JP7152733B2 - がん転移抑制剤 - Google Patents
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Description
項1. エンテロコッカス属に属する乳酸菌の菌体及びその菌体成分からなる群より選択される少なくとも1種を含有する、がん転移抑制剤.
項2. 前記エンテロコッカス属に属する乳酸菌がエンテロコッカス・フェカリスである、項1に記載のがん転移抑制剤.
項3. 前記エンテロコッカス属に属する乳酸菌がエンテロコッカス・フェカリスNF-1011株(特許生物寄託センター受託番号FERM BP-10902)である、項1又は2に記載のがん転移抑制剤.
項4. 前記菌体が死菌体である、項1~3のいずれかに記載のがん転移抑制剤.
項5. 前記死菌体が、生菌体の溶菌酵素による処理を含む方法で調製された死菌体である、項4に記載のがん転移抑制剤.
項6. 前記菌体成分が水溶性成分である、項1~5のいずれかに記載のがん転移抑制剤.
項7. 経口製剤形態である、項1~6のいずれかに記載のがん転移抑制剤.
項8. 食品組成物である、項1~7のいずれかに記載のがん転移抑制剤.
項9. 食品添加剤である、項1~7のいずれかに記載のがん転移抑制剤.
項10. 医薬である、項1~7のいずれかに記載のがん転移抑制剤.
エンテロッコカス・フェカリスNF-1011株(特許生物寄託センター受託番号FERM BP-10902)をロゴサ液体培地10mlに播種し、37℃にて15時間好気的に静置培養(前培養)し、菌体濃度が約109個/mlの菌体液(シード)を得た。これをロゴサ液体培地10Lに播種(菌体濃度:106個/ml)し、37℃で16時間好気的に静置培養し、生菌数約109個/mlの菌体液を得た。得られた菌体液を遠心分離(12,000×g、20分間)して集菌し、これを生理食塩水(0.85%塩化ナトリウム水溶液)で2回洗浄して、蒸留水100mlに懸濁し、菌体懸濁液を得た。
生菌体試料(参考例1)である菌体懸濁液にリゾチームを終濃度0.1mg/ml量となるよう添加し、37℃で4時間処理後、110℃で10分間加熱処理して、菌体処理物を得た。
死菌体試料(参考例2)である菌体処理物を遠心分離(12000×g、15分間)し、上清を回収した。
3%チオグリコレート培地でマウス腹腔に誘導したマクロファージを回収し、FCS10%含有RPMI培地(ニッスイ)で1×106cells/mlに調整した。96穴細胞培養プレートにて、生菌体試料(参考例1)あるいは死菌体試料(参考例2)と共に3時間培養し、培養上清中のTNF-α量をELISA法(RSD社 TNF-α Mouse DuoSet)にて測定した。
雄性のBALB/cマウス8週齢を2群に分け、対照群には生理食塩水を、試験群には死菌体試料(参考例2)(60mg/匹)を、試験期間中連日経口投与した。投与開始から3日目に、BJMC3879マウス乳がん細胞(入手元:大阪医科大学)(5×105cells/匹)を眼窩静脈叢より接種させた。乳がん細胞接種7日目に肺を摘出し、パラホルムアルデヒドで固定した後、パラフィン包埋、薄切、HE染色を行い、切片上の腫瘍コロニー数をカウントした。
雌性のC57BL/6L-CASマウスを2群に分け、対照群には生理食塩水を、試験群には死菌体水溶性成分試料(参考例3)(死菌体試料(参考例2)60mg分/匹)を、試験期間中連日経口投与した。投与開始3日目に、メラノーマ細胞(1×105cells/匹)を眼窩静脈叢より接種させた。メラノーマ細胞接種14日目に肺を摘出し、パラホルムアルデヒドで固定した後、グリセリン浸漬で透明化を行った。実体顕微鏡下で肺に生着しているメラノーマの写真を撮影し、コロニー数をカウントした。
Claims (3)
- がん転移抑制剤であって、
エンテロコッカス・フェカリスNF-1011株(特許生物寄託センター受託番号FERM BP-10902)の死菌体及び前記死菌体の水溶性成分からなる群より選択される少なくとも1種を含有し、且つ
経口製剤形態、食品組成物、又は食品添加物である
、がん転移抑制剤。 - 経口製剤形態の医薬である、請求項1に記載のがん転移抑制剤。
- 食品組成物、又は食品添加物である、請求項1に記載のがん転移抑制剤。
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Non-Patent Citations (3)
Title |
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Cancer,1973年,Vol. 31,p. 1392-1396 |
Exp. Omcol.,2005年,Vol. 27, Issue 4,p. 336-338 |
医学と生物学,第143巻, 第3号,2001年,p. 113-118 |
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