JP6999927B2 - 多血小板血漿を製造する方法 - Google Patents
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Description
抗凝固剤として1.25mlのクエン酸ナトリウム注射液(扶桑薬品工業株式会社)を30mlのシリンジ(テルモ株式会社)に分取し,1名の健常者から25mlの採血を行い,5mlずつ5本の真空採血管(日本ベクトン・ディッキンソン)に分注した。そのうち,真空採血管1本は,血球計数装置(シスメックス株式会社)で血小板数を測定した。また,遠心分離(200Gで15分間)を行う1回遠心法を実施し,上清を多血小板血漿とした(試料1)。
真空採血管の2本を4℃で24時間保存した。そのうち1本の血液に対して,1回遠心法を実施し,上清を多血小板血漿とした(試料2)。残りの1本の血液を室温で24時間静置(1Gで24時間)し,上清を多血小板血漿とした(試料3)。
真空採血管の2つを4℃で48時間保存した。そのうち1本の血液に対して,1回遠心法を実施し,上清を多血小板血漿とした(試料4)。残りの1本の血液を室温で24時間静置(1Gで24時間)し,上清を多血小板血漿とした(試料5)。多血小板血漿の血小板数を血球計数装置で測定した。その結果を以下の表1に示す。
抗凝固剤として1.25mlのクエン酸ナトリウム注射液を30mlのシリンジに分取し,1名の健常者から25mlの採血を行い,5mlずつ5本の真空採血管に分注した。真空採血管1本は,遠心分離(200Gで15分間)を実施し,上清を分注し,分注した上清に対して遠心分離(1500Gで15分間)を行う2回遠心分離法を実施し,上清を除去し,0.5mlの多血小板血漿とした。残りの4本は,4℃で24時間または48時間保存し,時間経過した血液に対して,同様に2回遠心分離法を行い0.5mlの多血小板血漿とした。同様に,24時間または48時間経過した血液を室温で24時間静置(1Gで24時間)し,上清を分注し,分注した上清に対して遠心分離(1500Gで15分間)を行い,0.5mlの多血小板血漿とした。多血小板血漿の血小板に含まれているEGF(表皮増殖因子:Epidermal Growth Factor)の含有量をR&D System社のELISAキットを用いて調べた。
保存時間を6時間とした以外は試料4と同様にして上清を得た。その結果,血小板の回収率は60%であった。
保存時間を6時間とした以外は試料5と同様にして上清を得た。その結果,血小板の回収率は93%であった。
保存時間を72時間とした以外は試料5と同様にして上清を得た。その結果,血小板の回収率は81%であった。
保存時間を5日とした以外は試料5と同様にして上清を得た。その結果,血小板の回収率は75%であった。
静置時間を6時間とした以外は試料5と同様にして上清を得た。その結果,血小板の回収率は80%であった。
[実施例7]
静置時間を24時間とした以外は試料5と同様にして上清を得た。その結果,血小板の回収率は79%であった。
[実施例8]
静置温度を25度とした以外は試料5と同様にして上清を得た。その結果,血小板の回収率は82%であった。
[実施例9]
静置温度を37度とした以外は試料5と同様にして上清を得た。その結果,血小板の回収率は86%であった。
Claims (5)
- 冷蔵保存後の血液を,20℃以上38℃以下で6時間以上48時間以下静置する静置工程を含む,多血小板血漿を製造する方法。
- 請求項1に記載の方法であって,前記冷蔵保存後の血液は,0℃以上10℃以下にて1時間以上5日以下保存された血液である,方法。
- 請求項1に記載の方法であって,前記冷蔵保存後の血液は,0℃以上10℃以下にて1時間以上72時間以下保存された血液である,方法。
- 請求項1に記載の方法であって,上清除去工程をさらに含む,方法。
- 請求項4に記載の方法であって,前記上清除去工程は,遠心分離工程を含む,方法。
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