JP6789931B2 - 発酵乳の製造方法 - Google Patents
発酵乳の製造方法 Download PDFInfo
- Publication number
- JP6789931B2 JP6789931B2 JP2017519387A JP2017519387A JP6789931B2 JP 6789931 B2 JP6789931 B2 JP 6789931B2 JP 2017519387 A JP2017519387 A JP 2017519387A JP 2017519387 A JP2017519387 A JP 2017519387A JP 6789931 B2 JP6789931 B2 JP 6789931B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- lactase
- fermented milk
- bifidobacteria
- milk
- lactic acid
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- 235000015140 cultured milk Nutrition 0.000 title claims description 140
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title claims description 31
- 102100026189 Beta-galactosidase Human genes 0.000 claims description 190
- 108010005774 beta-Galactosidase Proteins 0.000 claims description 190
- 108010059881 Lactase Proteins 0.000 claims description 186
- 229940116108 lactase Drugs 0.000 claims description 186
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N lactic acid Chemical compound CC(O)C(O)=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 158
- 241000186000 Bifidobacterium Species 0.000 claims description 116
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 claims description 86
- 239000004310 lactic acid Substances 0.000 claims description 79
- 235000014655 lactic acid Nutrition 0.000 claims description 79
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 claims description 54
- 239000008101 lactose Substances 0.000 claims description 50
- 235000020185 raw untreated milk Nutrition 0.000 claims description 48
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 claims description 36
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 claims description 31
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 claims description 31
- 239000008267 milk Substances 0.000 claims description 31
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 claims description 27
- 239000008103 glucose Substances 0.000 claims description 27
- 229930182830 galactose Natural products 0.000 claims description 25
- 238000000354 decomposition reaction Methods 0.000 claims description 23
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 17
- 239000002994 raw material Substances 0.000 claims description 16
- WQZGKKKJIJFFOK-PHYPRBDBSA-N alpha-D-galactose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-PHYPRBDBSA-N 0.000 claims description 14
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 claims description 14
- 238000002156 mixing Methods 0.000 claims description 7
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 60
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 60
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 37
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 32
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 description 14
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 12
- 244000199866 Lactobacillus casei Species 0.000 description 10
- 235000013958 Lactobacillus casei Nutrition 0.000 description 10
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 10
- 229940017800 lactobacillus casei Drugs 0.000 description 10
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 9
- 241000194020 Streptococcus thermophilus Species 0.000 description 7
- 241000186660 Lactobacillus Species 0.000 description 6
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 229940039696 lactobacillus Drugs 0.000 description 6
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 6
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 6
- 241001608472 Bifidobacterium longum Species 0.000 description 5
- 229940009291 bifidobacterium longum Drugs 0.000 description 5
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 5
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 5
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 5
- 238000001962 electrophoresis Methods 0.000 description 4
- 239000000463 material Substances 0.000 description 4
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 4
- 230000035484 reaction time Effects 0.000 description 4
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 3
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 description 3
- 150000002016 disaccharides Chemical class 0.000 description 3
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 3
- 230000000968 intestinal effect Effects 0.000 description 3
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 3
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 3
- 150000002772 monosaccharides Chemical class 0.000 description 3
- 235000020183 skimmed milk Nutrition 0.000 description 3
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 3
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 2
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000193830 Bacillus <bacterium> Species 0.000 description 2
- 241001134770 Bifidobacterium animalis Species 0.000 description 2
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 2
- 241000235649 Kluyveromyces Species 0.000 description 2
- 240000001046 Lactobacillus acidophilus Species 0.000 description 2
- 235000013956 Lactobacillus acidophilus Nutrition 0.000 description 2
- 240000006024 Lactobacillus plantarum Species 0.000 description 2
- 235000013965 Lactobacillus plantarum Nutrition 0.000 description 2
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 2
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 2
- 229940118852 bifidobacterium animalis Drugs 0.000 description 2
- XBDQKXXYIPTUBI-UHFFFAOYSA-N dimethylselenoniopropionate Natural products CCC(O)=O XBDQKXXYIPTUBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 2
- 235000021255 galacto-oligosaccharides Nutrition 0.000 description 2
- 150000003271 galactooligosaccharides Chemical class 0.000 description 2
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 2
- 210000000936 intestine Anatomy 0.000 description 2
- 229940039695 lactobacillus acidophilus Drugs 0.000 description 2
- 229940072205 lactobacillus plantarum Drugs 0.000 description 2
- 238000000691 measurement method Methods 0.000 description 2
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 2
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 2
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 2
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 2
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 2
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 2
- WXHLLJAMBQLULT-UHFFFAOYSA-N 2-[[6-[4-(2-hydroxyethyl)piperazin-1-yl]-2-methylpyrimidin-4-yl]amino]-n-(2-methyl-6-sulfanylphenyl)-1,3-thiazole-5-carboxamide;hydrate Chemical compound O.C=1C(N2CCN(CCO)CC2)=NC(C)=NC=1NC(S1)=NC=C1C(=O)NC1=C(C)C=CC=C1S WXHLLJAMBQLULT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000122821 Aspergillus kawachii Species 0.000 description 1
- 241000228245 Aspergillus niger Species 0.000 description 1
- 240000006439 Aspergillus oryzae Species 0.000 description 1
- 235000002247 Aspergillus oryzae Nutrition 0.000 description 1
- 240000001009 Aspergillus oryzae RIB40 Species 0.000 description 1
- 235000013023 Aspergillus oryzae RIB40 Nutrition 0.000 description 1
- 241000186018 Bifidobacterium adolescentis Species 0.000 description 1
- 241000186016 Bifidobacterium bifidum Species 0.000 description 1
- 241000741973 Bifidobacterium breve DSM 20213 = JCM 1192 Species 0.000 description 1
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 1
- 244000285963 Kluyveromyces fragilis Species 0.000 description 1
- 235000014663 Kluyveromyces fragilis Nutrition 0.000 description 1
- 241001138401 Kluyveromyces lactis Species 0.000 description 1
- 244000199885 Lactobacillus bulgaricus Species 0.000 description 1
- 235000013960 Lactobacillus bulgaricus Nutrition 0.000 description 1
- 241001147746 Lactobacillus delbrueckii subsp. lactis Species 0.000 description 1
- 241000218588 Lactobacillus rhamnosus Species 0.000 description 1
- 241000194036 Lactococcus Species 0.000 description 1
- 241000194017 Streptococcus Species 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 238000005273 aeration Methods 0.000 description 1
- BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N ammonium sulfate Chemical compound N.N.OS(O)(=O)=O BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052921 ammonium sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011130 ammonium sulphate Nutrition 0.000 description 1
- -1 and for example Substances 0.000 description 1
- 235000020244 animal milk Nutrition 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 229940002008 bifidobacterium bifidum Drugs 0.000 description 1
- 235000020299 breve Nutrition 0.000 description 1
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 239000012228 culture supernatant Substances 0.000 description 1
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 1
- 230000009849 deactivation Effects 0.000 description 1
- 230000003111 delayed effect Effects 0.000 description 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 1
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 description 1
- 238000006911 enzymatic reaction Methods 0.000 description 1
- 239000000796 flavoring agent Substances 0.000 description 1
- 235000019634 flavors Nutrition 0.000 description 1
- 239000006260 foam Substances 0.000 description 1
- 235000015203 fruit juice Nutrition 0.000 description 1
- 235000020251 goat milk Nutrition 0.000 description 1
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 235000020256 human milk Nutrition 0.000 description 1
- 210000004251 human milk Anatomy 0.000 description 1
- 230000001771 impaired effect Effects 0.000 description 1
- 230000002779 inactivation Effects 0.000 description 1
- 239000011261 inert gas Substances 0.000 description 1
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 1
- 239000011707 mineral Substances 0.000 description 1
- 235000010755 mineral Nutrition 0.000 description 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 1
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 1
- 235000005985 organic acids Nutrition 0.000 description 1
- 150000007530 organic bases Chemical class 0.000 description 1
- 239000008055 phosphate buffer solution Substances 0.000 description 1
- 239000001967 plate count agar Substances 0.000 description 1
- 235000008476 powdered milk Nutrition 0.000 description 1
- 235000019260 propionic acid Nutrition 0.000 description 1
- IUVKMZGDUIUOCP-BTNSXGMBSA-N quinbolone Chemical compound O([C@H]1CC[C@H]2[C@H]3[C@@H]([C@]4(C=CC(=O)C=C4CC3)C)CC[C@@]21C)C1=CCCC1 IUVKMZGDUIUOCP-BTNSXGMBSA-N 0.000 description 1
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 1
- 235000020254 sheep milk Nutrition 0.000 description 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 1
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 1
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 1
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 1
- 239000003643 water by type Substances 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23C—DAIRY PRODUCTS, e.g. MILK, BUTTER OR CHEESE; MILK OR CHEESE SUBSTITUTES; MAKING THEREOF
- A23C9/00—Milk preparations; Milk powder or milk powder preparations
- A23C9/12—Fermented milk preparations; Treatment using microorganisms or enzymes
- A23C9/127—Fermented milk preparations; Treatment using microorganisms or enzymes using microorganisms of the genus lactobacteriaceae and other microorganisms or enzymes, e.g. kefir, koumiss
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23C—DAIRY PRODUCTS, e.g. MILK, BUTTER OR CHEESE; MILK OR CHEESE SUBSTITUTES; MAKING THEREOF
- A23C9/00—Milk preparations; Milk powder or milk powder preparations
- A23C9/12—Fermented milk preparations; Treatment using microorganisms or enzymes
- A23C9/1203—Addition of, or treatment with, enzymes or microorganisms other than lactobacteriaceae
- A23C9/1206—Lactose hydrolysing enzymes, e.g. lactase, beta-galactosidase
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23C—DAIRY PRODUCTS, e.g. MILK, BUTTER OR CHEESE; MILK OR CHEESE SUBSTITUTES; MAKING THEREOF
- A23C9/00—Milk preparations; Milk powder or milk powder preparations
- A23C9/12—Fermented milk preparations; Treatment using microorganisms or enzymes
- A23C9/127—Fermented milk preparations; Treatment using microorganisms or enzymes using microorganisms of the genus lactobacteriaceae and other microorganisms or enzymes, e.g. kefir, koumiss
- A23C9/1275—Fermented milk preparations; Treatment using microorganisms or enzymes using microorganisms of the genus lactobacteriaceae and other microorganisms or enzymes, e.g. kefir, koumiss using only lactobacteriaceae for fermentation in combination with enzyme treatment of the milk product; using enzyme treated milk products for fermentation with lactobacteriaceae
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2400/00—Lactic or propionic acid bacteria
- A23V2400/11—Lactobacillus
- A23V2400/123—Bulgaricus
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2400/00—Lactic or propionic acid bacteria
- A23V2400/11—Lactobacillus
- A23V2400/157—Lactis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2400/00—Lactic or propionic acid bacteria
- A23V2400/21—Streptococcus, lactococcus
- A23V2400/249—Thermophilus
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2400/00—Lactic or propionic acid bacteria
- A23V2400/51—Bifidobacterium
- A23V2400/517—Bifidum
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Zoology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Virology (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Dairy Products (AREA)
Description
本発明は、乳酸菌と、ビフィズス菌と、を使用した発酵乳の製造方法に関する。
ヒトの腸内菌叢を構成する乳酸菌やビフィズス菌は、腸内で有益な作用を奏することが知られている。しかし、乳酸菌やビフィズス菌の増殖速度は、腸内菌叢を構成する他の細菌に比べて遅い。そこで、腸内で乳酸菌やビフィズス菌を選択的に増殖させる発明が提案されている（例えば、特許文献１参照）。特にビフィズス菌は増殖速度が遅く、ビフィズス菌を特異的に増殖させる発明も提案されている（例えば、特許文献２参照）。
腸内菌叢を構成する乳酸菌やビフィズス菌の割合を増やす方法として、生きた状態の乳酸菌やビフィズス菌を含む発酵乳を摂取することも考えられる。しかしながら、ビフィズス菌は乳酸菌に比べて酸素に弱く、増殖速度も遅いことから、乳酸菌とビフィズス菌を含む発酵乳を製造する場合において、ビフィズス菌を増殖させることは難しい。ビフィズス菌の種類によっては、乳酸菌との共存下において、ほとんど増殖せず死滅するものも存在する。そこで、乳酸菌とビフィズス菌を含む発酵乳を製造する場合、ビフィズス菌の添加量を多くするか、特許文献２に記載のガラクトオリゴ糖を添加する必要があった。
しかしながら、乳酸菌とビフィズス菌を含む発酵乳を製造するために、ビフィズス菌の添加量を多くする場合、事前に大量のビフィズス菌を培養する必要が生じることと、原料乳に大量のビフィズス菌を添加する必要が生じることから、製造コストが増大する問題があった。特許文献２に記載のガラクトオリゴ糖を得るには、別途の工程が必要になるため、製造コストが増大する問題があった。
本発明は、簡便な方法でビフィズス菌の生菌数を増大・維持させながら、乳酸菌とビフィズス菌を含む発酵乳を製造することを目的とする。
本発明は、以下の技術的構成を有することにより、本発明の課題を解決した。
（１）原料乳と、乳酸菌と、ビフィズス菌と、を混合する第１工程と、原料乳を発酵させる第２工程と、を順次行う発酵乳の製造方法であって、上記第２工程が終了する前に、原料乳にラクターゼを添加する工程（ラクターゼ添加工程）を行うことを特徴とする発酵乳の製造方法。
（２）前記第１工程の前、前記第１工程と略同時又は前記第１工程の後から選択される１つ以上のタイミングで、前記ラクターゼ添加工程を行うことを特徴とする前記（１）に記載の発酵乳の製造方法。
（３）前記ラクターゼによって、前記原料乳に含まれる乳糖を徐々に分解することを特徴とする前記（１）又は（２）に記載の発酵乳の製造方法。
（４）前記原料乳に加える前記ラクターゼの終濃度が１．３ｕｎｉｔ／ｇ以上であることを特徴とする前記（１）〜（３）のいずれかに記載の発酵乳の製造方法。
（５）乳糖の分解によって生成したグルコース及びガラクトースを前記乳酸菌又は前記ビフィズス菌に資化させることを特徴とする前記（３）に記載の発酵乳の製造方法。
（６）前記乳糖が、前記ラクターゼによって分解され、且つ、当該分解と並行して前記乳酸菌又は前記ビフィズス菌の少なくとも一方に資化されることを特徴とする前記（３）又は（５）に記載の発酵乳の製造方法。
（７）前記ラクターゼが前記第２工程中に徐々に失活していくことを特徴とする前記（１）に記載の発酵乳の製造方法。
（８）乳酸菌と、ビフィズス菌と、ラクターゼと、を含有する発酵乳であって、当該ラクターゼが中性ラクターゼであり、発酵乳中において失活した状態で存在し、乳糖が２．０質量％以下であることを特徴とする発酵乳。
（９）前記乳糖が０．５質量％以下であることを特徴とする前記（８）に記載の発酵乳。
（２）前記第１工程の前、前記第１工程と略同時又は前記第１工程の後から選択される１つ以上のタイミングで、前記ラクターゼ添加工程を行うことを特徴とする前記（１）に記載の発酵乳の製造方法。
（３）前記ラクターゼによって、前記原料乳に含まれる乳糖を徐々に分解することを特徴とする前記（１）又は（２）に記載の発酵乳の製造方法。
（４）前記原料乳に加える前記ラクターゼの終濃度が１．３ｕｎｉｔ／ｇ以上であることを特徴とする前記（１）〜（３）のいずれかに記載の発酵乳の製造方法。
（５）乳糖の分解によって生成したグルコース及びガラクトースを前記乳酸菌又は前記ビフィズス菌に資化させることを特徴とする前記（３）に記載の発酵乳の製造方法。
（６）前記乳糖が、前記ラクターゼによって分解され、且つ、当該分解と並行して前記乳酸菌又は前記ビフィズス菌の少なくとも一方に資化されることを特徴とする前記（３）又は（５）に記載の発酵乳の製造方法。
（７）前記ラクターゼが前記第２工程中に徐々に失活していくことを特徴とする前記（１）に記載の発酵乳の製造方法。
（８）乳酸菌と、ビフィズス菌と、ラクターゼと、を含有する発酵乳であって、当該ラクターゼが中性ラクターゼであり、発酵乳中において失活した状態で存在し、乳糖が２．０質量％以下であることを特徴とする発酵乳。
（９）前記乳糖が０．５質量％以下であることを特徴とする前記（８）に記載の発酵乳。
本発明は、簡便な方法でビフィズス菌の生菌数を増大・維持させながら、乳酸菌とビフィズス菌を含む発酵乳を製造することができる。
本発明は、原料乳と、乳酸菌と、ビフィズス菌と、を混合する第１工程と、
原料乳を発酵させる第２工程と、
を順次行う発酵乳の製造方法であって、
上記第２工程が終了する前に、原料乳にラクターゼを添加する工程（ラクターゼ添加工程）を行うことを特徴とする発酵乳の製造方法である。
第２工程が終了する前に、ラクターゼ添加工程を行うことで、原料乳に含まれる乳糖を酵素反応によってグルコースとガラクトースに分解することが可能になる。ラクターゼ添加工程によって、原料乳に含まれる乳糖量が減少し、グルコース量とガラクトース量が増大する結果、発酵乳におけるビフィズス菌の生菌数が増大する。第２工程が終了とは、発酵工程が終了と同義である。
当該効果は、原料乳にグルコース及び／又はガラクトースを添加しただけでは得られない。発酵乳におけるビフィズス菌の生菌数を増大させるには、ラクターゼを添加することによって、原料乳に含まれる乳糖量を減少させた上で、グルコース量及びガラクトース量を増大させることが重要である。
原料乳を発酵させる第２工程と、
を順次行う発酵乳の製造方法であって、
上記第２工程が終了する前に、原料乳にラクターゼを添加する工程（ラクターゼ添加工程）を行うことを特徴とする発酵乳の製造方法である。
第２工程が終了する前に、ラクターゼ添加工程を行うことで、原料乳に含まれる乳糖を酵素反応によってグルコースとガラクトースに分解することが可能になる。ラクターゼ添加工程によって、原料乳に含まれる乳糖量が減少し、グルコース量とガラクトース量が増大する結果、発酵乳におけるビフィズス菌の生菌数が増大する。第２工程が終了とは、発酵工程が終了と同義である。
当該効果は、原料乳にグルコース及び／又はガラクトースを添加しただけでは得られない。発酵乳におけるビフィズス菌の生菌数を増大させるには、ラクターゼを添加することによって、原料乳に含まれる乳糖量を減少させた上で、グルコース量及びガラクトース量を増大させることが重要である。
第１工程は、原料乳と、乳酸菌と、ビフィズス菌と、を混合するものであればよく、加える順序は制限されない。原料乳を主にする場合、原料乳に乳酸菌と、ビフィズス菌と、を加えればよい。
原料乳と、乳酸菌と、ビフィズス菌と、を混合する方法は特に限定されない。原料乳中に、乳酸菌とビフィズス菌が略均一に分布するようにわずかな時間だけ混合させる程度でもよい。略均一に分布させた後は、原料乳を満たした容器の底面に、乳酸菌とビフィズス菌が分布した状態であってもよい。
ビフィズス菌は酸素耐性が高くないため、混合する時間は短くすることが好ましい。混合速度を遅くすると、原料乳中の溶存酸素量を低くすることができるため好ましい。原料乳の温度を高くすると溶存酸素量を低くすることが可能である。また、撹拌時に泡立てないように注意することも重要である。また、溶存酸素低減、除去の為に脱気操作や窒素などの不活性ガスによる曝気操作も効果的である。
原料乳と、乳酸菌と、ビフィズス菌と、を混合する方法は特に限定されない。原料乳中に、乳酸菌とビフィズス菌が略均一に分布するようにわずかな時間だけ混合させる程度でもよい。略均一に分布させた後は、原料乳を満たした容器の底面に、乳酸菌とビフィズス菌が分布した状態であってもよい。
ビフィズス菌は酸素耐性が高くないため、混合する時間は短くすることが好ましい。混合速度を遅くすると、原料乳中の溶存酸素量を低くすることができるため好ましい。原料乳の温度を高くすると溶存酸素量を低くすることが可能である。また、撹拌時に泡立てないように注意することも重要である。また、溶存酸素低減、除去の為に脱気操作や窒素などの不活性ガスによる曝気操作も効果的である。
第２工程は、原料乳を、乳酸菌とビフィズス菌で発酵させる工程である。
第２工程における発酵温度は、乳酸菌及びビフィズス菌が生育する温度であればよい。
使用する乳酸菌及びビフィズス菌によって発酵温度は異なるが、２０℃〜５０℃の範囲にすることが好ましく、２５℃〜４５℃にすることがより好ましい。
下限値未満であると、発酵が遅延しやすくなり、経済性に優れた発酵乳を得にくくなるおそれがある。
上限値超であると、乳酸菌及びビフィズス菌、又はビフィズス菌の死滅の問題がある。
第２工程における発酵温度は、乳酸菌及びビフィズス菌が生育する温度であればよい。
使用する乳酸菌及びビフィズス菌によって発酵温度は異なるが、２０℃〜５０℃の範囲にすることが好ましく、２５℃〜４５℃にすることがより好ましい。
下限値未満であると、発酵が遅延しやすくなり、経済性に優れた発酵乳を得にくくなるおそれがある。
上限値超であると、乳酸菌及びビフィズス菌、又はビフィズス菌の死滅の問題がある。
第２工程における発酵時間は、使用する乳酸菌及びビフィズス菌の種類並びにその発酵温度によるが、１時間〜４８時間の範囲にすることが好ましい。発酵が進むにつれて、原料乳のｐＨが低下するので、これを指標にすることもできる。
下限値未満であると発酵が十分に進行せず、所望の発酵乳を得にくくなるおそれがある。
上限値超であると製造コストの増加や出来上がった発酵乳の品質が悪化するおそれがある。
下限値未満であると発酵が十分に進行せず、所望の発酵乳を得にくくなるおそれがある。
上限値超であると製造コストの増加や出来上がった発酵乳の品質が悪化するおそれがある。
ラクターゼ添加工程は、第１工程の前、第１工程と略同時又は第１工程の後から選択される１つ以上のタイミングで、行うことが好ましい。２以上のタイミングで行うことも可能である。ラクターゼ添加工程後に、原料乳に含まれる乳糖の分解が行われることになる（ラクターゼ反応）。
簡便性の点とビフィズス菌の増殖効果を得る点からは、第１工程の前又は第１工程と略同時にラクターゼ添加工程を行うことが好ましい。乳糖の分解によって生成したグルコース及びガラクトースを前記乳酸菌又は前記ビフィズス菌に資化させることが可能になる。
第１工程の前又は第１工程と略同時にラクターゼを添加することによって、発酵途中における乳酸菌の生育が抑えられ、ビフィズス菌の増殖効果が高められる。ラクターゼを添加した場合に、発酵途中において乳酸菌の生育が抑えられることは、原料乳のｐＨが下がりにくくなることから確認することができる。
第１工程の前又は第１工程と略同時にラクターゼを添加することによって、発酵途中における乳酸菌の生育が抑えられ、ビフィズス菌の増殖効果が高められる。ラクターゼを添加した場合に、発酵途中において乳酸菌の生育が抑えられることは、原料乳のｐＨが下がりにくくなることから確認することができる。
ビフィズス菌の増殖効果をさらに高める点からは、第１工程と略同時にラクターゼ添加工程を行うことがより好ましい。発酵が進むにつれて、前記原料乳に含まれる乳糖の分解速度を緩やかにすることが可能となる結果、ビフィズス菌と乳酸菌の共存化において、ビフィズス菌が資化しやすい環境を整えることができ、ビフィズス菌の増殖効果を高めることができる。
前記ラクターゼとして中性ラクターゼを使用することが好ましい。発酵乳を製造する場合に中性ラクターゼを使用すると、発酵の進行に伴うｐＨ低下によって徐々に中性ラクターゼが失活する。すなわち、中性ラクターゼによる原料乳に含まれる乳糖の分解速度は、発酵の進行に伴い、漸減することになる。このような中性ラクターゼの作用は、乳酸菌とビフィズス菌の共存化において、ビフィズス菌が原料乳中の糖類を資化させやすくなる環境を提供することができ、発酵乳中のビフィズス菌数を増大させるものである。
前記ラクターゼとして中性ラクターゼを使用することが好ましい。発酵乳を製造する場合に中性ラクターゼを使用すると、発酵の進行に伴うｐＨ低下によって徐々に中性ラクターゼが失活する。すなわち、中性ラクターゼによる原料乳に含まれる乳糖の分解速度は、発酵の進行に伴い、漸減することになる。このような中性ラクターゼの作用は、乳酸菌とビフィズス菌の共存化において、ビフィズス菌が原料乳中の糖類を資化させやすくなる環境を提供することができ、発酵乳中のビフィズス菌数を増大させるものである。
本発明において、略同時とは、使用する乳酸菌及びビフィズス菌の生育速度によって変化する相対的なものであって、使用する乳酸菌又はビフィズス菌の少なくとも一方が誘導期に該当することを意味する。ビフィズス菌の増殖効果を増大させるには、使用する乳酸菌及びビフィズス菌のいずれもが誘導期に該当する時期にラクターゼ添加工程を行うことが好ましい。
原料乳に対するラクターゼ反応の温度は０℃〜５５℃であることが好ましく、５〜５０℃であることがより好ましい。
ラクターゼ反応の温度が下限値未満であると乳糖の分解が不足しやすくなるおそれがある。これを解消するには、ラクターゼの反応時間を長くする必要が生じるため、発酵乳を効率的に製造することが難しい。
ラクターゼ反応の温度が上限値超であると、ラクターゼが失活しやすくなり、乳糖の分解が不十分な状態になるおそれがある。乳酸菌とビフィズス菌の共存化において、ビフィズス菌を増大させにくくなる。
ラクターゼ反応の温度が下限値未満であると乳糖の分解が不足しやすくなるおそれがある。これを解消するには、ラクターゼの反応時間を長くする必要が生じるため、発酵乳を効率的に製造することが難しい。
ラクターゼ反応の温度が上限値超であると、ラクターゼが失活しやすくなり、乳糖の分解が不十分な状態になるおそれがある。乳酸菌とビフィズス菌の共存化において、ビフィズス菌を増大させにくくなる。
原料乳に対するラクターゼ反応の時間は０．５時間〜４８時間であることが好ましく、１時間〜４０時間であることがより好ましい。ラクターゼとして中性ラクターゼを使用する場合、第２工程において、原料乳のｐＨ低下に伴い徐々に中性ラクターゼが失活するため、そのラクターゼ反応の時間は第２工程よりも短いものになる。
ラクターゼ反応の時間が下限値未満であると、乳糖の分解が不足しやすくなるおそれがある。
ラクターゼ反応の時間が上限値超であると、製造コストの増加の問題がある。
ラクターゼ反応の時間が下限値未満であると、乳糖の分解が不足しやすくなるおそれがある。
ラクターゼ反応の時間が上限値超であると、製造コストの増加の問題がある。
原料乳に対するラクターゼ反応のｐＨは２．０〜１０．０であることが好ましく、ｐＨ２．５〜９．０であることがより好ましく、ｐＨ３．０〜８．０であることが特に好ましい。中性ラクターゼを使用する場合におけるラクターゼ反応のｐＨは、５．０〜８．０であることが好ましい。酸性ラクターゼを使用する場合におけるラクターゼ反応のｐＨは、３．０〜７．０であることが好ましい。
下限値未満、もしくは上限値以上であると、ラクターゼが失活しやすくなり、乳糖の分解が不十分な状態になるおそれがある。
発酵が進むにつれて、原料乳のｐＨが低下する。ラクターゼが中性ラクターゼである場合、原料乳のｐＨの低下に伴い、失活する。
下限値未満、もしくは上限値以上であると、ラクターゼが失活しやすくなり、乳糖の分解が不十分な状態になるおそれがある。
発酵が進むにつれて、原料乳のｐＨが低下する。ラクターゼが中性ラクターゼである場合、原料乳のｐＨの低下に伴い、失活する。
本発明に係る発酵乳は、乳酸菌と、ビフィズス菌と、ラクターゼと、を含有する発酵乳であって、当該乳酸菌の数が１ｍＬあたり１×１０の４乗〜１×１０の１０乗個の範囲にあり、当該ビフィズス菌の数が１ｍＬあたり１×１０の４乗〜１×１０の１２乗個の範囲にあることを特徴とする。
上述した発酵乳の製造方法を経ることによって、発酵乳に含まれる乳酸菌の数及びビフィズス菌の数を上記の範囲にすることができる。当該発酵乳に含まれる乳酸菌及びビフィズス菌の数は生菌数を意味する。
上述した発酵乳の製造方法を経ることによって、発酵乳に含まれる乳酸菌の数及びビフィズス菌の数を上記の範囲にすることができる。当該発酵乳に含まれる乳酸菌及びビフィズス菌の数は生菌数を意味する。
発酵乳中に含まれるラクターゼの少なくとも一部は、中性ラクターゼであることが好ましい。当該中性ラクターゼは、発酵乳中において失活した状態で存在することが好ましい。
中性ラクターゼが失活した場合においても、そのタンパク質構造は維持されている。したがって、発酵乳自体又は発酵乳を濃縮したものについて電気泳動を行うことで、発酵乳中に中性ラクターゼが存在するか確認することができる。電気泳動を行った後、得られた特定のバンドからアミノ酸配列を推定することも可能である。当該中性ラクターゼの配列はその由来によって異なるが、既知であるため、電気泳動結果及びそのアミノ酸配列から、ラクターゼの存在を確認することが可能である。同様に、発酵乳自体又は発酵乳を濃縮したものについて電気泳動を行うことで、発酵乳中に酸性ラクターゼが存在するか確認することも可能である。アミノ酸配列の推定も同様である。
発酵乳中に含まれるラクターゼが失活していることは、後述するラクターゼの活性測定方法を行うことで確認することができる。
中性ラクターゼが失活した場合においても、そのタンパク質構造は維持されている。したがって、発酵乳自体又は発酵乳を濃縮したものについて電気泳動を行うことで、発酵乳中に中性ラクターゼが存在するか確認することができる。電気泳動を行った後、得られた特定のバンドからアミノ酸配列を推定することも可能である。当該中性ラクターゼの配列はその由来によって異なるが、既知であるため、電気泳動結果及びそのアミノ酸配列から、ラクターゼの存在を確認することが可能である。同様に、発酵乳自体又は発酵乳を濃縮したものについて電気泳動を行うことで、発酵乳中に酸性ラクターゼが存在するか確認することも可能である。アミノ酸配列の推定も同様である。
発酵乳中に含まれるラクターゼが失活していることは、後述するラクターゼの活性測定方法を行うことで確認することができる。
発酵乳のｐＨは５．５以下にあることが好ましく、ｐＨ５．０以下であることがより好ましい。発酵乳のｐＨの下限値は、３．０以上であることが好ましく、３．５以上であることがより好ましい。
発酵乳のｐＨが上限値超であると凝乳が不十分となる問題がある。発酵乳のｐＨが低すぎると酸味が強くなりすぎ、味のバランスを損ないやすくなる。
発酵乳のｐＨが上限値超であると凝乳が不十分となる問題がある。発酵乳のｐＨが低すぎると酸味が強くなりすぎ、味のバランスを損ないやすくなる。
発酵乳の乳糖分解率は、５０％以上であることが好ましく、７０％以上であることがより好ましく、９０％以上であることがさらに好ましい。上限値は限定されないが、例えば１００％である。乳糖分解率は、発酵前の乳糖量を発酵後の乳糖量で除した値に１００を乗じた値で示される。乳糖分解率は、乳糖量の減少量であるので、ラクターゼによる乳糖分解量と、乳酸菌及びビフィズス菌による乳糖の資化量の合計である。ラクターゼ添加工程を経ない発酵乳（乳酸菌及びビフィズス菌を含む）の乳糖分解率は、使用する原料乳、菌株及び発酵条件等によるが、最大４０％であり、発酵が良好に進んだ場合、およそ３０〜４０％になる。
ラクターゼ添加工程を第１工程の前又は第１工程と略同時に行うことで、ラクターゼによる発酵乳の乳糖分解率を高めることができる。
乳糖分解率が下限値未満であると、乳酸菌とビフィズス菌を含む発酵乳において、ビフィズス菌が十分に増殖しないおそれがある。
ラクターゼ添加工程を第１工程の前又は第１工程と略同時に行うことで、ラクターゼによる発酵乳の乳糖分解率を高めることができる。
乳糖分解率が下限値未満であると、乳酸菌とビフィズス菌を含む発酵乳において、ビフィズス菌が十分に増殖しないおそれがある。
ラクターゼ添加工程を経た発酵乳に含まれる乳糖量は、２．０質量％以下であることが好ましく、１．０質量％以下であることが好ましく、０．５質量％以下であることがさらに好ましい。下限値は限定されないが、例えば、０質量％である。ラクターゼ添加工程を経ない発酵乳に含まれる乳糖量は、使用する原料乳、菌株及び発酵条件等によるが、最低３．０質量％である。したがって、発酵乳に含まれる乳糖量を測定することにより、ラクターゼ添加工程を行ったか否かを推定することができる。
発酵乳に含まれる乳糖量が上限値超であると、乳酸菌とビフィズス菌を含む発酵乳において、ビフィズス菌が十分に増殖しないおそれがある。
発酵乳に含まれる乳糖量が上限値超であると、乳酸菌とビフィズス菌を含む発酵乳において、ビフィズス菌が十分に増殖しないおそれがある。
ラクターゼ添加工程を経た発酵乳に含まれるグルコース量は、０．５％以上であることが好ましく、１．０％以上であることがより好ましく、２．０％以上であることがさらに好ましい。発酵乳に含まれるグルコース量を上記以上含めることによって、乳酸菌とビフィズス菌が共存する状態であっても、ビフィズス菌がグルコースを資化しやすい環境を整えることができる。
ラクターゼ添加工程を経ない発酵乳（乳酸菌及びビフィズス菌を含む）に含まれるグルコース量は、発酵が良好に進んだ場合、ほとんどゼロである。グルコースは乳酸菌が資化してしまい、ビフィズス菌は資化することができずに増殖が制限されてしまう。
ラクターゼ添加工程を経ない発酵乳（乳酸菌及びビフィズス菌を含む）に含まれるグルコース量は、発酵が良好に進んだ場合、ほとんどゼロである。グルコースは乳酸菌が資化してしまい、ビフィズス菌は資化することができずに増殖が制限されてしまう。
ラクターゼ添加工程を経た発酵乳に含まれるガラクトース量は、１．０％以上であることが好ましく、１．５％以上であることがより好ましく、２．０％以上であることがさらに好ましい。発酵乳に含まれるガラクトース量を上記以上含めることによって、乳酸菌とビフィズス菌が共存する状態であっても、ビフィズス菌がグルコースを資化しやすい環境を整えることができる。
ラクターゼ添加工程を経ない発酵乳（乳酸菌及びビフィズス菌を含む）に含まれるガラクトース量は、発酵が良好に進んだ場合、１．０％未満である。ガラクトースは乳酸菌が資化しやすい状況にあるため、ビフィズス菌は資化しにくく、増殖が制限されてしまう。
ラクターゼ添加工程を経ない発酵乳（乳酸菌及びビフィズス菌を含む）に含まれるガラクトース量は、発酵が良好に進んだ場合、１．０％未満である。ガラクトースは乳酸菌が資化しやすい状況にあるため、ビフィズス菌は資化しにくく、増殖が制限されてしまう。
以下、本発明に係る発酵乳を構成する材料について説明する。
＜原料乳＞
原料乳としては、乳糖を含有するものであればよく、例えば、牛乳、羊乳もしくは山羊乳等の獣乳、母乳又はこれらを乾燥させた粉乳等を単独又は混合したものを使用することができる。本発明においては、これらにさらに乳糖及び水を加えたものも原料乳である。
発酵乳を１００質量％としたときの原料乳は９０質量％以上であることが好ましく、９５質量％以上であることが好ましく、９８質量％以上であることがさらに好ましい。
原料乳としては、乳糖を含有するものであればよく、例えば、牛乳、羊乳もしくは山羊乳等の獣乳、母乳又はこれらを乾燥させた粉乳等を単独又は混合したものを使用することができる。本発明においては、これらにさらに乳糖及び水を加えたものも原料乳である。
発酵乳を１００質量％としたときの原料乳は９０質量％以上であることが好ましく、９５質量％以上であることが好ましく、９８質量％以上であることがさらに好ましい。
本発明においては、発酵が完了するまでの乳を原料乳といい、発酵が完了した後の乳を発酵乳という。
原料乳の殺菌方法は、原料乳及び後述するその他の成分に存在する微生物を殺菌できる条件であればよく、その殺菌方法は限定されない。殺菌方法としては、超高温で短時間（数秒間）行う方法、高温で比較的短時間（数分）行う方法、低温（数十度）で長時間（数分〜数十分）行う方法等が挙げられる。
＜乳酸菌＞
乳酸菌としては、ラクトコッカス（Ｌａｃｔｏｃｏｃｃｕｓ）属、ラクトバチルス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ）属、ストレプトコッカス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ）属に属する微生物を例示できる。
例えば、ラクトコッカス・ラクティス（Ｌａｃｔｏｃｏｃｃｕｓ ｌａｃｔｉｓ）、ラクトコッカス・ラクティス・サブスピーシーズ・クレモリス（Ｌａｃｔｏｃｏｃｃｕｓ ｌａｃｔｉｓ ｓｕｂｓｐ． ｃｒｅｍｏｒｉｓ）、ラクトバチルス・カゼイ（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｃａｓｅｉ）ラクトバチルス・ガセリ（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｇａｓｓｅｒｉ）、ラクトバチルス・ラムノーサス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｒｈａｍｎｏｓｕｓ）、ラクトバチルス・アシドフィルス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ａｃｉｄｏｐｈｉｌｕｓ）、ラクトバチルス・プランタラム（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｐｌａｎｔａｒｕｍ）、ラクトバチルス・デルブルッキー・サブスピーシーズ・ブルガリカス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｄｅｌｂｒｕｅｃｋｉｉ ｓｕｂｓｐ． ｂｕｌｇａｒｉｃｕｓ）、ストレプトコッカス・サーモフィラス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌｕｓ）が挙げられる。これらの乳酸菌は単独で使用しても良いし、２以上を組み合わせて使用しても良い。
なお、上記の乳酸菌のうち、ラクトバチルス・デルブルッキー・サブスピーシーズ・ブルガリカス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｄｅｌｂｒｕｅｃｋｉｉ ｓｕｂｓｐ． ｂｕｌｇａｒｉｃｕｓ）及びストレプトコッカス・サーモフィラス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌｕｓ）を使用したものが狭義のヨーグルトである。
乳酸菌としては、ラクトコッカス（Ｌａｃｔｏｃｏｃｃｕｓ）属、ラクトバチルス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ）属、ストレプトコッカス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ）属に属する微生物を例示できる。
例えば、ラクトコッカス・ラクティス（Ｌａｃｔｏｃｏｃｃｕｓ ｌａｃｔｉｓ）、ラクトコッカス・ラクティス・サブスピーシーズ・クレモリス（Ｌａｃｔｏｃｏｃｃｕｓ ｌａｃｔｉｓ ｓｕｂｓｐ． ｃｒｅｍｏｒｉｓ）、ラクトバチルス・カゼイ（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｃａｓｅｉ）ラクトバチルス・ガセリ（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｇａｓｓｅｒｉ）、ラクトバチルス・ラムノーサス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｒｈａｍｎｏｓｕｓ）、ラクトバチルス・アシドフィルス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ａｃｉｄｏｐｈｉｌｕｓ）、ラクトバチルス・プランタラム（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｐｌａｎｔａｒｕｍ）、ラクトバチルス・デルブルッキー・サブスピーシーズ・ブルガリカス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｄｅｌｂｒｕｅｃｋｉｉ ｓｕｂｓｐ． ｂｕｌｇａｒｉｃｕｓ）、ストレプトコッカス・サーモフィラス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌｕｓ）が挙げられる。これらの乳酸菌は単独で使用しても良いし、２以上を組み合わせて使用しても良い。
なお、上記の乳酸菌のうち、ラクトバチルス・デルブルッキー・サブスピーシーズ・ブルガリカス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｄｅｌｂｒｕｅｃｋｉｉ ｓｕｂｓｐ． ｂｕｌｇａｒｉｃｕｓ）及びストレプトコッカス・サーモフィラス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌｕｓ）を使用したものが狭義のヨーグルトである。
原料乳への乳酸菌の添加量は、１ｍＬあたり１×１０の４乗〜１×１０の１０乗個であることが好ましい。
下限値未満であると発酵速度低下の問題がある。
上限値超であると製造コストの増加の問題がある。
下限値未満であると発酵速度低下の問題がある。
上限値超であると製造コストの増加の問題がある。
＜ビフィズス菌＞
ビフィズス菌としては、ビフィドバクテリウム（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ）属に属する微生物を例示できる。
例えば、ビフィドバクテリウム・アドレセンティス（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ａｄｏｌｅｓｃｅｎｔｉｓ）、ビフィドバクテリウム・ビフィドゥム（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｂｉｆｉｄｕｍ）、ビフィドバクテリウム・ロンガム・エスエスピー・インファンティス（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｌｏｎｇｕｍ ｓｓｐ． ｉｎｆａｎｔｉｓ）、ビフィドバクテリウム・ブレベ（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｂｒｅｖｅ）、ビフィドバクテリウム・ロンガム（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｌｏｎｇｕｍ）、ビフィドバクテリウム・アニマリス・エスエスピー・ラクティス（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ａｎｉｍａｌｉｓ ｓｓｐ． ｌａｃｔｉｓ）である。これらのビフィズス菌は単独で使用しても良いし、２以上を組み合わせて使用しても良い。
このうち、ビフィドバクテリウム・アニマリス・エスエスピー・ラクティス（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ａｎｉｍａｌｉｓ ｓｓｐ． ｌａｃｔｉｓ）のＢＢ−１２株（クリスチャンハンセン社製）は耐酸性を有することから好ましい。また、当該ＢＢ−１２株は酸素耐性もある程度有することから、発酵乳の製造において使用しやすい。
ビフィズス菌としては、ビフィドバクテリウム（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ）属に属する微生物を例示できる。
例えば、ビフィドバクテリウム・アドレセンティス（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ａｄｏｌｅｓｃｅｎｔｉｓ）、ビフィドバクテリウム・ビフィドゥム（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｂｉｆｉｄｕｍ）、ビフィドバクテリウム・ロンガム・エスエスピー・インファンティス（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｌｏｎｇｕｍ ｓｓｐ． ｉｎｆａｎｔｉｓ）、ビフィドバクテリウム・ブレベ（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｂｒｅｖｅ）、ビフィドバクテリウム・ロンガム（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｌｏｎｇｕｍ）、ビフィドバクテリウム・アニマリス・エスエスピー・ラクティス（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ａｎｉｍａｌｉｓ ｓｓｐ． ｌａｃｔｉｓ）である。これらのビフィズス菌は単独で使用しても良いし、２以上を組み合わせて使用しても良い。
このうち、ビフィドバクテリウム・アニマリス・エスエスピー・ラクティス（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ａｎｉｍａｌｉｓ ｓｓｐ． ｌａｃｔｉｓ）のＢＢ−１２株（クリスチャンハンセン社製）は耐酸性を有することから好ましい。また、当該ＢＢ−１２株は酸素耐性もある程度有することから、発酵乳の製造において使用しやすい。
原料乳へのビフィズス菌の添加量は、１ｍＬあたり１×１０の４乗〜１×１０の１２乗個であることが好ましい。
下限値未満であると菌数不足の問題がある。
上限値超であると製造コスト増加の問題がある。
下限値未満であると菌数不足の問題がある。
上限値超であると製造コスト増加の問題がある。
原料乳に添加するビフィズス菌数と乳酸菌数の比率は、０．０１〜１０００００の範囲内にあることが好ましく、０．１〜１００００の範囲内にあることがより好ましく、１〜１０００の範囲にあることがさらに好ましい。
下限値未満であると、発酵後のビフィズス菌数が増えにくくなる恐れがある。
上限値超であると、発酵後のビフィズス菌数は増えるものの、製造コストが増大する傾向にあり、好ましくない。
下限値未満であると、発酵後のビフィズス菌数が増えにくくなる恐れがある。
上限値超であると、発酵後のビフィズス菌数は増えるものの、製造コストが増大する傾向にあり、好ましくない。
＜ラクターゼ＞
ラクターゼは、乳糖をガラクトースとグルコースに分解する作用を有する。ラクターゼは、β−ガラクトシダーゼと呼ばれることもある。ラクターゼは細菌由来のものと酵母由来のものとカビ由来のものがある。ラクターゼとしては、中性に至適ｐＨがある中性ラクターゼ、酸性に至適ｐＨがある酸性ラクターゼを使用することができる。
ラクターゼは単独で使用しても良いし、２以上を組み合わせて使用しても良い。中性ラクターゼを単独又は２以上、酸性ラクターゼを単独又は２以上使用することも可能である。
ラクターゼは、乳糖をガラクトースとグルコースに分解する作用を有する。ラクターゼは、β−ガラクトシダーゼと呼ばれることもある。ラクターゼは細菌由来のものと酵母由来のものとカビ由来のものがある。ラクターゼとしては、中性に至適ｐＨがある中性ラクターゼ、酸性に至適ｐＨがある酸性ラクターゼを使用することができる。
ラクターゼは単独で使用しても良いし、２以上を組み合わせて使用しても良い。中性ラクターゼを単独又は２以上、酸性ラクターゼを単独又は２以上使用することも可能である。
中性ラクターゼとしては、クルイベロミセス・ラクチス（Ｋｌｕｙｖｅｒｏｍｙｃｅｓ ｌａｃｔｉｓ）由来のラクターゼ又はクルイベロマイセス・フラギリス（Ｋｌｕｙｖｅｒｏｍｙｃｅｓ ｆｒａｇｉｌｉｓ）、クルイベロマイセス・マーキシアヌス（Ｋｌｕｙｖｅｒｏｍｙｃｅｓ ｍａｒｘｉａｎｕｓ）、バチルス・サーキュランス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｃｉｒｃｕｌａｎｓ）由来のラクターゼが好ましい。クルイベロミセス由来のラクターゼは，クルイベロミセスの菌そのもののほか，クルイベロミセス・ラクチスから派生したラクターゼが含まれる。活性の至適ｐＨとして６.０〜７.５かつ失活ｐＨ５．５〜４.０があげられる。発酵乳のｐＨは５．０以下であるため、中性ラクターゼを使用する場合、発酵乳に含まれる中性ラクターゼは失活した状態である。
酸性ラクターゼ（β−ガラクトシダーゼ）としては、アスペルギルス・オリゼー（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｏｒｙｚａｅ）由来のラクターゼ、アスペルギルス・カワチ（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｋａｗａｃｈｉｉ）由来のラクターゼ、またはアスペルギルス・ニガー（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｎｉｇｅｒ）由来のラクターゼが好ましい。
ラクターゼの添加量は原料乳に加える終濃度として、０．１〜１００ｕｎｉｔ／ｇの範囲にするのが好ましく、０．５〜５０ｕｎｉｔ／ｇとするのがより好ましい。１．３〜４０ｕｎｉｔ／ｇとすることがさらに好ましく、１．５〜３０ｕｎｉｔ／ｇとすることが特に好ましい。本発明においては、「ｕｎｉｔ」を「Ｕ」と略す場合がある。
下限値未満では十分な乳糖分解が得られず、ビフィズス菌を増大させる効果が得られにくくなる。
上限値超では乳糖分解が急速に進むため、ビフィズス菌を増大させる効果が得られにくくなる。
下限値未満では十分な乳糖分解が得られず、ビフィズス菌を増大させる効果が得られにくくなる。
上限値超では乳糖分解が急速に進むため、ビフィズス菌を増大させる効果が得られにくくなる。
＜その他＞
原料乳又は発酵乳に乳糖以外のグルコース及びガラクトース等の糖類、タンパク質、糖質、脂質、ビタミン類、ミネラル類、有機酸、有機塩基、果汁、フレーバー類等を添加することもできる。
これらの材料を添加する場合、事前に殺菌処理を行ってから添加しても良いし、原料乳に添加後に殺菌処理を行っても良い。
原料乳又は発酵乳に乳糖以外のグルコース及びガラクトース等の糖類、タンパク質、糖質、脂質、ビタミン類、ミネラル類、有機酸、有機塩基、果汁、フレーバー類等を添加することもできる。
これらの材料を添加する場合、事前に殺菌処理を行ってから添加しても良いし、原料乳に添加後に殺菌処理を行っても良い。
以下、本発明を実施例を用いて説明するが、本発明はこれに制限されるものではない。
以下の実施例において、ラクターゼは、断りの無い場合には合同酒精社製のＧＯＤＯ−ＹＮＬ２（中性ラクターゼ）を用いた。ビフィズス菌は、断りのない場合にはクリスチャンハンセン社製のＢＢ１２株を用いた。
以下の実施例において、ラクターゼは、断りの無い場合には合同酒精社製のＧＯＤＯ−ＹＮＬ２（中性ラクターゼ）を用いた。ビフィズス菌は、断りのない場合にはクリスチャンハンセン社製のＢＢ１２株を用いた。
＜評価方法＞
（中性ラクターゼ活性の測定方法）
中性ラクターゼ活性は、ＦＣＣ、第４版、１９９６年７月１日、第８０１〜８０２頁／ラクターゼ（中性）（β-ガラクトシダーゼ）活性で、公表されたものを用いて測定した。
（中性ラクターゼ活性の測定方法）
中性ラクターゼ活性は、ＦＣＣ、第４版、１９９６年７月１日、第８０１〜８０２頁／ラクターゼ（中性）（β-ガラクトシダーゼ）活性で、公表されたものを用いて測定した。
（酸性ラクターゼ活性の測定方法）
酸性ラクターゼ活性は、ＦＣＣ、第４版、１９９６年７月１日、第８０２〜８０３頁／ラクターゼ（酸性）（β-ガラクトシダーゼ）活性で、公表されたものを用いて測定した。
酸性ラクターゼ活性は、ＦＣＣ、第４版、１９９６年７月１日、第８０２〜８０３頁／ラクターゼ（酸性）（β-ガラクトシダーゼ）活性で、公表されたものを用いて測定した。
（乳酸菌数の測定方法）
乳酸菌数の測定は、発酵前の原料乳と、調製した発酵乳を生理食塩水で適宜希釈した０．１ｍＬを、栄研化学社製ＢＣＰ加プレートカウント寒天培地‘栄研’で混釈して３７℃で２日間の培養後の菌数を測定した。
乳酸菌数の測定は、発酵前の原料乳と、調製した発酵乳を生理食塩水で適宜希釈した０．１ｍＬを、栄研化学社製ＢＣＰ加プレートカウント寒天培地‘栄研’で混釈して３７℃で２日間の培養後の菌数を測定した。
（ビフィズス菌数の測定方法）
ビフィズス菌数の測定は、発酵前の原料乳と、調製した発酵乳を生理食塩水で適宜希釈した０．１ｍＬを、栄研化学社製ＴＯＳプロピオン酸寒天培地で混釈して３７℃で２日間の嫌気培養後の菌数を測定した。
ビフィズス菌数の測定は、発酵前の原料乳と、調製した発酵乳を生理食塩水で適宜希釈した０．１ｍＬを、栄研化学社製ＴＯＳプロピオン酸寒天培地で混釈して３７℃で２日間の嫌気培養後の菌数を測定した。
（糖分析方法）
乳サンプル（原料乳に各種材料を添加したもの又は後述する発酵乳）２００μＬに２０％スルホサリチル酸を５０μＬ、純水を８００μＬ加えた後、２００００ｇで１０分間の遠心を行った。この上清に対してＨＰＬＣ分析（Ｗａｔｅｒｓ社製、Ａｌｌｉａｎｃｅ ２６９５）を行った。分析カラムはＣＡＲＢＯＳｅｐ ＣＨＯ−６２０ ＣＡ（トランスジェノミック社製）を用い、カラム温度８５℃、純水を移動相に毎分０．５ｍＬの流量で、示差屈折検出器にて実施した。
乳サンプル（原料乳に各種材料を添加したもの又は後述する発酵乳）２００μＬに２０％スルホサリチル酸を５０μＬ、純水を８００μＬ加えた後、２００００ｇで１０分間の遠心を行った。この上清に対してＨＰＬＣ分析（Ｗａｔｅｒｓ社製、Ａｌｌｉａｎｃｅ ２６９５）を行った。分析カラムはＣＡＲＢＯＳｅｐ ＣＨＯ−６２０ ＣＡ（トランスジェノミック社製）を用い、カラム温度８５℃、純水を移動相に毎分０．５ｍＬの流量で、示差屈折検出器にて実施した。
［実施例１］
市販のスキムミルク（森永乳業社製）を２質量部、市販の牛乳（明治乳業社製）を９８質量部で混合、溶解して１００℃で５分の殺菌処理を行った。原料乳を４０℃まで冷却し、０．１質量部のラクターゼ（終濃度５Ｕ／ｇ）を添加して、撹拌せずに４０℃で２０分間ラクターゼ反応を行った後、１００℃で５分のラクターゼ失活処理をした。得られた原料乳を４３℃まで冷却し、乳酸菌（ＹＦ−Ｌ８１２株：Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌｕｓ及びＬａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｄｅｌｂｒｕｅｃｋｉｉ ｓｕｂｓｐ． ｂｕｌｇａｒｉｃｕｓのミクスチャー、クリスチャンハンセン社製）０．１ｍｇ／原料乳１ｍＬとビフィズス菌０．０５ｍｇ／原料乳１ｍＬをそれぞれ添加して４３℃で４時間発酵させ、実施例１の発酵乳を得た（ラクターゼ前処理）。
市販のスキムミルク（森永乳業社製）を２質量部、市販の牛乳（明治乳業社製）を９８質量部で混合、溶解して１００℃で５分の殺菌処理を行った。原料乳を４０℃まで冷却し、０．１質量部のラクターゼ（終濃度５Ｕ／ｇ）を添加して、撹拌せずに４０℃で２０分間ラクターゼ反応を行った後、１００℃で５分のラクターゼ失活処理をした。得られた原料乳を４３℃まで冷却し、乳酸菌（ＹＦ−Ｌ８１２株：Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌｕｓ及びＬａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｄｅｌｂｒｕｅｃｋｉｉ ｓｕｂｓｐ． ｂｕｌｇａｒｉｃｕｓのミクスチャー、クリスチャンハンセン社製）０．１ｍｇ／原料乳１ｍＬとビフィズス菌０．０５ｍｇ／原料乳１ｍＬをそれぞれ添加して４３℃で４時間発酵させ、実施例１の発酵乳を得た（ラクターゼ前処理）。
［比較例１］
実施例１と同時に、以下のようにしてラクターゼ処理を行わない発酵乳を得た。
市販のスキムミルク（森永乳業社製）を２質量部、市販の牛乳（明治乳業社製）を９８質量部で混合、溶解して１００℃で５分の殺菌処理を行った。殺菌処理後に原料乳を４３℃まで冷却し、乳酸菌とビフィズス菌を実施例１と同様に添加して４３℃で４時間発酵させ、比較例１の発酵乳を得た。
実施例１と同時に、以下のようにしてラクターゼ処理を行わない発酵乳を得た。
市販のスキムミルク（森永乳業社製）を２質量部、市販の牛乳（明治乳業社製）を９８質量部で混合、溶解して１００℃で５分の殺菌処理を行った。殺菌処理後に原料乳を４３℃まで冷却し、乳酸菌とビフィズス菌を実施例１と同様に添加して４３℃で４時間発酵させ、比較例１の発酵乳を得た。
＜評価＞ＹＦ−Ｌ８１２株とラクターゼ前処理添加乳におけるＢＢ−１２株の増殖効果
表１に示したように、ラクターゼ処理を行った実施例１において、発酵中にＢＢ−１２株が良好な増殖を示した。発酵終了時点での実施例１と比較例１との差はおよそ３９％（（実施例のビフィズス菌数の増加割合−その実施例と同時に行った比較例のビフィズス菌数の増加割合）であった。発酵後のｐＨに実施例１と比較例１で差は見られず、発酵乳の製造に影響は見られなかった。図１に示したように、実施例１（図１の実線）は比較例１（図１の破線）に比べ、発酵途中におけるｐＨは高くなる傾向が認められた。表４に示したように、発酵後の乳酸菌数はラクターゼ処理を行った実施例１が良好な増殖を示した。
表１中の発酵前とは、各種材料を混合した直後に測定した値を意味する。他の表でも同様である。
表２に示したように、実施例１における発酵後の乳糖分解率は７２％であった。比較例１のグルコース量及びガラクトース量はほとんど存在しないのに対し、実施例１の発酵乳に含まれるグルコース量及びガラクトース量が増大した。２糖である乳糖よりも単糖であるグルコース又はガラクトースの方が資化しやすいと考えられるため、実施例１の発酵乳の方がビフィズス菌が成長しやすい状態にあると示唆された。
表１に示したように、ラクターゼ処理を行った実施例１において、発酵中にＢＢ−１２株が良好な増殖を示した。発酵終了時点での実施例１と比較例１との差はおよそ３９％（（実施例のビフィズス菌数の増加割合−その実施例と同時に行った比較例のビフィズス菌数の増加割合）であった。発酵後のｐＨに実施例１と比較例１で差は見られず、発酵乳の製造に影響は見られなかった。図１に示したように、実施例１（図１の実線）は比較例１（図１の破線）に比べ、発酵途中におけるｐＨは高くなる傾向が認められた。表４に示したように、発酵後の乳酸菌数はラクターゼ処理を行った実施例１が良好な増殖を示した。
表１中の発酵前とは、各種材料を混合した直後に測定した値を意味する。他の表でも同様である。
表２に示したように、実施例１における発酵後の乳糖分解率は７２％であった。比較例１のグルコース量及びガラクトース量はほとんど存在しないのに対し、実施例１の発酵乳に含まれるグルコース量及びガラクトース量が増大した。２糖である乳糖よりも単糖であるグルコース又はガラクトースの方が資化しやすいと考えられるため、実施例１の発酵乳の方がビフィズス菌が成長しやすい状態にあると示唆された。
［実施例２］
市販のスキムミルク（森永乳業社製）を２質量部、市販の牛乳（明治乳業社製）を９８質量部で混合、溶解して１００℃で５分の殺菌処理を行った。殺菌処理後に原料乳を４３℃まで冷却し、０．０５質量部（終濃度２．５Ｕ／ｇ）のラクターゼと乳酸菌（ＹＦ−Ｌ８１２株）０．１ｍｇ／料乳１ｍＬとビフィズス菌０．０５ｍｇ／原料乳１ｍＬを添加して４３℃で４時間発酵させ、実施例２の発酵乳を得た（ラクターゼ同時添加）。
市販のスキムミルク（森永乳業社製）を２質量部、市販の牛乳（明治乳業社製）を９８質量部で混合、溶解して１００℃で５分の殺菌処理を行った。殺菌処理後に原料乳を４３℃まで冷却し、０．０５質量部（終濃度２．５Ｕ／ｇ）のラクターゼと乳酸菌（ＹＦ−Ｌ８１２株）０．１ｍｇ／料乳１ｍＬとビフィズス菌０．０５ｍｇ／原料乳１ｍＬを添加して４３℃で４時間発酵させ、実施例２の発酵乳を得た（ラクターゼ同時添加）。
［比較例２］
実施例２と同時に、比較例１と同様にしてラクターゼ処理を行わない比較例２の発酵乳を得た。
実施例２と同時に、比較例１と同様にしてラクターゼ処理を行わない比較例２の発酵乳を得た。
表３に示したように、ラクターゼ処理を行った実施例２において、発酵中にＢＢ−１２株が良好な増殖を示した。発酵終了時点での実施例２と比較例２との差はおよそ１５８％であった。発酵後のｐＨと乳酸菌数に実施例２と比較例２で差は見られず、発酵乳の製造に影響は見られなかった。
図示していないが、実施例２及び比較例２においても実施例１及び比較例１と同様に、発酵途中におけるｐＨが高くなる傾向が認められた。
実施例２の発酵乳のラクターゼ活性は認められなかったため、当該発酵乳に含まれる中性ラクターゼは失活していることが示唆された。
表４に示したように、発酵後の乳糖分解率は９１％であった。第１工程と略同時にラクターゼ添加工程を行うことで、第２工程において、ラクターゼによる乳糖分解が進むものと考えられる。
図示していないが、実施例２及び比較例２においても実施例１及び比較例１と同様に、発酵途中におけるｐＨが高くなる傾向が認められた。
実施例２の発酵乳のラクターゼ活性は認められなかったため、当該発酵乳に含まれる中性ラクターゼは失活していることが示唆された。
表４に示したように、発酵後の乳糖分解率は９１％であった。第１工程と略同時にラクターゼ添加工程を行うことで、第２工程において、ラクターゼによる乳糖分解が進むものと考えられる。
［実施例３］
常法に従いアスペルギルス・オリゼー ＲＩＢ４０を４％マルトエキス（オリエンタル酵母社製）寒天培地に生育させた。ツァペックドックスブロス（Ｄｉｆｃｏ社製）を１００ｍＬ含む５００ｍＬ容三角フラスコに、生育した菌糸先端部分の５ｍｍ角を植菌し、３０℃で７日間培養した培養上清を酸性ラクターゼの粗酵素として取得した。粗酵素液は、８０％飽和となるように硫酸アンモニウムを添加して沈殿を回収し、得られた沈殿を１０ｍＭのリン酸緩衝液（ｐＨ６．５）に懸濁し、同緩衝液で透析した試料をカビ由来の酸性ラクターゼとして用いた。
実施例２で使用したラクターゼの代わりに上記のカビ由来の酸性ラクターゼを用いた以外、実施例２と同様にして、実施例３の発酵乳を得た。
常法に従いアスペルギルス・オリゼー ＲＩＢ４０を４％マルトエキス（オリエンタル酵母社製）寒天培地に生育させた。ツァペックドックスブロス（Ｄｉｆｃｏ社製）を１００ｍＬ含む５００ｍＬ容三角フラスコに、生育した菌糸先端部分の５ｍｍ角を植菌し、３０℃で７日間培養した培養上清を酸性ラクターゼの粗酵素として取得した。粗酵素液は、８０％飽和となるように硫酸アンモニウムを添加して沈殿を回収し、得られた沈殿を１０ｍＭのリン酸緩衝液（ｐＨ６．５）に懸濁し、同緩衝液で透析した試料をカビ由来の酸性ラクターゼとして用いた。
実施例２で使用したラクターゼの代わりに上記のカビ由来の酸性ラクターゼを用いた以外、実施例２と同様にして、実施例３の発酵乳を得た。
［実施例４］
実施例２で使用したラクターゼの代わりにバチルス・サーキュランス由来の中性ラクターゼ（アマノエンザイム社製 ラクトレスＬ３）を用いた以外、実施例２と同様にして、実施例４の発酵乳を得た。
実施例２で使用したラクターゼの代わりにバチルス・サーキュランス由来の中性ラクターゼ（アマノエンザイム社製 ラクトレスＬ３）を用いた以外、実施例２と同様にして、実施例４の発酵乳を得た。
［比較例３］
実施例３及び４と同時に、比較例１と同様にしてラクターゼ処理を行わない発酵乳を得た。
実施例３及び４と同時に、比較例１と同様にしてラクターゼ処理を行わない発酵乳を得た。
表５に示したように、カビ由来のラクターゼ処理した実施例３、ならびにバチルス・サーキュランス由来の中性ラクターゼ処理した実施例４においても発酵中にＢＢ−１２株が良好な増殖を示した。発酵終了時点でのラクターゼ未処理の比較例３との差は実施例３でおよそ９７％、実施例４で１４４％であった。
実施例３の発酵乳の酸性ラクターゼ活性を認めた。実施例４の発酵乳の中性ラクターゼ活性は認められなかったため、当該発酵乳に含まれる中性ラクターゼは失活していることが示唆された。
実施例３の発酵乳の酸性ラクターゼ活性を認めた。実施例４の発酵乳の中性ラクターゼ活性は認められなかったため、当該発酵乳に含まれる中性ラクターゼは失活していることが示唆された。
［実施例５］
実施例１で使用した乳酸菌（ＹＦ−Ｌ８１２株）の代わりに乳酸菌（ＹＣ−３８０株：Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌｕｓ及びＬａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｄｅｌｂｒｕｅｃｋｉｉ ｓｕｂｓｐ． ｂｕｌｇａｒｉｃｕｓのミクスチャー、クリスチャンハンセン社製）を用いた以外、実施例１と同様にして、実施例５の発酵乳を得た。
実施例１で使用した乳酸菌（ＹＦ−Ｌ８１２株）の代わりに乳酸菌（ＹＣ−３８０株：Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌｕｓ及びＬａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｄｅｌｂｒｕｅｃｋｉｉ ｓｕｂｓｐ． ｂｕｌｇａｒｉｃｕｓのミクスチャー、クリスチャンハンセン社製）を用いた以外、実施例１と同様にして、実施例５の発酵乳を得た。
［比較例４］
実施例５と同時に、使用した乳酸菌（ＹＦ−Ｌ８１２株）の代わりに乳酸菌（ＹＣ−３８０株：Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌｕｓ及びＬａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｄｅｌｂｒｕｅｃｋｉｉ ｓｕｂｓｐ． ｂｕｌｇａｒｉｃｕｓのミクスチャー、クリスチャンハンセン社製）を用いた以外、比較例１と同様にしてラクターゼ処理を行わない発酵乳を得た。
実施例５と同時に、使用した乳酸菌（ＹＦ−Ｌ８１２株）の代わりに乳酸菌（ＹＣ−３８０株：Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌｕｓ及びＬａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｄｅｌｂｒｕｅｃｋｉｉ ｓｕｂｓｐ． ｂｕｌｇａｒｉｃｕｓのミクスチャー、クリスチャンハンセン社製）を用いた以外、比較例１と同様にしてラクターゼ処理を行わない発酵乳を得た。
表６に示したように、ラクターゼ処理を行った実施例５が発酵中にＢＢ−１２株が良好な増殖を示した。発酵終了時点での比較例４との差はおよそ３９％であった。
実施例５の発酵乳のラクターゼ活性は認められなかったため、当該発酵乳に含まれる中性ラクターゼは失活していることが示唆された。
比較例４のグルコース量及びガラクトース量はほとんど存在しないのに対し、実施例５の発酵乳に含まれるグルコース量及びガラクトース量が増大した。２糖である乳糖よりも単糖であるグルコース又はガラクトースの方が資化しやすいと考えられるため、実施例５の発酵乳の方がビフィズス菌が成長しやすい状態にあると示唆された。
実施例５の発酵乳のラクターゼ活性は認められなかったため、当該発酵乳に含まれる中性ラクターゼは失活していることが示唆された。
比較例４のグルコース量及びガラクトース量はほとんど存在しないのに対し、実施例５の発酵乳に含まれるグルコース量及びガラクトース量が増大した。２糖である乳糖よりも単糖であるグルコース又はガラクトースの方が資化しやすいと考えられるため、実施例５の発酵乳の方がビフィズス菌が成長しやすい状態にあると示唆された。
［実施例６］
実施例２で使用した乳酸菌（ＹＦ−Ｌ８１２株）の代わりに乳酸菌（ＹＣ−３８０株）を用いた以外、実施例２と同様にして、実施例６の発酵乳を得た。
実施例２で使用した乳酸菌（ＹＦ−Ｌ８１２株）の代わりに乳酸菌（ＹＣ−３８０株）を用いた以外、実施例２と同様にして、実施例６の発酵乳を得た。
［比較例５］
実施例６と同時に、比較例４と同様にしてラクターゼ処理を行わない発酵乳を得た。
実施例６と同時に、比較例４と同様にしてラクターゼ処理を行わない発酵乳を得た。
表８に示したように、ラクターゼ処理を行ったサンプルの方が発酵中にＢＢ−１２株が良好な増殖を示した。発酵終了時点でのラクターゼ未処理との差はおよそ４６５％であった。
実施例６の発酵乳のラクターゼ活性は認められなかったため、当該発酵乳に含まれる中性ラクターゼは失活していることが示唆された。
比較例５のグルコース量及びガラクトース量はほとんど存在しないのに対し、実施例６の発酵乳に含まれるグルコース量及びガラクトース量が増大した。２糖である乳糖よりも単糖であるグルコース又はガラクトースの方が資化しやすいと考えられるため、実施例６の発酵乳の方がビフィズス菌が成長しやすい状態にあると示唆された。
実施例６の発酵乳のラクターゼ活性は認められなかったため、当該発酵乳に含まれる中性ラクターゼは失活していることが示唆された。
比較例５のグルコース量及びガラクトース量はほとんど存在しないのに対し、実施例６の発酵乳に含まれるグルコース量及びガラクトース量が増大した。２糖である乳糖よりも単糖であるグルコース又はガラクトースの方が資化しやすいと考えられるため、実施例６の発酵乳の方がビフィズス菌が成長しやすい状態にあると示唆された。
［実施例７］
ラクターゼの終濃度を０．５Ｕ／ｇから１０Ｕ／ｇに段階的に調整した以外、実施例６と同様にして、実施例７の発酵乳を得た。
ラクターゼの終濃度を０．５Ｕ／ｇから１０Ｕ／ｇに段階的に調整した以外、実施例６と同様にして、実施例７の発酵乳を得た。
［比較例６］
実施例７と同時に、比較例４と同様にしてラクターゼ処理を行わない発酵乳を得た。
実施例７と同時に、比較例４と同様にしてラクターゼ処理を行わない発酵乳を得た。
表１０に示したように、ラクターゼ処理を行ったサンプルの方が発酵中にＢＢ−１２株が良好な増殖を示した。発酵終了時点でのラクターゼ未処理との差はおよそ３２％から６４２％であった。
得られた結果を図２に示した。図２に示したように、ビフィズス菌数の増加割合についての比較例との差は、ラクターゼの終濃度が０．５Ｕ／ｇ以上１．０Ｕ／ｇ以下である場合、ラクターゼを添加しなかった比較例に比べわずかに改善した程度であった。ラクターゼの終濃度が１．０Ｕ／ｇ以上５Ｕ／ｇ以下である場合、ラクターゼの添加濃度に依存して、ほぼ直線的に増大する結果が得られた。ラクターゼの終濃度が５Ｕ／ｇ超であると、添加濃度に依存した効果は確認できず、ラクターゼの終濃度が５Ｕ／ｇのものとほぼ同程度の効果であった。
実施例７の全ての発酵乳のラクターゼ活性は認められなかったため、当該発酵乳に含まれる中性ラクターゼは失活していることが示唆された。
得られた結果を図２に示した。図２に示したように、ビフィズス菌数の増加割合についての比較例との差は、ラクターゼの終濃度が０．５Ｕ／ｇ以上１．０Ｕ／ｇ以下である場合、ラクターゼを添加しなかった比較例に比べわずかに改善した程度であった。ラクターゼの終濃度が１．０Ｕ／ｇ以上５Ｕ／ｇ以下である場合、ラクターゼの添加濃度に依存して、ほぼ直線的に増大する結果が得られた。ラクターゼの終濃度が５Ｕ／ｇ超であると、添加濃度に依存した効果は確認できず、ラクターゼの終濃度が５Ｕ／ｇのものとほぼ同程度の効果であった。
実施例７の全ての発酵乳のラクターゼ活性は認められなかったため、当該発酵乳に含まれる中性ラクターゼは失活していることが示唆された。
［実施例８］
ビフィズス菌をＢＢ−１２株の代わりにＢｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｂｒｅｖｅ ＪＣＭ １１９２に変更した以外、実施例６と同様にして、実施例８の発酵乳を得た。
ビフィズス菌をＢＢ−１２株の代わりにＢｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｂｒｅｖｅ ＪＣＭ １１９２に変更した以外、実施例６と同様にして、実施例８の発酵乳を得た。
［比較例７］
実施例８と同時に、比較例４と同様にしてラクターゼ処理を行わない発酵乳を得た。
実施例８と同時に、比較例４と同様にしてラクターゼ処理を行わない発酵乳を得た。
表１１に示したように、ラクターゼ処理を行ったサンプルの方が発酵中にＪＣＭ １１９２株が良好な増殖を示した。発酵終了時点でのラクターゼ未処理との差はおよそ４６％であった。
実施例８の発酵乳のラクターゼ活性は認められなかったため、当該発酵乳に含まれる中性ラクターゼは失活していることが示唆された。
実施例８の発酵乳のラクターゼ活性は認められなかったため、当該発酵乳に含まれる中性ラクターゼは失活していることが示唆された。
［実施例９］
ビフィズス菌をＢＢ−１２株の代わりにＢｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｌｏｎｇｕｍ ＪＣＭ １２１７に変更した以外、実施例６と同様にして、実施例８の発酵乳を得た。
ビフィズス菌をＢＢ−１２株の代わりにＢｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｌｏｎｇｕｍ ＪＣＭ １２１７に変更した以外、実施例６と同様にして、実施例８の発酵乳を得た。
［比較例８］
実施例９と同時に、比較例４と同様にしてラクターゼ処理を行わない発酵乳を得た。
実施例９と同時に、比較例４と同様にしてラクターゼ処理を行わない発酵乳を得た。
表１２に示したように、ラクターゼ処理を行った実施例９が発酵中にＪＣＭ １１９２株の減少が抑制された。発酵終了時点でのラクターゼ未処理との差はおよそ４％であった。
実施例９の発酵乳のラクターゼ活性は認められなかったため、当該発酵乳に含まれる中性ラクターゼは失活していることが示唆された。
実施例９の発酵乳のラクターゼ活性は認められなかったため、当該発酵乳に含まれる中性ラクターゼは失活していることが示唆された。
［参考例１］
原料乳中にグルコースもしくはガラクトースをそれぞれ１質量％、およびその両方を第１工程で添加した以外、比較例４と同様にしてラクターゼ処理を行わない発酵乳を得た。
原料乳中にグルコースもしくはガラクトースをそれぞれ１質量％、およびその両方を第１工程で添加した以外、比較例４と同様にしてラクターゼ処理を行わない発酵乳を得た。
［比較例９］
参考例１と同時に、比較例４と同様にしてラクターゼ処理を行わない発酵乳を得た。
参考例１と同時に、比較例４と同様にしてラクターゼ処理を行わない発酵乳を得た。
表１３に示したように、糖を添加して発酵を行った参考例１は、発酵中にＢＢ−１２株が良好な増殖を示さず、比較例９とほぼ同様の傾向を示した。
［実施例１０］
ラクターゼの終濃度を１．３Ｕ／ｇ、１．５Ｕ／ｇのより低濃度域で段階的に調整した以外、実施例６と同様にして、実施例１０の発酵乳を得た。
ラクターゼの終濃度を１．３Ｕ／ｇ、１．５Ｕ／ｇのより低濃度域で段階的に調整した以外、実施例６と同様にして、実施例１０の発酵乳を得た。
［比較例１０］
実施例１０と同時に、比較例４と同様にしてラクターゼ処理を行わない発酵乳を得た。
実施例１０と同時に、比較例４と同様にしてラクターゼ処理を行わない発酵乳を得た。
表１４に示したように、ラクターゼ処理を行ったサンプルの方が発酵中にＢＢ−１２株が良好な増殖を示した。発酵終了時点でのラクターゼ未処理との差はおよそ９７％から１０７％であった。この差の数値とラクターゼ終濃度の数値を図２に当てはめると、曲線の近似した位置にプロットすることができる。実施例１０は、実施例７に比べ発酵前のビフィズス菌数が多かったことから、栄養源が枯渇しやすく、ｐＨも下がりやすい状況であったことから、ビフィズス菌数が十分に増加する前に発酵が終了したことが考えられるところ、ラクターゼの終濃度が１．３Ｕ／ｇ及び１．５Ｕ／ｇであれば、ラクターゼの添加濃度に依存してビフィズス菌数が増大することが示唆された。
実施例１０の全ての発酵乳のラクターゼ活性は認められなかったため、当該発酵乳に含まれる中性ラクターゼは失活していることが示唆された。
実施例１０の全ての発酵乳のラクターゼ活性は認められなかったため、当該発酵乳に含まれる中性ラクターゼは失活していることが示唆された。
以上のことから、乳酸菌とビフィズス菌を含む発酵乳においてビフィズス菌の増殖効果を得るには、単にグルコースやガラクトースの量を調整するだけでは不十分であり、ラクターゼ添加によって乳糖量が減少し、且つ、グルコース量及びガラクトース量を増大させることが重要であることが示された。特に、乳酸菌とビフィズス菌を含む発酵乳においてビフィズス菌の増殖効果を更に増大させるには、ラクターゼ添加工程を第１工程と略同時にするのが良いことが示された。
乳酸菌とビフィズス菌を含む発酵乳において、ビフィズス菌が死滅する傾向にある場合であっても、ラクターゼ添加工程を設けることによって、ビフィズス菌の生菌数を維持させることができることが示された。
乳酸菌とビフィズス菌を含む発酵乳において、ビフィズス菌が死滅する傾向にある場合であっても、ラクターゼ添加工程を設けることによって、ビフィズス菌の生菌数を維持させることができることが示された。
Claims (10)
- 原料乳と、乳酸菌と、ビフィズス菌と、を混合する第１工程と、
原料乳を発酵させる第２工程と、
を順次行う発酵乳の製造方法であって、
前記第１工程の前、前記第１工程と略同時、から選択される１つ以上のタイミングで、原料乳にラクターゼを添加する工程（ラクターゼ添加工程）を行い、且つ
前記発酵乳における前記ビフィズス菌の数が、１ｍｌあたり１×１０ ４ 〜１×１０ １２ 個の範囲である
ことを特徴とする、発酵乳の製造方法。 - 前記ラクターゼによって、前記原料乳に含まれる乳糖を徐々に分解することを特徴とする請求項１に記載の発酵乳の製造方法。
- 前記原料乳に加える前記ラクターゼの終濃度が１．３ｕｎｉｔ／ｇ以上であることを特徴とする請求項１又は２に記載の発酵乳の製造方法。
- 乳糖の分解によって生成したグルコース及びガラクトースを前記乳酸菌又は前記ビフィズス菌に資化させることを特徴とする請求項２に記載の発酵乳の製造方法。
- 前記乳糖が、前記ラクターゼによって分解され、且つ、当該分解と並行して前記乳酸菌又は前記ビフィズス菌の少なくとも一方に資化されることを特徴とする請求項２又は４に記載の発酵乳の製造方法。
- 前記ラクターゼが前記第２工程中に徐々に失活していくことを特徴とする請求項１に記載の発酵乳の製造方法。
- 前記発酵乳における前記乳酸菌の数が、１ｍｌあたり１×１０ ４ 〜１×１０ １０ 個の範 囲である、請求項１〜６のいずれか一項に記載の発酵乳の製造方法。
- 乳酸菌と、ビフィズス菌と、ラクターゼと、を含有する発酵乳であって、
当該ラクターゼが中性ラクターゼであり、発酵乳中において失活した状態で存在し、乳糖が２．０質量％以下であり、
前記発酵乳における前記ビフィズス菌の数が、１ｍｌあたり１×１０ ４ 〜１×１０ １２ 個の範囲である
ことを特徴とする発酵乳。 - 前記乳糖が０．５質量％以下であることを特徴とする請求項８に記載の発酵乳。
- 前記発酵乳における前記乳酸菌の数が、１ｍｌあたり１×１０ ４ 〜１×１０ １０ 個の範 囲である、請求項８又は９に記載の発酵乳。
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2015101071 | 2015-05-18 | ||
| JP2015101071 | 2015-05-18 | ||
| PCT/JP2016/064804 WO2016186151A1 (ja) | 2015-05-18 | 2016-05-18 | 発酵乳の製造方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPWO2016186151A1 JPWO2016186151A1 (ja) | 2018-03-15 |
| JP6789931B2 true JP6789931B2 (ja) | 2020-11-25 |
Family
ID=57320349
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP2017519387A Active JP6789931B2 (ja) | 2015-05-18 | 2016-05-18 | 発酵乳の製造方法 |
Country Status (4)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US20180139977A1 (ja) |
| EP (1) | EP3298904A4 (ja) |
| JP (1) | JP6789931B2 (ja) |
| WO (1) | WO2016186151A1 (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR102563510B1 (ko) * | 2022-05-23 | 2023-08-10 | 롯데웰푸드 주식회사 | 갈락토올리고당이 함유된 저유당 발효유의 제조방법 및 상기 방법으로 제조된 발효유 |
Families Citing this family (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP7401970B2 (ja) * | 2016-10-31 | 2023-12-20 | 合同酒精株式会社 | 発酵乳製品の製造方法及び酵素含有組成物 |
| JP2019058132A (ja) * | 2017-09-27 | 2019-04-18 | 株式会社明治 | 発酵乳及び発酵乳の製造方法 |
| JP7109895B2 (ja) * | 2017-09-29 | 2022-08-01 | 株式会社明治 | 発酵乳及び発酵乳の製造方法 |
| JP7048340B2 (ja) * | 2018-02-09 | 2022-04-05 | 株式会社明治 | 発酵乳の製造方法、及び発酵効率低下抑制方法 |
| JP7213020B2 (ja) * | 2018-03-30 | 2023-01-26 | 株式会社明治 | 発酵乳及び発酵乳の製造方法 |
| JP7292022B2 (ja) * | 2018-09-27 | 2023-06-16 | 株式会社明治 | 発酵乳の製造方法、発酵乳の製造時間を短縮させる方法、発酵乳の酸度を高める方法 |
| EP3897171A1 (en) * | 2018-12-18 | 2021-10-27 | Pepsico Inc | Method for hydrolysis of lactose in dairy compositions and dairy products |
| JP7455554B2 (ja) * | 2019-11-12 | 2024-03-26 | 株式会社 伊藤園 | 発酵乳の製造方法および発酵乳の香味の増強方法 |
Family Cites Families (20)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP0119329A1 (en) * | 1982-12-28 | 1984-09-26 | Unilever N.V. | Treatment of milk products with lactic acid bacteria and lactose-splitting enzymes, and use of the resulting products in preparing foodstuffs |
| US4797289A (en) * | 1987-03-09 | 1989-01-10 | Reddy Malireddy S | Enhancement of lactobacillus acidophilus growth and viability in yogurt and other cultured dairy products |
| US4956186A (en) * | 1989-10-25 | 1990-09-11 | Borden, Inc. | Process for the production of low calorie yogurt |
| JP3389377B2 (ja) * | 1995-09-26 | 2003-03-24 | 株式会社ヤクルト本社 | 乳糖含有量の少ない発酵乳の製造方法 |
| JP3017456B2 (ja) * | 1997-05-08 | 2000-03-06 | 明治乳業株式会社 | プロピオン酸菌の高濃度培養方法及び培養物ならびにその加工物 |
| CA2441628A1 (en) * | 2001-04-05 | 2002-10-17 | Universite Laval | Alpha-galactosidase as food-grade genetic marker |
| CN1286967C (zh) * | 2001-11-05 | 2006-11-29 | 株式会社益力多本社 | 双歧杆菌属细菌和应用该细菌的发酵食品 |
| JP3706345B2 (ja) * | 2002-02-26 | 2005-10-12 | 長谷川香料株式会社 | 乳飲料又は発酵乳の風味改良剤 |
| US20070196439A1 (en) * | 2006-02-13 | 2007-08-23 | Catani Steven J | Lactose-reduced dairy compositions and related methods |
| UA36650U (ru) * | 2007-10-11 | 2008-11-10 | Одесская Национальная Академия Пищевых Технологий | Ферментированный молочный напиток геродиетического назначения |
| US20100285175A1 (en) * | 2007-12-03 | 2010-11-11 | Novozymes A/S | Method for Producing a Dairy Product |
| EP2351489A4 (en) * | 2008-10-23 | 2012-04-04 | Meiji Co Ltd | PREPARATION OF FERMENTED WHEY AND PROCESS FOR PRODUCING THE SAME |
| CN104719465A (zh) * | 2009-02-25 | 2015-06-24 | 株式会社明治 | 乳糖成分较少的发酵乳及其制作方法 |
| JP5010651B2 (ja) * | 2009-08-18 | 2012-08-29 | 株式会社ヤクルト本社 | 乳酸菌発酵乳エキス及びこれを含有する発酵乳製品 |
| WO2012026384A1 (ja) * | 2010-08-21 | 2012-03-01 | 株式会社 明治 | 乳糖分の少ない発酵乳及びその製造方法 |
| CN103338647B (zh) * | 2011-03-04 | 2015-09-09 | 株式会社明治 | 味道改善的发酵乳及其制造方法 |
| KR101227816B1 (ko) * | 2011-03-15 | 2013-01-29 | 연세대학교 원주산학협력단 | 효소분해 유청농축액을 포함하는 유산균 생육 촉진용 조성물 |
| SG11201400553QA (en) * | 2011-09-15 | 2014-06-27 | Meiji Co Ltd | Low calorie yogurt and method for producing same |
| FI127843B (en) * | 2014-08-28 | 2019-04-15 | Valio Oy | Prepared acidified milk protein products and process for their preparation |
| CN104286174B (zh) * | 2014-11-05 | 2017-07-04 | 光明乳业股份有限公司 | 一种无乳糖发酵乳及其制备方法 |
-
2016
- 2016-05-18 US US15/575,033 patent/US20180139977A1/en not_active Abandoned
- 2016-05-18 WO PCT/JP2016/064804 patent/WO2016186151A1/ja active Application Filing
- 2016-05-18 EP EP16796544.1A patent/EP3298904A4/en active Pending
- 2016-05-18 JP JP2017519387A patent/JP6789931B2/ja active Active
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR102563510B1 (ko) * | 2022-05-23 | 2023-08-10 | 롯데웰푸드 주식회사 | 갈락토올리고당이 함유된 저유당 발효유의 제조방법 및 상기 방법으로 제조된 발효유 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPWO2016186151A1 (ja) | 2018-03-15 |
| EP3298904A1 (en) | 2018-03-28 |
| WO2016186151A1 (ja) | 2016-11-24 |
| US20180139977A1 (en) | 2018-05-24 |
| EP3298904A4 (en) | 2018-11-21 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JP6789931B2 (ja) | 発酵乳の製造方法 | |
| RU2751166C2 (ru) | Способ получения молочного продукта, ферментированного с помощью молочнокислых бактерий и бактерий Bacillus, бактериальная композиция и ее применение в данном способе | |
| Farnsworth et al. | Effects of transglutaminase treatment on functional properties and probiotic culture survivability of goat milk yogurt | |
| Kök-Taş et al. | Effects of different fermentation parameters on quality characteristics of kefir | |
| JP5898220B2 (ja) | テクスチャを改変する乳酸菌株 | |
| KR101018274B1 (ko) | 발효유의 제조방법 | |
| JP4802216B2 (ja) | ビフィドバクテリウム属菌含有組成物及びビフィドバクテリウム属菌含有組成物の製造方法 | |
| JP6193439B2 (ja) | ラクトバチルス属乳酸菌の増殖促進剤及び／又は生残性向上剤 | |
| JPWO2008099543A1 (ja) | 新規乳酸菌を用いた発酵乳の製造方法 | |
| CN108882718A (zh) | 使用干酪乳杆菌生产发酵乳制品的方法 | |
| KR20150138846A (ko) | 두유 발효물 | |
| JP5393463B2 (ja) | ビフィズス菌の増殖及び生存を改善するアラビアガムの使用 | |
| US20130189396A1 (en) | Method for producing a fermented food containing bifidobacteria | |
| Rayes | Enhancement of probiotic bioactivity by some prebiotics to produce bio-fermented milk | |
| JP7401970B2 (ja) | 発酵乳製品の製造方法及び酵素含有組成物 | |
| JP2020162478A (ja) | 低脂肪発酵食品およびその製造方法 | |
| JP2022136018A (ja) | 保形性が改善された発酵組成物、及びその製造方法 | |
| JP4794592B2 (ja) | 新規乳酸菌 | |
| KR101227816B1 (ko) | 효소분해 유청농축액을 포함하는 유산균 생육 촉진용 조성물 | |
| El-Shafei et al. | Production of high quality functional Labneh cheese using exopolysaccharides producing encapsulated Lactobacillus bulgaricus | |
| JP4794593B2 (ja) | 新規乳酸菌を用いた発酵乳の製造方法 | |
| JP3993322B2 (ja) | 乳酸菌生育促進剤及びその利用 | |
| Kaur et al. | Development of lactose hydrolyzed milk using micro fluidization assisted crude β-galactosidase enzyme of Lactobacillus acidophilus | |
| Ayad et al. | Stimulating the Viability of Bifidobacterium spp. in Synbiotic Fermented Milk by Co-culturing with Lactobacillus paracasei 441 and Inulin | |
| JP5800380B2 (ja) | 乳酸菌およびそれを用いた飲料並びにその製造方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20171109 |
|
| A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20190201 |
|
| A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20200225 |
|
| A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20200415 |
|
| TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
| A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20201006 |
|
| A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20201104 |
|
| R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 6789931 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |