JP3017456B2 - プロピオン酸菌の高濃度培養方法及び培養物ならびにその加工物 - Google Patents
プロピオン酸菌の高濃度培養方法及び培養物ならびにその加工物Info
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Description
【０００１】
【発明の属する技術分野】本発明は、プロピオン酸菌の
高濃度培養技術に関するものである。更に詳細には、本
発明は、プロピオン酸菌の産生するビフィズス菌増殖促
進物質を多量に生産し、且つ培養液から抽出することな
くそのまま食せるよう、乳原料を培地に用いて高濃度培
養し、その後、粉末処理または滅菌処理により加工した
プロピオン酸菌高濃度培養物の加工物に関するものであ
って、本発明に係る培養物、加工物は、通常の飲食品や
健康保健飲食品等の機能性原料等として有利に利用され
るものである。
高濃度培養技術に関するものである。更に詳細には、本
発明は、プロピオン酸菌の産生するビフィズス菌増殖促
進物質を多量に生産し、且つ培養液から抽出することな
くそのまま食せるよう、乳原料を培地に用いて高濃度培
養し、その後、粉末処理または滅菌処理により加工した
プロピオン酸菌高濃度培養物の加工物に関するものであ
って、本発明に係る培養物、加工物は、通常の飲食品や
健康保健飲食品等の機能性原料等として有利に利用され
るものである。
【０００２】
【従来の技術】そのまま食することのできるプロピオン
酸菌の培養物を得るには、チーズスターターの調製法に
従い、培地に脱脂粉乳を用いて培養すればよい。例え
ば、１０％の脱粉還元液を培地として、Propionibacter
ium freudenreichiiを３０℃で３日間静置培養する
と、菌数が６×１０9cfu/ml、ビフィズス菌増殖促進活
性（測定法は後述）が４．９U/mlのプロピオン酸菌培養
物が得られる。しかし、これを実際に食してビフィズス
菌増殖促進効果を実現するには、活性値が低いことから
多量に食さねばならず、また培養物のままでは保存でき
ないことから、現実的には培養物そのものをビフィズス
菌増殖促進効果を有する機能性原料として利用すること
は不可能であった。
酸菌の培養物を得るには、チーズスターターの調製法に
従い、培地に脱脂粉乳を用いて培養すればよい。例え
ば、１０％の脱粉還元液を培地として、Propionibacter
ium freudenreichiiを３０℃で３日間静置培養する
と、菌数が６×１０9cfu/ml、ビフィズス菌増殖促進活
性（測定法は後述）が４．９U/mlのプロピオン酸菌培養
物が得られる。しかし、これを実際に食してビフィズス
菌増殖促進効果を実現するには、活性値が低いことから
多量に食さねばならず、また培養物のままでは保存でき
ないことから、現実的には培養物そのものをビフィズス
菌増殖促進効果を有する機能性原料として利用すること
は不可能であった。
【０００３】
【発明が解決しようとする課題】本発明は、上記した技
術の現状に鑑み、従来よりも比ビフィズス菌増殖促進活
性が高く、且つそのまま食することのできるプロピオン
酸菌の高濃度培養物を創製する技術を新たに開発する目
的でなされたものである。
術の現状に鑑み、従来よりも比ビフィズス菌増殖促進活
性が高く、且つそのまま食することのできるプロピオン
酸菌の高濃度培養物を創製する技術を新たに開発する目
的でなされたものである。
【０００４】
【課題を解決するための手段】本発明は、上記した目的
を達成するためになされたものであって、本発明者ら
は、比ビフィズス菌増殖促進活性の高いプロピオン酸菌
の培養物を得るために各方面から鋭意研究を行った結
果、ホエイ粉を主成分とした培地、又は、混合物（すな
わち、ホエイ蛋白質にミネラルと単糖を追加した混合
物）を主成分とした培地で培養を行ったところ、プロピ
オン酸菌が非常に高濃度に増殖し、従来よりも比ビフィ
ズス菌増殖促進活性の高いプロピオン酸菌培養物が得ら
れるという、きわめて有用な新知見を得た。
を達成するためになされたものであって、本発明者ら
は、比ビフィズス菌増殖促進活性の高いプロピオン酸菌
の培養物を得るために各方面から鋭意研究を行った結
果、ホエイ粉を主成分とした培地、又は、混合物（すな
わち、ホエイ蛋白質にミネラルと単糖を追加した混合
物）を主成分とした培地で培養を行ったところ、プロピ
オン酸菌が非常に高濃度に増殖し、従来よりも比ビフィ
ズス菌増殖促進活性の高いプロピオン酸菌培養物が得ら
れるという、きわめて有用な新知見を得た。
【０００５】また更に、この培養物について検討した結
果、得られた培養物は、これを粉末化処理もしくは滅菌
処理することにより、機能性原料として取扱いの容易な
形態に処理した加工物が得られるという有用な新知見を
得た。
果、得られた培養物は、これを粉末化処理もしくは滅菌
処理することにより、機能性原料として取扱いの容易な
形態に処理した加工物が得られるという有用な新知見を
得た。
【０００６】本発明は、これらの有用新知見に基づき更
に研究の結果、遂に完成されたものである。以下、本発
明について詳述する。
に研究の結果、遂に完成されたものである。以下、本発
明について詳述する。
【０００７】本発明においては、ホエイ粉を培地原料と
して用いるものであり、ホエイ粉を培地原料に用いる
と、チーズスターター調製時の培地原料である脱粉を用
いる場合に比べて、高濃度に培養することができ、１菌
体当たりの比ビフィズス菌増殖促進活性も向上する。ま
た、ホエイ粉をプロテアーゼで処理し、得られた処理物
は、更に有効である。この処理物及びホエイ粉は、適宜
混合して使用することもできる。
して用いるものであり、ホエイ粉を培地原料に用いる
と、チーズスターター調製時の培地原料である脱粉を用
いる場合に比べて、高濃度に培養することができ、１菌
体当たりの比ビフィズス菌増殖促進活性も向上する。ま
た、ホエイ粉をプロテアーゼで処理し、得られた処理物
は、更に有効である。この処理物及びホエイ粉は、適宜
混合して使用することもできる。
【０００８】例えば、１０％脱粉還元液でチーズ用プロ
ピオン酸菌（Propionibacterium freudenreichii）を
培養（３０℃、７２ｈ）した場合の生菌数が６×１０9c
fu/ml、比ビフィズス菌増殖促進活性が４．９U/mlであ
るのに対し、同条件下で１０％ホエイ粉還元プロテアー
ゼ処理液を培地として培養した場合の生菌数は８×１０
9cfu/ml、比ビフィズス菌増殖促進活性は１７．７U/ml
となる。
ピオン酸菌（Propionibacterium freudenreichii）を
培養（３０℃、７２ｈ）した場合の生菌数が６×１０9c
fu/ml、比ビフィズス菌増殖促進活性が４．９U/mlであ
るのに対し、同条件下で１０％ホエイ粉還元プロテアー
ゼ処理液を培地として培養した場合の生菌数は８×１０
9cfu/ml、比ビフィズス菌増殖促進活性は１７．７U/ml
となる。
【０００９】なお、ビフィズス菌増殖促進活性は、寒天
平板拡散法により測定した。すなわち、Ｋ2ＨＰＯ4、Ｋ
Ｈ2ＰＯ4、グルコース濃度以外の成分を２分の１濃度に
希釈したＮｏ．１培地（N. Azuma, K. Yamauchi and T.
Mitsuoka, Agric. Biol. Chem., 48:2159(1984)）に寒
天１．５％を加え、ｐＨ８．５に調整し、活性測定培地
とし、これに検定菌としてBifidobacterium longum 600
1株を懸濁させ、厚さ１mmの平板を作成して、この上に
試料を含むペーパーディスクを置き、培養後に出現した
増殖円径を測定した。この際、標準物質として１０倍段
階希釈した1-hydoroxy-2-naphthoic acidを含むペーパ
ーディスクにつき同様に試験し、得られた増殖円径と本
標準物質濃度を指標にビフィズス菌増殖促進活性（１μ
g/mlの1-hydroxy-2-naphthoic acidが示す増殖円径に相
当する活性を１U/mlと定義）を算出した。
平板拡散法により測定した。すなわち、Ｋ2ＨＰＯ4、Ｋ
Ｈ2ＰＯ4、グルコース濃度以外の成分を２分の１濃度に
希釈したＮｏ．１培地（N. Azuma, K. Yamauchi and T.
Mitsuoka, Agric. Biol. Chem., 48:2159(1984)）に寒
天１．５％を加え、ｐＨ８．５に調整し、活性測定培地
とし、これに検定菌としてBifidobacterium longum 600
1株を懸濁させ、厚さ１mmの平板を作成して、この上に
試料を含むペーパーディスクを置き、培養後に出現した
増殖円径を測定した。この際、標準物質として１０倍段
階希釈した1-hydoroxy-2-naphthoic acidを含むペーパ
ーディスクにつき同様に試験し、得られた増殖円径と本
標準物質濃度を指標にビフィズス菌増殖促進活性（１μ
g/mlの1-hydroxy-2-naphthoic acidが示す増殖円径に相
当する活性を１U/mlと定義）を算出した。
【００１０】このように、１０％ホエイ粉還元プロテア
ーゼ処理液を培地に使用することは高い比ビフィズス菌
増殖促進活性を有する培養物を得るのに有効な手段であ
るが、同培地は乳糖を高濃度（約７％）に含み、これが
プロピオン酸菌の生育、ひいてはビフィズス菌増殖促進
物質の産生を阻害している点にはじめて着目し、更に本
発明の一部の改良を行うこととした。
ーゼ処理液を培地に使用することは高い比ビフィズス菌
増殖促進活性を有する培養物を得るのに有効な手段であ
るが、同培地は乳糖を高濃度（約７％）に含み、これが
プロピオン酸菌の生育、ひいてはビフィズス菌増殖促進
物質の産生を阻害している点にはじめて着目し、更に本
発明の一部の改良を行うこととした。
【００１１】すなわち、本発明において、培地の主成分
としてホエイ粉及び／又はそのプロテアーゼ処理物を使
用するほか、ホエイ蛋白質、ミネラル、単糖の混合物を
使用する方法を発明した。具体的には、培地中の糖濃度
を削減するために、ホエイ蛋白質源として、ホエイを透
析処理して乳糖含量を減らしたホエイ蛋白質濃縮物（以
下、ＷＰＣということもある）、及び／又はこれらを更
に高純度に分離したホエイ蛋白質分離物（以下、ＷＰＩ
ということもある）を使用し、これに適量の糖質と不足
するミネラル分を個々添加することにより培地を調製す
る方法を発明した。
としてホエイ粉及び／又はそのプロテアーゼ処理物を使
用するほか、ホエイ蛋白質、ミネラル、単糖の混合物を
使用する方法を発明した。具体的には、培地中の糖濃度
を削減するために、ホエイ蛋白質源として、ホエイを透
析処理して乳糖含量を減らしたホエイ蛋白質濃縮物（以
下、ＷＰＣということもある）、及び／又はこれらを更
に高純度に分離したホエイ蛋白質分離物（以下、ＷＰＩ
ということもある）を使用し、これに適量の糖質と不足
するミネラル分を個々添加することにより培地を調製す
る方法を発明した。
【００１２】本発明において、培地中の蛋白質含有量は
１〜５％、好適には１．５〜４．０％とし、糖質含有量
は１〜４％、好適には１．５〜３．０％とするのがよ
い。このような含有量が得られるよう、ホエイ粉（プロ
テアーゼ処理物）、ホエイ蛋白質（プロテアーゼ処理
物）の使用量、混合量をコントロールする。また、糖質
としては、乳糖ではなく、グルコースまたは乳糖をラク
ターゼ処理した単糖を使用する。
１〜５％、好適には１．５〜４．０％とし、糖質含有量
は１〜４％、好適には１．５〜３．０％とするのがよ
い。このような含有量が得られるよう、ホエイ粉（プロ
テアーゼ処理物）、ホエイ蛋白質（プロテアーゼ処理
物）の使用量、混合量をコントロールする。また、糖質
としては、乳糖ではなく、グルコースまたは乳糖をラク
ターゼ処理した単糖を使用する。
【００１３】この場合、低コストで且つ食用に適した培
地を得るためには、糖質とミネラル両方の供給源として
乳清ミネラルのラクターゼ処理液を使用するのがよい。
すなわち、ＷＰＣをタンパク源、乳清ミネラルを糖質源
とミネラル源とした、両者の最適化率混合物を培地原料
とすることで、ホエイ粉を培地原料とする場合よりもさ
らに高濃度培養が可能で、比ビフィズス菌増殖促進活性
の高い培養液が得られる。詳しい培地調製方法を以下に
示す。
地を得るためには、糖質とミネラル両方の供給源として
乳清ミネラルのラクターゼ処理液を使用するのがよい。
すなわち、ＷＰＣをタンパク源、乳清ミネラルを糖質源
とミネラル源とした、両者の最適化率混合物を培地原料
とすることで、ホエイ粉を培地原料とする場合よりもさ
らに高濃度培養が可能で、比ビフィズス菌増殖促進活性
の高い培養液が得られる。詳しい培地調製方法を以下に
示す。
【００１４】ＷＰＣは還元後、プロテアーゼでタンパク
を分解する。プロテアーゼは麹菌由来のエンド＆エキソ
型で、使用量は分解するタンパク量の３％とする。反応
は５０℃、ｐＨ７．０で行い、ｐＨの低下が見られなく
なるまで３〜５時間攪拌を続ける。乳清ミネラルは、ラ
クターゼで乳糖を分解する。ラクターゼの使用量は分解
する糖質量の２〜８％とし、反応は５０〜６０℃（５５
℃が好適）、ｐＨ５〜６で行い、完全に分解するまで攪
拌を続ける。
を分解する。プロテアーゼは麹菌由来のエンド＆エキソ
型で、使用量は分解するタンパク量の３％とする。反応
は５０℃、ｐＨ７．０で行い、ｐＨの低下が見られなく
なるまで３〜５時間攪拌を続ける。乳清ミネラルは、ラ
クターゼで乳糖を分解する。ラクターゼの使用量は分解
する糖質量の２〜８％とし、反応は５０〜６０℃（５５
℃が好適）、ｐＨ５〜６で行い、完全に分解するまで攪
拌を続ける。
【００１５】続いて、好適には最終的な培地濃度とし
て、蛋白濃度が１〜５％（好適には１．５〜４．０
％）、糖質濃度が１〜４％（好適には１．５〜３．０
％）となるようにこれら２液を混合する。最後に、酵母
エキス、硫酸ナトリウム、アスパラギン、その他プロピ
オン酸菌培養に必要な常用される成分を培地に添加し、
ｐＨを５〜８（好適には５．５〜７．５）に調整して培
地の調製を終了する。プロピオン酸菌の培養工程は、以
下に従う。
て、蛋白濃度が１〜５％（好適には１．５〜４．０
％）、糖質濃度が１〜４％（好適には１．５〜３．０
％）となるようにこれら２液を混合する。最後に、酵母
エキス、硫酸ナトリウム、アスパラギン、その他プロピ
オン酸菌培養に必要な常用される成分を培地に添加し、
ｐＨを５〜８（好適には５．５〜７．５）に調整して培
地の調製を終了する。プロピオン酸菌の培養工程は、以
下に従う。
【００１６】すなわち、培地温度を２０〜４０℃とし、
スターターを培養開始直後の生菌数が１０7〜１０8cfu/
mlとなるように接種して、３〜４日間培養する。ｐＨは
炭酸カリウム水溶液でｐＨ５．５〜７．５に保つ。培養
途中にグルコースを追加添加すると、培養液のビフィズ
ス菌増殖促進活性を増大させることができる。このよう
にして得られた培養物は従来の約５倍の菌数と、約１０
倍の比ビフィズス菌増殖促進活性を有する。
スターターを培養開始直後の生菌数が１０7〜１０8cfu/
mlとなるように接種して、３〜４日間培養する。ｐＨは
炭酸カリウム水溶液でｐＨ５．５〜７．５に保つ。培養
途中にグルコースを追加添加すると、培養液のビフィズ
ス菌増殖促進活性を増大させることができる。このよう
にして得られた培養物は従来の約５倍の菌数と、約１０
倍の比ビフィズス菌増殖促進活性を有する。
【００１７】本発明においては、プロピオン酸菌がすべ
て使用可能であるが、中でもチーズ用プロピオン酸菌は
有利に使用することができる。チーズ用プロピオン酸菌
としては、Propionibacterium freudenreichii以外に、
Propionibacterium acidipropionici, Propionibacteri
um jensenii, Propionibacterium thoeniiを用いても同
様の結果を得ることができる。
て使用可能であるが、中でもチーズ用プロピオン酸菌は
有利に使用することができる。チーズ用プロピオン酸菌
としては、Propionibacterium freudenreichii以外に、
Propionibacterium acidipropionici, Propionibacteri
um jensenii, Propionibacterium thoeniiを用いても同
様の結果を得ることができる。
【００１８】このようにして得られた培養物は、そのま
まそれ自体で直接飲食に供することができるが、これを
更に粉末化ないし液状化処理して、機能性原料として取
扱いの容易な形態に加工処理することも可能であり、こ
の点も本発明の重要な特徴のひとつである。
まそれ自体で直接飲食に供することができるが、これを
更に粉末化ないし液状化処理して、機能性原料として取
扱いの容易な形態に加工処理することも可能であり、こ
の点も本発明の重要な特徴のひとつである。
【００１９】次に得られた培養物の加工処理について説
明する。培養物の加工形態は大別して粉末状と液体状に
分けられる。粉末状の加工物を得るには、培養液に賦形
剤として脱粉もしくはホエイ粉、生澱粉、デキストリン
を直接添加し、培養液固形分を３０〜４０％とした後、
噴霧乾燥するか、培養液と賦形剤の還元液を混合し、固
形分が３０〜４０％となるまで濃縮後、噴霧乾燥する。
必要に応じてアスコルビン酸ナトリウムを安定剤として
添加する。充填時に脱酸素処理（窒素封入や脱酸素剤添
加）することで長期保存が可能である。賦形剤として
は、上記のほか、必要に応じて、ＷＰＣ、ＷＰＩ、化工
澱粉（デキストリンのほか、ソリューブルスターチ、ブ
リティシュガム、酸化澱粉、澱粉エステル、澱粉エーテ
ル等）も使用できる。
明する。培養物の加工形態は大別して粉末状と液体状に
分けられる。粉末状の加工物を得るには、培養液に賦形
剤として脱粉もしくはホエイ粉、生澱粉、デキストリン
を直接添加し、培養液固形分を３０〜４０％とした後、
噴霧乾燥するか、培養液と賦形剤の還元液を混合し、固
形分が３０〜４０％となるまで濃縮後、噴霧乾燥する。
必要に応じてアスコルビン酸ナトリウムを安定剤として
添加する。充填時に脱酸素処理（窒素封入や脱酸素剤添
加）することで長期保存が可能である。賦形剤として
は、上記のほか、必要に応じて、ＷＰＣ、ＷＰＩ、化工
澱粉（デキストリンのほか、ソリューブルスターチ、ブ
リティシュガム、酸化澱粉、澱粉エステル、澱粉エーテ
ル等）も使用できる。
【００２０】液状の加工物を得るには、培養液にｐＨ調
整剤として乳酸を加えて酸性化した後、安定剤としてア
スコルビン酸ナトリウムを添加し、加熱滅菌を行う。−
８０℃で凍結することで長期保存が可能である。
整剤として乳酸を加えて酸性化した後、安定剤としてア
スコルビン酸ナトリウムを添加し、加熱滅菌を行う。−
８０℃で凍結することで長期保存が可能である。
【００２１】粉末状加工物はそのまま単独で利用する以
外に、他の粉末と混合することも可能である。液状加工
物は賦形剤を含まないことから、透明飲料に配合できる
他、無菌である特性を生かし、ビフィズス菌増殖促進活
性を著しく低下させる程の加熱工程を必要とする製品に
対しても後から無菌添加することで対処できる。以下、
本発明を試験例及び実施例により詳述する。
外に、他の粉末と混合することも可能である。液状加工
物は賦形剤を含まないことから、透明飲料に配合できる
他、無菌である特性を生かし、ビフィズス菌増殖促進活
性を著しく低下させる程の加熱工程を必要とする製品に
対しても後から無菌添加することで対処できる。以下、
本発明を試験例及び実施例により詳述する。
【００２２】
【試験例】種々の乳原料を培地に使用した場合のＢＧＳ
（ビフィズス菌増殖促進物質）生産能の違いについて試
験した。培地としては、次の３種を使用した。 脱脂粉乳１０％還元液 ホエイ粉１０％還元プロテアーゼ処理液 ラクターゼ処理済乳清ミネラル２．８４％含有、プロ
テアーゼ処理済 ＷＰＣ−８０ ４．５％還元液
（ビフィズス菌増殖促進物質）生産能の違いについて試
験した。培地としては、次の３種を使用した。 脱脂粉乳１０％還元液 ホエイ粉１０％還元プロテアーゼ処理液 ラクターゼ処理済乳清ミネラル２．８４％含有、プロ
テアーゼ処理済 ＷＰＣ−８０ ４．５％還元液
【００２３】これらの各々について、Propionibacteriu
m freudenreichii ATCC 6207株を植菌し、３５℃、７２
時間、ｐＨ６．０で中和培養した。尚、プロテアーゼ処
理は酵素にアマノＡ（天野製薬）を用い、の培地につ
いてはホエイ粉１ｇにつき６．７９ｍｇ使用し、分解条
件：ｐＨ７．０、５０℃、２時間、の培地については
ＷＰＣ−８０ １ｇにつき４５．４ｍｇ使用し、分解条
件：ｐＨ７．０、５０℃、４時間で行った。ラクターゼ
処理は酵素にスミラクトＬ（新日本化学工業）を用い、
乳清ミネラル１ｇにつき１５ｍｇ使用し、分解条件：ｐ
Ｈ５．２、５５℃、１２時間で行った。尚、各培地とも
０．１％の酵母エキスを添加し、培養中のｐＨ維持には
８Ｎ炭酸カリウムを用いた。
m freudenreichii ATCC 6207株を植菌し、３５℃、７２
時間、ｐＨ６．０で中和培養した。尚、プロテアーゼ処
理は酵素にアマノＡ（天野製薬）を用い、の培地につ
いてはホエイ粉１ｇにつき６．７９ｍｇ使用し、分解条
件：ｐＨ７．０、５０℃、２時間、の培地については
ＷＰＣ−８０ １ｇにつき４５．４ｍｇ使用し、分解条
件：ｐＨ７．０、５０℃、４時間で行った。ラクターゼ
処理は酵素にスミラクトＬ（新日本化学工業）を用い、
乳清ミネラル１ｇにつき１５ｍｇ使用し、分解条件：ｐ
Ｈ５．２、５５℃、１２時間で行った。尚、各培地とも
０．１％の酵母エキスを添加し、培養中のｐＨ維持には
８Ｎ炭酸カリウムを用いた。
【００２４】培養終了後の菌数は、９．５×１０9cfu
/ml、１６．６×１０9cfu/ml、３３．７×１０9cfu
/mlで、比ビフィズス菌増殖促進活性は、７．５U/m
l、３１．２U/ml、５５．８U/mlであった。培養期
間中の比ビフィズス菌増殖促進活性の経時変化を図１に
示す。
/ml、１６．６×１０9cfu/ml、３３．７×１０9cfu
/mlで、比ビフィズス菌増殖促進活性は、７．５U/m
l、３１．２U/ml、５５．８U/mlであった。培養期
間中の比ビフィズス菌増殖促進活性の経時変化を図１に
示す。
【００２５】
【実施例】以下に実施例を示し、本発明をより具体的に
説明するが、これらによって何ら本発明が限定されるも
のではない。
説明するが、これらによって何ら本発明が限定されるも
のではない。
【００２６】（実施例１）ｐＨ７、５０℃に調整した１
０％ＷＰＣ−８０還元液６．７５Ｋｇにプロテアーゼ
（アマノＡ）を３０６ｇ添加し、４時間分解させた後
に、８５℃で加熱して酵素を失活させる。一方、ｐＨ
５、５５℃に調整した５．１６％乳清ミネラル８．２５
Ｋｇにラクターゼ（スミラクトＬ）を１２４ｇ添加し、
５時間以上分解させた後に８５℃で加熱して酵素を失活
させる。両者を混合し、酵母エキス１５ｇを加え、ｐＨ
６．７に調整後、滅菌し、プロピオン酸菌（Propioniba
cterium freudenreichii IFO 12424）スターターを９×
１０7cfu/mlとなるよう接種する。ｐＨが６．０以下に
下がらぬよう８Ｎ炭酸カリウムを適宜加えながら、３５
℃、７２時間攪拌を続ける。その結果、５５．８U/mlの
比ビフィズス菌増殖促進活性を有する培養物が得られ
る。
０％ＷＰＣ−８０還元液６．７５Ｋｇにプロテアーゼ
（アマノＡ）を３０６ｇ添加し、４時間分解させた後
に、８５℃で加熱して酵素を失活させる。一方、ｐＨ
５、５５℃に調整した５．１６％乳清ミネラル８．２５
Ｋｇにラクターゼ（スミラクトＬ）を１２４ｇ添加し、
５時間以上分解させた後に８５℃で加熱して酵素を失活
させる。両者を混合し、酵母エキス１５ｇを加え、ｐＨ
６．７に調整後、滅菌し、プロピオン酸菌（Propioniba
cterium freudenreichii IFO 12424）スターターを９×
１０7cfu/mlとなるよう接種する。ｐＨが６．０以下に
下がらぬよう８Ｎ炭酸カリウムを適宜加えながら、３５
℃、７２時間攪拌を続ける。その結果、５５．８U/mlの
比ビフィズス菌増殖促進活性を有する培養物が得られ
る。
【００２７】（実施例２）実施例１で得た培養物に脱粉
を固形分が３５％となるまで添加し、７５℃達温殺菌
後、ドライヤーで噴霧乾燥する。噴霧乾燥条件は液温５
０℃、送風温度１３０℃、排風温度９０℃、噴霧圧力５
０Ｋｇ／ｃｍ2とする。得られた粉末状培養液加工物は
脱酸素剤を入れたビニール袋に充填し、室温保存する。
を固形分が３５％となるまで添加し、７５℃達温殺菌
後、ドライヤーで噴霧乾燥する。噴霧乾燥条件は液温５
０℃、送風温度１３０℃、排風温度９０℃、噴霧圧力５
０Ｋｇ／ｃｍ2とする。得られた粉末状培養液加工物は
脱酸素剤を入れたビニール袋に充填し、室温保存する。
【００２８】（実施例３）ｐＨ７、５０℃に調整した１
０％ＷＰＣ−８０還元液６．７５Ｋｇにプロテアーゼ
（アマノＡ）を３０６ｇ添加し、４時間分解させた後に
８５℃で加熱して酵素を失活させる。一方、ｐＨ５、５
５℃に調整した５．１６％乳清ミネラル８．２５Ｋｇに
ラクターゼ（スミラクトＬ）を１２４ｇ添加し、５時間
以上分解させた後に８５℃で加熱して酵素を失活させ
る。両者を混合し、酵母エキス１５ｇを加え、ｐＨ６．
７に調整後、滅菌し、プロピオン酸菌（Propionibacter
ium freudenreichii IFO 12424）スターターを９×１０
7cfu/mlとなるよう接種する。ｐＨが６．０以下に下が
らぬよう８Ｎ炭酸カリウムを適宜加えながら、３５℃、
７２時間攪拌を続ける。途中、培養４８時間目において
グルコース１５０ｇを無菌添加することにより、６６．
９U/mlの比ビフィズス菌増殖促進活性を有する培養物が
得られる。
０％ＷＰＣ−８０還元液６．７５Ｋｇにプロテアーゼ
（アマノＡ）を３０６ｇ添加し、４時間分解させた後に
８５℃で加熱して酵素を失活させる。一方、ｐＨ５、５
５℃に調整した５．１６％乳清ミネラル８．２５Ｋｇに
ラクターゼ（スミラクトＬ）を１２４ｇ添加し、５時間
以上分解させた後に８５℃で加熱して酵素を失活させ
る。両者を混合し、酵母エキス１５ｇを加え、ｐＨ６．
７に調整後、滅菌し、プロピオン酸菌（Propionibacter
ium freudenreichii IFO 12424）スターターを９×１０
7cfu/mlとなるよう接種する。ｐＨが６．０以下に下が
らぬよう８Ｎ炭酸カリウムを適宜加えながら、３５℃、
７２時間攪拌を続ける。途中、培養４８時間目において
グルコース１５０ｇを無菌添加することにより、６６．
９U/mlの比ビフィズス菌増殖促進活性を有する培養物が
得られる。
【００２９】（実施例４）実施例３で得た培養物に乳酸
を加えてｐＨ４に調整し、アスコルビン酸ナトリウムを
添加して加熱滅菌する。得られた液状培養物加工物は耐
凍容器に充填し、−８０℃で凍結保存する。
を加えてｐＨ４に調整し、アスコルビン酸ナトリウムを
添加して加熱滅菌する。得られた液状培養物加工物は耐
凍容器に充填し、−８０℃で凍結保存する。
【００３０】
【発明の効果】本発明によれば、従来よりも比ビフィズ
ス菌増殖促進活性が高く、且つそのまま食せるよう、乳
原料を主成分とした培地を用いて高濃度に培養した培養
物を得、さらにはこれを機能性原料として取り扱いの容
易な形態に処理した加工物を得ることができる。
ス菌増殖促進活性が高く、且つそのまま食せるよう、乳
原料を主成分とした培地を用いて高濃度に培養した培養
物を得、さらにはこれを機能性原料として取り扱いの容
易な形態に処理した加工物を得ることができる。
【図１】種々の乳原料を培地に添加した場合のＢＧＳ活
性量の相違を示す。
性量の相違を示す。
フロントページの続き (72)発明者 金子 勉 東京都東村山市栄町１−21−３ 明治乳 業株式会社 中央研究所内 (56)参考文献 特開 平５−41995（ＪＰ，Ａ) Ｊ．ｏｆ Ｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎ ａｎｄ Ｂｉｏｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎ ｇ，1992，ｖｏｌ．74，Ｎｏ．２，ｐ. 95−99 (58)調査した分野(Int.Cl.7，ＤＢ名) C12N 1/00 - 7/08 A23C 1/00 - 23/00 A23L 1/30 ＢＩＯＳＩＳ（ＤＩＡＬＯＧ) ＷＰＩ（ＤＩＡＬＯＧ)
Claims (10)
- 【請求項１】 ホエイ粉のプロテアーゼ処理物を主成分
とする培地又はホエイ蛋白質濃縮物のプロテアーゼ処理
物及び乳清ミネラルのラクターゼ処理物を主成分とする
培地を使用すること、を特徴とする比ビフィズス菌増殖
促進活性が高くそのまま培養物を経口摂取することによ
ってビフィズス菌増殖促進効果を実現することのできる
プロピオン酸菌の高濃度培養方法。 - 【請求項２】 培地中の蛋白質含有率が１〜５％、好適
には１．５〜４．０％、糖質含有量が１〜４％、好適に
は１．５〜３．０％であること、を特徴とする請求項１
に記載の方法。 - 【請求項３】 培養時の添加物として、酵母エキス、硫
酸ナトリウム、アスパラギン、グルコース、炭酸カリウ
ムの少なくともひとつを使用すること、を特徴とする請
求項１〜２のいずれか１項に記載の方法。 - 【請求項４】 培養期間中のｐＨが５〜８、好適には
５．５〜７．５、温度が１７〜４２℃、好適には２０〜
４０℃であること、を特徴とする請求項１〜３のいずれ
か１項に記載の方法。 - 【請求項５】 プロピオン酸菌として、チーズ用プロピ
オン酸菌を使用すること、を特徴とする請求項１〜４の
いずれか１項に記載の方法。 - 【請求項６】 プロピオン酸菌としてPropionibacteriu
m freudenreichiiを使用すること、を特徴とする請求項
５記載の方法。 - 【請求項７】 請求項１〜６のいずれか１項に記載の方
法で製造してなる比ビフィズス菌増殖促進活性の高いプ
ロピオン酸菌高濃度培養物。 - 【請求項８】 請求項７に記載の培養物に必要に応じて
アスコルビン酸ナトリウムを添加して加工すること、を
特徴とするプロピオン酸菌高濃度培養物の加工物。 - 【請求項９】 脱脂粉乳、ホエイ粉、ホエイ蛋白質濃縮
物、ホエイ蛋白質分離物、生澱粉、化工澱粉、デキスト
リンの少なくともひとつからなる賦形剤を用い、乾燥処
理してなること、を特徴とする請求項８に記載の粉末状
加工物。 - 【請求項１０】 乳酸をｐＨ調整剤として用い、滅菌処
理してなること、を特徴とする請求項８に記載のプロピ
オン酸菌高濃度培養物の液状加工物。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP9132968A JP3017456B2 (ja) | 1997-05-08 | 1997-05-08 | プロピオン酸菌の高濃度培養方法及び培養物ならびにその加工物 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP9132968A JP3017456B2 (ja) | 1997-05-08 | 1997-05-08 | プロピオン酸菌の高濃度培養方法及び培養物ならびにその加工物 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH10304871A JPH10304871A (ja) | 1998-11-17 |
| JP3017456B2 true JP3017456B2 (ja) | 2000-03-06 |
Family
ID=15093718
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP9132968A Expired - Lifetime JP3017456B2 (ja) | 1997-05-08 | 1997-05-08 | プロピオン酸菌の高濃度培養方法及び培養物ならびにその加工物 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP3017456B2 (ja) |
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| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP1607383A4 (en) * | 2003-03-26 | 2006-09-27 | Meiji Dairies Corp | PROC D TO STABILIZE 1,4-DIHYDROXY-2-NAPHTHIC ACID |
| EP2463376B1 (en) | 2003-10-01 | 2019-08-28 | Meiji Co., Ltd. | Food and beverages for treating metabolic osteopathy |
| JP2005124432A (ja) * | 2003-10-22 | 2005-05-19 | Shuichi Shiomi | 健康食品 |
| JP4073922B2 (ja) * | 2005-03-18 | 2008-04-09 | 明治飼糧株式会社 | ビフィズス菌増殖促進成分を含有する飼料組成物とその使用方法 |
| KR100963862B1 (ko) | 2007-11-07 | 2010-06-16 | 건국대학교 산학협력단 | 농축유청단백질을 이용한 바실러스 폴리퍼멘티쿠스 ｓｃｄ배양 배지 조성물 |
| CN102488716B (zh) * | 2008-02-29 | 2013-09-11 | 株式会社明治 | 丙酸杆菌发酵物在制造皮肤粗糙预防、改善剂中的应用 |
| EP2648530B2 (en) * | 2010-12-07 | 2023-04-19 | Purac Biochem B.V. | Fruit ferments containing propionate and use thereof |
| EP2942397A1 (en) * | 2014-05-09 | 2015-11-11 | Acies Bio d.o.o. | Co-cultivation of propionibacterium and yeast |
| JP6789931B2 (ja) * | 2015-05-18 | 2020-11-25 | 合同酒精株式会社 | 発酵乳の製造方法 |
| JP7107835B2 (ja) * | 2016-03-24 | 2022-07-27 | 株式会社明治 | 口腔内環境改善用組成物 |
-
1997
- 1997-05-08 JP JP9132968A patent/JP3017456B2/ja not_active Expired - Lifetime
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| Ｊ．ｏｆ Ｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎ ａｎｄ Ｂｉｏｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，１９９２，ｖｏｌ．７４，Ｎｏ．２，ｐ．９５−９９ |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPH10304871A (ja) | 1998-11-17 |
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