JP6742773B2 - 検査キット及び検査方法 - Google Patents

Description

本発明は、尿における標的物質の有無を検査するための検査キット、及び当該検査キットを用いて、結核菌の抗原に対する抗体が尿に含まれるか否か検査する方法に関する。

ＷＨＯの統計によれば、２０１４年において、全世界で約９６０万人が結核に感染しており、感染者の大部分が、アフリカやアジアにおける発展途上国で発生している。現在、日本等の先進国では、活動性結核の診断方法として血清を用いる方法（以下、血清診断法）が普及しているが、血清診断法は、高度の培養技術や高価なコストを要する。また発展途上国の中には、不衛生な注射器の使用が社会問題となっている国があり、このような国では注射器を用いて血液を採取することにリスクがある。以上のことから、発展途上国では、先進国のように、血清診断法が普及していない。

そこで本願発明者らは、発展途上国で実施可能な活動性結核の診断方法を確立すべく鋭意研究を行っており、この研究過程において、活動性結核の感染者では、結核菌が産生するＭＰＢ６４抗原に対する特異ＩｇＧ抗体が、血液だけでなく、尿にも含まれることを明らかにした。尿は注射器を要せず採取できるので、尿における特異ＩｇＧ抗体の有無を簡便で高感度に検査可能な検査キットを実現できれば、注射器の使用にリスクのある発展途上国でも正確な活動性結核診断が期待でき、結核の感染拡大を抑制する一助になると考えられる。

ここで例えば特許文献１には、イムノクロマト法により、尿などの生体試料中の抗体（検体）の有無を検査可能な検査キットが提案されている。特許文献１の検査キットは、試料添加用部材と、膜担体と、含浸部材とを備える。膜担体には、二次抗体（第一の物質）が固定された捕捉部位が形成される。含浸部材には、呈色標識物質で標識された抗原（第二の物質）が含浸される。生体試料は、試料添加用部材上に注入された後、含浸部材に至り、抗原（第二の物質）と混合する。この際、生体試料中に抗体（検体）が存在すれば、抗原抗体反応により抗体（検体）と抗原（第二の物質）との複合体が形成される。この複合体を含む生体試料は、毛細管現象により、膜担体中をクロマト展開されて捕捉部位に到達し、そこに固定された二次抗体（第一の物質）と反応して捕捉されて、捕捉部位に呈色標識物質が集積する。この集積による発色から、生体試料中に抗体（検体）が含まれることが検出される。

特許文献１に開示されるようなイムノクロマト法は、生体試料中の検体の濃度が低い場合には、膜担体でクロマト展開される生体試料中の複合体が微量となることで、検体を高感度に検出できない問題が生じ得る。上述した尿中の特異ＩｇＧ抗体の濃度は非常に低いため（血液中の特異ＩｇＧ抗体の濃度の１／２０００〜１／１０００程度）、尿中の特異ＩｇＧ抗体の有無を検査するのにイムノクロマト法は適していない。

特開２００３−３４４４０６号公報

本発明は、上記事項に鑑みてなされたものであって、その目的は、尿に標的物質が含まれていることを高感度に検出可能であり、検査を容易に行うことの可能な検査キット及びこれを用いる検査方法を提供することである。

上記目的を達成するため、本発明は、次の項に記載の主題を包含する。

項１．尿における標的物質の有無を検査するための検査キットであって、
一端に開口が形成される筒状を呈し、前記開口を通じて尿などの液体が内部に投入される管体と、
前記管体の一端に着脱自在に取り付けられる蓋体とを備え、
前記蓋体は、前記標的物質と反応する反応物質が表面に固定された膜体を保持可能であり、
前記管体の一端に前記蓋体を取り付けることに伴い、前記膜体が前記管体内の液体に浸漬され、
前記管体の一端から前記蓋体を取り外すことに伴い、前記膜体が前記管体内から引き出される検査キット。

項２．前記蓋体は、前記管体の開口よりも大きな断面を有する頭部と、前記管体の開口から前記管体内に挿入可能な挿入部とを備え、
前記挿入部は、前記頭部から延びる柱状体であり、前記管体の開口に対応する断面を有しており、
前記挿入部の先端に形成されたスリットに前記膜体の一端が挟み込まれることで、前記膜体が前記挿入部に保持され、
前記管体の一端への前記蓋体の取り付けが、前記挿入部に保持させた前記膜体や、前記挿入部を、順次、前記管体の開口から前記管体内に挿入するように行われることで、前記スリットから延び出た前記膜体の範囲が前記管体内の液体に浸漬され、
前記管体の一端からの前記蓋体の取り外しが、前記管体内から前記挿入部を引き出すように行われることで、前記挿入部に保持された前記膜体も前記管体内から引き出される項１に記載の検査キット。

項３．前記蓋体は、前記管体の開口よりも大きな断面を有する頭部と、前記管体の開口から前記管体内に挿入可能な挿入部とを備え、
前記挿入部は、前記頭部から延びる支持板と、前記支持板の表面から突出する一対の第１突出片とを備え、
前記一対の第１突出片は、前記支持板の幅方向に間隔をあけて形成されており、
前記反応物質が固定された前記膜体の表面を上側に向けた状態で、前記膜体が前記一対の第１突出片に挟み込まれるように前記支持板の表面に載置されることで、前記膜体が前記挿入部に保持され、
前記管体の一端への前記蓋体の取り付けが、前記挿入部を前記管体の開口から前記管体内に挿入するように行われることで、前記挿入部に保持された前記膜体も前記管体内に挿入されて、前記一対の第１突出片の間から露出する前記膜体の表面が前記管体内の尿に浸漬され、
前記管体の一端からの前記蓋体の取り外しが、前記管体内から前記挿入部を引き出すように行われることで、前記挿入部に保持された前記膜体も前記管体内から引き出される項１に記載の検査キット。

項４．前記一対の突出片の横断面は、前記支持板の表面に対して垂直に延びた後、前記支持板の幅方向内側に屈曲する形状を呈する項３に記載の検査キット。

項５．前記一対の第１突出片は、前記支持板の全長に亘って延びており、
前記蓋体が前記管体の一端に取り付けられた状態では、前記支持板や前記一対の第１突出片は、前記管体の他端に当接する項３又は４に記載の検査キット。

項６．前記挿入部は、前記支持板の長手方向先端側において前記支持板の表面から突出する第２突出片をさらに備え、
前記第２突出片は、前記支持板の幅方向に延びるものであり、前記支持板の先端から視て前記一対の第１突出片の間に位置する項３乃至５のいずれかに記載の検査キット。

項７．前記蓋体は、前記管体の開口よりも大きな断面を有する頭部と、前記管体の開口から前記管体の内部に挿入可能な挿入部とを備え、
前記挿入部は、前記頭部から延びる支持板と、当該支持板の表面に載置可能な環状枠体とを備え、
前記反応物質が固定された前記膜体の表面を上側に向けた状態で、前記膜体を前記支持板の表面に載置した後、前記環状枠体を前記支持板の表面に載置することで、前記膜体が、前記支持板と前記環状枠体とで挟み込まれて、前記挿入部に保持された状態となり、
前記管体の一端への前記蓋体の取り付けが、前記挿入部を前記管体の開口から前記管体内に挿入するように行われることで、前記挿入部に保持された前記膜体も前記管体内に挿入されて、前記環状枠体の内側の開口から露出する前記膜体の表面が前記管体内の液体に浸漬され、
前記管体の一端からの前記蓋体の取り外しが、前記管体内から前記挿入部を引き出すように行われることで、前記挿入部に保持された前記膜体も前記管体内から引き出される項１に記載の検査キット。

項８．前記頭部は、前記管体側に配置される第１端面と、前記第１端面の反対側にある第２端面とを有し、
前記蓋体が前記管体の一端に取り付けられた状態では、前記第２端面が、前記管体の長手方向に対して垂直に広がることで、前記頭部を土台として前記管体を立設させることが可能である項１乃至７のいずれかに記載の検査キット。

項９．前記挿入部の外面や前記管体の内面には、前記標的物質が付着することを防止するコーティング材が塗布される項２乃至８のいずれかに記載の検査キット。

項１０．前記管体の他端に着脱自在に取り付けられるブロックをさらに備え、
前記ブロックは、前記管体側に配置される第３端面と、前記第３端面の反対側にある第４端面とを有し、
前記第３端面に形成される凹部に前記管体の他端が挿入されることで、前記ブロックが前記管体の他端に取り付けられ、
前記ブロックが前記管体の他端に取り付けられた状態では、前記第４端面が前記管体の長手方向に対して垂直に広がることで、前記ブロックを土台として前記管体を立設させることが可能である項１乃至９のいずれかに記載の検査キット。

項１１．前記標的物質は、結核菌の抗原に対する抗体であり、
前記膜体の表面には、前記反応物質としての前記抗原が固定される項１乃至１０のいずれかに記載の検査キット。

項１２．前記膜体の表面には、前記結核菌の抗原に対する抗体がさらに固定される項１１に記載の検査キット。

項１３．項１１又は１２に記載の検査キットを用いて、結核菌の抗原に対する抗体が尿に含まれるか否かを検査する方法であって、
尿を前記管体内に投入する第１工程と、
前記蓋体の取り付け作業により、前記膜体を前記管体内の尿に浸漬させる第２工程と、
前記蓋体の取り外し作業により、前記膜体を前記管体内から引き出す第３工程と、
前記管内の尿を排出して、洗浄液を前記管体内に投入する第４工程と、
前記蓋体の取り付け作業により、前記膜体を前記管体内の洗浄液に浸漬させて、前記膜体に付着している未反応の前記抗体を洗い流す第５工程と、
前記蓋体の取り外し作業により、前記膜体を前記管体内から引き出す第６工程と、
前記管内の洗浄液を排出して、前記抗体に対する二次抗体であって酵素で標識された二次抗体を含む二次抗体液を前記管体内に投入する第７工程と、
前記蓋体の取り付け作業により、前記膜体を前記管体内の二次抗体液に浸漬させる第８工程と、
前記蓋体の取り外し作業により、前記膜体を前記管体内から引き出す第９工程と、
前記管内の二次抗体液を排出して、洗浄液を前記管体内に投入する第１０工程と、
前記蓋体の取り付け作業により、前記膜体を前記管体内の洗浄液に浸漬させて、前記膜体に付着している未反応の二次抗体を洗い流す第１１工程と、
前記蓋体の取り外し作業により、前記膜体を前記管体内から引き出す第１２工程と、
前記管内の洗浄液を排出して、前記酵素との反応で発色する発色基質を含有する発色液を前記管体内に投入する第１３工程と、
前記蓋体の取り付け作業により、前記膜体を前記管体内の発色液に浸漬させる第１４工程と、を有する検査方法。

項１４．前記第１工程では、１０ｃｃ以上の尿が前記管体内に投入される項１３に記載の検査方法。

本発明の検査キットによれば、膜体が管体内の尿などの液体に浸漬されることで、膜体の単位面積当たりに染み込む液体の量を多くすることができる。したがって、尿に含まれる標的物質が微量であったとしても、尿中の標的物質と、膜体に固定される反応物質とを確実に反応させることができる。このため、尿に標的物質が含まれていることを高感度に検出できる。

また本発明の検査キットによれば、蓋体を管体の一端に着脱することに伴い、膜体を管体内に挿入され、また、管体内の膜体が引き出される。このため、蓋体３の着脱作業と、ニトロセルロース膜Ｎの挿入・取り出し作業とを個別に行う必要がない。したがって、検査を容易に行うことができる。

本発明の検査方法によれば、結核菌の抗原に対する抗体が尿に含まれる場合には、抗原が固定された膜体の位置において、不溶性の色素が生じて、当該色素の沈着による発色から、尿に抗体が含まれていることが検出される。

本発明の第１実施形態に係る検査キットを示す斜視図である。 第１実施形態に係る検査キットを分解した状態を示す斜視図である。 蓋体を管体の一端に取り付ける作業を示す斜視図である。 頭部を土台として管体を立設させた状態を示す斜視図である。 蓋体を管体の一端から取り外す作業を示す斜視図である。 尿における特異ＩｇＧ抗体の有無を検査する工程を示すフロチャートである。 本発明の第２実施形態に係る検査キットを示す斜視図である。 第２実施形態に係る検査キットを分解した状態を示す斜視図である。 蓋体を管体の一端に取り付ける作業を示す斜視図である。 頭部を土台として管体を立設させた状態を示す斜視図である。 蓋体を管体の一端から取り外す作業を示す斜視図である。 第２実施形態の変形例に係る検査キットを示す斜視図である。 第２実施形態の変形例に係る検査キットを示す斜視図である。 本発明の第３実施形態に係る検査キットを示す斜視図である。 第３実施形態に係る検査キットを分解した状態を示す斜視図である。 ニトロセルロース膜を挿入部に保持させる作業を示す斜視図である。 蓋体を管体の一端に取り付ける作業を示す斜視図である。 頭部を土台として管体を立設させた状態を示す斜視図である。 蓋体を管体の一端から取り外す作業を示す斜視図である。 第２実施形態の検査キットにブロックが設けられた状態を示す斜視図である。

（第１実施形態）
以下、本発明の第１実施形態について添付図面を参照しながら説明する。図１は、第１実施形態に係る検査キット１を示す斜視図である。図２は、検査キット１を分解した状態を示す斜視図である。

第１実施形態に係る検査キット１は、被験者から採取された尿に、結核菌の抗原に対する抗体（標的物質）が含まれるか否か検査するために使用される。例えば、上記結核菌の抗原は、結核菌が特異的に産生し、菌体外へ分泌するＭＰＢ６４抗原であり、標的物質とされる上記抗体は、ＭＰＢ６４抗原に対する特異ＩｇＧ抗体である。

検査キット１は、管体２と、管体２の一端に着脱自在に取り付けられる蓋体３とを備える。

管体２は、一端に開口４が形成される円筒状を呈しており、１０ｃｃ以上の容積を有する。上記の検査が実施される際には、尿などの液体Ｌが、開口４を通じて管体２内に投入される。管体２は、透明或いは半透明のプラスチックやガラスから形成される。軽量性及び割れにくさの点から管体２はプラスチックから形成されることが好ましい。

蓋体３は、ゴム或いは可撓性プラスチックから形成されるものであり、頭部５と挿入部６とを備える。頭部５は、管体２の開口４よりも大きな円板状を呈しており、管体２側に配置される平坦な端面７と、その反対側にある平坦な端面８とを有する。

挿入部６は、頭部５の端面７から延びる柱状体である。挿入部６は、その横断面が管体２の開口４に対応する円形を呈することで、開口４から管体２内に挿入可能である。挿入部６の先端には、スリット９が形成される。スリット９は、挿入部６の径方向に直線状に延びており、ニトロセルロース膜Ｎ（膜体）の一端を挟み込むために使用される。なお挿入部６の形状は、管体２の形状に応じて適宜変更され得る。例えば、管体２が断面矩形の筒状とされる場合には、挿入部６は、管体２の開口４に対応する矩形断面を有するものとされる。そして挿入部６の先端には幅方向に延びるスリット９が形成され、このスリット９がニトロセルロース膜Ｎの一端を挟み込むために使用される。

ニトロセルロース膜Ｎは、径が０．４５μｍ程度の孔を無数に有する多孔質構造の薄膜である。ニトロセルロース膜Ｎの幅は、管体２の径と同等或いはそれ以下とされる。ニトロセルロース膜Ｎの長さは、管体２の長さと同等或いはそれ以下とされる。ニトロセルロース膜Ｎの表面には、結核菌の抗原Ｋや、コントロール物質Ｃが固定される。

抗原Ｋは、例えば上述したＭＰＢ６４抗原であり、ライン状或いはドット状にニトロセルロース膜Ｎに固定される。抗原Ｋの量を少なく抑えるために、抗原Ｋは、図示の例のようにライン状に固定されることが好ましい。

コントロール物質Ｃは、抗原Ｋに対する抗体（標的物質とされる抗体）であり、後述の二次抗体液や発色液が管体２内に適切に投入されたか否か確認すべく、ニトロセルロース膜Ｎに固定される。ニトロセルロース膜Ｎに固定される抗原ＫがＭＰＢ６４抗原である場合には、ＭＰＢ６４抗原に対する特異ＩｇＧ抗体が、コントロール物質Ｃとしてニトロセルロース膜Ｎに固定される。コントロール物質Ｃの固定位置は、抗原Ｋの固定位置から、ニトロセルロース膜Ｎの長手方向に離れた位置とされる。ニトロセルロース膜Ｎには、抗原Ｋやコントロール物質Ｃの固定位置を特定するためのマーカー（図示せず）が付される。なおマーカーは管体２に形成されてもよい。

抗原Ｋやコントロール物質Ｃを固定するニトロセルロース膜の範囲は特に限定されないが、本実施形態では、管体２内に投入される液体Ｌの量が管体２の容積よりも少ない事態を想定して、ニトロセルロース膜Ｎの長手方向の一端側に抗原Ｋやコントロール物質Ｃが固定されている。

蓋体３を管体２の一端に取り付ける際には、まず図３（ａ）に示すように、ニトロセルロース膜Ｎの一端をスリット９に挟み込むことで、ニトロセルロース膜Ｎが蓋体３の挿入部６に保持された状態とする。ついで図３（ｂ）や図３（ｃ）に示すように、挿入部６に保持させたニトロセルロース膜Ｎや、挿入部６を、管体２の開口４から管体２内に順次挿入する。以上の作業により、蓋体３が管体２の一端に取り付けられる。尿などの液体Ｌが管体２内に投入されている場合には、スリット９から延び出たニトロセルロース膜Ｎの範囲が管体２内の液体Ｌに浸漬される。

図３（ｃ）に示すように蓋体３が管体２の一端に取り付けられた状態では、挿入部６の外面が管体２の内面に密着することで蓋体３が固定される。また挿入部６が開口４を密閉することで、管体２内の液体Ｌが漏出しない。さらに管体２の内面が挿入部６を内向きに押圧してスリット９の幅が狭まることで、ニトロセルロース膜Ｎの一端が締め付けられる。このためニトロセルロース膜Ｎが挿入部６に保持された状態が安定して維持される（ニトロセルロース膜Ｎの一端がスリット９に挟み込まれた状態が安定して維持される）。

またさらに図３（ｃ）に示すように蓋体３が管体２の一端に取り付けられた状態では、蓋体３の端面８が、管体２の長手方向に対して垂直に広がる。このため図４に示すように、頭部５を土台として管体２を立設させることができる。そしてこのように管体２を立設させれば、図示例のように管体２内の液体Ｌの量が管体２の容積よりも少ない場合でも、液体Ｌが管体２の一端側に貯留するので、抗原Ｋやコントロール物質Ｃが固定されるニトロセルロース膜Ｎの一端側を、管体２内の液体Ｌに浸漬させることができる。

管体２の一端からの蓋体３の取り外しは、図５（ａ）や図５（ｂ）に示すように、管体２内から挿入部６を引き出すように行われ、これに伴い、挿入部６に保持されたニトロセルロース膜Ｎも管体２内から引き出される。図５（ｂ）に示すように蓋体３が管体２から取り外された後では、尿などの液体Ｌを、管体２の開口４を通じて、管体２内に投入したり、管体２内から排出することができる。

第１実施形態では、標的物質の抗体が尿に含まれるか否か検査するために、尿や二次抗体液や発色液等の液体Ｌを管体２内に順次投入することが行われる。二次抗体液は、抗体に対する二次抗体が希釈された溶液であり、二次抗体は酵素（蛍光色素）で標識されている。酵素は、例えばペルオキシダーゼやアルカリホスファターゼである。発色液は、酵素との反応で発色する酵素基質を含有する水溶性の溶液である。

そして尿や二次抗体液や発色液が管体２内に投入されるたびに、図３に示す蓋体３の取り付け作業が行われることで、挿入部６に保持されたニトロセルロース膜Ｎが、管体２内の尿や二次抗体液や発色液に順次浸漬される。尿に抗体が含まれる場合には、抗原Ｋが固定されたニトロセルロース膜Ｎの位置（以下、抗原Ｋの固定位置）において、以下の（１）〜（３）の反応から不溶性の色素が生じて、当該色素の沈着による発色から、尿に抗体が含まれていることが検出される。

（１）ニトロセルロース膜Ｎに固定された抗原Ｋに、尿中の抗体が結合することで、抗原Ｋと抗体とを含む複合体（以下、抗原・抗体複合体）が形成される。
（２）抗原・抗体複合体を構成する抗体に、酵素で標識された二次抗体が結合することで、抗体と抗原Ｋと二次抗体とを含む複合体（以下、抗原・抗体・二次抗体複合体）が形成される。
（３）抗原・抗体・二次抗体複合体を構成する二次抗体に付された酵素と、発色液の酵素基質とが反応することで、不溶性（油性）の色素が生成されて、当該色素が抗原・抗体・二次抗体複合体の存在する位置（抗原Ｋの固定位置）に沈着することによる発色が生じる。

また、ニトロセルロース膜Ｎが管体２内の二次抗体液や発色液に浸漬される際には、コントロール物質Ｃが固定されたニトロセルロース膜Ｎの位置（以下、コントロール物質Ｃの固定位置）において、以下の（４），（５）の反応から不溶性の色素が生じて、当該色素の沈着による発色が生じる。

（４）コントロール物質Ｃに、酵素で標識された二次抗体が結合することで、コントロール物質Ｃと二次抗体とを含む複合体（以下、抗体・二次抗体複合体）が形成される。
（５）抗体・二次抗体複合体を構成する二次抗体に付された酵素と、発色液の酵素基質とが反応することで、不溶性（油性）の色素が生成されて、当該色素が抗体・二次抗体複合体の存在する位置（コントロール物質Ｃの固定位置）に沈着することによる発色が生じる。

図６は、尿における抗体の有無を検査する工程を示すフロチャートである。上記の（１）〜（５）の反応は、図６の工程が実施されることで生じるものである。以下、図６の工程について説明する。

まず、蓋体３が管体２から取り外された状態で、被験者から採取した尿を管体２内に投入する（ステップＳ１０１）。

ついで図３に示す蓋体３の取り付け作業により、ニトロセルロース膜Ｎや挿入部６を管体２内に挿入して、ニトロセルロース膜Ｎを管体２内の尿に浸漬させる（ステップＳ１０２）。

ニトロセルロース膜Ｎを尿に浸漬させる時間は、１時間程度に設定される。尿に抗体（標的物質）が含まれる場合には、抗原Ｋの固定位置で（１）の反応が生じて、抗原・抗体複合体が形成される。なお（１）の反応を確実に生じさせるために、先のステップＳ１０１では、１０ｃｃ以上の尿を管体２内に投入することが好ましい。

なお本実施形態では、ニトロセルロース膜Ｎの一端側に抗原Ｋが固定されているため、ステップＳ１０２において、図４に示すように頭部５を土台として管体２を立設させて、管体２の一端側に尿を貯留させることが行われる。これによりニトロセルロー膜Ｎの一端側において、尿中の抗体が抗原Ｋと接触して（１）の反応が生じ、抗原・抗体複合体が形成される。

ついで図５に示す蓋体３の取り外し作業により、挿入部６やニトロセルロース膜Ｎを管体２内から引き出す（ステップＳ１０３）。

ついで、管体２内の尿を排出して、洗浄液を管体２内に投入する（ステップＳ１０４）。

ついで図３に示す蓋体３の取り付け作業により、ニトロセルロース膜Ｎや挿入部６を管体２内に挿入し、ニトロセルロース膜Ｎを管体２内の洗浄液に浸漬させる（ステップＳ１０５）。これにより、ニトロセルロース膜Ｎに付着している未反応の抗体（抗原Ｋと反応しなかった抗体）が、洗い流される。

ついで図５に示す蓋体３の取り外し作業により、挿入部６やニトロセルロース膜Ｎを管体２内から引き出す（ステップＳ１０６）。

ついで、管体２内の洗浄液を排出して、二次抗体液を管体２内に投入する（ステップＳ１０７）。

ついで図３に示す蓋体３の取り付け作業により、ニトロセルロース膜Ｎや挿入部６を管体２内に挿入し、ニトロセルロース膜Ｎを管体２内の二次抗体液に浸漬させる（ステップＳ１０８）。

ニトロセルロース膜Ｎを二次抗体液に浸漬させる時間は、１時間程度に設定される。尿に抗体（標的物質）が含まれていた場合には、抗原Ｋの固定位置で、抗原・抗体複合体が形成されているため、上記（２）の反応が生じて抗原・抗体・二次抗体複合体が形成される。またコントロール物質Ｃの固定位置では、上記（４）の反応が生じて、抗体・二次抗体複合体が形成される。

またステップＳ１０８においても、ステップＳ１０２と同様、図４に示すように頭部５を土台として管体２を立設させて、管体２の一端側に二次抗体液を貯留させることが行われる。これにより、ニトロセルロー膜Ｎの一端側に形成・固定されている抗原・抗体複合体やコントロール物質Ｃに、二次抗体が接触して、（２），（４）の反応が生じ、抗原・抗体・二次抗体複合体や抗体・二次抗体複合体が形成される。

ついで図５に示す蓋体３の取り外し作業により、挿入部６やニトロセルロース膜Ｎを管体２内から引き出す（ステップＳ１０９）。

ついで、管体２内の二次抗体液を排出して、洗浄液を管体２内に投入する（ステップＳ１１０）。

ついで図３に示す蓋体３の取り付け作業により、蓋体３を管体２の一端に取り付けて、ニトロセルロース膜Ｎや挿入部６を管体２内に挿入して、ニトロセルロース膜Ｎを洗浄液に浸漬させる（ステップＳ１１１）。これにより、ニトロセルロース膜Ｎに付着している未反応の二次抗体（抗原・抗体複合体やコントロール物質Ｃに結合しなかった二次抗体）が、洗い流される。

ついで図５に示す蓋体３の取り外し作業により、挿入部６やニトロセルロース膜Ｎを管体２内から引き出す（ステップＳ１１２）。

ついで、管体２内の洗浄液を排出して、発色液を管体２内に投入する（ステップＳ１１３）。

ついで図３に示す蓋体３の取り付け作業により、ニトロセルロース膜Ｎや挿入部６を管体２内に挿入して、ニトロセルロース膜Ｎを発色液に浸漬させる（ステップＳ１１４）。

ニトロセルロース膜Ｎを発色液に浸漬させる時間は、１０分間から１５分間程度に設定される。尿に抗体（標的物質）が含まれていた場合には、抗原Ｋの固定位置で、抗原・抗体・二次抗体複合体が形成されているため、上記（３）の反応による発色が生じる。またコントロール物質Ｃの固定位置では、抗体・二次抗体複合体が形成されていることから、上記（５）の反応による発色が生じる。

またステップＳ１１４においても、ステップＳ１０２，Ｓ１０８と同様、図４に示すように頭部５を土台として管体２を立設させて、管体２の一端側に発色液を貯留させることが行われる。これにより、ニトロセルロー膜Ｎの一端側に形成・固定されている抗原・抗体・二次抗体複合体や抗体・二次抗体複合体に発色液が接触するので、上記（３），（５）の反応による発色が生じる。

上述した第１実施形態の検査キット１は、高度な技術や高価なコストを要せず、容易且つ高感度に、尿に抗体が含まれることを検出可能なので、発展途上国における活動性結核の診断ツールとして好適に使用できるものである。

すなわち第１実施形態の検査キット１によれば、ニトロセルロース膜Ｎが管体２内の尿等の液体Ｌに浸漬されることで、ニトロセルロース膜Ｎの単位面積当たりに染み込む液体Ｌの量を多くすることができる。このため、尿などの液体Ｌに含まれる物質（抗体、二次抗体、酵素基質など）が微量であったとしても、当該液体Ｌ中の物質と、ニトロセルロース膜Ｎに形成・固定される物質（抗原Ｋ、抗原・抗体複合体、抗原・抗体・二次抗体複合体、コントロール物質Ｃ、抗体・二次抗体複合体など）とを確実に反応させることができる。したがって、尿に抗体（標的物質）が含まれていることを高感度に検出できる。

またコントロール物質Ｃがニトロセルロース膜Ｎに固定されていることで、管体２内に二次抗体液や発色液が投入されたか否か確認できる。すなわち、適切に二次抗体液や発色液が管体２内に投入されていた場合には、コントロール物質Ｃの固定位置で（４），（５）の反応による発色が生じる。これに対し、二次抗体液や発色液が管体２内に投入されなかった場合には、コントロール物質Ｃの固定位置で（４），（５）の反応による発色が生じない。したがって、コントロール物質Ｃの固定位置における発色の有無から、管体２内に二次抗体液や発色液が投入されたか否か確認できる。そしてこのことから、管体２への二次抗体液や発色液の投入が看過された場合に、検査のやり直しが促されて、抗原Ｋの固定位置で（１）〜（３）の反応による発色が生じないことで、尿に抗体（標的物質）が含まれていないと結論付けられることを回避できる。

さらに第１実施形態の検査キット１によれば、蓋体３を管体２に取り付ける作業により、挿入部６に保持されたニトロセルロース膜Ｎが管体２内に挿入されて液体Ｌに浸漬される。また管体２から蓋体３を取り外す作業により、ニトロセルロース膜Ｎが管体２内から引き出される。したがって、蓋体３の着脱作業とニトロセルロース膜Ｎの挿入・取り出し作業とを個別に行う必要がない。また、ニトロセルロース膜Ｎが挿入部６に保持されることで、ニトロセルロース膜Ｎが管体２内から取り外し難くなる事態を回避できる。以上のことから、検査を容易に行うことができる。

また蓋体３へのニトロセルロース膜Ｎの取り付けや、蓋体３の着脱や、管体２に対する液体Ｌの投入・排出など、高度な技術を要しない作業によって、尿における抗体の有無を検査できる。

また管体２が尿・二次抗体液・洗浄液を貯留する容器として共用されるので、尿・二次抗体液・洗浄液毎に容器を準備する必要がない。したがって検査に要する手間やコストを軽減できる。

さらに頭部５を土台として管体２を立設できるので（図４）、手で管体２を持ったり、試験管立て等の立設手段を用いて管体２を立てることを要せず、管体２の一端側に液体Ｌを貯留させることができる。このため、手間を要せず、液体Ｌ中に含まれる物質（抗体、二次抗体、酵素基質など）と、ニトロセルロース膜Ｎの一端側に形成・固定される物質（抗原Ｋ、抗原・抗体複合体、抗原・抗体・二次抗体複合体、コントロール物質Ｃ、抗体・二次抗体複合体など）とを接触させて、上記（１）〜（５）の反応を生じさせることができる。したがって、上記立設手段を準備できないアフリカやアジア等のフィールドでも、検査を容易に行うことができる。また、ニトロセルロース膜Ｎの一端側に抗原Ｋやコントロール物質Ｃを固定しておけば、管体２内に投入される液体Ｌの量が管体２の容積よりも少ない場合でも、管体２を立設することで上記（１）〜（５）の反応を生じさせることができる。このため、ニトロセルロース膜Ｎの全体に万遍なく抗原Ｋやコントロール物質Ｃを固定したり、尿や二次抗体液や発色液で管体２内を満たすことを要しない。したがって、検査に使用する抗原Ｋ・コントロール物質Ｃ・尿・二次抗体液・発色液の量を少なく抑えることができるので、材料コストの軽減が図られる。

次に、本発明の第２実施形態や第３実施形態の検査キットについて説明する。第２及び第３実施形態の検査キットも、第１実施形態と同様、ニトロセルロース膜Ｎを用いて、結核菌の抗原に対する抗体（標的物質）が尿に含まれるか否か検査可能なものである。第２及び第３実施形態でも、抗原Ｋやコントロール物質Ｃがニトロセルロース膜Ｎの一端側の表面に固定されており、抗原Ｋやコントロール物質Ｃの固定位置を特定可能なマーカーがニトロセルロース膜Ｎや管体２に形成される。以下では、第１実施形態と相違する点を中心に説明し、第１実施形態と共通する点については図面に同一の符号を付して詳細な説明を省略する。

（第２実施形態）
図７は、第２実施形態に係る検査キット１０を示す斜視図である。図８は、検査キット１０を分解した状態を示す斜視図である。

第２実施形態の検査キット１０は、管体２と、管体２の一端に着脱自在に取り付けられる蓋体１１とを備えており、蓋体１１の構造が、第１実施形態の検査キットと異なる。

蓋体１１は、プラスチックやスチールから形成されるものであり、頭部１２と挿入部１３とを備える。

頭部１２は、管体２の開口４よりも大きな円板状を呈しており、管体２側に配置される平坦な端面１４と、その反対側にある平坦な端面１５とを有する。

頭部１２の端面１４には、管体２の一端を差し込み可能な環状凹部１６が形成される。環状凹部１６の内側面には、螺子溝（図示せず）が形成されており、この螺子溝と、管体２の一端の外側面に形成される螺子溝（図示せず）とを螺合させることができる。

挿入部１３は、頭部１２の端面１４における環状凹部１６の内側から延びるものであって、支持板１７と、一対の第１突出片１８，１８とを備える。

支持板１７は、矩形の板状を呈する。支持板１７の長さは、管体２の長さと同等とされる。支持板１７の幅は、管体２の内径と同等或いはそれ以下とされる。

第１突出片１８，１８は、支持板１７の表面から突出するものである。第１突出片１８，１８は、それぞれ支持板１７の長手方向の全長に亘って延びており、支持板１７の幅方向に間隔をあけて形成されている。

第２実施形態で使用されるニトロセルロース膜Ｎは、長さが支持板１７の長さと同等或いはそれ以下であり、幅が第１突出片１８，１８の間隔と同等とされる。ニトロセルロース膜Ｎは、抗原Ｋやコントロール物質Ｃが固定された表面が上側に向けられた状態で、第１突出片１８，１８に挟み込まれるよう支持板１７の表面に載置されることで、蓋体１１の挿入部１３に保持される。図示の例では、第１突出片１８，１８が支持板１７の幅方向両縁に形成されることで、支持板１７と同等の幅を有するニトロセルロース膜Ｎを、第１突出片１８，１８に挟み込ませることができる。

図７に示すようにニトロセルロース膜Ｎが第１突出片１８，１８に挟み込まれた状態（ニトロセルロース膜Ｎが挿入部１３に保持された状態）では、抗原Ｋやコントロール物質Ｃが固定されたニトロセルロースの表面が、第１突出片１８，１８の間から露出する。また、ニトロセルロース膜Ｎが支持板１７の幅方向に動くことが、第１突出片１８，１８によって規制される。

なお図示例のように、必ずしも第１突出片１８，１８を支持板１７の幅方向両縁に形成する必要はなく、第１突出片１８，１８の間隔は、支持板１７やニトロセルロース膜Ｎの幅に応じて適宜変更され得る。例えば、支持板１７よりも幅の小さなニトロセルロース膜Ｎが使用される場合には、第１突出片１８，１８の間隔も、支持板１７の幅より小さくされ得る。

また第１突出片１８，１８の各々の長さは、ニトロセルロース膜Ｎの挟み込みが可能な限りにおいて、支持板１７の長さよりも短くされてもよい。

また支持板１７の幅方向の一方側及び他方側にそれぞれ、複数の第１突出片１８を支持板１７の長手方向に間隔をあけて形成してもよい。例えば、支持板１７の幅方向の一方側及び他方側にそれぞれ、３つの第１突出片１８を支持板１７の長手方向の先端・中央・基端に形成すれば、支持板１７と同等の長さを有するニトロセルロース膜Ｎを、幅方向一方側の３つの第１突出片１８と、幅方向他方側の３つの第１突出片１８とで挟み込んで、動かないようにすることができる。

蓋体１１を管体２の一端に取り付ける際には、まず図９（ａ）に示すように、ニトロセルロース膜Ｎが挿入部１３に保持された状態で、挿入部１３を管体２内に挿入することが行われる。ついで図９（ｂ）に示すように、管体２の一端を環状凹部１６に差し込み、蓋体１１を管体２に対して相対的に回転させて、環状凹部１６の内側面にある螺子溝と、管体２の外側面にある螺子溝とを螺合させる。以上の作業により、図９（ｃ）に示すように蓋体１１が管体２の一端に取り付けられて、挿入部１３と共にニトロセルロース膜Ｎも管体２内に挿入された状態となる。管体２内に尿などの液体Ｌが投入されている場合には、抗原Ｋやコントロール物質Ｃが固定されたニトロセルロースの表面が第１突出片１８，１８の間から露出していることで、当該ニトロセルロース膜Ｎの表面が液体Ｌに浸漬される。

また図９（ｃ）に示すように蓋体１１が管体２に取り付けられた状態では、上述した螺子溝の螺合により頭部１２が管体２の一端に固定されて、管体２の開口４が頭部１２によって密閉される。これにより、管体２内の液体Ｌが漏出しない。

また蓋体１１が管体２に取り付けられた状態では（図９（ｃ））、第１突出片１８，１８によって、支持板１７の幅方向へのニトロセルロース膜Ｎの動きが規制されるとともに、挿入部１３の先端が管体２の他端に当接することで、管体２の他端側へのニトロセルロース膜Ｎの動きも規制される。以上により、ニトロセルロース膜Ｎが支持板１７に載置された状態が安定して維持される。

さらに蓋体１１が管体２に取り付けられた状態では（図９（ｃ））、頭部１２の端面１５が、管体２の長手方向に対して垂直に広がる。このため図１０に示すように、頭部１２を土台として管体２を立設させることができる。そしてこのように管体２を立設させれば、管体２内の液体Ｌが管体２の一端側に貯留するので、抗原Ｋやコントロール物質Ｃが固定されたニトロセルロース膜Ｎの一端側を液体Ｌに浸漬させることができる。

蓋体１１を管体２の一端から取り外す際には、まず図１１（ａ）に示すように、取り付け時とは逆向きに蓋体１１を管体２に対して回転させることで、環状凹部１６（図８）の螺子溝と管体２の螺子溝との螺合を解除する。ついで図１１（ｂ）に示すように管体２内から挿入部１３を引き出すことが行われる。以上の作業により、蓋体１１が管体２の一端から取り外されて、挿入部１３に保持されたニトロセルロース膜Ｎも管体２内から引き出される。図１１（ｂ）に示すように蓋体１１が管体２から取り外された状態では、尿や二次抗体液や発色液等の液体Ｌを、管体２の開口４を通じて、管体２内に投入したり、管体２内から排出できる。

以上の構成を有する検査キット１０は、図６と同様の工程が実施されることで、尿における抗体（標的物質）の有無を検査可能である。

図６のステップＳ１０３，Ｓ１０６，Ｓ１０９，Ｓ１１２に対応する工程では、図１１に示す蓋体１１の取り外し作業が行われることで、管体２内から挿入部１３やニトロセルロース膜Ｎが引き出された状態とされる。

図６のステップＳ１０２，Ｓ１０５，Ｓ１０８，Ｓ１１１，Ｓ１１４に対応する工程では、図９に示す蓋体１１の取り付け作業が行われることで、挿入部１３やニトロセルロース膜Ｎが管体２内に挿入されて、管体２内に投入されている尿などの液体Ｌ（尿・洗浄液・二次抗体液・発色液など）にニトロセルロース膜Ｎが浸漬した状態とされる。尿に抗体（標的物質）が含まれている場合には、抗原Ｋの固定位置において、上記の（１）〜（３）の反応から発色が生じることで、尿に抗体（標的物質）が含まれていることが検出される。

コントロール物質Ｃの固定位置では、図６のステップＳ１０８に対応する工程で上記の（４）の反応が生じ、ステップＳ１１４に対応する工程で上記（５）の反応から発色が生じる。管体２への二次抗体液や発色液の投入が看過された場合には、コントロール物質Ｃの固定位置で発色が生じないことで、二次抗体液や発色液が投入されなかったことが判明する。

第２実施形態においても、ニトロセルロース膜Ｎが管体２内の尿などの液体Ｌに浸漬されることで、管体２内の液体Ｌに含まれる物質（抗体、二次抗体、酵素基質など）と、ニトロセルロース膜Ｎに形成・固定される物質（抗原Ｋ、抗原・抗体複合体、抗原・抗体・二次抗体複合体、コントロール物質Ｃ、抗体・二次抗体複合体など）とが確実に反応する。したがって、尿に抗体が含まれることを高感度に検出できる。また図１０に示したように頭部１２を土台として管体２を立設できるので、手間を要せず、管体２の一端側に液体Ｌを貯留させて、液体Ｌ中の物質（抗体、二次抗体、酵素基質など）と、ニトロセルロース膜Ｎの一端側に形成・固定される物質（抗原Ｋ、抗原・抗体複合体、抗原・抗体・二次抗体複合体、コントロール物質Ｃ、抗体・二次抗体複合体など）とを反応させることができる。

また第２実施形態によれば、蓋体１１を管体２の一端に着脱することに伴い、ニトロセルロース膜Ｎを管体２内に挿入し、管体２内のニトロセルロース膜Ｎを引き出すことができる。したがって、蓋体３の着脱作業と、ニトロセルロース膜Ｎの挿入・取り出し作業とを個別に行う必要がない。
さらに蓋体１１を管体２に取り付ける際には、第１突出片１８，１８が、支持板１７の幅方向へのニトロセルロース膜Ｎの動きを規制するので、ニトロセルロース膜Ｎが支持板１７に載置された状態が維持される。このため、確実にニトロセルロース膜Ｎを支持板１７と共に管体２に挿入できる。
さらに蓋体１１が管体２に取り付けられた状態では、第１突出片１８，１８によって、支持板１７の幅方向へのニトロセルロース膜Ｎの動きが規制されることに加え、挿入部１３の先端が管体２の他端に当接することで、管体２の他端側へのニトロセルロース膜Ｎの動きも規制される。このため、ニトロセルロース膜Ｎが支持板１７に載置された状態（ニトロセルロース膜Ｎが挿入部１３に保持された状態）が安定して維持される。したがって、ニトロセルロース膜Ｎが管体２内から取り外し難くなる事態を回避でき、蓋体１１を管体２から取り外す際に、確実にニトロセルロース膜Ｎを支持板１７と共に管体２から引き出すことができる。
以上のことから、検査を容易に行うことができる。

また蓋体１１が管体２に取り付けられた状態では、上述のようにニトロセルロース膜Ｎが支持板１７に載置された状態が維持されることで、ニトロセルロース膜Ｎが支持板１７から脱落して折れ曲がるような事態が生じず、ニトロセルロース膜Ｎは常に拡がった状態とされる。このため、ニトロセルロース膜Ｎの各部位に液体Ｌを均等に浸透させることができる。したがって、ニトロセルロース膜Ｎの各部位に固定された物質を、液体Ｌ中の物質と反応させることができる。

また第２実施形態においても、蓋体１１へのニトロセルロース膜Ｎの取り付けや、管体２への蓋体１１の着脱や、管体２に対する液体Ｌの投入・排出など、高度な技術を要しない作業により、尿における抗体の有無を検査できる、また管体２が尿・二次抗体液・洗浄液を貯留する容器として共用されるので、検査に要する手間やコストを軽減できる。

なお第２実施形態の検査キットは、図１２や図１３に示すように変更され得る。図１２、図１３に示す検査キット１９，２０では、一対の第１突出片１８，１８の断面が、支持板１７の表面に対して垂直に延びた後、支持板１７の幅方向内側に屈曲する形状を呈している。これら検査キット１９，２０によれば、第１突出片１８，１８が、支持板１７の幅方向へのニトロセルロース膜Ｎの動きに加えて、支持板１７の表面に対して垂直な方向へのニトロセルロース膜Ｎの動きも規制する。このため、ニトロセルロース膜Ｎが支持板１７に載置された状態がより安定して維持される。

さらに図１３に示す検査キット２０では、挿入部１３が、支持板１７や第１突出片１８，１８に加えて、第２突出片２１をさらに備えるものとなっている。第２突出片２１は、支持板１７の長手方向先端側において、支持板１７の表面から突出するものである。第２突出片２１は、支持板１７の幅方向に延びており、支持板１７の先端（他端）から視て一対の第１突出片１８，１８の間に位置する。この図１３の検査キット２０では、第２突出片２１によって、ニトロセルロース膜Ｎが管体２の他端側に抜け出ることが防止される。このため、蓋体１１を管体２から取り外す際に、確実にニトロセルロース膜Ｎを支持板１７と共に管体２内から引き出すことができる。なお図１３の検査キット２０では、第１突出片１８，１８が支持板１７の途中までしか延びていないことで、第１突出片１８，１８と第２突出片２１との間に隙間Ｓが形成されており、この隙間Ｓから、ニトロセルロース膜Ｎを第１突出片１８，１８の間に挿入できる。なお隙間Ｓは必ずしも形成する必要はなく、第２突出片２１が第１突出片１８，１８の間を支持板１７の幅方向に延びるものとされてもよい（つまり、第２突出片２１が、第１突出片１８，１８の内側に位置するものであってもよい）。この場合でも、例えば、ニトロセルロース膜Ｎの幅方向を弓なりに撓ませた状態で、ニトロセルロース膜Ｎの両側縁を第１突出片１８，１８の間に差し込んだ後、ニトロセルロース膜Ｎを平らにすることで、第１突出片１８，１８の間にニトロセルロース膜Ｎを挿入できる。また図１３では、挿入部１３の先端（すなわち支持板１７の先端や第２突出片２１）が管体２の他端に当接する例を示しているが、図１３の検査キット２０では、ニトロセルロース膜Ｎが管体２の他端側に抜け出ることが第２突出片２１によって防止されるので、図１３のように必ずしも挿入部１３の先端を管体２の他端に当接させる必要はなく、挿入部１３の長さ（すなわち支持板１７の長さ）は、管体２の長さ以下となる範囲内で適宜調整され得る。

（第３実施形態）
図１４は、第３実施形態に係る検査キット３０を示す斜視図である。図１５は、検査キット３０を分解した状態を示す斜視図である。

第３実施形態の検査キット３０は、管体２と、管体２の一端に着脱自在に取り付けられる蓋体３１とを備えるものであり、蓋体３１の構造が、第１及び第２実施形態の検査キットと異なる。

蓋体３１は、プラスチックやスチールから形成されるものであり、頭部３２と挿入部３３とを備える。

頭部３２は、管体２の開口４よりも大きな円板状を呈しており、管体２側に配置される平坦な端面３４と、その反対側にある平坦な端面３５とを有する。端面３４には、管体２の一端を差し込み可能な環状凹部３６が形成される。環状凹部３６の内側面には、螺子溝（図示せず）が形成されており、この螺子溝と、管体２の一端の外側面に形成される螺子溝（図示せず）とを螺合させることができる。

挿入部３３は、支持板３７と、環状枠体３８とを備える。

支持板３７は、矩形の板状を呈するものであり、頭部３２の端面３４における環状凹部３６の内側から延びる。支持板３７の長さは、管体２の長さと同等或いはそれ以下とされる。支持板３７の幅は、管体２の内径と同等とされる。

支持板３７の表面３７ａには、ニトロセルロース膜Ｎを載置するための矩形の凹部３９が形成される。また支持板３７の表面３７ａにおける凹部３９の外側には、四つの突起４０が形成される。これら突起４０は支持板３７の四隅に位置する。

環状枠体３８は、支持板３７と同様の外形寸法を有するものであり、長さが管体２の長さと同等或いはそれ以下とされ、幅が管体２の内径と同等とされる。環状枠体３８は、その一側縁３８ｂが薄肉のヒンジを介して支持板３７の一側縁３７ｂに接合されることで、支持板３７の一側縁３７ｂに回動自在に支持される。環状枠体３８の内側の開口５０は、支持板３７の凹部３９よりも小さな矩形に形成されており、環状枠体３８の回動で環状枠体３８の表面３８ａを支持板３７の表面３７ａに沿わせた状態では、環状枠体３８の内縁部３８ｃが凹部３９の上方に突き出るようになっている。また環状枠体３８の表面３８ａの四隅には孔４１が形成されており、上述のように表面３８ａを表面３７ａに沿わせた状態では、突起４０と孔４１とが係合する。

検査が実施される際には、環状枠体３８を回動させて、ニトロセルロース膜Ｎを環状枠体３８と支持板３７とで挟み込む作業が行われる。

すなわち、まず図１６（ａ）に示すように、ニトロセルロース膜Ｎを、支持板３７の凹部３９に載置する。この際には、抗原Ｋやコントロール物質Ｃが固定されたニトロセルロース膜Ｎの表面を上側に向ける。

ついで図１６（ｂ）に示すように、環状枠体３８の表面３８ａが支持板３７の表面３７ａに沿うように環状枠体３８を回動させることで、環状枠体３８を支持板３７の表面３７ａに載置して、突起４０と孔４１を係合させる。これにより、ニトロセルロース膜Ｎの外縁部が環状枠体３８の内縁部３８ｃと支持板３７とに挟み込まれて、ニトロセルロース膜Ｎが挿入部３３に保持された状態となる。

そしてニトロセルロース膜Ｎが挿入部３３に保持された状態では（図１６（ｂ））、環状枠体３８の開口５０から、抗原Ｋやコントロール物質Ｃが固定されたニトロセルロース膜Ｎの表面が露出する。また、突起４０と孔４１が係合することで、環状枠体３８や支持板３７が開方向に回動せず、ニトロセルロース膜Ｎが挿入部３３に保持された状態が維持される（ニトロセルロース膜Ｎを環状枠体３８と支持板３７とで挟み込んだ状態が維持される）。

蓋体３１を管体２の一端に取り付ける際には、図１７（ａ）に示すように、ニトロセルロース膜Ｎが挿入部３３に保持された状態で、挿入部３３を管体２内に挿入することが行われる。ついで図１７（ｂ）に示すように、管体２の一端を頭部３２の環状凹部３６に差し込み、蓋体３１を管体２に対して相対的に回転させることで、環状凹部３６の内側面にある螺子溝と、管体２の外側面にある螺子溝とを螺合させる。以上の作業により、図１７（ｃ）に示すように、蓋体３１が管体２の一端に取り付けられて、挿入部３３と共にニトロセルロース膜Ｎも管体２内に挿入された状態となる。管体２内に尿などの液体Ｌが投入されている場合には、抗原Ｋやコントロール物質Ｃが固定されたニトロセルロース膜Ｎの表面が環状枠体３８の開口５０から露出していることで、当該ニトロセルロース膜Ｎの表面が液体Ｌに浸漬される。

また図１７（ｃ）に示すように蓋体３１が管体２に取り付けられた状態では、突起４０と孔４１が係合することに加えて、支持板３７や環状枠体３８の外縁が管体２の内面に当接することによっても、環状枠体３８や支持板３７が開方向に回動することが防止される。これにより、ニトロセルロース膜Ｎが挿入部３３に保持された状態（ニトロセルロース膜Ｎが環状枠体３８や支持板３７に挟み込まれた状態）がより安定して維持される。

さらに蓋体３１が管体２の一端に取り付けられた状態では（図１７（ｃ））、頭部３２の端面３５が、管体２の長手方向に対して垂直に広がる。このため図１８に示すように、頭部３２を土台として管体２を立設させることができる。そしてこのように管体２を立設させれば、管体２内の液体Ｌが管体２の一端側に貯留するので、抗原Ｋやコントロール物質Ｃが固定されたニトロセルロース膜Ｎの一端側を液体Ｌに浸漬させることができる。

蓋体３１を管体２の一端から取り外す際には、図１９（ａ）に示すように、取り付け時とは逆向きに蓋体３１を管体２に対して相対回転させることで、環状凹部３６（図１５〜図１７）の螺子溝と管体２の一端の螺子溝との螺合を解除する。ついで図１９（ｂ）に示すように管体２内から挿入部３３を引き出すことが行われる。以上の作業により、蓋体３１が管体２の一端から取り外されて、挿入部３３に保持されたニトロセルロース膜Ｎも管体２内から引き出される。上記の作業で蓋体３１が管体２から取り外された後では、尿や二次抗体液や発色液等の液体Ｌを、管体２の開口４を通じて、管体２内に投入したり、管体２内から排出できる。

以上の構成を有する検査キット３０は、図６と同様の工程で、尿における抗体（標的物質）の有無を検査可能である。

図６のステップＳ１０３，Ｓ１０６，Ｓ１０９，Ｓ１１２に対応する工程では、図１９に示す蓋体３１の取り外し作業が行われることで、挿入部３３やニトロセルロース膜Ｎが管体２内から引き出された状態とされる。

図６のステップＳ１０２，Ｓ１０５，Ｓ１０８，Ｓ１１１に対応する工程では、図１７に示す蓋体３１の取り付け作業が行われることで、ニトロセルロース膜Ｎや挿入部３３が管体２内に挿入されて、ニトロセルロース膜Ｎが管体２内の液体Ｌ（尿・洗浄液・二次抗体液・発色液など）に浸漬した状態とされる。尿に抗体（標的物質）が含まれている場合には、抗原Ｋの固定位置において、上記の（１）〜（３）の反応から発色が生じることで、尿に抗体（標的物質）が含まれていることが検出される。

また第１及び第２実施形態と同様、コントロール物質Ｃの固定位置では、図６のステップＳ１０８，Ｓ１１４に対応する工程において上記（４），（５）の反応が生じる。管体２への二次抗体液や発色液の投入が看過された場合には、コントロール物質Ｃの固定位置で発色が生じないことで、二次抗体液や発色液が投入されなかったことが判明する。

第３実施形態においても、ニトロセルロース膜Ｎが管体２内の尿などの液体Ｌに浸漬されることで、管体２内の液体Ｌに含まれる物質（抗体、二次抗体、酵素基質など）と、ニトロセルロース膜Ｎに形成・固定される物質（抗原Ｋ、抗原・抗体複合体、抗原・抗体・二次抗体複合体、コントロール物質Ｃ、抗体・二次抗体複合体など）とが確実に反応する・このため尿に抗体が含まれていることを高感度に検出できる。また頭部１２を土台として管体２を立設できるので（図２０）、手間を要せず、管体２の一端側に液体Ｌを貯留させて、液体Ｌ中の物質（抗体、二次抗体、酵素基質など）と、ニトロセルロース膜Ｎの一端側に形成・固定される物質（抗原Ｋ、抗原・抗体複合体、抗原・抗体・二次抗体複合体、コントロール物質Ｃ、抗体・二次抗体複合体など）とを反応させることができる。

また第３実施形態においても、蓋体１１を管体２の一端に着脱することに伴い、管体２内にニトロセルロース膜Ｎを挿入し、また、ニトロセルロース膜Ｎを管体２内から引き出すことができる。したがって、蓋体３の着脱作業と、ニトロセルロース膜Ｎの挿入・取り出し作業とを個別に行う必要がない。
さらに環状枠体３８と支持板３７による挟み込みで、ニトロセルロース膜Ｎが挿入部３３に保持されるため、ニトロセルロース膜Ｎが挿入部３３から脱落しない。このため、確実に挿入部３３と共にニトロセルロース膜Ｎを管体２内に挿入したり管体２内から取り出すことができ、ニトロセルロース膜Ｎが管体２内から取り外し難くなる事態が回避される。
以上のことから、検査を容易に行うことができる。

またニトロセルロース膜Ｎが管体２内に挿入された状態では、環状枠体３８と支持板３７による挟み込みでニトロセルロース膜Ｎが常に拡がった状態とされるため、ニトロセルロース膜Ｎの各部位に液体Ｌが均等に浸透する。このため、ニトロセルロース膜Ｎの各部位に固定された物質を、液体Ｌ中の物質と反応させることができる。

また第３実施形態においても、蓋体３１へのニトロセルロース膜Ｎの取り付けや、管体２への蓋体３１の着脱や、管体２に対する液体Ｌの投入・排出など、高度な技術を要しない作業により、尿における抗体の有無を検査できる。また管体２が尿・二次抗体液・洗浄液を貯留する容器として共用されるので、検査に要する手間やコストを軽減できる。

なお第３実施形態では、環状枠体３８の一側縁３８ｂと支持板３７の一側縁３７ｂとを薄肉のヒンジで接合する例を示したが、環状枠体３８を回動可能とするヒンジは、上記薄肉のヒンジに限られない。例えば、環状枠体３８の一側縁３８ｂと支持板３７の一側縁３７ｂとを回動可能に結合する軸体（図示せず）と、軸体の周りに装着されて、環状枠体３８を閉方向に付勢するコイルバネ（図示せず）とが、ヒンジとして設けられてもよい。この場合には、コイルバネの付勢により、環状枠体３８が開方向に回動することが防止されるので、環状枠体３８や支持板３７がニトロセルロース膜Ｎを挟み込んだ状態が安定して維持される。なお図１６（ａ）に対応する作業では、コイルバネの力に抗して、環状枠体３８を開方向に回動させて、ニトロセルロース膜Ｎを支持板３７の凹部３９に載置することが行われる。なお上記例と異なり、第３実施形態で示したように環状枠体３８と支持板３７とを薄肉のヒンジで接合すれば、検査キット３０の部品点数を少なく抑えることができる。このため、検査キット３０の製造に要するコストや手間を軽減できる。

また必ずしも、環状枠体３８と支持板３７とをヒンジで一体に接合する必要はなく、環状枠体３８と支持板３７とを別体にしてもよい。この場合には、環状枠体３８と支持板３７とでニトロセルロース膜Ｎを挟み込むために、以下の作業（ａ），（ｂ）が順次行われる。
（ａ）ニトロセルロース膜Ｎを支持板３７の凹部３９に載置する。
（ｂ）環状枠体３８の表面３８ａが支持板３７の表面３７ａに沿うように、環状枠体３８を支持板３７の表面３７ａに載置して、突起４０と孔４１とを係合させる。
以上のように環状枠体３８と支持板３７とを別体にする場合には、ヒンジが省略されるので、検査キット３０の部品点数をより少なく抑えることができる。したがって検査キット３０の製造コストや製造手間を一層軽減できる。

また、支持板３７に凹部３９を形成せずに、支持板３７の表面を平らなものとしてもよい。このようにしても、環状枠体３８と支持板３７とでニトロセルロース膜Ｎを挟み込むことができる。なお図示例のように支持板３７に凹部３９を形成すれば、ニトロセルロース膜Ｎの位置決めができるので、環状枠体３８や支持板３７でニトロセルロース膜Ｎを挟み込む作業を円滑に進めることができる。また、ニトロセルロース膜Ｎにおける抗原Ｋやコントロール試薬Ｃの固定位置を、確実に開口５０から露出させて液体Ｌに浸漬させることができる。

また図１５や図１６では、支持板３７や環状枠体３８の四隅に、突起４０や孔４１を形成する例を示したが、突起４０や孔４１は、四隅以外の位置に形成されてもよく、支持板３７や環状枠体３８の周回りに延びるよう形成されてもよい。また図示例とは逆に、支持板３７に孔４１を形成し、環状枠体３８に突起４０を形成してもよい。

また、突起４０や孔４１は支持板３７や環状枠体３８に形成されなくてもよい。この場合でも、支持板３７や環状枠体３８の幅を管体２の内径と同等にすれば、挿入部３３を管体２内に挿入した状態において、管体２の内面が支持板３７や環状枠体３８の外縁に当接するので、ニトロセルロース膜Ｎを支持板３７や環状枠体３８で挟み込んだ状態を維持できる。なお図示例のように突起４０や孔４１を形成する場合には、これらの係合でニトロセルロース膜Ｎの挟み込みを維持できるので、支持板３７や環状枠体３８の幅を、管体２の内径よりも小さくすることができる。このため、支持板３７や環状枠体３８を管体２内に挿入することや管体２内から取り出すことを、円滑に行うことができる。

本発明は、上記の第１〜第３実施形態に限定されず、特許請求の範囲において種々改変することができる。

例えば、第１〜第３実施形態では、蓋体３，１１，３１の頭部５，１２，３２（図１，図７，図１２，図１３，図１４）が円板状を呈する例を示したが、頭部５，１２，３２の形状は、円板状に限らず、管体２の開口４よりも大きな横断面を有する任意の形状に設定され得る。

また第２実施形態や第３実施形態では、環状凹部１６，３６（図９，図１７）の内側面に形成される螺子溝と、管体２の一端の外側面に形成される螺子溝とを螺合することで、頭部１２，３２を管体２の一端に固定する例を示したが、頭部１２，３２の固定は、上記螺子溝以外の公知の手段によって実現されてもよい。

また、上記第１〜第３実施形態では、図６のステップＳ１０２，Ｓ１０８，Ｓ１１４に対応する工程で、液体Ｌ中に含まれる物質と、ニトロセルロース膜Ｎの一端側に固定される物質とを反応させるべく、頭部５，１２，３２を土台として管体２を立設する例を示したが（図４，図１０，図１８）、図６のステップＳ１０５，Ｓ１１１に対応する工程でも、洗浄液でニトロセルロース膜Ｎの一端側を洗浄すべく、図４，図１０，図１８に示すように頭部５，１２，３２を土台として管体２を立設させてもよい。

また第１〜第３実施形態の検査キット１，１０，１９，２０，３０（図１，図７，図１２，図１３，図１４）では、凹凸のある地面に管体２を安定して立設させるべく、頭部５，１２，３２の端面８，１５，３５から棒状体を突出させて、この棒状体を地面に突き刺すようにしてもよい。

また図６のステップＳ１０２，Ｓ１０５，Ｓ１０８，Ｓ１１１，Ｓ１１４に対応する工程では、（１）〜（５）の反応やニトロセルロース膜Ｎの洗浄を促進すべく、検査キット１，１０，１９，２０，３０を振ったり回転させることで、管体２内の液体Ｌを揺らしてもよく、或いは、管体２を横向きにして載置することで、管体２の長手方向全体に液体Ｌが貯留するようにしてもよい。

また、第１〜第３実施形態の検査キット１，１０，１９，２０，３０（図１，図７，図１２，図１３，図１４）は、図２０に示すブロック６０をさらに備えるものであってもよい（図２０は、第２実施形態の検査キット１０（図７）にブロック６０を設ける例を示している）。ブロック６０は、抗原Ｋやコントロール物質Ｃがニトロセルロース膜Ｎの他端側に固定される場合に使用される。

ブロック６０は、管体２側に配置される平坦な端面６１と、その反対側にある平坦な端面６２とを有しており、端面６１に形成された凹部６３に管体２の他端が挿入されることで、管体２の他端に取り付けられる。ブロック６０が管体２の他端に取り付けられた状態では、端面６２が管体２の長手方向に対して垂直に広がることで、ブロック６０を土台として管体２を立設させることができる。

上記のブロック６０が使用される場合には、図６のステップＳ１０２，Ｓ１０８，Ｓ１１４に対応する工程で、管体の他端にブロック６０を取り付けて、ブロック６０を土台として管体２を立設させることが行われる。このようにすれば、管体２の他端側に液体Ｌが貯留するので、液体Ｌ中の物質（抗体、二次抗体、酵素基質など）と、ニトロセルロース膜Ｎの他端側に固定される物質（抗原Ｋ、抗原・抗体複合体、抗原・抗体・二次抗体複合体など）とを確実に反応させることができる。また図６のステップＳ１０５，Ｓ１１１に対応する工程においても、ニトロセルロース膜Ｎの他端側を洗浄すべく、ブロック６０を土台として管体２を立設させて、管体２の他端側に洗浄液を貯留させてもよい。また、凹凸のある地面に対して管体２を安定して立設させるべく、ブロック６０の端面６２から棒状体を突出させて、この棒状体を地面に突き刺すようにしてもよい。

また第２実施形態や第３実施形態の検査キット１０，１９，２０，３０（図７，図１２，図１３，図１４）では、抗原Ｋやコントロール物質Ｃの固定位置を特定するためのマーカーが、挿入部１３，３３に形成されてもよい。例えば、第２実施形態の検査キット１０，１９，２０（図７，図１２，図１３）では、ニトロセルロース膜Ｎを第１突出片１８，１８の間に挟み込ませた状態で、抗原Ｋやコントロール物質Ｃの側方に位置する第１突出片１８，１８の範囲にマーカーを形成すれば、抗原Ｋやコントロール物質Ｃの位置を特定できる。また第３実施形態の検査キット３０（図１４）では、ニトロセルロース膜Ｎを環状枠体３８と支持板３７とで挟み込んだ状態で、抗原Ｋやコントロール物質Ｃの側方に位置する環状枠体３８の外面にマーカーを形成すれば、抗原Ｋやコントロール物質Ｃの位置を特定できる。

また第１〜第３実施形態では、抗原Ｋやコントロール物質Ｃを固定する膜体として、ニトロセルロース膜Ｎを使用する例を示したが、ニトロセルロース膜Ｎの代わりに、従来の血清診断法で使用されているフィルターペーパー等の膜体が使用されてもよい。なお抗原Ｋを尿中の抗体と十分接触させるために、ニトロセルロース膜Ｎを使用することが好ましい。

また、検査対象とされる標的物質は、上記実施形態に示した結核菌の抗原Ｋに対する抗体に限られない。ニトロセルロース膜Ｎやフィルターペーパー等の膜体に固定される物質や、管体２内に投入される液体Ｌが適宜選択されることで、尿に含有され得る上記抗体以外の蛋白や微生物や寄生虫を標的物質として、これらが尿に含まれるか否か検査することも可能である。

また第１〜第３実施形態の検査キット１，１０，１９，２０，３０（図１，図７，図１２，図１３，図１４）では、管体２の内面や、挿入部６，１３，３３の外面に、尿中の標的物質が付着することを防止するコーティング材を塗布してもよい。このようにすれば、管体２の内面や挿入部６，１３，３３の外面に標的物質が付着しないので、尿に含まれる標的物質の多数を、ニトロセルロース膜Ｎやフィルターペーパーに固定される物質と反応させることができる。このため、尿に標的物質が含まれることを高感度に検出できる。例えば上記実施形態で示したように、標的物質が、ＭＰＢ６４抗原に対する特異ＩｇＧ抗体とされる場合には、上記のコーティング材として、スキムミルクやウシ血清アルブミン（Bovine Serum Albumin、ＢＳＡ）の希釈液が使用され得る。

１，１０，１９，２０，３０ 検査キット、
２ 管体、
３，１１，３１ 蓋体、
４ 管体の開口、
５，１２，３２ 頭部、
６，１３，３３ 挿入部、
７，１４，３４ 頭部の端面（第１端面）、
８，１５，３５ 頭部の端面（第２端面）、
９ スリット、
１６，３６ 頭部の環状凹部、
１７，３７ 支持板、
１８ 第１突出片、
２１ 第２突出片、
３７ａ 支持板の表面、
３７ｂ 支持板の一側縁、
３８ 環状枠体、
３８ａ 環状枠体の表面、
３８ｂ 環状枠体の一側縁、
３８ｃ 環状枠体の内縁部、
３９ 支持板の凹部、
４０ 支持板の突起、
４１ 環状枠体の孔、
５０ 環状枠体の内側の開口、
６０ ブロック、
６１ ブロックの端面（第３端面）、
６２ ブロックの端面（第４端面）、
Ｃ コントロール物質（結核菌の抗原に対する抗体）、
Ｋ 抗原（反応物質）、
Ｌ 液体、
Ｎ ニトロセルロース膜（膜体）、
Ｓ 第１突出片と第２突出片との間の隙間

Claims (12)

1. 尿における標的物質の有無を検査するための検査キットであって、
   一端に開口が形成される筒状を呈し、前記開口を通じて尿などの液体が内部に投入される管体と、
   前記管体の一端に着脱自在に取り付けられる蓋体とを備え、
   前記蓋体は、前記管体の開口よりも大きな断面を有する頭部と、前記管体の開口から前記管体内に挿入可能な挿入部とを備え、
   前記挿入部は、前記頭部から延びる支持板と、前記支持板の表面から突出する一対の第１突出片とを備え、前記一対の第１突出片は、前記支持板の幅方向に間隔をあけて形成されており、
   前記標的物質と反応する反応物質が表面に固定された膜体の表面を上側に向けた状態で、前記膜体が前記一対の第１突出片に挟み込まれるように前記支持板の表面に載置されることで、前記膜体が前記挿入部に保持され、
   前記管体の一端への前記蓋体の取り付けが、前記挿入部を前記管体の開口から前記管体内に挿入するように行われることで、前記挿入部に保持された前記膜体も前記管体内に挿入されて、前記一対の第１突出片の間から露出する前記膜体の表面が前記管体内の尿に浸漬され、
   前記管体の一端からの前記蓋体の取り外しが、前記管体内から前記挿入部を引き出すように行われることで、前記挿入部に保持された前記膜体も前記管体内から引き出される検査キット。
2. 前記一対の突出片の横断面は、前記支持板の表面に対して垂直に延びた後、前記支持板の幅方向内側に屈曲する形状を呈する請求項１に記載の検査キット。
3. 前記一対の第１突出片は、前記支持板の全長に亘って延びており、
   前記蓋体が前記管体の一端に取り付けられた状態では、前記支持板や前記一対の第１突出片は、前記管体の他端に当接する請求項１又は２に記載の検査キット。
4. 前記挿入部は、前記支持板の長手方向先端側において前記支持板の表面から突出する第２突出片をさらに備え、
   前記第２突出片は、前記支持板の幅方向に延びるものであり、前記支持板の先端から視て前記一対の第１突出片の間に位置する請求項１乃至３のいずれかに記載の検査キット。
5. 尿における標的物質の有無を検査するための検査キットであって、
   一端に開口が形成される筒状を呈し、前記開口を通じて尿などの液体が内部に投入される管体と、
   前記管体の一端に着脱自在に取り付けられる蓋体とを備え、
   前記蓋体は、前記管体の開口よりも大きな断面を有する頭部と、前記管体の開口から前記管体の内部に挿入可能な挿入部とを備え、
   前記挿入部は、前記頭部から延びる支持板と、当該支持板の表面に載置可能な環状枠体とを備え、
   前記標的物質と反応する反応物質が固定された膜体の表面を上側に向けた状態で、前記膜体を前記支持板の表面に載置した後、前記環状枠体を前記支持板の表面に載置することで、前記膜体が、前記支持板と前記環状枠体とで挟み込まれて、前記挿入部に保持された状態となり、
   前記管体の一端への前記蓋体の取り付けが、前記挿入部を前記管体の開口から前記管体内に挿入するように行われることで、前記挿入部に保持された前記膜体も前記管体内に挿入されて、前記環状枠体の内側の開口から露出する前記膜体の表面が前記管体内の液体に浸漬され、
   前記管体の一端からの前記蓋体の取り外しが、前記管体内から前記挿入部を引き出すように行われることで、前記挿入部に保持された前記膜体も前記管体内から引き出される検査キット。
6. 前記頭部は、前記管体側に配置される第１端面と、前記第１端面の反対側にある第２端面とを有し、
   前記蓋体が前記管体の一端に取り付けられた状態では、前記第２端面が、前記管体の長手方向に対して垂直に広がることで、前記頭部を土台として前記管体を立設させることが可能である請求項１乃至５のいずれかに記載の検査キット。
7. 前記挿入部の外面や前記管体の内面には、前記標的物質が付着することを防止するコーティング材が塗布される請求項１乃至６のいずれかに記載の検査キット。
8. 前記管体の他端に着脱自在に取り付けられるブロックをさらに備え、
   前記ブロックは、前記管体側に配置される第３端面と、前記第３端面の反対側にある第４端面とを有し、
   前記第３端面に形成される凹部に前記管体の他端が挿入されることで、前記ブロックが前記管体の他端に取り付けられ、
   前記ブロックが前記管体の他端に取り付けられた状態では、前記第４端面が前記管体の長手方向に対して垂直に広がることで、前記ブロックを土台として前記管体を立設させることが可能である請求項１乃至７のいずれかに記載の検査キット。
9. 前記標的物質は、結核菌の抗原に対する抗体であり、
   前記膜体の表面には、前記反応物質としての前記抗原が固定される請求項１乃至８のいずれかに記載の検査キット。
10. 前記膜体の表面には、前記結核菌の抗原に対する抗体がさらに固定される請求項９に記載の検査キット。
11. 請求項９又は１０に記載の検査キットを用いて、結核菌の抗原に対する抗体が尿に含まれるか否かを検査する方法であって、
    尿を前記管体内に投入する第１工程と、
    前記蓋体の取り付け作業により、前記膜体を前記管体内の尿に浸漬させる第２工程と、
    前記蓋体の取り外し作業により、前記膜体を前記管体内から引き出す第３工程と、
    前記管内の尿を排出して、洗浄液を前記管体内に投入する第４工程と、
    前記蓋体の取り付け作業により、前記膜体を前記管体内の洗浄液に浸漬させて、前記膜体に付着している未反応の前記抗体を洗い流す第５工程と、
    前記蓋体の取り外し作業により、前記膜体を前記管体内から引き出す第６工程と、
    前記管内の洗浄液を排出して、前記抗体に対する二次抗体であって酵素で標識された二次抗体を含む二次抗体液を前記管体内に投入する第７工程と、
    前記蓋体の取り付け作業により、前記膜体を前記管体内の二次抗体液に浸漬させる第８工程と、
    前記蓋体の取り外し作業により、前記膜体を前記管体内から引き出す第９工程と、
    前記管内の二次抗体液を排出して、洗浄液を前記管体内に投入する第１０工程と、
    前記蓋体の取り付け作業により、前記膜体を前記管体内の洗浄液に浸漬させて、前記膜体に付着している未反応の二次抗体を洗い流す第１１工程と、
    前記蓋体の取り外し作業により、前記膜体を前記管体内から引き出す第１２工程と、
    前記管内の洗浄液を排出して、前記酵素との反応で発色する発色基質を含有する発色液を前記管体内に投入する第１３工程と、
    前記蓋体の取り付け作業により、前記膜体を前記管体内の発色液に浸漬させる第１４工程と、を有する検査方法。
12. 前記第１工程では、１０ｃｃ以上の尿が前記管体内に投入される請求項１１に記載の検査方法。