JP6547042B2

JP6547042B2 - 非選択的キナーゼ阻害剤

Info

Publication number: JP6547042B2
Application number: JP2018106185A
Authority: JP
Inventors: ジスマン、ローレンス、エス．
Original assignee: プルモキネ、インコーポレイテッド; ギリードサイエンシズ、インコーポレイテッド
Priority date: 2013-01-10
Filing date: 2018-06-01
Publication date: 2019-07-17
Anticipated expiration: 2034-01-09
Also published as: US20190248761A1; CA2897651C; US20150353527A1; US10532994B2; CN109568319A; AU2014205483B2; AU2020289802A1; WO2014110200A1; ES2675720T3; JP2018158931A; CA2897651A1; US10246438B2; CN105142624A; EP3007689A4; JP6387488B2; EP3007689A1; AU2014205483A1; JP2016506418A; EP3007689B1; DK3007689T3

Description

（関連出願の相互参照）
本出願は、２０１３年１月１０日出願の米国仮出願番号第６１／７５１，２１７号及び米国仮出願番号６１／８８９，８８７号に関する優先権を主張するものである。これらの全内容を、その全体において参照により本明細書に組み込む。

（政府支援による研究の陳述）
本発明は、国立衛生研究所によって授与された認可番号１Ｒ４３ＨＬ１０２９４６−０１及び２Ｒ４４ＨＬ１０２９４６−０２のもとで、合衆国政府の支援によってなされたものである。合衆国政府は本発明において特定の権利を有する。

本開示は、一般に、タンパク質キナーゼ活性に関連する疾患の治療及び防止に関する。特に、本技術は、タンパク質キナーゼ阻害剤の治療指標並びに肺及び血管の状態、癌及び他の障害の治療又は防止のための方法に関する。

以下の背景の考察は、読者が本発明を理解するのを単に助けるために提供するものであり、必ずしも現行技術を説明又は構成しようとするものではない。

受容体チロシンキナーゼ（ＲＴＫ）は、細胞及び組織の再生、リモデリング、成長及び分化を制御する膜貫通ポリペプチドである。例えば、Ｍｕｓｔｏｎｅｎら、Ｊ．ＣｅｌｌＢｉｏｌｏｇｙ１２９、８９５〜８９８頁（１９９５年）；ｖａｎｄｅｒＧｅｅｒら、ＡｎｎＲｅｖ．ＣｅｌｌＢｉｏｌ．１０、２５１〜３３７頁（１９９４年）を参照されたい。ＲＴＫを活性化するのに加えて、ポリペプチドリガンド成長因子及びサイトカインは、受容体二量化をもたらすＲＴＫ外部ドメインの構造変化を誘発させることができる。Ｌｙｍｂｏｕｓｓａｋｉ、Ｄｉｓｓｅｒｔａｔｉｏｎ、Ｕｎｉｖ．ｏｆＨｅｌｓｉｎｋｉ、Ｍｏｌ．／ＣａｎｃｅｒＢｉｏＬａｂａｎｄＤｅｐｔ．ｏｆＰａｔｈｏｌｏｇｙ、ＨａａｒｔｍａｎＩｎｓｔｉｔｕｔｅ（１９９９年）；Ｕｌｌｒｉｃｈら、Ｃｅｌｌ６１、２０３〜２１２頁（１９９０年）。さらに、同族ＲＴＫ受容体−リガンド結合は、特定のチロシン残基での受容体トランスリン酸化、続く、キナーゼ触媒ドメインの活性化を付与し、それによって、基質リン酸化、及びシグナル伝達カスケードの活性化を可能にする。同上（Ｉｄ．）。

しかし、異常なＲＴＫ活性は様々な疾患状態と関連しており、特定のＲＴＫ阻害剤の全身的送達は特定の疾患状態に対して効力を示している。マウスモノクロタリン（ＭＣＴ）モデル系を含むこの目的のためのインビボでのアッセイが、想定されるＲＴＫ阻害剤が治療剤として機能するかどうかを究明するために用いられている。しかし、前臨床薬物候補の効力に関して、ＭＣＴモデルは、そうした系では、特定のヒト疾患表現型、例えばそうした疾患と症候的に合併性である新生内膜及び／又は叢状の病変の発現を立証することはできないという理由のため批判されている。したがって、このモデルは、ヒト疾患の病原学的及び病理学的指標を複雑にする可能性のある不完全な系である。したがって、新規の補完的なモデル系が、正確で効果的な薬物の開発に必要である。

第一世代のＲＴＫ阻害剤、例えばイマチニブの開発及び投与に合わせて、ＲＴＫは、ある種の変異を獲得することによる阻害剤耐性を進化させている。例えば、Ｓｈａｈら、Ｓｃｉｅｎｃｅ、３０５、３９５〜４０２頁（２００４年）を参照されたい。例えば、特定のキナーゼ阻害剤、例えばイマチニブでは難治性の罹患患者において、疎水性ポケット「ゲートキーパー残基」がしばしば変異を有するということが示されている。Ｐａｏら、ＰＬｏｓＭｅｄ．２（３）：ｅ７３（２００５年）を参照されたい。そうした変異は、ＡＢＬに関して、すなわち、Ｔ３１５残基並びにＫＩＴ、ＰＤＧＦＲα、ＥＧＦＲ及び他のキナーゼの類似した位置で特定されている。同上。したがって、優れた効力を有する新規のＲＴＫ阻害剤（表現型的にヒト疾患の病理と類似したモデル系で開発された）が、異常なＲＴＫ活性を有する疾患を防止及び治療するために必要である。

一態様では、本開示は、対象における肺障害を治療するための非選択的キナーゼ受容体阻害の方法であって、対象に、治療有効量の構造１の化合物、前記化合物の互変異性体、エナンチオマー、異性体若しくは立体異性体、前記化合物、前記化合物の互変異性体、エナンチオマー、異性体若しくは立体異性体の薬学的に許容される塩、又はその任意の混合物を投与するステップを含み、構造１が次式：

を有する方法を提供する。

ここで、ＸはＣ、Ｎ、Ｏ、Ｓ又は−ＣＮから独立に選択され；
Ｒ^１、Ｒ^２及びＲ^３は、同じであっても異なっていてもよく、Ｈ、Ｃ、Ｎ、Ｏ、Ｓ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｆ、Ｉ、−ＣＮ、−ＮＯ_２、−ＯＨ、−ＣＨ_３、−ＣＦ_３、−Ｃ−Ｎ−Ｃ−基、−Ｃ−Ｎ−Ｃ（＝Ｏ）−基、−Ｃ（＝Ｏ）Ｒ^８基、−Ｎ−Ｃ（＝Ｏ）Ｒ^８基、−Ｃ−Ｎ−Ｃ（＝Ｏ）Ｒ^８基、置換及び非置換Ｒ^８基、Ｒ^９、Ｒ^１０及びＲ^１１の１つ又は複数で置換された置換及び非置換Ｒ^８基、置換及び非置換アミジニル基、置換及び非置換グアニジニル基、置換及び非置換の第一級、第二級及び第三級アルキル基、置換及び非置換アリール基、置換及び非置換アルケニル基、置換及び非置換アルキニル基、置換及び非置換ヘテロシクリル基、置換及び非置換アミノアルキル基、置換及び非置換アルキルアミノアルキル基、置換及び非置換ジアルキルアミノアルキル基、置換及び非置換アリールアミノアルキル基、置換及び非置換ジアリールアミノアルキル基、置換及び非置換（アルキル）（アリール）アミノアルキル基、置換及び非置換ヘテロシクリルアルキル基、置換及び非置換シアノ基、置換及び非置換ピリミジニル基、置換及び非置換シアノ（アリール）基、置換及び非置換シアノ（ヘテロシクリル）基並びに置換及び非置換シアノ−ピリミジニル基からなる群から独立に選択され；
Ｒ^４、Ｒ^５、Ｒ^６及びＲ^７は、同じであっても異なっていてもよく、Ｈ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｆ、Ｉ、−ＣＮ、−ＮＯ_２、−ＯＨ、−ＣＨ_３、−ＣＦ_３、−ＮＨ_２、−Ｃ≡Ｎ、−Ｃ＝Ｎ基、−Ｃ−Ｎ−Ｃ−基、−Ｃ−Ｎ−Ｃ（＝Ｏ）−基、−Ｃ−Ｎ−Ｃ（＝Ｏ）−Ｃ−Ｆ、−Ｃ−Ｎ−Ｃ（＝Ｏ）−Ｃ＝Ｃ、置換及び非置換アルキル基、置換及び非置換アリール基、置換及び非置換ヘテロシクリル基、アルコキシ基、アリールオキシ基、置換及び非置換ヘテロシクリルアルキル基、置換及び非置換アミノアルキル基、置換及び非置換アルキルアミノアルキル基、置換及び非置換ジアルキルアミノアルキル基、置換及び非置換アリールアミノアルキル基、置換及び非置換ジアリールアミノアルキル基、置換及び非置換（アルキル）（アリール）アミノアルキル基、置換及び非置換アルキルアミノ基、置換及び非置換アリールアミノ基、置換及び非置換ジアルキルアミノ基、置換及び非置換ジアリールアミノ基、置換及び非置換（アルキル）（アリール）アミノ基、−Ｃ（＝Ｏ）Ｈ、−Ｃ（＝Ｏ）−アルキル基、−Ｃ（＝Ｏ）−アリール基、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−アルキル基、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−アリール基、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ_２、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ（アルキル）基、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ（アリール）基、−Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（アルキル）_２基、−Ｃ（＝Ｏ）−アリール基、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ_２、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ（アルキル）基、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ（アリール）基、−Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（アルキル）_２基、−Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（アリール）_２基、−Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（アルキル）（アリール）基、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−アルキル基、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−アリール基、−Ｃ（＝Ｏ）−ヘテロシクリル基、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−ヘテロシクリル基、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ（ヘテロシクリル）基、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｎ（ヘテロシクリル）_２基、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｎ（アルキル）（ヘテロシクリル）基、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｎ（アリール）（ヘテロシクリル）基、置換及び非置換ヘテロシクリルアミノアルキル基、置換及び非置換ヒドロキシアルキル基、置換及び非置換アルコキシアルキル基、置換及び非置換アリールオキシアルキル基、及び置換及び非置換ヘテロシクリルオキシアルキル基、置換及び非置換ジヘテロシクリルアミノアルキル、置換及び非置換（ヘテロシクリル）（アルキル）アミノアルキル、置換及び非置換（ヘテロシクリル）（アリール）アミノアルキル、置換及び非置換アルコキシアルキル基、置換及び非置換ヒドロキシアルキル基、置換及び非置換アリールオキシアルキル基、及び置換及び非置換ヘテロシクリルオキシアルキル基；−（アルキル）（アリール）アミノアルキル基、−Ｃ（＝Ｏ）−ヘテロシクリル基、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−ヘテロシクリル基、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ（ヘテロシクリル）基、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｎ（ヘテロシクリル）_２基、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｎ（アルキル）（ヘテロシクリル）基、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｎ（アリール）（ヘテロシクリル）基、置換及び非置換ヘテロシクリルアミノアルキル基、置換及び非置換ヒドロキシアルキル基、置換及び非置換アルコキシアルキル基、置換及び非置換アリールオキシアルキル基、及び置換及び非置換ヘテロシクリルオキシアルキル基、−ＮＨ（アルキル）基、−ＮＨ（アリール）基、−Ｎ（アルキル）_２基、−Ｎ（アリール）_２基、−Ｎ（アルキル）（アリール）基、−ＮＨ（ヘテロシクリル）基、−Ｎ（ヘテロシクリル）（アルキル）基、−Ｎ（ヘテロシクリル）（アリール）基、−Ｎ（ヘテロシクリル）_２基、置換及び非置換アルキル基、置換及び非置換アリール基、置換及び非置換アルコキシ基、置換及び非置換アリールオキシ基、置換及び非置換ヘテロシクリル基、−ＮＨＯＨ、−Ｎ（アルキル）ＯＨ基、−Ｎ（アリール）ＯＨ基、−Ｎ（アルキル）Ｏ−アルキル基、−Ｎ（アリール）Ｏ−アルキル基、−Ｎ（アルキル）Ｏ−アリール基、及び−Ｎ（アリール）Ｏ−アリール基からなる群から独立に選択され；
Ｒ^８は、Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^３、Ｒ^４、Ｒ^５、Ｒ^６、Ｒ^７、Ｈ、存在せず、−Ｃ＝Ｃ、置換及び非置換ヘテロシクリル基、置換及び非置換アリール基、置換及び非置換ヘテロシクリル（Ｒ^９）基、置換及び非置換ヘテロシクリル（Ｒ^１０）基、置換及び非置換ヘテロシクリル（Ｒ^１１）基、置換及び非置換ヘテロシクリル（Ｒ^９）（Ｒ^１０）基、置換及び非置換ヘテロシクリル（Ｒ^９）（Ｒ^１１）基、置換及び非置換ヘテロシクリル（Ｒ^１０）（Ｒ^１１）基、置換及び非置換ヘテロシクリル（Ｒ^９）（Ｒ^１０）（Ｒ^１１）基、置換及び非置換−Ｃ（＝Ｏ）−ヘテロシクリル（Ｒ^９）基、置換及び非置換−Ｃ（＝Ｏ）−ヘテロシクリル（Ｒ^１０）基、置換及び非置換−Ｃ（＝Ｏ）−ヘテロシクリル（Ｒ^１１）基、置換及び非置換−Ｃ（＝Ｏ）−ヘテロシクリル（Ｒ^９）（Ｒ^１０）基、置換及び非置換−Ｃ（＝Ｏ）−ヘテロシクリル（Ｒ^９）（Ｒ^１１）基、置換及び非置換−Ｃ（＝Ｏ）−ヘテロシクリル（Ｒ^１０）（Ｒ^１１）基、置換及び非置換−Ｃ（＝Ｏ）−ヘテロシクリル（Ｒ^９）（Ｒ^１０）（Ｒ^１１）基、置換及び非置換アリール（Ｒ^９）基、置換及び非置換アリール（Ｒ^１０）基、置換及び非置換アリール（Ｒ^１１）基、置換及び非置換アリール（Ｒ^９）（Ｒ^１０）基、置換及び非置換アリール（Ｒ^９）（Ｒ^１１）基、置換及び非置換アリール（Ｒ^１０）（Ｒ^１１）基、置換及び非置換アリール（Ｒ^９）（Ｒ^１０）（Ｒ^１１）基、置換及び非置換−Ｃ（＝Ｏ）−アリール（Ｒ^９）基、置換及び非置換−Ｃ（＝Ｏ）−アリール（Ｒ^１０）基、置換及び非置換−Ｃ（＝Ｏ）−アリール（Ｒ^１１）基、置換及び非置換−Ｃ（＝Ｏ）−アリール（Ｒ^９）（Ｒ^１０）基、置換及び非置換−Ｃ（＝Ｏ）−アリール（Ｒ^９）（Ｒ^１１）基、置換及び非置換−Ｃ（＝Ｏ）−アリール（Ｒ^１０）（Ｒ^１１）基並びに置換／非置換−Ｃ（＝Ｏ）−アリール（Ｒ^９）（Ｒ^１０）（Ｒ^１１）基からなる群から選択され；
Ｒ^９、Ｒ^１０及びＲ^１１は、同じであっても異なっていてもよく、存在せず、Ｈ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｆ、Ｉ、−ＣＮ、−ＮＯ_２、−ＯＨ、−ＣＨ_３、−ＣＦ_３、−ＮＨ_２、−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ−Ｎ−Ｒ^１２、−Ｃ≡Ｎ、−Ｃ−Ｎ−Ｃ基、−Ｃ−Ｎ−Ｃ（＝Ｏ）−基、−Ｃ−Ｎ−Ｃ（＝Ｏ）−Ｃ−Ｆ、−Ｃ−Ｎ−Ｃ（＝Ｏ）−Ｃ＝Ｃ、−Ｃ＝Ｎ基、置換及び非置換アルキル基、置換及び非置換アリール基、置換及び非置換ヘテロシクリル基、アルコキシ基、アリールオキシ基、置換及び非置換ヘテロシクリルアルキル基、置換及び非置換アミノアルキル基、置換及び非置換アルキルアミノアルキル基、置換及び非置換ジアルキルアミノアルキル基、置換及び非置換アリールアミノアルキル基、置換及び非置換ジアリールアミノアルキル基、置換及び非置換（アルキル）（アリール）アミノアルキル基、置換及び非置換アルキルアミノ基、置換及び非置換アリールアミノ基、及び置換及び非置換ジアルキルアミノ基、置換及び非置換アミノアルキル基、置換及び非置換（アルキル）（アリール）アミノアルキル基、置換及び非置換アルキルアミノ基、置換及び非置換アリールアミノ基、置換及び非置換ジアルキルアミノ基、置換及び非置換ジアリールアミノ基、置換及び非置換（アルキル）（アリール）アミノ基、−Ｃ（＝Ｏ）Ｈ、−Ｃ（＝Ｏ）−アルキル基、−Ｃ（＝Ｏ）−アリール基、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−アルキル基、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−アリール基、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ_２、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ（アルキル）基、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ（アリール）基、−Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（アルキル）_２基、−Ｃ（＝Ｏ）−アリール基、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ_２、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ（アルキル）基、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ（アリール）基、−Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（アルキル）_２基、−Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（アリール）_２基、−Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（アルキル）（アリール）基、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−アルキル基、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−アリール基、−Ｃ（＝Ｏ）−ヘテロシクリル基、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−ヘテロシクリル基、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ（ヘテロシクリル）基、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｎ（ヘテロシクリル）_２基、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｎ（アルキル）（ヘテロシクリル）基、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｎ（アリール）（ヘテロシクリル）基、置換及び非置換ヘテロシクリルアミノアルキル基、置換及び非置換シアノ基、置換及び非置換ピリミジニル基、置換及び非置換シアノ（アリール）基、置換及び非置換シアノ（ヘテロシクリル）基並びに置換及び非置換シアノ−ピリミジニル基からなる群から独立に選択され；
Ｒ^１２は、存在せず、Ｈ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｆ、Ｉ、−ＣＮ、−ＮＯ_２、−ＯＨ、−ＣＨ_３、−ＣＦ_３、−ＮＨ_２、−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ−Ｎ−Ｒ^１２、−Ｃ≡Ｎ、−Ｃ−Ｎ−Ｃ基、−Ｃ−Ｎ−Ｃ（＝Ｏ）−基、−Ｃ−Ｎ−Ｃ（＝Ｏ）−Ｃ−Ｆ、−Ｃ−Ｎ−Ｃ（＝Ｏ）−Ｃ＝Ｃ、−Ｃ＝Ｎ基、−Ｃ（＝Ｏ）−基、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｃ−基、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｃ＝Ｃ、−Ｓ（＝Ｏ）_２−基、−Ｓ（＝Ｏ）_２−Ｃ−基、−Ｓ（＝Ｏ）_２−Ｃ＝Ｃ−基、−Ｓ（＝Ｏ）_２−Ｃ＝Ｃ−ＣＨ_３、アルコキシ基、アリールオキシ基、置換及び非置換アミジニル基、置換及び非置換グアニジニル基、置換及び非置換の第一級、第二級及び第三級アルキル基、置換及び非置換アリール基、置換及び非置換アルケニル基、置換及び非置換アルキニル基、置換及び非置換ヘテロシクリル基、置換及び非置換アミノアルキル基、置換及び非置換アルキルアミノアルキル基、置換及び非置換ジアルキルアミノアルキル基、置換及び非置換アリールアミノアルキル基、置換及び非置換ジアリールアミノアルキル基、置換及び非置換（アルキル）（アリール）アミノアルキル基、置換及び非置換ヘテロシクリルアルキル基、置換及び非置換シアノ基、置換及び非置換ピリミジニル基、置換及び非置換シアノ（アリール）基、置換及び非置換シアノ（ヘテロシクリル）基並びに置換及び非置換シアノ−ピリミジニル基からなる群から選択され；
Ｑ^１は、直接結合、Ｈ、Ｃ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｆ、Ｉ、−ＣＮ、−ＮＯ_２、−ＣＨ_３、−ＣＦ_３、−ＮＨ_２、−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ−Ｎ−Ｒ^１２、−Ｃ≡Ｎ、−Ｃ−Ｎ−Ｃ基、−Ｃ−Ｎ−Ｃ（＝Ｏ）−基、−Ｃ−Ｎ−Ｃ（＝Ｏ）−Ｃ−Ｆ、−Ｃ−Ｎ−Ｃ（＝Ｏ）−Ｃ＝Ｃ、−Ｃ＝Ｎ基、−Ｃ（＝Ｏ）−基、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｃ−基、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｃ＝Ｃ、−ＣＦ_３、−Ｃ≡Ｎ、−Ｃ−Ｎ−Ｃ−基、−Ｃ−Ｎ−Ｃ（＝Ｏ）−基、−Ｃ−Ｎ−Ｃ（＝Ｏ）−Ｃ−Ｆ、−Ｃ−Ｎ−Ｃ（＝Ｏ）−Ｃ＝Ｃ、−ＯＨ、アルコキシ基、アリールオキシ基、置換及び非置換アルキル基、置換及び非置換アリール基、置換及び非置換ヘテロシクリル基、アルコキシ基、アリールオキシ基、メトキシ基、ジメトキシ基、メトキシフェノール、メトキシフェノール基、ジメトキシフェノール、ジメトキシフェノール基、ジメトキシベンゼン、ジメトキシベンゼン基、メトキシメチルベンジル基、置換及び非置換アラルキル基、−ＮＨ_２、置換及び非置換ヘテロシクリルアルキル基、置換／非置換アミノアルキル基、置換及び非置換アルキルアミノアルキル基、置換及び非置換ジアルキルアミノアルキル基、置換及び非置換アリールアミノアルキル基、置換及び非置換ジアリールアミノアルキル基、置換及び非置換（アルキル）（アリール）アミノアルキル基、置換及び非置換アルキルアミノ基、置換及び非置換アリールアミノ基、及び置換及び非置換ジアルキルアミノ基、置換及び非置換シアノ基、置換及び非置換ピリミジニル基、置換及び非置換シアノ（アリール）基、置換及び非置換シアノ（ヘテロシクリル）基並びに置換及び非置換シアノ−ピリミジニル基からなる群から選択され；
Ｑ^２は、存在せず、Ｈ、Ｑ^１、Ｑ^１（Ｑ^３）、−ＯＨ、アルコキシ基、アリールオキシ基からなる群から選択され；
Ｑ^３は、存在せず、直接結合、Ｈ、Ｃ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｆ、Ｉ、−ＣＮ、−ＮＯ_２、−ＣＨ_３、−ＣＦ_３、−ＮＨ_２、−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ−Ｎ−Ｒ^１２、−Ｃ≡Ｎ、−Ｃ−Ｎ−Ｃ基、−Ｃ−Ｎ−Ｃ（＝Ｏ）−基、−Ｃ−Ｎ−Ｃ（＝Ｏ）−Ｃ−Ｆ、−Ｃ−Ｎ−Ｃ（＝Ｏ）−Ｃ＝Ｃ、−Ｃ＝Ｎ基、−Ｃ（＝Ｏ）−基、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｃ−基、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｃ＝Ｃ、−ＣＦ_３、−Ｃ≡Ｎ、−Ｃ−Ｎ−Ｃ−基、−Ｃ−Ｎ−Ｃ（＝Ｏ）−基、−Ｃ−Ｎ−Ｃ（＝Ｏ）−Ｃ−Ｆ、−Ｃ−Ｎ−Ｃ（＝Ｏ）−Ｃ＝Ｃ、−ＯＨ、アルコキシ基、アルコキシ基、アリールオキシ基、メトキシ基、ジメトキシ基、メトキシフェノール、メトキシフェノール基、ジメトキシフェノール、ジメトキシフェノール基、ジメトキシベンゼン、ジメトキシベンゼン基、置換及び非置換アルキル基、置換及び非置換アリール基並びに置換及び非置換ヘテロシクリル基からなる群から選択される。上記段落（すなわち、［０００９］）の内容を以下で「ＱＸＲ」と称する。

例示的な実施形態では、Ｒ^８の構造は以下の式：

（式中、ＸはＣ、Ｎ、Ｏ、Ｓ及び−ＣＮから独立に選択され；
Ｒ^９、Ｒ^１０及びＲ^１１は、同じであっても異なっていてもよく、Ｈ、Ｃ、Ｎ、Ｏ、Ｓ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｆ、Ｉ、−ＣＮ、−ＮＯ_２、−ＯＨ、−ＣＨ_３、−ＣＦ_３、−ＮＨ_２、−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ−Ｎ−Ｒ^１２、−Ｃ≡Ｎ、−Ｃ−Ｎ−Ｃ（＝Ｏ）−Ｃ−Ｆ、−Ｃ−Ｎ−Ｃ（＝Ｏ）−Ｃ＝Ｃ、置換及び非置換アルキル基、置換及び非置換アリール基、置換及び非置換ヘテロシクリル基、−ＯＨ、アルコキシ基、アリールオキシ基、置換及び非置換ヘテロシクリルアルキル基、置換及び非置換アミノアルキル基、置換及び非置換アルキルアミノアルキル基、置換及び非置換ジアルキルアミノアルキル基、置換及び非置換アリールアミノアルキル基、置換及び非置換ジアリールアミノアルキル基、置換及び非置換（アルキル）（アリール）アミノアルキル基、置換及び非置換アルキルアミノ基、置換及び非置換アリールアミノ基、及び置換及び非置換ジアルキルアミノ基、置換及び非置換シアノ基、置換及び非置換ピリミジニル基、置換及び非置換シアノ（アリール）基、置換及び非置換シアノ（ヘテロシクリル）基並びに置換及び非置換シアノ−ピリミジニル基からなる群から独立に選択され；
Ｒ^１２は、−Ｃ（＝Ｏ）−基、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｃ−基、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｃ＝Ｃ、−Ｓ（＝Ｏ）_２−基、−Ｓ（＝Ｏ）_２−Ｃ−基、−Ｓ（＝Ｏ）_２−Ｃ＝Ｃ−基、−Ｓ（＝Ｏ）_２−Ｃ＝Ｃ−ＣＨ_３、−ＯＨ、アルコキシ基、アリールオキシ基、置換及び非置換アミジニル基、置換及び非置換グアニジニル基、置換及び非置換の第一級、第二級及び第三級アルキル基、置換及び非置換アリール基、置換及び非置換アルケニル基、置換及び非置換アルキニル基、置換及び非置換ヘテロシクリル基、置換及び非置換アミノアルキル基、置換及び非置換アルキルアミノアルキル基、置換及び非置換ジアルキルアミノアルキル基、置換及び非置換アリールアミノアルキル基、置換及び非置換ジアリールアミノアルキル基、置換及び非置換（アルキル）（アリール）アミノアルキル基、置換及び非置換ヘテロシクリルアルキル基、置換及び非置換シアノ基、置換及び非置換ピリミジニル基、置換及び非置換シアノ（アリール）基、置換及び非置換シアノ（ヘテロシクリル）基並びに置換及び非置換シアノ−ピリミジニル基からなる群から選択される）
を有する。上記段落（すなわち、［００１０］）の内容を以下で「ＱＸＲ２」と称する。

例示的な実施形態では、Ｒ^８の構造は以下に示すようなグループＡ

から選択される。

例示的な実施形態では、Ｑ^１又はＱ^２の構造は、以下に示すようなグループＢ、−ＣＨ_３、−ＯＨ、−Ｏ−ＣＨ_３、−Ｃ−Ｎ−Ｃ（＝Ｏ）−Ｃ＝Ｃ及び−Ｃ−Ｎ−Ｃ（＝Ｏ）−Ｃ−Ｆから選択される。

いくつかの実施形態では、構造１の化合物は、グループＣで以下に示すような構造２、２ａ、３、４又は５の化合物である。

例示的な実施形態では、構造１、２、２ａ、３、４又は５の化合物を、経口、静脈内、皮下、経皮、腹腔内で、又は吸入により投与する。例示的な実施形態では、キナーゼ受容体は、そのＲＴＫが血小板由来の成長因子受容体（ＰＤＧＦＲ）である、受容体チロシンキナーゼ（ＲＴＫ）である。例示的な実施形態では、そのＰＤＧＦＲは、血小板由来の成長因子受容体−アルファ（ＰＤＧＦＲ−α）若しくは血小板由来の成長因子受容体−ベータ（ＰＤＧＦＲ−β）又はその両方である。例示的な実施形態では、ＰＤＧＦＲは、ＰＤＧＦＲ−αα、ＰＤＧＦＲ−ββ及びＰＤＧＦＲ−αβ又はその任意の組合せから選択されるホモ二量体又はヘテロ二量体である。例示的な実施形態では、ＰＤＧＦＲの阻害は、その肺障害が肺動脈高血圧症（ＰＡＨ）、網状及び／若しくは新生内膜の病変に関連したＰＡＨ、肺線維症及び／若しくは進行性血管変性、異常線維芽細胞及び／若しくは筋線維芽細胞増殖に関連したＰＡＨ、又は異常内皮細胞増殖に関連した肺血管障害、又はその任意の組合せである肺障害を治療するのに効果的である。

例示的な実施形態では、その阻害は、ＰＤＧＦＲ−αとＰＤＧＦＲ−βの両方の同時阻害である。例示的な実施形態では、その阻害は、同族基質の相互作用を調節することによって、ＰＤＧＦＲ−αとＰＤＧＦＲ−βの両方の活性化を防止する。例示的な実施形態では、その同族基質は、ＰＤＧＦＡＡ、ＰＤＧＦＢＢ及びＰＤＧＦＡＢ又はその任意の組合から選択される。例示的な実施形態では、肺障害は、肺動脈高血圧症（ＰＡＨ）、網状及び／又は新生内膜の病変に関連したＰＡＨ、肺線維症及び／又は進行性血管変性、異常線維芽細胞及び／又は筋線維芽細胞増殖に関連したＰＡＨ、及び異常内皮細胞増殖に関連した肺血管障害から選択される。

例示的な実施形態では、そのＰＡＨは、原発性ＰＡＨ、特発性ＰＡＨ、遺伝性ＰＡＨ、難治性ＰＡＨ、ＢＭＰＲ２、ＡＬＫ１、遺伝性出血性毛細血管拡張症に関連したエンドグリン、遺伝性出血性毛細血管拡張症に関連していないエンドグリン、薬物誘発性ＰＡＨ、及び毒素誘発性ＰＡＨ、全身性硬化症、混合性結合組織疾患、ＨＩＶ、肝炎及び／又は門脈圧亢進症に関連したＰＡＨから選択される。

例示的な実施形態では、ＰＡＨは、肺高血圧症、先天性心疾患、低酸素症、慢性溶血性貧血、新生児持続性肺高血圧症、肺静脈閉塞性疾患（ＰＶＯＤ）、肺毛細血管腫症（ＰＣＨ）、左心疾患性（left heart disease）肺高血圧症、収縮機能障害、拡張機能障害、弁膜症、肺疾患、間質性肺疾患、肺線維症、住血吸虫症、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、睡眠呼吸障害、肺胞低換気障害、高高度への慢性暴露、発育異常、慢性血栓塞栓性肺高血圧症（ＣＴＥＰＨ）、不明確な多因子性機序での肺高血圧症、血液学的障害、骨髄増殖障害、脾摘出術、全身性障害、サルコイドーシス、肺ランゲルハンス細胞組織球増殖症、リンパ管平滑筋腫症、神経線維腫症、血管炎、代謝性障害、糖原病（glycogen storage disease）、ゴーシェ病、甲状腺障害、腫瘍性閉塞症（tumoral obstruction）、線維性縦隔炎及び／又は透析での慢性腎不全に続いて起こる。

例示的な実施形態では、その肺障害は、異常な：右心室収縮期圧（ＲＶＳＰ）；肺動脈圧；心拍出量；右心室（ＲＶ）肥大；及び／又は肺動脈（ＰＡ）肥大に関連している。例示的な実施形態では、構造１の化合物は、キナーゼ受容体について３００ｎＭ未満のＩＣ_５０を有する。例示的な実施形態では、キナーゼ受容体は、血小板由来の成長因子受容体−アルファ（ＰＤＧＦＲ−α）若しくは血小板由来の成長因子受容体−ベータ（ＰＤＧＦＲ−β）又はその両方であり、その肺障害は肺動脈高血圧症である。例示的な実施形態では、阻害は非共有結合性相互作用によって起こる。例示的な実施形態では、阻害は共有結合性相互作用によって起こる。

一態様では、本開示は、対象における肺動脈高血圧症（ＰＡＨ）を治療する方法であって、対象に、構造１の化合物、前記化合物の互変異性体、エナンチオマー、異性体若しくは立体異性体、前記化合物、前記化合物の互変異性体、エナンチオマー、異性体若しくは立体異性体の薬学的に許容される塩、又はその任意の混合物を投与することによって、その下流標的がＰＤＧＦＲ−α及び／又はＰＤＧＦＲ−β活性化の結果としてリン酸化される任意の基質である、血小板由来の成長因子受容体−アルファ（ＰＤＧＦＲ−α）若しくは血小板由来の成長因子受容体−ベータ（ＰＤＧＦＲ−β）又はその両方の１つ又は複数の下流標的のリン酸化状態を調節するステップを含み、その下流標的が、ＡＫＴ、ＰＤＧＦＲ、ＳＴＡＴ３、ＥＲＫ１及びＥＲＫ２又はＰＤＧＦＲ−α及び／又はＰＤＧＦＲ−βの任意の他の下流標的からなる群から選択され；構造１の化合物が以下の式：

｛式中、ＸはＣ、Ｎ、Ｏ、Ｓ又は−ＣＮから独立に選択され；
Ｒ^１、Ｒ^２及びＲ^３は、同じであっても異なっていてもよく、Ｈ、Ｃ、Ｎ、Ｏ、Ｓ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｆ、Ｉ、−ＣＮ、−ＮＯ_２、−ＯＨ、−ＣＨ_３、−ＣＦ_３、−Ｃ−Ｎ−Ｃ−基、−Ｃ−Ｎ−Ｃ（＝Ｏ）−基、−Ｃ（＝Ｏ）Ｒ^８基、−Ｎ−Ｃ（＝Ｏ）Ｒ^８基、−Ｃ−Ｎ−Ｃ（＝Ｏ）Ｒ^８基、置換及び非置換Ｒ^８基、Ｒ^９、Ｒ^１０及びＲ^１１の１つ又は複数で置換された置換及び非置換Ｒ^８基、置換及び非置換アミジニル基、置換及び非置換グアニジニル基、置換及び非置換の第一級、第二級及び第三級アルキル基、置換及び非置換アリール基、置換及び非置換アルケニル基、置換及び非置換アルキニル基、置換及び非置換ヘテロシクリル基、置換及び非置換アミノアルキル基、置換及び非置換アルキルアミノアルキル基、置換及び非置換ジアルキルアミノアルキル基、置換及び非置換アリールアミノアルキル基、置換及び非置換ジアリールアミノアルキル基、置換及び非置換（アルキル）（アリール）アミノアルキル基、置換及び非置換ヘテロシクリルアルキル基、置換及び非置換シアノ基、置換及び非置換ピリミジニル基、置換及び非置換シアノ（アリール）基、置換及び非置換シアノ（ヘテロシクリル）基並びに置換及び非置換シアノ−ピリミジニル基からなる群から独立に選択され；
Ｒ^４、Ｒ^５、Ｒ^６及びＲ^７は、同じであっても異なっていてもよく、Ｈ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｆ、Ｉ、−ＣＮ、−ＮＯ_２、−ＯＨ、−ＣＨ_３、−ＣＦ_３、−ＮＨ_２、−Ｃ≡Ｎ、−Ｃ＝Ｎ基、−Ｃ−Ｎ−Ｃ−基、−Ｃ−Ｎ−Ｃ（＝Ｏ）−基、−Ｃ−Ｎ−Ｃ（＝Ｏ）−Ｃ−Ｆ、−Ｃ−Ｎ−Ｃ（＝Ｏ）−Ｃ＝Ｃ、置換及び非置換アルキル基、置換及び非置換アリール基、置換及び非置換ヘテロシクリル基、アルコキシ基、アリールオキシ基、置換及び非置換ヘテロシクリルアルキル基、置換及び非置換アミノアルキル基、置換及び非置換アルキルアミノアルキル基、置換及び非置換ジアルキルアミノアルキル基、置換及び非置換アリールアミノアルキル基、置換及び非置換ジアリールアミノアルキル基、置換及び非置換（アルキル）（アリール）アミノアルキル基、置換及び非置換アルキルアミノ基、置換及び非置換アリールアミノ基、置換及び非置換ジアルキルアミノ基、置換及び非置換ジアリールアミノ基、置換及び非置換（アルキル）（アリール）アミノ基、−Ｃ（＝Ｏ）Ｈ、−Ｃ（＝Ｏ）−アルキル基、−Ｃ（＝Ｏ）−アリール基、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−アルキル基、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−アリール基、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ_２、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ（アルキル）基、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ（アリール）基、−Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（アルキル）_２基、−Ｃ（＝Ｏ）−アリール基、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ_２、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ（アルキル）基、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ（アリール）基、−Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（アルキル）_２基、−Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（アリール）_２基、−Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（アルキル）（アリール）基、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−アルキル基、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−アリール基、−Ｃ（＝Ｏ）−ヘテロシクリル基、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−ヘテロシクリル基、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ（ヘテロシクリル）基、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｎ（ヘテロシクリル）_２基、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｎ（アルキル）（ヘテロシクリル）基、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｎ（アリール）（ヘテロシクリル）基、置換及び非置換ヘテロシクリルアミノアルキル基、置換及び非置換ヒドロキシアルキル基、置換及び非置換アルコキシアルキル基、置換及び非置換アリールオキシアルキル基、及び置換及び非置換ヘテロシクリルオキシアルキル基、置換及び非置換ジヘテロシクリルアミノアルキル、置換及び非置換（ヘテロシクリル）（アルキル）アミノアルキル、置換及び非置換（ヘテロシクリル）（アリール）アミノアルキル、置換及び非置換アルコキシアルキル基、置換及び非置換ヒドロキシアルキル基、置換及び非置換アリールオキシアルキル基、及び置換及び非置換ヘテロシクリルオキシアルキル基；−（アルキル）（アリール）アミノアルキル基、−Ｃ（＝Ｏ）−ヘテロシクリル基、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−ヘテロシクリル基、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ（ヘテロシクリル）基、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｎ（ヘテロシクリル）_２基、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｎ（アルキル）（ヘテロシクリル）基、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｎ（アリール）（ヘテロシクリル）基、置換及び非置換ヘテロシクリルアミノアルキル基、置換及び非置換ヒドロキシアルキル基、置換及び非置換アルコキシアルキル基、置換及び非置換アリールオキシアルキル基、及び置換及び非置換ヘテロシクリルオキシアルキル基、−ＮＨ（アルキル）基、−ＮＨ（アリール）基、−Ｎ（アルキル）_２基、−Ｎ（アリール）_２基、−Ｎ（アルキル）（アリール）基、−ＮＨ（ヘテロシクリル）基、−Ｎ（ヘテロシクリル）（アルキル）基、−Ｎ（ヘテロシクリル）（アリール）基、−Ｎ（ヘテロシクリル）_２基、置換及び非置換アルキル基、置換及び非置換アリール基、置換及び非置換アルコキシ基、置換及び非置換アリールオキシ基、置換及び非置換ヘテロシクリル基、−ＮＨＯＨ、−Ｎ（アルキル）ＯＨ基、−Ｎ（アリール）ＯＨ基、−Ｎ（アルキル）Ｏ−アルキル基、−Ｎ（アリール）Ｏ−アルキル基、−Ｎ（アルキル）Ｏ−アリール基並びに−Ｎ（アリール）Ｏ−アリール基からなる群から独立に選択され；
Ｒ^８の構造は以下の式：

（式中、ＸはＣ、Ｎ、Ｏ、Ｓ又は−ＣＮから独立に選択され；
Ｒ^９、Ｒ^１０及びＲ^１１は、同じであっても異なっていてもよく、Ｈ、Ｃ、Ｎ、Ｏ、Ｓ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｆ、Ｉ、−ＣＮ、−ＮＯ_２、−ＯＨ、−ＣＨ_３、−ＣＦ_３、−ＮＨ_２、−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ−Ｎ−Ｒ^１２、−Ｃ≡Ｎ、−Ｃ−Ｎ−Ｃ（＝Ｏ）−Ｃ−Ｆ、−Ｃ−Ｎ−Ｃ（＝Ｏ）−Ｃ＝Ｃ、置換及び非置換アルキル基、置換及び非置換アリール基、置換及び非置換ヘテロシクリル基、−ＯＨ、アルコキシ基、アリールオキシ基、置換及び非置換ヘテロシクリルアルキル基、置換及び非置換アミノアルキル基、置換及び非置換アルキルアミノアルキル基、置換及び非置換ジアルキルアミノアルキル基、置換及び非置換アリールアミノアルキル基、置換及び非置換ジアリールアミノアルキル基、置換及び非置換（アルキル）（アリール）アミノアルキル基、置換及び非置換アルキルアミノ基、置換及び非置換アリールアミノ基、及び置換及び非置換ジアルキルアミノ基、置換及び非置換シアノ基、置換及び非置換ピリミジニル基、置換及び非置換シアノ（アリール）基、置換及び非置換シアノ（ヘテロシクリル）基並びに置換及び非置換シアノ−ピリミジニル基からなる群から独立に選択され；
Ｒ^１２は、−Ｃ（＝Ｏ）−基、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｃ−基、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｃ＝Ｃ、−Ｓ（＝Ｏ）_２−基、−Ｓ（＝Ｏ）_２−Ｃ−基、−Ｓ（＝Ｏ）_２−Ｃ＝Ｃ−基、−Ｓ（＝Ｏ）_２−Ｃ＝Ｃ−ＣＨ_３、−ＯＨ、アルコキシ基、アリールオキシ基、置換及び非置換アミジニル基、置換及び非置換グアニジニル基、置換及び非置換の第一級、第二級及び第三級アルキル基、置換及び非置換アリール基、置換及び非置換アルケニル基、置換及び非置換アルキニル基、置換及び非置換ヘテロシクリル基、置換及び非置換アミノアルキル基、置換及び非置換アルキルアミノアルキル基、置換及び非置換ジアルキルアミノアルキル基、置換及び非置換アリールアミノアルキル基、置換及び非置換ジアリールアミノアルキル基、置換及び非置換（アルキル）（アリール）アミノアルキル基、置換及び非置換ヘテロシクリルアルキル基、置換及び非置換シアノ基、置換及び非置換ピリミジニル基、置換及び非置換シアノ（アリール）基、置換及び非置換シアノ（ヘテロシクリル）基並びに置換及び非置換シアノ−ピリミジニル基からなる群から選択される）
を有し、
Ｑ^１又はＱ^２の構造は−ＣＨ_３、−ＯＨ、−Ｏ−ＣＨ_３、−Ｃ−Ｎ−Ｃ（＝Ｏ）−Ｃ＝Ｃ、−Ｃ−Ｎ−Ｃ（＝Ｏ）−Ｃ−Ｆ、

からなる群から選択される｝
を有する方法を提供する。

上記段落（すなわち、［００１９］）の全内容を以下で「ＱＸＲ３」と称する。

例示的な実施形態では、Ｒ^８の構造は、[発明の概要]において上述したグループＡの構造から選択される。例示的な実施形態では、その調節は、投与する前の対象におけるＰＳＲと比較した、対象における、全ＳＴＡＴ３に対するリン酸化ＳＴＡＴ３、全ＥＲＫ１に対するジリン酸化ＥＲＫ１、全ＥＲＫ２に対するジリン酸化ＥＲＫ２、全ＥＲＫ１に対するモノリン酸化ＥＲＫ１、全ＰＤＧＦＲに対するリン酸化ＰＤＧＦＲ、若しくは全ＡＫＴに対するリン酸化ＡＫＴ、又はその任意の組合せの低下である。例示的な実施形態では、構造１の化合物は、残基Ｔｈｒ３０８及び／又はＳｅｒ４７３でＡＫＴと相互作用する、又は構造１の化合物は、ＬＹＳ６２７、ＶＡＬ６０７、ＧＬＵ６４４、ＭＥＴ６４８、ＨＩＳ８１６、ＬＥＵ８０９、ＡＳＰ８３６、ＣＹＳ８１４、ＩＬＥ８３４、ＣＹＳ８３５、ＰＨＥ９３７、ＬＹＳ６３４、ＶＡＬ６１４、ＧＬＵ６５１、ＭＥＴ６５５、ＨＩＳ８２４、ＬＥＵ８１７、ＡＳＰ８４４、ＣＹＳ８２２、ＩＬＥ８４２、ＶＡＬ６５８、ＩＬＥ６４７、ＨＩＳ８１６、ＡＲＧ８３６、ＬＹＳ６３４、ＧＬＵ６５１、ＡＬＡ６３２、ＨＩＳ８２４、ＭＥＴ６５５、ＡＲＧ８２５、ＣＹＳ８４３、ＴＨＲ８７４、ＡＲＧ８１７、ＶＡＬ８１５、ＬＥＵ６５１、ＬＥＵ８０９、ＩＬＥ６５７、ＴＨＲ６８１、ＩＬＥ６５４、ＡＲＧ８２５、ＡＳＰ８２６、ＬＥＵ６５８、ＬＥＵ８２５、ＰＨＥ８３７、ＬＥＵ６５８、ＨＩＳ８２４、ＣＹＳ８１４、ＩＬＥ６５４、ＡＳＰ８４４、ＩＬＥ８４２及び／又はＣＹＳ８４３、又はその任意の組合せから選択されるＰＤＧＦＲ−α、ＰＤＧＦＲ−β、ＰＤＧＦＲ−αα、ＰＤＧＦＲ−ββ及び／又はＰＤＧＦＲ−αβアミノ酸の１つ又は複数と相互作用する。

いくつかの実施形態では、構造１の化合物は、[発明の概要]において上述したグループＣ構造から選択される化合物である。例示的な実施形態では、阻害は非共有結合性相互作用によって起こる。例示的な実施形態では、阻害は共有結合性相互作用によって起こる。例示的な実施形態では、ＡＫＴ、ｃ−Ｋｉｔ及び／又はＰＤＧＦＲから選択される受容体チロシンキナーゼ（ＲＴＫ）を非選択的に阻害することによって過剰増殖、新生組織形成（neoplasia）、形成不全（hypoplasia）、過形成、形成異常、化生、前進形成、線維形成、血管形成、炎症、免疫学的状態、代謝、肺機能及び心臓血管機能に関連する１つ又は複数の疾患を治療するための、構造１の化合物前記化合物の互変異性体、エナンチオマー、異性体若しくは立体異性体、前記化合物、前記化合物の互変異性体、エナンチオマー、異性体若しくは立体異性体の薬学的に許容される塩、又はその任意の混合物。ここで、構造１は以下の通りである：

｛式中、Ｘ、Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^３、Ｒ^４、Ｒ^５、Ｒ^６、Ｒ^７（並びにその中に含まれるような、Ｒ^８、Ｒ^９、Ｒ^１０、Ｒ^１１及びＲ^１２）、Ｑ^１及びＱ^２（及びその中に含まれるような、Ｑ^３）は上記の「ＸＲＱ３」から選択される｝

例示的な実施形態では、Ｒ^８の構造は、[発明の概要]で上述したグループＡ構造から選択される。いくつかの実施形態では、化合物は、[発明の概要]において上述したグループＣ構造から選択される構造である。

例示的な実施形態では、構造１の化合物を、経口、静脈内、皮下、経皮、腹腔内で、又は吸入により投与する。例示的な実施形態では、その疾患は、癌、転移性癌、ＨＩＶ、肝炎、ＰＡＨ、原発性ＰＡＨ、特発性ＰＡＨ、遺伝性ＰＡＨ、難治性ＰＡＨ、ＢＭＰＲ２、ＡＬＫ１、遺伝性出血性毛細血管拡張症に関連したエンドグリン、遺伝性出血性毛細血管拡張症に関連していないエンドグリン、薬物誘発性ＰＡＨ、及び毒素誘発性ＰＡＨ、全身性硬化症、及び混合性結合組織疾患、肺高血圧症、先天性心疾患、低酸素症、慢性溶血性貧血、新生児持続性肺高血圧症、肺静脈閉塞性疾患（ＰＶＯＤ）、肺毛細血管腫症（ＰＣＨ）、左心疾患性肺高血圧症、収縮機能障害、拡張機能障害、弁膜症、肺疾患、間質性肺疾患、肺線維症、住血吸虫症、ＣＯＰＤ、睡眠呼吸障害、肺胞低換気障害、高高度への慢性暴露、発育異常、慢性血栓塞栓性肺高血圧症（ＣＴＥＰＨ）、不明確な多因子性機序での肺高血圧症、血液学的障害、骨髄増殖障害、脾摘出術、全身性障害、サルコイドーシス、肺ランゲルハンス細胞組織球増殖症、リンパ管平滑筋腫症、神経線維腫症、代謝性障害、糖原病、ゴーシェ病、甲状腺障害、腫瘍性閉塞症、線維性縦隔炎及び透析での慢性腎不全に関連したＰＡＨからなる群から選択される。

例示的な実施形態では、その塩は、塩化物、塩酸塩、硫酸塩、リン酸塩、メシラート、ビメシラート、トシラート、乳酸塩、酒石酸塩、リンゴ酸塩、ビス酢酸塩（bis-acetate）、クエン酸塩又はビス塩酸塩（bishydrochloride salt）である。例示的な実施形態では、阻害は非共有結合性相互作用によって起こる。いくつかの実施形態では、阻害は共有結合性相互作用によって起こる。いくつかの実施形態では、構造１の化合物は、キナーゼ受容体について３００ｎＭ未満のＩＣ_５０を有する。例示的な実施形態では、その治療方法は、運動能力の改善、機能クラスの改善、息切れの減少、入院の減少、肺移植の必要性の減少、心房中隔裂開術の必要性の減少、及び寿命又は全生存期間の増大の１つ又は複数をもたらす。いくつかの実施形態では、運動能力の改善は６分間歩行距離の増大である。適切な実施形態では、機能クラスの改善は、クラスＩＶからクラスＩＩＩ、ＩＩ若しくはＩへの改善、又はクラスＩＩＩからクラスＩＩ若しくはＩへの改善、又はクラスＩＩからクラスＩへの改善である。

図１は、イマチニブ及びＰＫ１０４５３（構造２）についてのＩＣ_５０濃度を表すグラフである。図１ＡはＰＤＧＦＲαに対するイマチニブのＩＣ_５０が７１ｎＭであることを示すグラフである。図１ＢはＰＤＧＦＲαに対するＰＫ１０４５３についてのＩＣ_５０が３５ｎＭであることを示すグラフである。さらに、図１ＣはＰＤＧＦＲβについてのイマチニブのＩＣ_５０が６０７ｎＭであることを示すグラフである。図１ＤはＰＤＧＦＲβに対するＰＫ１０４５３についてのＩＣ_５０が１０．１ｎＭであることを示すグラフである。

図２は、ヒト胎児肺線維芽細胞におけるイマチニブと比較した、Ｓｅｒ４７３及びＴｈｒ３０８でのＡＫＴのＰＤＧＦＢＢ刺激リン酸化に対するＰＫ１０４５３（構造２）のより低いＩＣ_５０を実証するＩｎＣｅｌｌウェスタン（ＩＣＷ）アッセイのグラフ及び画像を示す。図２Ａ〜Ｂは、ＨＬＦにおけるそれぞれｐＡＫＴ（Ｓ４７３）及びｐＡＫＴ（Ｔ３０８）のＰＤＧＦＡＡ刺激が、同等の０．３〜０．６μＭのＩＣ_５０で、ＰＫ１０４５３（■）及びイマチニブ（▲）によって阻止されていることを示すグラフである。図２Ｃは、ｐＡＫＴ（Ｓｅｒ４７３）のＰＤＧＦＢＢ刺激が、イマチニブ（▲）についての１．８μＭと比較して、０．１３μＭのＩＣ_５０で、ＰＫ１０４５３（■）によって阻止されていることを示すグラフである。図２Ｄは、ｐＡＫＴ（Ｔｈｒ３０８）のＰＤＧＦＢＢ刺激が、イマチニブ（▲）についての３．２５μＭと比較して、０．４３μＭのＩＣ_５０で、ＰＫ１０４５３（■）によって阻止されていることを示すグラフである。図２Ｅは、ＰＤＧＦＡＡ及びＰＤＧＦＢＢ刺激ＡＫＴリン酸化のＰＫ１０４５３ｖｓ．イマチニブについてのＩＣＷの例を示す画像である。８００ｎｍのシグナルは色分けされた緑色であり、リンタンパク質特異的なシグナルを表し；７００ｎｍのシグナルは色分けされた赤色であり、全ＡＫＴからのシグナルを表す。示すように、８００と７００ｎｍのシグナルは重ね合わさっている（§ ｐ＜０．０１；^＊ｐ＜０．００１）。

図３は、ＰＫ１０４５３（構造２）及びＩＲ７８０トレーサーの吸入２ｍｉｎ後の凍結ラット肺切断片（section）（右肺上葉、中間葉及び下葉）の蛍光画像である。画像収集は、ＩＲ７８０検出のλである８００ｎｍ（緑色）で行い、７００ｎｍ（赤色）での画像収集は組織自己蛍光を表す。デジタル式ルーラー間隔を示す（１ｃｍ）。

図４は、静脈内（ＩＶ）及び吸入（ＩＮＨ）によるＰＫ１０４５３（構造２）についてのグラフデータを示す。図４Ａは、肺及び血漿におけるＩＶ投与されたＰＫ１０４５３及び関連濃度についての時間の関数としての薬物動態学的（ＰＫ）グラフである。図４Ｂは、時間当たりの肺及び血漿における、ＩＮＨ投与されたＰＫ１０４５３及び関連するレベルについてのＰＫグラフである。

図５は、ＭＣＴ及びＭＣＴ＋ＰＮモデル系における、右心室（ＲＶ）収縮期圧及びＲＶ肥大に対するＰＫ１０４５３（構造２）の効果を表すグラフである。図５Ａは、ＭＣＴモデルにおける、ＲＶ収縮期圧に対するＰＫ１０４５３の効果を示すグラフである。ここでＣ（ｎ＝３）、Ｖ（ｎ＝２）、Ｄ２（ｎ＝６）、Ｄ４（ｎ＝６）及びＤ８（ｎ＝５）は、それぞれ、対照、ビヒクル、２週間にわたる１日に３回の２ｍｉｎ暴露、４ｍｉｎ暴露及び８ｍｉｎ暴露の時間を表す。星印（^＊）はｐ＜０．００１を表し、セクション記号（§）はｐ＜０．０５を表す。図５Ｂは、ＭＣＴモデルにおける、ＲＶ肥大に対するＰＫ１０４５３の効果を示すグラフである。ここで、吸入処置はＭＣＴの投与３週間後に開始された。Ｃ、Ｄ２、Ｄ４及びＤ８は、それぞれ、対照、２週間にわたる１日に３回の２、４及び８ｍｉｎ暴露の時間を表す。星印（^＊）はｐ＜０．００１を表す。図５Ｃは、ラットＭＣＴモデルにおける、ＲＶ収縮期圧（ＲＶＳＰ）に対するＰＫ１０４５３の効果を示すグラフである；ＰＫ１０４５３とイマチニブの比較；＃ｐ＜０．０１。図５Ｄは、ＰＫ１０４５３、イマチニブ及びビヒクルのＭＣＴモデルにおける、内腔／中膜（media）比を示すグラフである：ビヒクル（Ｖ、ｎ＝４）：０．５５±０．１；ＰＫ１０４５３（Ｄ８、ｎ＝１２）：０．９４±０．０８；イマチニブ（Ｉ８、ｎ＝５）：０．９９±０．０７；§ ｐ＜０．０５、＃ｐ＜０．０１。

図６は、ラットＭＣＴ＋ＰＮモデルにおける、テレメトリー試験についてのグラフである。図６Ａは、ＰＫ１０４５３でのＭＣＴ＋ＰＮモデル系を用いて、外来患者において長期にわたって測定した肺動脈収縮期圧を示すグラフである。Ｖ（ｎ＝５）及びＤ４（ｎ＝６）は、それぞれ、ビヒクル、及びＰＫ１０４５３（構造２）への１日に３回の４ｍｉｎ暴露を表す。星印（^＊）はｐ＜０．００１を表し、セクション記号（§）はｐ＜０．０１を表す。図６Ｂは、イマチニブでＭＣＴ＋ＰＮモデル系を用いて、外来患者において長期にわたって測定した肺動脈収縮期圧を示すグラフである。Ｖ＝ビヒクル；Ｉ＝イマチニブ（ｐ＝ＮＳ）。

図７は、ラットＭＣＴ＋ＰＮモデルにおける、血行力学的及び形態計測学的分析に関するグラフを表す。図７Ａは、ＲＶ収縮期圧：Ｖ（ｎ＝９）ＲＶＳ、７５．７±７．１ｍｍＨｇ、Ｄ４グループ（ｎ＝１０）ＲＶＳ４０．４±２．７ｍｍＨｇ、Ｄ８（ｎ＝８）ＲＶＳ４３±３．０ｍｍＨｇ（ｐ＜０．００１Ｖｖｓ．Ｄ４及びＶｖｓ．Ｄ８）を示すグラフである。図７Ｂは、ＲＶ肥大が、ＰＫ１０４５３（構造２）による治療で低下していることを示すグラフである；（ＲＶ＋ＩＶＳ）／ＬＶ比：Ｖ（ｎ＝１１）；Ｄ４（ｎ＝１３）；Ｄ８（ｎ＝７）；^＊ｐ＜０．００１、§ｐ＜０．０５。図７Ｃは、ラットＭＣＴ＋ＰＮモデルで、内腔面積／中膜面積比は、ＰＫ１０４５３Ｄ４（ｎ＝６）及びビヒクル（ｎ＝６）と比較して、Ｄ８（ｎ＝５）処置グループにおいて大きいことを示すグラフである；^＊ｐ＜０．０００１Ｄ８ｖｓ．Ｖ、Ｄ８ｖｓ．Ｄ４。図７Ｄは、内腔／中膜比分析のために使用したのと同じ動物試料で実施した閉塞分析を示すグラフである。閉塞分析は、Ｄ８グループにおいて、グレード２（＞５０％の閉塞）の病変の有意な低下を示している（＃ｐ＜０．０１）。

図８は、ＰＫ１０４５３処置検体の肺細動脈肥大及び腔内細胞増殖の４０Ｘ顕微鏡画像により、ラットＭＣＴ＋ＰＮモデルでの、新生内膜の病変に対するＰＫ１０４５３（構造２）の効果を例示する図である。図８Ａは、新生内膜の病変の顕微鏡画像を示す。図８Ｂは、ＰＫ１０４５３処置された対象の画像を示す。図８Ｃは、ホスホＰＤＧＦＲβ（ｐＰＤＧＦＲβ）染色、ビヒクル処置動物の画像を示す。図８Ｄは、ＰＫ１０４５３（Ｄ８）処置動物についてのｐＰＤＧＦＲβ染色の画像を示す。

図９は、ＭＣＴ＋ＰＮモデルによって、ビヒクル（ｎ＝６）と比較して、Ｄ４（ｎ＝６）及びＤ８（ｎ＝５）処置グループが増大している内腔面積：中膜面積を示すグラフである。記号（§）はｐ＝０．０３２（Ｄ４ｖｓ．Ｖ）であり、記号（‡）はｐ＝０．０２８（Ｄ８ｖｓ．Ｄ４）であり、星印（^＊）はｐ＝０．０００１４（Ｄ８ｖｓ．Ｖ）を表す。

図１０は、ＭＣＴ＋ＰＮ試料の免疫組織化学的評価を表す図である。図１０Ａは、ビヒクル処置で、ｐＳＴＡＴ３が、内皮細胞及び血管周囲細胞の核に局在化していることを示す図である。図１０Ｂは、構造２で処置された対象からの肺ｐＳＴＡＴ３核シグナルを示す図である。

図１１は、グレード０、１及び２の病変での肺細動脈における新生内膜及び増殖性の病変を含む内皮及び筋線維芽細胞の混合集団（mixed population）を示す、免疫組織化学的に染色したαＳＭＣアクチン、トリクローム及びｖＷＦ染色についての４０Ｘでのビヒクル処置動物（ＭＣＴ＋ＰＮモデル）に関する図である。グレード０の病変は、早期腔内内皮細胞増殖、及び中膜における血管平滑筋細胞の存在によって特徴付けられた（図１１Ａ、αＳＭＣ染色；図１１Ｄ、トリクローム；図１１Ｇ、ｖＷＦ）。グレード１〜２の病変は、広範囲に及ぶ腔内筋線維芽様細胞、いくらかの内皮細胞、及び中膜層の部分線維症を有している（図１１Ｂ、αＳＭＣ；図１１Ｅ、トリクローム；図１１Ｈ．ｖＷＦ）。進行したグレード２の病変は、広範囲に及ぶ腔内筋線維芽細胞様及び内皮細胞増殖並びに中膜層の完全な線維性置換によって特徴付けられている（図１１Ｃ、αＳＭＣ；図１１Ｆ、トリクローム；図１１Ｉ．ｖＷＦ）。長い矢印は、増殖性病変を有する腔内空間を示し、短い矢印は肺細動脈の中膜層を示す。

図１２は、ラットＭＣＴ＋ＰＮモデルにおける４０ＸＰＤＧＦＲシグナル伝達を示す図である。図１２Ａ〜Ｆは、肺細動脈（Ａ）；ＰＤＧＦＢＢ（Ｂ）；全ＰＤＧＦＲα（Ｃ）；全ＰＤＧＦＲβ（Ｄ）；ホスホＰＤＧＦＲα（ｐＰＤＧＦＲα；Ｅ）；及びｐＰＤＧＦＲβ（Ｆ）におけるＰＤＧＦＡＡを示す図である。シグナル強度は、ＰＤＧＦＡＡ、ＰＤＧＦＲα及びｐＰＤＧＦＲαと比較して、ＰＤＧＦＢＢ、ＰＤＧＦＲβ、特にｐＰＤＧＦＲβについてより大きかった。ｐＰＤＧＦＲβシグナルは、新生内膜増殖性及び血管周囲の病変における、敷石状パターンにおいて強かった。シグナル強度は、血管中膜層において相対的に低かった。矢印は、増殖性病変を有する血管腔を示す（スライドはビヒクル処置からのものである）。

図１３は、ラットＭＣＴ＋ＰＮモデル系を用いた、より大きい肺細動脈におけるｐＰＤＧＦＲαとｐＰＤＧＦＲβの比較を示す図である。図１３Ａ及び図１３Ｂは、それぞれ、中膜におけるｐＰＤＧＦＲαシグナルについての２０Ｘ及び４０Ｘの免疫組織化学を示し、矢印は、ｐＰＤＧＦＲα陽性である平滑筋細胞を示す。図１３Ｃ及びＤは、上記とは対照的に、ｐＰＤＧＦＲβについて中膜におけるシグナルがほとんどなかった２０Ｘ及び４０Ｘ画像をそれぞれ示す。ｐＰＤＧＦＲβについてのシグナルは、血管周囲細胞（左上−図１３Ｃ及びＤ）及び内皮細胞において顕著である。

図１４は、ＭＣＴ＋ＰＮモデルのために示されたＮａｎｏＰｒｏ免疫アッセイを示す図である。図１４Ａは、ビヒクル処置でのｐＡＫＴ（Ｔｈｒ３０８）及び全ＡＫＴを示す図である。図１４Ｂは、ＰＫ１０４５３処置でのｐＡＫＴ（Ｔｈｒ３０８）及び全ＡＫＴを示す図である。図１４Ｃは、ビヒクル処置でのｐＡＫＴ（Ｓｅｒ４７３）及び全ＡＫＴを示す図である。図１４Ｄは、ＰＫ１０４５３処置でのｐＡＫＴ（Ｓｅｒ４７３）及び全ＡＫＴを示す図である。図１４Ｅは、肺抽出物におけるｐＡＫＴ（Ｔｈｒ３０８）／ＡＫＴ比が、グループ間で有意差がないことを示すグラフである（Ｖ＝ビヒクル；Ｄ４＝４分間暴露３Ｘ／日で２週間、Ｄ８＝８分間暴露３Ｘ／日で２週間、ｐ＝ＮＳ）。図１４Ｆは、Ｄ８グループｖｓ．ビヒクルについて、肺抽出物におけるｐＡＫＴ（Ｓｅｒ４７３）／ＡＫＴ比を表すグラフである（Ｖ、ｎ＝５；Ｄ４、ｎ＝４；Ｄ８、ｎ＝５）§ｐ＜０．０５Ｄ８ｖｓ．Ｖ。

図１５は、ＭＣＴ＋ＰＮモデルにおける、ｐＳＴＡＴ３及びＳＴＡＴ３についてのＮａｎｏＰｒｏ免疫アッセイｌｕｍｏｇｒａｍを用いた実験による結果を示す図である。図１５Ａは、ビヒクル処置された対象のグラフである。図１５Ｂは、ＰＫ１０４５３（構造２）処置された対象のグラフである。図１５Ｃは、ＭＣＴ＋ＰＮモデル（ｎ＝４）を用いて、対象の肺においてｐＳＴＡＴ３／ＳＴＡＴ３を減少させたＰＫ１０４５３処置のグラフである。ここで、Ｖはビヒクルを表し、Ｄ４は１日に３回の４ｍｉｎの暴露時間を表し、Ｄ８は２週間にわたる１日に３回の８ｍｉｎの暴露時間を表す；２週間３ｘ／日ＰＫ１０４５３。星印（^＊）ｐ＝０．００９及びセクション記号（§）はｐ＝０．０２４を表す。

図１６は、ＭＣＴ＋ＰＮモデルにおいて、ホスホＥＲＫ１／２（ｐＥＲＫ１／２）及び全ＥＲＫ１／２について、Ｎａｎｏｐｒｏ免疫アッセイｌｕｍｏｇｒａｍを用いた実験による結果を示す図である。図１６Ａは、ビヒクル処置された対象におけるｐＥＲＫ１／２を示す図である。図１６Ｂは、ＰＫ１０４５３処置された対象におけるｐＥＲＫ１／２を示す図である。図１６Ｃは、ビヒクル処置された対象における全ＥＲＫ１／２を示す図である。図１６Ｄは、ＰＫ１０４５３処置された対象における全ＥＲＫ１／２を示す図である。ここでＰＫ１０４５３はｐｐＥＲＫ１／ＥＲＫ１を減少させている。図１６Ｅは、表示したような対象におけるｐｐＥＲＫ１／ＥＲＫ１を示すグラフである。図１６Ｆは、表示したようなｐＥＲＫ２／ＥＲＫ２を示すグラフである。図１６Ｇは、肺における、表示したようなｐｐＥＲＫ２／ＥＲＫ２を示すグラフである。図１６Ｈは、肺における、表示したようなｐＥＲＫ２／ＥＲＫ２を示すグラフである。各グループについてｎ＝４であり、Ｖはビヒクルを表す。Ｄ４は、４ｍｉｎ暴露時間、１日に３回を表し、Ｄ８は、２週間にわたる１日に３回のＰＫ１０４５３（構造２）の８ｍｉｎ暴露時間を表す。星印（^＊）ｐ≦０．０００５；§ ｐ＝０．０４５。

図１７は、ヒト胎児肺線維芽細胞における、ＥＲＫ１及びＥＲＫ２のＰＤＧＦＡＡｖｓ．ＰＤＧＦＢＢ刺激リン酸化についてのイマチニブ、ＰＫ１０４５３（構造２）及びＰＫ１０５７１（構造２ａ）の効果を示すグラフ表示である。図１７Ａ〜Ｄを参照されたい。

図１８Ａ〜Ｄは、ＰＫ化合物：ＰＫ１０４５３（構造２）、ＰＫ１０４６７（構造３）、ＰＫ１０４６８（構造４）、ＰＫ１０５６９（構造５）及びＰＫ１０５７１（構造２ａ）のグラフ表示である。これは、イマチニブと比較して、すべてのＰＫ化合物が、ヒト胎児肺線維芽細胞においてＰＤＧＦＢＢ刺激ＡＫＴリン酸化を阻害するのに、より低いＩＣ_５０濃度を有していることを示している。

図１９は、ビヒクル投与された対象及びＰＫ１０４５３（構造２）処置された対象における対象体重のグラフ表示である。四角印はビヒクル処置されたもの（ｎ＝１０）を表し、三角印はＰＫ１０４５３Ｄ４グループ（ｎ＝１０）を表し、菱形はＰＫ１０４５３Ｄ８グループ（ｎ＝６）を表す。

図２０は、ビヒクル（ｎ＝３）又はＰＫ１０４５３（ｎ＝３）で処置された携行式ＭＣＴ暴露対象において、全身血圧を７日間監視するために腹大動脈中に埋め込まれた送信機からのＰＡＣ４０テレメトリー送信データを表すグラフである。

本開示は、とりわけ、キナーゼ阻害剤として機能する新規なクラスの化合物に関する。同様に、疾患状態の防止又は治療においてそうした化合物を使用する方法を本明細書で開示する。本開示は、さらに、キナーゼ阻害剤を必要とする対象、例えば、以下でさらに詳細に説明するような血管疾患、増殖性障害、癌及び関連する疾患又は状態に苦しむ患者のための予防及び／又は治療指標を有する化合物の医薬処方物に関する。本明細書において使用する具体的な用語の定義を以下で示す。別段の定義のない限り、本明細書で使用するすべての技術的及び科学的用語は一般に、本発明が属する技術分野の技術者によって通常理解されているのと同じ意味を有するものとする。

本明細書及び添付の特許請求の範囲において使用されるように、単数形「ａ」、「ａｎ」及び「ｔｈｅ」は、文脈により明らかな指定のない限り、複数の指示対象を含む。例えば、「アミノ酸（an amino acid）」への参照は、２つ以上の核酸の組合せを含む等である。さらに、本明細書で使用するように、以下の略語は以下に詳述するように特定の意味を有する。

本明細書で使用するように、「約（about）」は当業者によって理解されており、それが使用される文脈によってある程度変動することになる。当業者に明確でない用語が使用されている場合、それが使用されている文脈を前提として、「約（about）」は、挙げられている値の最大でプラス又はマイナス１０％を意味するものとする。

本明細書で使用するように、以下のＰＫ化合物及び構造表示は本出願を通して互換的に使用される：ＰＫ１０４５３＝構造２；ＰＫ１０５７１＝構造２ａ；ＰＫ１０４６７＝構造３；ＰＫ１０４６８＝構造４；及びＰＫ１０５６９＝構造５。

本明細書で使用するように、薬剤又は薬物、例えば１つ若しくは複数のキナーゼ阻害剤化合物の対象（単数又は複数）への「投与（administration）」は、その目的とする機能を実行するために化合物を対象へ導入又は送達する任意の経路を含む。投与は、経口、鼻腔内、吸入、非経口（静脈内、筋肉内、腹腔内又は皮下）、経直腸又は局所を含む適切な任意の経路で実施することができる。投与は自己投与及び他の人による投与を含む。説明されるような医学的状態の治療又は防止の様々な方式は、完全な治療又は防止を含むが、また、完全に達しない治療又は防止も含み、そこである種の生物学的又は医学的に関連する結果が達成される「実質的である（substantial）」ことを意味するものであることも理解すべきである。

本明細書で使用するように、２つ以上の試料、治療への応答又は薬物を比較する関連で、「比較可能な（comparable）」又は「対応する（corresponding）」という用語は、比較において使用される同じタイプの試料、応答、治療及び薬物をそれぞれ指す。例えば、試料におけるＡＫＴ（ｐＡＫＴ）のリン酸化の状態又はレベルを、別の試料におけるリン酸化の状態又はレベルと比較することができる。いくつかの実施形態では、比較可能な試料を、同じ個体から異なる時間で得ることができる。他の実施形態では、比較可能な試料を、異なる個体、例えば患者及び健常者から得ることができる。一般に、比較可能な試料は、管理目的のため共通因子で正規化される。

本明細書で使用するように、「組成物」という用語は、指定された構成要素を指定された量で有する生成物、並びに指定された量での指定された構成要素の組合せから直接的又は間接的にもたらされる任意の生成物を指す。

本明細書で使用するように、「薬物」、「化合物」、「活性薬剤」、「薬剤」、「活性物質（actives）」、「医薬組成物」、「医薬処方物」及び「薬理学的に活性な薬剤」という用語は、互換的に使用され、これは、投与するのに適しており、疾患又は異常な生理学的状態の治療において有益な生物学的効果、適切には治療効果を有しているが、その効果は本来、予防的であってもよい、荷電するか又は荷電していない任意の化学化合物、複合体又は組成物を指す。これらの用語は、これらに限定されないが、塩、エステル、アミド、プロドラッグ、活性代謝産物、類似体などを含む、本明細書で具体的に挙げるそれらの活性薬剤の薬学的に許容される薬理学的に活性な誘導体も包含する。「活性薬剤」、「薬理学的に活性な薬剤」及び「ＡＰＩ」（活性な薬学的構成要素）という用語が使用される場合、又は特定の活性薬剤が具体的に特定されている場合、出願者が、活性薬剤それ自体、並びに薬学的に許容される、薬理学的に活性な塩、エステル、アミド、プロドラッグ、代謝産物、類似体等を含むことを意図しているものと理解すべきである。

本明細書で使用するように、組成物の「有効量」、「薬剤有効量」又は「治療有効量」という用語は、所望の治療及び／又は予防的効果を達成するのに十分な量、例えば、治療を受けている疾患に関連する症状の防止又はその減少をもたらす量である。対象へ投与される本発明の組成物の量は、疾患の種類及び重症度、並びに全体的な健康、年齢、性別、体重及び薬物への耐性などの個体の特徴に依存することになる。疾患の程度、重症度及び種類にも依存することになる。当業者は、上記及び他の因子に依存する適切な投薬量を決定することができよう。本発明の組成物は、１つ又は複数の追加の治療化合物と併用して投与することもできる。

本明細書で使用するように、キナーゼ阻害剤に関する場合、「不可逆的な（irreversible）」又は「不可逆的に（irreversibly）」という用語は、そうしたキナーゼと共有結合的に、すなわち、恒久的に結合又は会合しているキナーゼ、チロシンキナーゼ及び／又はＲＴＫの活性の阻害剤を意味する。

本明細書で使用するように、「新生物疾患（neoplastic disease）」という用語は、任意の種類及び由来の癌並びにその前駆体段階を指す。したがって、「新生物疾患」という用語は、「新生組織形成」、「新生物」、「癌」、「前癌」又は「腫瘍」という用語によって特定される対象物を含む。新生物疾患は一般に、異常なレベルの特定の細胞集団をもたらす異常な細胞分裂によって明らかになる。同様に、内皮細胞の単クローン性増殖（monoclonal expansion）は肺細動脈内皮細胞の「新生物」を指すことができるので、ＰＡＨもやはり、上記用語に包含される。さらに、新生物疾患の基礎をなす異常な細胞分裂は一般に、細胞に固有のものであり、感染症又は炎症への正常な生理学的応答ではない。いくつかの実施形態では、本明細書で提供する方法を用いて新生物疾患と診断されるものには癌腫が含まれる。

本明細書で使用するように、キナーゼ阻害剤又は受容体キナーゼ阻害剤に関して、「非選択的」という用語は、単一のキナーゼ、受容体、チロシンキナーゼ、ＲＴＫ又はドメイン、すなわち同族標的に対してだけ特異的であるわけではないが、例えばＰＤＧＦＲについて、単一のキナーゼ、受容体、チロシンキナーゼ、ＲＴＫ、ドメイン等を阻害するという文脈の範囲内で、その阻害剤が、そのキナーゼ、受容体、チロシンキナーゼ、ＲＴＫ、ドメイン等についての親和力及び／又はＩＣ_５０濃度に関して非特異的である、キナーゼ、チロシンキナーゼ、ドメイン及び／又はＲＴＫの活性の阻害剤を意味する。例えば、ＰＫ１０４５３（構造２）は、ＰＤＧＦＲ−βアイソフォームとＰＤＧＦＲ−αアイソフォームの両方を阻害することによってＰＤＧＦＲを非選択的に標的とするが、それでもなお、受容体アイソフォーム、例えばＰＤＧＦＲ−βについてより低いＩＣ_５０をもつことができる。

本明細書で使用するように、「薬学的に許容される塩」という用語は、無機塩基、有機塩基、無機酸、有機酸又は塩基性若しくは酸性のアミノ酸との塩を含む。無機塩基の塩として、本発明は、例えば、ナトリウム又はカリウムなどのアルカリ金属；カルシウム及びマグネシウムなどのアルカリ土類金属又はアルミニウム；及びアンモニアを含む。有機塩基の塩として、本発明は、例えばトリメチルアミン、トリエチルアミン、ピリジン、ピコリン、エタノールアミン、ジエタノールアミン及びトリエタノールアミンを含む。無機酸の塩として、本発明は、例えば塩酸、ヒドロホウ酸（hydroboric acid）、硝酸、硫酸及びリン酸を含む。有機酸の塩として、本発明は、例えばギ酸、酢酸、トリフルオロ酢酸、フマル酸、シュウ酸、酒石酸、マレイン酸、乳酸、クエン酸、コハク酸、リンゴ酸、メタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸及びｐ−トルエンスルホン酸を含む。塩基性アミノ酸の塩として、本発明は、例えばアルギニン、リシン及びオルニチンを含む。酸性アミノ酸には、例えばアスパラギン酸及びグルタミン酸が含まれる。

本明細書で使用するように、「参照レベル」という用語は、比較目的で着目し得る物質のレベルを指す。いくつかの実施形態では、参照レベルは、対照とする対象（control subject）から取った試料からの用量レベルの平均値としての指定された組成物投薬量であってよい。他の実施形態では、参照レベルは、異なる時間、例えば２、４、６、８及び１０分間（ｍｉｎ）等でのレベルなどの投与の時間過程での同じ対象におけるレベルであってよい。

本明細書で使用するように、「治療すること（treating）」又は「治療（treatment）」又は「緩和（alleviation）」という用語は、治療処置と、その目的が、標的とされる病理学的状態又は障害を防止する又はそれをスローダウン（低下）させることである予防的又は防止的手段の両方を指す。本発明の方法による治療剤を施された後、その対象が、特定の疾患又は状態の１つ又は複数の兆候又は症状の観察可能な及び／又は測定可能な減少を示す、又はその兆候又は症状が無くなっている場合、対象は、疾患について首尾よく「治療されている」。

本明細書で使用するように、「非置換アルキル」という用語は、ヘテロ原子を含まないアルキル基を指す。したがって、この語句は、例えばメチル、エチル、プロピル、ブチル、ペンチル、ヘキシル、ヘプチル、オクチル、ノニル、デシル、ウンデシル、ドデシルなどの直鎖状アルキル基を含む。この語句は、これらに限定されないが、例として挙げられる以下のもの：−ＣＨ（ＣＨ_３）_２、−ＣＨ（ＣＨ_３）（ＣＨ_２ＣＨ_３）、−ＣＨ（ＣＨ_２ＣＨ_３）_２、−Ｃ（ＣＨ_３）_３、−Ｃ（ＣＨ_２ＣＨ_３）_３、−ＣＨ_２ＣＨ（ＣＨ_３）_２、−ＣＨ_２ＣＨ（ＣＨ_３）（ＣＨ_２ＣＨ_３）、−ＣＨ_２ＣＨ（ＣＨ_２ＣＨ_３）_２、−ＣＨ_２Ｃ（ＣＨ_３）_３、−ＣＨ_２Ｃ（ＣＨ_２ＣＨ_３）_３、−ＣＨ（ＣＨ_３）ＣＨ（ＣＨ_３）（ＣＨ_２ＣＨ_３）、−ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ（ＣＨ_３）_２、−ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ（ＣＨ_３）（ＣＨ_２ＣＨ_３）、−ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ（ＣＨ_２ＣＨ_３）_２、−ＣＨ_２ＣＨ_２Ｃ（ＣＨ_３）_３、−ＣＨ_２ＣＨ_２Ｃ（ＣＨ_２ＣＨ_３）_３、−ＣＨ（ＣＨ_３）ＣＨ_２ＣＨ（ＣＨ_３）_２、−ＣＨ（ＣＨ_３）ＣＨ（ＣＨ_３）ＣＨ（ＣＨ_３）_２、−ＣＨ（ＣＨ_２ＣＨ_３）ＣＨ（ＣＨ_３）ＣＨ（ＣＨ_３）（ＣＨ_２ＣＨ_３）などを含む直鎖状アルキル基の分枝鎖状異性体も含む。この語句は、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチル及びシクロオクチルなどのシクロアルキル基などの環状アルキル基も含み、そうした環は、上記に定義したような直鎖状及び分枝鎖状アルキル基で置換されている。この語句は、これらに限定されないが、アダマンチル、ノルボルニル及びビシクロ［２．２．２］オクチルなどの多環式アルキル基も含み、そうした環は、上記に定義したような直鎖状及び分枝鎖状アルキル基で置換されている。したがって、非置換アルキル基という語句は、第一級アルキル基、第二級アルキル基及び第三級アルキル基を含む。非置換アルキル基は、親化合物中の１個又は複数の炭素原子（単数又は複数）、酸素原子（単数又は複数）、窒素原子（単数又は複数）及び／又は硫黄原子（単数又は複数）と結合していてよい。好ましい非置換アルキル基には、１〜２０個の炭素原子を有する直鎖状及び分枝鎖状アルキル基並びに環状アルキル基が含まれる。そうした非置換アルキル基は１〜１０個の炭素原子を有することがより好ましいが、そうした基は１〜５個の炭素原子を有することがさらに好ましい。いくつかの実施形態では、非置換アルキル基は、１〜３個の炭素原子を有する直鎖状及び分枝鎖状アルキル基を含み、メチル、エチル、プロピル及び−ＣＨ（ＣＨ_３）_２を含む。

本明細書で使用するように、「置換アルキル」という用語は、その中の炭素（単数又は複数）又は水素（単数又は複数）との１つ又は複数の結合が、これらに限定されないが、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ及びＩなどのハライド中のハロゲン原子；ヒドロキシル基、アルコキシ基、アリールオキシ基及びエステルなどの基の中の酸素原子；チオール基、アルキル及びアリールスルフィド基、スルホン基、スルホニル基、及びスルホキシド基などの基の中の硫黄原子；アミン、アミド、アルキルアミン、ジアルキルアミン、アリールアミン、アルキルアリールアミン、ジアリールアミン、Ｎ−オキシド、イミド及びエナミンなどの基の中の窒素原子；トリアルキルシリル基、ジアルキルアリールシリル基、アルキルジアリールシリル基及びトリアリールシリル基中などの基の中のケイ素原子；及び種々の他の基の中の他のヘテロ原子などの、非水素及び非炭素原子との結合によって置き換えられている上記に定義したような非置換アルキル基を指す。置換アルキル基は、その中の炭素（単数又は複数）又は水素原子（単数又は複数）との１つ又は複数の結合が、カルボニル、カルボキシル及びエステル基の中の酸素；イミン、オキシム、ヒドラゾン及びニトリルなどの基の中の窒素などのヘテロ原子との結合によって置き換えられている基も含む。適切な実施形態では、置換アルキル基には、とりわけ、その中の炭素又は水素原子との１つ又は複数の結合が、フッ素原子との１つ又は複数の結合によって置き換えられているアルキル基が含まれる。置換アルキル基の一例は、トリフルオロメチル基、及びトリフルオロメチル基を含む他のアルキル基である。他のアルキル基には、その中の炭素又は水素原子との１つ又は複数の結合が、酸素原子との結合によって置き換えられており、その結果その置換アルキル基には、ヒドロキシル、アルコキシ、アリールオキシ基又はヘテロシクリルオキシ基を含むものが含まれる。さらに他のアルキル基には、アミン、アルキルアミン、ジアルキルアミン、アリールアミン、（アルキル）（アリール）アミン、ジアリールアミン、ヘテロシクリルアミン、（アルキル）（ヘテロシクリル）アミン、（アリール）（ヘテロシクリル）アミン又はジヘテロシクリルアミン基を有するアルキル基が含まれる。

本明細書で使用するように、「非置換アリール」という用語は、ヘテロ原子を含まないアリール基を指す。したがって、この用語には例として、これらに限定されないが、例えばフェニル、ビフェニル、アントラセニル、ナフテニルなどの基が含まれる。この語句「非置換アリール」は、ナフタレンなどの縮合環を含む基を含むが、トリルなどのアリール基は本明細書では以下で説明するような置換アリール基であると考えるので、これは、その環員の１つと結合しているアルキル又はハロ基などの他の基を有するアリール基は含まない。非置換アリール基は、１個又は複数の炭素、酸素、窒素及び／又は硫黄原子と結合していてよい。

本明細書で使用するように、「置換アリール基」という用語は、非置換アリール基に関して、置換アルキル基が非置換アルキル基に関してもつのと同じ意味を有する。しかし、置換アリール基は、芳香族炭素の１つが上記の非炭素又は非水素原子の１つと結合しているアリール基も含み、また、そのアリール基の１つ又は複数の芳香族炭素が本明細書で定義するような置換及び／又は非置換アルキル、アルケニル又はアルキニル基と結合しているアリール基も含む。これは、アリール基の２個の炭素原子がアルキル、アルケニル又はアルキニル基の２個の原子と結合して縮合環系（例えば、ジヒドロナフチル又はテトラヒドロナフチル）を定義している結合配置を含む。したがって、「置換アリール」という用語は、これらに限定されないが、とりわけ、トリル及びヒドロキシフェニルを含む。

本明細書で使用するように、「非置換アルケニル」という用語は、２個の炭素原子の間に少なくとも１つの二重結合が存在することを除いて、上記に定義したような非置換アルキル基に関して説明したようなものなどの直鎖状及び分枝鎖状並びに環状の基を指す。非限定的な例には、とりわけ、ビニル、−ＣＨ＝Ｃ（Ｈ）（ＣＨ_３）、−ＣＨ＝Ｃ（ＣＨ_３）_２、−Ｃ（ＣＨ_３）＝Ｃ（Ｈ）_２、−Ｃ（ＣＨ_３）＝Ｃ（Ｈ）（ＣＨ_３）、−Ｃ（ＣＨ_２ＣＨ_３）＝ＣＨ_２、シクロヘキセニル、シクロペンテニル、シクロヘキサジエニル、ブタジエニル、ペンタジエニル及びヘキサジエニルが含まれる。

本明細書で使用するように、「置換アルケニル」という用語は、非置換アルケニル基に関して、置換アルキル基が非置換アルキル基に関してもつのと同じ意味を有する。置換アルケニル基には、非炭素又は非水素原子が、別の炭素と二重結合した炭素と結合しているアルケニル基、及びその非炭素／非水素原子の１つが炭素二重結合中に含まれていない炭素と結合しているものが含まれる。

本明細書で使用するように、「非置換アルキニル」という用語は、２個の炭素原子の間に少なくとも１つの三重結合が存在することを除いて、上記に定義したような非置換アルキル基に関して説明したものなどの直鎖状及び分枝鎖状基を指す。その例には、これらに限定されないが、とりわけ、−Ｃ≡Ｃ（Ｈ）、−Ｃ≡Ｃ（ＣＨ_３）、−Ｃ≡Ｃ（ＣＨ_２ＣＨ_３）、−Ｃ（Ｈ_２）Ｃ≡Ｃ（Ｈ）、−Ｃ（Ｈ）_２Ｃ≡Ｃ（ＣＨ_３）及び−Ｃ（Ｈ）_２Ｃ≡Ｃ（ＣＨ_２ＣＨ_３）が含まれる。

本明細書で使用するように、「置換アルキニル」という用語は、非置換アルキニル基に関して、置換アルキル基が非置換アルキル基に関してもつのと同じ意味を有する。置換アルキニル基には、非炭素又は非水素原子が、別の炭素と三重結合した炭素と結合しているアルキニル基、及び非炭素又は非水素原子が、炭素三重結合中に含まれていない炭素と結合しているものが含まれる。

本明細書で使用するように、「非置換アラルキル」という用語は、その非置換アルキル基の水素又は炭素結合が上記に定義したようなアリール基との結合で置き換えられている上記に定義したような非置換アルキル基を指す。例えば、メチル（−ＣＨ_３）は非置換アルキル基である。メチルの炭素がベンゼンの炭素と結合している場合などのように、メチル基の水素原子がフェニル基との結合で置き換えられている場合、その化合物は、非置換アラルキル基、すなわちベンジル基である。したがって、この用語には、これらに限定されないが、とりわけ、ベンジル、ジフェニルメチル及び１−フェニルエチル（−ＣＨ（Ｃ_６Ｈ_５）（ＣＨ_３））などの基が含まれる。

本明細書で使用するように、「置換アラルキル」という用語は、非置換アラルキル基に関して、置換アリール基が非置換アリール基に関してもつのと同じ意味を有する。しかし、置換アラルキル基は、その基のアルキル部の炭素又は水素結合が非炭素又は非水素原子との結合で置き換えられている基も含む。置換アラルキル基の非限定的な例には、とりわけ、−ＣＨ_２Ｃ（＝Ｏ）（Ｃ_６Ｈ_５）及び−ＣＨ_２（２−メチルフェニル）が含まれる。

本明細書で使用するように、「非置換ヘテロシクリル」という用語は、単環式、二環式及び多環式環化合物、例えば、そのうちの１つ又は複数が、これらに限定されないがＮ、Ｏ及びＳなどのヘテロ原子である３つ以上の環員を含むキヌクリジル（これに限定されない）を含む芳香族環化合物と非芳香族環化合物の両方を指す。ヘテロシクリル基の例には、これらに限定されないが：１〜４個の窒素原子を含む不飽和３〜８員環、例えばこれらに限定されないが、ピロリル、ピロリニル、イミダゾリル、ピラゾリル、ピリジニル、ジヒドロピリジニル、ピリミジル、ピラジニル、ピリダジニル、トリアゾリル、例えば４Ｈ−１，２，４−トリアゾリル、１Ｈ−１，２，３−トリアゾリル、２Ｈ−１，２，３−トリアゾリル等、テトラゾリル、例えば１Ｈ−テトラゾリル、２Ｈテトラゾリル等）；１〜４個の窒素原子を含む飽和３〜８員環、例えばこれらに限定されないが、ピロリジニル、イミダゾリジニル、ピペリジニル、ピペラジニル；１〜４個の窒素原子を含む縮合不飽和複素環式基、例えばこれらに限定されないが、インドリル、イソインドリル、インドリニル、インドリジニル、ベンズイミダゾリル、キノリル、イソキノリル、インダゾリル、ベンゾトリアゾリル；１〜２個の酸素原子及び１〜３個の窒素原子を含む不飽和３〜８員環、例えばこれらに限定されないが、オキサゾリル、イソオキサゾリル、オキサジアゾリル、例えば１，２，４−オキサジアゾリル、１，３，４−オキサジアゾリル、１，２，５−オキサジアゾリル等；１〜２個の酸素原子及び１〜３個の窒素原子を含む飽和３〜８員環、例えばこれに限定されないがモルホリニル；１〜２個の酸素原子及び１〜３個の窒素原子を含む不飽和縮合複素環式基、例えばベンゾオキサゾリル、ベンゾオキサジアゾリル、ベンゾオキサジニル、例えば２Ｈ−１，４−ベンゾオキサジニル等）；１〜３個の硫黄原子及び１〜３個の窒素原子を含む不飽和３〜８員環、例えばこれらに限定されないが、チアゾリル、イソチアゾリル、チアジアゾリル、例えば１，２，３−チアジアゾリル、１，２，４−チアジアゾリル、１，３，４−チアジアゾリル、１，２，５−チアジアゾリル等；１〜２個の硫黄原子及び１〜３個の窒素原子を含む飽和３〜８員環、例えばこれに限定されないがチアゾロジニル；１〜２個の硫黄原子を含む飽和及び不飽和３〜８員環、例えばこれらに限定されないが、チエニル、ジヒドロジチイニル、ジヒドロジチオニル、テトラヒドロチオフェン、テトラヒドロチオピラン；１〜２個の硫黄原子及び１〜３個の窒素原子を含む不飽和縮合複素環式環、例えばこれらに限定されないが、ベンゾチアゾリル、ベンゾチアジアゾリル、ベンゾチアジニル（例えば、２Ｈ−１，４−ベンゾチアジニル等）、ジヒドロベンゾチアジニル、例えば２Ｈ−３，４−ジヒドロベンゾチアジニル等、酸素原子を含む不飽和３〜８員環、例えばこれに限定されないがフリル；１〜２個の酸素原子を含む不飽和縮合複素環式環、例えばベンゾジオキソリル、例えば１，３−ベンゾジオキソイル等；酸素原子及び１〜２個の硫黄原子を含む不飽和３〜８員環、例えばこれに限定されないがジヒドロオキサチイニル；１〜２個の酸素原子及び１〜２個の硫黄原子を含む飽和３〜８員環、例えば１，４−オキサチアン；１〜２個の硫黄原子を含む不飽和縮合環、例えばベンゾチエニル、ベンゾジチイニル；並びに酸素原子及び１〜２個の酸素原子を含む不飽和縮合複素環式環、例えばベンズオキサチイニルが含まれる。ヘテロシクリル基には、その環中の１個又は複数のＳ原子が１個又は２個の酸素原子と二重結合している上記のもの（スルホキシド及びスルホン）も含まれる。例えば、ヘテロシクリル基には、テトラヒドロチオフェンオキシド及びテトラヒドロチオフェン１，１−ジオキシドが含まれる。好ましいヘテロシクリル基は５又は６環員を含む。より好ましいヘテロシクリル基は、モルホリン、ピペラジン、ピペリジン、ピロリジン、イミダゾール、ピラゾール、１，２，３−トリアゾール、１，２，４−トリアゾール、テトラゾール、チオフェン、チオモルホリン、チオモルホリンのＳ原子が１個又は複数のＯ原子と結合しているチオモルホリン、ピロール、ホモピペラジン、オキサゾリジン−２−オン、ピロリジン−２−オン、オキサゾール、キヌクリジン、チアゾール、イソオキサゾール、フラン及びテトラヒドロフランを含む。

本明細書で使用するように、「置換ヘテロシクリル」という用語は、環員の１つ又は複数が、置換アルキル基及び置換アリール基に関して上記したものなどの非水素原子と結合している上記に定義したような非置換ヘテロシクリル基を指す。その例には、これらに限定されないが、２−メチルベンズイミダゾリル、５−メチルベンズイミダゾリル、５−クロロベンズチアゾリル、Ｎ−アルキルピペラジニル基、例えばとりわけ、１−メチルピペラジニル、ピペラジン−Ｎ−オキシド、Ｎ−アルキルピペラジン−Ｎ−オキシド、２−フェノキシ−チオフェン及び２−クロロピリジニルが含まれる。さらに、置換ヘテロシクリル基には、非水素原子との結合が置換及び非置換アリール、置換及び非置換アラルキル又は非置換ヘテロシクリル基の一部である炭素原子との結合であるヘテロシクリル基も含まれる。その例には、これらに限定されないが、１−ベンジルピペリジニル、３−フェニルチオモルホリニル、３−（ピロリジン−１−イル）−ピロリジニル及び４−（ピペリジン−１−イル）−ピペリジニルが含まれる。Ｎ−アルキル置換ピペラジン基、例えばＮ−メチルピペラジン、置換モルホリン基及びピペラジンＮ−オキシド基、例えばピペラジンＮ−オキシド及びＮ−アルキルピペラジンＮ−オキシドなどの基は、いくつかの置換ヘテロシクリル基の例である。置換ピペラジン基、例えばＮ−アルキル置換ピペラジン基、例えばＮ−メチルピペラジンなど、置換モルホリン基及びＮ−オキシド基などの基は、種々の「Ｒ」基に適したいくつかの置換ヘテロシクリル基の例である。

本明細書で使用するように、「非置換ヘテロシクリルアルキル」という用語は、その非置換アルキル基の水素又は炭素結合が、上記に定義したようなヘテロシクリル基との結合で置き換えられている上記に定義したような非置換アルキル基を指す。例えば、メチル（−ＣＨ_３）は１つの非置換アルキル基である。そのメチルの炭素がピリジンの炭素２（ピリジンのＮと結合している炭素の１つ）又はピリジンの炭素３若しくは４と結合している場合などのように、メチル基の水素原子がヘテロシクリル基との結合で置き換えられている場合、その化合物は非置換ヘテロシクリルアルキル基である。

本明細書で使用するように、「置換ヘテロシクリルアルキル」という用語は、非置換ヘテロシクリルアルキル基に関して、置換アラルキル基が非置換アラルキル基に関してもつのと同じ意味を有する。しかし、置換ヘテロシクリルアルキル基は、非水素原子が、ヘテロシクリルアルキル基のヘテロシクリル基中のヘテロ原子、例えばこれに限定されないがピペリジニルアルキル基のピペリジン環中の窒素原子と結合している基も含む。さらに、置換ヘテロシクリルアルキル基は、その基のアルキル部の炭素結合又は水素結合が置換及び非置換アリール又は置換及び非置換アラルキル基との結合で置き換えられている基も含む。

本明細書で使用するように、「非置換アルキルアミノアルキル」という用語は、炭素又は水素結合が、水素原子及び上記に定義したような非置換アルキル基と結合した窒素原子との結合で置き換えられている上記に定義したような非置換アルキル基を指す。例えば、メチル（−ＣＨ_３）は１つの非置換アルキル基である。メチル基の水素原子が、水素原子及びエチル基と結合した窒素原子との結合で置き換えられている場合、得られる化合物は、非置換アルキルアミノアルキル基である−ＣＨ_２−Ｎ（Ｈ）（ＣＨ_２ＣＨ_３）である。

本明細書で使用するように、「置換アルキルアミノアルキル」という用語は、すべてのアルキルアミノアルキル基中の窒素原子との結合が、それだけで、すべてのアルキルアミノアルキル基が置換されていると限定するわけではない場合を除いて、アルキル基の１つ又はその両方における炭素又は水素原子との１つ又は複数の結合が置換アルキル基に関して上記したような非炭素又は非水素原子との結合で置き換えられている、上記に定義したような非置換アルキルアミノアルキル基を指す。

本明細書で使用するように、「非置換ジアルキルアミノアルキル」という用語は、炭素結合又は水素結合が、他の２つの上記に定義したような非置換アルキル基と結合した窒素原子との結合で置き換えられている上記に定義したような非置換アルキル基を指す。

本明細書で使用するように、「置換ジアルキルアミノアルキル」という用語は、アルキル基の１つ又は複数における炭素又は水素原子との１つ又は複数の結合が、置換アルキル基に関して上記したような非炭素及び非水素原子との結合で置き換えられている上記に定義したような非置換ジアルキルアミノアルキル基を指す。すべてのジアルキルアミノアルキル基中の窒素原子との結合は、それ自体、すべてのジアルキルアミノアルキル基が置換されていると限定するわけではない。

本明細書で使用するように、「非置換アルコキシ」という用語は、水素原子との結合が、ほかの、上記に定義したような非置換アルキル基の炭素原子との結合で置き換えられているヒドロキシル基（−ＯＨ）を指す。本明細書で使用するように、「置換アルコキシ」という用語は、水素原子との結合が、ほかの、上記に定義したような置換アルキル基の炭素原子との結合で置き換えられているヒドロキシル基（−ＯＨ）を指す。

本明細書で使用するように、「非置換ヘテロシクリルオキシ」という用語は、水素原子との結合が、ほかの、上記に定義したような非置換ヘテロシクリル基の環原子との結合で置き換えられているヒドロキシル基（−ＯＨ）を指す。本明細書で使用するように、「置換ヘテロシクリルオキシ」という用語は、水素原子との結合が、ほかの、上記に定義したような置換ヘテロシクリル基の環原子との結合で置き換えられているヒドロキシル基（−ＯＨ）を指す。本明細書で使用するように、「非置換ヘテロシクリルオキシアルキル」という用語は、炭素結合又は水素結合が、非置換ヘテロシクリル基と結合した酸素結合で置き換えられている上記に定義したような非置換アルキル基を指す。

本明細書で使用するように、「置換ヘテロシクリルオキシアルキル」という用語は、ヘテロシクリルオキシアルキル基のアルキル基の炭素又は水素基との結合が、置換アルキル基に関して上記したような非炭素及び非水素原子と結合しているか、又はヘテロシクリルオキシアルキル基のヘテロシクリル基が上記に定義したような置換ヘテロシクリル基である、上記に定義したような非置換ヘテロシクリルオキシアルキル基を指す。

本明細書で使用するように、「非置換ヘテロシクリルアルコキシ」という用語は、炭素結合又は水素結合が親化合物と結合した酸素原子との結合で置き換えられており、非置換アルキル基の別の炭素又は水素結合が上記に定義したような非置換ヘテロシクリル基と結合している、上記に定義したような非置換アルキル基を指す。本明細書で使用するように、「置換ヘテロシクリルアルコキシ」という用語は、ヘテロシクリルアルコキシ基のアルキル基の炭素又は水素基との結合が、置換アルキル基に関して上記したような非炭素及び非水素原子と結合している、又は、ヘテロシクリルアルコキシ基のヘテロシクリル基が上記に定義したような置換ヘテロシクリル基である、上記に定義したような非置換ヘテロシクリルアルコキシ基を指す。さらに、置換ヘテロシクリルアルコキシ基は、その基のアルキル部分との炭素結合又は水素結合が１つ又は複数の置換及び非置換複素環で置換されていてよい基も含む。

本明細書で使用するように、「非置換アリールアミノアルキル」という用語は、炭素結合又は水素結合が、少なくとも１つの上記に定義したような非置換アリール基と結合した窒素原子との結合で置き換えられている上記に定義したような非置換アルキル基を指す。

本明細書で使用するように、「置換アリールアミノアルキル」という用語は、すべてのアリールアミノアルキル基中の窒素原子との結合が、それだけで、すべてのアリールアミノアルキル基が置換されていると限定するわけではない場合を除いて、アリールアミノアルキル基のアルキル基が上記に定義したような置換アルキル基であるか、又はアリールアミノアルキル基のアリール基が置換アリール基である、上記に定義したような非置換アリールアミノアルキル基を指す。しかし、置換アリールアミノアルキル基は、その基の窒素原子と結合している水素が非炭素及び非水素原子で置き換えられている基をまさに含む。

本明細書で使用するように、「非置換ヘテロシクリルアミノアルキル」という用語は、炭素又は水素結合が、少なくとも１つの上記に定義したような非置換ヘテロシクリル基と結合した窒素原子との結合で置き換えられている上記に定義したような非置換アルキル基を指す。本明細書で使用するように、「置換ヘテロシクリルアミノアルキル」という用語は、ヘテロシクリル基が上記に定義したような置換ヘテロシクリル基である、且つ／又はアルキル基が上記に定義したような置換アルキル基である、上記に定義したような非置換ヘテロシクリルアミノアルキル基を指す。すべてのヘテロシクリルアミノアルキル基中の窒素原子との結合は、それだけで、すべてのヘテロシクリルアミノアルキル基が置換されていると限定するわけではない。

本明細書で使用するように、「非置換アルキルアミノアルコキシ」という用語は、炭素又は水素結合が、親化合物と結合した酸素原子との結合で置き換えられており、非置換アルキル基の別の炭素又は水素結合が、水素原子及び上記に定義したような非置換アルキル基と結合した窒素原子と結合している上記に定義したような非置換アルキル基を指す。

本明細書で使用するように、「置換アルキルアミノアルコキシ」という用語は、親化合物と結合した酸素原子と結合しているアルキル基の炭素又は水素原子との結合が、置換アルキル基に関して上記で論じたような非炭素及び非水素原子との１つ又は複数の結合で置き換えられており、且つ／又はアミノ基と結合した水素が非炭素及び非水素原子と結合しているか、且つ／又はアミンの窒素と結合したアルキル基が置換アルキル基に関して上記したような非炭素及び非水素原子と結合している場合、上記に定義したような非置換アルキルアミノアルコキシ基を指す。すべてのアルキルアミノアルコキシ基中でのアミン及びアルコキシ官能基の存在は、それだけで、すべてのそうした基を置換アルキルアミノアルコキシ基と限定するわけではない。

本明細書で使用するように、「非置換ジアルキルアミノアルコキシ」という用語は、炭素又は水素結合が、親化合物と結合した酸素原子との結合で置き換えられており、非置換アルキル基の別の炭素又は水素結合が、上記に定義したような他の２つの類似している、又は異なっている非置換アルキル基と結合した窒素原子と結合している、上記に定義したような非置換アルキル基を指す。

本明細書で使用するように、「置換ジアルキルアミノアルコキシ」という用語は、親化合物と結合した酸素原子と結合しているアルキル基の炭素又は水素原子との結合が、置換アルキル基に関して上記で論じたような非炭素及び非水素原子との１つ又は複数の結合で置き換えられており、且つ／又はアミンの窒素と結合したアルキル基の１つ又は複数が、置換アルキル基に関して上記したような非炭素及び非水素原子と結合している場合、上記に定義したような非置換ジアルキルアミノアルコキシ基を指す。すべてのジアルキルアミノアルコキシ基中でのアミン及びアルコキシ官能基の存在は、それだけで、すべてのそうした基を置換ジアルキルアミノアルコキシ基と限定するわけではない。

本明細書で使用するように、ヒドロキシル基、アミン基及びスルフヒドリル基に関して「保護された（protected）」という用語は、有機合成における保護基（Protective Groups in Organic Synthesis）、Ｇｒｅｅｎｅ、Ｔ．Ｗ．；Ｗｕｔｓ、Ｐ．Ｇ．Ｍ．、ＪｏｈｎＷｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓ、ＮｅｗＹｏｒｋ、ＮＹ（第３版、１９９９年）に示されているものなどの当業者に公知の保護基（これは、そこに示されている手順を用いて付加させる、又は取り除くことができる）で、望ましくない反応から保護されているこれらの官能基の形態を指す。保護されたヒドロキシル基の例には、これらに限定されないが、シリルエーテル、例えばヒドロキシル基と試薬、例えばこれらに限定されないが、ｔ−ブチルジメチル−クロロシラン、トリメチルクロロシラン、トリイソプロピルクロロシラン、トリエチルクロロシランの反応によって得られるもの；置換メチル及びエチルエーテル、例えばメトキシメチルエーテル、メチルチオメチルエーテル、ベンジルオキシメチルエーテル、ｔ−ブトキシメチルエーテル、２−メトキシエトキシメチルエーテル、テトラヒドロピラニルエーテル、１−エトキシエチルエーテル、アリルエーテル、ベンジルエーテル；エステル、例えばこれらに限定されないが、ベンゾイルホーメート、ホーメート、アセテート、トリクロロアセテート及びトリフルオロアセテートが含まれる。保護アミン基の非限定的な例には、アミド、例えばホルムアミド、アセトアミド、トリフルオロアセトアミド及びベンズアミド；イミド、例えばフタルイミド及びジチオスクシンイミドなどが含まれる。保護スルフヒドリル基の非限定的な例には、チオエーテル、例えばＳ−ベンジルチオエーテル及びＳ−４−ピコリルチオエーテル；置換Ｓ−メチル誘導体、例えば、とりわけ、ヘミチオ、ジチオ及びアミノチオアセタールが含まれる。

概説
種々の化合物が、例えば癌などの特定の疾患を治療するのに有用であることが分かっている。例えば、Ｇｌｅｅｖｅｃ（登録商標）（イマチニブメシラート又は「イマチニブ」）は、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）及び消化管間質腫瘍（ＧＩＳＴ）を治療するのに効力を示している化合物である。他の実験的薬物には、それぞれ、腎細胞癌腫及び白血病の治療のためのソラフェニブ及びＰＮＵ−１６６１９６が含まれる。特定の癌を治療するための医薬組成物の開発において大幅な進歩がなされているが；癌及び他の疾患、例えば肺動脈高血圧症（ＰＡＨ）などの肺−血管疾患を防止及び／又は治療するために、新規な化合物、組成物、治療の方法、及び薬物を開発するためのモデル系が求められている。特に、血小板由来の成長因子（ＰＤＧＦ）受容体チロシンキナーゼは、ＰＡＨのための魅力的な治療標的である。ＰＤＧＦシグナル伝達経路は、ヒト特発性ＰＡＨ（ｉＰＡＨ）において、また、疾患の動物モデルにおいて活性化される。例えば、ＰＤＧＦＡ、ＰＤＧＦＢ、ＰＤＧＦＲα及びＰＤＧＦＲβ ｍＲＮＡの発現は、対照とする対象と比較して、ｉＰＡＨを有する患者からの肺小動脈において増大し、ウエスタンブロット分析は、ＰＡＨ肺におけるＰＤＧＦＲβのタンパク質発現の有意な増大を示している。

ＰＡＳＭＣの遊走はイマチニブ、ＰＤＧＦＲα阻害剤によって阻害される。イマチニブはまた、ＰＡＨのラットＭＣＴモデルにおいて、ＲＶＳＰを低下させ生存を改善している。難治性ＰＡＨを有する患者のいくつかの場合の報告では、イマチニブに対する好都合な応答が観察されている。Ｇｈｏｆｒａｎｉら、「確立された治療に対して不十分な応答を有する肺動脈高血圧症患者におけるイマチニブ（Imatinib in pulmonary arterial hypertension patients with inadequate response to established therapy）」、ＡｍＪＲｅｓｐｉｒＣｒｉｔＣａｒｅＭｅｄ．Ｖｏｌ．１８２：１１７１〜７頁（２０１０年）を参照されたい。重篤なＰＡＨを有する患者におけるイマチニブの効果を試験したＩＭＰＲＥＳ治験は、６分間歩行距離及び心肺の血行動態の改善を示している。しかし、経口投与されたイマチニブは、胃腸障害（gastrointestinal distress）及び骨髄抑制を含む全身性副作用を伴う可能性がある。Ｐａｎｉａｇｕａら、「リウマチ性疾患の治療のためのイマチニブ（Imatinib for the treatment of rheumatic diseases）」、ＮａｔＣｌｉｎＰｒａｃｔＲｈｅｕｍａｔｏｌ；Ｖｏｌ３：１９０〜１頁（２００７年）を参照されたい。治療域（therapeutic window）を改善する、すなわち、効力を増大し、全身性副作用を減少させるために、本発明者らは、ＰＡＨのためにキナーゼ阻害剤の吸入送達を用いている。

さらに、イマチニブはインビボでのマウスＭＣＴモデル系を用いて開発されたが、これは、少なくとも、特定のヒト疾患表現型を発現させること、例えばＰＡＨに関連した新生内膜及び／又は網状病変が発生することに関しては信頼性がないので、前臨床的な薬物候補の効力評価に関して不完全な系である。Ｃｏｏｌら、「強皮症及びヒト免疫不全ウイルス感染症に関連した肺高血圧症における網状病変の発病及び進化（Pathogenesis and evolution of plexiform lesions in pulmonary hypertension associated with scleroderma and human immunodeficiency virus infection）、ＨｕｍＰａｔｈｏｌ．２８：４３４〜４４２頁（１９９７年）。したがって、ヒト疾患表現型を提示する、より挑戦的なモデルにおいて、キナーゼ阻害剤の効果を試験することは、ヒト疾患の病理をより正確に反映し、結果として、ヒト疾患を効果的に治療するための次世代の化合物及び組成物を開発するのに必須である。

本発明者らは、本発明の化合物及び治療をイマチニブと比較しながら、そうしたモデルを使用した。以下でさらに詳述するように、本発明者らは、マウスモノクロタリン（ＭＣＴ）＋肺全摘（ＰＮ）モデル系（ＭＣＴ＋ＰＮ）を用いて効力試験を実施した。このモデルは、ヒト疾患、例えばＰＡＨに特徴的な新生内膜及び／又は網状病変をもたらす。そのために、例えば、ＰＡＨの病理学的シグニチャーは、小さい前毛細血管の肺細動脈における同心円状（concentric）及び網状の病変からなる。Ｃｏｏｌら(１９９７年）；及びＴｕｄｅｒら、「グロメルロイド病変に関連した:重篤な肺高血圧症における網状病変（Plexiform lesion in severe pulmonary hypertension：association with glomeruloid lesion）」、ＡｍＪＰａｔｈｏｌ１５９：３８２〜３８３頁（２００１年）を参照されたい。同心円状病変は、血管腔を閉塞させる新生内膜細胞の増殖によってもたらされる。これらの同心円状の閉塞性新生内膜の病変は、筋線維芽細胞及び／又は内皮細胞を含むことが報告されている。例えば、Ｙｉら、ＡｍＪＲｅｓｐｉｒＣｒｉｔＣａｒｅＭｅｄ１６２：１５７７〜８６頁（２０００年）を参照されたい。

さらに、Ｔ細胞、Ｂ細胞及びマクロファージからなる血管周囲の浸潤物が、叢生成性（plexogenic）ＰＡＨにおいて見出されている。Ｓａｋａｇａｍｉ、「全身送達のために吸入された治療薬の肺吸収及び体内動態（disposition）を評価するためのインビボ、インビトロ及びエクスビボモデル（In vivo, in vitro and ex vivo models to assess pulmonary absorption and disposition of inhaled therapeutics for systemic delivery）」、ＡｄｖＤｒｕｇＤｅｌｉｖＲｅｖ５８：１０３０〜１０６０頁（２００６年）を参照されたい。さらに、網状病変は、内皮細胞マーカーに対して染色される混乱した血管チャネルによって特徴付けられ、特発性及び／又は原発性ＰＡＨを有する患者からの肺試料におけるそうした病変は、内皮細胞の単クローン性増殖からなる。Ｌｅｅら、「単クローン内皮細胞増殖は、続発性肺高血圧症ではなく原発性肺高血圧症において存在する（Monoclonal endothelial cell proliferation is present in primary but not secondary pulmonary hypertension）」、ＪＣｌｉｎＩｎｖｅｓｔ１０１：９２７〜９３４頁（１９９８年）。したがって、少なくとも、その疾患の最初の段階又は初期段階において、正常な内皮細胞の急性のアポトーシス喪失は、アポトーシス耐性の内皮細胞の出現及びクローン性増殖をもたらす可能性があるので、この種のＰＡＨは本質的に肺細動脈内皮細胞の「癌」である（上記参照）。Ｌｅｅら（１９９８年）。ＰＡＨに関連した腫瘍形成過程（neoplastic process）は、新生物疾患の治療のためのＲＴＫ阻害について狭い選択性しかもたない可能性のある劣ったモデル系を用いて従来作製されたキナーゼ阻害剤と比較して、優れた効力、効能、及びより広範囲の阻害を有するＭＣＴ＋ＰＮモデルの判定によって、ＰＡＨのキナーゼ阻害剤治療だけでなく、新規な化合物、組成物及び方法の開発も提供する。薬物−キナーゼ相同性モデリングは、例えば、その非選択的及び不可逆的誘導体を含むそうした阻害剤が、以下でさらに説明するように、最適効力のために、脆弱なキナーゼドメインを確実に標的とするようにする。

化合物合成
一態様では、本開示は、以下の部に記載されており、ＷＯ２００８／０５８３４１（これを、その全体において、且つあたかも本明細書で完全に示されているかのようにすべての目的のために、参照により本明細書に組み込む）に開示されているような手順を用いて容易に合成される構造Ｉ化合物の合成を提供する。さらに、構造Ｉの化合物は一般に、例えばジハロ複素環などの出発原料から調製される。第１のステップは、モノアミノ−モノハロ中間体を生成するための求核的芳香族置換である。求核的芳香族置換は一般に、エタノール、イソプロパノール、ｔｅｒｔ−ブタノール、ジオキサン、ＴＨＦ、ＤＭＦ、エトキシエタノール、トルエン又はキシレンなどの溶媒中で、第一級又は第二級アミンをジハロゲン化複素環に付加させることによって実施される。反応は通常、過剰なアミン又は非求核的塩基、例えばトリエチルアミン若しくはジイソプロピルエチルアミン又は無機塩基、例えば炭酸カリウム若しくは炭酸ナトリウムの存在下、高温で実施される。

或いは、アミノ置換基は、遷移金属触媒作用によるアミノ化反応によって導入することができる。そうした変換のための典型的な触媒には、Ｐｄ（ＯＡｃ）_２／Ｐ（ｔ−Ｂｕ）_３、Ｐｄ_２（ｄｂａ）_３／ＢＩＮＡＰ及びＰｄ（ＯＡｃ）_２／ＢＩＮＡＰが含まれる。これらの反応は一般に、トルエン又はジオキサンなどの溶媒中、炭酸セシウム又はナトリウム若しくはカリウムｔｅｒｔ−ブトキシドなどの塩基の存在下、室温から還流までの温度範囲で実施される。例えば、Ｈａｒｔｗｉｇ及びＡｎｇｅｗ、Ｃｈｅｍ．Ｉｎｔ．Ｅｄ３７、２０４６頁（１９９８年）を参照されたい。これらの化合物の合成の第１のステップで使用するアミンは市場から入手するか、又は当業者に周知の方法を用いて調製される。さらに、α−アルキルベンジルアミンはオキシムの還元によって調製することができる。典型的な還元剤には、水素化アルミニウムリチウム、活性炭担持のパラジウム触媒存在下の水素ガス、塩酸存在下のＺｎ、又はＴｉＣｂ、ＺｒＣＵ、ＮｉＣｌ_２及びＭｏＯ_３などのルイス酸存在下の水素化ホウ素ナトリウム、又はＡｍｂｅｒｌｙｓｔＨ１５イオン交換樹脂及びＬｉＣｌと一緒にした水素化ホウ素ナトリウムが含まれる。α−アルキルベンジルアミンは、対応するケトンの還元的アミノ化によっても調製することができる。そうした変換のための典型的な方法はロイカート・ヴァラッハ（Leuckart-Wallach）反応であるが、触媒条件（ＨＣＯ_２ＮＨ_４、［（ＣＨ_３）_５Ｃ_５ＲｈＣｌ_２］_２）又は他の手順、例えばＮＨ_４ＯＡｃ、Ｎａ（ＣＮ）ＢＨ_３）も使用される。α−アルキルベンジルアミンは、対応するα−アルキルベンジルアルコールからも調製することもできる。そうした方法には、メシラート又はトシラートとしてのヒドロキシルの誘導化、及び慣用的な合成方法を用いて第一級アミンに転換されるフタルイミド又はアジドなどの窒素求核試薬を用いた置換；又は、光延様条件下での適切な窒素求核試薬を用いたヒドロキシルの置換が含まれる。α−アルキルベンジルアルコールは、メタノールなどの溶媒中で、水素化ホウ素ナトリウムなどの還元剤を用いて、対応するケトンを還元することによって調製することができる。或いは、α−アルキルベンジルアルコールは、ベンズアルデヒド誘導体へのアルキル金属種（グリニャール試薬など）の付加によって得ることができる。これは一般に、テトラヒドロフランなどの溶媒中、室温以下で行われる。高い光学純度のα−アルキルベンジルアミンは、キラルα−アルキルベンジルアルコールから、上記に概説した方法を用いて調製することができる。キラルα−アルキルベンジルアルコールは、対応するケトンのキラル還元によって得ることができる。

次いで、上述したジハロ複素環及びアミンから形成されたモノアミノ−モノハロ中間体を、さらに官能化することができる。例えば、そのアミン置換基が追加的な官能基を担持している場合、この官能基は、当業界で周知の方法を用いて誘導化又は官能化することができる。例えば、遊離第一級アミノ基を、さらに官能化してアミド、スルホンアミド又は尿素官能基にするか、或いは、アルキル化して第二級又は第三級アミン誘導体を生成させることができる。アミドの形成のための好ましい方法は、ジクロロメタン、テトラヒドロフラン又は１，４−ジオキサンなどの溶媒中で、ジシクロヘキシルカルボジイミド、１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド、ジイソプロピルカルボジイミド又はカルボニルジイミダゾールなどのカップリング試薬を用いて、アミンをカルボン酸とカップリングさせるステップを含む。或いは、酸成分を、アミン反応前に、酸塩化物（塩化チオニル、塩化オキサリル、ビス（トリクロロメチル）カーボネート又は塩化シアヌルを用いて）、又は混合無水物種（例えば、ｔ−ブチルクロロホーメート又はイソプロピルクロロホーメートを用いて）、又は活性エステル中間体（Ｎ−ヒドロキシスクシンイミジル、ペンタフルオロフェニル又はｐ−ニトロフェニルエステルなど）に転換させることによって活性化させることができる。

次いで、モノアミノ−モノクロロ中間体を、パラジウム媒介クロスカップリング反応で、適切に官能化されたカップリングパートナーと反応させて、ハロゲン原子を代替の部分で置き換えることができる。典型的なカップリングパートナーは有機ボロン酸又はエステルである。例えば、鈴木カップリング、有機スタンナン、スティルカップリング、グリニャール試薬、熊田カップリング、有機亜鉛種、及び根岸カップリングについては、Ｍｉｙａｕｒａ及びＳｕｚｕｋｉ、ＣｈｅｍＲｅｖ．９５２４５７（１９９５年）；Ｓｔｉｌｌｅ、Ｃｈｅｍ．、Ｉｎｔ．Ｅｄ．Ｅｎｇｌ２５、５０８頁（１９８６年）；Ｋｕｍａｄａら、Ｏｒｇ．Ｓｙｎｔｈ．Ｃｏｌｌ．Ｖｏｌ．６、４０７頁（１９９８年）；及び：Ｎｅｇｉｓｈｉ、Ｊ．Ｏｒｇａｎｏｍｅｔ．Ｃｈｅｍ．６５３、３４頁（２００２年）をそれぞれ参照されたい。鈴木カップリングは好ましいカップリング方法であり、一般にＤＭＥ、ＴＨＦ、ＤＭＦ、エタノール、プロパノール、トルエン又は１，４−ジオキサンなどの溶媒中、炭酸カリウム、水酸化リチウム、炭酸セシウム、水酸化ナトリウム、フッ化カリウム又はリン酸カリウムなどの塩基の存在下で行われる。この反応は高温で実施することができ、使用するパラジウム触媒は、Ｐｄ（ＰＰｈ_３）_４、Ｐｄ（ＯＡｃ）_２、［ＰｄＣｌ_２（ｄｐｐｆ）］、Ｐｄ_２（ｄｂａ）_３／Ｐ（ｔ−Ｂｕ）_３から選択することができる。

モノアミノ−モノクロロ中間体は、上記に概説したのと同様の条件を用いて、第２の求核的芳香族置換反応にかけることもできる。当業者は、上記合成について説明した反応の順番は特定の状況では変えることができ、且つ、上述の反応について、場合によって、妥当な収率及び効率で進行させるために、特定の官能基を誘導化する、すなわち保護する必要があり得ることを理解されよう。保護官能基の種類は当業者に周知である。上述した反応シーケンスによりもたらされる生成物を、当業者に周知の技術を用いてさらに誘導化することができる。離脱基は、Ｍａｒｃｈ、「最新の有機化学:反応、機序及び構造（Advanced Organic Chemistry：Reactions, Mechanisms and Structure）」４ｔｈＥｄ．、３５２〜７頁、ＪｏｈｎＷｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓ、ＮＹ（１９９２年）に開示されているものなどの適切な任意の公知の種類のものであってよい。いくつかの実施形態では、離脱基はハロゲン、例えば塩素である。

キナーゼ
タンパク質キナーゼは、タンパク質中の特定の残基のリン酸化を触媒作用する酵素のファミリーである。そうした酵素は一般に３つのグループ、セリン及び／又はスレオニン残基を優先的にリン酸化するもの、チロシン残基を優先的にリン酸化するもの、及びチロシンとＳｅｒ／Ｔｈｒ残基の両方をリン酸化するものに分類される。したがって、タンパク質キナーゼは、それらの受容体に対するサイトカインの作用を含む細胞外シグナルを細胞核へ伝達し、種々の生物学的事象の引き金を引くことに関与するシグナル伝達経路における重要な要素である。正常な細胞生理におけるタンパク質キナーゼの多くの役割には、増殖、分化、代謝、アポトーシス、細胞移動、有糸分裂誘発、転写、翻訳及び他のシグナル伝達過程を含む細胞周期のコントロールが含まれる。

血小板由来の成長因子受容体キナーゼ（ＰＤＧＦＲ）はＲＴＫの一種である。ＰＤＧＦＲの配列はＧｅｎＢａｎｋの受入番号ＮＭ−００２６０９（ｍＲＮＡ）及びＮＰ−００２６００（タンパク質）において見ることができ、これは少なくとも、Ｍａｔｓｕｉら、「新規な受容体ｃＤＮＡの単離は、２つのＰＤＧＦ受容体遺伝子の存在を確立する（Isolation of a novel receptor cDNA establishes the existence of two PDGF receptor genes）」、Ｓｃｉｅｎｃｅ２４３（４８９２）：８００〜８０４頁（１９８９年）；Ｃｌａｅｓｓｏｎ−Ｗｅｌｓｈ，Ｌ．ら、「Ｂ鎖含有ＰＤＧＦ分子に対して特異的なヒト血小板由来の成長因子（ＰＤＧＦ）受容体のｃＤＮＡクローニン及び発現（cDNA cloning and expression of a human platelet-derived growth factor (PDGF) receptor specific for B-chain-containing PDGF molecules）」、Ｍｏｌ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｌ．８（８）：３４７６〜３４８６頁（１９８８年）；及びＧｒｏｎｗａｌｄら、ＰＮＡＳ．８５（１０）：３４３５〜３４３９頁（１９８８年）に記載されている。

さらに、ＰＤＧＦＲの同族結合リガンド、ＰＤＧＦは、線維芽細胞、平滑筋細胞及びグリア細胞などの間葉由来の細胞についての強力なマイトジェン因子である。ＰＤＧＦは、ジスルフィド結合で連結された２つのポリペプチド鎖Ａ及びＢを通常含む、３２ｋＤａのタンパク質ヘテロ二量体である。ＰＤＧＦＡＢヘテロ二量体に加えて、２つのホモ二量体形態のＰＤＧＦが存在する（ＡＡ及びＢＢ）。血液凝固及び血小板付着の間、ＰＤＧＦが、損傷した血管の部位で顆粒から放出される。これは、ＰＤＧＦが、血管の修復において役割を有している可能性があることを示唆している。ＰＤＧＦは、そこで筋細胞が増殖し得る、動脈の中膜層から内膜層への動脈平滑筋細胞の遊走を刺激することができる。ＰＤＧＦのすべてのアイソフォームによって誘発される細胞増殖は、ＰＤＧＦ受容体とのリガンド結合によって媒介される。ＰＤＧＦ受容体はクラスＩＩＩのチロシンキナーゼファミリーに属しており、詳しく上述したように、これはＡ型（又はアルファ型）及びＢ型（又はベータ型）と称される２つの受容体サブタイプからなる。ＰＤＧＦ受容体ファミリーの他のメンバーには、ＣＳＦ−ＩＲ、ｃＫＩＴ及びＦＬＴ３が含まれる。２つのＰＤＧＦ受容体アイソフォームは、著しく異なるそれらのリガンド結合特異性によって識別することができる。ＰＤＧＦβ受容体はＢ鎖だけを結合させる（アイソフォームＢＢ及びＡＢ）が、ＰＤＧＦα受容体は、すべての形態のＰＤＧＦを結合させることができる（Ａ及び／又はＢ鎖を含むアイソフォーム）。内皮細胞及び血管平滑筋の増殖へのＰＤＧＦ関連過程が重要であることから、ＰＤＧＦＲβキナーゼ阻害剤が、例えば疾患の防止及び治療に有用なある範囲の発病過程がある。

ＰＤＧＦ発現は、グリア芽腫から前立腺癌腫に至る多くの異なる固形腫瘍において示されている。これらの種々の腫瘍型において、ＰＤＧＦシグナル伝達の生物学的役割は、癌細胞成長の自己分泌刺激から、隣接する間質及び血管形成を伴うより微弱な（subtle）パラクリン相互作用まで様々である。したがって、小分子でＰＤＧＦＲキナーゼ活性を阻害することは、腫瘍成長、血管形成、新生物性の病因を有する疾患、免疫学的疾患及び炎症性疾患、癌を含む過剰増殖性疾患及び血管新生を伴う疾患、腎臓（renal and kidney）疾患、骨再形成疾患、代謝性疾患、血管疾患並びに、例えばＰＡＨなどの肺血管疾患を妨害することができる。ＰＤＧＦによって媒介される、したがってその同族受容体が関与する他の疾患には、例えば血管形成、アテローム切除又は粥腫（plaque）除去の他の侵襲的方法の後の冠動脈再狭窄を含む再狭窄、同様の手順後の腎臓又は末梢動脈の再狭窄；他の形態の急性損傷に関連する血管増殖現象及び線維症、例えば成人呼吸窮迫症候群に関連する肺線維症、腎炎に関連する腎臓線維症、川崎病（Kawasake’s disease）に関連する冠動脈狭窄及び他の関節炎に関連する血管狭窄、例えば高安病（Takayasha’s disease）；静脈移植における狭窄の防止；移植器官における加速された平滑筋細胞遊走及び増殖に起因する狭窄の防止並びに他の線維化過程、例えば強皮症及び筋線維症、及び腫瘍細胞増殖の阻害が含まれる。

ｃ−ＫｉｔはＰＤＧＦ受容体ファミリーに属する別の受容体チロシンキナーゼであり、通常、造血前駆細胞、マスト細胞及び胚細胞において発現する。ｃ−ｋｉｔ発現は、マスト細胞白血病、胚細胞腫瘍、小細胞肺癌腫、ＧＩＳＴ、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、神経芽細胞腫、黒色腫、卵巣癌腫、胸部癌腫を含む多くの癌に関与している。Ｓｍｏｌｉｃｈら、Ｂｌｏｏｄ、９７（５）１４１３〜２１頁。

細胞外シグナル制御タンパク質キナーゼ１及び２（ＥＲＫ１／２）は、細胞の増殖及びアポトーシスを媒介することができるマイトジェン活性化タンパク質（ＭＡＰ）キナーゼスーパーファミリーのメンバーである。細胞増殖を制御するＲａｓ−Ｒａｆ−ＭＥＫ−ＥＲＫシグナル伝達カスケードは十分研究されているが、ＥＲＫ１／２媒介細胞死に関連する機序はほとんど知られていない。ＥＲＫ１／２は細胞核に転位置するが、サイトゾル中に留まることもできる。ＥＲＫ１／２のサイトゾル保持は、マイトジェン応答に関与している転写因子基質へのアクセスを拒絶する。さらに、サイトゾルＥＲＫ１／２は、細胞核における生存及び増殖性シグナルを阻害するほかに、細胞質中のＤＡＰキナーゼなどのいくつかのアポトーシス促進性タンパク質の触媒活性を強化する。細胞死を増進させるサイトゾルＥＲＫ１／２及びそのサイトゾル基質の機能をさらに規定する試験は、この経路を、癌及び慢性炎症性疾患の効果的な治療法を開発するために利用するのに不可欠である。

ＳＴＡＴ３は、一般にサイトカイン及び成長因子に応答して機能するＳＴＡＴタンパク質ファミリーのメンバーである。ＳＴＡＴファミリーメンバーは、受容体会合キナーゼによってリン酸化され、次いで、細胞核に転位置しそこで転写活性化因子として作用する、ホモ又はヘテロ二量体を形成する。ＳＴＡＴ３は、ＩＦＮ、ＥＧＦ、ＩＬ５、ＩＬ６、ＨＧＦ、ＬＩＦ及びＢＭＰ２を含む種々のサイトカイン及び成長因子に応答したリン酸化によって活性化される。このタンパク質は、細胞刺激に応答した様々な遺伝子の発現を媒介する。したがって、細胞成長及びアポトーシスなどのいくつかの細胞過程において重要な役割を果たす。小さいＧＴＰａｓｅＲａｃ１はこのタンパク質と結合してその活性を制御することが示されており、ＰＩＡＳ３はＳＴＡＴ３を阻害することが示されている。

ＡＫＴ（ＰＫＢとしても公知である）は、代謝、細胞生存、移動性、転写及び細胞周期の進行の制御に関与している。ＡＫＴは、ヒトにおいて５００超のメンバーからなるタンパク質キナーゼスーパーファミリーのＡＧＣサブファミリーに属する。ＡＫＴサブファミリーは３つの哺乳類アイソフォーム、Ａｋｔ１、Ａｋｔ２及びＡｋｔ３を含む。これらは、はっきりと異なる遺伝子の産生物であり、３つの機能ドメイン：Ｎ末端プレクストリン相同性（ＰＨ）ドメイン、中央キナーゼドメイン、及び疎水性モチーフ（ＨＭ）リン酸化部位［ＦｘｘＦ（Ｓ／Ｔ）Ｙ］を含むＣ末端制御ドメインを含む、保存された構造を共有する。

キナーゼ阻害剤
一態様では、本開示は、対象においてキナーゼ、例えばＲＴＫなどのチロシンキナーゼを阻害する化合物及び方法、及び／又は、対象における、キナーゼ、例えばＲＴＫなどのチロシンキナーゼによって媒介される、又はそれに関連する生物学的状態の治療方法を提供する。いくつかの実施形態では、そのキナーゼは、Ｃｄｃ２キナーゼ、ＡＫＴ、ｃ−Ｋｉｔ、ｃ−ＡＢＬ、ＥＲＫ１／２、ＳＴＡＴ３、ｐ６０ｓｒｃ、ＶＥＧＦＲ３、ＰＤＧＦＲα、ＰＤＧＦＲβ、ＦＧＦＲ３、ＰＤＧＦＲ−αα、ＰＤＧＦＲ−ββ、ＰＤＧＦＲ−αβ、ＦＬＴ−３、Ｆｙｎ、Ｌｃｋ、Ｔｉｅ−２、ＧＳＫ−３、Ｃｄｋ２、Ｃｄｋ４、ＭＥＫ１、ＮＥＫ−２、ＣＨＫ２、ＣＫ１ε、Ｒａｆ、ＣＨＫ１、Ｒｓｋ２、ＦＭＳ（ＣＳＦ−ＩＲ）、ＫＤＲ、ＥｐｈＡ２、ＥｐｈＡ３、ＥｐｈＡ８、ＦＬＴ１、ＦＬＴ４、ＨＣＫ、ＰＴＫ５、ＲＥＴ、ＳＹＫ、ＤＤＲ１、ＤＤＲ２及びＰＡＲ−１である。同様に、いくつかの実施形態では、キナーゼは、チロシンキナーゼ、例えばＣｄｃ２キナーゼ、ｃ−Ｋｉｔ、ｃ−ＡＢＬ、ｐ６０ｓｒｃ、ＶＥＧＦＲ３、ＰＤＧＦＲα、ＰＤＧＦＲβ、ＦＧＦＲ３、ＰＤＧＦＲ−αα、ＰＤＧＦＲ−ββ、ＰＤＧＦＲ−αβ、ＦＬＴ−３、Ｆｙｎ、Ｌｃｋ及び／又はＴｉｅ−２などである。この方法は、対象に、構造Ｉの化合物、前記化合物の互変異性体、前記化合物の薬学的に許容される塩、その互変異性体の薬学的に許容される塩、又はその混合物を投与するステップを含む。

従来、ＷＯ０１／２９０２５、ＷＯ０１／６２２５１及びＷＯ０１／６２２５２に開示されているように、種々のインドリル置換化合物が、１つ又は複数のキナーゼを阻害することが示されている。同様に、ＷＯ０１／２８９９３において種々のベンズイミダゾリル化合物が最近開示されている。そうした化合物は、受容体型と非受容体型のチロシンキナーゼの両方のシグナル伝達を阻害、調節及び／又は制御できることが報告されている。開示されている化合物の一部は、インドリル又はベンズイミダゾリル基と結合したキノロン断片を含む。４−ヒドロキシキノロン及び４−ヒドロキシキノリン誘導体の合成も報告されている。例えば、Ｕｋｒａｉｎｅｔｓらは、３−（ベンズイミダゾール−２−イル）−４−ヒドロキシ−２−オキソ−１，２−ジヒドロキノリンの合成を開示している。Ｕｋｒａｉｎｅｔｓら、Ｔｅｔ．Ｌｅｔｔ．４２、７７４７〜４８頁（１９９５年）は、他の４−ヒドロキシキノロン及びチオ類似体、例えば１Ｈ−２−オキソ−３−（２−ベンズイミダゾリル）−４−ヒドロキシキノリンの合成、抗けいれん及び抗甲状腺活性も開示している。Ｕｋｒａｉｎｅｔｓら、ＫｈｉｍｉｙａＧｅｔｅｒｏｔｓｉｋｌｉｃｈｅｓｋｉｋｈＳｏｅｄｉｎｉｉ、１、１０５〜１０８頁（１９９３年）。さらに、例えば４−アミノ−５−フルオロ−３−［５−（４−メチルピペラジン−１−イル）−１Ｈ−ベンズイミダゾール−２−イル］キノリン−２（１Ｈ）−オンなどの他の化合物が、内皮細胞と腫瘍細胞の両方の増殖を促進する受容体チロシンキナーゼの阻害を示す、経口で生物学的に利用可能なベンズイミダゾール−キノリノンとして記載されている。ＷＯ２００５／０４７２４４に開示されているように、９つのチロシンキナーゼ、ＦＧＦＲ１、ＦＧＦＲ３、ＶＥＧＦＲ１、ＶＥＧＦＲ２、ＶＥＧＦＲ３、ＰＤＧＦＲβ、ｃ−Ｋｉｔ、ｐ６０ｓｒｃ及びＦＬＴ−３に対する阻害効果が示されている。しかし、この化合物は、薬学的に許容される用量でＥＧＦＲファミリーキナーゼ又はインスリン受容体キナーゼを有意に阻害していない。

さらに、ＵＳ２００６／０１５４９３６に開示されているような、４−（４−メチルピペラジン−１−イルメチル）−Ｎ−［４−メチル−３−（４−ピリジン−３−イル）ピリミジン−２−イルアミノ）フェニル］−ベンズアミド（イマチニブ）は、ＵＳ２０１１／０１９０３１３に記載されているように、ＰＤＧＦＲα及びβキナーゼ、Ａｂｌ、ＤＤＲ並びにｃ−ＫＩＴを阻害する。しかし、ＵＳ２０１１／０１９０３１３の段落[０１１７]は、イマチニブは安全であるようであり、６カ月間にわたって良好な耐容性を示すが、主要な効力パラメーター（６ＭＷＤ）は、副次的評価項目における大幅な改善にもかかわらず、イマチニブにランダム化された患者においてプラセボに対して改善されていない。したがって、少なくとも、従来の限界、抵抗性の疾患表現型、及び以下でさらに詳述するような、より効果的なキナーゼ、例えばＲＴＫ阻害に対する必要性のため、キナーゼ、例えばＲＴＫなどのチロシンキナーゼを阻害する化合物に対する継続的必要性がある。ＵＳ２００８／０２６８４６０を参照されたい。

さらに、Ｆｒｅｙら（１９９８年）により報告されている小分子は、受容体と共有結合的に相互作用し、同時に、その分子のＡＴＰ結合ポケット中のシステイン残基をアルキル化することによって、表皮成長因子受容体（ＥＧＦＲ）を不可逆的に阻害することが示されている。実際、Ｌｅｐｒｏｕｌｔら、「構造に区別できるキナーゼヌクレオチド結合部位におけるシステインマッピング:選択的共有結合性阻害剤の応用及び設計（Cysteine Mapping in Conformationally Distinct Kinase Nucleotide Binding Sites：Application to the Design of Selective Covalent Inhibitors）」、Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．５４、１３４７〜１３５５頁（２０１１年）は、不可逆的阻害剤を設計するための１つのアプローチは、キナーゼのヌクレオチド結合部位中に存在するシステイン残基の系統的解析によって、標的タンパク質中に存在するシステインチオール基の求核性を利用することであることを開示している。そうしたアプローチは、異なるキナーゼ構造を考慮に入れたとしても、不可逆的阻害を容易にし、したがって、投薬及び毒性を改善することができる。同上を参照されたい。

Ｌｅｐｒｏｕｌｔら（２０１１年）におけるシステインマッピングは、キナーゼが選択的共有結合性阻害剤のための潜在的標的であることを実証している。ベンゼン環のパラ位においてそれにクロロアセトアミド基が付加されたキナーゼ阻害剤イマチニブの例が示されている。ペプチド阻害剤付加体形成が、ＫｉｔとＰＤＧＦα受容体の両方について示されている。同上。しかし、他の化合物は、同様の共有結合付加体を示すことができていない。クロロアセトアミドが、システイン残基と共有結合を形成できる求電子試薬の例として示されている。阻害剤と標的タンパク質キナーゼとの間に共有結合を形成させるための求電子トラップ（electrophilic trap）を意味するために、一般用語「弾頭（warhead）」が使用される。クロロアセトアミドは、求電子試薬としての臨床的有用性をもつのには反応性が高すぎ、この理由のため毒性を有している可能性がある。それにもかかわらず、Ｌｅｐｒｏｕｌｔら（２０１１年）は、求電子試薬の最善にまでは至らない位置決めが、なぜ共有結合が、他の反応性の低い弾頭と形成されないかを説明できると示唆している。

本開示は、とりわけ、ＲＴＫ受容体阻害剤での明確な弾頭位置決めを提供する。いくつかの実施形態では、Ｌｅｐｒｏｕｌｔら（２０１１年）が記載しているもの以外の求電子試薬を、効力を増大させるために使用した。Ｂａｒｆら(２０１２年）及びＯｂａｌｌａら、「様々なニトリル含有化合物の求電子性及び反応性を評価するために、一般に応用可能な方法（A generally applicable method for assessing the electrophilicity and reactivity of diverse nitrile-containing compounds）」、ＢｉｏｏｒｇＭｅｄＣｈｅｍＬｅｔｔ１７：９９８〜１００２頁（２００７年）（ニトリル含有求電子試薬を記載している）を参照されたい。さらに、Ｄｉｌｌｅｒら、ＪＭｅｄＣｈｅｍ４６：４６３８〜４６４７頁（２００３年）は、ＶＥＧＦＲ２をベースとしたＰＤＧＦβ受容体の相同性モデル（５５％相同性）を報告している。

本発明者らは以前に、本発明の１つの態様に関して、相同性構造をベースとしたＲＴＫの相同性モデルを用いることによって、分子ドッキングを使用した。例えば、ｃ−Ｋｉｔに対するＰＤＧＦα及びＰＤＧＦβ受容体の相同性はそれぞれ５９％及び６３％である。いくつかの実施形態では、ＲＴＫ阻害剤、例えばＰＤＧＦＲ阻害剤に関連した様々な位置での種々の求電子試薬、足場の導入は、さらなる生物化学的分析のための基礎を提供した。そのために、標的システイン残基に対する阻害剤弾頭の空間的方向性を分析して、結合の自由エネルギーを計算し、Ｋ_ｉを推定することができる。いくつかの実施形態では、最も小さい結合自由エネルギー、及び弾頭のシステイン残基と極めて近接した化合物は、不可逆的非選択的ＲＴＫ阻害剤を付与する。

したがって、本開示は、例えばＰＤＧＦＲ若しくはｃ−Ｋｉｔ又はその両方などの受容体チロシンキナーゼ（ＲＴＫ）と共有結合的に相互作用する、構造１の化合物、前記化合物のエナンチオマー、異性体若しくは立体異性体、前記化合物、前記化合物の互変異性体、エナンチオマー、異性体若しくは立体異性体の薬学的に許容される塩、又はその任意の混合物を提供する。いくつかの実施形態では、そのＰＤＧＦＲは、相同性モデリングによって実証されるような、ＰＤＧＦＲ−α、ＰＤＧＦＲ−β、ＰＤＧＦＲ−αα、ＰＤＧＦＲ−ββ及びＰＤＧＦＲ−αβからなる群から選択される。

医薬組成物
一態様では、本開示は、構造１の化合物の少なくとも１つ及び薬学的に許容される担体を含む医薬組成物を提供する。本発明の組成物は以下で説明するような他の治療剤を含むことができ、医薬処方物の技術分野において周知のものなどの技術にしたがって、例えば、慣用的な固体若しくは液体のビヒクル又は賦形剤、並びに所望の投与方式に適した種類の医薬品添加物、例えば添加剤、結合剤、防腐剤、安定剤、香味剤等を用いることによって処方することができる。

医薬組成物は一般に、その意図する投与経路に適合するように処方される。投与経路の例には、非経口（例えば、静脈内、皮内、腹腔内又は皮下）、経口、吸入、経皮（局所）、眼球内、イオン注入及び経粘膜投与が含まれる。非経口、皮内又は皮下施用のために使用される液剤又は懸濁剤は、以下の成分：滅菌賦形剤、例えば注射用の水、生理食塩水、固定油、ポリエチレングリコール、グリセリン、プロピレングリコール又は他の合成溶媒；抗菌剤、例えばベンジルアルコール又はメチルパラベン；酸化防止剤、例えばアスコルビン酸又は亜硫酸水素ナトリウム；キレート剤、例えばエチレンジアミン四酢酸；緩衝剤、例えば酢酸塩、クエン酸塩又はリン酸塩、及び等張性を調整するための薬剤、例えば塩化ナトリウム又はデキストロースを含むことができる。ｐＨは、塩酸又は水酸化ナトリウムなどの酸又は塩基で調整することができる。非経口製剤は、ガラス又はプラスチック製のアンプル、使い捨て注射器又は複数用量バイアル中に封入することができる。患者や担当医師に好都合なように、投与処方物を、治療過程で必要なすべての装置を備えたキットで提供することができる。

本開示の化合物は、非毒性の薬学的に許容されるビヒクル又は賦形剤を含む単位投薬処方物で、適切な任意の手段、例えば錠剤、カプセル剤、顆粒剤又は散剤などの形態で経口で；舌下で；頬側で；例えば滅菌した注射可能な水性若しくは非水性の液剤又は懸濁剤のような、例えば皮下、静脈内、筋肉内、皮内（経皮）若しくは嚢内注射又は注入技術による非経口で、吸入噴霧又は吹送によるなどの経鼻で、クリーム剤又は軟膏の形態などの局所で、液剤又は懸濁剤の形態で眼内で、ペッサリー、タンポン又はクリーム剤の形態で経膣で、或いは坐剤の形態などの経直腸で投与される。これらの化合物は、例えば即時放出又は持続放出に適した形態で投与することができる。即時放出又は持続放出は、本発明の化合物を含む適切な医薬組成物の使用によって、又は、持続放出のために、皮下植込錠又は浸透圧ポンプなどのデバイスの使用によって達成することができる。

呼吸管への投与、例えば鼻腔内投与を含む吸入のため、活性化合物を、呼吸管への投与のために当業界で用いられる方法及び処方物のいずれかによって投与することができる。したがって、活性化合物を、例えば溶液、懸濁液又は乾燥粉末の形態で投与することができる。本発明のこの態様による薬剤は、エアロゾルの形態で直接気道に投与することもできる。エアロゾルとして使用するため、液体又は懸濁液中の本発明の化合物を、慣用的なアジュバントを含む適切な噴射剤、例えばプロパン、ブタン又はイソブタンのような炭化水素噴射剤と一緒に、加圧エアロゾル容器中にパッケージ化することができる。本発明の材料は、ネブライザー又はアトマイザーなどの非加圧形態で投与することもできる。

本発明にしたがって使用できる噴射剤駆動型吸入エアロゾルは、共溶媒、安定剤、界面活性剤、酸化防止剤、滑沢剤及びｐＨ調整剤などの他の構成要素を含むこともできる。本発明にしたがって使用できる本発明による噴射剤駆動型吸入エアロゾルは、当業界で公知の吸入器、例えば計量式用量吸入器を用いて投与することができる。別の代替法として、本発明の薬剤を、肺界面活性剤処方物の形態で気道に投与することができる。肺界面活性剤処方物は、外生的な肺界面活性剤処方物（例えば、Ｉｎｆａｓｕｒｆ（登録商標）（ＦｏｒｅｓｔＬａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ）、Ｓｕｒｖａｎｔａ（登録商標）（ＲｏｓｓＰｒｏｄｕｃｔｓ）及びＣｕｒｏｓｕｒｆ（登録商標）（ＤＥＹ、Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａ、ＵＳＡ）又は合成肺界面活性剤処方物（例えば、Ｅｘｏｓｕｒｆ（登録商標）（ＧｌａｘｏＷｅｌｌｃｏｍｅＩｎｃ．）及びＡＬＥＣ）を含むことができる。これらの界面活性剤処方物は、気道滴下（すなわち、挿管後）によって又は気管内で投与される。

他の代替法として、本発明の薬剤を、吸入可能な粉末の形態で気道へ投与することができる。粉末処方物は、生理学的に許容される添加剤、例えば単糖（例えば、グルコース又はアラビノース）、二糖（例えば、ラクトース、サッカロース及びマルトース）、オリゴ糖及び多糖（例えば、デキストラン）、ポリアルコール（例えば、ソルビトール、マンニトール、キシリトール）、塩（例えば、塩化ナトリウム、炭酸カルシウム）又はこれらの添加剤のお互いの混合物を含むことができる。単糖又は二糖を使用するのが好まししく、排他的にではないが、特に水和物形態のラクトース又はグルコースの使用が好ましい。

本発明による吸入可能な散剤の範囲内で、添加剤は最大で２５０μｍ、好ましくは１０〜１５０μｍ、最も好ましくは１５〜８０μｍの最大平均粒径を有する。１〜９μｍの平均粒径を有するより微細な添加剤画分を、上記した添加剤に添加するのが適切な場合があるようである。より微細なこれらの添加剤も、本明細書で先に挙げた可能な添加剤の群から選択される。最後に、本発明による吸入可能な散剤を調製するために、好ましくは０．５〜１０μｍの平均粒径を有する微細化処方物を添加剤混合物に加える。粉砕し微細化し、最後に構成要素を一緒に混合することによって、本発明による吸入可能な散剤を製造するためのプロセスは従来技術により公知である。

鼻腔内処方物を含む呼吸管への投与を目的とする処方物において、活性化合物は一般に、微粉化技術などによって小さい粒径、例えば約５ミクロン以下をもつように構成される。いくつかの実施形態では、活性化合物の持続放出処方物が使用される。いくつかの実施形態では、活性化合物は、吸入器を用いて、自由流動粉末として経口吸入により投与される。

本開示の医薬組成物及び方法は、本開示の構造１の化合物を含む組成物と合わせて１つ又は複数の病理学的状態を治療するために一般に用いられる、本明細書で言及され且つ／又は当業界で公知であるような追加的な治療用活性化合物（第２の薬剤）をさらに含む。治療剤の併用は、相乗的に作用して、本明細書で説明する様々な疾患、障害及び／又は状態の治療又は防止を遂行する。そうした第２の薬剤には、これらに限定されないが、プロスタノイド、エンドセリンアンタゴニスト、細胞質キナーゼ阻害剤、受容体キナーゼ阻害剤、エンドセリン受容体アンタゴニスト、例えばアンブリセンタン、ボセンタン及びシタクスセンタン、ＰＤＥ５（ＰＤＥ−Ｖ）阻害剤、例えばシルデナフィル、タダラフィル及びバルデナフィル、カルシウムチャンネル遮断薬、例えばアムロジピン、フェロジピン、バレパミル（varepamil)、ジルチアゼム及びメントール、プロスタサイクリン、トレプロスチニル、イロプロスト、ベラプロスト、一酸化窒素、酸素、ヘパリン、ワルファリン、利尿剤、ジゴキシン、シクロスポリン、例えばシクロスポリンＡ、ＣＴＬＡ４−Ｉｇ、抗体、例えばＩＣＡＭ−３、抗ＩＬ−２受容体（抗Ｔａｃ）、抗ＣＤ４５ＲＢ、抗ＣＤ２、抗ＣＤ３（ＯＫＴ−３）、抗ＣＤ４、抗ＣＤ８０、抗ＣＤ８６、ＣＤ４０とｇｐ３９の間の相互作用を遮断する薬剤、例えばＣＤ４０及び／又はｇｐ３９に対して特異的な抗体、すなわちＣＤ１５４、ＣＤ４０及びｇｐ３９（ＣＤ４０１ｇ及びＣＤ８ｇｐ３９）から構成された融合タンパク質、阻害剤、例えばＮＦ−κＢ機能の核転座阻害剤、例えばデオキシスパガリン（ＤＳＧ）、コレステロール生合成阻害剤、例えばＨＭＧＣｏＡレダクターゼ阻害剤（ロバスタチン及びシンバスタチン）、非ステロイド系抗炎症剤（ＮＳＡＩＤ）、例えばイブプロフェン、アスピリン、アセトアミノフェン、レフルノミド、デオキシスパガリン、シクロオキシゲナーゼ阻害剤、例えばセレコクシブ、ステロイド、例えばプレドニゾロン又はデキサメタゾン、金化合物、β−アゴニスト、例えばサルブタモール、ＬＡＢＡ、例えばサルメテロール、ロイコトリエンアンタゴニスト、例えばモンテルカスト、抗増殖剤、例えばメトトレキサート、ＦＫ５０６（タクロリムス、Ｐｒｏｇｒａｆ）、ミコフェノール酸モフェチル、細胞傷害性薬物、例えばアザチオプリン、ＶＰ−１６、エトポシド、フルダラビン、ドキソルビシン、アドリアマイシン、アムサクリン、カンプトテシン、シタラビン、ゲムシタビン、フルオロデオキシウリジン、メルファラン及びシクロホスファミド、抗代謝産物、例えばメトトレキサート、トポイソメラーゼ阻害剤、例えばカンプトテシン、ＤＮＡアルキル化剤、例えばシスプラチン、キナーゼ阻害剤、例えばソラフェニブ、微小管毒、例えばパクリタキセル、ＴＮＦ−α阻害剤、例えばテニダップ、抗ＴＮＦ抗体又は可溶性ＴＮＦ受容体、ヒドロキシ尿素及びラパマイシン（シロリムス又はＲａｐａｍｕｎｅ）又はその誘導体が含まれる。

本発明の化合物は薬学的に許容される塩として調製することもできるが、そうした塩が少なくとも薬学的に許容される塩の調製における中間体として有用である限り、薬学的に許容されない塩も本開示の範囲内に含まれることを理解されよう。薬学的に許容される塩の例には、これらに限定されないが、硫酸塩、リン酸塩、メシラート、ビスメシラート、トシラート、乳酸塩、酒石酸塩、リンゴ酸塩、ビス酢酸塩、クエン酸塩、ビス塩酸塩、ナトリウム、カリウム、リチウム、カルシウム、マグネシウム、アンモニウム及びアルキルアンモニウムなどの薬学的に許容されるカチオンの塩；塩酸、オルトリン酸、硫酸、リン酸、硝酸、炭酸、ホウ酸、スルファミン酸及び臭化水素酸などの薬学的に許容される無機酸の酸付加塩；又は酢酸、プロピオン酸、酪酸、酒石酸、マレイン酸、ヒドロキシマレイン酸、フマル酸、クエン酸、乳酸、粘液酸、グルコン酸、安息香酸、コハク酸、シュウ酸、フェニル酢酸、メタンスルホン酸、トリハロメタンスルホン酸、トルエンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、イセチオン酸、サリチル酸、スルファニル酸、アスパラギン酸、グルタミン酸、エデト酸、ステアリン酸、パルミチン酸、オレイン酸、ラウリン酸、パントテン酸、タンニン酸、アスコルビン酸、吉草酸及びオロチン酸などの薬学的に許容される有機酸の塩が含まれる。アミン基の塩は、そのアミノ窒素原子がアルキル、アルケニル、アルキニル又はアラルキル部分などの適切な有機基を担持する四級アンモニウム塩を含むこともできる。塩は、慣用的な手段、例えば、遊離塩基形態の化合物を、その塩が不溶性である溶媒若しくは媒体中、又は、真空下又は凍結乾燥によって除去される水などの溶媒中で１若しくは複数当量の適切な酸と反応させることによって、或いは、既存の塩のアニオンを適切なイオン交換樹脂の別のアニオンと交換することによって形成させることができる。いくつかの実施形態では、塩は、硫酸塩、リン酸塩、メシラート、ビメシラート、トシラート、乳酸塩、酒石酸塩、リンゴ酸塩、ビス酢酸塩、クエン酸塩又はビス塩酸塩である。

いくつかの実施形態では、本開示の化合物は治療有効量で投与される。そうした投与は、構造１の化合物が、臨床医によって求められている、例えば対象の細胞、組織、体液（fluid）に関連した応答を引き出すようにする。キナーゼ阻害、例えばＲＴＫ阻害によって媒介される、又はそれに関連する状態の治療又は防止において、適切な投薬量レベルを投与する。いくつかの実施形態では、１日当たり約０．０１〜５００ｍｇ／ｋｇ対象体重を単一又は複数用量で投与する。それを踏まえて（In accord）、いくつかの実施形態では、投薬量レベルは１日当たり約０．１〜約２５０ｍｇ／ｋｇであり、他の実施形態では、１日当たり約０．５〜約１００ｍｇ／ｋｇを対象に投与する。適切な投薬量レベルは、例えば１日当たり約０．０１〜２５０ｍｇ／ｋｇ、１日当たり約０．０５〜１００ｍｇ／ｋｇ又は１日当たり約０．１〜５０ｍｇ／ｋｇを含む。いくつかの実施形態では、この範囲内で、投薬量は１日当たり約０．０５〜０．５、０．５〜５又は５〜５０ｍｇ／ｋｇである。経口投与のために、組成物を、これらに限定されないが、１、５、１０、１５、２０、２５、５０、７５、１００、１５０、２００、２５０、３００、４００、５００、６００、７５０、８００、９００及び１０００ｍｇの活性構成要素を含む、１．０〜１０００ｍｇの活性構成要素を含む錠剤の形態で提供する。例えば、治療を受ける対象への投薬量の治療効力及び／又は症状調整のために、投薬量を、これらの範囲のいずれかの任意の用量になるように選択することができる。いくつかの実施形態では、本開示の化合物を、例えばＵＳ８２５７７４１、ＵＳ８２６３１２８、ＷＯ２０１０／１３２８２７、ＷＯ２０１０／１０２０６６、ＷＯ２０１２／０４０５０２、ＷＯ２０１２／０３１１２９及び／又はＷＯ２０１０／１０２０６５に記載されているようにして、吸入により、１日に１〜２０、１〜１５、１〜１０、１〜５、１〜４若しくは１〜３回、又は１日に１若しくは２回投与する。いくつかの実施形態では、本開示の化合物を１日に１〜５回投与する。

いくつかの実施形態では、その単位用量は、（ａ）対象に投与された場合、対象の血漿中に約１〜５０００ｎｇ／ｍＬのＣ_ｍａｘの化合物又は対象の血液中に約１〜５０００ｎｇ／ｍＬのＣ_ｍａｘの化合物；及び（ｂ）対象への投与２４ｈ後、対象の血漿中に約１〜５０００ｎｇ／ｍＬの化合物、又は対象への投与２４ｈ後、対象の血液中に約１〜５０００ｎｇ／ｍＬの化合物の１つ又は複数を提供するのに十分である。

いくつかの実施形態では、治療有効量の構造１の化合物、前記化合物の互変異性体、前記化合物のエナンチオマー、異性体若しくは立体異性体、前記化合物、前記化合物の互変異性体、エナンチオマー、異性体若しくは立体異性体の薬学的に許容される塩、又はその任意の混合物は、有害な副作用を伴わない。そうした有害な副作用には、投与する前の対象と比較して、これらに限定されないが、対象における肺機能の低下、全身血圧の増大又は低下、免疫無防備状態の骨髄抑制、貧血、低酸素症が含まれる。

疾患の防止及び治療
一態様では、本開示は、１つ又は複数の疾患を治療するための、構造１（構造１は本明細書で説明されている）の化合物、前記化合物の互変異性体、前記化合物のエナンチオマー、異性体若しくは立体異性体、前記化合物、前記化合物の互変異性体、エナンチオマー、異性体若しくは立体異性体の薬学的に許容される塩、又はその任意の混合物を提供する。

したがって、本開示は、キナーゼ、例えばチロシンキナーゼを阻害する化合物、組成物、方法、及びそうしたキナーゼによって媒介される、又はそれらに関連する生物学的状態を治療する方法を提供する。例えば、本開示は、１つ又は複数のキナーゼ、例えば細胞分裂周期２キナーゼ（Ｃｄｃ２キナーゼ）、ｃ−Ｋｉｔ、ｃ−ＡＢＬ、ｐ６０ｓｒｃ、ＡＫＴ、ＶＥＧＦＲ３、ＰＤＧＦＲα、ＰＤＧＦＲβ、ＰＤＧＦＲ−αα、ＰＤＧＦＲ−ββ、ＰＤＧＦＲ−αβ、ＦＧＦＲ３、ＦＬＴ−３、ＳＲＣ、ＦＧＲ、ＹＥＳ（Ｆｙｎ）に関係したＦＹＮ癌遺伝子キナーゼ、リンパ球に特異的なタンパク質チロシンキナーゼ（Ｌｃｋ）、Ｉｇ及びＥＧＦ相同性ドメインを有するチロシンキナーゼ（Ｔｉｅ−２）、ＦＭＳ（ＣＳＦ−ＩＲ）、ＫＤＲ、ＥｐｈＡ２、ＥｐｈＡ３、ＥｐｈＡ８、ＦＬＴ１、ＦＬＴ４、ＨＣＫ、ＰＴＫ５、ＲＥＴ、ＳＹＫ、ＤＤＲ１、ＤＤＲ２、グリコーゲンシンターゼキナーゼ３（ＧＳＫ−３）、サイクリン依存性キナーゼ２（Ｃｄｋ２）、サイクリン依存性キナーゼ４（Ｃｄｋ４）、ＭＥＫ１、ＮＥＫ−２、ＣＨＫ２、ＣＫ１ε、Ｒａｆ、チェックポイントキナーゼ１（ＣＨＫ１）、リボソームＳ６キナーゼ２（Ｒｓｋ２）及びＰＡＲ−１などを阻害する方法を提供する。特に、チロシンキナーゼ、例えば細胞分裂周期２キナーゼ（Ｃｄｃ２キナーゼ）、ＥＲＫ１／２、ＳＴＡＴ３、ＡＫＴ、ｃ−Ｋｉｔ、ｃ−ＡＢＬ、ｐ６０ｓｒｃ、ＶＥＧＦＲ３、ＰＤＧＦＲα、ＰＤＧＦＲβ、ＰＤＧＦＲ−αα、ＰＤＧＦＲ−ββ、ＰＤＧＦＲ−αβ、ＦＧＦＲ３、ＦＬＴ−３、ＳＲＣ、ＦＧＲ、ＹＥＳ（Ｆｙｎ）に関係したＦＹＮ癌遺伝子キナーゼ、リンパ球に特異的なタンパク質チロシンキナーゼ（Ｌｃｋ）、Ｉｇ及びＥＧＦ相同性ドメインを有するチロシンキナーゼ（Ｔｉｅ−２）、ＦＭＳ（ＣＳＦ−ＩＲ）、ＫＤＲ、ＥｐｈＡ２、ＥｐｈＡ３、ＥｐｈＡ８、ＦＬＴ１、ＦＬＴ４、ＨＣＫ、ＰＴＫ５、ＲＥＴ、ＳＹＫ、ＤＤＲ１及びＤＤＲ２などを阻害する化合物、組成物、方法を提供する。いくつかの実施形態では、そのチロシンキナーゼは、受容体チロシンキナーゼ（ＲＴＫ）、例えばＰＤＧＦＲ、ＰＤＧＦＲ−αα、ＰＤＧＦＲ−ββ、ＰＤＧＦＲ−αβ若しくはｃ−Ｋｉｔ又はその組合せなどである。

本開示は、キナーゼ、例えば、Ｃｄｃ２キナーゼ、ｃ−Ｋｉｔ、ＡＫＴ、ｃ−ＡＢＬ、ＥＲＫ１／２、ＳＴＡＴ３、ｐ６０ｓｒｃ、ＶＥＧＦＲ３、ＰＤＧＦＲα、ＰＤＧＦＲβ、ＦＧＦＲ３、ＰＤＧＦＲ−αα、ＰＤＧＦＲ−ββ、ＰＤＧＦＲ−αβ、ＦＬＴ−３、Ｆｙｎ、Ｌｃｋ、Ｔｉｅ−２、ＧＳＫ−３、Ｃｄｋ２、Ｃｄｋ４、ＭＥＫ１、ＮＥＫ−２、ＣＨＫ２、ＣＫ１ε、Ｒａｆ、ＣＨＫ１、Ｒｓｋ２、ＦＭＳ（ＣＳＦ−ＩＲ）、ＫＤＲ、ＥｐｈＡ２、ＥｐｈＡ３、ＥｐｈＡ８、ＦＬＴ１、ＦＬＴ４、ＨＣＫ、ＰＴＫ５、ＲＥＴ、ＳＹＫ、ＤＤＲ１、ＤＤＲ２及びＰＡＲ−１を含むチロシンキナーゼによって媒介される、又はそれらに関連する生物学的状態を治療する化合物、組成物、方法も提供する。特に、本開示は、これらに限定されないが、Ｃｄｃ２キナーゼ、ＡＫＴ、ｃ−Ｋｉｔ、ｃ−ＡＢＬ、ｐ６０ｓｒｃ、ＶＥＧＦＲ３、ＰＤＧＦＲα、ＰＤＧＦＲβ、ＰＤＧＦＲ−αα、ＰＤＧＦＲ−ββ、ＰＤＧＦＲ−αβ、ＦＧＦＲ３、ＦＬＴ−３、Ｆｙｎ、Ｌｃｋ、Ｔｉｅ−２、ＦＭＳ（ＣＳＦ−ＩＲ）、ＫＤＲ、ＥｐｈＡ２、ＥｐｈＡ３、ＥｐｈＡ８、ＦＬＴ１、ＦＬＴ４、ＨＣＫ、ＰＴＫ５、ＲＥＴ、ＳＹＫ、ＤＤＲ１及びＤＤＲ２を含むチロシンキナーゼによって媒介される、又はそれらに関連する生物学的状態を治療する化合物、組成物、方法を提供する。いくつかの実施形態では、１つ又は複数のキナーゼによって媒介される、又はそれらに関連する疾患又は状態は、ＲＴＫ、例えばＰＤＧＦＲ、ＰＤＧＦＲ−αα、ＰＤＧＦＲ−ββ、ＰＤＧＦＲ−αβ若しくはｃ−Ｋｉｔ又はその組合せなどによって媒介される。

本開示の１つ又は複数のキナーゼによって媒介される、又はそれらに関連する疾患又は状態には、これらに限定されないが、ＰＡＨ、原発性ＰＡＨ、特発性ＰＡＨ、遺伝性ＰＡＨ、難治性ＰＡＨ、ＢＭＰＲ２、ＡＬＫ１、遺伝性出血性毛細血管拡張症に関連したエンドグリン、遺伝性出血性毛細血管拡張症に関連していないエンドグリン、薬物誘発性ＰＡＨ、及び毒素誘発性ＰＡＨ、全身性硬化症、混合性結合組織疾患、癌、難治性癌、転移性癌、新生組織形成、形成不全、過形成、形成異常、化生、前進形成、線維形成、血管新生疾患、肺機能障害、心臓血管機能障害、ＨＩＶ感染症、肝炎、門脈圧亢進症、肺高血圧症、先天性心疾患、低酸素症、慢性溶血性貧血、新生児持続性肺高血圧症、肺静脈閉塞性疾患（ＰＶＯＤ）、肺毛細血管腫症（ＰＣＨ）、左心疾患性肺高血圧症、収縮機能障害、拡張機能障害、弁膜症、肺疾患、間質性肺疾患、肺線維症、住血吸虫症、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、睡眠呼吸障害、肺胞低換気障害、高高度への慢性暴露、発育異常、慢性血栓塞栓性肺高血圧症（ＣＴＥＰＨ）、不明確な多因子性機序での肺高血圧症、血液学的障害、骨髄増殖障害、脾摘出術、全身性障害、サルコイドーシス、肺ランゲルハンス細胞組織球増殖症、リンパ管平滑筋腫症、神経線維腫症、血管炎、代謝性障害、糖原病、ゴーシェ病、甲状腺障害、腫瘍性閉塞症、線維性縦隔炎、及び透析での慢性腎不全の１つ又は複数に関連した、又はそれに続いて起こるＰＡＨ；肺高血圧症、先天性心疾患、低酸素症、慢性溶血性貧血、新生児持続性肺高血圧症、肺静脈閉塞性疾患（ＰＶＯＤ）、肺毛細血管腫症（ＰＣＨ）、左心疾患性肺高血圧症、収縮機能障害、拡張機能障害、弁膜症、肺疾患、間質性肺疾患、肺線維症、住血吸虫症、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、睡眠呼吸障害、肺胞低換気障害、高高度への慢性暴露、発育異常、慢性血栓塞栓性肺高血圧症（ＣＴＥＰＨ）、不明確な多因子性機序での肺高血圧症、血液学的障害、骨髄増殖障害、脾摘出術、全身性障害、サルコイドーシス、肺ランゲルハンス細胞組織球増殖症、リンパ管平滑筋腫症、神経線維腫症、血管炎、代謝性障害、糖原病、ゴーシェ病、甲状腺障害、腫瘍性閉塞症、線維性縦隔炎、免疫学的疾患及び炎症性疾患、過剰増殖性疾患、腎臓疾患、骨再形成、代謝性障害、血管疾患及び透析での慢性腎不全などの疾患が含まれる。

一態様では、本開示は、対象に、治療有効量の構造１の化合物（構造１の化合物は本明細書で記載されている）、前記化合物の互変異性体、前記化合物の薬学的に許容される塩、その互変異性体の薬学的に許容される塩、又はその混合物を投与することによって、対象における肺動脈高血圧症（ＰＡＨ）又は対象におけるＰＡＨに関連する生物学的状態を治療する方法を提供する。いくつかの実施形態では、本開示の１つ又は複数のキナーゼによって媒介される、又はそれらに関連する疾患又は状態は、ＰＡＨ、原発性ＰＡＨ、特発性ＰＡＨ、遺伝性ＰＡＨ、難治性ＰＡＨ、薬物誘発性ＰＡＨ、毒素誘発性ＰＡＨ、及び疾患に続いて起こるＰＡＨからなる群から選択される。

肺動脈高血圧症（ＰＡＨ）は、肺動脈圧の著しく且つ持続的な上昇を特徴とする命にかかわる疾患である。この疾患は、右心室（ＲＶ）の不全及び死をもたらす。慢性肺動脈高血圧症の処置のための現在の治療アプローチは、主に、症状の軽減並びにいくらかの予後の改善をもたらすものである。すべての治療法を前提としたとしても、大部分のアプローチの直接的な抗増殖性効果の証拠は見当たらない。さらに、現在適用されている大部分の薬剤の使用は、望ましくない副作用か又は不都合な薬物投与経路によって阻まれている。高血圧性の肺動脈の病理学的変化には、内皮損傷、血管平滑筋細胞（ＳＭＣ）の増殖及び過剰収縮並びに線維芽細胞増殖が含まれる。さらに、ＰＡＨ患者の状況は、当業界で公知のように、世界保健機関（ＷＨＯ）の分類（ＮＹ協会機能分類（NY Association Functional Classification）の後に改変されている）にしたがって評価することができる。

いくつかの実施形態では、構造１の化合物は、特に少なくとも１つのプロスタノイド、エンドセリンアンタゴニスト又はＰＤＥＶ阻害剤を施された後、先行治療法で不首尾であった患者のＰＡＨを治療又は防止する。他の実施形態では、これらの化合物は、より重篤に影響を受けている患者、特に、クラスＩＩ〜クラスＩＶの機能状態又はそれより重篤なクラスＩＩＩ又はＩＶの機能状態を有する患者のＰＡＨを治療又は防止する。他の実施形態では、これらの化合物は、ＢＭＰＲ２変異をかかえている患者のＰＡＨを治療又は防止する。

本開示は、特発性若しくは原発性肺高血圧症、家族性高血圧症、これらに限定されないが、結合組織疾患、先天性心臓欠陥（シャント）、肺線維症、門脈圧亢進症、ＨＩＶ感染症、鎌状赤血球症、薬物及び毒素、例えば食欲抑制因子、コカイン、慢性低酸素症、慢性肺閉塞性疾患、睡眠時無呼吸及び住血吸虫症に続いて起こる肺高血圧症、重大な静脈又は毛細血管の合併症に関連する肺高血圧症（肺静脈閉塞性疾患、肺毛細血管腫症）、左心室機能障害の程度と比例していない続発性肺高血圧症、及び／又は新生児、特にそれまでに従来のＰＡＨ治療に不首尾であった対象における持続性肺高血圧症に苦しむ対象を防止又は治療する方法を提供する。

一態様では、本開示は、過剰増殖、新生組織形成、形成不全、過形成、形成異常、化生、前進形成、線維形成、血管形成、炎症、肺機能及び心臓血管機能に関連する１つ又は複数の疾患を治療するための、構造１の化合物（構造１の化合物は本明細書で説明されている）、前記化合物の互変異性体、前記化合物のエナンチオマー、異性体若しくは立体異性体、前記化合物、前記化合物の互変異性体、エナンチオマー、異性体若しくは立体異性体の薬学的に許容される塩、又はその任意の混合物を提供する。

過剰増殖性の免疫学的及び炎症性、代謝性及び血管性疾患は当業界で公知であり、米国仮出願番号第６１／７５１，２１７号（これを、その全体において参照により本明細書に組み込む）に記載されているようなそうした疾患は、本明細書で説明する化合物及び薬剤の治療標的である。

本開示の他の態様は、対象に、治療有効量の構造１の化合物（構造１の化合物は本明細書で説明されている）、前記化合物の互変異性体、前記化合物の薬学的に許容される塩、その互変異性体の薬学的に許容される塩、又はその混合物を投与することによって、対象における高い肺動脈圧を防止する又は低減させる方法に関する。例えば、[発明の概要]を参照されたい。いくつかの実施形態では、構造１の化合物は、ＰＡＨに関連する生物学的状態、例えば異常な、右心室収縮期圧（ＲＶＳＰ）；肺動脈圧；心拍出量；右心室（ＲＶ）肥大など；及びＰＡ肥大を治療又は防止する。

いくつかの実施形態では、構造１の化合物は、投与する前の対象と比較して、対象における右心室（ＲＶ）機能、肺動脈（ＰＡ）収縮期圧及び／又は心拍出量の１つ又は複数の増大に関連する肺動脈圧を減少させる。いくつかの実施形態では、肺動脈圧の減少は、投与する前の対象と比較して、対象におけるＲＶ肥大、ＰＡ肥大、ＲＶＳＰ、持続的ＰＡ圧及び脳卒中のリスクの１つ又は複数の低下に関連している。いくつかの実施形態では、この低下は、少なくとも５、１０、１５、２０、２５、３０、３５、４０、４５、５０、５５、６０、６５、７０、７５、８０、８５、９０又は９５％の低下である。いくつかの実施形態では、この低下は、少なくとも４０％の低下である。

いくつかの実施形態では、肺動脈圧の減少は、投与する前の対象と比較して、対象における肺機能の低下及び／又は全身血圧の増大と関連していない。肺機能及び血圧を測定する方法は当業界で公知である。一態様では、本開示は、対象における肺動脈高血圧症（ＰＡＨ）を治療する方法であって、対象に構造１の化合物（構造１の化合物は本明細書で記載されている）、前記化合物の互変異性体、エナンチオマー、異性体若しくは立体異性体、前記化合物、前記化合物の互変異性体、エナンチオマー、異性体若しくは立体異性体の薬学的に許容される塩、又はその任意の混合物を投与することによって、血小板由来の成長因子受容体−アルファ若しくは血小板由来の成長因子受容体−ベータ又はその両方の１つ又は複数の下流標的のリン酸化状態（「ＰＳ」）を調節するステップを含み、その下流標的が、ＰＤＧＦＲ−α及び／又はＰＤＧＦＲ−β活性化の結果としてリン酸化された任意の基質であり、且つ、その下流標的が、ＡＫＴ、ＰＤＧＦＲ、ＳＴＡＴ３、ＥＲＫ１及びＥＲＫ２、又はＰＤＧＦＲ−α及び／又はＰＤＧＦＲ−βの他の任意の下流標的からなる群から選択される方法を提供する。タンパク質、キナーゼ／受容体についてのリン酸化状態のプロファイルは、例えばＺ−ｌｙｔｅキナーゼアッセイ、ＩｎｖｉｔｒｏｇｅｎＳｅｌｅｃｔＳｃｒｅｅｎ（登録商標）及び当業界で公知の他のキナーゼアッセイなどの当業界で公知の技術を用いて確認することができる。

適切な実施形態では、キナーゼ受容体活性の調節は、キナーゼ受容体活性の阻害である。ＰＤＧＦＲ、すなわちＰＤＧＦＲ−α、ＰＤＧＦＲ−β、ＰＤＧＦＲ−αα、ＰＤＧＦＲ−ββ及びＰＤＧＦＲ−αβ及び／又はｃ−Ｋｉｔは、本発明のいくつかの実施形態において阻害されるＲＴＫの例である。いくつかの実施形態では、その阻害は、少なくとも０．００１、０．０１、０．１、１、５、１０、１５、２０、２５、３０、３５、４０、４５、５０、５５、６０、６５、７０、７５、８０、８５、９０又は９５％の阻害である。いくつかの実施形態では、ＰＳＲ調節は、ＡＫＴ、ＳＴＡＴ３、ＥＲＫ１、ＥＲＫ２、ＰＤＧＦ及びＰＤＧＦＲ、すなわちＰＤＧＦＲ−αα、ＰＤＧＦＲ−ββ及びＰＤＧＦＲ−αβの１つ又は複数の調節である。いくつかの実施形態では、ＰＳの調節は、投与する前の対象におけるＰＳと比較した、対象における全ＳＴＡＴ３に対するリン酸化ＳＴＡＴ３の低下である。いくつかの実施形態では、その低下は、少なくとも０．００１、０．０１、０．１、１、５、１０、１５、２０、２５、３０、３５、４０、４５、５０、５５、６０、６５、７０、７５、８０、８５、９０又は９５％の低下である。いくつかの実施形態では、ＰＳの調節は、投与する前の対象におけるＰＳと比較した、対象における全ＥＲＫ１に対するジリン酸化ＥＲＫ１の低下である。いくつかの実施形態では、その低下は、少なくとも０．００１、０．０１、０．１、１、５、１０、１５、２０、２５、３０、３５、４０、４５、５０、５５、６０、６５、７０、７５、８０、８５、９０又は９５％の低下である。他の実施形態では、ＰＳの調節は、投与する前の対象におけるＰＳと比較した、対象における全ＥＲＫ２に対するジリン酸化ＥＲＫ２の低下である。いくつかの実施形態では、その低下は、少なくとも０．００１、０．０１、０．１、１、１０、５０、６０、７０、８０、８５、９０又は９５％の低下である。

いくつかの実施形態では、ＰＳの調節は、投与する前の対象におけるＰＳと比較した、対象における全ＥＲＫ１に対するモノリン酸化ＥＲＫ１の低下である。いくつかの実施形態では、その低下は、少なくとも０．００１、０．０１、０．１、１、５、１０、１５、２０、２５、３０、３５、４０、４５、５０、５５、６０、６５、７０、７５、８０、８５、９０又は９５％の低下である。いくつかの実施形態では、ＰＳの調節は、投与する前の対象におけるＰＳと比較した、対象における全ＰＤＧＦＲに対するリン酸化ＰＤＧＦＲの低下である。いくつかの実施形態では、その低下は、少なくとも０．００１、０．０１、０．１、１、５、１０、１５、２０、２５、３０、３５、４０、４５、５０、５５、６０、６５、７０、７５、８０、８５、９０又は９５％の低下である。いくつかの実施形態では、ＰＳの調節は、投与する前の対象におけるＰＳと比較した、対象における全ＡＫＴに対するリン酸化ＡＫＴの低下である。いくつかの実施形態では、その低下は、少なくとも０．００１、０．０１、０．１、１、５、１０、１５、２０、２５、３０、３５、４０、４５、５０、５５、６０、６５、７０、７５、８０、８５、９０又は９５％の低下である。

本発明を、以下の実施例によってさらに例示する。これらは、限定しようとするものと解釈すべきでは全くないものとする。以下は、ＲＴＫシグナル伝達経路が、ヒト疾患状態、例えばＰＡＨ及びその疾患の動物モデルにおいて活性化されることを例示する、実施例を通して使用される材料及び方法の説明である。

材料。ＰＫ１０４５３、（Ｓ）−Ｎ−（３−（１−（（６−（４−ヒドロキシ−３−メトキシフェニル）ピラジン−２イル）アミノ）エチル）フェニル）−５−メチルニコチンアミド、すなわち構造２は、Ｏｒｇａｎｉｘ，Ｉｎｃ．（Ｗｏｂｕｒｎ、ＭＡ）によって合成されたものである。ヒトＰＡ平滑筋細胞及び細胞培養液はＣｅｌｌＡｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ、Ｉｎｃ．から得た。ＰＤＧＦＢＢ、パラ−トルエンスルホン酸、水酸化アンモニウム及びＩＲ７８０はＳｉｇｍａＡｌｄｒｉｃｈ（Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ、Ｍｉｓｓｏｕｒｉ）から得た。イマチニブメシラートはＬＣＬａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ（Ｗｏｂｕｒｎ、ＭＡ）から得た。ヒト胎児肺線維芽細胞（ＨＬＦ）はＣｅｌｌＡｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ、Ｉｎｃ．、ＳａｎＤｉｅｇｏから得た。ＤＭＥＭ培地はＭｅｄｉａｔｅｃｈ（Ｍａｎａｓｓａｓ、ＶＡ．）から得た。ＰＤＧＦＡＡ、ＰＤＧＦＢＢ及びＧｌｕｔａｍａｘはＬｉｆｅＴｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ（ＧｒａｎｄＩｓｌａｎｄ、ＮＹ）から得た。パラ−トルエンスルホン酸、水酸化アンモニウム、ＩＲ７８０及びモノクロタリン（Ｃ２４０１ロット０３１Ｍ１９２１Ｖ及びロットＳＬＢＢ７８０２Ｖ）はＳｉｇｍａＡｌｄｒｉｃｈ（Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ、Ｍｉｓｓｏｕｒｉ）から得た。抗ホスホ−ＡＫＴ（Ｓｅｒ４７３）、抗ホスホ−ＡＫＴ（Ｔｈｒ３０８）、ｐａｎ−ＡＫＴ（ＣＳＴ２９２０マウスｍＡＢ及びＣＳＴ２９６５ウサギｍＡｂ）、抗ホスホ−ＥＲＫ１／２、抗ホスホ−ＳＴＡＴ３及び全ＳＴＡＴ３抗体はＣｅｌｌＳｉｇｎａｌｉｎｇＴｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ（Ｗａｌｔｈａｍ、ＭＡ）から得た。抗全ＥＲＫ１／２抗体はＰｒｏｔｅｉｎＳｉｍｐｌｅ（ＣＡ）から得た。抗フォン・ヴィレブランド因子、アクチン、ホスホ−ＰＤＧＦＲα（Ｙ７５４）及びＰＤＧＦＢＢ抗体はＡｂＣａｍ（Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ、ＭＡ）から得た。ＰＤＧＦＡＡ（ｓｃ−１２８）、ＰＤＧＦＲ−アルファ（ｓｃ−３３８）、ＰＤＧＦＲ−ベータ（ｓｃ−４３２）及びｐ−ＰＤＧＦＲ−ベータ（Ｔｙｒ１０２１）（ｓｃ−１２９０９）に対する抗体はＳａｎｔａＣｒｕｚＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ（ＣＡ）から得た。６８０ＬＴヤギ抗マウスＩｇＧ、ＩＲＤｙｅ８００Ｗヤギ抗ウサギＩｇＧ及びＯｄｙｓｓｅｙブロッキング緩衝液はＬｉｃｏｒ（Ｌｉｎｃｏｌｎ、ＮＥ）から得た。

インビトロでのキナーゼアッセイ。
Ｚ−ｌｙｔｅキナーゼアッセイを、ＰＫ１０４５３（構造２）によるＰＤＧＦＲアルファ及びＰＤＧＦＲベータ媒介リン酸化の阻害を判定するために実施した。１０点の滴定曲線をモデル化してＩＣ_５０を計算した（ＩｎｖｉｔｒｏｇｅｎＳｅｌｅｃｔＳｃｒｅｅｎ（登録商標））。

ＰＡＳＭＣ増殖アッセイ。ヒト肺動脈平滑筋細胞（ＰＡＳＭＣ）はＣｅｌｌＡｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ（ＳａｎＤｉｅｇｏ、ＣＡ．）から得、９６ウェルフォーマット中で５０％コンフルエンスまで成長させた。細胞を、ＰＤＧＦＢＢ５０ｎｇ／ｍｌで刺激する２４時間前に無血清培地に切り替え、ＰＫ１０４５３（構造２）の濃度を変動させた。処置２４時間後に、ＣｙｑｕａｎｔＮＦ細胞増殖アッセイを実施し（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ（登録商標））、蛍光シグナルをＣｙｔｏｆｌｕｏｒＰｌａｔｅリーダーで測定した。データは、各濃度で８つの複製物の平均値をもとにした。

ＩｎＣｅｌｌウェスタン（ＩＣＷ）。ＰＤＧＦＢＢ及びＰＤＧＦＡＡ刺激ＡＫＴリン酸化についてのＰＫ１０４５３（構造２）とイマチニブの阻害プロファイルを比較するために、ＩＣＷを、Ｃｈｅｎら、「キナーゼシグナル伝達経路及び薬物効力を監視するための細胞に基づいた免疫細胞化学的アッセイ（A cell-based immunocytochemical assay for monitoring kinase signaling pathways and drug efficacy）」、Ａｎａｌｙｔｉｃａｌｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ；Ｖｏｌ．３３８：１３６〜４２頁（２００５年）の方法にしたがって、修正を加えて実施した。ＨＬＦを、３７℃、５％ＣＯ_２で、５％ＦＢＳを含むＤＭＥＭ及び４ｍＭＧｌｕｔａｍａｘで、６継代以下での継代培養で保持した。ＨＬＦを、９６ウェルプレートに播種し、７０〜８０％コンフルエンスまで成長させ、次いで４８時間血清不足にした。細胞を、指示された濃度で、薬物（ＰＫ１０４５３又はイマチニブ）で３０ｍｉｎ処理し、次いで１０ｎｇ／ｍｌのＰＤＧＦＡＡ又はＢＢに７．５ｍｉｎ暴露させた。細胞を３．７％ホルムアルデヒド中に固定し、０．１％ＴｒｉｔｏｎＸ−１００で洗浄し、Ｏｄｙｓｓｅｙブロッキング緩衝液で９０ｍｉｎ処理した。タンパク質を、１：１００希釈ウサギｍＡｂをリン酸化ＡＫＴ（Ｓｅｒ４７３又はＴｈｒ３０８）に、１：１００のマウスｍＡｂを全Ａｋｔ−ｐａｎ−４０４０Ｄに終夜インキュベートした。抗体を、ＩＲＤｙｅ６８０ＬＴヤギ抗マウスＩｇＧ及びＩＲＤｙｅ８００Ｗヤギα−ウサギＩｇＧコンジュゲート抗体を用いて検出した。洗浄した後、シグナルを、Ｏｄｙｓｓｅｙ赤外画像システム（ＬＩ−ＣＯＲ）を用いて定量化した。リンタンパク質シグナル（８００ｎｍ）を各ウェルから得た総タンパク質シグナル（７００ｎｍ）に対して正規化し、同一プレート上の２連での実験値の平均をとり報告した。

動物。雄のスプラーグドーリーラット（体重３２０〜３３０グラム；ＴａｃｏｎｉｃＩｎｃ．）をこの試験で使用した。動物を、１２ｈの明／暗サイクルを備えた標準的なラット用ケージに収容し、標準的なラットの餌及び水を適宜提供した。動物をＮＩＨ指針にしたがって管理し使用した。すべての動物プロトコルは、ＢａｓｓｅｔｔＭｅｄｉｃａｌＣｅｎｔｅｒ及びＰｕｌｍｏｋｉｎｅＩＡＣＵＣによって承認されているものである。

処方物及びエアロゾル送達。ＰＫ１０４５３（構造２）を２０ｍｇ／ｍｌの濃度で１Ｍトシル酸に溶解させた。噴霧化を、ＰＡＲＩネブライザーを用いて１２．５ｐｓｉの空気圧で実施した。エアロゾル液滴を、エアロゾル気流中を通過するアンモニア蒸気で中和した。次いでその粒子を、暴露チャンバーへ到達する前に、シリカビーズカートリッジの環状管を通して流して乾燥させた。６ポート型暴露チャンバーは、ＰｏｗｅｒｓｃｏｐｅＩｎｃ．（Ｍｉｎｎｅａｐｏｌｉｓ、ＭＮ）によって注文設計し作製された、鼻だけを暴露させるシステムであった。各ポートでの真空流量は流量計で別々に制御した。エアロゾル粒径は、Ａｎｄｅｒｓｏｎ（ＭａｒｋＩＩ）カスケードインパクターを備えた乾燥カラムの出口ポートで測定した。空気動力学的中央粒子径（ＭＭＡＤ）は２μｍであり、関連幾何標準偏差（ＧＳＤ）は１．６であった。イマチニブメシラートを２０ｍｇ／ｍｌで水に溶解し、ＰＡＲＩネブライザーで送達し、次いで、吸入させる前に、シリカビーズカートリッジの環状管を通して流すことによって乾燥させた。

吸入された用量の推定。Ｐｏｗｅｒｓｃｏｐｅ暴露チャンバーによって４ｍｉｎか又は８ｍｉｎ（各群についてｎ＝６）、ＰＫ１０４５３（構造２）に暴露させたフィルターを、褐色ガラスバイアルに入れた。１２ｍＬの１：３（ｖ／ｖ）メタノール：アセトニトリルを、断続的に混合しながら、約１ｈｒかけてフィルターを入れた各バイアルに加え、次いで６０秒間超音波処理した。次いで、１０μＬの未知のフィルター抽出物を９９０μＬの１：３（ｖ／ｖ）メタノール：アセトニトリルに加えることによって、一定分量を１００倍希釈した。試料を３０秒間渦巻き混合させ、次いで１００μＬの希釈分量を、１００μＬ（１７２ｎｇ／ｍＬ）の１：１メタノール：水中の化学的に関係性のない（nonchemically related）内部標準（ＰＫ１８８５５）と一緒にし、渦巻き混合させ、ＬＣ−ＭＳ／ＭＳ分析用のオートサンプラーバイアルに移した。フィルター抽出物を、１００％メタノール（ＰｈａｒｍＯｐｔｉｍａ（登録商標）、Ｉｎｃ．）で調製した較正曲線に対して比較した。ＰＫ１０４５３（構造２）のμｇ／Ｌ空気でのエアロゾル濃度を、４ｍｉｎ及び８ｍｉｎの暴露時間について、フィルター上のＰＫ１０４５３（構造２）の平均合計μｇ及び各フィルターを通過した流量（０．８Ｌ／ｍｉｎ）をもとにして計算した。吸入用量を、ＰＫ１０４５３／ｃｍ^２濾紙の平均濃度（４ｍｉｎ及び８ｍｉｎ暴露の平均）、プレチスモグラフィー（０．１５Ｌ／ｍｉｎ）で測定した平均通気ｍｉｎ、及び推定沈着率（deposition fraction）０．１を用いて計算した。イマチニブ８ｍｉｎ用量は重量分析にもとづいた。

画像化。肺内の吸入ＰＫ１０４５３（構造２）の空間分布は蛍光画像で評価した。近ＩＲ蛍光トレーサー、ＩＲ−７８０をネブライザー中の薬物溶液に加えて、乾燥エアロゾル粒子が薬物とＩＲトレーサーの両方を確実に含むようにした。２ｍｉｎ暴露させた後、動物を、気管開口部を通して挿管して全身麻酔下に置き、肺を切除した。ＯＣＴ／ＰＢＳを、肺動脈を通して注入し、肺に空気を吹き込み、肺を液体窒素の気相で凍結させた。連続した肺の約２ｍｍ切断片を、ＬｉｃｏｒＯｄｙｓｓｅｙ撮像装置で画像化した。

薬物動態学的試験。ＰＫ１０４５３（構造２）を静脈内で又は吸入により動物（複数）に投与し、次いでこれらを時間０、１０、２０及び６０ｍｉｎ（各時間点でｎ＝３）で安楽死させた。心穿刺により血液試料を取り、肺を切除した。肺をホモジナイズし、ＰＫ１０４５３（構造２）をアセトニトリル：メタノールの１：３混合液で抽出した。同様に、血漿をアセトニトリル：メタノールの１：３混合液で抽出した。薬物をＬＣＭＳ／ＭＳ（ＰｈａｒｍＯｐｔｉｍａＩｎｃ．、ＰｏｒｔａｇｅＭＩ）でアッセイした。このデータにＥｘｃｅｌで一次指数曲線を当てはめた。ＡＵＣを台形積分法で決定した。

ラットＭＣＴモデルでの効力試験−ラットＭＣＴモデルにおけるＰＫ１０４５３（構造２）用量応答試験。
雄のスプラーグドーリーラットにＭＣＴ６０ｍｇ／ｋｇＩＰＭＣＴを施し、３週間後、ＰＫ１０４５３（構造２）又はビヒクル対照を吸入により投与した。４つの群：ビヒクル対照（４ｍｉｎ暴露）、及び１日に３回２ｍｉｎ（Ｄ２）、４ｍｉｎ（Ｄ４）又は８ｍｉｎ（Ｄ８）の暴露時間でのＰＫ１０４５３（構造２）の３つの処置群を試験した。これらのレジメンを２週間投与した。ビヒクルは上記したようにアンモニア蒸気で中和された、エアロゾル化した１Ｍトシル酸からなるものである。捕捉したエアロゾル粒子を水に溶解して調製した溶液のｐＨを用量毎に測定した。これは常に５．５〜６．０の範囲内にあった。この試験の最後に、ＲＶ収縮期圧を測定し、心腔を切開し計量した。

ラットＭＣＴモデルにおける効力試験−ラットＭＣＴモデルにおけるＰＫ１０４５３（構造２）ｖｓ．イマチニブ
雄のスプラーグドーリーラットにＭＣＴ６０ｍｇ／ｋｇＩＰを与えた。３週間後、ビヒクル（１Ｍトシル酸）、ＰＫ１０４５３（構造２、１Ｍトシル酸中に２０ｍｇ／ｍｌ遊離塩基で）又はイマチニブメシラート（ネブライザー溶液中に２０ｍｇ／ｍｌ）を指定された群に、１日に３回２週間、８ｍｉｎ吸入暴露させて投与した。試験の最後に、ＲＶＳＰ圧を測定し；肺と心臓をホルマリンに固定した。ＲＶＳＰの測定のため、動物をイソフルランで鎮静させ、気管開口部を通して挿管し、ＴＯＰＯＶＥＮＴ圧力制御された人工呼吸器（最大吸気圧１８ｃｍＨ_２Ｏ、ＰＥＥＰ５ｃｍ）で人工呼吸させた。胸骨切開後、Ｓｃｉｓｅｎｓｅ社の高品質カテーテルを、右心室心尖部（RV apex）を通して挿入した。

ラットＭＣＴ＋ＰＮモデルでの効力試験。
肺全摘、及び肺動脈中へのＴＲＭ５３Ｐテレメトリーモニター（ＴｅｌｅｍｅｔｒｙＲｅｓｅａｒｃｈ、ＮｅｗＺｅａｌａｎｄ及びＡＤＩｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ、Ｃｏｌｏｒａｄｏ）の埋め込みをラットにおいて実施した。ＭＣＴ後２週間で、ＰＫ１０４５３（構造２）を１日に３回、１週間投与した。投薬は、ＭＣＴ後、３週間ではなく２週間で開始した。その理由は、より挑戦的なこのモデルでは、動物はより速くＰＡＨを発現し、ＭＣＴだけで処置した動物より早く苦痛（distress）を現わすからである（データは示さていない）。２つの群に、ビヒクル対照か又はＰＫ１０４５３（構造２）の４ｍｉｎ暴露を施した。大気（動物用施設の高度にもとづくと大気圧７１６ｍｍＨｇと推定される）中で、歩行動物において毎朝投与する前に、ＰＡ圧のサンプリングを５ｍｉｎ実施した。プロトコル４（イマチニブｖｓ．ビヒクル）では、動物にＤＳＩＰＡＣ４０送信機を取り付け、次いでモノクロタリン５０ｍｇ／ｋｇＩＰ（ロットＳＬＢＢ７８０２Ｖ）を施した。より少ない用量のＭＣＴをこの試験のために用いた。その理由は、このロットのＭＣＴを６０ｍｇ／ｋｇ用いようと試みたが、体重減少と頻呼吸のため、高い割合の動物において早期の安楽死を必要とする結果となったためである。ＭＣＴＩＰ注射２週間後、ビヒクル（ネブライザー溶液中に、メシラート３ｍｇ／ｍｌ又はイマチニブメシラート２０ｍｇ／ｍｌ）を、９日間にわたって１日に３回、８ｍｉｎ暴露で投与した。このプロトコルのため、毎朝投与する前に、テレメトリーデータを毎日１０ｍｉｎ得た。

ＰＶループの測定。動物の別個のコホートにおいて、上述したように、ＭＣＴ＋ＰＮモデルを展開し、次いでＰＫ１０４５３（構造２）を、１日に３回、４ｍｉｎ又は８ｍｉｎ薬物処置群に投与した。ビヒクル対照群には１日に３回、４ｍｉｎ暴露を施した。１４日間処置した後、圧力−体積（ＰＶ）ループをアドミッタンスシステム（Ｓｃｉｓｅｎｓｅ、Ｉｎｃ．）で得、ラットをイソフルラン及び１００％ＦｉＯ_２による全身麻酔下に置いた。また、或いは代替的に、１４日間処置した後、各群においてＲＶ圧を得た。各群のサブセットにおいて、１４日間処置した後、圧力−体積（ＰＶ）ループをアドミッタンスシステム（高品質カテーテルＦＴＥ１９１８Ｂ、Ｓｃｉｓｅｎｓｅ、Ｉｎｃ．）で得た。全身麻酔を導入し気管開口部を通して挿管した後、ラットを、圧力がコントロールされた人工呼吸器（ＴＯＰＯＶＥＮＴ）上に置いた。全身麻酔は、イソフルラン及び１００％ＦｉＯ_２からなり、最大吸気圧を１８ｃｍに、ＰＥＥＰを５ｃｍＨ_２Ｏに設定した。左開胸を、ＲＶ流出路を介してＲＶにおいて、アドミッタンスカテーテルで実施した。

全身血圧試験。全身ＢＰに対するＰＫ１０４５３（構造２）の効果を、下行大動脈に埋め込んだＤＳＩＰＡＣ４０送信機を用いて、携帯式ＭＣＴ処置ラットにおいて試験した。ＭＣＴ６０ｍｇ／ｋｇＩＰの投与３週間後、動物に、吸入ＰＫ１０４５３（構造２）又はビヒクルを、３Ｘ／ｄで７日間４ｍｉｎ暴露により吸入させた。毎朝投与前に血圧を記録した。

プレチスモグラフィー。プレチスモグラフィーを、ＥＭＫＡデュアルチャンバープレチスモグラフ及びＩＯＸソフトウェアで実施した。測定したパラメーターには、呼吸頻度、一回呼吸量、毎分換気量（minute ventilation）、最大吸気流及び呼気流並びに気道抵抗（ＳＲａｗ）が含まれる。最初のデータ収集を行う前に、動物をプレチスモグラフに３日間順化させた。測定は、最初の薬物を投与する前と試験の最後に行った。

組織学及び形態計測学的分析。試験の最後に、全身麻酔下で人工呼吸器をつけた動物から心臓と肺を取り出した。ヘパリン添加生理食塩水（heparinized saline）を、主肺動脈を通して加圧下で注入した。ウエスタンブロット及びＮａｎｏＰｒｏ１００アッセイ分析用に、右肺上葉を直ちに結紮し液体窒素に入れた。心臓を取り出し、ＲＶ自由壁、心室中隔及びＬＶ自由壁を切開し計量した。緩衝化したホルマリン（１０％）を、肺動脈と気管の両方を通して加圧下で注入した。形態計測学的分析を、８μｍの切断片にしたＨ＆Ｅ染色されたホルマリン固定組織で実施した。肺細動脈の中膜面積と内腔面積を、処置群に対して盲検化された技術者によってＩｍａｇｅＪソフトウェアで測定した。測定は、切断片当たり２０の肺細動脈について行った。内腔面積と全中膜面積の比を決定した。この比は、全肺細動脈面積における変動を正規化する。さらに、閉塞性分析を、Ｈｏｍｍａら、「デヒドロエピアンドロステロンによる、肺全摘ラットのモノクロタリン誘発肺高血圧症に対する保護におけるＲｈｏＡ／Ｒｈｏキナーゼシグナル伝達の関与（Involvement of RhoA/Rho kinase signaling in protection against monocrotaline-induced pulmonary hypertension in pneumonectomized rats by dehydroepiandrosterone）」、ＡｍＪＰｈｙｓｉｏｌＬｕｎｇＣｅｌｌＭｏｌＰｈｙｓｉｏｌ．Ｖｏｌ．２９５：Ｌ７１〜８頁（２００８年）の方法にしたがって、モノクロタリン＋肺全摘試験（特に効力試験５）で実施した。簡潔に述べると、前毛細血管細動脈を、新生内膜の病変の証拠がない場合をグレード０に、５０％未満の内腔の閉塞の場合をグレード１に、５０％超の閉塞の場合をグレード２に割り当てた。Ｍａｓｓｏｎトリクローム染色を、ＭＣＴ＋ＰＮモデルからの肺切断片で実施した。

ＮａｎｏＰｒｏ免疫アッセイ。リン酸化ＥＲＫ１／２とＳＴＡＴアイソフォームの相対的差異を、ＮａｎｏＰｒｏ１００（登録商標）免疫アッセイシステム（ＰｒｏｔｅｉｎＳｉｍｐｌｅ／ＣｅｌｌＢｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ、ＣＡ）で測定した。Ｆａｎら、「臨床検体における癌タンパク活性化の連続分析のためのナノ流体プロテオミクスアッセイ（Nanofluidic proteomic assay for serial analysis of oncoprotein activation in clinical specimens）」、ＮａｔＭｅｄ１５：５６６〜５７１頁（２００９年）を参照されたい。

免疫組織化学的検査。抗原回復を、クエン酸塩緩衝液（ｐＨ６．０）又はＴｒｉｓ−ＥＤＴＡ緩衝液（ｐＨ９．０）で実施した。免疫組織化学的検査を以下の標的：ＣＤ２０（Ｂ細胞マーカー）、ＣＤ３（Ｔ細胞マーカー）、フォン・ヴィレブランド因子（ｖＷＦ）、全ＳＴＡＴ３、ホスホＳＴＡＴ３（Ｔｙｒ７０５）、全ＰＤＧＦＲ−アルファ、全ＰＤＧＦＲ−ベータ及びホスホＰＤＧＦＲ−ベータについて実施した。競合ペプチドはＰＤＧＦＲ−アルファ及びホスホ−ＰＤＧＦＲ−ベータに使用可能であった。シグナル検出をＥＸＰＯＳＥＨＲＰ／ＤＡＢキット（Ａｂｃａｍ（登録商標））で実施した。

統計的分析。別段の言及のない限り、データは平均±ＳＥＭで提示する。複数の群の比較のために、ボンフェローニ補正を含む一般線形モデルを使用した（ＳＰＳＳ１４．０）。有意性はｐ＝０．０５レベルで設定した。

（例１）
ＰＫ１０４５３（構造２）の特性評価
インビトロでのキナーゼアッセイによって、ＡＴＰＫ_ｍでのＰＫ１０４５３についてのＩＣ_５０は、ＰＤＧＦＲ−αに対して３５ｎＭであり、ＰＤＧＦＲ−βに対して１０．１ｎＭであることが実証された。イマチニブについて、ＡＴＰＫ_ｍでのＩＣ_５０は、ＰＤＧＦＲ−αに対して７１ｎＭであり、ＰＤＧＦＲ−βに対して６０７ｎＭであった。図１を参照されたい。図２に例示したＩＣＷで示されるように、Ｓｅｒ４７３でのＰＤＧＦＢＢ刺激ＡＫＴリン酸化についてのＰＫ１０４５３のＩＣ_５０は、イマチニブについての１．８μＭに対して０．１３μＭであった（ｐ＜０．０１）。Ｔｈｒ３０８でのＰＤＧＦＢＢ刺激ＡＫＴリン酸化についてのＰＫ１０４５３のＩＣ_５０は、イマチニブについての．３．２５μＭに対して、０．４３μＭであった（ｐ＜０．００１）。ＰＫ１０４５３及びイマチニブのＡＫＴのＰＤＧＦＡＡ刺激リン酸化についてのＩＣ_５０濃度には有意差はなかった。

推定された吸入用量−ＰＫ１０４５３（構造２）及びイマチニブ。ＰＫ１０４５３の平均濃度は、４ｍｉｎ暴露について６２．４±３．３μｇ／ｃｍ^２濾紙であり、８ｍｉｎ暴露について１３７±７．０μｇ／ｃｍ^２であった。これは、４ｍｉｎ暴露について９１．６５μｇ／Ｌ空気、８ｍｉｎ暴露について１００．６μｇ／Ｌ空気のエアロゾル濃度をもたらした。重量分析にもとづいたイマチニブのエアロゾル濃度は１６７μｇ／Ｌであった。沈着率０．１及びラット重量３００ｇを仮定して、平均吸入用量（８ｍｉｎ）は、表１に示すように、ＰＫ１０４５３について約２０μｇ／ｋｇであり、イマチニブについて４０μｇ／ｋｇであった。推定吸入用量は、エアロゾル中のＰＫ１０４５３（構造２）の測定濃度及びイマチニブの重量分析値、測定した毎分換気量（ＭＶ）、推定した０．１の沈着率及びラット重量３００ｇから計算した。

吸入ＰＫ１０４５３（構造２）の肺分布及び薬物動態。ＩＲ７８０トレーサーでの、ＰＫ１０４５３の吸入に続く肺切断片の蛍光画像を図３に示す。ここで、蛍光強度は、肺全体にわたって十分に分散していることが示されている。より黒ずんだ線のネットワークが結合組織から生じており、したがって、これは疾患に冒された気道を示してはいない。イマチニブの空間分布も同様であった（データは示さず）。

薬物動態学的試験のため、吸入によって投与された場合の肺内のＰＫ１０４５３（構造２）の濃度を、ＩＶ投与で達成された濃度と比較した。Ｍｏｒｅｎ「医薬におけるエアロゾル:原理、診断及び治療（Aerosols in medicine ：principles, diagnosis, and therapy）」、Ａｍｓｔｅｒｄａｍ；ＮｅｗＹｏｒｋ：Ｅｌｓｅｖｉｅｒ．ｘｘ、４２９（１９９３年）及びＰｈａｌｅｎら、「吸入暴露方法（Inhalation exposure methodology）」、ＥｎｖｉｒｏｎＨｅａｌｔｈＰｅｒｓｐｅｃｔ５６：２３〜３４頁（１９８４年））に記載されているように、呼吸投与及びＩＶ投与に続く時間の関数としての薬物濃度のプロットのＡＵＣを比較することによって、静脈内投与に対する吸入投与の薬物動態学的利点、Ｒ_ｄを推定することができる：
Ｒ_ｄ＝［（ＡＵＣ_肺／ＡＵＣ_血漿）呼吸器］／［（ＡＵＣ_肺／ＡＵＣ_血漿）ＩＶ］

薬物動態学的データを一次指数曲線にモデル化し、この曲線からＡＵＣを計算した（表２を参照されたい）。図４は、ＰＫ１０４５３（構造２）の吸入又はＩＶ投与に続く時間の関数として、肺内及び血漿中の薬物レベルを示す。データは、ＩＶ投与されたＰＫ１０４５３（Ｒ_ｄ＝４４．６）と比較して、吸入投与されたものは４５倍有利であることを示している。

（例２）
ＭＣＴモデル効力
ＲＶＳＰ値を図５Ａに示す。ビヒクル群（ｎ＝６）では、ＲＶＳＰは８０．４±２．６ｍｍＨｇであった。処置群について、Ｄ２（ｎ＝６）、５１．４±６．５；Ｄ４（ｎ＝６）、４４．４±３．８；及びＤ８（ｎ＝５）、３７．１±４．５ｍｍＨｇ（ｐ＜０．００１）。正常な対照群ＲＶＳＰは２８．５±２．６ｍｍＨｇ（ｎ＝３）であった。ビヒクル処置群と比較して、Ｄ４群においてＲＶＳＰの４４％の低下があり、Ｄ８群においてＲＶＳＰの５４％の低下があった。比（ＲＶ＋ＩＶＳ）／ＬＶ重量で測って、ＲＶ肥大の度合いの有意の減少もあった。図５Ｂを参照されたい。中隔はＲＶとＬＶで共有されているので、データはこの比で表している。しかし、ＲＶ／（ＩＶＳ＋ＬＶ）比を用いても同様の結果が示されている。

さらに、ビヒクル群には６匹の動物がいたが、２匹の動物が出血したため、正確なＲＶ収縮終期圧は得られなかった。したがって、ＲＶ収縮期圧は、ビヒクル群においてはｎ＝４をもとにし、５７．９±７．６ｍｍＨｇであった。ＰＫ１０４５３（構造２）群（ｎ＝１２）では、ＲＶ収縮終期圧は３６．３±２．６ｍｍＨｇであり、イマチニブ群（ｎ＝６）では、３１．８±１．８ｍｍＨｇ（ｐ＝０．００１ビヒクルｖｓ．ＰＫ１０４５３；ｐ＝０．００２ビヒクルｖｓ．イマチニブ、図５Ｃ）であった。収縮終期容積は、ＰＫ１０４５３（９９．５±１０μｌ）及びイマチニブ（８１±４．３μｌ）に対して、ビヒクル群（１５８±１２．６μｌ）においてより大きかった（ｐ＝０．０５ビヒクルｖｓ．ＰＫ１０４５３；ｐ＝０．０１４ビヒクルｖｓ．イマチニブ；ｐ＝ＮＳＰＫ１０４５３ｖｓ．イマチニブ）。以下のパラメーター：収縮終期容積、駆出率（ejection fraction）、心拍出量、一回仕事量について、群の間での有意差はなかった。内腔と中膜の比は、ＭＣＴモデルにおいて、ビヒクルに対してＰＫ１０４５３とイマチニブの両方とも改善された（ビヒクル（Ｖ、ｎ＝４）：０．５５±０．１；ＰＫ１０４５３（Ｄ８、ｎ＝１２）：０．９４±０．０８；イマチニブ（Ｉ８、ｎ＝５）：０．９９±０．０７；ｐ＜０．０１Ｄ８ｖｓ．Ｖ、ｐ＜０．０５Ｉ８ｖｓ．Ｖ、図５Ｄ）。

（例３）
ラットＭＣＴ＋ＰＮモデルでの効力試験
テレメトリー試験。ラットＭＣＴ＋ＰＮモデルにおけるテレメトリー試験の結果を説明する。処置開始前０日目、ビヒクル群におけるＰＡ収縮期圧は４１．０±１１．７ｍｍＨｇであり、ＰＫ１０４５３（構造２）群において４３．１±３．５ｍｍＨｇ（ｐ＝ＮＳ）であった。５日間の処置後、ＰＡ収縮期圧は、ビヒクル群において６９．４±１２．９ｍｍＨｇであり、ＰＫ１０４５３群において４７．３±３．０ｍｍＨｇで有意に低かった（ｐ＜０．０１）。処置８日目、ビヒクル群におけるＰＡ収縮期圧は８３．５±８．５であったが、ＰＫ１０４５３群では４７．３±４．９ｍｍＨｇで有意に低かった（ｐ＜０．００１）。

別のＰＫ１０４５３（構造２）テレメトリー試験において、処置開始前１日目に、ビヒクル群におけるＰＡ収縮期圧は４７．４±１０．２ｍｍＨｇであり、ＰＫ１０４５３群では４３．１±３．５ｍｍＨｇ（ｐ＝ＮＳ）であった。５日間の処置後、ＰＡ収縮期圧はビヒクル群において６７．４±１１．４ｍｍＨｇであり、ＰＫ１０４５３群において４７．２±３．０ｍｍＨｇで有意に低かった（ｐ＝０．０３）。処置９日目、ビヒクル群におけるＰＡ収縮期圧は９２．８±９．１ｍｍＨｇであったが、ＰＫ１０４５３群（ｐ＝０．０３）では５０．５±７ｍｍＨｇで有意に低かった。イマチニブテレメトリー試験（試験４）について、１日目で、ビヒクル群におけるＰＡ収縮期圧は５１．４±８．９ｍｍＨｇであり、イマチニブ群では４１．５±３．５ｍｍＨｇであった。処置９日目、ビヒクル群におけるＰＡ収縮期圧は８０．４±１４．２ｍｍＨｇであり、イマチニブ群では７５．１±７ｍｍＨｇ（ｐ＝ＮＳ）であった。図６を参照されたい。

ＭＣＴ＋ＰＮモデルでのＲＶ圧及びＰＶループの測定；ＰＫ１０４５３（構造２）用量応答試験。動物の別個のコホートにおいて、記載したようにしてＭＣＴ＋ＰＮモデルを展開した。ＲＶ圧を、ビヒクル暴露並びに１日に３回、４ｍｉｎ（Ｄ４）及び８ｍｉｎ暴露（Ｄ８）でのＰＫ１０４５３処置の１４日後に得た。ビヒクル群（ｎ＝９）では、ＲＶ収縮期圧は７５．７±７．１ｍｍＨｇであり、Ｄ４群（ｎ＝１０）ＲＶでは収縮期圧は４０．４±２．７ｍｍＨｇであり、Ｄ８ＭＣＴ＋ＰＮ群ではＲＶ収縮期圧は４３±３．０ｍｍＨｇであった（ｐ＜０．００１Ｖｖｓ．Ｄ４及びＶｖｓ．Ｄ８；図７Ａ）。ＰＶループを、各群からの動物のサブセットで得た（ビヒクルｎ＝３；Ｄ４ｎ＝５、Ｄ８ｎ＝４）。

（例４）
ＭＣＴ＋ＰＮＭＣＴ＋ＰＮモデル効力
ＰＶループ試験。ビヒクル対照と比較して、Ｄ４とＤ８の処置群の両方において、ＲＶ収縮終期圧（ＥＳＰ）はより低く、ＲＶ駆出率（ＥＦ）はより高かった。Ｄ８群における心拍出量はビヒクル群と比較して増大した。表３を参照されたい。ＭＣＴ６０ｍｇ／ｋｇＩＰに続いて７日後、試験動物に左肺全摘を施した。ＭＣＴ投与２週間後、ＰＫ１０４５３（構造２）又はビヒクルを、１日に３回、２週間にわたって吸入により与えた。この期間の最後にＰＶループを得た。表３に関して：Ｖ＝ビヒクル；Ｄ４＝４ｍｉｎ吸入ＰＫ１０４５３；Ｄ８＝８ｍｉｎ吸入ＰＫ１０４５３；各群ｎ＝４；^＊ｐ＜０．００１；^＊＊ｐ＜０．０１；§ｐ＜０．０５ｖｓ．Ｖである。以下の表３を参照されたい。

ＲＶ肥大に対するＰＫ１０４５３（構造２）の効果。ラットＭＣＴ＋ＰＮＭＣＴ＋ＰＮモデルにおいて、ＰＫ１０４５３での処置はＲＶ肥大の大幅な減少をもたらした。図７Ｂを参照されたい。ビヒクル群（ｎ＝１１）における（ＲＶ＋ＩＶＳ）／ＬＶ比は０．８８±０．０５であり、ＰＫ１０４５３Ｄ４群（ｎ＝１３）では０．６２±０．０４であり、ＰＫ１０４５３Ｄ８群（ｎ＝７）では０．６８±０．０５であった（ｐ＜０．００１Ｄ４ｖｓ．Ｖ；ｐ＝０．０１２Ｄ８ｖｓ．Ｖ）。

肺細動脈組織学及び形態学の解析。内腔面積と中膜面積の比（Ｌ／Ｍ）は、Ｄ４又はビヒクル群と比較して、ＰＫ１０４５３（構造２）処置Ｄ８群において有意に大きかった：Ｄ８（ｎ＝５）Ｌ／Ｍ０．７２±０．０５、Ｄ４（ｎ＝６）Ｌ／Ｍ０．３３±０．０６及びビヒクル対照Ｖ（ｎ＝６）：０．２６±０．０４（ｐ＜０．０００１Ｄ８ｖｓ．Ｖ又はＤ８ｖｓ．Ｄ４）。図７Ｃを参照されたい。閉塞分析を、内腔／中膜比測定で使用したのと同じ動物試料で実施した。閉塞分析によって、ＰＫ１０４５３Ｄ８処置群における、グレード２閉塞病変の大幅な減少が実証された（Ｖ（ｎ＝６）４１．５±７．１％、Ｄ４（ｎ＝６）２８．５±４．２％；Ｄ８１１．４±４．１％；ｐ＜０．０１Ｄ８ｖｓ．Ｖ；図７Ｄを参照されたい。図８Ａは、ビヒクル処置動物における閉塞性（グレード２）病変のＨ＆Ｅ染色を示している（ＭＣＴ＋ＰＮモデル）；ＰＫ１０４５３（Ｄ８）処置動物からのグレード０血管との比較を行った。図８Ｂを参照されたい。ホスホ−ＰＤＧＦＲβについて染色されたグレード２病変の例を、図８ＤのＰＫ１０４５３（Ｄ８）処置動物からのグレード０病変と比較して図８Ｃに示す（ＭＣＴ＋ＰＮモデル）。ホスホＰＤＧＦＲβについての染色は、グレード２病変において、敷石状パターンでの強いシグナルを示した。

記載したように、肺細動脈肥大及び腔内細胞増殖性病変の他の例を示し、定量的分析を図９に示す。内腔面積と中膜面積の比（Ｌ／Ｍ）は、ビヒクルと比較して、ＰＫ１０４５３処置群において有意に大きかった。ここで、より高い用量はＤ８（ｎ＝４）Ｌ／Ｍ１．１７±０．０７、より低い用量はＤ４Ｌ／Ｍ０．７５±０．１４であり、ビヒクル対照Ｖ（ｎ＝６）：０．３６±０．０９（ｐ＝０．０３２Ｄ４ｖｓ．Ｖ；ｐ＝０．０００１４Ｄ８ｖｓ．Ｖ；ｐ＝０．０２８Ｄ８ｖｓ．Ｄ４）である。内皮細胞マーカー、ｖＷＦは、シグナルが大部分肺細動脈内にあることを示している。チロシン７０５ホスホＳＴＡＴ３抗体は、内皮細胞及び血管周囲細胞の細胞核へのｐＳＴＡＴ３の局在化を示している。図１０Ａ及び図１０Ｂ（ＰＫ１０４５３処置で）を参照されたい。

α−ＳＭＣアクチン及びｖＷｆについてのトリクローム及び免疫組織化学的検査。内皮細胞マーカー、ｖＷＦは、シグナルが大部分肺細動脈内にあることを示している。グレード０、１及び２の病変をさらに特徴付けるために、ラットＭＣＴ＋ＰＮにおいて、肺細動脈の血管ＳＭＣ（αＳＭＣアクチン）、内皮細胞マーカー（ｖＷＦ）及びトリクローム染色についての免疫組織化学的検査を実施した。グレード０の病変は、中膜内に血管ＳＭＣを保存したままでの内皮細胞（ＥＣ）の早期新生内膜（内腔内）増殖によって；グレード１〜２の病変は、中膜層における、血管平滑筋細胞の部分喪失を伴った、混合された筋線維芽細胞様細胞（ＭＦ）及びＥＣの新生内膜（内腔内）増殖／浸潤によって；進行したグレード２の病変は、中膜層における、ＶＳＭ細胞の完全な喪失及び中膜の線維化置換（fibrotic replacement）を伴った、広範囲に及ぶＭＦ／ＥＣ内腔内増殖によって特徴付けられた。図１１Ａ〜Ｉを参照されたい。

（例５）
ＰＤＧＦシグナル伝達についての免疫組織化学検査。
前毛細血管肺細動脈においては、ＰＤＧＦＲ−β経路を介したシグナル伝達が支配的であった。ＰＤＧＦＡＡリガンド及びＰＤＧＦＲ−αについてのシグナルは存在したが、ＰＤＧＦＢＢ及びＰＤＧＦＲ−βについてのシグナルより定性的に低かった。リン酸化ＰＤＧＦＲ−β（ｐＰＤＧＦＲ−β）は、新生内膜細胞及び血管周囲細胞において敷石状の外観を有しており、前毛細血管肺細動脈におけるホスホ−ＰＤＧＦＲ−α（ＰＤＧＦＲ−α）についてのシグナルより強かった。ｐＰＤＧＦＲ−β又はアルファについての最小シグナルが、前毛細血管肺細動脈の中膜層において検出された。図１２Ａ〜Ｆを参照されたい。より大きい（＞５０μｍ）血管では、ｐＰＤＧＦＲ−αについてのシグナルは中膜ＶＳＭ細胞中に存在した。対照的に、ｐＰＤＧＦＲβ中膜層シグナルは低かった。図１３Ａ〜Ｄを参照されたい。

（例６）
ＮａｎｏＰｒｏ（登録商標）免疫アッセイ及びウエスタンブロット
ｐＡＫＴ／ＡＫＴについてのＮａｎｏｐｒｏ（登録商標）免疫アッセイを図１４に示し、ｐＳＴＡＴ３／ＳＴＡＴ３について図１５に示す。Ｄ４群とＤ８群の両方において、ビヒクルと比較して、ｐＳＴＡＴ３／ＳＴＡＴ３比の大幅な減少が見られた。図１６は、肺ホモジネートにおける、ｐｐＥＲＫ１／ＥＲＫ１、ｐＥＲＫ１／ＥＲＫ１、ｐｐＥＲＫ２／ＥＲＫ２及びｐＥＲＫ２／ＥＲＫ２に対する吸入ＰＫ１０４５３（構造２）の効果を示す。Ｄ４群及びＤ８群において、ビヒクルと比較して、それぞれｐｐＥＲＫ１／ＥＲＫ１及びｐＥＲＫ１／ＥＲＫ１の大幅な減少が見られた。

（例７）
ＰＤＧＦＡＡはＰＤＧＦＲ−αを刺激するのに対して、ＰＤＧＦＢＢはＰＤＧＦＲ−βと結合しそれを活性化させる。
図１７は、ヒト胎児肺線維芽細胞における、ＥＲＫ１及びＥＲＫ２のＰＤＧＦＡＡｖｓ．ＰＤＧＦＢＢ刺激リン酸化に対するイマチニブ、ＰＫ１０４５３（構造２）及びＰＫ１０５７１（構造２ａ）の効果を示す。ジリン酸化ＥＲＫ１と全ＥＲＫ１（ｐｐＥＲＫ１／ＥＲＫ１）の比はＰＤＧＦＡＡ又はＰＤＧＦＢＢ刺激で増大し、１μＭ及び１０μＭの濃度のイマチニブ、ＰＫ１０４５３及びＰＫ１０５７１で有意に減少した。ジリン酸化ＥＲＫ２と全ＥＲＫ２（ｐｐＥＲＫ２／ＥＲＫ２）の比はＰＤＧＦＡＡ又はＰＤＧＦＢＢ刺激（１０ｎｇ／ｍｌ）で増大し、１ｕＭ及び１０ｕＭの濃度のイマチニブ、ＰＫ１０４５３及びＰＫ１０５７１で有意に減少した。ＰＤＧＦＢＢ刺激後、ジリン酸化ＥＲＫ１と全ＥＲＫ１（ｐｐＥＲＫ１／ＥＲＫ１）、及びジリン酸化ＥＲＫ２と全ＥＲＫ２（ｐｐＥＲＫ２／ＥＲＫ２）の比は、イマチニブと比較して、１ｕＭのＰＫ１０４５３及びＰＫ１０５７１で、より効率的に減少した。したがって、ＰＫ１０４５３及びＰＫ１０５７１は、イマチニブと比較して、ＰＤＧＦＢＢ刺激のＥＲＫ１及びＥＲＫ２リン酸化のより強力な阻害剤である。

具体的には、上記したような図１７Ａ〜Ｄを参照して、ヒト胎児肺線維芽細胞のＰＤＧＦＡＡ及びＰＤＧＦＢＢ（１０ｎｇ／ｍｌ）刺激は、無血清培地だけの対照（ＳＦ）と比較して、ｐｐＥＲＫ１／ＥＲＫ１及びｐｐＥＲＫ２／ＥＲＫを増大させた。イマチニブ、ＰＫ１０４５３（構造２）及びＰＫ１０５７１（構造２ａ）は、ＰＤＧＦＡＡ刺激ｐｐＥＲＫ１及びｐｐＥＲＫ２の形成を減少させるのに、１ｕＭで同等に効果的であった（図１７Ａ及びＣ）。しかし、ＰＫ１０４５３及びＰＫ１０５７１は、ＰＤＧＦＢＢ刺激ｐｐＥＲＫ１及びｐｐＥＲＫ２を減少させるのに、１ｕＭ及び１０ｕＭで、より効果的であった（図１７Ｂ及びＤ）。これらのデータは、ＰＫ１０４５３及びＰＫ１０５７１は、ＰＤＧＦ受容体ベータによってシグナル伝達を阻止するのに、イマチニブと比較して、より効果的であることを実証している。示したデータは平均±ＳＥＭである。ＰＫ１０４５３とＰＫ１０５７１の効果差（differential effect）は、ＥＲＫ２リン酸化を阻止するのより、ＥＲＫ１リン酸化を阻止するのにより顕著であった。イマチニブが１ｕＭでｐｐＥＲＫ１形成の阻害に効果をもたないのに対して、ＰＫ１０４５３及びＰＫ１０５７１は１ｕＭで、ＰＤＧＦＢＢ刺激ｐｐＥＲＫ１形成を減少させるのに効果的であった。ＰＫ１０４５３＝構造２；ＰＫ１０５７１＝構造２ａ。血小板由来の成長因子受容体アルファ＝ＰＤＧＦＲ−アルファ＝ＰＤＧＦＲ−α＝ＰＤＧＦ受容体アルファ＝ＰＤＧＦアルファ受容体。血小板由来の成長因子受容体ベータ＝ＰＤＧＦＲ−ベータ＝ＰＤＧＦＲ−β＝ＰＤＧＦ受容体ベータ＝ＰＤＧＦベータ受容体。

（例８）
ＰＫ１０４５３（構造２）、ＰＫ１０４６７（構造３）、ＰＫ１０４６８（構造４）、ＰＫ１０５６９（構造５）及びＰＫ１０５７１（構造２ａ）は、線維芽細胞においてＰＤＧＦＢＢ刺激ＡＫＴリン酸化を阻害するのに、イマチニブと比較して、より低いＩＣ_５０濃度を有する。
細胞培養液中で成長させたヒト胎児肺線維芽細胞を、肺動脈高血圧症、肺線維症及び関連障害において起こる線維芽細胞増殖のモデルとして使用する。図１８Ａ〜Ｄを参照されたい。これらのデータは、ＰＫ１０４５３、ＰＫ１０４６７、ＰＫ１０４６８、ＰＫ１０５６９及びＰＫ１０５７１は、イマチニブと比較して、ＰＤＧＦベータ受容体によって媒介されるシグナル伝達のより強力な阻害剤であることを強調している。これらのデータは、ＰＫ１０４５３、ＰＫ１０４６７、ＰＫ１０４６８、ＰＫ１０５６９及びＰＫ１０５７１で達成できる肺動脈高血圧症、肺線維症及び関連障害のための治療として、ＰＤＧＦアルファ受容体シグナル伝達に加えてＰＤＧＦベータ受容体シグナル伝達を効果的に阻害することの重要性を示している。上記及び本出願を通して使用するように、ＰＫの化合物及び構造の表示は、以下のように互換的に使用される：ＰＫ１０４５３＝構造２；ＰＫ１０５７１＝構造２ａ；ＰＫ１０４６７＝構造３；ＰＫ１０４６８＝構造４；及びＰＫ１０５６９＝構造５。図１８Ａ〜Ｄを参照されたい。

（例９）
体重、全身ＢＰ及びプレチスモグラフィー試験
ビヒクルと比較して、処置群において、対ビヒクル群で、より遅い体重減少速度の傾向があった。図１９を参照されたい。図２０に示すように、処置７日目で、ＭＣＴＰＫ１０４５３群（ｎ＝３）における１３１±１０ｍｍＨｇに対して、収縮期ＢＰは、ＭＣＴビヒクル群（ｎ＝３）において１１１±２１ｍｍＨｇであった。ラットＭＣＴ＋ＰＮＭＣＴ＋ＰＮモデルにおいて、ＰＫ１０４５３／ビヒクル投与１日目及び１５日目に、２チャンバープレチスモグラフィーを測定した。結果を表４に示す。ＰＫ１０４５３での処置は、４ｍｉｎ暴露群（Ｄ４）において、ビヒクルと比較して、毎分換気量（ＭＶ）のより小さい低下を伴い、最大吸気流（ＰＩＦ）及び最大呼気流（ＰＥＦ）の大幅な改善を伴った。

（例１０）
考察及び適用実施形態
ＰＤＧＦシグナル伝達経路は、ヒト肺動脈高血圧症（ＰＡＨ）において、また、疾患の動物モデルにおいて活性化されることが分かった。この試験では、新規の非選択的な吸入ＰＤＧＦ受容体阻害剤、ＰＫ１０４５３（構造２）は、ＰＡＨのラットモノクロタリン（ＭＣＴ）モデルとラットＭＣＴ＋肺全摘（＋ＰＮ）モデルの両方において肺高血圧症を低減させるであろうという仮説をテストした。１日に３回２週間、４（Ｄ４）ｍｉｎ暴露及び８（Ｄ８）ｍｉｎ暴露で吸入によって送達されたＰＫ１０４５３は、ラットＭＣＴとラットＭＣＴ＋ＰＮの両方のモデルにおいて右心室収縮期圧（ＲＶＳＰ）を低下させた：ビヒクルＭＣＴ群（ｎ＝６）のＲＶＳＰは８０．４±２．６ｍｍＨｇ；Ｄ４ＭＣＴ群（ｎ＝６）において４４．４±５．８ｍｍＨｇ；Ｄ８ＭＣＴ群（ｎ＝５）において３７．１±４．５ｍｍＨｇ（ｐ＜０．００１ｖｓ．ビヒクル）であり；ビヒクルＭＣＴ＋ＰＮ群（ｎ＝９）のＲＶＳＰは７５．７±７．１ｍｍＨｇ；Ｄ４ＭＣＴ＋ＰＮ群（ｎ＝１０）において４０．４±２．７ｍｍＨｇ、Ｄ８ＭＣＴ＋ＰＮ群（ｎ＝８）において４３．０±３．０ｍｍＨｇ（ｐ＜０．００１）であった。ラットＭＣＴ＋ＰＮモデルにおいて、肺動脈圧の連続テレメトリーモニタリングも、ＰＫ１０４５３がＰＡＨの進行を防止することを実証している。吸入によって与えられたイマチニブは、ＭＣＴモデルにおいて同等に効果的であったが、ＭＣＴ＋ＰＮモデルにおいては効果的ではなかった。

免疫組織化学的検査は、ＭＣＴ＋ＰＮモデルにおいて見られた新生内膜及び血管周囲の病変におけるＰＤＧＦα受容体と比較して、ＰＤＧＦβ受容体の活性化が増大していることを実証している。イマチニブがＰＤＧＦα受容体について選択的であるのに対して、ＰＫ１０４５３は、ＰＤＧＦα受容体とＰＤＧＦβ受容体の両方のキナーゼ活性の阻害について、イマチニブと比較して、より低いＩＣ_５０を有していることが示された。ＰＫ１０４５３は、ＭＣＴ＋ＰＮ動物からの肺抽出物において、リン酸化ＡＫＴ（Ｓｅｒ４７３）と全ＡＫＴ、リン酸化ＳＴＡＴ３（Ｙ７０５）と全ＳＴＡＴ３の比、ジリン酸化ＥＲＫ１と全ＥＲＫ１の比及びモノリン酸化ＥＲＫ１と全ＥＲＫ１の比を低下させた。手短に言えば、吸入によって送達された場合、ＰＫ１０４５３は、ラットＭＣＴ及びＭＣＴ＋ＰＮモデルにおいて、ＰＡＨの進行を有意に低減させる。したがって、ＰＤＧＦαとＰＤＧＦβ受容体の両方の非選択的阻害は、少なくともＰＡＨ及び関連疾患において、ＰＤＧＦＲαの選択的阻害に優る治療上の利点を有している。

それによって、初めて、吸入によって投与された場合、新規な非選択的ＰＤＧＦ受容体阻害剤、ＰＫ１０４５３（構造２）は、疾患の２つの動物モデル：ラットＭＣＴモデル及びラットＭＣＴ＋ＰＮモデルにおいて、ＰＡＨの重症度を低減させることが示された。したがって、ＰＫ１０４５３は、ＰＤＧＦＲαとＰＤＧＦＲβ受容体の両方に対して非常に強力であるので、イマチニブはＰＤＧＦＲα受容体に対して選択的であるが、ＰＫ１０４５３は驚くほど優れた効力を有する。吸入によって投与された場合、ＰＫ１０４５３とイマチニブはどちらもラットＭＣＴモデルにおいて効果的であるが、ＰＫ１０４５３だけは、ラットＭＣＴ＋ＰＮモデルにおいて、肺高血圧症を低減させた。この効果差の１つの理由は、ラットＭＣＴ＋ＰＮモデルにおいて、ＰＤＧＦＲα受容体と比較して、前毛細血管肺細動脈新生内膜の病変におけるＰＤＧＦＲβ受容体を介したシグナル伝達の過度の活性化に起因している可能性がある。

したがって、本発明のデータは、新規な非選択的、ＰＤＧＦ受容体阻害剤ＰＫ１０４５３（構造２）は、吸入により送達された場合、ラットＭＣＴモデルとラットＭＣＴ＋ＰＮモデルの両方において、ＰＡＨの進行を防止することを実証している。注目すべきことに、これは、ラットＭＣＴ＋ＰＮモデルにおいてＰＤＧＦ受容体阻害の効力を報告する初めての試験である。ＰＡ圧の持続的低下は、ＰＫ１０４５３で処置された携帯式ＰＡＨ（ＭＣＴ＋ＰＮ）動物においても見られた。これらのモデルにおけるＰＡ及びＲＶ収縮期圧の大幅な減少と同時に、ＲＶ肥大の減少及び肺細動脈の内腔と中膜の比の改善が実証された。圧力−体積ループは、対照動物と比較して、ＰＫ１０４５３処置動物において、ＲＶ駆出率の改善、より高い心拍出量、及びより低い一回仕事量への傾向を示した。ＰＫ１０４５３処置動物の肺抽出物において、ｐＡＫＴ（Ｓｅｒ４７３）／ＡＫＴ、ｐＳＴＡＴ３／ＳＴＡＴ３、ｐｐＥＲＫ１／ＥＲＫ１及びｐＥＲＫ１／ＥＲＫ１の比の大幅な減少があった。

ＰＡＨは実質的に肺へ局在化する疾患であるので、吸入による標的部位への薬物の直接投与が、より高い局所濃度（より大きい効力）、及び薬物のより低い全身濃度（より少ない副作用）の利点を提供するという仮説をテストした。薬物動態学的試験は、ＰＫ１０４５３（構造２）の静脈内投与に対して、吸入送達の４５倍の利点を実証した。ラットＭＣＴモデルにおいて、ＰＫ１０４５３はＲＶ収縮期圧を５０％低下させたが、全身ＢＰに対して悪影響はなかった。さらに、吸入されたＰＫ１０４５３は、２週間の過程にわたって肺機能に対して悪影響を及ぼさなかった。

ラットＭＣＴモデルにおいて、本発明者らは吸入ＰＫ１０４５３と吸入イマチニブを比較し、どちらも同等に効果的であることを見出した。これらの結果は、ラットＭＣＴモデルにおいて、全身に送達された場合、ＰＤＧＦ受容体阻害剤イマチニブは肺高血圧症を低減させるという従来の報告と一致している。Ｓｃｈｅｒｍｕｌｙら、「ＰＤＧＦ阻害による実験的肺高血圧症の逆転（Reversal of experimental pulmonary hypertension by PDGF inhibition）」、ＪＣｌｉｎＩｎｖｅｓｔ；１１５：２８１１〜２１頁（２００５年）を参照されたい。しかし、ラットＭＣＴ＋ＰＮモデルでは、吸入ＰＫ１０４５３は肺動脈圧を低下させるのに効果的であったが、吸入イマチニブは効果的でなかった。ラットＭＣＴ＋ＰＮモデルはＭＣＴだけのモデルと比較して、より挑戦的なＰＡＨのモデルであり、ヒト疾患の病理をより正確に反映することができる。Ｗｈｉｔｅら、「重篤な肺動脈高血圧症のラットモデルにおける網状様病変、及び組織因子発現の増大（Plexiform-like lesions and increased tissue factor expression in a rat model of severe pulmonary arterial hypertension）」、ＡｍＪＰｈｙｓｉｏｌＬｕｎｇＣｅｌｌＭｏｌＰｈｙｓｉｏｌ；２９３：Ｌ５８３〜９０頁（２００７年）。ＰＤＧＦ−α及び−β受容体の阻害についてのインビトロでのＩＣ_５０の測定は、ＰＫ１０４５３は両方のアイソフォームに対してイマチニブより強力であり、イマチニブはＰＤＧＦＲβアイソフォームの中程度の阻害剤でしかないことを示している。免疫組織化学的検査は、ラットＭＣＴ＋ＰＮモデルにおける新生内膜の病変は高いレベルのホスホＰＤＧＦＲβを有しており、ｐＰＤＧＦＲαのレベルは低いことを実証している。これらの知見は、なぜ、ＰＤＧＦＲβとＰＤＧＦＲαの両方の非選択的阻害が、ＰＤＧＦＲαの選択的阻害を凌ぐ治療上の利点をもたらしたかということ説明している。

本発明のデータは、高高度誘発性の肺高血圧症の新生子ウシモデルについて、Ｐａｎｚｈｉｎｓｋｉｙら「低酸素症は、ＰＤＧＦベータ受容体−ＪＮＫ１シグナル伝達を活性化することによって外膜線維芽細胞における独特の増殖性応答を誘発する（Hypoxia induces unique proliferative response in adventitial fibroblasts by activating PDGFbeta receptor-JNK1 signaling）」、ＣａｒｄｉｏｖａｓｃＲｅｓ；９５：３５６〜６５頁（２０１２年）と一致している。そのモデルにおいて、ｐＰＤＧＦＲβの活性化とともに、外膜線維芽細胞の広範囲に及ぶ血管周囲増殖が実証されている。これらの病変は、本試験のためのラットＭＣＴ＋ＰＮモデルにおいて観察されるパターンと類似している。これらの知見も、ヒトＰＡＨについて報告されているものと一致している。Ｐｅｒｒｏｓら、「特発性肺動脈高血圧症における血小板由来の成長因子の発現及び機能（Platelet-derived growth factor expression and function in idiopathic pulmonary arterial hypertension）」、ＡｍＪＲｅｓｐｉｒＣｒｉｔＣａｒｅＭｅｄ；１７８：８１〜８頁（２００８年）はＰＡＨを有する患者の肺動脈病変におけるＰＤＧＦＡ、ＰＤＧＦＢ、ＰＤＧＦＲα、ＰＤＧＦＲβ及びｐＰＤＧＦＲβの分布を記載している。ＰＤＧＦＲαの発現が、主に肥大肺細動脈の筋肉中膜層において見られるのに対して、ＰＤＧＦＲβ及びｐＰＤＧＦＲβは網状病変の内皮細胞において支配的である。

ＰＤＧＦＲαに対するイマチニブの選択性は、ＰＡＨの試験において、従来強調されてきていない。イマチニブによる、ＰＤＧＦＡＡ刺激されたＰＤＧＦＲαリン酸化の阻害は０．１μＭであるのに対して；ＰＤＧＦＢＢ刺激されたＰＤＧＦＲβリン酸化の阻害は０．３８μＭであると報告されている。例えば、Ｄｅｉｎｉｎｇｅｒら、「慢性骨髄性白血病のための治療剤としてのイマチニブの開発（The development of imatinib as a therapeutic agent for chronic myeloid leukemia）」。Ｂｌｏｏｄ；１０５：２６４０〜５３頁（２００５年）を参照されたい。しかし、ここで、［ＡＴＰ］Ｋｍ（ａｐｐ）で、イマチニブは、ＰＤＧＦＲαについて、ベータ受容体と比較して１０倍、より選択的であると判定されている（ＩＣ_５０はＰＤＧＦＲαについて７１ｎＭであるのに対して、ＰＤＧＦＲβについては６０７ｎＭ）。ＰＤＧＦＲ経路を調べる大部分のＰＡＨに関連した細胞ベースの試験は、高用量のイマチニブ（５〜１０μＭ）を使用しており、したがってＰＤＧＦＲα受容体阻害とβ受容体阻害の間の区別を排除している。

Ｗｕら、「ＰＤＧＦＲ遺伝的に決定された細胞ＰＤＧＦ−ＰＤＧＦＲシグナル伝達経路の総合的分析（Comprehensive dissection of PDGF-PDGFR signaling pathways in PDGFR genetically defined cells）」、ＰＬｏＳＯｎｅ；３：ｅ３７９４（２００８年）は、遺伝的に決定されたマウス胎児線維芽細胞（ＭＥＦ）において、ＰＤＧＦＲシグナル伝達を検討している。ＭＥＦは、ＰＤＧＦＲα、ＰＤＧＦＲβ受容体だけを発現する、又はその両方の受容体を発現するように、或いはいずれの受容体も発現しないように操作されている。ＰＤＧＦＲα受容体及びＰＤＧＦＲβ受容体を介したシグナル伝達は、共有された経路と明確に異なった経路の両方を有していることが分かっている。３３の遺伝子セットはＰＤＧＦＲαによって明らかに活性化されており、１５の遺伝子セットはＰＤＧＦＲβによって活性化されている。ＰＤＧＦＲα／βヘテロ二量体は、ＮＦκＢ及びＩＬ−６シグナル伝達の成分を活性化している。カルシウム流出経路は、ＰＤＧＦＲαとＰＤＧＦＲβの両方によって制御されている。血管形成に関与するシグナル伝達は、ＰＤＧＦＲβ経路によってだけ制御されている。この知見は、ＭＣＴ＋ＰＮモデルを用いて前毛細血管肺細動脈の新生内膜の病変で見出された、ホスホＰＤＧＦＲβの選択的増大と適合している。

ＰＤＧＦＢＢは、肺動脈平滑筋細胞及び線維芽細胞においてＳｅｒ４７３でＡＫＴのリン酸化を誘発するが、肺動脈内皮細胞においてはそれを誘発しないことが分かっている。Ｏｇａｗａら、「ＰＤＧＦは、ヒト肺動脈平滑筋細胞におけるＡｋｔ／ｍＴＯＲの活性化によりＳＴＩＭ１／Ｏｒａｉ１を上方調節することによって、ストア感受性Ｃａ^２＋流入を増進させる（PDGF enhances store-operated Ca2+ entry by upregulating STIM1/Orai1 via activation of Akt/mTOR in human pulmonary arterial smooth muscle cells）」、ＡｍＪＰｈｙｓｉｏｌＣｅｌｌＰｈｙｓｉｏｌ；３０２：Ｃ４０５〜１１頁（２０１２年）を参照されたい。ＡＫＴ（Ｓｅｒ４７３）のリン酸化の増大は、慢性血栓塞栓性の肺動脈高血圧症を有する患者の動脈内膜切除による平滑筋表現型を有する細胞においても見出されている。Ｏｇａｗａら、「ｍＴＯＲの阻害は、慢性血栓塞栓性肺高血圧を有する患者の動脈内膜切除組織からの細胞におけるストア感受性Ｃａ^２＋流入を弱める（Inhibition of mTOR attenuates store-operated Ca2+ entry in cells from endarterectomized tissues of patients with chronic thromboembolic pulmonary hypertension）」、ＡｍＪＰｈｙｓｉｏｌＬｕｎｇＣｅｌｌＭｏｌＰｈｙｓｉｏｌ；２９７：Ｌ６６６〜７６頁（２００９年）を参照されたい。ＰＤＧＦＢＢ刺激は、これらの細胞中のＡＫＴ／ｍＴＯＲ経路を介して、ストア感受性（store operated）のカルシウム流入を増大させている。同上を参照されたい。

しかし、対照及びモノクロタリン処置ラットからの肺動脈平滑筋細胞において、イマチニブ（０．１μＭ）はウシ胎仔血清刺激Ｓｅｒ４７３ＡＫＴリン酸化を増大させているが、Ｔｈｒ３０８２５でのＡＫＴのリン酸化に対して影響を及ぼしていない。この濃度で、イマチニブはＰＤＧＦα受容体を介して作用するようである。Ｗｕら（２００８年）は、ＳＴＩ−５７１（イマチニブ）は５μＭで、ＰＤＧＦＲβヌル細胞系とＰＤＧＦＲαヌル細胞系の両方において、ＰＤＧＦＢＢ刺激ＡＫＴリン酸化（ＳＥＲ４７３）を阻止することを見出している。本発明は、ヒト胎児肺線維芽細胞における、ＡＫＴ（Ｓｅｒ４７３）及びＡＫＴ（Ｔｈｒ３０８）リン酸化のＰＤＧＦＡＡ及びＰＤＧＦＢＢ刺激を検討するためのＩＣＷを含む。イマチニブによる阻害を、ＰＤＧＦＡＡ又はＰＤＧＦＢＢ刺激ＡＫＴリン酸化のＰＫ１０４５３阻害と比較し、ＰＫ１０４５３がより強力であることを見出した。

さらに、ナノ流体プロテオミクス免疫アッセイを、ＭＣＴ＋ＰＮ動物の肺抽出物において、ＡＫＴ、ＳＴＡＴ３及びＥＲＫ１／２のリン酸化された種を定量するために用いた。ＰＫ１０４５３処置群において、ビヒクルと比較して、ホスホ−ＡＫＴ（Ｓｅｒ４７３）、ホスホ−ＳＴＡＴ３並びにｐｐＥＲＫ１／ＥＲＫ及びｐＥＲＫ１／ＥＲＫ１の大幅な減少が見出された。Ｓｃｈｅｒｍｕｌｙら（２００８年）は、ＰＡＨのラットＭＣＴモデルにおいて、イマチニブによるｐＥＲＫ１／２の減少を実証している。Ｊａｓｍｉｎらの「細胞透過性カベオリン−１ペプチドの短期間投与は、モノクロタリン誘発肺高血圧症及び右心室肥大の発症を防止する（Short-term administration of a cell-permeable caveolin-1 peptide prevents the development of monocrotaline-induced pulmonary hypertension and right ventricular hypertrophy）」、Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ；１１４：９１２〜２０頁（２００６年）は、ラットＭＣＴモデルにおいてＳＴＡＴ３の活性化を示しており、Ｍａｓｒｉら、「特発性肺動脈高血圧における過剰増殖性アポトーシス耐性内皮細胞（Hyperproliferative apoptosis-resistant endothelial cells in idiopathic pulmonary arterial hypertension）」、ＡｍＪＰｈｙｓｉｏｌＬｕｎｇＣｅｌｌＭｏｌＰｈｙｓｉｏｌ；２９３：Ｌ５４８〜５４頁（２００７年）は、ヒト特発性ＰＡＨにおいてＳＴＡＴ３が活性化されることを見出している。本発明のナノ流体プロテオミクス免疫アッセイは、従来、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）における、イマチニブのｐＳＴＡＴ３及びｐＥＲＫ１／２への影響を試験するために使用された。Ｆａｎら、「臨床検体における癌タンパク活性化の連続分析のためのナノ流体プロテオミクスアッセイ（Nanofluidic proteomic assay for serial analysis of oncoprotein activation in clinical specimens）」、Ｎａｔｕｒｅｍｅｄｉｃｉｎｅ；１５：５６６〜７１頁（２００９年）を参照されたい。このアッセイは、タンパク質のモノリン酸化アイソフォームとジリン酸化アイソフォームを識別するのに有用である。例えば、イマチニブに応答するＣＭＬを有する患者は、モノリン酸化ＥＲＫ２１４のレベルが明らかに低下していた。ここで、ＭＣＴ肺全摘ラットの肺内において、ＥＲＫ１アイソフォーム、及びジリン酸化形態のＥＲＫ１とモノリン酸化形態のＥＲＫ１の両方が支配的である。ＰＫ１０４５３での処置はｐｐＥＲＫ１／ＥＲＫ及びｐＥＲＫ１／ＥＲＫ１を有意に減少させた。

閉塞分析を、Ｈｏｍｍａら、「デヒドロエピアンドロステロンによる、肺全摘ラットのモノクロタリン誘発肺高血圧症に対する保護におけるＲｈｏＡ／Ｒｈｏキナーゼシグナル伝達の関与（Involvement of RhoA/Rho kinase signaling in protection against monocrotaline-induced pulmonary hypertension in pneumonectomized rats by dehydroepiandrosterone）」、ＡｍＪＰｈｙｓｉｏｌＬｕｎｇＣｅｌｌＭｏｌＰｈｙｓｉｏｌ；２９５：Ｌ７１〜８頁（２００８年）の方法にしたがって実施した。ラットＭＣＴ＋ＰＮモデルにおいて、より高い用量の吸入ＰＫ１０４５３は、グレード２閉塞性病変をほとんど伴わなかった。次いで、これらの病変を、血管平滑筋細胞及び内皮細胞のためのマーカーを用いた免疫組織化学的検査によって特性評価し、トリクローム染色を実施して、筋性病変を線維性病変と識別した。新生内膜増殖性のグレード１〜２の病変は、筋線維芽細胞及び内皮細胞を含むと判定された。進行したグレード２病変では、血管中膜の線維性置換があった。これらの病変における筋線維芽細胞の由来は、完全には明らかになっていない。これらは、血管周囲線維芽細胞若しくは周皮細胞の浸潤、循環幹細胞、常在性前駆細胞に由来するか、又は内皮−上皮間葉転換の結果としての可能性がある。Ｙｅａｇｅｒら、「肺血管リモデリングにおける前駆細胞（Progenitor cells in pulmonary vascular remodeling）」、ＰｕｌｍＣｉｒｃ；１：３〜１６頁（２０１１年）を参照されたい。これらの病変が検出されているが、１型の病変は、２型及び３型へ進む恐れのある初期段階の病変であると提案するのは妥当である。このモデルでは、腔内内皮細胞は増殖し、筋線維芽細胞表現型へ移行し（且つ／又は内腔は血管周囲細胞／筋線維芽細胞によって浸潤され）、漸進的に血管腔を閉塞させる。

Ｓａｋａｏら、「肺動脈高血圧症における可逆的又は不可逆的リモデリング（Reversible or irreversible remodeling in pulmonary arterial hypertension）」、ＡｍＪＲｅｓｐｉｒＣｅｌｌＭｏｌＢｉｏｌ；４３：６２９〜３４頁（２０１０年）は、ＰＡＨにおいて、血管の筋層化（vascular muscularization）（逆リモデリング）の退縮を、潜在的に不可逆的な内皮細胞増殖と識別することの重要さを強調している。ここで提示されているデータは、ＰＤＧＦＲα経路を介したシグナル伝達が、ＰＡＨにおける、より大きな肺細動脈血管のリモデリングにおいて重要な役割を果たすのに対して、ＰＤＧＦＲβ経路は、前毛細血管肺細動脈の増殖性新生内膜の病変においてより重要であることを示している。このアイソフォームを強力に（イマチニブより強力に）阻止するＰＤＧＦＲ阻害剤でＰＤＧＦＲβ経路を標的とすることは、これらの病変の進行に影響を及ぼす可能性がある。したがって、そうした病変が完全な線維化置換の前に治療された場合、これらの病変の血管退縮の可逆性があり得る。

結論として、吸入された非選択的ＰＤＧＦ受容体阻害剤、ＰＫ１０４５３（構造２）は、ＰＡＨのＭＣＴラットモデルとＭＣＴ＋ＰＮラットモデルの両方において効果的であった。ＰＫ１０４５３での治療は、携帯式動物における肺動脈圧の大幅な減少、右心室機能の改善、及びＲＶ肥大の減少を伴った。組織学的分析は、ＰＫ１０４５３で処置された動物における肺細動脈内腔と中膜の比の改善、及びＡＫＴ（Ｓｅｒ４７３）、ＳＴＡＴ３及びＥＲＫ１のリン酸化状態の減少を実証した。全身血圧に対するＰＫ１０４５３（構造２）の有意の影響はなく、肺機能に対するＰＫ１０４５３の悪影響もなかった。イマチニブとは対照的に、ＰＫ１０４５３は、ＰＤＧＦＲα受容体について選択的ではなく、むしろ、ＰＤＧＦＲαとβの両方のアイソフォームに対して非常に強力である。ＰＡＨの網状病変において、ＰＤＧＦＲβ経路はＰＤＧＦＲα受容体より高度に活性化されるので、非選択的ＰＤＧＦＲ阻害剤、例えばＰＫ１０４５３は、ＰＡＨ及び関連疾患並びに疾患経路に対して効力を有する。

Claims

以下の式の化合物またはその薬学的に許容される塩を含む、リン酸化を低減させるのに使用するための医薬組成物：

ここで、化合物の治療有効量を対象に投与することにより、キナーゼのリン酸化が低減される。
キナーゼが、細胞外シグナル調節キナーゼ（ＥＲＫ）である、請求項１の医薬組成物。
ＥＲＫがＥＲＫ１である、請求項１の医薬組成物。
ＥＲＫがＥＲＫ２である、請求項１の医薬組成物。
リン酸化が、ＰＤＧＦＢＢ刺激性リン酸化である、請求項１の医薬組成物。
リン酸化の減少が、ヒト肺線維芽細胞において測定される、請求項１の医薬組成物。
低減が、１μＭの化合物の濃度で観察される、請求項１の医薬組成物。
低減が、１０μＭの化合物の濃度で観察される、請求項１の医薬組成物。
投与が吸入によるものである、請求項１の医薬組成物。
投与が経口である、請求項１の医薬組成物。
前記方法が、キナーゼ受容体を阻害する、請求項１の医薬組成物。
キナーゼ受容体が、受容体チロシンキナーゼである、請求項１１の医薬組成物。
受容体チロシンキナーゼがＡＫＴである、請求項１２の医薬組成物。
受容体チロシンキナーゼがｃ−Ｋｉｔである、請求項１２の医薬組成物。
受容体チロシンキナーゼがＰＤＧＦＲである、請求項１２の医薬組成物。