JP6496745B2 - 結像光学系、照明装置および観察装置 - Google Patents

結像光学系、照明装置および観察装置 Download PDF

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Description

本発明は、結像光学系、照明装置および観察装置に関するものである。
従来、中間像位置において光路長を調節することにより、合焦点位置を光軸に沿う方向(Z軸上)に移動させる方法が知られている(例えば、特許文献1参照。)。
特許第4011704号公報
しかしながら、特許文献1の方法では、中間像面に平面鏡を配置するので、平面鏡の表面の傷や異物が像に重なってしまうという不都合がある。また、顕微鏡光学系に適用される場合には、拡大光学系であるため、縦倍率は横倍率の2乗に等しく、合焦点位置の光軸に沿う方向への僅かな移動によっても、中間像はその光軸方向に大きく移動する。その結果、移動した中間像がその前後に位置していたレンズに重なると、上記と同様に、レンズの表面の傷や異物あるいはレンズ内の欠陥等が最終的な像に重なってしまうという不都合がある。このことから、従来技術による光軸(Z軸)方向走査機能を備えた顕微鏡装置においては、Z軸方向に異なる合焦位置で観察等を行おうすると、鮮明な最終像を得ることが困難であり、長年、光軸方向走査型の顕微鏡装置における宿命として解消できない課題であった。
本発明は上述した事情に鑑みてなされたものであって、中間像が光学素子に一致する位置で結像されても、中間像に光学素子の傷、異物および欠陥等が重なることを防止して鮮明な最終像を取得することができ、かつ、製造が容易である結像光学系、照明装置および観察装置を提供することを目的としている。
上記目的を達成するために、本発明は以下の手段を提供する。
本発明の第1の態様は、最終像および少なくとも1つの中間像を形成する複数の結像レンズと、該結像レンズにより形成されるいずれかの前記中間像よりも物体側に配置され、前記物体からの光の波面に空間的な乱れを付与する第1の位相変調素子と、該第1の位相変調素子との間に少なくとも1つの中間像を挟む位置に配置され、前記第1の位相変調素子により前記物体からの光の波面に付与された空間的な乱れを打ち消す第2の位相変調素子とを備え、前記第1の位相変調素子および前記第2の位相変調素子の各々が、複屈折媒質から形成され、前記物体からの光を複屈折させる複数個のプリズムを備える結像光学系である。
本明細書においては、像のあり方として、「鮮明な像」および「不鮮明な像」(または「ぼやけた像」)という2つの概念を用いる。
まず「鮮明な像」とは、物体から発した光の波面に、空間的な乱れが付与されていない状態で、あるいは一旦付与された乱れが打ち消され解消された状態で、結像レンズを介して生成された像であり、光の波長と結像レンズの開口数とで決まる空間周波数帯域、あるいはそれに準ずる空間周波数帯域、あるいは目的に応じた所望の空間周波数帯域を有するものを意味する。
次に「不鮮明な像」(または「ぼやけた像」)とは、物体から発した光の波面に、空間的な乱れが付与された状態で、結像レンズを介して生成された像であり、その像の近傍に配置された光学素子の表面や内部に存在する傷や異物や欠陥等が、実質的に最終像として形成されない様な特性を有するものを意味する。
このようにして形成された「不鮮明な像」(または「ぼやけた像」)は、単に焦点の外れた像とは異なり、本来結像されるはずだった位置(すなわち仮に波面の空間的な乱れが付与されなかった場合に結像される位置)における像も含めて、光軸方向の広い範囲にわたって、像コントラストの明確なピークを持たず、その空間周波数帯域は、「鮮明な像」の空間周波数帯域に比べて、常に狭いものとなる。
以下、本明細書における「鮮明な像」および「不鮮明な像」(または「ぼやけた像」)は、上記概念に基づくものであり、Z軸上での中間像の移動とは、本発明ではぼやけた中間像の状態のまま移動することを意味する。また、Z軸走査とは、Z軸上での光の移動のみに限らず、後述するようにXY上の光移動を伴なっていてもよい。
本態様によれば、結像レンズの物体側から入射された光は結像レンズによって集光されることにより最終像を結像する。この場合において、物体からの光が中間像の一つよりも物体側に配置された第1の位相変調素子を通過することにより、光の波面に空間的な乱れが付与され、結像される中間像はぼやける。具体的には、光は、第1の位相変調素子を通過する際にプリズムによる複屈折によって複数個の光束に分割され、中間結像面において複数個の集光点に分離して集光する。
中間像を結像した光は第2の位相変調素子を通過することにより、第1の位相変調素子によって付与された波面の空間的な乱れが打ち消される。具体的には、中間結像面において複数個の集光点を形成した複数の光束は、第2の位相変調素子を通過する際にプリズムによる複屈折によって1つに合成され、最終結像面において単一の集光点に集光する。これにより、最終結像面においては、鮮明な物体の像が復元される。このようにすることで、第2の位相変調素子以降においてなされる最終像の結像においては、鮮明な像を得ることができる。特に、走査系により、結像光学系を通過する光は上記の空間変調状態を保ったままZ軸上を中間像が移動し、Z軸走査中に結像光学系のどのレンズについても中間像がぼやけたまま通過する。
すなわち、中間像をぼやけさせることにより、中間像位置に何らかの光学素子が配置されて、該光学素子の表面や内部に傷、異物あるいは欠陥等が存在していてもそれらが中間像に重なって、最終的に最終像の一部として形成されてしまう不都合の発生を防止することができる。また、顕微鏡光学系に適用される場合には、フォーカシング等によりZ軸上での移動した中間像がその前後に位置していたレンズに重なったとしても、レンズの表面の傷や異物あるいはレンズ内の欠陥等が最終的な像に映りこむようなノイズ画像を生じない。また、第1および第2の位相変調素子として、研磨が容易な平坦な表面形状を有するプリズムを使用することで、中間像を不鮮明化する手段として、例えばマイクロレンズアレイやレンチキュラーを使用する場合と比較して、装置を容易に製造することができる。
上記第1の態様においては、前記第1の位相変調素子および前記第2の位相変調素子の各々が、複数個の前記プリズムを備え
このようにすることで、プリズムの数が2個、3個、4個・・・と増加すると、第1の位相変調素子による光の分割数が4本、8本、16本・・・と増加し、中間結像面における集光点の数も、4個、8個、16個・・・と増加する。したがって、プリズムの数が多
い程、中間像の不鮮明化効果を高めることができる。
上記第1の態様においては、前記第1の位相変調素子および前記第2の位相変調素子の各々が、前記複数個の前記プリズムの間に配置された4分の1波長板を有していてもよい。
第1の位相変調素子において、一のプリズムに入射した光は、該一のプリズムによって2つの直線偏光に分割され、各直線偏光は4分の1波長板によって円偏光に変換された後に次のプリズムによって2つの直線偏光に分割される。これにより、第1の位相変調素子に入射した単一の入射光は、4以上の直線偏光に変換され、中間結像面において、結像レンズの光軸に交差する方向に一列に配列する4個以上の集光点を形成する。このように、プリズム同士の間に4分の1波長板を配置するだけで、中間結像面における集光点の数を簡単な構成で増大することができ、中間結像面における集光点の配列の自由度を向上することができる。
上記第1の態様においては、前記第1の位相変調素子は、前記結像レンズの光軸に交差する平面上において2次元的に配列する複数個の集光点を前記中間像として形成してもよい。
このようにすることで、中間像を効果的に不鮮明化することができる。平面上において集光点を2次元的に配列するためには、例えば、第1の位相変調素子を構成する任意の2個のプリズムの内、物体側のプリズムの光学軸と像側の光学軸とがねじれの関係となるように、物体側のプリズムに対して像側のプリズムを光軸回りに傾ければよい。
本発明の第2の態様は、上記いずれかに記載の結像光学系と、該結像光学系の物体側に配置され、該結像光学系に入射させる照明光を発生する光源とを備える照明装置である。
本態様によれば、物体側に配置された光源から発せられた照明光が結像光学系に入射することにより、最終像側に配置された観察対象物に照明光を照射することができる。この場合において、第1の位相変調素子によって、結像光学系により形成される中間像がぼやけるので、中間像位置に何らかの光学素子が配置されて、光学素子の表面や内部に傷、異物あるいは欠陥等が存在していても、それらが中間像に重なって最終的に最終像の一部として形成されてしまう不都合の発生を防止することができる。
本発明の第3の態様は、上記いずれかに記載の結像光学系と、該結像光学系の最終像側に配置され、観察対象物から発せられた光を検出する光検出器とを備える観察装置である。
本態様によれば、結像光学系により、光学素子の表面や内部に傷、異物あるいは欠陥等の像が中間像に重なることが防止されることによって、鮮明な最終像を光検出器によって検出することができる。
本発明の第4の態様は、上記いずれかの結像光学系と、該結像光学系の物体側に配置され、該結像光学系に入射させる照明光を発生させる光源と、前記結像光学系の最終像側に配置され、観察対象物から発せられた光を検出する光検出器とを備える観察装置である。
本態様によれば、観察対象部における照明光の走査範囲にわたり鮮明な最終像を取得することができる。
本発明の第5の態様は、上記の照明装置と、該照明装置によって照明された観察対象物から発せられた光を検出する光検出器とを備え、前記光源が、パルスレーザ光源である観察装置である。
本態様によれば、観察対象物を多光子励起観察することができる。
本発明の第1の参考例は、最終像および少なくとも1つの中間像を形成する複数の結像レンズと、該結像レンズにより形成されるいずれかの前記中間像よりも物体側に配置され、前記物体からの光の波面に空間的な乱れを付与する第1の位相変調素子と、該第1の位相変調素子との間に少なくとも1つの中間像を挟む位置に配置され、前記第1の位相変調素子により前記物体からの光の波面に付与された空間的な乱れを打ち消す第2の位相変調素子とを備え、前記位相変調素子における空間的な乱れと該乱れの打ち消しを調整または増大する構成を有することを特徴とする結像光学系のための位相変調素子である。
本参考例によれば、結像レンズの物体側から入射された光は結像レンズによって集光されることにより最終像を結像する。この場合において、中間像の一つよりも物体側に配置された第1の位相変調素子を通過することにより、光の波面に空間的な乱れが付与され、結像される中間像はぼやける。また、中間像を結像した光は第2の位相変調素子を通過することにより、第1の位相変調素子によって付与された波面の空間的な乱れが打ち消される。これにより、第2の位相変調素子以降においてなされる最終像の結像においては、鮮明な像を得ることができる。特に、走査系により、結像光学系を通過する光は上記の空間変調状態を保ったままZ軸上を中間像が移動し、Z軸走査中に結像光学系のどのレンズについても中間像がぼやけたまま通過する。
すなわち、中間像をぼやけさせることにより、中間像位置に何らかの光学素子が配置されて、該光学素子の表面や内部に傷、異物あるいは欠陥等が存在していてもそれらが中間像に重なって、最終的に最終像の一部として形成されてしまう不都合の発生を防止することができる。また、顕微鏡光学系に適用される場合には、フォーカシング等によりZ軸上での移動した中間像がその前後に位置していたレンズに重なったとしても、レンズの表面の傷や異物あるいはレンズ内の欠陥等が最終的な像に映りこむようなノイズ画像を生じない。
上記第1の参考例においては、前記第1の位相変調素子および前記第2の位相変調素子が、前記結像レンズの瞳位置近傍に配置されていてもよい。
このようにすることで、光束の変動しない瞳位置近傍に配置して第1の位相変調素子および第2の位相変調素子を小型化することができる。
上記第1の参考例においては、いずれかの前記中間像を挟む位置に配置される2つの前記結像レンズ間の光路長を変更可能な光路長可変手段を備えていてもよい。
このようにすることで、光路長可変手段の作動により、2つの結像レンズ間の光路長を変更することにより、最終像の結像位置を光軸方向に容易に変更することができる。
上記第1の参考例においては、前記光路長可変手段が、光軸に直交して配置され前記中間像を形成する光を折り返すように反射する平面鏡と、該平面鏡を光軸方向に移動させるアクチュエータと、前記平面鏡により反射された光を2方向に分岐するビームスプリッタとを備えていてもよい。
このようにすることで、物体側の結像レンズにより集光された物体側からの光が平面鏡によって反射されて折り返された後、ビームスプリッタによって分岐されて像側の結像レ
ンズに入射される。この場合において、アクチュエータを作動させて平面鏡を光軸方向に移動させることにより、2つの結像レンズ間の光路長を容易に変更することができ、最終像の結像位置を光軸方向に容易に変更することができる。
上記第1の参考例においては、いずれかの前記結像レンズの瞳位置近傍に、光の波面に付与する空間的な位相変調を変更することにより、前記最終像位置を光軸方向に変化させる可変空間位相変調素子を備えていてもよい。
このようにすることで、可変空間位相変調素子によって最終像位置を光軸方向に変化させるような空間的な位相変調を光の波面に付与することができ、付与する位相変調を調節することにより最終像の結像位置を光軸方向に容易に変更することができる。
上記第1の参考例においては、前記第1の位相変調素子または前記第2の位相変調素子の少なくとも一方の機能が、前記可変空間位相変調素子によって担われていてもよい。
このようにすることで、可変空間位相変調素子に最終像位置を光軸方向に変化させるような空間的な位相変調と、中間像をぼやけさせるような位相変調あるいは中間像のぼやけを打ち消すような位相変調との両方を受け持たせることができる。これにより、構成部品を少なくして簡易な結像光学系を構成することができる。
上記第1の参考例においては、前記第1の位相変調素子および前記第2の位相変調素子が、光軸に直交する1次元方向に変化する位相変調を光の波面に付与してもよい。
このようにすることで、第1の位相変調素子により光軸に直交する1次元方向に変化する位相変調を光の波面に付与して、中間像をぼやけさせることができ、中間像位置に何らかの光学素子が配置されて、該光学素子の表面や内部に傷、異物あるいは欠陥等が存在していてもそれらが中間像に重なって、最終的に最終像の一部として形成されてしまう不都合の発生を防止することができる。また、1次元方向に変化した位相変調を打ち消すような位相変調を第2の位相変調素子により光の波面に付与して、ぼやけない鮮明な最終像を結像させることができる。
上記第1の参考例においては、前記第1の位相変調素子および前記第2の位相変調素子が、光軸に直交する2次元方向に変化する位相変調を光束の波面に付与してもよい。
このようにすることで、第1の位相変調素子により光軸に直交する2次元方向に変化する位相変調を光の波面に付与して、中間像をより確実にぼやけさせることができる。また、2次元方向に変化した位相変調を打ち消すような位相変調を第2の位相変調素子により光の波面に付与して、より鮮明な最終像を結像させることができる。
上記第1の参考例においては、前記第1の位相変調素子および前記第2の位相変調素子が、光を透過させる際に波面に位相変調を付与する透過型素子であってもよい。
上記第1の参考例においては、前記第1の位相変調素子および前記第2の位相変調素子が、光を反射させる際に波面に位相変調を付与する反射型素子であってもよい。
上記第1の参考例においては、前記第1の位相変調素子と前記第2の位相変調素子とが、相補的な形状を有していてもよい。
このようにすることで、中間像をぼやけさせる空間的な乱れを波面に付与する第1の位相変調素子と、波面に付与された空間的な乱れを打ち消すような位相変調を付与する第2の位相変調素子とを簡易に構成することができる。
上記第1の参考例においては、前記第1の位相変調素子および前記第2の位相変調素子が、透明材料の屈折率分布によって波面に位相変調を付与してもよい。
このようにすることで、第1の位相変調素子を光が透過する際に屈折率分布に従う波面の乱れを生じさせ、第2の位相変調素子を光が透過する際に屈折率分布によって波面の乱れを打ち消すような位相変調を光の波面に付与することができる。
本発明の第2の参考例は、上記第1の参考例に係る結像光学系と、該結像光学系の物体側に配置され、該結像光学系に入射させる照明光を発生する光源とを備える照明装置である。
本参考例によれば、物体側に配置された光源から発せられた照明光が結像光学系に入射されることにより、最終像側に配置された照明対象物に照明光を照射することができる。この場合に、第1の位相変調素子によって、結像光学系により形成される中間像がぼやけさせられるので、中間像位置に何らかの光学素子が配置されて、該光学素子の表面や内部に傷、異物あるいは欠陥等が存在していてもそれらが中間像に重なって、最終的に最終像の一部として形成されてしまう不都合の発生を防止することができる。
本発明の第3の参考例は、上記第1の参考例に係る結像光学系と、該結像光学系の最終像側に配置され、観察対象物から発せられた光を検出する光検出器とを備える観察装置を提供する。
本参考例によれば、結像光学系により、光学素子の表面や内部に傷、異物あるいは欠陥等の像が中間像に重なることが防止されることによって形成された鮮明な最終像を光検出器によって検出することができる。
上記第3の参考例においては、前記光検出器が、前記結像光学系の最終像位置に配置され、該最終像を撮影する撮像素子であってもよい。
このようにすることで、結像光学系の最終像位置に配置された撮像素子により、鮮明な最終像を撮影して、精度の高い観察を行うことができる。
本発明の第4の参考例は、上記第1の参考例に係る結像光学系と、該結像光学系の物体側に配置され、該結像光学系に入射させる照明光を発生する光源と、前記結像光学系の最終像側に配置され、観察対象物から発せられた光を検出する光検出器とを備える観察装置である。
本参考例によれば、光源からの光が結像光学系によって集光されて観察対象物に照射され、観察対象物において発生した光が最終像側に配置された光検出器により検出される。これにより、中間の光学素子の表面や内部に傷、異物あるいは欠陥等の像が中間像に重なることが防止されることによって形成された鮮明な最終像を光検出器によって検出することができる。
上記第4の参考例においては、前記光源および前記光検出器と前記結像光学系との間に配置されたニポウディスク型コンフォーカル光学系を備えていてもよい。
このようにすることで、観察対象物に多点のスポット光を走査させて観察対象物の鮮明な画像を高速に取得することができる。
上記第4の参考例においては、前記光源がレーザ光源であり、前記光検出器が共焦点ピンホールおよび光電変換素子を備えていてもよい。
このようにすることで、中間像位置における傷や異物や欠陥等の像の写り込みのない、鮮明な共焦点画像による観察対象物の観察を行うことができる。
本発明の第5の参考例は、上記照明装置と、該照明装置によって照明された観察対象物から発せられた光を検出する光検出器とを備え、前記光源がパルスレーザ光源である観察装置である。
このようにすることで、中間像位置における傷や異物や欠陥等の像の写り込みのない、鮮明な多光子励起画像による観察対象物の観察を行うことができる。
本発明によれば、中間像が光学素子に一致する位置で結像されても、中間像に光学素子の傷、異物および欠陥等が重なることを防止して鮮明な最終像を取得することができ、さらに、位相変調素子を改良することで、より鮮明な最終像の取得を可能であり、かつ、製造が容易であるという効果を奏する。
本発明の一実施形態に係る結像光学系を示す模式図である。 図1の結像光学系における中間像の不鮮明化および最終像の鮮明化を説明する図である。 図1および図2の結像光学系の作用を説明する模式図である。 図3の物体側の瞳位置から波面回復素子までを示す拡大図である。 従来の顕微鏡装置に用いられる結像光学系を示す模式図である。 図1の結像光学系における波面錯乱素子および波面回復素子の他の例を示す模式図である。 図1の結像光学系における波面錯乱素子および波面回復素子の他の例を示す模式図である。 図1の結像光学系における波面錯乱素子および波面回復素子の他の例を示す模式図である。 本発明の第1の実施形態に係る観察装置を示す模式図である。 本発明の第2の実施形態に係る観察装置を示す模式図である。 本発明の第3の実施形態に係る観察装置を示す模式図である。 図11の観察装置の変形例を示す模式図である。 図12の観察装置の第1の変形例を示す模式図である。 図13の観察装置のさらなる変形例を示す模式図である。 図12の観察装置の第2の変形例を示す模式図である。 図12の観察装置の第3の変形例を示す模式図である。 本発明の参考実施形態に係る結像光学系および観察装置に使用される位相変調素子の一例としてのシリンドリカルレンズを示す斜視図である。 図17のシリンドリカルレンズを用いた場合の作用を説明する模式図である。 図18の説明に使用するガウス光学に基づく位相変調量と光学パワーの関係を説明する図である。 本発明の参考実施形態に係る結像光学系および観察装置に使用される位相変調素子の他の例としてのバイナリ回折格子を示す斜視図である。 本発明の参考実施形態に係る結像光学系および観察装置に使用される位相変調素子の他の例としての1次元正弦波回折格子を示す斜視図である。 本発明の参考実施形態に係る結像光学系および観察装置に使用される位相変調素子の他の例としての自由曲面レンズを示す斜視図である。 本発明の参考実施形態に係る結像光学系および観察装置に使用される位相変調素子の他の例としてのコーンレンズを示す縦断面図である。 本発明の参考実施形態に係る結像光学系および観察装置に使用される位相変調素子の他の例としての同心円型バイナリ回折格子を示す斜視図である。 位相変調素子として回折格子を用いた場合の光軸に沿う光線の作用を説明する模式図である。 位相変調素子として回折格子を用いた場合の軸上光線の作用を説明する模式図である。 波面錯乱素子として機能する回折格子の作用を説明する中央部の詳細図である。 波面回復素子として機能する回折格子の作用を説明する中央部の詳細図である。 本発明の参考実施形態に係る結像光学系および観察装置に使用される位相変調素子の他の例としての球面収差素子を示す縦断面図である。 本発明の参考実施形態に係る結像光学系および観察装置に使用される位相変調素子の他の例としての不規則形状素子を示す縦断面図である。 本発明の参考実施形態に係る結像光学系および観察装置に使用される位相変調素子の他の例としての反射型の位相変調素子を示す模式図である。 本発明の参考実施形態に係る結像光学系および観察装置に使用される位相変調素子の他の例としての屈折率分布型素子を示す模式図である。 本発明の結像光学系を内視鏡的用途でもって顕微鏡的に拡大観察するための装置に適用する場合のレンズ配列の一例を示す図である。 本発明の結像光学系を、インナーフォーカス機能付き内視鏡型細径対物レンズを備えた顕微鏡に適用する場合のレンズ配列の一例を示す図である。
本発明の顕微鏡装置に用いられる結像光学系1の一実施形態について、図面を参照して以下に説明する。
本実施形態に係る結像光学系1は、図1に示されるように、間隔をあけて配置された2つ1組の結像レンズ2,3と、これらの結像レンズ2,3の中間結像面に配置されたフィールドレンズ4と、物体O側の結像レンズ2の瞳位置PP近傍に配置された波面錯乱素子(第1の位相変調素子)5と、像I側の結像レンズ3の瞳位置PP近傍に配置された波面回復素子(第2の位相変調素子)6とを備えている。図中、符号7は開口絞りであり、符号Qは結像光学系1の光軸である。
波面錯乱素子5は、水晶等の複屈折媒質から形成された一対のプリズム5a,5bを接合してなる単一のウォラストンプリズム(プリズム)5Aから構成されている。物体O側の第1のプリズム5aおよび像I側の第2のプリズム5bは、光学軸が光軸Qに直交するように、かつ、光学軸が互いに直交するように、配置されている。以下、光軸Q方向をZ方向、第1のプリズム5aの光学軸方向をX方向、第2のプリズム5bの光学軸方向をY方向と定義する。
波面回復素子6は、水晶等の複屈折媒質から形成された一対のプリズム6a,6bを接合してなる単一のウォラストンプリズム(プリズム)6Aから構成されている。プリズム6a,6bは、プリズム5a,5bと同一の複屈折媒質から形成され、プリズム5a,5bと同一の形状を有することが好ましい。物体O側の第1のプリズム6aおよび像I側の第2のプリズム6bは、光学軸が光軸Qに直交するように、かつ、光学軸が互いに直交するように、配置されている。
さらに、ウォラストンプリズム6Aは、フィールドレンズ4に対してウォラストンプリズム5Aとは対称となるように配置されている。すなわち、第1のプリズム6aの光学軸が第2のプリズム5bの光学軸と平行となり、第2のプリズム6bの光学軸が第1のプリズム5aの光学軸と平行となるように、ウォラストンプリズム6Aは配置されている。また、ウォラストンプリズム5Aおよびウォラストンプリズム6Aは、後述するように、フィールドレンズ4による結像に関して、互いに共役な位置関係に配置されている。
ウォラストンプリズム5Aは、物体Oから発せられ物体O側の結像レンズ2により集光された光を透過させる際に波面に乱れを付与するようになっている。ウォラストンプリズム5Aによって波面に乱れを付与することにより、フィールドレンズ4に結像される中間像が不鮮明化されるようになっている。
具体的には、結像レンズ2からウォラストンプリズム5Aに入射した単一の光線は、図2に示されるように、ウォラストンプリズム5Aによって複屈折されることによりX方向に直線偏向した光線とY方向に直線偏向した光線とに分割され、ウォラストンプリズム5Aからは2つの光線が互いに異なる角度で射出される。その結果、単一の光線は、中間結像面において、光軸Qに直交する方向に配列する2つの位置A,Bに分離される。図同様に、プリズム5Aに入射した全ての光線が中間結像面において位置A,Bに分離される。これにより、中間結像面には、結像レンズ2による中間像IIとして、2つの位置A,Bに形成された2個の集光点からなる中間像II,IIが形成される。このように、中間像IIが2つの位置A,Bに分離することによって、中間像IIが不鮮明化されるようになっている。
一方、ウォラストンプリズム6Aは、フィールドレンズ4により集光された光を透過させる際に、ウォラストンプリズム5Aによって付与された波面の乱れを打ち消すような位相変調を光に付与するようになっている。ウォラストンプリズム6Aは、ウォラストンプリズム5Aとは逆の位相特性を有し、波面の乱れを打ち消すことによって、鮮明な最終像Iを結像させるようになっている。
具体的には、ウォラストンプリズム6Aは、中間結像面における2個の集光点II,IIからの2つの光を透過させる際に、該2つの光を1つに合成し、合成された単一の光を結像レンズ3へ射出する。これにより、中間結像面において2つに分離された中間像II,IIが、結像レンズ3の結像面(最終結像面)においては1つに復元され、ウォラストンプリズム5Aによって変調された光の波面が最終結像面において復調されるようになっている。
本実施形態に係る結像光学系1の、より一般的な概念について詳細に説明する。
図3に示される例では、結像光学系1は、物体O側および像I側に関してテレセントリックな配置になっている。また、波面錯乱素子5はフィールドレンズ4から物体O側に距離aFだけ離れた位置に配置され、波面回復素子6はフィールドレンズ4から像I側に距離bFだけ離れた位置に配置されている。
図3において、符号fは結像レンズ2の焦点距離、符号fは結像レンズ3の焦点距離、符号F,F’は結像レンズ2の焦点位置、符号F,F’は結像レンズ3の焦点位置、符号II,II,IIは中間像である。
ここで、波面錯乱素子5は必ずしも結像レンズ2の瞳位置PP近傍に配置されている必要はなく、波面回復素子6も必ずしも結像レンズ3の瞳位置PP近傍に配置されている必要はない。
ただし、波面錯乱素子5と波面回復素子6は、フィールドレンズ4による結像に関して、式(1)に示されるように、互いに共役な位置関係に配置されている必要がある。
1/f=1/a+1/b (1)
ここで、fはフィールドレンズ4の焦点距離である。
図4は、図3の物体O側の瞳位置PPから波面回復素子6までを詳細に示す図である。
ここで、ΔLは、光が光学素子を透過することによって付与される、特定の位置(すなわち光線高さ)を透過する光線を基準とした、位相の進み量である。
また、ΔLo(xo)は、光が波面錯乱素子5の光軸上(x=0)を通過する場合を基準とした、波面錯乱素子5の任意の光線高さxを通過する場合の位相の進み量を与える関数である。
さらに、ΔL(x)は、光が波面回復素子6の光軸上(x=0)を通過する場合を基準とした、波面回復素子6の任意の光線高さxを通過する場合の位相の進み量を与える関数である。
ΔL(x)とΔL(x)は、下式(2)を満たしている。
ΔL(x)+ΔL(x)=ΔL(x)+ΔL(β・x)=0 (2)
ここで、βは、フィールドレンズ4による波面錯乱素子5と波面回復素子6の共役関係における横倍率であり、下式(3)により表される。
β=−b/a (3)
このような結像光学系1に1本の光線Rが入射し、波面錯乱素子5上の位置xを通過すると、そこで、ΔL(x)の位相変調を受け、屈折、回折、散乱等による錯乱光線Rcを生じる。錯乱光線Rcは、光線Rの位相変調を受けなかった成分とともに、フィールドレンズ4によって波面回復素子6上の位置x=β・xに投影される。投影された光線は位置xを通過することにより、ΔL(β・x)=−ΔL(x)の位相変調を受け、波面錯乱素子5によって受けた位相変調が打ち消される。これにより、波面の乱れのない1本の光線R’に戻る。
波面錯乱素子5と波面回復素子6が共役な位置関係にあり、かつ式(2)の特性を有する場合には、波面錯乱素子5上の1つの位置を経て位相変調を受けた光線は、その位置と一対一対応し、かつ波面錯乱素子5から受けた位相変調を打ち消すような位相変調を付与する波面回復素子6の特定の位置を必ず通過する。図3および図4に示される光学系は、光線Rに対して、波面錯乱素子5における光線Rの入射位置xや入射角に関わりなく、上記のように作用する。すなわち、あらゆる光線Rに関して、中間像IIを不鮮明化し、かつ最終像Iを鮮明に結像させることができる。
図5に、従来の結像光学系を示す。この結像光学系によれば、物体O側の結像レンズ2によって集光された光は中間結像面に配置されるフィールドレンズ4において鮮明な中間像IIを形成した後、像I側の結像レンズ3によって集光されて鮮明な最終像Iを形成する。
従来の結像光学系では、フィールドレンズ4の表面に傷や塵埃等があったり、フィールドレンズ4の内部に空洞等の欠陥があったりした場合に、フィールドレンズ4に鮮明に形成された中間像にこれらの異物の像が重なってしまい、最終像Iにも異物の像が形成されてしまうという問題が発生する。
これに対し、本実施形態に係る結像光学系1によれば、フィールドレンズ4に一致する位置に配置される中間結像面には、波面錯乱素子5によって不鮮明化された中間像IIが結像されるので、中間像IIに重なった異物の像は、波面回復素子6によって位相変調を受けて不鮮明な中間像IIが鮮明化される際に同じ位相変調によって不鮮明化される。したがって、鮮明な最終像Iに中間結像面の異物の像が重なることを防止することができる。
この場合において、波面錯乱素子5および波面回復素子6を構成するウォラストンプリズム5A,6Aは、外表面が平坦面のみからなるプリズム5a,5b,6a,6bの組み合わせから構成されているので、研磨加工が容易である。したがって、ウォラストンプリズム5A,6Aを用いることで、中間像II,IIを不鮮明化する手段として、外表面形状が複雑なマイクロレンズアレイやレンチキュラーレンズを用いた場合と比べて、製造が容易であり、製造コストを低減することができる。
なお、上記説明においては、2つの結像レンズ2,3をそれぞれテレセントリックな配置として説明したが、これに限定されるものではなく、非テレセントリック系であっても同様に作用する。
また、位相進み量の関数を1次元的な関数としたが、これに代えて、2次元的な関数としても同様に作用し得る。
また、結像レンズ2と波面錯乱素子5とフィールドレンズ4の間の空間、およびフィールドレンズ4と波面回復素子6と結像レンズ3の間の空間は、必ずしも必要でなく、これらの素子の間は光学的に接合されていてもよい。
また、結像光学系1をなす各レンズ、すなわち、結像レンズ2,3およびフィールドレンズ4の各々が結像と瞳リレーの機能を明確に分担する構成としたが、実際の結像光学系においては、1つのレンズが結像と瞳リレーの両機能を同時に有するような構成も用いられている。このような場合においても、上記条件が満たされる場合には、波面錯乱素子5は波面に乱れを付与して中間像IIを不鮮明化し、波面回復素子6は波面の乱れを打ち消して最終像Iを鮮明化することができる。
本実施形態は以下のように変形することができる。
本実施形態においては、波面錯乱素子5および波面回復素子6の各々が、ウォラストンプリズム5A,6Aを1つのみ備えることとしたが、これに代えて、図6および図7に示されるように、複数個のウォラストンプリズムと、該複数個のウォラストンプリズムの間に配置された4分の1波長板を備えていてもよい。
図6および図7には、一例として、波面錯乱素子5が、2個のウォラストンプリズム5A,5Bと、該2個のウォラストンプリズム5A,5Bの間に配置された単一の4分の1波長板9とを備え、波面回復素子6が、2個のウォラストンプリズム6A,6Bと、該2個のウォラストンプリズム6A,6Bの間に配置された単一の4分の1波長板9とを備えた構成が示されている。ウォラストンプリズム5A,5Bと4分の1波長板9、および、ウォラストンプリズム6A,6Bと4分の1波長板9は、図6に示されるように、互いに接合されていてもよく、図7に示されるように、光軸Q方向に間隔を空けて配置されていてもよい。図7においては、レンズ2,3,4の図示を省略している。
本変形例の作用について、図7を参照して説明すると、波面錯乱素子5に入射した光は、第1のウォラストンプリズム5Aによって2つの直線偏光に分割され、該2つの直線偏光はそれぞれ、4分の1波長板9によってそれぞれ円偏光に変換される。円偏光は、第2のウォラストンプリズム5Bによって、2つの直線偏光に分割され、円偏光は、第2のウォラストンプリズム5Bによって、2つの直線偏光に分割される。これにより、中間結像面には、光軸Qに交差する方向に間隔を空けて1列に配列する4個の位置A,B,C,Dに中間像として集光点II,II,II,IIが形成される。
ここで、ウォラストンプリズム5A,5B,6A,6Bの光軸Q方向の厚さに応じて、該ウォラストンプリズム5A,5B,6A,6Bから射出される2つの光線の成す角度が変化する。したがって、各ウォラストンプリズム5A,5B,6A,6Bの厚さに応じて中間結像面における集光点II,II,II,IIの間隔を変更することができる。
ウォラストンプリズム5A,5Bの数が1つ増加する毎に、波面錯乱素子5による光の分割数が2倍に増加し、中間結像面に形成される集光点II,II,II,IIの数も2倍に増加する。したがって、波面錯乱素子5を構成するプリズム5A,5Bの数を増加することによって、中間像IIの不鮮明化効果をさらに高めることができる。
図6および図7に示される変形例においては、波面錯乱素子5が、4分の1波長板9を備えることに代えて、図8に示されるように、物体O側の第1のウォラストンプリズム5Aの2つの光学軸に対して像I側の第2のウォラストンプリズム5Bの2つの光学軸がねじれの関係となるように、第1のウォラストンプリズム5Aに対して第2のウォラストンプリズム5Bが、光軸Q回りに傾いて配置されていてもよい。フィールドレンズ4に対して波面錯乱素子5と波面回復素子6とが光学的に対称となるように、波面回復素子6も、像側の第2のウォラストンプリズム6Bに対して第1のウォラストンプリズム6Aが、光軸Q回りに傾いて配置される。このようにしても、第1のウォラストンプリズム5Aによって分割された2つの直線偏光の各々が、第2のウォラストンプリズム5Bによってさらに2つに分割されることにより、中間像IIを4個の集光点II,II,II,IIに分離することができる。
ただし、図8の変形例において、4個の集光点II,II,II,IIは、1列ではなく、平行四辺形の4個の頂点を形成するように、光軸Qに直交する平面上において2次元的に配列される。このときの4個の集光点II,II,II,IIの2次元的な配列は、第1のウォラストンプリズム5Aに対する第2のウォラストンプリズム5Bの光軸Q回りの傾き角度に応じて変化する。したがって、本例によれば、中間結像面における集光点II,II,II,IIの配列の自由度を向上することができる。
また、本実施形態においては、波面錯乱素子5および波面回復素子6を構成するプリズムとして、ウォラストンプリズム5A,5B,6A,6Bを使用することとしたが、これに代えて、他の種類の複屈折性を有するプリズム、例えばローションプリズムを使用してもよい。
次に、本発明の第1の実施形態に係る観察装置10について、図面を参照して以下に説明する。
本実施形態に係る観察装置10は、図9に示されるように、非コヒーレントな照明光を発生する光源11と、光源11からの照明光を観察対象物Aに照射する照明光学系12と、観察対象物Aからの光を集光する結像光学系13と、該結像光学系13により集光された光を撮影して画像を取得する撮像素子(光検出器)14とを備えている。
照明光学系12は、光源11からの照明光を集光する集光レンズ15a,15bと、該集光レンズ15a,15bにより集光された照明光を観察対象物Aに照射する対物レンズ16とを備えている。
また、この照明光学系12は、いわゆるケーラー照明であり、集光レンズ15a,15bは、光源11の発光面と対物レンズ16の瞳面とが互いに共役になるように配置されている。
結像光学系13は、物体側に配置された観察対象物Aから発せられた観察光(例えば、反射光)を集光する上記対物レンズ(結像レンズ)16と、該対物レンズ16により集光された観察光の波面に乱れを付与する波面錯乱素子(第1の位相変調素子)17と、波面に乱れを付与された光を光源11からの照明光路から分岐させる第1のビームスプリッタ18と、光軸方向に間隔を明けて配置された第1の中間結像レンズ対19と、該第1の中間結像レンズ対19の各レンズ19a,19bを通過した光を90°偏向する第2のビームスプリッタ20と、該第2のビームスプリッタ20により偏向された光を集光して中間像を結像させる第2の中間結像レンズ21と、該第2の中間結像レンズ21による中間結像面に配置された光路長可変手段22と、光路長可変手段22により戻されて中間結像レンズ21および第2のビームスプリッタ20を透過した光を集光して中間像を結像させる中間結像レンズ対24と、中間結像レンズ対24の各レンズ24a,24bを通過した光を集光して最終像を結像させる結像レンズ25と、中間結像レンズ対24と結像レンズ25との間に配置された波面回復素子(第2の位相変調素子)23とを備えている。
撮像素子14は、例えば、CCDあるいはCMOSのような2次元のイメージセンサである。撮像素子14は、結像レンズ25による最終像の結像位置に配置された撮像面14aを備え、撮像面14に入射する光を撮影することにより観察対象物Aの2次元的な画像を取得することができるようになっている。
波面錯乱素子17は、対物レンズ16の瞳位置近傍に配置されている。波面錯乱素子17は、上述した波面錯乱素子5のいずれかであり、複屈折媒質により構成されている。したがって、波面錯乱素子17は、光が透過する際に、複屈折媒質が有する複屈折性によって光の波面を変調する。本実施形態においては、観察対象物Aからの観察光を透過させることにより、必要な波面の乱れを付与するようになっている。
波面回復素子23は、上述した波面回復素子6のいずれかであり、複屈折媒質により構成されている。したがって、波面回復素子23は、光が透過する際に、複屈折媒質が有する複屈折性によって光の波面を変調する。
これら波面錯乱素子17および波面回復素子23は、上述した波面錯乱素子5および波面回復素子6と同様に、複屈折媒質の複屈折性により、互いに相補的な位相変調を光の波面に付与することができるようになっている。したがって、波面回復素子23は、光路長可変手段22により折り返すように反射された観察光を透過させることにより、波面錯乱素子17により付与された波面の乱れを打ち消すような位相変調を光の波面に与えるようになっている。
光軸(Z軸)走査系としての光路長可変手段22は、光軸に直交して配置された平面鏡22aと、該平面鏡22aを光軸方向に変位させるアクチュエータ22bとを備えている。光路長可変手段22のアクチュエータ22bの作動により、平面鏡22aを光軸方向に変位させると、第2の中間結像レンズ21と平面鏡22aとの間の光路長が変化させられ、それによって、観察対象物Aにおける、撮像面14aと共役な位置、すなわち、対物レンズ16の前方の合焦点位置が、光軸方向に変化させられるようになっている。
このように構成された本実施形態に係る観察装置10を用いて観察対象物Aの観察を行うには、光源11からの照明光を照明光学系12によって観察対象物Aに照射する。観察対象物Aから発せられた観察光は対物レンズ16によって集光され、波面錯乱素子17を透過して第1のビームスプリッタ18および中間結像光学系19を通過し、第2のビームスプリッタ20において、90°偏向される。そして、観察光は、第2の中間結像レンズ21を介して光路長可変手段22の平面鏡22aによって折り返されるように反射され、ビームスプリッタ20および中間結像レンズ対24を介して波面回復素子23を透過する。これにより、結像レンズ25によって結像された最終像が撮像素子14によって撮影される。
光路長可変手段22のアクチュエータ22bを作動させて、平面鏡22aを光軸方向に移動させることにより、第2の中間結像レンズ21と平面鏡22aとの間の光路長を変化させることができる。これによって、対物レンズ16の前方の合焦点位置を光軸方向に移動させ走査することができる。そして、異なる合焦点位置において観察光を撮影することにより、観察対象物Aの奥行き方向に異なる位置に合焦させた複数の画像を取得することができる。さらに、これら複数の画像を加算平均によって合成した後、高域強調処理を施すことにより、被写界深度の深い画像を取得することができる。
この場合において、光路長可変手段22の平面鏡22a近傍には第2の中間結像レンズ21による中間像が結像される。この中間像は、波面錯乱素子17を透過することにより観察光に付与された波面の乱れによって、不鮮明化されている。そして、不鮮明化された中間像を結像した後の光は、第2の中間結像レンズ21および中間結像レンズ対24によって集光された後に、波面回復素子23を通過させられることにより、波面の乱れが完全に打ち消される。
その結果、本実施形態に係る観察装置10によれば、平面鏡22aの表面に傷や塵埃等の異物が存在していても、異物の像が最終像に重なって撮影されてしまうことを防止することができ、かつ、観察対象物Aの鮮明な画像を得ることができるという利点がある。
また、同様にして、観察対象物Aにおける合焦点位置を光軸方向に移動させると、第1の中間結像レンズ対19によって形成される中間像も光軸方向に大きく変動するが、その変動の結果、中間像が第1の中間結像レンズ対19の位置に重なったとしても、あるいはまた、その変動範囲内に何らかの他の光学素子が存在する場合であっても、中間像が不鮮明化されているので、異物の像が最終像に重なって撮影されてしまうことを防止することができる。本実施形態において、上述したような走査系を搭載した場合には、結像光学系に配置されるあらゆる光学素子上で、光がZ軸移動してもノイズ画像を生じない。
次に、本発明の第2の実施形態に係る照明装置28および観察装置30について、図面を参照して以下に説明する。
本実施形態の説明において、上述した第1の実施形態に係る観察装置10と構成を共通とする箇所には同一符号を付して説明を省略する。
本実施形態に係る観察装置30は、図10に示されるように、レーザ光源31と、該レーザ光源31からのレーザ光を観察対象物Aに集光させる一方、観察対象物Aからの光を集光する結像光学系32とを備える照明装置28と、結像光学系32により集光された光を撮影する撮像素子(光検出器)33と、光源31および撮像素子33と結像光学系32との間に配置されたニポウディスク型コンフォーカル光学系34とを備えている。
ニポウディスク型コンフォーカル光学系34は、平行間隔をあけて配置される2枚のディスク34a,34bと、該ディスク34a,34bを同時に回転させるアクチュエータ34cとを備えている。レーザ光源31側のディスク34aには、マイクロレンズ(図示略)が多数配列されており、物体側のディスク34bには、各マイクロレンズに対応する位置に多数のピンホール(図示略)が設けられている。また、2枚のディスク34a,34bの間の空間には、ピンホールを通過した光を分岐するダイクロイックミラー34dが固定されている。ダイクロイックミラー34dによって分岐された光は集光レンズ35によって集光され、撮像素子33の撮像面33aに最終像が結像されて、画像が取得されるようになっている。
結像光学系32は、第1の実施形態における第1のビームスプリッタ18と第2のビームスプリッタ20とを共通化して単一のビームスプリッタ36とし、ニポウディスク型コンフォーカル光学系34のピンホールを通過した光を観察対象物Aに照射するための光路と、観察対象物Aにおいて発生し、ニポウディスク型コンフォーカル光学系34のピンホールに入射するまでの光路とを完全に共通化している。
このように構成された本実施形態に係る観察装置30の作用について、以下に説明する。
本実施形態に係る観察装置30によれば、ニポウディスク型コンフォーカル光学系34のピンホールから結像光学系25、位相変調素子23、中間結像レンズ対24を介して結像光学系32に入射した光は、ビームススプリッタ36を透過した後に、第2の中間結像レンズ21によって集光され、光路長可変手段22の平面鏡22aによって折り返されるように反射される。そして、光は、第2の中間結像レンズ21を通過した後にビームスプリッタ36によって90°偏向され、第1の中間結像レンズ対19および位相変調素子17を透過して対物レンズ16により観察対象物Aに集光される。
本実施形態においては、レーザ光が最初に透過する位相変調素子23は、レーザ光の波面に乱れを付与する波面錯乱素子として機能し、その後に透過する位相変調素子17は、位相変調素子23により付与された波面の乱れを打ち消すような位相変調を付与する波面回復素子として機能する。
したがって、ニポウディスク型コンフォーカル光学系34によって多数の点光源状に形成された光源の像は第2の中間結像レンズ21によって平面鏡22a上に中間像として結像されるが、第2の中間結像レンズ21により形成される中間像は、位相変調素子23を通過することにより不鮮明化されているので、中間結像面に存在する異物の像が、最終像に重なってしまう不都合を防止できる。
また、位相変調素子23を透過することにより波面に付与された乱れは、位相変調素子17を透過することにより打ち消されるので、観察対象物Aに鮮明な多数の点光源の像を結像させることができる。そして、ニポウディスク型コンフォーカル光学系34のアクチュエータ34cの作動によりディスク34a,34bを回転させることにより、観察対象物Aに結像している多数の点光源の像を光軸に交差するXY方向に移動させ、高速走査を行うことができる。
一方、観察対象物Aにおける点光源の像の結像位置において発生した光、例えば、蛍光は、対物レンズ16により集光され、位相変調素子17および第1の中間結像レンズ対19を透過する。そして、光は、ビームスプリッタ36によって90°偏向されて、第2の中間結像レンズ21によって集光され、平面鏡22aによって折り返されるように反射される。その後、光は、再度、第2の中間結像レンズ21によって集光されてビームスプリッタ36を透過する。そして、光は、結像レンズ25により集光されて、ニポウディスク型コンフォーカル光学系34のピンホール位置に結像される。
ピンホールを通過した光はダイクロイックミラー34dによって、レーザ光源31からの光路から分岐され、集光レンズ35によって集光されて撮像素子33の撮像面33aに最終像として結像される。この場合において、観察対象物において多数の点状に発生した蛍光が透過する位相変調素子17は第1の実施形態と同様に波面錯乱素子として機能し、位相変調素子23は波面回復素子として機能する。
したがって、位相変調素子17を透過することにより波面に乱れが付与された蛍光は、平面鏡22aに不鮮明な中間像を結像する。そして、位相変調素子23を透過することにより、波面の乱れが完全に打ち消された状態となった蛍光は、ニポウディスク型コンフォーカル光学系34のピンホールに結像する。そして、光は、ピンホールを通過した後にダイクロイックミラー34dによって分岐され、集光レンズ35により集光されて撮像素子33の撮像面33aに鮮明な最終像を結像する。
これにより、本実施形態に係る観察装置30によれば、観察対象物Aにレーザ光を照射する照明装置としても、観察対象物Aにおいて発生した蛍光を撮影する観察装置としても、中間像を不鮮明化して中間結像面における異物の像が最終像に重なることを防止しつつ、鮮明な最終像を得ることができるという利点を有する。本実施形態において、上述したような走査系を搭載した場合には、結像光学系に配置されるあらゆる光学素子上で、光がZ軸移動してもノイズ画像を生じない。
次に、本発明の第3の実施形態に係る照明装置38および観察装置40について、図面を参照して以下に説明する。
本実施形態の説明において、上述した第2の実施形態に係る観察装置30と構成を共通とする箇所には同一符号を付して説明を省略する。
本実施形態に係る観察装置40は、図11に示されるように、レーザ走査型共焦点観察装置である。
この観察装置40は、レーザ光源41と、該レーザ光源41からのレーザ光を観察対象物Aに集光させる一方、観察対象物Aからの光を集光する結像光学系42とを備える照明装置38と、結像光学系42により集光された蛍光を通過させる共焦点ピンホール43と、該共焦点ピンホール43を通過した蛍光を検出する光検出器44とを備えている。
結像光学系42は、レーザ光のビーム径を拡大するビームエキスパンダー45と、レーザ光を偏向し蛍光を透過するダイクロイックミラー46と、対物レンズ16の瞳と共役な位置の近傍に配置されたガルバノミラー47と、第3の中間結像レンズ対48とを第2の実施形態に係る観察装置30とは異なる構成として備えている。また、レーザ光の波面に乱れを付与する位相変調素子23をガルバノミラー47の近傍に配置している。図中、符号49はミラーである。
このように構成された本実施形態に係る観察装置40の作用について以下に説明する。 本実施形態に係る観察装置40によれば、レーザ光源41から発せられたレーザ光は、ビームエキスパンダー45によってビーム径が拡大されてダイクロイックミラー46により偏向され、ガルバノミラー47によって2次元的に走査された後、位相変調素子23および第3の中間結像レンズ対48を通過してビームスプリッタ36に入射する。ビームスプリッタ36への入射後は、第2の実施形態に係る観察装置30と同様である。
すなわち、レーザ光は、位相変調素子23によって波面に乱れを付与された後に、光路長可変手段22の平面鏡22aに中間像を結像するので、中間像が不鮮明化されており、中間結像面に存在する異物の像が重なることを防止することができる。また、対物レンズ16の瞳位置に配置された位相変調素子17によって、波面の乱れが打ち消されるので、鮮明化された最終像を観察対象物Aに結像させることができる。また、最終像の結像深さは、光路長可変手段22によって任意に調節することができる。
一方、観察対象物Aにおけるレーザ光の最終像の結像位置において発生した蛍光は、対物レンズ16によって集光され、位相変調素子17を透過する。そして、蛍光は、レーザ光とは逆の光路を辿って、ビームスプリッタ36により偏向され、第3の中間結像レンズ対48、位相変調素子23、ガルバノミラー47およびダイクロイックミラー46を通過した後に結像レンズ24によって、共焦点ピンホール43に集光される。そして、共焦点ピンホール43を通過した蛍光のみが光検出器44によって検出される。
この場合においても、対物レンズ16により集光された蛍光は、位相変調素子17によって波面に乱れを付与された後に中間像を結像するので、中間像が不鮮明化され、中間結像面に存在する異物の像が重なることを防止することができる。そして、位相変調素子23を透過することによって波面の乱れが打ち消されるので、鮮明化された像を共焦点ピンホール43に結像させることができ、観察対象物Aにおいてレーザ光の最終像の結像位置において発生した蛍光を効率よく検出することができる。その結果、高分解能の明るい共焦点画像を取得することができるという利点がある。本実施形態において、上述したような走査系を搭載した場合には、結像光学系に配置されるあらゆる光学素子上で、光がZ軸移動してもノイズ画像を生じない。
なお、本実施形態においては、レーザ走査型共焦点観察装置を例示したが、これに代えて、図12に示されるようにレーザ走査型多光子励起観察装置に適用してもよい。
この場合、レーザ光源41として、極短パルスレーザ光源を採用し、ガルバノミラー47と結像レンズ24との間にあるダイクロイックミラー46を無くし、ミラー49に代えて、ダイクロイックミラー46を採用すればよい。
図12の観察装置50においては、極短パルスレーザ光を観察対象物Aに照射する照明装置の機能において、中間像を不鮮明化し、最終像を鮮明化することができる。観察対象物Aにおいて発生した蛍光については、対物レンズ16により集光され、位相変調素子17およびダイクロイックミラー46を透過した後に、中間像を結像することなく、集光レンズ51によって集光されて、光検出器44によりそのまま検出される。
また、上記各実施形態においては、光路を折り返す平面鏡の移動により光路長を変化させる光路長可変手段22により、対物レンズ16の前方の合焦点位置を光軸方向に変化させることとした。これに代えて、光路長可変手段としては、図13に示されるように、中間結像光学系61を構成するレンズ61a,61bの一方のレンズ61aをアクチュエータ62によって光軸方向に移動させることにより、光路長を変化させるものを採用した観察装置60を構成してもよい。図中、符号63は他の中間結像光学系である。
また、図14に示されるように、2次元の光スキャナを構成する2枚のガルバノミラー47の間に、他の中間結像光学系80を配置し、2つのガルバノミラー47が位相変調素子17,23および対物レンズ16の瞳に配置されている開口絞り81に対して、精度よく光学的に共役な位置関係に配置されているように構成してもよい。
また、光路長可変手段として、図15に示されるように、反射型のLCOSのような空間光変調素子(SLM)64を採用してもよい。このようにすることで、LCOSの液晶の制御によって高速に波面に与える位相変調を変化させ、対物レンズ16の前方の合焦点位置を光軸方向に高速に変化させることができる。図中、符号52は、ビームエキスパンダー45によりビーム径が拡大されたレーザ光を集光して中間像を結像させる中間結像レンズ対であり、符号65は、ミラーである。この場合、位相変調素子23はビームエキスパンダー45と中間結像レンズ対52との間に配置し、位相変調素子17はビームスプリッタ36と対物レンズ16との間に配置することとすればよい。
また、反射型のLCOSのような空間光変調素子64に代えて、図16に示されるように、透過型のLCOSのような空間光変調素子66を採用してもよい。反射型のLCOSと比較してミラー65が不要となるので、構成を簡易化することができる。
観察対象物Aにおける合焦点位置を光軸方向に移動させる手段としては、上記各実施例に示したもの(光路長可変手段22、あるいは中間結像光学系61とアクチュエータ62、あるいは反射型空間光変調素子64、あるいは透過型空間光変調素子66)の他にも、能動光学素子として知られるパワー可変光学素子が各種利用可能である。まず機械的可動部を有するものとして、形状可変鏡(DFM:Deformable Mirror)、液体やゲルを用いた形状可変レンズがある。そして機械的可動部を持たない同様の素子として、電界により媒質の屈折率を制御する、、液晶レンズやタンタル酸ニオブ酸カリウム(KTN:KTa1−x NbxO3)結晶レンズ、さらには音響光学偏向器(AOD/Acousto−Optical Deflector)におけるシリンドリカルレンズ効果を応用したレンズ、等がある。
以上、本発明の顕微鏡としての実施形態は、いずれも観察対象物Aにおける合焦点位置を光軸方向に移動させる何らかの手段を有する。さらに、これらの合焦点位置光軸方向移動手段は、同じ目的に対する従来の顕微鏡における手段(対物レンズか観察対象物かの何れかを光軸方向に移動させる)に比較して、駆動対象物の質量が小さい、あるいは応答速度の速い物理現象を利用している、という理由により、動作速度を大幅に高めることができる。
このことには、観察対象物(例えば、生きた生体組織標本)における、より高速な現象を検出し得る、という利点がある。
本発明の参考実施形態においては、透過型あるいは反射型のLCOSのような空間光変調素子64,66を採用する場合には、位相変調素子23の機能を空間光変調素子64,66に担わせることができる。このようにすることで、波面錯乱素子としての位相変調素子23を省略でき、構成をさらに簡易化することができるという利点がある。
また、上記例は、空間光変調素子とレーザ走査型多光子励起観察装置との組み合わせにおける、位相変調素子23の省略であるが、これと同様にして、本発明の参考実施形態においては、空間光変調素子と、レーザ走査型共焦点観察装置との組み合わせにおいても、位相変調素子23を省略することが可能である。すなわち、図15,図16において、ダイクロイックプリズム36に代えてミラー49を採用し、ビームエキスパンダー45と空間光変調素子64,66との間にダイクロイックミラー46を採用して分岐光路をなし、さらに結像レンズ24、共焦点ピンホール43、および光検出器44を採用した上で、位相変調素子23の機能を空間光変調素子64,66に担わせることができる。この場合の空間光変調素子64,66は、レーザ光源41からのレーザ光に対しては、波面錯乱素子として波面に乱れを付与する一方で、観察対象物Aからの蛍光に対しては、位相変調素子17によって付与された波面の乱れを打ち消す波面回復素子として作用する。
上記参考実施形態の位相変調素子としては、例えば、図17に示されるような、シリンドリカルレンズ68,69を採用することにしてもよい。
この場合には、シリンドリカルレンズ68によって中間像は非点収差によって点像が線状に伸ばされるので、この作用により、中間像を不鮮明化することができる。また、シリンドリカルレンズ68と相補的な形状のシリンドリカルレンズ69により、最終像を鮮明化することができる。
図17の場合、凸レンズまたは凹レンズのいずれを波面錯乱素子として使用してもよいし、波面回復素子として使用してもよい。
位相変調素子としてシリンドリカルレンズ5,6を用いる場合の作用について、以下に詳細に説明する。図18は、図3および図4における位相変調素子としてシリンドリカルレンズ5,6を用いた例を示す。
ここでは、特に、下記条件を設定する。
(a) 物体O側の位相変調素子(波面錯乱素子)5として、x方向にパワーψOxを有するシリンドリカルレンズを用いる。
(b) 像I側の位相変調素子(波面回復素子)6として、x方向にパワーψIxを有するシリンドリカルレンズを用いる。
(c) xz平面上の軸上光線Rxのシリンドリカルレンズ5における位置(光線高さ)をxとする。
(d) xz平面上の軸上光線Rxのシリンドリカルレンズ6における位置(光線高さ)をxとする。
図18において、符号II0X,II0Yは中間像である。
この例における作用を説明する前に、ガウス光学に基づく位相変調量と光学パワーとの関係について、図19を用いて説明する。
図19において、高さ(光軸からの距離)xでのレンズの厚さをd(x)、高さ0(光軸上)でのレンズの厚さをdとすると、高さxの光線に沿った入射側接平面から射出側接平面までの光路長L(x)は次式(4)で表される。
L(x)=(d−d(x))+n・d(x) (4)
高さxにおける光路長L(x)と高さ0(光軸上)における光路長L(0)との差は、薄肉レンズとしての近似を用いると、次式(5)で表される。
L(x)−L(0)=(−x/2)(n−1)(1/r−1/r) (5)
上記光路長差L(x)−L(0)は、高さ0における射出光に対する、高さxにおける射出光の位相進み量と、絶対値が等しく符号が逆である。したがって、上記位相進み量は、式(5)の符号を反転させた次式(6)で表される。
L(0)−L(x)=(x/2)(n−1)(1/r−1/r) (6)
一方、この薄肉レンズの光学パワーψは、次式(7)で表される。
ψ=1/f=(n−1)(1/r−1/r) (7)
したがって、式(6)、(7)から位相進み量L(0)−L(x)と光学パワーψとの関係が次式(8)によって求められる。
L(0)−L(x)=ψ・x/2 (8)
ここで、図18の説明に戻る。
xz面上の軸上光線Rxがシリンドリカルレンズ5において受ける軸上主光線すなわち光軸に沿った光線Rに対する位相進み量ΔLOcは、式(8)に基づいて次式(9)で表される。
ΔLOc(x)=LOc(0)−LOc(x)=ψOx・x /2 (9)
ここで、LOc(x)はシリンドリカルレンズ5における高さxの光線に沿った、入射側接平面から射出側接平面までの光路長の関数である。
これと同様にして、xz平面上の軸上光線Rxがシリンドリカルレンズ6において受ける、軸上主光線すなわち光軸に沿った光線Rに対する位相進み量ΔLIcは、次式(10)で表される。
ΔLIc(x)=LIc(0)−LIc(x)=ψIx・x /2 (10)
ここで、LIc(x)はシリンドリカルレンズ6における高さxの光線に沿った、入射側接平面から射出側接平面までの光路長の関数である。
上記式(2)に式(9)、(10)および(x/x=β の関係を適用すると、この例において、シリンドリカルレンズ5が波面錯乱、シリンドリカルレンズ6が波面回復の機能をそれぞれ果たすための条件が式(11)に示すように求められる。
ψOx/ψIx=−β (11)
すなわち、ψOxとψIxの値は互いに符号が逆であり、かつ、それらの絶対値の比はフィールドレンズ4の横倍率の2乗に比例する必要がある。
なお、ここでは軸上光線に基づいて説明したが、上記条件を満たすならば、シリンドリカルレンズ5,6は軸外光線に対しても同様に波面錯乱と波面回復の機能を果たす。
また、位相変調素子5,6,68,69(図においては、位相変調素子5,6として表示。)としては、シリンドリカルレンズに代えて、本発明の参考実施形態においては、図20に示されるような1次元バイナリ回折格子、図21に示されるような1次元正弦波回折格子、図22に示されるような自由曲面レンズ、図23に示されるようなコーンレンズ、図24に示されるような同心円型バイナリ回折格子を採用してもよい。同心円型回折格子としてはバイナリ型に限定されるものではなく、ブレーズド型、正弦波型等の任意の形態を採用することができる。
ここで、位相変調素子として回折格子5,6を用いた場合について、以下に詳細に説明する。
この場合の中間像IIにおいては回折によって1つの点像が複数の点像に分離される。この作用によって、中間像IIが不鮮明化され、中間結像面の異物の像が最終像に重なって表れることを防止することができる。
位相変調素子として、回折格子5,6を用いた場合における軸上主光線、すなわち、光軸に沿った光線Rの好ましい経路の一例を図25に、また、軸上光線Rの好ましい経路の一例を図26にそれぞれ示す。これらの図において、光線R,Rは回折格子5を経て複数の回折光に分離するが、回折格子6を経ることにより元通りの1本の光線になる。
この場合においても、上記式(1)から(3)を満たすことによって上記効果を達成することができる。
ここで、図25および図26に準じて、式(2)は「1本の軸上光線Rが回折格子5,6で受ける位相変調の和は、軸上主光線Rが回折格子5,6で受ける位相変調の和と常に等しい。」と言い換えることができる。
また、回折格子5,6が周期構造を有する場合、それらの形状(すなわち位相変調特性)が一周期分の領域において式(2)を満たすならば、他の領域においても同様に満たすとみなすことができる。
そこで、回折格子5,6の中央部、すなわち、光軸近傍領域に着目して説明する。図27は回折格子5の、図28は回折格子6の、それぞれ中央部の詳細図である。
ここで、回折格子5,6が式(2)を満たすための条件は以下の通りである。
すなわち、回折格子6における変調の周期pがフィールドレンズ4によって投影された回折格子5による変調の周期pと等しくなければならない。また、回折格子6による変調の位相がフィールドレンズ4によって投影された回折格子5による変調の位相に対して反転しており、かつ、回折格子6による位相変調の大きさと回折格子6による位相変調の大きさとが絶対値で等しくなければならない。
まず、周期pと投影された周期pとが等しくなるための条件は式(12)により表される。
=|β|・p (12)
次に、回折格子6による変調の位相が投影された回折格子5による変調の位相に対して反転しているためには、上記式(12)を満たした上で、例えば、回折格子5はその山領域の中心の1つが光軸と一致するように配置されるとともに、回折格子6はその谷領域の中心の1つが光軸と一致するように配置されればよい。図27および図28はその一例に他ならない。
最後に、回折格子6による位相変調の大きさと、回折格子5による位相変調の大きさとが絶対値で等しいための条件を求める。
回折格子5の光学的なパラメータ(山領域厚さtOc、谷領域厚さtOt、屈折率n)より、回折格子5の谷領域を透過する軸上光線Rに付与される、光軸に沿った(山領域を透過する)光線Rに対する位相進み量ΔLOdtは、次式(13)で表される。
ΔLOdt=n・tOc−(n・tOt+(tOc−tOt))
=(n−1)(tOc−tOt) (13)
同様にして、回折格子6の光学的なパラメータ(山領域厚さtIc、谷領域厚さtIt、屈折率n)より、回折格子6の山領域を透過する軸上光線Rに付与される、光軸に沿った(谷領域を透過する)光線Rに対する位相進み量ΔLIdtは、次式(14)で表される。
ΔLIdt=(n・tIt+(tIc−tIt))−n・tIc
=−(n−1)(tIc−tIt) (14)
この場合、ΔLOdtの値は正、ΔLIdtの値は負なので、両者の絶対値が等しいための条件は次式(15)で表される。
ΔLOdt+ΔLIdt=(n−1)(tOc−tOt)−(n−1)(tIc−tIt)=0(15)
なお、ここでは軸上光線に基づいて説明したが、上記条件を満たすならば、軸外光線に対しても、回折格子5は波面散乱、回折格子6は波面回復の機能を果たす。
また、ここでは回折格子5,6の断面形状を台形として説明したが、他の形状でも同様の機能を果たし得ることは言うまでもない。
さらに、位相変調素子5,6としては、図29に示されるような球面収差素子、図30に示されるような不規則形状素子、図31に示されるような透過型の空間光変調素子64との組み合わせによる反射型の波面変調素子、図32に示されるような屈折率分布型素子を採用してもよい。
さらに、本発明の参考実施形態においては、位相変調素子5,6としては、多数の微小なレンズが並んだフライアイレンズやマイクロレンズアレイ、あるいは多数の微小なプリズムが並んだマイクロプリズムアレイを採用してもよい。
また、上記実施形態に係る結像光学系1を内視鏡に適用する場合には、図33に示されるように、対物レンズ(結像レンズ)70の内部に波面錯乱素子5を配置し、複数のフィールドレンズ4および集光レンズ71を含むリレー光学系72を挟んで対物レンズ70とは反対側に配置された接眼レンズ73近傍に波面回復素子6を配置すればよい。このようにすることで、フィールドレンズ4の表面近傍に形成される中間像を不鮮明化し、接眼レンズ73によって結像される最終像を鮮明化することができる。
また、図34に示されるように、アクチュエータ62によってレンズ61aを駆動するインナーフォーカス機能付き内視鏡型細径対物レンズ74内に、波面錯乱素子5を設け、顕微鏡本体75に設けられたチューブレンズ(結像レンズ)76の瞳位置近傍に波面回復素子6を配置してもよい。このように、アクチュエータ自身は公知なレンズ駆動手段(たとえば圧電素子)でもよいが、Z軸上での中間像の移動という点では上述した実施形態と同様の観点で中間像の空間変調を実行できるような配置であることが重要である。
以上に説明した実施形態は、Z軸上での中間像の移動という観点で、空間変調による中間像の不鮮明化を観察装置の結像光学系に適用する場合を論じたものである。もう一つの観点であるXY軸(あるいはXY面)上での中間像の移動という観点で、同様に、観察装置に適用することも可能である。
以上に論じた本発明の結像光学系のための位相変調素子は、以下に示すような態様であり得、下記に示す主旨に基づき当業者が最適な実施形態を検討することができる。以下の態様によれば、上述した(一組の)位相変調素子における空間的な乱れと該乱れの打ち消しを調整または増大する構成を有することを特徴とする結像光学系のための位相変調素子を提供するので、本発明の位相変調素子による独自の作用効果を進化させ、または実用上有利なものにすることが可能であると言うことができる。
(1)液晶型の位相変調素子
本発明の参考例においては、前記第1および前記第2の位相変調素子は、複数の基板によって挟まれた液晶を有するように結像光学系を構成してもよい。こうすることで、液晶の複屈折を利用することにより、第1の位相変調素子によって中間像における一つの集光点を複数個の集光点に分離させることによって不鮮明化し、また第2の位相変調素子によって前記分離した集光点を再び一つに重ねることとなり、最終像を鮮明化することができ、よって中間像問題を解決することができる。この場合、複屈折材料としての液晶は、他の複屈折材料、例えば水晶等の無機材料の結晶と比較して、種類が豊富である点において設計の自由度が高いメリットがあり、さらに複屈折の性質が強い点において中間像を不鮮明化する効果が高いメリットがある。
また、前記基板の液晶との接触面が平面である場合に、平面で挟まれた液晶は複屈折プリズムとして上記の不鮮明化効果を呈するようになる。この場合、液晶を挟む基板の面は平面なので、基板の加工が容易であるというメリットがある。また、前記第1および前記第2の位相変調素子のそれぞれが、液晶よりなる複数個のプリズムで構成されてもよい。この場合、プリズムを一つ増やすごとに,中間像における集光点の数は二倍になり、より多数の集光点に分離されることとなり、よって中間像を不鮮明化する効果が高まる。また、前記第1および前記第2の位相変調素子のそれぞれが、少なくとも1枚の4分の1波長板を有するものであってもよい。この場合、4分の1波長板を用いることによって、分離された集光点の中間像における配置の自由度が高まる。例えば、複数個のプリズムによって4点、あるいは8点等に分離された集光点を一直線上に配置することができるようになる点で好ましい。
また、上述した複屈折によって分離された中間像点が、2次元的に配置された結像光学系とすれば、中間像を効果的に不鮮明化できる点で好ましい。
また、前記基板の液晶との接触面が凹凸形状(凹面,凸面,または凹と凸の両方がある面.非平面)であるように位相変調素子を構成してもよい。このような構成では、凹凸形状(シリンドリカル面、トーリック面、レンチキュラー面、マイクロレンズアレイ形状、ランダム面等)が本来的に有する中間像の不鮮明化効果を、液晶の複屈折によってさらに高めることができるようになる。また、前記第1および第2の位相変調素子における前記基板の前記凹凸形状が相補的であり、且つ前記第1および第2の位相変調素子における液晶の配向方向が平行であるように設計してもよい。かかる設計によれば、二つの位相変調素子における位相変調に相補性を持たせることができることとなり、すなわち最終的な画像(最終像)の回復ができるようになる。さらに、前記第1および第2の位相変調素子における前記基板の前記凹凸形状が同一であり、且つ前記基板をなす硝材の屈折率が前記液晶の二つの主屈折率の平均値に等しく、且つ前記第1および第2の位相変調素子における液晶の配向方向が直交するように構成してもよい。こうすることによっても、二つの位相変調素子における位相変調に相補性を持たせることができることとなり、すなわち最終像の回復ができるようになる。
以上、本発明の各実施形態について図面を参照して詳述してきたが、具体的な構成はこの実施形態に限られるものではなく、本発明の要旨を逸脱しない範囲の設計変更等も含まれる。例えば、本発明を上記の各実施形態およびその変形例に適用したものに限定されることなく、これらの実施形態およびその変形例を適宜組み合わせた実施形態に適用してもよく、特に限定されるものではない。
I 最終像
II,II,II 中間像
O 物体
PP,PP 瞳位置
1,13,32,42 結像光学系
2,3 結像レンズ
5 波面錯乱素子(第1の位相変調素子)
6 波面回復素子(第2の位相変調素子)
5A,5B,6A,6B ウォラストンプリズム(プリズム)
9 4分の1波長板
10,30,40,50,60 観察装置
11,31,41 光源
14,33 撮像素子(光検出器)
17,23 位相変調素子
20,36 ビームスプリッタ
22 光路長可変手段
22a 平面鏡
22b アクチュエータ
28,38 照明装置
34 ニポウディスク型コンフォーカル光学系
43 共焦点ピンホール
44 光検出器(光電子変換素子)
61a レンズ(光路長可変手段)
62 アクチュエータ(光路長可変手段)
64 空間光変調素子(可変空間位相変調素子)

Claims (7)

  1. 最終像および少なくとも1つの中間像を形成する複数の結像レンズと、
    該結像レンズにより形成されるいずれかの前記中間像よりも物体側に配置され、前記物体からの光の波面に空間的な乱れを付与する第1の位相変調素子と、
    該第1の位相変調素子との間に少なくとも1つの中間像を挟む位置に配置され、前記第1の位相変調素子により前記物体からの光の波面に付与された空間的な乱れを打ち消す第2の位相変調素子とを備え、
    前記第1の位相変調素子および前記第2の位相変調素子の各々が、複屈折媒質から形成され、前記物体からの光を複屈折させる複数個のプリズムを備える結像光学系。
  2. 前記第1の位相変調素子および前記第2の位相変調素子の各々が、前記複数個の前記プリズムの間に配置された4分の1波長板を有する請求項に記載の結像光学系。
  3. 前記第1の位相変調素子は、前記結像レンズの光軸に交差する平面上において2次元的に配列する複数個の集光点を前記中間像として形成する請求項または請求項に記載の結像光学系。
  4. 請求項1から請求項のいずれかに記載の結像光学系と、
    該結像光学系の物体側に配置され、該結像光学系に入射させる照明光を発生する光源とを備える照明装置。
  5. 請求項1から請求項のいずれかに記載の結像光学系と、
    該結像光学系の最終像側に配置され、観察対象物から発せられた光を検出する光検出器とを備える観察装置。
  6. 請求項1から請求項のいずれかに記載の結像光学系と、
    該結像光学系の物体側に配置され、該結像光学系に入射させる照明光を発生する光源と、
    前記結像光学系の最終像側に配置され、観察対象物から発せられた光を検出する光検出器とを備える観察装置。
  7. 請求項に記載の照明装置と、
    該照明装置によって照明された観察対象物から発せられた光を検出する光検出器とを備え、
    前記光源が、パルスレーザ光源である観察装置。
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