JP6478368B2 - テアフラビン類の製造方法、及びテアフラビン類を含む飲料 - Google Patents
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Description
項1. カテキン類と、前記カテキン類を酸化してテアフラビン類を生成できる酸化酵素とを水中で共存させた状態で、酸素を含むマイクロバブル及び/又はナノバブルを供給する酸化工程を備える、テアフラビン類の製造方法。
項2. 前記カテキン類の供給源が、茶葉及びその抽出物の少なくとも一方である、項1に記載のテアフラビン類の製造方法。
項3. 前記酸化酵素の供給源が、植物、前記植物の搾汁、及び前記植物の抽出物からなる群から選択された少なくとも1種である、項1又は2に記載のテアフラビン類の製造方法。
項4. 前記植物が、茶葉、果物、野菜、ハーブ、豆類、穀類、及び担子菌類からなる群から選択された少なくとも1種である、項3に記載のテアフラビン類の製造方法。
項5. 前記植物が、梨、洋梨、ブドウ、リンゴ、及びバナナからなる群から選択された少なくとも1種である、項3に記載のテアフラビン類の製造方法。
項6. 前記酸化工程において、前記カテキン類及び前記酸化酵素を含む水中1L当たりのマイクロバブル及び/又はナノバブルによる酸素の供給量が、常温常圧に換算して、10ml/分以上となるようにして、前記マイクロバブル及び/又はナノバブルを供給する、項1〜5のいずれかに記載のテアフラビン類の製造方法。
項7. 前記酸化工程を15〜50℃下に5〜240分間行う、項1〜6のいずれかに記載のテアフラビン類の製造方法。
項8. 茶葉及びその抽出物の少なくとも一方と、植物、前記植物の搾汁、及び前記植物の抽出物からなる群から選択された少なくとも1種との発酵物を含む、テアフラビン類を含む飲料。
項9. カテキン類と、前記カテキン類を酸化してテアフラビン類を生成できる酸化酵素とを水中で共存させた状態で、酸素を含むマイクロバブル及び/又はナノバブルを供給して得られた溶液を含む、飲料。
項10. カテキン類と、前記カテキン類を酸化してテアフラビン類を生成できる酸化酵素とを水中で共存させた状態で、酸素を含むマイクロバブル及び/又はナノバブルを供給し、テアフラビン類を含む溶液を得る工程と、
前記工程で得られた溶液を用いて、飲料を調製する調製工程と、
を備える、テアフラビン類を含む飲料の製造方法。
本発明のテアフラビン類の製造方法は、カテキン類と、カテキン類を酸化してテアフラビン類を生成できる酸化酵素とを水中で共存させた状態で、酸素を含むマイクロバブル及び/又はナノバブルを供給する酸化工程を備える。
サンプル溶液を15000rpm、10分間の条件で遠心し、上清を適宜イオン交換水で希釈したのち、得られた希釈液0.5mlに対し1mMアスコルビン酸水溶液0.5ml及びメタノール1mlを加えて撹拌する。次に、得られた液を0.2μmディスクフィルター(メルクミリポア社製、マイレクスLG 13mm)に通液し、初出の0.7ml以上を捨てた後の溶出液を回収してUHPLC分析のサンプルとする。標準試料も全て同様の方法で処理を行う。分析条件は、以下の通りである。
装置:Acquity UPLC システム(日本ウォーターズ株式会社)
カラム:Acquity BEH Shield RP‐18、 1.7μm、2.1×100mm(日本ウォーターズ株式会社)
移動相A:0.1%ギ酸水溶液
移動相B:0.1%ギ酸アセトニトリル溶液
流速:0.6ml/min.
検出:UV280nm
カラム温度:50℃
本発明のテアフラビン類を含む飲料は、茶葉及びその抽出物の少なくとも一方と、植物、植物の搾汁、及び植物の抽出物からなる群から選択された少なくとも1種との発酵物を含むことを特徴とする。このような発酵物としては、上記のテアフラビン類の製造方法によって得られたテアフラビン溶液を好適に用いることができる。この場合、本発明のテアフラビン類を含む飲料は、カテキン類と、カテキン類を酸化してテアフラビン類を生成できる酸化酵素とを水中で共存させた状態で、酸素を含むマイクロバブル及び/又はナノバブルを供給して得られた溶液を含むことを特徴とする。
上記のカテキン類と、上記のカテキン類を酸化してテアフラビン類を生成できる酸化酵素とを水中で共存させた状態で、酸素を含むマイクロバブルを供給し、テアフラビン類を含む溶液を得る工程
上記の工程で得られた溶液を用いて、飲料を調製する調製工程
100L容量のタンクに30℃のイオン交換水60Lを入れ、インスタントグリーンティの粉末(インド産)500gを投入した。そこへ微細気泡発生装置(アスプ社製、ASG1)を用いてマイクロバブル及びナノバブル(大気)を供給しながら攪拌速度158rpm(max)の回転数で10分間攪拌し、反応系内をマイクロバブル及びナノバブルで満たすと共に、インスタントグリーンティを完全に溶解させた。なお、この際、攪拌羽は、一段とし、最下段の位置に取り付けた。その後、酵素源として梨(福岡県産の幸水)の皮及び芯を除いてブレンダーで破砕したもの2000gを添加して反応を開始した。反応は60分間行い、反応中は常にマイクロバブル及びナノバブルの供給を行うと共に、液温を30℃に保った。酵素源の添加直後から10分ごとにサンプリング(10ml)を行い、混合物中における各テアフラビン類の量(TF1、TF2A、TF2B、TF3)及びこれらの合計量(TFs)を超高速液体クロマトグラフィ(UHPLC)で分析した。なお、サンプリングは、採取した10mlの混合物を5ml容量のエッペンチューブ2本に約4.5mlずつ分注し、卓上遠心機で3分間遠心し、上清を回収して分析に供した。結果を表1及び図1のグラフに示す。なお、UHPLCによるテアフラビン類の測定条件は、上記の通りである。
マイクロバブル及びナノバブルを供給しなかったこと以外は、実施例1と同様にしてテアフラビン溶液を調製し、上記の混合物中における各テアフラビン類の量及びこれらの合計量を超高速液体クロマトグラフィ(UHPLC)で分析した。結果を表2及び図2のグラフに示す。
100L容量のタンクに30℃のイオン交換水50Lを入れ、インスタントグリーンティの粉末(インド産)500gを投入した。そこへ微細気泡発生装置(アスプ社製、ASG1)を用いてマイクロバブル及びナノバブル(大気)を供給しながら攪拌速度158rpm(max)の回転数で10分間攪拌し、反応系内をマイクロバブル及びナノバブルで満たすと共に、インスタントグリーンティを完全に溶解させた。なお、この際、攪拌羽は、一段とし、最下段の位置に取り付けた。その後、酵素源としてCTC破砕した生茶葉(平成25年収穫のやぶきた二茶の冷凍品)1000gを添加して反応を開始した。反応は60分間行い、反応中は常にマイクロバブル及びナノバブルの供給を行うと共に、液温を30℃に保った。酵素源の添加直後から15分ごとにサンプリング(10ml)を行い、混合物中における各テアフラビン類の量(TF1、TF2A、TF2B、TF3)及びこれらの合計量(TFs)を超高速液体クロマトグラフィ(UHPLC)で分析した。なお、サンプリングは、採取した10mlの混合物を5ml容量のエッペンチューブ2本に約4.5mlずつ分注し、卓上遠心機で3分間遠心し、上清を回収して分析に供した。結果を表3及び図3のグラフに示す。
上記の混合物にマイクロバブル及びナノバブルを供給しなかったこと以外は、実施例2と同様にしてテアフラビン溶液を調製し、混合物中における各テアフラビン類の量及びこれらの合計量を超高速液体クロマトグラフィ(UHPLC)で分析した。結果を表4及び図4のグラフに示す。
100L容量のタンクに30℃のイオン交換水60Lを入れ、インスタントグリーンティの粉末(インド産)500gを投入した。そこへ微細気泡発生装置(アスプ社製、ASG1)を用いてマイクロバブル及びナノバブル(大気)を供給しながら攪拌速度158rpm(max)の回転数で10分間攪拌し、反応系内をマイクロバブル及びナノバブルで満たすと共に、インスタントグリーンティを完全に溶解させた。なお、この際、攪拌羽は、一段とし、最下段の位置に取り付けた。その後、酵素源として梨(福岡県産の幸水)の皮及び芯を除いてブレンダーで破砕したもの2000g及びCTC破砕した生茶葉(平成25年収穫のやぶきた二茶の冷凍品)600gを添加して反応を開始した。反応は60分間行い、反応中は常にマイクロバブル及びナノバブルの供給を行うと共に、液温を30℃に保った。酵素源の添加直後から15分ごとにサンプリング(10ml)を行い、混合物中における各テアフラビン類の量(TF1、TF2A、TF2B、TF3)及びこれらの合計量(TFs)を超高速液体クロマトグラフィ(UHPLC)で分析した。なお、サンプリングは、採取した10mlの混合物を5ml容量のエッペンチューブ2本に約4.5mlずつ分注し、卓上遠心機で3分間遠心し、上清を回収して分析に供した。結果を表5及び図5のグラフに示す。
インスタントグリーンティの粉末を600g用いたこと、生茶葉を1800g用いたこと、及び反応を90分間行ったこと以外は、実施例3と同様にしてテアフラビン溶液を調製し、混合物中における各テアフラビン類の量及びこれらの合計量を超高速液体クロマトグラフィ(UHPLC)で分析した。結果を表6及び図6のグラフに示す。
梨の代わりに洋梨(追熟させたラフランスの冷凍果汁)を用いたこと以外は、実施例4と同様にしてテアフラビン溶液を調製し、混合物中における各テアフラビン類の量及びこれらの合計量を超高速液体クロマトグラフィ(UHPLC)で分析した。結果を表7及び図7のグラフに示す。
洋梨として、追熟させたラフランスの冷凍果汁の代わりに、追熟させたラフランスの皮及び芯を除いてすりおろしたものを用いたこと以外は、実施例5と同様にしてテアフラビン溶液を調製し、混合物中における各テアフラビン類の量及びこれらの合計量を超高速液体クロマトグラフィ(UHPLC)で分析した。結果を表8及び図8のグラフに示す。
梨の代わりに、ブレンダーで種と皮ごと粉砕したブドウ(山梨県産 巨峰)を2000g用いたこと以外は、実施例4と同様にしてテアフラビン溶液を調製し、混合物中における各テアフラビン類の量及びこれらの合計量を超高速液体クロマトグラフィ(UHPLC)で分析した。結果を表9及び図9のグラフに示す。
100L容量のタンクに、30℃のイオン交換水60Lとインスタントグリーンティの粉末(インド産)600gを投入した。そこへ微細気泡発生装置(アスプ社製、ASG1)を用いてマイクロバブル及びナノバブル(大気)を供給しながら攪拌速度158rpm(max)の回転数で10分間撹拌し、反応系内をマイクロバブル及びナノバブルで満たすと共に、インスタントグリーンティを完全に溶解させた。なお、この際、攪拌羽は、一段とし、最下段の位置に取り付けた。その後、酵素源として生茶葉(平成24年収穫のやぶきた二茶の冷凍品)1800g及び皮と芯を除きブレンダーで破砕したリンゴ(青森県産、サンふじ)2000gを添加して、反応を開始した。反応は60分間行い、反応中は常にマイクロバブル及びナノバブルの供給を行なうと共に、液温を30℃に保った。酵素源の添加直後から15分ごとにサンプリング(10ml)を行い、混合物中における各テアフラビン類の合計量(TFs)を超高速液体クロマトグラフィ(UHPLC)で分析した。なお、サンプリングは、採取した10mlの混合物を5ml容量のエッペンチューブ2本に約4.5mlずつ分注し、卓上遠心機で3分間遠心し、上清を回収して分析に供した。結果を表10及び図10のグラフに示す。
100L容量のタンクに、30℃のイオン交換水60Lとインスタントグリーンティの粉末(インド産)600gを投入した。そこへ微細気泡発生装置(アスプ社製、ASG1)を用いてマイクロバブル及びナノバブル(大気)を供給しながら攪拌速度158rpm(max)の回転数で10分間撹拌し、反応系内をマイクロバブル及びナノバブルで満たすと共に、インスタントグリーンティを完全に溶解させた。なお、この際、攪拌羽は、一段とし、最下段の位置に取り付けた。その後、酵素源として生茶葉(平成24年収穫のやぶきた二茶の冷凍品)1800g及び皮を除きブレンダーで破砕したバナナ(エクアドル産、ファボリータバナナ)1000gを添加して、反応を開始した。反応は60分間行い、反応中は常にマイクロバブル及びナノバブルの供給を行なうと共に、液温を30℃に保った。酵素源の添加直後から15分ごとにサンプリング(10ml)を行い、混合物中における各テアフラビン類の合計量(TFs)を超高速液体クロマトグラフィ(UHPLC)で分析した。なお、サンプリングは、採取した10mlの混合物を5ml容量のエッペンチューブ2本に約4.5mlずつ分注し、卓上遠心機で3分間遠心し、上清を回収して分析に供した。結果を表11及び図11のグラフに示す。
100mlスケールの多連型培養装置(エイブル株式会社製 BioJr.8)に、インスタントグリーンティの粉末(南インド産茶葉使用)1gに25℃の水100mlを投入した溶液について、反応系を4系列準備した。得られた各溶液に酵素源として生茶葉(平成24年収穫のやぶきた二茶の冷凍品)0.25gを添加して、反応を開始した。反応中は温度を25℃に保ち、250rpmの回転速度で撹拌を行いながら、3つの反応系については、それぞれ通気量20、40、80ml/分のミリバブルの添加(エイブル株式会社製 BioJr.8による)また、残り1つの反応系については、バブリングを行わなかった。反応開始直後から10分ごとにサンプリング(50μl)を行い、実施例1と同様にして、混合物中における各テアフラビン類の合計量(TFs)を超高速液体クロマトグラフィ(UHPLC)で分析した。なお、サンプリングは、採取した50μlの混合物を水で3倍に希釈したのち、遠心機で10分間遠心し、上清を回収したのち再度適宜希釈したのち分析に供した。結果を表12及び図12のグラフに示す。
実施例4と同様にして、マイクロバブル及びナノバブルを供給してテアフラビン類(TFs)濃度が440ppmのテアフラビン溶液を調製した。一方、マイクロバブル及びナノバブルを供給しなかったこと以外は、実施例4と同様にして、テアフラビン類(TFs)濃度が190ppmのテアフラビン溶液を調製した。次に、それぞれのテアフラビン溶液に水を加えて、表12のサンプルNo.1〜8に示すように、テアフラビン類(TFs)濃度が62.5ppm、95ppm、125ppm、190ppmのテアフラビン溶液を調製した。次に、各サンプルがクリームダウンしない程度に加熱した後、各サンプルが入ったペットボトルを氷水に5分間浸漬してサンプルを冷却した後、サンプルのクリームダウンの有無について確認した。結果を表13に示す。また、冷却後におけるサンプルNo.1,2の写真を図13(左から順にサンプルNo.1、No.2)に示す。
Claims (8)
- カテキン類と、前記カテキン類を酸化してテアフラビン類を生成できる酸化酵素とを水中で共存させた状態で、酸素を含むマイクロバブル及び/又はナノバブルを供給する酸化工程を備える、テアフラビン類の製造方法。
- 前記カテキン類の供給源が、茶葉及びその抽出物の少なくとも一方である、請求項1に記載のテアフラビン類の製造方法。
- 前記酸化酵素の供給源が、植物、前記植物の搾汁、及び前記植物の抽出物からなる群から選択された少なくとも1種である、請求項1又は2に記載のテアフラビン類の製造方法。
- 前記植物が、茶葉、果物、野菜、ハーブ、豆類、穀類、及び担子菌類からなる群から選択された少なくとも1種である、請求項3に記載のテアフラビン類の製造方法。
- 前記植物が、梨、洋梨、ブドウ、リンゴ、及びバナナからなる群から選択された少なくとも1種である、請求項3に記載のテアフラビン類の製造方法。
- 前記酸化工程において、前記カテキン類及び前記酸化酵素を含む水中1L当たりのマイクロバブル及び/又はナノバブルによる酸素の供給量が、常温常圧における単位時間当たりの酸素の体積に換算して、10ml/分以上となるようにして、前記マイクロバブル及び/又はナノバブルを供給する、請求項1〜5のいずれかに記載のテアフラビン類の製造方法。
- 前記酸化工程を15〜50℃下に5〜240分間行う、請求項1〜6のいずれかに記載のテアフラビン類の製造方法。
- カテキン類と、前記カテキン類を酸化してテアフラビン類を生成できる酸化酵素とを水中で共存させた状態で、酸素を含むマイクロバブル及び/又はナノバブルを供給し、テアフラビン類を含む溶液を得る工程と、
前記工程で得られた溶液を用いて、飲料を調製する調製工程と、
を備える、テアフラビン類を含む飲料の製造方法。
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