JP6397334B2 - 捕食性ダニと、真菌抑制剤に接触している不動化された餌とを含むダニ組成物並びに前記組成物の使用に関する方法及び使用 - Google Patents

捕食性ダニと、真菌抑制剤に接触している不動化された餌とを含むダニ組成物並びに前記組成物の使用に関する方法及び使用 Download PDF

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Description

本発明は、概して、捕食性ダニの使用による生物学的作物保護の分野に関する。本発明は、特に、捕食性ダニと餌とを含むダニ組成物に関する。このようなダニ組成物は、捕食性ダニの飼育及び/又は捕食性ダニを用いた作物保護に適している。
生物学的作物保護のための捕食性ダニの使用は、農業及び園芸においてますます一般的になりつつある。現在、Phytoseiidae、Laelapidae、Macrochelidae、Parasitidae、Tydeidae、Cheyletidae、Cunaxidae、Erythraeidae、Stigmaeidaeの科からの捕食性ダニが利用されており、又は植物食性ダニ、アザミウマ及びコナジラミ類等の有害生物と戦うことが示唆されてきた。生物学的有害生物防除剤としての、捕食性ダニの商業的利用の必要条件は、許容される価格に対するその利用可能性である。そのため、これを効率的に大量に産生する可能性が重要である。
ここ数年の間、捕食性ダニのための飼育用餌(或いは、飼育用宿主と称される)の利用可能性を考慮すると、大量飼育のための方法は相当に改善されてきた。これらの新たに利用できる飼育用餌の多くは、Astigmatidダニである。例えば、Koppert B.V.の国際出願であるWO2006/057552、WO2006/071107及びWO2007/075081を参照されたい。加えて、WO2008/015393、WO2008/104807及びEP2232986は、Phytoseiid捕食者及びAstigmatid餌ダニ種の追加的な組み合わせについて開示する。このようなAstigmatid餌ダニ種は、捕食性Mesostigmatidダニ種、捕食性Prostigmatidダニ種等の、他の分類群からの捕食性種の大量飼育にも適していることが判明した。
飼育用餌の利用可能性におけるこのような発展にもかかわらず、捕食性ダニの大量飼育には一定の限界が残されており、大量飼育は、このような限界の改善によって恩恵を受けるであろう。
例えば、生きている飼育用餌は、その運動活性、代謝ガス及び代謝熱を生じるその代謝活性のため、捕食性ダニのストレス源ともなり得る。これらの効果は、高い個体群密度において特に非常に大きくなり得る。加えて、生きた餌個体は、捕食性ダニを妨害し、更には襲撃してくる捕食者に対する防御として作用し得る警報フェロモン等、特定の化学物質を産生及び分泌し得る。このような密度依存性ストレス要因は、より低い産卵速度、未成熟期のより低い生存及び成虫の捕食性ダニのより短い長寿命により、捕食性ダニのより遅い個体群発達速度及びより低い最大個体群密度をもたらし得る。これらのストレス要因の排除又は軽減に適した発明の解決法は、より高い飼育個体群密度及び速い個体群発達速度を達成することができるであろう。
EP2380436は、捕食性Phytoseiid種の個体群及びAstigmatid種の個体群を含むダニ組成物並びに該組成物を用いて捕食性Phytoseiidダニを飼育するための方法を開示する。本組成物は、Astigmatid種の個体群が生きていないことを特徴とする。生きていないとは、生きたAstigmatid個体が全く存在しない(餌が完全に不活性である)ことを意味する。
EP2380436の組成物及びPhytoseiid捕食者の飼育におけるその使用は、生きた餌によって誘導される妨害的ストレス要因を抑制又は排除する可能性がある。しかし、この組成物は、おそらく特定の問題を解決するであろうが、依然として大きな不利益を有する。本発明の発明者らは、死んだAstigmatidダニが、優れた真菌の基質でもあり、真菌生育を促進することを見出した。この問題は、先行技術には記録されていない。大規模な真菌生育は、捕食性ダニの個体群発達速度及び最大個体群密度に悪い影響を及ぼす。
本発明は、相当数の死んだまたは不動化された餌個体を含む飼育用餌の個体群において捕食性ダニが飼育される場合、適切な真菌抑制が必要とされるとの知見に基づく。
従って、本発明は、第1の態様において、
捕食性ダニ種個体の個体群と、
少なくとも1種のAstigmatidダニ種個体を含む捕食性個体のための食物源であって、前記Astigmatid個体の少なくとも一部分が不動化された食物源と、
場合により、Astigmatid個体に適した食物源と、
場合により、前記ダニ種個体のための担体と
を含むダニ組成物であって、不動化されたAstigmatid個体、及び場合により、Astigmatid個体のための必要に応じた食物源が、真菌抑制剤に接触されているダニ組成物に関する。
組成物は、捕食性ダニの個体群の個体を含む。当業者に周知の通り、捕食性Phytoseiidダニは、植物上に天然の生息場所があり、そこで有害な生物(昆虫やダニ)を捕食する。捕食性Phytoseiidダニは、de Moraesらにより2004に記載されている通り、その天然の生息場所から単離することができる。本発明において特に有用な捕食性ダニは、捕食性Mesostigmatidダニ種、捕食性Prostigmatidダニ種、特に、
i)Phytoseiidae、例えば、
Amblyseiinaeの亜科、例えば、Amblyseius属、例えば、Amblyseius andersoni、Amblyseius aerialis、Amblyseius swirskii、Amblyseius herbicolus又はAmblyseius largoensis、Euseius属、例えば、Euseius finlandicus、Euseius hibisci、Euseius ovalis、Euseius victoriensis、Euseius stipulatus、Euseius scutalis、Euseius tularensis、Euseius addoensis、Euseius concordis、Euseius ho又はEuseius citri、Neoseiulus属、例えば、Neoseiulus barkeri、Neoseiulus californicus、Neoseiulus cucumeris、Neoseiulus longispinosus、Neoseiulus womersleyi、Neoseiulus idaeus、Neoseiulus anonymus、Neoseiulus paspalivorus、Neoseiulus reductus又はNeoseiulus fallacis、Amblydromalus属、例えば、Amblydromalus limonicus、Typhlodromalus属、例えば、Typhlodromalus aripo、Typhlodromalus laila又はTyphlodromalus peregrinus、Typhlodromips属、例えば、Typhlodromips montdorensis、Phytoseiulus属、例えば、Phytoseiulus persimilis、Phytoseiulus macropilis、Phytoseiulus longipes、Phytoseiulus fragariaeからのもの、
Typhlodrominaeの亜科、Galendromus属、例えば、Galendromus occidentalis、Typhlodromus属、例えば、Typhlodromus pyri、Typhlodromus doreenae又はTyphlodromus athiasaeからのもの、
ii)Ascidae、例えば、Proctolaelaps pygmaeus(Muller)等のProctolaelaps属;Blattisocius属、例えば、Blattisocius tarsalis(Berlese)、Blattisocius keegani(Fox);Lasioseius属、例えば、Lasioseius fimetorum Karg、Lasioseius floridensis Berlese、Lasioseius bispinosus Evans、Lasioseius dentatus Fox、Lasioseius scapulatus(Kenett)、Lasioseius athiasae Nawar&Nasr;Arctoseius属、例えば、Arctoseius semiscissus(Berlese);Protogamasellus属、例えば、Protogamasellus dioscorus Mansonからのもの、
iii)Laelapidae、例えば、Stratiolaelaps属、例えば、Stratiolaelaps scimitus(Womersley)(Hypoaspis属にも置かれる);Geolaelaps、例えば、Geolaelaps aculeifer(Canestrini)(Hypoaspis属にも置かれる);Androlaelaps、例えば、Androlaelaps casalis casalis(Berlese)からのもの、
iv)Macrochelidae、例えば、Macrocheles属、例えば、Macrocheles robustulus(Berlese)、Macrocheles muscaedomesticae(Scopoli)、Macrocheles matrius(Hull)からのもの、
v)Parasitidae、例えば、Pergamasus属、例えば、Pergamasusquisquiliarum Canestrini;Parasitus、例えば、Parasitusfimetorum(Berlese)、Parasitus bituberosus Kargからのもの
から選択されるMesostigmatidダニ種、
vi)Tydeidae、例えば、Homeopronematus属、例えば、Homeopronematus anconai(Baker);Tydeus属、例えば、Tydeus lambi(Baker)、Tydeus caudatus(Duges)、Tydeus lambi(Baker);Pronematus属、例えば、Pronematus ubiquitous(McGregor)からのもの、
vii)Cheyletidae、例えば、Cheyletus属、例えば、Cheyletus eruditus(Schrank)、Cheyletus malaccensis Oudemansからのもの、
viii)Cunaxidae、例えば、Coleoscirus属、例えば、Coleoscirus simplex(Ewing)、Cunaxa属、例えば、Cunaxa setirostris(Hermann)からのもの、
ix)Erythraeidae、例えば、Balaustium属、例えば、Balaustium putmani Smiley、Balaustium medicagoense Meyer&Ryke、Balaustium murorum(Hermann)からのもの、
x)Stigmaeidae、例えば、Agistemus属、例えば、Agistemus exsertus Gonzalez;Zetzellia属、例えば、Zetzelliamali(Ewing)からのもの、
からのものなどの、Prostigmatidダニ種
から選択することができる。
Phytoseiid種として選択される場合、ダニ種は、好ましくは、Amblyseius swirskii、Amblysieus aerialis、Amblyseius andersoni、Neoseiulus barkeri、Neoseiulus californicus、Neoseiulus cucumeris、Neoseiulus fallacis、Typhlodromips montdorensis又はAmblydromalus limonicusから選択されるPhytoseiid種である。
本発明に関して用いられるPhytoseiidダニ亜科、属及び種の名称は、他に断りのない限り、de Moraes、G.J.ら、2004に記されている通りである。他の科からの種に関しては、Gerson U.、Smiley R.L. and Ochoa R.、2003、Mites (Acari) for pest control(Blackwell Publishing)を参照されたい。代替的及び同等な名称を特定のダニ種に用いてよいことが留意されたい。例えば、Amblydromalus limonicusが、代替的及び同等な名称Amblyseius limonicus及びTyphlodromalus limonicusとしても公知であることが当業者に知られている。
捕食者の個体群は、好ましくは、飼育用個体群である。本明細書において、飼育という用語は、有性生殖による個体群の繁殖及び増加を包含すると理解されるべきである。飼育用個体群は、両方の性の性的に成熟した成虫、及び/又は性的に成熟した成虫へと成熟することができる他の生活段階、例えば、両方の性の卵、幼虫及び/又は若虫の個体を含むことができる。或いは、飼育用個体群は、1匹又は複数の受精した雌を含むことができる。基本的に、飼育用個体群は、有性生殖によって個体数を増加させることができる。
ダニ組成物は、少なくとも1種のAstigmatidダニ種の個体を含む、捕食性個体のための食物源を更に含む。選択されたAstigmatidダニ種の1つ以上の生活段階に由来する個体は、選択された捕食者の個体に適した餌(食物源)である必要がある。選択された捕食者のための餌として適したAstigmatidダニの選択は、当業者の知識の範囲内である。Astigmatidダニは、Hughes A.M.、1977に記載されている通りにその天然の生息場所から単離することができ、Parkinson、C.L.(1992)及びSolomon、M.E.&Cunnington、A.M.(1963)に記載されている通りに維持及び培養することができる。
Astigmatidダニ種は、
i)Carpoglyphus属、例えば、Carpoglyphus lactisからなどの、Carpoglyphidae、
ii)Dermatophagoides属、例えば、Dermatophagoides pteronysinus、Dermatophagoides farinae;Euroglyphus属、例えば、Euroglyphus longior、Euroglyphus maynei;Pyroglyphus属、例えば、Pyroglyphus africanusからなどのPyroglyphidae、
iii)Diamesoglyphus属、例えば、Diamesoglyphus intermediusor、Ctenoglyphus属、例えば、Ctenoglyphus plumiger、Ctenoglyphus canestrinii、Ctenoglyphus palmiferからなどのCtenoglyphinae亜科;Blomia属、例えば、Blomia freemani又はGlycyphagus属、例えば、Glycyphagus ornatus、Glycyphagus bicaudatus、Glycyphagus privatus、Glycyphagus domesticus又はLepidoglyphus属、例えば、Lepidoglyphus michaeli、Lepidoglyphus fustifer、Lepidoglyphus destructor又はAustroglycyphagus属、例えば、Austroglycyphagus geniculatusからなどのGlycyphaginae亜科;Aeroglyphus属、例えば、Aeroglyphus robustusからなどのAeroglyphinae亜科;Gohieria属、例えば、Gohieria. fuscaからなどのLabidophorinae亜科;Coproglyphus属、例えば、Coproglyphus stammeriorからなどのNycteriglyphinae亜科;Chortoglyphus属、例えば、Chortoglyphus arcuatus等のChortoglyphidae亜科からなどの、より好ましくは、Glycyphaginae亜科から選択され、より好ましくは、Glycyphagus属又はLepidoglyphus属から選択され、最も好ましくは、Glycyphagus domesticus又はLepidoglyphus destructorから選択されるGlycyphagidae
iv)Tyrophagus属、例えば、Tyrophagus putrescentiae、Tyrophagus tropicus;Acarus属、例えば、Acarus siro、Acarus farris、Acarus gracilis;Lardoglyphus属、例えば、Lardoglyphus konoi;Thyreophagus entomophagus等のThyreophagus属;Aleuroglyphus属、例えば、Aleuroglyphus ovatusからなどの、Acaridae、
v)Suidasia nesbiti、Suidasia pontifica又はSuidasia medanensis等のSuidasia属からなどの、Suidasiidae
から選択することができる。
Astigmataに関する記述は、Hughes(1977)に提示されている。好ましいAstigmatidダニは、Lepidoglyphus destructor、Carpoglyphidae、例えば、Carpoglyphus属、例えば、Carpoglyphus lactis、Thyreophagus属、例えば、Thyreophagus entomophagus、Acaridae、Suidasia pontifica又はSuidasia medanensisから選択することができる。又は、Blomia spp.から選択することができる。
本発明において、Astigmatid個体の少なくとも一部分が不動化されている。本発明の文脈内において、不動化という用語は、Astigmatid個体が、不動化処理に付されたことを意味するものと解釈されるべきである。不動化処理は、Astigmatid個体がその生活段階のいずれかにおいて有する運動性を損なう処理を意味するものと解釈されるべきである。運動性とは、自発的及び独立的に動く能力である。
当業者であれば認識できる通り、運動性があるAstigmatidダニの生活段階は、幼虫、若虫及び成虫である。よって、これらの段階のいずれかの運動性を損なう処理は、不動化処理であると考慮されるべきである。加えて、個体が卵段階等の運動性でない生活段階から運動性である生活段階へと発育するのを防止する処理も、不動化処理として考慮されるべきである。好ましい一実施形態において、不動化されたAstigmatidダニ個体の個体群は、卵、幼虫、若虫又は成虫、好ましくはこれらの生活段階の全てを含む。更に好ましい一実施形態において、Astigmatid個体は、永続的に不動化されている。死をもたらす処理は、永続的な不動化処理として考慮することができる。
本発明において、Astigmatid個体は、凍結、加熱、低温ショック又は熱ショック処理等の熱処理;ガス処理又は燻蒸処理、例えば、ガス窒息又はアルコール若しくはエーテル燻蒸処理、好ましくはエタノール燻蒸処理等の化学処理;UV、マイクロ波又はX線処理等の放射線照射処理;激しい振盪又は撹拌、ずり応力の印加、衝突等の機械的処理;超音波処理、圧力変化、好ましくは圧力降下等のガス圧処理;感電死等の電気的処理;接着剤による不動化;又は水若しくは食物欠乏による誘導等の飢餓による不動化;空気からの一時的な酸素の排除又は別のガスによる酸素の置換等、窒息による不動化から選択される不動化処理により不動化することができる。当業者であれば、これらの処理が、どのようにしてAstigmatid個体の不動化をもたらすか、また、不動化処理が、Astigmatid個体が依然として捕食性ダニ個体に適した餌(食物源)のままであるようなものであるべきことを理解するだろう。
熱処理は、Astigmatid個体を十分に長い時間、不動化が誘導されるように環境範囲外の温度に付すことにより行うことができる。環境範囲外の温度は、例えば、3℃以下、2℃以下、1℃以下、0℃以下、−1℃以下、−2℃以下、−3℃以下、−4℃以下、−5℃以下、−6℃以下、−7℃以下、−8℃以下、−9℃以下、−10℃以下、−18℃以下、−20℃以下から選択することができる。実用限界以外に環境範囲外の温度の下限はなく、環境範囲外の温度は、−78℃、−79℃、−80℃、−194℃、−195℃、−196℃、−197℃もの低さとなり得る。或いは、環境範囲外の温度は、40℃以上、41℃以上、42℃以上、43℃以上、44℃以上、45℃以上、46℃以上、47℃以上、48℃以上、49℃以上、50℃以上から選択することができる。環境範囲外の温度は、55℃、60℃又は65℃、70℃、75℃、80℃もの高さとなり得る。
化学処理は、Astigmatid個体を十分に長い時間、不動化が誘導されるように不動化用化学物質に付すことにより行うことができる。不動化用化学物質は、ガス又は燻蒸、例えば、CO、N、CO、NO、NO等の、酸素を排出することにより及び/又は毒性であるために窒息をもたらすガスの形態となり得る。或いは、不動化用化学物質は、動物生理を妨げる可能性があることが知られた異なる化学物質、例えば、エタノール若しくはメタノール又はその組み合わせ等のアルコール、又はジエチルエーテル等のエーテルとなり得る。不動化されたAstigmatid個体は、捕食性ダニのための食物源として供されるため、好ましくは、不動化用化学物質は、毒性痕跡を残さない。
放射線照射処理は、Astigmatid個体を十分に長い時間、不動化が誘導されるように不動化放射線照射に付すことにより行うことができる。不動化放射線照射は、UV、X線又はマイクロ波照射から選択することができる。
機械的手段による不動化は、十分なエネルギーを散逸させて不動化効果を生じるいずれかの機械的手段により行うことができる。これは、特に、不動化対象のダニと衝突することができる粒子の存在下における、激しい振盪又は撹拌により達成することができる。衝突は、ガス流によるダニの加速及びガスフローを少なくとも部分的に遮断する多数の対象物に対する衝突によって、又はダニを、好ましくは乱流ガスフロー(乱気流等)に運ばれる追加的な粒子と共に乱流ガスフローに置き、ダニをこれらの粒子と衝突させることによって引き起こすこともできる。或いは、超音波処理を用いてもよい。
異なる実施形態において、Astigmatidダニは、接着剤により不動化することができる。例えば、Astigmatidダニを表面に固着させることにより、或いはその肢を固着させることにより、その運動性を弱めることができる。
飢餓は、不動化を達成するための更に別の手段となり得る。飢餓は、水又は食物欠乏により引き起こすことができる。水及び食物の欠乏は、入手できる水又は食物の量が、ダニの環境における既存の条件下での正常な代謝に必要とされる量に満たない状況を考慮されるべきである。
不動化処理は、Astigmatidダニの個体の少なくとも一部分の不動化に十分に有効となる必要がある。少なくとも一部分とは、一部分又は実質的に全体を意味するものと理解されるべきである。不動化されたAstigmatid個体の一部分は、10%以上、20%以上、30%以上、40%以上、50%以上、60%以上、70%以上、80%以上、90%以上、95%以上又は97%以上であり得る。好ましくは、不動化されたAstigmatid個体の一部分は、50〜90%、より好ましくは、70〜90%である。不動化されたAstigmatid個体の一部分は、卵、幼虫、若虫又は成虫から選択されるAstigmatidダニの1つ以上の生活段階を含む。
よって、本発明において、Astigmatid個体によって捕食者に提示されるストレスの抑制の点においてプラスの効果を得るために、Astigmatid個体の個体群が、完全に死んでいる又は不活性(不動化されていない運動性部分が存在し得るため)である必要はない。加えて、運動性Astigmatid個体の小個体群の存在は、後述するその食菌性挙動、抗真菌性滲出液の産生及び/又は新鮮な(生きた)食物源の提供により、更なる利益を提示し得る。また、不動化されたAstigmatid個体は、代謝的に不活性である必要はない。特定の不動化処理は、運動性を弱めつつ、代謝活性を維持することができる。代謝的に活性な不動化されたAstigmatid個体は、捕食者のための新鮮な食物源と考慮することもできる。
本発明において、不動化されたAstigmatid個体、及び、存在する場合には任意の非不動化個体は、同一種からのものであり得る。しかし、特定の実施形態において、不動化されたAstigmatid個体、及び、存在する場合には任意の非不動化個体は、代わりに、異なる種からのものであり得る。これにより、組成物に存在するAstigmatid種の選択に可変性が生じる。特定の種からの個体は、不動化された食物源としての使用に好ましくなり得る一方、他の種からの個体は、真菌抑制等の、生きた個体により為される機能のために好ましくなり得る。
本発明による組成物において、Astigmatid個体に対する捕食性個体の比率は、約100:1〜1:100、例えば、約1:1〜1:50、例えば、約1:4、1:10、1:20又は1:30等となり得る。よって、本発明による組成物は、より低い比率の、Astigmatid個体に対する捕食性個体を含有し得る。よって、より多くの餌が捕食者に利用できる。このことは捕食性ダニを飼育する場合に有益である。
本発明の組成物について上に記載の通り、担体を含む培地において、より高い捕食者密度を維持することができる。よって、好ましい一実施形態において、組成物は、担体及び、担体1ml当たり10以上、50以上、100以上、150以上、200以上、250、300以上、350以上、400以上、最大450匹の捕食性個体、好ましくはPhytoseiid個体を含有する。
真菌抑制のため、不動化されたAstigmatid個体は、真菌抑制剤に接触させられる。不動化されたAstigmatid個体と真菌抑制剤との接触において、真菌抑制剤は、その抗真菌性作用を発揮することができるように、不動化されたAstigmatid個体、好ましくは、実質的に全体的に不動化されたAstigmatid個体に接近することができる。従って、真菌抑制剤との接触は、真菌抑制効果が得られるようなものである。当業者であれば理解できようが、この真菌抑制効果は、組成物における捕食者の飼育に十分なものとなる必要がある。真菌抑制剤と不動化されたAstigmatid個体との接触のため、Astigmatid個体のための食物源等の、不動化されたAstigmatid個体に関連するいかなる材料を真菌抑制剤と接触させてもよく、従って、真菌抑制処理に有効に付してもよい。
真菌抑制剤は、例えば、真菌生育を遅らせる又は防止することにより、例えば真菌代謝を妨げることにより、又は真菌バイオマスの破壊により真菌生育を抑制させることにより、真菌生育を抑制するいずれかの薬剤である。真菌抑制剤は、天然又は合成の殺真菌薬等、例えば、シトラール、ネラール、2,3−エポキシネラール、ゲラニアール、ファルネサール(farnesal)、α−アカラディアール(acaradial)、β−アカラディアール又はナタマイシン(ピマリシン)から選択される天然殺真菌薬等の、化学的真菌抑制剤を含み得る。
或いは、真菌抑制剤は、食真菌性(fungivorous)ダニ個体の個体群等の、生物学的真菌抑制剤を含み得る。食真菌性(又は食菌性)ダニは、真菌バイオマスを常食とするダニであり、よって、真菌生育を抑制及び制御することができる。好ましくは、食真菌性ダニ個体は、Tyrophagus putrescentiae、Thyreophagus entomophagus、Acarus farris、Acarus siro、Aleuroglyphus ovatus等の、Acaridae;Lepidoglyphus destructor、Glycyphagus domesticus等の、Glycyphagidae;Carpoglyphus lactis等の、Carpoglyphidae;Suiidasia pontifica、Suidasia medanensis、Suiidasia nesbiti等の、Suiidasidae;Dermatophagoides farinae、Dermatophagoides pteronyssinus等の、Pyroglyphidaeから選択される種等の、Astigmatid種からのものである。当業者であれば、その食菌性機能を果たすために、食真菌性ダニ個体は、生きている必要があり、好ましくは、運動性がある必要があることを理解されよう。運動性のある食真菌性個体は、Astigmatid個体の非不動化部分の少なくとも一部を形成し得る。
生物学的真菌抑制剤は、シトラール、ネラール、ゲラニアール、ファルネサール、α−アカラディアール又はβ−アカラディアール等の、抗真菌性滲出液を産生するダニ種の個体群として選択することもできる。このような抗真菌性滲出液を産生するダニ種は、Astigmata目、好ましくは、Lepidoglyphus destructor、Acarus siro、Lardoglyphus konoi、Caloglyphus polyphyllae;Tyrophagus putresecntiae、Tyrophagus neiswanderi、Tyrophagus pernisciosus;Rhizoglyphus robini;Carpoglyphus lactis等の、Carpoglyphidae属;Suiidasia Pontifica、Suidasia medanensis、Suiidasia nesbiti等の、Suiidasidaeから選択することができる。抗真菌性滲出液を産生するダニ個体に運動性がある必要はない。接着剤を使用することによる不動化又は特定の機械的不動化技法等、特定の不動化処理は、抗真菌性滲出液を産生するダニ個体の代謝活性を維持することができ、これによって、抗真菌性滲出液の産生も可能にする。しかし、これを用いる場合、抗真菌性滲出液を産生するダニ個体は、運動性があることが好ましい。このようにして、抗真菌性滲出液は、組成物中により有効に分布させることができる。運動性のある抗真菌性滲出液を産生するダニ個体は、Astigmatid個体の非不動化部分の少なくとも一部を形成し得る。
Astigmataが、所望の食菌性挙動又は抗真菌性滲出液産生活性を有する多くの種を保持するという事実を考慮すると、この目から食真菌性ダニ種及び抗真菌性滲出液を産生するダニ種を選択することが好ましい。加えて、この目からの種は、捕食性ダニ個体のための餌として機能することもできる。運動性(非不動化)Astigmatid個体は、捕食性個体のための追加的な食物源を提供し得る。これは、捕食者に新鮮な食物源を提示するであろう。これは、不動化された餌ダニにおいて十分に保存され得ないビタミン等、不安定な栄養素を捕食者に提供するために重要となり得る。これは、捕食性ダニの健康状態を高め得る。この健康状態は、捕食行動の点における捕食者の多用途性及び/又は敏捷性に寄与する要因となり得る。
本発明の一実施形態において、組成物は、Astigmatid個体に適した食物物質を含む。適した食物物質の選択は、当業者の知識の範囲内であり、例えば、WO2006/057552、WO2006/071107、WO2007/075081、WO2008/015393、WO2008/104807及びEP2232986に開示されている。適した食物物質の存在は、組成物が生きたAstigmatid個体を含む場合に有益である。しかし、組成物が、死んだAstigmatid個体のみを含む場合においても、Astigmatidダニの飼育培地からの食物源の移動のため、食物物質が組成物中に存在していてもよい。
この構成は、上述のEP2380436の組成物との主要な違いである。Astigmatidダニの食物源の残部はいずれも、真菌にとっての潜在的な基質であり、真菌生育を促進するであろう。従って、EP2380436は、食物源の除去を必要とする。EP2380436は、枯渇による食物源の除去を示唆する。しかし、これは非実際的であり、Astigmatidダニの飼育が、Astigmatidダニの個体群発達ではなく、食物源の状態に基づいて制御されなければならないことを意味するであろう。飼育の実施において、これは望ましくない。加えて、連続的なプロセスが不可能になり、飼育は、不連続的に行う必要がある。その他の手段による食物源の除去は、骨の折れる作業であり、Astigmatidバイオマスを失う傾向があり、非効率性の原因を導入する。真菌抑制のための特定の実施形態において、食物源を真菌抑制剤と接触させてよいという事実を考慮すると、本発明による組成物において、食物源の除去は必要ない。真菌抑制剤との接触は、真菌抑制効果が得られるようなものである。当業者であれば理解できようが、この真菌抑制効果は、組成物において捕食者を飼育するのに十分なものとなるべきである。
好ましい一実施形態において、組成物は、ダニ種の個体のための担体を含む。担体は、個体への担体表面の提供に適したいかなる固体材料であってもよい。好ましくは、担体は、ダニ個体群によって、並びに担体、Astigmatid餌ダニのための食物源の代謝活動によって、並びに培地上で生育する微生物によって、産生された代謝ガス及び代謝熱の交換を可能にする多孔性培地を提供する。適した担体の例として、(コムギ)ふすま、おがくず、トウモロコシ穂軸の粗挽き(corn cob grit)、バーミキュライト等々、植物材料が挙げられる。Astigmatid個体に適した食物物質が組成物中に包含される場合、担体それ自体が、適した食物物質を含むことができる。三次元培養物としてダニ培養物を維持する可能性を考慮すると、細かく分割された担体要素を含む担体の使用が一般的である。
好ましい一実施形態において、ダニ種の個体のための担体は、担体要素、好ましくは、約1.0〜15.0mm、例えば3.0〜9.0mmの最長軸を有する担体要素を含み、担体要素の積み重なりは、捕食性ダニ個体に適したシェルターを含む。一般用語において、シェルターは、外部影響からの避難所を提供する居所として定義することができる。本発明による担体のシェルターは、これをダニ個体に提供する。本発明の開示に基づき、当業者に共通の一般知識と組み合わせると、当業者であれば、ダニシェルターの構造的要件を理解することができよう。よって、当業者であれば、ダニシェルター、特に、捕食性ダニ又は飼育用餌から選択される商業的に関連するダニに適したシェルターを含む適切な担体を設計及び/又は選択することができよう。
本発明の一実施形態において、シェルターは、担体要素の材料がダニ個体を遮蔽する区域において提供され得、この区域に位置する場合、直交性又は逆向きの関係を有する少なくとも3方向において、その周囲から遮蔽する。周囲からの遮蔽とは、妨害性の外部相互作用を少なくとも抑制する、好ましくは制限する、最も好ましくは実質的に排除することとして理解されるべきである。このような妨害性の外部相互作用は、特に、例えば、運動及び関連する他のダニとの身体接触などの、組成物中の他のダニによって産生又はもたらされる。しかし、例えば、ダニが捕食性ダニである場合、同じ種の個体による共食い性の捕食の可能性もある。あらゆる捕食性ダニは、ある程度まで、共食い行動を示すことを理解されるべきである。このような妨害性相互作用は、ダニ個体の産卵速度、生存及び長寿命のうち1つ以上に悪影響を及ぼすため、個体群発達速度に悪影響を及ぼす。同種の捕食性ダニ個体間のこのような妨害性相互作用の強度は、通常、より高い個体群密度において増加するであろう。しかし、ダニの商業的生産者は、可能な限り生産コストを抑制するために、高い個体群密度と、可能な限り高い個体群発達速度の達成を目標とする。本発明の一実施形態において、シェルター化は、妨害性相互作用からダニ個体を遮蔽することにより達成することができる。この遮蔽は、ダニ個体への接近を抑制させることにより達成することができる。
理解されるように、直交性又は逆向きの関係を有する方向は、ダニ個体が原点に存在する場合、原点(0,0,0)からの方向における仮想の直交性(又はデカルト(Cartesian))三次元座標系の6軸(正のX、負のX、正のY、負のY、正のZ、負のZ)に沿った方向に相当する。これらの方向は、垂直(直交性)又は逆向きいずれかの方向である。図1に描写されている通り、三次元空間において、これらの方向の最大数は6である。
本発明の一実施形態において、ダニ個体は、シェルター区域に位置する場合、このような方向の少なくとも3方向、好ましくは、このような方向の少なくとも4方向、最も好ましくは、このような方向の少なくとも5方向、例えばこのような方向の5方向において、その周囲から遮蔽される。このような方向の3方向における遮蔽は、図2に提示又は図3に提示されている構造等、3平面間に形成される角と同様の構造によって提供することができる。このような方向の少なくとも4方向における遮蔽は、図4に提示されている2側面が開口した「箱」等の構造によって提供することができる。5方向における遮蔽は、開口した立方体が得られるように、4平面の「箱」の側壁に5番目の水平平面が配置された図3の状況において提供できよう。
組成物における他のダニによってもたらされる外部影響からダニ個体を遮蔽するために、シェルターは、シェルターの体積が1〜140mm、例えば、2〜120mm、2〜100mm、2〜80mm、2〜70mm、2〜60mm、2〜50mm、2〜40mm、2〜30mm、2〜25mm、2〜20mm、2〜18mm、2〜16mm、2〜14mm、2〜12mm、2〜10mm、2〜8mm、2〜6mm又は2〜4mmとなるような寸法を有することが好ましい。これにより、シェルター中に、妨害効果を生じ得る過剰に多いダニ個体が存在する可能性を抑制する。
シェルターにダニ個体が接近可能である必要があることが明らかである。この点において、ダニにとって接近可能でない区域は、シェルターとして認めることができないことが留意されるべきである。本発明の特定の実施形態において、ダニ個体にとって良好な接近可能性を有するために、区域は、少なくとも0.3〜1.2mm、例えば、0.5〜1.0mm又は0.5〜0.8mm接近直径と、少なくとも0.25〜1.44mm、0.30〜1.20mm、0.30〜1.00mm、0.30〜0.80mm、0.30〜0.90mmの接近区域で接近することができる。
ダニシェルターは、窪み、凹部、孔、チャンバ、空洞、隙間、凹み、ポケット、チューブ、ドーム、タブ及び同様の構造により形成された空隙等の空隙により提供することができる。好ましくは、上に記載の体積及び/又は接近の寸法と一致するこのような空隙は、ダニシェルターとして適している。
ダニ個体のためのシェルターは、積み重なって存在する個々の担体要素の上又はその中に存在することができる。即ち、積み重ねた個々の担体要素は、ダニシェルターとして適した構造を含む。或いは、ダニシェルターは、積み重ねた担体要素間に形成することができる。即ち、担体要素の積み重なりにおいて、複数の担体要素が一体に、ダニシェルターとして適した構造を形成する。「担体要素の積み重なり」は、多数の担体要素の三次元的な順序付けを意味するものと理解されるべきである。用語「順序付け」は、ランダムな順序付けを包含する。
本発明の範囲内において、もみ殻に由来する担体要素を用いることができる。当業者であれば、もみ殻という用語の意味を知り、もみ殻が、草種(特に穀物)の種子の乾燥した鱗片状の保護的な外皮(殻)である、又は花の鱗片状部分若しくは細かく刻んだわら等の、類似の細かい乾燥した鱗片状の植物材料であることを理解できよう。好ましい一実施形態において、もみ殻は、草(イネ科植物(Poaceae)又はイネ科植物(Gramineae))種に由来し、最も好ましくは、コムギ、オリザ(oryza)種、ライムギ、カラスムギ又はアワからのもみ殻等の穀類種からのもみ殻である。殻が特に好ましい。特に、アワ由来の殻は、優れた外部寸法及び内部寸法を有し、これにより、適したシェルターを提供するダニ飼育用基質として非常に適したものとなる。
本発明の用語「アワ」に含まれる種は、トウジンビエ又はBajra(Pennisetum glaucum);フォックステイルミレット(Setaria italica);キビ、コモンミレット、ブルームコーンミレット、ホッグミレット又はホワイトミレット(Panicum miliaceum);シコクビエ(Eleusine coracana)(インドではRagi、Nachani又はMandwaとしても公知)、インドビエ又はサワミレット(Echinochloa frumentacea);日本アワ(Echinochloa esculenta);コドミレット(Paspalum scrobiculatum);リトルミレット(Panicum sumatrense);ギニアミレット(Brachiaria deflexa=Urochloa deflexa);ブラウントップミレット(Urochloa ramosa=Brachiaria ramosa=Panicum ramosum)を包含する。テフ(Eragrostis tef)及びフォニオ(Digitaria exilis)もまた、アワと呼ばれることが多く、より稀ではあるが、ソルガム(Sorghum spp.)及びハトムギ(Coix lacrima−jobi)も同様である。本発明のため、これらの種もまた、用語「アワ」に含まれる。
ダニシェルターの提供に適した担体要素の寸法及びその構造配置とは別に、生分解の観点から担体要素が不活性であることが好ましい。これは、担体材料が、真菌及び/又は細菌等の、微生物にとって不毛な生育的基質であることを意味する。これは、ダニ飼育条件下における潜在的な問題である真菌生育等の、微生物生育の制御に役立つ。上述のもみ殻及び特に好ましいもみ殻種類は、微生物、特に、真菌にとって不毛な生育的基質である。
更に別の態様において、本発明は、捕食性ダニを飼育するための方法であって、
(i)本発明による組成物を用意するステップと、
(ii)捕食性個体に、Astigmatid個体群の個体を捕食させるステップと
を含む方法に関する。
捕食性ダニを飼育するための方法であって、捕食者の個体群を、Astigmatidダニの個体群と関連させ、捕食者の個体に、Astigmatid個体群の個体を捕食させる方法は、本技術分野において公知のものである。本発明による方法は、本発明による組成物において、Astigmatid個体の少なくとも一部分が不動化され、不動化されたAstigmatid個体が真菌抑制剤に接触されるという点において、先行技術の方法と区別される。
本発明による組成物の技術的側面は、既に上に記述されている。
本発明の更に別の一態様は、捕食性ダニを飼育するための、少なくとも1種のAstigmatidダニ種からの個体の個体群を含む組成物であって、Astigmatid個体の少なくとも一部分が不動化され、不動化されたAstigmatid個体が真菌抑制剤に接触される組成物の使用に関する。前述及び後述する実験から明らかであろうが、Astigmatid個体の部分が不動化されたAstigmatidダニ種の個体群の使用は、捕食性ダニを飼育するために特定の利益を有する。
本発明の更にまた別の一態様は、捕食性ダニを飼育するための飼育システムであって、本発明による組成物を収容する容器を含むシステムに関する。好ましい一実施形態において、容器は、好ましくは、捕食性ダニの少なくとも1つの運動性である生活段階のための出口、より好ましくは、前記少なくとも1つの運動性である生活段階の持続的な放出をもたらすのに適した出口を含む。
別の一態様において、本発明は、作物の有害生物を防除するための、本発明の組成物又は本発明による飼育システムの使用に関する。
有害生物は、Trialeurodes vaporariorum若しくはBemisia tabaci等のコナジラミ類;Thrips tabaci等のアザミウマ又はFrankliniella occidentalis等のFrankliniella spp.、Tetranychus urticae等のハダニ又はPolyphagotarsonemus等の他の植物食性ダニから選択することができる。
作物は、トマト(Lycopersicon esculentum)、トウガラシ(pepper)(Capsicum annuum)、ナス(Solanum melogena)、キュウリ(cucumis sativa)、メロン(cucumis melo)、スイカ(Citrullus lanatus)等のウリ科植物(Curcubits)(Cucurbitaceae)等の(温室)野菜作物;マメ(Phaseolus vulgaris);ソフトフルーツ(イチゴ(Fragaria×annanassa)、ラズベリー(Rubus ideaus)等);(温室)観賞用作物(バラ、ガーベラ、キク等)又はCitrus spp.等の樹木作物から選択することができるが、これらに制限されない。
本発明の更に別の一態様は、作物における生物学的有害生物防除のための方法に関する。本方法は、本発明の組成物を前記作物に与えるステップを含む。有害生物及び作物は、上述通りに選択することができる。
本発明による方法において、組成物は、近傍において、例えば、多数の作物植物の上に又はその基礎に、前記組成物の量を適用することにより与えることができる。組成物は、増強的生物学的有害生物防除のための捕食性ダニ組成物利用の慣例通りに、作物植物上に又は作物植物の基礎に拡散させることにより、単純に作物植物に与えることができる。拡散によって個々の作物植物それぞれに与えることのできる組成物の量は、1〜20mlから20ml、例えば、1〜10ml、好ましくは、2〜5mlに及び得る。或いは、組成物は、作物における捕食性ダニの放出に適した本発明による飼育システムにおいて、多数の作物植物に与えることができる。飼育システムは、多数の作物の間又はその基礎等の、近傍に配置することができる。本発明による生物学的有害生物防除のための方法において、全作物植物に組成物を与える必要はない。商品作物は、通常、密集して栽培されるためである。捕食性ダニは、作物植物から作物植物へと拡散することができる。十分な作物保護を達成するために本発明による組成物を与えなければならない作物植物の数は、具体的な状況に依存し得、当業者が、この分野における自身の経験に基づき容易に決定することができる。通常、1ヘクタール当たりの放出される捕食性ダニの数を決定することが多い。この数は、1ヘクタール当たり1000〜3百万、典型的には250.000〜1百万又は250.000〜500.000に及び得る。
次に、添付の図面及び実施例を参照しつつ、本発明をより詳細に説明する。これらの図面及び実施例は、単なる説明目的のものであり、特許請求の範囲に定義されている本発明の範囲を制限するものでは決してないことを強調したい。
図1は、三次元直交性(デカルト)座標系を提示する。軸X、Y、Zに沿って、原点(0,0,0)からの6方向を定義することができる(正のXに沿う、負のXに沿う、正のYに沿う、負のYに沿う、正のZに沿う、負のZに沿う)。これらの方向は、垂直(直交性)又は逆向きのいずれかの方向である。 図2は、シェルターの図式的概観を提示し、図中、ダニ個体(1)は、矢印(2)、(3)、(4)で示される3方向において、その周囲との相互作用から遮蔽されている。シェルターは、床部平面(5)、第1の側方平面(6)及び第2の側方平面(7)によって提供される。相互作用による影響は、依然として、矢印(8)、(9)、(10)で示される方向の周囲から来る可能性がある。 図3は、代替的なシェルターの図式的概観を提示し、図中、ダニ個体(1)は、矢印(2)、(3)、(4)で示される3方向において、その周囲との相互作用から遮蔽されている。シェルターは、床部平面(5)、第1の側方平面(6)及び第2の側方平面(7)によって提供される。相互作用による影響は、依然として、矢印(8)、(9)、(10)で示される方向の周囲から来る可能性がある。 図4は、シェルターの図式的概観を提示し、図中、ダニ個体(1)は、矢印(2)、(3)、(4)、(8)で示される4方向において、その周囲との相互作用から遮蔽されている。シェルターは、床部平面(5)、第1の側方平面(6)、第2の側方平面(7)及び第3の側方平面(11)によって提供される。相互作用による影響は、依然として、矢印(9)、(10)で示される方向の周囲から来る可能性がある。側方平面(6)、(7)、(11)に被覆平面を配置すれば、周囲の相互作用からダニ個体を更に遮蔽することができることは明らかであろう。加えて、更に別の側方平面を側方平面(7)と垂直に配置すれば、周囲からの遮蔽を更に増強することができる。このようにして、ダニ個体(1)は、矢印(10)で示す方向において、周囲から遮蔽することもできよう。
図1〜4の略図は、長方形形状で提示されているが、窪み、凹部、孔、チャンバ、空洞、隙間、凹み、ポケット、チューブ、ドーム、タブ及び同様の構造等の、非長方形構造によって同様の遮蔽効果をもたらすことができることが理解されるべきである。
[実施例1]
<セットアップ>
6種の被験試料(A)、(B)、(C)、(A+)、(B+)、(C+)において、カビ発生(moulding)試験を行った。これらの混合物は、次の成分から調製した。(1)あらゆる運動性である生活段階からなる純粋Carpoglyphus lactisの個体群。この試料は、食物粒子と関連せず、70%(±1%)の含水量を有した。(2)閉鎖した容器内で24時間−20℃にて凍結し、使用前に解凍した(1)からのダニ。(3)は、閉鎖した容器内で4日間−20℃にて凍結した、その飼育培地(ふすま及び食物粒子を含有)におけるCarpoglyphus lactisからなる。(4)湿ったバーミキュライト(粒子径<2mm、含水量15.8%)。これらの成分を用いて、数種類の混合物を、小型のカップ内に2回複製(in duplo)して調製した。同一セットのカップにおいて、0.1g(±0,01g)の生きたCarpoglyphus lactis(純粋)ダニを、全混合物に加えた。2種の湿度(93%及び85%)及び25℃で、2、4及び6日目にカビ発生(菌糸体成長及び胞子形成)の重大度を観察した。
<結果>
結果を下表1.1に提示する。
結果は、4日目以降、生きたC.lactisダニを含有しない全カップにおいて、有機物のカビ発生が明らかに目に見えたことを示す。純粋形態の凍結した餌ダニが、カビ発生に対し感受性が高いことが明らかに観察された。餌ダニ飼育培地が包含された場合、カビ発生に対する感受性は増加した。食物性物質が使用されなかった場合(A+及びC+)、生きたダニは消失し、従って、カビ発生の見込みがあった。
カビ発生の種類は、形態が異なった。有機物が密接に接触した場合(担体又は小凝集塊なし)、菌糸体は、完全なネットワークを形成し、混合物を凝集させた。食物粒子が担体によって隔離された場合、胞子形成はより多く観察された。
全混合物及び捕食性ダニ飼育に適切な湿度において、全食物型のカビ発生が観察された。有機物(餌ダニ又は餌ダニのための食物)の分率の低下は、カビ発生の重大度又はスピードを減少させた。運動性Carpoglyphus lactisダニ(総食物の10%)の添加は、菌糸体成長を強く抑制し、従って、捕食に利用できる死んだ餌ダニの維持に成功した。
[実施例2]
<セットアップ>
餌ダニを不動化するため、100ml広口瓶において、7.5gのCarpoglypus lactisを0.75gの純粋エタノールと合一した。広口瓶を閉鎖し、振盪して内容物を混合した。外界温度にて2、3又は4時間後、広口瓶を再度開けた。材料を呼吸させ、エタノールを蒸発させるため、広口瓶を、メッシュを含有する頂部で閉鎖した。実験期間中、21℃及び65〜75%RHで広口瓶を貯蔵した。運動性の点におけるダニの活動性をモニターするため、エタノール処理開始後の異なる時点において、およそ0.5gの試料を採取した。これらの試料から、改変したベルレーゼ漏斗を用いて運動性ダニを抽出し、計数した。
<結果>
結果を下表2.1に提示する。
表は、目に見える活動性を示したダニの数を示す(エタノールを適用してから異なる時間における培地1グラム当たりの数)。無処理材料は、1グラム当たりおよそ15000匹の活動性個体をもたらした(成虫、若虫及び幼虫の組み合わせ)。エタノール適用の2時間後、多くのダニは、依然として活動性を示したが、その脚は主に制御できない運動をした。エタノール曝露の3時間後、大部分のダニは非活動性であった。4時間後、数匹の個体のみが、ほんの小さな脚の運動を示した。1日後、ほとんど全運動が停止し、動き回る個体がごくたまに観察できた。最初の数日間、活動性ダニはほとんど観察されなかった。この期間において活動性を有するダニは、あらゆる生活段階のものであった。数日後、ダニ活動性は徐々に回復した。
[実施例3]
<セットアップ>
捕食性ダニによるエタノール処理した餌ダニの受け入れを、選択実験において試験した。Carpoglyphus lactis飼育バッチを3群に分けた。1群(処理E)には、上述の通り3時間エタノール処理を与えた。エタノール適用と同時に、第2及び第3の群を−18℃の冷凍庫に置いた。18時間後、両群を冷凍庫から取り出した。一方の群(処理FE)を上述の通り追加的なエタノール処理に付し、他方の群(処理F)には更なる処理を与えなかった。餌ダニの処理を開始してから27時間後、産生された材料をA.limonicusによる三者択一試験に用いた。調製された食物のごく一部分を、連絡した3個のアリーナに置き、多数のA.limonicusを中央に置いた。翌日、各種類の食物におけるA.limonicusの数を計数した。実験を10回複製した。
<結果>
結果を、異なる処理の食物から回収されたダニの平均分率として図5に提示する。エラーバーは、SDを表示する。A.limonicusは、異なる処理の食物に対して嗜好性を示さず(ANOVA、P=0.06)、Astigmatidダニの代表として、エタノール処理したCarpoglyphus lactisが、凍結したCarpoglyphus lactisと比較して食物源として等しく許容されることを実証する。
[実施例4]
<セットアップ>
本実験において、実験3(処理E、F及びFE)と正確に同一の材料を用いた。餌ダニの処理を開始してから27時間後、材料を用いて、捕食性ダニの飼育に用いられる条件と同様の条件で貯蔵実験を開始した。小型のカップに0.6gの培地を充填し、処理毎に5回複製した。これらを25℃及び93%RHにて貯蔵した。培地の質を毎日評価した。
<結果>
(処理E)
カップを25℃及び93%RHに置いてから2日後、数匹の餌ダニ(約1%)が活動性を有した。7日目に最初の真菌生育が観察され、カップ当たり0〜5個の小さい菌糸体パッチが見られた。この時点において、多くの餌ダニが活動性であり、エタノール処理前のダニ初期数の約20%であった。
(処理F)
3日目に最初の真菌生育が観察され、カップ当たり3〜6個の小さい菌糸体パッチが見られた。5日後、表面の100%が、白い菌糸体に覆われた。7日目、緑色及び黄色の小生子が、それぞれ表面積の70〜100%及び5〜20%を覆った。
(処理FE)
いくつかの複製において3日目に最初の真菌生育が観察され、カップ当たり0〜1個の小さい菌糸体パッチが見られた。5日後、表面の20%が、白い菌糸体に覆われた。7日目、表面は、白い菌糸体に完全に覆われ、緑色及び黄色の小生子が、それぞれ表面積の20〜75%及び1%を覆った。
不動化実験(実験2)と同様に、処理Eにおけるダニの活性は、数日後に回復する。この処理は、群を抜いて最低の真菌発生を生じさせた。この結果は、ダニの活動性の回復が真菌を抑制することに起因すると考えられる。加えて、エタノールそれ自体が、真菌生育を抑制することができる。これは、処理FEが、処理Fよりも低い真菌生育を生じさせるが、処理F及びFEどちらにおいても、活動性ダニが観察されなかったという事実に反映される。
[実施例5]
<セットアップ>
多数のAstigmatid餌ダニに関与する飼育試験のカビ発生データを評価して、運動性Astigmatid個体の真菌抑制効果を決定した。Carpoglyphus lactis(Cl)、Lepidoglyphus destructor(Ld)、Suidasia pontifica(Sp)、Thyreophagus entomophagus(Te)及びTyrophagus putrescentiae(Tp)に関与する飼育のデータを収集し解析した。
包含される試験において、実施例2に記載されている通りに飼育を行った。菌糸体凝集塊に基づいて、培地のカビ発生をスコア化した。次のスコア化の表を用いた。軽度(スコア1)、中程度(スコア2)又は重度(スコア3)。
<結果>
図6に提示されているドットプロットは、5種の餌ダニの密度に対する、ふすま及びアワもみ殻(Clのみ)担体におけるカビ発生スコアを示す。
Astigmatidダニの真菌抑制効果は明らかである。一部のダニ種は、カビ抑制において他のダニ種よりも有効である。例えば、密度>500匹ダニ/グラムの試験条件下においては、C.lactis及びT.entomophagousが有効であり、一方、L.destructor及びS.pontificaは、密度>1000匹ダニ/グラムを必要とする。結果は、もみ殻担体がカビを形成させ難いことも示す。
[実施例6]
<セットアップ>
Phytoseiidae科の捕食性ダニの代表として、A.swirskii及びA.limonicusのために飼育試行をセットアップした。Astigmata目からの餌ダニの代表として、C.lactis及びT.entomophagusを選択した。
90umメッシュナイロンの通気性の蓋を備えるペトリ皿(φ=25mm、h=30mm)において飼育を行った。これらの装置一式を、底に飽和塩溶液を入れて所望の湿度を生じたより大型の容器(l×w×h=33×20×15cm)内に置いた。A.limonicus(93%RH)以外は、85%RHにて全試行を行った。温度は25.0℃(±0.3℃)であり、光環境(light regime)は16/8(L:D)であった。処理毎の複製数は3であった。
ダニのための担体材料として、A.limonicus(ここでは13%湿アワもみ殻を用いた)以外は、全事例において10%湿コムギふすまを用いた。同一接種材料を相対的に低密度で用いて、捕食性ダニ飼育を開始した。
ふすま及び酵母を含有する食餌によりAstigmatidダニを飼育し、食物として供給した。Astigmatid餌ダニは、試験に応じて、生きた又は生きた+凍結形態で捕食者に与えた。十分な食物を供給し、及び、生きた餌ダニ:捕食性ダニの比率を許容されるレベル(比率<10、好ましくは0〜5)に維持するために、凍結餌ダニの量は、生きた+凍結餌ダニの量の2倍であった(凍結餌ダニの量が生きた+凍結餌ダニの量の4倍であった、S.pontificaを除く)。担体及び餌を、接種材料の50%(w/w)の量で週に2回与えた。食物源として、選択された種の不動化(−18℃で3〜7日間、使用1時間前に解凍)Astigmatid個体又は選択された種の不動化及び生きたAstigmatid個体の混合物のいずれかを提示した。これにより、生きた:不動化比率(生きた+凍結処理のみ)の制御が可能となった。ふすま及び酵母を含有する食餌により、Astigmatidダニを飼育した。
試行を18〜50日間続け(グラフを参照)、週に2回、各装置一式の1試料を採取した。この試料から生きた捕食性ダニ及び餌ダニを抽出し、計数した。このようにして、密度(1グラム当たり)及び比率(生きた餌ダニ:生きた捕食性ダニ)を計算した。
<結果>
結果を図7に提示し、生きた+不動化餌の組み合わせが、Phytoseiid捕食者ダニの有意により高い密度をもたらすことを示す。C.lactisにおいて飼育したA.swirskiiに関して(パネルA)、平均増加は150%であり、T.entomophagusにおいて飼育したA.swirskiiに関して(パネルB)、増加は135%であり、S.pontificaにおいて飼育したA.swirskiiに関して(パネルC)、増加は155%であった。C.lactisにおいて飼育したA.limonicusに関して(パネルD)、この増加は270%と最高であった。グラフは、試行経過における捕食性ダニの密度(1グラム当たり)(平均±SE)を示す。グラフの下に、処理毎の平均及び統計検定のp値(平均を比較する2試料t検定)を提示する。
不動化されたAstigmatid餌が、捕食者のストレスレベルを増加させるリスクなしで、より大量のAstigmatid餌ダニを与える機会を大量飼育者に与えると結論付けることができる。これは、有意により高い密度の捕食者ダニをもたらし、よって、大量飼育の効率を増加させ得る。
[実施例7]
<セットアップ>
2種の捕食性ダニ、A.swirskii及びA.limonicusを、異なる担体型に対するその嗜好性に関して試験した。卵段階の飼育開始からおよそ10日後に成熟雌を収集した。提供された3種の担体は、アワもみ殻;本発明による担体、コムギふすま;標準担体及びバーミキュライト(微粒子、全粒子<2mm);同様に標準担体であった。全担体を湿った形態で(15ml水/100g添加)同時に与えた。各担体のうち、2ポーションを、放出ポイントから不動された距離で(4cm)互いに向き合わせて置いた。被験基質は全て、0.5ccの同一体積で与えた(アリーナ毎に2ポーションに分ける)。試験開始時に、各種10匹の雌及び2匹の雄を、各プラスチック選択アリーナ(φ=12cm)の中間に置いた。アリーナを湿った脱脂綿上に置き、捕食性ダニに水を与え、逃避を防止した。放出ポイントに食物源としてTypha花粉を置いた。複製数は3であり、頂点位置(12時の位置)における別の基質により、その後のアリーナの位置を定めた。
25℃、75%RH及び16:8(L:D)光環境の条件の気候室において試験を行い、アリーナにおけるRHは、85%前後であった。2日後に、基質毎の捕食者の卵数及び存在する成虫数を計数した(雄個体は統計から除外した)。このため、全担体粒子を個々に精査し、追加の食物を添加した後、2日後にも点検した。カイ二乗適合度検定(1変数)を用いて、種毎の基質毎の結果を統計解析した。
<結果>
各基質に見られた雌の総数(3回複製後)を図8(パネルA)に提示する。全スタートアップ雌(30匹)のうち、基質から大部分の個体を回収した、即ち、全A.limonicusの87%(26個体)及び全A.swirskiiの60%(18個体)。よって、材料が食物源から明らかに分離されたとしても、大部分の雌ダニはこの担体に見られた。両方の試験は、担体材料の間に有意差を示した(p=0.000)。
各担体に見られた卵(及び幼生)の総数(3回複製後)を図1のパネルBに示す。雌ダニの発生率(が、担体上に産み付けられた卵数と相関することが明らかである。両方の試験は、担体材料の間に有意差を示した(p=0.000)。
結果は、本実験においてアワもみ殻によって表される、ダニシェルターを提供する担体材料が、Phytoseiid種等のダニ種に非常に好ましいことを示す。
[実施例8]
<セットアップ>
厚い層の培地を調製して、大量飼育装置一式をシミュレートした。担体材料として、ふすま又はアワもみ殻(両者共に湿らせる)のいずれかを用いた。ふすまは、商業的ダニ飼育において用いられる標準担体である。もみ殻は、ダニシェルターを有する本発明による担体の代表である。両者共に凍結形態のC.lactisを含む2種の食物型(A及びB)を用いた。スタートアップ飼育において、捕食性ダニ、A.limonicusを、試験培地層において2世代超に亘り飼育した。その後の飼育は、換気された箱(L×W×H=15×15×8cm)の中で6〜7cmの高さの層において2週間行った。試料採取、餌やり及び混合は、週に2回行った。試験は、21℃及び93%RHにおいて2回複製して行った。週毎に、試料から生きた捕食者及び餌ダニの数を計数した。
<結果>
結果を図9に提示する。もみ殻飼育における捕食者密度は、両方の食物型において、第1週及び第2週において増加している。ふすま混合物において、飼育は、第1週には維持されているが、第2週に崩壊する。捕食者数の減少に続いて、餌ダニ数が増加し、これによって、これらの飼育混合物の継続が困難なものとなる。試験は、標準ふすま担体と比較して、もみ殻担体について肯定的である正味の結果を示す。
[参考文献]

Claims (21)

  1. 捕食性ダニ種から選択される捕食性ダニ種の個体群と、
    少なくとも1種のAstigmatidダニ種の個体群を含む、前記捕食性個体のための食物源と、ここで、前記Astigmatid個体群の50〜90%不動化処理によって不動化されており、
    を含むダニ組成物であって、不動化されたAstigmatid個体群が、真菌抑制剤に接触されており、前記真菌抑制剤が、食真菌性ダニ種または抗真菌性滲出液を産生するダニ種から選択される真菌抑制ダニ個体群を含む、ダニ組成物。
  2. Astigmatid個体に適した食物物質と、前記ダニ種個体のための担体とをさらに含む、請求項1に記載の組成物。
  3. 前記真菌抑制ダニ個体群が、Astigmatid種から選択される、請求項1又は2に記載の組成物。
  4. 前記捕食性ダニ種が、
    i)Phytoseiidae、
    ii)Ascidae、
    iii)Laelapidae、
    iv)Macrochelidae、若しくは、
    v)Parasitidae
    から選択されるMesostigmatidダニ種、又は、
    Prostigmatidダニ種
    から選択される、請求項1〜3のいずれか1項に記載の組成物。
  5. 前記Phytoseiidaeが、Amblyseiinae亜科またはTyphlodrominae亜科から選択される、請求項4に記載の組成物。
  6. Astigmatid個体数に対する捕食性個体数の比率が、100:1〜1:10である、請求項1〜5のいずれか1項に記載の組成物。
  7. 担体及び、担体1ml当たり10以上、最大450匹の捕食性ダニ種個体を含有する、請求項2〜6のいずれかに記載の組成物。
  8. 前記不動化されたAstigmatid個体が、熱処理、化学処理、放射線照射処理、超音波処理、機械的処理、電気的処理、接着剤による不動化、又は飢餓による不動化から選択される不動化処理によって不動化されている、請求項1〜のいずれか1項に記載の組成物。
  9. 前記ダニ種の個体のための前記担体が、担体要素を含み、前記担体要素の積み重なりが、捕食性ダニ個体に適したシェルターを含む、請求項2〜のいずれか1項に記載の組成物。
  10. 前記シェルターが、捕食性個体をその周囲から遮蔽するための区域を含み、捕食性個体がこの区域に位置する場合、前記区域において、前記担体要素の材料が、直交性又は逆向きの関係を有する少なくとも3方向において、捕食性個体をその周囲から遮蔽する、請求項に記載の組成物。
  11. 前記シェルターが、窪み、凹部、孔、チャンバ、空洞、隙間、凹み、ポケット、チューブにより形成される空隙等の空隙を含む、請求項又は10に記載の組成物。
  12. 担体要素が、もみ殻に由来する、請求項11のいずれか1項に記載の組成物。
  13. 捕食性ダニ種から選択される捕食性ダニ種を飼育するための方法であって、
    (i)請求項1〜12に記載の組成物を用意するステップと、
    (ii)前記捕食性ダニ個体群の個体に、Astigmatid個体群の個体を捕食させるステップと
    を含む方法。
  14. 前記捕食性ダニ種が、Mesostigmatidダニ種又はProstigmatidダニ種から選択される、請求項13に記載の方法。
  15. 捕食性ダニ種を飼育するための、請求項1〜12に記載の組成物の使用。
  16. 前記捕食性ダニ種が、Mesostigmatidダニ種又はProstigmatidダニ種から選択される、請求項15に記載の使用。
  17. 捕食性ダニ種を飼育するための飼育システムであって、請求項1〜12のいずれか1項に記載の組成物を収容する容器を含む飼育システム。
  18. 前記捕食性ダニ種が、Mesostigmatidダニ種又はProstigmatidダニ種から選択される、請求項17に記載の飼育システム。
  19. 前記容器が、少なくとも1つの前記捕食性ダニ種の幼虫、若虫又は成虫の持続的な放出をもたらすのに適した出口を備える、請求項17又は18に記載の飼育システム。
  20. 作物の有害生物を防除するための、請求項1〜12のいずれかに記載の組成物又は請求項20に記載の飼育システムの、使用。
  21. 作物における有害生物を生物学的に防除するための方法であって、前記作物に請求項1〜12に記載の組成物を与えるステップを含む方法。
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