JP6351766B2 - 多色蛍光分析装置 - Google Patents
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Description
(1)励起光の照射により試料が含む異なる蛍光波長を有する複数種の蛍光色素から発せられた蛍光を検出する多色蛍光分析装置であって、
互いに異なる複数の励起波長帯を有する励起光を前記試料に照射する照射部と、
前記試料の少なくとも一部が当接し、前記励起光の照射により前記試料から発せられた蛍光を含む光を第1の入射部から受け入れて導光すると共に、前記第1の入射部と反対側の第1の出射部から前記光を出射する第1のファイバオプティックプレートと、
前記第1の出射部から出射した光を第2の入射部から受け入れて導光すると共に、前記第2の入射部と反対側の第2の出射部から前記光を出射する第2のファイバオプティックプレートと、
前記第2の出射部の端面上に設けられ、前記蛍光の少なくとも一部を透過しかつ前記励起波長帯を含まない複数の透過波長帯の光を透過する単一の誘電体多層膜干渉フィルタと、
前記誘電体多層膜干渉フィルタに密着するように設けられ、前記誘電体多層膜干渉フィルタを透過した光を検出する二次元検出部とを備えていることを特徴とする多色蛍光分析装置、
(2)前記(1)に記載の誘電体多層膜干渉フィルタが第1の誘電体多層膜干渉フィルタであり、照射部が光源と前記光源から発せられた光の中から所定の励起波長帯を有する励起光を選択的に透過させる第2の誘電体多層膜干渉フィルタとを有している前記(1)に記載の多色蛍光分析装置、
(3)第1の誘電体多層膜干渉フィルタの透過波長帯における光の透過率(α1)が所定値(α)よりも小さい関係を満たす立ち上がり波長(λ1i)と、第2の誘電体多層膜干渉フィルタの透過波長帯における光の透過率(α2)が前記所定値(α)よりも小さい関係を満たす立ち下がり波長(λ2j)とが、下記式(1)で表される関係を満たす前記(2)に記載の多色蛍光分析装置、
(4)所定値(α)が0.1%である前記(3)に記載の多色蛍光分析装置、
(5)第1の誘電体多層膜干渉フィルタの実効屈折率(neff)が1.5以上2.2以下である前記(3)または(4)に記載の多色蛍光分析装置、
(6)第1の誘電体多層膜干渉フィルタに入射する光の最大入射角(θmax)が30°である前記(3)から(5)のいずれか1項に記載の多色蛍光分析装置、
(7)第2のファイバオプティックプレートを構成する光ファイバの外径が第1のファイバオプティックプレートを構成する光ファイバの外径より小さい前記(1)から(6)のいずれか1項に記載の多色蛍光分析装置、
(8)各励起波長帯の励起光が順次照射される前記(3)から(7)のいずれか1項に記載の多色蛍光分析装置、
(9)少なくとも2つの励起波長帯を有する励起光が同時に照射される前記(3)から(7)のいずれか1項に記載の多色蛍光分析装置、
(10)試料が蛍光色素を含むDNA断片であり、前記DNA断片の塩基配列の分析に用いられる前記(1)から(7)のいずれか1項に記載の多色蛍光分析装置、
(11)蛍光色素がAlexa405、FAM、Texas Red およびCy5.5である前記(10)に記載の多色蛍光分析装置、
(12)第2の誘電体多層膜干渉フィルタが第1フィルタ、第2フィルタ、第3フィルタおよび第4フィルタを有し、
第1フィルタの透過率が、380〜396nmの波長帯において85%以上、かつ380〜396nmの波長帯以外の波長帯において0.1%未満であり、
第2フィルタの透過率が、474〜497nmの波長帯において85%以上、かつ474〜497nmの波長帯以外の波長帯において0.1%未満であり、
第3フィルタの透過率が、561〜575nmの波長帯において85%以上、かつ561〜575nmの波長帯以外の波長帯において0.1%未満であり、
第4フィルタの透過率が、641〜657nmの波長帯において85%以上、かつ641〜657nmの波長帯以外の波長帯において0.1%未満であり、
前記第1フィルタ、第2フィルタ、第3フィルタおよび第4フィルタが切り替えて用いられる前記(11)に記載の多色蛍光分析装置、
(13)第2の誘電体多層膜干渉フィルタが単一のフィルタであり、前記第2の誘電体多層膜干渉フィルタの透過率が380〜396nm、474〜497nm、561〜575nmおよび641〜657nmの波長帯において85%以上、かつ前記波長帯以外の波長帯において0.1%未満である前記(11)に記載の多色蛍光分析装置、
(14)第1の誘電体多層膜干渉フィルタの透過率が、436〜462nm、536〜548nm、620〜632nmおよび713〜800nmの波長帯において85%以上、かつ前記波長帯以外の波長帯において0.1%未満である前記(12)または(13)に記載の多色蛍光分析装置、並びに
(15)第1のファイバオプティックプレートの試料が当接する側の面において、光ファイバのコア部端面にアミノシラン処理が施され、前記光ファイバの前記コア部端面以外の面にHMDS処理が施されている前記(10)から(14)のいずれか1項に記載の多色蛍光分析装置
に関する。
互いに異なる複数の励起波長帯を有する励起光を前記試料に照射する照射部と、
前記試料の少なくとも一部が当接し、前記励起光の照射により前記試料から発せられた蛍光を含む光を第1の入射部から受け入れて導光すると共に、前記第1の入射部と反対側の第1の出射部から前記光を出射する第1のファイバオプティックプレートと、
前記第1の出射部から出射した光を第2の入射部から受け入れて導光すると共に、前記第2の入射部と反対側の第2の出射部から前記光を出射する第2のファイバオプティックプレートと、
前記第2の出射部の端面上に設けられ、前記蛍光の少なくとも一部を透過しかつ前記励起波長帯を含まない複数の透過波長帯の光を透過する単一の誘電体多層膜干渉フィルタと、
前記誘電体多層膜干渉フィルタに密着するように設けられ、前記誘電体多層膜干渉フィルタを透過した光を検出する二次元検出部とを備えていることを特徴とする。
1、1a、1b 多色蛍光分析装置
10 試薬保管手段
20 送液手段
30 廃液保管手段
40 蛍光検出手段
41 照射部
42 フローチップ
43 蛍光検出部
411 光源
417 第2の誘電体多層膜干渉フィルタ
417a 第1フィルタ
417b 第2フィルタ
417c 第3フィルタ
417d 第4フィルタ
423 基板
424 第1のファイバオプティックプレート
425 第1の光ファイバ
425a 第1の入射部
425b 第1の出射部
426 コア部
427 クラッド部
431 第2のファイバオプティックプレート
432 誘電体多層膜干渉フィルタ(第1の誘電体多層膜干渉フィルタ)
433 二次元検出部
434 第2の光ファイバ
434a 第2の入射部
434b 第2の出射部
435 コア部
436 クラッド部
Claims (15)
- 励起光の照射により試料が含む異なる蛍光波長を有する複数種の蛍光色素から発せられた蛍光を検出する多色蛍光分析装置であって、
互いに異なる複数の励起波長帯を有する励起光を前記試料に照射する照射部と、
前記試料の少なくとも一部が当接し、前記励起光の照射により前記試料から発せられた蛍光を含む光を第1の入射部から受け入れて導光すると共に、前記第1の入射部と反対側の第1の出射部から前記光を出射する第1のファイバオプティックプレートと、
前記第1の出射部から出射した光を第2の入射部から受け入れて導光すると共に、前記第2の入射部と反対側の第2の出射部から前記光を出射する第2のファイバオプティックプレートと、
前記第2の出射部の端面上に設けられ、前記蛍光の少なくとも一部を透過しかつ前記励起波長帯を含まない複数の透過波長帯の光を透過する単一の誘電体多層膜干渉フィルタと、
前記誘電体多層膜干渉フィルタに密着するように設けられ、前記誘電体多層膜干渉フィルタを透過した光を検出する二次元検出部とを備えていることを特徴とする多色蛍光分析装置。 - 請求項1に記載の誘電体多層膜干渉フィルタが第1の誘電体多層膜干渉フィルタであり、照射部が光源と前記光源から発せられた光の中から所定の励起波長帯を有する励起光を選択的に透過させる第2の誘電体多層膜干渉フィルタとを有している請求項1に記載の多色蛍光分析装置。
- 所定値(α)が0.1%である請求項3に記載の多色蛍光分析装置。
- 第1の誘電体多層膜干渉フィルタの実効屈折率(neff)が1.5以上2.2以下である請求項3または請求項4に記載の多色蛍光分析装置。
- 第1の誘電体多層膜干渉フィルタに入射する光の最大入射角(θmax)が30°である請求項3から請求項5のいずれか1項に記載の多色蛍光分析装置。
- 第2のファイバオプティックプレートを構成する光ファイバの外径が第1のファイバオプティックプレートを構成する光ファイバの外径より小さい請求項1から請求項6のいずれか1項に記載の多色蛍光分析装置。
- 各励起波長帯の励起光が順次照射される請求項3から請求項7のいずれか1項に記載の多色蛍光分析装置。
- 少なくとも2つの励起波長帯を有する励起光が同時に照射される請求項3から請求項7のいずれか1項に記載の多色蛍光分析装置。
- 試料が蛍光色素を含むDNA断片であり、前記DNA断片の塩基配列の分析に用いられる請求項1から請求項7のいずれか1項に記載の多色蛍光分析装置。
- 蛍光色素がAlexa405、FAM、Texas RedおよびCy5.5である請求項10に記載の多色蛍光分析装置。
- 第2の誘電体多層膜干渉フィルタが第1フィルタ、第2フィルタ、第3フィルタおよび第4フィルタを有し、
第1フィルタの透過率が、380〜396nmの波長帯において85%以上、かつ380〜396nmの波長帯以外の波長帯において0.1%未満であり、
第2フィルタの透過率が、474〜497nmの波長帯において85%以上、かつ474〜497nmの波長帯以外の波長帯において0.1%未満であり、
第3フィルタの透過率が、561〜575nmの波長帯において85%以上、かつ561〜575nmの波長帯以外の波長帯において0.1%未満であり、
第4フィルタの透過率が、641〜657nmの波長帯において85%以上、かつ641〜657nmの波長帯以外の波長帯において0.1%未満であり、
前記第1フィルタ、第2フィルタ、第3フィルタおよび第4フィルタが切り替えて用いられる請求項11に記載の多色蛍光分析装置。 - 第2の誘電体多層膜干渉フィルタが単一のフィルタであり、前記第2の誘電体多層膜干渉フィルタの透過率が380〜396nm、474〜497nm、561〜575nmおよび641〜657nmの波長帯において85%以上、かつ前記波長帯以外の波長帯において0.1%未満である請求項11に記載の多色蛍光分析装置。
- 第1の誘電体多層膜干渉フィルタの透過率が、436〜462nm、536〜548nm、620〜632nmおよび713〜800nmの波長帯において85%以上、かつ前記波長帯以外の波長帯において0.1%未満である請求項12または請求項13に記載の多色蛍光分析装置。
- 第1のファイバオプティックプレートの試料が当接する側の面において、光ファイバのコア部端面にアミノシラン処理が施され、前記光ファイバの前記コア部端面以外の面にHMDS処理が施されている請求項10から請求項14のいずれか1項に記載の多色蛍光分析装置。
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