JP6328648B2 - 新規薬物−タンパク質コンジュゲート - Google Patents
新規薬物−タンパク質コンジュゲート Download PDFInfo
- Publication number
- JP6328648B2 JP6328648B2 JP2015538560A JP2015538560A JP6328648B2 JP 6328648 B2 JP6328648 B2 JP 6328648B2 JP 2015538560 A JP2015538560 A JP 2015538560A JP 2015538560 A JP2015538560 A JP 2015538560A JP 6328648 B2 JP6328648 B2 JP 6328648B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- group
- conjugate
- auristatin
- antibody
- formula
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- 108010044540 auristatin Proteins 0.000 claims description 60
- 230000021615 conjugation Effects 0.000 claims description 55
- 125000005647 linker group Chemical group 0.000 claims description 53
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 51
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 claims description 41
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 claims description 38
- 102000023732 binding proteins Human genes 0.000 claims description 35
- 108091008324 binding proteins Proteins 0.000 claims description 35
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 33
- CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N L-aspartic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N 0.000 claims description 29
- 229940009098 aspartate Drugs 0.000 claims description 27
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims description 19
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 claims description 17
- 125000001997 phenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(*)C([H])=C1[H] 0.000 claims description 17
- 238000011282 treatment Methods 0.000 claims description 15
- LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N Ethylene glycol Chemical group OCCO LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 14
- IEDXPSOJFSVCKU-HOKPPMCLSA-N [4-[[(2S)-5-(carbamoylamino)-2-[[(2S)-2-[6-(2,5-dioxopyrrolidin-1-yl)hexanoylamino]-3-methylbutanoyl]amino]pentanoyl]amino]phenyl]methyl N-[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(3R,4S,5S)-1-[(2S)-2-[(1R,2R)-3-[[(1S,2R)-1-hydroxy-1-phenylpropan-2-yl]amino]-1-methoxy-2-methyl-3-oxopropyl]pyrrolidin-1-yl]-3-methoxy-5-methyl-1-oxoheptan-4-yl]-methylamino]-3-methyl-1-oxobutan-2-yl]amino]-3-methyl-1-oxobutan-2-yl]-N-methylcarbamate Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H]([C@@H](CC(=O)N1CCC[C@H]1[C@H](OC)[C@@H](C)C(=O)N[C@H](C)[C@@H](O)c1ccccc1)OC)N(C)C(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](C(C)C)N(C)C(=O)OCc1ccc(NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CCCCCN2C(=O)CCC2=O)C(C)C)cc1)C(C)C IEDXPSOJFSVCKU-HOKPPMCLSA-N 0.000 claims description 14
- 108010093470 monomethyl auristatin E Proteins 0.000 claims description 14
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 13
- WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-L glutamate group Chemical group N[C@@H](CCC(=O)[O-])C(=O)[O-] WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-L 0.000 claims description 11
- VGGSQFUCUMXWEO-UHFFFAOYSA-N Ethene Chemical group C=C VGGSQFUCUMXWEO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 10
- 239000005977 Ethylene Substances 0.000 claims description 10
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 claims description 10
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims description 10
- 239000004365 Protease Substances 0.000 claims description 9
- 125000004435 hydrogen atom Chemical group [H]* 0.000 claims description 9
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 claims description 9
- 102000008394 Immunoglobulin Fragments Human genes 0.000 claims description 8
- 108010021625 Immunoglobulin Fragments Proteins 0.000 claims description 8
- 201000010099 disease Diseases 0.000 claims description 8
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 claims description 8
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 claims description 8
- 239000000427 antigen Substances 0.000 claims description 7
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 claims description 7
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 claims description 7
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 claims description 7
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 claims description 6
- 150000001413 amino acids Chemical group 0.000 claims description 6
- 125000004433 nitrogen atom Chemical group N* 0.000 claims description 6
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims description 6
- 125000004434 sulfur atom Chemical group 0.000 claims description 6
- MFRNYXJJRJQHNW-DEMKXPNLSA-N (2s)-2-[[(2r,3r)-3-methoxy-3-[(2s)-1-[(3r,4s,5s)-3-methoxy-5-methyl-4-[methyl-[(2s)-3-methyl-2-[[(2s)-3-methyl-2-(methylamino)butanoyl]amino]butanoyl]amino]heptanoyl]pyrrolidin-2-yl]-2-methylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoic acid Chemical compound CN[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N(C)[C@@H]([C@@H](C)CC)[C@H](OC)CC(=O)N1CCC[C@H]1[C@H](OC)[C@@H](C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 MFRNYXJJRJQHNW-DEMKXPNLSA-N 0.000 claims description 4
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 claims description 4
- 102100037486 Reverse transcriptase/ribonuclease H Human genes 0.000 claims description 4
- 125000002947 alkylene group Chemical group 0.000 claims description 4
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 claims description 4
- 239000012634 fragment Substances 0.000 claims description 4
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 4
- 108010059074 monomethylauristatin F Proteins 0.000 claims description 4
- 230000002062 proliferating effect Effects 0.000 claims description 4
- 125000004450 alkenylene group Chemical group 0.000 claims description 3
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 claims description 3
- 239000000562 conjugate Substances 0.000 description 134
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 72
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 46
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 39
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 39
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 34
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 31
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 29
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 25
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 23
- 229940049595 antibody-drug conjugate Drugs 0.000 description 22
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 22
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 description 21
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 21
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 20
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 18
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylformamide Chemical compound CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 18
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N Trifluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 18
- 239000000611 antibody drug conjugate Substances 0.000 description 18
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 16
- 229930195712 glutamate Natural products 0.000 description 16
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 16
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 16
- WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N L-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N 0.000 description 15
- SJRJJKPEHAURKC-UHFFFAOYSA-N N-Methylmorpholine Chemical compound CN1CCOCC1 SJRJJKPEHAURKC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- WKPWGQKGSOKKOO-RSFHAFMBSA-N maytansine Chemical compound CO[C@@H]([C@@]1(O)C[C@](OC(=O)N1)([C@H]([C@@H]1O[C@@]1(C)[C@@H](OC(=O)[C@H](C)N(C)C(C)=O)CC(=O)N1C)C)[H])\C=C\C=C(C)\CC2=CC(OC)=C(Cl)C1=C2 WKPWGQKGSOKKOO-RSFHAFMBSA-N 0.000 description 15
- PEEHTFAAVSWFBL-UHFFFAOYSA-N Maleimide Chemical compound O=C1NC(=O)C=C1 PEEHTFAAVSWFBL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 14
- 229930126263 Maytansine Natural products 0.000 description 14
- 229910052736 halogen Inorganic materials 0.000 description 14
- 150000002367 halogens Chemical group 0.000 description 14
- -1 polyethylene Polymers 0.000 description 14
- 239000000047 product Substances 0.000 description 14
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 14
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 14
- 239000001488 sodium phosphate Substances 0.000 description 14
- 229910000162 sodium phosphate Inorganic materials 0.000 description 14
- RYFMWSXOAZQYPI-UHFFFAOYSA-K trisodium phosphate Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[O-]P([O-])([O-])=O RYFMWSXOAZQYPI-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 14
- 238000004191 hydrophobic interaction chromatography Methods 0.000 description 13
- 230000036961 partial effect Effects 0.000 description 13
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N Toluene Chemical compound CC1=CC=CC=C1 YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 12
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 description 11
- LMDZBCPBFSXMTL-UHFFFAOYSA-N 1-ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl)carbodiimide Chemical compound CCN=C=NCCCN(C)C LMDZBCPBFSXMTL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- WZEAGSMYTVSXQA-XZZQEHRXSA-N [4-[[(2s)-2-[[(2s)-2-amino-3-methylbutanoyl]amino]-5-(carbamoylamino)pentanoyl]amino]phenyl]methyl n-[(2s)-1-[[(2s)-1-[[(3r,4s,5s)-1-[(2s)-2-[(1r,2r)-3-[[(1s,2r)-1-hydroxy-1-phenylpropan-2-yl]amino]-1-methoxy-2-methyl-3-oxopropyl]pyrrolidin-1-yl]-3-methox Chemical compound C1([C@H](O)[C@@H](C)NC(=O)[C@H](C)[C@@H](OC)[C@@H]2CCCN2C(=O)C[C@H]([C@H]([C@@H](C)CC)N(C)C(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](C(C)C)N(C)C(=O)OCC=2C=CC(NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=O)NC(=O)[C@@H](N)C(C)C)=CC=2)C(C)C)OC)=CC=CC=C1 WZEAGSMYTVSXQA-XZZQEHRXSA-N 0.000 description 10
- 230000001268 conjugating effect Effects 0.000 description 10
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 10
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 10
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 description 10
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N acetic acid Substances CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 9
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 9
- 101001012157 Homo sapiens Receptor tyrosine-protein kinase erbB-2 Proteins 0.000 description 8
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 8
- 102100030086 Receptor tyrosine-protein kinase erbB-2 Human genes 0.000 description 8
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 description 8
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 8
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 8
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 8
- 241000894007 species Species 0.000 description 8
- UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N streptomycin Chemical compound CN[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@](C=O)(O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@H]1O UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N 0.000 description 8
- 101100330725 Arabidopsis thaliana DAR4 gene Proteins 0.000 description 7
- 239000004698 Polyethylene Substances 0.000 description 7
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 7
- 125000003545 alkoxy group Chemical group 0.000 description 7
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 7
- 125000004093 cyano group Chemical group *C#N 0.000 description 7
- 125000000392 cycloalkenyl group Chemical group 0.000 description 7
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 7
- 125000000623 heterocyclic group Chemical group 0.000 description 7
- 229940127121 immunoconjugate Drugs 0.000 description 7
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 7
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 7
- BWGNESOTFCXPMA-UHFFFAOYSA-N Dihydrogen disulfide Chemical compound SS BWGNESOTFCXPMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000007821 HATU Substances 0.000 description 6
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 6
- CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L Magnesium sulfate Chemical compound [Mg+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 6
- 238000006957 Michael reaction Methods 0.000 description 6
- 102000035195 Peptidases Human genes 0.000 description 6
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 6
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 description 6
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 6
- WGLUMOCWFMKWIL-UHFFFAOYSA-N dichloromethane;methanol Chemical compound OC.ClCCl WGLUMOCWFMKWIL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 6
- 125000001072 heteroaryl group Chemical group 0.000 description 6
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 6
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 6
- 230000004962 physiological condition Effects 0.000 description 6
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 6
- 230000004044 response Effects 0.000 description 6
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 6
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 6
- 238000002415 sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis Methods 0.000 description 6
- 229960000575 trastuzumab Drugs 0.000 description 6
- NTRPBIATANVSPI-UHFFFAOYSA-N (2,5-dioxopyrrolidin-1-yl) 4-[3-(4-methylphenyl)sulfonyl-2-[(4-methylphenyl)sulfonylmethyl]propanoyl]benzoate Chemical compound C1=CC(C)=CC=C1S(=O)(=O)CC(C(=O)C=1C=CC(=CC=1)C(=O)ON1C(CCC1=O)=O)CS(=O)(=O)C1=CC=C(C)C=C1 NTRPBIATANVSPI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 125000006552 (C3-C8) cycloalkyl group Chemical group 0.000 description 5
- KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N Isopropanol Chemical compound CC(C)O KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 5
- 230000003833 cell viability Effects 0.000 description 5
- 239000003638 chemical reducing agent Substances 0.000 description 5
- 239000000460 chlorine Substances 0.000 description 5
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 5
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 5
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 5
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 5
- 238000006722 reduction reaction Methods 0.000 description 5
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 5
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 5
- 125000000999 tert-butyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(*)(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 5
- AGGWFDNPHKLBBV-YUMQZZPRSA-N (2s)-2-[[(2s)-2-amino-3-methylbutanoyl]amino]-5-(carbamoylamino)pentanoic acid Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCNC(N)=O AGGWFDNPHKLBBV-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 4
- 125000004178 (C1-C4) alkyl group Chemical group 0.000 description 4
- VHYFNPMBLIVWCW-UHFFFAOYSA-N 4-Dimethylaminopyridine Chemical compound CN(C)C1=CC=NC=C1 VHYFNPMBLIVWCW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- LJSMMWFTVBPRDS-UHFFFAOYSA-N 5,6-diamino-3',6'-bis(diethylamino)spiro[2-benzofuran-3,9'-xanthene]-1-one Chemical compound O1C(=O)C2=CC(N)=C(N)C=C2C21C1=CC=C(N(CC)CC)C=C1OC1=CC(N(CC)CC)=CC=C21 LJSMMWFTVBPRDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 4
- 125000001313 C5-C10 heteroaryl group Chemical group 0.000 description 4
- ZAMOUSCENKQFHK-UHFFFAOYSA-N Chlorine atom Chemical compound [Cl] ZAMOUSCENKQFHK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 4
- 229930182555 Penicillin Natural products 0.000 description 4
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 4
- PXIPVTKHYLBLMZ-UHFFFAOYSA-N Sodium azide Chemical compound [Na+].[N-]=[N+]=[N-] PXIPVTKHYLBLMZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000003125 aqueous solvent Substances 0.000 description 4
- 239000012300 argon atmosphere Substances 0.000 description 4
- 239000012298 atmosphere Substances 0.000 description 4
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 4
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 description 4
- 229910002091 carbon monoxide Inorganic materials 0.000 description 4
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 4
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 4
- 229910052801 chlorine Inorganic materials 0.000 description 4
- 125000000151 cysteine group Chemical group N[C@@H](CS)C(=O)* 0.000 description 4
- 229940127089 cytotoxic agent Drugs 0.000 description 4
- 125000002228 disulfide group Chemical group 0.000 description 4
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 4
- 230000007515 enzymatic degradation Effects 0.000 description 4
- 239000012894 fetal calf serum Substances 0.000 description 4
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 4
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 4
- 229940049954 penicillin Drugs 0.000 description 4
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 4
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 4
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 4
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 4
- 239000011550 stock solution Substances 0.000 description 4
- 229960005322 streptomycin Drugs 0.000 description 4
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 4
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 4
- 230000035899 viability Effects 0.000 description 4
- 208000023275 Autoimmune disease Diseases 0.000 description 3
- 208000035473 Communicable disease Diseases 0.000 description 3
- 229920000742 Cotton Polymers 0.000 description 3
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 3
- CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L Sodium Carbonate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]C([O-])=O CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 3
- PZBFGYYEXUXCOF-UHFFFAOYSA-N TCEP Chemical compound OC(=O)CCP(CCC(O)=O)CCC(O)=O PZBFGYYEXUXCOF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 3
- 125000002252 acyl group Chemical group 0.000 description 3
- 238000007792 addition Methods 0.000 description 3
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 3
- 210000004102 animal cell Anatomy 0.000 description 3
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 3
- 238000012054 celltiter-glo Methods 0.000 description 3
- 230000008859 change Effects 0.000 description 3
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 3
- 239000002254 cytotoxic agent Substances 0.000 description 3
- 125000006575 electron-withdrawing group Chemical group 0.000 description 3
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 3
- 150000002431 hydrogen Chemical group 0.000 description 3
- 229940072221 immunoglobulins Drugs 0.000 description 3
- 229910052943 magnesium sulfate Inorganic materials 0.000 description 3
- 235000019341 magnesium sulphate Nutrition 0.000 description 3
- 125000000956 methoxy group Chemical group [H]C([H])([H])O* 0.000 description 3
- 230000008569 process Effects 0.000 description 3
- 235000019419 proteases Nutrition 0.000 description 3
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 3
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 3
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 3
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 3
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 3
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 3
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 3
- 239000003039 volatile agent Substances 0.000 description 3
- DSQHYGKLDYXUSA-SFHVURJKSA-N (2s)-2-(9h-fluoren-9-ylmethoxycarbonylamino)hexanedioic acid Chemical compound C1=CC=C2C(COC(=O)N[C@@H](CCCC(=O)O)C(O)=O)C3=CC=CC=C3C2=C1 DSQHYGKLDYXUSA-SFHVURJKSA-N 0.000 description 2
- BLUGYPPOFIHFJS-UUFHNPECSA-N (2s)-n-[(2s)-1-[[(3r,4s,5s)-3-methoxy-1-[(2s)-2-[(1r,2r)-1-methoxy-2-methyl-3-oxo-3-[[(1s)-2-phenyl-1-(1,3-thiazol-2-yl)ethyl]amino]propyl]pyrrolidin-1-yl]-5-methyl-1-oxoheptan-4-yl]-methylamino]-3-methyl-1-oxobutan-2-yl]-3-methyl-2-(methylamino)butanamid Chemical compound CN[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N(C)[C@@H]([C@@H](C)CC)[C@H](OC)CC(=O)N1CCC[C@H]1[C@H](OC)[C@@H](C)C(=O)N[C@H](C=1SC=CN=1)CC1=CC=CC=C1 BLUGYPPOFIHFJS-UUFHNPECSA-N 0.000 description 2
- 125000004209 (C1-C8) alkyl group Chemical group 0.000 description 2
- PVVTWNMXEHROIA-UHFFFAOYSA-N 2-(3-hydroxypropyl)-1h-quinazolin-4-one Chemical compound C1=CC=C2NC(CCCO)=NC(=O)C2=C1 PVVTWNMXEHROIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WEZDRVHTDXTVLT-GJZGRUSLSA-N 2-[[(2s)-2-[[(2s)-2-[(2-aminoacetyl)amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]acetic acid Chemical compound OC(=O)CNC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CN)CC1=CC=CC=C1 WEZDRVHTDXTVLT-GJZGRUSLSA-N 0.000 description 2
- HGOBHXGITKMPPL-UHFFFAOYSA-N 4-[3-(4-methylphenyl)sulfonyl-2-[(4-methylphenyl)sulfonylmethyl]propanoyl]benzoic acid Chemical compound C1=CC(C)=CC=C1S(=O)(=O)CC(C(=O)C=1C=CC(=CC=1)C(O)=O)CS(=O)(=O)C1=CC=C(C)C=C1 HGOBHXGITKMPPL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 description 2
- 208000026310 Breast neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 108020004705 Codon Proteins 0.000 description 2
- KDXKERNSBIXSRK-RXMQYKEDSA-N D-lysine Chemical compound NCCCC[C@@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-RXMQYKEDSA-N 0.000 description 2
- OFDNQWIFNXBECV-UHFFFAOYSA-N Dolastatin 10 Natural products CC(C)C(N(C)C)C(=O)NC(C(C)C)C(=O)N(C)C(C(C)CC)C(OC)CC(=O)N1CCCC1C(OC)C(C)C(=O)NC(C=1SC=CN=1)CC1=CC=CC=C1 OFDNQWIFNXBECV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 2
- PXGOKWXKJXAPGV-UHFFFAOYSA-N Fluorine Chemical compound FF PXGOKWXKJXAPGV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010009504 Gly-Phe-Leu-Gly Proteins 0.000 description 2
- PWKSKIMOESPYIA-BYPYZUCNSA-N L-N-acetyl-Cysteine Chemical compound CC(=O)N[C@@H](CS)C(O)=O PWKSKIMOESPYIA-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 2
- FADYJNXDPBKVCA-UHFFFAOYSA-N L-Phenylalanyl-L-lysin Natural products NCCCCC(C(O)=O)NC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 FADYJNXDPBKVCA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- JGFZNNIVVJXRND-UHFFFAOYSA-N N,N-Diisopropylethylamine (DIPEA) Chemical compound CCN(C(C)C)C(C)C JGFZNNIVVJXRND-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- PXHVJJICTQNCMI-UHFFFAOYSA-N Nickel Chemical compound [Ni] PXHVJJICTQNCMI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- RFCVXVPWSPOMFJ-STQMWFEESA-N Phe-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 RFCVXVPWSPOMFJ-STQMWFEESA-N 0.000 description 2
- FADYJNXDPBKVCA-STQMWFEESA-N Phe-Lys Chemical compound NCCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 FADYJNXDPBKVCA-STQMWFEESA-N 0.000 description 2
- NQRYJNQNLNOLGT-UHFFFAOYSA-N Piperidine Chemical compound C1CCNCC1 NQRYJNQNLNOLGT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229920002873 Polyethylenimine Polymers 0.000 description 2
- WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N Tetrahydrofuran Chemical compound C1CCOC1 WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000004142 Trypsin Human genes 0.000 description 2
- 108090000631 Trypsin Proteins 0.000 description 2
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 2
- DHKHKXVYLBGOIT-UHFFFAOYSA-N acetaldehyde Diethyl Acetal Natural products CCOC(C)OCC DHKHKXVYLBGOIT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 150000001241 acetals Chemical class 0.000 description 2
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 2
- 239000003463 adsorbent Substances 0.000 description 2
- 230000029936 alkylation Effects 0.000 description 2
- 238000005804 alkylation reaction Methods 0.000 description 2
- 150000001408 amides Chemical class 0.000 description 2
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 2
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 description 2
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 2
- 229960005261 aspartic acid Drugs 0.000 description 2
- 108010008739 auristatin PHE Proteins 0.000 description 2
- 108010009065 auristatin PYE Proteins 0.000 description 2
- 238000010533 azeotropic distillation Methods 0.000 description 2
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 2
- 239000012267 brine Substances 0.000 description 2
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 2
- 230000006037 cell lysis Effects 0.000 description 2
- 238000003570 cell viability assay Methods 0.000 description 2
- GTZCVFVGUGFEME-HNQUOIGGSA-N cis-Aconitic acid Natural products OC(=O)C\C(C(O)=O)=C/C(O)=O GTZCVFVGUGFEME-HNQUOIGGSA-N 0.000 description 2
- GTZCVFVGUGFEME-IWQZZHSRSA-N cis-aconitic acid Chemical compound OC(=O)C\C(C(O)=O)=C\C(O)=O GTZCVFVGUGFEME-IWQZZHSRSA-N 0.000 description 2
- 238000004132 cross linking Methods 0.000 description 2
- 239000013058 crude material Substances 0.000 description 2
- 239000012043 crude product Substances 0.000 description 2
- 125000000753 cycloalkyl group Chemical group 0.000 description 2
- 231100000433 cytotoxic Toxicity 0.000 description 2
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 description 2
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 2
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 2
- 238000011161 development Methods 0.000 description 2
- MQYQOVYIJOLTNX-UHFFFAOYSA-N dichloromethane;n,n-dimethylformamide Chemical compound ClCCl.CN(C)C=O MQYQOVYIJOLTNX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000000539 dimer Substances 0.000 description 2
- ADTQERWKHUWTIE-UHFFFAOYSA-N ditert-butyl 2-[[4-[3-(4-methylphenyl)sulfanyl-2-[(4-methylphenyl)sulfanylmethyl]propanoyl]benzoyl]amino]butanedioate Chemical compound C1=CC(C)=CC=C1SCC(C(=O)C=1C=CC(=CC=1)C(=O)NC(CC(=O)OC(C)(C)C)C(=O)OC(C)(C)C)CSC1=CC=C(C)C=C1 ADTQERWKHUWTIE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- OFDNQWIFNXBECV-VFSYNPLYSA-N dolastatin 10 Chemical compound CC(C)[C@H](N(C)C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N(C)[C@@H]([C@@H](C)CC)[C@H](OC)CC(=O)N1CCC[C@H]1[C@H](OC)[C@@H](C)C(=O)N[C@H](C=1SC=CN=1)CC1=CC=CC=C1 OFDNQWIFNXBECV-VFSYNPLYSA-N 0.000 description 2
- 108010045524 dolastatin 10 Proteins 0.000 description 2
- 210000001163 endosome Anatomy 0.000 description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 2
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 2
- 239000011737 fluorine Substances 0.000 description 2
- 229910052731 fluorine Inorganic materials 0.000 description 2
- 102000037865 fusion proteins Human genes 0.000 description 2
- 108020001507 fusion proteins Proteins 0.000 description 2
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 description 2
- 150000007857 hydrazones Chemical class 0.000 description 2
- 210000002865 immune cell Anatomy 0.000 description 2
- 238000002513 implantation Methods 0.000 description 2
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 2
- 238000010348 incorporation Methods 0.000 description 2
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 2
- 238000002372 labelling Methods 0.000 description 2
- 208000032839 leukemia Diseases 0.000 description 2
- 238000004020 luminiscence type Methods 0.000 description 2
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 description 2
- 230000002132 lysosomal effect Effects 0.000 description 2
- 210000003712 lysosome Anatomy 0.000 description 2
- 230000001868 lysosomic effect Effects 0.000 description 2
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 2
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 2
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 2
- LOTBYPQQWICYBB-UHFFFAOYSA-N methyl n-hexyl-n-[2-(hexylamino)ethyl]carbamate Chemical compound CCCCCCNCCN(C(=O)OC)CCCCCC LOTBYPQQWICYBB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 2
- 230000005012 migration Effects 0.000 description 2
- 238000013508 migration Methods 0.000 description 2
- 229930014626 natural product Natural products 0.000 description 2
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N nitrogen Substances N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QJGQUHMNIGDVPM-UHFFFAOYSA-N nitrogen group Chemical group [N] QJGQUHMNIGDVPM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 2
- 150000002905 orthoesters Chemical class 0.000 description 2
- 125000001151 peptidyl group Chemical group 0.000 description 2
- 108010073101 phenylalanylleucine Proteins 0.000 description 2
- 229910052698 phosphorus Inorganic materials 0.000 description 2
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 2
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 2
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 2
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 2
- 235000019833 protease Nutrition 0.000 description 2
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 2
- 239000000376 reactant Substances 0.000 description 2
- 150000007659 semicarbazones Chemical class 0.000 description 2
- 238000002741 site-directed mutagenesis Methods 0.000 description 2
- 238000001542 size-exclusion chromatography Methods 0.000 description 2
- HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M sodium;chloride;hydrate Chemical compound O.[Na+].[Cl-] HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 2
- KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-L succinate(2-) Chemical compound [O-]C(=O)CCC([O-])=O KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-N succinic acid Chemical compound OC(=O)CCC(O)=O KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000008685 targeting Effects 0.000 description 2
- LWHDVGRAEHWWFV-UHFFFAOYSA-N tert-butyl 3-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-(2-aminoethoxy)ethoxy]ethoxy]ethoxy]ethoxy]ethoxy]ethoxy]ethoxy]ethoxy]ethoxy]ethoxy]ethoxy]ethoxy]ethoxy]ethoxy]ethoxy]ethoxy]ethoxy]ethoxy]ethoxy]ethoxy]ethoxy]ethoxy]etho Chemical compound CC(C)(C)OC(=O)CCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCN LWHDVGRAEHWWFV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- SRVJKTDHMYAMHA-WUXMJOGZSA-N thioacetazone Chemical compound CC(=O)NC1=CC=C(\C=N\NC(N)=S)C=C1 SRVJKTDHMYAMHA-WUXMJOGZSA-N 0.000 description 2
- 150000003573 thiols Chemical class 0.000 description 2
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 2
- GTZCVFVGUGFEME-UHFFFAOYSA-N trans-aconitic acid Natural products OC(=O)CC(C(O)=O)=CC(O)=O GTZCVFVGUGFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000010474 transient expression Effects 0.000 description 2
- 239000012588 trypsin Substances 0.000 description 2
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 2
- 230000004614 tumor growth Effects 0.000 description 2
- 239000003981 vehicle Substances 0.000 description 2
- 229920003170 water-soluble synthetic polymer Polymers 0.000 description 2
- LGNCNVVZCUVPOT-FUVGGWJZSA-N (2s)-2-[[(2r,3r)-3-[(2s)-1-[(3r,4s,5s)-4-[[(2s)-2-[[(2s)-2-(dimethylamino)-3-methylbutanoyl]amino]-3-methylbutanoyl]-methylamino]-3-methoxy-5-methylheptanoyl]pyrrolidin-2-yl]-3-methoxy-2-methylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoic acid Chemical compound CC(C)[C@H](N(C)C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N(C)[C@@H]([C@@H](C)CC)[C@H](OC)CC(=O)N1CCC[C@H]1[C@H](OC)[C@@H](C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 LGNCNVVZCUVPOT-FUVGGWJZSA-N 0.000 description 1
- WOWDZACBATWTAU-FEFUEGSOSA-N (2s)-2-[[(2s)-2-(dimethylamino)-3-methylbutanoyl]amino]-n-[(3r,4s,5s)-1-[(2s)-2-[(1r,2r)-3-[[(1s,2r)-1-hydroxy-1-phenylpropan-2-yl]amino]-1-methoxy-2-methyl-3-oxopropyl]pyrrolidin-1-yl]-3-methoxy-5-methyl-1-oxoheptan-4-yl]-n,3-dimethylbutanamide Chemical compound CC(C)[C@H](N(C)C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N(C)[C@@H]([C@@H](C)CC)[C@H](OC)CC(=O)N1CCC[C@H]1[C@H](OC)[C@@H](C)C(=O)N[C@H](C)[C@@H](O)C1=CC=CC=C1 WOWDZACBATWTAU-FEFUEGSOSA-N 0.000 description 1
- HCVXCBYLIZAAEV-XXGGWIJGSA-N 15-methoxyansamitocin p-3 Chemical compound CO[C@@H]([C@@]1(O)C[C@H](OC(=O)N1)[C@@H](C)[C@@H]1O[C@@]1(C)[C@@H](OC(=O)C(C)C)CC(=O)N1C)\C=C\C=C(C)\C(OC)C2=CC(OC)=C(Cl)C1=C2 HCVXCBYLIZAAEV-XXGGWIJGSA-N 0.000 description 1
- 150000003923 2,5-pyrrolediones Chemical class 0.000 description 1
- ZRBWQYWYCXOYNW-UHFFFAOYSA-N 2-[[4-[3-(4-methylphenyl)sulfanyl-2-[(4-methylphenyl)sulfanylmethyl]propanoyl]benzoyl]amino]butanedioic acid Chemical compound C1=CC(C)=CC=C1SCC(C(=O)C=1C=CC(=CC=1)C(=O)NC(CC(O)=O)C(O)=O)CSC1=CC=C(C)C=C1 ZRBWQYWYCXOYNW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QDAWXRKTSATEOP-UHFFFAOYSA-N 2-acetylbenzoic acid Chemical compound CC(=O)C1=CC=CC=C1C(O)=O QDAWXRKTSATEOP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QBHDSQZASIBAAI-UHFFFAOYSA-N 4-acetylbenzoic acid Chemical compound CC(=O)C1=CC=C(C(O)=O)C=C1 QBHDSQZASIBAAI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 description 1
- WLHCBQAPPJAULW-UHFFFAOYSA-N 4-methylbenzenethiol Chemical compound CC1=CC=C(S)C=C1 WLHCBQAPPJAULW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000002407 ATP formation Effects 0.000 description 1
- 208000031261 Acute myeloid leukaemia Diseases 0.000 description 1
- 102000006306 Antigen Receptors Human genes 0.000 description 1
- 108010083359 Antigen Receptors Proteins 0.000 description 1
- 102100024222 B-lymphocyte antigen CD19 Human genes 0.000 description 1
- 208000032791 BCR-ABL1 positive chronic myelogenous leukemia Diseases 0.000 description 1
- 206010005003 Bladder cancer Diseases 0.000 description 1
- CAGAZBNOYKMMNM-UHFFFAOYSA-N C(CCC(=O)OSC1=C(C=CC=C1)C)(=O)OSC1=C(C=CC=C1)C Chemical compound C(CCC(=O)OSC1=C(C=CC=C1)C)(=O)OSC1=C(C=CC=C1)C CAGAZBNOYKMMNM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical group [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000010833 Chronic myeloid leukaemia Diseases 0.000 description 1
- 108091026890 Coding region Proteins 0.000 description 1
- 206010009944 Colon cancer Diseases 0.000 description 1
- 235000019750 Crude protein Nutrition 0.000 description 1
- CKLJMWTZIZZHCS-UHFFFAOYSA-N D-OH-Asp Natural products OC(=O)C(N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000237378 Dolabella auricularia Species 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010017993 Gastrointestinal neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 208000012766 Growth delay Diseases 0.000 description 1
- 101000980825 Homo sapiens B-lymphocyte antigen CD19 Proteins 0.000 description 1
- 108091006905 Human Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- 102000008100 Human Serum Albumin Human genes 0.000 description 1
- 102000018071 Immunoglobulin Fc Fragments Human genes 0.000 description 1
- 108010091135 Immunoglobulin Fc Fragments Proteins 0.000 description 1
- 208000008839 Kidney Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- CKLJMWTZIZZHCS-UWTATZPHSA-N L-Aspartic acid Natural products OC(=O)[C@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-UWTATZPHSA-N 0.000 description 1
- 102000004856 Lectins Human genes 0.000 description 1
- 108090001090 Lectins Proteins 0.000 description 1
- 206010058467 Lung neoplasm malignant Diseases 0.000 description 1
- 208000034578 Multiple myelomas Diseases 0.000 description 1
- 208000033761 Myelogenous Chronic BCR-ABL Positive Leukemia Diseases 0.000 description 1
- 208000033776 Myeloid Acute Leukemia Diseases 0.000 description 1
- 208000015914 Non-Hodgkin lymphomas Diseases 0.000 description 1
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 1
- 108091034117 Oligonucleotide Proteins 0.000 description 1
- 101710160107 Outer membrane protein A Proteins 0.000 description 1
- 206010033128 Ovarian cancer Diseases 0.000 description 1
- 206010061535 Ovarian neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 108090000526 Papain Proteins 0.000 description 1
- 206010035226 Plasma cell myeloma Diseases 0.000 description 1
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N Potassium Chemical compound [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000007056 Recombinant Fusion Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010008281 Recombinant Fusion Proteins Proteins 0.000 description 1
- 206010038389 Renal cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000006265 Renal cell carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 238000011579 SCID mouse model Methods 0.000 description 1
- 206010041067 Small cell lung cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000005718 Stomach Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 229910021626 Tin(II) chloride Inorganic materials 0.000 description 1
- 208000007097 Urinary Bladder Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 208000036142 Viral infection Diseases 0.000 description 1
- HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N Zinc Chemical compound [Zn] HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N [3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-hydroxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methyl [5-(6-aminopurin-9-yl)-2-(hydroxymethyl)oxolan-3-yl] hydrogen phosphate Polymers Cc1cn(C2CC(OP(O)(=O)OCC3OC(CC3OP(O)(=O)OCC3OC(CC3O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)C(COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3CO)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)O2)c(=O)[nH]c1=O JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 1
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 description 1
- 238000001042 affinity chromatography Methods 0.000 description 1
- 150000004703 alkoxides Chemical class 0.000 description 1
- 125000002877 alkyl aryl group Chemical group 0.000 description 1
- 125000005037 alkyl phenyl group Chemical group 0.000 description 1
- 239000002168 alkylating agent Substances 0.000 description 1
- 229940100198 alkylating agent Drugs 0.000 description 1
- 229910052782 aluminium Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000001412 amines Chemical group 0.000 description 1
- BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N ammonium sulfate Chemical compound N.N.OS(O)(=O)=O BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052921 ammonium sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011130 ammonium sulphate Nutrition 0.000 description 1
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 1
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 1
- 229940034982 antineoplastic agent Drugs 0.000 description 1
- 239000008346 aqueous phase Substances 0.000 description 1
- 239000012431 aqueous reaction media Substances 0.000 description 1
- 235000003704 aspartic acid Nutrition 0.000 description 1
- 230000001363 autoimmune Effects 0.000 description 1
- 230000005784 autoimmunity Effects 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 125000000043 benzamido group Chemical group [H]N([*])C(=O)C1=C([H])C([H])=C([H])C([H])=C1[H] 0.000 description 1
- OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N beta-carboxyaspartic acid Natural products OC(=O)C(N)C(C(O)=O)C(O)=O OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 125000006367 bivalent amino carbonyl group Chemical group [H]N([*:1])C([*:2])=O 0.000 description 1
- 201000011281 bladder sarcoma Diseases 0.000 description 1
- UORVGPXVDQYIDP-UHFFFAOYSA-N borane Chemical compound B UORVGPXVDQYIDP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910010277 boron hydride Inorganic materials 0.000 description 1
- 201000008275 breast carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 229960000455 brentuximab vedotin Drugs 0.000 description 1
- 102200106422 c.686G>C Human genes 0.000 description 1
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 1
- 150000001732 carboxylic acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 1
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 1
- 230000010261 cell growth Effects 0.000 description 1
- 230000004663 cell proliferation Effects 0.000 description 1
- 238000002512 chemotherapy Methods 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 208000029742 colonic neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 239000012230 colorless oil Substances 0.000 description 1
- 238000010276 construction Methods 0.000 description 1
- 235000019784 crude fat Nutrition 0.000 description 1
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 description 1
- 231100000409 cytocidal Toxicity 0.000 description 1
- 230000000445 cytocidal effect Effects 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 239000007857 degradation product Substances 0.000 description 1
- 238000010511 deprotection reaction Methods 0.000 description 1
- 238000011033 desalting Methods 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 238000011026 diafiltration Methods 0.000 description 1
- 239000000032 diagnostic agent Substances 0.000 description 1
- 235000005911 diet Nutrition 0.000 description 1
- 230000037213 diet Effects 0.000 description 1
- 230000029087 digestion Effects 0.000 description 1
- 238000007865 diluting Methods 0.000 description 1
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 1
- 125000002147 dimethylamino group Chemical group [H]C([H])([H])N(*)C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 1
- 150000002019 disulfides Chemical class 0.000 description 1
- WRZXKWFJEFFURH-UHFFFAOYSA-N dodecaethylene glycol Chemical compound OCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCO WRZXKWFJEFFURH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000008030 elimination Effects 0.000 description 1
- 238000003379 elimination reaction Methods 0.000 description 1
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 1
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 1
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 1
- ANFZRGMDGDYNGA-UHFFFAOYSA-N ethyl acetate;propan-2-ol Chemical compound CC(C)O.CCOC(C)=O ANFZRGMDGDYNGA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 239000013604 expression vector Substances 0.000 description 1
- 239000000835 fiber Substances 0.000 description 1
- 239000012458 free base Substances 0.000 description 1
- 125000000524 functional group Chemical group 0.000 description 1
- 206010017758 gastric cancer Diseases 0.000 description 1
- 238000009650 gentamicin protection assay Methods 0.000 description 1
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 description 1
- 229940022353 herceptin Drugs 0.000 description 1
- 239000008241 heterogeneous mixture Substances 0.000 description 1
- 238000003384 imaging method Methods 0.000 description 1
- 238000011065 in-situ storage Methods 0.000 description 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- 238000004255 ion exchange chromatography Methods 0.000 description 1
- 125000001449 isopropyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])(*)C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 201000010982 kidney cancer Diseases 0.000 description 1
- 239000010410 layer Substances 0.000 description 1
- 239000002523 lectin Substances 0.000 description 1
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 1
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 1
- 239000012280 lithium aluminium hydride Substances 0.000 description 1
- 201000007270 liver cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000014018 liver neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 201000005202 lung cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000020816 lung neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 201000001441 melanoma Diseases 0.000 description 1
- 230000002503 metabolic effect Effects 0.000 description 1
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 1
- 125000000325 methylidene group Chemical group [H]C([H])=* 0.000 description 1
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 238000002703 mutagenesis Methods 0.000 description 1
- 231100000350 mutagenesis Toxicity 0.000 description 1
- 229910052759 nickel Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000010899 nucleation Methods 0.000 description 1
- 239000012038 nucleophile Substances 0.000 description 1
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 1
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 1
- 239000012044 organic layer Substances 0.000 description 1
- 239000012074 organic phase Substances 0.000 description 1
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 1
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 1
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019834 papain Nutrition 0.000 description 1
- 229940055729 papain Drugs 0.000 description 1
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 1
- 230000006320 pegylation Effects 0.000 description 1
- 229920001515 polyalkylene glycol Polymers 0.000 description 1
- 229920000573 polyethylene Polymers 0.000 description 1
- 229920002704 polyhistidine Polymers 0.000 description 1
- 108091033319 polynucleotide Proteins 0.000 description 1
- 239000002157 polynucleotide Substances 0.000 description 1
- 102000040430 polynucleotide Human genes 0.000 description 1
- 239000011591 potassium Substances 0.000 description 1
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 1
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 1
- 239000001990 protein-drug conjugate Substances 0.000 description 1
- JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-O pyridinium Chemical compound C1=CC=[NH+]C=C1 JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-O 0.000 description 1
- 239000012429 reaction media Substances 0.000 description 1
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 1
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 1
- 238000010188 recombinant method Methods 0.000 description 1
- 238000010992 reflux Methods 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 208000015347 renal cell adenocarcinoma Diseases 0.000 description 1
- 125000006853 reporter group Chemical group 0.000 description 1
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 1
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 1
- 238000001223 reverse osmosis Methods 0.000 description 1
- 102220050205 rs370855515 Human genes 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 125000002914 sec-butyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])C([H])(*)C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 238000012163 sequencing technique Methods 0.000 description 1
- 238000013207 serial dilution Methods 0.000 description 1
- 208000002491 severe combined immunodeficiency Diseases 0.000 description 1
- 239000000377 silicon dioxide Substances 0.000 description 1
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N silicon dioxide Inorganic materials O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000000587 small cell lung carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 239000012279 sodium borohydride Substances 0.000 description 1
- 229910000033 sodium borohydride Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910000029 sodium carbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- BEOOHQFXGBMRKU-UHFFFAOYSA-N sodium cyanoborohydride Chemical compound [Na+].[B-]C#N BEOOHQFXGBMRKU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000012321 sodium triacetoxyborohydride Substances 0.000 description 1
- 239000012453 solvate Substances 0.000 description 1
- 239000011877 solvent mixture Substances 0.000 description 1
- 235000011150 stannous chloride Nutrition 0.000 description 1
- 201000011549 stomach cancer Diseases 0.000 description 1
- 125000003107 substituted aryl group Chemical group 0.000 description 1
- 239000001384 succinic acid Substances 0.000 description 1
- 229910052717 sulfur Inorganic materials 0.000 description 1
- 125000004354 sulfur functional group Chemical group 0.000 description 1
- 230000002195 synergetic effect Effects 0.000 description 1
- 238000010189 synthetic method Methods 0.000 description 1
- 231100000057 systemic toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 125000004213 tert-butoxy group Chemical group [H]C([H])([H])C(O*)(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 231100001274 therapeutic index Toxicity 0.000 description 1
- 150000003568 thioethers Chemical class 0.000 description 1
- AXZWODMDQAVCJE-UHFFFAOYSA-L tin(II) chloride (anhydrous) Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Sn+2] AXZWODMDQAVCJE-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 125000002088 tosyl group Chemical group [H]C1=C([H])C(=C([H])C([H])=C1C([H])([H])[H])S(*)(=O)=O 0.000 description 1
- 230000001052 transient effect Effects 0.000 description 1
- 238000002054 transplantation Methods 0.000 description 1
- 229960001612 trastuzumab emtansine Drugs 0.000 description 1
- 230000010304 tumor cell viability Effects 0.000 description 1
- 201000005112 urinary bladder cancer Diseases 0.000 description 1
- 231100000925 very toxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000009385 viral infection Effects 0.000 description 1
- 230000003442 weekly effect Effects 0.000 description 1
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 1
- 238000002689 xenotransplantation Methods 0.000 description 1
- 229910052725 zinc Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011701 zinc Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
- A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
- A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
- A61K47/6889—Conjugates wherein the antibody being the modifying agent and wherein the linker, binder or spacer confers particular properties to the conjugates, e.g. peptidic enzyme-labile linkers or acid-labile linkers, providing for an acid-labile immuno conjugate wherein the drug may be released from its antibody conjugated part in an acidic, e.g. tumoural or environment
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
- A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
- A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
- A61K47/6801—Drug-antibody or immunoglobulin conjugates defined by the pharmacologically or therapeutically active agent
- A61K47/6803—Drugs conjugated to an antibody or immunoglobulin, e.g. cisplatin-antibody conjugates
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
- A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
- A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
- A61K47/6835—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site
- A61K47/6851—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site the antibody targeting a determinant of a tumour cell
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
- A61P35/02—Antineoplastic agents specific for leukemia
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
- A61P37/06—Immunosuppressants, e.g. drugs for graft rejection
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
Description
(((Dq-Lk1)m-P)p-Lk2-Lk3)n-Ab (I)
[式中、Dは、オーリスタチン部分を表し;
qは、1〜10の整数を表し;
Lk1は、リンカーを表し;
mは、1〜10の整数を表し;
Pは、結合またはz価の基-P1-NH(ここでzは2〜11であり、P1は少なくとも1つのエチレン単位-CH2-CH2またはエチレングリコール単位-O-CH2-CH2-を含む基である)を表し;
pは、1〜10の整数を表し;
Lk2は、結合またはy価のリンカー(ここでyは2〜11であり、1〜9のアスパルテートおよび/もしくはグルタメート残基からなる)を表し;
Lk3は、一般式:
-CO-Ph-X-Y- (II)
{式中、Phは場合により置換されたフェニル基であり;XはCO基またはCH.OH基を表し;Yは式:
のリンカーを表し;
Abは、標的上の結合パートナーに結合することができる結合タンパク質またはペプチドを表し、前記結合タンパク質またはペプチドは、結合タンパク質またはペプチドにおけるジスルフィド結合由来の2つの硫黄原子を介してLk3に結合されており;
nは、1〜sの整数(ここでsは、Lk3にコンジュゲートする前に結合タンパク質またはペプチドに存在しているジスルフィド結合の数である)を表し;
m、n、p、q、yおよびzの値は、コンジュゲートに1〜10個のD基が含まれるように選択される]
のオーリスタチン含有コンジュゲートを提供する。
を含有する化合物である。
を含む。
を含む。
である。
である。
である。
および
である。
のコンジュゲートであり得る。
のコンジュゲートであり得る。
((Dq-Lk1)m-P)p-Lk2-Lk3a (VIII)
[式中、D、Lk1、P、Lk2ならびにm、pおよびqは一般式Iで示した意味を有し;
Lk3aは式:
-CO-Ph-Xa-Ya (IX)
{式中、Phは上記で示された意味を有し;XaはCO基を表し;Yaは基:
の基を表す]
のコンジュゲート化試薬と反応させることによって調製することができる。
が挙げられる。
が挙げられる。
が挙げられる。
((Lk1b)m-P)p-Lk2-Lk3a
[式中、m、P、L、p、Lk2およびLk3aは一般式VIIIに示される意味を有し、Lk1bはオーリスタチンに存在する基と反応する基を含むように式Lk1を改変させた基である]
の化合物とを反応させることによって調製し得る。典型的には、Lk1bはモノメチルオーリスタチンの末端の窒素原子と反応する。典型的な基および適切な反応は当業者にとって周知である。
(((D'q'-Lk1')m-P)p-Lk2-Lk3)n-Ab (I')
[式中、D'は薬物部分を表し;
q'は、2〜10の整数を表し;
Lk1'は、リンカーを表し;
mは、1〜10の整数を表し;
Pは、結合またはz価の基-P1-NH-(ここでzは2〜11であり、P1は少なくとも1つのエチレン単位-CH2-CH2-またはエチレングリコール単位-O-CH2-CH2-を含む基である)を表し;
pは、1〜10の整数を表し;
Lk2は、結合またはy価のリンカー(ここでyは2〜11であり、1〜9のアスパルテートおよび/もしくはグルタメート残基からなる)を表し;
Lk3は、一般式:
-CO-Ph-X-Y- (II)
{式中、Phは場合により置換されたフェニル基であり;XはCO基またはCH.OH基であり;Yは式:
のリンカーを表し;
Abは、標的上の結合パートナーに結合することができる結合タンパク質またはペプチドを表し、前記結合タンパク質は、結合タンパク質またはペプチドにおけるジスルフィド結合由来の2つの硫黄原子を介してLk3に結合されており;ならびに
nは、1〜sの整数(ここでsは、Lk3にコンジュゲートする前に結合タンパク質またはペプチドに存在しているジスルフィド結合の数である)を表し;
m、n、p、q'、yおよびzの値は、コンジュゲートに1〜10個のD'基が含まれるように選択される]
を有するコンジュゲートも提供する。
を含む化合物である。
を含む。
および
である。
の分岐要素が導入される。式VIにおけるアシル部分のそれぞれが、適切なリンカーLk1aを介してD'基に結合していてもよい。Lk1aは任意の適切なリンカーであって、例えばLk1'について上記に示した連結の一つを組み込んだ分解性リンカーである。好ましい一実施形態において、Lk1aは上記に示すV基を表す。アスパルテートもしくはグルタメートまたは類似の残基のアミノ基は、任意の適切な手段によってPに結合することができ、例えば連結はアミド結合を介することができ、例えば上記の分岐基は-CO.CH2-基を介してPに結合し、
を有する。D'は、例えば、上述のようにメイタンシン、特にオーリスタチンであり得る。
((D'q'-Lk1')m-P)p-Lk2-Lk3a (VIII')
[式中、D'、q'、Lk1'、m、P、p、Lk2およびLk3は、上記に規定および好ましいと規定された意味を有する]
のコンジュゲート化試薬は新規であり、本発明の一部を形成する。それらは、式VIIIの試薬について上記した方法に準じて調製することができる。本発明のこの態様による特に好ましいコンジュゲート化試薬は、式:
1. 上記式I'のコンジュゲート。
2. D'は、細胞毒性薬である、項1に記載のコンジュゲート。
3. D'は、オーリスタチンまたはメイタンシンである、項1に記載のコンジュゲート。
4. D'は、その末端の窒素原子を介して結合されたモノメチルオーリスタチンEまたはモノメチルオーリスタチンFである、項3に記載のコンジュゲート。
5. オーリスタチンは、その末端の窒素原子を介して結合されたモノメチルオーリスタチンEである、項4に記載のコンジュゲート。
6. Lk1'は、分解性リンカーである、項1〜5のいずれか一項に記載のコンジュゲート。
7. Lk1'は、以下の基:
の1つを含む、項6に記載のコンジュゲート。
8. 1Lk1'は、
9. Lk1'は、式:
の要素を含む、項1〜8のいずれか一項に記載のコンジュゲート。
10. 式:
を有する項1〜5のいずれか一項に記載のコンジュゲート;およびAbが〜X-基の2、3または4コピーを保有する等価構造。
11. Pは結合を表すか、またはPは-P1-NH-(ここでP1は2〜10のエチレングリコール単位を含む)を表す、項1〜10のいずれか一項に記載のコンジュゲート。
12. Pは、ポリエチレングリコールを表す、項1〜11のいずれか一項に記載のコンジュゲート。
13. Lk3のフェニル基Phは置換されていない、項1〜12のいずれか一項に記載のコンジュゲート。
14. Yは、式:
15. Abは、完全長抗体または完全長抗体の抗原結合領域を含む抗体フラグメントを表す、項1〜14のいずれか一項に記載のコンジュゲート。
16. Abは、IgG1もしくはIgG4またはIgG1もしくはIgG4のフラグメントを表す、項1〜15のいずれか一項に記載のコンジュゲート。
17. 項1〜16のいずれか一項に記載のコンジュゲートの調製方法であって、結合タンパク質における1つまたは複数のジスルフィド結合を還元する工程と、続けて一般式:
((D'q'-Lk1')m-P)p-Lk2-Lk3a (VIII')
[式中、D'、Lk1'、P、Lk2ならびにm、pおよびq'は項1に規定した意味を有し、
Lk3aは式:
-CO-Ph-Xa-Ya (IX)
{式中、Phは請求項1で規定した意味を有し、XaはCO基を表し、Yaは基:
の基を表す]
のコンジュゲート化試薬と反応させる工程と、場合により前記最初に形成されたCO基Xを還元してCH.OH基Xを有するコンジュゲートを得る工程とを含む、方法。
18. Yaは、
19. 一般式:
((D'q'-Lk1')m-P)p-Lk2-Lk3a (VIII')
[式中、D'は項1〜5のいずれか一項で示された意味を有し、Lk1'は項1および6〜9のいずれか一項に規定の意味を有し、Pは項1、10および11のいずれか一項に規定の意味を有し、Lk2、m、pおよびqは項1に規定の意味を有し、Lk3aは式:
-CO-Ph-Xa-Ya (IX)
{式中、Phは項1または項10で規定した意味を有し、XaはCO基を表し、Yaは基:
の基を表す]
の化合物。
19. Yaは、
20. 項1〜15のいずれか一項に記載のコンジュゲートと、医薬的に許容される担体と、場合によりさらなる治療薬とを含む、医薬組成物。
21. 治療で使用するための、項1〜15のいずれか一項に記載のコンジュゲートまたは項20に記載の組成物。
22. 医薬的有効量の項1〜15のいずれか一項に記載のコンジュゲートまたは項20に記載の組成物を患者に投与する工程を含む、患者の処置方法。
HATU(5mg)を、Na2CO3(3mg)と、H2N-val-cit-PAB-MMAE(11mg)と、ジクロロメタンおよびDMF(1mL)の無水混合物中の工程1生成物(35mg)との撹拌懸濁液に添加し、アルゴン雰囲気下で2日間撹拌した。ジクロロメタンを真空下で除去し、反応混合物を、工程1に記載の方法と同様の方法で冷アセトン(3×5mL)からの沈澱により精製した。固体を真空乾燥させて、ビス-スルホン-PEG(5kDa)-MMAE3を無色の非晶質固体(42mg、95%)として得た。診断シグナル
4-[2,2-ビス[(p-トリルスルホニル)-メチル]アセチル]安息香酸-N-ヒドロキシスクシンイミジルエステル(35mg)を、炭酸ナトリウム(3mg)およびNH2-val-cit-PAB-MMAE(35mg)のDCM-DMF無水混合物(3:1、1mL)の撹拌懸濁液に添加し、アルゴン雰囲気下で24時間撹拌した。生成物を、カラムクロマトグラフィーによりジクロロメタン-メタノール(95:5、v/v)で溶出して精製し、ビス-スルホン-MMAE5を無色の非晶質固体(22mg、33%)として得た。m/z M+Na 1629.5: 診断シグナル
抗体コンジュゲートが高レベルの均質性と低い平均DARで製造され得ることを実証するために、それぞれ1つの重鎖間ジスルフィド結合を有する2つの改変抗体変異体を、親抗体配列のPCRをベースとする部位特異的変異誘発によって作製した。これらの抗体変異体および親抗体を、ジスルフィド結合由来の2つのシステイン残基間に架橋を形成する実施例1で調製したコンジュゲート化試薬(ビス-スルホン-PEG(24)-val-cit-PAB-MMAE1)と反応させた。
ヒトIgG1(κ)フレームワークに基づき生成したヒト化抗Her2受容体モノクローナル抗体変異体(トラスツズマブ)をコードする親抗体DNA配列の構築は、以前にCarter P.ら、Proc. Natl Acad. Sci. USA、89、4285〜4289頁(1992)に記載されており、この文献で抗体はhumAb4D5-8として言及されている。本実験の目的のために、重鎖アミノ酸配列の359位と361位のアミノ酸をAspとLeuでそれぞれ置換した(E359DおよびM361L)。また本実験で使用される親抗体の軽鎖および重鎖アミノ酸配列は、それぞれ配列番号1および2によって本明細書に示される。親抗体のヒンジ領域における2つのシステイン(ヒンジ領域配列:PKSCDKTHTCPPCP)は、抗体の2つの重鎖間に鎖間ジスルフィド結合を形成する。これらのシステイン残基は、EUインデックス番号方式によるIgG1の226位および229位に相当し、配列番号2の229残基および232残基である。
抗体変異体と、鎖間ジスルフィド結合あたり1、1.5または2当量の高分子コンジュゲーション試薬ビス-スルホン-PEG(24)-val-cit-PAB-MMAE1とのコンジュゲーションを、抗体還元後に実施した。還元反応を、4.7mg/mL抗体濃度で、10mM DTTを使用して1時間、22℃または40℃で実施した。各抗体変異体に対してバッファー交換を行い、過剰の還元剤を除去した。高分子コンジュゲーション試薬を、コンジュゲーションの直前に50%アセトニトリル水溶液(pH8)で調製した。コンジュゲーション中の抗体濃度は3mg/mLであり、反応を一晩(16時間)、40℃または22℃で行った。コンジュゲーション反応の反応条件を以下のTable 1(表1)に示す。
実施例4において、単一のヒンジ-ジスルフィド変異体の最も低い平均DARは、40℃の場合(反応1および7)ならびに22℃の場合(反応4および10)の両方で、鎖間ジスルフィド結合あたり1当量の高分子コンジュゲーション試薬を使用するときに得られた。これらの結果と親抗体を使用して取得可能な抗体の結果とを比較するために、親抗体をジスルフィド結合あたり1当量の高分子コンジュゲーション試薬を使用して実施例4に設定された条件でコンジュゲートした。
4種のトラスツズマブ-MMAEコンジュゲートを調製した。2種のコンジュゲートは、ビス-スルホン-PEG(24)-val-cit-PAB-MMAE1(実施例1)からトラスツズマブ抗体[ハーセプチン(登録商標)]を使用して調製し、精製後、DAR-2およびDAR44コンジュゲートを得た。残りの2種のコンジュゲートは、比較可能なマレイミド系試薬(H2N-val-cit-PAB-MMAEから1と同様の方法で調製したmal-val-cit-PAB-MMAE)から調製し、精製DAR-2およびDAR-4コンジュゲートを得た。
トラスツズマブ-MMAEコンジュゲートを、ビススルホン試薬1または比較可能なマレイミド試薬(実施例6)のいずれかから調製し、両方のコンジュゲートを精製して、抗体あたり4つの薬物分子を付加させた(DAR4)。コンジュゲートをIgG枯渇血清(BBI溶液、SF142-2)と混合し、コンジュゲートの最終濃度を1mg/mLにした。アジ化ナトリウムを添加し(最終濃度1mM)、次いで混合物をアリコートに分割した。2つのアリコートは直ぐに-80℃で凍結した。残りのアリコートは37℃で維持し、120時間後に2つのアリコートを取り出して-80℃の冷凍庫に移した後、解析した。冷凍アリコートを、ProPac(登録商標)2.1mm×100mmのHIC-10カラム(Fisher Scientific社)に関して実施例6に記載された方法を使用して分析的疎水性相互作用クロマトグラフィーによって分析した。
トラスツズマブ(pH7.5の20mMリン酸ナトリウム、150mM NaCl、20mM EDTA中5.2mg/mLで0.768mL)溶液に、5mM TCEP溶液(0.032mL)を添加し、得られた混合物を40℃で1時間インキュベートした。TCEP処理抗体を室温に冷却し、pH7.5の20mMリン酸ナトリウム、150mM NaClおよび20mM EDTAを使用して4.44mg/mLに希釈した。次いで、ビス-スルホン-dPEG(24u)-val-cit-PAB-MMAE溶液(0.100mL、4.4mg/mL)の50%(v/v)MeCNおよび50%(v/v)20mMリン酸ナトリウム溶液(pH7.5)、150mM NaClならびに20mM EDTAを抗体溶液に添加した。得られたコンジュゲーション反応混合物を混合し、22℃で22時間インキュベートした。22時間後、50mM N-アセチル-L-システイン(0.064mL、3.0mM)を添加し、得られた混合物をさらに1時間、22℃でインキュベートした。反応サンプルを、分析HICにより、TOSOH TSK-ゲル ブチル-NPR 35×4.6mmカラムを使用して分析した。薬物と抗体のUV最大吸光度の比とピーク溶出の順序によって同定される分離したDAR変異体それぞれについての面積を棒グラフでプロットした。結果を図5に示す。図5において、主生成物(>73%)はDAR-4コンジュゲートである。
トラスツズマブMMAEコンジュゲートを、実施例8と同様にして、但しスケールを5mgのトラスツズマブに増加させ、N-アセチルL-システインインキュベーション工程を含めずに作製した。反応混合物をAKTAプライムシステムに結合させたToyoPearl Phenyl 650S樹脂充填1mLカラムを用いて、バッファーA:50mMリン酸ナトリウム、2.0M NaCl pH7.0およびバッファーB:80% 50mMリン酸ナトリウム、pH7.0の20%イソプロパノールで平衡化させて分取HICにより精製した。コンジュゲーション混合物を等量の4.0M NaClの50mMリン酸ナトリウム(pH7.0)と混合し、カラム上に1mL/分のバッファーAで注入した。次いで、DAR4サンプルを0-100%のバッファーB勾配を使用して溶出した。DAR4種が溶出し始めた時、勾配を保持し、UVトレースが、勾配が続くベースラインに戻るまで保持した。溶出ピークの画分を回収し、選択し、TOSOH TSKゲルButhyl-NPR 35×4.6mmのカラムを使用して分析的HICにより分析した。DAR4を含有する画分(純度>90%)を合わせ、HiPrep(商標)26/10脱塩カラムを使用してPBS pH7.4にバッファー交換し、VivaSpin 20(10kDa MWCO PES膜)濃縮機で4000×g、室温で濃縮した。濃縮DAR4サンプルを次いで滅菌条件下で濾過し、-80℃の冷凍庫で急速冷凍した。最終サンプルをブラッドフォード分析によって定量し、非還元SDS-PAGEおよび分析的HICによって分析し、インビトロ評価に用いた。
H2N-L-α-アミノアジピン酸-ビス-[val-cit-PAB-MMAE]5c(7mg)および公知の4-[2,2-ビス[(p-トリルスルホニル)-メチル]アセチル]安息香酸(6mg)を含有する無水ジメチルホルムアミド(0.5mL)中の撹拌溶液に、1-[ビス(ジメチルアミノ)メチレン]-1H-1,2,3-トリアゾロ[4,5-b]ピリジニウム3-オキシドヘキサフルオロホスフェート(HATU)(1.4mg、14mgを含有させた100μLのDMFストック溶液10μL)を添加し、溶液を5分間、0℃で撹拌した。次いでN-メチルモルホリン(NMM)[0.37μL、(37μLを含有する963μLのDMFストック溶液10μL)]に添加し、溶液を撹拌した。1時間の時間間隔ではHATU[1.4mg(ストック溶液10μL)]およびNMM[0.37μl(ストック溶液10μL)]の追加分を、合計で3回の添加となるまで加えた。次いで材料を逆相C18-カラムクロマトグラフィーによりバッファーA(v/v):水:5%アセトニトリル:0.1% TFAおよびバッファーB(v/v):0.1% TFA含有アセトニトリル(100:0v/vから0:100)で溶出して直接精製し、有機溶媒を真空下で除去し、水性溶媒を凍結乾燥により除去し、ビス-スルホン-PEG(24)-H2N-ビス-[val-cit-PAB-MMAE]6を無色の膜(3.3mg、31%)として単離した。m/z[M+H]2+ 1992。
不活性雰囲気下のビス-スルホン-ビス-PEG-酸15(24.0mg)の撹拌溶液に、H2N-val-cit-PAB-MMAE.TFA塩(37.2mg)および無水炭酸ナトリウム(2.7mg)の無水ジメチルホルムアミド(0.8mL)を添加した。次いで、1-[ビス(ジメチルアミノ)メチレン]-1H-1,2,3-トリアゾロ[4,5-b]ピリジニウム3-オキシドヘキサフルオロホスフェート(HATU)(9.6mg)を添加し、反応混合物を室温で撹拌した。42時間後、反応混合物を、酢酸(50μL)で酸性化し、次いで逆相C18カラムクロマトグラフィーによりバッファーA(v/v):水:5%アセトニトリル:0.1% TFAおよびバッファーB(v/v):0.1% TFA含有アセトニトリル(100:0v/vから0:100)で溶出して直接精製した。生成物画分については、有機溶媒を真空下で除去し、水性溶媒を凍結乾燥により除去した。さらに逆相シリカジオールカラムクロマトグラフィーを使用して酢酸エチル-イソプロパノール(100:0v/vから0:100v/v)で溶出して精製を行った。溶媒を真空下で除去し、ビス-スルホン-PEG(24)-ビス-[val-cit-PAB-MMAE]9を、無色の油(8.0mg、21%)として単離した。m/z M+Na 5104。
トラスツズマブのパパイン消化から得られたFab(2.14mg/mL、PBS中)の2つの5mLアリコートを、DTT(50μLの1M DTT溶液を添加)を用いて22℃で1時間、還元した。2つのPD-10カラムを使用して還元されたFab溶液を20mMリン酸ナトリウム、pH7.4(150mM NaClおよび20mM EDTA)にバッファー交換し、過剰のDTTを除去した。バッファー交換後、サンプル濃度をUVによって測定した。バッファー交換Fab溶液を、1.1mg/mL(3.6mL最終容積)に、pH7.4の20mMリン酸ナトリウム(150mM NaClおよび20mM EDTA)を用いて希釈した。
実施例12で調製された試薬6および試薬9抗体コンジュゲートのインビトロ有効性をHER-2受容体過剰発現がん細胞株の細胞増殖に対する阻害効果を実施例9の方法によって測定することによって決定した。
DAR=1、DAR=2、DAR=3およびDAR=4を有する4つの抗体薬物コンジュゲート(ADC)を、ビス-スルホン-PEG(24)-val-cit-PAB-MMAE試薬1とトラスツズマブとのコンジュゲーションから製造し、HICにより精製して、それぞれDAR単独の純度を95%超とした。次いで、各コンジュゲートを、以下のように異種移植試験で使用した。
親抗体および実施例4に記載の単一のヒンジジスルフィド変異体IgGC226Sの、鎖間ジスルフィド結合あたり1モル当量のコンジュゲーション試薬ビス-スルホン-PEG(24)-val-cit-PAB-MMAE1を抗体還元後に実施した(TCEP、鎖間ジスルフィドあたり1モル当量、15分、40℃)。コンジュゲーション試薬は、コンジュゲーションの直前にDMSO[5%(v/v)DMSOの反応溶液となる]で調製した。コンジュゲーション中の抗体濃度は4mg/mLであった。反応は40℃で一晩実施し、その後、反応混合物を10mM DHAを用いて1時間室温で処理し、次いでSDS-PAGEによって分析した。SDS-PAGEゲルを、InstantBlue(商標)で染色し、IMAGEQUANT(商標)LAS 4010機器(GE Healthcare社)を用いて染色してレーン内に存在する各種の%を決定した。SDS-PAGEの結果を図9に示す。図9において、Mで標識したレーンはNovex Protein標準(Invitrogen社)を示す。レーン1および2はそれぞれコンジュゲーション反応前および後のIgGC226Sの移動プロファイルを示す。レーン3および4は親抗体についての等価な反応を示す。抗体の重-重鎖間ジスルフィドがコンジュゲーション後に、ジスルフィド結合の交錯によるなど、共有結合により架橋されないとき、SDS-PAGEによって重鎖-軽鎖二量体(H+L)の80kDaマーカーのすぐ下にバンドが見える。対照的に重-重鎖間ジスルフィドがコンジュゲーション後に架橋されるとき、抗体重鎖-軽鎖四量体(2H+2L)の160kDaマーカーのすぐ上にバンドが見える。レーン2および4を比較すると、単一の重鎖間ジスルフィドを有するIgGC226Sにコンジュゲートすることにより、2つの重鎖間ジスルフィドを有する親抗体の場合と比較して、2つの重鎖間架橋の程度がより高くなり(それぞれ抗体の重鎖-軽鎖四量体が67%であるのに対して80%)、重鎖-軽鎖二量体形成の程度がより低くなる(それぞれ31%に対して17%)ことが理解できる。本方法はこのように重鎖間ジスルフィド結合の効率的な架橋によって抗体コンジュゲートの安定性を改善する。
Claims (20)
- 一般式:
(((Dq-Lk1)m-P)p-Lk2-Lk3)n-Ab (I)
[式中、Dは、オーリスタチン部分を表し;
qは、1〜10の整数を表し;
Lk1は、リンカーを表し;
mは、1〜10の整数を表し;
Pは、結合またはz価の基-P1-NH(ここでzは2〜11であり、P1は少なくとも1つのエチレン単位-CH2-CH2-またはエチレングリコール単位-O-CH2-CH2-を含む基である)を表し;
pは、1〜10の整数を表し;
Lk2は、結合またはy価のリンカー(ここでyは2〜11であり、1〜9のアスパルテートおよび/もしくはグルタメート残基からなる)を表し;
Lk3は、一般式:
-CO-Ph-X-Y- (II)
{式中、Phは場合により置換されたフェニル基であり;XはCO基またはCH.OH基を表し;Yは式:
のリンカーを表し;
Abは、標的上の結合パートナーに結合することができる結合タンパク質またはペプチドを表し、前記結合タンパク質またはペプチドは、結合タンパク質またはペプチドにおけるジスルフィド結合由来の2つの硫黄原子を介してLk3に結合されており;
nは、1〜sの整数(ここでsは、Lk3にコンジュゲートする前に結合タンパク質またはペプチドに存在しているジスルフィド結合の数である)を表し;
m、n、p、q、yおよびzの値は、コンジュゲートに1〜10個のD基が含まれるように選択される]
のオーリスタチン含有コンジュゲート。 - オーリスタチンは、その末端の窒素原子を介して結合されたモノメチルオーリスタチンEまたはモノメチルオーリスタチンFである、請求項1に記載のコンジュゲート。
- オーリスタチンは、その末端の窒素原子を介して結合されたモノメチルオーリスタチンEである、請求項1または請求項2に記載のコンジュゲート。
- Lk1は、分解性リンカーである、請求項1から3のいずれか一項に記載のコンジュゲート。
- Lk1は、以下の基:
の1つを含む、請求項4に記載のコンジュゲート。 - Lk1は、
- qは、2〜10の整数であり、Lk1は、1つもしくは複数のアスパルテートまたはグルタメート残基が組み込まれた多価のリンカーである、請求項1から3のいずれか一項に記載のコンジュゲート。
- Pは結合を表すか、またはPは-P1-NH-(ここでP1は2〜10のエチレングリコール単位を含む)を表す、請求項1から7のいずれか一項に記載のコンジュゲート。
- Pは、ポリエチレングリコールを表す、請求項1から7のいずれか一項に記載のコンジュゲート。
- Lk3のフェニル基Phは置換されていない、請求項1から9のいずれか一項に記載のコンジュゲート。
- Yは、式:
- Abは、完全長抗体または完全長抗体の抗原結合領域を含む抗体フラグメントを表す、請求項1から11のいずれか一項に記載のコンジュゲート。
- Abは、IgG1もしくはIgG4またはIgG1もしくはIgG4のフラグメントを表す、請求項12に記載のコンジュゲート。
- 請求項1から13のいずれか一項に記載のコンジュゲートの調製方法であって、結合タンパク質における1つまたは複数のジスルフィド結合を還元する工程と、続けて一般式:
((Dq-Lk1)m-P)p-Lk2-Lk3a (VIII)
[式中、D、Lk1、P、Lk2ならびにm、pおよびqは請求項1に規定の意味を有し;
Lk3aは式:
-CO-Ph-Xa-Ya (IX)
{式中、Phは請求項1に規定の意味を有し、XaはCO基を表し、Yaは基:
の基を表す]のコンジュゲート化試薬と反応させて、XがCOを表す式Iのコンジュゲートを生成する工程と、場合により前記最初に形成されたCO基Xを還元してCH.OH基Xを有するコンジュゲートを得る工程とを含む、方法。 - Yaは、
- 一般式:
((Dq-Lk1)m-P)p-Lk2-Lk3a (VIII)
[式中、Dは、請求項1から3のいずれか一項に規定の意味を有し;Lk1は、請求項1および4から7のいずれか一項に規定の意味を有し;Pは、請求項1、8および9のいずれか一項に規定の意味を有し;Lk2、m、pおよびqは請求項1に規定の意味を有し、Lk3aは、式:
-CO-Ph-Xa-Ya (IX)
{式中、Phは請求項1または請求項10に規定の意味を有し、XaはCO基を表し、Yaは基:
の基を表す]
の化合物。 - Yaは、
- 請求項1から13のいずれか一項に記載のコンジュゲートと、医薬的に許容される担体と、場合によりさらなる治療剤とを含む、医薬組成物。
- 治療において使用するための、請求項1から13のいずれか一項に記載のコンジュゲートまたは請求項18に記載の組成物。
- 増殖性疾患の治療のための医薬の製造における、請求項1から13のいずれか一項に記載のコンジュゲートの使用。
Applications Claiming Priority (9)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US201261717743P | 2012-10-24 | 2012-10-24 | |
US201261717710P | 2012-10-24 | 2012-10-24 | |
US61/717,710 | 2012-10-24 | ||
US61/717,743 | 2012-10-24 | ||
US201361811285P | 2013-04-12 | 2013-04-12 | |
US61/811,285 | 2013-04-12 | ||
GBPCT/GB2013/051593 | 2013-06-19 | ||
PCT/GB2013/051593 WO2013190292A2 (en) | 2012-06-19 | 2013-06-19 | Novel process for preparation of antibody conjugates and novel antibody conjugates |
PCT/GB2013/052661 WO2014064423A1 (en) | 2012-10-24 | 2013-10-11 | Drug-protein conjugates |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2015533847A JP2015533847A (ja) | 2015-11-26 |
JP6328648B2 true JP6328648B2 (ja) | 2018-05-23 |
Family
ID=50544085
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2015538560A Active JP6328648B2 (ja) | 2012-10-24 | 2013-10-11 | 新規薬物−タンパク質コンジュゲート |
Country Status (19)
Country | Link |
---|---|
US (2) | US20150290342A1 (ja) |
EP (2) | EP2911700B1 (ja) |
JP (1) | JP6328648B2 (ja) |
KR (1) | KR102209395B1 (ja) |
CN (1) | CN104870021B (ja) |
AU (1) | AU2013336409B2 (ja) |
BR (1) | BR112015008376A2 (ja) |
CA (1) | CA2884299A1 (ja) |
DK (1) | DK2911700T5 (ja) |
ES (1) | ES2623209T3 (ja) |
HK (1) | HK1208187A1 (ja) |
IL (1) | IL237672B (ja) |
IN (1) | IN2015DN02349A (ja) |
MX (1) | MX2015005122A (ja) |
MY (1) | MY169147A (ja) |
RU (1) | RU2015119561A (ja) |
SG (1) | SG11201501618WA (ja) |
WO (1) | WO2014064423A1 (ja) |
ZA (1) | ZA201501642B (ja) |
Families Citing this family (21)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
KR20160018579A (ko) * | 2013-06-04 | 2016-02-17 | 싸이톰스 테라퓨틱스, 인크. | 활성화가능 항체를 접합하기 위한 조성물 및 방법 |
HUE051389T2 (hu) | 2013-10-15 | 2021-03-01 | Seagen Inc | Pegilezett gyógyszer-linkerek ligandum-gyógyszer konjugátum javított farmakokinetikájához |
EP3145552B1 (en) * | 2014-05-23 | 2020-03-04 | Novartis AG | Methods for making conjugates from disulfide-containing proteins |
CN113332449B (zh) * | 2014-06-12 | 2023-12-22 | 石药集团巨石生物制药有限公司 | 酶法制备同质的抗体-药物缀合物 |
US10835616B2 (en) | 2014-10-14 | 2020-11-17 | Polytherics Limited | Process for the conjugation of a peptide or protein with a reagent comprising a leaving group including a portion of PEG |
ES2960741T3 (es) * | 2014-10-24 | 2024-03-06 | Abzena Uk Ltd | Conjugados y reactivos de conjugación |
GB201419108D0 (en) | 2014-10-27 | 2014-12-10 | Glythera Ltd | Materials and methods relating to linkers for use in antibody drug conjugates |
TWI660741B (zh) | 2015-11-03 | 2019-06-01 | 財團法人工業技術研究院 | 抗體藥物複合物及其製造方法 |
US11793880B2 (en) | 2015-12-04 | 2023-10-24 | Seagen Inc. | Conjugates of quaternized tubulysin compounds |
US11229708B2 (en) | 2015-12-04 | 2022-01-25 | Seagen Inc. | Conjugates of quaternized tubulysin compounds |
WO2017161206A1 (en) | 2016-03-16 | 2017-09-21 | Halozyme, Inc. | Conjugates containing conditionally active antibodies or antigen-binding fragments thereof, and methods of use |
SG11201807827VA (en) | 2016-03-25 | 2018-10-30 | Seattle Genetics Inc | Process for the preparation of pegylated drug-linkers and intermediates thereof |
WO2017178828A1 (en) | 2016-04-14 | 2017-10-19 | Polytherics Limited | Conjugates and conjugating reagents comprising a linker that includes at least two (-ch2-ch2-0-) units in a ring |
GB201608936D0 (en) | 2016-05-20 | 2016-07-06 | Polytherics Ltd | Novel conjugates and novel conjugating reagents |
WO2017212250A1 (en) * | 2016-06-06 | 2017-12-14 | Polytherics Limited | Antibodies, uses thereof and conjugates thereof |
GB201614162D0 (en) * | 2016-08-18 | 2016-10-05 | Polytherics Ltd | Antibodies, uses thereof and conjugates thereof |
JP2020512312A (ja) | 2017-03-24 | 2020-04-23 | シアトル ジェネティックス, インコーポレイテッド | グルクロニド薬物−リンカーの調製のためのプロセスおよびその中間体 |
GB201820864D0 (en) * | 2018-12-20 | 2019-02-06 | J A Kemp | Antibody-drug conjugates |
CN114502200A (zh) * | 2020-04-15 | 2022-05-13 | 深圳康源久远生物技术有限公司 | 抗体药物缀合物 |
KR20230159463A (ko) * | 2021-03-19 | 2023-11-21 | 선전 엔듀어링 바이오테크 리미티드 | Cd3 및 cd19에 대해 이중 특이성을 갖는 페길화된 t 세포 인게이저 |
WO2023141855A1 (en) * | 2022-01-27 | 2023-08-03 | Glyco-Therapy Biotechnology Co., Ltd. | Protein conjugates with multiple payloads and methods for making the same |
Family Cites Families (11)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
GB0316294D0 (en) | 2003-07-11 | 2003-08-13 | Polytherics Ltd | Conjugated biological molecules and their preparation |
BR122018071968B8 (pt) | 2003-11-06 | 2021-07-27 | Seattle Genetics Inc | conjugado de anticorpo-droga, composição farmacêutica, artigo de manufatura e uso de um conjugado de anticorpo-droga |
BRPI0617546A2 (pt) * | 2005-09-26 | 2011-07-26 | Medarex Inc | conjugado de fÁrmaco-anticorpo, formulaÇço farmacÊutica, mÉtodo para matar uma cÉlula de tumor, mÉtodo para retardar ou interromper o crescimento de um tumor em um sujeito mamÍfero e composto |
EP2211904B1 (en) * | 2007-10-19 | 2016-08-17 | Seattle Genetics, Inc. | Cd19 binding agents and uses thereof |
EP2842575B1 (en) | 2008-03-18 | 2017-09-27 | Seattle Genetics, Inc. | Auristatin drug linker conjugates |
EP2276506A4 (en) * | 2008-04-30 | 2014-05-07 | Immunogen Inc | EFFICIENT CONJUGATES AND HYDROPHILIC BINDER |
US9005598B2 (en) | 2009-03-04 | 2015-04-14 | Polytherics Limited | Conjugated proteins and peptides |
CN102471380B (zh) * | 2009-04-01 | 2015-01-14 | 霍夫曼-拉罗奇有限公司 | 抗FcRH5抗体和免疫偶联物及使用方法 |
AR078471A1 (es) * | 2009-10-02 | 2011-11-09 | Sanofi Aventis | COMPUESTOS MAITANSINOIDES Y EL USO DE ESTOS PARA PREPARAR CONJUGADOS CON UN ANTICUERPO LOS CUALES SE UTILIZAN COMO AGENTES ANTICANCERIGENOS Y EL PROCEDIMIENTO DE PREPARACIoN DE ESTOS CONJUGADOS |
RU2620864C2 (ru) * | 2012-04-25 | 2017-05-30 | Конинклейке Филипс Н.В. | Система и способ для определения местоположения градиентной катушки |
IN2014DN10428A (ja) * | 2012-06-19 | 2015-08-21 | Polytherics Ltd |
-
2013
- 2013-10-11 IN IN2349DEN2015 patent/IN2015DN02349A/en unknown
- 2013-10-11 EP EP13786530.9A patent/EP2911700B1/en active Active
- 2013-10-11 JP JP2015538560A patent/JP6328648B2/ja active Active
- 2013-10-11 BR BR112015008376A patent/BR112015008376A2/pt not_active Application Discontinuation
- 2013-10-11 MX MX2015005122A patent/MX2015005122A/es unknown
- 2013-10-11 EP EP16203350.0A patent/EP3159013A1/en not_active Withdrawn
- 2013-10-11 CA CA2884299A patent/CA2884299A1/en not_active Abandoned
- 2013-10-11 DK DK13786530.9T patent/DK2911700T5/en active
- 2013-10-11 US US14/437,537 patent/US20150290342A1/en not_active Abandoned
- 2013-10-11 RU RU2015119561A patent/RU2015119561A/ru unknown
- 2013-10-11 CN CN201380055880.6A patent/CN104870021B/zh active Active
- 2013-10-11 MY MYPI2015701285A patent/MY169147A/en unknown
- 2013-10-11 KR KR1020157011427A patent/KR102209395B1/ko active IP Right Grant
- 2013-10-11 WO PCT/GB2013/052661 patent/WO2014064423A1/en active Application Filing
- 2013-10-11 AU AU2013336409A patent/AU2013336409B2/en active Active
- 2013-10-11 ES ES13786530.9T patent/ES2623209T3/es active Active
- 2013-10-11 SG SG11201501618WA patent/SG11201501618WA/en unknown
-
2015
- 2015-03-10 ZA ZA2015/01642A patent/ZA201501642B/en unknown
- 2015-03-11 IL IL237672A patent/IL237672B/en active IP Right Grant
- 2015-09-11 HK HK15108932.7A patent/HK1208187A1/xx unknown
-
2021
- 2021-09-17 US US17/477,565 patent/US20220062436A1/en active Pending
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
CA2884299A1 (en) | 2014-05-01 |
MY169147A (en) | 2019-02-18 |
ZA201501642B (en) | 2016-01-27 |
EP2911700B1 (en) | 2017-02-08 |
AU2013336409B2 (en) | 2017-08-03 |
DK2911700T5 (en) | 2017-05-22 |
MX2015005122A (es) | 2015-10-29 |
HK1208187A1 (en) | 2016-02-26 |
EP2911700A1 (en) | 2015-09-02 |
DK2911700T3 (en) | 2017-05-15 |
CN104870021B (zh) | 2018-03-13 |
KR20150103656A (ko) | 2015-09-11 |
RU2015119561A (ru) | 2016-12-20 |
WO2014064423A1 (en) | 2014-05-01 |
US20150290342A1 (en) | 2015-10-15 |
IL237672A0 (en) | 2015-04-30 |
CN104870021A (zh) | 2015-08-26 |
JP2015533847A (ja) | 2015-11-26 |
SG11201501618WA (en) | 2015-04-29 |
IL237672B (en) | 2018-02-28 |
BR112015008376A2 (pt) | 2017-09-26 |
IN2015DN02349A (ja) | 2015-08-28 |
EP3159013A1 (en) | 2017-04-26 |
ES2623209T3 (es) | 2017-07-10 |
AU2013336409A1 (en) | 2015-04-02 |
KR102209395B1 (ko) | 2021-01-28 |
US20220062436A1 (en) | 2022-03-03 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP6328648B2 (ja) | 新規薬物−タンパク質コンジュゲート | |
JP6328649B2 (ja) | 薬物−タンパク質コンジュゲート | |
JP6832621B2 (ja) | 抗体薬物コンジュゲートと共に使用する安定性調節用リンカー | |
WO2020090979A1 (ja) | 抗体に対する親和性物質、切断性部分および反応性基を有する化合物またはその塩 | |
KR102342935B1 (ko) | 항체-약물 접합체 및 면역독소 | |
KR20140139480A (ko) | 항체-약물 접합체 및 관련 화합물, 조성물, 및 방법 | |
US20150125473A1 (en) | Novel process for preparation of antibody conjugates and novel antibody conjugates | |
KR102342934B1 (ko) | 항체-약물 접합체 및 면역독소 | |
TW201625315A (zh) | Her2抗體-藥物共軛物 | |
JP2021513844A (ja) | グリピカン3抗体およびそのコンジュゲート | |
AU2015340370A1 (en) | Materials and methods relating to linkers for use in protein drug conjugates | |
NZ728857B2 (en) | Materials and methods relating to linkers for use in protein drug conjugates | |
BR112016018005B1 (pt) | Conjugados anticorpo-droga e imunotoxinas |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20161004 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20170828 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20171120 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A821 Effective date: 20171120 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20180326 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20180418 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 6328648 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |