JP6265025B2 - エストロゲン様作用剤 - Google Patents
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Description
しかしながら、エストロゲン投与によるホルモン療法には、副作用があることからその投与の調整が非常に難しいという問題があり、また医師の管理化で行わなければならないという問題もあった。
しかしながら、これら特許文献に記載の抽出物においては、安定して十分な効果を得られるものが無いのが現状であった。
すなわち本発明は、陽光桜(Cerasus ‘Yoko’)の葉または花の抽出物を含有するエストロゲン様作用剤である。
また、桜の樹皮の抽出物がエストロゲン受容体β(ERβ)結合能(エストロゲン様作用)を有することが報告されている(特許文献4および非特許文献1)。しかしながら、これら抽出物は、本発明で用いられる陽光桜(Cerasus ‘Yoko’)の葉または花の抽出物とは、抽出部位の点で異なる。
すなわち、本発明で用いられる陽光桜(Cerasus ‘Yoko’)の葉または花の抽出物については、エストロゲン様作用に関する報告例がないことから、かかる抽出物がエストロゲン様作用を有することを見出して完成された本発明のエストロゲン様作用剤は新規性かつ進歩性を具備するものである。
本発明に用いられる陽光桜は、バラ科サクラ属に属する落葉性の植物であり、学名はCerasus ‘Yoko’と呼ばれている。カンヒザクラ(Prunus campanulata)に天城吉野(Prunus x yedoensis‘Amagi-yoshino ’)を交配した栽培品種(1981年に種苗法による品種登録が行われている。)として作られ、「天地に恵みを与える太陽」という意味を持つ「陽光」と名づけられた。大輪で紅色の花が咲くので人目をよく引き、病気に強く、厳しい気候にも耐えうる特長を持ち、平和の象徴として国内だけでなく世界各地へ寄付されている桜として知られている。花は一重咲きで、その花径は3. 8〜4. 6cmであり、花弁数は5枚である。また、萼片に鋸歯はなく、萼筒は長鐘形で小花柄には毛が多い。葉は楕円形で、互い違いに生え(互生)、葉の先は尾状に尖り、縁には鋸歯がある。
抽出に用いられる溶媒としては、炭化水素化合物、エステル、ケトン、エーテル、ハロゲン化炭化水素、水溶性のアルコール類および水などが挙げられる。好ましくは水、低級アルコール、多価アルコールの中から選ばれる1種または2種以上の溶媒であり、更に好ましくは水、エタノール、1,3−ブチレングリコールの中から選ばれる1種または2種以上の溶媒である。抽出に用いられる溶媒の量は、陽光桜の葉の乾燥物もしくは花の乾燥物、またはこれら混合物1質量部に対して、例えば、1〜100質量部、好ましくは5〜40質量部である。
抽出物は、例えば、陽光桜の葉または花に抽出溶媒を加えて、室温にて1時間以上、好ましくは1日以上、特に好ましくは5〜10日間浸漬し、ろ過する抽出方法を採用することで抽出液として得ることができる。得られた抽出液は、そのまま用いてもよく、あるいは溶媒留去により濃縮したり、カラムクロマトグラフィーや溶媒分画等の処理により精製したりしてもよい。
本発明のエストロゲン様作用剤は、上記の陽光桜の葉または花抽出物を含有するものであり、医薬品、化粧品類または食品に利用することができ、例えば、軟膏、クリーム、スプレー、オイル、貼付剤、錠剤、キャンディーなどに利用することができる。本発明のエストロゲン作用剤を医薬として適用する場合は、月経異常、更年期障害、骨粗鬆症などのエストロゲンの不足に起因する症状の防止または改善において有効に用いることができる。
乾燥した陽光桜の葉100gに1000gの50%エタノール水溶液を加えて室温で1週間抽出し、ろ過することにより陽光桜葉の抽出液を得た。この抽出液をロータリーエバポレーターで減圧下、60℃で乾燥濃縮し、陽光桜葉抽出物22.6g(乾固物)を得た。
乾燥した陽光桜の花100gに1000gの50%エタノール水溶液を加えて室温で1週間抽出し、ろ過することにより陽光桜花の抽出液を得た。この抽出液をロータリーエバポレーターで減圧下、60℃で乾燥濃縮し、陽光桜花抽出物33.2g(乾固物)を得た。
乾燥したソメイヨシノ(Prunus x yedoensis Matsum )の葉100gに1000gの50%エタノール水溶液を加えて室温で1週間抽出し、ろ過することによりソメイヨシノ葉の抽出液を得た。この抽出液をロータリーエバポレーターで減圧下、60℃で乾燥濃縮し、ソメイヨシノ葉抽出物21.3g(乾固物)を得た。
乾燥したサトザクラ(Prunus lannesiana )の花100gに1000gの50%エタノール水溶液を加えて室温で1週間抽出し、ろ過することによりサトザクラ花の抽出液を得た。この抽出液をロータリーエバポレーターで減圧下、60℃で乾燥濃縮し、サトザクラ花抽出物20.8g(乾固物)を得た。
乾燥した陽光桜の樹皮100gに1000gの50%エタノール水溶液を加えて60℃で10時間抽出し、ろ過することにより陽光桜樹皮の抽出液を得た。この抽出液をロータリーエバポレーターで減圧下、60℃で乾燥濃縮し、陽光桜樹皮抽出物4.6g(乾固物)を得た。
乾燥したプエラリアミリフィカ(Pueraria mirifica )の根100gに1000gの50%エタノール水溶液を加えて室温で1週間抽出し、ろ過することによりプエラリアミリフィカ根の抽出液を得た。この抽出液をロータリーエバポレーターで減圧下、60℃で乾燥濃縮し、プエラリアミリフィカ根抽出物4.0g(乾固物)を得た。
乾燥した大豆(Glycine max )100gに1000gの50%エタノール水溶液を加えて室温で1週間抽出し、ろ過することにより大豆の抽出液を得た。この抽出液をロータリーエバポレーターで減圧下、60℃で乾燥濃縮し、大豆抽出物10.2g(乾固物)を得た。
上記の陽光桜葉抽出物、陽光桜花抽出物、ソメイヨシノ葉抽出物、サトザクラ花抽出物、陽光桜樹皮抽出物、プエラリアミリフィカ根抽出物、大豆抽出物を用いて、下記の方法によりエストロゲン様作用活性を測定した。その結果を表1に示す。
なお、陽光桜葉抽出物および陽光桜花抽出物と比較して、ソメイヨシノ葉抽出物、およびサトザクラ花抽出物は品種の点で異なり、陽光桜樹皮抽出物は抽出部位の点で異なる。更に、プエラリアミリフィカ根抽出物、および大豆抽出物は、エストロゲン様作用活性を有することで知られる抽出物である。
エストロゲン様作用活性を、エストロゲン依存性細胞の増殖に対する影響を調べる方法(Invitrocell. Dev. Biol. 28A, 595-602, 1992)で、測定した。すなわち、ヒト乳がん細胞由来MCF−7細胞(理研細胞バンク、JCRB0134)を5%FBS(チャコール・デキストラン処理)、1mMピルビン酸ナトリウムを含有するEagle's MEM (フェノールレッド除去)を用いて、2.5×104個/mLの細胞密度で浮遊させた細胞懸濁培地0.2mLを96穴培養プレートに播種した。24時間培養後、表1に記載の設定濃度になるように培地で調整した各試料溶液20μLを96穴培養プレートに添加した。6日間培養後、MTT還元法にて生細胞数の測定を行った。エストロゲン様作用活性は、試料無添加で培養した生細胞数に対する、試料添加で培養した生細胞数の割合(相対値%)で表わした。
Claims (1)
- 陽光桜(Cerasus ‘Yoko’)の葉または花の抽出物を含有するエストロゲン様作用剤。
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