KR101917363B1 - 콩 발아배아 추출물을 포함하는 여성 갱년기 질환의 예방 또는 치료용 약학조성물 - Google Patents

Abstract

본 발명은 콩 발아배아 추출물 또는 그의 분획물을 포함하는 여성 갱년기 질환의 예방 또는 치료용 약학조성물, 상기 약학 조성물을 투여하는 단계를 포함하는 여성 갱년기 질환의 예방 또는 치료 방법 및 상기 추출물 또는 그의 분획물을 포함하는 여성 갱년기 질환의 예방 또는 개선용 식품조성물에 관한 것이다. 본 발명의 콩 발아배아 추출물은 여성 갱년기 질환의 원인이 되는 여성 호르몬 저하증을 개선시킬 뿐만 아니라, 이에 의하여 유발되는 다양한 증상인 골다공증, 비만, 고지혈증 등에 대하여도 개선효과를 나타내므로, 상기 여성 호르몬 저하증에 의하여 발병되는 여성 갱년기 질환의 예방, 개선 또는 치료를 위한 또는 식품 및 의약품의 개발에 널리 활용될 수 있을 것이다.

Description

콩 발아배아 추출물을 포함하는 여성 갱년기 질환의 예방 또는 치료용 약학조성물{A pharmaceutical composition comprising extract from germinated gemmule of bean for preventing or treating menopausal disorder}

본 발명은 콩 발아배아 추출물을 포함하는 여성 갱년기 질환의 예방 또는 치료용 약학조성물에 관한 것으로, 보다 구체적으로 본 발명은 콩 발아배아 추출물 또는 그의 분획물을 포함하는 여성 갱년기 질환의 예방 또는 치료용 약학조성물, 상기 약학 조성물을 투여하는 단계를 포함하는 여성 갱년기 질환의 예방 또는 치료 방법 및 상기 추출물 또는 그의 분획물을 포함하는 여성 갱년기 질환의 예방 또는 개선용 식품조성물에 관한 것이다.

여성의 경우, 폐경이 나타난 이후의 약 1년까지를 폐경이행기, 더 흔히는 갱년기라고 하며 그 기간은 일반적으로 평균 4~7년 정도이다. 대한폐경학회에 따르면 우리나라 50대 여성 중 약 89%가 갱년기 증상을 겪는다. 폐경은 포도당 대사, 지질 대사, 골 항상성 및 에너지 대사에 대한 장애를 나타내며(Tiano and Mauvais-Jarvis, 2012; Wildman and Sowers, 2011), 이로 인해 폐경기 여성에서 구체적으로 안면홍조, 발한, 비뇨생식기계의 위축에 따른 증상(질 건조감, 반복적인 질 감염과 요로계 감염으로 인한 질염, 방광염, 배뇨통, 급뇨), 정신적 불안정(집중장애 및 단기 기억장애, 불안과 신경과민, 기억력 감소), 피부관절계 변화(피부 건조와 위축, 근육통, 관절통), 골다공증의 진행으로 인한 골절의 증가, 체질량지수(BMI)의 증가 등과 같은 여성 갱년기 질환가 발생할 수 있다.

합성에스트로겐 호르몬제제의 투여는 이러한 장애들을 일부 해결할 수 있다고 알려져 있으나, 유방암, 자궁 내막암의 위험을 증가시키는 부작용이 있어 문제가 되고 있다. 이에 따라, 이소플라본, 플라보노이드, 리그난 등의 에스트로겐과 기능 및 구조가 유사한 식물 유래의 천연 에스트로겐인 피토에스트로겐(phytoestrogen)에 대한 관심이 높아지고 있다. 또한, 상기 이소플라보노이드와 같은 천연 화합물이 선택적 에스트로겐 수용체 조절제로 작용한다는 증거가 늘어감에 따라 여성 갱년기 질환를 예방, 개선 및 치료하기 위한 후보 물질로서 천연 약초에 대한 연구가 활발히 진행되어, 여성 갱년기장애 개선에 효과를 갖는 홍삼 복합물 조성물(한국공개특허 10-2006-0061323) 등이 개발된 바 있다. 그러나, 그들의 효능은 여전히 확신할 수 없는 실정이다(Cano et al., 2008; Somjen et al., 2008).

이에 따라, 갱년기 여성에 있어서 상기 조절제와 같은 활성을 지니면서도, 여성 갱년기 질환를 개선하는 피토에스트로겐을 포함하는 새로운 식물을 발굴하기 위한 연구가 활발히 진행되고 있다. 예를 들어, 한국등록특허 제1563577호에는 엉겅퀴 추출물을 유효성분으로 포함하는 갱년기 여성의 에스트로겐 저하증 개선 및 예방용 식품 조성물이 개시되어 있고, 한국등록특허 제1544532호에는 백수오, 참대, 갈근, 소엽, 도라지, 지실초, 감초, 별꽃, 생강, 대추, 진피, 천속단, 석창포, 복령, 맥문동, 녹각사 및 치자나무의 혼합 추출물을 포함하는 여성 갱년기 질환의 예방 또는 치료용 약학 조성물이 개시되어 있다.

이러한 배경하에서, 본 발명자들은 여성 갱년기 질환을 예방 또는 치료하기 위한 방법을 개발하고자 예의 연구 노력한 결과, 콩 발아배아 추출물 또는 그의 분획물이 여성 갱년지 질환의 원인이 되는 여성 호르몬의 수준을 증가시켜, 여성 갱년기 질환을 예방 또는 치료할 수 있음을 확인하고, 본 발명을 완성하였다.

본 발명의 하나의 목적은 콩 발아배아 추출물 또는 그의 분획물을 포함하는 여성 갱년기 질환의 예방 또는 치료용 약학조성물을 제공하는 것이다.

본 발명의 다른 목적은 상기 약학 조성물을 투여하는 단계를 포함하는 여성 갱년기 질환의 예방 또는 치료 방법을 제공하는 것이다.

본 발명의 또 다른 목적은 상기 추출물 또는 그의 분획물을 포함하는 여성 갱년기 질환의 예방 또는 개선용 식품조성물을 제공하는 것이다.

상기 목적을 달성하기 위한 일 실시양태로서, 본 발명은 콩 발아배아 추출물 또는 그의 분획물을 포함하는 여성 갱년기 질환 예방 또는 치료용 약학 조성물을 제공한다.

본 발명의 용어 "콩 발아배아"란, 콩에서 분리한 배아를 발아시킨 발아배아를 의미한다. 콩 발아배아의 제조방법은 본 발명자들의 선행연구에 의하여 공지된 바 있으며(한국공개특허 제2013-0057173호), 구체적으로 상기 콩 발아배아는 콩으로부터 분리된 배아를 발아시켜 수득하는 것일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다. 상기 콩 발아배아 추출물의 갱년기 증상 개선효과는 지금까지 전혀 알려져 있지 않았고, 본 발명자들에 의하여 최초로 규명되었다.

본 발명의 용어 "추출물"이란, 목적하는 물질을 다양한 용매에 침지한 다음, 상온 또는 가온상태에서 일정시간 동안 추출하여 수득한 액상성분, 상기 액상성분으로부터 용매를 제거하여 수득한 고형분 등의 결과물을 의미한다. 뿐만 아니라, 상기 결과물에 더하여, 상기 결과물의 희석액, 이들의 농축액, 이들의 조정제물, 정제물 등을 모두 포함하는 것으로 포괄적으로 해석될 수 있다.

본 발명에 있어서, 상기 추출물은 콩 발아배아 추출물을 의미한다. 상기 콩 발아배아 추출물은 상기 콩 발아배아의 식물전체, 이의 건조물, 가공물 등을 단독으로 또는 조합하여, 물 또는 다양한 유기용매 등으로 추출하여 수득할 수 있다. 이때, 사용되는 유기용매는 특별히 이에 제한되지 않으나, 바람직하게는 물, 극성용매 또는 비극성용매가 될 수 있고, 보다 바람직하게는 물, 탄소수 1 내지 4의 저급 알코올(메탄올, 에탄올, 프로판올 또는 부탄올 등), 이들의 혼합용매 등이 될 수 있으며, 가장 바람직하게는 에탄올 또는 그의 혼합용매를 사용할 수 있다. 또한, 상기 추출물을 수득하기 위한 방법 역시 특별히 이에 제한되지 않으나, 바람직하게는 상기 콩 발아배아의 식물전체, 이의 건조물, 가공물 등을 상기 용매에 침지하고, 10 내지 25℃의 상온에서 추출하는 냉침추출법, 40 내지 100℃로 가열하여 추출하는 가열추출법, 초음파를 가하여 추출하는 초음파추출법, 환류냉각기를 이용한 환류추출법 등의 방법을 사용할 수 있다.

본 발명의 용어 "분획물"이란, 다양한 구성성분을 포함하는 혼합물로부터 특정성분 또는 특정 그룹을 분리하는 분획방법에 의하여 얻어진 결과물을 의미한다.

본 발명에 있어서, 상기 분획물은 상기 콩 발아배아 추출물을 다양한 분획방법에 적용하여 수득한 분획물로 해석될 수 있다. 상기 추출물의 분획물은 상기 추출물을 다양한 분획방법에 적용하여 수득할 수 있는데, 상기 분획방법은 특별히 이에 제한되지 않으나, 다양한 용매를 처리하여 수행하는 용매 분획법, 일정한 분자량 컷-오프 값을 갖는 한외 여과막을 통과시켜 수행하는 한외여과 분획법, 다양한 크로마토그래피(크기, 전하, 소수성 또는 친화성에 따른 분리를 위해 제작된 것)를 수행하는 크로마토그래피 분획법 등이 될 수 있다. 특히, 상기 용매 분획법에 사용되는 용매는 특별히 이에 제한되지 않으나, 극성 용매 또는 비극성 용매를 사용할 수 있고, 바람직하게는 비극성 용매를 사용할 수 있다. 상기 용매 분획법은 비극성 수준이 높은 용매로부터 낮은 용매를 사용하여 상기 추출물을 순차적으로 분획하는 방식으로 수행될 수 있는데, 예를 들어 헥산 또는 에틸아세테이트를 이용하여 상기 추출물을 순차적으로 분획하는 방법을 사용할 수 있다.

본 발명의 콩 발아배아 추출물 또는 그의 분획물은 이소플라본(isoflavone) 또는 소야사포닌(soyasaponin)을 포함하는 것일 수 있다.

본 발명의 용어 "이소플라본(isoflavone)"이란, 에스트로겐과 비슷한 구조를 갖는 폴리페놀 화합물의 일종으로, 식물성 에스트로겐(phytoestrogen)이라고도 불린다. 상기 이소플라본은 체내 흡수율이 높으며, 에스트로겐 수용체와 결합하여 그 작용을 활성화시킨다. 상기 이소플라본은 특별히 이에 제한되지 않으나, 일 예로서, (E)-((2R,3S,4S,5R,6S)-3,4,5-trihydroxy-6-(3-(4-hydroxyphenyl)-4-oxo-4H-chromen-7-yloxy)-tetrahydro-2H-pyran-2-yl)methyl but-2-enoate, 5-Hydroxy-2-(4-hydroxyphenyl)-4-oxo-4H-chromen-7-yl 6-O-[(2E)-2-butenoyl]hexopyranoside 등이 될 수 있다.

본 발명의 용어 "소야사포닌(soyasaponin)"이란, 콩에 포함되어 있는 식물성 스테롤(phytosterol)의 일종으로, 스테로이드 또는 트리테르페노이드와 같은 아글리콘(Aglycone) 구조에 기초하여 복잡하고 다양한 분자 구조를 보인다. 상기 소야사포닌은 특별히 이에 제한되지 않으나, 일 예로서, Triacetyl soyasaponin Ab, Diacetyl soyasaponin Aa, Soyasaponin Ab, Soyasaponin Ae, Soyasaponin Af, Soyasaponin Aa, Soyasaponin Ac, Soyasaponin Ag, Soyasaponin Ad, Soyasaponin Ah, Soyasaponin Ba, Soyasaponin Bc, Soyasaponin Bb, Soyasaponin Bd, Soyasaponin Be, Soyasaponin βg, Soyasaponin βa, Soyasaponin γg 등이 될 수 있다.

본 발명의 용어 "여성 갱년기 질환"이란, 여성에게서 월경이 중단되는 시기인 갱년기에 생기는 다양한 이상 증상들을 나타내는 질환을 의미하며, 대체로 갱년기의 여성에게서 난소의 기능이 노화로 인해 저하되어 여성호르몬을 적게 내기 때문에 이러한 성호르몬의 불균형으로 인하여 발병된다고 알려져 있다.

상기 여성 갱년기 질환은 여성의 성호르몬인 에스트로겐의 분비 감소로 인한 증상을 나타내며, 상기 증상은 비만, 골다공증, 에너지 대사 장애 등의 증상을 부수적으로 수반할 수 있다.

따라서, 본 발명에 있어서, 상기 여성 갱년기 질환이란 특별히 이에 제한되지 않으나, 일 예로서, 여성 호르몬 저하증이 될 수 있고, 다른 예로서 에스트로겐 저하증이 될 수 있으며, 또 다른 예로서, 에스트로겐의 대표적인 호르몬인 에스트라디올 저하증이 될 수 있는데, 이러한 여성 갱년기 질환은 비만, 골다공증, 대사장애 등의 다양한 증상을 부수적으로 수반할 수 있다. 이처럼 여성 갱년기 질환는 여성 호르몬의 저하로 인하여 나타나는 질환으로서 다양한 부수적인 증상을 수반하지만, 상기 부수적으로 수반되는 증상에 의하여 본 발명에서 제공하는 여성 갱년기 질환이 정의되지는 않는다. 다시 말해서, 본 발명에서 제공하는 콩 발아배아 추출물 또는 그의 분획물이 임상적으로는 상기 부수적으로 수반되는 비만, 골다공증, 대사장애 등의 다양한 증상을 개선 또는 치료하는 효과를 나타낼 수 있으나, 이러한 효과는 여성 갱년기 증상에 의한 여성 호르몬의 감소를 억제하여 나타나는 간접적인 효과에 불과하다. 즉, 여성 갱년기 질환의 원인이 되는 여성 호르몬의 감소가 아닌 다른 원인에 의하여 발생되는 비만, 골다공증, 대사장애 등의 질환에 대하여 나타낼 수 있는 콩 발아배아 추출물 또는 그의 분획물의 효과는 본 발명에서 제공하는 효과와 구별되어야 한다.

본 발명의 용어, "예방"이란, 본 발명의 콩 발아배아 추출물 또는 그의 분획물을 포함하는 약학 조성물의 투여에 의해 여성 갱년기 질환을 억제시키거나 또는 지연시키는 모든 행위를 의미한다.

본 발명의 용어, "치료"란, 상기 약학 조성물의 투여에 의해 여성 갱년기 질환가 호전되거나 이롭게 변경되는 모든 행위를 의미한다.

본 발명의 약학 조성물은 총 조성물의 중량 대비 0.0001 내지 50 중량%로 포함할 수 있으며, 구체적으로 0.01 중량% 내지 10 중량%로 포함할 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.

상기 본 발명의 약학 조성물은 약학 조성물의 제조에 통상적으로 사용하는 약학적으로 허용가능한 담체, 부형제 또는 희석제를 추가로 포함할 수 있고, 상기 담체는 비자연적 담체(non-naturally occuring carrier)를 포함할 수 있다.

본 발명의 용어, "약학적으로 허용가능한"이란, 상기 조성물에 노출되는 세포나 인간에게 독성이 없는 특성을 나타내는 것을 의미한다.

구체적으로, 상기 약학 조성물은, 각각 통상의 방법에 따라 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 현탁액, 에멀젼, 시럽, 에어로졸 등의 경구형 제형, 외용제, 좌제 및 멸균 주사용액의 형태로 제형화하여 사용될 수 있다. 본 발명에서, 상기 약학 조성물에 포함될 수 있는 담체, 부형제 및 희석제로는 락토즈, 덱스트로즈, 수크로스, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨, 말티톨, 전분, 아카시아 고무, 알지네이트, 젤라틴, 칼슘 포스페이트, 칼슘 실리케이트, 셀룰로즈, 메틸 셀룰로즈, 미정질 셀룰로스, 폴리비닐 피롤리돈, 물, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 탈크, 마그네슘 스테아레이트 및 광물유를 들 수 있다. 제제화할 경우에는 보통 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 조제된다. 경구투여를 위한 고형제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제 등이 포함되며, 이러한 고형제제는 적어도 하나 이상의 부형제 예를 들면, 전분, 칼슘카보네이트(calcium carbonate), 수크로스(sucrose) 또는 락토오스(lactose), 젤라틴 등을 섞어 조제된다. 또한 단순한 부형제 이외에 마그네슘 스티레이트, 탈크 같은 윤활제들도 사용된다. 경구를 위한 액상 제제로는 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제 등이 해당되는 데 흔히 사용되는 단순희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다. 비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조 제제, 좌제가 포함된다. 비수성용제, 현탁제로는 프로필렌글리콜(propylene glycol), 폴리에틸렌 글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔(witepsol), 마크로골, 트윈(tween) 61, 카카오지, 라우린지, 글리세로제라틴 등이 사용될 수 있다.

다른 양태로서, 본 발명은 상기 약학 조성물을 여성 갱년기 질환이 발병되거나 또는 발병될 가능성이 있는 인간을 제외한 개체에 투여하는 단계를 포함하는 여성 갱년기 질환의 예방 또는 치료 방법을 제공한다.

이때, 상기 콩 발아배아, 그의 추출물, 그의 분획물, 여성 갱년기 질환, 예방 및 치료의 정의는 상기에서 설명한 바와 같다.

본 발명의 용어, "투여"란, 적절한 방법으로 개체에게 소정의 물질을 도입하는 것을 의미한다.

본 발명의 용어, "개체"란, 여성 갱년기 질환이 발병하였거나 발병할 수 있는 인간을 포함한 쥐, 생쥐, 가축 등의 모든 동물을 의미한다. 구체적인 예로, 인간을 포함한 포유동물일 수 있다.

본 발명의 여성 갱년기 질환의 예방 또는 치료 방법은 구체적으로, 인간을 제외한 개체에 콩 발아배아 추출물 또는 그의 분획물을 포함하는 여성 갱년기 질환의 예방 또는 치료용 약학 조성물을 약학적으로 유효한 양으로 투여하는 단계를 포함할 수 있다.

본 발명의 용어, "약학적으로 유효한 양"이란, 의학적 치료에 적용 가능한 합리적인 수혜/위험 비율로 질환을 치료하기에 충분하며 부작용을 일으키지 않을 정도의 양을 의미하며, 유효 용량 수준은 환자의 성별, 연령, 체중, 건강상태, 질병의 종류, 중증도, 약물의 활성, 약물에 대한 민감도, 투여 방법, 투여 시간, 투여 경로, 및 배출 비율, 치료 기간, 배합 또는 동시에 사용되는 약물을 포함한 요소 및 기타 의학 분야에 잘 알려진 요소에 따라 당업자에 의해 용이하게 결정될 수 있다.

구체적으로 본 발명의 조성물은 고형분을 기준으로 1일 0.0001 내지 100 mg/체중 kg으로, 더욱 구체적으로 0.001 내지 100 mg/체중 kg으로 투여할 수 있다. 투여는 상기 권장 투여량을 하루에 한 번 투여할 수도 있고, 수회 나누어 투여할 수도 있다.

본 발명의 여성 갱년기 질환의 예방 또는 치료 방법에서, 상기 조성물을 투여하는 투여 경로 및 투여 방식은 특별히 제한되지 않으며, 목적하는 해당 부위에 상기 조성물을 포함하는 조성물이 도달할 수 있는 한 임의의 투여 경로 및 투여 방식에 따를 수 있다. 구체적으로, 상기 조성물은 경구 또는 비경구의 다양한 경로를 통하여 투여될 수 있으며, 그 투여 경로의 비제한적인 예로는, 구강, 직장, 국소, 정맥내, 복강내, 근육내, 동맥내, 경피, 비측내 또는 흡입 등을 통하여 투여되는 것을 들 수 있다.

또 다른 양태로서, 본 발명은 콩 발아배아 추출물 또는 그의 분획물을 포함하는 여성 갱년기 질환의 예방 또는 개선용 식품 조성물을 제공한다.

이때, 상기 콩 발아배아, 그의 추출물, 그의 분획물, 여성 갱년기 질환 및 예방의 정의는 상기에서 설명한 바와 같다.

본 발명의 용어, "개선"이란, 본 발명의 콩 발아배아 추출물 또는 그의 분획물을 포함하는 조성물의 투여로 치료되는 상태와 관련된 파라미터, 예를 들면 증상의 정도를 적어도 감소시키는 모든 행위를 의미한다.

본 발명의 용어 "식품"이란, 육류, 소시지, 빵, 초콜릿, 캔디류, 스낵류, 과자류, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 아이스크림류를 포함한 낙농제품, 각종 스프, 음료수, 차, 드링크제, 알코올음료, 비타민 복합제, 건강 기능 식품 및 건강 식품 등이 있으며, 통상적인 의미에서의 식품을 모두 포함한다.

본 발명의 식품 조성물은, 일상적으로 섭취하는 것이 가능하기 때문에 높은 여성 갱년기 질환에 대한 개선 효과를 기대할 수 있으므로, 건강 증진 목적으로 매우 유용하게 사용될 수 있다.

상기 건강 기능(성) 식품(functional food)이란, 특정보건용 식품(food for special health use, FoSHU)과 동일한 용어로, 영양 공급 외에도 생체조절기능이 효율적으로 나타나도록 가공된 의학, 의료효과가 높은 식품을 의미한다. 여기서 '기능(성)'이라 함은 인체의 구조 및 기능에 대하여 영양소를 조절하거나 생리학적 작용 등과 같은 보건용도에 유용한 효과를 얻는 것을 의미한다. 본 발명의 식품은 당 업계에서 통상적으로 사용되는 방법에 의하여 제조가능하며, 상기 제조시에는 당 업계에서 통상적으로 첨가하는 원료 및 성분을 첨가하여 제조할 수 있다. 또한 상기 식품의 제형 또한 식품으로 인정되는 제형이면 제한 없이 제조될 수 있다. 본 발명의 식품용 조성물은 다양한 형태의 제형으로 제조될 수 있으며, 일반 약품과는 달리 식품을 원료로 하여 약품의 장기 복용 시 발생할 수 있는 부작용 등이 없는 장점이 있고, 휴대성이 뛰어나므로, 본 발명의 식품은 여성 갱년기 질환의 개선 효과를 증진시키기 위한 보조제로 섭취가 가능하다.

상기 건강 식품(health food)은 일반식품에 비해 적극적인 건강유지나 증진 효과를 가지는 식품을 의미하고, 건강보조식품(health supplement food)은 건강보조 목적의 식품을 의미한다. 경우에 따라, 건강 기능 식품, 건강식품, 건강보조식품의 용어는 호용된다.

구체적으로, 상기 건강 기능 식품은 본 발명의 화합물을 음료, 차류, 향신료, 껌, 과자류 등의 식품 소재에 첨가하거나, 캡슐화, 분말화, 현탁액 등으로 제조한 식품으로, 이를 섭취할 경우 건강상 특정한 효과를 가져오는 것을 의미하나, 일반 약품과는 달리 식품을 원료로 하여 약품의 장기 복용 시 발생할 수 있는 부작용이 없는 장점이 있다.

상기 식품 조성물은 생리학적으로 허용 가능한 담체를 추가로 포함할 수 있는데, 담체의 종류는 특별히 제한되지 않으며 당해 기술 분야에서 통상적으로 사용되는 담체라면 어느 것이든 사용할 수 있다.

또한, 상기 식품 조성물은 식품 조성물에 통상 사용되어 냄새, 맛, 시각 등을 향상시킬 수 있는 추가 성분을 포함할 수 있다. 예들 들어, 비타민 A, C, D, E, B1, B2, B6, B12, 니아신(niacin), 비오틴(biotin), 폴레이트(folate), 판토텐산(panthotenic acid) 등을 포함할 수 있다. 또한, 아연(Zn), 철(Fe), 칼슘(Ca), 크롬(Cr), 마그네슘(Mg), 망간(Mn), 구리(Cu), 크륨(Cr) 등의 미네랄; 및 라이신, 트립토판, 시스테인, 발린 등의 아미노산을 포함할 수 있다.

또한, 상기 식품 조성물은 방부제(소르빈산 칼륨, 벤조산나트륨, 살리실산, 데히드로초산나트륨 등), 살균제(표백분과 고도 표백분, 차아염소산나트륨 등), 산화방지제(부틸히드록시아니졸(BHA), 부틸히드록시톨류엔(BHT) 등), 착색제(타르색소 등), 발색제(아질산 나트륨, 아초산 나트륨 등), 표백제(아황산나트륨), 조미료(MSG 글루타민산나트륨 등), 감미료(둘신, 사이클레메이트, 사카린, 나트륨 등), 향료(바닐린, 락톤류 등), 팽창제(명반, D-주석산수소칼륨 등), 강화제, 유화제, 증점제(호료), 피막제, 검기초제, 거품억제제, 용제, 개량제 등의 식품 첨가물(food additives)을 포함할 수 있다. 상기 첨가물은 식품의 종류에 따라 선별되고 적절한 양으로 사용될 수 있다.

본 발명의 식품 조성물의 일 예로 건강음료 조성물로 사용될 수 있으며, 이 경우 통상의 음료와 같이 여러 가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로 함유할 수 있다. 상술한 천연 탄수화물은 포도당, 과당과 같은 모노사카라이드; 말토스, 슈크로스와 같은 디사카라이드; 덱스트린, 사이클로덱스트린과 같은 폴리사카라이드; 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨 등의 당알콜일 수 있다. 감미제는 타우마틴, 스테비아 추출물과 같은 천연 감미제; 사카린, 아스파르탐과 같은 합성 감미제 등을 사용할 수 있다. 상기 천연 탄수화물의 비율은 본 발명의 건강음료 조성물 100 mL 당 일반적으로 약 0.01 내지 0.04 g, 구체적으로 약 0.02 내지 0.03 g이 될 수 있다.

상기 외에 건강음료 조성물은 여러 가지 영양제, 비타민, 전해질, 풍미제, 착색제, 펙트산, 펙트산의 염, 알긴산, 알긴산의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알코올 또는 탄산화제 등을 함유할 수 있다. 그 밖에 천연 과일주스, 과일주스 음료, 또는 야채 음료의 제조를 위한 과육을 함유할 수 있다. 이러한 성분은 독립적으로 또는 혼합하여 사용할 수 있다. 이러한 첨가제의 비율은 크게 중요하진 않지만 본 발명의 건강음료 조성물 100 중량부당 0.01 ~ 0.1 중량부의 범위에서 선택되는 것이 일반적이다.

본 발명의 콩 발아배아 추출물은 여성 갱년기 질환의 원인이 되는 여성 호르몬 저하증을 개선시킬 뿐만 아니라, 이에 의하여 유발되는 다양한 증상인 골다공증, 비만, 고지혈증 등에 대하여도 개선효과를 나타내므로, 상기 여성 호르몬 저하증에 의하여 발병되는 여성 갱년기 질환의 예방, 개선 또는 치료를 위한 또는 식품 및 의약품의 개발에 널리 활용될 수 있을 것이다.

도 1은 조골세포에 대한 콩 발아배아 추출물의 독성을 보여주는 그래프이다.
도 2a는 에스트로겐 수용체를 과다하게 발현시키는 것으로 알려진 암세포주에서 에스트로겐 수용체 알파의 활성화에 대한 콩 발아배아 추출물의 효과를 분석한 결과를 나타내는 그래프이다.
도 2b는 에스트로겐 수용체를 과다하게 발현시키는 것으로 알려진 암세포주에서 에스트로겐 수용체 베타의 활성화에 대한 콩 발아배아 추출물의 효과를 분석한 결과를 나타내는 그래프이다.
도 2c는 에스트로겐 수용체의 신호전달 과정에 관여하는 단백질의 발현수준에 대한 콩 발아배아 추출물의 효과를 분석한 결과를 나타내는 그래프이다.
도 2d는 콩 발아배아 추출물이 처리된 암세포주에서 발현된 에스트로겐 수용체의 신호전달 과정에 관여하는 단백질의 발현수준을 정량분석한 결과를 나타내는 그래프이다.
도 2e는 여성 갱년기 질환 모델 마우스(OVX)를 이용하여, 여성 갱년기 질환을 유발하는 여성 호르몬 저하증에 대한 콩 발아배아 추출물의 효과를 분석한 결과를 나타내는 그래프이다.
도 3은 여성 갱년기 질환 모델 마우스를 이용하여, 여성 갱년기 질환에 의해 유발되는 골다공증에 대한 콩 발아배아 추출물의 효과를 분석한 결과를 나타내는 그래프이다.
도 4는 여성 갱년기 질환 모델 마우스를 이용하여, 여성 갱년기 질환에 의해 유발되는 비만에 대한 콩 발아배아 추출물의 효과를 분석한 결과를 나타내는 그래프이다.
도 5는 여성 갱년기 질환 모델 마우스를 이용하여, 여성 갱년기 질환에 의해 유발되는 고지혈증에 대한 콩 발아배아 추출물의 효과를 분석한 결과를 나타내는 그래프이다.

이하 본 발명을 실시예를 통하여 보다 상세하게 설명한다. 그러나 이들 실시예는 본 발명을 예시적으로 설명하기 위한 것으로 본 발명의 범위가 이들 실시예에 한정되는 것은 아니다.

실시예 1: 콩 발아배아 추출물의 제조

콩 발아배아 추출물을 제조하기 위하여 본 발명자의 선행 연구에 따라 제조한 콩 발아배아를 이용하였다. 구체적으로, 콩 배아를 흐르는 물에 침지하여 발아시키고 24시간 정도 경과한 시점에서 콩 발아배아를 수확하여 동결건조 시켰으며, 이를 분말화하여 콩발아배아 분말을 수득하였다. 상기 수득한 콩 발아배아 분말에 발효주정을 가하여 추출하고, 이를 여과하여 액상성분을 수득하고, 상기 액상성분을 동결건조시켜 콩 발아배아 추출물을 수득하였다.

실시예 2: 콩 발아배아 추출물의 세포독성 평가

상기 실시예 1에서 수득한 콩 발아배아 추출물의 안전성을 확인하기 위하여, 조골세포에 대한 상기 추출물의 세포독성을 평가하였다. 구체적으로, 96 웰 플레이트에 조골세포주 C3H10T1/2를 2×10^2 세포/웰로 계수하여 분주하였고, 100, 250 및 500 ㎍/mL 농도의 콩 발아배아 추출물을 상기 세포에 처리하여 24시간 또는 72시간 동안 배양하였다. 배양 완료 후, MTT 용액의 추가에 의하여 형성된 비수용성의 포르마잔(formazan)을 디메틸술폭시드(dimethyl sulfoxide) 용액으로 용해시켰으며, 595nm에서 상기 용해된 포르마잔의 흡광도를(optical density; O.D. value) 측정함으로써 상대적인 세포 활성능(%)을 평가하였다(도 1). 이때, 대조군으로는 DMSO(dimethyl sulfoxide)를 처리한 조골세포를 사용하였다.

도 1은 조골세포에 대한 콩 발아배아 추출물의 독성을 보여주는 그래프이다. 도 1에서 보듯이, 콩 발아배아 추출물은 100, 250 및 500 ㎍/mL의 농도에서도 세포독성을 나타내지 않았으며, 500 ㎍/mL의 농도에서는 조골세포의 증식능을 오히려 향상시킴을 확인하였다. 이를 통해, 본 발명의 콩 발아배아 추출물은 인체에 해가 없는 안전한 물질임을 알 수 있었다.

실시예 3: 여성 갱년기 질환의 원인이 되는 여성 호르몬 저하증에 대한 콩 발아배아 추출물의 효과

실시예 3-1: 에스트로겐 수용체 활성화에 대한 콩 발아배아 추출물의 효과

에스트로겐 수용체(에스트로겐 수용체 알파 및 베타)를 과다하게 발현시키는 것으로 알려진 암세포주(MCF-7 human breast cancer cell)에 상기 실시예 1에서 수득한 콩 발아배아 추출물을 다양한 용량(100, 250 또는 500 ㎍/㎖)으로 처리하고 배양한 후, 루시퍼라제가 결합된 항체를 이용하여, 활성화된 에스트로겐 수용체의 수준을 측정하였다(도 2a 및 2b). 이때, 음성 대조군으로는 아무것도 처리하지 않은 암세포주를 사용하고, 양성 대조군으로는 상기 암세포주에서 에스트로겐 수용체를 활성화시키는 것으로 알려진 17 베타-에스트로겐을 10 nM의 용량으로 처리한 암세포주를 사용하였다.

도 2a는 에스트로겐 수용체를 과다하게 발현시키는 것으로 알려진 암세포주에서 에스트로겐 수용체 알파의 활성화에 대한 콩 발아배아 추출물의 효과를 분석한 결과를 나타내는 그래프이고, 도 2b는 에스트로겐 수용체를 과다하게 발현시키는 것으로 알려진 암세포주에서 에스트로겐 수용체 베타의 활성화에 대한 콩 발아배아 추출물의 효과를 분석한 결과를 나타내는 그래프이다. 도 2a 및 2b에서 보듯이, 음성 대조군에 비하여 본 발명의 콩 발아배아 추출물을 처리한 암세포주에서는 에스트로겐 수용체(에스트로겐 수용체 알파 및 베타)가 모두 활성화됨을 확인하였다.

실시예 3-2: 에스트로겐 수용체를 통한 신호전달 과정에 대한 콩 발아배아 추출물의 효과

상기 실시예 3-1의 결과로부터, 본 발명의 콩 발아배아 추출물이 에스트로겐 수용체를 활성화시킬 수 있음을 확인하였으므로, 상기 에스트로겐 수용체를 통한 신호전달 과정에도 본 발명의 콩 발아배아 추출물이 효과를 나타낼 수 있는지 확인하고자 하였다.

구체적으로, 에스트로겐 수용체의 신호전달 과정에 대한 연구가 규명된 암세포주(HepG2 human liver cancer cell)에 상기 실시예 1에서 수득한 콩 발아배아 추출물을 다양한 용량(100, 250 또는 500 ㎍/㎖)으로 처리하고 배양한 후, 상기 암세포주에서 발현되는 에스트로겐 수용체의 신호전달 과정에 관여하는 단백질(CYP19, P-ERK, p-P38 및 p-MEK)의 수준을 웨스턴블럿 분석을 통해 비교하였다(도 2c 및 2d). 이때, 대조군으로는 아무것도 처리하지 않은 암세포주를 사용하였다.

도 2c는 에스트로겐 수용체의 신호전달 과정에 관여하는 단백질의 발현수준에 대한 콩 발아배아 추출물의 효과를 분석한 결과를 나타내는 그래프이고, 도 2d는 콩 발아배아 추출물이 처리된 암세포주에서 발현된 에스트로겐 수용체의 신호전달 과정에 관여하는 단백질의 발현수준을 정량분석한 결과를 나타내는 그래프이다. 도 2c 및 2d에서 보듯이, 에스트로겐 수용체의 신호전달 과정에 관여하는 단백질인 CYP19, P-ERK, p-P38 및 p-MEK는 모두 콩 발아배아 추출물의 처리에 의하여 처리농도 의존적으로 단백질 수준이 증가됨을 확인하였다.

상기 실시예 3-1 및 3-2의 결과로부터, 본 발명의 콩 발아배아 추출물은 에스트로겐 수용체를 모두 활성화시키고, 에스트로겐 수용체를 통한 신호전달과정 역시 활성화시켰으므로, 상기 콩 발아배아 추출물은 에스트로겐의 효과를 모사할 수 있을 것으로 분석되었다.

실시예 3-3: 여성 갱년기 질환 모델 마우스를 이용한 콩 발아배아 추출물의 효과검증

상기 실시예 3-1 및 3-2의 결과로부터, 본 발명의 콩 발아배아 추출물이 에스트로겐의 효과를 모사할 수 있을 것으로 분석되었는 바, 이러한 효과를 여성 갱년기 질환 모델 마우스를 통해 검증하였다.

먼저, 8주령의 암컷 C57BL/6 마우스로부터 난소를 제거하여 여성 갱년기 질환 모델 마우스를 제작하였다. 대략적으로, 8주령의 암컷 C57BL/6 마우스의 복부 아래쪽 가운데 구역에 1-2cm정도 피부 절개 후 포셉(forcep)을 이용하여 난소(ovary)와 난관(oviduct) 등을 견인하여 절제하여 여성 갱년기 질환 모델 마우스를 제작하였다.

다음으로, 상기 제작된 모델 마우스에 상기 실시예 1에서 수득한 콩 발아배아 추출물을 다양한 투여량(0.1, 1 또는 5mg/kg)으로 경구투여하면서 주 6회 경구투여하면서 1개월간 사육하였다.

끝으로, 정상 8주령의 암컷 C57BL/6 마우스, 여성 갱년기 질환 모델 마우스 또는 상기 콩 발아배아 추출물을 투여한 마우스를 대상으로 채혈한 다음, 채혈된 혈청내 에스트라디올(에스트로겐의 일종)의 농도를 측정하였다(도 2e).

도 2e는 여성 갱년기 질환 모델 마우스(OVX)를 이용하여, 여성 갱년기 질환을 유발하는 여성 호르몬 저하증에 대한 콩 발아배아 추출물의 효과를 분석한 결과를 나타내는 그래프이다. 도 2e에서 보듯이, 정상 마우스에 비하여, 여성 갱년기 질환 모델 마우스에서는 에스트라디올의 혈청내 농도가 감소되었고, 상기 여성 갱년기 질환 모델 마우스에 콩 발아배아 추출물을 투여하면 감소된 에스트라디올의 혈청내 농도가 증가됨을 확인하였다.

따라서, 콩 발아배아 추출물은 여성 갱년기 질환의 원인이 되는 여성 호르몬 저하증을 개선시키는 효과를 나타내므로, 상기 콩 발아배아 추출물은 여성 갱년기 질환을 예방, 개선 또는 치료하는 효과를 나타냄을 알 수 있었다.

실시예 4: 여성 호르몬 저하증에 의해 유발되는 증상에 대한 콩 발아배아 추출물의 효과

상기 실시예 3을 통해, 본 발명의 콩 발아배아 추출물은 여성 갱년기 질환의 원인이 되는 에스트로겐의 일종인 에스트라디올의 저하증을 개선시킬 수 있음을 확인하였다. 이에, 상기 추출물이 여성 호르몬 저하증에 의하여 유발되는 다양한 증상, 예를 들어 골다공증, 비만, 고지혈증 등에 대하여도 개선효과를 나타낼 수 있는지 확인하고자 하였다.

실시예 4-1: 콩 발아배아 추출물의 골다공증 개선효과

상기 실시예 3에서 제작된 여성 갱년기 질환 모델 마우스와 상기 모델 마우스에 콩 발아배아 추출물을 0.1mg/kg의 투여량으로 투여한 마우스를 대상으로 골 밀도의 변화를 분석하였다.

대략적으로, 상기 각 마우스로부터 대퇴골을 분리하여 주변 근육을 제거하였고, 10% 포르말린으로 고정하였다. μCT 분석을 통해 골밀도를 측정하였고, 대퇴골 원위부 골단에서 골의 전체 면적(TV)에 대한 해면골의 부피(BV)를 산출하여 골 부피 밀도(Bone volume density, BV/TV (%))를 산출하고, 이의 상대적 비율(골 밀도 증가비율)을 계산하여 골다공증 개선효과를 분석하였다(도 3). 이때, 대조군으로는 정상 마우스를 사용하였다.

도 3은 여성 갱년기 질환 모델 마우스를 이용하여, 여성 갱년기 질환에 의해 유발되는 골다공증에 대한 콩 발아배아 추출물의 효과를 분석한 결과를 나타내는 그래프이다. 도 3에서 보듯이, 여성 갱년기 질환 모델 마우스(폐경기 유발군)의 경우에는 정상 마우스에 비하여, 골 밀도 증가비율이 저하되었으나, 콩 발아배아 추출물을 투여한 마우스에서는 여성 갱년기 질환 모델 마우스에 비하여, 골 밀도 증가비율이 개선됨을 확인하였다.

실시예 4-2: 콩 발아배아 추출물의 비만 개선효과

상기 실시예 3에서 제작된 여성 갱년기 질환 모델 마우스와 상기 모델 마우스에 콩 발아배아 추출물을 0.1mg/kg의 투여량으로 투여한 마우스를 대상으로 자궁 조직 주위 지방조직의 크기를 비교하였다. 대략적으로, 상기 각 마우스로부터 자궁 조직 주위 지방조직을 적출하고, 이를 10% 포르말린에 고정시킨 후, 파라핀 고정(embedded) 과정을 거쳐 상기 지방조직을 4μm로 섹션(section)하였다. 이후, HE(Hematoxylin and Eosin) 염색을 통해 현미경 400배 배율로 지방세포를 관찰하여 한 시야에서 10개의 세포에 대해 각각 장축과 단축의 길이를 측정하고, 한 개체당 3시야에서 관찰한 장축(Long axis)과 단축(Short axis)의 평균값을 계산하여, 그룹의 평균값을 계산하였다(도 4). 이때, 대조군으로는 정상 마우스를 사용하였다.

도 4는 여성 갱년기 질환 모델 마우스를 이용하여, 여성 갱년기 질환에 의해 유발되는 비만에 대한 콩 발아배아 추출물의 효과를 분석한 결과를 나타내는 그래프이다. 도 4에서 보듯이, 정상 마우스에 비하여 여성 갱년기 질환 모델 마우스에서는 지방조직의 장축과 단축의 길이가 급격히 증가하였으나, 콩 발아배아 추출물을 투여한 경우에는, 상기 지방조직의 장축과 단축의 길이가 콩 발아배아 추출물의 투여량에 비례하여 감소됨을 확인하였다.

실시예 4-3: 콩 발아배아 추출물의 고지혈증 개선효과

상기 실시예 3에서 제작된 여성 갱년기 질환 모델 마우스와 상기 모델 마우스에 콩 발아배아 추출물을 0.1, 1 또는 5mg/kg의 투여량으로 투여한 마우스를 대상으로 총 칼로리의 45%의 지방-유래의 고지방 식이를 투여하여 고콜레스테롤증을 유발하였다. 이어, 각 마우스로부터 채혈한 후, 채혈된 혈액의 혈장에 포함된 총 콜레스테롤의 함량과 HDL의 함량을 측정한 다음, 혈중 지질 대사의 지표인 HDL에 대한 총 콜레스테롤의 비율(total Chol/HDL ratio)을 분석하였다(도 5). 이때, 대조군으로는 정상 마우스를 사용하였다.

도 5는 여성 갱년기 질환 모델 마우스를 이용하여, 여성 갱년기 질환에 의해 유발되는 고지혈증에 대한 콩 발아배아 추출물의 효과를 분석한 결과를 나타내는 그래프이다. 도 5에서 보듯이, 정상 마우스에 비하여 여성 갱년기 질환 모델 마우스에서는 혈중 지질 대사의 지표인 HDL에 대한 총 콜레스테롤의 비율(total Chol/HDL ratio)이 급격하게 증가하였으나, 콩 발아배아 추출물을 투여한 경우에는, 증가된 HDL에 대한 총 콜레스테롤의 비율이 콩 발아배아 추출물의 투여량에 비례하여 감소됨을 확인하였다.

상기 실시예 4-1 내지 4-3의 결과에서 보듯이, 본 발명에서 제공하는 콩 발아배아 추출물은 여성 호르몬 저하증에 의하여 유발되는 다양한 증상(골다공증, 비만, 고지혈증 등)에 대하여도 개선효과를 나타낼 수 있음을 확인하였다.

Claims (7)

1. 콩 발아배아 추출물 또는 그의 분획물을 포함하는 여성 호르몬 저하증 예방 또는 치료용 약학 조성물
   
2. 제1항에 있어서,
   상기 콩 발아배아 추출물은 콩 발아배아를 물, 탄소수 1 내지 4의 알코올 및 이들의 혼합 용매로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 용매로 추출하여 수득한 것인 조성물.
   
3. 삭제
4. 제1항에 있어서,
   상기 여성 호르몬 저하증은 에스트로겐 저하증인 것인 조성물.
   
5. 제1항에 있어서,
   상기 조성물은 약학적으로 허용되는 담체, 부형제 또는 희석제를 추가로 포함하는 것인, 조성물.
   
6. 제1항, 제2항, 제4항 및 제5항 중 어느 하나의 항의 조성물을 여성 호르몬 저하증이 발병되거나 또는 발병될 가능성이 있는 인간을 제외한 개체에 투여하는 단계를 포함하는 여성 호르몬 저하증의 예방 또는 치료 방법.
   
7. 콩 발아배아 추출물 또는 그의 분획물을 포함하는 여성 호르몬 저하증 예방 또는 개선용 식품 조성물.

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