JP6214010B2 - 抗オンコスタチンm受容体ベータ抗体 - Google Patents
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Description
(1)受託番号FERM ABP−11380として寄託されているハイブリドーマ細胞系。
(2)(1)に係るハイブリドーマから得られる、オンコスタチンM特異的受容体ベータサブユニットに対するモノクローナル抗体。
(3)Fab、Fab’、F(ab’)2及びscFvからなる群から選択される、(2)に係る抗体の活性断片。
(6)アトピー性皮膚炎を治療するための医薬を製造するための(2)に係るモノクローナル抗体又は(3)に係る断片の使用。
(7)薬学的に許容可能な担体、賦形剤又は希釈剤と共に、治療有効量の(2)に係るモノクローナル抗体又は(3)に係る断片を含む、アトピー性皮膚炎を治療する方法。
1)前記分子を調製し、(2)に係るモノクローナル抗体の存在下で、(a)OSMRβを発現し、gp130を発現しない細胞及び(b)OSM受容体を発現する細胞と共にそれをインキュベートするステップと、
2)(2)に係るモノクローナル抗体と前記細胞の両方との結合を測定することによって、前記分子が前記細胞の両方と競合的に結合できるかどうかを間接的に調べるステップと
を含む、方法。
(9)(2)に係るモノクローナル抗体と比較して、OSM及び/又はIL−31シグナル経路に対してより強力な阻害活性を有する分子を単離及び同定する方法であって、
1)前記分子を調製し、OSM受容体及びIL−31受容体を発現する細胞と共にそれをインキュベートするステップと、
2)(2)に係るモノクローナル抗体と比較して、前記分子が、OSMからOSM受容体まで及び/又はIL−31からIL−31受容体までのシグナル伝達によって誘導されるリン酸化活性をより顕著に抑制できるかどうかを調べるステップと
を含む、方法。
1.抗体
以下に記載した抗体を実験に使用した。PEがコンジュゲートした抗ラットIgk軽鎖(BD Pharmingen)、抗マウスOSMR(30−1、MBL)、ヤギ抗mIL−31Ra抗体(R&D Systems)、精製したラットIgG2akアイソタイプ対照(R35−95、BD Pharmingen)及びラットIgG1アイソタイプ対照(クローン43414、R&D Systems)。アイソタイプ対照抗体は種々のマウス組織に対して低いバックグラウンド結合を示した。抗ホスホ−p44/42MAPキナーゼ(Thr202/Tyr204)抗体はCell Signaling(カタログ番号9101)から購入した。
本研究において、8週齢のC57BL/6Jの雄のマウス(Clea Japan、東京、日本)を使用した。OSMRβ欠損(OSMRβ−/−)マウスを以前に記載されているように作製した(Tanakaら、2003)。8週齢のOSMRβ+/+及びOSMRβ−/−の雄のマウスを使用した。中等度から重度のアトピー性皮膚炎を有するNC/NgaマウスはSLC(浜松、静岡、日本)から購入し、実験のエンドポイントまで従来の条件に維持した。12週齢のNC/Ngaの雄のマウスを本研究に使用した。全てのマウスを食物及び水を自由に摂取できる状態で12時間の明/暗周期下に維持した。全ての時点において、和歌山医科大学の動物実験のためのガイドライン、動物の餌の供給及び保管についての日本政府の通知(No.6)並びに1978年に改訂された実験動物のケア及び使用のための国立衛生研究所の指針(NIH公報番号80〜23)に従って動物研究管理委員会(Animal Research Control Committee)の管理下で実験を実施した。全ての試みは使用する動物の数及びそれらの苦痛を最小化するように行った。
mIL−31Ra遺伝子(配列番号3)をマウスの後根神経節からクローニングし、レトロウイルスベクター、pMXs−puro内でサブクローニングした。mIL−31Raを有するレトロウイルスを産生し、Ba/F3細胞をウイルスに感染させた。感染細胞をピューロマイシンを用いて選択した。mIL−31Ra(配列番号4)の表面発現を、FACS Calibur(BD)を用いてヤギ抗mIL−31Ra抗体染色(R&D Systems)により確認した。
OSMRβ(配列番号5)の可溶性型を有する発現ベクターを、FLAGタグ及びポリヒスチジン残基と連結したCD8シグナル配列をコードする配列を含有する発現ベクター内でクローニングした。組換え可溶性OSMRβ(配列番号6)をCOS7細胞内で産生し、Ni−NTA及び抗FLAG M2親和性カラムを用いて精製した。Wistarラットを精製した可溶性mOSMRβで免疫化した。リンパ球をリンパ節から回収し、Ogorochi,Tら、1992に記載されているようにマウス骨髄腫P3X細胞と融合した。これらの細胞を、ハイブリドーマ(融合細胞)を選択するためにHAT培地中で培養した。ハイブリドーマ上清を、mOSMRβを発現するBa/F3トランスフェクタントを用いて抗mOSMRβ抗体の産生についてスクリーニングした(Tanakaら、1999)。抗mOSMRβ抗体を産生するハイブリドーマ細胞を、FACS Aria(Becton)を用いた単一細胞分類によって更にクローニングした。全部で166個のハイブリドーマクローンをスクリーニングし、7D2と称したハイブリドーマクローンを、更なる分析のために抗mOSMRβ抗体産生体として選択した(図2A)。
ハイブリドーマ培養上清を回収し、7D2モノクローナル抗体のアイソタイプを、ラットモノクローナル抗体アイソタイピング試験キット(Serotec)を用いて評価した。7D2モノクローナル抗体のアイソタイプをラットIgG1として確認した(図2B)。抗体を精製するために、プロテインLカラム(Pierce)を用いてAKTAシステム(GE healthcare)を適用した。7D2ハイブリドーマ由来の培養上清をプロテインLカラムに通し、結合した抗体を製造業者のプロトコールに記載されているようにカラムから溶出した。7D2モノクローナル抗体溶液の緩衝液をリン酸緩衝生理食塩水(PBS)に交換した。7D2モノクローナル抗体の純度を、CBB染色で観察したSDS−PAGEによって評価した(図2C)。精製した7D2モノクローナル抗体を、mOSMRβ(BaF3−mOSMRβ)を発現するBaF3トランスフェクタントを用いて評価した。精製した7D2モノクローナル抗体はBaF3−mOSMRβを染色できた。mOSMRβに対する7D2モノクローナル抗体の特異的結合を、BaF3−mOSMRβ細胞及びBaF3−mIL31Ra細胞の染色によって更に確認した。7D2モノクローナル抗体はBaF3−mOSMRβ細胞のみを染色したが、BaF3−mIL−31Ra細胞を染色しなかった(図2D)。
mOSMRβを発現するBa/F3トランスフェクタントを、いくつかの濃度にて、精製した7D2モノクローナル抗体又は市販の抗mOSMR抗体(クローン:30−1、MBL)とインキュベートした。細胞をPBSで洗浄した後、細胞をPEがコンジュゲートした抗ラットIgGとインキュベートした。PBSで洗浄した後、細胞をFACS Calibur(Becton)を用いて分析した。mOSMRβ及びgp130の両方を内因的に発現するLO細胞(Haraら、1999)を上記の7D2又は30−1モノクローナル抗体で染色し、FACS Caliburを用いて分析した。mOSMRβに対する7D2モノクローナル抗体の特異性を評価するために、7D2モノクローナル抗体を、mIL−31Raを発現するBaF3トランスフェクタントを用いて試験した。
IL−31Raを外因的に発現するLOトランスフェクタントをBa/F3トランスフェクタントと同じ方法で構築した。従って、LOトランスフェクタントは、OSM受容体(すなわち、mOSMRβ及びgp130の組合せ)及びIL−31受容体(すなわち、mOSMRβ及びIL−31Raの組合せ)を発現する。50ng/mlのOSM又は50ng/mlのIL−31とのインキュベーションの5分後、LOトランスフェクタントが図3Cに示すようにErkのリン酸化を示すことを確認した。
マウスを個々のケージに3日間収容した。背中皮内の吻側部分において、マウスにPBS(40μl)、IL−31(25〜1000ng/40μl、Peprotech、Rocky Hill、NJ)又はOSM(400ng/40μl、R&D Systems、Minneapolis、MN)を注射した。
後足のつま先からの引っ掻き行動を検出し、MicroAct(Neuroscience、東京、日本)を使用して評価した。MicroAct装置の使用を他に記載されているように確認した(Inagakiら、2002&2003;Takanoら、2003)。50mg/kg体重の用量のペントバルビタールナトリウムの腹腔内注射によりマウスを強く麻酔した。引っ掻き行動を記録する前に、無菌条件下で、小さなテフロンコーティングした磁石(1mm直径、3mm長さ)をマウスの両方の後足の背側内に皮下移植した。麻酔から回復した後、動物を落ち着かせるために、磁石を有するマウスを1時間、観察室(11cm直径、18cm高さ)に入れた。記録時間の長さは2時間であった。MicroAct分析プログラムを、以前に記載されているように長続きする(>1.5s)引っ掻き事象の数に抵抗するための後の設定と共に使用した(Takanoら、2003):閾値(V)0.1、事象間隔(s)0.2、最大周波数(Hz)20.0、最小周波数(Hz)2.0、最小持続時間(s)1.5。
抗体の制御放出を可能にする架橋したゼラチンヒドロゲル(MedGel;MedGel、京都、日本)を切断し、アイソタイプ対照抗体又は抗OSMRβ抗体(7D2モノクローナル抗体)を含有する溶液中に4℃にて一晩浸した。移植を2週間の間隔で2回実施した。第1の移植のために、20μg(20μl)の抗体を2mgのMedGel中に浸し、第2の移植のために、100μg(100μl)の抗体を10mgのMedGel中に浸した。アイソタイプ対照抗体を浸したMedGel及び抗OSMRβ7D2モノクローナル抗体を浸したMedGelを次いで、首筋の後方内に皮下移植した。
いくつかの改変をして、Grimstadら(2008)に記載されている基準に従って、皮膚病変の重症度を試験し、スコア付けした。病変の重症度を、身体の6つの部分(右顔面、左顔面、右耳、左耳、頭皮及び背中)について0〜3のスケール(0=正常な皮膚、1=うろこ状及び乾燥、2=結節性病変、3=出血性病変)で等級に分けた。各マウスの全スコア(最小0、最大18)をそのマウスについてのスコアとして得た。実験期間の0日からのスコアの変化を結果に示した。
実験の前及びエンドポイントにおいて血清IgE及びIL−13を測定するために、マウスを尾静脈から出血させ、血清を分離させた。製造業者の指示書に従って、IgE酵素結合免疫吸着測定法(ELISA)キット(Morinaga、東京、日本)及びIL−13 ELISAキット(R&D Systems)をそれぞれ使用して血清IgE及びIL−13を測定した。
実験のエンドポイントにおいて、ジエチルエーテルによりマウスを強く麻酔し、0.85%NaCl、続いて氷冷した修飾ザンボニ固定液(0.1M PBS中の2%PFA及び0.2%ピクリン酸、pH7.4)で経心的に灌流した。背中、顔面及び耳の皮膚を迅速に除去し、4℃にて3時間、同じ固定液中に加え、0.1M PBS中の20%スクロース中で凍結防止した。全ての試料をO.C.T.培地(Sakura Finetek、Torrance、CA)に包埋し、乾燥氷上の冷n−ヘキサン中に急速に凍結し、次いで−80℃にて保存した。凍結した切片をクリオスタット上で切断し(6μm厚)、ヘマトキシリン及びエオシンで染色した。
結果を平均±SEMとして示す。群間の統計的に有意な差を、スチューデントのt検定又は分散分析(ANOVA)、続いてポストホックボンフェローニ検定によって分析した。統計的有意差についての基準はP<0.05であった。
IL−31は痒みを誘導することによってアトピー性皮膚炎の進行に関与すると示唆されている。IL−31Raは、OSMRβと対合して、IL−31シグナリングを伝達するための機能的ヘテロダイマーを形成する(Dreuwら、2004)。更に、IL−31Ra及びOSMRβは後根神経節におけるニューロンで共発現することが実証されており(Bandoら、2006)、OSM及び/又はIL−31が、アトピー性皮膚炎進行の間、ニューロンにおいて痒みを誘導する役割を果たし得ることを示唆している。マウスにおける引っ掻き行動に対するIL−31の直接的な効果を試験するために、本発明者らは、背中の皮下の吻側部分にIL−31を注射した。図1Aに示されるように、IL−31による引っ掻き事象の数は100ngの用量にて増加し始め、400ngの用量にてピークに達し、1000ngの用量で維持した。IL−31と対照的に、OSMは引っ掻き事象の数の増加を誘導しなかった(図1A)。IL−31により誘導される引っ掻き行動に対するOSMRβ欠損の効果を調べるために、更に本発明者らはIL−31をOSMRβ−/−マウスに注射した。OSMRβ+/+マウスにおいてIL−31により増加した数の引っ掻き行動は、OSMRβ−/−マウスにおいて完全になくなり(図1B)、IL−31により誘導される引っ掻き行動がOSMRβを介して痒みを媒介することが示される。
図1A及び1Bのデータに基づいて、本発明者らは、抗OSMRβ抗体によるOSMRを介するシグナリングの遮断がNC/Ngaマウスの掻痒を改善できると仮定している。最初に、本発明者らは、NC/Ngaマウスの引っ掻き行動に対する抗OSMRβ抗体(7D2モノクローナル抗体)の効果を試験した。抗OSMRβ7D2モノクローナル抗体又はアイソタイプ対照抗体を有するMedGelを、NC/Ngaマウスの首筋の後方内に皮下移植した。図4に示されるように、抗OSMRβ7D2モノクローナル抗体を移植したNC/Ngaマウス(OSMRβ−NC/Ngaマウス)と、アイソタイプ対照抗体を移植したNC/Ngaマウス(アイソタイプ−NC/Ngaマウス)との間で実験期間の24日までに引っ掻き行動の数の差は存在しなかった。しかしながら、実験期間の24日から31日まで、引っ掻き行動の数はアイソタイプ−NC/Ngaマウスにおいて増加する傾向があったが、OSMRβ−NC/Ngaマウスにおいてはなかった(図4)。これにより、抗OSMRβ7D2モノクローナル抗体治療は、いくつかの態様においてアトピー性皮膚炎進行の間、痒みを遮断する役割を果たし得ることが示唆される。
最後に、本発明者らは、NC/Ngaマウスにおける皮膚炎進行に対する抗mOSMRβ特異的抗体(7D2モノクローナル抗体)の効果を評価した。皮膚炎スコアを臨床的に評価し、皮膚損傷の重症度を組織学的に評価した。アイソタイプ−NC/Ngaマウスの皮膚病変は実験期間の間中ずっと、進行した(図5、A〜C)のに対して、OSMRβ−NC/Ngaマウスの皮膚病変は改善した(図5、D〜F)。皮膚状態を人口皮膚重症度スコアによって評価し、その結果を図6(A)及び(B)に示す。アイソタイプ−NC/Ngaマウスにおける皮膚重症度スコアは実験期間の間中ずっと、徐々に増加した。対照的に、OSMRβ−NC/Ngaマウスにおける皮膚重症度スコアは、第1の移植後、14日の間、わずかに減少し、第2の移植後、劇的に減少した(図6(A))。更に、OSMRβ−NC/Ngaマウスの体重はアイソタイプ−NC/Ngaマウスの体重と比べて増加した(図6(B))。
NC/Ngaマウスにおいて、皮膚病変は、通常、アトピー性皮膚炎の患者において観察される(Cooperら、1994)、上昇した血清IgEレベル及びTh2優先的免疫反応(Inoueら、2007)に通常、関連している。抗体治療の前に、OSMRβ−NC/Ngaマウスとアイソタイプ−NC/Ngaマウスとの間に血清IgEレベルの有意な差は存在しなかった(図8(A)及び(B))。治療後、アイソタイプ−NC/NgaマウスにおけるIgEのレベルと対照的に、血清IgEの増加はOSMRβ−NC/Ngaマウスにおいてなくなった(図8(A))。更に、血清IL−13レベルは、治療後、OSMRβ−NC/Ngaマウスにおいて劇的に減少したのに対して、このサイトカインレベルはアイソタイプ−NC/Ngaマウスにおいて増加した(図8(B))。これらの結果により、アトピー性皮膚炎進行の間の炎症性反応もまた、抗OSMRβ7D2モノクローナル抗体での治療により防がれたことが示される。
本発明者らは、NC/Ngaマウスにおける皮膚炎進行に対する7D2及び30−1の効果を評価した。皮膚損傷の重症度を組織学的に評価した。30−1抗体を移植したマウスにおける皮膚重症度スコアは実験期間の間中ずっと、徐々に増加した。対照的に、7D2を移植したマウスにおける皮膚重症度スコアは劇的に減少した(図9)。上記のように、7D2モノクローナル抗体はOSMRβに特異的に結合するが、gp130又はIL−31Raには特異的に結合しない。対照的に、30−1モノクローナル抗体はOSMRβモノマーに対する親和性よりOSMRβ/gp130複合体に対して高い親和性を有する。実際に、30−1抗体はOSMRβモノマーにかろうじて結合した(図3)。これらのデータにより、30−1のようなOSMRβ/gp130複合体に対する抗体はアトピー性皮膚炎進行を遮断せず、7D2のようなOSMRβ特異的抗体のみが皮膚炎進行下で皮膚炎症を防ぐことができることが示唆される。
(1)候補分子を調製し、7D2モノクローナル抗体の存在下で、OSMRβのみ、OSM受容体、IL−31受容体及び/又はそれらの組合せを発現する細胞と共にそれをインキュベートするステップであって、
前記分子は、これらに限定されるべきではないが、小さな化学化合物;約5〜20a.a.からなる抗体及び小さなペプチドを含むタンパク質;並びにアプタマーを含む核酸を含むことができ、
OSMRβのみを発現する細胞はOSMRβを発現するBaF3トランスフェクタントであってもよく、OSM受容体を発現する細胞はLO細胞であってもよく、OSM受容体及びIL−31受容体を発現する細胞はIL−31Raを発現するLOトランスフェクタントであってもよい、ステップと、
(2)7D2モノクローナル抗体と細胞との結合を測定することによって、前記候補分子が細胞と競合的に結合できるかどうかを間接的に調べるステップと
を含む、方法を提供する。
(1)候補分子を調製し、OSM受容体、IL−31受容体又はその両方を発現する細胞と共にそれをインキュベートするステップであって、
前記分子は、これらに限定されるべきではないが、小さな化学化合物;約5〜20a.a.からなる抗体及びペプチドを含むタンパク質;並びにアプタマーを含む核酸を含むことができ、
OSM受容体を発現する細胞はLO細胞であってもよく、OSM受容体及びIL−31受容体を発現する細胞はIL−31Raを発現するLOトランスフェクタントであってもよい、ステップと、
(2)前記候補分子が、7D2モノクローナル抗体と比較して、OSMからOSM受容体まで及び/又はIL−31からIL−31受容体までのシグナル伝達によって誘導されるリン酸化活性をより顕著に抑制できるかどうかを調べるステップと
を含む、方法を提供する。
以下の引用文献の全内容はこの明細書の開示に含まれる。
参考文献
(1)Bando T, Morikawa Y, Komori T, Senba E (2006) Complete overlap of interleukin-31 receptor A and oncostatin M receptor β in the adult dorsal root ganglia with distinct developmental expression patterns. Neuroscience 142: 1263-1271.
(2)Bilsborough J, Leung DY, Maurer M, Howell M, Boguniewcz M, Yao L, Storey H, Leciel C, Harder B, Gross JA (2006) IL-31 is associated with cutaneous lymphocyte antigen-positive skin homing T cells in patients with atopic dermatitis. J Allergy Clin Immunol 117: 418-425.
(3)Cooper KD (1994) Atopic dermatitis: recent trends in pathogenesis and therapy. J Invest Dermatol 102: 128-137.
(4)Dillon SR, Sprecher C, Hammond A, Bilsborough J, Rosenfeld-Franklin M, Presnell SR, Haugen HS, Maurer M, Harder B, Johnston J, Bort S, Mudri S, Kuijper JL, Bukowski T, Shea P, Dong DL, Dasovich M, Grant FJ, Lockwood L, Levin SD, LeCiel C, Waggie K, Day H, Topouzis S, Kramer J, Kuestner R, Chen Z, Foster D, Parrish-Novak J, Gross JA (2004) Interleukin 31, a cytokine produced by activated T cells, induces dermatitis in mice. Nat. Immunol 5: 752-760.
(5)Dreuw A, Radtke S, Pflanz S, Lippok BE, Heinrich PC, Hermanns HM (2004) Characterization of the signaling capacities of the novel gp130-like cytokine receptor. J Biol Chem 279: 36112-36120.
(6)Grimstad O, Sawanobori Y, Vestergaad C, Bilsborough J, Olsen UB, Gronhoj-Larsen C, Matsushima K (2008) Anti-interleukin-31-antibodies ameliorate scratching behavior in NC/Nga mice: a model of atopic dermatitis. Exp Dermatol 18: 35-43.
(7)Hara T, Nakano Y, Tanaka M, Tamura K, Sekiguchi T, Minehata K, Copeland NG, Jenkins NA, Okabe M, Kogo H, Mukouyama Y, Miyajima A (1999) Identification of podocalyxin-like protein 1 as a novel cell surface marker for hemangioblasts in the murine aorta-gonad-mesonephros region. Immunity11: 567-78.
(8)Inoue J, Aramaki Y (2007) Suppression of skin lesions by transdermal application of CpG-oligodeoxynucleotides in NC/Nga mice, a model of human atopic dermatitis. J Immunol 178: 584-591.
(9)Sonkoly E, Muller A, Lauerma AI, Pivarcsi A, Soto H, Kemeny L, Alenius H, Dieu-Nosjean MC, Meller S, Rieker J, Steinhoff M, Hoffmann TK, Ruzicka T, Zlotnik A, Homey B (2006) IL-31: A new link between T cells and pruritus in atopic skin inflammation. J Allergy Clin Immunol 117: 411-417.
(10)Tanaka M, Hara T, Copeland NG, Gilbert DJ, Jenkins NA, Miyajima A (1999) Reconstitution of the functional mouse oncostatin M (OSM) receptor: molecular cloning of the mouse OSM receptor beta subunit.Blood 93: 804-15.
(11)Tanaka M, Hirabayashi Y, Sekiguchi T, Inoue T, Katsuki M, Miyajima A (2003) Targeted disruption of oncostatin M receptor results in altered hemtopoiesis. Blood 102: 3154-3162.
(12)Ogorochi, T., Hara, T., Wang, H. M., Maruyama, K. and Miyajima, A., Monoclonal antibodies specific for low-affinity interleukin-3 (IL-3) binding protein AIC2A: evidence that AIC2A is a component of a high-affinity IL-3 receptor. Blood 1992. 79: 895-903.
(13)Tanaka, M., Hara, T., Copeland, N. G., Gilbert, D. J., Jenkins, N. A. and Miyajima, A., Reconstitution of the functional mouse oncostatin M (OSM) receptor: molecular cloning of the mouse OSM receptor beta subunit. Blood 1999. 93: 804-815.
Claims (8)
- 受託番号FERM BP−11380として寄託されているハイブリドーマ細胞系。
- 請求項1に記載のハイブリドーマから得られる、オンコスタチンM特異的受容体ベータサブユニットに対するモノクローナル抗体。
- Fab、Fab’、F(ab’)2及びscFvからなる群から選択される、請求項2に記載の抗体の、オンコスタチンM受容体ベータサブユニットに結合する断片。
- 請求項2に記載のモノクローナル抗体又は請求項3に記載の断片を含む、OSMとOSM受容体との間及びIL−31とIL−31受容体との間のシグナル経路に対する阻害剤。
- 請求項2に記載のモノクローナル抗体又は請求項3に記載の断片を含む、アトピー性皮膚炎を治療するための医薬。
- アトピー性皮膚炎を治療するための医薬を製造するための請求項2に記載のモノクローナル抗体又は請求項3に記載の断片の使用。
- 請求項2に記載のモノクローナル抗体と比較して、OSMRβ並びにOSMRβ及びgp130からなるOSM受容体に対してより強力な結合活性を有する分子を単離及び同定する方法であって、
(1)前記分子を調製し、請求項2に記載のモノクローナル抗体の存在下で、(a)OSMRβを発現し、gp130を発現しない細胞及び(b)OSM受容体を発現する細胞と共にそれをインキュベートするステップと、
(2)請求項2に記載のモノクローナル抗体と前記細胞の両方との結合を測定することによって、前記分子が前記細胞の両方と競合的に結合できるかどうかを間接的に調べるステップと
を含む、上記方法。 - 請求項2に記載のモノクローナル抗体と比較して、OSM及び/又はIL−31シグナル経路に対してより強力な阻害活性を有する分子を単離及び同定する方法であって、
(1)候補分子を調製し、OSM受容体及びIL−31受容体を発現する細胞と共にそれをインキュベートするステップと、
(2)請求項2に記載のモノクローナル抗体と比較して、前記候補分子が、OSMからOSM受容体まで及び/又はIL−31からIL−31受容体までのシグナル伝達によって誘導されるリン酸化活性をより顕著に抑制できるかどうかを調べるステップと
を含む、上記方法。
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