JP6210882B2 - 組織分割装置、細胞分取装置、細胞分取システム、組織表示システム、組織分割方法および細胞分取方法 - Google Patents

組織分割装置、細胞分取装置、細胞分取システム、組織表示システム、組織分割方法および細胞分取方法 Download PDF

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Description

本発明は、組織分割装置、細胞分取装置、細胞分取システム、組織表示システム、基板、伸展部材、組織分割方法および細胞分取方法に関するものである。
従来、病理診断などに用いられる組織の切片から、数十ミクロン程度の微小領域を切り取って採取するための技術としてＬＭＤ（Ｌａｓｅｒ Ｍｉｃｒｏｄｉｓｓｅｃｔｉｏｎ）法が知られている（例えば、非特許文献１参照。）。ＬＭＤ法は、切片の採取すべき微小領域にＵＶレーザを照射することにより、切片から微小領域を切り取っている。
Ｌｅｉｃａ ＭＩＣＲＯＳＹＳＴＥＭＳ、"ライカ ＬＭＤ６５００ ライカ ＬＭＤ７０００"、Ｐ．２、［ｏｎｌｉｎｅ］、［平成２４年８月３０日検索］、インターネット＜URL：http://www.leica-microsystems.com/fileadmin/downloads/Leica%20LMD7000/Brochures/LMD6500_7000_JP.pdf＞
しかしながら、切片から癌細胞などの特定の細胞が存在する領域を切り取り、切り取った微小な断片に含まれる細胞から抽出した核酸、遺伝子、アミノ酸、ペプチド、たんぱく質、脂質、糖鎖などの微量な生体試料の検査を実施したい場合、特に遺伝子検査を実施したい場合、ＬＭＤ法によって採取された断片に含まれる細胞数では少なすぎて検査に必要な量の遺伝子を抽出することができない。したがって、多数の切片をマイクロダイセクションして十分な数の細胞を収集しなければならず、１度の遺伝子検査を行うのに膨大な労力および時間を要するという問題がある。
一方、切り取る断片の面積を大きくする、または、生体組織から切き出す切片を厚くすることが考えられる。しかしながら、ＬＭＤ法で切り取る断片を大きくしようした場合、レーザを走査可能な領域を大きくしたり、レーザを走査して切り取った断片をレーザの圧力で吹き飛ばすためにレーザの出力を高くしたりする必要がある。そのために装置の構成が一層大掛かりになり装置の価格も高騰するという不都合がある。また、切片を厚くした場合、レーザで切片を切断するためにはやはりレーザの出力を高くする必要があるという不都合がある。
本発明は、上述した事情に鑑みてなされたものであって、生体組織の切片を簡便な構成と操作で十分な量の細胞を含む寸法の断片に分割して採取することができる組織分割装置、細胞分取装置、細胞分取システム、組織表示システム、組織分割方法および細胞分取方法を提供することを目的とする。
上記目的を達成するため、本発明は以下の手段を提供する。
本発明の第１の態様は、生体組織の切片を貼り付け可能な表面を有し、複数の小片に分割可能に設けられた基板と、該基板を複数の小片に分割することによって前記表面に貼り付けられた切片を前記小片と略同等の形状の断片に分割する分割部とを備え、該分割部が、前記複数の小片のうち、前記切片内の採取すべき領域が貼り付けられている一部の小片の、前記切片が貼り付けられている面および該面とは反対側の面のうち少なくとも一方の面を支持し、前記表面に交差する方向に移動させられることで前記一部の小片を他の小片に対して前記交差する方向に移動させる支持部材と、前記一部の小片に貼り付けられた前記切片の分割を補助する分割補助部とを備え、該分割補助部が、前記支持部材との間に前記基板を挟み該基板に端面を向けて配置され、前記支持部材によって移動された前記一部の小片が挿入可能な孔を前記端面に有する略筒状の部材を備え、前記端面と前記孔の内面とが成す角が前記切片の分割を補助する組織分割装置である。
本発明の第１の態様によれば、生体組織の切片が貼り付けられた基板を分割部によって複数の小片に分割するだけの簡便な構成と操作によって、基板上に貼り付けられた切片を基板と共に小片と略同等の形状の断片に分割し、小片と共に該小片に付着している断片を採取することができる。また、基板と共に力学的に切片が分割されるので、切片の厚さや断片の大きさはＬＭＤ法に比べて厳しく制限されない。したがって、切片を厚くし、または、小片の寸法を大きくすることにより、切片を十分な量の細胞を含む寸法の断片に分割することができる。
上記第１の態様においては、前記基板が、予め分割された前記複数の小片の集合体からなり、前記分割部が、前記小片同士を相対的に移動させる力を前記基板に加えることで前記基板を分割してもよい。あるいは、上記第１の態様においては、前記基板は、前記複数の小片に区画する溝が形成され、前記分割部が、前記小片同士を相対的に移動させる力を前記基板に加えることで前記基板を分割してもよい。
このようにすることで、小片同士を相対的に移動させる力を基板に加えることにより予め設定された形状の小片に容易に基板を分割することができる。
上記第１の態様においては、前記分割部が、前記複数の小片のうち、前記切片内の採取すべき領域が貼り付けられている一部の小片を前記交差する方向に移動させて、前記小片同士を前記表面に交差する方向に相対的に移動させる力を前記基板に加える。
このようにすることで、基板表面の略法線方向に一部の小片を移動させて他の小片と分割し、一部の小片の表面に貼り付けられていた切片の一部を切り取ることができる。
また、上記第１の態様においては、前記分割部が、前記一部の小片の前記切片が貼り付けられている面および該面とは反対側の面のうち少なくとも一方の面を支持する支持部材を備え、該支持部材を前記交差する方向に移動させることで前記一部の小片を前記交差する方向に移動させる。
このようにすることで、一部の小片のみを容易に表面に交差する方向に移動させることができる。
また、上記第１の態様においては、前記分割部が、前記一部の小片に貼り付けられた前記切片の分割を補助する分割補助部をさらに備える。分割補助部は、前記支持部材との間に前記基板を挟み該基板に端面を向けて配置され、前記支持部材によって移動された前記一部の小片が挿入可能な孔を前記端面に有する略筒状の部材を備え、前記端面と前記孔の内面とが成す角が前記切片の分割を補助する。
このようにすることで、小片が筒状の部材の孔内に挿入される過程において当該小片に貼り付けられている切片をより確実に切り取ることができる。
上記の支持部材を備える構成においては、前記分割部が、前記支持部材によって前記一方の面を前記交差する方向に押圧することとしてもよい。
このようにすることで、一部の小片を容易に移動させることができる。
上記の支持部材によって小片の一方の面を押圧する構成においては、前記支持部材が、前記切片を間に挟んで前記切片が貼り付けられている面を支持し、前記支持部材と前記切片との間に配置され該切片の表面を覆って保護する保護部材を備えることとしてもよい。
このようにすることで、支持部材と切片とが直接接触することが防止され、同一の支持部材を連続して使用して切片から複数の断片を採取したとしても、一の断片に含まれる生体分子等の物質が支持部材を介して他の断片に移動すること（コンタミネーション）を防ぐことができる。
上記の支持部材を備える構成においては、前記支持部材と前記一部の小片の前記反対側の面との間に配置されると共に該反対側の面を吸着する吸着部材を備え、前記分割部が、前記支持部材によって前記一部の小片の前記反対側の面を前記交差する方向に引っ張ることとしてもよい。
このようにすることで、一部の小片を容易に移動させることができる。
上記の支持部材を備える構成においては、前記分割部が、前記基板を間に挟んで対向配置され前記小片の前記切片が貼り付けられている面および前記反対側の面を支持すると共に前記交差する方向に一体に移動させられる２つの前記支持部材を備えることとしてもよい。
本発明の第２の態様は、生体組織の切片を貼り付け可能な表面を有し、複数の小片に分割可能に設けられた基板と、該基板を複数の小片に分割することによって前記表面に貼り付けられた切片を前記小片と略同等の形状の断片に分割する分割部と、該分割部によって分割された前記切片の断片を採取する採取部とを備え、前記分割部が、前記複数の小片のうち、前記切片内の採取すべき領域が貼り付けられている一部の小片の、前記切片が貼り付けられている面および該面とは反対側の面のうち少なくとも一方の面を支持し、前記表面に交差する方向に移動させられることで前記一部の小片を他の小片に対して前記交差する方向に移動させる支持部材と、前記一部の小片に貼り付けられた前記切片の分割を補助する分割補助部とを備え、該分割補助部が、前記支持部材との間に前記基板を挟み該基板に端面を向けて配置され、前記支持部材によって移動された前記一部の小片が挿入可能な孔を前記端面に有する略筒状の部材を備え、前記端面と前記孔の内面とが成す角が前記切片の分割を補助する細胞分取装置である。
本発明の第３の態様は、上記に記載の細胞分取装置と、前記基板上の切片を観察する観察装置とを備える細胞分取システムである。
本発明の第４の態様は、上記に記載の細胞分取装置と、前記基板上の切片を観察する観察装置と、該観察装置によって観察された切片を表示する表示部とを備える組織表示システムである。
本発明の参考例の一態様は、生体組織の切片を貼り付け可能な表面を有するとともに複数の小片に分割可能に設けられ、複数の小片に分割されることによって前記表面に貼り付けられた前記切片を分割する基板である。
本発明の参考例の一態様は、生体組織の切片を貼り付け可能な表面を有するとともに複数の小片に分割可能に設けられた基板の、前記切片が貼り付けられる表面とは反対側の面に接着され、前記基板の表面方向に伸展可能な伸展部材であって、前記表面方向に伸展することによって接着されている前記基板を複数の小片に分割する伸展部材である。
本発明の第５の態様は、生体組織の切片を貼り付け可能な表面を有すると共に複数の小片に分割可能に設けられた基板の前記表面に複数の前記小片にまたがって切片を貼り付ける貼付ステップと、前記基板を複数の小片に分割することによって前記基板の表面に貼り付けられている切片を分割する分割ステップとを含み、該分割ステップにおいて、前記複数の小片のうち、前記切片内の採取すべき領域が貼り付けられている一部の小片の、前記切片が貼り付けられている面および該面とは反対側の面のうち少なくとも一方の面を支持部材によって支持するとともに、前記支持部材によって支持された前記一部の小片が挿入可能な孔を端面に有する略筒状の部材を、前記基板を間に挟んで前記孔が前記支持部材と対向するように前記基板に前記端面を向けて配置し、前記略筒状の部材の前記端面と前記孔の内面とが成す角によって前記一部の小片に貼り付けられた切片の分割が補助されるように、前記支持部材を前記略筒状の部材側に向かって前記表面に交差する方向に移動させて前記一部の小片を前記孔内へ移動させる組織分割方法である。
本発明の第６の態様は、生体組織の切片を貼り付け可能な表面を有すると共に複数の小片に分割可能に設けられた基板に前記切片を貼り付ける貼付ステップと、前記切片が貼り付けられた前記基板を複数の小片に分割することによって前記切片を前記小片と略同等の形状の断片に分割する分割ステップと、前記分割された前記切片の断片を採取する採取ステップとを含み、前記分割ステップにおいて、前記複数の小片のうち、前記切片内の採取すべき領域が貼り付けられている一部の小片の、前記切片が貼り付けられている面および該面とは反対側の面のうち少なくとも一方の面を支持部材によって支持するとともに、前記支持部材によって支持された前記一部の小片が挿入可能な孔を端面に有する略筒状の部材を、前記基板を間に挟んで前記孔が前記支持部材と対向するように前記基板に前記端面を向けて配置し、前記略筒状の部材の前記端面と前記孔の内面とが成す角によって前記一部の小片に貼り付けられた切片の分割が補助されるように、前記支持部材を前記略筒状の部材側に向かって前記表面に交差する方向に移動させて前記一部の小片を前記孔内へ移動させる細胞分取方法である。
本発明によれば、生体組織の切片を簡便な構成と操作で十分な量の細胞を含む寸法の断片に分割することができるという効果を奏する。
本発明の参考実施形態に係る細胞分取システムの全体構成図である。 溝を粘着シート側に向けて粘着シートに接着されたガラス基板の側面図である。 溝を粘着シートと反対側に向けて粘着シートに接着されたガラス基板の側面図である。 粘着シートに接着したガラス基板を示す図である。 粘着シートの伸展により分割されたガラス基板を示す図である。 伸展用ステージおよび治具の構成を示す図である。 図４の伸展用ステージおよび治具の使用方法を説明する図であり、粘着シートを伸展させた状態を示している。 図４の伸展用ステージおよび治具の使用方法を説明する図であり、粘着シートをグリップリングで保持した状態を示している。 図１の細胞分取装置および細胞分取システムを使用して切片から細胞を採取する手順を説明するフローチャートである。 基板の変形例を示す図である。 基板のもう１つの変形例を示す図である。 図１の細胞分取システムの変形例を示す図である。 図１の細胞分取システムのもう１つの変形例を示す図である。 図１の細胞分取システムを使用して細胞を採取する手順の変形例を示すフローチャートである。 外筒および内筒を用いた粘着シートを伸展させる方法の変形例を示す図であり、外筒に粘着シートを設置した状態を示す図である。 図１２の外筒および内筒を用いて粘着シートを伸展させた状態を示す図である。 図１２の外筒および内筒を用いて別の方法により粘着シートを伸展させた状態を示す図である。 粘着シートを伸展させる方法のもう１つ変形例を示す図であり、粘着シートの伸展前を示している。 粘着シートを伸展させる方法のもう１つ変形例を示す図であり、粘着シートの伸展後を示している。 グリップリングの変形例を示す図である。 本発明の一実施形態に係る細胞分取装置および細胞分取システムが備える基板の構成を示す図である。 本発明の一実施形態に係る細胞分取装置および細胞分取システムが備える支持部材および分割補助部の構成を示す図である。 図１８の支持部材および分割補助部を使用した切片の分割方法を説明する図である。 図１８の支持部材および分割補助部を使用した切片の分割方法を説明する図である。 図１８の支持部材を使用した切片の分割方法の変形例を示す図である。 支持部材の変形例と該支持部材を使用した切片の分割方法を説明する図である。 図１８の支持部材の変形例を示す図である。 本発明の参考実施例により作成した切片の写真であり、分割前の状態を示している。 図２３の切片の分割後の状態を示す写真である。
（参考実施形態）
以下に、本発明の参考実施形態に係る細胞分取装置１および細胞分取システム１００について図１から図１６を参照して説明する。
本実施形態に係る細胞分取システム１００は、図１に示されるように、光学顕微鏡（観察装置）２と、本実施形態に係る細胞分取装置１とを備えている。
光学顕微鏡２は、正立型である。光学顕微鏡２は、その視野を撮像するＣＣＤカメラなどの撮像装置３がカメラ用ポート２ａに接続されている。撮像装置３によって撮像された映像は図示しないモニタに表示されるようになっている。細胞分取システム１００は、このモニタと共に組織表示システムを構成している。映像は、イメージプロセッサなどの図示しない映像処理装置によって映像処理が施されてからモニタに表示されてもよい。
細胞分取装置１は、生体組織の切片が貼付されるガラス基板（基板）４と、その表面に沿う方向に伸展可能でありガラス基板４が接着される粘着シート（伸展部材）５と、該粘着シート５を伸展させる伸展用ステージ（分割部、伸展部、押圧部材）６と、該伸展用ステージ６で伸展させる粘着シート５を保持する治具７と、粘着シート５からガラス基板４の小片４ｂを採取する採取部８とを備えている。本発明に係る細胞分割装置は、基板４と、伸展用ステージ６と、治具７とからなる構成に相当する。
ガラス基板４は、平坦な表面を有する平板状である。ガラス基板４の表面には、図２Ａおよび図３Ａに示されるように、所定の間隔を空けて格子状の溝（分割線）４ａが形成されている。溝４ａは、例えば、レーザ加工や化学エッチング、ダイシングなどにより形成されてもよく、ガラス切りなどを用いて操作者の手作業により形成されてもよい。
ガラス基板４は、生体組織の切片を安定に支持可能な厚さ、例えば、０．０５ｍｍから０．５ｍｍが好ましい。溝４ａの間隔は、切片から採取すべき断片の大きさによって適宜変更可能である。例えば、溝４ａの間隔は、切片内から十分に細かい位置精度で所望の領域の断片を採取しつつ、採取した断片に十分な量の細胞が含まれているように、０．０５ｍｍから５．０ｍｍが好ましい。ガラス基板４は、その上に貼付された切片の透過光像を光学顕微鏡２で観察できるように、光学的に透明なものが用いられる。
ガラス基板４は、その表面と切片との密着性を向上するために、表面にシラン化などの化学処理が施されていてもよい。また、ガラス基板４は、小片４ｂの採取後に行う検査などの目的に応じて、例えば、核酸やタンパク質などが吸着を防ぐためのコーティング処理などが施されていてもよい。
粘着シート５は、一方の面に接着剤が塗布され、ガラス基板４を十分に堅固にかつ後述する採取部８により剥離可能に接着可能な粘着性を有している。また、粘着シート５はその表面に沿う方向に伸展可能である。粘着シート５上にガラス基板４を接着した状態で粘着シート５をその表面に沿う方向に伸展させたときに、粘着シート５の伸展に伴ってガラス基板４もその表面に沿う方向に引っ張られる。そして、図３Ｂに示されるように、ガラス基板４が溝４ａの位置で切断されて複数の小片４ｂに分割するようになっている。このときに、ガラス基板４の表面上に貼付された切片Ａも同時にその表面に沿う方向に引っ張られて溝４ａに沿って切断される。
粘着シート５は、光学的に透過性または半透過性を有している。これにより、光学顕微鏡２で粘着シート５を観察したときに、該粘着シート５を挟んで光学顕微鏡２の対物レンズと反対側に配置された物体も観察可能になっている。粘着シート５としては、例えば、半導体製造プロセスのダイシングステップにおいてウエハの一時的な固定に使用されるダイシングテープを好適に用いることができる。
なお、図２Ａには、ガラス基板４が溝４ａを粘着シート５側に向けて粘着シート５に接着されている例が示されているが、図２Ｂに示されるように、ガラス基板４が溝４ａを粘着シート５と反対側に向けて該粘着シート５に接着されてもよい。
伸展用ステージ６は、図４に示されるように、略円柱状であり、両端が略平行にかつ平坦に形成されている。伸展用ステージ６は上端側の部分（以下、小径部分という。）６ａが、他の部分（以下、大径部分という。）６ｂよりも小さい径寸法を有するように、側面に段差が形成されている。
治具７は、粘着シート５を広げた状態で貼付可能な下枠（固定部材）９ａと、該下枠９ａに上からかぶせる上枠９ｂと、粘着シート５を伸展した状態に保持するグリップリング１０ａ，１０ｂ（保持部材）とを有している。グリップリング１０ａ，１０ｂは、外リング１０ａと内リング１０ｂとからなる。外リング１０ａの内径寸法と内リング１０ｂの外径寸法とは略同一である。下枠９ａと上枠９ｂは、略中央部分に板圧方向に貫通した窓９ｃ，９ｄがそれぞれ形成されている。上枠９ｂの窓９ｄの内側にはその内周面に沿って外リング１０ａが嵌めこまれている。下枠９ａの９ｃ窓は、小径部分６ａの外径寸法以上の直径を有している。
治具７は次のように使用される。まず、内リング１０ｂを小径部分６ａの外周に沿って嵌める。また、ガラス基板４が接着された粘着シート５を、ガラス基板４を窓９ｃの位置に配置し、ガラス基板４が接着されている側を上方に向けた状態で下枠９ａの下面に接着する。これにより、粘着シート５のガラス基板４が接着された領域の周辺が所定の形状に固定される。次に、粘着シート５の窓９ｃと一致している部分を伸展用ステージ６の上端面に押し当てた状態で下枠９ａを下方向に押圧して移動させる。これにより、図５Ａに示されるように、粘着シート５の窓９ｃと一致している部分が伸展用ステージ６から押圧されて伸展する。この粘着シート５の伸展に伴ってガラス基板４が複数の小片４ｂに分割される。
次に、図５Ｂに示されるように、粘着シート５を伸展させたままの状態で上枠９ｂを下枠９ａにかぶせることにより外リング１０ａと内リング１０ｂを嵌める。これにより、粘着シート５の窓９ｃと一致する部分が伸展された状態にグリップリング１０ａ，１０ｂによって保持される。
なお、このようにして粘着シート５を伸展させたときに、該粘着シート５がどの程度伸展したかを知るための目印、例えば、目盛りが粘着シート５に付されていてもよい。
採取部８は、採取針１１と、該採取針１１を操作するマニピュレータ１２とを備えている。採取針１１の先端部は、小片４ｂと略同一またはそれ以下の直径寸法を有している。マニピュレータ１２は、アーム１２ａの先端に採取針１１を保持している。マニピュレータ１２は、操作者による操作に従ってアーム１２ａを３次元方向に移動させるようになっている。
このように構成された細胞分取装置１および細胞分取システム１００を使用して生体組織の切片から所望の細胞を含む断片を採取する方法について、図６を参照して以下に説明する。
本実施形態に係る細胞分取装置１および細胞分取システム１００を使用して生体組織の切片から目的の細胞を採取するには、まず、生体組織から採取用切片（切片）を切り出し（ステップＳ１）、切り出した採取用切片をガラス基板４上に貼付する（ステップＳ２、貼付ステップ）。そして、採取用切片を光学顕微鏡２で観察して検体画像を取得する（ステップＳ３）。
採取用切片の切り出しは、例えば、凍結包埋法やパラフィン包埋法などにより行われる。採取用切片の厚さは、採取した細胞の用途にもよるが、通常の病理標本などに用いられる切片の厚さ（約数μｍから１０μｍ）より厚くてもよく、例えば、５０μｍ程度の厚さで採取用切片が切り出される。切り出した採取用切片の寸法がガラス基板４の溝４ａの間隔よりも小さいときには、採取用切片が溝４ａをまたぐように採取用切片をガラス基板４上に貼付する。
また、採取用切片とは別に、生体組織の採取用切片の切り出し位置と隣接した位置から厚さ数μｍから１０μｍ程度の染色用切片を切り出す。切り出した染色用切片は、スライドガラスに貼付した後に、例えば、病理診断用の染色を施しておく（ステップＳ４）。そして、染色済みの染色用切片を光学顕微鏡２で観察して染色画像を取得し（ステップＳ５）、取得した染色画像内において所望の細胞が存在している採取すべき領域、例えば、癌細胞に浸食されている領域を決定する（ステップＳ６）。
次に、取得した検体画像と染色画像とを、各画像内の切片がぴったり重なり合うように重畳して表示し（ステップＳ７）、染色用切片内の決定した採取すべき領域に一致する小片４ｂの位置、例えば、その小片４ｂの列番号と段番号を記録する（ステップＳ８）。
次に、ガラス基板４を粘着シート５に接着する。なお、粘着シート５に予め接着しておいたガラス基板４上に切り出した採取用切片を貼付してもよい。次に、粘着シート５を伸展用ステージ６および治具７を使用して伸展させることによりガラス基板４を分割する（ステップＳ９、分割ステップ）。このときに、ガラス基板４上に貼付された採取用切片もガラス基板４と共にその表面方向に引っ張られることにより溝４ａの位置で断片に分割される。
次に、粘着シート５をグリップリング１０ａ，１０ｂによって伸展した状態に保持し、ガラス基板４が接着された側の面が下方を向くように粘着シート５を標本ステージ２ｂ上に設置する。このときに、粘着シート５を、下枠９ａから剥離した状態で標本ステージ２ｂに設置してもよく、下枠９ａと共に標本ステージ２ｂに設置しても良い。
次に、記録しておいた位置の小片４ｂを光学顕微鏡２で観察しながら、その視野内でマニピュレータ１２を操作することより採取針１１を採取すべき小片４ｂの背後に配置する。そして、採取すべき小片４ｂの、粘着シート５に接着している側の面を採取針１１で突くことにより小片４ｂを粘着シート５から剥離させて落下させる（ステップＳ１０、採取ステップ）。このときに、標本ステージ２ｂの下方にチューブラック１３を配置し、小片４ｂの落下位置に予め回収チューブ１３ａを設置しておいてもよい。
以上の手順により、採取用切片から所望の細胞が存在する領域の断片を小片４ｂと共に採取することができる。採取された細胞は、例えば、遺伝子検査などに用いられる。
このように、本実施形態によれば、簡便な構成と操作のみで切片から所望の細胞が存在する領域を選択的に採取することができるという利点がある。また、ＵＶレーザ光源のような高価な構成が不要であるので、製造コストを安価に抑えることができるという利点がある。また、ＬＭＤと異なり切片を力学的に切断しているので、比較的厚い切片でも容易に切断可能であると共に、溝４ａの間隔を調節するだけで小片４ｂの大きさを容易に拡大することができる。したがって、従来十分な細胞数を回収するために複数の切片から断片を採取する必要があり多大な労力を要していた作業が、１つまたは少数の小片４ｂを採取するだけで済むので、作業に要する労力と時間とを大幅に削減することができるという利点がある。
上記実施形態においては、切片を貼付する基板として、格子状の溝４ａが形成されたガラス基板４を用いることとしたが、これに代えて、ガラスの小片４ｂが平面方向に配列されてなるガラス基板４を使用してもよい。
この場合、ガラス基板４の形状を保持するために、図７に示されるように、予め粘着シート５上にガラスの小片４ｂが配列された状態で接着されている。このようにすることで、粘着シート５を伸展させたときに、小片４ｂ同士の境界（分割線）においてより容易にかつ確実にガラス基板４を分割することができる。
なお、予め分割された小片を粘着シート５上に配列した状態にするには、一例として以下のような方法を用いることができる。
粘着シート５上にガラス基板４を接着し、該ガラス基板４にガラス切りで格子状に傷をつける。そして、ガラス基板４を傷の位置で徒手的に割ることにより、容易に図７のように小片４ｂが粘着シート５上に配列した状態とすることができる。このときに、ガラス基板４が汚れないように、ガラス基板４表面をフィルムなどで保護しながら行うことが好ましい。
また、上記実施形態で採用した基板の構成は一例であり、この構成に限定されるものではない。
例えば、基板の素材は、ガラスの他に樹脂などでもよい。小片４ｂの形状としては、粘着シート５の表面に密に配列可能な形状であればよく、例えば、正六角形や三角形でもよい。また、図８に示されるように、小片として球状のガラスビーズや樹脂ビーズ４ｃを用い、これらを粘着シート５上に好ましくは単層で配列させることにより基板４’が構成されていてもよい。
また、基板として磁性を有するものを用いても良い。例えば、直径が１μｍから５００μｍの磁性粒子を粘着シート５の表面に密に配列させてもよいし、ステンレスなどの金属板を基板として使用してもよい。基板として金属のような可視光を透過させないものを用いた場合には、光学顕微鏡で粘着シート５の透過光像を観察したときに、小片４ｂが小さくてもよりはっきりと視認することができる。
この場合、採取部８として、磁石を使用してもよい。例えば、採取針１１の先端に、磁性粒子と略同一の大きさの磁石を設ける。そして、採取針１１の先端を、磁性粒子に粘着シート５と反対側から近づけることにより、所望の磁性粒子を磁力によって採取針１１の先端に捕捉して粘着シート５から採取することができる。
また、上記実施形態においては、正立型の光学顕微鏡２を使用し、伸展用ステージ６が光学顕微鏡２と別体で設けられている構成を採用したが、細胞分取システム１００の構成はこれに限定されるものではない。例えば、光学顕微鏡２として倒立型を使用してもよく、伸展用ステージ６を光学顕微鏡２に搭載してもよい。
図９は、倒立型の光学顕微鏡２に、伸展用ステージ６と治具７とを設けた構成の一例を示している。標本ステージ２ｂは、光学顕微鏡２の観察位置と、光学顕微鏡２の本体から外れた位置との間でガイドレール２ｃに沿って水平方向にスライド可能に設けられている。このような構成においては、標本ステージ２ｂを観察位置に配置した状態で治具７を下方に移動させることにより伸展用ステージ６上で粘着シート５を伸展させる。その後、標本ステージ２ｂをスライドさせ、光学顕微鏡２と別体で設けられた採取部８を使用して小片４ｂが採取される。
図１０は、正立型の光学顕微鏡２に、伸展用ステージ６、治具７および採取部８を設けた構成の一例を示している。伸展用ステージ６は、標本ステージ２ｂの上方に対物レンズと一体で上下方向に移動可能に設けられ、治具７によって標本ステージ２ｂの上方に保持された粘着シート５に対して上方から押し当てられるようになっている。この構成においては、標本ステージ２ｂ上で、粘着シート５の伸展から小片４ｂの採取までの一連の作業を行うことができる。
また、上記実施形態においては、採取用切片の検体画像と染色用切片の染色画像とを照らし合わせることにより採取すべき小片４ｂを決定することとしたが、これに代えて、採取用切片の画像から採取すべき小片４ｂを決定してもよい。
比較的厚い採取用切片の場合、細胞が厚さ方向に重なっているため、染色を施しても個々の細胞の形状や細胞の分布などを正確に像から認識することが難しい。しかし、そのような染色像や未染色の切片の像からでも、大まかな組織形状や細胞の分布に基づいて採取すべき領域を判別可能な場合には、例えば、図１１に示されるように、光学顕微鏡２で採取用切片を観察しながらその場で採取すべき小片４ｂを選択し（ステップＳ１１）、粘着シート５の伸展（ステップＳ９）および小片４ｂの採取（ステップＳ１０）を行ってもよい。このようにすることで、必要に応じて手順をさらに簡略化することができる。
また、上記実施形態においては、略円柱状の伸展用ステージ６を使用して粘着シート５を伸展させることとしたが、粘着シート５を伸展させる方法はこれに限定されるものではない。
例えば、伸展用ステージ６に代えて外筒１４ａおよび該外筒１４ａ内に収納可能な内筒１４ｂを使用してもよい。
この場合、図１２に示されるように、粘着シート５を外筒１４ａの上端面に被せて外筒１４ａの側面に固定する。符号１５は、粘着シート５を外筒１４ａの側面に固定するために固定部材を示している。次に、図１３に示されるように、内筒１４ｂを外筒１４ａの内部から相対的に突出させるか、または、図１４に示されるように、内筒１４ｂを外筒１４ａの外部から該外筒１４ａ内に相対的に押し込む。これにより、粘着シート５を各方向に略均一に伸展させることができる。
また、図１５Ａに示されるように、ガラス基板４が接着された領域を除いた位置において粘着シート５をホルダ１６により一定の形状に保持し、図１５Ｂに示されるように、ガラス基板４が接着された領域を伸展用ステージ６に押し当てることにより粘着シート５を伸展させてもよい。
また、グリップリングとして、磁力によって互いに密着状態に維持できるものを用いてもよい。例えば、図１６に示されるように、グリップリング１０ｃ，１０ｄは、同一の径寸法を有する上リング１０ｃと下リング１０ｄとからなり、上リング１０ｃは磁石からなり、下リング１０ｄはステンレスなどの金属からなる。上リング１０ｃと下リング１０ｄとの間に粘着シート５を伸展させた状態で挟んで両リング１０ｃ，１０ｄを互いに磁力で密着させることによっても、粘着シート５を伸展した状態に保持することができる。両方のリング１０ｃ，１０ｄが、互いに引力を発生させる磁石からなっていてもよい。
また、上記実施形態においては、採取針１１で小片４ｂを背後から突くことにより該小片４ｂを粘着シート５から剥離させて回収することとしたが、これに代えて、内部が陰圧に吸引可能な回収容器を使用してもよい。このようにしても、回収容器を採取すべき小片４ｂに粘着シート５と反対側から近づけることにより、小片４ｂを粘着シート５から剥離させて回収容器内に回収することができる。
また、粘着シート５として、紫外線が照射されることにより粘着性が失われるものを用いてもよい。
この場合、例えば、光学顕微鏡２に紫外光源（採取部）を搭載する。そして、紫外光源から放射された紫外線を、対物レンズを介して採取すべき小片４ｂの位置に局所的に照射することにより、小片４ｂを容易に粘着シート５から剥離させて回収することができる。他にも、光ファイバで紫外光を導き、ファイバ端を採取すべき小片４ｂの位置に向けて局所的に照射することによっても、同様の効果を得られる。
（本発明の一実施形態）
次に、本発明の一実施形態に係る細胞分取装置および細胞分取システムについて図１７から図２２を参照して説明する。
本実施形態に係る細胞分取装置および細胞分取システムは、基板、分割部および採取部の構成において前述した参考実施形態と異なる。したがって、これらの構成について主に説明し、参考実施形態と共通する構成についての説明を省略する。
本実施形態において、基板２０は、平面状に２次元配列された複数の小片２０ａの集合体からなり、図１７に示されるように、略直方体の小片２０ａの側面同士が密着した状態に保持されている。これらの小片２０ａの少なくとも一方の端面は、生体組織の採取用切片（本実施形態においては、以下、単に切片という。）を貼り付け可能な略平坦な表面を形成するように、同一平面上に配置されている。以下、基板２０および小片２０ａの、切片が貼り付けられる面を組織接着面ともいう。
このような小片２０ａの配列構造は、例えば、半径方向内方向の押圧力を発生する輪ゴムのような環状の部材２１によって１つに束ねられることによって保持されている。すなわち、隣接する小片２０ａの側面同士が互いに押圧し合い、それによって側面間に発生する摩擦力により小片２０ａの配列構造は保持されている。この配列構造において各小片２０ａはその周囲に隣接する複数の小片２０ａによって支持されているため、１つの小片２０ａが除かれたとしても残された小片２０ａの配列構造は安定に保持される。
なお、小片２０ａは、隣接する側面同士が接着剤によって接着され、または、組織接着面とは反対側の面に接着剤が塗布されることにより配列状態に保持されていてもよい。また、基板２０は、微細加工が容易な材料であり、切片との接着性が良好な表面を有し、生物材料の混入がない材料、例えば、ガラス、金属、またはプラスチックからなるものが好ましい。また、小片２０ａの形状は、配列構造を維持可能な形状であればよく、球状や円柱状、または直方体以外の多角柱状であってもよい。小片２０ａが正六角柱の場合には、配列構造がさらに安定なものとなる。
また、本実施形態において、小片２０ａとは、１個の直方体の小片と、該小片を除く小片群との両方を示す。
また、本実施形態に係る細胞分取装置は、参考実施形態における粘着シート５、伸展用ステージ６および治具７に代えて、支持部材２２および分割補助部２３を備えている。
支持部材２２は、１つの小片２０ａの端面よりも狭い面積で該端面と接触させられる接触面２２ａを有している。なお、図１８には、支持部材２２の一例として、略半球形の一端面を有する円柱状の部材が示されているが、支持部材２２の接触面２２ａは、小片２０ａの端面を安定して押圧可能な形状であればよく、例えば、小片２０ａの端面と十分に広い面積で接触するように略平坦な形状であってもよい。
分割補助部２３は、支持部材２２を使用した切片の分割を補助するものである。分割補助部２３は、筒状の部材であり、長手方向に沿って形成されて両端面に開口する孔２３ａを有している。分割補助部２３の少なくとも一方の端面は、長手方向に対して略垂直に形成された平坦面である。この一方の端面を小片２０ａの端面に接触させて配置したときに、孔２３ａが小片２０ａの厚さ方向に沿って延びるようになっている。孔２３ａの横断面形状は、小片２０ａの端面よりも大きく小片２０ａが通過可能な形状であればよいが、小片２０ａの端面よりも若干大きい横断面形状を有していることが好ましい。
このように構成された細胞分取装置および細胞分取システムを使用して生体組織の切片から所望の細胞を含む断片を採取する方法について説明する。本実施形態に係る組織分割方法および細胞分取方法は、図６に示される参考実施形態に係るそれらと、切片を分割する工程（ステップＳ９）および分割された断片を採取する工程（ステップＳ１０）において異なる。したがって、これら２つの工程についてのみ説明する。
基板２０を切片Ａが貼付されている組織接着面を下方に向けて標本ステージ２ｂに設置した後、図１９Ａに示されるように、採取すべき小片２０ａの、組織接着面とは反対側の面（以下、反対面ともいう。）に支持部材２２を配置する。また、分割補助部２３を、孔２３ａの開口と支持部材２２とが基板２０を間に挟んで対向するように配置し、分割補助部２３の一方の端面を切片Ａに接触させる。支持部材２２の操作は、参考実施形態の採取針１１と同様にマニピュレータ１２によって行われる。
次に、図１９Ｂに示されるように、支持部材２２を下方に移動させることにより、小片２０ａの反対面を支持部材２２の接触面２２ａで押圧してこの小片２０ａを下方に移動させる（分割ステップ、採取ステップ）。小片２０ａ同士は摩擦力によって互い支持し合っているので、周囲の小片２０ａ群の配列状態は保持されたまま、支持部材２２によって押圧された小片２０ａのみが周辺の小片２０ａ群に対して下方に移動して分離する。
分離した小片２０ａの組織接着面に貼付されている切片Ａの一部は、他の部分に対して下方に引っ張られることにより小片２０ａの組織接着面と略同等の形状の断片Ａ’に切断される。このときに、分割補助部２３の一方の端面と孔２３ａの内周面とが成す角が、切片Ａに対して刃のように作用する。これにより、切片Ａがより容易に切断されると共に、その断片Ａ’の形状は小片２０ａの組織接着面とより正確に一致したものとなる。このようにして切片Ａの断片Ａ’と共に分離した小片２０ａは、標本ステージ２ｂの下方に予め配置された回収チューブ１３ａに落下して回収される。
以上の手順により、切片Ａから所望の細胞が存在する領域の断片Ａ’を小片２０ａと共に採取することができる。
このように、本実施形態によれば、簡便な構成と操作のみで切片Ａから所望の細胞が存在する領域を選択的に採取することができるという利点がある。また、ＵＶレーザ光源のような高価な構成が不要であるので、製造コストを安価に抑えることができるという利点がある。また、ＬＭＤと異なり切片Ａを力学的に切断しているので、比較的厚い切片Ａでも容易に切断可能であると共に、小片２０ａの寸法を調節するだけで断片Ａ’の大きさを容易に拡大することができる。したがって、従来十分な細胞数を回収するために複数の切片から断片を採取する必要があり多大な労力を要していた作業が、１つまたは少数の小片２０ａを採取するだけで済むので、作業に要する労力と時間とを大幅に削減することができるという利点がある。
なお、上記実施形態においては、支持部材２２により小片２０ａの反対面を押圧することとしたが、これに代えて、図２０に示されるように、小片２０ａの組織接着面を押圧することとしてもよい。この場合、基板２０を、切片Ａが貼り付けられている側を上方に向けて標本ステージ２ｂに設置することにより、支持部材２２によって分離した小片２０ａをそのまま下方の回収チューブ１３ａに落下させることができる。
支持部材２２により小片２０ａの組織接着面を押圧する場合、支持部材２２の接触面２２ａと切片Ａとが直接接触することを防ぐために、これらの間に配置される保護部材２４を備えることとしてもよい。
このようにすることで、切片Ａに含まれる生体分子等の物質が支持部材２２に付着することが防止されるので、同一の支持部材２２を連続して使用して複数の小片２０ａを分離し断片Ａ’を採取したとしても、支持部材２２を介した断片Ａ’間のコンタミネーションを防ぐことができる。
この場合、小片２０ａの組織接着面と略同一の大きさまたはそれより小さい保護部材２４を使用し、小片２０ａを分離した後に小片２０ａと共に保護部材２４も回収することとしてもよい。この場合、保護部材２４は、小片２０ａに付着した断片Ａ’の分析に影響を与えない材料からなるものが好ましい。このようにしても、支持部材２２を介した断片Ａ’間のコンタミネーションを防ぐことができる。
なお、切片Ａがパラフィン包埋法によって作成されている場合は、支持部材２２と切片Ａとが接触したときに切片Ａに含まれる生体分子等の物質が支持部材２２に付着する可能性は十分に低い。したがって、保護部材２４を使用せずに同じ支持部材２２で連続して小片２０ａを分離したとしても、採取した断片Ａ’間のコンタミネーションが発生する可能性は十分に低い。一方、凍結包埋法で作成された切片Ａのように生体組織の切断面が露出している切片の場合も、採取する断片Ａ’が十分に大きく、微量のコンタミネーションが発生したとしてもその後の断片Ａ’の分析結果に影響が無い場合は保護部材２４を使用しなくてもよい。
また、上記実施形態においては、支持部材２２に代えて、他の手段によって小片２０ａの組織接着面または反対面を押圧することとしてもよい。例えば、分割部が、小片２０ａの端面よりも狭い開口を有する管部材を備え、開口を小片２０ａの端面に対向配置した状態で管部材の内部に圧縮空気を供給することにより、開口から小片２０ａの端面に圧縮空気を噴き付けて該端面を押圧することとしてもよい。
また、上記実施形態においては、小片２０ａの組織接着面を押圧することにより該小片２０ａを分離することとしたが、これに代えて、小片２０ａの反対面を引っ張ることとしてもよい。
この場合も小片２０ａの分離に支持部材２２’が使用される。すなわち、図２１に示されるように、支持部材２２’の接触面２２ａ’に小片２０ａの反対面を吸着する吸着部材２５を設け、該吸着部材２５を介して接触面２２ａ’を反対面に接触させることにより、支持部材２２’に小片２０ａが吸着する。そして、支持部材２２’を矢印で示される方向に移動させることにより、１つの小片２０ａを分離することができる。分離した小片２０ａは、吸着部材２５から剥離して回収される。なお、図２１には、略平坦な接触面２２ａ’を有する支持部材２２’が示されている。
吸着部材２５としては、例えば、表面に粘着性を有する部材が用いられる。小片２０ａが磁性物質を含む場合には、吸着部材２５として磁石を使用することとしてもよい。また、上述した管部材を使用し、開口を端面に対向配置して管部材内を吸引することによっても、小片２０ａの反対面を引っ張って該小片２０ａを分離することができる。
また、上記実施形態においては、図２２に示されるように、２つの支持部材２２，２２”を使用して小片２０ａの両端面を支持し、これらの支持部材２２，２２”を一体的に上方向または下方向に移動させることにより小片２０ａを分離することとしてもよい。
また、上記実施形態においては、小片２０ａを分離する方向は鉛直方向に対して上方・下方に限らず、斜め方向に小片２０ａを移動させて分離することとしてもよい。
次に、上述した参考実施形態の実施例について説明する。
本実施例では、細胞分取装置により生体組織の切片が分割されることを確認するため、以下の実験を行った。
生体組織としてブタの結腸を使用し、生体組織から、厚さが５０μｍ、４辺が約１０ｍｍの切片を凍結包埋法により切り出した。切り出した切片を、ダイシングシート（伸展部材）上に角が互いに隣接するように配列して貼付された４枚のカバーガラス上に、該カバーガラスの境界（分割線）をまたぐように貼付した後、切片を風乾した。カバーガラスは、各辺寸法が１８ｍｍ、厚さが０．１３ｍｍから０．１７ｍｍのものを使用した。すなわち、本実施例においては、小片としての４つのカバーガラスから１つの基板が構成され、これらの４つのカバーガラスは溝によって互いに区切られている。
次に、ダイシングテープを、略中央部に円状の窓が貫通して形成されている上枠（固定部材）に、切片が窓の略中央部分に配置されるように貼り付けた。次に、カバーガラスが貼付されている側の面を上方に向け、窓内に円柱状のステージ（押圧部材、伸展部、分割部）が配置された状態で、上枠を略水平に保ちながら押し下げることにより、ダイシングテープの窓内に配置されている部分をその平面方向に伸展させた。これにより、４枚のカバーガラスを互いに離間させ、カバーガラス上に貼付されていた切片を、カバーガラスの境界において４つの断片に分割した。このようにして切片を分割する前と後の切片の写真を図２３および図２４に示す。
図２３は、ダイシングテープを伸展する前の状態を示している。写真の略中央に縦方向現れている線Ｌが、カバーガラスの境界（分割線）である。
図２４は、ダイシングテープを伸展させた状態を示しており、切片がカバーガラスの境界に沿ってきれいに分割されていることが分かる。
以上の実験から、本発明の組織分割装置、細胞分取装置および細胞分取システムを用いることにより、比較的厚い切片であっても容易にかつ分割線に沿って十分にきれいに分割できることが確認された。
上述した参考実施形態および実施例から、以下の付記項に記載の本発明の参考例のもう１つの態様が導かれる。
（付記項１）
生体組織の切片を貼り付け可能な表面を有し、複数の小片に分割可能に設けられた基板と、該基板を複数の小片に分割することによって前記表面に貼り付けられた切片を前記小片と略同等の形状の断片に分割する分割部と、該分割部によって分割された前記小片を採取する採取部とを備える細胞分取装置。
付記項１に係る発明によれば、基板と該基板に貼り付けられた生体組織の切片を分割部によっていっしょに分割し、分割された小片を採取部によって採取するだけの簡便な構成と操作で小片と共に切片の断片を採取することができる。また、切片を厚くし、または、小片を平面方向に大きくすることにより、各小片に付着した細胞の量を増やし、１個または数個の小片を採取するだけで遺伝子などの微量な生体試料の検査にも十分な量の細胞を容易に採取することができる。
（付記項２）
前記基板は、前記複数の小片が平面状に配列されてなり、前記分割部が、前記小片同士を相対的に移動させる力を前記基板に加えることで前記基板を分割する付記項１に記載の細胞分取装置。
（付記項３）
前記基板は、前記複数の小片に区画する溝が形成されている付記項２に記載の細胞分取装置。
（付記項４）
前記基板が、分離した前記複数の小片の集合体からなる付記項２に記載の細胞分取装置。
（付記項５）
前記分割部が、前記小片同士を前記表面に沿う方向に相対的に移動させる力を前記基板に加える付記項１から付記項４のいずれかに記載の細胞分取装置。
（付記項６）
前記基板の前記切片が貼り付けられる表面とは反対側の面を接着すると共に前記表面に沿う方向に伸展可能な伸展部材を備え、前記分割部が、少なくとも前記基板に含まれる一部の小片が接着されている領域において前記伸展部材を前記表面に沿う方向に伸展させる伸展部を備える付記項５に記載の細胞分取装置。
付記項６に係る発明によれば、切片が貼り付けられた基板を伸展部材上に接着した状態で、伸展部により伸展部材を伸展させることにより、基板上に貼り付けられた切片を基板と共に分割することができる。
（付記項７）
前記伸展部材が、前記基板の前記反対側の面を剥離可能に接着する付記項６に記載の細胞分取装置。
付記項７に係る発明によれば、基板を分割した後に小片を伸展部材から剥離して容易に回収することができる。
（付記項８）
前記伸展部材が、その表面に粘着性を有する付記項７に記載の細胞分取装置。
付記項８に係る発明によれば、基板を容易に伸展部材上に接着することができる。
（付記項９）
前記基板は、分離した前記複数の小片が、互いに隣接して配列した状態で前記伸展部材に接着されてなる付記項６または付記項７に記載の細胞分取装置。
付記項９に係る発明によれば、伸展部材を伸展させたときに基板を容易にかつ確実に小片に分割することができる。
（付記項１０）
前記伸展部材が、光学的に透明または半透明な材料からなる付記項６から付記項９のいずれかに記載の細胞分取装置。
付記項１０に係る発明によれば、伸展部材の透過光像を光学顕微鏡で観察したときに伸展部材上の小片の位置を確認することができる。
（付記項１１）
前記小片が、０．０５ｍｍから０．５ｍｍの厚さ寸法と０．０５ｍｍから５．０ｍｍの辺寸法とを有する直方体状である付記項１から付記項１０のいずれかに記載の細胞分取装置。
付記項１１に係る発明によれば、切片から所望の領域を十分に細かい精度で選択して採取しつつ、各小片に十分な量の細胞を付着させることができる。
（付記項１２）
前記伸展部が、前記伸展部材の、前記基板が接着されている領域の周辺部位を所定の形状に固定する固定部材と、該固定部材により固定された前記伸展部材の前記領域を、前記基板が接着されている面と反対の面の側から押圧する押圧部材とを備える付記項６から付記項１１のいずれかに記載の細胞分取装置。
付記項１２に係る発明によれば、伸展部材を簡便な構成と操作のみで伸展させることができる。
（付記項１３）
前記採取部が、前記伸展部材の前記小片が接着されている位置を、該小片が接着されている面とは反対側の面から突く針部材を備える付記項６から付記項１２のいずれかに記載の細胞分取装置。
付記項１３に係る発明によれば、複数の小片の中から特定の小片だけを容易に伸展部材から剥離させて採取することができる。
（付記項１４）
前記伸展部材の前記領域を伸展した状態に保持する保持部材を備える付記項６から付記項１３のいずれかに記載の細胞分取装置。
付記項１４に係る発明によれば、伸展部材を伸展させて各小片同士の間に間隔が空いた状態に保持し、採取部による小片の採取をより容易にすることができる。
（付記項１５）
前記保持部材が、前記伸展部材の前記基板が接着されている側の面を下向きに保持可能である付記項１４に記載の細胞分取装置。
付記項１５に係る発明によれば、保持部材により伸展部材を、基板を下に向けて保持した状態で小片を剥離させることにより、小片を自重により落下させて容易に回収することができる。
（付記項１６）
前記保持部材により保持された前記伸展部材の、前記基板が接着されている面の側に配置され、内部が陰圧に吸引される回収容器を備える付記項１４または付記項１５に記載の細胞分取装置。
付記項１６に係る発明によれば、回収容器を採取すべき小片に接近させるだけで容易に該小片を回収容器内に回収することができる。
（付記項１７）
前記小片が、０．００１ｍｍから０．５ｍｍの直径寸法を有する磁性粒子である付記項９に記載の細胞分取装置。
付記項１７に係る発明によれば、例えば、回収した小片を溶液中で処理する際に磁力を利用して溶液から分離するなど、処理を効率化することができる。
（付記項１８）
前記採取部が、前記小片の寸法と略同一の大きさの空間に、前記磁性粒子を引き寄せる磁力を発生させる磁石を有する付記項１７に記載の細胞分取装置。
付記項１８に係る発明によれば、磁石を所望の小片に接近させることにより、該小片を磁石に捕捉して容易に伸展部材から採取することができる。
（付記項１９）
付記項１から付記項１８のいずれかに記載の細胞分取装置と、前記基板上の前記切片を観察する観察装置とを備える細胞分取システム。
付記項１９に係る発明によれば、基板上に貼付された切片や分割後に形成された小片などを観察装置によって観察することにより、採取すべき小片の選択や、選択した小片の採取をより容易にかつより正確に行なうことができる。
（付記項２０）
所定の分割線によって複数の小片に分割可能な基板の表面上に、前記分割線をまたいで生体組織の切片を貼付する貼付ステップと、前記切片が貼付された前記基板を前記表面に沿う方向に引っ張ることにより、前記基板および前記生体組織の切片を前記分割線で分割する分割ステップと、該分割ステップにおいて分割された前記小片を採取する採取ステップとを備える細胞分取方法。
付記項２０に係る発明によれば、貼付ステップにおいて切片を基板に貼付した後、分割ステップにおいて基板を引っ張ることにより基板と共に該基板上に貼付された切片を複数の小片に分割し、分割された複数の小片の中から採取ステップにおいて小片を選択して採取することにより、生体組織の切片から遺伝子検査にも十分な量の細胞を簡便な構成と操作で採取することができる。
１ 細胞分取装置
２ 光学顕微鏡（観察装置）
２ａ カメラ用ポート
２ｂ 標本ステージ
３ 撮像装置
４ ガラス基板（基板）
４ａ 溝（分割線）
４ｂ 小片
５ 粘着シート（伸展部材）
６ 伸展用ステージ（分割部、伸展部、押圧部材）
７ 治具
８ 採取部
９ａ 下枠（固定部材）
９ｂ 上枠
９ｃ，９ｄ 窓
１０ａ グリップリング、外リング（保持部材）
１０ｂ グリップリング、内リング（保持部材）
１０ｃ グリップリング、上リング（保持部材）
１０ｄ グリップリング、下リング（保持部材）
１１ 採取針（針部材）
１２ マニピュレータ
１２ａ アーム
１３ チューブラック
１３ａ 回収チューブ
１４ａ 外筒
１４ｂ 内筒
１５ 固定部材
１６ ホルダ
２０ 基板
２０ａ 小片
２１ 環状の部材
２２ 支持部材
２２ａ 接触面
２３ 分割補助部
２３ａ 孔
２４ 保護部材
２５ 吸着部材
１００ 細胞分取システム

Claims (12)

  1. 生体組織の切片を貼り付け可能な表面を有し、複数の小片に分割可能に設けられた基板と、
    該基板を複数の小片に分割することによって前記表面に貼り付けられた切片を前記小片と略同等の形状の断片に分割する分割部とを備え、
    該分割部が、
    前記複数の小片のうち、前記切片内の採取すべき領域が貼り付けられている一部の小片の、前記切片が貼り付けられている面および該面とは反対側の面のうち少なくとも一方の面を支持し、前記表面に交差する方向に移動させられることで前記一部の小片を他の小片に対して前記交差する方向に移動させる支持部材と、
    前記一部の小片に貼り付けられた前記切片の分割を補助する分割補助部とを備え、
    該分割補助部が、前記支持部材との間に前記基板を挟み該基板に端面を向けて配置され、前記支持部材によって移動された前記一部の小片が挿入可能な孔を前記端面に有する略筒状の部材を備え、前記端面と前記孔の内面とが成す角が前記切片の分割を補助する組織分割装置。
  2. 前記基板が、予め分割された前記複数の小片の集合体からなる請求項１に記載の組織分割装置。
  3. 前記基板は、前記複数の小片に区画する溝が形成されている請求項１に記載の組織分割装置。
  4. 前記分割部が、前記支持部材によって前記小片の前記一方の面を前記交差する方向に押圧する請求項１から請求項３のいずれかに記載の組織分割装置。
  5. 前記支持部材が、前記切片を間に挟んで前記切片が貼り付けられている面を支持し、
    前記支持部材と前記切片との間に配置され該切片の表面を覆って保護する保護部材を備える請求項４に記載の組織分割装置。
  6. 前記支持部材と前記一部の小片の前記反対側の面との間に配置されると共に該反対側の面を吸着する吸着部材を備え、
    前記分割部が、前記支持部材によって、前記一部の小片の前記反対側の面を前記交差す
    る方向に引っ張る請求項１から請求項３のいずれかに記載の組織分割装置。
  7. 前記分割部が、前記基板を間に挟んで対向配置され前記小片の前記切片が貼り付けられている面および前記反対側の面の両方を支持すると共に前記交差する方向に一体に移動させられる２つの前記支持部材を備える請求項１から請求項３のいずれかに記載の組織分割装置。
  8. 生体組織の切片を貼り付け可能な表面を有し、複数の小片に分割可能に設けられた基板と、
    該基板を複数の小片に分割することによって前記表面に貼り付けられた切片を前記小片と略同等の形状の断片に分割する分割部と、
    該分割部によって分割された前記切片の断片を採取する採取部とを備え、
    前記分割部が、
    前記複数の小片のうち、前記切片内の採取すべき領域が貼り付けられている一部の小片の、前記切片が貼り付けられている面および該面とは反対側の面のうち少なくとも一方の面を支持し、前記表面に交差する方向に移動させられることで前記一部の小片を他の小片に対して前記交差する方向に移動させる支持部材と、
    前記一部の小片に貼り付けられた前記切片の分割を補助する分割補助部とを備え、
    該分割補助部が、前記支持部材との間に前記基板を挟み該基板に端面を向けて配置され、前記支持部材によって移動された前記一部の小片が挿入可能な孔を前記端面に有する略筒状の部材を備え、前記端面と前記孔の内面とが成す角が前記切片の分割を補助する細胞分取装置。
  9. 請求項８に記載の細胞分取装置と、
    前記基板上の切片を観察する観察装置とを備える細胞分取システム。
  10. 請求項８に記載の細胞分取装置と、
    前記基板上の切片を観察する観察装置と、
    該観察装置によって観察された切片を表示する表示部とを備える組織表示システム。
  11. 生体組織の切片を貼り付け可能な表面を有すると共に複数の小片に分割可能に設けられた基板の前記表面に複数の前記小片にまたがって切片を貼り付ける貼付ステップと、
    前記基板を複数の小片に分割することによって前記基板の表面に貼り付けられている切片を分割する分割ステップとを含み、
    該分割ステップにおいて、
    前記複数の小片のうち、前記切片内の採取すべき領域が貼り付けられている一部の小片の、前記切片が貼り付けられている面および該面とは反対側の面のうち少なくとも一方の面を支持部材によって支持するとともに、前記支持部材によって支持された前記一部の小片が挿入可能な孔を端面に有する略筒状の部材を、前記基板を間に挟んで前記孔が前記支持部材と対向するように前記基板に前記端面を向けて配置し、
    前記略筒状の部材の前記端面と前記孔の内面とが成す角によって前記一部の小片に貼り付けられた切片の分割が補助されるように、前記支持部材を前記略筒状の部材側に向かって前記表面に交差する方向に移動させて前記一部の小片を前記孔内へ移動させる組織分割方法。
  12. 生体組織の切片を貼り付け可能な表面を有すると共に複数の小片に分割可能に設けられた基板に前記切片を貼り付ける貼付ステップと、
    前記切片が貼り付けられた前記基板を複数の小片に分割することによって前記切片を前記小片と略同等の形状の断片に分割する分割ステップと、
    前記分割された前記切片の断片を採取する採取ステップとを含み、
    前記分割ステップにおいて、
    前記複数の小片のうち、前記切片内の採取すべき領域が貼り付けられている一部の小片の、前記切片が貼り付けられている面および該面とは反対側の面のうち少なくとも一方の面を支持部材によって支持するとともに、前記支持部材によって支持された前記一部の小片が挿入可能な孔を端面に有する略筒状の部材を、前記基板を間に挟んで前記孔が前記支持部材と対向するように前記基板に前記端面を向けて配置し、
    前記略筒状の部材の前記端面と前記孔の内面とが成す角によって前記一部の小片に貼り付けられた切片の分割が補助されるように、前記支持部材を前記略筒状の部材側に向かって前記表面に交差する方向に移動させて前記一部の小片を前記孔内へ移動させる細胞分取方法。
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