JP6189743B2 - 血中フィラリア幼虫の検出方法、血液分析装置、及びコンピュータプログラム - Google Patents
血中フィラリア幼虫の検出方法、血液分析装置、及びコンピュータプログラム Download PDFInfo
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Description
図1は、本実施の形態に係る血液分析装置の構成を示す模式図である。本実施の形態に係る血液分析装置1は、動物から採取された全血検体に含まれる血球を種類毎に検出し、各血球を計数する、動物用多項目血球分析装置である。血液分析装置1は、イヌ、ネコ、ウサギなどの種々の動物種の中から一の動物種の指定を受け付けることで、指定された動物種に応じた測定モードで動作する多動物種対応型の血液分析装置である。図1に示すように、血液分析装置1は、測定ユニット2と、測定ユニット2を制御可能な情報処理ユニット5とを備えている。
測定ユニットの構成について説明する。図1に示すように、測定ユニット2は、検体容器Tを測定ユニット2の筐体内に取り込む検体容器設置部21と、血液検体を検体容器Tから吸引する検体吸引部22と、検体吸引部22により吸引した血液から測定に用いられる測定試料を調製する試料調製部23と、試料調製部23により調製された測定試料から血球を検出する検出部24と、CPU及びメモリ等からなる制御部25とを有している。
次に、情報処理ユニット5の構成について説明する。情報処理ユニット5は、コンピュータにより構成されている。図1に示すように、コンピュータ5は、CPU51a、ROM51b、RAM51c、ハードディスク51d、読出装置51e、入出力インタフェース51f、通信インタフェース51g、及び画像出力インタフェース51hを備えており、CPU51a、ROM51b、RAM51c、ハードディスク51d、読出装置51e、入出力インタフェース51f、通信インタフェース51g、及び画像出力インタフェース51hは、バス51jによって接続されている。
以下、本実施の形態に係る血液分析装置1の動作について説明する。
発明者らは、本実施の形態に係る血中ミクロフィラリアの検出方法(以下、「本方法」という)の性能を検証する試験を実施した。以下、検証試験について説明する。
なお、上述した実施の形態においては、血中に存在するフィラリア幼虫としてミクロフィラリアを検出する例を示したが、血中に現れるフィラリア幼虫である限り、被鞘幼虫(広義のミクロフィラリア)を検出してもよいし、キャリアから体内に侵入した感染幼虫を検出してもよい。
2 測定ユニット
22 検体吸引部
23 試料調製部
231 試薬容器
24 検出部
231 フローセル
237 レーザ光源
243 前方散乱光受光部
246 側方散乱光受光部
248 蛍光受光部
25 制御部
5 情報処理ユニット
51a CPU
51d ハードディスク
52 表示部
54a コンピュータプログラム
D 光学検出器
R 分析結果画面
Claims (12)
- ヒト以外の動物から採取された血液検体中のフィラリア幼虫の検出方法であって、
ヒト以外の動物から採取された血液検体から免疫学的手法を用いることなく測定試料を調製するステップと、
調製された測定試料をフローセルに流すステップと、
前記フローセルを流れる測定試料に光を照射するステップと、
光が照射された測定試料から発せられる前方散乱光、側方散乱光および/または蛍光を検出するステップと、
検出された光の特徴パラメータである前方散乱光強度、前方散乱光パルス幅、側方散乱光強度、側方散乱光パルス幅、蛍光強度および蛍光パルス幅のうちの少なくとも1つの特徴パラメータまたは少なくとも2つの特徴パラメータに基づいて、測定試料中の血球と区別してフィラリア幼虫を検出するステップと、を有し、
前記少なくとも1つの特徴パラメータは、前方散乱光パルス幅、側方散乱光パルス幅または蛍光パルス幅であり、
前記少なくとも2つの特徴パラメータは、側方散乱光強度と蛍光強度、側方散乱光強度と前方散乱光強度、前方散乱光パルス幅と前方散乱光強度、蛍光強度と前方散乱光強度、側方散乱光パルス幅と前方散乱光強度、または、蛍光パルス幅と前方散乱光強度である、血中フィラリア幼虫の検出方法。 - 測定試料中のフィラリア幼虫を検出するステップでは、前記少なくとも1つの特徴パラメータに基づいて、測定試料中の血球と区別して、フィラリア幼虫を検出する、請求項1に記載の血中フィラリア幼虫の検出方法。
- 測定試料中のフィラリア幼虫を検出するステップでは、前記少なくとも2つの特徴パラメータに基づいて、測定試料中の粒子を血球とフィラリア幼虫とに分類し、分類された血球及びフィラリア幼虫のそれぞれを個別に計数する、請求項1に記載の血中フィラリア幼虫の検出方法。
- 前記血球は白血球であり、
測定試料中のフィラリア幼虫を検出するステップでは、測定試料中の白血球を複数種類に分類し、分類された各種類の白血球を種類毎に計数する、請求項3に記載の血中フィラリア幼虫の検出方法。 - 前記少なくとも2つの特徴パラメータそれぞれの座標軸を有し、前記座標軸で規定される座標空間におけるフィラリア幼虫の分布を示す分布図と、フィラリア幼虫の計数結果とを含む画面を出力するステップをさらに有する、請求項1、3又は4に記載の血中フィラリア幼虫の検出方法。
- 測定試料を調製するステップでは、血中の粒子を染色する染色試薬を血液検体に混和して測定試料を調製し、
測定試料中のフィラリア幼虫を検出するステップでは、前方散乱光強度または側方散乱光強度と、蛍光強度または蛍光パルス幅とに基づいて、測定試料中の血球と区別して、フィラリア幼虫を検出する、請求項1、3乃至5の何れか1項に記載の血中フィラリア幼虫の検出方法。 - 前記測定試料中のフィラリア幼虫を検出するステップにおいて、
側方散乱光強度または前方散乱光強度と、蛍光強度とに基づいて、測定試料中の血球と区別して、フィラリア幼虫を検出する、請求項6に記載の血中フィラリア幼虫の検出方法。 - 測定試料を調製するステップでは、血液検体に溶血剤を混和して測定試料を調製する、請求項1乃至7の何れか1項に記載の血中フィラリア幼虫の検出方法。
- 前記血液検体は、イヌから採取される、請求項1乃至8の何れか1項に記載の血中フィラリア幼虫の検出方法。
- 自動血球分析装置を用いて、上記各ステップを自動的に実行する、請求項1乃至9の何れか1項に記載の血中フィラリア幼虫の検出方法。
- ヒト以外の動物から採取された血液検体中のフィラリア幼虫を検出できるヒト以外の動物用の血液分析装置であって、
ヒト以外の動物から採取された血液検体から免疫学的手法を用いることなく測定試料を調製する試料調製部と、
前記試料調製部によって調製された測定試料が供給されることにより、試料流を形成するフローセルと、
前記フローセルに形成された試料流に光を照射する光源と、
前記光源によって光が照射された測定試料から発せられる光を受け、受光量に応じた信号を出力する光検出部と、
前記光検出部からの出力信号に含まれる特徴パラメータである前方散乱光強度、前方散乱光パルス幅、側方散乱光強度、側方散乱光パルス幅、蛍光強度および蛍光パルス幅のうちの少なくとも1つの特徴パラメータまたは少なくとも2つの特徴パラメータに基づいて、測定試料中の血球と区別してフィラリア幼虫を検出する制御部と、を備え、
前記光検出部は、前方散乱光検出部、側方散乱光検出部および/または蛍光検出部を備えており、
前記少なくとも1つの特徴パラメータは、前方散乱光パルス幅、側方散乱光パルス幅または蛍光パルス幅であり、
前記少なくとも2つの特徴パラメータは、側方散乱光強度と蛍光強度、側方散乱光強度と前方散乱光強度、前方散乱光パルス幅と前方散乱光強度、蛍光強度と前方散乱光強度、側方散乱光パルス幅と前方散乱光強度、または、蛍光パルス幅と前方散乱光強度である、血液分析装置。 - ヒト以外の動物から採取された血液検体から免疫学的手法を用いることなく調製された測定試料をフローセルに流し、前記フローセルを流れる測定試料に光を照射し、光が照射された測定試料から発せられる光を前方散乱光検出部、側方散乱光検出部および/または蛍光検出部を含む光検出部によって検出したときに、コンピュータに、血中のフィラリア幼虫を検出させるためのコンピュータプログラムであって、
前記光検出部により検出された光の特徴パラメータを含む測定データを取得するステップと、
取得された前記測定データに含まれる前記特徴パラメータである前方散乱光強度、前方散乱光パルス幅、側方散乱光強度、側方散乱光パルス幅、蛍光強度および蛍光パルス幅のうちの少なくとも1つの特徴パラメータまたは少なくとも2つの特徴パラメータに基づいて、測定試料中の血球と区別してフィラリア幼虫を検出するステップと、
を前記コンピュータに実行させ、
前記少なくとも1つの特徴パラメータは、前方散乱光パルス幅、側方散乱光パルス幅または蛍光パルス幅であり、
前記少なくとも2つの特徴パラメータは、側方散乱光強度と蛍光強度、側方散乱光強度と前方散乱光強度、前方散乱光パルス幅と前方散乱光強度、蛍光強度と前方散乱光強度、側方散乱光パルス幅と前方散乱光強度、または、蛍光パルス幅と前方散乱光強度である、コンピュータプログラム。
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