JP6069555B2 - 経口紫外線抵抗性向上剤 - Google Patents
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Description
しかしながら、メチルヘスペリジンを経口摂取した場合に、皮膚の紫外線に対する抵抗性を改善する作用があることはこれまで知られていない。
1)メチルヘスペリジンを有効成分とする経口紫外線抵抗性向上剤。
2)紫外線暴露により誘発される皮膚障害を軽減又は抑制する上記1)の経口紫外線抵抗性向上剤。
3)紫外線暴露により誘発される皮膚障害が、皮膚の炎症又は皮膚老化である上記2)の経口紫外線抵抗性向上剤。
4)紫外線暴露により誘発される皮膚障害が、皮膚の紅斑、皮膚弾力性の低下、色素沈着、皮膚バリア機能の低下及び角層機能の低下から選ばれる1種以上である上記2)の経口紫外線抵抗性向上剤。
また、主にカルコン型化合物を多く含む組成の場合、ヘスペリジンメチルカルコンとも呼ばれることがあるが、これも同様である。
また、市販品(例えば、医薬品添加物、食品添加物、および化粧品原料として流通しているもの、または、「メチルヘスペリジン」(東京化成工業社)、「ヘスペリジンメチルカルコン」(Sigma社)等)を購入して使用することもできる。
すなわち、メチルヘスペリジンは、皮膚の紫外線に対する抵抗力を高める紫外線抵抗性向上剤として使用することができ、また、当該紫外線抵抗性向上剤を製造するために使用することができる。
従って、本発明の経口紫外線抵抗性向上剤は、紫外線暴露によって誘発される、皮膚の紅斑や浮腫等の皮膚の炎症、しわやたるみの形成、しみやそばかすの形成、皮膚の弾力性の低下、色素沈着、皮膚の黒化、黄ばみの増加、皮膚バリア機能の低下、角層機能の低下といった、皮膚老化又は皮膚劣化等の皮膚障害を軽減又は抑制するための経口医薬品、医薬部外品、サプリメント又は食品として、或いはこれらへ配合するための素材又は製剤として有用である。
尚、後記実施例2で示すように、メチルヘスペリジン投与群では、酸化ストレスマーカーである8-ヒドロキシ-2'-デオキシグアノシン(8−OHdG)の血中濃度が低下することから、メチルヘスペリジンはDNAの酸化損傷を抑制する作用を有するが、一方で血清中のトータル抗酸化能(PAO)は示さないことが明らかとなった。従って、メチルヘスペリジンにより奏される紫外線抵抗性向上作用は、ビタミンEやC等の抗酸化剤が示す作用とは異なると云える。
また、各種ビタミン類、アミノ酸やペプチドおよびその誘導体、核酸およびその誘導体、糖類及びその誘導体、その他、カロチノイド、大豆イソフラボン、カテキン類、クロロゲン酸等の抗酸化成分等も適宜配合することができる。
ヘアレスマウスHR-1(雌性、9週齢)(日本SLC)を1週間予備飼育後、コントロール群、糖転移ヘスペリジン投与群(糖転移ヘスペリジン:「林原ヘスペリジンS(林原商事社)」)、メチルヘスペリジン投与群(メチルヘスペリジン:「ヘスペリジンメチルカルコン」(Sigma社))とに分けた。
※糖転移ヘスペリジン
結果を表1 Δa*値)、表2 (目視による評価)に示した。コントロール群と比較して糖転移ヘスペリジン投与群、メチルヘスペリジン投与群において、UVB照射によるa*値の上昇を抑制する効果が見出され、メチルヘスペリジン投与群でその効果が特に強かった。さらに目視による評価においても、糖転移ヘスペリジン投与群と比較してメチルヘスペリジン投与群で、より紅斑を抑制することが明らかにされた。
1)方法ヘアレスマウスHR-1(雌性、9週齢)(日本SLC)を1週間予備飼育後、コントロール群、糖転移ヘスペリジン投与群(糖転移ヘスペリジン:「林原ヘスペリジンS(林原商事社)」)、メチルヘスペリジン投与群(メチルヘスペリジン:「ヘスペリジンメチルカルコン」(Sigma社))、大豆イソフラボン投与群(大豆イソフラボン:「イソフラボン-80(J-オイルミルズ社)」)、及びビタミンEとビタミンCの組み合わせ(ビタミンE:「(±)-α-トコフェロール(和光純薬工業社)」、ビタミンC:「L(+)-アスコルビン酸(和光純薬工業社)」)の投与群とに分けた。試験期間中、飼料および水は自由摂取させ、温度23±1℃、湿度50±1%、照明時間7:00−19:00の条件下で飼育した。糖転移ヘスペリジン投与群及びメチルヘスペリジン投与群は100mg/kg体重を、大豆イソフラボン投与群は2g/kg体重を、ビタミンEとビタミンCの組み合わせ(ビタミンE+ビタミンC)の投与群は、ビタミンEが200mg/kg体重、ビタミンCが600mg/kg体重を、投与量が0.1mL/10g体重になるように調製し、エマルジョン形態で、1日2回、2週間、胃ゾンデを用いて強制経口投与した。コントロール群は、サンプルを除いたものでエマルジョンとし、同様に経口投与した。経口投与2週後に、心採血し血清に調製し、ELISA kit(JaICA)を用いて血清中の酸化ストレスマーカーについてDNA酸化損傷マーカー8-OHdGを、銅イオンの還元反応を利用した抗酸化能測定キット「PAO」(JaICA)を用いて血清中のトータル抗酸化能(PAO)を、それぞれ定量した。
結果を表3(8-OHdG)、表4(抗酸化能)に示した。血清中の8-OHdGは、糖転移ヘスペリジン投与群、メチルヘスペリジン投与群において、コントロール群と比較して低下し、特にメチルヘスペリジン投与群においてその作用が強いことが明らかとなった。大豆イソフラボン投与群及びビタミンE+ビタミンC投与群においては、このような作用は認められなかった。一方、血清中のPAOは、糖転移ヘスペリジン投与群、メチルヘスペリジン投与群ともに、コントロール群と比較して顕著な差は認められなかった。抗酸化剤である大豆イソフラボン投与群及びビタミンE+ビタミンC投与群は、コントロール群と比較してPAOは高い値を示したが、それら抗酸化剤と比較してヘスペリジン類の血清中抗酸化能は強くないと示唆された。
以上より、ヘスペリジン類、特にメチルヘスペリジンの紫外線抵抗性向上の効果は、抗酸化能以外のメカニズムであることが明らかになった。
1)方法
Weiser-Maples系褐色モルモット(雌性、11週齢) を1週間予備飼育後、コントロール群、メチルヘスペリジン投与群(メチルヘスペリジン:「ヘスペリジンメチルカルコン」(Sigma社))とに分けた。試験期間中、飼料および水は自由摂取させ、温度23±1℃、湿度50±1%、照明時間7:00−19:00の条件下で飼育した。モルモットの背部をバリカンとシェーバーで傷付かないよう丁寧に毛刈りし、その毛刈りした背部に0.6cm×1.0cmの部位を近接して2列×5行=10ヶ所設定し、0mJ/cm2(未照射)部位と300mJ/cm2のUVBを隔日2回照射する部位を各5ヶ所設定し照射を行った。また、UVB照射部位以外の部分はアルミホイルで覆い、UVBが当たらないようにした。メチルヘスペリジン投与群は、100mg/kg体重 を、投与量が0.5mL/100g体重 になるように調製し、エマルジョン形態で、初回照射日から1日1回、3週間、胃ゾンデを用いて強制経口投与した。コントロール群は、メチルヘスペリジンを除いたものでエマルジョンとし、同様に経口投与した。経口投与(照射)前と経口投与(照射)1、2、3週間後に、UVB 未照射部位、および、UVB照射部位について、色彩色差計OFC-300A(日本電色工業)を用いて皮膚色(L*値)を測定した。L*値は皮膚色の明度を表す指標であり、L*値が低いほど皮膚が黒色に変化していることを示している。各群について、投与(照射)前の照射部位5ヶ所のL*値の平均値から投与(照射)3週後の照射部位5ヶ所のL*値の平均値を差し引き、ΔL*値で表した。
結果を表5に示した。メチルヘスペリジン投与群はコントロール群と比較して、有意にΔL*値の上昇を抑制する効果を見出した。すなわち、メチルヘスペリジンは色素沈着の形成過程において色素沈着を抑制する効果を有すると考えられた。
1)方法
ヘアレスマウスHR-1(雌性、7週齢)(日本SLC)を1週間予備飼育後、コントロール群、メチルヘスペリジン投与群とに分けた。尚、メチルヘスペリジンはアルプス薬品工業株式会社製の食品添加物用のものを用いた。試験期間中、飼料および水は自由摂取させ、温度23±1℃、湿度50±1%、照明時間7:00−19:00の条件下で飼育した。メチルヘスペリジン投与群は、100mg/kg体重 を、投与量が0.1mL/10g体重 になるように調製し、エマルジョン形態で、1日2回、2週間、胃ゾンデを用いて強制経口投与した。コントロール群は、メチルヘスペリジンを除いたものでエマルジョンとし、同様に経口投与した。経口投与2週後に、ペントバルビタール麻酔下にて、マウス背部に0.6cm×1.0cmの部位を近接して2列×3行=6ヶ所設定し、1mW/cm2のUVB照射線量で、0秒間(0mJ)と40秒間(40mJ)照射した(各3ヶ所)。
照射48時間後の紅斑の程度を、目視による5段階評価(−;反応なし、±(最小紅斑);軽度または部分的紅斑、+;明らかな全面紅斑、++;紅斑と浮腫、+++;紅斑と浮腫と水疱)と、分光式色差計SE-6000(日本電色工業)を用いて皮膚色(a*値)測定を行った。a*値は皮膚色の赤味を表す指標であり、a*値が大きいほど皮膚が赤色に変化、すなわち紅斑が生じていることを示している。各群について、40mJ(照射部位)の部位3ヶ所の平均値から0mJ(未照射部位)の部位3ヶ所の平均値を差し引き、Δa*値で表した。
結果を表6(Δa*値)、表7(目視による評価)に示した。コントロール群と比較してメチルヘスペリジン(食品添加物用)投与群において、UVB照射によるa*値の上昇を抑制する効果が見出された。さらに目視による評価においても、メチルヘスペリジン投与群で紅斑を抑制することが明らかになった。
1)方法
ヘアレスマウスHR-1(雌性、9週齢)(日本SLC)を1週間予備飼育後、コントロール群、メチルヘスペリジン投与群(メチルヘスペリジン:「ヘスペリジンメチルカルコン」(Sigma社))とに分けた。試験期間中、飼料および水は自由摂取させ、温度23±1℃、湿度50±1%、照明時間7:00−19:00の条件下で飼育した。メチルヘスペリジン投与群は、100mg/kg体重 を、投与量が0.1mL/10g体重 になるように調製し、エマルジョン形態で、1日2回、2週間、胃ゾンデを用いて強制経口投与した。コントロール群は、メチルヘスペリジンを除いたものでエマルジョンとし、同様に経口投与した。経口投与2週後に、ペントバルビタール麻酔下にて、マウス背部に0.6cm×1.0cmの部位を近接して2列×3行=6ヶ所設定し、1mW/cm2のUVB照射線量で、0秒間(0mJ)と40秒間(40mJ)照射した(各3ヶ所)。照射48時間後に心採血により屠殺後、UVB未照射部位および照射部位の皮膚を採取し、HE染色標本を作製し、表皮厚について顕微鏡で観察した。表皮厚は1組織当たり、任意の50ヶ所の表皮厚の平均値をその組織の表皮厚とした。
2)結果
結果を表8(Δ表皮厚)に示した。コントロール群と比較してメチルヘスペリジン投与群において、表皮肥厚を抑制していることが明らかとなった。
1)方法
ヘアレスマウスHR-1(雄性、9週齢)(日本SLC)を1週間予備飼育後、コントロール群、メチルヘスペリジン投与群とに分けた。尚、メチルヘスペリジンはアルプス薬品工業株式会社製の食品添加物用のものを用いた。試験期間中、飼料および水は自由摂取させ、温度23±1℃、湿度50±1%、照明時間7:00−19:00の条件下で飼育した。メチルヘスペリジン投与群は、100mg/kg体重 を、投与量が0.1mL/10g体重 になるように調製し、エマルジョン形態で、1日2回、2週間、胃ゾンデを用いて強制経口投与した。コントロール群は、メチルヘスペリジンを除いたものでエマルジョンとし、同様に経口投与した。経口投与2週後に、ペントバルビタール麻酔下にて、マウス背部に1.5cm×1.0cmの部位を近接して1列×1行=2ヶ所設定し、1mW/cm2のUVB照射線量で、0秒間(0mJ)と40秒間(40mJ)照射した(各1ヶ所)。照射48時間後に、ペントバルビタール麻酔下にて、Tewameterを用いて皮膚バリア機能の指標である経皮水分蒸散量(TEWL)を、Corneometerを用いて角層水分量(Capacitance)を計測した。各群について、40mJ(照射部位)の部位の値から0mJ(未照射部位)の部位の値を差し引き、各々ΔTEWL値、ΔCapacitance値で表した。
2)結果
結果を表9(ΔTEWL値)、表10(ΔCapacitance値)に示した。コントロール群と比較してメチルヘスペリジン(食品添加物用)投与群において、UVB照射によるTEWL値の上昇、および、Capacitance値の低下を抑制する効果が見出された。以上より、メチルヘスペリジンはUVB照射による皮膚バリア機能の低下、角層機能の低下を抑制する作用を有すると考えられた。
Claims (6)
- メチルヘスペリジンを有効成分とする紫外線抵抗性向上用サプリメント又は食品。
- 紫外線暴露により誘発される皮膚障害を軽減又は抑制する請求項1記載の紫外線抵抗性向上用サプリメント又は食品。
- 紫外線暴露により誘発される皮膚障害が、皮膚の炎症又は皮膚老化である請求項2記載の紫外線抵抗性向上用サプリメント又は食品。
- 紫外線暴露により誘発される皮膚障害が、皮膚の紅斑、皮膚弾力性の低下、色素沈着、皮膚バリア機能の低下及び角層機能の低下から選ばれる1種以上である請求項2記載の紫外線抵抗性向上用サプリメント又は食品。
- メチルヘスペリジンを経口摂取させる、紫外線抵抗性向上方法(但し、医薬を使用して人間を治療する方法を除く)。
- サプリメント又は食品としてメチルヘスペリジンを経口摂取させる、請求項5記載の方法。
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