JP6041279B2 - 植物組織の培養用培地の製造方法及び植物組織の培養方法並びに滅菌処理剤、殺菌処理剤、及び植物組織培養用培地組成物 - Google Patents
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Description
そこで、高圧蒸気滅菌器や無菌室を用いることなく簡便に、且つ、屋外でも植物組織を培養できる方法の研究・開発が進められている。
培地を煮沸する工程と、
煮沸途中で該培地に複数種の粉末状の薬剤から成る、第1滅菌処理剤を、1回のみ添加する工程と、
煮沸終了時に該培地に1種類の薬剤から成る第2滅菌処理剤を添加し、該培地を培養容器に分注する工程と、
分注した培地を冷却する工程と
を順に行うことを特徴とする。
固体状または半固体状の培地を収容してなる培養容器を、塩素系殺菌剤を含む第1殺菌組成液に所定時間浸漬する工程と、
植物組織を第2殺菌組成液に所定時間浸漬する工程と、
前記第1殺菌組成液から取り出した培養容器内の培地に、前記第2殺菌組成液から取り出した植物組織を置床し、培養する工程と
を含むことを特徴とする。
(1)培地固化時の滅菌処理
以下の(1−1)〜(1−3)の方法により固体培地を滅菌した。なお、これらの方法により得られる固体培地を「滅菌済み固体培地」という。
(1−1)培地固化時に滅菌処理剤を2回に分けて添加し、滅菌処理する方法(以下「2回添加型」という。図1参照)
1.培地を加熱して沸騰(煮沸)させる。
2.溶解した培地に第1滅菌処理剤(成分は後述する)を添加する。
3.3分間沸騰状態を継続する。
4.第2滅菌処理剤(成分は後述する)を添加した後、培地を培養容器に分注し、室温で冷却して培地を固化する。
1.培地を加熱して沸騰(煮沸)させる。
2.溶解した培地に第1滅菌処理剤(成分は後述する)を添加した後、培地を培養容器に分注し、室温で冷却する。
1.水道水を加熱し、沸騰させる。
2.滅菌処理剤と全培地成分の混合物に90℃以上の湯を注いで溶解する。
3.培地が完全に溶解した後、培養容器に分注し、室温で冷却する。
(1)固体培地における培養(図4参照)
1.外植体を第1殺菌処理液(P-1670を2000mg/L(SE-P2000)、ニサプリンを2000 mg/L(Nisin2000)、スターナ水和剤を500 mg/L(Ox500)、ナタマイシンを10000 mg/L(Nata10000)、オーソサイド80を10000 mg/L(Cap1000)、インパクト・Nを20000 mg/L(Imp20000)から選択されたいずれか一つ或いは複数を水道水に溶解したもの)に浸漬した後、取り出して水を切る。
2.培養容器に収容された滅菌済み固体培地を第2殺菌処理液(P-1670を2000mg/L(SE-P2000)、ケミクロンGを1400mg/L(Cl1400)から選択されたいずれか一つ或いは両方を含む)に浸漬する。
3.第2殺菌処理組成液から培養容器を取り出した後、倒置して余剰液を排出する。
4.手順3で得られた培養容器内の培地に、手順1で得られた外植体を置床し、通常の実験室内で培養する。
1.プラスチックケース内にポリエチレン袋を入れ、該ポリエチレン袋に培養液を注入する。
2.殺菌処理剤(P-1670を10 mg/L(SE-P10)、ニサプリンを10 mg/L(Nisin10)、スターナ水和剤を2 mg/L(Ox2)、ナタマイシンを50 mg/L(Nata50)、オーソサイド80を50 mg/L(Cap50)、インパクト・Nを100 mg/L(Imp100)、卵白リゾチームを100 mg/L(Ly100)、ケミクロンGを7 mg/L(Cl7))を培養液に投入し、溶解する。
3.手順2で得られた培養液内に無菌の外植体を置床し、通常の実験室内で培養する。
[薬剤濃度の植物の生育におよぼす影響]
培地の滅菌に用いる薬剤の濃度を変えて植物の生育に及ぼす影響を調べた。その結果を図6に示す。この実験の培養条件は次の通りである。
培地成分 :大塚A処方固形培地
培養期間 :30日
植物体数 :10
数値 :平均値±標準誤差
滅菌方法 :1回添加型
置床方法(培養方法):図4に示す方法で行い、第1殺菌処理液/第2殺菌処理液をSE-P2000Cll40/SE-P2000Cll40とした。
なお、図6中、「オートクレーブ(従来法)」は比較例を示し、オートクレーブにて殺菌処理を行った外植体を液体培地にて、クリーンベンチ内で培養した。
ナタマイシン製剤(Nata)は100mg/L以下の濃度なら成育に影響がなかった。なお、ナタマイシン製剤と共にP1670(SE-P)を添加した理由は、ナタマイシンのみでは芽胞菌による汚染が無視できないためである。
ニサプリン(Nisin)は500mg/L以下の濃度なら成育に悪影響がなかった。
スターナ水和剤(Ox)は2mg/L以下の濃度なら成育に悪影響がなかった。
ケミクロンG(Cl)は14mg/L以下の濃度なら成育に悪影響がなかった。なお、ケミクロンG14mg/Lの有効塩素濃度は10mg/Lである。
以上の結果に基づき、各滅菌処理剤や殺菌処理液に用いる薬剤濃度の上限値を設定した。
固体培地に菌を接種したときの滅菌効果を調べた。培養条件は以下の次の通りである。
培養期間 :30日
培養条件 :40℃ 暗黒
測定試験管数:50
数値 :微生物汚染率微生物コロニーが形成された試験管の割合
接種量 :培地1L当たり1mL
特に、培地作製手順はやや煩雑になるが、ケミクロンGは、P1670やニサプリンを投入後、3〜15分の間に入れるべきであり、こうすると食品添加物のみで薬剤を構成可能となる。また、こうすれば植物に悪影響の大きいオキソリニック酸製剤(スターナ水和剤)を使用しなくて済む。さらに、P1670、ニサプリン、スターナ水和剤を組み合わせれば全ての薬剤を同時投入できる。
滅菌済み培地(大塚A固形培地)を試験管立てに50本立てて、通常の実験台(14〜24℃)に放置したときの微生物コロニー形成程度の経時変化を調べた。
その結果を図8に示す。
図8より、P1670とニサプリン、ケミクロンGで滅菌した培地は、容器を充分に封じ、微生物の再侵入を防止すればコロニーは形成されなかった(即ち、充分滅菌できる)。
しかし、容器を充分に封じない場合は多くの微生物が再侵入し、コロニーが形成された。
一方、P1670、ニサプリン、スターナ水和剤を用いた場合は、細菌の再侵入が減少した。 また、上記に加えナタマイシンを用いた場合は、糸状菌の再侵入も大幅に減少したが、開放貯蔵できるわけではなかった。
ただし、ZonenCをさらに加えることで開放貯蔵が可能になった。また、ナタマイシンを抜くとZonenCがあっても開放貯蔵はできないことがわかった。
外植体の殺菌処理液及び培養容器の殺菌処理液に用いる薬剤の濃度及び組み合わせと、置床後の滅菌効果との関係を調べた。実験条件は下記の通りである。
固形培地 :大塚A処方
滅菌方法 :オートクレーブ
菌接種方法培:地表面 [B5、S3:菌懸濁液を培地表面に50μL /試験管滴下、An:分生子粉末,ないし分生子粉末をアルファー化デンプンで所定倍率に希釈した物を培地表面に10mg/試験管投入]、外植体 [B5、S3:菌懸濁液に浸漬(外植体当たり10μL付着)、An:分生子粉末、ないし分生子粉末をアルファー化デンプンで所定倍率に希釈した物を粉衣接種(外植体当たり5mg付着)]
外植体 :ジャガイモ
置床方法 :図4に示す方法
培養期間 :14日
一方、P-1670(SE-P)を添加した場合は、ケミクロンGが700mg/L(有効塩素500mg/L相当)以上の液に浸漬することによりコロニー形成を阻止できた。
さらに、オーソサイド(Cap)、スターナ水和剤(Ox)、ナタマイシン(Nata)などを低濃度で加えると、ケミクロンGが140mg/Lの液でも(有効塩素100mg/L相当)コロニー形成を阻止できた。
また、接種濃度を1000倍に薄めてもコロニー形成を防げなかった。
一方、スターナ水和剤(Ox)を200mg/L以上を含む殺菌処理液で外植体を処理すればB5は滅菌できるが、An及びS3のコロニー形成を防げなかった。さらに、オーソサイド80(Cap)を10000mg/L以上を含む液で処理すればS3のコロニー形成をある程度は阻止できるが、An及びB5のコロニー形成は防止できなかった。また、ナタマイシン(Nata)を10000mg/L以上を含む液で処理すればAnのコロニー形成をある程度は阻止できるが、S3及びB5のコロニー形成を防げなかった。ただし、上記3種の薬剤を添加すると菌3種のコロニー形成を防止できた(Anは100倍以上に薄めて接種した場合)。この傾向は、培養容器の殺菌処理液を換えてもほとんど同じであった。
また、ニサプリン(Nisin)やサルミンを加えると、かえってAnの殺菌効果が低下した。
培地の滅菌処理方法や外植体の処理液、培養容器の処理液を変えて、置床後における外来の微生物の汚染発生率を調べた。各試験の滅菌処理組成物、殺菌処理液等の一覧を図10Aに、微生物汚染率を図10Bに示す。
これらの図から、薬剤の濃度や組み合わせを工夫することにより、微生物汚染の発生を抑えることができることが分かる。特に、ジャガイモは置床時に微生物汚染が発生しやすいが、薬剤濃度を上げることで抑えることができた。
以上の結果に基づき、外植体の成長に悪影響を及ぼさない濃度に設定した薬剤を適宜組み合わせて滅菌処理組成物及び殺菌処理液を作成し、実際に培養したときの外植体の成長を比較した。培養条件は以下の通りである。
培養容器:試験管
培地:大塚A固形
培養条件:培養期間30日
1試験管1外植体
測定数:10試験管
液体培養について、液体培地の滅菌処理の違いによる外植体の成長の違いを調べた。液体培地には、大塚A処方液体培地を用い、30日間培養したときの結果を図12に示す。図12から、インパクト・Nは500mg/L以下の濃度なら成育に悪影響しない、オーソサイド80は50mg/L以下の濃度なら成育に悪影響しない、ケミクロンGは7mg/L以下の濃度なら成育がオートクレーブ法と同程度以上の滅菌効果が得られることが分かった。
菌を培地に接種した場合及び外植体に接種した場合について微生物汚染率を比較した。
菌の接種濃度、植物体の種類等は下記の通りである。
培地:B5、S3は培地に1ml/L添加。Anは分生子粉末を0.1g/L添加
植物体:外植体(ジャガイモ苗条)をB5あるいはS3の培養液に浸漬後置床、あるいはAn分生子を希釈した物を粉衣後接種
測定数:各5袋
結果を図13に示す。図13から分かるように、液体培地の場合も、固体培地と同様、培地に接種したものよりも外植体に接種したものの方が微生物汚染率が高かった。特に、Anの微生物汚染率が高く、汚染防止が難しいことが分かる。
液体培地を滅菌処理した後の外来の細菌の汚染率を調べた。いずれも、菌を接種せず通常の屋内で置床した場合の結果である。結果を図14に示す。図14から、卵白リゾチームは添加しなくとも微生物汚染は生じなかった。また、SE-P、Nisin、Ox、Nata、Cap、Imp10、Cl7のいずれを除いても微生物汚染率は上がった。
(1)培地
大塚A号処方等倍+硫安0.5 g/L、ショ糖15 g/L、ゲランガム2 g/L
酵母エキスは2.5 g/L、ペプトンは5 g/L、それ以外はミキサー破砕物を75 g/Lを培地に添加
(2)培養容器
内径 23mm の試験管及びプラスチック製モルトン栓
(3)培地量
30 mL、1個の培養容器につき1個の外植体を置床
20℃+外植体:白色蛍光灯30 μmol/m2・s、16時間日長、昼/夜温=23℃/20℃、38℃:暗黒下で38〜40℃
(5)培養期間
培地作成1日後から30日程度
(6)外植体
ジャガイモまたはキクの培養植物体の1〜2節の切片
(7)培養数
ジャガイモ25本、キク25本の計50本
B5系統(Bacillus subtilis と推定)の耐熱芽胞を培地1L当り1×1010 CFU接種
[実施例1]
以下の手順から成る。
1.培地を加熱して沸騰(煮沸)させた後、溶解した培地にSE-P:0.2g/Lとnisin :0.2g/Lの混合物から成る第1滅菌処理剤を添加する。SE-Pとnisin はいずれも粉末状の薬剤である、
2.2分間沸騰状態を継続する。
3.第2滅菌処理剤として Cl:3mg/Lを添加した後、培地を培養容器に分注し、室温で冷却して培地を固化する。
沸騰の継続時間を5分にした以外は実施例1と同じであり、以下の手順から成る。
1.培地を沸騰させた後、SE-P:0.2g/Lとnisin :0.2g/Lの混合物から成る第1滅菌処理剤を添加する。
2.5分間沸騰状態を継続する。
3.Cl:3mg/Lを添加した後、培地を培養容器に分注し、室温で冷却する。
沸騰の継続時間を10分にした以外は実施例1と同じであり、以下の手順から成る。
1.培地を沸騰させた後、SE-P:0.2g/Lとnisin :0.2g/L の混合物から成る第1滅菌処理剤を添加する。
2.10分間沸騰状態を継続する。
3.Cl:3mg/Lを添加した後、培地を培養容器に分注し、室温で冷却する。
沸騰の継続時間を30分にした以外は実施例1と同じであり、以下の手順から成る。
1.培地を沸騰させた後、SE-P:0.2g/Lとnisin :0.2g/Lの混合物から成る第1滅菌処理剤を添加する。
2.30分間沸騰状態を継続する。
3.Cl:3mg/Lを添加した後、培地を培養容器に分注し、室温で冷却する。
<比較例1>
1.培地を加熱し、沸騰させた後、Cl:1.5mg/Lと、SE-L:0.5g/Lをそれぞれ秤量し、添加する。
2.3分間沸騰状態を継続する。
3.Cl:1.5 mg/L と、nisin:0.2g/L をそれぞれ秤量し、添加した後、培地を培養容器に分注し、室温で冷却する。
培地の沸騰後に添加する薬剤の一つであるSE-Lを同じショ糖脂肪酸エステル類を含むSE-Pに変更した以外は比較例1と同じであり、以下の手順から成る。
1.培地を加熱し、沸騰させた後、Cl:1.5mg/Lと、SE-P:0.2g/Lをそれぞれ秤量し、添加する。
2.3分間沸騰状態を継続する。
3.Cl:1.5 mg/L と、nisin:0.2g/L をそれぞれ秤量し、添加した後、培地を培養容器に分注し、室温で冷却する。
培地の沸騰後に4種類全ての薬剤を添加し、直ちに培養容器に分注した例であり、以下の手順から成る。
1.培地を加熱し、沸騰させた後、Cl:3mg/L、SE-P:0.2g/L、nisin:0.2g/ L をそれぞれ秤量し、添加する。
2.培地を培養容器に分注し、室温で冷却する。
Cl全量を先に添加し、SE-Pを後に添加した例であり、以下の手順から成る。
1.培地を加熱し、沸騰させた後、Cl:3mg/Lを秤量し、添加する。
2.5分間沸騰状態を継続する。
3.SE-P 0.2g/L と、nisin:0.2g/L をそれぞれ秤量し、添加した後、培地を培養容器に分注し、室温で冷却する。
比較例1及び2は、本発明者が開発した従来の培地滅菌法であり、いずれも芽胞菌コロニーが形成された試験管はなく、十分な滅菌効果が得られることが分かる。ただし、これら比較例1及び2で用いた薬剤は、いずれも予め混合しておくことができない。具体的には、比較例1においてSE源として用いたSE-Lは粘稠性液体である。また、nisinは粉末であるが、同時に添加するClが強力な酸化性固体であるため、混合すると変性するおそれがある。一方、比較例2においてSE源として用いたSE-Pは粉末であるが、同時に添加するClが強力な酸化性固体であるため、やはり予め混合することができない。そのため、沸騰時、沸騰継続後に、それぞれ2種類の薬剤を秤量して添加する必要があり、手間がかかる。
1.培地を沸騰させた後、P-1670:ニサプリン:ナタマイシン:スターナ水和剤(農薬):デキストリンの重量比で100:100:10:1:39の混合物を0.25g/L添加する。
この変形例1によれば、冷却固化後の培地に対する菌侵入を低減することができ、培養容器を密閉保存する必要がない。
1. P-1670:ニサプリン:ナタマイシン:スターナ水和剤(農薬):デキストリンの重量比で100:100:10:1:39の混合物を0.25g/L、グラニュー糖20g/L、ゲランガム2g/L、大塚ハウス1号1.5g/L、大塚ハウス2号1g/Lをさらに混合した物25gに沸騰した湯を1L注入しよく攪拌し溶解する。
この変形例2によれば、粉末に熱湯を注ぐだけで滅菌した培地が作成できる。
これは、常温で液体培養を行う場合に適した培地滅菌法であり、室温程度の培地にP-1670:ニサプリン:ナタマイシン:インパクト・N:オーソサイド80:スターナ水和剤(農薬)の重量比で4:4:20:51:20:1の混合物を0.25g/LとケミクロンGを7mg/Lを添加して密閉する。
この方法によれば、耐熱芽胞が10000CFU/L程度までの汚染状況で、主要塩類・ビタミン・植物調節物質程度を含む単純な植物培養用培地を滅菌できる。
これは、植物組織(植物片或いは植物体)の滅菌法であり、農薬と食品添加物を使用している。具体的には、植物組織を、P-1670を1g/L、ナタマイシンを10g/L、スターナ水和剤を10g/L、オーソサイド80を10g/Lを含む水溶液に浸漬する。その後、上記の実施例5、変形例1で滅菌した培地に導入し、容器を密閉する。ただし実施例5の場合、培地は容器ごとP-1670を1g/L、ケミクロンG(次亜塩素酸塩)を1.43g/L含む液に浸漬する。
この方法を用いれば、ほぼあらゆる外部汚染状況の植物を滅菌できる。
これは、植物組織の滅菌法であり、食品添加物を使用した方法である。具体的には、植物をP-1670を1g/L、ナタマイシンを10g/L、ニサプリンを10g/Lを含む水溶液に浸漬し、その後に実施例5、或いは変形例2で滅菌した培地に導入し、容器を密閉する。ただし実施例5の場合、培地は容器ごとP-1670を1g/L、ケミクロンGを1.43g/L含む液に浸漬する。
この方法は、クリーンベンチを用いずに外植体を無菌培養する分には十分な程度に滅菌できる。
Claims (7)
- 培地を煮沸する工程と、
煮沸途中で該培地に複数種の粉末状の薬剤から成る、第1滅菌処理剤を、1回のみ添加する工程と、
煮沸終了時に該培地に1種類の薬剤から成る第2滅菌処理剤を添加し、該培地を培養容器に分注する工程と、
分注した培地を冷却する工程と
を順に行う植物組織の培養用培地の製造方法であって、
前記第1滅菌処理剤を構成する1種又は複数種の薬剤が、少なくともショ糖脂肪酸エステル類及びナイシンを含み、前記第2滅菌処理剤を構成する薬剤が次亜塩素酸の有効塩素を含む
ことを特徴とする植物組織の培養用培地の製造方法。 - 前記第1滅菌処理剤を構成する薬剤が、さらに、グリセリン脂肪酸エステル類、ナタマイシン、εポリリジン、プロタミン酸、クエン酸塩から選択される1ないし複数の成分を含むことを特徴とする請求項1に記載の植物組織の培養用培地の製造方法。
- ショ糖脂肪酸エステル類、ナイシン、及びオキソリニック酸を含有する粉末状の薬剤から成る、植物組織の培養用培地の滅菌処理剤。
- さらに、ナタマイシンを含有することを特徴とする請求項3に記載の滅菌処理剤。
- 培養用培地に添加したときに、ナイシンの濃度が0.1〜10mg/L、オキソリニック酸の濃度が0.1〜100mg/L、ナタマイシンの濃度が1〜1000mg/Lの範囲となるように調製されていることを特徴とする請求項4に記載の滅菌処理剤。
- サルミン、卵白リゾチーム、キャプタンのうちの少なくとも一種をさらに含むことを特徴とする請求項3〜5のいずれかに記載の植物組織の培養用培地の滅菌処理剤。
- 請求項3〜6のいずれかに記載の滅菌処理剤と、粉末状の培地成分とを含む植物培養用培地組成物。
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CN104604727A (zh) * | 2015-02-16 | 2015-05-13 | 钱家静 | 一种高精度bl(含碳源)培养基质的规模化制作方法 |
CN104604698A (zh) * | 2015-02-16 | 2015-05-13 | 安徽科技学院 | 一种mt(含固定介质)固体培养基质的规模化制作方法 |
CN104604722A (zh) * | 2015-02-16 | 2015-05-13 | 钱夕刚 | 一种高精度1/4ms(含碳源)培养基质的规模化制作方法 |
CN104604710A (zh) * | 2015-02-16 | 2015-05-13 | 安徽科技学院 | 一种mt基本固体培养基质的规模化制作方法 |
CN104604695A (zh) * | 2015-02-16 | 2015-05-13 | 安徽科技学院 | 一种mt(含碳源和固定介质)固体培养基质的规模化制作方法 |
CN104604702A (zh) * | 2015-02-16 | 2015-05-13 | 钱家静 | 一种White基本固体培养基质的规模化制作方法 |
CN104604707A (zh) * | 2015-02-16 | 2015-05-13 | 安徽科技学院 | 一种aa(含固定介质)固体培养基质的规模化制作方法 |
CN104604724A (zh) * | 2015-02-16 | 2015-05-13 | 钱夕刚 | 一种1/2ms基本固体培养基质的规模化制作方法 |
CN104604704A (zh) * | 2015-02-16 | 2015-05-13 | 安徽科技学院 | 一种b5(含碳源)固体培养基质的规模化制作方法 |
CN104604726A (zh) * | 2015-02-16 | 2015-05-13 | 钱夕刚 | 一种高精度1/2ms(含碳源和固定介质)培养基质的规模化制作方法 |
CN104604714A (zh) * | 2015-02-16 | 2015-05-13 | 钱夕刚 | 一种改良White基本固体培养基质的规模化制作方法 |
CN104642119A (zh) * | 2015-02-16 | 2015-05-27 | 钱家静 | 一种高精度t(含固定介质和碳源)培养基质的规模化制作方法 |
CN104604696A (zh) * | 2015-02-16 | 2015-05-13 | 安徽科技学院 | 一种t(含固定介质)固体培养基质的规模化制作方法 |
CN104642126A (zh) * | 2015-02-16 | 2015-05-27 | 钱家静 | 一种高精度aa(含固定介质)培养基质的规模化制作方法 |
CN104585046A (zh) * | 2015-02-16 | 2015-05-06 | 安徽科技学院 | 一种mt(含碳源)固体培养基质的规模化制作方法 |
CN104604705A (zh) * | 2015-02-16 | 2015-05-13 | 安徽科技学院 | 一种aa基本固体培养基质的规模化制作方法 |
CN104885941B (zh) * | 2015-05-26 | 2017-01-11 | 福建农林大学 | 一种巨芒化学消毒组培方法 |
CN104885945B (zh) * | 2015-05-26 | 2016-11-30 | 福建农林大学 | 一种香蕉化学消毒组培方法 |
CN105123750A (zh) * | 2015-10-15 | 2015-12-09 | 贵州省生物技术研究所 | 开放式培养马铃薯组培苗的霉菌抑菌剂及其使用方法 |
WO2018100866A1 (ja) * | 2016-11-30 | 2018-06-07 | キリン株式会社 | 植物による有用タンパク質の生産方法 |
CN109757381B (zh) * | 2019-03-20 | 2022-03-08 | 丽江海贝瑞生物科技有限公司 | 一种白芨组培快繁方法 |
Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2004018374A (ja) * | 2002-06-12 | 2004-01-22 | Inst Of Physical & Chemical Res | 植物用防カビ剤及びカビ発生防止方法 |
JP2006527599A (ja) * | 2003-06-16 | 2006-12-07 | モンサント テクノロジー エルエルシー | 遺伝子的に形質転換可能な植物組織の調製用の方法および装置 |
JP2012505648A (ja) * | 2008-10-17 | 2012-03-08 | ビオメリュー | レジオネラ属バクテリアを検出および/または同定するための反応培地 |
WO2013038197A1 (en) * | 2011-09-15 | 2013-03-21 | Algipharma As | Use of alginate oligomers to enhance the effects of antifungal agents |
-
2013
- 2013-09-20 JP JP2015506539A patent/JP6041279B2/ja active Active
- 2013-09-20 WO PCT/JP2013/075495 patent/WO2014147869A1/ja active Application Filing
- 2013-09-20 KR KR1020157030420A patent/KR20150132585A/ko not_active Application Discontinuation
Patent Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2004018374A (ja) * | 2002-06-12 | 2004-01-22 | Inst Of Physical & Chemical Res | 植物用防カビ剤及びカビ発生防止方法 |
JP2006527599A (ja) * | 2003-06-16 | 2006-12-07 | モンサント テクノロジー エルエルシー | 遺伝子的に形質転換可能な植物組織の調製用の方法および装置 |
JP2012505648A (ja) * | 2008-10-17 | 2012-03-08 | ビオメリュー | レジオネラ属バクテリアを検出および/または同定するための反応培地 |
WO2013038197A1 (en) * | 2011-09-15 | 2013-03-21 | Algipharma As | Use of alginate oligomers to enhance the effects of antifungal agents |
Non-Patent Citations (6)
Title |
---|
JPN6013062714; 水田洋一ほか: '食品添加物と煮沸を併用して培地を滅菌すると長期間の植物培養でも微生物汚染されない' 園芸学会雑誌 第75巻別冊2, 2006, 第311頁 * |
JPN6013062717; 水田洋一ほか: '抗菌物質処理後に外植体を塩素溶液でぬらせばクリーンベンチ不要で一度に多数置床できる' 園芸学会雑誌 第75巻別冊1, 2006, 第188頁 * |
JPN6013062719; 水田洋一ほか: '非加熱滅菌法を用いた簡易液体培養における微生物汚染の低減と植物の生育促進' 園芸学研究 第8巻別冊2, 2009, 第308頁 * |
JPN6013062721; 水田洋一ほか: 'オートクレーブとクリーンベンチを用いない簡易組織培養における微生物汚染率の低減' 園芸学研究 第9巻別冊2, 2010, 第298頁 * |
JPN6013062723; 水田洋一ほか: '滅菌容器と低濃度の殺菌剤を用いたオートクレーブ滅菌不要簡易培養法' 園芸学会雑誌 第70巻別冊2, 2001, 第140頁 * |
JPN6015051633; Journal of Applied Microbiology Vol.85, 1998, p.1013-1022 * |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
WO2014147869A1 (ja) | 2014-09-25 |
JPWO2014147869A1 (ja) | 2017-02-16 |
KR20150132585A (ko) | 2015-11-25 |
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