CN104604704A - 一种b5(含碳源)固体培养基质的规模化制作方法 - Google Patents

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何克勤
胡能兵
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Abstract

本发明公开了一种B5(含碳源)固体培养基质的规模化制作方法，属于植物生物技术领域。首先计算B5(含碳源)基本培养基质所含的18种元素扩大1000倍后的需求量；准确称取扩大后的药品量，其中的CuSO4·5H2O和CoCl2·6H2O需要用万分之一天平准确称量；将上述18种元素按照需求量的少多进行先后混合，即最少的两种元素先混，接着加入次少量元素混合均匀，以此类推；将固体培养基质每250g密封于一个固定的塑料容器中；根据需要分别进行启封使用。通过该方法可制备出扩大了1000倍的B5(含碳源)固体培养基，具有操作方便、快速、应用简单、不同批次以及批次内误差小的特点，且避免了B5液体培养基制取时由于计算、称量等人为操作以及天气、温度、水分等外界因素影响导致出现误差大、沉淀、发霉等现象，可运用于植物组织培养等生物技术用途。

Description

一种B5(含碳源)固体培养基质的规模化制作方法
技术领域
本发明公开了一种B5(含碳源)固体培养基质的规模化制作方法，属于植物生物技术领域。更具体地说是一种包括有准确计算、精确称量、先少后多地混合、密封、启封使用等五个步骤，以期获得不同批次和批次之间误差极小的培养基质、减少试验误差的方法。
背景技术
植物组织培养技术或无土栽培技术通常需要配制培养基母液，即配制扩大一定倍数、含有各种类型试剂的液体。然而，由于母液含有不同类型试剂，常常分为大量元素、微量元素、铁盐和有机元素四大类，而四大类所扩大的倍数不同，导致药品使用质量不一致，一则容易出现计算误差；二则药品的厂家、质量不一致，即使计算、称量一致，也会影响试验结果；三则由于母液为液体状态，在春夏之交季节，由于气温上升以及湿度增大，极其容易导致母液感染细菌、霉菌，导致母液中呈现不同颜色或出现沉淀的现象，浪费了原料；四则会因称量者对容器刻度的认知(尤其是微量元素)、仪器精密度的不同而出现较大误差。
鉴于母液配制的上述缺点，用常规的母液配制培养基，常常会出现因称量者、药品、季节等因素而导致的试验结果失败或无法重复的现象，极大的影响了运用植物组织培养或无土栽培技术开展试验的进程，打击了试验者的信心。
发明内容
一种B5(含碳源)固体培养基质的规模化制作方法，其特征在于，所述的方法中包括有准确计算、精确称量、先少后多地混合、密封、启封使用等五个步骤。
根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的五个步骤具体操作如下：
①     准确计算：将B5基本固体基所含的18中元素扩大1000倍，即六水氯化钴和五水硫酸铜各0.025g，二水钼酸钠0.25g，碘化钾0.75g，烟酸1g，盐酸吡哆醇1g，七水硫酸锌2g，硼酸3g，盐酸硫胺素10g，四水硫酸锰10g，乙二胺四乙酸钠铁28g，肌醇100g，硫酸铵134g，二水氯化钙150g，磷酸二氢钠150g，七水硫酸镁500g，硝酸钾2500g，绵白糖30000g；
②     精确称量：按照①中计算的结果准确称量，尤其是要用万分之一天平准确称量各0.025g的六水氯化钴和五水硫酸铜；
③     先少后多地混合：按照量的少多进行先后混合，即按照六水氯化钴、五水硫酸铜，二水钼酸钠，碘化钾，烟酸，盐酸吡哆醇，七水硫酸锌，硼酸，盐酸硫胺素，四水硫酸锰，乙二胺四乙酸钠铁，肌醇，硫酸铵，二水氯化钙，磷酸二氢钠，七水硫酸镁，硝酸钾，绵白糖的顺序混合均匀，共计33590.05g；
④     密封：将混合后的固体基质按照250g每瓶的要求分装于塑料容器中，并进行密封；
⑤     启封使用：根据需要，每1L蒸馏水中加入准确称量的上述基质33.6g，加热待其完全溶解后，加入其它所需试剂即可。
本发明的有益效果：不同批次的基质之间无计算误差；由于所有试剂都扩大了1000倍，不同批次的基质之间的称量误差极小；理论上，由于每次为1000倍的使用量(以每次1L计算)，即可以配制1000L的上述配方，批次内部不会出现因为使用不同厂家、不同时期的试剂而导致的人为误差；扩大后的基质为每250g密封于一个塑料容器中，可避免因天气、温度、水分等外界因素影响导致出现液体母液常见的沉淀、发霉等现象；上述的诸多优点都为以该培养基为基质开展的后续试验，获得准确的试验结果奠定基础。
具体实施方式：
下面结合具体实施例对本发明进行进一步的描述。
本实施例中一种B5(含碳源)固体培养基质的规模化制作方法，包括有准确计算、精确称量、先少后多地混合、密封、启封使用等五个步骤。
上述五个步骤具体操作如下：
①     准确计算：将B5基本固体基所含的18中元素扩大1000倍，即六水氯化钴和五水硫酸铜各0.025g，二水钼酸钠0.25g，碘化钾0.75g，烟酸1g，盐酸吡哆醇1g，七水硫酸锌2g，硼酸3g，盐酸硫胺素10g，四水硫酸锰10g，乙二胺四乙酸钠铁28g，肌醇100g，硫酸铵134g，二水氯化钙150g，磷酸二氢钠150g，七水硫酸镁500g，硝酸钾2500g，绵白糖30000g；
②     精确称量：按照①中计算的结果准确称量，尤其是要用万分之一天平准确称量各0.025g的六水氯化钴和五水硫酸铜；
③     先少后多地混合：按照量的少多进行先后混合，即按照六水氯化钴、五水硫酸铜，二水钼酸钠，碘化钾，烟酸，盐酸吡哆醇，七水硫酸锌，硼酸，盐酸硫胺素，四水硫酸锰，乙二胺四乙酸钠铁，肌醇，硫酸铵，二水氯化钙，磷酸二氢钠，七水硫酸镁，硝酸钾，绵白糖的顺序混合均匀，共计33590.05g；
④     密封：将混合后的固体基质按照250g每瓶的要求分装于塑料容器中，并进行密封；
⑤     启封使用：根据需要，每1L蒸馏水中加入准确称量的上述基质33.6g，加热待其完全溶解后，加入其它所需试剂即可。
将上述基质配制后的1L溶液加入5g琼脂粉，进而加入1ml的1N的KOH，溶解完全后分装于30个200ml的玻璃瓶中，121℃灭菌20min后。于超净工作台上接种甜叶菊茎段，25℃光照12h条件下培养20d后，生根良好。

Claims (3)

1.一种B5（含碳源）基本固体培养基质的规模化制作方法，其特征在于，所述的方法中包括有准确计算、精确称量、先少后多地混合、密封、启封使用等五个步骤。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的五个步骤具体操作如下：
①准确计算：将B5基本固体基所含的18中元素扩大1000倍，即六水氯化钴和五水硫酸铜各0.025g，二水钼酸钠0.25g，碘化钾0.75g，烟酸1g，盐酸吡哆醇1g，七水硫酸锌2g，硼酸3g，盐酸硫胺素10g，四水硫酸锰10g，乙二胺四乙酸钠铁28g，肌醇100g，硫酸铵134g，二水氯化钙150g，磷酸二氢钠150g，七水硫酸镁500g，硝酸钾2500g，绵白糖30000g；
②精确称量：按照①中计算的结果准确称量，尤其是要用万分之一天平准确称量各0.025g的六水氯化钴和五水硫酸铜；
③先少后多地混合：按照量的少多进行先后混合，即按照六水氯化钴、五水硫酸铜，二水钼酸钠，碘化钾，烟酸，盐酸吡哆醇，七水硫酸锌，硼酸，盐酸硫胺素，四水硫酸锰，乙二胺四乙酸钠铁，肌醇，硫酸铵，二水氯化钙，磷酸二氢钠，七水硫酸镁，硝酸钾，绵白糖的顺序混合均匀，共计33590.05g；
④密封：将混合后的固体基质按照250g每瓶的要求分装于塑料容器中，并进行密封；
⑤启封使用：根据需要，每1L蒸馏水中加入准确称量的上述基质33.6g，加热待其完全溶解后，加入其它所需试剂即可。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，该培养基质的规模化制作方法具有以下特点，即不同批次的基质之间无计算误差；由于所有试剂都扩大了1000倍，不同批次的基质之间的称量误差极小；理论上，由于每次为1000倍的使用量(以每次1L计算)，即可以配制1000L的上述配方，批次内部不会出现因为使用不同厂家、不同时期的试剂而导致的人为误差；扩大后的基质为每250g密封于一个塑料容器中，可避免因天气、温度、水分等外界因素影响导致出现液体母液常见的沉淀、发霉等现象；上述的诸多优点都为以该培养基为基质开展的后续试验，获得准确的试验结果奠定基础。
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Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101070531A (zh) * 2006-05-09 2007-11-14 陈曦 干粉式培养基及其制备方法
CN102174546A (zh) * 2002-04-19 2011-09-07 维莱尼姆公司 磷脂酶，编码磷脂酶的核酸以及制备和应用磷脂酶的方法
WO2014147869A1 (ja) * 2013-03-22 2014-09-25 Mizuta Youichi 植物組織の培養用培地の製造方法及び植物組織の培養方法並びに滅菌処理剤、殺菌処理剤、及び植物組織培養用培地組成物

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102174546A (zh) * 2002-04-19 2011-09-07 维莱尼姆公司 磷脂酶，编码磷脂酶的核酸以及制备和应用磷脂酶的方法
CN101070531A (zh) * 2006-05-09 2007-11-14 陈曦 干粉式培养基及其制备方法
WO2014147869A1 (ja) * 2013-03-22 2014-09-25 Mizuta Youichi 植物組織の培養用培地の製造方法及び植物組織の培養方法並びに滅菌処理剤、殺菌処理剤、及び植物組織培養用培地組成物

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