JP5967858B2 - ヒアルロニダーゼ活性阻害剤 - Google Patents
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Description
一方、ヒアルロニダーゼは、ヒアルロン酸を分解する酵素であり、ヒアルロン酸中のβ(1→4)結合を加水分解する。そのため、ヒアルロニダーゼの活性を阻害することにより、皮膚真皮中のヒアルロン酸量を維持でき、みずみずしくハリのある肌を保つことができると考えられている(非特許文献1)。
しかしながら、ホソバヒカゲスゲ抽出物が優れたヒアルロニダーゼ活性阻害作用を有すること、また、ホソバヒカゲスゲ抽出物を皮膚外用剤に特定量含有させることによって、保湿効果や肌荒れ改善効果のみならず、肌のハリ改善効果や肌のツヤ改善効果が得られることは、未だ報告されていない。
本発明のヒアルロニダーゼ活性阻害剤および皮膚外用剤は、いずれもホソバヒカゲスゲ抽出物を含有する。まず、ホソバヒカゲスゲ抽出物について説明する。
本発明に用いられるホソバヒカゲスゲ抽出物は、カヤツリグサ科スゲ属に属するホソバヒカゲスゲ(Carex humilis )の根、葉、花、種子(中でも好ましくは根)を、そのままもしくは乾燥させた後、各種溶媒にて抽出したものであり、抽出液そのもの、もしくはその希釈物や濃縮物をいう。
本発明のヒアルロニダーゼ活性阻害剤は、上記ホソバヒカゲスゲ抽出物を有効成分として含有するものであり、医薬品、医薬部外品、食品、化粧品類(例えば、化粧水、乳液、クリーム、ジェル、美容液、パック、オイル、軟膏、スプレー、貼付剤など)として利用することができる。医薬品として利用する場合としては、例えば、関節機能改善剤、眼科手術補助剤、内視鏡用粘膜下注入剤、点眼剤など使われるヒアルロン酸の分解を抑制するための補助剤としての利用が挙げられる。また、変形性関節症や慢性関節リウマチの治療や疼痛の緩和のために、注射剤として使用することもできる。本発明のヒアルロニダーゼ活性阻害剤は、ホソバヒカゲスゲ抽出物に加え必要に応じ、本発明の効果を損なわない範囲内で、医薬品、医薬部外品、食品、化粧品類に添加され得る添加剤を含有していても良い。
本発明の皮膚外用剤は、上記ホソバヒカゲスゲ抽出物を乾燥残留物として0.0001〜10質量%含有するものである。本発明における乾燥残留物の質量は、実際に溶媒を除去して乾燥させた残留物の質量のみならず、残留物に含まれる溶媒量を算出し、その溶媒量を減じた残留物の質量も概念的に包含される。例えば、抽出溶媒が揮発性である場合は、抽出溶媒を105℃〜120℃で完全に留去させ、残存した固形分の質量であり、抽出溶媒が不揮発性である場合は、高速液体クロマトグラフィー等で溶媒量を定量し、それ以外の成分量が乾燥残留物の質量である。
採取したホソバヒカゲスゲ根を純水で洗浄し乾燥させたもの50gに、500gの70%エタノール水溶液を加え24時間浸漬し抽出した。ろ過後、得られた抽出物を脱臭・脱色処理し、さらに濃縮することによりホソバヒカゲスゲ抽出物粉末(ヒアルロニダーゼ活性阻害剤)を得た。
乾燥させたツバキ花50gに対し、500gの50%1,3−ブチレングリコール水溶液を加え、室温下で7日間抽出し、ろ過後、−5℃で7日間冷却し、再度ろ過することでツバキ花抽出物を得た。
上記ホソバヒカゲスゲ抽出物粉末を80%エタノール水溶液に10mg/mLになるように溶解し、試験に供した。さらに上記ホソバヒカゲスゲ抽出物溶液、クロモグリク酸ナトリウム(MP Biomedicals, Inc.)、上記ツバキ花抽出物は、30%1,3−ブチレングリコール水溶液で適宜希釈し、表1に示す濃度の試験溶液とした。
ヒアルロニダーゼ活性阻害率は以下の式を用いて算出した。結果を表1に示す。
阻害率(%)=(A585Control−A585Sample)/(A585Control−A585Blank)×100
上記ヒアルロニダーゼ活性阻害試験に供したホソバヒカゲスゲ抽出物粉末の80%エタノール水溶液、上記ヒアルロニダーゼ活性阻害試験に供したツバキ花抽出物の30%1,3−ブチレングリコール水溶液、クロモグリク酸ナトリウムを使用して、表2に示す化粧水(皮膚外用剤)を調製し、7項目について下記評価基準により評価を行なった。結果を表2に示す。
(1)肌荒れ改善効果
肌荒れを生じている20名の女性(25才〜52才)をパネラーとし、皮膚外用剤を1日2回ずつ2週間使用した後の肌の状態について下記のように官能評価を行った。
2点:肌荒れが明らかに改善してきたと感じた場合。
1点:肌荒れがやや改善してきたと感じた場合。
0点:肌荒れ改善効果が全く見られない、または肌荒れが悪化したと感じた場合。
◎:35点以上(非常に優れた肌荒れ改善効果を有する皮膚外用剤)
○:30点以上35点未満(優れた肌荒れ改善効果を有する皮膚外用剤)
△:15点以上30点未満(わずかに肌荒れ改善効果を有する皮膚外用剤)
×:15点未満(肌荒れ改善効果を有しない皮膚外用剤)
肌の乾燥を感じている20名の女性(25才〜56才)をパネラーとし、皮膚外用剤を1日2回、4 週間使用したのち、洗顔後30分後における肌の状態について下記のように官能評価を行った。
2点:洗顔後の肌のつっぱり感が明らかに改善されたと感じた場合。
1点:洗顔後の肌のつっぱり感がやや改善されたと感じた場合。
0点:洗顔後の肌のつっぱり感に変化を感じない、または以前よりもつっぱり感が悪化したと感じた場合。
◎:35点以上(非常に優れた乾燥肌の改善効果を有する皮膚外用剤)
○:30点以上35点未満(優れた乾燥肌の改善効果を有する皮膚外用剤)
△:15点以上30点未満(わずかに乾燥肌の改善効果を有する皮膚外用剤)
×:15点未満(乾燥肌の改善効果を有しない皮膚外用剤)
20名の女性(25才〜56才)をパネラーとし、皮膚外用剤を1日2回、4週間使用後の肌の状態について下記のように官能評価を行った。
2点:肌のハリが明らかに改善したと感じた場合。
1点:肌のハリがやや改善したと感じた場合。
0点:肌に変化を感じなかった、または肌のハリが悪くなったと感じた場合。
◎:35点以上(非常に優れた肌のハリ改善効果を有する皮膚外用剤)
○:30点以上35点未満(優れた肌のハリ改善効果を有する皮膚外用剤)
△:15点以上30点未満(わずかに肌のハリ改善効果を有する皮膚外用剤)
×:15点未満(肌のハリ改善効果を有しない皮膚外用剤)
20名の女性(25才〜56才)をパネラーとし、皮膚外用剤を1日2回、2週間使用後の肌の状態について下記のように官能評価を行った。
2点:明らかに肌のツヤが改善したと感じた場合。
1点:やや肌のツヤが改善したと感じた場合。
0点:肌に変化を感じなかった、または肌のツヤが悪くなったと感じた場合。
◎:35点以上(非常に優れた肌のツヤ改善効果を有する皮膚外用剤)
○:30点以上35点未満(優れた肌のツヤ改善効果を有する皮膚外用剤)
△:15点以上30点未満(わずかに肌のツヤ改善効果を有する皮膚外用剤)
×:15点未満(肌のツヤ改善効果を有しない皮膚外用剤)
20名の女性(25才〜56才)をパネラーとし、洗顔した後に皮膚外用剤を使用した時の感触について下記のように官能評価を行った。
2点:使用時に肌へのなじみが良いと感じた場合。
1点:使用時に肌へのなじみがやや悪いと感じた場合。
0点:使用時に肌へのなじみが明らかに悪いと感じた場合。
◎:35点以上(非常に優れた肌へのなじみ性を有する皮膚外用剤)
○:30点以上35点未満(優れた肌へのなじみ性を有する皮膚外用剤)
△:15点以上30点未満(わずかに肌へのなじみ性を有する皮膚外用剤)
×:15点未満(肌へのなじみ性を有しない皮膚外用剤)
20名の女性(25才〜56才)をパネラーとし、洗顔した後に皮膚外用剤を使用して10分後の肌の感触について下記のように官能評価を行った。
2点:べたつきが無いと感じた場合。
1点:肌がややべたつくと感じた場合。
0点:肌が非常にべたつくと感じた場合。
◎:35点以上(使用後のべたつきが無い皮膚外用剤)
○:30点以上35点未満(使用後のべたつきが殆ど無い皮膚外用剤)
△:15点以上30点未満(使用後のべたつきが少し有る皮膚外用剤)
×:15点未満(使用後のべたつきが有る皮膚外用剤)
化粧料を透明ガラス容器に密封して0℃、25℃、40℃でそれぞれ3ヶ月間保存し、その外観を観察して、下に示す2段階で評価した。
○:安定性良好(いずれの温度においても外観の変化がない。)
×:安定性不良(いずれかの温度において、沈殿を生じるまたは分離する。もしくは変色を生じる。)
上記(A)で得られたホソバヒカゲスゲ抽出物粉末、クロモグリク酸ナトリウムを使用して、表3に示す乳液を調製し、実施例2〜4と同様の方法により評価を行なった。なお、ホソバヒカゲスゲ抽出物粉末を含有する乳液の調製は、上記(A)で得られたホソバヒカゲスゲ抽出物粉末を表3に示す多価アルコールとノニオン性界面活性剤成分にあらかじめ溶解した後、他の成分に配合することにより行った。結果を表3に示す。
上記(A)で得られたホソバヒカゲスゲ抽出物粉末を使用して、表4に示すクリームを調製し、実施例2〜4と同様の方法により評価を行なった。なお、ホソバヒカゲスゲ抽出物粉末を含有するクリームの調製は、乳液の場合と同様に、上記(A)で得られたホソバヒカゲスゲ抽出物粉末を表4に示す多価アルコールとノニオン性界面活性剤成分にあらかじめ溶解した後、他の成分に配合することにより行った。結果を表4に示す。
以上詳述の通り、本発明のヒアルロニダーゼ活性阻害剤は、従来のものよりも低濃度で高い活性を示すことが明らかとなった。そのため、本発明のヒアルロニダーゼ活性阻害剤の有効成分であるホソバヒカゲスゲ抽出物を含有する皮膚外用剤は、従来のヒアルロニダーゼ活性阻害剤を含有する皮膚外用剤で認められる肌荒れ改善効果、乾燥肌の改善効果(保湿効果)よりも単に優れるだけでなく、かかる従来の皮膚外用剤では得られなかった肌のハリ・ツヤ改善効果をも優位に有していた。また、肌へのなじみ性、べたつき等の使用感も優れ、安定性も良好であった。さらに、本発明によるホソバヒカゲスゲ抽出物とAHAまたはその塩とを併用した皮膚外用剤は、肌のハリ改善効果や肌のツヤ改善効果が顕著に増強していた。
Claims (1)
- ホソバヒカゲスゲ(Carex humilis )抽出物を有効成分として含有するヒアルロニダーゼ活性阻害剤。
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