JP5943463B2

JP5943463B2 - レアメタル結合能を有する人工ペプチドおよびその利用

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Publication number: JP5943463B2
Application number: JP2012047585A
Authority: JP
Inventors: 厚夫田村; 禎弘飯田
Original assignee: Kobe University NUC
Current assignee: Kobe University NUC
Priority date: 2012-03-05
Filing date: 2012-03-05
Publication date: 2016-07-05
Anticipated expiration: 2032-03-05
Also published as: JP2013181021A

Description

本発明は、レアメタル結合能を有する人工ペプチドおよびその利用に関するものであり、詳細には、レアメタル結合能を有する人工ペプチドを含有する金属吸着剤、それを用いるレアメタル回収方法、レアメタル検出方法に関するものである。

先端科学技術の発展に深く関わり、高性能化の材料となっているのがレアメタルとよばれる非鉄金属類であり、材料・触媒化学の分野において広く注目を浴びている。近年の技術革新や新興国の発展に伴い、貴金属をはじめとするレアメタルの使用量が急増しており、資源確保観点からも金属の回収法の効率化が急務の課題となっている。

従来のレアメタル回収技術は、高温や強酸性など極端な条件で行われるため、環境負荷が大きく、エネルギー消費も大きい。また、特定のレアメタルのみを選択的に回収することは困難である。そこで、環境負荷の少ないレアメタル回収技術が求められており、種々の技術が提案されている（例えば、特許文献１参照）。

特開２００８−１２７６５１号公報

本発明は、レアメタル結合能を有する人工ペプチドを提供し、環境負荷の少ないレアメタル回収方法を提供することを課題とする。

本発明は、上記課題を解決するために、以下の各発明を包含する。
［１］以下のアミノ酸配列（１）を有し、かつアミノ酸残基数が１００以下であるペプチド。
（１）ＳＤＰＬＶＸ_１ＲＡＳＬＩＧＬＬＸ_２ＬＬＬＷＸ_３Ｘ_４Ｘ_５ＲＸ_６（配列番号１）
（Ｘ_１は親水性アミノ酸、Ｘ_２はＨまたはＡ、Ｘ_３はＲまたはＫ、Ｘ_４はＭまたは脂肪族アミノ酸、Ｘ_５はＤまたはＥ、Ｘ_６は任意のアミノ酸を表す。）
［２］Ｘ_１がＮまたはＲ、Ｘ_４がＭまたはＬ、Ｘ_６がＫまたはＬである前記［１］に記載のペプチド。
［３］アミノ酸配列（１）が、以下のアミノ酸配列（２）または（３）である前記［２］に記載のペプチド。
（２）ＳＤＰＬＶＮＲＡＳＬＩＧＬＬＨＬＬＬＷＲＭＤＲＬ（配列番号２）
（３）ＳＤＰＬＶＲＲＡＳＬＩＧＬＬＨＬＬＬＷＫＭＤＲＫ（配列番号３）
［４］アミノ酸配列（１）が、以下のアミノ酸配列（４）または（５）である前記［２］に記載のペプチド。
（４）ＳＤＰＬＶＲＲＡＳＬＩＧＬＬＨＬＬＬＷＫＬＥＲＫ（配列番号４）
（５）ＳＤＰＬＶＲＲＡＳＬＩＧＬＬＡＬＬＬＷＫＭＤＲＫ（配列番号５）
［５］前記［１］〜［４］のいずれかに記載のペプチドを含有する金属吸着剤。
［６］金属がレアメタルである前記［５］に記載の金属吸着剤。
［７］レアメタルがパラジウムおよび／または白金である前記［６］に記載の金属吸着剤。
［８］前記［５］〜［７］のいずれかに記載の金属吸着材とレアメタルを含む金属成分を含有する水溶液とを接触させる工程とを含むことを特徴とするレアメタル回収方法。
［９］レアメタルがパラジウムおよび／または白金である前記［８］に記載のレアメタル回収方法。
［１０］前記［１］〜［４］のいずれかに記載のペプチドとレアメタルを含む金属成分を含有する水溶液とを接触させる工程、および、当該ペプチドの構造変化を検出する工程を含むことを特徴とするレアメタル検出方法。
［１１］レアメタルがパラジウムおよび／または白金である前記［１０］に記載のレアメタル検出方法。

本発明によれば、レアメタル結合能を有する人工ペプチドを提供することができる。当該人工ペプチドは、金属吸着材として好適に使用することができる。当該金属吸着材を用いることにより、レアメタルを効率よく回収することができる。

本発明のペプチド（Ｍ２ＳＡＰ２）溶液に金属イオンを添加してＣＤ（円二色性）測定した結果を示す図である。本発明のペプチド（Ｍ２ＳＡＰ２）溶液に（Ａ）銅イオン溶液または（Ｂ）パラジウムイオン溶液を滴定してＩＴＣ測定した結果を示す図である。本発明のペプチド（Ｍ２ＳＡＰ３）溶液に金属イオンを添加してＣＤ測定した結果を示す図である。本発明のペプチド（Ｍ２ＳＡＰ３）溶液に（Ａ）銅イオン溶液または（Ｂ）パラジウムイオン溶液を滴定してＩＴＣ測定した結果を示す図である。本発明のペプチド（Ｍ２ＳＡＰ５）溶液に金属イオンを添加してＣＤ測定した結果を示す図である。本発明のペプチド（Ｍ２ＳＡＰ５）溶液に（Ａ）銅イオン溶液または（Ｂ）パラジウムイオン溶液を滴定してＩＴＣ測定した結果を示す図である。本発明のペプチド（Ｍ２ＳＡＰ６）溶液に金属イオンを添加してＣＤ測定した結果を示す図である。本発明のペプチド（Ｍ２ＳＡＰ６）溶液に（Ａ）銅イオン溶液または（Ｂ）パラジウムイオン溶液を滴定してＩＴＣ測定した結果を示す図である。本発明のペプチド（Ｍ２ＳＡＰ５）塗工した薄葉紙のパラジウムイオン吸着能を検討した結果を示す図である。

Ｍ２タンパク質はＡ型インフルエンザウイルスのエンベロープ内に存在する膜タンパク質である。Ｍ２タンパク質は、９７残基のアミノ酸（配列番号６）からなる１回膜貫通タンパク質であり、天然状態ではヘリックス構造をとっておりテトラマーを構成している。さらに、その４本膜貫通ヘリックスはｐＨ依存性のプロトンチャネルを形成しており、その中に含むＨｉｓ３７はｐＨセンサーであり、Ｔｒｐ４１はゲートの役割を担っている（Jasen R. Schnell et al., Nature 451 591-595 2008. 、Stouffer AL et al., Nature 451 596-599 2008.）。また、Ｍ２タンパク質は銅イオンと選択的に結合する能力を保有していることが知られている（Chris S. Gandhi et al., J Biol Chem 274(9) 5474-82 1999）。
そこで、本発明者らは、Ｍ２タンパク質の膜貫通ドメインを含むＳｅｒ２３からＬｅｕ４６までのアミノ酸配列からなるペプチドは疎水性が高く水に不溶であったためアミノ酸配列を改変することで水溶性を獲得させ、さらに新たな金属結合能を付与するべくペプチド分子を設計し、種々の性質について検討を行った。その結果、レアメタル結合能を有する水溶性アナログを見出し、本発明を完成させるに至った。

〔ペプチド〕
本発明は、以下のアミノ酸配列（１）を有し、かつアミノ酸残基数が１００以下であるペプチドを提供する。
（１）ＳＤＰＬＶＸ_１ＲＡＳＬＩＧＬＬＸ_２ＬＬＬＷＸ_３Ｘ_４Ｘ_５ＲＸ_６（配列番号１）
（Ｘ_１は親水性アミノ酸、Ｘ_２はＨまたはＡ、Ｘ_３はＲまたはＫ、Ｘ_４はＭまたは脂肪族アミノ酸、Ｘ_５はＤまたはＥ、Ｘ_６は任意のアミノ酸を表す。）
本発明のペプチドは、水溶性かつレアメタル結合能を有しているペプチドであればよい。本発明のペプチドは、上記アミノ酸配列（１）を含むものであればよく、それ以外の部分のアミノ酸配列は、水溶性およびレアメタル結合能の少なくとも一方を損なわない限り特に限定されない。なお、本明細書において、「ペプチド」は２個以上のアミノ酸がペプチド結合によって結合したものを意味し、結合するアミノ酸の数は問わない。すなわち、本発明における「ペプチド」にはポリペプチドが含まれる。

Ｘ_１は親水性アミノ酸であればよい。Ｘ_１の親水性アミノ酸としては、例えばアスパラギン、アルギニン、アスパラギン酸、グルタミン酸、グルタミン、ヒスチジン、リジン、セリン、トレオニン等が挙げられる。好ましくは、アスパラギン、アルギニンまたはグルタミン酸である。
Ｘ_４はメチオニンまたは脂肪族アミノ酸であればよい。Ｘ_４の脂肪族アミノ酸としては、例えばロイシン、イソロイシン、アラニン、バリン等が挙げられる。好ましくはロイシンである。
Ｘ_６のアミノ酸は特に限定されず、いずれのアミノ酸でもよい。好ましくは、ロイシン、リジン、グリシンであり、より好ましくは、ロイシンまたはリジンである。

上記アミノ酸配列（１）は、以下のアミノ酸配列（２）または（３）であることが好ましい。
（２）ＳＤＰＬＶＮＲＡＳＬＩＧＬＬＨＬＬＬＷＲＭＤＲＬ（配列番号２）
（３）ＳＤＰＬＶＲＲＡＳＬＩＧＬＬＨＬＬＬＷＫＭＤＲＫ（配列番号３）
アミノ酸配列（２）または（３）からなるペプチドは水溶性であり、パラジウムおよび銅と選択的に結合することが確認されている。

また、上記アミノ酸配列（１）は、以下のアミノ酸配列（４）または（５）であることが好ましい。
（４）ＳＤＰＬＶＲＲＡＳＬＩＧＬＬＨＬＬＬＷＫＬＥＲＫ（配列番号４）
（５）ＳＤＰＬＶＲＲＡＳＬＩＧＬＬＡＬＬＬＷＫＭＤＲＫ（配列番号５）
アミノ酸配列（４）または（５）からなるペプチドは水溶性であり、パラジウムと選択的に結合することが確認されている。

本発明のペプチドのアミノ酸残基数は、２４残基以上１００残基以下であれば特に限定されない。取り扱いの簡便さ、製造効率等の観点から、アミノ酸残基数の上限は約８０残基が好ましく、より好ましくは約５０残基、さらに好ましくは約４０残基、特に好ましくは約３０残基である。

本発明のペプチドの具体例としては、例えば、配列番号６のアミノ酸配列からなるＭ２タンパク質のＳｅｒ２３からＬｅｕ４６を、上記アミノ酸配列（１）で置換したペプチドを含むペプチドを好適に用いることができる。また、上記アミノ酸配列（１）を２〜４回繰り返した配列を含むペプチドを好適に用いることができる。上記アミノ酸配列（１）を２〜４回繰り返した配列としては、具体的には、例えば、上記アミノ酸配列（２）〜（５）のいずれか１種を２〜４回繰り返した配列、上記アミノ酸配列（２）〜（５）の２〜４種を適宜組み合わせて結合した配列などが挙げられる。好ましくは上記アミノ酸配列（２）〜（５）のいずれか１種からなるペプチドであり、より好ましくは上記アミノ酸配列（４）または（５）からなるペプチドである。

本発明のペプチドは、公知の一般的なペプチド合成のプロトコールに従って、固相合成法（Ｆｍｏｃ法、Ｂｏｃ法）または液相合成法により製造することができる。また、本発明のペプチドをコードするＤＮＡを含有する発現ベクターを導入した形質転換体を用いる方法や、ｉｎｖｉｔｒｏ転写・翻訳系を用いる方法により製造することができる。

本発明のペプチドは、Ｃ末端がカルボキシル基（−ＣＯＯＨ）、カルボキシレート(−ＣＯＯ⁻)、アミド（−ＣＯＮＨ_２）またはエステル（−ＣＯＯＲ）の何れであってもよい。エステルにおけるＲとしては、例えば、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピルもしくはｎ−ブチルなどのＣ_１−６アルキル基、例えば、シクロペンチル、シクロヘキシルなどのＣ_３−８シクロアルキル基、例えば、フェニル、α−ナフチルなどのＣ_６−１２アリール基、例えば、ベンジル、フェネチルなどのフェニル−Ｃ_１−２アルキル基もしくはα−ナフチルメチルなどのα−ナフチル−Ｃ_１−２アルキル基などのＣ_７−１４アラルキル基のほか、経口用エステルとして汎用されるピバロイルオキシメチル基などが挙げられる。本発明のペプチドがＣ末端以外にカルボキシル基またはカルボキシレートを有している場合、それらの基がアミド化またはエステル化されているものも本発明のペプチドに含まれる。

本発明のペプチドを構成するアミノ酸は、側鎖が任意の置換基で修飾されたものでもよい。置換基は特に限定されないが、例えば、フッ素原子、塩素原子、シアノ基、水酸基、ニトロ基、アルキル基、シクロアルキル基、アルコキシ基、アミノ基などが挙げられる。さらに、本発明のペプチドには、Ｎ末端のメチオニン残基のアミノ基が保護基（例えば、ホルミル基、アセチルなどのＣ_２−６アルカノイル基などのＣ_１−６アシル基など）で保護されているもの、Ｎ末端側が生体内で切断され生成したグルタミル基がピログルタミン酸化したもの、分子内のアミノ酸の側鎖上の置換基（例えば、−ＯＨ、−ＳＨ、アミノ基、イミダゾール基、インドール基、グアニジノ基など）が適当な保護基（例えば、ホルミル基、アセチルなどのＣ_２−６アルカノイル基などのＣ_１−６アシル基など）で保護されているものも含まれる。

本発明のペプチドは塩を形成していてもよく、その塩としては、例えば、塩酸、硫酸、燐酸、乳酸、酒石酸、マレイン酸、フマル酸、シュウ酸、リンゴ酸、クエン酸、オレイン酸、パルミチン酸などの酸との塩；ナトリウム、カリウム、カルシウムなどのアルカリ金属もしくはアルカリ土類金属の、またはアルミニウムの水酸化物または炭酸塩との塩；トリエチルアミン、ベンジルアミン、ジエタノールアミン、ｔ−ブチルアミン、ジシクロヘキシルアミン、アルギニンなどとの塩などが挙げられる。

〔金属吸着剤およびレアメタル回収方法〕
本発明のペプチドは金属（金属イオン）と結合できる性質を有するため、金属吸着剤として好適に用いることができる。本発明の金属吸着剤の吸着対象金属は、本発明のペプチドに特異的（選択的）に結合可能な金属に限定されず、非特異的に結合可能な金属であってもよい。本発明の金属吸着剤の吸着対象金属としては、例えば、金、銀、銅、亜鉛、白金、パラジウム、コバルト、クロム、マンガン、ニッケルなどが挙げられる。

本発明のペプチドは選択的レアメタル結合能を有しているので、レアメタル吸着剤として有用である。レアメタルとしては、例えば、白金、パラジウム、ロジウム、イリジウム、ルテニウム、オスミウム、金、銀、コバルト、クロム、マンガン、ニッケルなどが挙げられる。好ましくはパラジウムおよび／または白金である。

本発明の金属吸着剤は、本発明のペプチドのみからなるものでもよいが、本発明のペプチド以外のものを含んでもよい。好ましくは、本発明のペプチドが適当な担体に担持された形態の金属吸着剤である。担体は、本発明のペプチドを担持可能なものであれば特に限定されず、公知のペプチド担体から適宜選択して用いることができる。担体の材質は特に限定されず、例えば、紙、木材、プラスチック等が挙げられる。担体の形状は特に限定されず、平板状、球状、糸状等が挙げられる。

本発明の金属吸着剤を、金属成分を含有する水溶液と接触させることにより、本発明のペプチドが水溶液中の金属イオンと結合し、結合した金属を回収することができる。したがって、本発明は、上記本発明の金属吸着剤と金属成分を含有する水溶液とを接触させる工程を含む金属回収方法を提供する。また、本発明のペプチドは、レアメタルと特異的（選択的）に結合することができるので、回収対象金属をレアメタルとすることが好ましい。レアメタルを回収する場合は、本発明の金属吸着剤とレアメタルを含む金属成分を含有する水溶液とを接触させればよい。回収対象のレアメタルとしては、上記に例示したものが好ましい。

本発明のレアメタル回収方法では、本発明の金属吸着剤とレアメタルを含む金属成分を含有する水溶液とを接触させた後、例えば、遠心分離、ろ過、ｐＨの変化などによりレアメタルが結合した本発明の金属吸着剤を回収し、酵素による加水分解や燃焼によって金属吸着剤を分解消滅させることなどにより本発明の金属吸着剤からレアメタルを分離すればよい。

〔レアメタル検出方法〕
本発明者らは、後の実施例で示すように、本発明のペプチドが特定のレアメタルと結合することにより構造変化することを見出した。したがって、本発明は、本発明のペプチドを用いるレアメタル検出方法を提供することができる。すなわち、本発明のレアメタル検出方法は、本発明のペプチドと目的のレアメタルを含有する可能性のある水溶液とを接触させる工程、および、接触後の本発明のペプチドの構造変化を検出する工程を含むものであればよい。本発明のレアメタル検出方法において、本発明のペプチドは、上記本発明の金属吸着剤の形態で使用することが好ましい。ペプチドの構造変化を検出する手段としては、特に限定されないが、例えば、円二色性（ＣＤ）測定、赤外分光（ＩＲ）測定、核磁気共鳴（ＮＭＲ）測定などが挙げられる。

〔レアメタルセンサー〕
本発明のペプチドは特定のレアメタルと結合することにより構造変化するので、特定のレアメタルに対するセンシング素子として用いることができる。本発明のペプチドを用いるセンシング素子と、特定のレアメタルの結合に伴うペプチドの構造変化を他の信号に変換する手段とを組み合わせることにより、特定のレアメタルに対するセンサー（検出器）を提供することができる。

以下、実施例により本発明を詳細に説明するが、本発明はこれらに限定されるものではない。

〔実施例１：人工ペプチドの金属イオン結合能の検討〕
（１）ペプチドの合成
以下の４種類のペプチドを、ペプチド合成機（Pioneer, Peptide synthesis System; Applied Biosystems社製）を用いて、Ｆ−ｍｏｃ固相法により合成した。
Ｍ２ＳＡＰ２：ＳＤＰＬＶＮＲＡＳＬＩＧＬＬＨＬＬＬＷＲＭＤＲＬ（配列番号２）
Ｍ２ＳＡＰ３：ＳＤＰＬＶＲＲＡＳＬＩＧＬＬＨＬＬＬＷＫＭＤＲＫ（配列番号３）
Ｍ２ＳＡＰ５：ＳＤＰＬＶＲＲＡＳＬＩＧＬＬＨＬＬＬＷＫＬＥＲＫ（配列番号４）
Ｍ２ＳＡＰ６：ＳＤＰＬＶＲＲＡＳＬＩＧＬＬＡＬＬＬＷＫＭＤＲＫ（配列番号５）

（２）実験方法
（２−１）ＣＤ（円二色性）測定
合成した各ペプチドを酢酸バッファー（ｐＨ５．５）にそれぞれ溶解して、３００μＭのペプチド溶液を調製した。このペプチド溶液にコバルト、銅またはパラジウムを含む溶液を添加した。ペプチド溶液のみ（金属非添加）、コバルト添加ペプチド溶液、銅添加ペプチド溶液およびパラジウム添加ペプチド溶液について、それぞれＣＤを測定した。測定には、ＪａｓｃｏＪ−７２０ｓｐｅｃｔｒｏ−ｐｏｌａｒｒｉｍｅｔｅｒ（日本分光社製）を使用し、光路長０．１ｍｍのタイコセルを用いて２００μＬのペプチド溶液について測定した。測定条件は、温度２５℃、走査波長２５０ｎｍ〜１９０ｎｍ、データ間隔０．２ｎｍ、走査速度１００ｎｍ／ｍｉｎ、レスポンス２ｓｅｃ、バンド幅１ｎｍ、感度１０ｍｄｅｇ、積算回数８回とした。

（２−２）ＩＴＣ測定（等温滴定熱測定）
合成した各ペプチドを酢酸バッファー（ｐＨ５．５）にそれぞれ溶解して、３００μＭのペプチド溶液を調製した。測定には、ＶＰ−ＩＴＣＭｉｃｒｏＣａｌｏｒｉｍｅｔｅｒ（MicroCal社製）を使用した。セルに１．５ｍＬのペプチド溶液を入れ、撹拌しながら銅イオン溶液またはパラジウムイオン溶液を滴定した。得られた発熱量の変化を解析して結合定数を算出した。

（３）結果
（３−１）Ｍ２ＳＡＰ２
Ｍ２ＳＡＰ２のＣＤ測定の結果を図１に、ＩＴＣ測定の結果を図２（Ａ）および（Ｂ）に示した。図１から、Ｍ２ＳＡＰ２は、銅イオンまたはパラジウムイオンを添加することによりこれらの金属と結合してα−へリックスに構造変化することが示された。一方、コバルトイオンを添加した場合は構造変化が生じないことが示された。示していないが、他の金属（鉄イオン、ニッケルイオン等）を添加した場合も構造変化が生じなかった。この結果から、Ｍ２ＳＡＰ２は、銅およびパラジウムと選択的に結合することが明らかとなった。図２（Ａ）および（Ｂ）に示した発熱量の変化に基づいて得られた結合常数（表１参照）から、Ｍ２ＳＡＰ２の銅およびパラジウムに対する結合能は同程度であった。

（３−２）Ｍ２ＳＡＰ３
Ｍ２ＳＡＰ３のＣＤ測定の結果を図３に、ＩＴＣ測定の結果を図４（Ａ）および（Ｂ）に示した。図３から、Ｍ２ＳＡＰ３は、銅イオンまたはパラジウムイオンを添加することによりこれらの金属と結合してα−へリックスに構造変化することが示された。一方、コバルトイオンを添加した場合は構造変化が生じないことが示された。示していないが、他の金属（鉄イオン、ニッケルイオン等）を添加した場合も構造変化が生じなかった。この結果から、Ｍ２ＳＡＰ３は、銅およびパラジウムと選択的に結合することが明らかとなった。図４（Ａ）および（Ｂ）に示した発熱量の変化に基づいて得られた結合常数（表１参照）から、Ｍ２ＳＡＰ３の銅およびパラジウムに対する結合能は同程度であった。

（３−３）Ｍ２ＳＡＰ５
Ｍ２ＳＡＰ５のＣＤ測定の結果を図５に、ＩＴＣ測定の結果を図６（Ａ）および（Ｂ）に示した。図５から、Ｍ２ＳＡＰ３は、パラジウムイオンを添加することによりこれと結合してα−へリックスに構造変化することが示された。一方、銅イオンまたはコバルトイオンを添加した場合は構造変化が生じないことが示された。示していないが、他の金属（鉄イオン、ニッケルイオン等）を添加した場合も構造変化が生じなかった。この結果から、Ｍ２ＳＡＰ５は、パラジウムと選択的に結合することが明らかとなった。図６（Ａ）および（Ｂ）に示した発熱量の変化に基づいて得られた結合常数（表１参照）から、Ｍ２ＳＡＰ５のパラジウムに対する結合能は、銅に対する結合能の約４倍であった。なお、パラジウムに対する結合能がＭ２ＳＡＰ３と比して約２倍向上している点で、より有用性が高い。

（３−４）Ｍ２ＳＡＰ６
Ｍ２ＳＡＰ６のＣＤ測定の結果を図７に、ＩＴＣ測定の結果を図８（Ａ）および（Ｂ）に示した。図７から、Ｍ２ＳＡＰ６は、パラジウムイオンを添加することによりこれと結合してα−へリックスに構造変化することが示された。一方、銅イオンまたはコバルトイオンを添加した場合は構造変化が生じないことが示された。示していないが、他の金属（鉄イオン、ニッケルイオン等）を添加した場合も構造変化が生じなかった。この結果から、Ｍ２ＳＡＰ６は、パラジウムと選択的に結合することが明らかとなった。図８（Ａ）および（Ｂ）に示した発熱量の変化に基づいて得られた結合常数（表１参照）から、Ｍ２ＳＡＰ６のパラジウムに対する結合能は、銅に対する結合能の約４倍であった。なお、パラジウムに対する結合能がＭ２ＳＡＰ３と比して約４倍向上している点で、より有用性が高い。

〔実施例２：ペプチド塗工紙のＰｄイオン吸着能の検討〕
（１）ペプチド塗工紙の作製
原紙として、薄葉紙１４ｇ／ｍ^２（５０ｍｍ×５０ｍｍ）を用いた。ペプチド塗工液（原液）として、バインダー樹脂（２５％品）４０ｍｇにＭ２ＳＡＰ５を１０ｍｇ添加して攪拌混合したもの（バインダー樹脂（固形量）：ペプチド（固形量）＝１：１）を用いた。ペプチド塗工液の入ったシャーレの中に薄葉紙を入れて含浸させ、その後オーブン乾燥機にて１００℃で１０分間乾燥を行った。ペプチド塗工液（原液）を水で希釈して濃度を調整することにより、塗工量が２ｇ／ｍ^２（ペプチド１ｇ／ｍ^２）の塗工紙および１ｇ／ｍ^２（ペプチド０．５ｇ／ｍ^２）の塗工紙の２種類を作製した。

（２）Ｐｄイオン吸着試験
パラジウム標準液（１０００ｐｐｍ）が５ｍｌ入ったシャーレに、２５ｍｍ×２５ｍｍ角の塗工紙を４時間含浸させ、パラジウムイオンを吸着させた。その後、残液のパラジウムイオン濃度を原子吸光分光光度計を用いて測定し、初期濃度との差を吸着量とした（ｎ＝２）。
結果を図９および表２に示した。図９は、４時間含浸後の薄葉紙の写真であり、（Ａ）が薄葉紙１４ｇ／ｍ^２、（Ｂ）が薄葉紙１４ｇ／ｍ^２＋ペプチド塗工液２ｇ／ｍ^２、（Ｃ）が薄葉紙１４ｇ／ｍ^２＋ペプチド塗工液１ｇ／ｍ^２の写真である。図９からわかるように、薄葉紙の着色の程度は（Ｂ）＞（Ｃ）＞（Ａ）であった。また、表２に示したように、薄葉紙に本発明のペプチドを塗工することでパラジウムイオンの吸着量が用量依存的に増加した。また、ペプチド塗工紙作製における原料ペプチドの歩留まりを１００％と仮定した場合、ペプチド１ｇあたりのパラジウムイオン吸着量は約９０〜約１３５ｍｇ／ｇと推定された。

なお本発明は上述した各実施形態および実施例に限定されるものではなく、請求項に示した範囲で種々の変更が可能であり、異なる実施形態にそれぞれ開示された技術的手段を適宜組み合わせて得られる実施形態についても本発明の技術的範囲に含まれる。また、本明細書中に記載された学術文献および特許文献の全てが、本明細書中において参考として援用される。

Claims

以下のアミノ酸配列（１）からなるペプチド、またはアミノ酸配列（１）を２〜４回繰り返した配列からなるペプチド。
（１）ＳＤＰＬＶＸ_１ＲＡＳＬＩＧＬＬＸ_２ＬＬＬＷＸ_３Ｘ_４Ｘ_５ＲＸ_６（配列番号１）
（Ｘ_１はＮまたはＲ、Ｘ_２はＨまたはＡ、Ｘ_３はＲまたはＫ、Ｘ_４はＭまたはＬ、Ｘ_５はＤまたはＥ、Ｘ_６はＫまたはＬを表す。）
アミノ酸配列（１）が、以下のアミノ酸配列（２）〜（５）のいずれかである請求項１に記載のペプチド。
（２）ＳＤＰＬＶＮＲＡＳＬＩＧＬＬＨＬＬＬＷＲＭＤＲＬ（配列番号２）
（３）ＳＤＰＬＶＲＲＡＳＬＩＧＬＬＨＬＬＬＷＫＭＤＲＫ（配列番号３）
（４）ＳＤＰＬＶＲＲＡＳＬＩＧＬＬＨＬＬＬＷＫＬＥＲＫ（配列番号４）
（５）ＳＤＰＬＶＲＲＡＳＬＩＧＬＬＡＬＬＬＷＫＭＤＲＫ（配列番号５）
請求項１または２に記載のペプチドを含有する金属吸着剤。
金属がレアメタルである請求項３に記載の金属吸着剤。
レアメタルがパラジウムおよび／または白金である請求項４に記載の金属吸着剤。
請求項３〜５のいずれかに記載の金属吸着材とレアメタルを含む金属成分を含有する水溶液とを接触させる工程を含むことを特徴とするレアメタル回収方法。
レアメタルがパラジウムおよび／または白金である請求項６に記載のレアメタル回収方法。
請求項１または２に記載のペプチドとレアメタルを含む金属成分を含有する水溶液とを接触させる工程、および、当該ペプチドの構造変化を検出する工程を含むことを特徴とするレアメタル検出方法。
レアメタルがパラジウムおよび／または白金である請求項８に記載のレアメタル検出方法。