JP5923468B2 - エストロジェン分泌増進用組成物、及びその芳香組成物、並びにその芳香用具。 - Google Patents
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Description
本発明は、１,８-シネオールを有効成分として含有するエストロジェン分泌増進用組成物、エストロジェン分泌芳香組成物、及び、エストロジェン分泌芳香用具に関する。
一般に、黄体後期（月経が始まる７〜１０日前から月経開始日まで）、出産直後（出産後、３〜５日目から２週間）、更年期（通常４５〜５５歳）に起こる、女性特有の不定愁訴（抑うつ気分、倦怠感、意欲低下、睡眠障害）は、エストロジェン分泌の低下によってもたらされる。
月経が終わると、視床下部の刺激で、エストロジェン分泌量が徐々に増え排卵が起こる。排卵の終わった卵胞は黄体となり、プロジェステロンを分泌するが、この時期にエストロジェン分泌も行われる。そのレベルは徐々に高まるが、妊娠しないと急激に低下し、月経が始まる。従って、黄体後期はエストロジェン分泌の急激な低下が生じる時期である。この時期に月経前緊張症が起こる。この病気では、女性特有の不定愁訴が黄体後期に起こり、月経の始まりとともに徐々に消失するが、月経期間中も続く場合もある。生殖年齢にある女性の２０〜５０％は月経前緊張症の症状の少なくとも一つを有する。
排卵後受胎すると、エストロジェンの値は急速かつ大量に増大する。妊娠中のエストロジェン分泌量は、妊娠していない女性の数十倍にもなる。ほぼ９ヶ月間にわたり高値を示したエストロジェン分泌レベルは、分娩後数時間以内に急激に減少し7日目には測定不能なまでに低下する。この時期に約80％の女性でマタニティーブルーが起こる。マタニティーブルーは、月経前緊張症と同様、女性特有の不定愁訴を示す。症状は、通常、出産後３〜５日目から始まり２週間以内に消失する。また、産後のホルモン分泌の低下により、産後うつ病となることもある。
エストロジェンの分泌レベルは生涯を通じて変化する。思春期に上昇し始め、２０代にピークを迎える。その後、卵巣機能は徐々に衰え、エストロジェンは減少し、更年期を迎える。更年期は通常45〜55歳に起こり、早まることも遅まることもある。更年期障害はこの時期の女性の60〜70％に見られる。更年期障害の症状は、月経前緊張症やマタニティブルーに似たような女性特有の不定愁訴が主である。
以上のことから、女性の不定愁訴（病気を含む）はエストロジェン分泌が減少するという特徴を持つ時期である、黄体後期(月経中も含む)、出産後、更年期に出現することがわかる。
ところで、エストロジェン分泌を制御する組成物として、特許文献１には、エストロジェン(女性ホルモンの１群)の主成分である１７β-エストラジオールの分泌促進剤として、香科組成物のアンプレット・シード油やアンブレットリドを用いることが開示している。また、特許文献２には、女性ホルモン不足症を治療するものとして菌生冬虫夏草の抽出物を用いることが開示している。また、特許文献３は、本発明者らによるものであるが、β−カリオフィレンの芳香成分の女性に対する影響が開示されている。
ところで、エストロジェン分泌を制御する組成物として、特許文献１には、エストロジェン(女性ホルモンの１群)の主成分である１７β-エストラジオールの分泌促進剤として、香科組成物のアンプレット・シード油やアンブレットリドを用いることが開示している。また、特許文献２には、女性ホルモン不足症を治療するものとして菌生冬虫夏草の抽出物を用いることが開示している。また、特許文献３は、本発明者らによるものであるが、β−カリオフィレンの芳香成分の女性に対する影響が開示されている。
更に、非特許文献１〜３には、匂いの呈示は、視床下部が制御する黄体形成ホルモン（LH）の分泌頻度を変えることを示し、従来のアロマテラピー等が経口、経静脈、経皮的ルートを介する複合的な作用であることに対し、嗅覚神経を介する作用のみによって、視床下部機能を変える可能性を示した。一般的に、エストロジェンの分泌は、ＬＨの分泌を受けて生じ、ＬＨの分泌は視床下部の活動を受けて生じる為、視床下部の活動亢進をもたらす作用が、エストロジェン分泌亢進をもたらすものと考えられる。いずれも、１,８-シネオールと女性ホルモンであるエストロジェン分泌については言及されていない。
エストロジェンは、以下のアンチエージング効果（あるいは更年期及び閉経女性のエストロジェン低下に伴う疾患リスク低減効果）を有することが明らかにされている。
・コラーゲンの生成促進（美肌効果、ハリ・つやの衰え予防）
・カルシウムの骨への吸収促進（骨粗鬆症のリスク低減）
・毛髪の新生促進（増毛促進）
・基礎代謝亢進（リンゴ型肥満の予防）
・認知機能亢進（認知症リスク低減）
・血管拡張促進（動脈硬化のリスク低減）
・免疫機能亢進（膠原病、リューマチ等自己免疫疾患リスク低減）
・乳腺の発達促進（乳房の弾力やハリの維持による美容効果）
・善玉コレステロール（HDL）増加（動脈硬化のリスク低減）
・コラーゲンの生成促進（美肌効果、ハリ・つやの衰え予防）
・カルシウムの骨への吸収促進（骨粗鬆症のリスク低減）
・毛髪の新生促進（増毛促進）
・基礎代謝亢進（リンゴ型肥満の予防）
・認知機能亢進（認知症リスク低減）
・血管拡張促進（動脈硬化のリスク低減）
・免疫機能亢進（膠原病、リューマチ等自己免疫疾患リスク低減）
・乳腺の発達促進（乳房の弾力やハリの維持による美容効果）
・善玉コレステロール（HDL）増加（動脈硬化のリスク低減）
最近、代替医療として、アロマテラピーなどの香り（匂い物質）による健康改善法が広まりつつあるが、効用は経験に基づくものであり基礎医学研究による裏付けがあまりない。また、作用する経路も嗅覚神経を介すものに限らず、経口、経静脈、経皮的ルートも含み、複合的である。しかし、嗅覚情報は大脳新皮質を介さず、直接、情動の中枢である大脳辺縁系や本能（摂食、睡眠）ホルモンの中枢である視床下部に入力することを考えると、匂い物質は経口、経静脈、経皮的ルートを介さない新しい中枢神経系薬物として発展しうる可能性がある。
Shinohara,K., Morofushi, M, Funabashi, T. and Kimura, F., Axillary pheromones modulatepulsatile LH secretion in humans. NeuroReport. 12, 893-895. (2001).
Shinohara,K., Morofushi, M., Funabashi, T., Mitsushima, D. and Kimura, F., Effects of 5α-androst-16-en-3α-ol on the pulsatile secretion of luteinizing hormone in human females. Chem.Senses 25, 465-467. (2000).
Morofushi, M., Shinohara, K., Funabashi T. and Kimura, F. Positiverelationship between menstrual synchrony and ability to smell 5α-androst-16-en-3α-ol.Chem. Sense 25, 407-411. (2000).
本発明は、エストロジェン分泌増進用組成物、及び前記分泌増進方法を提供することを目的とする。
本発明者らは、上記課題を解決するため鋭意検討を重ねた結果、１,８-シネオールの匂いが、特に、黄体後期の女性のエストロジェン分泌を増進する作用を見出した。本発明は、以上の知見に基づき完成されたものであり、１,８-シネオールを有効成分として含有するエストロジェン分泌増進用組成物、及びその芳香組成物、並びにその芳香用具である。
即ち、本発明の第１の様態である請求項１の発明は、合成された１,８-シネオール又は天然物から単離、精製された１,８-シネオールを有効成分として含有するエストロジェン分泌増進用組成物（食品を除く。）である。
請求項２の発明は、請求項１に記載のエストロジェン分泌増進用組成物において、前記エストロジェンは、１７β-エストラジオールであることを特徴とする。
請求項３の発明は、請求項１又は２に記載のエストロジェン分泌増進用組成物において、前記組成物の投与手段が香料、精油、化粧品による嗅覚神経を介して脳に伝達されるように投与することを特徴とする。
本発明の第２の様態である請求項４の発明は、請求書１〜３のいずれかに記載のエストロジェン分泌増進用組成物を含有するエストロジェン分泌増進用芳香組成物である。
請求項５の発明は、請求項４に記載のエストロジェン分泌増進用芳香組成物において、前記エストロジェンは、１７β-エストラジオールであることを特徴とする。
本発明の第３の様態である請求項６の発明は、請求書１〜３のいずれかに記載のエストロジェン分泌増進用組成物を含有するエストロジェン分泌増進用芳香用具である。
請求項７の発明は、請求項６に記載のエストロジェン分泌芳香用具において、前記エストロジェンは、１７β-エストラジオールであることを特徴とする。
請求項２の発明は、請求項１に記載のエストロジェン分泌増進用組成物において、前記エストロジェンは、１７β-エストラジオールであることを特徴とする。
請求項３の発明は、請求項１又は２に記載のエストロジェン分泌増進用組成物において、前記組成物の投与手段が香料、精油、化粧品による嗅覚神経を介して脳に伝達されるように投与することを特徴とする。
本発明の第２の様態である請求項４の発明は、請求書１〜３のいずれかに記載のエストロジェン分泌増進用組成物を含有するエストロジェン分泌増進用芳香組成物である。
請求項５の発明は、請求項４に記載のエストロジェン分泌増進用芳香組成物において、前記エストロジェンは、１７β-エストラジオールであることを特徴とする。
本発明の第３の様態である請求項６の発明は、請求書１〜３のいずれかに記載のエストロジェン分泌増進用組成物を含有するエストロジェン分泌増進用芳香用具である。
請求項７の発明は、請求項６に記載のエストロジェン分泌芳香用具において、前記エストロジェンは、１７β-エストラジオールであることを特徴とする。
本発明の合成された１,８-シネオール又は天然物から単離、精製された１,８-シネオールを有効成分として含有するエストロジェン分泌増進用組成物、エストロジェン分泌芳香組成物、及び、エストロジェン芳香用具を使用することにより、エストロジェン分泌を増進することができ、特に、黄体後期においてエストロジェン分泌をより増進することができる。この為、女性に対してエストロジェン分泌低下に伴い生じる、月経前緊張症、月経期の諸症状、マタニティーブルー、産後うつ病、更年期障害といった女性特有の不定愁訴（病気を含む）を緩和する効果、エストロジェン分泌増進によるアンチエージング効果を期待できる。
また、副次的効果として、特に黄体後期において、集中力、性欲、陽性／陰性感情、気分、不安の症状を改善でき、それによって、女性の不定愁訴症状の改善、アンチエージングをもたらす効果が期待できる。
また、本発明の組成物は、嗅覚神経を介する方法によって投与できるので、短時間で効果を発揮させることができ、また、血液を介さないので肝臓や腎臓等の臓器に副作用を及ぼさないという利点もある。
また、副次的効果として、特に黄体後期において、集中力、性欲、陽性／陰性感情、気分、不安の症状を改善でき、それによって、女性の不定愁訴症状の改善、アンチエージングをもたらす効果が期待できる。
また、本発明の組成物は、嗅覚神経を介する方法によって投与できるので、短時間で効果を発揮させることができ、また、血液を介さないので肝臓や腎臓等の臓器に副作用を及ぼさないという利点もある。
以下、本発明を詳細に説明するが、本発明は、１,８-シネオールの匂いが、特に、黄体後期の女性（黄体後期は、エストロジェンが低下し、月経前緊張症を起こす。）のエストロジェン分泌を増進する作用を見出した。本発明は、以上の知見に基づき完成されたものである。
この１,８-シネオールは、別名ユーカリプトール (eucalyptol)と呼ばれる天然に存在する有機化合物(合成も可能であるが)で、環状エーテル構造を持つモノテルペノイドの一種であり、１,８-シネオールは他にリモネンオキシド、カジェプトール (cajeptol) とも呼ばれ、こころよい芳香と味を持つことから、食品添加物・香料・化粧品に利用され、下記のような構造式を有する。
この１,８-シネオールは、別名ユーカリプトール (eucalyptol)と呼ばれる天然に存在する有機化合物(合成も可能であるが)で、環状エーテル構造を持つモノテルペノイドの一種であり、１,８-シネオールは他にリモネンオキシド、カジェプトール (cajeptol) とも呼ばれ、こころよい芳香と味を持つことから、食品添加物・香料・化粧品に利用され、下記のような構造式を有する。
そして、発明者らは、１,８-シネオールの匂いは、黄体後期の女性のエストロジェン分泌を増進する作用があることを見出したが、以下のような新規な用途に利用できることに想到した。
（１）１,８-シネオールは、黄体後期（月経期も含む）の女性にみられるエストロジェン分泌の低下が原因の不快症状、及び出産後の女性の不快症状の改善に効果があると推定できる。また、エストロジェン分泌の低下が原因の不快症状は黄体後期（月経期も含む）の女性のみならず、出産後の女性、更年期の女性にもみられるが、このような女性の不快症状に対しても１,８-シネオールは有効であると推定できる。また、上述のアンチエージング効果があると推定できる。
（２）植物の精油（エッセンシャルオイル）を用いて症状の改善や健康維持を図る療法を一般にアロマテラピー（芳香治療、芳香療法）というが、この植物の精油（混合物）の代わりに、１,８-シネオール（精油に含まれる単一物質）を用いて、病気の治療を図ることも可能である。
従って、１,８-シネオールは、「エストロジェン分泌増進の芳香による症状の改善組成物」としても利用できると考えられる。
（３）上記（２）と同様に、器具や道具のような形態でも、１,８-シネオールによる症状の改善や健康維持は可能である。従って、１,８-シネオールは、「芳香による症状の改善用用具」としても利用できると考えられる。
（１）１,８-シネオールは、黄体後期（月経期も含む）の女性にみられるエストロジェン分泌の低下が原因の不快症状、及び出産後の女性の不快症状の改善に効果があると推定できる。また、エストロジェン分泌の低下が原因の不快症状は黄体後期（月経期も含む）の女性のみならず、出産後の女性、更年期の女性にもみられるが、このような女性の不快症状に対しても１,８-シネオールは有効であると推定できる。また、上述のアンチエージング効果があると推定できる。
（２）植物の精油（エッセンシャルオイル）を用いて症状の改善や健康維持を図る療法を一般にアロマテラピー（芳香治療、芳香療法）というが、この植物の精油（混合物）の代わりに、１,８-シネオール（精油に含まれる単一物質）を用いて、病気の治療を図ることも可能である。
従って、１,８-シネオールは、「エストロジェン分泌増進の芳香による症状の改善組成物」としても利用できると考えられる。
（３）上記（２）と同様に、器具や道具のような形態でも、１,８-シネオールによる症状の改善や健康維持は可能である。従って、１,８-シネオールは、「芳香による症状の改善用用具」としても利用できると考えられる。
以下、上記の各用途について説明する。
（４）エストロジェン分泌増進用組成物（以下、「本発明の増進用組成物」という場合がある）
本発明のエストロジェン分泌増進用組成物は、１,８-シネオールを有効成分として含有するものである。
使用する１,８-シネオールは、天然物（例えば、ティートリー、ペパーミント、ユーカリ、ローズマリー等）などから抽出されたものでもよく、人工的に合成されたものであってもよい。また、１,８-シネオールは、試薬として既に販売されているのでそれを用いてもよい。
（４）エストロジェン分泌増進用組成物（以下、「本発明の増進用組成物」という場合がある）
本発明のエストロジェン分泌増進用組成物は、１,８-シネオールを有効成分として含有するものである。
使用する１,８-シネオールは、天然物（例えば、ティートリー、ペパーミント、ユーカリ、ローズマリー等）などから抽出されたものでもよく、人工的に合成されたものであってもよい。また、１,８-シネオールは、試薬として既に販売されているのでそれを用いてもよい。
本発明のエストロジェン分泌増進用組成物は、その使用態様に応じて様々な組成で調製されるが、通常は、後述するエストロジェン分泌芳香組成物と同様の組成で調製される。
本発明のエストロジェン分泌芳香組成物は、その使用態様に応じて様々な組成で調製されるが、通常は、１,８-シネオール濃度が０.３〜３.７５％で、好ましくは１.５％になるように、適当な溶媒、例えば、ジプロピレングリコール、プロピレングリコール、ブチレングリコール、ミネラルオイル、クエン酸トリエチル、エタノール、ベンジルベンゾエイトと混合することにより調製される。
一般には、アロマポット、ディフーザーを用いて、芳香浴としてその香りを吸入する。また、必要に応じて他の成分を加え、化粧品（スキンケア製品、香水等）、入浴剤、芳香剤、スプレー、マッサージオイル、シャンプー、洗濯洗剤などとして使用することもできる。
本発明のエストロジェン分泌芳香組成物は、その使用態様に応じて様々な組成で調製されるが、通常は、１,８-シネオール濃度が０.３〜３.７５％で、好ましくは１.５％になるように、適当な溶媒、例えば、ジプロピレングリコール、プロピレングリコール、ブチレングリコール、ミネラルオイル、クエン酸トリエチル、エタノール、ベンジルベンゾエイトと混合することにより調製される。
一般には、アロマポット、ディフーザーを用いて、芳香浴としてその香りを吸入する。また、必要に応じて他の成分を加え、化粧品（スキンケア製品、香水等）、入浴剤、芳香剤、スプレー、マッサージオイル、シャンプー、洗濯洗剤などとして使用することもできる。
（５）エストロジェン分泌芳香用具
本発明のエストロジェン分泌芳香用具は、合成された１,８-シネオール又は天然物から単離、精製された１,８-シネオールを含有する部分を持つものである。
使用する１,８-シネオールは、芳香組成物と同様に、合成された又は天然物から単離、精製されたものを用いる。
また、飲食物を口に入れる前又は咀嚼中、通常その食品の匂いを嗅いでいる。従って、食品或いは飲料という形態でも１,８-シネオールはその効果を発揮でき、１,８-シネオールは女性の不定愁訴症状の改善用の飲食物としても利用できる。
飲食物の種類は限定されず、フレーバーティー、フレーバーコーヒー、フレーバービール、飴、ガム、ブレスケア、調味料などを例示できる。例えば、本発明の食品は、通常の食品の製造工程に、１,８-シネオールを添加する工程を追加することにより製造され、食品中の１,８-シネオールの含有量は、食品の種類により異なるが、通常は、0.3-3.75%程度が適量である。
芳香用具は、芳香に使用される器具、道具等であればどのようなものでもよく、生理用品、紙類、繊維製品（下着、ストキング等）、貼布薬、石鹸、ろうそく、枕、布団、などを例示することができる。
本発明の芳香用具は、植物の精油の代わりに１,８-シネオールを用いること以外は、一般の芳香用具と同様に製造することができる。
本発明のエストロジェン分泌芳香用具は、合成された１,８-シネオール又は天然物から単離、精製された１,８-シネオールを含有する部分を持つものである。
使用する１,８-シネオールは、芳香組成物と同様に、合成された又は天然物から単離、精製されたものを用いる。
また、飲食物を口に入れる前又は咀嚼中、通常その食品の匂いを嗅いでいる。従って、食品或いは飲料という形態でも１,８-シネオールはその効果を発揮でき、１,８-シネオールは女性の不定愁訴症状の改善用の飲食物としても利用できる。
飲食物の種類は限定されず、フレーバーティー、フレーバーコーヒー、フレーバービール、飴、ガム、ブレスケア、調味料などを例示できる。例えば、本発明の食品は、通常の食品の製造工程に、１,８-シネオールを添加する工程を追加することにより製造され、食品中の１,８-シネオールの含有量は、食品の種類により異なるが、通常は、0.3-3.75%程度が適量である。
芳香用具は、芳香に使用される器具、道具等であればどのようなものでもよく、生理用品、紙類、繊維製品（下着、ストキング等）、貼布薬、石鹸、ろうそく、枕、布団、などを例示することができる。
本発明の芳香用具は、植物の精油の代わりに１,８-シネオールを用いること以外は、一般の芳香用具と同様に製造することができる。
（６）エストロジェン分泌増進用組成物の使用
本発明のエストロジェン分泌増進用組成物の使用対象及び投与方法は、１,８-シネオールを、エストロジェンの低下を示す者に投与することを特徴とするものである。
１,８-シネオールの投与方法は特に限定されず、通常の医薬等と同様に経口的、経静脈的、経皮的に投与してもよいが、好ましくは、１,８-シネオールによる刺激が嗅覚神経を介して脳に伝達されるような手段で投与する。このような投与手段の一例としては、１,８-シネオールを含む空気を、エストロジェン分泌の低下を示す者に嗅がせる手段を例示することができる。このときの空気中の１,８-シネオールの量は厳密には計測できないが、芳香を発散する溶液の使用する１,８-シネオールの含有量は、例えば、プロピレングリコールを溶媒に用いた場合には、０.３〜３.７５％の範囲が好ましく、１.５％程度がより好ましい。
本発明のエストロジェン分泌増進用組成物の使用対象及び投与方法は、１,８-シネオールを、エストロジェンの低下を示す者に投与することを特徴とするものである。
１,８-シネオールの投与方法は特に限定されず、通常の医薬等と同様に経口的、経静脈的、経皮的に投与してもよいが、好ましくは、１,８-シネオールによる刺激が嗅覚神経を介して脳に伝達されるような手段で投与する。このような投与手段の一例としては、１,８-シネオールを含む空気を、エストロジェン分泌の低下を示す者に嗅がせる手段を例示することができる。このときの空気中の１,８-シネオールの量は厳密には計測できないが、芳香を発散する溶液の使用する１,８-シネオールの含有量は、例えば、プロピレングリコールを溶媒に用いた場合には、０.３〜３.７５％の範囲が好ましく、１.５％程度がより好ましい。
以下、実施例により本発明を更に詳細に説明する。
〔実施例１〕
正常月経周期（26日〜34日）を回帰する精神的・身体的に健常な２０代の非喫煙女性を対象として、１,８-シネオールを嗅いだ場合に生じるホルモン変化を調べた。
〔実施例１〕
正常月経周期（26日〜34日）を回帰する精神的・身体的に健常な２０代の非喫煙女性を対象として、１,８-シネオールを嗅いだ場合に生じるホルモン変化を調べた。
1.実験方法
１−１.説明会
被験者には、事前に実験内容を説明して承諾を得てから、実験当日は匂いが強い食べ物や刺激物(ニンニク・タマネギ・香辛料・香草など)を朝から食べないようにし、実験開始30分前からは何も食べないようにしてもらうようにした。また、基礎体温を記載してもらい、排卵検査薬を用いて、排卵日（LHサージ）を確定してもらった。
１−１.説明会
被験者には、事前に実験内容を説明して承諾を得てから、実験当日は匂いが強い食べ物や刺激物(ニンニク・タマネギ・香辛料・香草など)を朝から食べないようにし、実験開始30分前からは何も食べないようにしてもらうようにした。また、基礎体温を記載してもらい、排卵検査薬を用いて、排卵日（LHサージ）を確定してもらった。
１−２.実験当日
被験者を月経周期により、卵胞期（月経開始後5-10日）、黄体後期（LHサージ後9-12日）の２グループに分けた。各々のグループの被験者に、１.５％の１,８-シネオールを含む溶媒（プロピレングリコール）又は溶媒のみを嗅がせ、実験開始前と実験開始２０分後に唾液採取を行い、分泌されるエストロジェン(女性ホルモン)の内、最も作用が強い１７βエストラジオール（E2）を酵素免疫測定法により測定した。
被験者を月経周期により、卵胞期（月経開始後5-10日）、黄体後期（LHサージ後9-12日）の２グループに分けた。各々のグループの被験者に、１.５％の１,８-シネオールを含む溶媒（プロピレングリコール）又は溶媒のみを嗅がせ、実験開始前と実験開始２０分後に唾液採取を行い、分泌されるエストロジェン(女性ホルモン)の内、最も作用が強い１７βエストラジオール（E2）を酵素免疫測定法により測定した。
前記の酵素免疫測定法に用いたのは、SALIMETRICS社製の唾液中成分の定量キット(測定キット)で、型番が1-3702 Estradiol, EIA Kit, High Sensitivity, Salivaryで、測定手法は、(Ａ)「未知の濃度の１７βエストラジオールを含む唾液検体」を、それに結合する抗体（96穴プレートというプラスティックプレートの穴にコーティングされている）と反応させ、その際、(Ｂ)「酵素を予め結合させた既知濃度の１７βエストラジオール」も同時に反応させ、(Ａ)と(Ｂ)で競合反応（(Ａ)と(Ｂ)で抗体を取り合う）をさせた。
一定時間の反応後、プレート状の抗体に結合しているもの以外の溶液を捨て、酵素反応（発色する）を誘発する基質を添加する。こうすることで、発色は(Ｂ)の結合量を反映した色合いになる。この色合いは、吸光光度計による測定から定量化し、(Ａ)が少なければ、(Ｂ)の方が抗体を多く取るので、発色の強さは強くなり、一方、(Ｂ)が多ければ、相対的に(Ｂ)が抗体を取る量が減り、発色の強さは弱くなる。こうした原理を利用して、別途、「既知の濃度の１７βエストラジオール（標準検体）」を複数濃度測定し、検量線を算出しておくことで、発色の色合いから(Ａ)「未知の濃度の１７βエストラジオールを含む唾液検体」の濃度を算出した。
一定時間の反応後、プレート状の抗体に結合しているもの以外の溶液を捨て、酵素反応（発色する）を誘発する基質を添加する。こうすることで、発色は(Ｂ)の結合量を反映した色合いになる。この色合いは、吸光光度計による測定から定量化し、(Ａ)が少なければ、(Ｂ)の方が抗体を多く取るので、発色の強さは強くなり、一方、(Ｂ)が多ければ、相対的に(Ｂ)が抗体を取る量が減り、発色の強さは弱くなる。こうした原理を利用して、別途、「既知の濃度の１７βエストラジオール（標準検体）」を複数濃度測定し、検量線を算出しておくことで、発色の色合いから(Ａ)「未知の濃度の１７βエストラジオールを含む唾液検体」の濃度を算出した。
前記酵素免疫測定法で使用した酵素である「西洋ワサビペルオキシダーゼ（horseradish peroxidase）」は、以下のような物性を有する。
ペルオキシダーゼ（Hydrogen peroxidase，Horseradish peroxidase，HRP）
反応 色原性基質＋Ｈ2Ｏ2 ⇔酸化型色素＋２Ｈ2Ｏ
起源 西洋わさび（Horseradish）
分子量， 40,000，至適pH：pＨ６.５
基質特異性 色原性基質（水素供与体）については特異性はない．
過酸化物としてはＨ2Ｏ2, ＣＨ3ＯＯＨ, Ｃ2Ｈ6ＯＯＨのみ
阻害剤と活性化剤 阻害剤：ＣＮ−，Ｓ−−，Ｆ−，Ｎ3−（抗凝固剤として用いられるフッ素イオン、保存料として用いられるNaN3を含有）
安定性 乾燥，冷蔵状態で数年間，水溶液で冷蔵1年間
ペルオキシダーゼ（Hydrogen peroxidase，Horseradish peroxidase，HRP）
反応 色原性基質＋Ｈ2Ｏ2 ⇔酸化型色素＋２Ｈ2Ｏ
起源 西洋わさび（Horseradish）
分子量， 40,000，至適pH：pＨ６.５
基質特異性 色原性基質（水素供与体）については特異性はない．
過酸化物としてはＨ2Ｏ2, ＣＨ3ＯＯＨ, Ｃ2Ｈ6ＯＯＨのみ
阻害剤と活性化剤 阻害剤：ＣＮ−，Ｓ−−，Ｆ−，Ｎ3−（抗凝固剤として用いられるフッ素イオン、保存料として用いられるNaN3を含有）
安定性 乾燥，冷蔵状態で数年間，水溶液で冷蔵1年間
実験は、空気を２ L/minの風量で本実施例の１,８-シネオールを含む溶媒（プロピレングリコール）の入ったガラス瓶に送り、そこから出てきた空気を被験者の鼻から１０cm離したロートから放出させることにより行い、これを２０分間続けた。実験中は、被験者には椅子に座ってリラックスした状態で普段と変わらない呼吸をしてもらい、実験開始前と実験開始２０分後に唾液採取を行った。このとき、何らかの異常を認めた場合、その場で実験を中止し適切な処置を行うこととした。
１．実験結果
[実施例１]
実施例１：１,８-シネオールの１.５％をプロピレングリコールで溶かしたものと、比較例１:コントロールとしてプロピレングリコール(PG)だけのものとを比較実験を行った。
被験者は卵胞期(Follicular Phase)６人、黄体後期(Late Luteal Phase)５人の全体で１１人を対象とし、比較例１と実施例１のぞれぞれの実験結果を示す。
実施例１と比較例１の実験前と実験後の比較結果は、実施例１で分泌される１７βエストラジオール(E2)は３.１pg/mlから３.４pg/mlに濃度が有意に増加した（対応のあるt検定、P＜0.05）のに対して、比較例１は３.０pg/mlから３.０pg/mlで濃度に違いはなかった。
これらの変化量（嗅いだ後―嗅ぐ前）について比較（PG vs １,８-Cineole）すると、コントロールのプロピレングリコール(PG)に比べ、１７βエストラジオールの濃度(E2)が有意に増加した（対応のあるt検定、P＜0.05）。
[実施例１]
実施例１：１,８-シネオールの１.５％をプロピレングリコールで溶かしたものと、比較例１:コントロールとしてプロピレングリコール(PG)だけのものとを比較実験を行った。
被験者は卵胞期(Follicular Phase)６人、黄体後期(Late Luteal Phase)５人の全体で１１人を対象とし、比較例１と実施例１のぞれぞれの実験結果を示す。
実施例１と比較例１の実験前と実験後の比較結果は、実施例１で分泌される１７βエストラジオール(E2)は３.１pg/mlから３.４pg/mlに濃度が有意に増加した（対応のあるt検定、P＜0.05）のに対して、比較例１は３.０pg/mlから３.０pg/mlで濃度に違いはなかった。
これらの変化量（嗅いだ後―嗅ぐ前）について比較（PG vs １,８-Cineole）すると、コントロールのプロピレングリコール(PG)に比べ、１７βエストラジオールの濃度(E2)が有意に増加した（対応のあるt検定、P＜0.05）。
被験者を卵胞期の６人（n=6）を対象とした比較例１と実施例１との実験では、実施例１で分泌される１７βエストラジオールは３.１pg/mlから３.５pg/mlに濃度が有意に増加し（対応のあるt検定、P＜0.05）、比較例１は２.５pg/mlから２.７pg/mlで濃度(E2)は増加傾向を示した（対応のあるt検定、P＜0.10）。これらの変化量（嗅いだ後―嗅ぐ前）について比較（PG vs １,８-Cineole）すると、１,８-シネオール(Cineole)とプロピレングリコール(PG)は濃度に違いはなかった。
被験者を黄体後期の５人（n=5）を対象とした比較例１と実施例１との実験では、実施例１で分泌される１７βエストラジオールは３.１pg/mlから３.３pg/mlに濃度が増加し、比較例１は３.５pg/mlから３.１pg/mlで濃度が低下した（対応のあるt検定、P＜0.10）。これらの変化量（嗅いだ後―嗅ぐ前）について比較（PG vs １,８-Cineole）すると、コントロールのプロピレングリコール(PG)に比べ、１７βエストラジオールの濃度(E2)が有意に増加した（対応のあるt検定、P＜0.05）。
これらの各変化量の差分値（１,８-シネオール(Cineole)変化量−プロピレングリコール(PG)変化量）を図１に示して説明すると、卵胞期（n=6）と黄体後期（n=5）での各変化量の差分値を比較すると、黄体後期は、卵胞期に比べ、濃度(E2)が有意に増加した（対応のないt検定、P＜0.05）ことが判る。
次に、１,８-シネオール(Cineole)をプロピレングリコール(PG)にどの程度の量を溶かせば良いかを検証した。
そのため、上述したように、溶媒のプロピレングリコール(PG)に、実施例１と同じ１.５０％の１,８-シネオールを溶かしたものと、それより少ない０.３０％を溶かしたもの、それより多い、３.７５％と、７.５０％を溶かしたものを、新たに３人ずつの黄体後期の被験者を対象に実験を行った。
その変化量の結果を図２に示して説明すると、１７βエストラジオールの増加は、１,８-シネオール(Cineole)が１.５０％の溶液の割合が有意に増加したことが判り、少なくとも０.３０％から３.７５％では１７βエストラジオールの増加が認められ、逆に、７.５０％では逆効果になることが判る。すなわち、０.３０％〜３.７５％の溶液でエストロジェン分泌増進効果が認められ、１.５０％前後の溶液が好ましいことが判る。
そのため、上述したように、溶媒のプロピレングリコール(PG)に、実施例１と同じ１.５０％の１,８-シネオールを溶かしたものと、それより少ない０.３０％を溶かしたもの、それより多い、３.７５％と、７.５０％を溶かしたものを、新たに３人ずつの黄体後期の被験者を対象に実験を行った。
その変化量の結果を図２に示して説明すると、１７βエストラジオールの増加は、１,８-シネオール(Cineole)が１.５０％の溶液の割合が有意に増加したことが判り、少なくとも０.３０％から３.７５％では１７βエストラジオールの増加が認められ、逆に、７.５０％では逆効果になることが判る。すなわち、０.３０％〜３.７５％の溶液でエストロジェン分泌増進効果が認められ、１.５０％前後の溶液が好ましいことが判る。
次に、１,８-シネオール投与による被験者の「集中力」について検証した。
この「集中力」の検証には、ＰＣ操作による認知課題であるＡＮＴ（attention network task）テストを用いて、1.8-cineoleを嗅いだ前後の集中力の変化をＰＧ(コントロール)の場合と比較を行った。
前述のＡＮＴは、ヒトの注意機能（実行機能、覚醒機能、注意定位機能）を、短時間で効率よく評価するために開発された検証手段である。ＡＮＴは、実験トライアルが開始されると、背景の中央に中心点が1000ms表示される。次に、“＊”が手がかり刺激として表示される。手がかり刺激が呈示された500ms後に、5つの矢印の画像が注視点の上方もしくは下方に呈示される。被験者の課題は、5つの矢印のうち、中央の矢印の向きをテンキーのボタンでできるだけ素早く(RT：リアクションタイム)かつ正確に回答することである。
なお、中央の矢印をターゲット刺激、それ以外の４つの矢印をディストラクター刺激と呼ぶ。実験では、合計４条件の手がかり刺激条件が呈示される。まず、No Cue条件では、手がかり刺激は表示されない。次に、Central Cue条件では、注視点の位置すなわち画面中央に手がかり刺激が呈示される。Congruent Cue条件では、ターゲット刺激が呈示される位置に手がかり刺激が呈示される。すなわち、矢印が注視点の上方に呈示される場合は、手がかり刺激も注視点上方に呈示される。最後に、Incongruent Cue条件では、画面中央を横切る水平線に対して、ターゲット刺激とは対称な位置に手がかり刺激が呈示される。すなわち、ターゲット刺激が注視点の上方に呈示される場合、注視点を挟んでターゲット刺激とは逆の位置に手がかり刺激が呈示される。
この「集中力」の検証には、ＰＣ操作による認知課題であるＡＮＴ（attention network task）テストを用いて、1.8-cineoleを嗅いだ前後の集中力の変化をＰＧ(コントロール)の場合と比較を行った。
前述のＡＮＴは、ヒトの注意機能（実行機能、覚醒機能、注意定位機能）を、短時間で効率よく評価するために開発された検証手段である。ＡＮＴは、実験トライアルが開始されると、背景の中央に中心点が1000ms表示される。次に、“＊”が手がかり刺激として表示される。手がかり刺激が呈示された500ms後に、5つの矢印の画像が注視点の上方もしくは下方に呈示される。被験者の課題は、5つの矢印のうち、中央の矢印の向きをテンキーのボタンでできるだけ素早く(RT：リアクションタイム)かつ正確に回答することである。
なお、中央の矢印をターゲット刺激、それ以外の４つの矢印をディストラクター刺激と呼ぶ。実験では、合計４条件の手がかり刺激条件が呈示される。まず、No Cue条件では、手がかり刺激は表示されない。次に、Central Cue条件では、注視点の位置すなわち画面中央に手がかり刺激が呈示される。Congruent Cue条件では、ターゲット刺激が呈示される位置に手がかり刺激が呈示される。すなわち、矢印が注視点の上方に呈示される場合は、手がかり刺激も注視点上方に呈示される。最後に、Incongruent Cue条件では、画面中央を横切る水平線に対して、ターゲット刺激とは対称な位置に手がかり刺激が呈示される。すなわち、ターゲット刺激が注視点の上方に呈示される場合、注視点を挟んでターゲット刺激とは逆の位置に手がかり刺激が呈示される。
前記の実験によって、５人の黄体後期の被験者を対象に、選択的注意能力(Conflicting Score)、を調べ、その結果を図３に示して説明する。
[選択的注意能力(Conflicting Score)]
Incongruent Flanker条件のRT−Congruent Flanker条件のRTを調べた。これは、選択的注意能力の指標と考えられ、選択的注意能力が高いほど、Conflicting Scoreは小さくなるものと考えられる。
[選択的注意能力(Conflicting Score)]
Incongruent Flanker条件のRT−Congruent Flanker条件のRTを調べた。これは、選択的注意能力の指標と考えられ、選択的注意能力が高いほど、Conflicting Scoreは小さくなるものと考えられる。
これらの実験結果が図３のグラフであるが、本発明の実施例の１,８-シネオール(cineole)を嗅いだ前後で、コントロール（PG）に比べ、Conflicting Scoreが減少した為、選択的注意能力が高まったものと考えられ、これらの結果から集中力の向上に応用可能である。
次に、１,８-シネオール投与による被験者の「性欲」について検証した。この検証は、ＰＣ操作による認知課題であるUnconscious Dot Probe課題を用いて、１,８-シネオール（1.5%）を嗅いだ前後の性欲を反映すると考えられる指標の変化をＰＧ(コントロール)の場合と比較することを、６人の黄体後期の被験者を対象に行った。
Unconscious Dot Probe課題は、ヒトの注意バイアスを評価するために開発された検証手段である。本実施例での実験では、課題に用いる視覚刺激に男性のヌード画像を用い、この画像に対する注意がどれだけ高いか（バイアス）が性欲を反映する指標と考え、測定を行った。ただし、刺激画像の呈示時間は17ms(知覚可能な閾値を下回る)で、閾値下（Uncoscious）でのDot Probe課題による測定を行った。
Unconscious Dot Probe課題は、ヒトの注意バイアスを評価するために開発された検証手段である。本実施例での実験では、課題に用いる視覚刺激に男性のヌード画像を用い、この画像に対する注意がどれだけ高いか（バイアス）が性欲を反映する指標と考え、測定を行った。ただし、刺激画像の呈示時間は17ms(知覚可能な閾値を下回る)で、閾値下（Uncoscious）でのDot Probe課題による測定を行った。
同検証手段の課題では、実験トライアルが開始されると、男性のヌード画像が画面の左右いずれかに呈示される。次に、ヌード画像が呈示された位置（Congruent条件）あるいは呈示されなかった逆の位置（Incongruent条件）のいずれかに、傾いた縞模様が呈示される（呈示された直後、消える）。
被験者の課題は、この傾いた縞模様がどちら向きに傾いていたかをテンキーのボタンでできるだけ素早く(RT(リアクションタイム)かつ正確に回答することである。例えば、男性のヌード画像に注意が向かっている程、縞模様の傾きを見落とすことになる為、正答率は低下することが期待される。そこで、この正答率を指標として、男性ヌード画像へのバイアスの強さを比較した。
これらの実験結果が図４のグラフであるが、本発明の実施例の１,８-シネオールを嗅いだ前後で、男性ヌード画像に対するバイアスが、コントロール（PG）に比べ、高まった。
被験者の課題は、この傾いた縞模様がどちら向きに傾いていたかをテンキーのボタンでできるだけ素早く(RT(リアクションタイム)かつ正確に回答することである。例えば、男性のヌード画像に注意が向かっている程、縞模様の傾きを見落とすことになる為、正答率は低下することが期待される。そこで、この正答率を指標として、男性ヌード画像へのバイアスの強さを比較した。
これらの実験結果が図４のグラフであるが、本発明の実施例の１,８-シネオールを嗅いだ前後で、男性ヌード画像に対するバイアスが、コントロール（PG）に比べ、高まった。
次に、１,８-シネオール投与による感情の増減への影響について、黄体後期の被験者６人を対象にＰＡＮＡＳ（The Positive and Negative Affect Schedule）テストを行った。ＰＡＮＡＳは、「ポジティブ感情」「ネガティブ感情」の２つの尺度から感情の質問項目に答える検査である。
これらの実験結果が図５のグラフであるが、本発明の実施例の１,８-シネオールを嗅いだ前後で、コントロール（PG）に比べ、ポジティブ感情が増加し、ネガティブ感情が低下した。
これらの実験結果が図５のグラフであるが、本発明の実施例の１,８-シネオールを嗅いだ前後で、コントロール（PG）に比べ、ポジティブ感情が増加し、ネガティブ感情が低下した。
次に、１,８-シネオール投与による気分の増減への影響について、黄体後期の被験者６人を対象にＰＯＭＳ（Profile of Mood States）テストにより検証した。ＰＯＭＳとは「活気」「不安」「抑うつ」「怒り」「疲労感」「混乱」の６つの尺度から気分の質問項目に答える検査である。
これらの実験結果が図６のグラフであるが、１,８-シネオール（1.5%）を嗅いだ前後で、本発明の１,８-シネオールの実施例はコントロール（PG）に比べ、肯定的作用としては、活力がやや高まり、不安、抑うつ、疲労感がやや減少した。これらの結果から、「活気」「不安」「抑うつ」「疲労感」の気分の改善に利用可能である。
これらの実験結果が図６のグラフであるが、１,８-シネオール（1.5%）を嗅いだ前後で、本発明の１,８-シネオールの実施例はコントロール（PG）に比べ、肯定的作用としては、活力がやや高まり、不安、抑うつ、疲労感がやや減少した。これらの結果から、「活気」「不安」「抑うつ」「疲労感」の気分の改善に利用可能である。
次に、１,８-シネオール投与による不安の傾向を黄体後期の被験者６人を対象にＳＴＡＩ(State and Trait Anxiety Inventry)テストにより検証した。
ＳＴＡＩとは「状態不安」「特性不安」の2つの尺度から不安の状態及び特性の質問項目に答える検査である。
これらの実験結果の図１４のグラフで説明すると、１,８-シネオールを嗅いだ前後で、コントロール（PG）に比べ、状態不安が減少した。
これらの各テストの結果から判るように、不安感の軽減利用可能である。
ＳＴＡＩとは「状態不安」「特性不安」の2つの尺度から不安の状態及び特性の質問項目に答える検査である。
これらの実験結果の図１４のグラフで説明すると、１,８-シネオールを嗅いだ前後で、コントロール（PG）に比べ、状態不安が減少した。
これらの各テストの結果から判るように、不安感の軽減利用可能である。
以上説明したように、本発明の実施例によれば、合成された１,８-シネオール又は天然物から単離、精製された１,８-シネオールを有効成分として含有するエストロジェン分泌増進用組成物、エストロジェン分泌芳香組成物、及び、エストロジェン芳香用具を女性に対して使用することにより、エストロジェン分泌を増進することができる。この為、エストロジェン分泌低下に伴い生じる、月経前緊張症、月経期の諸症状、マタニティーブルー、産後うつ病、更年期障害といった女性特有の不定愁訴（病気を含む）を緩和する効果、エストロジェン分泌増進、特に黄体後期にはエストロジェン分泌がより増進によるアンチエージング効果が期待できる。
また、副次的効果として、エストロジェン分泌が増進されることにより、集中力、性欲、陽性／陰性感情、気分、不安の症状の改善ができ、それによって（あるいはそれと同時に）、女性の不定愁訴症状の改善、アンチエージングをもたらす効果が期待できる。
また、本発明の組成物は、嗅覚神経を介する方法によって投与できるので、短時間で効果を発揮させることができ、また、血液を介さないので肝臓や腎臓等の臓器に副作用を及ぼさないという利点もある。
また、本発明の組成物は、嗅覚神経を介する方法によって投与できるので、短時間で効果を発揮させることができ、また、血液を介さないので肝臓や腎臓等の臓器に副作用を及ぼさないという利点もある。
Claims (7)
- 合成された１,８-シネオール又は天然物から単離、精製された１,８-シネオールを有効成分として含有するエストロジェン分泌増進用組成物（食品を除く。）。
- 前記エストロジェンは、１７β-エストラジオールであることを特徴とする請求項１に記載のエストロジェン分泌増進用組成物。
- 前記組成物の投与手段が、香料、精油、化粧品による嗅覚神経を介して脳に伝達されるように投与することを特徴とする請求項１又は２に記載のエストロジェン分泌増進用組成物。
- 請求書１〜３のいずれかに記載のエストロジェン分泌増進用組成物を含有することを特徴するエストロジェン分泌増進用芳香組成物。
- 前記エストロジェンは、１７β-エストラジオールであることを特徴とする請求項４に記載のエストロジェン分泌増進用芳香組成物。
- 請求書１〜３のいずれかに記載のエストロジェン分泌増進用組成物を含有することを特徴するエストロジェン分泌増進用芳香用具。
- 前記エストロジェンは、１７β-エストラジオールであることを特徴とする請求項６に記載のエストロジェン分泌増進用芳香用具。
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