JP5894669B2

JP5894669B2 - 血管新生抑制作用を有する新規な化合物、その製造方法およびそれを含む薬学的組成物

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Publication number: JP5894669B2
Application number: JP2014522758A
Authority: JP
Inventors: ハンキム、ジ; ハクキム、ジェ; クワンリ、ジョン; ジュン、ハン−サン; ソクハン、ナム; パク、ヨン; カン、スン−フン; ジンチョン、ヒ; リ、キュン−テ; ウンチェ、ヒェ; ハチ、ヨン; ハンリ、ジュ; ヒペク、ス
Original assignee: Boryung Pharmaceutical Co Ltd
Current assignee: Boryung Pharmaceutical Co Ltd
Priority date: 2011-07-27
Filing date: 2012-07-27
Publication date: 2016-03-30
Anticipated expiration: 2032-07-27
Also published as: RU2015140132A3; BR112014001963A2; RU2014107488A; CN103827089A; RU2015140132A; KR101412794B1; US20140256711A1; WO2013015657A3; EP2754655A4; WO2013015657A2; KR20130013163A; US9227955B2; EP2754655A2; JP2014521640A; MX2014001052A

Description

本発明は、血管新生抑制作用を有する新規な化合物、その製造方法およびそれを含む薬学的組成物に関する。
本発明は、血管内皮細胞増殖因子の活性異常により誘発される疾患または症状を予防または治療するための薬学的組成物に関する。

全世界的に現在まで癌に関する多くの研究がなされてきているにも拘らず、癌自体の多様性および発病機序の多様化により治療が難しいのが現実である。このため、副作用が少なくかつ耐性を克服しうる新規な抗癌剤の開発が引き続き行われたが、未だ必要薬物の開発が不十分であり、効果的な治療剤の開発が求められている。

腫瘍の成長は、これを支え得る新しい血管の生成があってこそ可能である。一般に、腫瘍は、そのサイズが大きくなるにつれて、その中央内部は低酸素状態となり、組織が壊死してしまう。また、腫瘍自体の圧力により血管が破壊され、低酸素状態はさらに悪化する。このような状態を克服するために、腫瘍は新しい血管を生成するためのタンパク質を発現して新血管の形成を促進する。

一方、今まで様々な観点から血管新生(angiogenesisまたはneovascularization)に関する研究が行われてきた結果、ＶＥＧＦ(vascular endothelial growth factor)、ｂＦＧＦ(basic fibroblast growth factor)、ＨＧＦ(hepatocyte growth factor)、ＥＧＦ(epithelial growth factor)、アンジオポエチン(angiopoietin)などの血管新生因子、ＦＧＦＲ(fibroblast growth factor receptor)、Ｆｌｋ−１／ＫＤＲ、Ｆｌｔ−１、Ｆｌｔ−３、Ｔｉｅ−１、Ｔｉｅ−２／Ｔｅｋ、Ｅｐｈなどのチロシンキナーゼ(tyrosine kinase)活性を有する血管新生因子受容体、およびアンジオスタチン(angiostatin)やエンドスタチン(endostatin)などの内因性血管新生阻害剤などが発見され、血管新生の機序だけでなく、血管新生とヒトの疾病との関連性が漸次解明されており、また、血管新生を調節し得る様々な新規方法が提示されている。特に、血管新生因子のうち、ＶＥＧＦは、多くの癌において癌の進行程度や癌の治療率などと密接な相関関係を示しており、その受容体であるＦｌｋ−１／ＫＤＲが血管内皮細胞に非常に特異的に発現されているため、選択的な血管新生阻害剤の開発のための目標として注目されている。

癌と血管新生との関係は、１９７１年に米国のＦｏｌｋｍａｎ博士によって提起された、癌の成長に血管新生が必須的であるという仮説として最初に報告され(J. Folkman, Tumor Angiogenesis: Therapeutic Implications. New England Journal of Medicine , 285, 1182-1186, 1971)、１９９０年に天然物から得たフマギリン(fumagillin)が選択的な血管新生阻害効果を示すことが報告されて以来、血管新生阻害剤が癌の治療剤として注目を浴び始めた(D. Ingber, T. Fujita, et al. Synthetic analogues of fumagillin that inhibit angiogenesis and suppress tumor growth. Nature , 348, 555-557, 1990)。また、最近発見されたアンジオスタチン(M. S. O'Reilly, L. Holmgren, Y. Shing, C. Chen, R. A. Rosenthal, M. Moses, W. S. Lane, Y. Cao, E. H. Sago and J. Forkman., Angiostatin: a novel angiogenesis inhibitor that mediates the suppression of metastases by a Lewis Lung Carcinoma, Cell , 79, 315-328, 1994)、エンドスタチン(M. S. O'Reilly, T. Boehm, C. Chen, et al ., Endostatin: an endogeneous inhibitor of angiogenesis and tumor growth. Cell , 88, 277-285, 1997)などの内因性血管新生阻害剤が実験動物モデルで抗癌剤としての優れた効能を持つことが立証され、血管新生阻害剤の抗癌剤としての利用にさらに多くの関心が集中している。

しかも、血管新生阻害剤を抗癌剤として用いる場合、既存の抗癌剤より優れた利点があるが、血管新生が癌の成長または転移に必須的な現象であるので、癌の成長および転移を同時に遮断することができ、血管新生阻害剤は、異数性(aneuploid)の癌細胞ではなく、正常２倍体(diploid)の血管内皮細胞を標的とするため、癌細胞の異種性および遺伝的不安定性による耐性などの問題が起こらない。また、血管新生阻害剤は、特定または幾種類かの癌にのみ効能を示す既存の抗癌剤とは異なり、血管新生が必須不可欠な全種類の癌に効能を示す。血管新生が、正常成人にとっては幾つかの特別な場合、すなわち傷の治癒、女性の生理等を除いては極めて稀に発生する現象として知られているので、血管新生阻害剤を抗癌剤として用いる場合、既存の抗癌剤で見られる副作用が大幅に減少するであろう。

また、血管新生は、癌の成長および転移(metastasis)だけでなく、リウマチ (Rheumatoid arthritis)［クォンホジョン、大韓内分泌学会誌、第１６巻第３号、２００１］、糖尿病性網膜症(diabetic retinopathy)[クァクノフン、大韓内分泌学会誌、第１６巻第３号、２００１］、角膜炎症、充血、黄斑変性症、脈絡膜血管新生症、血管新生緑内障[YS Kwon, HS Hong, JC Kim, JS Shin, YS Son. Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. February 2005 vol. 46 no. 2 454-460]、角膜血管新生［キムゼホ、リザヨン、ジョンソングン、ジュチョンギ、大韓眼科学会誌、第４０巻第３号、６６２-６６６］などの眼球疾患、乾癬(psoriasis)[D. Creamer, D. Sullivan, R. Bicknell and J. Barker. Angiogenesis Volume 5, Number 4, 231-236]、肺の気道(airway)を塞いで生命に脅威を与える血管腫(hemangiomas)[Birgit M. Kraling et al. American Journal of Pathology, Vol. 148, No. 4, April 1996]、肥満などのいわゆる血管新生疾患(angiogenic disease)を誘発させることが知られているため、血管新生阻害剤は、癌以外にも、他の種類の血管新生疾患を治療または予防するのに有用であることが期待される。

Angiogenesis in cancer, vascular, rheumatoid and other disease. Folkman J. Nat Med. 1995 1(1) 27-31. Review General mechanisms of metastasis. Woodhouse E.C., Chuaqui R.F., Liotta L.A.. Cancer. 1997, Vol 80 (8 Suppl) 1529-1537. Review Anti-invasive and anti-angiogenic activities of naturally occurring dibenzodiazepine BU-4664L and its derivatives. Miyanaga S., Sakurai H., Saiki I., Onaka H., Igarashi Y. Bioorg. Med. Chem. Lett. 2010 20 (3) 963-965 Tumor Angiogenesis: Therapeutic Implications. J. Folkman. New England Journal of Medicine , 285, 1182-1186, 1971 Synthetic analogues of fumagillin that inhibit angiogenesis and suppress tumor growth. D. Ingber, T. Fujita, et al. Nature , 348, 555-557, 1990 Angiostatin: a novel angiogenesis inhibitor that mediates the suppression of metastases by a Lewis Lung Carcinoma. M. S. O'Reilly, L. Holmgren, Y. Shing, C. Chen, R. A. Rosenthal, M. Moses, W. S. Lane, Y. Cao, E. H. Sago and J. Forkman. Cell , 79, 315-328, 1994 Endostatin: an endogeneous inhibitor of angiogenesis and tumor growth. M. S. O'Reilly, T. Boehm, C. Chen, et al . Cell , 88, 277-285, 1997 血管新生調節低分子化合物、大韓内分泌学会誌、クォンホジョン、第１６巻第３号、２００１糖尿性網膜病症における血管新生研究、大韓内分泌学会誌、クァクノフン、第１６巻第３号、２００１ Inhibitory Effect of Rapamycin on Corneal Neovascularization In Vitro and In Vivo. YS Kwon, HS Hong, JC Kim, JS Shin, YS Son. Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. February 2005 vol. 46 no. 2 454-460 Angiogenesis in psoriasis. D. Creamer, D. Sullivan, R. Bicknell and J. Barker. Angiogenesis Volume 5, Number 4, 2002 , pp. 231-236(6) E-Selectin Is Present in Proliferating Endothelial Cells in Human Hemangiomas. Birgit M. Kraling et al. American Journal of Pathology, Vol. 148, No. 4, April 1996

本発明の目的は、血管新生抑制活性を有する新規な化合物、その製造方法およびそれを含む薬学的組成物を提供することにある。

本発明は、下記化学式の化合物、またはその薬学的に許容される塩を提供する：

式中、Ｘ_１およびＸ_２はそれぞれ独立してハロゲン（Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ）または水素であり、
Ｙは−ＮＨ−、−Ｓ−または−Ｏ−であり、
Ｒ_１はベンジル、フェニルオキシ、１，１−ピリミジンエチル、ピリジンメチル、Ｃ_１−４アルキル、Ｃ_３−６アルケン、ｔ−ブトキシカルボニルおよびマロン−２−イルの中から選ばれる１〜５個で置換されたピペリジニル、ピペラジニル、アザビシクロ［２．２．２］オクタニルまたはフェニルであり、
ここで、Ｃ_１−４アルキルはＲ_３Ｒ_４Ｎ−、ヒドロキシ基およびハロゲンの中から選ばれる０〜３個で置換されたものであり、Ｒ_３およびＲ_４はそれぞれ独立してＣ_１−４アルキルであり、
ここで、ベンジル、フェニルオキシ、ピリミジンエチルおよびピリミジンメチルはハロゲンで０〜４個置換されたものであり、
Ｒ_２はハロゲンで０〜３個置換されたベンジルによって０〜３個置換されたモルホリニル、ハロゲンによって０〜３個置換されたフェニル、ピリジニル、ピリミジニル、ピペリジニルおよびピペラジニルの中から選ばれる１または２個で置換されたＣ_１−４アルキル；Ｃ_５−１０アルキル；Ｃ_１−４アルキルオキシカルボニルアミノ；Ｃ_１−４アルコキシＣ_１−４アルキル；トルエンスルホンアミノ；Ｃ_１−４アルキル、ハロゲン、ニトロおよびフェノキシの中から選ばれる０〜３個で置換されたフェニル；Ｃ_１−４アルキルオキシカルボニルおよびＣ_１−４アルキルの中から選ばれる０〜３個で置換されたピリジニル；アゼパン−２−オンイル；１，３，４−トリアゾリル；Ｃ_１−４アルキルによって０〜３個置換されたピリミジニル；ピロリジニル；Ｃ_１−４アルキルによって０〜２個置換されたチアゾリル；Ｃ_１−４アルキルによって０〜３個置換された２，３−ジヒドロキシインドル；

であり、
ここで、Ｒ_５およびＲ_６は独立してＣ_１−４アルキル、Ｃ_１−４アルキルスルファニルまたはチオールであり、
Ｒ_７およびＲ_８は独立してＣ_１−４アルキルオキシカルボニル基、フェニルまたはベンジルである。
また、前記Ｒ_１は、好ましくは、１−ベンジルピペリジン−４−イル；１−ベンジルピペリジン−３−イル；４−フェノキシフェニル；１−（２−ヒドロキシエチル）−ピペリジン−４−イル；１−（２−ヒドロキシエチル）−ピペリジン−３−イル；１−（２−ヒドロキシエチル）−ピペラジ−４−イル；２，２，６，６−テトラメチルピペリジン−４−イル；ｔ−ブトキシカルボニルピペリジン−４−イル；ｔ−ブトキシカルボニルピペリジン−３−イル；１−アザビシクロ［２．２．２］オクト−３−イル；メチルピペリジン−４−イル；メチルピペラジン−４−イル；ピペリジン−４−イル；ピペリジン−３−イル；１−（２−ヒドロキシエチル）−２，２，６，６−テトラメチルピペリジン−４−イル；１−アリールピペリジン−４−イル；［２−（Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノ）エチル］ピペリジン−４−イル；（ｔ−ブチルオキシカルボニル）ピペリジン−３−イル；（マロン−２−イル）ピペリジン−４−イル；（ピリジン−２−イル）メチルピペリジン−４−イル；（ピリジン−３−イル）メチルピペリジン−４−イル；または１−（６−クロロ−５−フルオロピリミジン−４−イル）エチルピペリジン−４−イルである。前記Ｒ_１は、より好ましくは、１−ベンジルピペリジン−４−イル；１−ベンジルピペリジン−３−イル；１−（２−ヒドロキシエチル）−ピペリジン−４−イル；ピペリジン−３−イル；またはｔ−ブトキシカルボニルピペリジン−３−イルである。
また、前記Ｒ_２は、好ましくは、３−クロロフェニル；４−フェノキシフェニル；３，３−ジメチル−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−６−イル；４−（４−フルオロベンジル）−モルホリン−２−イルメチル；１，３，４−トリアゾール−２−イル；４，６−ジメチルピリミジン−２−イル；（Ｓ）−ピロリジン−３−イル；２−（モルホリン−１−イル）エチル；ｔ−ブトキシカルボニルアミノ；（３−メトキシカルボニル）ピリジン−６−イル；ｐ−トルエンスルホンアミノ；ピリジン−４−イルメチル；１，２−ジフェニルエチル；２−メトキシエチル；５−メチルチアゾール−２−イル；３−メチルピリジン−２−イル；アゼパン−２−オン−３−イル；４−フルオロベンジル；２−エチルヘキシル；３−メチル−２−メチルスルファニル−３，４−ジヒドロキナゾリン−４−オン−６−イル；（３，４−ジメトキシ）フェニル；

である。より好ましくは、Ｒ_２は３−クロロフェニル；４−フェノキシフェニル；５−メチルチアゾール−２−イル；または

である。

本発明で言及する「化学式Ｉの化合物」は、特別な言及がない限り、そのラセミ体、その光学異性体、その溶媒和物（水和物を含む）、結晶形、無定形などを全て含む意味である。

前記化学式Ｉの化合物またはその薬学的に許容される塩の代表化合物は、次のとおりである：

２−（１−ベンジルピペリジン−４−イルアミノ）−Ｎ−（３−クロロフェニル）ニコチンアミド［１０３］、
Ｎ−（３−クロロフェニル）−２−（４−フェノキシアニリノ）ニコチンアミド［１０４］、
２−（１−ベンジルピペリジン−４−イルアミノ）−Ｎ−（４−フェノキシフェニル）ニコチンアミド［１１０］、
２−（４−フェノキシアニリノ）−Ｎ−（４−フェノキシフェニル）ニコチンアミド［１１１］、
Ｎ−（３−クロロフェニル）−２−（２，２，６，６−テトラメチルピペリジン−４−イルアミノ）ニコチンアミド［２０１］、
Ｎ−（３−クロロフェニル）−２−（１−ｔ−ブトキシカルバモイルピペリジン−４−イルアミノ）ニコチンアミド［２０８］、
２−（１−アザビシクロ［２．２．２］オクト−３−イルアミノ）−Ｎ−（３−クロロフェニル）ニコチンアミド［２１０］、
Ｎ−（３−クロロフェニル）−２−（１−メチルピペリジン−４−イルアミノ）ニコチンアミド［２１４］、
Ｎ−（３−クロロフェニル）−２−［１−（２−ヒドロキシエチル）ピペリジン−４−イルアミノ］ニコチンアミド［２１８］、
Ｎ−（３−クロロフェニル）−２−（４−メチルピペラジン−１−イルアミノ）ニコチンアミド［２４０］、
Ｎ−（３−クロロフェニル）−２−［４−（２−ヒドロキシエチル）ピペラジン−１−イルアミノ）ニコチンアミド［２４１］、
（Ｒ）−２−（１−ベンジルピペリジン−３−イルアミノ）−Ｎ−（３−クロロフェニル）ニコチンアミド［２６７］、
（Ｓ）−２−（１−ベンジルピペリジン−３−イルアミノ）−Ｎ−（３−クロロフェニル）ニコチンアミド［２７３］、
（Ｒ）−Ｎ−（３−クロロフェニル）−２−（１−ｔ−ブトキシカルバモイルピペリジン−３−イルアミノ）ニコチンアミド［２７０］、
（Ｓ）−Ｎ−（３−クロロフェニル）−２−（１−ｔ−ブトキシカルバモイルピペリジン−３−イルアミノ）ニコチンアミド［２７６］、
２−（１−ベンジルピペリジン−４−イルアミノ）−６−クロロ−Ｎ−（３−クロロフェニル）ニコチンアミド［３０１］、
２−（１−ベンジルピペリジン−４−イルアミノ）−６−クロロ−Ｎ−（３−クロロフェニル）−５−フルオロニコチンアミド［３０２］、
６−クロロ−Ｎ−（３−クロロフェニル）−２−［１−（２−ヒドロキシエチル）ベンジルピペリジン−４−イルアミノ］ニコチンアミド［３１１］、
６−クロロ−Ｎ−（３−クロロフェニル）−５−フルオロ−２−［１−（２−ヒドロキシエチル）ピペリジン−４−イルアミノ］ニコチンアミド［３１２］、
２−（１−ベンジルピペリジン−４−イルアミノ）−Ｎ−（３，３−ジメチル−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−６−イル）ニコチンアミド［１１７］、
Ｎ−（３，３−ジメチル−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−６−イル）−２−（４−フェノキシアニリノ）ニコチンアミド［１１８］、
Ｎ−（３−クロロフェニル）−２−（４−ピペリジルアミノ）ニコチンアミド［２２４］、
（Ｒ）−Ｎ−（３−クロロフェニル）−２−（３−ピペリジルアミノ）ニコチンアミド［２６９］、
（Ｓ）−Ｎ−（３−クロロフェニル）−２−（３−ピペリジルアミノ）ニコチンアミド［２７５］、
Ｎ−（３−クロロフェニル）−２−（１−（２−ヒドロキシエチル）−２，２，６，６−テトラメチルピペリジン−４−イルアミノ）ニコチンアミド［２４２］、
２−（１−アリールピペリジン−４−イルアミノ）−Ｎ−（３−クロロフェニル）ニコチンアミド［２４３］、
Ｎ−（３−クロロフェニル）−２−［１−（２−Ｎ，Ｎ−ジエチルアミノ−エチル）ピペリジン−４−イルアミノ］ニコチンアミド［２４４］、
Ｎ−（３−クロロフェニル）−２−［１−（ピリジン−２−イルメチル）ピペリジン−４−イルアミノ］ニコチンアミド［２４８］、
Ｎ−（３−クロロフェニル）−２−［１−（ピリジン−３−イルメチル）ピペリジン−４−イルアミノ］ニコチンアミド［２４９］、
２−｛１−［１−（６−クロロ−５−フルオロピリミジン−２−イル）エチル］ピペリジン−４−イルアミノ｝−Ｎ−（３−クロロフェニル）ニコチンアミド［２５０］、
（Ｒ）−Ｎ−（３−クロロフェニル）−２−［１−（２−ヒドロキシエチル）ピペリジン−３−イルアミノ］ニコチンアミド［２６８］、
（Ｓ）−Ｎ−（３−クロロフェニル）−２−［１−（２−ヒドロキシエチル）ピペリジン−３−イルアミノ］ニコチンアミド［２７４］、
２−｛４−［３−（３−クロロフェニルカルバモイル）ピリジン−２−イルアミノ］ピペリジン−１−イル｝マロン酸［２４６］、
２−（１−ベンジルピペリジン−４−イルオキシ）−Ｎ−（３−クロロフェニル）ニコチンアミド［２８９］、
２−（１−ベンジルピペリジン−４−イルスルファニル）−Ｎ−（３−クロロフェニル）ニコチンアミド［２９０］、
２−（１−ベンジルピペリジン−４−イルアミノ）−Ｎ−［４−（４−フルオロベンジル）モルホリン−２−イルメチル］ニコチンアミド［４０４］、
２−（１−ベンジルピペリジン−４−イルアミノ）−Ｎ−（１，３，４−トリアゾール−２−イル）ニコチンアミド［４０６］、
２−（１−ベンジルピペリジン−４−イルアミノ）−Ｎ−（４，６−ジメチルピリミジン−２−イル）ニコチンアミド［４０７］、
２−（１−ベンジルピペリジン−４−イルアミノ）−Ｎ−（Ｓ）−ピロリジン−３−イルニコチンアミド［４０８］、
２−（１−ベンジルピペリジン−４−イルアミノ）−Ｎ−２−（モルホリン−１−イル）エチルニコチンアミド［４０９］、
Ｎ’−［２−（１−ベンジルピペリジン−４−イルアミノ）ピリジン−３−カルボニル］ヒドラジンカルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル［４１０］、
メチル６−｛［２−（１−ベンジルピペリジン−４−イルアミノ）ピリジン−３−カルボニル］アミノ｝ニコチネート［４１２］、
２−（１−ベンジルピペリジン−４−イルアミノ）−Ｎ−（ｐ−トルエンスルホンアミノ）ニコチンアミド［４２４］、
２−（１−ベンジルピペリジン−４−イルアミノ）−Ｎ−（ピリジン−４−イルメチル）ニコチンアミド［４２５］、
２−（１−ベンジルピペリジン−４−イルアミノ）−Ｎ−（１，２−ジフェニルエチル）ニコチンアミド［４２６］、
２−（１−ベンジルピペリジン−４−イルアミノ）−Ｎ−（２−メトキシエチル）ニコチンアミド［４２７］、
２−（１−ベンジルピペリジン−４−イルアミノ）−Ｎ−（５−メチルチアゾール−２−イル）ニコチンアミド［４２８］、
２−（１−ベンジルピペリジン−４−イルアミノ）−Ｎ−（３−メチルピリジン−２−イル）ニコチンアミド［４２９］、
２−（１−ベンジルピペリジン−４−イルアミノ）−Ｎ−（アゼパン−２−オン−３−イル）ニコチンアミド［４３０］、
２−（１−ベンジルピペリジン−４−イルアミノ）−Ｎ−（４−フルオロベンジル）ニコチンアミド［４３１］、
２−（１−ベンジルピペリジン−４−イルアミノ）−Ｎ−（２−エチルヘキシル）ニコチンアミド［４３６］、
２−（１−ベンジルピペリジン−４−イルアミノ）−Ｎ−（３−メチル−２−メチルスルファニル−３，４−ジヒドロキナゾリン−４−オン−６−イル）ニコチンアミド［４３９］、
６−ベンジル−２−｛［２−（１−ベンジルピペリジン−４−イルアミノ）ピリジン−３−カルボニル］アミノ｝−４，５，６，７−テトラヒドロ−チエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３−カルボン酸メチルエステル［４４０］、
６−エトキシカルバメート−２−｛［２−（１−ベンジルピペリジン−４−イルアミノ）ピリジン−３−カルボニル］アミノ｝−４，５，６，７−テトラヒドロ−チエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３−カルボン酸メチルエステル［４４１］、
２−｛［２−（１−ベンジルピペリジン−４−イルアミノ）ピリジン−３−カルボニル］アミノ｝−４，５，６，７−テトラヒドロ−チエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３−カルボン酸メチルエステル［４４２］、
２−（１−ベンジルピペリジン−４−イルアミノ）−Ｎ−（３，４−ジメトキシフェニル）ニコチンアミド［４４３］、
２−｛［２−（１−ベンジルピペリジン−４−イルアミノ）−６−クロロピリジン−３−カルボニル］アミノ｝−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３−カルボン酸メチルエステル［５０１］、
２−｛［２−（１−ベンジルピペリジン−４−イルアミノ）−６−クロロピリジン−３−カルボニル］アミノ｝−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３−カルボン酸メチルエステル［５０２］、
２−｛［２−（１−（２−ヒドロキシエチル）ピペリジン−４−イルアミノ）ピリジン−３−カルボニル］アミノ｝−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３−カルボン酸メチルエステル［５０３］、
２−｛［６−クロロ−２−（１−（２−ヒドロキシエチル）ピペリジン−４−イルアミノ）ピリジン−３−カルボニル］アミノ｝−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３−カルボン酸メチルエステル［５０４］、
２−｛［６−クロロ−５−フルオロ−２−（１−（２−ヒドロキシエチル）ピペリジン−４−イルアミノ）ピリジン−３−カルボニル］アミノ｝−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３−カルボン酸メチルエステル［５０５］、
２−｛［２−（２，２，６，６−テトラメチルピペリジン−４−イルアミノ）ピリジン−３−カルボニル］アミノ｝−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３−カルボン酸メチルエステル［５０６］、
２−｛［２−（２，２，６，６−テトラメチルピペリジン−４−イルアミノ）６−クロロピリジン−３−カルボニル］アミノ｝−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３−カルボン酸メチルエステル［５０７］、
２−｛［６−クロロ−５−フルオロ−２−（２，２，６，６−テトラメチルピペリジン−４−イルアミノ）ピリジン−３−カルボニル］アミノ｝−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３−カルボン酸メチルエステル［５０８］、
２−｛［２−（１−ベンジルピペリジン−３−イルアミノ）ピリジン−３−カルボニル］アミノ｝−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３−カルボン酸メチルエステル［５０９］、
２−｛［２−（１−ベンジルピペリジン−３−イルアミノ）−６−クロロピリジン−３−カルボニル］アミノ｝−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３−カルボン酸メチルエステル［５１０］、
２−｛［２−（１−ベンジルピペリジン−３−イルアミノ）−６−クロロ−５−フルオロピリジン−３−カルボニル］アミノ｝−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３−カルボン酸メチルエステル［５１１］、
６−クロロ−Ｎ−（２−エチルヘキシル）−２−［１−（２−ヒドロキシエチル）ピペリジン−４−イルアミノ］ニコチンアミド［５１５］、
Ｎ−（２−エチルヘキシル）−２−（２，２，６，６−テトラメチルピペリジン−４−イルアミノ）ニコチンアミド［５１７］、
６−クロロ−Ｎ−（２−エチルヘキシル）−５−フルオロ−２−（２，２，６，６−テトラメチルピペリジン−４−イルアミノ）ニコチンアミド［５１９］、
２−（１−ベンジルピペリジン−３−イルアミノ）−Ｎ−（２−エチルヘキシル）ニコチンアミド［５２０］、
２−（１−ベンジルピペリジン−３−イルアミノ）−６−クロロ−Ｎ−（２−エチルへキシル）−５−フルオロニコチンアミド［５２２］、およびこれらの薬学的に許容される塩。

化学式Ｉの代表化合物の構造式は、次のとおりである。

本発明の化学式Ｉの化合物またはその薬学的に許容される塩のうち、より好ましい化合物は、次のとおりである：

２−（１−ベンジルピペリジン−４−イルアミノ）−Ｎ−（３−クロロフェニル）ニコチンアミド［１０３］、
２−（１−ベンジルピペリジン−４−イルアミノ）−Ｎ−（４−フェノキシフェニル）ニコチンアミド［１１０］、
Ｎ−（３−クロロフェニル）−２−［１−（２−ヒドロキシエチル）ピペリジン−４−イルアミノ］ニコチンアミド［２１８］、
（Ｓ）−２−（１−ベンジルピペリジン−３−イルアミノ）−Ｎ−（３−クロロフェニル）ニコチンアミド［２７３］、
（Ｓ）−Ｎ−（３−クロロフェニル）−２−（１−ｔ−ブトキシカルバモイルピペリジン−３−イルアミノ）ニコチンアミド［２７６］、
６−クロロ−Ｎ−（３−クロロフェニル）−５−フルオロ−２−［１−（２−ヒドロキシエチル）ピペリジン−４−イルアミノ］ニコチンアミド［３１２］、
（Ｓ）−Ｎ−（３−クロロフェニル）−２−（３−ピペリジルアミノ）ニコチンアミド［２７５］、
２−（１−ベンジルピペリジン−４−イルスルファニル）−Ｎ−（３−クロロフェニル）ニコチンアミド［２９０］、
２−（１−ベンジルピペリジン−４−イルアミノ）−Ｎ−（５−メチルチアゾール−２−イル）ニコチンアミド［４２８］、
２−｛［２−（１−ベンジルピペリジン−４−イルアミノ）ピリジン−３−カルボニル］アミノ｝−４，５，６，７−テトラヒドロ−チエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３−カルボン酸メチルエステル［４４２］、
２−｛［２−（１−ベンジルピペリジン−３−イルアミノ）ピリジン−３−カルボニル］アミノ｝−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３−カルボン酸メチルエステル［５０９］、およびこれらの薬学的に許容される塩。

本発明の化学式Ｉの化合物のうち、２−（１−ベンジルピペリジン−４−イルアミノ）−Ｎ−（３−クロロフェニル）ニコチンアミド［１０３］またはその薬学的に許容される塩がさらにより好ましい。

本発明において、薬学的に許容される塩は、通常、薬製造業者が医薬品を製造するのに使用する無機酸および有機酸塩を意味し、無機酸としては塩酸、臭酸、硫酸、リン酸などを使用することができ、有機酸としてはクエン酸、酢酸、乳酸、スズ酸、フマル酸、ギ酸、プロピオン酸、シュウ酸、トリフルオロ酢酸、メタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、マレイン酸、安息香酸、グルコン酸、グリコール酸、コハク酸、４−モルホリンエタンスルホン酸、カンファースルホン酸、４−ニトロベンゼンスルホン酸、ヒドロキシ−Ｏ−スルホン酸、４−トルエンスルホン酸、ガラクツロン酸、エンボン酸、グルタミン酸、アスパラギン酸などを使用することができる。

また、本発明は、下記化学式ＩＩの化合物と下記化学式ＩＩＩの化合物を塩基の存在下に反応させる段階を含む、化学式Ｉの化合物の製造方法を提供する（以下、「製造方法１」という）：

式中、Ｘ_１、Ｘ_２、Ｒ_１およびＲ_２は前述の定義と同じであり、
Ｚはクロロまたはブロモである。

本発明の製造方法１の化学式ＩＩの化合物および［化学式ＩＩＩ］の化合物は、商業的に市販されるものを使用することができ、或いは公知の方法によって製造して使用することができる。例えば、化学式ＩＩの場合は文献等（Organic Synthesis Collective Volume 1,(1941) 12 [F. K. Thayer], Organic Synthesis Collective Volume 1, 147 (1941)[B. Helferich and W. Schaefer], Organic Synthesis Collective Volume 2, 292 (1943)[John R. Ruhoff]）に記載された方法で製造することができ、化学式ＩＩＩの場合は文献等（Journal of medicinal chemistry, vol 22, 1171 (1979)[E. W. Byrnes and et. al], Journal of the Chemical Society. Perkin Transactions 1. 1984, 229 [Lars J. S. Knutsen and et. al.]）に記載された方法によって製造することができる。

本発明の製造方法１において、前記塩基は、一般に当業者に知られている多様な有機塩基を適切に選択して使用することができ、例えば、この反応で使用される有機塩としてはトリエチルアミン、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン、Ｎ−メチルモルホリン、ＤＢＵ(1,8-Diazabicyclo[5.4.0]undec-7-ene)、Ｎ−メチルピペリジン、４−ジメチルアミノピリジン、Ｎ，Ｎ−ジメチルアニリン、２，６−ルチジン、４−Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノピリジンおよびピリジンの中から選ばれる１種以上の一般的な３級有機塩基を使用することが好ましい。本発明の製造方法１において、前記塩基の使用モル量：化学式ＩＩの化合物の使用モル量＝１〜５：１とすることができ、好ましくは３：１である。

本発明の製造方法１において、反応溶媒は、一般に、当業者がアミド結合反応をさせるときに用いる有機溶媒を使用することができ、例えば、アセトニトリル、クロロホルム、塩化メチレン、テトラヒドロフラン、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、Ｎ−メチルピロリジノンの中から選ばれる単一溶媒または混合溶媒を使用することが好ましい。

本発明の製造方法１において、反応温度は多様な温度にすることができるが、−１０〜室温（３０℃）が好ましく、０〜１０℃で塩基を添加し、室温または常温で反応させることがさらにより好ましい。ところが、反応温度は使用した塩基の種類、反応溶媒、これらの使用量などによって異なる。

また、本発明は、下記化学式ＩＶの化合物と下記化学式Ｖの化合物を塩基の存在下に反応させる段階を含む、化学式Ｉの化合物の製造方法を提供する（以下、「製造方法２」という）：

式中、
Ｘ_１、Ｘ_２、Ｒ_１およびＲ_２は前述の定義と同じであり、Ｙは−ＮＨ_２、−ＳＨまたは−ＯＨである。

本発明の製造方法２において、前記塩基は、当業者が一般に使用可能な無機塩基、または常温で固体状として存在する有機塩基であって、炭酸カリウム、炭酸水素カリウム、炭酸ナトリウム、炭酸水素ナトリウム、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化カルシウム、水酸化バリウム、ナトリウムメトキシド、ナトリウムエトキシド、ナトリウム−ｔ−ブトキシド、カリウム−ｔ−ブトキシド、水素化ナトリウム、水素化カリウム、水素化ホウ素ナトリウム、シアノ水素化ホウ素ナトリウム、４−Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノピリジンなどから選ばれるものが好ましい。

本発明の製造方法２において、前記塩基の使用モル量：化学式ＩＶのモル量は様々に１〜２：１が好ましく、１．２〜１．５：１がより好ましい。

本発明の製造方法２において、反応溶媒は、当業者が１００℃以上の温度で還流可能な有機溶媒であって、キシレン、トルエン、ＤＭＦ、ＤＭＳＯ、ジオキサン、ルチジン、ピリジン、およびＮ，Ｎ−ジメチルアニリンなどから選ばれる単一溶媒または混合溶媒を使用することが好ましい。ここで、キシレンはオルト−キシレン(ortho-xylene)、メタ−キシレン(meta-xylene)、パラ−キシレン(para-xylene)の全てを意味し、ルチジンは２，３−ルチジン、２，４−ルチジン、２，５−ルチジン、２，６−ルチジン、３，４−ルチジン、３，５−ルチジンの全てを意味する。より好ましくはオルト−キシレン(o-xylene)である。

本発明の製造方法２において、反応は、室温〜還流温度範囲の様々な反応温度で行うことができるが、好ましくは反応溶媒の還流温度で行う。

また、本発明は、本発明の化学式Ｉの化合物またはその薬学的に許容される塩を有効成分として含む、血管内皮細胞増殖因子（ＶＥＧＦ）の活性異常により誘発される疾患または症状の予防または治療用薬学的組成物を提供する。ここで、薬学的に許容される塩は、前述したとおりである。

また、本発明は、本発明の化学式Ｉの化合物またはその薬学的に許容される塩の有効量を、血管内皮細胞増殖因子（ＶＥＧＦ）の活性異常により誘発される疾患または症状の予防または治療を要するヒトを含む哺乳類に投与することにより、血管内皮細胞増殖因子の活性異常により誘発された疾患または症状を予防または治療する方法を提供する。

本発明において、前記血管内皮細胞増殖因子の活性異常により誘発される疾患または症状は、癌、リウマチ(Rheumatoid arthritis)、糖尿病性網膜症(diabetic retinopathy)、角膜炎症、充血、黄斑変性症、脈絡血管新生症、血管新生緑内障、角膜血管新生の眼球疾患、乾癬、肺の気道を塞ぐ血管腫(hemangiomas)、血管増殖による肥満などがある。
本発明において、前記血管内皮細胞増殖因子の活性異常により誘発される疾患または症状は、癌であることが好ましい。

また、本発明は、本発明の化学式Ｉの化合物またはその薬学的に許容される塩を含む血管新生抑制用薬学的組成物を提供する。本発明において、前記血管新生抑制用薬学的組成物は抗癌剤であることが好ましい。

また、本発明の薬学的組成物は、化学式Ｉの化合物またはその薬学的に許容される塩に追加して同一または類似の機能を示す有効成分を１種以上含有することができる。

本発明の組成物は、投与のために、前述した成分以外に、さらに薬学的に許容される担体を少なくとも１種含ませて製造することができる。薬学的に許容される担体としては、食塩水、滅菌水、リンガー液、緩衝食塩水、デキストロース溶液、マルトデキストリン溶液、グリセロール、エタノールおよびこれらの成分の少なくとも１成分を混合して使用することができ、必要に応じて抗酸化剤、緩衝液、静菌剤などの他の通常の添加剤を加えることができる。また、希釈剤、分散剤、界面活性剤、結合剤および潤滑剤をさらに添加して、水溶液、懸濁液、乳濁液等の注射用剤形、丸薬、カプセル、顆粒または錠剤に製剤化することができる。さらに、当分野の適正な方法、またはＲｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＳｃｉｅｎｃｅ（最近版）、ＭａｃｋＰｕｂｌｉｓｈｉｎｇＣｏｍｐａｎｙ、ＥａｓｔｏｎＰＡに開示されている方法を用いて、各疾患に応じてまたは成分に応じて好ましく製剤化することができる。

本発明の組成物は、目的の方法に応じて経口投与または非経口投与（例えば、静脈内、皮下、腹腔内または局所に適用）することができ、投与量は患者の体重、年齢、性別、健康状態、食餌、投与時間、投与方法、排泄率および疾患の重症度などによってその範囲が様々である。本発明の化学式Ｉの化合物またはこれらの薬学的に許容される塩の１日投与量は約５-７５ｍｇであり、好ましくは５-５０ｍｇであり、１日１回投与することがさらに好ましい。

本発明の組成物は、血管内皮細胞増殖因子の活性異常により誘発される疾患または症状の予防または治療のために単独で、または手術、ホルモン治療、薬物治療および生物学的反応調節剤を用いる方法と併用して使用することができる。

本発明は、前記化学式Ｉの化合物、前記列挙された化合物またはこれらの薬学的に許容される塩を、哺乳類を含む対象体に投与し、血管内皮細胞増殖因子の活性異常により誘発される疾患または症状を予防または治療する方法を提供する。

本発明は、前記化学式Ｉの化合物、前記列挙された化合物またはこれらの薬学的に許容される塩を、哺乳類を含む対象体に投与し、癌、リウマチ(Rheumatoid arthritis)、糖尿病性網膜症(diabetic retinopathy)、角膜炎症、充血、黄斑変性症、脈絡膜血管新生症、血管新生緑内障、角膜血管新生による眼球疾患、乾癬、肺の気道を塞ぐ血管腫(hemangiomas)、または血管増殖による肥満(angiogenic disease)を予防または治療する方法を提供する。

本発明の化合物は、血管内皮細胞増殖の活性を抑制するので、血管内皮細胞増殖因子の活性異常により誘発される疾患または症状の予防および治療に使用でき、血管新生抑制剤として使用できる。

実験例２−２の結果の写真である。実験例２−２の結果の写真である。実験例４の結果の写真である。実験例４の結果の写真である。実験例５の結果の写真である。実験例５の結果の写真である。実験例６の結果の写真である。実験例６の結果の写真である。実験例７の結果の写真である。

以下、本発明の理解を助けるために好適な製造例および実施例を提示する。ところが、下記の製造例および実施例は、本発明をより容易に理解するために提供されるものに過ぎず、本発明の内容を限定するものではない。

また、以下で言及された試薬および溶媒は、特別な言及がない限り、Ａｌｄｒｉｃｈ社、ＴＣＩ、ＷａｋｏまたはＪｕｎｓｅｉ社から購入したものであり、^１Ｈ−ＮＭＲデータはＧｅｍｉｎｉ２００（Ｖｅｒｉａｎ社）機で測定した値であり、Ｍａｓｓデータは１１００ＭＳＤ（ＨｅｗｌｅｔｔＰａｃｋａｒｄ社）機で測定した値である。
また、本発明の製造例および実施例で「乾燥剤」として用いられた化合物は、特別な言及がない限り、「硫酸ナトリウム」である。

＜製造例＞
下記の製造例に、表１の化合物を製造するための中間体の製造に関する例を記載する。

製造例１．メチル２−アミノ−４，５，６，７−テトラヒドロ−チエン［２，３−ｃ］ピリジン−３−カルボキシレート塩酸塩の製造（参考文献：ＷＯ２０１０／１１２１２４）

ピペリジン−２−オン塩酸塩（５ｇ、３７．４３ｍｍｏｌ、１．０５ｅｑ）とメチルシアノアセテート（３７．４３ｍｍｏｌ、１．０５ｅｑ）、硫黄（３５．６５ｍｍｏｌ、１．０５ｅｑ）をメタノール（２０ｍＬ）に入れ、ジエチルアミン（３５．６５ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を常温で５時間攪拌し、得られた固体を減圧濾過して得た後、イソプロパノール（１０ｍＬ）とメタノール（２０ｍＬ）で洗浄し、熱風乾燥させて標題の化合物を得た。収率４２．６％、basified Cpd ¹H NMR (CDCl₃) δ 6.01(s, 2H), 3.79-3.77(m, 5H), 3.07(t, 2H), 2.72(m, 2H) ppm。

製造例２．メチル２−アミノ−６−ベンジル−４，５，６，７−テトラヒドロ−チエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３−カルボキシレートの製造（参考文献：ＷＯ２０１０／１１２１２４）

製造例１と同様の方法で、ピペリジン−２−オン塩酸塩の代わりに、これと等モル量の１−ベンジルピペリジン−２−オンを用いて標題の化合物を得た。収率８１．４％、¹H NMR (CDCl₃) δ 7.37-7.30(m, 5H), 6.01(s, 2H), 3.78(s, 3H), 3.68(s, 2H), 3.41(s, 2H), 2.85-2.75(m, 4H) ppm。

製造例３．２−アミノ−４，７−ジヒドロ−５Ｈ−チエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３，６−ジカルボン酸６−エチルエステル−３−メチルエステルの製造（参考文献：ＷＯ２０１０／１１２１２４）

製造例１と同様の方法で、ピペリジン−２−オン塩酸塩の代わりに、これと等モル量のピペリジン−２−オン−１−イルエトキシカルバメートを用いて標題の化合物を得た。収率７８．１％、¹H NMR (CDCl₃) δ 6.05(s, 2H), 4.40(s, 2H), 4.17(q, 2H), 3.80(s, 3H), 3.67(t, 2H), 2.81(t, 2H), 1.28(t, 3H) ppm。

製造例４．２−アミノ−４，７−ジヒドロ−５Ｈ−チエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３，６−ジカルボン酸６−ｔｅｒｔ−ブチルエステル３−メチルエステルの製造（参考文献：ＷＯ２０１０／１１２１２４）

製造例１と同様の方法で、ピペリジン−２−オン塩酸塩の代わりに、これと等モル量のピペリジン−２−オン−１−イルｔｅｒｔ−ブトキシカルバメートを用いて標題の化合物を得た。収率８０．９％、¹H NMR (CDCl₃) δ 6.07(s, 2H), 4.35(s, 2H), 3.79(s, 3H), 3.61(t, 2H), 2.78(t, 2H), 1.47(s, 9H) ppm。

製造例５．２−クロロ−Ｎ−（３−クロロフェニル）ニコチンアミドの製造

段階１．２−クロロニコチニルクロリドの製造
２−クロロニコチン酸（１０ｇ、６３．４７ｍｍｏｌ、１ｅｑ）を塩化メチレン７０ｍＬに入れ、氷浴上で攪拌した。塩化チオニル（７６．１６ｍｍｏｌ、１．２ｅｑ）を３０分間滴加した後、氷浴を除去し、常温で３０分間攪拌した後、１時間還流攪拌した。反応溶液を冷却して別途の精製過程なしで次の段階で直ちに使用した。

段階２．２−クロロ−Ｎ−（３−クロロフェニル）ニコチンアミドの製造
段階１．で得られた溶液を氷浴上でトリエチルアミン（１５２．３２ｍｍｏｌ、２．４ｅｑ）を３０分間滴加した後、３０分間常温で攪拌した。反応溶液に３−クロロアニリン（７６．１６ｍｍｏｌ、１．２ｅｑ）を３０分間滴加した後、３時間還流攪拌した。薄膜シリカクロマトグラフィーを介して反応完結の有無を確認した後、常温に冷却し、精製水を入れて反応を終結させた後、ＭＣ（塩化メチレン、５０ｍＬ）で２〜３回抽出した。得られた有機物層を１Ｎ−塩酸水溶液７０ｍＬで洗浄した後、飽和重炭酸ナトリウム水溶液で中和した。硫酸ナトリウムで水分を除去し、減圧濃縮した後、カラムクロマトグラフィー（移動相：３０（ｖ／ｖ）％ＥＡ含有ヘキサン）で精製して標題の化合物を得た。総収率：８１．６％、¹H NMR (CDCl₃+4drop CD₃OD) δ 8.41(dd, 1H), 8.00(dd, 1H), 7.74(st, 1H), 7.49(d, 1H), 7.35(dd, 1H), 7.27(t, 1H), 7.13(d, 1H) ppm。

製造例６．２−クロロ−Ｎ−（４−フェノキシフェニル）ニコチンアミドの製造

製造例５の段階２と同様の方法で、３−クロロアニリンの代わりに、これと等モル量の４−フェノキシアニリンを用いて標題の化合物を得た。総収率：９１．２％、¹H NMR (CDCl₃) δ 8.52(dd, 1H), 8.22(dd, 1H), 8.17 (s, 1H), 7.62(d, 2H), 7.46-7.32(m, 3H), 7.15-7.0(m, 5H) ppm。

製造例７．Ｎ−（１−アセチル−３，３−ジメチル−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−６−イル）−２−クロロニコチンアミドの製造

製造例５の段階２と同様の方法で、３−クロロアニリンの代わりに、これと等モル量の１−アセチル−６−アミノ−３，３−ジメチル−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドールを用いて標題の化合物を得た。総収率：８０．４％、¹H NMR (CDCl₃) δ 9.01(s, 1H), 8.42(d, 1H), 8.07(d, 1H), 8.05(s, 1H), 7.93(d, 1H), 7.33(dd, 1H), 7.14(d, 1H), 3.75(s, 2H), 2.07(s, 3H), 1.37(s, 6H) ppm。

製造例８．２，６−ジクロロ−Ｎ−（３−クロロフェニル）ニコチンアミドの製造

段階１．２，６−ジクロロニコチニルクロリドの製造
製造例５の段階１と同様の方法で、２−クロロニコチン酸の代わりに、これと等モル量の２，６−ジクロロニコチン酸を用いて標題の化合物を得た。

段階２．２，６−ジクロロ−Ｎ−（３−クロロフェニル）ニコチンアミドの製造
製造例５の段階２と同様の方法で、２−クロロニコチニルクロリドの代わりに、これと等モル量の段階１で得られた２，６−ジクロロニコチニルクロリドを用いて標題の化合物を得た。総収率：７５．３％、¹H NMR (CDCl₃+ 2drop DMSO-d₆) δ 9.82(s, 1H), 7.89(d, 1H), 7.77(st, 1H), 7.52(dt, 1H), 7.34(d, 1H), 7.23(t, 1H), 7.08(dq, 1H) ppm。

製造例９．２，６−ジクロロ−Ｎ−（３−クロロフェニル）−５−フルオロニコチンアミドの製造

段階１．２，６−ジクロロ−５−フルオロニコチニルクロリドの製造
製造例５の段階１と同様の方法で、２−クロロニコチン酸の代わりに、これと等モル量の２，６−ジクロロ−５−フルオロニコチン酸を用いて標題の化合物を得た。

段階２．２，６−ジクロロ−Ｎ−（３−クロロフェニル）−５−フルオロニコチンアミドの製造
製造例５の段階２と同様の方法で、２−クロロニコチニルクロリドの代わりに、これと等モル量の段階１で得られた２，６−ジクロロ−５−フルオロニコチニルクロリドを用いて標題の化合物を得た。総収率：７８．４％、¹H NMR (CDCl₃) δ 8.35(s, 1H), 8.08(d, 1H), 7.76(s, 1H), 7.48-7.19(m, 3H) ppm。

製造例１０．２−［（２−クロロピリジン−３−カルボニル）−アミノ］−４，７−ジヒドロ−５Ｈ−チエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３，６−ジカルボン酸６−ｔｅｒｔ−ブチルエステル３−メチルエステルの製造

製造例５の段階２と同様の方法で、３−クロロアニリンの代わりに、これと等モル量の製造例４で得た２−アミノ−４，７−ジヒドロ−５Ｈ−チエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３，６−ジカルボン酸６−ｔｅｒｔ−ブチルエステル３−メチルエステル(2-Amino-4,7-dihydro-5H-thieno[2,3-c]pyridine-3,6-dicarboxylic acid 6-tert-butyl ester 3-methyl ester)を用いて標題の化合物を得た。総収率：５６．７％、¹H NMR (CDCl₃) δ 8.58(d, 1H), 8.23(d, 1H), 7.44(m, 1H), 4.57(s, 2H), 3.92(s, 3H), 3.69(t, 2H), 2.92(t, 2H), 1.49(s, 9H) ppm。

製造例１１．２−［（２，６−ジクロロピリジン−３−カルボニル）−アミノ］−４，７−ジヒドロ−５Ｈ−チエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３，６−ジカルボン酸６−ｔｅｒｔ−ブチルエステル３−メチルエステル{2-[(2,6-Dichloro-pyridine-3-carbonyl)-amino]-4,7-dihydro-5H-thieno[2,3-c]pyridine-3,6-dicarboxylic acid 6-tert-butyl ester 3-methyl ester}の製造

製造例５の段階２と同様の方法で、２−クロロニコチニルクロリドの代わりに、これと等モル量の２，６−ジクロロニコチニルクロリドを使用し、３−クロロアニリンの代わりに、これと等モル量の製造例４で得た２−アミノ−４，７−ジヒドロ−５Ｈ−チエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３，６−ジカルボン酸６−ｔｅｒｔ−ブチルエステル３−メチルエステル{2-Amino-4,7-dihydro-5H-thieno[2,3-c]pyridine-3,6-dicarboxylic acid 6-tert-butyl ester 3-methyl ester}を用いて標題の化合物を得た。総収率：４３．４％、¹H NMR (CDCl₃) δ 7.65(d, 1H), 7.39(m, 1H), 3.82(s, 2H), 3.78(s, 3H), 3.48(t, 2H), 2.98(t, 2H), 1.60(s, 9H) ppm。

製造例１２．Ｎ−（１−アセチル−３，３−ジメチル−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−６−イル）−２−クロロニコチンアミド {2-[(2,6-Dichloro-5-fluoro-pyridine-3-carbonyl)-amino]-4,7-dihydro-5H-thieno[2,3-c]pyridine-3,6-dicarboxylic acid 6-tert-butyl ester 3-methyl ester}の製造

製造例５の段階２と同様の方法で、２−クロロニコチニルクロリドの代わりに、これと等モル量の製造例９の２，６−ジクロロ−５−フルオロニコチニルクロリドを使用し、３−クロロアニリンの代わりに、これと等モル量の製造例４で得た２−アミノ−４，７−ジヒドロ−５Ｈ−チエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３，６−ジカルボン酸６−ｔｅｒｔ−ブチルエステル３−メチルエステル{2-Amino-4,7-dihydro-5H-thieno[2,3-c]pyridine-3,6-dicarboxylic acid 6-tert-butyl ester 3-methyl ester}を用いて標題の化合物を得た。収率：４９．７％、¹H NMR (CDCl₃) δ 8.12(d, 1H), 4.56(s, 2H), 3.92(s, 3H), 3.69(t, 2H), 2.92(t, 2H), 1.50(s, 9H) ppm。

製造例１３．Ｎ−（２−エチルヘキシル）−２−クロロニコチンアミドの製造

製造例５の段階２と同様の方法で、３−クロロアニリンの代わりに、これと等モル量の２−エチルヘキシルアミンを用いて標題の化合物を得た。総収率：９２．４％、¹H NMR (CDCl₃) δ 8.41(d, 1H), 8.04(d, 1H), 7.31(m, 1H), 6.50(br, 1H), 3.41(t, 2H), 1.58(m, 1H), 1.48-1.28(m, 8H), 0.97-0.88(m, 6H) ppm。

製造例１４．２，６−ジクロロ−Ｎ−（２−エチルヘキシル）−ニコチンアミドの製造

製造例５の段階２と同様の方法で、２−クロロニコチニルクロリドの代わりに、これと等モル量の製造例８の２，６−ジクロロニコチニルクロリドを使用し、３−クロロアニリンの代わりに、これと等モル量の２−エチルヘキシルアミンを用いて標題の化合物を得た。総収率：８９．６％、¹H NMR (CDCl₃) δ 8.09(d, 1H), 7.37(d, 1H), 6.55(br, 1H), 3.43(t, 2H), 1.59(m, 1H), 1.49-1.29(m, 8H), 0.97-0.88(m, 6H) ppm。

製造例１５．Ｎ−（２−エチルヘキシル）−２，６−ジクロロ−５−フルオロニコチンアミドの製造

製造例５の段階２と同様の方法で、２−クロロニコチニルクロリドの代わりに、これと等モル量の製造例８の２，６−ジクロロ−５−フルオロニコチニルクロリドを使用し、３−クロロアニリンの代わりに、これと等モル量の２−エチルヘキシルアミンを用いて標題の化合物を得た。総収率：９０．１％、¹H NMR (CDCl₃) δ 8.0(d, 1H), 6.65(br, 1H), 3.44(t, 2H), 1.58(m, 1H), 1.48-1.27(m, 8H), 0.97-0.88(m, 6H) ppm。

製造例１６．２−（１−ベンジルピペリジン−４−イルアミノ）ニコチン酸の製造

段階１．２−（１−ベンジルピペリジン−４−イルアミノ）ニコチノニトリルの製造
２−クロロニコチノニトリル１００ｇ、無水炭酸カリウム１０８．８２ｇおよび４−アミノ−１−ベンジルピペリジン１３３．８３ｍＬをオルソ−キシレン５０ｍＬに入れ、２４時間還流攪拌した。反応混合物を常温に冷却し、酢酸エチル５００ｍＬと精製水１０００ｍＬを添加した後、濃い塩酸水溶液でｐＨが約２〜３となるように添加した。水層を分取し、さらに酢酸エチル３００ｍＬで洗浄した後、氷浴で攪拌しながら水酸化ナトリウムでｐＨが約９〜１０となるように添加した。添加終了後、１時間さらに攪拌し、濾過した後、水で洗浄し、熱風乾燥させて標題の化合物１３７．４ｇ（収率：７１．５％）を得た。¹H NMR (CDCl₃) δ 8.26(dd, 1H), 7.63 (dd, 1H), 7.36-7.28(m, 5H), 6.59(m, 1H), 5.0(d, 1H), 4.14-3.97(m, 1H), 3.53(s, 2H), 2.88(d, 2H), 2.22(t, 2H), 2.1-1.98(m, 2H), 1.68-1.47(m, 2H) ppm。

段階２．２−（１−ベンジルピペリジン−４−イルアミノ）ニコチン酸の製造
段階１で得られた２−（１−ベンジルピペリジン−４−イルアミノ）ニコチノニトリル１００ｇをイソプロパノール２００ｍＬに溶かした後、水酸化カリウム６３．２２ｇを入れ、１２時間還流攪拌した。反応混合物を常温に冷却し、精製水８００ｍＬと酢酸エチル５００ｍＬを添加した後、濃い塩酸水溶液でｐＨが約２〜３となるように添加した。水層を分取し、酢酸エチル５００ｍＬで洗浄した後、氷浴で攪拌しながら水酸化ナトリウムでｐＨが約６〜８となるように加えた。氷浴上でさらに１時間攪拌し、生成された固体を濾過した後、精製水で洗浄した。固体を精製水３００ｍＬでスラリー化して３０分間攪拌した後、濾過し、さらにアセトン１５０ｍＬでスラリー化して３０分間攪拌し、濾過した。少量のアセトンで洗浄した後、熱風乾燥させて標題の化合物９３．７ｇ（収率：８８．１ｇ）を得た。¹H NMR (CDCl₃) δ 8.89(d, 1H), 8.29(d, 1H), 8.10(d, 1H), 7.57-7.42(m, 5H), 4.35(s, 2H), 4.30(m, 1H), 3.47(d, 2H), 2.73(t, 2H), 2.39(d, 2H), 2.01-1.80(m, 2H) ppm。

製造例１７．４−アミノ−１−（２−ヒドロキシエチル）ピペリジンの製造

参考文献：J. Med. Chem. 50 (2007) 3561
段階１．ｔｅｒｔ−ブチル１−（２−ヒドロキシエチル）ピペリジン−４−イルカルバメートの製造
ｔ−ブチル４−ピペリジニルカルバメート(tert-butyl 4-piperidinylcarbamate)０．５ｇ、２−ブロモエタノール(4-bromoethanol)０．２１ｍＬおよびＫ_２ＣＯ_３２．７６ｇをアセトニトリル１０ｍＬに入れ、５時間還流攪拌した。反応混合物を常温に冷却し、濾過して固体を除去した後、濃縮した。残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（移動相：２０（ｖ／ｖ）％ＥＡ含有ヘキサン）で精製して標題の化合物０．５８ｇ（収率：９４％）を得た。¹H NMR (CDCl₃) δ 4.76(d, 1H), 3.65(t, 2H), 3.48(m, 1H), 2.92(m, 2H), 2.59(t, 2H), 2.26(m, 2H), 1.94(m, 2H), 1.52(m, 2H), 1.44(s, 9H) ppm。

段階２．４−アミノ−１−（２−ヒドロキシエチル）ピペリジンの製造
段階１で製造されたｔｅｒｔ−ブチル１−（２−ヒドロキシエチル）ピペリジン−４−イルカルバメート０．５８ｇをエタノール１０ｍＬに入れて溶かし、濃い塩酸水溶液１ｍＬを入れて２時間還流攪拌した。反応混合物を常温に冷却し、減圧濃縮して溶媒を除去した。残渣物に蒸留水１０ｍＬを入れて飽和重曹水で中和した後、塩化メチレン１０ｍＬずつで２回抽出した。乾燥剤によって水分を除去し、減圧濃縮して標題の化合物０．３３ｇ（収率：９５％）を得た。¹H NMR (CDCl₃) δ 3.68(s, 2H), 3.60(t, 2H), 2.86(d, 2H), 2.69(m, 1H), 2.53(t, 2H), 2.11(t, 2H), 1.82(d, 2H), 1.42(t, 2H) ppm。

製造例１８．３−アミノ−１−ベンジルピペリジンの製造
参考文献： J. Med. Chem. 23 (1980) 848

段階１．３−（Ｎ−アセトアミノ）−１−ベンジルピペリジンの製造
３−（Ｎ−アセトアミノ）ピペリジン２ｇと重炭酸ナトリウム１．３ｇをＤＭＦ(dimethylformamide)７ｍＬに入れ、氷浴上で３０分間攪拌した。反応混合物に塩化ベンジル１．７ｍＬを１５分間滴加した後、常温で１５時間攪拌した。減圧濃縮して溶媒を除去し、精製水を投入した。生成された固体を濾過して得、ジエチルエーテルで再結晶して標題の化合物２．１３ｇ（収率：８７．５％）を得た。¹H NMR (CDCl₃) δ 7.31(m, 5H), 4.15-4.03(m, 1H), 3.49(s, 2H), 2.59(d, 1H), 2.43(d, 2H), 2.19(m, 1H), 1.98(s, 3H), 1.92(d, 2H), 1.74-1.52(m, 4H) ppm。

段階２．３−アミノ−１−ベンジルピペリジンの製造
３−（Ｎ−アセトアミド）−１−ベンジルピペリジン２．１３ｇを６Ｎの塩酸水溶液１０ｍＬに入れて１時間還流攪拌した。反応混合物を常温に冷却し、６Ｎアンモニア水をｐＨが９〜１０となるように投入した。クロロホルム１５ｍＬずつで４回抽出し、硫酸ナトリウムを用いて水分を除去し、減圧濃縮して標題の化合物１．２１ｇ（収率：９６．３％）を得た。¹H NMR (CDCl₃) δ 7.31(m, 5H), 3.51(s, 2H), 2.93-2.61(m, 3H), 2.06(t, 1H), 1.90-1.52(m, 4H), 1.20-1.02(m, 1H) ppm。

製造例１９．４−（１−ブロモエチル）−６−クロロ−５−フルオロピリミジンの製造
参考文献： Org. Process Res. Dev. 5 (2001) 28

６−クロロ−４−エチル−５−フルオロピリミジン５ｇ、ＮＢＳ６．６５ｇおよびＡＩＢＮ０．５１ｇを塩化メチレン５０ｍＬに入れて１２時間還流攪拌した。反応混合物を常温に冷却し、精製水３０ｍＬを投入した。有機層を分取し、水層を塩化メチレン３０ｍＬで抽出した。有機層を１０％メタ重亜硫酸ナトリウム水溶液３０ｍＬで洗浄し、精製水で洗浄した。乾燥剤を用いて水分を除去し、減圧濃縮して標題の化合物６．９５ｇ（収率：９５．１％）を得た。¹H NMR (CDCl₃) δ 8.80(s, 1H), 5.35(q, 1H), 2.08(d, 3H) ppm。

製造例２０．６−アミノ−３−メチル−２−メチルスルファニル−３Ｈ−キナゾリン−４−オンの製造
参考文献：Bioorg. Med. Chem. 14 (2006) 8608

段階１．３−メチル−６−ニトロ−２−チオキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−キナゾリン−４−オンの製造
５−ニトロアントラニル酸３．４８ｇ、メチルイソチオシアネート１．６８ｇおよびトリエチルアミン３．７２ｍＬをエタノール７０ｍＬに入れ、４時間還流攪拌した。反応溶液を常温に冷却し、減圧濃縮して溶媒を除去した後、ジエチルエーテルで再結晶して標題の化合物３．９１ｇを得た。（収率８６．２％）¹H NMR (DMSO-d₆) δ 8.19(d, 1H), 8.16(sd, 1H), 8.05(dd, 1H), 3.67(s, 3H) ppm。

段階２．２−メチルチオ−３−メチル−６−ニトロ−３Ｈ−キナゾリン−４−オンの製造
段階１で得られた３−メチル−６−ニトロ−２−チオキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−キナゾリン−４−オン３．９１ｇ、ヨウ化メタン８．２４ｍＬおよび無水炭酸カリウム２．７３ｇをアセトン８２ｍＬに入れて８時間還流攪拌した。反応溶液を熱い状態で濾過して固体混合物を除去し、アセトンで洗浄した。濾液を減圧濃縮して溶媒を除去した後、イソプロパノール２０ｍＬでスラリー化して３０分間攪拌した。反応混合物を濾過した後、乾燥させて標題の化合物２．８４ｇ（収率：６８．７％）を得た。¹H NMR (DMSO-d₆) δ 8.30(d, 1H), 8.26(sd, 1H), 8.16(dd, 1H), 3.56 (s, 3H), 2.71(s, 3H) ppm。

段階３．６−アミノ−２−メチルチオ−３−メチル−３Ｈ−キナゾリン−４−オンの製造
段階２で得られた２−メチルチオ−３−メチル−６−ニトロ−３Ｈ−キナゾリン−４−オン１．５ｇ、塩化スズ（ＩＩ）二水和物６．７３ｇおよび水素化ホウ酸ナトリウム０．１１ｇをエタノール１０ｍＬに入れて３時間還流攪拌した。反応混合物に精製水２０ｍＬを投入し、２Ｎ−水酸化ナトリウム水溶液で中和した。減圧濃縮によってエタノールを除去した後、ジエチルエーテル１５ｍＬずつで２回抽出した。得られた溶液から乾燥剤を用いて水分を除去し、減圧乾燥させて標題の化合物０．５５ｇ（収率：４１．７％）を得た。¹H NMR (CDCl₃) δ 8.02(d, 1H), 6.71(s, 1H), 6.68(d, 1H), 3.57(s, 3H), 2.62(s, 3H) ppm。

＜実施例＞
下記の実施例では、前記表１の化合物を製造する方法を記載した。

実施例１．２−（１−ベンジルピペリジン−４−イルアミノ）−Ｎ−（３−クロロフェニル）ニコチンアミドの製造［１０３］

製造例５で製造された２−クロロ−（Ｎ−３−クロロフェニル）ニコチンアミド（２８０ｍｇ、１．０５ｍｍｏｌ、１．０５ｅｑ）、４−アミノ−１−ベンジルピペリジン（１．０ｍｍｏｌ）および無水炭酸カリウム（１．３ｍｍｏｌ）をオルト−キシレンに入れ、２４時間還流攪拌した。反応混合物を常温に冷却し、酢酸エチルを投入した後、１Ｎ−塩酸水溶液で２回抽出した。得られた水層を酢酸エチル３０ｍＬで洗浄した後、２Ｎ−水酸化ナトリウム水溶液をｐＨが約９〜１０となるように滴加し、塩化メチレン２０ｍＬで２〜３回抽出した。乾燥剤を用いて水分を除去し、減圧濃縮した後、シリカゲルクロマトグラフィーによって得ようとする画分を分取して精製した。減圧濃縮によって溶媒を除去した後、真空乾燥させて標題の化合物を得た。収率：６６．５％、¹H NMR (DMSO-d₆) δ8.15-8.30(m, 2H), 8.03(d, 1H), 7.90(s, 1H), 7.66(d, 1H), 7.60(d, 1H), 7.30-7.60(m, 6H), 7.19(d, 1H), 6.70(m, 1H), 4.10(bs, 1H), 3.95(s, 1H), 2.85-3.15(m, 2H), 2.70-2.85(m, 2H), 1.90-2.15(m, 2H), 1.60-1.85(m, 2H) ppm。

実施例２．Ｎ−（３−クロロフェニル）−２−（４−フェノキシアニリノ）ニコチンアミドの製造［１０４］

実施例１と同様の方法で、４−アミノ−１−ベンジルピペリジンの代わりに、これと等モル量の４−フェノキシアニリンを用いて標題の化合物（収率：７２．３％）を得た。¹H NMR (DMSO-d₆) δ 8.37(d, 1H), 8.21(d, 1H), 7.92 (s, 1H), 7.60-7.76(m, 3H), 7.30-7.43(m, 3H), 7.21(d, 1H), 7.06(t, 1H), 6.90-7.05(m, 5H) ppm。

実施例３．２−（１−ベンジルピペリジン−４−イルアミノ）−Ｎ−（４−フェノキシフェニル）ニコチンアミドの製造［１１０］

実施例１と同様の方法で、２−クロロ−（Ｎ−３−クロロフェニル）ニコチンアミドの代わりに、これと等モル量の製造例６の２−クロロ−（Ｎ−４−フェノキシフェニル）ニコチンアミドを用いて標題の化合物（収率：６９．１％）を得た。¹H NMR (DMSO-d₆) δ 10.23(s, 1H), 8.32(s, 1H), 8.21(d, 1H), 8.09(d, 2H), 7.66(d, 1H), 7.70 (d, 2H), 7.20-7.45(m, 6H), 6.95-7.18(m, 5H), 3.90-4.10(m, 1H), 3.47(s, 2H), 2.675 -2.80(m, 2H), 2.05-2.25(m, 2H), 1.95- 2.05(m, 2H), 1.35-1.60(m, 2H) ppm。

実施例４．２−（４−フェノキシアニリノ）−Ｎ−（４−フェノキシフェニル）ニコチンアミドの製造［１１１］

実施例１と同様の方法で、２−クロロ−（Ｎ−３−クロロフェニル）ニコチンアミドの代わりに、これと等モル量の製造例６の２−クロロ−（Ｎ−４−フェノキシフェニル）ニコチンアミドを使用し、４−アミノ−１−ベンジルピペリジンの代わりに、これと等モル量の４−フェノキシアリニンを用いて標題の化合物（収率：７７．８％）を得た。¹H NMR (DMSO-d₆) δ 10.50(s, 1H), 10.33(s, 1H), 8.35(d, 1H), 8.25(d, 1H), 7.69-7.82(m, 4H), 7.30-7.46(m, 4H), 6.88-7.18(m, 11H) ppm。

実施例５．Ｎ−（３−クロロフェニル）−２−（２，２，６，６−テトラメチルピペリジン−４−イルアミノ）ニコチンアミドの製造［２０１］

実施例１と同様の方法で、４−アミノ−１−ベンジルピペリジンの代わりに、これと等モル量の４−アミノ−２，２，６，６−テトラメチルピペリジンを用いて標題の化合物（収率：８２．１％）を得た。¹H NMR (CDCl₃) δ 8.26(d, 1H), 7.80(d, 1H), 7.68-7.63(m, 2H), 7.35(d, 1H), 7.28(t, 1H), 7.13(d, 1H), 6.56-6.47(m, 1H), 4.65-4.46(m, 1H), 2.05(d, 2H), 1.30(s, 6H), 1.14(s, 6H), 1.02(t, 2H) ppm。

実施例６．Ｎ−（３−クロロフェニル）−２−（１−ｔ−ブトキシカルバモイルピペリジン−４−イルアミノ）ニコチンアミドの製造［２０８］

実施例１と同様の方法で、４−アミノ−１−ベンジルピペリジンの代わりに、これと等モル量の４−アミノ−１−Ｂｏｃ−ピペリジンを用いて標題の化合物（収率：４２．３％）を得た。¹H NMR (CDCl₃) δ 8.23(d, 1H0, 8.03(d, 1H), 7.75(d, 1H), 7.63(s, 1H), 7.40(d, 1H), 7.27(t, 1H), 7.12(d, 1H), 4.26-4.10(m, 1H), 3.96(d, 2H), 2.98(t, 2H), 1.98(d, 2H), 1.50-1.36(m, 11H) ppm。

実施例７．２−（１−アザビシクロ［２．２．２］オクト−３−イルアミノ）−Ｎ−（３−クロロフェニル）ニコチンアミドの製造［２１０］

実施例１と同様の方法で、４−アミノ−１−ベンジルピペリジンの代わりに、これと等モル量の３−アミノ−１−アザビシクロ［２．２．２］オクタンを用いて標題の化合物（収率：２４．５％）を得た。¹H NMR (CDCl₃) δ 8.19(d, 1H), 7.95(d, 1H), 7.86(d, 1H), 7.10-7.03(m, 2H), 6.86-6.79(m, 1H), 6.58-6.50(m, 1H), 4.40(s, 1H), 4.03(d, 1H), 3.80-3.61(m, 2H), 3.33(d, 1H), 3.18- 2.95(m, 2H), 2.47-2.36(m, 1H), 1.95-1.69 (m, 4H) ppm。

実施例８．Ｎ−（３−クロロフェニル）−２−（１−メチルピペリジン−４−イルアミノ）ニコチンアミドの製造［２１４］

実施例１と同様の方法で、４−アミノ−１−ベンジルピペリジンの代わりに、これと等モル量の４−アミノ−１−メチルピペリジンを用いて標題の化合物（収率：８７．３％）を得た。¹H NMR (CDCl₃) δ 8.26(d, 1H), 8.01(d, 1H), 7.75- 7.65(m, 2H), 7.41-7.12(m, 3H), 6.68-6.62(m, 1H), 4.16-4.05(m, 1H), 3.75-3.4(m, 2H), 2.86(d, 2H), 2.37(s, 3H), 2.15-2.05 (m, 2H), 1.76-1.60(m, 2H) ppm。

実施例９．Ｎ−（３−クロロフェニル）−２−［１−（２−ヒドロキシエチル）ピペリジン−４−イルアミノ］ニコチンアミドの製造［２１８］

実施例１と同様の方法で、４−アミノ−１−ベンジルピペリジンの代わりに、これと等モル量の製造例１７で得られた４−アミノ−１−（２−ヒドロキシエチル）ピペリジンを用いて標題の化合物（収率：６４．６％）を得た。¹H NMR (CDCl₃) δ 8.18(d, 1H), 7.96(d, 1H), 7.74(d, 1H), 7.61(s, 1H), 7.47(d, 1H), 7.22(t, 1H), 7.06(d, 1H), 6.48-6.41(m, 1H), 3.54(t, 2H), 3.03(d, 2H), 2.74(t, 2H), 2.48(t, 2H), 2.22(t, 1H), 2.05-1.94(m, 2H), 1.59-1.35(m, 2H) ppm。

実施例１０．Ｎ−（３−クロロフェニル）−２−（４−メチルピペリジン−１−イルアミノ）ニコチンアミドの製造［２４０］

実施例１と同様の方法で、４−アミノ−１−ベンジルピペリジンの代わりに、これと等モル量の１−アミノ−４−メチルピペラジンを用いて標題の化合物（収率：９３．８％）を得た。¹H NMR (CDCl₃) δ 8.47-8.37(m, 2H), 7.93(s, 1H), 7.51(d, 1H), 7.28(t, 1H), 7.21-7.08(m, 2H), 3.27(t, 4H), 2.62(t, 4H), 2.37(s, 3H) ppm。

実施例１１．Ｎ−（３−クロロフェニル）−２−［４−（２−ヒドロキシエチル）ピペラジン−１−イルアミノ］ニコチンアミドの製造［２４１］

実施例１と同様の方法で、４−アミノ−１−ベンジルピペリジンの代わりに、これと等モル量の１−アミノ−４−（２−ヒドロキシエチル）ピペラジンを用いて標題の化合物（収率：７７．３％）を得た。¹H NMR (CDCl₃) δ 8.47-8.37(m, 2H), 7.91(s, 1H), 7.51(d, 1H), 7.28(t, 1H), 7.21-7.08(m, 2H), 3.66(t, 2H), 3.29(t, 4H), 2.75(t, 2H), 2.65(t, 2H) ppm。

実施例１２．Ｎ−（３−クロロフェニル）−２−（１−ｔ−ブトキシカルバモイルピペリジン−３−イルアミノ）ニコチンアミドの製造
１２−Ａ）（Ｒ）−Ｎ−（３−クロロフェニル）−２−（１−ｔ−ブトキシカルバモイルピペリジン−３−イルアミノ）ニコチンアミドの製造［２７０］

実施例１と同様の方法で、４−アミノ−1−ベンジルピペリジンの代わりに、これと等モル量の（Ｒ）−３−アミノ−１−Ｂｏｃ−ピペリジンを用いて標題の化合物（収率：４３．８％）を得た。¹H NMR (CDCl₃) δ 8.24(br, 2H), 8.08(d, 1H), 7.78(d, 1H), 7.70(s, 1H), 7.39(d, 1H), 7.25(t, 1H), 7.12(d, 1H), 6.57-6.51(m, 1H), 4.21-4.06(m, 1H), 3.95-3.86(m, 1H), 3.62-3.49(m, 2H), 3.30-3.18(m, 2H), 2.04-1.86(m, 1H), 1.68-1.56(m, 2H), 1.42(s, 9H) ppm。

１２−Ｂ）（Ｓ）−Ｎ−（３−クロロフェニル）−２−（１−ｔ−ブトキシカルバモイルピペリジン−３−イルアミノ）ニコチンアミドの製造［２７６］

実施例１と同様の方法で、４−アミノ−1−ベンジルピペリジンの代わりに、これと等モル量の（Ｓ）−３−アミノ−１−Ｂｏｃ−ピペリジンを用いて標題の化合物（収率：５１．７％）を得た。¹H NMR (CDCl₃) δ 8.24(d, 1H), 8.08(d, 1H), 7.71(d, 1H), 7.69(s, 1H), 7.16(d, 1H), 7.27(t, 1H), 7.12(d, 1H), 6.59-6.51(m, 1H), 4.21-4.06(m, 1H), 3.95-3.86(m, 1H), 3.62-3.52(m, 1H), 3.30-3.18(m, 2H), 2.04-1.96(m, 1H), 1.98-1.56(m, 3H), 1.42(s, 9H) ppm。

実施例１３．２−（１−ベンジルピペリジン−４−イルアミノ）−６−クロロ−Ｎ−（３−クロロフェニル）ニコチンアミドの製造［３０１］

実施例１と同様の方法で、２−クロロ−Ｎ−（３−クロロフェニル）ニコチンアミドの代わりに、これと等モル量の製造例８で得られた２，６−ジクロロ−Ｎ−（３−クロロフェニル）ニコチンアミドを用いて標題の化合物（収率：４８．７％）を得た。¹H NMR (CDCl₃) δ 8.21(d, 1H), 7.75(s, 1H), 7.64(s, 1H), 7.60(d, 1H), 7.39-7.25(m, 6H), 7.14(d, 1H), 4.15-3.98(m, 1H), 3.53(s, 2H), 2.79(d, 2H), 2.21(t, 2H), 2.06-1.93(m, 2H), 1.67-1.48(m, 2H) ppm。

実施例１４．２−（１−ベンジルピペリジン−４−イルアミノ）−６−クロロ−Ｎ−（３−クロロフェニル）−５−フルオロニコチンアミドの製造［３０２］

実施例１と同様の方法で、２−クロロ−Ｎ−（３−クロロフェニル）ニコチンアミドの代わりに、これと等モル量の製造例９で得られた２，６−ジクロロ−Ｎ−（３−クロロフェニル）−５−フルオロニコチンアミドを用いて標題の化合物（収率：６６．６％）を得た。¹H NMR (CDCl₃) δ 8.73(s, 1H), 7.88(d, 1H), 7.76(s, 1H), 7.48(d, 1H), 7.27(t, 1H), 7.12(d, 1H), 4.96(d, 1H), 4.02(m, 1H), 3.56(s, 2H), 2.89(d, 2H), 2.22(t, 2H), 2.09(d, 2H), 1.59(m, 2H) ppm。

実施例１５．６−クロロ−Ｎ−（３−クロロフェニル）−２−［１−（２−ヒドロキシエチル）ベンジルピペリジン−４−イルアミノ］ニコチンアミドの製造［３１１］

実施例１３と同様の方法で、４−アミノ−１−ベンジルピペリジンの代わりに、これと等モル量の製造例１７で得られた４−アミノ−１−（２−ヒドロキシエチル）ピペリジンを用いて標題の化合物（収率：７４．５％）を得た。¹H NMR (CDCl₃) δ 8.32(d, 1H), 7.78(d, 1H), 7.67(s, 1H), 7.41(d, 1H), 7.27(t, 1H), 7.13(d, 1H), 6.53(d, 1H), 4.17-4.08(m, 1H), 3.74(t, 2H), 3.12(d, 2H), 2.78(t, 2H), 2.61(t, 2H), 2.12(d, 2H), 1.88-1.68(m, 2H) ppm。

実施例１６．６−クロロ−Ｎ−（３−クロロフェニル）−５−フルオロ−２−［１−（２−ヒドロキシエチル）ピペリジン−４−イルアミノ］ニコチンアミドの製造［３１２］

実施例１と同様の方法で、２−クロロ−Ｎ−（３−クロロフェニル）ニコチンアミドの代わりに、これと等モル量の製造例９で得られた２，６−ジクロロ−Ｎ−（３−クロロフェニル）−５−フルオロニコチンアミドを使用し、４−アミノ−１−ベンジルピペリジンの代わりに、これと等モル量の製造例１７で得られた４−アミノ−１−（２−ヒドロキシエチル）ピペリジンを用いて標題の化合物（収率：８１．１％）を得た。¹H NMR (CDCl₃) δ 8.73(s, 1H), 7.88(d, 1H), 7.76(s, 1H), 7.48(d, 1H), 7.29(t, 1H), 7.12(d, 1H), 4.98(d, 1H), 4.04(m, 1H), 3.62(t, 2H), 2.92 (d, 2H), 2.59(t, 2H), 2.32(t, 2H), 2.12(d, 2H), 1.62(m, 2H) ppm。

実施例１７．２−（１−ベンジルピペリジン−４−イルアミノ）−Ｎ−（３，３−ジメチル−２,３−ジヒロド−１Ｈ−インドール−６−イル）ニコチンアミドの製造［１１７］

段階１．Ｎ−（１−アセチル−３，３−ジメチル−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−６−イル）−２−（１−ベンジルピペリジン−４−イルアミノ）ニコチンアミドの製造
製造例７で得られたＮ−（１−アセチル−３，３−ジメチル−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−６−イル）−２−クロロニコチンアミド（３６１ｍｇ、１．０５ｍｍｏｌ、１．０５ｅｑ）、４−アミノ−１−ベンジルピペリジン（１．０ｍｍｏｌ）および無水炭酸カリウム（１．３ｍｍｏｌ）をオルソ−キシレンに入れ、２４時間還流攪拌した。反応混合物を常温に冷却し、減圧濃縮した後、別途の精製過程なしで次の段階で直ちに使用した。

段階２．２−（１−ベンジルピペリジン−４−イルアミノ）−Ｎ−（３，３−ジメチル−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−６−イル）ニコチンアミドの製造
段階１で得た残渣物をエタノール１０ｍＬに入れ、濃い塩酸水溶液を加えて４時間還流攪拌した。反応混合物を常温に冷却し、減圧濃縮して溶媒を除去した。残渣物を蒸留水１０ｍＬに入れ、２０（ｗｔ／ｗｔ）％水酸化ナトリウム水溶液を滴加してｐＨが９〜１０となるようにした。混合物をクロロホルム２０ｍＬで抽出し、硫酸ナトリウムを用いて水分を除去した後、減圧濃縮した。カラムクロマトグラフィー（移動相：１０（ｖ／ｖ）％アセトン含有クロロホルム）で精製過程を経て標題の化合物を得た。（総収率：４６．１％）¹H NMR (CDCl₃), δ 8.21(d, 1H), 7.97(d, 1H), 7.64(d, 1H), 7.20-7.40(m, 4H), 6.99(d, 2H), 6.67(d, 1H), 6.49(dd, 1H), 4.06(bs, 1H), 3.52(s, 2H), 3.32(s, 2H), 2.85(d, 2H), 2.25(t, 2H), 1.95-2.10(m, 2H), 1.48-1.72(m, 2H), 1.29 (s, 6H) ppm。

実施例１８．Ｎ−（３，３−ジメチル−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−６−イル）−２−（４−フェノキシアニリノ）ニコチンアミドの製造［１１８］

実施例１７の段階１および２と同様の製造方法で、４−アミノ−１−ベンジルピペリジンの代わりに、これと等モル量の４−フェノキシアニリンを用いて、標題の化合物を得た。（総収率：５４．３％）¹H NMR (CDCl₃), δ 10.20(s, 1H), 8.32(d, 1H), 7.78 (d, 1H), 7.72(s, 1H), 7.62(d, 3H), 7.31(t, 3H), 6.95-7.11(m, 5H), 6.68-6.85(m, 1H), 3.34(s, 2H), 1.32(s, 6H) ppm。

実施例１９．Ｎ−（３−クロロフェニル）−２−（４−ピペリジルアミノ）ニコチンアミドの製造［２２４］

実施例６で製造されたＮ−（３−クロロフェニル）−２−（１−ｔ−ブトキシカルバモイルピペリジン−４−イルアミノ）ニコチンアミド１．０ｇをエタノール１０ｍＬに入れて溶かした後、濃い塩酸水溶液５ｍＬを加えて８時間還流攪拌した。反応溶液を常温に冷却し、減圧濃縮によって溶媒を除去した後、飽和重曹水を滴加してｐＨが９〜１０となるようにした。酢酸エチル３０ｍＬずつで３回抽出した後、乾燥剤を用いて水分を除去し、減圧濃縮および真空乾燥させて標題の化合物０．６９ｇ（収率：８９．９％）を得た。¹H NMR (CDCl₃) δ 8.23(d, 1H), 7.99(d, 2H), 7.7(d, 1H), 7.66(s, 1H), 7.36(d, 1H), 7.27(t, 1H), 7.10(d, 1H), 6.53-5.45(m, 1H), 4.18-4.05(m, 1H), 3.43(t, 1H), 3.09(d, 2H), 2.74(t, 2H), 2.15-2.01(m, 2H), 1.57-1.36(m, 2H) ppm。

実施例２０．Ｎ−（３−クロロフェニル）−２−（３−ピペリジルアミノ）ニコチンアミドの製造

２０−Ａ）（Ｒ）−Ｎ−（３−クロロフェニル）−２−（３−ピペリジルアミノ）ニコチンアミドの製造［２６９］
実施例１９と同様の方法で、出発物質として、実施例１２−Ａで製造された（Ｒ）−Ｎ−（３−クロロフェニル）−２−（１−ｔ−ブトキシカルバモイルピペリジン−３−イルアミノ）ニコチンアミド０．５ｇを用いて、標題の化合物０．３５ｇ（収率：９１．２％）を得た。
1H NMR 8.26(d, 1H), 8.08(d, 1H), 7.72(d, 1H), 7.67(s, 1H), 7.37(d, 1H), 7.26(t, 1H), 7.11(d, 1H), 6.57-6.51(m, 1H), 4.18-4.08(m, 1H), 3.72(br, 1H), 3.21(d, 1H), 2.97-2.88(m, 1H), 2.79-2.60(m, 2H), 2.14-1.96(m, 2H), 1.82-1.68(m, 1H), 1.66-1.48(m, 2H) ppm。

２０−Ｂ）（Ｓ）−Ｎ−（３−クロロフェニル）−２−（３−ピペリジルアミノ）ニコチンアミドの製造［２７５］
実施例１９と同様の方法で、出発物質として、実施例１２−Ｂで製造された（Ｓ）−Ｎ−（３−クロロフェニル）−２−（１−ｔ−ブトキシカルバモイルピペリジン−３−イルアミノ）ニコチンアミド０．５ｇを用いて、標題の化合物０．３４ｇ（収率：８８．６％）を得た。1H NMR 8.22(d, 1H), 8.03(d, 1H), 7.71(d, 1H), 7.67(s, 1H), 7.37(d, 1H), 7.26(t, 1H), 7.11(d, 1H), 6.52-6.46(m, 1H), 4.18-4.08(m, 1H), 3.17(d, 1H), 2.95(m, 1H), 2.74-2.53(m, 2H), 2.14-1.96(m, 2H), 1.82-1.68(m, 1H), 1.66-1.48(m, 2H) ppm。

実施例２１．Ｎ−（３−クロロフェニル）−２−（１−（２−ヒドロキシエチル）−２，２，６，６−テトラメチルピペリジン−４−イルアミノ）ニコチンアミドの製造［２４２］

実施例５で製造されたＮ−（３−クロロフェニル）−２−（２，２，６，６−テトラメチルピペリジン−４−イルアミノ）ニコチンアミド（３３０ｍｇ、１ｍｍｏｌ、１ｅｑ）、２−ブロモエタノール（１．２ｍｍｏｌ）および無水炭酸カリウム（１．２ｍｍｏｌ）をアセトニトリル５ｍＬに入れ、１８時間還流攪拌した。反応混合物を常温に冷却し、濾過した。濾液を減圧濃縮してシリカゲルカラムクロマトグラフィー（移動相：１０（ｖ／ｖ）％メタノール含有クロロホルム）によって得ようとする画分を分取し、標題の化合物を得た。収率：３７．１％、¹H NMR (CDCl₃) δ8.22(d, 1H), 7.79(d, 1H), 7.69(d, 1H), 7.65(s, 1H), 7.37(d, 1H), 7.27(t, 1H), 7.10(d, 1H), 6.51-6.45(m, 1H), 4.64-4.45(m, 1H), 3.88(t, 2H), 3.49(t, 2H), 2.08-1.96(m, 3H), 1.28(s, 6H), 1.13(s, 6H), 1.0(t, 2H) ppm。

実施例２２．２−（１−アリールピペリジン−４−イルアミノ）−Ｎ−（３−クロロフェニル）ニコチンアミドの製造［２４３］

実施例２１と同様の方法で、Ｎ−（３−クロロフェニル）−２−（２，２，６，６-テトラメチルピペリジン−４−イルアミノ)ニコチンアミドの代わりに、これと等モル量の実施例１９で製造されたＮ−（３−クロロフェニル）−２−（４−ピペリジルアミノ）ニコチンアミド、および２−ブロモエタノールの代わりに、これと等モル量の臭化アリールを用いて、標題の化合物（収率：３６．８％）を得た。¹H NMR (CD₃OD) δ 8.22(d, 1H), 8.08(d, 1H), 7.86(s, 1H), 7.53(d, 1H), 7.34(t, 1H), 7.15(d, 1H), 6.76-6.68(m, 1H), 5.79(t, 1H), 4.72-4.62(m, 2H), 4.33-4.20(m, 1H), 4.07(dd, 1H), 3.58-3.4(m, 3H), 3.19(t, 2H), 2.32(d, 2H), 1.89-1.68(m, 2H) ppm。

実施例２３．Ｎ−（３−クロロフェニル）−２−［１−（２−Ｎ，Ｎ−ジエチルアミノ−エチル）ピペリジン−４−イルアミノ］ニコチンアミドの製造［２４４］

実施例２２と同様の方法で、臭化アリールの代わりに、これと等モル量の２−クロロエチル−Ｎ，Ｎ−ジエチルアミンを用いて標題の化合物（収率：４７．５％）を得た。¹H NMR (CDCl₃) δ 8.19(d, 1H), 8.06(s, 1H), 7.93(d, 1H), 7.65(d, 1H), 7.59(s, 1H), 7.33(d, 1H), 7.21(s, 1H), 7.06(d, 1H), 6.48-6.40(m, 1H), 4.07-3.93(m, 1H), 2.79(d, 2H), 2.59-2.40(m, 8H), 2.18(t, 2H), 1.98(d, 2H), 1.62-1.46(m, 2H), 0.97(t, 6H) ppm。

実施例２４．Ｎ−（３−クロロフェニル）−２−［１−（ピリジン−２−イルメチル）ピペリジン−４−イルアミノ］ニコチンアミドの製造［２４８］

実施例２２と同様の方法で、臭化アリールの代わりに、これと等モル量の２−クロロメチルピリジンを用いて標題の化合物（収率：５６．６％）を得た。¹H NMR (CD₃OD) δ 8.49(d, 1H), 8.26(d, 1H), 8.02(d, 1H), 7.89-7.80(m, 2H), 7.59-7.52(m, 2H), 7.37-7.31(m, 2H), 7.14(d, 1H), 6.68-6.60(m, 1H), 4.09-3.97(m, 1H), 3.71(s, 2H), 2.88(d, 2H), 2.39(t, 2H), 2.12-2.01(m, 2H), 1.73-1.57(m, 2H) ppm。

実施例２５．Ｎ−（３−クロロフェニル）−２−［１−（ピリジン−３−イルメチル）ピペリジン−４−イルアミノ］ニコチンアミドの製造［２４９］

実施例２２と同様の方法で、臭化アリールの代わりに、これと等モル量の３−クロロメチルピリジンを用いて標題の化合物（収率：４３．８％）を得た。¹H NMR (CDCl₃) δ 8.49(m, 1H), 8.26(d, 1H), 7.99(d, 1H), 7.77-7.65(m, 3H), 7.41-7.25(m, 3H), 7.17-7.11(m, 1H), 6.55-6.49(m, 1H), 4.23-4.08(m, 1H), 3.10(d, 2H), 2.76(d, 2H), 2.06(d, 2H), 1.68(s, 2H), 1.43(q, 2H)ppm。

実施例２６．２−｛１−［１−（６−クロロ−５−フルオロピリミジン−４−イル）エチル］ピペリジン−４−イルアミノ｝−Ｎ−（３−クロロフェニル）ニコチンアミドの製造［２５０］

実施例２２と同様の方法で、臭化アリールの代わりに、これと等モル量の製造例１９で得られた４−（１−ブロモエチル）−６−クロロ−５−フルオロピリミジンを用いて標題の化合物（収率：４４．９％）を得た。¹H NMR (CDCl₃) δ 8.22(d, 1H), 8.18(s, 1H), 8.06(d, 1H), 7.72(d, 1H), 7.61(s, 1H), 7.33(d, 1H), 7.22(t, 1H), 7.08(d, 1H), 6.55-6.47(m, 1H), 5.34(q, 1H), 4.43-4.23(m, 3H), 3.28(t, 2H), 2.13(d, 2H), 1.98(d, 3H), 1.67-1.46(m, 2H) ppm。

実施例２７．Ｎ−（３−クロロフェニル）−２−［１−(２−ヒドロキシエチル)ピペリジン−３−イルアミノ］ニコチンアミドの製造
２７−Ａ）（Ｒ）−Ｎ−（３−クロロフェニル）−２−［１−（２−ヒドロキシエチル）ピペリジン−３−イルアミノ］ニコチンアミドの製造［２６８］

実施例２１と同様の方法で、Ｎ−（３−クロロフェニル）−２−（２，２，６，６−テトラメチルピペリジン−４−イルアミノ）ニコチンアミドの代わりに、これと等モル量の実施例２０−Ａ）で得た（Ｒ）−Ｎ−（３−クロロフェニル）−２−（３−ピペリジルアミノ）ニコチンアミドを用いて標題の化合物（収率：６４．７％）を得た。¹H NMR (CDCl₃) δ 8.48(br, 1H), 8.40(s, 1H), 8.17(d, 1H), 7.76(d, 1H), 7.59(s, 1H), 7.42(d, 1H), 7.19(t, 1H), 7.03(d, 1H), 6.48-6.40(m, 1H), 4.35-4.23(m, 1H), 3.61(t, 2H), 3.13(br, 2H), 2.69(d, 1H), 2.60-2.36(m, 4H), 1.85-1.58(m, 3H) ppm。

２７−Ｂ）（Ｓ）−Ｎ−（３−クロロフェニル）−２−[１−（２−ヒドロキシエチル）ピペリジン−３−イルアミノ]ニコチンアミドの製造［２７４］

実施例２１と同様の方法で、Ｎ−（３−クロロフェニル）−２−（２，２，６，６−テトラメチルピペリジン−４−イルアミノ）ニコチンアミドの代わりに、これと等モル量の実施例２０−Ｂ）で得た（Ｓ）−Ｎ−（３−クロロフェニル）−２−（３−ピペリジルアミノ）ニコチンアミドを用いて標題の化合物（収率：６０．８％）を得た。¹H NMR (CDCl₃) δ 8.50(br, 1H), 8.22(d, 1H), 7.97(s, 1H), 7.73(d, 1H), 7.61(s, 1H), 7.45(d, 1H), 7.25(t, 1H), 7.09(d, 1H), 6.53-6.47(m, 1H), 4.33(br, 1H), 3.61(t, 2H), 2.76-2.45(m, 6H), 1.85-1.58(m, 4H) ppm。

実施例２８．２−（１−ベンジルピペリジン−３−イルアミノ）−Ｎ−（３−クロロフェニル)ニコチンアミドの製造
２８−Ａ）（Ｒ）−２−（１−ベンジルピペリジン−３−イルアミノ）−Ｎ−（３−クロロフェニル）ニコチンアミドの製造［２６７］

実施例２１と同様の方法で、Ｎ−（３−クロロフェニル）−２−（２，２，６，６−テトラメチルピペリジン−４−イルアミノ）ニコチンアミドの代わりに、これと等モル量の実施例２０−Ａ）で得た（Ｓ）−Ｎ−（３−クロロフェニル）−２−（３−ピペリジルアミノ）ニコチンアミドを使用し、２−ブロモエタノールの代わりに、これと等モル量の塩化ベンジルを用いて標題の化合物（収率：６４．４％）を得た。¹H NMR (CDCl₃) δ 8.33(d, 1H), 8.24(d, 1H), 7.83(s, 1H), 7.74(s, 1H), 7.68(d, 1H), 7.47-7.13(m, 7H), 6.53-6.46(m, 1H), 4.39-4.27(m, 1H), 2.69(d, 1H), 2.53-2.34(m, 3H), 1.85-1.58(m, 6H) ｐｐｍ。

２８−Ｂ）（Ｓ）−２−（１−ベンジルピペリジン−３−イルアミノ）−Ｎ−（３−クロロフェニル）ニコチンアミドの製造［２７３］

実施例２１と同様の方法で、Ｎ−（３−クロロフェニル）−２−（２，２，６，６−テトラメチルピペリジン−４−イルアミノ）ニコチンアミドの代わりに、これと等モル量の実施例２０−Ｂ）で得た（Ｓ）−Ｎ−（３−クロロフェニル）−２−（３−ピペリジルアミノ）ニコチンアミドを使用し、２−ブロモエタノールの代わりに、これと等モル量の塩化ベンジルを用いて標題の化合物（収率：６８．２％）を得た。
¹H NMR (CDCl₃) δ 8.33(d, 1H), 8.22(d, 1H), 7.86(s, 1H), 7.82(s, 1H), 7.71(d, 1H), 7.45-7.12(m, 7H), 6.53-6.46(m, 1H), 4.32(br, 1H), 2.68(d, 1H), 2.53-2.34(m, 3H), 1.97(s, 2H), 1.81-1.55(m, 4H) ppm。

実施例２９．２−（４−（３−（３−クロロフェニルカルバモイル）ピリジン−２−イルアミノ）ピペリジン−１−イル）マロン酸の製造［２４６］

段階１．ジエチル２−（４−（３−（３−クロロフェニルカルバモイル）ピリジン−２−イルアミノ）ピペリジン−１−イル）マロネートの製造
実施例１９で得られたＮ−（３−クロロフェニル）−２−（４−ピペリジルアミノ）ニコチンアミド０．２５ｇ、ジエチル２−ブロモマロネート０．２ｍＬおよび無水炭酸カリウム０．１６ｇをアセトニトリル５ｍＬに入れ、２４時間還流攪拌した。反応混合物を常温に冷却し、酢酸エチル１０ｍＬを投入した後、１Ｎ塩酸水溶液で３回抽出した。得た水層をさらに酢酸エチル１５ｍＬで洗浄し、飽和重曹水でｐＨが約９となるように投入した。その後、別途の精製過程なしで次の段階に移行した。

段階２．２−（４−（３−（３−クロロフェニルカルバモイル）ピリジン−２−イルアミノ）ピペリジン−１−イル）マロン酸の製造
段階１で得られた混合物に水酸化ナトリウム０．１６ｇを投入し、３時間５０℃で加熱攪拌した。反応混合物を常温に冷却し、酢酸エチル１０ｍＬで３回抽出した。飽和食塩水で２回洗浄した後、乾燥剤を用いて水分を除去した。得られた溶液を減圧濃縮した後、シリカゲルクロマトグラフィー（移動相：３０（ｖ／ｖ）％ヘキサン含有ＥＡ）で精製して標題の化合物０．０５ｇ（総収率：１５％）を得た。¹H NMR (CDCl₃+ 4drop CD₃OD) δ 8.12(d, 1H) 7.80(d, 1H), 7.63(s, 1H), 7.4(d, 1H), 7.22(t, 1H), 7.05(d, 1H), 6.53-6.47(m, 1H), 4.12-3.98(m, 1H), 3.10-3.0(m, 2H), 2.71(t, 2H), 2.03(d, 2H), 1.99(s, 1H), 1.49-1.3(m, 2H) ppm。

実施例３０．２−（１−ベンジルピペリジン−４−イルオキシ）−Ｎ−（３−クロロフェニル）ニコチンアミドの製造［２８９］

１−ベンジル−４−ヒドロキシピペリジン（２０９ｍｇ、１．１ｍｍｏｌ、１．１ｅｑ）と９５ｗ％水素化ナトリウム（１．２ｍｍｏｌ）をジメチルホルムアミド５ｍＬに入れて常温で３０分間攪拌し、２−クロロ−Ｎ−（３−クロロフェニル）ニコチンアミド（１．０ｍｍｏｌ）を投入し、２０時間還流攪拌した。反応混合物を常温に冷却し、精製水２０ｍＬを投入して反応を終結させた。酢酸エチル２０ｍＬずつで２回抽出し、乾燥剤を用いて水分を除去した後、減圧濃縮した。残渣物を、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（移動相：３０（ｖ／ｖ）％ヘキサン含有ＥＡ）で得ようとする画分を分取し、減圧乾燥させて標題の化合物０．２５ｇ（収率：３３．７％）を得た。¹H NMR (CDCl₃) δ 8.60(d, 1H), 8.29(d, 1H), 7.88(s, 1H), 7.48(d, 1H), 7.36-7.27(m, 6H), 7.17-7.05(m, 2H), 5.51-5.38(m, 1H), 3.59(s, 2H), 2.89-2.80(m, 2H), 2.42(t, 2H), 2.29-2.23(m, 2H), 2.06-1.87(m, 2H) ppm。

実施例３１．２−（１−ベンジルピペリジン−４−イルスルファニル）−Ｎ−（３−クロロフェニル）ニコチンアミドの製造［２９０］

実施例３０と同様の方法で、１−ベンジル−４−ヒドロキシピペリジンの代わりに、これと等モル量の１−ベンジル−４−メルカプトピペリジンを使用し、塩基としてナトリウムメトキシドを用いて標題の化合物を製造した。収率：４２．８％、¹H NMR (CDCl₃) δ 8.52-8.46(m, 2H), 7.88(d, 1H), 7.46(d, 1H), 7.32-7.25(m, 6H), 7.18, 7.02(m, 2H), 4.08-3.96(m, 1H), 2.52(s, 2H), 2.88-2.82(m, 2H), 2.25(t, 2H), 2.16-1.97(m, 2H), 1.88-1.68(m, 2H)。

実施例３２．２−（１−ベンジルピペリジン−４−イルアミノ）−Ｎ−［４−（４−フルオロベンジル）モルホリン−２−イルメチル］ニコチンアミドの製造［４０４］

段階１．２−（１−ベンジルピペリジン−４−イルアミノ）ニコチニルクロリドの製造
製造例１６で製造された２−（１−ベンジルピペリジン−４−イルアミノ）ニコチン酸（３１１ｍｇ、１．０ｍｍｏｌ、１．０ｅｑ）と塩化チオニル（１．５ｍｍｏｌ）を塩化メチレン１５ｍＬに入れ、１時間還流攪拌した。反応混合物を常温に冷却し、得られた溶液を別途の精製過程なしで次の段階で直ちに使用した。

段階２．２−（１−ベンジルピペリジン−４−イルアミノ）−Ｎ−［４−（４−フルオロベンジル）モルホリン−２−イルメチル］ニコチンアミドの製造
段階１で得られた溶液を氷浴上で４〜５℃に冷却し、トリエチルアミン（０．４２ｍＬ、３．０ｍｍｏｌ）を５分間滴加した。反応溶液に４−（４−フルオロベンジル）モルホリン−２−イルメチルアミン（１．２ｍｍｏｌ）を投入した後、常温で３０分間攪拌し、４時間さらに還流攪拌した。反応混合物を常温に冷却し、飽和重曹水で洗浄した後、飽和食塩水で洗浄した。乾燥剤を用いて水分を除去し、減圧濃縮した後、シリカカラムクロマトグラフィー（移動相：３０（ｖ／ｖ）％ヘキサン含有ＥＡ）で得ようとする画分を分取し、標題の化合物を得た。（総収率：５３．０％）¹H NMR (CDCl₃) δ8.20(d, 1H), 8.12(d, 1H), 7.54(d, 1H), 7.36-7.24(m, 7H), 7.01(t, 2H), 6.46-6.38(m, 1H), 4.08-3.98(m, 1H), 3.87(d, 1H), 3.73-3.61(m, 4H), 3.53(s, 2H), 3.45(s, 2H), 3.32-3.19(m, 2H), 2.85-2.61(m, 4H), 2.32-2.14(m, 3H), 2.08-1.88(m, 3H) ppm。

実施例３３．２−（１−ベンジルピペリジン−４−イルアミノ）−Ｎ−（１，３，４−トリアゾール−２イル）ニコチンアミドの製造［４０６］

実施例３２と同様の方法で、（４−（４−フルオロベンジル）モルホリン−２−イルメチルアミンの代わりに、これと等モル量の２−アミノ−１，３，４−トリアゾールを用いて標題の化合物（総収率：２０．８％）を得た。¹H NMR (CDCl₃) δ 8.57(m, 1H), 8.23(m, 1H), 7.97(m, 2H), 7.32(m, 5H), 6.47(m, 1H), 6.14(br, 1H), 3.92(m, 1H), 3.52(s, 2H), 2.86(m, 2H), 2.25(m, 2H), 1.97(m, 2H), 1.56(m, 2H) ppm。

実施例３４．２−（１−ベンジルピペリジン−４−イルアミノ）−Ｎ−（４，６−ジメチルピリミジン−２−イル）ニコチンアミドの製造［４０７］

実施例３２と同様の方法で、４−（４−フルオロベンジル）モルホリン−２−イルメチルアミンの代わりに、これと等モル量の２−アミノ−４，６−ジメチルピリミジンを用いて標題の化合物（総収率：１９．３％）を得た。¹H NMR (CDCl₃) δ 8.26(d, 1H), 8.10(m, 1H), 8.05(m, 1H), 7.36(m, 6H), 6.50(m, 1H), 4.12(m, 1H), 3.57(s, 2H), 2.83(m, 2H), 2.29(m, 2H), 2.05(m, 2H), 1.64(m, 2H), 1.28(s, 6H) ppm。

実施例３５．２−（１−ベンジルピペリジン−４−イルアミノ）−Ｎ−（Ｓ）−ピロリジン−３−イルニコチンアミドの製造[４０８］

実施例３２と同様の方法で、４−（４−フルオロベンジル）モルホリン−２−イルメチルアミンの代わりに、これと等モル量の（Ｓ）−３−アミノ−ピロリジンを用いて標題の化合物（総収率：１３．４％）を得た。¹H NMR (CDCl₃) δ 8.19(d, 1H), 8.05(d, 1H), 7.44(d, 1H), 7.11(m, 5H), 6.50(m, 1H), 4.12(m, 1H), 3.53(s, 2H), 2.82(m, 4H), 2.32-1.93(m, 9H), 1.61(m, 4H) ppm。

実施例３６．２−（１−ベンジルピペリジン−４−イルアミノ）−Ｎ−２−（モルホリン−１−イル）エチルニコチンアミドの製造［４０９］

実施例３２と同様の方法で、４−（４−フルオロベンジル）モルホリン−２−イルメチルアミンの代わりに、これと等モル量の１−（２−アミノエチル）モルホリンを用いて標題の化合物（総収率：７４．８％）を得た。¹H NMR (CD₃OD) δ 8.12(d, 1H), 7.97(d, 1H), 7.86(d, 1H), 7.35(m, 5H), 6.54(m, 1H), 4.95(m, 1H), 3.71(t, 2H), 3.56(s, 2H), 3.38(d, 2H), 2.83(d, 2H), 2.53(m, 4H), 2.31(m, 2H), 2.02(d, 2H), 1.61(m, 2H) ppm。

実施例３７．Ｎ’−［２−（１−ベンジルピペリジン−４−イルアミノ）ピリジン−３−カルボニル］ヒドラジンカルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルの製造［４１０］

実施例３２と同様の方法で、４−（４−フルオロベンジル）モルホリン−２−イルメチルアミンの代わりに、これと等モル量のＢｏｃ−ヒドラジンを用いて標題の化合物（総収率：１９．３％）を得た。¹H NMR (CDCl₃) δ 8.13(m, 1H), 7.92(m, 1H), 7.36(m, 5H), 6.52(m, 1H), 3.98(m, 1H), 3.56(s, 2H), 2.86(d, 2H), 2.31(m, 2H), 2.02(m, 2H), 1.51(m, 11H) ppm。

実施例３８．メチル６−｛［２−（１−ベンジルピペリジン−４−イルアミノ）ピリジン−３−カルボニル］アミノ｝ニコチネートの製造［４１２］

実施例３２と同様の方法で、４−（４−フルオロベンジル）モルホリン−２−イルメチルアミンの代わりに、これと等モル量のメチル６−アミノニコチネートを用いて標題の化合物（総収率：２８．６％）を得た。¹H NMR (CDCl₃) δ 8.92(s, 1H), 8.63(s, 1H), 8.35(s, 1H), 8.29(d, 1H), 8.18(d, 1H), 7.78(d, 1H), 7.35(m, 5H), 6.53(m, 1H), 4.13(m, 1H), 3.97(s, 3H), 3.56(s, 2H), 2.86(d, 2H), 2.28(t, 2H), 2.09(d, 2H), 1.65(m, 2H) ppm。

実施例３９．２−（１−ベンジルピペリジン−４−イルアミノ）−Ｎ−（ｐ−トルエンスルホンアミノ）ニコチンアミドの製造［４２４］

実施例３２と同様の方法で、４−（４−フルオロベンジル）モルホリン−２−イルメチルアミンの代わりに、これと等モル量のｐａｒａ−トルエンスルホニルヒドラジンを用いて標題の化合物（総収率：３７．４％）を得た。¹H NMR (CDCl₃) δ 8.15(d, 1H), 7.82(d, 2H), 7.41-7.12(m, 7H), 6.35-6.27(m, 1H), 3.91-3.78(m, 1H), 3.51(s, 2H), 2.28(d, 2H), 2.41(s, 3H), 2.13(t, 2H), 1.89(d, 2H), 1.37-1.18(m, 2H) ppm。

実施例４０．２−（１−ベンジルピペリジン−４−イルアミノ）−Ｎ−（ピリジン−４−イルメチル）ニコチンアミドの製造［４２５］

実施例３２と同様の方法で、４−（４−フルオロベンジル）モルホリン−２−イルメチルアミンの代わりに、これと等モル量の４−アミノメチルピリジンを用いて標題の化合物（総収率：６７．８％）を得た。¹H NMR (CDCl₃) δ 8.46(m, 3H), 8.16(m, 2H), 7.72(m, 2H), 7.32-7.17(m, 5H), 6.39(m, 1H), 4.51(d, 2H), 4.01(m, 1H), 3.48(s, 2H), 2.78(d, 2H), 2.21(t, 2H), 1.98(d, 2H), 1.59 (m, 2H) ppm。

実施例４１．２−（１−ベンジルピペリジン−４−イルアミノ）−Ｎ−（１，２−ジフェニルエチル）ニコチンアミドの製造［４２６］

実施例３２と同様の方法で、４−（４−フルオロベンジル）モルホリン−２−イルメチルアミンの代わりに、これと等モル量の１，２−ジフェニルエチルアミンを用いて標題の化合物（総収率：８４．３％）を得た。¹H NMR (CDCl₃) δ 8.19(d, 1H), 7.98(d, 1H), 7.46-7.22(m, 15H), 7.11(d, 1H), 6.44(m, 1H), 6.25(d, 1H), 5.43(q, 1H), 4.01(m, 1H), 3.52(s, 2H), 3.20(dd, 2H), 2.81(d, 2H), 2.23(t, 2H), 2.02(d, 2H), 1.59(m, 2H) ppm。

実施例４２．２−（１−ベンジルピペリジン−４−イルアミノ）−Ｎ−（２−メトキシエチル）ニコチンアミドの製造［４２７］

実施例３２と同様の方法で、４−（４−フルオロベンジル）モルホリン−２−イルメチルアミンの代わりに、これと等モル量の２−メトキシエチルアミンを用いて標題の化合物（総収率：７７．４％）を得た。¹H NMR (CDCl₃) δ 8.17(s, 1H), 8.16(s, 1H), 7.55(d, 1H), 7.31(m, 5H), 6.60(br, 1H), 6.42(m, 1H), 4.02(m, 1H), 3.58-3.50(m, 6H), 3.35 (s, 3H), 2.79(d, 2H), 2.22(t, 2H), 2.01(d, 2H), 1.61(m, 2H) ppm。

実施例４３．２−（１−ベンジルピペリジン−４−イルアミノ）−Ｎ−（５−メチルチアゾール−２−イル)ニコチンアミドの製造［４２８］

実施例３２と同様の方法で、４−（４−フルオロベンジル）モルホリン−２−イルメチルアミンの代わりに、これと等モル量の２−アミノ−５−メチルチアゾールを用いて標題の化合物（総収率：１２．１％）を得た。¹H NMR (CDCl₃) δ 8.73(d, 1H), 8.19(d, 1H), 7.59(s, 1H), 7.32(m, 5H), 6.53(d, 1H), 4.19(m, 1H), 3.47(s, 2H), 2.82(d, 2H), 2.42(s, 3H), 2.24(t, 2H), 2.10(d, 2H), 1.70(m, 2H) ppm。

実施例４４．２−（１−ベンジルピペリジン−４−イルアミノ）−Ｎ−（３−メチルピリジン−２−イル）ニコチンアミドの製造［４２９］

実施例３２と同様の方法で、４−（４−フルオロベンジル）モルホリン−２−イルメチルアミンの代わりに、これと等モル量の２−アミノ−３−メチルピリジンを用いて標題の化合物（総収率：９．４％）を得た。¹H NMR (CDCl₃) δ 8.28(d, 1H), 8.27(s, 1H), 8.11(m, 1H), 7.89(m, 1H), 7.64(d, 1H), 7.32(m, 5H), 7.11(m, 1H), 6.52(m, 1H), 4.08(m, 1H), 3.54(s, 2H), 2.83(d, 2H), 2.34(s, 3H), 2.26(t, 2H), 2.06(d, 2H), 1.58(m, 2H) ppm。

実施例４５．２−（１−ベンジルピペリジン−４−イルアミノ）−Ｎ−（アゼパン−２−オン−３−イル）ニコチンアミドの製造［４３０］

実施例３２と同様の方法で、４−（４−フルオロベンジル）モルホリン−２−イルメチルアミンの代わりに、これと等モル量の３−アミノ−アゼパン−２−オンを用いて標題の化合物（総収率：５０．１％）を得た。¹H NMR (CDCl₃) δ 8.20(m, 2H), 7.69(d, 1H), 7.55(d, 1H), 7.33(m, 5H), 6.48(m, 1H), 6.14(m, 1H), 4.64(m, 1H), 4.06(m, 1H), 3.54(s, 2H), 3.32(m, 2H), 2.85(d, 2H), 2.32-1.43 (m, 12H) ppm。

実施例４６．２−（１−ベンジルピペリジン−４−イルアミノ）−Ｎ−（４−フルオロベンジル）ニコチンアミドの製造［４３１］

実施例３２と同様の方法で、４−（４−フルオロベンジル）モルホリン−２−イルメチルアミンの代わりに、これと等モル量の４−フルオロベンジルアミンを用いて標題の化合物（総収率：８１．１％）を得た。¹H NMR (CDCl₃) δ 8.19(m, 2H), 7.54(d, 1H), 7.30(m, 6H), 7.03(t, 2H), 6.50(br, 1H), 6.42(m, 1H), 4.05(m, 1H), 3.55(s, 2H), 2.83(d, 2H), 2.25(t, 2H), 2.05(d, 2H), 1.63(m, 2H) ppm。

実施例４７．２−（１−ベンジルピペリジン−４−イルアミノ）−Ｎ−（２−エチルヘキシル）ニコチンアミドの製造［４３６］

実施例３２と同様の方法で、４−（４−フルオロベンジル）モルホリン−２−イルメチルアミンの代わりに、これと等モル量の２−エチルヘキシルアミンを用いて標題の化合物（総収率：８９．４％）を得た。¹H NMR (CDCl₃) δ 8.27(d, 1H), 8.08(d, 1H), 7.51(d, 1H), 7.30(m, 5H), 6.44(m, 1H), 6.05(m, 1H), 4.02(m, 1H), 3.52(s, 2H), 3.34(t, 2H), 2.27(t, 2H), 2.06(d, 2H), 1.62(m, 2H), 1.45-1.36(m, 8H), 0.93(m, 6H) ppm。

実施例４８．２−（１−ベンジルピペリジン−４−イルアミノ）−Ｎ−（３−メチル−２−メチルスルファニル−３，４−ジヒドロキナゾリン−４−オン−６−イル）ニコチンアミドの製造［４３９］

実施例３２と同様の方法で、４−（４−フルオロベンジル）モルホリン−２−イルメチルアミンの代わりに、これと等モル量の製造例２０で得た６−アミノ−３−メチル−２−メチルスルファニル−３Ｈ−キナゾリン−４−オンを用いて標題の化合物（総収率：７７．０％）を得た。¹H NMR (DMSO-d₆) δ 8.28-7.95(m, 5H), 7.73-7.46(m, 6H), 6.72(m, 1H), 4.31(m, 1H), 3.53(s, 3H), 3.47(s, 2H), 3.24-3.11(m, 2H), 2.66(s, 3H), 2.58(m, 2H), 2.20(m, 2H), 1.78(m, 2H) ppm。

実施例４９．６−ベンジル−２−｛［２−（１−ベンジルピペリジン−４−イルアミノ）ピリジン−３−カルボニル］アミノ｝−４，５，６，７−テトラヒドロ−チエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３−カルボン酸メチルエステルの製造［４４０］

実施例３２と同様の方法で、４−（４−フルオロベンジル）モルホリン−２−イルメチルアミンの代わりに、これと等モル量の製造例２で得たメチル２−アミノ−６−ベンジル−４，５，６，７−テトラヒドロ−チエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３−カルボキシレートを用いて標題の化合物（総収率：８４．４％）を得た。¹H NMR (CDCl₃) δ 8.42(d, 1H), 8.28(d, 1H), 7.88(d, 1H), 7.35(m, 10H), 6.57(m, 1H), 4.12(m, 1H), 3.91(s, 3H), 3.72(s, 2H), 3.61(s, 2H), 3.55(s, 2H), 2.93-2.82(m, 6H), 2.27(t, 2H), 2.07(d, 2H), 1.67(m, 2H) ppm。

実施例５０．６−エトキシカルバメート−２−｛［２−（１−ベンジルピペリジン−４−イルアミノ）ピリジン−３−カルボニル］アミノ｝−４，５，６，７−テトラヒドロ−チエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３−カルボン酸メチルエステルの製造［４４１］

実施例３２と同様の方法で、４−（４−フルオロベンジル）モルホリン−２−イルメチルアミンの代わりに、これと等モル量の製造例３で得た２−アミノ−４，７−ジヒドロ−５Ｈ−チエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３，６−ジカルボン酸６−エチルエステル３−メチルエステルを用いて標題の化合物（総収率：８１．１％）を得た。¹H NMR (CDCl₃) δ 8.43(d, 1H), 8.26(d, 2H), 7.88(d, 1H), 7.41(m, 5H), 6.61(m, 1H), 4.58(s, 2H), 4.23-4.15(m, 3H), 3.91(s, 3H), 3.82(s, 2H), 3.73(st, 2H), 3.09(d, 2H), 2.90(t, 2H), 2.57(t, 2H), 2.20(d, 2H), 1.91(m, 2H) ppm。

実施例５１．２−｛［２−（１−ベンジルピペリジン−４−イルアミノ）ピリジン−３−カルボニル］アミノ｝−４，５，６，７−テトラヒドロ−チエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３−カルボン酸メチルエステルの製造［４４２］

実施例３２と同様の方法で、４−（４−フルオロベンジル）モルホリン−２−イルメチルアミンの代わりに、これと等モル量の製造例１で得たメチル２−アミノ−４，５，６，７−テトラヒドロ−チエン［２，３−ｃ］ピリジン−３−カルボキシレート塩酸塩を使用し、塩基として用いられたトリエチルアミンの当量を４．０ｅｑに増やすことにより、標題の化合物（総収率：８３．１％）を得た。¹H NMR (CDCl₃) δ 8.40(d, 1H), 8.20(d, 1H), 7.75(d, 1H), 7.25-7.18(m, 5H), 6.49(m, 1H), 4.07 (m, 1H), 3.82(m, 5H), 3.09-2.72(m, 6H), 2.22(t, 2H), 2.07(d, 2H), 1.64(m, 2H) ppm。

実施例５２．２−（１−ベンジルピペリジン−４−イルアミノ）−Ｎ−（３，４−ジメトキシフェニル）ニコチンアミドの製造［４４３］

実施例３２と同様の方法で、４−（４−フルオロベンジル）モルホリン−２−イルメチルアミンの代わりに、これと等モル量の３，４−ジメトキシアニリンを用いて標題の化合物（総収率：８９．９％）を得た。¹H NMR (CDCl₃) δ 8.23(d, 1H), 8.01(d, 1H), 7.68(d, 1H), 7.59(s, 1H), 7.34-7.25(m, 5H), 6.90(m, 2H), 6.51(m, 1H), 4.06(m, 1H), 3.91(s, 3H), 3.89(s, 3H), 3.52(s, 2H), 2.82(d, 2H), 2.24(t, 2H), 2.03(t, 2H), 1.61(m, 2H) ppm。

実施例５３．２−｛［２−（１−ベンジルピペリジン−４−イルアミノ）−６−クロロピリジン−３−カルボニル］アミノ｝−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３−カルボン酸メチルエステルの製造［５０１］

製造例１１で得た２−［（２，６−ジクロロピリジン−３−カルボニル）アミノ］−４，７−ジヒドロ−５Ｈ−チエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３，６−ジカルボン酸６−ｔｅｒｔ−ブチルエステル３−メチルエステル（５１０ｍｇ、１．０５ｍｍｏｌ、１．０５ｅｑ）、４−アミノ−１−ベンジルピペリジン（１．０ｍｍｏｌ）および無水炭酸カリウム（１．２ｍｍｏｌ）をオルソ−キシレンに入れ、２４時間還流攪拌した。反応混合物を常温に冷却し、濃い塩酸水溶液を加えた後、３時間さらに還流攪拌した。反応液を常温に冷却し、酢酸エチル１０ｍＬを投入した後、蒸留水２０ｍＬずつで２回抽出した。得られた水層をさらに酢酸エチル２０ｍｌで洗浄した後、２Ｎ水酸化ナトリウムを加えてｐＨが約９〜１０となるようにした。混合液を塩化メチレン２０ｍＬずつで２回抽出し、飽和食塩水３０ｍＬで洗浄した後、乾燥剤を用いて水分を除去した。減圧濃縮して溶媒を除去し、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（移動相＝１０（ｖ／ｖ）％メタノール含有クロロホルム）で得ようとする画分を分取し、標題の化合物を得た。収率：７２．３％、¹H NMR (DMSO-d₆) δ 7.46(d, 1H), 7.39(d, 1H), 7.32(m, 5H), 6.62(d, 1H), 6.41(d, 1H), 4.43(s, 2H), 3.83(m, 1H), 3.69(s, 2H), 3.59(m, 2H), 2.73(m, 4H), 2.08(t, 2H), 1.82(d, 2H), 1.51(m, 2H) ppm。

実施例５４．２−｛［２−（１−ベンジルピペリジン−４−イルアミノ）−６−クロロピリジン−３−カルボニル］アミノ｝−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３−カルボン酸メチルエステルの製造［５０２］

実施例５３と同様の方法で、２−［（２，６−ジクロロピリジン−３−カルボニル）アミノ］−４，７−ジヒドロ−５Ｈ−チエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３，６−ジカルボン酸６−ｔｅｒｔ−ブチルエステル３−メチルエステルの代わりに、これと等モル量の製造例１２で得た２−［（２，６−ジクロロ−５−フルオロ−ピリジン−３−カルボニル）アミノ］−４，７−ジヒドロ−５Ｈ−チエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３，６−ジカルボン酸６−ｔｅｒｔ−ブチルエステル３−メチルエステルを用いて標題の化合物を得た。総収率：５１．４％、¹H NMR (CDCl₃) δ 7.83(d, 1H), 7.34(m, 5H), 5.04(m, 1H), 4.06(m, 1H), 3.92(m, 5H), 3.54(s, 3H), 3.12(t, 2H), 2.88(m, 4H), 2.21(m, 2H), 2.07(m, 2H), 1.59(m, 2H) ppm。

実施例５５．２−｛［２−（１−（２−ヒドロキシエチル）ピペリジン−４−イルアミノ）ピリジン−３−カルボニル］アミノ｝−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３−カルボン酸メチルエステルの製造［５０３］

実施例５３と同様の方法で、２−［（２，６−ジクロロピリジン−３−カルボニル）アミノ］−４，７−ジヒドロ−５Ｈ−チエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３，６−ジカルボン酸６−ｔｅｒｔ−ブチルエステル３−メチルエステルの代わりに、これと等モル量の製造例１０で得た２−［（２−クロロピリジン−３−カルボニル）アミノ］−４，７−ジヒドロ−５Ｈ−チエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３，６−ジカルボン酸６−ｔｅｒｔ−ブチルエステル３−メチルエステルを使用し、４−アミノ−１−ベンジルピペリジンの代わりに、これと等モル量の製造例１７で得た４−アミノ−１−（２−ヒドロキシエチル）ピペリジンを用いて標題の化合物を得た。総収率：６７．７％、¹H NMR (CDCl₃) δ 8.52(m, 1H), 8.26(d, 1H), 7.88(d, 1H), 6.61(m, 1H), 4.26(m, 1H), 3.99-3.87(m, 5H), 3.73(t, 2H), 3.12(m, 2H), 2.98-2.80(m, 4H), 2.59-2.12(m, 6H), 1.68(m, 2H) ppm。

実施例５６．２−｛［６−クロロ−２−（１−（２−ヒドロキシエチル）ピペリジン−４−イルアミノ）ピリジン−３−カルボニル］アミノ｝−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３−カルボン酸メチルエステルの製造［５０４］

実施例５３と同様の方法で、４−アミノ−１−ベンジルピペリジンの代わりに、これと等モル量の製造例１７で得た４−アミノ−１−（２−ヒドロキシエチル）ピペリジンを用いて標題の化合物を得た。収率：７４．４％、¹H NMR (CDCl₃) δ 7.31(d, 1H), 6.55(d, 1H), 6.23(m, 1H), 6.09(br, 1H), 4.02(m, 1H), 4.82(s, 3H), 3.77(t, 2H), 3.64(t, 2H), 2.93-2.82(m, 4H), 2.58(d, 2H), 2.33(t, 2H), 2.11-1.75(m, 4H), 1.54(m, 2H) ppm。

実施例５７．２−｛［６−クロロ−５−フルオロ−２−（１−（２−ヒドロキシエチル）ピペリジン−４−イルアミノ）ピリジン−３−カルボニル］アミノ｝−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３−カルボン酸メチルエステルの製造［５０５］

実施例５３と同様の方法で、２−［（２，６−ジクロロピリジン−３−カルボニル）アミノ］−４，７−ジヒドロ−５Ｈ−チエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３，６−ジカルボン酸６−ｔｅｒｔ−ブチルエステル３−メチルエステルの代わりに、これと等モル量の製造例１２で得た２−［（２，６−ジクロロ−５−フルオロ−ピリジン−３−カルボニル）アミノ］−４，７−ジヒドロ−５Ｈ−チエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３，６−ジカルボン酸６−ｔｅｒｔ−ブチルエステル３−メチルエステルを使用し、４−アミノ−１−ベンジルピリジンの代わりに、これと等モル量の製造例１７で得た４−アミノ−１−（２−ヒドロキシエチル）ピペリジンを用いて標題の化合物を得た。収率：５０．３％、¹H NMR (CDCl₃) δ 7.83(d, 1H), 5.02(m, 1H), 4.06(m, 1H), 3.92(m, 5H), 3.62(t, 2H), 3.13(t, 2H), 2.96-2.81(m, 4H), 2.58(t, 2H), 2.34(t, 2H), 2.11(d, 2H), 1.58(m, 2H) ppm。

実施例５８．２−｛［２−（２，２，６，６−テトラメチルピペリジン−４−イルアミノ）ピリジン−３−カルボニル］アミノ｝−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３−カルボン酸メチルエステルの製造［５０６］

実施例５５と同様の方法で、４−アミノ−１−（２−ヒドロキシエチル）ピペリジンの代わりに、これと等モル量の４−アミノ−２，２，６，６−テトラメチルピペリジンを用いて標題の化合物を得た。収率：８６．０％、¹H NMR (CDCl₃) δ 8.33-8.24(m, 2H), 7.88(d, 1H), 6.58(m, 1H), 4.59(m, 1H), 3.92(m, 5H), 3.11(t, 2H), 2.78(st, 2H), 2.08(d, 2H), 1.33(s, 6H), 1.26-1.1(m, 8H) ppm。

実施例５９．２−｛［２−（２，２，６，６−テトラメチルピペリジン−４−イルアミノ）６−クロロピリジン−３−カルボニル］アミノ｝−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３−カルボン酸メチルエステルの製造［５０７］

実施例５３と同様の方法で、４−アミノ−１−ベンジルピペリジンの代わりに、これと等モル量の４−アミノ−２，２，６，６−テトラメチルピペリジンを用いて標題の化合物を得た。収率：７７．９％、¹H NMR (CDCl₃) δ 8.28(d, 1H), 7.42(d, 1H) 6.39(m, 1H), 6.15(m, 1H), 5.99(br, 1H), 4.39(m, 1H), 3.97-3.75(m, 5H), 3.52(m, 2H), 2.03 (m, 2H), 1.68(m, 2H), 1.42(s, 6H), 1.18(s, 6H) ppm。

実施例６０．２−｛［６−クロロ−５−フルオロ−２−（２，２，６，６−テトラメチルピペリジン−４−イルアミノ）ピリジン−３−カルボニル］アミノ｝−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３−カルボン酸メチルエステルの製造［５０８］

実施例５３と同様の方法で、２−［（２，６−ジクロロピリジン−３−カルボニル）アミノ］−４，７−ジヒドロ−５Ｈ−チエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３，６−ジカルボン酸６−ｔｅｒｔ−ブチルエステル３−メチルエステルの代わりに、これと等モル量の製造例１２で得た２−［（２，６−ジクロロ−５−フルオロ−ピリジン−３−カルボニル）アミノ］−４，７−ジヒドロ−５Ｈ−チエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３，６−ジカルボン酸６−ｔｅｒｔ−ブチルエステル３−メチルエステルを使用し、４−アミノ−１−ベンジルピペリジンの代わりに、これと等モル量の４−アミノ−２，２，６，６−テトラメチルピペリジンを用いて標題の化合物を得た。収率：４９．２％、¹H NMR (CDCl₃) δ 7.83(d, 1H), 4.91(m, 1H), 4.48(m, 1H), 3.92(m, 5H), 3.12(d, 2H), 2.80(m, 2H), 2.06(d, 2H), 1.33(s, 6H), 1.25(m, 2H), 1.17(s, 6H) ppm。

実施例６１．２−｛［２−（１−ベンジルピペリジン−３−イルアミノ）ピリジン−３−カルボニル］アミノ｝−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３−カルボン酸メチルエステルの製造［５０９］

実施例５５と同様の方法で、４−アミノ−１−（２−ヒドロキシエチル）ピペリジンの代わりに、これと等モル量の製造例１８で得た３−アミノ−１−ベンジルピペリジンを用いて標題の化合物を得た。収率：８０．１％、¹H NMR (CDCl₃) δ 8.52(m, 1H) 8.26(d, 1H), 7.83(d, 1H), 7.51- 7.11(m, 5H), 6.54(m, 1H), 4.38(m, 1H), 4.18(s, 2H), 3.89(s, 3H), 3.59(m, 2H), 3.33(d, 2H), 3.04(m, 2H), 2.74-2.43 (m, 4H), 1.89-1.64(m, 4H) ppm。

実施例６２．２−｛［２−（１−ベンジルピペリジン−３−イルアミノ）−６−クロロピリジン−３−カルボニル］アミノ｝−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３−カルボン酸メチルエステルの製造［５１０］

実施例５３と同様の方法で、４−アミノ−１−ベンジルピペリジンの代わりに、これと等モル量の製造例１８で得た３−アミノ−１−ベンジルピペリジンを用いて標題の化合物を得た。収率：７３．５％、¹H NMR (CDCl₃) δ 7.30(m, 6H), 6.55(m, 1H), 6.51(d, 1H), 6.09(br, 1H), 4.54(s, 2H), 4.23(m, 1H), 3.86-3.72(m, 5H), 3.49(m, 2H), 2.92 (t, 2H), 2.63-2.28(m, 4H), 1.80-1.59(m, 6H) ppm。

実施例６３．２−｛［２−（１−ベンジルピペリジン−３−イルアミノ）−６−クロロ−５−フルオロピリジン−３−カルボニル］アミノ｝−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３−カルボン酸メチルエステルの製造［５１１］

実施例５７と同様の方法で、４−アミノ−１−（２−ヒドロキシエチル）ピペリジンの代わりに、これと等モル量の製造例１８で得た３−アミノ−１−ベンジルピペリジンを用いて標題の化合物を得た。収率：５３．７％、¹H NMR (CDCl₃) δ 7.83(d, 1H), 7.34(m, 5H), 5.89(m, 1H), 4.33(m, 1H), 3.92(m, 5H), 3.51(m, 2H), 3.12(t, 2H), 2.81(t, 2H), 2.74-2.48(m, 2H), 2.34-2.15(m, 2H), 1.80-1.62(m, 4H) ppm。

実施例６４．６−クロロ−Ｎ−（２−エチルヘキシル）−２−［１−（２−ヒドロキシエチル）ピペリジン−４−イルアミノ］ニコチンアミドの製造［５１５］

製造例１４で得た２，６−ジクロロ−Ｎ−（２−エチルヘキシル）−ニコチンアミド（３１８ｍｇ、１．０５ｍｍｏｌ、１．０５ｅｑ）、製造例１７で得た４−アミノ−１−（２−ヒドロキシエチル）ピペリジン（１．０ｍｍｏｌ）および無水炭酸カリウム（１．２ｍｍｏｌ）をオルト−キシレン５ｍＬに入れ、２４時間還流攪拌した。反応混合物を常温に冷却し、酢酸エチル１５ｍＬを投入した後、１Ｎ塩酸水溶液３０ｍＬずつで２回抽出した。得られた水層をさらに酢酸エチルで洗浄した後、２Ｎ水酸化ナトリウム水溶液を加えてｐＨが約９〜１０となるようにした。混合液を塩化メチレン２０ｍＬで２回抽出し、飽和食塩水で洗浄した後、乾燥剤を用いて水分を除去した。減圧濃縮して溶媒を除去し、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（移動相：２０（ｖ／ｖ）％ＥＡ含有ヘキサン）で得ようとする画分を分取し、標題の化合物を得た。収率：７７．９％、¹H NMR (CDCl₃) δ 8.35(d, 1H), 7.45(d, 1H), 6.44(d, 1H), 6.01(br, 1H), 4.03(m, 1H), 3.62(t, 2H), 3.32(t, 2H), 2.87(d, 2H), 2.56(t, 2H), 2.33(t, 2H), 2.07(d, 2H), 1.59(m, 2H), 1.42-1.16(m, 8H), 0.98-0.91(m, 6H) ppm。

実施例６５．Ｎ−（２−エチルヘキシル）−２−（２，２，６，６−テトラメチルピペリジン−４−イルアミノ）ニコチンアミドの製造［５１７］

実施例６４と同様の方法で、２，６−ジクロロ−Ｎ−（２−エチルヘキシル）ニコチンアミドの代わりに、これと等モル量の製造例１３で得た２−クロロ−Ｎ−（２−エチルヘキシル）ニコチンアミドを使用し、４−アミノ−１−（２−ヒドロキシエチル）ピペリジンの代わりに、これと等モル量の４−アミノ−２，２，６，６−テトラメチルピペリジンを用いて標題の化合物を得た。収率：８４．４％、¹H NMR (CDCl₃) δ 8.13(d, 1H), 7.82(d, 1H), 7.49(d, 1H), 6.40(m, 1H), 6.21(br, 1H), 4.44(m, 1H), 3.26(t, 2H), 1.98(dd, 2H), 1.49(m, 1H), 1.22(m, 14H), 1.07(m, 8H), 0.89-0.81(m, 6H) ppm。

実施例６６．６−クロロ−Ｎ−（２−エチルヘキシル）−５−フルオロ−２−（２，２，６，６−テトラメチルピペリジン−４−イルアミノ）ニコチンアミドの製造［５１９］

実施例６４と同様の方法で、２，６−ジクロロ−Ｎ−（２−エチルヘキシル）ニコチンアミドの代わりに、これと等モル量の製造例１５で得た２，６−ジクロロ−Ｎ−（２−エチルヘキシル）−５−フルオロニコチンアミドを使用し、４−アミノ−１−（２−ヒドロキシエチル）ピペリジンの代わりに、これと等モル量の４−アミノ−２，２，６，６−テトラメチルピペリジンを用いて標題の化合物を得た。収率：６１．７％、¹H NMR (CDCl₃) δ 7.85(d, 1H), 7.34(d, 1H), 4.37(m, 1H), 3.42-3.28(m, 2H), 2.02(dd, 2H), 1.53(m, 1H), 1.30(m, 14H), 1.13(m, 8H), 1.01-0.87(m, 6H) ppm。

実施例６７．２−（１−ベンジルピペリジン−３−イルアミノ）−Ｎ−（２−エチルヘキシル）ニコチンアミドの製造［５２０］

実施例６５と同様の方法で、４−アミノ−２，２，６，６−テトラメチルピペリジンの代わりに、これと等モル量の製造例１８で得た３−アミノ−１−ベンジルピペリジンを用いて標題の化合物を得た。収率：８７．３％、¹H NMR (CDCl₃) δ 8.29(d, 1H), 8.15(d, 1H), 7.53(d, 1H), 7.41-7.21(m, 5H), 6.40(m, 1H), 6.31(br, 1H), 4.28(m, 1H), 3.48(s, 2H), 3.34(m, 2H), 2.90-2.27(m, 5H), 1.86-1.54(m, 4H), 1.41-1.22(m, 8H), 0.95-0.90(m, 6H) ppm。

実施例６８．２−（１−ベンジルピペリジン−３−イルアミノ）−６−クロロ−Ｎ−（２−エチルヘキシル）−５−フルオロニコチンアミドの製造［５２２］

実施例６６と同様の方法で、４−アミノ−２，２，６，６−テトラメチルピペリジンの代わりに、これと等モル量の製造例１８で得た３−アミノ−１−ベンジルピペリジンを用いて標題の化合物を得た。収率：７０．２％、¹H NMR (CDCl₃) δ 7.83(d, 1H), 7.31(m, 5H), 6.94(m, 1H), 5.70(br, 1H), 4.29(m, 1H), 3.52(d, 2H), 3.41(t, 2H), 2.68-2.52(m, 3H), 1.73-1.56(m, 4H), 1.33-1.21(m, 8H), 0.93-0.87(m, 6H) ppm。

＜実験例＞
以下、下記の実験例の結果に表示された「＃」は、無処置対照群と比較してｐ＜０．０５を意味し、「＊」はＶＥＧＦで刺激されたＨＵＶＥＣグループと比較して(VEGF-stimulated HUVEC group)ｐ＜０．０５を意味し、「＊＊」はＶＥＧＦで刺激されたＨＵＶＥＣグループと比較してｐ＜０．０１を意味し、「＊＊＊」はＶＥＧＦで刺激されたＨＵＶＥＣグループと比較してｐ＜０．００１を意味する。このような統計学的有意性はＡＮＯＶＡａｎｄＤｕｎｎｅｔｔ’ｓｐｏｓｔ−ｈｏｃｔｅｓｔを用いて決定した。

＜実験例１＞細胞生存率の測定−ＭＴＳアッセイ
１）方法
ＤＭＥＭｍｅｄｉａ（Ｄｕｌｂｅｃｏ’ｓＭｏｄｉｆｉｅｄＥａｇｌｅ’ｓＭｅｄｉｕｍ、Ｇｉｂｃｏ＃１１８８５）で培養したＡ−４３１（ヒト黒色腫、ＡＴＣＣＣＲＬ−１５５５^ＴＭ）細胞株を９６ウェルプレートにウェル当たり１×１０^４個となるように接種した後、３７℃、５％ＣＯ_２培養条件で１８時間細胞がプレートの底部に安定的に付着するまで培養した。試験物質であるｓｕｎｉｔｉｎｉｂ（保寧製薬合成研究所で合成）（１００、５０、２５、１２．５、６．２５、３．１２５、１．５６、０．７８μＭ）、化学式Ｉの化合物（１００、５０、２５、１２．５、６．２５、３．１２５、１．５６、０．７８μＭ）、ｃｏｎｔｒｏｌ（培地）を系列希釈して９６ウェルプレートに処理した。試験物質で処理した細胞を４８時間培養した後、細胞生存率(cell viability)を測定した。

各試験物質が入っているウェルにＭＴＳ溶液［（３−（４，５−ジメチルチアゾール−２−イル）−５−（３−カルボキシメトキシフェニル）−２−（４−スルホフェニル）−２Ｈ−テトラゾリウム）、Ｐｒｏｍｅｇａ，Ｃａｔ＃Ｇ５４２１、２ｍｇ／ｍＬ］とＰＭＳ溶液［フェナジンメトサルフェート(Phenazine methosulfate)、Ｓｉｇｍａ＃Ｐ９６２５、１ｍｇ／ｍＬ］の２０：１（ｖ／ｖ）混合物を２１μＬ加えて２時間培養した後、マイクロプレートリーダー(Microplate reader)（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒｄｅｖｉｃｅ、ｓｐｅｃｔｒａＭａｘＭ２）を用いて、４９０ｎｍで生成されたホルマザン(formazan)の量を測定し、ｃｏｎｔｒｏｌ（ｍｅｄｉａ処理群）の生存率(viability)と比較して各ｄｒｕｇの濃度による相対生存率(relative viability)を測定した。その結果は表２のとおりである。

２）結果
試験物質およびこれらの処理濃度：
−陰性対照群(control)：培地(media)
−陽性対照群：ｓｕｎｉｔｉｎｉｂ、１００、５０、２５、１２．５、６．２５、３．１２５、１．５６、０．７８μＭ
−化学式Ｉの化合物：１００、５０、２５、１２．５、６．２５、３．１２５、１．５６、０．７８μＭ

表２に示すように、化学式Ｉの化合物は、末期腎臓癌に対する抗癌剤として用いられるｓｕｎｉｔｉｎｉｂに類似する或いはそれより高いＩＣ_５０値を持っており、より毒性が低くて安全な化合物であることが分かる。

＜実験例２＞ＨＵＶＥＣｓにおいてＶＥＧＦによって増加した細胞移動（cell migration）抑制効果
２−１．トランスウェルアッセイ(Transwell assay)
１）方法
上記の実施例で得た化合物がＨＵＶＥＣｓ（血管内皮細胞）においてＶＥＧＦ（Vascular endothelial growth factor、血管内皮細胞増殖因子）により誘導された細胞の移動を抑制するかを調べるために、ｔｒａｎｓｗｅｌｌを用いて次のような実験を行った。
ＨＵＶＥＣｓは、ＡＴＣＣ(American Type Culture Collection)から提供を受け、１０％ＦＢＳ、フェニシリン（１００ｕｎｉｔ／ｍＬ）および１００μｇ／ｍＬの硫酸ストレプトマイシン(streptomycin sulfate)と、様々な成長因子(growth factor)を含むＥＧＭ−２培地(Endothelial growth Medium-2 Medium)に３７℃、５％ＣＯ_２の条件で培養し、成長因子の除去されたＥＢＭ−２培地(Endothelial Basal Medium-2 Medium)で次のような実験に使用した。ＤＭＳＯ(dimethylsulfoxide)に溶解した様々な濃度の試験化合物（化合物１０３番、１１０番、２１８番、２７３番、２７５番、２７６番、２９０番、３１２番、４２８番、４４２番、５０９番、ｓｕｎｉｔｉｎｉｂ）はＶＥＧＦと共に添加した。
２４−ｔｒａｎｓｗｅｌｌｐｌａｔｅに培養したＨＵＶＥＣｓ細胞を細胞濃度２×１０^５ｃｅｌｌｓ／ｗｅｌｌで分注した。Ｓｕｎｉｔｉｎｉｂ（１μＭ）、化学式Ｉの化合物で適正な濃度別に１時間前処理した後、細胞の成長および増殖を誘導するＶＥＧＦ１０ｎｇ／ｍＬで２４時間処理した。
２４時間後に細胞をエタノールで１分間固定した後、染色試薬を用いて細胞を染色した。Ｔｒａｎｓｗｅｌｌ内にある孔へ移動した細胞数を数えて細胞の移動を評価した。
また、化合物１０３番、１１０番、２１８番、２７３番、２７５番、２７６番、２９０番、３１２番、４２８番、４４２番、５０９番で細胞を処理したのと同様に、化合物２５０番（実施例２６）を用いて、表４に記載された様々な濃度で細胞を処理した後、化合物１０３番、１１０番、２１８番、２７３番、２７５番、２７６番、２９０番、３１２番、４２８番、４４２番、５０９番で処理した場合と同様に前記細胞の移動を評価した。また、その結果を、何によっても処理していない場合(no treat)およびＶＥＧＦ１０ｎｇ／ｍＬのみで処理した場合と比較した。

２）結果
その結果は、膜を通過して移動したＨＵＶＥＣｓの平均数値（ｎ＝３）で示し、化合物１０３番、１１０番、２１８番、２７３番、２７５番、２７６番、２９０番、３１２番、４２８番、４４２番、５０９番に対する実験結果は下記表３のとおりであり、化合物２５０番に対する結果は表４のとおりである。

表３および表４に示すように、化学式Ｉの化合物は、ＶＥＧＦにより誘導されたＨＵＶＥＣｓの移動を抑制する効果を示した。しかも、化学式Ｉの化合物のうち、１０３番の化合物は、抗癌剤であるＳｕｎｉｔｉｎｉｂより、ＶＥＧＦにより誘導されたＨＵＶＥＣｓの移動を抑制する効果にさらに優れることを確認した。また、化合物２５０番は、最も低い濃度でも、ＶＥＧＦにより誘導されたＨＵＶＥＣｓの移動を抑制する効果に顕著に優れていた。

２−２．創傷治癒アッセイ(Wound healing assay)
１）方法
ＨＵＶＥＣｓを滅菌済みの使い捨て用細胞擦過器（ＢＤＦａｌｃｏｎ、Ｂｅｄｆｏｒｄ、ＵＳＡ）をもって細胞断層を擦過させた後、ＰＢＳで細胞を柔らかく洗浄する。ｓｕｎｉｔｉｎｉｂ（１μＭ）、化合物−１０３（０．１、０．５、１μＭ）で適正な濃度別に１時間前処理した後、ＶＥＧＦ１０ｎｇ／ｍＬで２４時間処理した。２４時間後、擦過された細胞断層からの細胞移動状態を顕微鏡で観察し、顕微鏡内のカメラ（ＣａｎｏｎＰｏｗｅｒｓｈｏｔ６４０）を用いて写真撮影した。
また、前記化合物１０３番で細胞を処理したのと同様に、化合物２５０番（実施例２６）を用いて、表６に記載された多様な濃度で細胞を処理し、ＶＥＧＦを処理した後、化合物１０３番で処理した場合と同一の方法で前記細胞の移動状態を顕微鏡で観察し、顕微鏡内のカメラを用いて写真撮影した。また、前記結果を、何によっても処理していない場合（対照群）およびＶＥＧＦ１０ｎｇ／ｍＬのみで処理した場合と比較した。

２）結果
化合物１０３番に対する結果は表５および図１のとおりであり、化合物２５０番に対する結果は表６および図２のとおりである。

表５に示すように、化合物１０３が、ＶＥＧＦにより誘導されたＨＵＶＥＣｓの移動を抑制する効果を有することを確認し、Ｓｕｎｉｔｉｎｉｂと比較して、ＶＥＧＦにより誘導されたＨＵＶＥＣｓ移動の抑制効果にさらに優れることを確認した。
また、表６に示すように、化合物２５０番も、ＶＥＧＦにより誘導されたＨＵＶＥＣｓの移動を抑制する効果を有することを確認し、また、ｎＭの最も低い濃度でＨＵＶＥＣｓ移動の抑制効果に優れることを確認した。

＜実験例３＞ＨＵＶＥＣｓにおいてＶＥＧＦによって増加した細胞増殖(cell proliferation)阻害効果(BrdU incorporation assay)
１）方法
ＨＵＶＥＣｓにおいてＶＥＧＦにより誘導されたＤＮＡ合成による細胞増殖がＢＲＮ−１０３によって阻害されるかを、ＢｒｄＵｉｎｃｏｒｐｏｒａｉｏｎａｓｓａｙを用いて調べた。９６ウェルプレートに、実験例２に従って培養したＨＵＶＥＣｓ細胞を細胞濃度１×１０^４ｃｅｌｌｓ／ｗｅｌｌで分注した。Ｓｕｎｉｔｉｎｉｂ（１μＭ）、化合物−１０３（０．１、０．５、１μＭ）で適正な濃度別に１時間前処理した後、ＶＥＧＦ１０ｎｇ／ｍＬで２４時間処理した。２４時間後、ＢｒｄＵｉｎｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎａｓｓａｙｋｉｔ（Ｒｏｃｈｅ）を用いて細胞内のＤＮＡ合成量を蛍光により測定した。
また、化合物１０３番で細胞を処理したのと同様に、化合物２５０番（実施例２６）を用いて、表８に記載された多様な濃度で細胞を処理し、ＶＥＧＦで処理した後、化合物１０３番で細胞を処理した場合と同様に前記細胞内のＤＮＡ合成量を測定した。また、前記結果を、何によっても処理していない場合（対照群）およびＶＥＧＦ１０ｎｇ／ｍＬのみで処理した場合と比較した。

２）結果
化合物１０３番に対する結果は表７のとおりであり、化合物２５０番に対する結果は表８のとおりである。

表７に示すように、ＶＥＧＦにより誘導されたＨＵＶＥＣｓの増殖(proliferation)は、化合物１０３によって濃度依存的に阻害された。また、本発明の化合物１０３はＳｕｎｉｔｉｎｉｂよりさらに良い阻害効果を示した。
また、表８に示すように、化合物２５０番も、ＶＥＧＦにより誘導されたＨＵＶＥＣｓの増殖を阻害した。また、化合物２５０番は、ｎＭの最も低い濃度でも、ＶＥＧＦにより誘導されたＨＵＶＥＣｓの増殖(Proliferation)に対して優れた阻害効果を示した。

＜実験例４＞ＨＵＶＥＣｓにおいてＶＥＧＦにより誘導されたＴｕｂｅｆｏｒｍａｔｉｏｎ抑制効果(ex vivo capillary structure formation assay)
１）方法
ＨＵＶＥＣｓをＳｕｎｉｔｉｎｉｂ（１μＭ）、化合物−１０３（０．１、０．５、１μＭ）で適正な濃度別に１時間前処理する。１時間後、マトリゲル（Matrigel）が敷かれている４８ウェルプレートに細胞濃度３×１０^５ｃｅｌｌｓ／ｗｅｌｌで分注した後、ＶＥＧＦ１０ｎｇ／ｍＬで４時間処理した。Ｔｕｂｅを形成するＨＵＶＥＣｓを、顕微鏡内にあるカメラで撮影した。
また、化合物１０３番で細胞を処理したのと同様に、化合物２５０番（実施例２６）を用いて、表１０に記載された多様な濃度で細胞を処理し、ＶＥＧＦで処理した後、化合物１０３番で細胞を処理した場合と同様に、Ｔｕｂｅを形成するＨＵＶＥＣｓを顕微鏡内にあるカメラで撮影した。

２）結果
化合物１０３番に対する結果は図３および表９のとおりであり、化合物２５０番に対する結果は図４および表１０のとおりである。

表９に示すように、ＶＥＧＦにより誘導されたＴｕｂｅｆｏｒｍａｔｉｏｎは、化合物１０３によって抑制されることを確認することができる。これは、ＶＥＧＦにより誘導された新生血管を遮断することを意味する。また、化合物１０３は、Ｓｕｎｉｔｉｎｉｂと比較して、Ｔｕｂｅｆｏｒｍａｔｉｏｎの抑制効果に優れることが確認された。
また、表１０に示すように、ＶＥＧＦにより誘導されたＴｕｂｅｆｏｒｍａｔｉｏｎは、化合物２５０番によって抑制された。これは、化合物２５０番もＶＥＧＦにより誘導された新生血管を遮断することを示唆する。特に、化合物２５０番は、低濃度でもＴｕｂｅｆｏｒｍａｔｉｏｎの抑制効果に優れることが確認された。

＜実験例５＞マウス大動脈（Mouse aortic）におけるＶＥＧＦにより誘導されたｓｐｒｏｕｔｉｎｇ抑制効果
５−１ｅｘｖｉｖｏｍｉｃｒｏｖｅｓｓｅｌｓｐｒｏｕｔｉｎｇａｓｓａｙ
１）方法
５週齢のＣ５７ＢＬ／６マウスから摘出した大動脈分節をマトリゲルの敷かれている４８ウェルプレート上に置き、Ｓｕｎｉｔｉｎｉｂ（１μＭ）、化合物−１０３（０．１、０．５、１μＭ）で適正な濃度別に１時間前処理した後、ＶＥＧＦ１０ｎｇ／ｍＬで７日間処理した。大動脈端部のｓｐｒｏｕｔｓは顕微鏡内の写真機によって撮影した。
また、化合物１０３番で大動脈分節を処理したのと同様に、２５０番の化合物（実施例２６）を用いて多様な濃度（１０ｎＭ、５０ｎＭ、１００ｎＭ）で６週齢のｓｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙｒａｔから摘出した大動脈分節を処理し、ＶＥＧＦで処理した後、化合物１０３番で大動脈を処理した場合と同様に、大動脈端部のｓｐｒｏｕｔｓを顕微鏡内の写真機によって撮影した。

２）結果
図５および図６に示すように、ＶＥＧＦにより誘導された大動脈のｓｐｒｏｕｔｓが化合物１０３および２５０番によって減少することを確認した。
特に、化合物２５０番は、ｎＭの低い濃度でも効果的に大動脈のｓｐｒｏｕｔｓを減少させることを確認することができた。

＜実験例６＞ＨＵＶＥＣｓにおけるＶＥＧＦにより活性化されたＶＥＧＦＲ２の阻害効果（ウェスタンブロット解析（Western blot analysis））

１）方法
前記実施例の化合物のＶＥＧＦにより誘導されたＶＥＧＦＲ２の活性に本発明の化学式Ｉの化合物が及ぼす影響を確認するために、次のような方法で実験を行った。
ＨＵＶＥＣｓをＳｕｎｉｔｉｎｉｂ（１μＭ）、化合物−１０３（０．１、０．５、１μＭ）で適正な濃度別に１時間前処理し、ＶＥＧＦ（１０ｎｇ／ｍＬ）で５分間処置した後、４０００ｒｐｍで３分間遠心分離して細胞を集め、ＰＢＳ(phosphate buffered saline)で１回洗浄した。洗浄したペレットはロイペプチン(leupeptin)とアプロチニン(aprotinin)をそれぞれ５μＬ／ｍＬずつ含んでいる溶解緩衝液（５０ｍＭＨＥＰＥＳｐＨ７．０、２５０ｍＭＮａＣｌ、５ｍＭＥＤＴＡ、０．１％ＮｏｎｉｄｅｔＰ−４０、１ｍＭのフッ化フェニルメチルスルホニルおよび０．５ｍＭのオルトバナジン酸ナトリウム）で懸濁し、４℃で２０分間反応させた。細胞残骸物を微細遠心分離機で分離して除去した後、上清液を急冷した。Ｂｉｏ−Ｒａｄタンパク質分析試薬を用いてタンパク質の濃度を測定した。各試験群の４０μｇの細胞タンパク質を１０％ＳＤＳ−ＰＡＧＥによって電気泳動し、ＰＶＤＦメンブランに電気ブロットした。
免疫ブロット法では、４℃のブロッキング溶液（５％脱脂粉乳）で一晩反応させた後、１次抗体を加えて４時間反応させた。その後、Ｔｗｅｅｎ２０／Ｔｒｉｓ−ｂｕｆｆｅｒｅｄｓａｌｉｎｅ（ＴＴＢＳ）溶液で４回洗浄し、西洋ワサビペルオキシダーゼ結合２次抗体の１：１０００（ｖ／ｖ）の希釈液で常温で１時間反応させ、さらにＴＴＢＳで３回洗浄した後、化学的発光方法（ＡｍｅｒｓｈａｍＬｉｆｅＳｃｉｅｎｃｅ）で確認した。
また、化合物１０３番で細胞を処理したのと同様に、化合物２５０番（実施例２６）を用いて多様な濃度（１０ｎＭ、５０ｎＭ、１００ｎＭ）で細胞を処理し、ＶＥＧＦで処理した後、化合物１０３番で細胞を処理した場合と同様にＶＥＦＧＲ２の阻害効果を確認した。

２）結果
化合物１０３番に対する結果は図７のとおりであり、化合物２５０番に対する結果は図８のとおりである。
図７および図８において、「−」は左側に記載された成分が添加されないことを意味し、「＋」は左側に記載された成分が添加されたことを意味する。図７および図８に示すように、ＶＥＧＦによってｐ−ＶＥＧＦＲ（Ｔｒｙ−１１７５）タンパク質の発現が増加し、本発明の化学式Ｉの化合物とＳｕｎｉｔｉｎｉｂの前処理により、ｐ−ＶＥＧＦＲ（Ｔｙｒ−１１７５）タンパク質の発現が抑制された。よって、６−ＨＭＡは、ＰＧＥ_２合成酵素であるＣＯＸ−２のタンパク質発現を抑制することによりＰＧＥ_２の生成を阻害させることを確認した。したがって、本発明の化学式Ｉの化合物は、ＨＵＶＥＣｓにおいて細胞の移動および増殖に重要に関与するＶＥＧＦＲ２のメカニズムによって細胞の移動および増殖を抑制することが確認された。

＜実験例７＞ＨＵＶＥＣｓにおけるＶＥＧＦにより活性化されたＡＫＴ／ＥＲＫとｅＮＯＳの阻害効果（ウェスタンブロット解析（Western blot analysis））
１）方法
前記実施例の化合物のＶＥＧＦにより誘導されたＡＫＴ(serine/threonine protein kinase B)／ＥＲＫ(Extracellular signal-regulated kinases)とｅＮＯＳ(endothelial nitric oxide synthase)の活性に、本発明の化学式の化合物が及ぼす影響を確認するために、次のような方法で実験を行った。
ＨＵＶＥＣｓをｓｕｎｉｔｉｎｉｂ（１μＭ）、化合物１０３（０．１、０．５、１、１０μＭ）で適正な濃度別に１時間前処理した後、ＶＥＧＦ（１０ｎｇ／ｍＬ）で１０分（ｐ−ＥＲＫ）、３０分（ｐ−ＡＫＴ）および１時間（ｐ−ｅＮＯＳ）処置した後、４０００ｒｐｍで３分間遠心分離して細胞を集め、ＰＢＳ(phosphate buffered saline)で１回洗浄した。洗浄されたペレットはロイペプチン(leupeptin)とアプロチニン(aprotinin)をそれぞれ５μＬ／ｍＬずつ含んでいる溶解緩衝液（５０ｍＭＨＥＰＥＳｐＨ７．０、２５０ｍＭＮａＣｌ、５ｍＭＥＤＴＡ、０．１％ＮｏｎｉｄｅｔＰ−４０、１ｍＭのフッ化フェニルメチルスルホニルおよび０．５ｍＭのオルトバナジン酸ナトリウム）で懸濁し、４℃で２０分間反応させた。細胞残骸物を微細遠心分離機で分離して除去した後、上清液を急冷した。
Ｂｉｏ−Ｒａｄタンパク質分析試薬を用いてタンパク質の濃度を測定した。各試験群の４０μｇの細胞タンパク質を１０％ＳＤＳ−ＰＡＧＥによって電気泳動し、ＰＶＤＦメンブランに電気ブロットした。
免疫ブロット法では、４℃のブロッキング溶液（５％脱脂粉乳）で一晩反応させた後、１次抗体を加えて４時間反応させた。その後、Ｔｗｅｅｎ２０／Ｔｒｉｓ−ｂｕｆｆｅｒｅｄｓａｌｉｎｅ（ＴＴＢＳ）溶液で４回洗浄し、西洋ワサビペルオキシダーゼ結合２次抗体の１：１０００（ｖ／ｖ）の希釈液で常温で１時間反応させ、さらにＴＴＢＳで３回洗浄した後、化学的発光方法（ＡｍｅｒｓｈａｍＬｉｆｅＳｃｉｅｎｃｅ）で確認した。３回実験した結果のうち代表的な結果値を図５に示した。

２）結果
図９において、「−」は左側に記載された成分が添加されないことを意味し、「＋」は左側に記載された成分が添加されたことを意味する。実験結果では、図５に示すように、ＶＥＧＦによって１０分でｐ−ＥＲＫと３０分でｐ−ＡＫＴのタンパク質の発現が増加した。本発明の化合物１０３を前処理した結果、ｐ−ＡＫＴタンパク質の発現は抑制されたが、ｐ−ＥＲＫタンパク質の発現は抑制されなかった。これに対し、Ｓｕｎｉｔｉｎｉｂを前処理した結果、ｐ−ＡＫＴとｐ−ＥＲＫタンパク質の発現が抑制されることを確認した。また、ＡＫＴとＥＲＫの下位機序であるｐ−ｅＮＯＳの発現は、化合物１０３とＳｕｎｉｔｉｎｉｂを前処理したグループのすべてで減少することを確認することができる。よって、本発明の化学式の化合物は、Ｓｕｎｉｔｉｎｉｂとは異なる機序を介して、ＨＵＶＥＣｓにおいて細胞の移動および増殖に関与するｅＮＯＳの活性を抑制することにより、細胞の移動および増殖を抑制することが確認された。

Claims

化学式Ｉの化合物、またはその薬学的に許容される塩：
式中、Ｘ_１およびＸ_２はそれぞれ独立してハロゲン（Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ）または水素であり、
Ｙは−ＮＨ−、−Ｓ−または−Ｏ−であり、
Ｒ_１はベンジル、フェニルオキシ、１−（１−ピリミジンエチル）、ピリジンメチル、Ｃ_１−４アルキル、Ｃ_３−６アルケン、ｔ−ブトキシカルボニルおよびマロン−２−イルの中から選ばれる１〜５個で置換されたピペリジニルまたはピペラジニル；ピペリジン−４−イル；またはピペリジン−３−イルであり、
ここで、Ｃ_１−４アルキルはＲ_３Ｒ_４Ｎ−、ヒドロキシ基およびハロゲンの中から選ばれる０〜３個で置換されたものであり、Ｒ_３およびＲ_４はそれぞれ独立してＣ_１−４アルキルであり、
ここで、ベンジル、フェニルオキシ、ピリミジンエチルおよびピリジンメチルはハロゲンで０〜４個置換されたものであり、
Ｒ_２はハロゲンで０〜３個置換されたベンジルによって０〜３個置換されたモルホリニル、ハロゲンによって０〜３個置換されたフェニル、ピリジニル、ピリミジニル、ピペリジニルおよびピペラジニルの中から選ばれる１または２個で置換されたＣ_１−４アルキル；Ｃ_５−１０アルキル；Ｃ_１−４アルキルオキシカルボニルアミノ；Ｃ_１−４アルコキシＣ_１−４アルキル；トルエンスルホンアミノ；Ｃ_１−４アルキル、ハロゲン、ニトロおよびフェノキシの中から選ばれる０〜３個で置換されたフェニル；Ｃ_１−４アルキルオキシカルボニルおよびＣ_１−４アルキルの中から選ばれる０〜３個で置換されたピリジニル；アゼパン−２−オンイル；１，３，４−トリアゾリル；Ｃ_１−４アルキルによって０〜３個置換されたピリミジニル；ピロリジニル；Ｃ_１−４アルキルによって０〜２個置換されたチアゾリル；Ｃ_１−４アルキルによって０〜３個置換された２，３−ジヒドロキシインドル；
であり、
ここで、Ｒ_５およびＲ_６は独立してＣ_１−４アルキル、Ｃ_１−４アルキルスルファニルまたはチオールであり、
Ｒ_７およびＲ_８は独立してＣ_１−４アルキルオキシカルボニル基、フェニルまたはベンジルである。
前記Ｒ_１が１−ベンジルピペリジン−４−イル；１−ベンジルピペリジン−３−イル；１−（２−ヒドロキシエチル）−ピペリジン−４−イル；１−（２−ヒドロキシエチル）−ピペリジン−３−イル；１−（２−ヒドロキシエチル）−ピペラジ−４−イル；２，２，６，６−テトラメチルピペリジン−４−イル；ｔ−ブトキシカルボニルピペリジン−４−イル；ｔ−ブトキシカルボニルピペリジン−３−イル；メチルピペリジン−４−イル；メチルピペラジン−４−イル；ピペリジン−４−イル；ピペリジン−３−イル；１−（２−ヒドロキシエチル）−２，２，６，６−テトラメチルピペリジン−４−イル；１−アリルピペリジン−４−イル；［２−（Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノ）エチル］ピペリジン−４−イル；（ｔ−ブチルオキシカルボニル）ピペリジン−３−イル；（マロン−２−イル）ピペリジン−４−イル；（ピリジン−２−イル）メチルピペリジン−４−イル；（ピリジン−３−イル）メチルピペリジン−４−イル；または１−（６−クロロ−５−フルオロピリミジン−４−イル）エチルピペリジン−４−イルである、請求項１に記載の化学式Ｉの化合物またはその薬学的に許容される塩。
前記Ｒ_１が１−ベンジルピペリジン−４−イル；１−ベンジルピペリジン−３−イル；１−（２−ヒドロキシエチル）−ピペリジン−４−イル；ピペリジン−３−イル；またはｔ−ブトキシカルボニルピペリジン−３−イルである、請求項２に記載の化学式Ｉの化合物またはその薬学的に許容される塩。
前記Ｒ_２が３−クロロフェニル；４−フェノキシフェニル；３，３−ジメチル−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−６−イル；４−（４−フルオロベンジル）−モルホリン−２−イルメチル；１，３，４−トリアゾール−２−イル；４，６−ジメチルピリミジン−２−イル；（Ｓ）−ピロリジン−３−イル；２−（モルホリン−１−イル）エチル；ｔ−ブトキシカルボニルアミノ；（３−メトキシカルボニル）ピリジン−６−イル；ｐ−トルエンスルホンアミノ；ピリジン−４−イルメチル；１，２−ジフェニルエチル；２−メトキシエチル；５−メチルチアゾール−２−イル；３−メチルピリジン−２−イル；アゼパン−２−オン−３−イル；４−フルオロベンジル；２−エチルヘキシル；３−メチル−２−メチルスルファニル−３，４−ジヒドロキナゾリン−４−オン−６−イル；
である、請求項１に記載の化学式Ｉの化合物またはその薬学的に許容される塩。
Ｒ_２が３−クロロフェニル；４−フェノキシフェニル；５−メチルチアゾール−２−イル；または
である、請求項４に記載の化学式Ｉの化合物またはその薬学的に許容される塩。
前記化合物またはその薬学的に許容される塩が、
２−（１−ベンジルピペリジン−４−イルアミノ）−Ｎ−（３−クロロフェニル）ニコチンアミド［１０３］、
２−（１−ベンジルピペリジン−４−イルアミノ）−Ｎ−（４−フェノキシフェニル）ニコチンアミド［１１０］、
Ｎ−（３−クロロフェニル）−２−（２，２，６，６−テトラメチルピペリジン−４−イルアミノ）ニコチンアミド［２０１］、
Ｎ−（３−クロロフェニル）−２−（１−ｔ−ブトキシカルボニルピペリジン−４−イルアミノ）ニコチンアミド［２０８］、
Ｎ−（３−クロロフェニル）−２−（１−メチルピペリジン−４−イルアミノ）ニコチンアミド［２１４］、
Ｎ−（３−クロロフェニル）−２−［１−（２−ヒドロキシエチル）ピペリジン−４−イルアミノ］ニコチンアミド［２１８］、
Ｎ−（３−クロロフェニル）−２−（４−メチルピペラジン−１−イルアミノ）ニコチンアミド［２４０］、
Ｎ−（３−クロロフェニル）−２−［４−（２−ヒドロキシエチル）ピペラジン−１−イルアミノ）ニコチンアミド［２４１］、
（Ｒ）−２−（１−ベンジルピペリジン−３−イルアミノ）−Ｎ−（３−クロロフェニル）ニコチンアミド［２６７］、
（Ｓ）−２−（１−ベンジルピペリジン−３−イルアミノ）−Ｎ−（３−クロロフェニル）ニコチンアミド［２７３］、
（Ｒ）−Ｎ−（３−クロロフェニル）−２−（１−ｔ−ブトキシカルボニルピペリジン−３−イルアミノ）ニコチンアミド［２７０］、
（Ｓ）−Ｎ−（３−クロロフェニル）−２−（１−ｔ−ブトキシカルボニルピペリジン−３−イルアミノ）ニコチンアミド［２７６］、
２−（１−ベンジルピペリジン−４−イルアミノ）−６−クロロ−Ｎ−（３−クロロフェニル）ニコチンアミド［３０１］、
２−（１−ベンジルピペリジン−４−イルアミノ）−６−クロロ−Ｎ−（３−クロロフェニル）−５−フルオロニコチンアミド［３０２］、
６−クロロ−Ｎ−（３−クロロフェニル）−２−［１−（２−ヒドロキシエチル）ベンジルピペリジン−４−イルアミノ］ニコチンアミド［３１１］、
６−クロロ−Ｎ−（３−クロロフェニル）−５−フルオロ−２−［１−（２−ヒドロキシエチル）ピペリジン−４−イルアミノ］ニコチンアミド［３１２］、
２−（１−ベンジルピペリジン−４−イルアミノ）−Ｎ−（３，３−ジメチル−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−６−イル）ニコチンアミド［１１７］、
Ｎ−（３−クロロフェニル）−２−（４−ピペリジルアミノ）ニコチンアミド［２２４］、
（Ｒ）−Ｎ−（３−クロロフェニル）−２−（３−ピペリジルアミノ）ニコチンアミド［２６９］、
（Ｓ）−Ｎ−（３−クロロフェニル）−２−（３−ピペリジルアミノ）ニコチンアミド［２７５］、
Ｎ−（３−クロロフェニル）−２−（１−（２−ヒドロキシエチル）−２，２，６，６−テトラメチルピペリジン−４−イルアミノ）ニコチンアミド［２４２］、
２−（１−アリルピペリジン−４−イルアミノ）−Ｎ−（３−クロロフェニル）ニコチンアミド［２４３］、
Ｎ−（３−クロロフェニル）−２−［１−（２−Ｎ，Ｎ−ジエチルアミノ−エチル）ピペリジン−４−イルアミノ］ニコチンアミド［２４４］、
Ｎ−（３−クロロフェニル）−２−［１−（ピリジン−２−イルメチル）ピペリジン−４−イルアミノ］ニコチンアミド［２４８］、
Ｎ−（３−クロロフェニル）−２−［１−（ピリジン−３−イルメチル）ピペリジン−４−イルアミノ］ニコチンアミド［２４９］、
２−｛１−［１−（６−クロロ−５−フルオロピリミジン−４−イル）エチル］ピペリジン−４−イルアミノ｝−Ｎ−（３−クロロフェニル）ニコチンアミド［２５０］、
（Ｒ）−Ｎ−（３−クロロフェニル）−２−［１−（２−ヒドロキシエチル）ピペリジン−３−イルアミノ］ニコチンアミド［２６８］、
（Ｓ）−Ｎ−（３−クロロフェニル）−２−［１−（２−ヒドロキシエチル）ピペリジン−３−イルアミノ］ニコチンアミド［２７４］、
２−｛４−［３−（３−クロロフェニルカルバモイル）ピリジン−２−イルアミノ］ピペリジン−１−イル｝マロン酸［２４６］、
２−（１−ベンジルピペリジン−４−イルオキシ）−Ｎ−（３−クロロフェニル）ニコチンアミド［２８９］、
２−（１−ベンジルピペリジン−４−イルスルファニル）−Ｎ−（３−クロロフェニル）ニコチンアミド［２９０］、
２−（１−ベンジルピペリジン−４−イルアミノ）−Ｎ−［４−（４−フルオロベンジル）モルホリン−２−イルメチル］ニコチンアミド［４０４］、
２−（１−ベンジルピペリジン−４−イルアミノ）−Ｎ−（１，３，４−トリアゾール−２−イル）ニコチンアミド［４０６］、
２−（１−ベンジルピペリジン−４−イルアミノ）−Ｎ−（４，６−ジメチルピリミジン−２−イル）ニコチンアミド［４０７］、
２−（１−ベンジルピペリジン−４−イルアミノ）−Ｎ−（Ｓ）−ピロリジン−３−イルニコチンアミド［４０８］、
２−（１−ベンジルピペリジン−４−イルアミノ）−Ｎ−２−（モルホリン−１−イル）エチルニコチンアミド［４０９］、
Ｎ’−［２−（１−ベンジルピペリジン−４−イルアミノ）ピリジン−３−カルボニル］ヒドラジンカルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル［４１０］、
メチル６−｛［２−（１−ベンジルピペリジン−４−イルアミノ）ピリジン−３−カルボニル］アミノ｝ニコチネート［４１２］、
２−（１−ベンジルピペリジン−４−イルアミノ）−Ｎ−（ｐ−トルエンスルホンアミノ）ニコチンアミド［４２４］、
２−（１−ベンジルピペリジン−４−イルアミノ）−Ｎ−（ピリジン−４−イルメチル）ニコチンアミド［４２５］、
２−（１−ベンジルピペリジン−４−イルアミノ）−Ｎ−（１，２−ジフェニルエチル）ニコチンアミド［４２６］、
２−（１−ベンジルピペリジン−４−イルアミノ）−Ｎ−（２−メトキシエチル）ニコチンアミド［４２７］、
２−（１−ベンジルピペリジン−４−イルアミノ）−Ｎ−（５−メチルチアゾール−２−イル）ニコチンアミド［４２８］、
２−（１−ベンジルピペリジン−４−イルアミノ）−Ｎ−（３−メチルピリジン−２−イル）ニコチンアミド［４２９］、
２−（１−ベンジルピペリジン−４−イルアミノ）−Ｎ−（アゼパン−２−オン−３−イル）ニコチンアミド［４３０］、
２−（１−ベンジルピペリジン−４−イルアミノ）−Ｎ−（４−フルオロベンジル）ニコチンアミド［４３１］、
２−（１−ベンジルピペリジン−４−イルアミノ）−Ｎ−（２−エチルヘキシル）ニコチンアミド［４３６］、
２−（１−ベンジルピペリジン−４−イルアミノ）−Ｎ−（３−メチル−２−メチルスルファニル−３，４−ジヒドロキナゾリン−４−オン−６−イル）ニコチンアミド［４３９］、
６−ベンジル−２−｛［２−（１−ベンジルピペリジン−４−イルアミノ）ピリジン−３−カルボニル］アミノ｝−４，５，６，７−テトラヒドロ−チエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３−カルボン酸メチルエステル［４４０］、
６−エトキシカルバメート−２−｛［２−（１−ベンジルピペリジン−４−イルアミノ）ピリジン−３−カルボニル］アミノ｝−４，５，６，７−テトラヒドロ−チエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３−カルボン酸メチルエステル［４４１］、
２−｛［２−（１−ベンジルピペリジン−４−イルアミノ）ピリジン−３−カルボニル］アミノ｝−４，５，６，７−テトラヒドロ−チエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３−カルボン酸メチルエステル［４４２］、
２−｛［２−（１−ベンジルピペリジン−４−イルアミノ）−６−クロロピリジン−３−カルボニル］アミノ｝−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３−カルボン酸メチルエステル［５０１］、
２−｛［２−（１−ベンジルピペリジン−４−イルアミノ）−６−クロロピリジン−３−カルボニル］アミノ｝−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３−カルボン酸メチルエステル［５０２］、
２−｛［２−（１−（２−ヒドロキシエチル）ピペリジン−４−イルアミノ）ピリジン−３−カルボニル］アミノ｝−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３−カルボン酸メチルエステル［５０３］、
２−｛［６−クロロ−２−（１−（２−ヒドロキシエチル）ピペリジン−４−イルアミノ）ピリジン−３−カルボニル］アミノ｝−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３−カルボン酸メチルエステル［５０４］、
２−｛［６−クロロ−５−フルオロ−２−（１−（２−ヒドロキシエチル）ピペリジン−４−イルアミノ）ピリジン−３−カルボニル］アミノ｝−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３−カルボン酸メチルエステル［５０５］、
２−｛［２−（２，２，６，６−テトラメチルピペリジン−４−イルアミノ）ピリジン−３−カルボニル］アミノ｝−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３−カルボン酸メチルエステル［５０６］、
２−｛［２−（２，２，６，６−テトラメチルピペリジン−４−イルアミノ）６−クロロピリジン−３−カルボニル］アミノ｝−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３−カルボン酸メチルエステル［５０７］、
２−｛［６−クロロ−５−フルオロ−２−（２，２，６，６−テトラメチルピペリジン−４−イルアミノ）ピリジン−３−カルボニル］アミノ｝−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３−カルボン酸メチルエステル［５０８］、
２−｛［２−（１−ベンジルピペリジン−３−イルアミノ）ピリジン−３−カルボニル］アミノ｝−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３−カルボン酸メチルエステル［５０９］、
２−｛［２−（１−ベンジルピペリジン−３−イルアミノ）−６−クロロピリジン−３−カルボニル］アミノ｝−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３−カルボン酸メチルエステル［５１０］、
２−｛［２−（１−ベンジルピペリジン−３−イルアミノ）−６−クロロ−５−フルオロピリジン−３−カルボニル］アミノ｝−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３−カルボン酸メチルエステル［５１１］、
６−クロロ−Ｎ−（２−エチルヘキシル）−２−［１−（２−ヒドロキシエチル）ピペリジン−４−イルアミノ］ニコチンアミド［５１５］、
Ｎ−（２−エチルヘキシル）−２−（２，２，６，６−テトラメチルピペリジン−４−イルアミノ）ニコチンアミド［５１７］、
６−クロロ−Ｎ−（２−エチルヘキシル）−５−フルオロ−２−（２，２，６，６−テトラメチルピペリジン−４−イルアミノ）ニコチンアミド［５１９］、
２−（１−ベンジルピペリジン−３−イルアミノ）−Ｎ−（２−エチルヘキシル）ニコチンアミド［５２０］、
２−（１−ベンジルピペリジン−３−イルアミノ）−６−クロロ−Ｎ−（２−エチルへキシル）−５−フルオロニコチンアミド［５２２］、およびこれらの薬学的に許容される塩よりなる群から選ばれるいずれか一つである、請求項１に記載の化学式Ｉの化合物またはその薬学的に許容される塩。
前記化合物またはその薬学的に許容される塩が、
２−（１−ベンジルピペリジン−４−イルアミノ）−Ｎ−（３−クロロフェニル）ニコチンアミド［１０３］、
２−（１−ベンジルピペリジン−４−イルアミノ）−Ｎ−（４−フェノキシフェニル）ニコチンアミド［１１０］、
Ｎ−（３−クロロフェニル）−２−［１−（２−ヒドロキシエチル）ピペリジン−４−イルアミノ］ニコチンアミド［２１８］、
（Ｓ）−２−（１−ベンジルピペリジン−３−イルアミノ）−Ｎ−（３−クロロフェニル）ニコチンアミド［２７３］、
（Ｓ）−Ｎ−（３−クロロフェニル）−２−（１−ｔ−ブトキシカルボニルピペリジン−３−イルアミノ）ニコチンアミド［２７６］、
６−クロロ−Ｎ−（３−クロロフェニル）−５−フルオロ−２−［１−（２−ヒドロキシエチル）ピペリジン−４−イルアミノ］ニコチンアミド［３１２］、
（Ｓ）−Ｎ−（３−クロロフェニル）−２−（３−ピペリジルアミノ）ニコチンアミド［２７５］、
２−（１−ベンジルピペリジン−４−イルスルファニル）−Ｎ−（３−クロロフェニル）ニコチンアミド［２９０］、
２−（１−ベンジルピペリジン−４−イルアミノ）−Ｎ−（５−メチルチアゾール−２−イル）ニコチンアミド［４２８］、
２−｛［２−（１−ベンジルピペリジン−４−イルアミノ）ピリジン−３−カルボニル］アミノ｝−４，５，６，７−テトラヒドロ−チエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３−カルボン酸メチルエステル［４４２］、
２−｛［２−（１−ベンジルピペリジン−３−イルアミノ）ピリジン−３−カルボニル］アミノ｝−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３−カルボン酸メチルエステル［５０９］、およびこれらの薬学的に許容される塩よりなる群から選ばれるいずれか一つである、請求項６に記載の化学式Ｉの化合物またはその薬学的に許容される塩。
前記化合物またはその薬学的に許容される塩が２−（１−ベンジルピペリジン−４−イルアミノ）−Ｎ−（３−クロロフェニル）ニコチンアミド［１０３］またはその薬学的に許容される塩である、請求項７に記載の化学式Ｉの化合物またはその薬学的に許容される塩。
下記化学式ＩＩの化合物と下記化学式ＩＩＩの化合物を塩基の存在下に反応させる段階を含む、請求項１の化学式Ｉの化合物の製造方法：
式中、Ｘ_１、Ｘ_２、Ｒ_１およびＲ_２は前述の定義と同じあり、
Ｚはクロロまたはブロモである。
前記塩基がトリエチルアミン、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン、Ｎ−メチルモルホリン、ＤＢＵ(1,8-Diazabicyclo[5.4.0]undec-7-ene)、Ｎ−メチルピペリジン、４−ジメチルアミノピリジン、Ｎ，Ｎ−ジメチルアニリン、２，６−ルチジン、４−Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノピリジンおよびピリジンの中から選ばれる、請求項９に記載の製造方法。
下記化学式IVの化合物と下記化学式Ｖの化合物を塩基の存在下に反応させる段階を含む、請求項１の化学式Ｉの化合物の製造方法：
式中、Ｘ_１、Ｘ_２、Ｒ_１およびＲ_２は前述の定義と同じであり、
Ｙは−ＮＨ_２、−ＳＨまたは−ＯＨである。
前記塩基が炭酸カリウム、炭酸水素カリウム、炭酸ナトリウム、炭酸水素ナトリウム、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化カルシウム、水酸化バリウム、ナトリウムメトキシド、ナトリウムエトキシド、ナトリウム−ｔ−ブトキシド、カリウム−ｔ−ブトキシド、水素化ナトリウム、水素化カリウム、水素化ホウ素ナトリウム、シアノ水素化ホウ素ナトリウム、および４−Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノピリジンの中から選ばれる、請求項１１に記載の製造方法。
前記反応がキシレンの存在下で行われる、請求項１１に記載の製造方法。
前記キシレンがｏ−キシレンである、請求項１３に記載の製造方法。
請求項１〜８のいずれか１項の化合物またはその薬学的に許容される塩を有効成分として含む、血管内皮細胞増殖因子（ＶＥＧＦ）の活性異常により誘発される疾患または症状の予防または治療用薬学的組成物。
前記血管内皮細胞増殖因子の活性異常により誘発される疾患または症状が癌(cancer)、リウマチ(Rheumatoid arthritis)、糖尿病性網膜症(diabetic retinopathy)、角膜炎症、充血、黄斑変性症、脈絡血管新生症、血管新生緑内障、角膜血管新生の眼球疾患、乾癬、肺の気道を塞ぐ血管腫(hemangiomas)、および血管増殖による肥満(angiogenic disease)
の中から選ばれる、請求項１５に記載の薬学的組成物。
前記血管内皮細胞増殖因子の活性異常により誘発される疾患または症状が癌である、請求項１６に記載の薬学的組成物。
請求項１〜８のいずれか１項の化合物またはその薬学的に許容される塩を含む、血管新生抑制用薬学的組成物。
前記血管新生抑制用薬学的組成物が抗癌剤である、請求項１８に記載の薬学的組成物。