CN115785074B - Parp7抑制剂及其用途 - Google Patents

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Abstract

本申请涉及一种聚(腺苷二磷酸‑核糖)聚合酶‑7(PARP7)抑制剂，其包括式(I)的化合物或其药学可接受的盐、氘代化合物、溶剂化物、酯、酸、代谢物或前药。本申请还涉及PARP7抑制剂在选择性地抑制PARP7活性、或治疗或预防由PARP7活性调节的或受其影响的或者其中涉及PARP7活性或过表达的疾病、障碍或病症的用途。

Description

PARP7抑制剂及其用途
技术领域
本发明涉及制药领域，特别是涉及哒嗪酮衍生物及其制备方法，以及其用于治疗和/或预防疾病的方法和用途。
背景技术
PARP(多聚ADP-核糖聚合酶)是由17种酶组成的蛋白家族，利用烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD+)作为底物将ADP-核糖(ADPR)转移到靶蛋白上，是存在于多数真核细胞中的多功能蛋白质翻译后修饰酶。它通过识别结构损伤的DNA片段而被激活，被认为是DNA损伤的感受器，参与DNA修复、基因组稳定性等一系列细胞过程。
PARP家族分为两个子类：polyPARPs和monoPARPs。PolyPARPs将多个ADPR(ADP-ribose)分子依次添加到蛋白质中，导致ADPR链可以达到数百个单位。相比之下，monoPARPs仅通过附着一个ADPR分子来修饰蛋白质。因此，polyPARPs和monoPARPs代表了两种不同类型的治疗靶点，因为它们具有不同的ADP-核糖基化的蛋白底物，在细胞信号转导和蛋白功能调节中发挥不同的作用。
PARP7(TIPARP)是一种monoPARP，是调控先天免疫、转录因子活性和细胞应激反应的关键因子。多项研究表明，PARP7在先天免疫信号通路中发挥关键作用，特别是作为I型干扰素抗病毒反应的负调控因子，敲除PARP7可以增强不同细胞类型中核酸传感器激动剂或病毒诱导的干扰素-β(IFN-β)的表达。PARP7作为芳香烃受体(AHR)活性的抑制因子，在病毒感染或暴露于香烟烟雾后通过AHR激活的细胞应激中表达上调。此外，PARP7还受肝脏X受体(LXRs)、缺氧诱导因子1(HIF-1)的调节。
PARP7在正常细胞中表达量并不高，在一系列肿瘤中过度活跃。当癌细胞或者病毒感染时，胞内游离的核酸片段会通过TBK1介导的I型IFN通路触发先天免疫感知，通过磷酸化细胞质干扰素调节因子IRF-3，然后易位到细胞核并与转录共激活因子结合，促进IFN-α和IFN-β的转录，进而招募树突状细胞、巨噬细胞、淋巴细胞等免疫细胞识别和杀伤癌细胞。但高表达的PARP7在癌细胞中充当刹车器的作用，阻止IRF-3的磷酸化，继而阻止I型IFNs的产生，逃避免疫细胞的识别和追杀。抑制PARP7可有效地抑制癌细胞的生长并恢复干扰素信号传导，有效地激活先天和适应性免疫。
PARP7负向调节芳香烃受体(AHR)和I型干扰素(IFN-I)信号转导，两者都与肠道稳态和免疫有关。由于PARP7表达的缺失会增加AHR和IFN-I信号通路，在小鼠右旋糖酐硫酸钠(DSS)诱导的结肠炎模型中，PARP7表达的缺失降低了包括白介素IL-6、CXCL1、lipocalin-2等炎症基因的表达。实验结果表明PARP7可能参与免疫细胞向炎症部位的招募。因此，抑制PARP7能降低DSS诱导的小鼠结肠炎的严重程度，并抑制炎症性肠病患者组织中促炎细胞因子的产生。
目前已经报导的PARP7抑制剂相对较少，进展最快的仍处于早期临床开发阶段。美国Ribon Therapeutics公司开发的三氟哒嗪酮化合物RBN-2397可抑制PARP7的酶活性，并可抑制多种癌细胞的生长和增殖，在小鼠异种移植瘤模型和同源基因肿瘤模型中可导致肿瘤消退(Gozgit J.M.et al.Cancer Cell 2021,39,1-13)。但RBN-2397体内药代动力学性质较差，例如体内血浆暴露量低，血浆半衰期短，口服生物利用度低。因此，需要开发能够改善体内药代动力学性质，具有更好的抗肿瘤活性和治疗效果，降低临床副作用，并能够扩展到更多的肿瘤适应症的PARP7抑制剂。
发明内容
本发明旨在提供一种能够选择性地抑制PARP7的酶活性的化合物。
根据本发明的一个方面，提供一种聚(腺苷二磷酸-核糖)聚合酶-7(PARP7)抑制剂，其包括式(I)的化合物或其药学可接受的盐、氘代化合物、溶剂化物、酯、酸、代谢物或前药，
其中，
表示双键或单键，条件是任一个原子上最多连接一个双键；
X选自卤素、C1-6卤代烷基、和C2-6烷酰基，或与Y以及与它们相连的碳原子一起形成稠合苯环或杂环；
Y选自NH和O，或与X以及与它们相连的碳原子一起形成稠合苯环或杂环；A为选自-N-O-、＝N-O-、-O-N-和-O-N＝的氮氧基，且N原子在价键未饱和时任选地被氢、C1-6烷基、C2-6酰基、或C1-6磺酰基取代；
L选自-(CH2)n-、其中n为1、2或3，R5和R5’各自独立地选自氢、C1-3烷基、卤素、氘、和羟基，或R5和R5’以及与它们相连的碳原子一起形成C3-6环烷基；
R1和R2各自独立地选自氢、C1-6烷基、C1-6羟基烷基、C1-6卤代烷基、C3-6环烷基、C3-6羟基环烷基或C3-6卤代环烷基，或者R1与R2以及与它们相连的碳原子一起形成C5-8环烷基；
M为选自式(M-l)、(M-2)、(M-3)、(M-4)和(M-5)的基团：
其中D1、D2、D3、D4、D5、D6、D7、D8、D9和D10各自独立地选自N和CH，条件是M基团的环原子上至少含有一个N，
R3各自独立地选自氢、卤素、羟基、C1-4烷基、C1-6卤代烷基、和C1-6羟基烷基，m各自独立地选自0、1或2；
G为任选地被一个或两个R4基团取代的5-6元芳杂环基团，其中R4基团各自独立地选自羟基、氰基、C1-6烷基、C1-6羟基烷基、C1-6卤代烷基、卤素、C3-6环烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、-NR6R6’、-C(O)NR6R6’、-NR6C(O)R7、-C(O)OR6、-OR6、-S(O)2NR6R6’、-NR6S(O)2R7、-S(O)2R7、-C(O)R6、和任选地被卤素取代的苯基，或者两个R4以及与它们相连的碳原子一起形成任选地被羟基、甲基、卤素或氧代取代的C5-8环烷基、苯基或杂芳基，其中R6、R6’和R7各自独立地选自氢、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、C3-6环烷基、和C1-6羟基烷基。在优选的实施方式中，所述杂环为含N原子的5-8元单环，优选为哌啶、吡咯烷、哌嗪或四氢吡啶。
在另外的实施方式中，M为选自式(M-1a)、(M-2a)、(M-3a)、(M-4a)和(M-5a)的基团：
其中D1选自N或CH，m各自独立地选自0、1或2，R3各自独立地选自氢、羟基、卤素或C1-4烷基。
在其他的实施方式中，其中G为选自式(G-1)、(G-2)、(G-3)、(G-4)、(G-5)、(G-6)和(G-7)的基团：
其中Q各自独立地选自N或CH，更优选Q各自独立地为N；R4如之前所定义。
优选地，R4基团为任选的取代基，且各自独立地选自氰基、C1-4烷基、C1-4羟基烷基、C1-4卤代烷基、卤素、C3-6环烷基、C2-4烯基、C2-4炔基、-NR6R6’、-C(O)NR6R6’、-C(O)OR6、-OR6、-C(O)R6、和任选地被卤素取代的苯基，其中R6和R6’各自独立地选自氢和C1-4烷基。
在优选的方面，X选自溴、三氟甲基、和乙酰基，或X与Y以及与它们相连的碳原子一起形成稠合苯环或稠合哌啶环；Y选自NH，或与X以及与它们相连的碳原子一起形成稠合苯环或稠合哌啶环。
在进一步优选的实施方式中，当式(M-1)或式(M-1a)中D1为N时，L选自-(CH2)n-、当D1为CH时，L选自-(CH2)n-、/> 且n、R5、R5’如之前所定义。
在另外的实施方式中，当A为-N-O-时，L为当A为＝N-O-时，L为当A为-O-N-时，L为/>
当A为-O-N＝时，L为
在本发明的优选方面，提供一种PARP7抑制剂，其包括式(I)的化合物、或其药学可接受的盐、氘代化合物、溶剂化物、酯、酸、代谢物或前药，其中X选自C1-6卤代烷基和C2-6烷酰基，X更优选为C1-6卤代烷基，特别是三氟甲基；Y选自NH；A为选自＝N-O-、-O-N-和-O-N＝的氮氧基，更优选为-O-N-；L选自 更优选为/>其中R5和R5’各自独立地选自氢或卤素，更优选为氢；M为选自式(M-1a)和(M-5a)的基团，其中D1选自N或CH，更优选为CH，m各自为1，R3独立地选自氢、卤素或C1-3烷基，更优选为氢；G为选自式(G-1)、(G-3)和(G-4)的基团，更优选为式(G-1)的基团，其中Q选自N或CH，更优选为N，R4选自C1-6卤代烷基、卤素、C3-6环烷基、和任选地被卤素取代的苯基，更优选为C1-6卤代烷基，特别是三氟甲基；R1和R2各自独立地选自氢、C1-6烷基、和C3-6环烷基，或者R1与R2以及与它们相连的碳原子一起形成C5-8环烷基，R1和R2各自更优选独立地选自氢和C1-6烷基。
在另外优选的方面，本发明提供一种PARP7抑制剂，其包括式(I)的化合物、或其药学可接受的盐、氘代化合物、溶剂化物、酯、酸、代谢物或前药，其中表示双键或单键，条件是任一个原子上最多连接一个双键；
X选自卤素和C1-6卤代烷基，或与Y以及与它们相连的碳原子一起形成稠合苯环或杂环；
Y选自NH，或与X以及与它们相连的碳原子一起形成稠合苯环或杂环；
A为选自-N-O-、＝N-O-、-O-N-和-O-N＝的氮氧基，且N原子在价键未饱和时任选地被氢、C1-6烷基、C2-6酰基、或C1-6磺酰基取代；
L选自-(CH2)n-、其中n为1、2或3，R5和R5’各自独立地选自氢或C1-3烷基，或R5和R5’以及与它们相连的碳原子一起形成C3-6环烷基；
R1和R2各自独立地选自氢、C1-6烷基、C1-6羟基烷基、C1-6卤代烷基、C3-6环烷基、C3-6羟基环烷基或C3-6卤代环烷基，或者R1与R2以及与它们相连的碳原子一起形成C5-8环烷基；
M为选自式(M-l)、(M-2)、(M-3)和(M-4)的基团：
其中D1、D2、D3、D4、D5、D6、D7、D8和D9各自独立地选自N和CH，条件是M基团的环原子上至少含有一个N，
R3各自独立地选自卤素、羟基、C1-4烷基和C1-6卤代烷基，
m各自独立地选自0、1或2；
G为任选地被一个或两个R4基团取代的5-6元芳杂环基团，其中R4基团各自独立地选自羟基、氰基、C1-6烷基、C1-6羟基烷基和C1-6卤代烷基，或者两个R4以及与它们相连的碳原子一起形成任选地被羟基、或甲基取代的C5-8环烷基。
进一步优选地，M为选自式(M-1a)、(M-2a)、(M-3a)和(M-4a)的基团：
其中D1选自N或CH，m各自独立地选自0、1或2，R3各自独立地选自羟基、卤素或C1-4烷基。
另外进一步优选地，G为选自式(G-1)和(G-2)的基团：
其中Q选自N或CH。
另外特别优选地，当式(M-1)或式(M-1a)中D1为N时，L选自-(CH2)n-、 当D1为CH时，L选自-(CH2)n-、/>
另外特别优选地，当A为-N-O-时，L为当A为＝N-O-时，L为/>当A为-O-N-时，L为/> 当A为-O-N＝时，L为/>
本发明还优选地提供一种PARP7抑制剂，其包括式(II)的化合物、或其药学可接受的盐、氘代化合物、溶剂化物、酯、酸、代谢物或前药，
其中，表示双键或单键，条件是任一个原子上最多连接一个双键，X选自卤素和C1-6卤代烷基，或与Y以及与它们相连的碳原子一起形成稠合苯环或哌啶环；
Y选自NH，或与X以及与它们相连的碳原子一起形成稠合苯环或哌啶环；
A为选自-N-O-、＝N-O-、-O-N-和-O-N＝的氮氧基，且N原子在价键未饱和时任选地被氢、C1-6烷基、C2-6酰基、或C1-6磺酰基取代；
L选自-(CH2)n-、其中n为1、2或3，R5和R5’各自独立地选自氢或C1-3烷基，或R5和R5’以及与它们相连的碳原子一起形成C3-6环烷基；
D选自N或CH；
Q选自N或CH；
R1和R2各自独立地选自氢、C1-6烷基、C3-6环烷基，或者R1与R2以及与它们相连的碳原子一起形成C5-8环烷基；
R3选自氢或C1-3烷基；
R4选自羟基、氰基、C1-6烷基、C1-6羟基烷基和C1-6卤代烷基。
在本发明的另一个方面，提供一种药物组合物，其包括本发明的化合物、或其药学可接受的盐、氘代化合物、溶剂化物、酯、酸、代谢物或前药，和药学上可接受的载体或赋形剂，以及任选的其它治疗剂。
本发明的其他方面还涉及本发明的化合物、或其药学可接受的盐、氘代化合物、溶剂化物、酯、酸、代谢物或前药选择性地抑制PARP7活性的方法或用途，或者本发明的化合物、或其药学可接受的盐、氘代化合物、溶剂化物、酯、酸、代谢物或前药在制备用于选择性地抑制PARP7活性的药物中的用途。
在本发明的进一步方面还涉及发明的化合物、或其药学可接受的盐、氘代化合物、溶剂化物、酯、酸、代谢物或前药治疗或预防由PARP7活性调节的或受其影响的或者其中涉及PARP7活性的疾病、障碍或病症的方法或用途，或者本发明的化合物、或其药学可接受的盐、氘代化合物、溶剂化物、酯、酸、代谢物或前药在制备用于治疗或预防由PARP7活性调节的或受其影响的或者其中涉及PARP7活性或过表达的疾病、障碍或病症的药物中的用途。
优选地，由PARP7活性调节的或受其影响的或者其中涉及PARP7活性或过表达的疾病、障碍或病症为过度增殖性疾病，特别是癌症、自身免疫性或炎症性疾病。
在更优选地方面，所述疾病、障碍或病症选自癌症，包括但不限于肺鳞癌、肺腺癌、非小细胞肺癌、小细胞肺癌、头颈鳞癌、乳腺癌、胰腺癌、胰腺导管腺癌、结直肠癌、黑色素瘤、卵巢癌、食管鳞癌、胃癌、肝癌、口腔癌、尿路上皮癌、前列腺癌、膀胱癌、肾细胞癌、胃肠间质瘤、子宫颈癌、子宫内膜癌、横纹肌肉瘤、纤维肉瘤、神经内分泌瘤、间皮瘤、脑癌、和恶性胶质瘤等。
在其他优选的方面，所述疾病、障碍或病症选自自身免疫性或炎症性疾病，包括但不限于溃疡性结肠炎、克劳恩病、多发性硬化症、自身免疫性肝病、I型糖尿病、支气管哮喘、系统性红斑狼疮、类风湿性关节炎、强制性脊柱炎、幼年特发性关节炎、银屑病、多发性肌炎、和皮肌炎等。
具体实施方式
定义
除非另外定义，否则本文中使用的所有技术和科学术语具有本发明所属领域普通技术人员通常所理解的含义。在说明书中，除非上下文另有明确说明，单数形式也包含复数形式。本文提到的所有出版物、专利申请、专利或其它参考文献均通过引入本文作为参考。在存在抵触的情况下，以本说明书(包括定义在内)为准。此外，材料、方法和实施例都仅是说明性的，并不意在限制本发明的范围。
除非另有说明，本发明采用本领域技术范围内的质谱、NMR、HPLC、蛋白质化学、生物化学、重组DNA技术和药理学等常规方法。除非提供具体的定义，否则与本文描述的分析化学、合成有机化学、以及医学和药物化学等化学上相关的命名和实验室操作和技术，是本领域技术人员已知的。一般而言，前述技术和步骤可以通过本领域众所周知的和在各种一般文献和更具体文献中描述的常规方法来实施，这些文献在本说明书中被引用和讨论。
术语“烷基”是指脂肪族烃基团，可以是支链或直链的烷基。根据结构，烷基可以是单价基团或双价基团(即亚烷基)。在本发明中，烷基优选是具有1-8个碳原子的烷基，更优选具有1-6个碳原子的“低级烷基”，甚至更优选具有1-4个碳原子的烷基。典型的烷基包括但不限于甲基、乙基、丙基、丁基、戊基、己基等。应理解，本文提到的“烷基”包括可能存在的所有构型和构象的该烷基，例如本文提到的“丙基”包括正丙基和异丙基，“丁基”包括正丁基、异丁基和叔丁基，“戊基”包括正戊基、异戊基、新戊基、叔戊基、和戊-3-基等。
术语“烷氧基”是指-O-烷基，其中烷基如本文中定义。典型的烷氧基包括但不限于甲氧基、乙氧基、丙氧基、丁氧基、戊氧基、己氧基等。
术语“烷氧基烷基”是指本文定义的烷基被本文定义的烷氧基取代。
术语“环烷基”是指单环或多环基，其仅含有碳和氢。环烷基包括具有3-12个环原子的基团。根据结构，环烷基可以是单价基团或双价基团(例如亚环烷基)。在本发明中，环烷基优选是具有3-8个碳原子的环烷基，更优选具有3-6个碳原子的“低级环烷基”。环烷基的例子包括但不限于，环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基、环辛基、环戊烯基、环己烯基、环庚烯基和金刚烷基。
术语“烷基(环烷基)”或“环烷基烷基”是指本文定义的烷基被本文定义的环烷基取代。非限制性的环烷基烷基包括环丙基甲基、环丁基甲基、环戊基甲基、环己基甲基等。
术语“芳香基”是指平面环具有离域的π电子系统并且含有4n+2个π电子，其中n是整数。芳香基环可以由五、六、七、八、九或多于九个原子构成。芳香基可以是任选取代的。术语“芳香基”包括碳环芳基(例如苯基)和杂环芳基(或“杂芳基”或“杂芳香基”)基团(例如吡啶)。该术语包括单环或稠环多环(即共用相邻的碳原子对的环)基团。
本文使用的术语“芳基”是指芳香基环中每一个构成环的原子都是碳原子。芳基环可以由五、六、七、八、九或多于九个原子构成。芳基可以是任选取代的。芳基的实例包括但不限于苯基、萘基、菲基、蒽基、芴基和茚基。根据结构，芳基可以是单价基团或双价基团(即亚芳基)。
术语“芳氧基”是指-O-芳基，其中芳基如本文中定义。
术语“杂芳基”是指芳基中包括一个或多个选自氮、氧和硫的环杂原子。含N“杂芳基”部分是指芳香基中环上至少有一个骨架原子是氮原子。根据结构，杂芳基可以是单价基团或双价基团(即亚杂芳基)。杂芳基的实例包括但不限于吡啶基、咪唑基、嘧啶基、吡唑基、三唑基、吡嗪基、四唑基、呋喃基、噻吩基、异噁唑基、噻唑基、噁唑基、异噻唑基、吡咯基、喹啉基、异喹啉基、吲哚基、苯并咪唑基、苯并呋喃基、吲唑基、吲嗪基、酞嗪基、哒嗪基、异吲哚基、蝶啶基、嘌呤基、噁二唑基、噻二唑基、呋咱基、苯并呋咱基、苯并噻吩基、苯并噻唑基、苯并噁唑基、喹唑啉基、萘啶基和呋喃并吡啶基等。
术语“烷基(芳基)”或“芳烷基”是指本文定义的烷基被本文定义的芳基取代。非限制性的烷基(芳基)包括苄基、苯乙基等。
术语“烷基(杂芳基)”或“杂芳基烷基”是指本文定义的烷基被本文定义的杂芳基取代。
本文使用的术语“杂烷基”是指本文定义的烷基中的一个或多个骨架链原子是杂原子，例如氧、氮、硫、硅、磷或它们的组合。所述杂原子(一个或多个)可以位于杂烷基内部的任意位置或在杂烷基与分子的其余部分相连的位置。
本文使用的术语“杂环烷基”或“杂环基”是指非芳香基环中一个或多个构成环的原子是选自氮、氧和硫的杂原子。杂环烷基环可以是由三、四、五、六、七、八、九或多于九个原子构成的单环或多环。杂环烷基环可以是任选取代的。杂环烷基的实例包括但不限于内酰胺、内酯、环亚胺、环硫代亚胺、环氨基甲酸酯、四氢噻喃、4H-吡喃、四氢吡喃、哌啶、1,3-二噁英、1,3-二噁烷、1,4-二噁英、1,4-二噁烷、哌嗪、1,3-氧硫杂环己烷、1,4-氧硫杂环己二烯、1,4-氧硫杂环己烷、四氢-1,4-噻嗪、2H-1,2-噁嗪、马来酰亚胺、琥珀酰亚胺、巴比妥酸、硫代巴比妥酸、二氧代哌嗪、乙内酰脲、二氢尿嘧啶、吗啉、三噁烷、六氢-1,3,5-三嗪、四氢噻吩、四氢呋喃、吡咯啉、吡咯烷、咪唑烷，吡咯烷酮、吡唑啉、吡唑烷、咪唑啉、咪唑烷、1,3-二氧杂环戊烯、1,3-二氧杂环戊烷、1,3-二硫杂环戊烯、1,3-二硫杂环戊烷、异噁唑啉、异噁唑烷、噁唑啉、噁唑烷、噁唑烷酮、噻唑啉、噻唑烷和1,3-氧硫杂环戊烷。根据结构，杂环烷基可以是单价基团或双价基团(即亚杂环烷基)。
术语“烷基(杂环烷基)”或“杂环烷基烷基”是指本文定义的烷基被本文定义的杂环烷基取代。
术语“烷氧基(杂环烷基)”或“杂环烷基烷氧基”是指本文定义的烷氧基被本文定义的杂环烷基取代。
术语“卤”或“卤素”是指氟、氯、溴和碘。
术语“卤代烷基”、“卤代烷氧基”和“卤代杂烷基”包括烷基、烷氧基或杂烷基的结构，其中至少一个氢被卤原子置换。在某些实施方式中，如果两个或更多氢原子被卤原子置换，所述卤原子彼此相同或不同。
术语“羟基”是指-OH基团。
术语“氰基”是指-CN基团。
术语“酯基”是指具有式-COOR的化学部分，其中R选自烷基、环烷基、芳基、杂芳基(通过环碳连接)和杂环基(通过环碳连接)。
术语“氨基”是指-NH2基团。
术语“氨酰基”是指-CO-NH2基团。
术语“烷基氨酰基”是指-CO-NH-R基团，其中R为本文定义的烷基。
术语“酰胺基”或“酰氨基”是指-NR-CO-R’，其中R和R’各自独立地为氢或烷基。
术语“烷基氨基”是指进一步被一个或两个烷基取代的氨基取代基，具体是指基团-NRR’，其中R和R’各自独立地选自氢或低级烷基，条件是-NRR’不是-NH2。“烷基氨基”包括其中-NH2的氮连接至少一个烷基基团的化合物的基团。烷基氨基基团的例子包括但不限于，甲基氨基、乙基氨基等。“二烷基氨基”包括其中-NH2的氮连接至少两个其它烷基基团的基团。二烷基氨基基团的例子包括但不限于，二甲基氨基、二乙基氨基等。
术语“芳基氨基”和“二芳基氨基”是指进一步被一个或两个芳基取代的氨基取代基，具体是指基团-NRR’，其中R和R’各自独立地选自氢、低级烷基、或芳基，其中N分别连接至少一个或两个芳基基团。
术语“环烷基氨基”是指进一步被一个或两个本文所定义的环烷基取代的氨基取代基。
术语“杂烷基氨基”是指进一步被一个或两个本文所定义的杂烷基取代的氨基取代基。
本文的术语“芳烷基氨基”是指其中R是低级芳烷基且R’是氢、低级烷基、芳基或低级芳烷基的基团-NRR’。
术语“杂芳基氨基”是指进一步被一个或两个本文所定义的杂芳基取代的氨基取代基。
术语“杂环烷基氨基”是指本文定义的氨基被本文定义的杂环烷基取代。
术语“烷基氨基烷基”是指本文定义的烷基被本文定义的烷基氨基取代。
术语“氨基烷基”是指进一步被一个或多个氨基取代的烷基取代基。
术语“氨基烷氧基”是指进一步被一个或多个氨基取代的烷氧基取代基。
术语“羟烷基”或“羟基烷基”是指进一步被一个或多个羟基取代的烷基取代基。
术语“氰基烷基”是指进一步被一个或多个氰基取代的烷基取代基。
术语“酰基”是指有机或无机含氧酸去掉羟基后剩下的一价原子团，通式为R-M(O)-，其中M通常为C。
术语“羰基”是由碳和氧两种原子通过双键连接而成的有机官能团(C＝O)。
术语“烷酰基”或“烷基羰基”是指进一步被一个烷基取代的羰基。典型的烷酰基包括但不限于乙酰基、丙酰基、丁酰基、戊酰基、己酰基等。
术语“芳基羰基”是指本文定义的羰基被本文定义的芳基取代。
术语“烷氧基羰基”是指进一步被一个烷氧基取代的羰基。
术语“杂环烷基羰基”是指进一步被一个杂环烷基取代的羰基。
术语“烷基氨基羰基”、“环烷基氨基羰基”、“芳基氨基羰基”、“芳烷基氨基羰基”、“杂芳基氨基羰基”分别是指本文定义的羰基分别被本文定义的烷基氨基、环烷基氨基、芳基氨基、芳烷基氨基、或杂芳基氨基取代。
术语“烷基羰基烷基”或“烷酰基烷基”是指进一步被一个烷基羰基取代的烷基。
术语“烷基羰基烷氧基”或“烷酰基烷氧基”是指进一步被一个烷基羰基取代的烷氧基。
术语“杂环烷基羰基烷基”是指进一步被一个杂环烷基羰基取代的烷基。
术语“巯基”是指-SH基团。术语“烷硫基”是指本文所定义的巯基被本文所定义的烷基取代。
术语“砜基”或“磺酰基”是指磺酸失去羟基后的官能团，具体是指-S(＝O)2-基团。
术语“亚砜基”或“亚磺酰基”是指-S(＝O)-。
术语“氨基砜基”或“氨基磺酰基”是指-S(＝O)2-NH2基团。
术语“烷基亚砜基”或“烷基亚磺酰基”是指烷基-S(＝O)-。
术语“烷基砜基”或“烷基磺酰基”是指-S(＝O)2-R，其中R为烷基。
术语“烷基氨基砜基”是指本文定义的砜基被本文定义的烷基氨基取代。
术语“烷基砜基氨基”或“烷基磺酰氨基”，以及“环烷基砜基氨基”或“环烷基磺酰氨基”是指本文定义的氨基被本文定义的烷基砜基或环烷基砜基取代，即-NH-S(＝O)2-R，其中R分别为烷基和环烷基。
术语“环烷基砜基”和“环烷基磺酰基”是指-S(＝O)2-R，其中R为环烷基。
术语“季铵基”是指-N+RR’R”，其中R、R’和R”各自独立地选自具有1-8个碳原子的烷基。
术语“任选”指后面描述的一个或多个事件可以发生或可以不发生，并且包括发生的事件和不发生的事件两者。术语“任选取代的”或“取代的”是指所提及的基团可以被一个或多个额外的基团取代，所述额外的基团各自并且独立地选自烷基、环烷基、芳基、杂芳基、杂环基、羟基、烷氧基、氰基、卤素、酰胺基、硝基、卤代烷基、氨基、甲磺酰基、烷基羰基、烷氧基羰基、杂芳基烷基、杂环烷基烷基、氨酰基、氨基保护基等。其中，氨基保护基优选选自新戊酰基、叔丁氧羰基、苄氧羰基、9-芴甲氧羰基、苄基、对甲氧苄基、烯丙氧羰基、和三氟乙酰基等。
本文术语“药学上可接受的盐”指的是保留主题化合物的所需生物学活性且显示最小的不希望的毒理学效应的盐。这些药学上可接受的盐可以在化合物的最终分离和纯化过程中原位制备，或通过单独使纯化化合物的游离酸或游离碱形式分别与合适的碱或酸反应来制备。
“溶剂化物”或“溶剂合物”指的是含有化学计量或非化学计量溶剂的溶剂加成形式。一些化合物趋于以晶状固态捕集固定摩尔比例的溶剂分子，从而形成溶剂合物。若溶剂是水，则形成的溶剂合物是水合物；若溶剂是醇，则形成的溶剂合物是醇化物。水合物通过使一个或多个水分子与所述物质的一个分子结合而形成，其中所述水保持其分子状态为H2O。
本文公开的化合物的“代谢物”是当该化合物被代谢时形成的化合物的衍生物。术语“活性代谢物”是指当该化合物被代谢时形成的化合物的生物活性衍生物。本文使用的术语“被代谢”，是指特定物质被生物体改变的过程总和(包括但不限于水解反应和由酶催化的反应，例如氧化反应)。因此，酶可以产生特定的结构转变为化合物。例如，细胞色素P450催化各种氧化和还原反应，同时二磷酸葡萄糖甘酸基转移酶催化活化的葡萄糖醛酸分子至芳香醇、脂肪族醇、羧酸、胺和游离的巯基的转化。新陈代谢的进一步的信息可以从《ThePharmacological Basis of Therapeutics》，第九版，McGraw-Hill(1996)获得。本文公开的化合物的代谢物可以通过将化合物给予宿主并分析来自该宿主的组织样品、或通过将化合物与肝细胞在体外孵育并且分析所得化合物来鉴别。这两种方法都是本领域已知的。在一些实施方式中，化合物的代谢物是通过氧化过程形成并与相应的含羟基化合物对应。在一些实施方式中，化合物被代谢为药物活性代谢物。
本文使用的术语“调节”，是指直接或间接与靶标相互作用，以改变靶标的活性，仅仅举例来说，包括增强靶标的活性、抑制靶标的活性、限制靶标的活性或者延长靶标的活性。
术语“前药”或“前体药物”是指如下衍生物，其可能不具有药理学活性，但在某些情况下，可口服或肠胃外给予并在这之后在体内代谢以形成具有药理学活性的本发明化合物。前药的非限制性实例包括：酯、碳酸酯、半酯、磷酸酯、硝基酯、硫酸酯、亚砜、酰胺、氨基甲酸酯、含氮化合物、磷酰胺、糖苷、醚、乙缩醛和酮缩醇等。
“有效量”指，将引发例如研究者或医师在研的组织、系统、动物或人的生物学或医学反应的药物或药学制剂的量。此外，术语“治疗有效量”指与没有接受该量的相应对象相比，引起疾病、紊乱、或副作用改良的治疗、治愈、预防、或缓解、或者疾病或紊乱发展速率降低的任何量。该术语范围内还包括有效提高正常生理功能的量。
本文所用的术语“治疗”指缓解疾病、紊乱或病症的至少一种症状。该术语包括向对象给药和/或应用一种或多种本文所述化合物以提供病症的管理或治疗。用于本公开目的的“治疗”可以但不必须提供治愈；而是指，“治疗”可以是病症的管理形式。当本文所述化合物用于处理有害的增殖细胞(包括癌)时，“治疗”包括部分或完全破坏所述有害的增殖细胞，但对正常细胞的破坏影响最小。有害的快速增殖细胞(包括癌细胞)的所需处理机制在细胞水平上是凋亡。
本文所用的术语“预防”包括共同预防或减缓临床上显著疾病发展的开始或者预防或减缓风险个体中的临床前显著疾病阶段的开始。这包括预防性治疗有疾病发展风险的个人。
术语“受试者”或“患者”包括能患有病症或与降低的或不足的程序性细胞死亡(细胞凋亡)相关的病症的有机体或能以其他方式从本发明化合物的给药中获益的有机体，例如人类和非人类动物。优选的人类包括患有或倾向患有如本文所述的病症或相关状况的人类患者。术语“非人类动物”包括脊椎动物，例如哺乳动物，如非人类灵长类动物、羊、牛、狗、猫和啮齿动物如小鼠，以及非哺乳动物，如鸡、两栖动物、爬行动物等。
本文使用的GI50是指使50％细胞生长被抑制所需的药物浓度，即药物使50％细胞(如癌细胞)的生长得到抑制或控制时的药物浓度。
本文使用的IC50是指在测量效应的分析中获得最大效应的50％抑制的特定测试化合物的量、浓度或剂量。
本文使用的EC50是指测定化合物的剂量、浓度或量，其引起特定测定化合物诱导、刺激或加强的特定反应的50％的最大表达的剂量依赖反应。
本发明的PARP7抑制剂
本发明涉及一种PARP7抑制剂，其包括式(I)的化合物或其药学可接受的盐、氘代化合物、溶剂化物、酯、酸、代谢物或前药，
其中，
表示双键或单键，条件是任一个原子上最多连接一个双键；
X选自卤素、C1-6卤代烷基、和C2-6烷酰基，或与Y以及与它们相连的碳原子一起形成稠合苯环或杂环；
Y选自NH和O，或与X以及与它们相连的碳原子一起形成稠合苯环或杂环；A为选自-N-O-、＝N-O-、-O-N-和-O-N＝的氮氧基，且N原子在价键未饱和时任选地被氢、C1-6烷基、C2-6酰基、或C1-6磺酰基取代；
L选自-(CH2)n-、其中n为1、2或3，R5和R5’各自独立地选自氢、C1-3烷基、卤素、氘、和羟基，或R5和R5’以及与它们相连的碳原子一起形成C3-6环烷基；
R1和R2各自独立地选自氢、C1-6烷基、C1-6羟基烷基、C1-6卤代烷基、C3-6环烷基、C3-6羟基环烷基或C3-6卤代环烷基，或者R1与R2以及与它们相连的碳原子一起形成C5-8环烷基；
M为选自式(M-l)、(M-2)、(M-3)、(M-4)和(M-5)的基团：
其中D1、D2、D3、D4、D5、D6、D7、D8、D9和D10各自独立地选自N和CH，条件是M基团的环原子上至少含有一个N，
R3各自独立地选自氢、卤素、羟基、C1-4烷基、C1-6卤代烷基、和C1-6羟基烷基，m各自独立地选自0、1或2；
G为任选地被一个或两个R4基团取代的5-6元芳杂环基团，其中R4基团各自独立地选自羟基、氰基、C1-6烷基、C1-6羟基烷基、C1-6卤代烷基、卤素、C3-6环烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、-NR6R6’、-C(O)NR6R6’、-NR6C(O)R7、-C(O)OR6、-OR6、-S(O)2NR6R6’、-NR6S(O)2R7、-S(O)2R7、-C(O)R6、和任选地被卤素取代的苯基，或者两个R4以及与它们相连的碳原子一起形成任选地被羟基、甲基、卤素或氧代取代的C5-8环烷基、苯基或杂芳基，其中R6、R6’和R7各自独立地选自氢、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、C3-6环烷基、和C1-6羟基烷基。在优选的实施方式中，所述杂环为含N原子的5-8元单环，优选为哌啶、吡咯烷、哌嗪或四氢吡啶。
在另外的实施方式中，M为选自式(M-1a)、(M-2a)、(M-3a)、(M-4a)和(M-5a)的基团：
其中D1选自N或CH，m各自独立地选自0、1或2，R3各自独立地选自氢、羟基、卤素或C1-4烷基。
在其他的实施方式中，其中G为选自式(G-1)、(G-2)、(G-3)、(G-4)、(G-5)、(G-6)和(G-7)的基团：
其中Q各自独立地选自N或CH，更优选Q各自独立地为N；R4如之前所定义。
在本说明书中，任选取代基R4的取代位置不受限制，可以连接在G所代表的杂芳基部分的任何不饱和碳处。例如，当G所代表的杂芳基部分形成稠合双环时(如上式G-3、G-4)，本文的表示法并不将R4取代基的位置限制于所连接的单环上，而是可以在稠合双环中的任一个环的任何不饱和碳处进行R4取代。
优选地，R4基团为任选的取代基，且各自独立地选自氰基、C1-4烷基、C1-4羟基烷基、C1-4卤代烷基、卤素、C3-6环烷基、C2-4烯基、C2-4炔基、-NR6R6’、-C(O)NR6R6’、-C(O)OR6、-OR6、-C(O)R6、和任选地被卤素取代的苯基，其中R6和R6’各自独立地选自氢和C1-4烷基。
在优选的方面，X选自溴、三氟甲基、和乙酰基，或X与Y以及与它们相连的碳原子一起形成稠合苯环或稠合哌啶环；Y选自NH，或与X以及与它们相连的碳原子一起形成稠合苯环或稠合哌啶环。
在进一步优选的实施方式中，当式(M-1)或式(M-1a)中D1为N时，L选自-(CH2)n-、当D1为CH时，L选自-(CH2)n-、/> 且n、R5、R5’如之前所定义。/>
在另外的实施方式中，当A为-N-O-时，L为当A为＝N-O-时，L为当A为-O-N-时，L为/> 当A为-O-N＝时，L为/>
在本发明的优选方面，提供一种PARP7抑制剂，其包括式(I)的化合物、或其药学可接受的盐、氘代化合物、溶剂化物、酯、酸、代谢物或前药，其中X选自C1-6卤代烷基和C2-6烷酰基，X更优选为C1-6卤代烷基，特别是三氟甲基；Y选自NH；A为选自＝N-O-、-O-N-和-O-N＝的氮氧基，更优选为-O-N-；L选自 更优选为/>其中R5和R5’各自独立地选自氢或卤素，更优选为氢；M为选自式(M-1a)和(M-5a)的基团，其中D1选自N或CH，更优选为CH，m各自为1，R3独立地选自氢、卤素或C1-3烷基，更优选为氢；G为选自式(G-1)、(G-3)和(G-4)的基团，更优选为式(G-1)的基团，其中Q选自N或CH，更优选为N，R4选自C1-6卤代烷基、卤素、C3-6环烷基、和任选地被卤素取代的苯基，更优选为C1-6卤代烷基，特别是三氟甲基；R1和R2各自独立地选自氢、C1-6烷基、和C3-6环烷基，或者R1与R2以及与它们相连的碳原子一起形成C5-8环烷基，R1和R2各自更优选独立地选自氢和C1-6烷基。
在另外优选的方面，本发明提供一种PARP7抑制剂，其包括式(I)的化合物、或其药学可接受的盐、氘代化合物、溶剂化物、酯、酸、代谢物或前药，其中表示双键或单键，条件是任一个原子上最多连接一个双键；
X选自卤素和C1-6卤代烷基，或与Y以及与它们相连的碳原子一起形成稠合苯环或杂环；
Y选自NH，或与X以及与它们相连的碳原子一起形成稠合苯环或杂环；
A为选自-N-O-、＝N-O-、-O-N-和-O-N＝的氮氧基，且N原子在价键未饱和时任选地被氢、C1-6烷基、C2-6酰基、或C1-6磺酰基取代；
L选自-(CH2)n-、其中n为1、2或3，R5和R5’各自独立地选自氢或C1-3烷基，或R5和R5’以及与它们相连的碳原子一起形成C3-6环烷基；
R1和R2各自独立地选自氢、C1-6烷基、C1-6羟基烷基、C1-6卤代烷基、C3-6环烷基、C3-6羟基环烷基或C3-6卤代环烷基，或者R1与R2以及与它们相连的碳原子一起形成C5-8环烷基；
M为选自式(M-l)、(M-2)、(M-3)和(M-4)的基团：
其中D1、D2、D3、D4、D5、D6、D7、D8和D9各自独立地选自N和CH，条件是M基团的环原子上至少含有一个N，
R3各自独立地选自卤素、羟基、C1-4烷基和C1-6卤代烷基，
m各自独立地选自0、1或2；
G为任选地被一个或两个R4基团取代的5-6元芳杂环基团，其中R4基团各自独立地选自羟基、氰基、C1-6烷基、C1-6羟基烷基和C1-6卤代烷基，或者两个R4以及与它们相连的碳原子一起形成任选地被羟基、或甲基取代的C5-8环烷基。
进一步优选地，M为选自式(M-1a)、(M-2a)、(M-3a)和(M-4a)的基团：
/>
其中D1选自N或CH，m各自独立地选自0、1或2，R3各自独立地选自羟基、卤素或C1-4烷基。
另外进一步优选地，G为选自式(G-1)和(G-2)的基团：
其中Q选自N或CH。
另外特别优选地，当式(M-1)或式(M-1a)中D1为N时，L选自-(CH2)n-、 当D1为CH时，L选自-(CH2)n-、/>
另外特别优选地，当A为-N-O-时，L为当A为＝N-O-时，L为当A为-O-N-时，L为/> 当A为-O-N＝时，L为/>
本发明还优选地提供一种PARP7抑制剂，其包括式(II)的化合物、或其药学可接受的盐、氘代化合物、溶剂化物、酯、酸、代谢物或前药，
其中，表示双键或单键，条件是任一个原子上最多连接一个双键，
X选自卤素和C1-6卤代烷基，或与Y以及与它们相连的碳原子一起形成稠合苯环或哌啶环；
Y选自NH，或与X以及与它们相连的碳原子一起形成稠合苯环或哌啶环；
A为选自-N-O-、＝N-O-、-O-N-和-O-N＝的氮氧基，且N原子在价键未饱和时任选地被氢、C1-6烷基、C2-6酰基、或C1-6磺酰基取代；
L选自-(CH2)n-、其中n为1、2或3，R5和R5’各自独立地选自氢或C1-3烷基，或R5和R5’以及与它们相连的碳原子一起形成C3-6环烷基；
D选自N或CH；
Q选自N或CH；
R1和R2各自独立地选自氢、C1-6烷基、C3-6环烷基，或者R1与R2以及与它们相连的碳原子一起形成C5-8环烷基；
R3选自氢或C1-3烷基；
R4选自羟基、氰基、C1-6烷基、C1-6羟基烷基和C1-6卤代烷基。
进一步优选地，本发明涉及下表所示的化合物、或其药学可接受的盐、氘代化合物、溶剂化物、酯、酸、代谢物或前药。
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本文描述的是新型的PARP7抑制剂。本文也描述了此化合物的药学可接受的盐、氘代化合物、溶剂化物、酯、酸、代谢物和前药。
本发明的化合物可以游离形式存在，例如游离碱或游离酸或两性离子形式，或者可以盐的形式存在。所述盐可以为任何盐，可为有机或无机加成盐，特别是常用于药学的任何生理学上可接受的有机或无机加成盐。
对于本发明的目的而言为优选的盐是本发明化合物的生理学上可接受的盐。然而，也包括自身不适于药学应用但例如可用于分离或纯化本发明化合物的盐。
术语“药学可接受的盐”是指本发明化合物的相对无毒的无机酸或有机酸加成盐，例如参见S.M.Berge等人，“Pharmaceutical Salts,J.Pharm.Sci.1977,66,1-19。
本发明化合物的药学可接受的盐包括无机酸、羧酸和磺酸的酸加成盐，例如以下酸的盐：盐酸、氢溴酸、氢碘酸、硫酸、焦硫酸、磷酸、硝酸；或与有机酸的盐，例如甲酸、乙酸、乙酰乙酸、丙酮酸、三氟乙酸、丙酸、丁酸、己酸、庚酸、十一烷酸、月桂酸、苯甲酸、水杨酸、2-(4-羟基苯甲酰基)-苯甲酸、樟脑酸、肉桂酸、环戊烷丙酸、二葡糖酸、3-羟基-2-萘甲酸、烟酸、扑酸、果胶酯酸、过硫酸、3-苯基丙酸、苦味酸、叔戊酸、2-羟基乙磺酸、衣康酸、氨基磺酸、三氟甲磺酸、十二烷基硫酸、乙磺酸、苯磺酸、对甲苯磺酸、甲磺酸、2-萘磺酸、萘二磺酸、樟脑磺酸、柠檬酸、酒石酸、硬脂酸、乳酸、草酸、丙二酸、琥珀酸、苹果酸、己二酸、海藻酸、马来酸、富马酸、D-葡糖酸、扁桃酸、抗坏血酸、葡庚糖酸、甘油磷酸、天冬氨酸、磺基水杨酸、半硫酸或硫氰酸的盐。
本发明化合物的药学可接受的盐还包括常用碱的盐，例如且优选碱金属盐(例如钠盐和钾盐)、碱土金属盐(例如钙盐和镁盐)、以及衍生自氨或具有1至16个碳原子的有机胺的铵盐，所述有机胺例如且优选为乙胺、二乙胺、三乙胺、乙基二异丙胺、单乙醇胺、二乙醇胺、三乙醇胺、二环己胺、二甲基氨基乙醇、普鲁卡因、二苄胺、N-甲基吗啉、精氨酸、赖氨酸、乙二胺、N-甲基哌啶、N-甲基葡糖胺、二甲基葡糖胺、乙基葡糖胺、1,6-己二胺、氨基葡萄糖、肌氨酸、丝氨醇、三(羟甲基)氨基甲烷、氨基丙二醇、Sovak碱和1-氨基-2,3,4-丁三醇。
本发明包括本发明化合物的所有可能的盐，其可为单一盐或所述盐以任意比例的任意混合物。
本发明包括本发明化合物的所有可能的氘代化合物，氘原子可任意取代在碳原子或氮原子上。
溶剂化物是为了本发明的目的对通过在固态或液态下的配位作用与溶剂分子形成络合物的本发明化合物的那些形式而使用的术语。水合物是其中与水发生配位的特殊溶剂合物形式。水合物优选作为本发明范围内的溶剂化物。
此外，本发明还包括本发明化合物的前体药物。术语“前药”包括自身可以是有生物学活性的或是惰性的但在其于体内的保留时间中被转化成(例如通过代谢或水解)本发明化合物的化合物。
此外，本发明包括本发明化合物的所有可能的结晶形式或多晶型物，其作为单独的多晶型物，或作为多于一种多晶型物以任意比例的混合物。
在本说明书中，在一些情况中为方便起见，化合物的结构式代表特定的异构体，但本发明包括所有异构体，例如几何异构体、基于不对称碳原子的光学异构体、立体异构体、互变异构体等。
本发明所涉及带有手性的化合物，其构型可以是任意构型或者混合的外消旋体。当根据本发明使用的化合物包含多于一种手性中心时，其可以非对映体形式存在。所述非对映体异构体化合物可以通过本领域技术人员已知的方法分离(例如，色谱或结晶)，而单独对映体可以如上所述分离。本发明包括根据本发明使用的多种非对映体化合物及其混合物的应用。本发明使用的化合物可以不同互变异构形式或以不同几何异构体形式存在，本发明包括根据本发明使用的化合物的各个互变异构体和/或几何异构体及其混合物的应用。本发明使用的化合物可以两性离子形式存在。本发明包括根据本发明使用的化合物的各个两性离子形式及其混合物的应用。
筛选和表征药学可接受的盐、多晶型和/或溶剂化物可以使用多种技术完成，所述技术包括但不限于热分析、X射线衍射、光谱、显微镜方法、元素分析。使用的各种光谱技术包括但不限于Raman、FTIR、UVIS和NMR(液体和固体状态)。各种显微镜技术包括但不限于IR显微镜检术和拉曼(Raman)显微镜检术。
因此，本发明包括本发明化合物的所有可能的盐、多晶型物、代谢物、水合物、氘代化合物、溶剂化物、或前药(例如：酯)，其作为单独的盐、多晶型物、代谢物、水合物、氘代化合物、溶剂化物、或前药，或作为多于一种盐、多晶型物、代谢物、水合物、氘代化合物、溶剂化物、前药以任意比例的混合物。
本发明的药物用途
本发明的式(I)或式(II)的化合物、或其药学可接受的盐、氘代化合物、溶剂化物、酯、酸、代谢物或前药，能够选择性地抑制PARP7的酶活性，因此能够用于治疗或预防由PARP7活性调节的或受其影响的或者其中涉及PARP7活性或过表达的疾病、障碍或病症。
在优选的方面，由PARP7活性调节的或受其影响的或者其中涉及PARP7活性或过表达的疾病、障碍或病症为过度增殖性疾病，特别是癌症，包括但不限于肺鳞癌、肺腺癌、非小细胞肺癌、小细胞肺癌、头颈鳞癌、乳腺癌、胰腺癌、胰腺导管腺癌、结直肠癌、黑色素瘤、卵巢癌、食管鳞癌、胃癌、肝癌、口腔癌、尿路上皮癌、前列腺癌、膀胱癌、肾细胞癌、胃肠间质瘤、子宫颈癌、子宫内膜癌、横纹肌肉瘤、间皮瘤、神经内分泌瘤、纤维肉瘤、脑癌和恶性胶质瘤等。
在另外优选的方面，由PARP7活性调节的或受其影响的或者其中涉及PARP7活性或过表达的疾病、障碍或病症为自身免疫性或炎症性疾病，包括但不限于溃疡性结肠炎、克劳恩病、多发性硬化症、自身免疫性肝病、I型糖尿病、支气管哮喘、系统性红斑狼疮、类风湿性关节炎、强制性脊柱炎、幼年特发性关节炎、银屑病、多发性肌炎和皮肌炎等。
本发明的化合物可全身和/或局部地发挥作用。为此，其可以以适当的方式给药，例如通过口服途径、肠胃外途径、肺途径、鼻途径、舌下途径、舌途径、含服途径、直肠途径、皮肤途径、经皮途径、结膜途径或耳途径，或以植入物或支架的形式。
优选地，在本发明的实施方式中，可以通过注射、口服、吸入、直肠和经皮施用中的至少一种将包含本发明化合物的药物施用给患者。
不论所选的给药途径如何，都通过本领域技术人员已知的常规方法将本发明的PARP7抑制剂和/或本发明的药物组合物配制成药学上可接受的剂型。
在根据本发明对患者进行治疗时，给定药物的量取决于诸多因素，如具体的给药方案、疾病或病症类型及其严重性、需要治疗的受治疗者或宿主的独特性(例如体重)，但是，根据特定的周围情况，包括例如已采用的具体药物、给药途径、治疗的病症、以及治疗的受治疗者或宿主，施用剂量可由本领域已知的方法常规决定。通常，就成人治疗使用的剂量而言，施用剂量典型地在0.02-5000mg/天，例如约1-1500mg/天的范围。该所需剂量可以方便地被表现为一剂、或同时给药的(或在短时间内)或在适当的间隔的分剂量，例如每天二、三、四剂或更多分剂。本领域技术人员可以理解的是，尽管给出了上述剂量范围，但具体的有效量可根据患者的情况并结合医师诊断而适当调节。
本发明的化合物的实际给药剂量水平和时间进程可以变化，从而获得有效实现特定患者所期望的治疗响应并对所述患者无毒的活性成分的量。
药物组合物
本发明的另一方面涉及药物组合物，其包含本发明的式(I)或式(II)的化合物、或其药学可接受的盐、氘代化合物、溶剂化物、酯、酸、代谢物或前药，和药学上可接受的稀释剂、载体或赋形剂，以及任选的一种或多种其他治疗剂。
本发明的化合物可以以单独的药剂或与一种或多种其他治疗剂组合的形式给药，其中所述组合不引发不可接受的副作用。该药物组合物包括给药包含本发明的化合物和一种或多种其他治疗剂的单一药物剂量制剂、以及以其自身的单独的药物剂量制剂形式给药本发明的化合物和各种其他治疗剂。例如，可以向患者以例如片剂或胶囊的单一口服剂量组合物形式将式(I)或式(II)的化合物和其他治疗剂一起给药，或者可以以单独的剂量制剂形式给药每一药剂。
当使用单独的剂量制剂时，本发明的化合物和一种或多种其他治疗剂可以在基本上相同的时间(例如同时)或在分别错开的时间(例如，相继地)给药。
特别地，本发明的化合物可以以与下列物质的固定组合或单独组合的形式使用：其他抗肿瘤剂，例如烷化剂、抗代谢剂、得自植物的抗肿瘤剂、激素治疗剂、拓扑异构酶抑制剂、喜树碱衍生物、激酶抑制剂、靶向药物、抗体、干扰素和/或生物反应修饰剂、抗血管生成化合物以及其他抗肿瘤药物。
本发明的化合物还可以连同放射疗法和/或手术介入来用于癌症治疗。
化合物的制备
使用本领域技术人员已知的标准合成技术或使用本领域已知的方法与本文描述的方法组合，可以合成本发明的化合物。另外，本文给出的溶剂、温度和其它反应条件可以根据本领域技术而改变。作为进一步的指导，也可以利用以下的合成方法。
所述反应可以按顺序使用，以提供本文描述的化合物；或它们可以用于合成片段，所述片段通过本文描述的方法和/或本领域已知的方法随后加入。
用于合成本文描述的化合物的起始原料可以被合成或可以从商业来源获得。本文描述的化合物和其它相关具有不同取代基的化合物可以使用本领域技术人员已知的技术和原料合成。制备本文公开的化合物的一般方法可以来自本领域已知的反应，并且该反应可以通过由本领域技术人员所认为适当的试剂和条件修改，以引入本文提供的分子中的各种部分。
如果需要，反应产物可以使用常规技术分离和纯化，包括但不限于过滤、蒸馏、结晶、色谱等方法。这些产物可以使用常规方法表征，包括物理常数和图谱数据。
制备式(I)或式(II)的化合物的合成方案的非限制性实施例如下描述。
实施例
以下具体的非限制性实施例将被解释为仅仅是说明性的，并不以任何方式限制本发明。虽然无需进一步详细描述，但是可以相信本领域技术人员能基于本文的描述，完全利用本公开。
化合物的结构是通过核磁共振(NMR)或/和质谱(MS)来确定的。NMR的测定溶剂为氘代二甲基亚砜(DMSO-d6)、氘代氯仿(CDCl3)或氘代甲醇(CD3OD)。
实施例中如无特殊说明，溶液是指水溶液。
实施例中如无特殊说明，反应的温度为室温，例如20℃～30℃。
实施例中的反应进程的监测采用薄层色谱法(TLC)和LCMS，反应所使用的展开剂、纯化化合物采用的柱层析的洗脱剂和薄层色谱法的展开剂体系包括：A：二氯甲烷/甲醇体系，B：正已烷/乙酸乙酯体系，C：石油醚/乙酸乙酯体系。溶剂的体积比根据化合物的极性而进行调节，也可以加入少量的三乙胺和醋酸等碱性或酸性试剂进行调节。
实施例1：化合物1的合成(S)-5-{[1-{[2-氧代-2-{4-[5-(三氟甲基)嘧啶-2-基] 哌嗪-1-基}乙氧基]氨基}丙烷-2-基]氨基}-4-(三氟甲基)哒嗪-3(2H)-酮
/>
1.1中间体的合成
步骤A：4,5-二溴-2-((2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)哒嗪-3(2H)-酮的制备
将4,5-二溴哒嗪-3(2H)-酮(10.00克，39.39毫摩尔，1.0eq.)溶于N,N-二甲基甲酰胺(84毫升)，氮气保护下，置于冰浴中降至0℃，分批加入氢化钠(60％，1.89克，47.27毫摩尔，1.2eq.)。反应液于0℃反应1小时。然后向反应液中滴加2-(三甲基硅烷基)乙氧甲基氯(7.22克，43.33毫摩尔，1.1eq.)。反应液于25℃继续反应3小时。缓慢向反应液中加水(400毫升)淬灭，乙酸乙酯(3x400毫升)萃取。合并有机相，饱和盐水(400毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩。粗品用硅胶柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝20/1；V/V)分离纯化得到4,5-二溴-2-((2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)哒嗪-3(2H)-酮(7.45克，黄色油状物)，收率：49.2％。LCMS:(ESI)[M+H-28]+＝356.6。
1H NMR:(400MHz,CDCl3)δ7.85(s,1H),5.52(s,2H),3.80–3.71(m,2H),1.03–
0.95(m,2H),0.03(s,9H)。
步骤B：4-溴-5-氯-2-((2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)哒嗪-3(2H)-酮的制备
将4,5-二溴-2-((2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)哒嗪-3(2H)-酮(7.45克，19.39毫摩尔，1.0eq.)溶于N-甲基吡咯烷酮(15毫升)，加入氯化锂(814毫克，19.39毫摩尔，1.0eq.)。反应液加热至95℃反应4小时。反应液降至室温并加水(100毫升)稀释，乙酸乙酯(3x80毫升)萃取。合并有机相，饱和盐水(80毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩。残留物用硅胶柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝20/1；V/V)分离纯化得到4-溴-5-氯-2-((2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)哒嗪-3(2H)-酮(5.45克，黄色油状物)，收率：82.7％。
LCMS:(ESI)[M+H-28]+＝312.8。
1H NMR:(400MHz,CDCl3)δ7.77(s,1H),5.53(s,2H),3.80–3.70(m,2H),1.07–0.95(m,2H),0.03(s,9H)。
步骤C：5-氯-4-(三氟甲基)-2-{[2-(三甲基硅基)乙氧基]甲基}哒嗪-3(2H)-酮(中间体A)的制备
将4-溴-5-氯-2-((2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)哒嗪-3(2H)-酮(3.25克，9.57毫摩尔，1.0eq.)溶于N,N-二甲基甲酰胺(10毫升)，加入碘化亚铜(1.28克，6.70毫摩尔，0.7eq.)，氮气保护下将氟磺酰基二氟乙酸甲酯(5.52克，28.71毫摩尔，3.0eq.)滴加至反应液中。反应液加热至95℃反应3小时。将反应液冷却至室温，加水(80毫升)稀释，乙酸乙酯(3x80毫升)萃取。合并有机相，饱和盐水(80毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩。残留物用硅胶柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝10/1；V/V)分离纯化得到中间体A(5-氯-4-(三氟甲基)-2-{[2-(三甲基硅基)乙氧基]甲基}哒嗪-3(2H)-酮，2.80克，无色油状物)，收率：89.0％。
LCMS:(ESI)[M+H-28]+＝301.8。
1H NMR:(400MHz,CDCl3)δ8.12(s,1H),5.54(s,2H),3.81–3.73(m,2H),1.02–0.96(m,2H),0.02(s,9H)。
步骤D：(S)-5-((1-羟基丙烷-2-基)氨基)-4-(三氟甲基)-2-((2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)哒嗪-3(2H)-酮(中间体B)的制备
将5-氯-4-(三氟甲基)-2-{[2-(三甲基硅基)乙氧基]甲基}哒嗪-3(2H)-酮(2.80克，8.51毫摩尔，1.0eq.)溶于乙醇(21毫升)，依次加入三乙胺(860毫克，8.51毫摩尔，1.0eq.)以及L-氨基丙醇(2.56克，34.04毫摩尔，4.0eq.)。反应液加热至60℃反应3小时。反应液降至室温，加水(50毫升)，乙酸乙酯(3x50毫升)萃取。合并有机相，饱和盐水(50毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩。残留物用硅胶柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝1/1；V/V)分离纯化得到中间体B，((S)-5-((1-羟基丙烷-2-基)氨基)-4-(三氟甲基)-2-((2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)哒嗪-3(2H)-酮,450毫克，黄色油状物)，收率：14.4％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝367.8。
1H NMR:(400MHz,CDCl3)δ7.74(s,1H),5.90–5.79(m,1H),5.45–5.35(m,2H),4.00–3.89(m,1H),3.87–3.80(m,1H),3.76–3.65(m,3H),1.35(d,J＝6.4Hz,3H),1.02–0.94(m,2H),0.02(s,9H)。
步骤E: 4-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯的制备
将2-氯-5-(三氟甲基)嘧啶(4.00克，21.92毫摩尔，1.05eq.)与哌嗪-1-羧酸叔丁酯(3.89克，20.87毫摩尔，1.0eq.)溶于N-甲基吡咯烷酮(40毫升)，加入碳酸钾(3.46克，25.04毫摩尔，1.2eq.)。将反应液加热至80℃反应5小时。反应液降至室温，向反应液中加水(150毫升)析出固体。过滤收集固体并溶于乙酸乙酯(150毫升)，无水硫酸钠干燥并浓缩得到4-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(6.4克，白色固体)，收率：87.9％。
LCMS:(ESI)[M+H-56]+＝276.8。
1H NMR:(400MHz,DMSO-d6)δ8.74(s,2H),3.89–3.79(m,4H),3.49–3.42(m,4H),1.44(s,9H)。
步骤F:2-(哌嗪-1-基)-5-(三氟甲基)嘧啶(中间体C)的制备
将4-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(3.00克，9.03毫摩尔，1.0eq.)溶于二氯甲烷(10毫升)，加入盐酸二氧六环溶液(4M，10毫升)。反应液于25℃反应1小时。向反应液中加入N,N-二异丙基乙胺调节pH至7～8并浓缩得到中间体C(2-(哌嗪-1-基)-5-(三氟甲基)嘧啶，2.90克，白色固体)，收率：100％。LCMS:(ESI)[M+H]+＝233.0。
步骤G:2-氧代-2-(4-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)乙氧基氨基甲酸叔丁酯的合成
将2-(哌嗪-1-基)-5-(三氟甲基)嘧啶(2.90克，12.49毫摩尔，1.0eq.)溶于N,N-二甲基甲酰胺(50毫升)，依次加入N,N-二异丙基乙胺(8.07克，62.45毫摩尔，5.0eq.)，2-(7-氮杂苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(5.70克，14.99毫摩尔，1.2eq.)，然后将2-((叔丁氧羰基)氨基)氧基)乙酸(2.62克，13.74毫摩尔，1.1eq.)滴加至反应液中。反应液于25℃反应2小时。向反应液中加水(200毫升)淬灭反应，乙酸乙酯(3x150毫升)萃取。合并有机相，饱和盐水(150毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩。残留物用硅胶柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝1/1；V/V)分离纯化得到2-氧代-2-(4-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)乙氧基氨基甲酸叔丁酯(4.50克，黄色油状物)，收率：88.9％。
LCMS:(ESI)[M+H-56]+＝349.8。
步骤H:2-(氨基氧基)-1-{4-[5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]哌嗪-1-基}乙酮盐酸盐(中间体D)的制备
将2-氧代-2-(4-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)乙氧基氨基甲酸叔丁酯(2.25克，5.55毫摩尔，1.0eq.)溶于二氯甲烷(60毫升)，加入盐酸二氧六环溶液(4M，12毫升)。反应液于25℃反应2小时。反应液浓缩得到中间体D(2-(氨基氧基)-1-{4-[5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]哌嗪-1-基}乙酮盐酸盐，1.73克，黄色固体)，收率：91.2％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝305.8。
1.2化合物1的合成
步骤A:(S)-叔丁基{1-[(2-氧代-2-{4-[5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]哌嗪-1-基}乙 氧基)氨基]丙烷-2-基}氨基甲酸酯(中间体E)的制备
将2-(氨基氧基)-1-{4-[5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]哌嗪-1-基}乙酮盐酸盐(342毫克，1.00毫摩尔，1.0eq.)溶于甲醇(10毫升)，加入N,N-二异丙基乙胺(388毫克，3.00毫摩尔，3.0eq.)中和盐酸盐，然后再加入Boc-L-丙氨醛(208毫克，1.20毫摩尔，1.2eq.)。反应液加热至55℃反应3小时。将反应液降至室温并向其中加入乙酸(240毫克，4.00毫摩尔，4.0eq.)及氰基硼氢化钠(629毫克，10.00毫摩尔，10.0eq.)。反应液于55℃继续反应16小时。反应液降至室温并加入饱和碳酸氢钠(100毫升)淬灭，乙酸乙酯(2x80毫升)萃取。合并有机相，无水硫酸钠干燥并浓缩。残留物用硅胶柱层析(乙酸乙酯/石油醚＝2/1；V/V)分离纯化得到中间体E((S)-叔丁基{1-[(2-氧代-2-{4-[5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]哌嗪-1-基}乙氧基)氨基]丙烷-2-基}氨基甲酸酯，330毫克，白色固体)，收率：71.3％。LCMS:(ESI)[M+H]+＝463.2。
1H NMR:(400MHz,CDCl3)δ8.51(s,2H),6.58(br s,1H),4.75–4.65(m,1H),4.52–4.39(m,2H),4.03–3.89(m,4H),3.74–3.68(m,2H),3.68–3.60(m,2H),3.49–3.42(m,2H),3.13–3.09(m,1H),1.45(s,9H),1.19–1.14(m,3H)。
步骤B:(S)-2-{(2-氨基丙基)氨基]氧基}-1-{4-[5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]哌嗪- 1-基}乙酮的制备
将(S)-叔丁基{1-[(2-氧代-2-{4-[5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]哌嗪-1-基}乙氧基)氨基]丙烷-2-基}氨基甲酸酯(148毫克，0.32毫摩尔，1.0eq.)溶于二氯甲烷(3毫升)，加入三氟乙酸(1.5毫升)。反应液于25℃反应1小时。加入饱和碳酸氢钠(40毫升)中和三氟乙酸，二氯甲烷(2x50毫升)萃取。合并有机相，无水硫酸钠干燥并浓缩得到(S)-2-{(2-氨基丙基)氨基]氧基}-1-{4-[5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]哌嗪-1-基}乙酮(116毫克，淡黄色固体)，收率：99.0％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝363.2。
步骤C:(S)-5-{[1-{[2-氧代-2-{4-[5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]哌嗪-1-基}乙氧 基]氨基}丙烷-2-基]氨基}-4-(三氟甲基)-2-{[2-(三甲基硅基)乙氧基]甲基}哒嗪-3 (2H)-酮的制备
将(S)-2-{(2-氨基丙基)氨基]氧基}-1-{4-[5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]哌嗪-1-基}乙酮(116毫克，0.32毫摩尔，1.0eq.)溶于乙醇(6毫升)，依次加入三乙胺(162毫克，1.60毫摩尔，5.0eq.)以及5-氯-4-(三氟甲基)-2-{[2-(三甲基硅基)乙氧基]甲基}哒嗪-3(2H)-酮(316毫克，0.96毫摩尔，3.0eq.)。反应液加热至60℃反应3小时。反应液降至室温并浓缩，残留物用硅胶柱层析(乙酸乙酯/石油醚＝2/1；V/V)分离纯化得到(S)-5-{[1-{[2-氧代-2-{4-[5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]哌嗪-1-基}乙氧基]氨基}丙烷-2-基]氨基}-4-(三氟甲基)-2-{[2-(三甲基硅基)乙氧基]甲基}哒嗪-3(2H)-酮(37毫克，淡黄色固体)，收率：17.7％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝655.2。
步骤D:(S)-5-{[1-{[2-氧代-2-{4-[5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]哌嗪-1-基}乙氧 基]氨基}丙烷-2-基]氨基}-4-(三氟甲基)哒嗪-3(2H)-酮的制备
将(S)-5-{[1-{[2-氧代-2-{4-[5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]哌嗪-1-基}乙氧基]氨基}丙烷-2-基]氨基}-4-(三氟甲基)-2-{[2-(三甲基硅基)乙氧基]甲基}哒嗪-3(2H)-酮(26毫克，0.04毫摩尔，1.0eq.)溶于二氯甲烷(3毫升)，加入三氟乙酸(0.4毫升)。反应液于25℃反应0.5小时。向反应液中加入饱和碳酸氢钠(30毫升)中和三氟乙酸，二氯甲烷(3x50毫升)萃取。合并有机相，无水硫酸钠干燥并浓缩。将浓缩得到的产物溶解于甲醇(3毫升)，加入碳酸钾(20毫克，0.15毫摩尔，3.6eq.)，将反应液于25℃反应1小时。将反应液过滤，滤液通过prep-HPLC纯化得到化合物1，(S)-5-{[1-{[2-氧代-2-{4-[5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]哌嗪-1-基}乙氧基]氨基}丙烷-2-基]氨基}-4-(三氟甲基)哒嗪-3(2H)-酮(3.62毫克，淡黄色固体)，收率：15.7％。LCMS:(ESI)[M+H]+＝525.5。
1H NMR:(400MHz,CDCl3)δ10.50(br s,1H),8.52(s,2H),7.70(s,1H),7.05–6.97(m,1H),6.33–6.22(m,1H),4.44(s,2H),4.08–3.99(m,1H),3.98–3.89(m,4H),3.76–3.66(m,2H),3.43–3.34(m,2H),3.33–3.23(m,1H),3.07–2.96(m,1H),1.36(d,J＝6.4Hz,3H)。
实施例2：化合物2的合成
(S)-5-((1-(甲基(2-氧代-2-(4-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)乙氧基) 氨基)丙烷-2-基)氨基)-4-(三氟甲基)哒嗪-3(2H)-酮的制备
步骤A:(S)-叔丁基(1-(甲基(2-氧代-2-(4-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌嗪-1- 基)乙氧基)氨基)丙烷-2-基)氨基甲酸酯的制备
将(S)-叔丁基(1-((2-氧代-2-(4-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)乙氧基)氨基)丙烷-2-基)氨基甲酸酯(240毫克，0.52毫摩尔，1.0eq.)溶于甲醇(10毫升)，然后加甲醛溶液(37％水溶液，421毫克，5.19毫摩尔，10.0eq.)。反应液于23℃反应3小时。然后向反应液中加乙酸(125毫克，2.08毫摩尔，4.0eq.)和氰基硼氢化钠(326毫克，5.19毫摩尔，10.0eq.)。反应液于23℃继续反应16小时。缓慢向反应液中加水(80毫升)淬灭，加入饱和碳酸氢钠(10毫升)中和，乙酸乙酯(3x80毫升)萃取。合并有机相，饱和盐水(80毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩。粗品用硅胶柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝2/1；V/V)分离纯化得到(S)-叔丁基(1-(甲基(2-氧代-2-(4-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)乙氧基)氨基)丙烷-2-基)氨基甲酸酯(200毫克，无色透明油状物)，收率：76.0％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝477.2。
步骤B:(S)-2-((2-氨基丙基)(甲基)氨基)氧基)-1-(4-(5-(三氟甲基)嘧啶-2- 基)哌嗪-1-基)乙酮的制备
将(S)-叔丁基(1-(甲基(2-氧代-2-(4-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)乙氧基)氨基)丙烷-2-基)氨基甲酸酯(170毫克，0.36毫摩尔，1.0eq.)溶于二氯甲烷(4毫升)，加入三氟乙酸(2毫升)。反应液于23℃反应1小时。向反应液中加入饱和碳酸氢钠水溶液(50毫升)中和，二氯甲烷(3x80毫升)萃取。合并有机相，无水硫酸钠干燥并浓缩得到(S)-2-((2-氨基丙基)(甲基)氨基)氧基)-1-(4-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)乙酮(120毫克，白色固体)，收率：78.6％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝377.2。
步骤C:(S)-5-((1-(甲基(2-氧代-2-(4-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)乙 氧基)氨基)丙烷-2-氨基)-4-(三氟甲基)-2-((2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)哒嗪-3(2H)- 酮的制备
将(S)-2-((2-氨基丙基)(甲基)氨基)氧基)-1-(4-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)乙酮(120毫克，0.32毫摩尔，1.0eq.)溶于乙醇(10毫升)，氮气保护下加入三乙胺(162毫克，1.60毫摩尔，5.0eq.)及5-氯-4-(三氟甲基)-2-((2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)哒嗪-3(2H)-酮(210毫克，0.64毫摩尔，2.0eq.)，将反应液加热至60℃反应3小时。反应液冷却至室温，浓缩，粗品用硅胶柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝2/1；V/V)分离纯化得到(S)-5-((1-(甲基(2-氧代-2-(4-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)乙氧基)氨基)丙烷-2-氨基)-4-(三氟甲基)-2-((2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)哒嗪-3(2H)-酮(50毫克，黄色油状物)，收率：15.0％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝669.3。
步骤D:(S)-5-((1-(甲基(2-氧代-2-(4-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)乙 氧基)氨基)丙烷-2-基)氨基)-4-(三氟甲基)哒嗪-3(2H)-酮的制备
将(S)-5-((1-(甲基(2-氧代-2-(4-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)乙氧基)氨基)丙烷-2-氨基)-4-(三氟甲基)-2-((2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)哒嗪-3(2H)-酮(25毫克，0.037毫摩尔，1.0eq.)溶于二氯甲烷(2毫升)，加入三氟乙酸(0.2毫升)，反应液于21℃反应2小时。向反应液中加入饱和碳酸氢钠水溶液(30毫升)中和，二氯甲烷(3x50毫升)萃取。合并有机相，无水硫酸钠干燥并浓缩。将粗品重新溶于甲醇(2毫升)，加入碳酸钾(19毫克，0.14毫摩尔，3.6eq.)。反应液于21℃继续反应1小时。反应液过滤，滤液通过prep-HPLC分离纯化得到化合物2，(S)-5-((1-(甲基(2-氧代-2-(4-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)乙氧基)氨基)丙烷-2-基)氨基)-4-(三氟甲基)哒嗪-3(2H)-酮(4.8毫克，白色粉末)，收率：22.9％。LCMS:(ESI)[M+H]+＝539.2。
1H NMR:(400MHz,CDCl3)δ10.23(br s,1H),8.51(s,2H),7.75(s,1H),6.04–5.95(m,1H),4.46–4.36(m,2H),4.19–4.09(m,1H),3.96–3.86(m,4H),3.73–3.59(m,2H),3.48–3.39(m,2H),3.06–2.94(m,1H),2.92–2.83(m,1H),2.71(s,3H),1.34(d,J＝6.4Hz,3H)。
实施例3：化合物3的合成(S)-5-((1-(乙基(2-氧代-2-(4-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)乙氧基)氨基)丙烷-2-基)氨基)-4-(三氟甲基)哒嗪-3(2H)-酮
步骤A:(S)-叔丁基(1-(乙基(2-氧代-2-(4-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌嗪-1- 基)乙氧基)
氨基)丙烷-2-基)氨基甲酸酯的制备
将(S)-叔丁基(1-((2-氧代-2-(4-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)乙氧基)氨基)丙烷-2-基)氨基甲酸酯(250毫克，0.54毫摩尔，1.0eq.)，溶于甲醇(10毫升)，然后加乙醛(238毫克，5.41毫摩尔，10.0eq.)。反应液于23℃反应3小时。然后向反应液中加入乙酸(32毫克，0.54毫摩尔，1.0eq.)及氰基硼氢化钠(340毫克，5.41毫摩尔，10.0eq.)。反应液于23℃继续反应16小时。缓慢向反应液中加水(80毫升)淬灭,并加入饱和碳酸氢钠溶液(5毫升)中和，乙酸乙酯(3x80毫升)萃取。合并有机相，饱和盐水(80毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩。粗品用硅胶柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝2/1；V/V)分离纯化得到(S)-叔丁基(1-(乙基(2-氧代-2-(4-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)乙氧基)氨基)丙烷-2-基)氨基甲酸酯(180毫克，黄色油状物)，收率：63.8％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝491.2。
步骤B:(S)-2-((2-氨基丙基)(乙基)氨基)氧基)-1-(4-(5-(三氟甲基)嘧啶-2- 基)哌嗪-1-基)乙酮的制备
将(S)-叔丁基(1-(乙基(2-氧代-2-(4-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)乙氧基)氨基)丙烷-2-基)氨基甲酸酯(160毫克，0.33毫摩尔，1.0eq.)，溶于二氯甲烷(4毫升)，加入三氟乙酸(2毫升)。反应液于23℃反应1小时。向反应液中加入饱和碳酸氢钠水溶液(40毫升)中和，二氯甲烷(3x50毫升)萃取。合并有机相，无水硫酸钠干燥并浓缩得到(S)-2-((2-氨基丙基)(乙基)氨基)氧基)-1-(4-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)乙酮(160毫克，白色粉末)，收率：95.5％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝391.2。
步骤C:(S)-5-((1-(乙基(2-氧代-2-(4-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)乙 氧基)氨基)丙烷-2-氨基)-4-(三氟甲基)-2-((2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)哒嗪-3(2H)- 酮的制备
将(S)-2-((2-氨基丙基)(乙基)氨基)氧基)-1-(4-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)乙酮(160毫克，0.41毫摩尔，1.0eq.)溶于乙醇(2毫升)，氮气保护下加入三乙胺(207毫克，2.05毫摩尔，5.0eq.)及5-氯-4-(三氟甲基)-2-((2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)哒嗪-3(2H)-酮(270毫克，0.82毫摩尔，2.0eq.)，将反应液加热至60℃反应3小时。反应液冷却至室温，浓缩，粗品用硅胶柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝1/1；V/V)分离纯化得到(S)-5-((1-(乙基(2-氧代-2-(4-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)乙氧基)氨基)丙烷-2-氨基)-4-(三氟甲基)-2-((2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)哒嗪-3(2H)-酮(110毫克，黄色油状物)，收率：33.4％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝683.4。
步骤D:(S)-5-((1-(乙基(2-氧代-2-(4-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)乙 氧基)氨基)丙烷-2-基)氨基)-4-(三氟甲基)哒嗪-3(2H)-酮的制备
将(S)-5-((1-(乙基(2-氧代-2-(4-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)乙氧基)氨基)丙烷-2-氨基)-4-(三氟甲基)-2-((2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)哒嗪-3(2H)-酮(105毫克，0.15毫摩尔，1.0eq.)溶于二氯甲烷(2毫升)，加入三氟乙酸(0.2毫升)，将反应液于21℃反应2小时。向反应液中加入饱和碳酸氢钠水溶液(50毫升)中和，二氯甲烷(3x80毫升)萃取。合并有机相，无水硫酸钠干燥并浓缩。将残留物重新溶于甲醇(2毫升)，加入碳酸钾(77毫克，0.55毫摩尔，3.6eq.)。反应液于21℃继续反应1小时。反应液过滤，滤液通过prep-HPLC分离纯化得到化合物3，(S)-5-((1-(乙基(2-氧代-2-(4-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)乙氧基)氨基)丙烷-2-基)氨基)-4-(三氟甲基)哒嗪-3(2H)-酮(23.29毫克，白色固体)，收率：27.4％。LCMS:(ESI)[M+H]+＝553.2。
1H NMR:(400MHz,CDCl3)δ10.15(br s,1H),8.51(s,2H),7.76(s,1H),6.04–5.92(m,1H),4.49–4.40(m,2H),4.24–4.15(m,1H),3.95–3.85(m,4H),3.73–3.54(m,2H),3.46–3.35(m,2H),3.01–2.83(m,4H),1.33(d,J＝6.4Hz,3H),1.16(t,J＝7.2Hz,3H)。
实施例4：化合物4的合成
(S)-2-(4-(2-((甲基(2-((6-羰基-5-(三氟甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙 基)氨基)氧代)乙酰基)哌嗪-1-基)嘧啶-5-甲腈
4.1)中间体G的合成
步骤A：4-(5-氰基嘧啶-2-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯的制备
将2-氯-5-氰基嘧啶(3.00克，21.50毫摩尔，1.0eq.)溶于N-甲基吡咯烷酮(30毫升)，依次加入1-叔丁氧羰基哌嗪(4.00克，21.50毫摩尔，1.0eq.)以及碳酸钾(5.94克，43.00毫摩尔，2.0eq.)，反应液加热至80℃反应1小时。反应液降至室温并倒入水(40毫升)中，乙酸乙酯(3x50毫升)萃取。合并有机相，依次用水(3x50毫升)及盐水(50毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩。残留物柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝5/1；V/V)纯化得到4-(5-氰基嘧啶-2-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(4.00克，黄色固体)，收率：64.3％。
LCMS:(ESI)[M+H-56]+＝234.2。
1H NMR:(400MHz,CDCl3)δ8.50(s,2H),3.95–3.84(m,4H),3.58–3.45(m,4H),1.49(s,9H)。
步骤B：2-(哌嗪-1-基)-5-氰基嘧啶盐酸盐(中间体G)的制备
将4-(5-氰基嘧啶-2-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(1.00克，3.46毫摩尔，1.0eq.)溶于二氯甲烷(5毫升)，加入盐酸二氧六环溶液(4M，15毫升)。反应液于15℃反应1小时。反应液浓缩得到中间体G,2-(哌嗪-1-基)-5-氰基嘧啶盐酸盐(720毫克，白色固体)，收率：92.3％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝190.2。
4.2)化合物4的合成
步骤A：叔丁基(2-(4-(5-氰基嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)-2-羰基乙氧基)氨基甲酸酯的制备
将2-(哌嗪-1-基)嘧啶-5-甲腈盐酸盐(7.1克，37.57毫摩尔，1.0eq.)溶于四氢呋喃(100毫升)，依次加入N,N-二异丙基乙胺(7.2克，56.25毫摩尔，1.5eq.)，2-(7-氮杂苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(21克，56.25毫摩尔，1.5eq.)，然后将2-((叔丁氧羰基)氨基)氧基)乙酸(7.1克，37.57毫摩尔，1.1eq.)滴加至反应液中，反应液于25℃反应2小时。向反应液中加水(200毫升)淬灭反应，乙酸乙酯(3x150毫升)萃取。合并有机相，饱和盐水(150毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩。残留物用硅胶柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝1/1；V/V)分离纯化得到叔丁基(2-(4-(5-氰基嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)-2-羰基乙氧基)氨基甲酸酯(8.3克，白色固体)，收率：61％。
LCMS:(ESI)[M+H-56]+＝306.1。
步骤B：2-(4-(2-(氨基氧代)乙酰基)哌嗪-1-基)嘧啶-5-甲腈的制备
将叔丁基(2-(4-(5-氰基嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)-2-羰基乙氧基)氨基甲酸酯(500毫克，1.38毫摩尔，1.0eq.)溶于二氯甲烷(5毫升)，加入盐酸二氧六环溶液(4M，3毫升)，反应液于25℃反应2小时。将反应液浓缩，粗品用硅胶柱层析(二氯甲烷/甲醇＝92/8；V/V)分离纯化得到2-(4-(2-(氨基氧代)乙酰基)哌嗪-1-基)嘧啶-5-甲腈(200毫克，白色固体)，收率：72.0％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝263.1。
步骤C：叔丁基(S)-(1-((2-(4-(5-氰基嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)-2-羰基乙氧基)氨 基)丙烷-2-基)氨基甲酸酯的制备
将2-(4-(2-(氨基氧代)乙酰基)哌嗪-1-基)嘧啶-5-甲腈(200毫克，0.764毫摩尔，1eq.)溶于甲醇(4毫升)，然后加Boc-L-丙氨醛溶液(200毫克，1.15毫摩尔，1.5eq)。反应液于55℃反应2小时。然后向反应液中加醋酸(182毫克，3.1毫摩尔，4.0eq.)和氰基硼氢化钠(380毫克，7.6毫摩尔，10.0eq.)。反应液于55℃继续反应16小时。缓慢向反应液中加饱和氯化铵(35毫升)淬灭，乙酸乙酯(3x30毫升)萃取。合并有机相，饱和盐水(40毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩。粗品用硅胶柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝1/1；V/V)分离纯化得到叔丁基(S)-(1-((2-(4-(5-氰基嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)-2-羰基乙氧基)氨基)丙烷-2-基)氨基甲酸酯(200毫克，白色固体)，收率：62.0％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝420.2。
步骤D：叔丁基(S)-(1-((2-(4-(5-氰基嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)-2-羰基乙氧基) (甲基)氨基)丙烷-2-基)氨基甲酸酯的制备
将叔丁基(S)-(1-((2-(4-(5-氰基嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)-2-羰基乙氧基)氨基)丙烷-2-基)氨基甲酸酯(850毫克，2.03毫摩尔，1eq.)溶于甲醇(12毫升)，然后加甲醛溶液(290毫克，2.44毫摩尔，1.2eq.)，反应液于35℃反应2小时。然后向反应液中加醋酸(125毫克，2.08毫摩尔，4.0eq.)和氰基硼氢化钠(1.2克，20.3毫摩尔，10.0eq.)，反应液于35℃继续反应16小时。缓慢向反应液中加水(35毫升)淬灭，乙酸乙酯(3x30毫升)萃取。合并有机相，饱和盐水(40毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩。粗品用硅胶柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝1/2；V/V)分离纯化得到叔丁基(S)-(1-((2-(4-(5-氰基嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)-2-羰基乙氧基)(甲基)氨基)丙烷-2-基)氨基甲酸酯(650毫克，淡黄色固体)，收率：74.0％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝434.2。
步骤E：(S)-2-(4-(2-(((2-氨基丙基)(甲基)氨基)氧代)乙酰基)哌嗪-1-基)嘧 啶-5-甲腈的制备
将叔丁基(S)-(1-((2-(4-(5-氰基嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)-2-羰基乙氧基)(甲基)氨基)丙烷-2-基)氨基甲酸酯(900毫克，2.08毫摩尔，1.0eq.)溶于二氯甲烷(9毫升)，加入三氟乙酸(4毫升),反应液于23℃反应1小时。反应液加碳酸氢钠水溶液(50毫升)淬灭，二氯甲烷(3x80毫升)萃取。合并有机相，无水硫酸钠干燥并浓缩得到(S)-2-(4-(2-(((2-氨基丙基)(甲基)氨基)氧代)乙酰基)哌嗪-1-基)嘧啶-5-甲腈(500毫克，白色粉末)，收率：72％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝334.2。
步骤F：(S)-2-(4-(2-((甲基(2-((6-羰基-5-(三氟甲基)-1-((2-(三甲基甲硅烷 基)乙氧基)甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙基)氨基)氧代)乙酰基)哌嗪-1-基)嘧啶- 5-甲腈的制备
将(S)-2-(4-(2-(((2-氨基丙基)(甲基)氨基)氧代)乙酰基)哌嗪-1-基)嘧啶-5-甲腈(340毫克，1.02毫摩尔，1.0eq.)溶于乙醇(10毫升)，氮气保护下加入三乙胺(247毫克，2.44毫摩尔，2.0eq.)和5-氯-4-(三氟甲基)-2-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)哒嗪-3(2H)-酮(400毫克，0.64毫摩尔，1.22eq.)，反应液加热至60℃反应1小时。反应液冷却至室温，浓缩，粗品用硅胶柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝1/1；V/V)分离纯化得到(S)-2-(4-(2-((甲基(2-((6-羰基-5-(三氟甲基)-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙基)氨基)氧代)乙酰基)哌嗪-1-基)嘧啶-5-甲腈(70毫克，无色油状物)，收率：11.0％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝626.4。
步骤G：(S)-2-(4-(2-((甲基(2-((6-羰基-5-(三氟甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨 基)丙基)
氨基)氧代)乙酰基)哌嗪-1-基)嘧啶-5-甲腈的制备
将(S)-2-(4-(2-((甲基(2-((6-羰基-5-(三氟甲基)-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙基)氨基)氧代)乙酰基)哌嗪-1-基)嘧啶-5-甲腈(70毫克，0.112毫摩尔，1.0eq.)溶于二氯甲烷(3毫升)，加入三氟乙酸(0.3毫升)，反应液于21℃反应2小时。反应液加碳酸氢钠水溶液(30毫升)，二氯甲烷(3x50毫升)萃取。合并有机相，无水硫酸钠干燥并浓缩。将粗品重新溶于无水甲醇(3毫升)，加入碳酸钾(60毫克，0.4毫摩尔，3eq.)。反应液于21℃继续反应1小时。反应液浓缩，粗品用硅胶柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝1/100；V/V)分离纯化得到化合物4，(S)-2-(4-(2-((甲基(2-((6-羰基-5-(三氟甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙基)氨基)氧代)乙酰基)哌嗪-1-基)嘧啶-5-甲腈(20毫克,白色粉末)，收率：36.3％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝496.2。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ10.34(s,1H),8.52(s,2H),7.74(s,1H),6.12–5.82(m,1H),4.40(d,J＝1.4Hz,2H),4.19–4.07(m,1H),3.99–3.84(m,4H),3.74–3.58(m,2H),3.49–3.37(m,2H),3.08–2.93(m,1H),2.93–2.81(m,1H),2.71(s,3H),1.34(d,J＝6.5Hz,3H)。
实施例5：化合物5的合成(S,E)-2-((6-氧代-5-(三氟甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙醛O-(2-氧代-2-(4-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)乙基)肟
步骤A:Boc-L-丙氨醛的制备
在0℃下将戴斯-马丁氧化剂(17.81克，42.00毫摩尔，1.4eq.)加入N-Boc-L-丙氨醇(5.26克，30.00毫摩尔，1.0eq.)的二氯甲烷溶液(120毫升)，反应液于20℃反应1小时。向反应液中缓慢加水(756毫克，42.00毫摩尔，1.4eq.)，然后再加入石油醚/乙酸乙酯混合溶液(15/1；V/V，150毫升)并搅拌。反应溶液过滤除去固体，将滤液浓缩，粗产物溶入石油醚/乙酸乙酯混合溶液(15/1；V/V，150毫升)，用饱和碳酸氢钠和10％硫代硫酸钠的混合溶液(1:1；V/V，3x120毫升)洗涤，水相再用石油醚/乙酸乙酯混合溶液(10/1；V/V，5x150毫升)萃取。合并有机相，无水硫酸钠干燥并浓缩得到Boc-L-丙氨醛(3.02克，17.435毫摩尔，淡黄色固体)，收率：58.1％。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ9.56(s,1H),5.11(br s,1H),4.30–4.17(m,1H),1.46(s,9H),1.34(d,J＝7.2Hz,3H)。
步骤B:(S,E)-叔丁基(1-((2-氧代-2-(4-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)乙氧基)亚氨基)丙烷-2-基)氨基甲酸酯的制备
将2-(氨基氧基)-1-(4-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)乙酮盐酸盐(400毫克，1.17毫摩尔，1.0eq.)溶于甲醇(10毫升)，然后加入N,N-二异丙基乙胺(454毫克，3.51毫摩尔，3.0eq.)以及Boc-L-丙氨醛(284毫克，1.64毫摩尔，1.4eq.)，反应液于55℃反应3小时。然后向反应液中加入醋酸(71毫克，1.17毫摩尔，1.0eq.)以及氰基硼氢化钠(111毫克，1.76毫摩尔，1.5eq.)。反应液于55℃继续反应半小时。缓慢向反应液中加碳酸氢钠溶液(50毫升)淬灭，用乙酸乙酯(3x100毫升)萃取。合并有机相，饱和盐水(80毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩。粗品用硅胶柱柱层析(乙酸乙酯/石油醚＝3/4；V/V)分离纯化得到(S,E)-叔丁基(1-((2-氧代-2-(4-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)乙氧基)亚氨基)丙烷-2-基)氨基甲酸酯(350毫克，白色固体)，收率：64.3％。
LCMS:(ESI)[M+H-100]+＝361.2。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.73–8.71(m,2H),7.39(d,J＝5.6Hz,1H),7.12
–7.10(d,J＝8Hz,1H),4.74–4.70(m,2H),4.17–4.08(m,1H),3.93–3.77(m,4H),3.61–3.50(m,4H),1.35(s,9H),1.15(d,J＝7.2Hz,3H)。
步骤C:(S,E)-2-氨基丙醛O-(2-氧代-2-(4-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)乙基)
肟的制备
将三氟乙酸(2毫升)加入(S,E)-叔丁基(1-((2-氧代-2-(4-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)乙氧基)亚氨基)丙烷-2-基)氨基甲酸酯(300毫克，0.65毫摩尔，1.0eq.)的二氯甲烷溶液(6毫升)，反应液于23℃反应1小时。反应液中加入饱和碳酸氢钠水溶液(50毫升)淬灭，用二氯甲烷(3x80毫升)萃取。合并有机相，无水硫酸钠干燥并浓缩得到(S,E)-2-氨基丙醛O-(2-氧代-2-(4-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)乙基)肟(200毫克，白色固体)，收率：57.9％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝361.2。
步骤D:(S,E)-2-((6-氧代-5-(三氟甲基)-1-((2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙醛O-(2-氧代-2-(4-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)乙 基)肟的制备
将(S,E)-2-氨基丙醛O-(2-氧代-2-(4-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)乙基)肟(200毫克，0.56毫摩尔，1.0eq.)溶于乙醇(10毫升)，氮气保护下加入三乙胺(281毫克，2.76毫摩尔，5.0eq.)和5-氯-4-(三氟甲基)-2-((2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)哒嗪-3(2H)-酮(365毫克，1.11毫摩尔，2.0eq.)，反应液加热至60℃反应3小时。反应液冷却至室温，浓缩，粗品用硅胶柱柱层析(乙酸乙酯/石油醚＝3/5；V/V)分离纯化得到(S,E)-2-((6-氧代-5-(三氟甲基)-1-((2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙醛O-(2-氧代-2-(4-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)乙基)肟(160毫克，黄色油状物)，收率：40.0％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝653.2。
步骤E:(S,E)-2-((6-氧代-5-(三氟甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙醛O-(2- 氧代-2-(4-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)乙基)肟的制备
将三氟乙酸(1毫升)加入(S,E)-2-((6-氧代-5-(三氟甲基)-1-((2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙醛O-(2-氧代-2-(4-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)乙基)肟(150毫克，0.23毫摩尔，1.0eq.)的二氯甲烷溶液(10毫升)，反应液于21℃反应1小时。往反应液中加碳酸氢钠水溶液(50毫升)淬灭，用二氯甲烷(3x80毫升)萃取。合并有机相，无水硫酸钠干燥并浓缩。将粗品重新溶于无水甲醇(5毫升)，加入碳酸钾(114毫克，0.83毫摩尔，3.6eq.)，反应液于21℃继续反应1小时。将反应液过滤，滤液用prep-HPLC分离纯化得到化合物5,(S,E)-2-((6-氧代-5-(三氟甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙醛O-(2-氧代-2-(4-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)乙基)肟(43.89毫克，白色固体)，收率：36.6％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝523.2。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ11.06(br s,1H),8.58–8.47(m,2H),7.71(s,1H),7.50(d,J＝5.6Hz,1H),5.91–5.81(m,1H),4.84–4.74(m,2H),4.48–4.39(m,1H),3.99–3.88(m,4H),3.77–3.68(m,2H),3.56–3.48(m,2H),1.52(d,J＝6.8Hz,3H)。
实施例6：化合物6的合成
(S,E)-2-((6-氧代-5-(三氟甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丁醛-O-(2-氧代- 2-(4-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)乙基)肟
步骤A:(S)-叔丁基(1-氧代丁烷-2-基)氨基甲酸酯的制备
将(S)-叔丁基(1-羟基丁烷-2-基)氨基甲酸酯(600毫克，3.17毫摩尔，1.0eq.)溶于二氯甲烷(20毫升)，于0℃下加入戴斯马丁试剂(1.88克，4.44毫摩尔，1.4eq.)。反应液于15℃反应1小时，然后向反应液中加水(12毫升)以及石油醚/乙酸乙酯混合溶液(15/1；V/V，18毫升)并搅拌。过滤除去固体，滤液浓缩，浓缩得到的粗品用石油醚/乙酸乙酯混合溶液(15/1；V/V，18毫升)溶解，用饱和碳酸氢钠与10％硫代硫酸钠的混合液(1/1；V/V，3x15毫升)洗涤。水相用石油醚/乙酸乙酯混合溶液(10/1；V/V，3x18毫升)萃取。合并有机相，无水硫酸钠干燥并浓缩得到(S)-叔丁基(1-氧代丁烷-2-基)氨基甲酸酯(355毫克，黄色固体)，收率：53.8％。
LCMS:(ESI)[M+H-56]+＝132.0。
1H NMR:(400MHz,CDCl3)δ9.58(s,1H),5.07(br s,1H),4.27–4.12(m,1H),2.00–1.83(m,1H),1.74–1.62(m,1H),1.46(s,9H),0.97(t,J＝7.6Hz,3H)。
步骤B:(S,E)-叔丁基(1-((2-氧代-2-(4-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基) 乙氧基)亚氨基)丁烷-2-基)氨基甲酸酯的制备
将(S)-叔丁基(1-氧代丁烷-2-基)氨基甲酸酯(150毫克，0.81毫摩尔，1.0eq.)溶于四氢呋喃(10毫升)，加入2-(氨基氧基)-1-(4-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)乙酮盐酸盐(329毫克，0.96毫摩尔，1.2eq.)，钛酸四乙酯(457毫克，2.01毫摩尔，2.5eq.)和N,N-二异丙基乙胺(311毫克，2.41毫摩尔，3.0eq.)。反应液于80℃反应2小时。向反应液中加入水(50毫升)，乙酸乙酯(3x80毫升)萃取。合并有机相，饱和盐水(100毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩。残留物用硅胶柱(乙酸乙酯/石油醚＝1/2；V/V)分离纯化得到(S,E)-叔丁基(1-((2-氧代-2-(4-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)乙氧基)亚氨基)丁烷-2-基)氨基甲酸酯(260毫克，白色固体)，收率：68.4％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝475.2。
步骤C:(S,E)-2-氨基丁醛O-(2-氧代-2-(4-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌嗪-1- 基)乙基)肟的制备
将(S,E)-叔丁基(1-((2-氧代-2-(4-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)乙氧基)亚氨基)丁烷-2-基)氨基甲酸酯(220毫克，0.46毫摩尔，1.0eq.)溶于二氯甲烷(6毫升)，加入三氟乙酸(2毫升)。反应液于15℃反应1小时。向反应液中加入碳酸氢钠溶液(20毫升)淬灭，用二氯甲烷(2x50毫升)萃取。合并有机相，饱和盐水(20毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩得到(S,E)-2-氨基丁醛O-(2-氧代-2-(4-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)乙基)肟(170毫克，黄色固体)，收率：60.7％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝375.2。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.55(s,2H),7.48(d,J＝6.0Hz,1H),4.89–4.71(m,2H),4.04–3.93(m,4H),3.80–3.72(m,2H),3.66–3.55(m,2H),3.49(q,J＝6.8Hz,1H),1.83(brs,2H),1.70–1.56(m,2H),1.05–0.96(m,3H)。
步骤D:(S,E)-2-((6-氧代-5-(三氟甲基)-1-((2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)-1, 6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丁醛-O-(2-氧代-2-(4-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)乙 基)肟的制备
将(S,E)-2-氨基丁醛O-(2-氧代-2-(4-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)乙基)肟(170毫克，0.45毫摩尔，1.0eq.)溶于乙醇(10毫升)，加入5-氯-4-(三氟甲基)-2-((2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)哒嗪-3(2H)-酮(224毫克，0.68毫摩尔，1.5eq.)及三乙胺(230毫克，2.27毫摩尔，5.0eq.)。反应液加热至60℃反应4小时。反应液加水(100毫升)淬灭，乙酸乙酯(2x100毫升)萃取，合并有机相，饱和盐水(100毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩。粗品用硅胶柱(乙酸乙酯/石油醚＝1/2；V/V)分离纯化得到(S,E)-2-((6-氧代-5-(三氟甲基)-1-((2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丁醛-O-(2-氧代-2-(4-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)乙基)肟(110毫克，黄色油状物)，收率：34.1％。
LCMS:(ESI)[M+H-28]+＝638.6。
步骤E:(S,E)-2-((6-氧代-5-(三氟甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丁醛-O-(2-氧代-2-(4-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)乙基)肟的制备
将(S,E)-2-((6-氧代-5-(三氟甲基)-1-((2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丁醛-O-(2-氧代-2-(4-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)乙基)肟(100毫克，0.15毫摩尔，1.0eq.)溶于二氯甲烷(3毫升)，加入三氟乙酸(1毫升)。反应液于15℃反应1小时。向反应液加入碳酸氢钠水溶液(50毫升)，二氯甲烷(3x80毫升)萃取。合并有机相，无水硫酸钠干燥并浓缩。将残留物重新溶于无水甲醇(4毫升)，加入碳酸钾(77毫克，0.55毫摩尔，3.6eq.)。反应液于15℃继续反应1小时。反应液过滤，滤液prep-HPLC分离纯化得到化合物6，(S,E)-2-((6-氧代-5-(三氟甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丁醛-O-(2-氧代-2-(4-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)乙基)肟(14.66毫克，白色固体)，收率：18.1％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝536.7。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ11.02(s,1H),8.52(s,2H),7.72(s,1H),7.46(d,J＝6.0Hz,1H),5.82–5.73(m,1H),4.84–4.76(m,2H),4.29–4.20(m,1H),4.01–3.88(m,4H),3.76–3.68(m,2H),3.56–3.47(m,2H),1.93–1.80(m,2H),1.04(t,J＝7.2Hz,3H)。
实施例7：化合物7的合成(S,E)-2-(4-(2-((2-((6-氧代-5-(三氟甲基)-1,6-二氢 哒嗪-4-基)氨基)亚丙基)氨基)氧基)
乙酰基)哌嗪-1-基)嘧啶-5-碳腈
步骤A:2-((叔丁氧羰基)氨基)氧基)乙酸甲酯的制备
将2-((叔丁氧羰基)氨基)氧基)乙酸(6.00克，31.38毫摩尔，1.0eq.)溶于N,N-二甲基甲酰胺(50毫升)，依次加入碳酸钾(5.21克，37.66毫摩尔，1.2eq.)以及碘甲烷(4.45克，31.38毫摩尔，1.0eq.)。反应液于15℃反应1小时。向反应液加水(100毫升)淬灭，乙酸乙酯(3x60毫升)萃取。合并有机相，饱和盐水(40毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩。得到的粗产物用硅胶柱柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝2/1)分离纯化得到2-((叔丁氧羰基)氨基)氧基)乙酸甲酯(5.08克，无色油状物)，收率：78.9％。
LCMS:(ESI)[M+H-56]+＝150.2。
1H NMR:(400MHz,CDCl3)δ7.82(br s,1H),4.48(s,2H),3.82(s,3H),1.51(s,9H)。
步骤B:2-(氨基氧基)乙酸甲酯盐酸盐的制备
将盐酸二氧六环溶液(4M，50毫升)加入2-((叔丁氧羰基)氨基)氧基)乙酸甲酯(2.85克，13.89毫摩尔，1.0eq.)的二氯甲烷溶液(10毫升)。反应液于15℃反应1小时。反应液浓缩得到2-(氨基氧基)乙酸甲酯盐酸盐(1.96克，白色固体)，收率：99.9％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝106.2。
步骤C:({[(6S,7E)-2,2,6-三甲基-4-氧代-5-氮杂-3-氧杂庚-7-亚基]氨基}氧 基)乙酸甲酯的制备
将2-(氨基氧基)乙酸甲酯盐酸盐(1.96克，13.85毫摩尔，1.2eq.)加入四氢呋喃(120毫升)中，依次加入N,N-二异丙基乙胺(5.7毫升，34.62毫摩尔，3.0eq.)，(S)-叔丁基(1-氧丙烷-2-基)氨基甲酸酯(2.00克，11.54毫摩尔，1.0eq.)以及钛酸四乙酯(2.63克，11.54毫摩尔，1.0eq.)。反应液加热至80℃反应2小时。将反应液降至室温并加水(100毫升)淬灭，乙酸乙酯(3x100毫升)萃取。合并有机相，饱和盐水(100毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩。得到的粗产物用硅胶柱柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝2/1)分离纯化得到({[(6S,7E)-2,2,6-三甲基-4-氧代-5-氮杂-3-氧杂庚-7-亚基]氨基}氧基)乙酸甲酯(1.69克，白色固体)，收率：56.3％。LCMS:(ESI)[M+H-100]+＝161.2。
1H NMR:(400MHz,CDCl3)δ7.59–7.49(m,1H),5.01–4.80(br,1H),4.63(s,2H),4.33–4.26(m,1H),3.81(s,3H),1.48(s,9H),1.34(d,J＝6.8Hz,3H)。
步骤D:({[(6S,7E)-2,2,6-三甲基-4-氧代-5-氮杂-3-氧杂庚-7-亚基]氨基}氧 基)乙酸(中间体F)的制备
将({[(6S,7E)-2,2,6-三甲基-4-氧代-5-氮杂-3-氧杂庚-7-亚基]氨基}氧基)乙酸甲酯(900毫克，3.46毫摩尔，1.0eq.)溶于甲醇(30毫升)与水(5毫升)，加入氢氧化锂(124毫克，5.19毫摩尔，1.5eq.)。反应液于40℃反应2小时。反应液降至室温并加水(40毫升)稀释，用1M稀盐酸调节至pH＝3，并用二氯甲烷(3x50毫升)萃取。合并有机相，饱和盐水(80毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩得到中间体F，({[(6S,7E)-2,2,6-三甲基-4-氧代-5-氮杂-3-氧杂庚-7-亚基]氨基}氧基)乙酸(851毫克，黄色油状物)，收率：99.9％。
LCMS:(ESI)[M+Na]+＝269.2。
步骤E:(S,E)-叔丁基(1-((2-(4-(5-氰基嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)-2-氧代-乙氧 基)亚氨基)丙烷-2-基)氨基甲酸酯的制备
将({[(6S,7E)-2,2,6-三甲基-4-氧代-5-氮杂-3-氧杂庚-7-亚基]氨基}氧基)乙酸(135毫克，0.55毫摩尔，1.0eq.)溶于N,N-二甲基甲酰胺(8毫升)，依次加入2-(哌嗪-1-基)-5-氰基嘧啶盐酸盐(136毫克，0.60毫摩尔，1.1eq.)，N,N-二异丙基乙胺(0.54毫升，3.30毫摩尔，6.0eq.)以及2-(7-氮杂苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(250毫克，0.66毫摩尔，1.2eq.)。反应液于25℃反应2小时。向反应液加水(40毫升)淬灭，乙酸乙酯(3x40毫升)萃取。合并有机相，饱和盐水(50毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩。得到的粗产物用硅胶柱柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝1/1)分离纯化得到(S,E)-叔丁基(1-((2-(4-(5-氰基嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)-2-氧代-乙氧基)亚氨基)丙烷-2-基)氨基甲酸酯(180毫克，黄色油状物)，收率：78.7％。
LCMS:(ESI)[M+H-100]+＝318.2。
1H NMR:(400MHz,CDCl3)δ8.52(d,J＝2.8Hz,2H),7.50(d,J＝4.4Hz,1H),4.82–4.77(m,1H),4.75(s,2H),4.35(br s,1H),3.98–3.93(m,4H),3.76–3.69(m,2H),3.62–3.55(m,2H),1.43(s,9H),1.31(d,J＝6.8Hz,3H)。
步骤F:(S,E)-2-(4-(2-((2-氨基亚丙基)氨基)氧基)乙酰基)哌嗪-1-基)嘧啶-5-碳腈的制备
将(S,E)-叔丁基(1-((2-(4-(5-氰基嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)-2-氧代-乙氧基)亚氨基)丙烷-2-基)氨基甲酸酯(210毫克，0.52毫摩尔，1.0eq.)溶于二氯甲烷(8毫升)，加入三氟乙酸(2毫升)。反应液于15℃反应0.5小时。向反应液加入饱和碳酸氢钠(40毫升)中和三氟乙酸，二氯甲烷(3x50毫升)萃取。合并有机相，无水硫酸钠干燥并浓缩得到(S,E)-2-(4-(2-((2-氨基亚丙基)氨基)氧基)乙酰基)哌嗪-1-基)嘧啶-5-碳腈150毫克，黄色油状物)，收率：95.0％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝318.2。
步骤G:(S,E)-2-(4-(2-((2-((6-氧代-5-(三氟甲基)-1-((2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)亚丙基)氨基)氧基)乙酰基)哌嗪-1-基)嘧啶-5-碳腈的制备
将(S,E)-2-(4-(2-((2-氨基亚丙基)氨基)氧基)乙酰基)哌嗪-1-基)嘧啶-5-碳腈(64毫克，0.20毫摩尔，1.0eq.)溶于乙醇(3毫升)，依次加入5-氯-4-(三氟甲基)-2-((2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)哒嗪-3(2H)-酮(73毫克，0.22毫摩尔，1.1eq.)和三乙胺(41毫克，0.40毫摩尔，2.0eq.)。反应液于60℃反应2小时。反应液降至室温并加水(20毫升)稀释，乙酸乙酯(3x30毫升)萃取。合并有机相，饱和盐水(30毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩。得到的粗产物用硅胶柱柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝1/3)分离纯化得到(S,E)-2-(4-(2-((2-((6-氧代-5-(三氟甲基)-1-((2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)亚丙基)氨基)氧基)乙酰基)哌嗪-1-基)嘧啶-5-碳腈(56毫克，黄色油状物)，收率：45.5％。
LCMS:(ESI)[M+H-28]+＝582.2。
步骤H:(S,E)-2-(4-(2-((2-((6-氧代-5-(三氟甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)亚丙基)氨基)氧基)乙酰基)哌嗪-1-基)嘧啶-5-碳腈的制备
将(S,E)-2-(4-(2-((2-((6-氧代-5-(三氟甲基)-1-((2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)亚丙基)氨基)氧基)乙酰基)哌嗪-1-基)嘧啶-5-碳腈(56毫克，0.09毫摩尔，1.0eq.)溶于二氯甲烷(3毫升)，并加入三氟乙酸(1毫升)。反应液于15℃反应0.5小时。将反应液浓缩，得到的浓缩物溶于甲醇(1毫升)，加入碳酸钾(10毫克，0.07毫摩尔)。反应液于15℃继续反应0.5小时。反应液过滤，滤液用prep-HPLC分离纯化得到化合物7，(S,E)-2-(4-(2-((2-((6-氧代-5-(三氟甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)亚丙基)氨基)氧基)乙酰基)哌嗪-1-基)嘧啶-5-碳腈(18.42毫克，白色固体)，收率：41.8％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝480.2。
1H NMR:(400MHz,CDCl3)δ10.82(s,1H),8.53(s,2H),7.70(s,1H),7.49(d,J＝5.6Hz,1H),5.89–5.76(m,1H),4.87–4.71(m,2H),4.50–4.37(m,1H),4.05–3.88(m,4H),3.79–3.67(m,2H),3.59–3.48(m,2H),1.52(d,J＝6.8Hz,3H)。
实施例8：化合物8的合成(S,E)-5-({3-[(2-氧代-2-{4-[5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]哌嗪-1-基}乙氧基)亚氨基]丁烷-2-基}氨基)-4-(三氟甲基)哒嗪-3(2H)-酮
步骤A：(S)-叔丁基(3-氧代丁烷-2-基)氨基甲酸酯的制备
氮气保护下，向冰浴下冷却至0℃的(S)-叔丁基(1-(甲氧基(甲基)氨基)-1-氧代-丙烷-2-基)氨基甲酸酯(581毫克，2.50毫摩尔，1.0eq.)四氢呋喃(12毫升)溶液中缓慢加入甲基溴化镁(1M，7.5毫升，7.50毫摩尔，3.0eq.)。反应液于0℃反应1小时。缓慢加入饱和氯化铵水溶液(30毫升)淬灭，并用乙酸乙酯(2x50毫升)萃取。合并有机相，无水硫酸钠干燥并浓缩。粗产物用硅胶柱层析(乙酸乙酯/石油醚＝1/4；V/V)分离纯化得到(S)-叔丁基(3-氧代丁烷-2-基)氨基甲酸酯(400毫克，淡黄色固体)，收率：85.4％。
LCMS:(ESI)[M+H-56]+＝132.2。
1H NMR:(400MHz,CDCl3)δ5.25(br s,1H),4.39–4.23(m,1H),2.20(s,3H),1.44(s,9H),1.34(d,J＝7.2Hz,3H)。
步骤B：(S,E)-叔丁基{3-[(2-氧代-2-{4-[5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]哌嗪-1-基}乙氧基)亚氨基]丁烷-2-基}氨基甲酸酯的制备
将2-(氨基氧基)-1-{4-[5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]哌嗪-1-基}乙酮盐酸盐(205毫克，0.60毫摩尔，1.0eq.)溶于四氢呋喃(8毫升)，依次加入N,N-二异丙基乙胺(233毫克，1.80毫摩尔，3.0eq.)，(S)-叔丁基(3-氧代丁烷-2-基)氨基甲酸(135毫克，0.72毫摩尔，1.2eq.)以及钛酸四乙酯(342毫克，1.50毫摩尔，2.5eq.)。反应液加热至80℃反应2小时。反应液降至室温，加入饱和碳酸氢钠水溶液(50毫升)淬灭，用二氯甲烷(3x80毫升)萃取。合并有机相，无水硫酸钠干燥并浓缩。粗产物用硅胶柱层析(甲醇/二氯甲烷＝1/33；V/V)分离纯化得到(S,E)-叔丁基{3-[(2-氧代-2-{4-[5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]哌嗪-1-基}乙氧基)亚氨基]丁烷-2-基}氨基甲酸酯(240毫克，淡黄色油状物)，收率：84.3％。
LCMS:(ESI)[M+H-100]+＝374.8。
1H NMR:(400MHz,CDCl3)δ8.51(s,2H),5.03(br s,1H),4.76(s,2H),4.31–4.19(m,1H),3.97–3.90(m,4H),3.75–3.67(m,2H),3.63–3.56(m,2H),1.90(s,3H),1.42(s,9H),1.29(d,J＝6.8Hz,3H)。
步骤C：(S,E)-2-{[(3-氨基丁烷-2-亚基)氨基]氧基}-1-{4-[5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]哌嗪-1-基}乙酮的制备
将(S,E)-叔丁基{3-[(2-氧代-2-{4-[5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]哌嗪-1-基}乙氧基)亚氨基]丁烷-2-基}氨基甲酸酯(250毫克，0.53毫摩尔，1.0eq.)溶于二氯甲烷(4毫升)，加入三氟乙酸(1毫升)。反应液于10℃反应0.5小时。加入饱和碳酸氢钠溶液(40毫升)中和三氟乙酸，用二氯甲烷(3x60毫升)萃取。合并有机相，无水硫酸钠干燥并浓缩得到(S,E)-2-{[(3-氨基丁烷-2-亚基)氨基]氧基}-1-{4-[5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]哌嗪-1-基}乙酮(197毫克，淡黄色油状物)，收率：99.9％。LCMS:(ESI)[M+H]+＝374.8。
步骤D：(S,E)-5-({3-[(2-氧代-2-{4-[5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]哌嗪-1-基}乙氧基)亚氨基]丁烷-2-基}氨基)-4-(三氟甲基)-2-{[2-(三甲基硅基)乙氧基]甲基}哒嗪-3(2H)-酮的制备
将(S,E)-2-{[(3-氨基丁烷-2-亚基)氨基]氧基}-1-{4-[5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]哌嗪-1-基}乙酮(197毫克，0.53毫摩尔，1.0eq.)溶于乙醇(8毫升)，依次加入三乙胺(213毫克，2.11毫摩尔，4.0eq.)和5-氯-4-(三氟甲基)-2-{[2-(三甲基硅基)乙氧基]甲基}哒嗪-3(2H)-酮(346毫克，1.05毫摩尔，2.0eq.)。反应液加热至60℃反应3小时。反应液降至室温并浓缩。粗产物用硅胶柱层析(甲醇/二氯甲烷＝1/33；V/V)分离纯化得到(S,E)-5-({3-[(2-氧代-2-{4-[5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]哌嗪-1-基}乙氧基)亚氨基]丁烷-2-基}氨基)-4-(三氟甲基)-2-{[2-(三甲基硅基)乙氧基]甲基}哒嗪-3(2H)-酮(190毫克，淡黄色油状物)，收率：30.9％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝666.6。
步骤E：(S,E)-5-({3-[(2-氧代-2-{4-[5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]哌嗪-1-基}乙氧 基)亚氨基]丁烷-2-基}氨基)-4-(三氟甲基)哒嗪-3(2H)-酮的制备
将(S,E)-5-({3-[(2-氧代-2-{4-[5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]哌嗪-1-基}乙氧基)亚氨基]丁烷-2-基}氨基)-4-(三氟甲基)-2-{[2-(三甲基硅基)乙氧基]甲基}哒嗪-3(2H)-酮(187毫克，0.16毫摩尔，1.0eq.)溶于二氯甲烷(3毫升)，加入三氟乙酸(1毫升)。反应液于10℃反应0.5小时。加入饱和碳酸氢钠(30毫升)中和三氟乙酸，二氯甲烷(3x50毫升)萃取。合并有机相，无水硫酸钠干燥并浓缩。将残余物溶解于甲醇(3毫升)，加入碳酸钾(30毫克，0.22毫摩尔)，并于10℃继续反应1小时。将反应液过滤，滤液通过prep-HPLC(FA)纯化得到化合物8，(S,E)-5-({3-[(2-氧代-2-{4-[5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]哌嗪-1-基}乙氧基)亚氨基]丁烷-2-基}氨基)-4-(三氟甲基)哒嗪-3(2H)-酮(36.39毫克，黄色固体)，收率：41.8％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝537.2。
1H NMR:(400MHz,CDCl3)δ11.36(br s,1H),8.51(s,2H),7.70(s,1H),6.11–6.02(m,1H),4.85–4.75(m,2H),4.39–4.29(m,1H),3.98–3.88(m,4H),3.78–3.65(m,2H),3.60–3.44(m,2H),1.95(s,3H),1.49(d,J＝6.8Hz,3H)。
实施例9：化合物9的合成(S,E)-5-((2-((2-氧代-2-(4-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)乙氧基)亚氨基)环戊基)氨基)-4-(三氟甲基)哒嗪-3(2H)-酮
步骤A：((1S,2S)-2-羟基环戊基)氨基甲酸叔丁酯的制备
将(1S,2S)-2-氨基环戊醇盐酸盐(2.00克，14.53毫摩尔，1.0eq.)溶于甲醇(40毫升)，依次加入三乙胺(5.88克，58.12毫摩尔，4.0eq.)以及二碳酸二叔丁酯(327毫克，21.80毫摩尔，1.5eq.)。反应液于25℃反应18小时。向反应液加水(40毫升)淬灭，二氯甲烷(3x50毫升)萃取。合并有机相，饱和盐水(200毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩。残留物柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝1/1；V/V)分离纯化得到((1S,2S)-2-羟基环戊基)氨基甲酸叔丁酯(2.80克，白色固体)，收率：95.7％。
LCMS:(ESI)[M+H-56]+＝146.2。
1H NMR:(400MHz,CDCl3)δ4.72(s,1H),4.01–3.95(m,1H),3.67–3.58(m,1H),2.14–2.05(m,1H),2.04–1.95(m,1H),1.84–1.72(m,1H),1.71–1.58(m,2H),1.45(s,9H),1.41–1.28(m,1H)。
步骤B：(S)-(2-氧代-环戊基)氨基甲酸叔丁酯的制备
将((1S,2S)-2-羟基环戊基)氨基甲酸叔丁基酯(1.00克，4.97毫摩尔，1.0eq.)溶于二氯甲烷(25毫升)，加入戴斯-马丁氧化剂(4.22克，9.94毫摩尔，2.0eq.)。反应液于15℃反应2小时。向反应液加入饱和碳酸氢钠水溶液(100毫升)淬灭，二氯甲烷(3x50毫升)萃取。合并有机相，饱和盐水(200毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩。残留物柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝1/1；V/V)分离纯化得到(S)-(2-氧代-环戊基)氨基甲酸叔丁酯(980毫克，无色油状物)，收率：99.0％。
1H NMR:(400MHz,CDCl3)δ4.98(s,1H),3.92(s,1H),2.62–2.53(m,1H),2.45–
2.36(m,1H),2.22–2.11(m,1H),2.07–1.99(m,1H),1.89–1.76(m,1H),1.68–1.57(m,1H),1.45(s,9H)。
步骤C：(S,E)-(2-((2-氧代-2-(4-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)乙氧基)亚氨基)
环戊基氨基甲酸叔丁酯的制备
将2-(氨基氧基)-1-(4-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)乙酮盐酸盐(229毫克，0.67毫摩尔，1.0eq.)溶于四氢呋喃(15毫升)中，依次加入N,N-二异丙基乙胺(260毫克，2.01毫摩尔，3.0eq.)，(S)-(2-氧代-环戊基)氨基甲酸叔丁酯(159毫克，0.80毫摩尔，1.2eq.)以及钛酸四乙酯(383毫克，1.68毫摩尔，2.5eq.)。反应液加热至80℃反应2小时。反应液降至室温，加入饱和碳酸氢钠水溶液(20毫升)淬灭，二氯甲烷(3x50毫升)萃取。合并有机相，无水硫酸钠干燥并浓缩。残留物柱层析(二氯甲烷/甲醇＝20/1；V/V)分离纯化得到(S,E)-(2-((2-氧代-2-(4-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)乙氧基)亚氨基)环戊基氨基甲酸叔丁酯(290毫克，淡黄色油状物)，收率：89.0％。
LCMS:(ESI)[M+H-100]+＝387.0。
步骤D:(S,E)-2-((2-氨基环戊亚基)氨基)氧基)-1-(4-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)乙烷-1-酮的制备
将(S,E)-(2-((2-氧代-2-(4-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)乙氧基)亚氨基)环戊基氨基甲酸叔丁酯(290毫克，0.60毫摩尔，1.0eq.)溶于二氯甲烷(9毫升)，加入三氟乙酸(3毫升)。反应液于15℃反应0.5小时。向反应液加入饱和碳酸氢钠水溶液(30毫升)中和三氟乙酸，二氯甲烷(3x50毫升)萃取。合并有机相，无水硫酸钠干燥并浓缩得到(S,E)-2-((2-氨基环戊亚基)氨基)氧基)-1-(4-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)乙烷-1-酮(135毫克，白色固体)，收率：45.3％。LCMS:(ESI)[M+H]+＝387.2。
步骤E：(S,E)-5-((2-((2-氧代-2-(4-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)乙氧 基)亚氨基)环戊基)氨基)-4-(三氟甲基)-2-((2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)哒嗪-3(2H)- 酮的制备
将(S,E)-2-((2-氨基环戊亚基)氨基)氧基)-1-(4-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)乙烷-1-酮(151毫克，0.39毫摩尔，1.0eq.)溶于乙醇(5毫升)，依次加入5-氯-4-(三氟甲基)-2-((2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)哒嗪-3(2H)-酮(256毫克，0.78毫摩尔，2.0eq.)以及三乙胺(158毫克，1.56毫摩尔，4.0eq.)。反应液加热至60℃反应3小时。反应液降至室温，加水(20毫升)稀释，乙酸乙酯(3x20毫升)萃取。合并有机相，饱和盐水(40毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩。残留物柱层析(二氯甲烷/甲醇＝20/1；V/V)分离纯化得到(S,E)-5-((2-((2-氧代-2-(4-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)乙氧基)亚氨基)环戊基)氨基)-4-(三氟甲基)-2-((2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)哒嗪-3(2H)-酮(145毫克，黄色油状物)，收率：55.0％。
LCMS:(ESI)[M+H-28]+＝651.2。
步骤F：(S,E)-5-((2-((2-氧代-2-(4-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)乙氧 基)亚氨基)
环戊基)氨基)-4-(三氟甲基)哒嗪-3(2H)-酮的制备
将(S,E)-5-((2-((2-氧代-2-(4-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)乙氧基)亚氨基)环戊基)氨基)-4-(三氟甲基)-2-((2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)哒嗪-3(2H)-酮(149毫克，0.22毫摩尔，1.0eq.)溶于二氯甲烷(6毫升)，加入三氟乙酸(2毫升)。反应液于15℃反应0.5小时。反应液浓缩，残留物用甲醇(2毫升)溶解，加入碳酸钾(21毫克，0.15毫摩尔)。反应液于15℃继续反应1小时。反应液过滤，滤液用prep-HPLC分离纯化得到化合物9，((S,E)-5-((2-((2-氧代-2-(4-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)乙氧基)亚氨基)环戊基)氨基)-4-(三氟甲基)哒嗪-3(2H)-酮(50.87毫克，白色固体)，收率：42.9％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝549.2。
1H NMR:(400MHz,CDCl3)δ10.61(s,1H),8.55(s,2H),7.74(s,1H),6.05–5.98(m,1H),4.87–4.79(m,2H),4.49–4.42(m,1H),4.01–3.92(m,4H),3.79–3.70(m,2H),3.60–3.51(m,2H),2.74–2.65(m,2H),2.53–2.43(m,1H),2.12–2.01(m,1H),1.92–1.80(m,1H),1.77–1.68(m,1H)。
实施例10：化合物10的合成(S,E)-2-环丙基-2-((6-氧代-5-(三氟甲基)-1,6-二 氢哒嗪-4-基)氨基)乙醛-O-(2-氧代-2-(4-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)乙基)肟
步骤A：(S)-2-氨基-2-环丙基乙酸甲酯盐酸盐的制备
将(S)-2-氨基-2-环丙基乙酸(806毫克，7.00毫摩尔，1.0eq.)溶于甲醇(9毫升)，冰浴下将其冷却至0℃，缓慢加入氯化亚砜(3.1毫升，42.01毫摩尔，6.0eq.)。反应液于10℃反应16小时。反应液浓缩得到(S)-2-氨基-2-环丙基乙酸甲酯盐酸盐(1.16克，淡黄色固体)，收率：99.1％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝130.0。
1H NMR:(400MHz,CD3OD)δ3.89(s,3H),3.40(d,J＝10.0Hz,1H),1.25–1.14(m,1H),0.89–0.77(m,2H),0.76–0.68(m,1H),0.65–0.57(m,1H)。
步骤B：(S)-2-[(叔丁氧羰基)氨基]-2-环丙基乙酸甲酯的制备
将(S)-2-氨基-2-环丙基乙酸甲酯盐酸盐(1.16克，7.00毫摩尔，1.0eq.)溶于二氯甲烷(20毫升)，加入三乙胺(4.9毫升，35.02毫摩尔，5.0eq.)，然后于0℃下缓慢加入二碳酸二叔丁酯(1.83克，8.40毫摩尔，1.2eq.)。反应液于10℃反应16小时。向反应液加入饱和氯化铵水溶液(80毫升)淬灭，乙酸乙酯(2x80毫升)萃取。合并有机相，饱和氯化铵水溶液(80毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩。残留物用硅胶柱层析(乙酸乙酯/石油醚＝1/9；V/V)分离纯化得到(S)-2-[(叔丁氧羰基)氨基]-2-环丙基乙酸甲酯(1.56克，淡黄色油状物)，收率：96.9％。LCMS:(ESI)[M+H-56]+＝174.0。
1H NMR:(400MHz,CDCl3)δ5.11(br s,1H),3.85–3.80(m,1H),3.79(s,3H),1.47(s,9H),1.13–1.03(m,1H),0.64–0.47(m,3H),0.46–0.37(m,1H)。
步骤C：(S)-(1-环丙基-2-氧代-乙基)氨基甲酸叔丁酯的制备
氮气保护下，将(S)-2-[(叔丁氧羰基)氨基]-2-环丙基乙酸甲酯(229毫克，1.00毫摩尔，1.0eq.)溶于超干四氢呋喃(3毫升)，于干冰-乙醇浴中降温至-78℃，滴加二异丁基氢化铝(1M，1.40毫升，1.40毫摩尔，1.4eq.)。反应液于-78℃反应0.5小时。向反应液加入饱和氯化铵水溶液(50毫升)淬灭，石油醚/乙酸乙酯混合溶剂(1/1；V/V，3x50毫升)萃取。合并有机相，饱和氯化铵水溶液(2x50毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩得到粗品(S)-(1-环丙基-2-氧代-乙基)氨基甲酸叔丁酯(230毫克，黄色油状物)，收率：57.7％。
LCMS:(ESI)[M+H-56]+＝144.2。
步骤D：(S,E)-{1-环丙基-2-[(2-氧代-2-{4-[5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]哌嗪-1- 基}乙氧基)
亚氨基]乙基}氨基甲酸叔丁酯的制备
室温下将2-(氨基氧基)-1-{4-[5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]六氢吡嗪-1-基}乙酮盐酸盐(150毫克，0.44毫摩尔，1.0eq.)溶入四氢呋喃(7毫升)中，依次加入N,N-二异丙基乙胺(175毫克，1.32毫摩尔，3.0eq.)，(S)-(1-环丙基-2-氧代-乙基)氨基甲酸叔丁酯(50％，175毫克，0.44毫摩尔，1.0eq.)以及钛酸四乙酯(250毫克，1.10毫摩尔，2.5eq.)。反应液加热至80℃反应2小时。反应液降至室温，加入饱和碳酸氢钠水溶液(50毫升)淬灭，乙酸乙酯(2x80毫升)萃取。合并有机相，无水硫酸钠干燥并浓缩。残留物用硅胶柱层析(乙酸乙酯/石油醚＝9/11；V/V)分离纯化得到(S,E)-{1-环丙基-2-[(2-氧代-2-{4-[5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]哌嗪-1-基}乙氧基)亚氨基]乙基}氨基甲酸叔丁酯(133毫克，白色固体)，收率：62.3％。LCMS:(ESI)[M+H-100]+＝387.2。
1H NMR:(400MHz,CDCl3)δ8.54(s,2H),7.55(d,J＝5.2Hz,1H),5.06–4.89(m,1H),4.84–4.74(m,2H),4.05–3.89(m,4H),3.83–3.67(m,3H),3.66–3.55(m,2H),1.45(s,9H),1.07–0.94(m,1H),0.66–0.55(m,2H),0.53–0.44(m,1H),0.39–0.29(m,1H)。
步骤E：(S,E)-2-氨基-2-环丙基乙醛O-(2-氧代-2-(4-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基) 哌嗪-1-基)乙基)肟的制备
将(S,E)-{1-环丙基-2-[(2-氧代-2-{4-[5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]哌嗪-1-基}乙氧基)亚氨基]乙基}氨基甲酸叔丁酯(163毫克，0.34毫摩尔，1.0eq.)溶于二氯甲烷(8毫升)，加入三氟乙酸(2毫升)。反应液于15℃反应1小时。向反应液加入饱和碳酸氢钠水溶液(40毫升)中和三氟乙酸，二氯甲烷(3x35毫升)萃取。合并有机相，无水硫酸钠干燥并浓缩得到(S,E)-2-氨基-2-环丙基乙醛O-(2-氧代-2-(4-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)乙基)肟(106毫克，黄色油状物)，收率：81.9％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝387.2。
步骤F：(S,E)-2-环丙基-2-((6-氧代-5-(三氟甲基)-1-((2-(三甲基硅基)乙氧 基)甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)乙醛O-(2-氧代-2-(4-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌 嗪-1-基)乙基)肟的制备
将(S,E)-2-氨基-2-环丙基乙醛O-(2-氧代-2-(4-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)乙基)肟(106毫克，0.27毫摩尔，1.0eq.)溶于乙醇(3毫升)，依次加入5-氯-4-(三氟甲基)-2-((2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)哒嗪-3(2H)-酮(178毫克，0.54毫摩尔，2.0eq.)及三乙胺(55毫克，0.54毫摩尔，2.0eq.)。反应液加热至60℃反应2小时。反应液降至室温，加入水(15毫升)稀释，乙酸乙酯(3x20毫升)萃取。合并有机相，饱和盐水(40毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩。残留物柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝1/3；V/V)分离纯化得到(S,E)-2-环丙基-2-((6-氧代-5-(三氟甲基)-1-((2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)乙醛O-(2-氧代-2-(4-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)乙基)肟(74毫克，黄色油状物)，收率：39.7％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝679.2。
步骤G：(S,E)-2-环丙基-2-((6-氧代-5-(三氟甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基) 乙醛-O-(2-氧代-2-(4-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)乙基)肟的制备
将(S,E)-2-环丙基-2-((6-氧代-5-(三氟甲基)-1-((2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)乙醛O-(2-氧代-2-(4-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)乙基)肟(74毫克，0.11毫摩尔，1.0eq.)溶于二氯甲烷(3毫升)，加入三氟乙酸(1毫升)。反应液于15℃反应0.5小时。将反应液浓缩，浓缩物溶于甲醇(1毫升)，加入碳酸钾(10毫克，0.07毫摩尔)。该反应液于15℃继续反应0.5小时。过滤反应液，得到的滤液用prep-HPLC分离，然后用prep-TLC(EtOAc)进一步纯化得到化合物10，(S,E)-2-环丙基-2-((6-氧代-5-(三氟甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)乙醛-O-(2-氧代-2-(4-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)乙基)肟(15.28毫克，白色固体)，收率：25.6％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝549.2。
1H NMR:(400MHz,CDCl3)δ10.82(s,1H),8.56(s,2H),7.71(s,1H),7.54(d,J＝6.4Hz,1H),5.98–5.90(m,1H),4.83(s,2H),4.05–3.90(m,4H),3.83–3.72(m,3H),3.62–3.50(m,2H),1.24–1.14(m,1H),0.87–0.73(m,2H),0.59–0.46(m,2H)。
实施例11：化合物11的合成(S,E)-6-(4-(2-((2-((6-氧代-5-(三氟甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)亚丙基)氨基)氧基)
乙酰基)哌嗪-1-基)烟酰胺
11.1)中间体H的合成
步骤A：4-(5-氰基吡啶-2-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯的制备
将2-氯-5-氰基吡啶(5.00克，36.09毫摩尔，1.0eq.)溶于N-甲基吡咯烷酮(150毫升)，依次加入1-叔丁氧羰基哌嗪(7.39克，39.70毫摩尔，1.1eq.)以及碳酸钾(14.96克，108.27毫摩尔，3.0eq.)。反应液加热至80℃反应2小时。反应液降至室温，加水(150毫升)稀释，乙酸乙酯(3x150毫升)萃取。合并有机相，饱和盐水(500毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩。残留物柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝2/1；V/V)分离纯化得到4-(5-氰基吡啶-2-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(8.40克，黄色固体)，收率：80.7％。
LCMS:(ESI)[M+H-56]+＝233.2。
1H NMR:(400MHz,CDCl3)δ8.41(d,J＝2.4Hz,1H),7.64(dd,J＝8.8,2.4Hz,1H),6.61(d,J＝9.2Hz,1H),3.3.70–3.67(m,4H),3.56–3.53(m,4H),1.49(s,9H)。
步骤B：6-(哌嗪-1-基)烟腈盐酸盐(中间体H)的制备
将4-(5-氰基吡啶-2-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(1.30克，4.51毫摩尔，1.0eq.)溶于二氯甲烷(2毫升)，加入盐酸二氧六环溶液(4M，15毫升)，将反应液于15℃反应1小时。反应液浓缩得到中间体H,6-(哌嗪-1-基)烟腈盐酸盐(0.99克，白色固体)，收率：97.2％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝189.2。
11.2)化合物11的合成：
步骤A:(S,E)-(1-((2-(4-(5-氰基吡啶-2-基)哌嗪-1-基)-2-氧代-乙氧基)亚氨基)丙烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯的制备
将({[(6S,7E)-2,2,6-三甲基-4-氧代-5-氮杂-3-氧杂庚-7-亚基]氨基}氧基)乙酸((100毫克，0.40毫摩尔，1.0eq.)与6-(哌嗪-1-基)烟腈盐酸盐(99毫克，0.44毫摩尔，1.1eq.)溶于N,N-二甲基甲酰胺(6毫升)，依次加入N,N-二异丙基乙胺(315毫克，2.40毫摩尔，6.0eq.)及2-(7-氮杂苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(185毫克，0.48毫摩尔，1.2eq.)。反应液于25℃反应2小时。向反应液中加水(40毫升)淬灭，乙酸乙酯(3x50毫升)萃取。合并有机相，饱和盐水(80毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩。残留物柱层析(二氯甲烷/甲醇＝20/1；V/V)纯化得到(S,E)-(1-((2-(4-(5-氰基吡啶-2-基)哌嗪-1-基)-2-氧代-乙氧基)亚氨基)丙烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯(120毫克，黄色油状物)，收率：71.0％。
LCMS:(ESI)[M+H-100]+＝317.2。
1H NMR:(400MHz,CDCl3)δ8.48–8.43(m,1H),7.69(dd,J＝8.8,2.4Hz,1H),7.53(d,J＝4.4Hz,1H),6.66(d,J＝9.2Hz,1H),4.98–4.86(m,1H),4.78(s,2H),4.48–4.28(m,1H),3.88–3.76(m,4H),3.75–3.62(m,4H),1.46(s,9H),1.34(d,J＝6.8Hz,3H)。
步骤B:(S,E)-6-(4-(2-((2-氨基亚丙基)氨基)氧基)乙酰基)哌嗪-1-基)烟腈
将(S,E)-(1-((2-(4-(5-氰基吡啶-2-基)哌嗪-1-基)-2-氧代-乙氧基)亚氨基)丙烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯(120毫克，0.29毫摩尔，1.0eq.)溶于二氯甲烷(4毫升)，加入三氟乙酸(1毫升)。反应加热至15℃反应0.5小时。反应液用饱和碳酸氢钠水溶液(20毫升)淬灭，然后用二氯甲烷(3x20毫升)萃取。合并有机相并用无水硫酸钠干燥，浓缩得到(S,E)-6-(4-(2-((2-氨基亚丙基)氨基)氧基)乙酰基)哌嗪-1-基)烟腈(70毫克，黄色油状物)，收率：76.8％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝317.2。
步骤C:(S,E)-6-(4-(2-((2-((6-氧代-5-(三氟甲基)-1-((2-(三甲基硅基)乙氧 基)甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)亚丙基)氨基)氧基)乙酰基)哌嗪-1-基)烟腈的制备
将(S,E)-6-(4-(2-((2-氨基亚丙基)氨基)氧基)乙酰基)哌嗪-1-基)烟腈(70毫克，0.22毫摩尔，1.0eq.)与5-氯-4-(三氟甲基)-2-((2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)哒嗪-3(2H)-酮(80毫克，0.24毫摩尔，1.1eq.)溶于乙醇(3毫升)，加入三乙胺(45毫克，0.44毫摩尔，2.0eq.)。反应液加热至60℃反应2小时。反应液降至室温并加水(20毫升)稀释，乙酸乙酯(3x20毫升)萃取。合并有机相，饱和盐水(80毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩。残留物柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝1/3；V/V)分离纯化得到(S,E)-6-(4-(2-((2-((6-氧代-5-(三氟甲基)-1-((2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)亚丙基)氨基)氧基)乙酰基)哌嗪-1-基)烟腈(75毫克，黄色油状物)，收率：56.0％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝609.2。
步骤D:(S,E)-6-(4-(2-((2-((6-氧代-5-(三氟甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)亚丙基)氨基)氧基)乙酰基)哌嗪-1-基)烟酰胺的制备
将(S,E)-6-(4-(2-((2-((6-氧代-5-(三氟甲基)-1-((2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)亚丙基)氨基)氧基)乙酰基)哌嗪-1-基)烟腈(70毫克，0.12毫摩尔，1.0eq.)溶于二氯甲烷(3毫升)，加入三氟乙酸(1毫升)。反应液于15℃反应0.5小时。反应液浓缩，残留物溶于甲醇(1毫升)，加入碳酸钾(10毫克，0.07毫摩尔)。反应液于15℃继续反应0.5小时。反应液经过滤，滤液用prep-HPLC纯化得到化合物11，(S,E)-6-(4-(2-((2-((6-氧代-5-(三氟甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)亚丙基)氨基)氧基)乙酰基)哌嗪-1-基)烟腈(25.97毫克，白色固体)，收率：49.4％。LCMS:(ESI)[M+H]+＝479.2。
1H NMR:(400MHz,CDCl3)δ11.16(s,1H),8.42(d,J＝2.0Hz,1H),7.70(s,1H),7.66(dd,J＝9.2,2.4Hz,1H),7.49(d,J＝5.6Hz,1H),6.62(d,J＝8.8Hz,1H),5.89–5.73(m,1H),4.83–4.72(m,2H),4.49–4.36(m,1H),3.86–3.72(m,4H),3.71–35.2(m,4H),1.52(d,J＝6.8Hz,3H)。
实施例12：化合物12的合成(S,E)-2-(6-氧代-5-(三氟甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙醛O-(2-氧代-2-(4-(5-(三氟甲基)吡啶-2-基)哌嗪-1-基)乙基)肟
12.1)中间体I的合成
步骤A:4-(5-(三氟甲基)吡啶-2-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯的制备
将2-氯-5-(三氟甲基)吡啶(4.13克，22.75毫摩尔，1.0eq.)与哌嗪-1-羧酸叔丁酯(3.26克，25.02毫摩尔，1.1eq.)溶于N-甲基吡咯烷酮(30毫升)，加入碳酸钾(9.43克，68.25毫摩尔，3.0eq.)。反应液加热至80℃反应1小时。反应液降至室温，向反应液中加水(500毫升)析出固体。过滤收集固体并溶于乙酸乙酯(500毫升)，用无水硫酸钠干燥并浓缩得到4-(5-(三氟甲基)吡啶-2-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(3.50克，白色固体)，收率：44.8％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝332.2。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.42–8.39(m,1H),7.65(dd,J＝8.8,2.4Hz,1H),6.64(d,J＝8.8Hz,1H),3.68–3.61(m,4H),3.58–3.52(m,4H),1.49(s,9H)。
步骤B:1-(5-(三氟甲基)吡啶-2-基)哌嗪盐酸盐(中间体I)的制备
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将4-(5-(三氟甲基)吡啶-2-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(1.00克，3.02毫摩尔，1.0eq.)溶于二氯甲烷(10毫升)，加入盐酸二氧六环溶液(4M，10毫升)。反应液于20℃反应1小时。反应液浓缩得到中间体I，1-(5-(三氟甲基)吡啶-2-基)哌嗪盐酸盐(808毫克，白色固体)，收率：99.9％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝231.8。
12.2)化合物12的合成
步骤A：(S,E)-(1-((2-氧基-2-(4-(5-(三氟甲基)吡啶-2-基)哌嗪-1-基)乙氧基)亚氨基)
丙-2-基)氨基甲酸叔丁酯的制备
将({[(6S,7E)-2,2,6-三甲基-4-氧代-5-氮杂-3-氧杂庚-7-亚基]氨基}氧基)乙酸(200毫克，0.81毫摩尔，1.0eq.)与1-(5-(三氟甲基)吡啶-2-基)哌嗪盐酸盐(239毫克，0.89毫摩尔，1.1eq.)溶于N,N-二甲基甲酰胺(10毫升)，依次加入N,N-二异丙基乙胺(630毫克，4.86毫摩尔，6.0eq.)及2-(7-氮杂苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(371毫克，0.97毫摩尔，1.2eq.)。反应液于25℃反应2小时。向反应液中加水(40毫升)淬灭，乙酸乙酯(3x40毫升)萃取。合并有机相，饱和盐水(80毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩。残留物柱层析(二氯甲烷/甲醇＝20/1；V/V)分离纯化得到(S,E)-(1-((2-氧基-2-(4-(5-(三氟甲基)吡啶-2-基)哌嗪-1-基)乙氧基)亚氨基)丙-2-基)氨基甲酸叔丁酯(275毫克，黄色油状物)，收率：73.7％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝460.2。
步骤B：(S,E)-2-氨基丙醛O-(2-氧代-2-(4-(5-(三氟甲基)吡啶-2-基)哌嗪-1-基)乙基)
肟的制备
将(S,E)-(1-((2-氧基-2-(4-(5-(三氟甲基)吡啶-2-基)哌嗪-1-基)乙氧基)亚氨基)丙-2-基)氨基甲酸叔丁酯(275毫克，0.60毫摩尔，1.0eq.)溶于二氯甲烷(8毫升)，加入三氟乙酸(2毫升)。反应液于15℃反应0.5小时。向反应液加入饱和碳酸氢钠水溶液(20毫升)中和三氟乙酸，二氯甲烷(3x20毫升)萃取。合并有机相，无水硫酸钠干燥并浓缩得到(S,E)-2-氨基丙醛O-(2-氧代-2-(4-(5-(三氟甲基)吡啶-2-基)哌嗪-1-基)乙基)肟(180毫克，黄色油状物)，收率：83.7％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝360.2。
1H NMR:(400MHz,CDCl3)δ8.44(s,1H),7.70(dd,J＝8.8,2.0Hz,1H),7.50(d,J＝5.6Hz,1H),6.69(d,J＝9.2Hz,1H),4.76(s,2H),3.83–3.76(m,4H),3.75–3.71(m,3H),3.69–3.58(m,4H),1.26(d,J＝6.8Hz,3H)。
步骤C：(S,E)-2-((6-氧代-5-(三氟甲基)-1-((2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙醛O-(2-氧代-2-(4-(5-(三氟甲基)吡啶-2-基)哌嗪-1-基)乙基)肟的制备
将(S,E)-2-氨基丙醛O-(2-氧代-2-(4-(5-(三氟甲基)吡啶-2-基)哌嗪-1-基)乙基)肟(79毫克，0.22毫摩尔，1.0eq.)与5-氯-4-(三氟甲基)-2-((2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)哒嗪-3(2H)-酮(80毫克，0.24毫摩尔，1.1eq.)溶于乙醇(3毫升)，加入三乙胺(44毫克，0.44毫摩尔，2.0eq.)。反应液加热至60℃反应2小时。反应液降至室温并加水(20毫升)稀释，乙酸乙酯(3x20毫升)萃取。合并有机相，饱和盐水(80毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩。残留物柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝1/3；V/V)分离纯化得到(S,E)-2-((6-氧代-5-(三氟甲基)-1-((2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙醛O-(2-氧代-2-(4-(5-(三氟甲基)吡啶-2-基)哌嗪-1-基)乙基)肟(72毫克，黄色油状物)，收率：50.3％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝652.2。
步骤D：(S,E)-2-(6-氧代-5-(三氟甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙醛O-(2-氧 代-2-(4-(5-(三氟甲基)吡啶-2-基)哌嗪-1-基)乙基)肟的制备
将(S,E)-2-((6-氧代-5-(三氟甲基)-1-((2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙醛O-(2-氧代-2-(4-(5-(三氟甲基)吡啶-2-基)哌嗪-1-基)乙基)肟(72毫克，0.11毫摩尔，1.0eq.)溶于二氯甲烷(3毫升)，加入三氟乙酸(1毫升)。反应液于15℃反应0.5小时。反应液浓缩，残留物溶于甲醇(1毫升)，加入碳酸钾(10毫克，0.07毫摩尔)。反应液于15℃继续反应0.5小时。反应液过滤，滤液用prep-HPLC纯化得到化合物12，(S,E)-2-(6-氧代-5-(三氟甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙醛O-(2-氧代-2-(4-(5-(三氟甲基)吡啶-2-基)哌嗪-1-基)乙基)肟(31.76毫克，白色固体)，收率：55.3％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝522.2。
1H NMR:(400MHz,CDCl3)δ10.77(s,1H),8.41(s,1H),7.70(s,1H),7.68(dd,J＝9.2,2.4Hz,1H),7.49(d,J＝5.6Hz,1H),6.66(d,J＝8.8Hz,1H),5.88–5.79(m,1H),4.83–4.73(m,2H),4.47–4.38(m,1H),3.82–3.70(m,4H),3.69–3.52(m,4H),1.51(d,J＝6.8Hz,3H)。
实施例13：化合物13的合成
6-((R)-3-甲基-4-(2-((E)-(S)-2-((6-氧代-5-(三氟甲基)-1,6-二氢哒嗪-4- 基)氨基)亚丙基)氨基)氧基)乙酰基)哌嗪-1-基)烟腈
步骤A：(R)-4-(5-氰基吡啶-2-基)-2-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯的制备
将2-氯-5-氰基吡啶(2.51克，18.11毫摩尔，1.0eq.)溶于N-甲基吡咯烷酮(120毫升)，依次加入(R)-2-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯(3.99克，19.92毫摩尔，1.1eq.)及碳酸钾(7.51克，54.33毫摩尔，3.0eq.)。反应液加热至80℃反应1小时。反应液将至室温并加水(150毫升)稀释，乙酸乙酯(3x150毫升)萃取。合并有机相，饱和盐水(500毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩。残留物柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝2/1；V/V)分离纯化得到(R)-4-(5-氰基吡啶-2-基)-2-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯(4.20克，黄色固体)，收率：76.7％。
LCMS:(ESI)[M+H-56]+＝247.0。
1H NMR:(400MHz,CDCl3)δ8.40(d,J＝2.0Hz,1H),7.62(dd,J＝8.8,2.0Hz,1H),6.56(d,J＝8.8Hz,1H),4.37–4.27(m,1H),4.20–4.12(m,1H),4.12–4.04(m,1H),4.00–3.90(m,1H),3.42(dd,J＝13.6,4.0Hz,1H),3.31–3.21(m,1H),3.19–3.08(m,1H),1.48(s,9H),1.15(d,J＝6.8Hz,3H)。
步骤B：(R)-6-(3-甲基哌嗪-1-基)烟腈盐酸盐的制备
将(R)-4-(5-氰基吡啶-2-基)-2-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯(500毫克，1.65毫摩尔，1.0eq.)溶于二氯甲烷(2毫升)，加入盐酸二氧六环溶液(4M，10毫升)。反应液于15℃反应1小时。反应液浓缩得到(R)-6-(3-甲基哌嗪-1-基)烟腈盐酸盐(384毫克，白色固体)，收率：99.8％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝203.2。
步骤C：((S,E)-1-((2-((R)-4-(5-氰基吡啶-2-基)-2-甲基哌嗪-1-基)-2-氧代-乙氧基)亚氨基)丙烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯的制备
将({[(6S,7E)-2,2,6-三甲基-4-氧代-5-氮杂-3-氧杂庚-7-亚基]氨基}氧基)乙酸(200毫克，0.84毫摩尔，1.0eq.)与(R)-6-(3-甲基哌嗪-1-基)烟腈盐酸盐(227毫克，0.92毫摩尔，1.1eq.)溶于N,N-二甲基甲酰胺(12毫升)，依次加入N,N-二异丙基乙胺(651毫克，5.04毫摩尔，6.0eq.)及2-(7-氮杂苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(384毫克，1.01毫摩尔，1.2eq.)。反应液于25℃反应2小时。向反应液中加水(50毫升)淬灭，乙酸乙酯(3x50毫升)萃取。合并有机相，饱和盐水(80毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩。残留物柱层析(二氯甲烷/甲醇＝20/1；V/V)分离纯化得到((S,E)-1-((2-((R)-4-(5-氰基吡啶-2-基)-2-甲基哌嗪-1-基)-2-氧代-乙氧基)亚氨基)丙烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯(280毫克，黄色油状物)，收率：77.3％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝431.2。
步骤D：6-((R)-4-(2-((E)-(S)-2-氨基亚丙基)氨基)氧基)乙酰基)-3-甲基哌嗪- 1-基)烟腈
将((S,E)-1-((2-((R)-4-(5-氰基吡啶-2-基)-2-甲基哌嗪-1-基)-2-氧代-乙氧基)亚氨基)丙烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯(280毫克，0.65毫摩尔，1.0eq.)溶于二氯甲烷(8毫升)，加入三氟乙酸(2毫升)。反应液于15℃反应0.5小时。向反应液加入饱和碳酸氢钠水溶液(20毫升)中和三氟乙酸，二氯甲烷(3x20毫升)萃取。合并有机相，无水硫酸钠干燥并浓缩得到6-((R)-4-(2-((E)-(S)-2-氨基亚丙基)氨基)氧基)乙酰基)-3-甲基哌嗪-1-基)烟腈(209毫克，黄色油状物)，收率：97.3％。LCMS:(ESI)[M+H]+＝331.2。
1H NMR:(400MHz,CDCl3)δ8.43(d,J＝2.0Hz,1H),7.67(dd,J＝8.8,2.4Hz,1H),7.49(d,J＝5.6Hz,1H),6.62(d,J＝8.8Hz,1H),4.85–4.65(m,2H),4.60–4.05(m,3H),3.78–3.63(m,4H),3.56–3.04(m,3H),1.28–1.25(m,6H)。
步骤E：6-((R)-3-甲基-4-(2-((E)-(S)-2-((6-氧代-5-(三氟甲基)-1-((2-(三甲 基硅基)乙氧基)甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)亚丙基)氨基)氧基)乙酰基)哌嗪-1-基) 烟腈的制备
将6-((R)-4-(2-((E)-(S)-2-氨基亚丙基)氨基)氧基)乙酰基)-3-甲基哌嗪-1-基)烟腈(73毫克，0.22毫摩尔，1.0eq.)与5-氯-4-(三氟甲基)-2-((2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)哒嗪-3(2H)-酮(80毫克，0.24毫摩尔，1.1eq.)溶于乙醇(3毫升)，加入三乙胺(45毫克，0.44毫摩尔，2.0eq.)。反应液加热至60℃反应2小时。反应液降至室温并加水(20毫升)稀释，乙酸乙酯(3x20毫升)萃取。合并有机相，饱和盐水(80毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩。残留物柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝1/3；V/V)分离纯化得到6-((R)-3-甲基-4-(2-((E)-(S)-2-((6-氧代-5-(三氟甲基)-1-((2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)亚丙基)氨基)氧基)乙酰基)哌嗪-1-基)烟腈(73毫克，黄色油状物)，收率：53.1％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝623.4。
步骤F：6-((R)-3-甲基-4-(2-((E)-(S)-2-((6-氧代-5-(三氟甲基)-1,6-二氢哒 嗪-4-基)氨基)亚丙基)氨基)氧基)乙酰基)哌嗪-1-基)烟腈的制备
将6-((R)-3-甲基-4-(2-((E)-(S)-2-((6-氧代-5-(三氟甲基)-1-((2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)亚丙基)氨基)氧基)乙酰基)哌嗪-1-基)烟腈(72毫克，0.12毫摩尔，1.0eq.)溶于二氯甲烷(3毫升)，加入三氟乙酸(1毫升)。反应液于15℃反应0.5小时。反应液浓缩，残留物溶于甲醇(1毫升)，加入碳酸钾(10毫克，0.07毫摩尔)。反应液于15℃继续反应0.5小时。反应液过滤，滤液prep-HPLC纯化得到化合物13，6-((R)-3-甲基-4-(2-((E)-(S)-2-((6-氧代-5-(三氟甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)亚丙基)氨基)氧基)乙酰基)哌嗪-1-基)烟腈(30.73毫克，白色固体52.0％)，收率52.0％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝493.2。
1H NMR:(400MHz,CDCl3)δ11.10(s,1H),8.41(d,J＝2.0Hz,1H),7.70(s,1H),7.65(dd,J＝9.2,2.4Hz,1H),7.50(d,J＝5.6Hz,1H),6.60(d,J＝8.8Hz,1H),5.90–5.81(m,1H),4.84–4.71(m,2H),4.50–4.00(m,4H),3.74–3.05(m,4H),1.51(d,J＝6.8Hz,3H),1.31–1.14(m,3H)。
实施例14：化合物14的合成
(S,E)-2-(6-氧代-5-(三氟甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙醛O-(2-(1-(5- (三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-基)乙基)肟
步骤A:2-(1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-基)乙醇的制备
将2-(哌啶-4-基)乙醇(900毫克，6.97毫摩尔，1.0eq.)溶于N,N-二甲基甲酰胺(10毫升)，加入2-氯-5-(三氟甲基)嘧啶(1.29克，7.04毫摩尔，1.01eq.)和N,N-二异丙基乙胺(2.70克，20.9毫摩尔，3.0eq.)。反应液在110℃反应18小时。将反应冷却到室温，向反应液中加水(100毫升)，然后用乙酸乙酯(2x100毫升)萃取。合并有机相，饱和盐水(100毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩。残留物用硅胶柱层析(乙酸乙酯/石油醚＝1/2；V/V)分离纯化得到2-(1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-基)乙醇(1.40克，黄色固体)，收率：70.8％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝276.0。
步骤B:2-(2-(1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-基)乙氧基)异吲哚-1,3-二酮 的制备
氮气保护下，将2-(1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-基)乙醇(150毫克，0.55毫摩尔，1.0eq.)溶于四氢呋喃(5毫升)，于0℃加入2-羟基异吲哚-1,3-二酮(98毫克，0.60毫摩尔，1.1eq.)，偶氮二甲酸二乙酯(116毫克，0.67毫摩尔，1.22eq.)和三苯基膦(172毫克，0.65毫摩尔，1.2eq.)。反应液于15℃反应1小时。向反应液中加入水(100毫升)稀释，乙酸乙酯(2x80毫升)萃取。合并有机相，并用饱和盐水(100毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩。残留物用硅胶柱层析(乙酸乙酯/石油醚＝1/4；V/V)分离纯化得到2-(2-(1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-基)乙氧基)异吲哚-1,3-二酮(128毫克，黄色固体)，收率：47.5％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝420.8。
1H NMR:(400MHz,CDCl3)δ8.50(s,2H),7.92–7.86(m,2H),7.83–7.77(m,2H),4.95–4.85(m,2H),4.33(t,J＝6.4Hz,2H),3.08–2.96(m,2H),2.01–1.93(m,2H),1.81(q,J＝6.4Hz,2H),1.35–1.20(m,3H)。
步骤C:O-(2-(1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-基)乙基)羟胺的制备
将2-(2-(1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-基)乙氧基)异吲哚-1,3-二酮(110毫克，0.26毫摩尔，1.0eq.)溶于乙醇(5毫升)，加入水合肼(27毫克，0.52毫摩尔，2.0eq.)。反应液于15℃反应2小时。将反应液过滤，滤液用水(30毫升)稀释，二氯甲烷(2x80毫升)萃取。合并有机相，饱和盐水(40毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩得到O-(2-(1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-基)乙基)羟胺(68毫克，黄色固体)，收率：90.8％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝291.2。
步骤D:(S,E)-叔丁基(1-((2-(1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-基)乙氧基) 亚氨基)丙烷-2-基)氨基甲酸酯的制备
将O-(2-(1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-基)乙基)羟胺(100毫克，0.34毫摩尔，1.0eq.)溶于四氢呋喃(5毫升)，加入(S)-叔丁基(1-氧代丙烷-2-基)氨基甲酸酯(72毫克，0.42毫摩尔，1.2eq.)和钛酸四乙酯(79毫克，0.34毫摩尔，1.0eq.)。反应液于80℃反应1小时。向反应液中加入水(100毫升)，乙酸乙酯(2x80毫升)萃取。合并有机相，饱和盐水(100毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩。残留物用硅胶柱层析(乙酸乙酯/石油醚＝20/1；V/V)分离纯化得到(S,E)-叔丁基(1-((2-(1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-基)乙氧基)亚氨基)丙烷-2-基)氨基甲酸酯(120毫克，黄色固体)，收率：75.9％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝445.8。
步骤E: (S,E)-2-氨基丙醛O-(2-(1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-基)乙基) 肟的制备
将(S,E)-叔丁基(1-((2-(1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-基)乙氧基)亚氨基)丙烷-2-基)氨基甲酸酯(120毫克，0.27毫摩尔，1.0eq.)溶于二氯甲烷(3毫升)，加入三氟乙酸(1毫升)。反应液于15℃反应1小时。向反应液中加入碳酸氢钠溶液(20毫升)淬灭，用二氯甲烷(2x50毫升)萃取。合并有机相，饱和盐水(20毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩得到(S,E)-2-氨基丙醛O-(2-(1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-基)乙基)肟(90毫克，黄色固体)，收率：96.8％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝346.2。
步骤F:(S,E)-2-((6-氧代-5-(三氟甲基)-1-((2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)-1, 6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙醛O-(2-(1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-基)乙基)肟的制 备
将(S,E)-2-氨基丙醛O-(2-(1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-基)乙基)肟(100毫克，0.29毫摩尔，1.0eq.)溶于乙醇(5毫升)，加入5-氯-4-(三氟甲基)-2-((2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)哒嗪-3(2H)-酮(143毫克，0.43毫摩尔，1.5eq.)和三乙胺(147毫克，1.45毫摩尔，5.0eq.)。反应液加热至60℃反应4小时。将反应冷却到室温，向反应液加水(100毫升)淬灭，乙酸乙酯(2x100毫升)萃取，合并有机相，饱和盐水(100毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩。粗品用硅胶柱层析(乙酸乙酯/石油醚＝1/1；V/V)分离纯化得到(S,E)-2-((6-氧代-5-(三氟甲基)-1-((2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙醛O-(2-(1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-基)乙基)肟(40毫克，黄色油状物)，收率：19.5％。LCMS:(ESI)[M+H]+＝638.2。
1H NMR:(400MHz,CDCl3)δ8.49(s,2H),7.77(s,1H),7.36(d,J＝5.6Hz,1H),6.04–5.96(m,1H),5.48–5.38(m,2H),4.90–4.83(m,2H),4.50–4.41(m,1H),4.19–4.14(m,2H),3.77–3.70(m,2H),3.03–2.91(m,2H),1.93–1.82(m,2H),1.70–1.63(m,2H),1.57–1.47(m,3H),1.29–1.18(m,3H),1.03–0.95(m,2H),0.03(s,9H)。
步骤G:(S,E)-2-(6-氧代-5-(三氟甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙醛O-(2-(1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-基)乙基)肟的制备
将(S,E)-2-((6-氧代-5-(三氟甲基)-1-((2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙醛O-(2-(1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-基)乙基)肟(30毫克，0.05毫摩尔，1.0eq.)，溶于二氯甲烷(1毫升)，加入三氟乙酸(0.3毫升)。反应液于15℃反应1小时。向反应液加碳酸氢钠水溶液(20毫升)，用二氯甲烷(3x40毫升)萃取。合并有机相，无水硫酸钠干燥并浓缩。将残余物重新溶于无水甲醇(2毫升)，加入碳酸钾(24毫克，0.17毫摩尔，3.6eq.)。反应液于15℃继续反应1小时。反应液过滤，滤液用prep-HPLC分离纯化，然后再用prep-TLC(二氯甲烷/乙酸乙酯＝1/2；V/V)纯化得到化合物14，(S,E)-2-((6-氧代-5-(三氟甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙醛-O-(2-(1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-基)乙基)肟(3.47毫克，白色固体)，收率：14.4％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝507.8。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ10.96(s,1H),8.45(s,2H),7.72(s,1H),7.32(d,J＝5.2Hz,1H),6.04–5.95(m,1H),4.89–4.77(m,2H),4.45–4.36(m,1H),4.14(t,J＝6.8Hz,2H),3.01–2.85(m,2H),1.86–1.77(m,2H),1.75–1.67(m,1H),1.66–1.58(m,4H),1.50(d,J＝6.4Hz,3H)。
实施例15：化合物15的合成(S,E)-2-羰基-2-(4-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌嗪- 1-基)乙醛O-(2-((6-羰基-5-(三氟甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙基)肟
步骤A：(S)-2-(2-((6-羰基-5-(三氟甲基)-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)异二氢吲哚-1,3-二酮的制备
将(S)-5-((1-羟基丙烷-2-基)氨基)-4-(三氟甲基)-2-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)哒嗪-3(2H)-酮(360毫克，0.981毫摩尔，1.0eq)，2-羟基异二氢吲哚-1,3-二酮(192毫克，1.177毫摩尔，1.2eq.)和三苯基膦(308毫克，1.177毫摩尔，1.2eq.)溶于四氢呋喃(5毫升)，然后0℃氮气保护下滴加偶氮二甲酸二乙酯(238毫克，1.177毫摩尔，1.2eq.)。反应液于室温反应1小时。反应液浓缩，粗品溶于石油醚/乙酸乙酯(1:1；V/V，50毫升)，然后加入石油醚直到没有固体析出。将混合物过滤，滤液浓缩，粗品用硅胶柱层析层析(石油醚/乙酸乙酯＝2/3；V/V)分离纯化得到(S)-2-(2-((6-羰基-5-(三氟甲基)-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)异二氢吲哚-1,3-二酮(350毫克，白色固体)，收率：70％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝513.2。
1H NMR:(400MHz,DMSO)δ8.10(s,1H),7.96–7.82(m,4H),6.83(dd,J＝8.3,3.8Hz,1H),5.31–5.17(m,2H),4.53(s,1H),4.44(dd,J＝10.8,8.0Hz,1H),4.26(dd,J＝10.8,3.8Hz,1H),3.68–3.58(m,2H),1.26(d,J＝6.5Hz,3H),0.95–0.83(m,2H),0.03–-0.02(m,9H)。
步骤B：(S)-5-((1-(氨基氧基)丙烷-2-基)氨基)-4-(三氟甲基)-2-((2-(三甲基 甲硅烷基)乙氧基)甲基)哒嗪-3(2H)-酮(中间体J)的制备
将(S)-2-(2-((6-羰基-5-(三氟甲基)-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)异二氢吲哚-1,3-二酮(350毫克，0.683毫摩尔，1.0eq.)溶于乙醇(5毫升)，然后在0℃下加水合肼(100毫克，1.025毫摩尔，1.5eq.)。反应液于室温反应1小时。反应液浓缩，粗品用甲叔丁基醚(10毫升)洗涤并过滤，滤液浓缩得到中间体J，(S)-5-((1-(氨基氧基)丙烷-2-基)氨基)-4-(三氟甲基)-2-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)哒嗪-3(2H)-酮(250毫克，白色固体)，收率：95.8％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝383.2。
步骤C：(S,E)-2-((2-((6-羰基-5-(三氟甲基)-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基) 甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)亚氨基)乙酸的制备
将(S)-5-((1-(氨基氧基)丙烷-2-基)氨基)-4-(三氟甲基)-2-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)哒嗪-3(2H)-酮(100毫克，0.261毫摩尔，1.0eq.)溶于甲醇(3毫升)，然后加2-羰基乙酸(20毫克，0.274毫摩尔，1.05eq.)。反应液于室温反应1小时。向反应液加水(10毫升)，用乙酸乙酯(3x10毫升)萃取，合并有机相并用饱和盐水(10毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩得到(S,E)-2-((2-((6-羰基-5-(三氟甲基)-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)亚氨基)乙酸(90毫克，白色固体)，收率：79％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝439.2。
步骤D：(S,E)-2-羰基-2-(4-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)乙醛O-(2- ((6-羰基-5-(三氟甲基)-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨 基)丙基)肟的制备
将(S,E)-2-((2-((6-羰基-5-(三氟甲基)-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)亚氨基)乙酸(90毫克，0.205毫摩尔，1.0eq.)溶于N,N-二甲基甲酰胺(2毫升)，依次加入N,N-二异丙基乙胺(79毫克，0.616毫摩尔，3.0eq.)，2-(7-氮杂苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(93毫克，0.246毫摩尔，1.2eq.)，然后将2-(哌嗪-1-基)-5-(三氟甲基)嘧啶(57毫克，0.246毫摩尔，1.2eq.)加至反应液中。反应液于25℃反应1小时。向反应液中加水(10毫升)淬灭反应，乙酸乙酯(3x10毫升)萃取。合并有机相，饱和盐水(10毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩。残留物用硅胶柱层析层析(石油醚/乙酸乙酯＝1/2；V/V)分离纯化得到(S,E)-2-羰基-2-(4-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)乙醛O-(2-((6-羰基-5-(三氟甲基)-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙基)肟(90毫克，白色固体)，收率：67％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝653.2。
步骤E：(S,E)-2-羰基-2-(4-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)乙醛O-(2-((6-羰基-5-(三氟甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙基)肟的制备
将(S,E)-2-羰基-2-(4-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)乙醛O-(2-((6-羰基-5-(三氟甲基)-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙基)肟(90毫克，0.138毫摩尔，1.0eq.)溶于二氯甲烷(2毫升)，加入三氟乙酸(0.3毫升)。反应液于25℃反应1小时。向反应液中加入饱和碳酸氢钠水溶液(30毫升)中和，二氯甲烷(3x10毫升)萃取。合并有机相，无水硫酸钠干燥并浓缩。将粗品重新溶于甲醇(2毫升)，加入碳酸钠(36毫克，0.345毫摩尔，2.5eq.)。反应液于25℃继续反应1小时。反应液过滤，滤液通过反相柱(水:乙腈＝1:10)分离纯化得到化合物15，(S,E)-2-羰基-2-(4-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)乙醛O-(2-((6-羰基-5-(三氟甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙基)肟(14毫克，白色粉末)，收率：19％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝522.8。
1H NMR:(400MHz,DMSO)δ12.47(s,1H),8.74(s,2H),8.00(s,1H),7.88(s,1H),6.48(dd,J＝8.3,3.8Hz,1H),4.32–4.11(m,3H),3.91–3.84(m,4H),3.67–3.60(m,4H),1.21(d,J＝6.3Hz,3H)。
实施例16：化合物16的合成(S,E)-5-((1-(((1-羰基-1-(4-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)丙烷-2-亚基)氨基)氧代)丙烷-2-基)氨基)-4-(三氟甲基)哒嗪-3(2H)-酮
步骤A：(S,E)-2-((2-((6-羰基-5-(三氟甲基)-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基) 甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)亚氨基)丙酸的制备
将(S)-5-((1-(氨基氧基)丙烷-2-基)氨基)-4-(三氟甲基)-2-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)哒嗪-3(2H)-酮(90毫克，0.235毫摩尔，1.0eq.)溶于甲醇(3毫升)，然后加2-羰基丙酸(22毫克，0.247毫摩尔，1.05eq.)。反应液于20℃反应1小时。向反应液加水(5毫升)，用乙酸乙酯(2x5毫升)萃取，合并有机相并用饱和盐水(10毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩得到(S,E)-2-((2-((6-羰基-5-(三氟甲基)-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)亚氨基)丙酸(90毫克，白色固体)，收率：85％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝453.2。
步骤B：(S,E)-5-((1-(((1-羰基-1-(4-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)丙烷-2-亚基)氨基)氧代)丙烷-2-基)氨基)-4-(三氟甲基)-2-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)哒嗪-3(2H)-酮的制备
将(S,E)-2-((2-((6-羰基-5-(三氟甲基)-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)亚氨基)丙酸(95毫克，0.210毫摩尔，1.0eq.)溶于N,N-二甲基甲酰胺(2毫升)，依次加入N,N-二异丙基乙胺(81毫克，0.630毫摩尔，3.0eq.)，2-(7-氮杂苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(96毫克，0.252毫摩尔，1.2eq.)，然后将2-(哌嗪-1-基)-5-(三氟甲基)嘧啶(54毫克，0.231毫摩尔，1.2eq.)加至反应液中。反应液于20℃反应1小时。向反应液中加水(10毫升)淬灭反应，乙酸乙酯(3x10毫升)萃取。合并有机相，饱和盐水(10毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩。残留物用硅胶柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝1/1；V/V)分离纯化得到(S,E)-5-((1-(((1-羰基-1-(4-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)丙烷-2-亚基)氨基)氧代)丙烷-2-基)氨基)-4-(三氟甲基)-2-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)哒嗪-3(2H)-酮(90毫克，黄色固体)，收率：64％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝667.2。
1H NMR:(400MHz,DMSO)δ8.80(s,2H),8.08(s,1H),6.75(dd,J＝8.3,3.7Hz,1H),5.27(s,2H),4.49–4.33(m,1H),4.31–4.18(m,2H),4.02–3.83(m,4H),3.61–3.68(m,6H),1.95(s,3H),1.28(d,J＝6.5Hz,3H),0.89(dd,J＝10.4,5.6Hz,2H),0.05(s,9H)。
步骤C：(S,E)-5-((1-(((1-羰基-1-(4-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)丙 烷-2-亚基)氨基)氧代)丙烷-2-基)氨基)-4-(三氟甲基)哒嗪-3(2H)-酮的制备
将(S,E)-5-((1-(((1-羰基-1-(4-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)丙烷-2-亚基)氨基)氧代)丙烷-2-基)氨基)-4-(三氟甲基)-2-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)哒嗪-3(2H)-酮(90毫克，0.135毫摩尔，1.0eq.)溶于二氯甲烷(2毫升)，加入三氟乙酸(0.3毫升)。反应液于20℃反应30分钟。向反应液中加入饱和碳酸氢钠水溶液(30毫升)中和，二氯甲烷(3x10毫升)萃取。合并有机相，无水硫酸钠干燥并浓缩。将粗品重新溶于甲醇(2毫升)，加入碳酸钾(46毫克，0.3338毫摩尔，2.5eq.)。反应液于20℃继续反应1小时。反应液过滤，滤液通过反相柱(乙腈/水＝1/10～10/1；V/V)分离纯化得到化合物16，(S,E)-5-((1-(((1-羰基-1-(4-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)丙烷-2-亚基)氨基)氧代)丙烷-2-基)氨基)-4-(三氟甲基)哒嗪-3(2H)-酮(52毫克，白色粉末)，收率：72％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝537.2。
1H NMR:(400MHz,DMSO)δ12.49(s,1H),8.77(s,2H),7.93(s,1H),6.54(d,J＝4.2Hz,1H),4.32(s,1H),4.24–4.17(m,2H),3.92–3.87(m,4H),3.58–3.66(m,4H),1.92(s,3H),1.23(d,J＝6.4Hz,3H)。
实施例17：化合物17的合成
(S)-N-(2-((6-氧代-5-(三氟甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)-2-(1- (5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-基)乙酰胺
17.1)中间体S的合成
步骤A：2-(1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-基)乙酸乙酯的制备
将(2-氯-5-(三氟甲基)嘧啶(200毫克，1.09毫摩尔，1.0eq.)溶于N-甲基吡咯烷酮(3毫升)，然后加入碳酸钾(455毫克，3.29毫摩尔，3.0eq.)和2-(哌啶-4-基)乙酸乙酯盐酸盐(251毫克，1.19毫摩尔，1.1eq.)。反应液于65℃反应2小时。反应液冷却至室温，加入水(5毫升)，用乙酸乙酯萃取(3x10毫升)，合并有机相并浓缩。粗品用硅胶柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝4/1；V/V)分离纯化得到2-(1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-基)乙酸乙酯(300毫克，白色固体)，收率：86.8％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝318.2。
1H NMR:(400MHz,DMSO)δ8.66(s,2H),4.70(d,J＝13.3Hz,2H),4.07(q,J＝7.1Hz,2H),3.00(td,J＝13.0,2.4Hz,2H),2.27(d,J＝7.1Hz,2H),2.10–1.93(m,1H),1.75(dd,J＝12.6,2.1Hz,2H),1.21–1.08(m,5H)。
步骤B：2-(1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-基)乙酸(中间体S)的制备
将2-(1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-基)乙酸乙酯(300毫克，0.946毫摩尔，1.0eq.)溶于四氢呋喃(3毫升)，然后加入水(3毫升)和氢氧化锂(68毫克，2.839毫摩尔，3.0eq.)。反应液于25℃反应16小时。向反应液加入水(5毫升)，用乙酸乙酯萃取(3x10毫升)，水相用柠檬酸水溶液调pH至5～6，乙酸乙酯萃取(3x15毫升)，将有机相合并后用无水硫酸钠干燥并浓缩得到中间体S,2-(1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-基)乙酸(220毫克，白色固体)，收率：80％。LCMS:(ESI)[M+H]+＝290.2。
17.2)中间体V的合成
步骤A：(S)-N-(2-((6-氧代-5-(三氟甲基)-1-((2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)- 1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)-2-(1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-基)乙酰胺的 制备
将2-(1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-基)乙酸(69毫克，0.238毫摩尔，1.3eq.)溶于N,N-二甲基甲酰胺(2毫升)，依次加入N,N-二异丙基乙胺(118毫克，0.914毫摩尔，5.0eq.)，2-(7-氮杂苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(83毫克，0.219毫摩尔，1.2eq.)，然后将(S)-5-((1-(氨基氧基)丙烷-2-基)氨基)-4-(三氟甲基)-2-((2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)哒嗪-3(2H)-酮(70毫克，0.183毫摩尔，1.0eq.)加至反应液中。反应液于25℃反应2小时。向反应液中加水(10毫升)淬灭反应，乙酸乙酯(3x10毫升)萃取。合并有机相，饱和盐水(10毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩。残留物用硅胶柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝1/2；V/V)分离纯化得到中间体V，(S)-N-(2-((6-氧代-5-(三氟甲基)-1-((2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)-2-(1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-基)乙酰胺(80毫克，白色固体)，收率：67％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝654.2。
17.3)化合物17的合成
步骤A：(S)-N-(2-((6-氧代-5-(三氟甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)- 2-(1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-基)乙酰胺的制备
将(S)-N-(2-((6-氧代-5-(三氟甲基)-1-((2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)-2-(1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-基)乙酰胺(80毫克，0.122毫摩尔，1.0eq.)溶于二氯甲烷(2毫升)，加入三氟乙酸(0.3毫升)。反应液于25℃反应30分钟。向反应液中加入饱和碳酸氢钠水溶液(30毫升)中和，二氯甲烷(3x50毫升)萃取。合并有机相，无水硫酸钠干燥并浓缩。将粗品重新溶于甲醇(2毫升)，加入碳酸钾(42毫克，0.306毫摩尔，2.5eq.)。反应液于25℃继续反应1小时。反应液过滤，滤液通过反相柱(乙腈/水＝1/10～10/1)分离纯化得到化合物17，(S)-N-(2-((6-氧代-5-(三氟甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)-2-(1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-基)乙酰胺(25.58毫克，白色粉末)，收率：40％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝524.2.
1H NMR:(400MHz,DMSO)δ12.48(s,1H),11.13(s,1H),8.66(s,2H),7.90(s,1H),6.61(s,1H),4.67(d,J＝13.1Hz,2H),4.20(s,1H),3.94–3.78(m,2H),2.98(t,J＝12.2Hz,2H),2.04–2.04(m,1H),1.92(d,J＝6.9Hz,2H),1.72(d,J＝12.7Hz,2H),1.19(d,J＝6.4Hz,3H),1.15–1.01(m,2H)。
实施例18：化合物18合成((E)-2-(1-氧代-1,2-二氢邻苯二甲嗪-5-基)丙醛-O- (2-氧代-2-(4-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)乙基)肟
步骤A:4-溴-3-羟基异苯并呋喃-1(3H)-酮的合成
氮气保护下，向冷却至-20℃的正丁基锂溶液(2.5M于己烷，45毫升，112.50毫摩尔，2.2eq.)中滴加2,2,6,6-四甲基六氢吡啶(15.71克，111.19毫摩尔，2.2eq.)的无水四氢呋喃溶液(120毫升)。反应液于-20℃搅拌30分钟以后，进一步降温至-50℃，然后滴加3-溴苯甲酸(10.16克，50.54毫摩尔，1.0eq.)的无水四氢呋喃溶液(40毫升)。反应液于-50℃继续反应1小时以后，向反应液中加入无水N,N-二甲基甲酰胺(15毫升，202.17毫摩尔，4.0eq.)，滴加完毕，搅拌一段时间以后，再将反应液升至室温。加水(100毫升)淬灭反应，用2M盐酸调节至pH＝4，用乙酸乙酯(3x100毫升)萃取。合并有机相，饱和盐水(2x100毫升)洗涤有机相，无水硫酸钠干燥并浓缩。得到的粗产品用乙酸乙酯/石油醚(1/1；V/V，300毫升)重结晶得到4-溴-3-羟基异苯并呋喃-1(3H)-酮(10.65克，黄色固体)，收率：92.0％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝229.0。
步骤B:5-溴代酞嗪-1(2H)-酮的合成
室温下将4-溴-3-羟基异苯并呋喃-1(3H)-酮(10.65克，46.50毫摩尔，1.0eq.)溶于乙醇(170毫升)，加入水合肼一水合物(13.02克，260.40毫摩尔，5.6eq.)。反应液加热至80℃反应2小时。反应液降至室温，加入水(150毫升)淬灭反应，用乙酸乙酯(3x150毫升)萃取。合并有机相，有机相用盐水(300毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩。得到的粗产品用硅胶柱柱层析(二氯甲烷/甲醇＝10/1；V/V)分离纯化得到5-溴代酞嗪-1(2H)-酮(3.5克，白色固体)，收率：33.5％。LCMS:(ESI)[M+H]+＝225.0。
1H NMR:(400MHz,DMSO-d6)δ12.84(br s,1H),8.42(s,1H),8.24(d,J＝8.0Hz,1H),8.21(dd,J＝8.0,1.2Hz,1H),7.76(t,J＝8.0Hz,1H)。
步骤C:5-溴-2-((2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)酞嗪-1(2H)-酮的制备
将5-溴代酞嗪-1(2H)-酮(2.25克，4.00毫摩尔，1.0eq.)溶于N,N-二甲基甲酰胺(50毫升)，然后在0℃下加氢化钠(60％，400毫克，10.00毫摩尔，2.5eq.)。反应液于0℃反应1.5小时，然后向反应液中加2-(三甲基硅烷基)乙氧甲基氯(1.00克，6.00毫摩尔，1.5eq.)。反应液于15℃继续反应两小时。缓慢向反应液中加水(100毫升)淬灭，乙酸乙酯(2x100毫升)萃取。合并有机相，饱和盐水(50毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩。粗品用硅胶柱层析(乙酸乙酯/石油醚＝1/10；V/V)分离纯化得到5-溴-2-((2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)酞嗪-1(2H)-酮(2.40克，黄色油状物)，收率：67.9％。
LCMS:(ESI)[M+H-28]+＝327.0。
1H NMR:(400MHz,CDCl3)δ8.44(s,1H),8.36(d,J＝7.6Hz,1H),7.94(d,J＝7.6Hz,1H),7.55(t,J＝8.0Hz,1H),5.51(s,2H),3.71–3.66(m,2H),0.96–0.91(m,2H),-0.06(s,9H)。
步骤D:5-(丙-1-烯-2-基)-2-((2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)邻苯二甲嗪-1 (2H)-酮的制备
氮气保护下，将5-溴-2-((2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)酞嗪-1(2H)-酮(4.50克，12.66毫摩尔，1.0eq.)，溶于1,4-二氧六环/水溶液(4/1；V/V，45毫升)，加入异丙烯基硼酸频哪醇酯(2.34克，13.93毫摩尔，1.1eq.)，碳酸钾(3.50克，25.33毫摩尔，2.0eq.)和1,1'-二(二苯膦基)二茂铁二氯化钯(II)(0.93克，1.27毫摩尔，0.1eq.)。反应液于65℃反应16小时。反应液加水(80毫升)淬灭，乙酸乙酯(2x100毫升)萃取。合并有机相，无水硫酸钠干燥并浓缩得到5-(丙-1-烯-2-基)-2-((2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)邻苯二甲嗪-1(2H)-酮(3.10克，黄色固体)，收率：62.7％。
LCMS:(ESI)[M+H-28]+＝289.0。
步骤E:5-(1-羟基丙烷-2-基)-2-((2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)邻苯二甲嗪-1 (2H)-酮的制备
将5-(丙-1-烯-2-基)-2-((2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)邻苯二甲嗪-1(2H)-酮(3.10克，9.80毫摩尔，1.0eq.)，溶于四氢呋喃(85毫升)，0℃下加硼氢化钠(0.59克，15.67毫摩尔，1.6eq.)。反应在0℃反应1小时。将三氟化硼-乙醚溶液(1.53克，10.78毫摩尔，1.1eq.)溶于四氢呋喃(5毫升)，滴入反应液中，反应在15℃反应1.5小时。在0℃下向反应液中加水(5毫升)，反应在15℃反应3.5小时。在0℃下将过氧单磺酸钾(9.98克，33.30毫摩尔，3.4eq.)溶于水(5毫升)滴加入反应液中。反应液于15℃反应18小时。反应液加水(80毫升)淬灭，乙酸乙酯(2x100毫升)萃取。合并有机相，饱和盐水(50毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩。粗品用硅胶柱层析(乙酸乙酯/石油醚＝1/1；V/V)分离纯化得到5-(1-羟基丙烷-2-基)-2-((2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)邻苯二甲嗪-1(2H)-酮(1.40克，黄色固体)，收率：39.3％。
LCMS:(ESI)[M+H-28]+＝307.2。
步骤F:2-(1-氧代-2-((2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)-1,2-二氢邻苯二甲嗪-5- 基)丙醛(中间体K)的制备
将5-(1-羟基丙烷-2-基)-2-((2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)邻苯二甲嗪-1(2H)-酮(700毫克，2.09毫摩尔，1.0eq.)溶于二氯甲烷(15毫升)，加入戴斯马丁试剂(1.33克，3.14毫摩尔，1.5eq.)。反应液于15℃反应2小时。反应液加碳酸氢钠水溶液(50毫升)淬灭，乙酸乙酯(2x100毫升)萃取。合并有机相，饱和盐水(100毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩。粗品用硅胶柱层析(乙酸乙酯/石油醚＝2/1；V/V)分离纯化得到中间体K，2-(1-氧代-2-((2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)-1,2-二氢邻苯二甲嗪-5-基)丙醛(350毫克，黄色油状物)，收率：50.3％。LCMS:(ESI)[M+H-28]+＝304.8。
步骤G:(E)-2-(1-氧代-2-((2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)-1,2-二氢邻苯二甲嗪-5-基)丙醛-O-(2-氧代-2-(4-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)乙基)肟的制备
将2-(氨基氧基)-1-(4-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)乙酮盐酸盐(100毫克，0.33毫摩尔，1.0eq.)溶于甲醇(5毫升)，加入2-(1-氧代-2-((2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)-1,2-二氢邻苯二甲嗪-5-基)丙醛(131毫克，0.39毫摩尔，1.2eq.)及N,N-二异丙基乙胺(128毫克，0.98毫摩尔，3.0eq.)。反应液加热至55℃反应3小时。反应液冷却至室温，加入乙酸(79毫克，1.31毫摩尔，4.0eq.)和氰基硼氢化钠(31毫克，0.49毫摩尔，1.5eq.)。反应液加热至55℃继续反应0.5小时。反应液加碳酸氢钠水溶液(50毫升)淬灭，乙酸乙酯(2x100毫升)萃取。合并有机相，饱和盐水(50毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩。粗品用硅胶柱层析(乙酸乙酯/石油醚＝2/1；V/V)分离纯化得到(E)-2-(1-氧代-2-((2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)-1,2-二氢邻苯二甲嗪-5-基)丙醛-O-(2-氧代-2-(4-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)乙基)肟(40毫克，黄色油状物)，收率：22.1％。
LCMS:(ESI)[M+H-28]+＝592.2。
1H NMR:(400MHz,CDCl3)δ8.59–8.52(m,3H),8.43(d,J＝8.0Hz,1H),7.82–7.71(m,2H),7.67(d,J＝6.4Hz,1H),5.66–5.54(m,2H),4.89–4.79(m,2H),4.45–4.33(m,1H),4.00–3.93(s,4H),3.81–3.73(m,4H),3.64–3.52(m,2H),1.63(d,J＝7.2Hz,3H),1.07–0.98(m,2H),0.03(s,9H)。
步骤H:((E)-2-(1-氧代-1,2-二氢邻苯二甲嗪-5-基)丙醛-O-(2-氧代-2-(4-(5- (三氟甲基)
嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)乙基)肟的制备
将(E)-2-(1-氧代-2-((2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)-1,2-二氢邻苯二甲嗪-5-基)丙醛-O-(2-氧代-2-(4-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)乙基)肟(35毫克，0.06毫摩尔，1.0eq.)，溶于二氯甲烷(10毫升)，加入三氟乙酸(1毫升)。反应液于15℃反应1小时。反应液加碳酸氢钠水溶液(50毫升)，二氯甲烷(3x80毫升)萃取。合并有机相，无水硫酸钠干燥并浓缩。将粗品重新溶于无水甲醇(5毫升)，加入碳酸钾(28毫克，0.21毫摩尔，3.6eq.)。反应液于15℃继续反应1小时。反应液过滤，滤液制备分离纯化得到化合物18，(E)-2-(1-氧代-1,2-二氢邻苯二甲嗪-5-基)丙醛-O-(2-氧代-2-(4-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)乙基)肟(9.48毫克，白色固体)，收率：33.8％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝490.2。
1H NMR:(400MHz,CDCl3)δ10.49(s,1H),8.59–8.51(m,3H),8.41(d,J＝7.6Hz,1H),7.83–7.72(m,2H),7.67(d,J＝6.4Hz,1H),4.82(s,2H),4.45–4.35(m,1H),4.01–3.90(m,4H),3.81–3.72(m,2H),3.63–3.54(m,2H),1.64(d,J＝6.8Hz,3H)。
实施例19：化合物19合成
(E)-2-(1-氧代-1,2-二氢邻苯二甲嗪-5-基)丙醛O-(2-氧代-2-(4-(5-(三氟甲 基)吡啶-2-基)哌嗪-1-基)乙基)肟
步骤A:2-氧代-2-(4-(5-(三氟甲基)吡啶-2-基)哌嗪-1-基)乙氧基氨基甲酸叔丁 酯的制备
将1-(5-(三氟甲基)吡啶-2-基)哌嗪盐酸盐(808毫克，3.02毫摩尔，1.0eq.)溶于N,N-二甲基甲酰胺(20毫升)，依次加入N,N-二异丙基乙胺(1.95克，15.09毫摩尔，5.0eq.)和2-(7-氮杂苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(1.38克，3.62毫摩尔，1.2eq.)，然后将2-((叔丁氧羰基)氨基)氧基)乙酸(635毫克，3.32毫摩尔，1.1eq.)滴加至反应液中。反应液于15℃反应2小时。向反应液中加水(100毫升)淬灭反应，乙酸乙酯(2x100毫升)萃取。合并有机相，饱和盐水(50毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩。得到的粗产物用硅胶柱柱层析(乙酸乙酯/石油醚＝1/3；V/V)分离纯化得到2-氧代-2-(4-(5-(三氟甲基)吡啶-2-基)哌嗪-1-基)乙氧基氨基甲酸叔丁酯(1.03克，黄色油状物)，收率：84.4％。
LCMS:(ESI)[M+H-56]+＝348.8。
步骤B:2-(氨基氧基)-1-(4-(5-(三氟甲基)吡啶-2-基)哌嗪-1-基)乙酮盐酸盐的 制备
将2-氧代-2-(4-(5-(三氟甲基)吡啶-2-基)哌嗪-1-基)乙氧基氨基甲酸叔丁酯(700毫克，1.73毫摩尔，1.0eq.)溶于盐酸二氧六环溶液(4M，10毫升)，将反应液于15℃反应1小时。反应液浓缩得到2-(氨基氧基)-1-(4-(5-(三氟甲基)吡啶-2-基)哌嗪-1-基)乙酮盐酸盐(590毫克，白色固体)，收率：99.9％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝305.2。
步骤C:(E)-2-(1-氧代-2-((2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)-1,2-二氢邻苯二甲 嗪-5-基)丙醛-O-(2-氧代-2-(4-(5-(三氟甲基)吡啶-2-基)哌嗪-1-基)乙基)肟
将2-(氨基氧基)-1-(4-(5-(三氟甲基)吡啶-2-基)哌嗪-1-基)乙酮盐酸盐(100毫克，0.29毫摩尔，1.0eq.)溶于四氢呋喃(10毫升)，依次加入2-(1-氧代-2-((2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)-1,2-二氢邻苯二甲嗪-5-基)丙醛(118毫克，0.35毫摩尔，1.2eq.)，N,N-二异丙基乙胺(114毫克，0.88毫摩尔，3.0eq.)和四乙氧基钛(74毫克，0.32毫摩尔，1.1eq.)。反应液加热至80℃反应1小时，然后将反应液降到室温，加水(50毫升)淬灭，乙酸乙酯(2x100毫升)萃取。合并有机相，饱和盐水(50毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩。粗品用硅胶柱层析(乙酸乙酯/石油醚＝2/3；V/V)分离纯化得到(E)-2-(1-氧代-2-((2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)-1,2-二氢邻苯二甲嗪-5-基)丙醛O-(2-氧代-2-(4-(5-(三氟甲基)吡啶-2-基)哌嗪-1-基)乙基)肟(80毫克，黄色油状物)，收率：44.1％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝620.2。
步骤D:(E)-2-(1-氧代-1,2-二氢邻苯二甲嗪-5-基)丙醛O-(2-氧代-2-(4-(5-(三 氟甲基)吡啶-2-基)哌嗪-1-基)乙基)肟的制备
将(E)-2-(1-氧代-2-((2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)-1,2-二氢邻苯二甲嗪-5-基)丙醛O-(2-氧代-2-(4-(5-(三氟甲基)吡啶-2-基)哌嗪-1-基)乙基)肟(60毫克，0.097毫摩尔，1.0eq.)溶于二氯甲烷(5毫升)，加入三氟乙酸(1.5毫升)。反应液于15℃反应1小时。反应液加碳酸氢钠水溶液(50毫升)中和，然后用二氯甲烷(3x80毫升)萃取。合并有机相，无水硫酸钠干燥并浓缩。将残余物重新溶于无水甲醇(3毫升)，加入碳酸钾(49毫克，0.35毫摩尔，3.6eq.)。反应液于15℃继续搅拌1小时。将反应液过滤，滤液通过prep-HPLC分离纯化得到化合物19，(E)-2-(1-氧代-1,2-二氢邻苯二甲嗪-5-基)丙醛O-(2-氧代-2-(4-(5-(三氟甲基)吡啶-2-基)哌嗪-1-基)乙基)肟(9.26毫克，白色固体)，收率：16.2％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝488.8。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ10.20(s,1H),8.50(s,1H),8.43–8.39(m,1H),8.36(dd,J＝7.2,1.6Hz,1H),7.78–7.70(m,2H),7.69–7.65(m,1H),7.63(d,J＝6.4Hz,1H),6.68–6.62(m,1H),4.77(s,2H),4.40–4.32(m,1H),3.78–3.69(m,4H),3.64–3.58(m,4H),1.59(d,J＝7.2Hz,3H)。
实施例20：化合物20的合成
(S)-N-(2-((6-氧代-5-(三氟甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)-2-(1- (5-三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-亚基)乙酰胺
20.1)中间体O和中间体N的合成
步骤A：4-(2-甲氧基-2-氧亚乙基)哌啶-1-羧酸叔丁酯的制备
氮气保护下，将磷酸乙酸三甲酯(27.32克，150.00毫摩尔，1.0eq.)溶于四氢呋喃(350毫升)，冰浴下冷却至0℃，分批加入氢化钠(60％，6.30克，157.50毫摩尔，1.05eq.)。反应液于0℃反应0.5小时。向反应液中加入N-叔丁氧羰基-4-哌啶酮(29.89克，150.00毫摩尔，1.0eq.)。反应液于25℃反应3小时。反应液缓慢加入冷饱和氯化铵溶液(400毫升)中淬灭，乙酸乙酯(2x350毫升)萃取。合并有机相，无水硫酸钠干燥并浓缩有机相。得到的粗产物用硅胶柱柱层析(乙酸乙酯/石油醚＝1/10；V/V)分离纯化得到4-(2-甲氧基-2-氧亚乙基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(30.83克，白色固体)，收率：80.5％。
LCMS:(ESI)[M+H-100]+＝156.2。
1H NMR:(400MHz,CDCl3)δ5.65(s,1H),3.63(s,3H),3.48–3.35(m,4H),2.91–2.82(m,2H),2.26–2.15(m,2H),1.40(s,9H)。
步骤B：2-(哌啶-4-亚基)乙酸甲酯盐酸盐(中间体O)的制备
将4-(2-甲氧基-2-氧亚乙基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(36.00克，47.00毫摩尔，1.0eq.)溶于二氯甲烷(200毫升)，加入盐酸二氧六环溶液(4M，150毫升)。反应液于25℃反应1小时。反应液浓缩得到中间体O粗品2-(哌啶-4-亚基)乙酸甲酯盐酸盐(34.84克，白色固体)。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝156.2。
步骤C：2-(1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-亚基)乙酸甲酯(中间体N)的制备
将2-(哌啶-4-亚基)乙酸甲酯盐酸盐(21.96克，114.66毫摩尔，1.2eq.)悬于二氯甲烷(300毫升)，依次加入三乙胺(29.01克，286.65毫摩尔，3.0eq.)以及2-氯-5-(三氟甲基)嘧啶(17.44克，95.55毫摩尔，1.0eq.)。反应液于25℃反应18小时。反应液加水(500毫升)淬灭，二氯甲烷(3x300毫升)萃取。合并有机相，无水硫酸钠干燥并浓缩有机相。得到的粗产物用硅胶柱柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝10/1；V/V)分离纯化得到中间体N，2-(1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-亚基)乙酸甲酯(22.50克,白色固体)，收率：78.2％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝302.0。
1H NMR:(400MHz,DMSO-d6)δ8.72(d,J＝0.4Hz,2H),5.84(s,1H),3.98–3.87(m,4H),3.64(s,3H),2.96(t,J＝5.2Hz,2H),2.45–2.38(m,2H)。
20.2)化合物20的制备
步骤A：2-(1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-亚基)乙酸的制备
将2-(1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-亚基)乙酸甲酯(11.38克，37.77毫摩尔，1.0eq.)溶于四氢呋喃(100毫升)与水(100毫升)的混合溶剂，加入氢氧化钠(4.53克，113.31毫摩尔，3.0eq.)。反应液于70℃反应3小时。反应液降至室温并用稀盐酸调节至pH＝6,乙酸乙酯(2x300毫升)萃取。合并有机相，饱和盐水(1000毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩有机相得到2-(1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-亚基)乙酸(9.67克，黄色固体)，收率：89.1％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝288.0。
步骤B：4-溴-5-(2,2,2-三氟乙氧基)-2-((2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)哒嗪-3 (2H)-酮的制备
将4,5-二溴-2-((2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)哒嗪-3(2H)-酮(68.80克，179.10毫摩尔，1.0eq.)溶于2,2,2-三氟乙醇(280毫升)，加入N,N-二异丙基乙胺(46.29克，358.20毫摩尔，2.0eq.)。反应液加热至70℃反应18小时。反应液降至室温并加水(800毫升)淬灭，乙酸乙酯(3x500毫升)萃取。合并有机相，饱和盐水(3x1L)洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩有机相。得到的粗产物用硅胶柱柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝3/1；V/V)分离纯化得到4-溴-5-(2,2,2-三氟乙氧基)-2-((2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)哒嗪-3(2H)-酮(82.80克，黄色固体)，收率：100％。LCMS:(ESI)[M+H-28]+＝375.0。
1H NMR:(400MHz,CDCl3)δ7.72(s,1H),5.53(s,2H),4.65(q,J＝7.6Hz,2H),3.76–3.68(m,2H),1.01–0.93(m,2H),0.02(s,9H)。
步骤C：5-(2,2,2-三氟乙氧基)-4-(三氟甲基)-2-((2-(三甲基硅基)乙氧基)甲 基)哒嗪-3(2H)-酮的制备
将4-溴-5-(2,2,2-三氟乙氧基)-2-((2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)哒嗪-3(2H)-酮(82.80克，205.32毫摩尔，1.0eq.)溶于N,N-二甲基甲酰胺(800毫升)，加入碘化亚铜(19.55克，102.66毫摩尔，0.5eq.)，氮气保护下，滴加氟磺酰基二氟乙酸甲酯(157.78克，821.28毫摩尔，4.0eq.)。反应液加热至100℃反应3小时。反应液降至室温并加水(1.5L)淬灭，乙酸乙酯(3x1L)萃取。合并有机相，饱和盐水(2x2L)洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩有机相。得到的粗产物用硅胶柱柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝5/1；V/V)分离纯化得到5-(2,2,2-三氟乙氧基)-4-(三氟甲基)-2-((2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)哒嗪-3(2H)-酮(78.00克，白色固体)，收率：96.8％。
LCMS:(ESI)[M+H-28]+＝365.0。
1H NMR:(400MHz,CDCl3)δ7.85(s,1H),5.48(s,2H),4.65(q,J＝7.6Hz,2H),3.79–3.68(m,2H),1.04–0.91(m,2H),0.03(s,9H)。
步骤D:(S)-5-((1-羟基丙烷-2-基)氨基)-4-(三氟甲基)-2-((2-(三甲基硅基)乙 氧基)甲基)哒嗪-3(2H)-酮(中间体B)的制备
将5-(2,2,2-三氟乙氧基)-4-(三氟甲基)-2-((2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)哒嗪-3(2H)-酮(78.00克，198.79毫摩尔，1.0eq.)溶于N,N-二甲基甲酰胺(780毫升)，依次加入三乙胺(20.12克，198.79毫摩尔，1.0eq.)以及L-氨基丙醇(29.86克，397.58毫摩尔，2.0eq.)。反应液加热至60℃反应3小时。反应液降至室温并加水(1L)稀释，乙酸乙酯(3x800毫升)萃取。合并有机相，饱和盐水(2x1.5L)洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩有机相。得到的粗产物用硅胶柱柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝2/1；V/V)分离纯化得到中间体B，(S)-5-((1-羟基丙烷-2-基)氨基)-4-(三氟甲基)-2-((2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)哒嗪-3(2H)-酮(72.08克，白色固体)，收率：98.7％。
LCMS:(ESI)[M+H-28]+＝340.1。
1H NMR:(400MHz,CDCl3)δ7.74(s,1H),5.95–5.81(m,1H),5.37(dd,J＝22.8,10.0Hz,2H),4.0–3.85(m,1H),3.84–3.75(m,1H),3.73–3.63(m,3H),1.32(d,J＝6.4Hz,3H),1.10–0.90(m,2H),0.00(s,9H)。
步骤E：(S)-2-(2-((6-羰基-5-(三氟甲基)-1-((2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)- 1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)异二氢吲哚-1,3-二酮的制备
将(S)-5-((1-羟基丙烷-2-基)氨基)-4-(三氟甲基)-2-((2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)哒嗪-3(2H)-酮(57.00克，155.25毫摩尔，1.0eq.)溶于四氢呋喃(400毫升)，依次加入N-羟基邻苯二甲酰亚胺(25.33克，155.25毫摩尔，1.0eq.)，三苯基膦(44.79克，170.78毫摩尔，1.1eq.)，最后滴加偶氮二甲酸二异丙酯(34.53克，170.78毫摩尔，1.1eq.)。反应液于25℃反应16小时。反应液加水(800毫升)淬灭，乙酸乙酯(3x600毫升)萃取。合并有机相，饱和盐水(1000毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩有机相。得到的粗产物用硅胶柱柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝3/1；V/V)分离纯化得到(S)-2-(2-((6-羰基-5-(三氟甲基)-1-((2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)异二氢吲哚-1,3-二酮(79.02克，无色油状物)，收率：99.3％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝513.2。
步骤F：(S)-5-((1-(氨基氧基)丙烷-2-基)氨基)-4-(三氟甲基)-2-((2-(三甲基 硅基)乙氧基)甲基)哒嗪-3(2H)-酮(中间体J)的制备
将(S)-2-(2-((6-羰基-5-(三氟甲基)-1-((2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)异二氢吲哚-1,3-二酮(40.00克，78.04毫摩尔，1.0eq.)溶于二氯甲烷(120毫升)与甲醇(60毫升)，加入水合肼(7.40克，116.96毫摩尔，1.5eq.)。反应液于25℃反应1小时。反应液浓缩，得到的粗产物中加入乙醇(100毫升)，滤除不溶物，滤液浓缩并用硅胶柱柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝2/1；V/V)分离纯化得到中间体J，(S)-5-((1-(氨基氧基)丙烷-2-基)氨基)-4-(三氟甲基)-2-((2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)哒嗪-3(2H)-酮(27.8克,黄色油状物)，收率：93.1％。LCMS:(ESI)[M+H]+＝383.1。
1H NMR:(400MHz,CDCl3)δ7.73(s,1H),6.45–6.35(m,1H),5.59(s,2H),5.43–5.34(m,2H),4.07–3.98(m,1H),3.85–3.77(m,1H),3.74–3.64(m,3H),1.32(d,J＝6.8Hz,3H),0.99–0.93(m,2H),0.00(s,9H)。
步骤G：(S)-N-(2-((6-氧代-5-(三氟甲基)-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲 基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)-2-(1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-亚基)乙 酰胺的制备
将2-(1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-亚基)乙酸(9.53克，33.18毫摩尔，1.1eq.)与(S)-5-((1-(氨基氧基)丙-2-基)氨基)-4-(三氟甲基)-2-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)哒嗪-3(2H)-酮(11.53克，30.16毫摩尔，1.0eq.)溶于N,N-二甲基甲酰胺(300毫升)，依次加入N,N-二异丙基乙胺(11.69克，90.48毫摩尔，3.0eq.)及2-(7-氮杂苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(13.76克，36.19毫摩尔，1.2eq.)。反应液于25℃反应1小时。反应液加水(800毫升)淬灭，乙酸乙酯(3x500毫升)萃取。合并有机相，饱和盐水(2x1000毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩有机相。得到的粗产物通过柱层析(乙酸乙酯/石油醚＝2/1；V/V)分离纯化得到(S)-N-(2-((6-氧代-5-(三氟甲基)-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)-2-(1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-亚基)乙酰胺(4.40克，黄色油状物)，收率：22.4％
LCMS:(ESI)[M+H]+＝652.2。
1H NMR:(400MHz,CDCl3)δ8.97(s,1H),8.52(s,2H),7.76(s,1H),6.09(s,1H),5.74–5.56(m,1H),5.48–5.40(m,1H),5.39–5.28(m,1H),4.18–4.10(m,2H),4.08–3.91(m,5H),3.75–3.68(m,2H),3.18–3.05(m,2H),2.39(t,J＝5.6Hz,2H),1.39(d,J＝6.4Hz,3H),1.01–0.95(m,2H),0.02(s,9H)。
步骤H：(S)-N-(2-((6-氧代-5-(三氟甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)- 2-(1-(5-三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-亚基)乙酰胺的制备
将(S)-N-(2-((6-氧代-5-(三氟甲基)-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)-2-(1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-亚基)乙酰胺(300毫克，0.46毫摩尔，1.0eq.)溶于二氯甲烷(18毫升)，加入三氟乙酸(3毫升)。反应液于25℃反应0.5小时。反应液浓缩，向得到的粗产物中加入甲醇(3毫升)及碳酸钾(100毫克，0.72毫摩尔)。反应液于25℃继续反应0.5小时。反应液过滤，滤液通过prep-HPLC纯化得到化合物20，(S)-N-(2-((6-氧代-5-(三氟甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)-2-(1-(5-三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-亚基)乙酰胺(41.89毫克，白色固体)，收率：17.5％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝522.2。
1H NMR:(400MHz,DMSO-d6)δ12.49(s,1H),11.21(s,1H),8.72(s,2H),7.93(s,1H),6.68–6.60(m,1H),5.57(s,1H),4.39–4.15(m,1H),3.97–3.82(m,6H),3.02–2.90(m,2H),2.37–2.25(m,2H),1.20(d,J＝6.8Hz,3H)。
实施例21：化合物21的合成
(S)-2-氟-N-(2-((6-氧代-5-(三氟甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)-2- (1-(5-(三氟甲基))嘧啶-2-基)哌啶-4-亚基)乙酰胺
21.1)中间体L的合成
步骤A：4-(2-乙氧基-1-氟-2-氧代亚乙基)哌啶-1-羧酸叔丁酯的制备
将2-(二甲氧基磷酰基)-2-氟乙酸乙酯(1.34克，5.52毫摩尔，1.1eq.)溶于四氢呋喃(20毫升)，然后在0℃下加入氢化钠(240毫克，6.02毫摩尔，1.2eq.)。反应液在0℃反应20分钟，然后在0℃下加入4-氧代哌啶-1-羧酸叔丁酯(1克，5.02毫摩尔，1.0eq.)，反应液于室温反应40分钟。反应液加入冰水(30毫升)，用乙酸乙酯萃取(3x20毫升)，将有机相合并后用无水硫酸钠干燥并浓缩。得到的粗品用硅胶柱柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝9/1；V/V)分离纯化得到4-(2-乙氧基-1-氟-2-氧代亚乙基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(900毫克，无色油状)，收率：64.2％。LCMS:(ESI)[M+H-100]+＝188.1。
步骤B：2-氟-2-(哌啶-4-亚基)乙酸乙酯盐酸盐的制备
将4-(2-乙氧基-1-氟-2-羰基亚乙基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(900毫克)溶于甲醇(5毫升)，然后加入盐酸二氧六环溶液(5毫升)。反应液于25℃反应30分钟。将反应液浓缩得到2-氟-2-(哌啶-4-亚基)乙酸乙酯盐酸盐(70毫克，无色油状)，收率：100％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝188.2。
步骤C：2-氟-2-(1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-亚基)乙酸乙酯(中间体L) 的制备
将2-氟-2-(哌啶-4-亚基)乙酸乙酯盐酸盐(700毫克，4.06毫摩尔，1.1eq.)溶于N-甲基吡咯烷酮(15毫升)，然后加入N,N-二异丙基乙胺(1.4克，11.04毫摩尔，3.0eq.)和2-氯-5-(三氟甲基)嘧啶(670毫克，3.68毫摩尔，1eq.)。反应液于80℃反应1小时。反应液冷却至室温，加入水(40毫升)，用乙酸乙酯萃取(2x35毫升)，将有机相合并后用无水硫酸钠干燥并浓缩。得到的粗品用硅胶柱柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝9/1；V/V)分离纯化得到中间体L，2-氟-2-(1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-亚基)乙酸乙酯(1克，白色固体)，收率：86.9％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝334.2。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.73(s,2H),4.30–4.16(m,2H),4.02–3.78(m,4H),2.98–2.83(m,2H),2.57–2.52(m,2H),1.27(t,J＝7.1Hz,3H)。
21.2)化合物21的合成
步骤A：2-氟-2-(1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-亚基)乙酸的制备
将2-氟-2-(1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-亚基)乙酸乙酯(1克,3.01毫摩尔,1.0eq.)溶于四氢呋喃(8毫升)，然后加入水(8毫升)和氢氧化锂(289毫克,12.04毫摩尔,4.0eq.)。反应液于40℃反应1小时。反应液降到室温，向反应液加入水(30毫升)，用乙酸乙酯萃取(3x25毫升)，水相用稀盐酸溶液调pH＝6,乙酸乙酯萃取(3x25毫升)，将有机相合并后用无水硫酸钠干燥并浓缩得到2-氟-2-(1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-亚基)乙酸(720毫克,白色固体)，收率：91.3％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝306.2。
步骤B：(S)-2-氟-N-(2-((6-氧代-5-(三氟甲基)-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧 基)甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基))丙氧基)-2-(1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4- 亚基)乙酰胺的制备
将2-氟-2-(1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-亚基)乙酸(200毫克，0.66毫摩尔，1.1eq.)溶于N,N-二甲基甲酰胺(5毫升)，依次加入N,N-二异丙基乙胺(153毫克，1.18毫摩尔，2.0eq.)，2-(7-氮杂苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(337毫克，0.89毫摩尔，1.5eq.)，然后将(S)-5-((1-(氨基氧基)丙烷-2-基)氨基)-4-(三氟甲基)-2-((2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)哒嗪-3(2H)-酮(230毫克，0.59毫摩尔，1.0eq.)加至反应液中。反应液于25℃反应1小时。向反应液中加水(35毫升)淬灭反应，乙酸乙酯(3x30毫升)萃取。合并有机相，饱和盐水(10毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩。得到的粗产物用硅胶柱柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝7/3；V/V)分离纯化得到(S)-2-氟-N-(2-((6-氧代-5-(三氟甲基)-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基))丙氧基)-2-(1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-亚基)乙酰胺(290毫克，无色油状)，收率：66.9％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝670.4。
步骤C：(S)-2-氟-N-(2-((6-氧代-5-(三氟甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧 基)-2-(1-(5-(三氟甲基))嘧啶-2-基)哌啶-4-亚基)乙酰胺的制备
将(S)-2-氟-N-(2-((6-氧代-5-(三氟甲基)-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基))丙氧基)-2-(1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-亚基)乙酰胺(290毫克，0.434毫摩尔，1.0eq.)溶于二氯甲烷(3毫升)，加入三氟乙酸(0.3毫升)。反应液于25℃反应20分钟。向反应液中加入饱和碳酸氢钠水溶液(5毫升)中和，二氯甲烷(3x10毫升)萃取。合并有机相，无水硫酸钠干燥并浓缩。将粗品重新溶于甲醇(3毫升)，加入碳酸钾(230毫克，1.67毫摩尔，3.0eq.)。反应液于25℃继续反应1小时。反应液过滤，滤液通过硅胶柱柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝1/100；V/V)分离纯化得到化合物21，(S)-2-氟-N-(2-((6-氧代-5-(三氟甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)-2-(1-(5-(三氟甲基))嘧啶-2-基)哌啶-4-亚基)乙酰胺(5.7毫克，白色粉末)，收率：4.1％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝540.2。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.49(s,1H),11.86(s,1H),8.72(s,2H),7.92(s,1H),6.64–6.51(m,1H),4.32–4.18(m,1H),4.05–3.93(m,1H),3.94–3.84(m,5H),2.91(s,2H),2.46(s,2H),1.21(d,J＝6.6Hz,3H)。
实施例22：化合物22的合成
2-氟-N-((S)-2-((6-羰基-5-(三氟甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)-2- (1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)-1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)乙酰胺
步骤A：2-氟-2-(1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)-1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)乙酸乙 酯的制备
将2-氟-2-(1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-亚基)乙酸乙酯(930毫克，2.8毫摩尔，1eq.)溶于四氢呋喃(15毫升)，然后加入DBU(2.1克，13.9毫摩尔，5.0eq.)。反应液于70℃反应3小时。反应液冷却至室温并浓缩得到粗品。粗品用硅胶柱柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝95/5；V/V)分离纯化得到2-氟-2-(1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)-1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)乙酸乙酯(210毫克，无色油状)，收率：22.8％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝334.2。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.73(s,2H),6.14(s,1H),5.58(d,J＝47.3Hz,1H),4.45–4.33(m,1H),4.33–4.23(m,1H),4.20(q,J＝7.1Hz,2H),4.12–4.03(m,1H),3.91–3.82(m,1H),2.29–2.17(m,1H),2.16–2.03(m,1H),1.19(t,J＝7.1Hz,3H)。
步骤B：2-氟-2-(1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)-1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)乙酸的 制备
将2-氟-2-(1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)-1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)乙酸乙酯(210毫克，0.64毫摩尔，1.0eq.)溶于四氢呋喃(3毫升)，然后加入水(3毫升)和氢氧化锂(46毫克，1.9毫摩尔，3.0eq.)。反应液于40℃反应1小时。向反应液加入水(30毫升)，用乙酸乙酯萃取(3x25毫升)，水相用稀盐酸调节pH＝6，乙酸乙酯萃取(3x25毫升)，将有机相合并后用无水硫酸钠干燥并浓缩有机相得到2-氟-2-(1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)-1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)乙酸(210毫克，白色固体)，收率：100％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝306.2。
步骤C：2-氟-N-((S)-2-((6-羰基-5-(三氟甲基)-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧 基)甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)-2-(1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)-1,2,3,6- 四氢吡啶-4-基)乙酰胺的制备
将2-氟-2-(1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)-1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)乙酸(170毫克,0.56毫摩尔,1.1eq.)溶于N,N-二甲基甲酰胺(5毫升)，依次加入N,N-二异丙基乙胺(145毫克,1.12毫摩尔,2.0eq.)，2-(7-氮杂苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(320毫克，0.84毫摩尔，1.5eq.)，然后将(S)-5-((1-(氨基氧基)丙烷-2-基)氨基)-4-(三氟甲基)-2-((2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)哒嗪-3(2H)-酮(230毫克，0.59毫摩尔，1.0eq.)加至反应液中。反应液于40℃反应1小时。向反应液中加水(35毫升)淬灭反应，乙酸乙酯(3x30毫升)萃取。合并有机相，饱和盐水(10毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩有机相。得到的粗产物用硅胶柱柱层析(二氯甲烷/甲醇＝98/2；V/V)分离纯化得到2-氟-N-((S)-2-((6-羰基-5-(三氟甲基)-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)-2-(1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)-1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)乙酰胺(450毫克,无色油状)，收率：100％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝670.4。
步骤D：2-氟-N-((S)-2-((6-羰基-5-(三氟甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧 基)-2-(1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)-1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)乙酰胺的制备
将2-氟-N-((S)-2-((6-羰基-5-(三氟甲基)-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)-2-(1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)-1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)乙酰胺(450毫克，0.672毫摩尔，1.0eq.)溶于二氯甲烷(5毫升)，加入三氟乙酸(1毫升)。反应液于25℃反应20分钟。向反应液中加入饱和碳酸氢钠水溶液(5毫升)中和，二氯甲烷(3x10毫升)萃取。合并有机相，无水硫酸钠干燥并浓缩有机相。将粗品重新溶于甲醇(3毫升)，加入碳酸钾(230毫克，1.67毫摩尔，3.0eq.)。反应液于25℃继续反应1小时。将反应液过滤，滤液通过pre-HPLC分离纯化得到化合物22，2-氟-N-((S)-2-((6-羰基-5-(三氟甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)-2-(1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)-1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)乙酰胺(1.5毫克,白色粉末)，收率：0.4％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝540.2。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ10.37(s,1H),9.25(s,1H),8.44(s,2H),7.62(s,1H),6.01(s,1H),5.92–5.79(m,1H),5.22(d,J＝46.9Hz,1H),4.46–4.19(m,2H),4.14–3.81(m,5H),2.35–2.21(m,1H),2.21–2.10(m,1H),1.31(d,J＝6.4Hz,3H)。
实施例23：化合物23的合成
(E)-2-(3-氟-1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-亚基)-N-((S)-2-((6-氧代- 5-(三氟甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)乙酰胺
23.1)中间体M的合成
步骤A：(E)-3-氟-4-(2-甲氧基-2-氧亚乙基)哌啶-1-羧酸叔丁基酯及(Z)-3-氟- 4-(2-甲氧基-2-氧亚乙基)哌啶-1-羧酸叔丁基酯(中间体M)的制备
氮气保护下，将磷酸乙酸三甲酯(3.35克，18.41毫摩尔，1.0eq.)溶于四氢呋喃(45毫升)，于冰浴下冷却至0℃，分批加入氢化钠(60％，0.77克，19.33毫摩尔，1.05eq.)。反应液于0℃反应0.5小时。向反应液中滴加3-氟-4-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯(4.00克，18.41毫摩尔，1.0eq.)的四氢呋喃(45毫升)溶液。反应液于25℃继续反应2.5小时。用冷饱和氯化铵(100毫升)淬灭反应液，乙酸乙酯(2x100毫升)萃取。合并有机相，饱和氯化铵(100毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩有机相。得到粗产物用硅胶柱柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝10/1；V/V)分离纯化得到(E)-3-氟-4-(2-甲氧基-2-氧亚乙基)哌啶-1-羧酸叔丁基酯(940毫克，淡黄色油状物)，收率：18.7％；和中间体M,(Z)-3-氟-4-(2-甲氧基-2-氧亚乙基)哌啶-1-羧酸叔丁基酯(1.30克，淡黄色油状物)，收率：25.8％。
(E)-3-氟-4-(2-甲氧基-2-氧亚乙基)哌啶-1-羧酸叔丁基酯：
LCMS:(ESI)[M+H-100]+＝174.2。
1H NMR:(400MHz,CDCl3)δ5.99(s,1H),4.95–4.72(m,1H),4.21–3.89(m,1H),3.78–3.67(m,4H),3.54–3.13(m,3H),2.66–2.45(m,1H),1.48(s,9H)。
(Z)-3-氟-4-(2-甲氧基-2-氧亚乙基)哌啶-1-羧酸叔丁基酯：
LCMS:(ESI)[M+H-100]+＝174.2。
1H NMR：(400MHz,CDCl3)δ6.40(d,J＝48.0Hz,1H),5.83(s,1H),4.72–4.16(m,2H),3.73(s,3H),3.07–2.86(m,1H),2.85–2.68(m,2H),2.17–2.07(m,1H),1.48(s,9H)。
23.2)化合物23的合成
步骤A：(E)-2-(3-氟哌啶-4-亚基)乙酸甲酯盐酸盐的制备
将(E)-3-氟-4-(2-甲氧基-2-氧亚乙基)哌啶-1-羧酸叔丁基酯(250毫克，0.92毫摩尔，1.0eq.)溶于二氯甲烷(5毫升)，加入盐酸二氧六环溶液(4M，3毫升)。反应液于25℃反应1小时。反应液浓缩得到粗品(E)-2-(3-氟哌啶-4-亚基)乙酸甲酯盐酸盐(200毫克，白色固体)。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝174.0。
步骤B：(E)-2-(3-氟-1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-亚基)乙酸甲酯的制备
/>
将(E)-2-(3-氟哌啶-4-亚基)乙酸甲酯盐酸盐(170毫克，0.813毫摩尔，1.2eq.)溶于N-甲基吡咯烷酮(2毫升)，依次加入N,N-二异丙基乙胺(263.2毫克，2.04毫摩尔，3.0eq.)以及2-氯-5-(三氟甲基)嘧啶(124毫克，0.68毫摩尔，1.0eq.)。反应液于80℃反应2小时。反应液降至室温并加入饱和氯化铵(60毫升)稀释，乙酸乙酯(2x40毫升)萃取。合并有机相，饱和氯化铵(2x60毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩有机相。得到粗产物用硅胶柱柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝6/1；V/V)分离纯化得到(E)-2-(3-氟-1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-亚基)乙酸甲酯(207毫克，白色固体)，收率95.6％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝319.9。
1H NMR:(400MHz,CDCl3)δ8.53(s,2H),6.06(s,1H),4.99–4.87(m,1H),4.54–4.47(m,1H),4.28–4.19(m,1H),3.95–3.88(m,1H),3.76(s,3H),3.75–3.71(m,1H),3.52–3.45(m,1H),2.77–2.68(m,1H)。
步骤C：(E)-2-(3-氟-1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-亚基)乙酸的制备
将(E)-2-(3-氟-1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-亚基)乙酸甲酯(100毫克，0.31毫摩尔，1.0eq.)溶于四氢呋喃(3毫升)与水(1.5毫升)的混合溶剂，加入氢氧化锂(53毫克，1.25毫摩尔，4.0eq.)。反应液于50℃反应2小时。反应液降至室温并加水(20毫升)稀释，用稀盐酸调节至pH＝6，乙酸乙酯(2x50毫升)萃取。合并有机相，饱和盐水(100毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩有机相得到(E)-2-(3-氟-1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-亚基)乙酸(93毫克,白色固体)，收率：97.3％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝306.2。
步骤D：(E)-2-(3-氟-1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-亚基)-N-((S)-2-((6- 氧代-5-(三氟甲基)-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基) 丙氧基)乙酰胺的制备
将(E)-2-(3-氟-1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-亚基)乙酸(90毫克，0.30毫摩尔，1.0eq.)溶于N,N-二甲基甲酰胺(3毫升)，依次加入(S)-5-((1-(氨基氧基)丙-2-基)氨基)-4-(三氟甲基)-2-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)哒嗪-3(2H)-酮(124毫克，0.32毫摩尔，1.1eq.)，N,N-二异丙基乙胺(0.15毫升，0.89毫摩尔，3.0eq.)以及2-(7-氮杂苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(135毫克，0.35毫摩尔，1.2eq.)。反应液于25℃反应1小时。反应液加水(100毫升)淬灭，乙酸乙酯(2x100毫升)萃取。合并有机相，饱和盐水(2x100毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩有机相。得到粗产物用硅胶柱柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝3/2；V/V)分离纯化得到(E)-2-(3-氟-1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-亚基)-N-((S)-2-((6-氧代-5-(三氟甲基)-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)乙酰胺(90毫克，黄色固体)，收率：46.6％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝669.9。
步骤E：(E)-2-(3-氟-1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-亚基)-N-((S)-2-((6- 氧代-5-(三氟甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)乙酰胺的制备
将(E)-2-(3-氟-1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-亚基)-N-((S)-2-((6-氧代-5-(三氟甲基)-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)乙酰胺(80毫克，0.12毫摩尔，1.0eq.)溶于二氯甲烷(3毫升)，加入三氟乙酸(1毫升)。反应液于25℃反应1小时。反应液中加入饱和碳酸氢钠(50毫升)中和三氟乙酸，二氯甲烷(3x80毫升)萃取。合并有机相，无水硫酸钠干燥并浓缩有机相。得到粗产物溶解于甲醇(2毫升)，加入碳酸钾(76毫克，0.55毫摩尔)。反应液于25℃继续反应1小时。反应液过滤，滤液通过prep-HPLC纯化得到化合物23，(E)-2-(3-氟-1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-亚基)-N-((S)-2-((6-氧代-5-(三氟甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)乙酰胺(8.66毫克，白色固体)，收率：13.4％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝540.2。
1H NMR:(400MHz,DMSO-d6)δ12.49(s,1H),11.45(s,1H),8.76(d,J＝0.4Hz,2H),7.93(s,1H),6.65–6.59(m,1H),5.84(s,1H),5.21–5.05(m,1H),4.33–4.17(m,2H),4.05–4.16(m,1H),3.93–4.03(m,2H),3.80–3.92(m,2H),3.09–3.12(m,1H),2.94–3.97(m,1H),1.20(d,J＝6.8Hz,3H)。
实施例24：化合物24的合成(Z)-2-(3-氟-1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-亚 基)-N-((S)-2-((6-氧代-5-(三氟甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)乙酰胺
步骤A：(Z)-2-(3-氟哌啶-4-亚基)乙酸甲酯盐酸盐的制备
将(Z)-3-氟-4-(2-甲氧基-2-氧代亚乙基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(400毫克，1.46毫摩尔，1.0eq.)溶于二氯甲烷(4毫升)，加入盐酸二氧六环溶液(4M，2毫升)。反应液于25℃反应1小时。反应液浓缩得到(Z)-2-(3-氟哌啶-4-亚基)乙酸甲酯盐酸盐(310毫克，白色固体)，收率：100％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝174.2。
步骤B：(Z)-2-(3-氟-1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-亚基)乙酸甲酯的制备
将(Z)-2-(3-氟哌啶-4-亚基)乙酸甲酯盐酸盐(310毫克，1.48毫摩尔，1.1eq.)溶于N-甲基吡咯烷酮(5毫升)，加入N,N-二异丙基乙胺(520毫克，4.03毫摩尔，3.0eq.)以及2-氯-5-三氟甲基嘧啶(245毫克，1.34毫摩尔，1.0eq.)。反应液于60℃反应2小时。反应液降至室温并加水(50毫升)稀释，乙酸乙酯(2x50毫升)萃取。合并有机相，饱和盐水(2x50毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩。得到的粗产物用硅胶柱柱层析(乙酸乙酯/石油醚＝1/5；V/V)分离纯化得到(Z)-2-(3-氟-1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-亚基)乙酸甲酯(360毫克，黄色固体)，收率：84.0％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝320.0。
1H NMR:(400MHz,CDCl3)δ8.51(s,2H),6.57(dd,J＝47.6,2.8Hz,1H),5.91(s,1H),5.47–5.36(m,1H),5.13–5.05(m,1H),3.76(s,3H),3.21–2.98(m,2H),2.91–2.81(m,1H),2.28(dt,J＝13.6,2.4Hz,1H)。
步骤C：(Z)-2-(3-氟-1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-亚基)乙酸的制备
将(Z)-2-(3-氟-1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-亚基)乙酸甲酯(200毫克，0.63毫摩尔，1.0eq.)溶于四氢呋喃(4毫升)与水(2毫升)的混合溶剂，加入氢氧化锂(79毫克，1.88毫摩尔，3.0eq.)。反应液于60℃反应2小时。反应液降至室温并加水(20毫升)稀释，用稀盐酸调节至pH＝5，乙酸乙酯(3x40毫升)萃取。合并有机相，无水硫酸钠干燥并浓缩得到(Z)-2-(3-氟-1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-亚基)乙酸(190毫克，黄色固体)，收率：99.4％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝306.0。
步骤D：(Z)-2-(3-氟-1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-亚基)-N-((S)-2-((6- 氧代-5-(三氟甲基)-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基) 丙氧基)乙酰胺的制备
将(Z)-2-(3-氟-1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-亚基)乙酸(182毫克，0.60毫摩尔，1.2eq.)溶于N,N-二甲基甲酰胺(5毫升)，依次加入N,N-二异丙基乙胺(193毫克，1.49毫摩尔，3.0eq.)，2-(7-氮杂苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(283毫克，0.75毫摩尔，1.5eq.)以及(S)-5-((1-(氨基氧基)丙-2-基)氨基)-4-(三氟甲基)-2-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)哒嗪-3(2H)-酮(190毫克，0.50毫摩尔，1.0eq.)。反应液于25℃反应2小时。反应液加水(30毫升)淬灭，乙酸乙酯(2x50毫升)萃取。合并有机相，饱和盐水(2x40毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩。得到的粗产物用硅胶柱柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝4/6；V/V)分离纯化得到(Z)-2-(3-氟-1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-亚基)-N-((S)-2-((6-氧代-5-(三氟甲基)-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)乙酰胺(120毫克，淡黄色油状物)，收率：36.1％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝669.9。
步骤E：(Z)-2-(3-氟-1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-亚基)-N-((S)-2-((6- 氧代-5-(三氟甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)乙酰胺的制备
将(Z)-2-(3-氟-1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-亚基)-N-((S)-2-((6-氧代-5-(三氟甲基)-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)乙酰胺(100毫克，0.15毫摩尔，1.0eq.)溶于二氯甲烷(3毫升)，加入三氟乙酸(1毫升)。反应液于25℃反应0.5小时。反应液浓缩，得到的粗产物溶解于甲醇(2毫升)，加入碳酸钾(40毫克，0.29毫摩尔)。反应液于25℃继续反应0.5小时。反应液过滤，滤液通过prep-HPLC纯化得到化合物24，(Z)-2-(3-氟-1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-亚基)-N-((S)-2-((6-氧代-5-(三氟甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)乙酰胺(3.47毫克，白色固体)，收率：4.31％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝540.0。
1H NMR:(400MHz,DMSO-d6)δ12.49(s,1H),11.52(s,1H),8.76–8.70(m,2H),7.93(s,1H),6.72–6.52(m,2H),5.78(s,1H),5.27–5.15(m,1H),4.95–4.84(m,1H),4.31–4.21(m,1H),4.01–3.95(m,1H),3.93–3.86(m,1H),3.32–3.17(m,1H),3.13–3.02(m,1H),2.64–2.57(m,1H),2.35–2.30(m,1H),1.20(d,J＝6.4Hz,3H)。
实施例25：化合物25的合成
(S)-N-(2-((6-氧代-5-(三氟甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)-2-(1- (5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)-1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)乙酰胺
25.1)中间体X的合成
步骤A：2-(1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)-1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)乙酸甲酯的制 备
将2-(1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-亚基)乙酸甲酯(10.00克，33.19毫摩尔，1.0eq.)溶于四氢呋喃(100毫升)，加入1,8-二氮杂环[5,4,0]十一烯-7(40.43克，265.54毫摩尔，8.0eq.)。反应液于70℃反应18小时。反应液降至室温并加水(300毫升)稀释，乙酸乙酯(3x200毫升)萃取。合并有机相，无水硫酸钠干燥并浓缩。得到的粗产物通过柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝10/1；V/V)分离纯化得到2-(1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)-1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)乙酸甲酯(7.45克，无色油状物)，收率：74.5％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝302.2。
1H NMR:(400MHz,DMSO-d6)δ8.73–8.68(m,2H),5.70–5.65(m,1H),4.26–4.21(m,2H),3.95(t,J＝5.6Hz,2H),3.60(s,3H),3.12(s,2H),2.22–2.13(m,2H)。
步骤B：2-(1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)-1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)乙酸的制备
将2-(1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)-1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)乙酸甲酯(6.93克，23.00毫摩尔，1.0eq.)溶于四氢呋喃(34毫升)与水(17毫升)混合溶剂，加入氢氧化钠(2.76克，69.00毫摩尔，3.0eq.)。反应液于50℃反应2小时。反应液降至室温并用稀盐酸调节至pH＝6，乙酸乙酯(2x100毫升)萃取。合并有机相，饱和盐水(300毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩得到中间体X，2-(1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)-1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)乙酸(6.18克，黄色固体)，收率：93.5％。LCMS:(ESI)[M+H]+＝288.0。
1H NMR:(400MHz,CDCl3)δ8.43(s,2H),5.67–5.60(m,1H),4.26–4.18(m,2H),3.96(t,J＝5.6Hz,2H),3.05(s,2H),2.27–2.16(m,2H)。
25.2)化合物25的合成
步骤A：(S)-N-(2-((6-氧代-5-(三氟甲基)-1-((2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)- 1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)-2-(1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)-1,2,3,6-四氢吡啶- 4-基)乙酰胺的制备
将2-(1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)-1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)乙酸(6.10克，21.23毫摩尔，1.1eq.)与(S)-5-((1-(氨基氧基)丙-2-基)氨基)-4-(三氟甲基)-2-((2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)哒嗪-3(2H)酮(7.38克，19.30毫摩尔，1.0eq.)溶于N,N-二甲基甲酰胺(200毫升)，依次加入N,N-二异丙基乙胺(7.48克，57.90毫摩尔，3.0eq.)，2-(7-氮杂苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(8.81克，23.16毫摩尔，1.2eq.)。反应液于25℃反应1小时。反应液加水(600毫升)淬灭，乙酸乙酯(3x500毫升)萃取。合并有机相，饱和盐水(2x1000毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩。得到的粗产物通过柱层析(乙酸乙酯/石油醚＝2/1；V/V)分离纯化得到(S)-N-(2-((6-氧代-5-(三氟甲基)-1-((2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)-2-(1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)-1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)乙酰胺(10.69克，黄色油状物)，收率：84.9％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝652.2。
步骤B：(S)-N-(2-((6-氧代-5-(三氟甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)- 2-(1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)-1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)乙酰胺的制备
将(S)-N-(2-((6-氧代-5-(三氟甲基)-1-((2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)-2-(1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)-1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)乙酰胺(5.74克，8.81毫摩尔，1.0eq.)溶于二氯甲烷(60毫升)，加入三氟乙酸(20毫升)。反应液于25℃反应0.5小时。反应液浓缩，得到的粗产物溶于甲醇(100毫升)与水(100毫升)混合溶剂，加入碳酸钾(4.87克，35.24毫摩尔，4.0eq.)，乙二胺(3.92克，65.19毫摩尔，7.4eq.)。反应液于25℃继续反应1小时。反应液加水(300毫升)稀释，二氯甲烷(3x200毫升)萃取。合并有机相，饱和盐水(300毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩。得到的粗产物通过prep-HPLC纯化得到化合物25，(S)-N-(2-((6-氧代-5-(三氟甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)-2-(1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)-1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)乙酰胺(1.54克，白色固体)，收率：33.6％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝522.2。
1H NMR:(400MHz,DMSO-d6)δ12.49(s,1H),11.23(s,1H),8.70(s,2H),7.90(s,1H),6.65–6.48(m,1H),5.63(s,1H),4.28–4.15(m,3H),3.97–3.88(m,3H),3.86–3.79(m,1H),2.76(s,2H),2.19–2.10(m,2H),1.18(d,J＝6.8Hz,3H)。
实施例26：化合物26的合成
(S)-2-(1-(5-(2-氟苯基)嘧啶-2-基)-1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)-N-(2-((6-羰 基-5-(三氟甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)乙酰胺
步骤A：2-[1-(5-碘嘧啶-2-基)哌啶-4-亚基]乙酸甲酯的制备
将2-(哌啶-4-亚基)乙酸甲酯盐酸盐(7.51克，39.18毫摩尔，1.0eq.)溶于二氯甲烷(80毫升)，加入三乙胺(11.90克，117.55毫摩尔,3.0eq.)及2-氯-5-碘嘧啶(9.61克，39.97毫摩尔，1.02eq.)。反应液于25℃反应18小时。反应液加水(100毫升)淬灭，乙酸乙酯萃取。合并有机相，饱和氯化铵溶液(2x150毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩。残留物用硅胶柱(乙酸乙酯/石油醚＝5/1；V/V)分离纯化得到2-[1-(5-碘嘧啶-2-基)哌啶-4-亚基]乙酸甲酯(8.20克,白色固体)，收率：58.3％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝360.0。
1H NMR:(400MHz,CDCl3)δ8.40(s,2H),5.78–5.75(m,1H),3.91–3.83(m,4H),3.71(s,3H),3.06–2.96(m,2H),2.41–2.32(m,2H)。
步骤B：2-(1-(5-碘嘧啶-2-基)-1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)乙酸甲酯的制备
将2-(1-(5-碘嘧啶-2-基)哌啶-4-亚基)乙酸甲酯(2.5克，6.94毫摩尔，1.0eq.)溶于四氢呋喃(30毫升)，然后加1,8-二氮杂双环(5,4,0)十一-7-烯(5.3克，34.72毫摩尔，5.0eq.)。反应液于70℃反应3小时。反应液浓缩，粗品用硅胶柱柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝8/1；V/V)分离纯化得到2-(1-(5-碘嘧啶-2-基)-1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)乙酸甲酯(1.7克,白色固体)，收率：68％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝360.0。
1HNMR:N001-08173-1(400MHz,DMSO)δ8.51(s,2H),5.71–5.60(m,1H),4.14–4.05(m,2H),3.81(t,J＝5.8Hz,2H),3.60(s,3H),3.10(s,2H),2.10–2.14(m,2H)。
步骤C：2-(1-(5-(2-氟苯基)嘧啶-2-基)-1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)乙酸甲酯的制 备
将2-(1-(5-碘嘧啶-2-基)-1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)乙酸甲酯(700毫克，1.949毫摩尔,1.0eq)溶于1,4-二氧六环(6毫升)，然后加(2-氟苯基)硼酸(542毫克，3.899毫摩尔,2.0eq)，碳酸钠(515毫克，4.861毫摩尔，2.5eq)和水(1毫升)，在氮气保护下加入[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(114毫克，0.155毫摩尔，0.08eq)。反应液于90℃反应3小时。反应液浓缩，得到的粗产物用硅胶柱柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝10/1；V/V)分离纯化得到2-(1-(5-(2-氟苯基)嘧啶-2-基)-1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)乙酸甲酯(600毫克，白色固体)，收率：94％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝327.9。
1H NMR:(400MHz,DMSO)δ8.59(d,J＝1.5Hz,2H),7.57(td,J＝7.8,1.5Hz,1H),7.45–7.36(m,1H),7.30–7.28(m,2H),5.69(s,1H),4.21(s,2H),3.93(t,J＝5.8Hz,2H),3.61(s,3H),3.12(s,2H),2.19–2.17(m,2H)。
步骤D：2-(1-(5-(2-氟苯基)嘧啶-2-基)-1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)乙酸的制备
将2-(1-(5-(2-氟苯基)嘧啶-2-基)-1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)乙酸甲酯(600毫克，1.834毫摩尔，1.0eq.)溶于四氢呋喃(6毫升)，然后加入水(4毫升)和氢氧化锂(45毫克，3.669毫摩尔，2.0eq.)。反应液于室温反应1小时。向反应液加入水(5毫升)，用乙酸乙酯萃取(3x10毫升)，水相用稀盐酸调pH＝6，乙酸乙酯萃取(3x15毫升)，将有机相合并后用无水硫酸钠干燥,并浓缩有机相得到2-(1-(5-(2-氟苯基)嘧啶-2-基)-1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)乙酸(500毫克，白色固体)，收率：87％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝314.2。
1HNMR:(400MHz,DMSO)δ12.24(s,1H),8.59(d,J＝1.5Hz,2H),7.57(td,J＝7.8,1.5Hz,1H),7.44–7.37(m,1H),7.35–7.26(m,2H),5.67(s,1H),4.21(s,2H),3.93(t,J＝5.7Hz,2H),3.02(s,2H),2.19(s,2H)。
步骤E：(S)-2-(1-(5-(2-氟苯基)嘧啶-2-基)-1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)-N-(2- ((6-羰基-5-(三氟甲基)-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨 基)丙氧基)乙酰胺的制备
将2-(1-(5-(2-氟苯基)嘧啶-2-基)-1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)乙酸(300毫克，0.958毫摩尔，1.0eq.)溶于四氢呋喃(5毫升)，依次加入N,N-二异丙基乙胺(371毫克，2.875毫摩尔，3.0eq.)，2-(7-氮杂苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(437毫克，1.150毫摩尔，1.2eq.)，然后将(S)-5-((1-(氨基氧基)丙烷-2-基)氨基)-4-(三氟甲基)-2-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)哒嗪-3(2H)-酮(402毫克，1.054毫摩尔，1.1eq.)加至反应液中。反应液于25℃反应2小时。向反应液中加水(10毫升)淬灭反应，乙酸乙酯(3x10毫升)萃取。合并有机相，饱和盐水(10毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩。得到的粗产物用硅胶柱柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝1/3；V/V)分离纯化得到(S)-2-(1-(5-(2-氟苯基)嘧啶-2-基)-1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)-N-(2-((6-羰基-5-(三氟甲基)-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)乙酰胺(500毫克，白色固体)，收率：77％。LCMS:(ESI)[M+H]+＝678.2。
步骤F：(S)-2-(1-(5-(2-氟苯基)嘧啶-2-基)-1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)-N-(2- ((6-羰基-5-(三氟甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)乙酰胺的制备
将(S)-2-(1-(5-(2-氟苯基)嘧啶-2-基)-1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)-N-(2-((6-羰基-5-(三氟甲基)-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)乙酰胺(350毫克，0.516毫摩尔，1.0eq.)溶于二氯甲烷(3毫升)，加入三氟乙酸(0.5毫升)。反应液于25℃反应30分钟。向反应液中加入饱和碳酸氢钠水溶液(30毫升)中和，二氯甲烷(3x10毫升)萃取。合并有机相，无水硫酸钠干燥并浓缩。将粗品重新溶于甲醇(2毫升)，加入碳酸钾(178毫克，1.292毫摩尔，2.5eq.)。反应液于25℃继续反应1小时。将反应液过滤，滤液通过prep-HPLC纯化得到化合物26，(S)-2-(1-(5-(2-氟苯基)嘧啶-2-基)-1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)-N-(2-((6-羰基-5-(三氟甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)乙酰胺(122毫克，白色粉末)，收率：43％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝548.2。
1H NMR:(400MHz,DMSO-d6)δ12.51(s,1H),11.26(s,1H),8.61(d,J＝1.4Hz,2H),7.92(s,1H),7.59(dd,J＝8.8,7.0Hz,1H),7.42(dt,J＝7.2,3.7Hz,1H),7.33(dd,J＝15.8,8.1Hz,2H),6.60(s,1H),5.67(s,1H),4.23(s,3H),3.94–3.91(m,3H),3.88–3.84(m,1H),2.78(s,2H),2.16(s,2H),1.21(d,J＝6.5Hz,3H)。
实施例27：化合物27的合成
2-(1-(5-(2-氟苯基)嘧啶-2-基)-3-甲基-1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)-N-((S)-2- ((6-氧代-5-(三氟甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)乙酰胺
27.1)中间体P的合成
步骤A：(E)-4-(2-甲氧基-2-氧代亚乙基)-3-甲基哌啶-1-羧酸叔丁酯的制备
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将2-(二甲氧基磷酰基)乙酸甲酯(95毫克，0.517毫摩尔，1.1eq.)溶于四氢呋喃(2毫升)，然后在0℃下加入氢化钠(21毫克，0.517毫摩尔，1.1eq.)。反应液在0℃反应20分钟，然后在0℃下加入3-甲基-4-氧代哌啶-1-羧酸叔丁酯(100毫克，0.47毫摩尔，1.0eq.)，反应液于室温反应40分钟。反应液加入水(15毫升)淬灭，用乙酸乙酯萃取(3x20毫升)，将有机相合并后用无水硫酸钠干燥并浓缩有机相。得到的粗品用硅胶柱柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝4/1；V/V)分离纯化得到(E)-4-(2-甲氧基-2-氧代亚乙基)-3-甲基哌啶-1-羧酸叔丁酯(120毫克，无色油状物)，收率：95.2％。
LCMS:(ESI)[M+H-100]+＝170.2。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ5.70(d,J＝1.6Hz,1H),3.90–3.76(m,1H),3.62(s,3H),3.58–3.40(m,2H),3.18–2.79(m,3H),2.46–2.36(m,1H),1.41(s,9H),1.02(d,J＝6.8Hz,3H)。
步骤B：(E)-2-(3-甲基哌啶-4-亚基)乙酸甲酯盐酸盐的制备
将(E)-4-(2-甲氧基-2-氧代亚乙基)-3-甲基哌啶-1-羧酸叔丁酯(3.8克，14.13毫摩尔，1.0eq.)溶于甲醇(30毫升)，然后加入盐酸二氧六环(4M,15毫升)。反应液于25℃反应3小时。反应液浓缩得到(E)-2-(3-甲基哌啶-4-亚基)乙酸甲酯盐酸盐(3.18克，无色油状物)，收率：100％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝170.2。
步骤C：(E)-2-(1-(5-溴嘧啶-2-基)-3-甲基哌啶-4-亚基)乙酸甲酯的制备
将(E)-2-(3-甲基哌啶-4-亚基)乙酸甲酯盐酸盐(2.7克，15.98毫摩尔，1eq.)溶于N-甲基吡咯烷酮(30毫升)，然后加入N,N-二异丙基乙胺(6.1克，47.94毫摩尔，3.0eq.)和5-溴-2-氯嘧啶(3克，15.98毫摩尔，1eq.)。反应液于80℃反应1小时。反应液冷却至室温，加入水(25毫升)，用乙酸乙酯萃取(2x20毫升)，将有机相合并后用无水硫酸钠干燥并浓缩有机相。得到的粗品用硅胶柱柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝96/4；V/V)分离纯化得到(E)-2-(1-(5-溴嘧啶-2-基)-3-甲基哌啶-4-亚基)乙酸甲酯(3.5克，淡黄色油状)，收率：68.8％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝326.0。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.49(s,2H),5.74(d,J＝1.4Hz,1H),4.20–4.11(m,1H),4.12–4.02(m,1H),3.65(s,3H),3.60–3.51(m,1H),3.34–3.25(m,3H),2.67–2.59(m,1H),1.06(d,J＝6.8Hz,3H)。
步骤D：2-(1-(5-溴嘧啶-2-基)-3-甲基-1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)乙酸甲酯(中间 体P)的制备
将(E)-2-(1-(5-溴嘧啶-2-基)-3-甲基哌啶-4-亚基)乙酸甲酯(1.78克，5.48毫摩尔，1eq.)溶于四氢呋喃(18毫升)，然后加入DBU(4.2克，27.3毫摩尔，5.0eq.)。反应液于70℃反应3小时。反应液冷却至室温并浓缩得到粗品。粗品用硅胶柱柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝96/4；V/V)分离纯化得到中间体P，2-(1-(5-溴嘧啶-2-基)-3-甲基-1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)乙酸甲酯(1克，无色油状)，收率：56.8％。LCMS:(ESI)[M+H]+＝326.0。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.46(d,J＝1.3Hz,2H),5.69–5.51(m,1H),4.35–4.12(m,1H),4.04–3.96(m,1H),3.96–3.87(m,1H),3.62(s,3H),3.61–3.56(m,1H),3.20–3.09(m,2H),2.45–2.31(m,1H),0.96(d,J＝7.0Hz,3H)。
27.2)化合物27的合成
步骤A：2-(1-(5-(2-氟苯基)嘧啶-2-基)-3-甲基-1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)乙酸 甲酯的制备
将2-(1-(5-溴嘧啶-2-基)-3-甲基-1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)乙酸甲酯(450毫克，1.39毫摩尔，1eq.)溶于二氧六环和水的混合溶剂(二氧六环/水＝5/1；V/V,8毫升)，然后加入(2-氟苯基)硼酸(388毫克，2.77毫摩尔，2.0eq.)，Pd(dppf)Cl2(102毫克,0.19毫摩尔,0.14eq.)和碳酸钠(294毫克,2.77毫摩尔,2.0eq.)。反应液于90℃反应16小时。反应液冷却至室温，加入水(25毫升)，用乙酸乙酯萃取(2x20毫升)，将有机相合并后用无水硫酸钠干燥并浓缩有机相。得到的粗品用硅胶柱柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝97/3；V/V)分离纯化得到2-(1-(5-(2-氟苯基)嘧啶-2-基)-3-甲基-1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)乙酸甲酯(590毫克，淡黄色油状)，收率：100％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝342.2。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.60(s,2H),7.62–7.54(m,1H),7.47–7.38(m,1H),7.37–7.27(m,2H),5.66(d,J＝3.4Hz,1H),4.42–4.28(m,1H),4.10–3.98(m,2H),3.72–3.65(m,1H),3.64(s,3H),3.22–3.14(m,2H),2.46–2.35(m,1H),1.00(d,J＝6.9Hz,3H)。
步骤B：2-(1-(5-(2-氟苯基)嘧啶-2-基)-3-甲基-1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)乙酸 的制备
将2-(1-(5-(2-氟苯基)嘧啶-2-基)-3-甲基-1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)乙酸甲酯(590克，1.74毫摩尔，1.0eq.)溶于四氢呋喃(4毫升)，然后加入水(2毫升)和氢氧化锂(125毫克，5.2毫摩尔，3.0eq.)。反应液于40℃反应1小时。向反应液加入水(25毫升)，用乙酸乙酯萃取(3x10毫升)，水相用稀盐酸调pH＝6，乙酸乙酯萃取(3x15毫升)，将有机相合并后用无水硫酸钠干燥并浓缩有机相得到2-(1-(5-(2-氟苯基)嘧啶-2-基)-3-甲基-1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)乙酸(470毫克,黄色油状)，收率：84.3％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝328.2。
步骤C：2-(1-(5-(2-氟苯基)嘧啶-2-基)-3-甲基-1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)-N- ((S)-2-((6-氧代-5-(三氟甲基)-1-((2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)-1,6-二氢哒嗪-4- 基)氨基)丙氧基)乙酰胺的制备
将2-(1-(5-(2-氟苯基)嘧啶-2-基)-3-甲基-1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)乙酸(470毫克，1.44毫摩尔，1.0eq.)溶于N,N-二甲基甲酰胺(8毫升)，依次加入N,N-二异丙基乙胺(372毫克，2.88毫摩尔，2.0eq.)，2-(7-氮杂苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(820毫克，2.16毫摩尔，1.5eq.)，然后将(S)-5-((1-(氨基氧基)丙烷-2-基)氨基)-4-(三氟甲基)-2-((2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)哒嗪-3(2H)-酮(570毫克，1.51毫摩尔，1.05eq.)加至反应液中。反应液于25℃反应2小时。向反应液中加水(30毫升)淬灭反应，乙酸乙酯(3x20毫升)萃取。合并有机相，饱和盐水(10毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩有机相。得到的粗产物用硅胶柱柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝3/7；V/V)分离纯化得到2-(1-(5-(2-氟苯基)嘧啶-2-基)-3-甲基-1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)-N-((S)-2-((6-氧代-5-(三氟甲基)-1-((2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)乙酰胺(540毫克，黄色固体)，收率：54.3％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝692.4。
步骤D：2-(1-(5-(2-氟苯基)嘧啶-2-基)-3-甲基-1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)-N- ((S)-2-((6-氧代-5-(三氟甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)乙酰胺的制备
将2-(1-(5-(2-氟苯基)嘧啶-2-基)-3-甲基-1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)-N-((S)-2-((6-氧代-5-(三氟甲基)-1-((2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)乙酰胺(540毫克，0.78毫摩尔,1.0eq.)溶于二氯甲烷(5毫升)，加入三氟乙酸(0.5毫升)。反应液于25℃反应0.5小时。向反应液中加入饱和碳酸氢钠水溶液(5毫升)中和，二氯甲烷(3x10毫升)萃取。合并有机相，无水硫酸钠干燥并浓缩有机相。将粗品重新溶于甲醇(5毫升)，加入碳酸钾(337毫克，2.44毫摩尔，3.0eq.)。反应液于25℃继续反应1小时。反应液过滤，滤液通过pre-HPLC分离纯化得到化合物27，2-(1-(5-(2-氟苯基)嘧啶-2-基)-3-甲基-1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)-N-((S)-2-((6-氧代-5-(三氟甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)乙酰胺(46.9毫克，白色粉末)，收率：10.7％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝562.2。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.48(s,1H),11.25(s,1H),8.58(d,J＝1.4Hz,2H),7.90(s,1H),7.60–7.53(m,1H),7.46–7.35(m,1H),7.35–7.25(m,2H),6.68–6.54(m,1H),5.60(s,1H),4.36(d,J＝18.2Hz,1H),4.20(s,1H),4.08(dd,J＝12.9,4.1Hz,1H),4.03–3.78(m,3H),3.57(dd,J＝12.6,3.9Hz,1H),2.86–2.70(m,2H),2.35(d,J＝17.7Hz,1H),1.19(d,J＝6.5Hz,3H),0.99(d,3H)。
实施例28：化合物28的合成
(S)-2-(1-(5-(5-(2-氟苯基)嘧啶-2-基)-5-甲基-1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)-N- (2-((6-氧代-5-(三氟甲基)-1,6-二氢哒嗪-4基)氨基)丙氧基)乙酰胺
步骤A：(S)-2-(1-(5-(5-(2-氟苯基)嘧啶-2-基)-5-甲基-1,2,3,6-四氢吡啶-4- 基)-N-(2-((6-氧代-5-(三氟甲基)-1,6-二氢哒嗪-4基)氨基)丙氧基)乙酰胺的制备
将2-(1-(5-(2-氟苯基)嘧啶-2-基)-3-甲基-1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)-N-((S)-2-((6-氧代-5-(三氟甲基)-1-((2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)乙酰胺(540毫克，0.78毫摩尔，1.0eq.)溶于二氯甲烷(5毫升)，加入三氟乙酸(0.5毫升)。反应液于25℃反应0.5小时。向反应液中加入饱和碳酸氢钠水溶液(5毫升)中和，二氯甲烷(3x10毫升)萃取。合并有机相，无水硫酸钠干燥并浓缩有机相。将粗品重新溶于甲醇(5毫升)，加入碳酸钾(337毫克，2.44毫摩尔，3.0eq.)。反应液于25℃继续反应1小时。反应液过滤，滤液通过pre-HPLC分离纯化得到化合物28，(S)-2-(1-(5-(5-(2-氟苯基)嘧啶-2-基)-5-甲基-1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)-N-(2-((6-氧代-5-(三氟甲基)-1,6-二氢哒嗪-4基)氨基)丙氧基)乙酰胺(33毫克，白色粉末)收率：15.1％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝562.2。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.49(s,1H),11.19(s,1H),8.58(d,J＝1.5Hz,2H),7.89(s,1H),7.61–7.52(m,1H),7.44–7.36(m,1H),7.35–7.26(m,2H),6.66–6.54(m,1H),4.20(s,1H),4.10(s,2H),3.94–3.78(m,4H),2.82(s,2H),2.15(s,2H),1.71(s,3H),1.19(d,J＝6.5Hz,3H)。
实施例29：化合物29的合成
(S)-2-(1-(5-环丙基嘧啶-2-基)-1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)-N-(2-((6-羰基-5- (三氟甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)乙酰胺
步骤A：2-(1-(5-溴嘧啶-2-基)哌啶-4-亚基)乙酸甲酯的制备
将2-(哌啶-4-亚基)乙酸甲酯(707毫克，4.559毫摩尔，1.1eq.)溶于N-甲基吡咯烷酮(10毫升)，依次加入N,N-二异丙基乙胺(1.6克，12.53毫摩尔，3.0eq.)以及5-溴-2-氯嘧啶(800毫克，4.145毫摩尔，1.0eq.)。反应液在70℃反应2小时。反应液降至室温，加水(10毫升)，乙酸乙酯(3x10毫升)萃取。合并有机相，饱和盐水(10毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩有机相。得到的粗产物用硅胶柱柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝10/1；V/V)分离纯化得到2-(1-(5-溴嘧啶-2-基)哌啶-4-亚基)乙酸甲酯(870毫克，无色油状物)，收率：67％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝312.0。
1H NMR：(400MHz,DMSO)δ8.48(s,2H),5.82(s,1H),3.81(dd,J＝11.6,5.6Hz,4H),3.62(s,3H),2.91(t,J＝5.5Hz,2H),2.63(t,J＝5.5Hz,2H)。
步骤B：2-(1-(5-溴嘧啶-2-基)-1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)乙酸甲酯的制备
将2-(1-(5-溴嘧啶-2-基)哌啶-4-亚基)乙酸甲酯(870毫克，2.797毫摩尔，1.0eq)溶于四氢呋喃(10毫升)，然后加1,8-二氮杂双环(5,4,0)十一-7-烯(2.12克，13.98毫摩尔，5.0eq)。反应液于70℃反应3小时。反应液浓缩，粗品用硅胶柱柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝10/1；V/V)分离纯化得到2-(1-(5-溴嘧啶-2-基)-1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)乙酸甲酯(570毫克，白色固体)，收率：65％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝312.0。
1H NMR：(400MHz,DMSO)δ8.46(s,2H),5.68–5.64(m,1H),4.14–4.07(m,2H),3.83(t,J＝5.8Hz,2H),3.60(s,3H),3.11(s,2H),2.14(d,J＝1.6Hz,2H)。
步骤C：2-(1-(5-环丙基嘧啶-2-基)-1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)乙酸甲酯的制备
将2-(1-(5-溴嘧啶-2-基)-1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)乙酸甲酯(530毫克，1.704毫摩尔，1.0eq.)溶于1,4-二氧六环(6毫升)，然后加环丙基硼酸(293毫克，3.408毫摩尔，2.0eq.)，碳酸钠(542毫克，5.112毫摩尔，3.0eq.)和水(1毫升)，在氮气保护下加[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(124毫克，0.710毫摩尔，0.1eq.)。反应液于90℃反应3小时。反应液浓缩，得到的粗产物用硅胶柱柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝10/1；V/V)分离纯化得到2-(1-(5-环丙基嘧啶-2-基)-1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)乙酸甲酯(260毫克，黄色液体)，收率：55％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝274.2。
步骤D：2-(1-(5-环丙基嘧啶-2-基)-1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)乙酸的制备
将2-(1-(5-环丙基嘧啶-2-基)-1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)乙酸甲酯(260毫克，0.952毫摩尔，1.0eq.)溶于四氢呋喃(3毫升)，然后加入水(3毫升)和氢氧化锂(45毫克，1.904毫摩尔，2.0eq.)。反应液于室温反应1小时。向反应液加入水(5毫升)，用乙酸乙酯萃取(3x10毫升)，水相用稀盐酸调pH＝6，乙酸乙酯萃取(3x15毫升)，将有机相合并后用无水硫酸钠干燥，并浓缩有机相得到2-(1-(5-环丙基嘧啶-2-基)-1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)乙酸(230毫克，白色固体)，收率：93％。LCMS:(ESI)[M+H]+＝260.2。
步骤E：(S)-2-(1-(5-环丙基嘧啶-2-基)-1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)-N-(2-((6-羰 基-5-(三氟甲基)-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙 氧基)乙酰胺的制备
将2-(1-(5-环丙基嘧啶-2-基)-1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)乙酸(240毫克，0.926毫摩尔，1.0eq.)溶于四氢呋喃(2毫升)，依次加入N,N-二异丙基乙胺(358毫克，2.779毫摩尔，3.0eq.)，2-(7-氮杂苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(422毫克，1.111毫摩尔，1.2eq.)，然后将(S)-5-((1-(氨基氧基)丙烷-2-基)氨基)-4-(三氟甲基)-2-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)哒嗪-3(2H)-酮(389毫克，1.019毫摩尔，1.1eq.)加至反应液中。反应液于25℃反应2小时。向反应液中加水(10毫升)淬灭反应，乙酸乙酯(3x10毫升)萃取。合并有机相，饱和盐水(10毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩有机相。得到的粗产物用硅胶柱柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝1/3；V/V)分离纯化得到(S)-2-(1-(5-环丙基嘧啶-2-基)-1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)-N-(2-((6-羰基-5-(三氟甲基)-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)乙酰胺(300毫克，白色固体)，收率：52％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝623.9。
步骤F：(S)-2-(1-(5-环丙基嘧啶-2-基)-1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)-N-(2-((6-羰 基-5-(三氟甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)乙酰胺的制备
将(S)-2-(1-(5-环丙基嘧啶-2-基)-1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)-N-(2-((6-羰基-5-(三氟甲基)-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)乙酰胺(300毫克，0.481毫摩尔，1.0eq.)溶于二氯甲烷(2毫升)，加入三氟乙酸(0.3毫升)。反应液于25℃反应30分钟。向反应液中加入饱和碳酸氢钠水溶液(30毫升)中和，二氯甲烷(3x10毫升)萃取。合并有机相，无水硫酸钠干燥并浓缩有机相。将粗产品重新溶于甲醇(2毫升)，加入碳酸钾(166毫克，1.203毫摩尔，2.5eq.)。反应液于25℃继续反应1小时。将反应液过滤，滤液通过prep-HPLC纯化得到化合物29，(S)-2-(1-(5-环丙基嘧啶-2-基)-1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)-N-(2-((6-羰基-5-(三氟甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)乙酰胺(100毫克，白色粉末)，收率：42％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝493.9。
1H NMR:(400MHz,DMSO-d6)δ12.46(s,1H),11.17(s,1H),8.16(s,2H),7.89(s,1H),6.60(s,1H),5.60(s,1H),4.20–4.18(m,1H),4.08(s,2H),3.93–3.82(m,2H),3.79(t,J＝5.7Hz,2H),2.72(s,2H),2.08(s,2H),1.81–1.67(m,1H),1.18(d,J＝6.6Hz,3H),0.89–0.82(m,2H),0.64–0.58(m,2H)。
实施例30：化合物30的合成
2-(1-(5-环丙基嘧啶-2-基)-3-甲基-1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)-N-((S)-2-((6- 氧代-5-(三氟甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)乙酰胺
步骤A：2-(1-(5-环丙基嘧啶-2-基)-3-甲基-1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)乙酸甲酯 的制备
将2-(1-(5-溴嘧啶-2-基)-3-甲基-1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)乙酸甲酯(450毫克，1.39毫摩尔，1eq.)溶于二氧六环和水的混合溶剂(二氧六环/水＝5/1；V/V，8毫升)，然后加入环丙基硼酸(239毫克，2.77毫摩尔，2.0eq.)，Pd(dppf)Cl2(102毫克，0.19毫摩尔，0.14eq.)和碳酸钠(294毫克，2.77毫摩尔，2.0eq.)。反应液于90℃反应16小时。反应液冷却至室温，加入水(25毫升)，用乙酸乙酯萃取(2x20毫升)，将有机相合并后用无水硫酸钠干燥并浓缩有机相。得到的粗品用硅胶柱柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝9/1；V/V)分离纯化得到2-(1-(5-环丙基嘧啶-2-基)-3-甲基-1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)乙酸甲酯(170毫克，无色油状)，收率：42.8％。LCMS:(ESI)[M+H]+＝288.2。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.18(s,2H),5.63(s,1H),4.27–4.16(m,1H),3.99–3.91(m,1H),3.91–3.85(m,1H),3.62(s,3H),3.61–3.57(m,1H),3.14–3.11(m,2H),2.41–2.29(m,1H),1.81–1.73(m,1H),0.97(d,J＝7.0Hz,3H),0.91–0.84(m,2H),0.67–0.61(m,2H)。
步骤B：2-(1-(5-环丙基嘧啶-2-基)-3-甲基-1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)乙酸的制 备
将2-(1-(5-环丙基嘧啶-2-基)-3-甲基-1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)乙酸甲酯(170克，0.593毫摩尔，1.0eq.)溶于四氢呋喃(4毫升)，然后加入水(2毫升)和氢氧化锂(43毫克，1.78毫摩尔，3.0eq.)。反应液于40℃反应1小时。向反应液加入水(25毫升)，用乙酸乙酯萃取(3x10毫升)，水相用稀盐酸调pH＝6，乙酸乙酯萃取(3x15毫升)，将有机相合并后用无水硫酸钠干燥并浓缩有机相，得到2-(1-(5-环丙基嘧啶-2-基)-3-甲基-1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)乙酸(140毫克,无色油状)，收率：86.9％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝274.2。
步骤C：2-(1-(5-环丙基嘧啶-2-基)-3-甲基-1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)-N-((S)- 2-((6-氧代-5-(三氟甲基)-1-((2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨 基)丙氧基)乙酰胺的制备
将2-(1-(5-环丙基嘧啶-2-基)-3-甲基-1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)乙酸(140毫克，0.52毫摩尔，1.0eq.)溶于N,N-二甲基甲酰胺(5毫升)，依次加入N,N-二异丙基乙胺(135毫克,1.04毫摩尔,2.0eq.)，2-(7-氮杂苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(296毫克，0.78毫摩尔，1.5eq.)，然后将(S)-5-((1-(氨基氧基)丙烷-2-基)氨基)-4-(三氟甲基)-2-((2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)哒嗪-3(2H)-酮(140毫克，0.52毫摩尔，1eq.)加至反应液中。反应液于25℃反应2小时。向反应液中加水(30毫升)淬灭反应，乙酸乙酯(3x20毫升)萃取。合并有机相，饱和盐水(10毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩有机相。得到的粗产物用硅胶柱柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝35/65；V/V)分离纯化得到2-(1-(5-环丙基嘧啶-2-基)-3-甲基-1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)-N-((S)-2-((6-氧代-5-(三氟甲基)-1-((2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)乙酰胺(340毫克，白色固体)，收率：100％。LCMS:(ESI)[M+H]+＝638.4。
步骤D：2-(1-(5-环丙基嘧啶-2-基)-3-甲基-1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)-N-((S)- 2-((6-氧代-5-(三氟甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)乙酰胺的制备
将2-(1-(5-环丙基嘧啶-2-基)-3-甲基-1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)-N-((S)-2-((6-氧代-5-(三氟甲基)-1-((2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)乙酰胺(340毫克，0.54毫摩尔，1.0eq.)溶于二氯甲烷(3毫升)，加入三氟乙酸(0.5毫升)。反应液于25℃反应0.5小时。向反应液中加入饱和碳酸氢钠水溶液(5毫升)中和，二氯甲烷(3x10毫升)萃取。合并有机相，无水硫酸钠干燥并浓缩有机相。将粗品重新溶于甲醇(3毫升)，加入碳酸钾(186毫克，1.35毫摩尔，3.0eq.)。反应液于25℃继续反应1小时。反应液过滤，滤液通过pre-HPLC分离纯化得到化合物30，2-(1-(5-环丙基嘧啶-2-基)-3-甲基-1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)-N-((S)-2-((6-氧代-5-(三氟甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)乙酰胺(15.7毫克，白色粉末)，收率：5.7％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝508.2。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.46(s,1H),11.22(s,1H),8.16(s,2H),7.89(s,1H),6.65–6.53(m,1H),5.57(s,1H),4.20–4.25(m,2H),3.99–3.76(m,4H),3.48(dd,J＝12.7,4.0Hz,1H),2.83–2.68(m,2H),2.30(s,1H),1.81–1.68(m,1H),1.19(d,J＝6.5Hz,3H),0.95(d,J＝6.9Hz,3H),0.91–0.79(m,2H),0.68–0.56(m,2H)。
实施例31：化合物31的合成
(S)-2-(1-(5-环丙基嘧啶-2-基)-5-甲基-1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)-N-(2-((6- 氧代-5-(三氟甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)乙酰胺
步骤A：(S)-2-(1-(5-环丙基嘧啶-2-基)-5-甲基-1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)-N- (2-((6-氧代-5-(三氟甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)乙酰胺的制备
将2-(1-(5-环丙基嘧啶-2-基)-3-甲基-1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)-N-((S)-2-((6-氧代-5-(三氟甲基)-1-((2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)乙酰胺(340毫克，0.54毫摩尔，1.0eq.)溶于二氯甲烷(3毫升)，加入三氟乙酸(0.5毫升)。反应液于25℃反应0.5小时。向反应液中加入饱和碳酸氢钠水溶液(5毫升)中和，二氯甲烷(3x10毫升)萃取。合并有机相，无水硫酸钠干燥并浓缩有机相。将粗品重新溶于甲醇(3毫升)，加入碳酸钾(186毫克，1.35毫摩尔，3.0eq.)。反应液于25℃继续反应1小时。反应液过滤，滤液通过pre-HPLC分离纯化得到化合物31，(S)-2-(1-(5-环丙基嘧啶-2-基)-5-甲基-1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)-N-(2-((6-氧代-5-(三氟甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)乙酰胺(17毫克,白色粉末)，收率：12.6％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝508.2。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.45(s,1H),11.16(s,1H),8.16(s,2H),7.89(s,1H),6.67–6.48(m,1H),4.20–4.16(m,1H),3.97(s,2H),3.92–3.86(m,1H),3.85–3.80(m,1H),3.76(t,J＝5.7Hz,2H),2.79(s,2H),2.08(d,J＝5.5Hz,2H),1.81–1.70(m,1H),1.67(s,3H),1.18(d,J＝6.6Hz,3H),0.89–0.82(m,2H),0.64–0.57(m,2H)。
实施例32：化合物32的合成
(S)-N-(2-{[6-氧代-5-(三氟甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基]氨基}丙氧基)-2-{1- [5-(三氟甲基)吡啶-2-基]哌啶-4-基}乙酰胺
32.1)中间体Q的合成
步骤A：4,5-二溴-2-(4-甲氧基苄基)哒嗪-3(2H)-酮的制备
氮气保护下，将4,5-二溴哒嗪-3(2H)-酮(10.16克，40.00毫摩尔，1.0eq.)溶于N,N-二甲基甲酰胺(100毫升)，于冰浴中降至0℃，分批加入氢化钠(60％，2.40克，60.00毫摩尔，1.5eq.)。反应液于0℃反应0.5小时。向反应液中加入4-甲氧基氯苄(6.26克，40.00毫摩尔，1.0eq.)。反应液于10℃继续反应3小时。将反应液缓慢倒入冷水(500毫升)中淬灭，乙酸乙酯(3x400毫升)萃取。合并有机相，饱和盐水(2x400毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩有机相有机相。得到粗品固体用甲醇(2x20毫升)洗涤。所得固体干燥得到4,5-二溴-2-(4-甲氧基苄基)哒嗪-3(2H)-酮(11.27克，淡棕色固体)，收率：75.3％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝375.0。
1H NMR:(400MHz,DMSO-d6)δ8.18(s,1H),7.28(d,J＝8.4Hz,2H),6.91(d,J＝8.4Hz,2H),5.20(s,2H),3.74(s,3H)。
步骤B：4-溴-5-甲氧基-2-(4-甲氧基苄基)哒嗪-3(2H)-酮的制备
将4,5-二溴-2-(4-甲氧基苄基)哒嗪-3(2H)-酮(6.18克，16.52毫摩尔，1.0eq.)悬于甲醇(52毫升)中，加入氢氧化钾(2.78克，49.57毫摩尔，3.0eq.)。反应液于10℃反应3小时。将反应液浓缩至剩余10毫升溶剂，向其中加入水(80毫升)，用二氯甲烷(3x100毫升)萃取。合并有机相，饱和盐水(80毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩有机相。得到粗品固体用甲醇(10毫升)洗涤。所得固体干燥得到4-溴-5-甲氧基-2-(4-甲氧基苄基)哒嗪-3(2H)-酮(4.44克，土黄色固体)，收率：82.6％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝325.0。
1H NMR:(400MHz,DMSO-d6)δ8.15(s,1H),7.25(d,J＝8.4Hz,2H),6.89(d,J＝8.8Hz,2H),5.21(s,2H),4.06(s,3H),3.72(s,3H)。
步骤C：5-甲氧基-2-(4-甲氧基苄基)-4-(三氟甲基)哒嗪-3(2H)-酮的制备
将4-溴-5-甲氧基-2-(4-甲氧基苄基)哒嗪-3(2H)-酮(8.08克，24.85毫摩尔，1.0eq.)溶于N,N-二甲基甲酰胺(42毫升)，加入碘化亚铜(2.37克，12.43毫摩尔，0.5eq.)。氮气保护下，将氟磺酰基二氟乙酸甲酯(19.10克，99.40毫摩尔，4.0eq.)滴加至反应液中。反应液加热至100℃反应3小时。反应液降至室温并加水(150毫升)淬灭，二氯甲烷(3x150毫升)萃取。合并有机相，无水硫酸钠干燥并浓缩有机相。所得粗品用硅胶柱[(乙酸乙酯/二氯甲烷＝1/1；V/V)/石油醚＝2/3；V/V]分离纯化得到5-甲氧基-2-(4-甲氧基苄基)-4-(三氟甲基)哒嗪-3(2H)-酮(5.30克，淡黄色固体)，收率：67.9％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝314.8。
1H NMR:(400MHz,DMSO-d6)δ8.34(s,1H),7.28(d,J＝8.4Hz,2H),6.92(d,J＝8.8Hz,2H),5.19(s,2H),4.11(s,3H),3.75(s,3H)。
步骤D：5-羟基-2-(4-甲氧基苄基)-4-(三氟甲基)哒嗪-3(2H)-酮的制备
将5-甲氧基-2-(4-甲氧基苄基)-4-(三氟甲基)哒嗪-3(2H)-酮(3.14克，10.00毫摩尔，1.0eq.)溶于N,N-二甲基甲酰胺(16毫升)，室温下滴加三甲基碘硅烷(2.60克，13.00毫摩尔，1.3eq.)。滴加完毕，将反应液加热至90℃继续反应20小时。反应液降至室温，加水(70毫升)淬灭，二氯甲烷(2x80毫升)萃取。合并有机相，无水硫酸钠干燥并浓缩有机相。所得粗品用硅胶柱[(乙酸乙酯/二氯甲烷＝1/1；V/V)/石油醚＝3/2；V/V]分离纯化得到5-羟基-2-(4-甲氧基苄基)-4-(三氟甲基)哒嗪-3(2H)-酮(2.82克,淡棕色固体)，收率：93.9％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝300.8。
1H NMR:(400MHz,DMSO-d6)δ7.79(s,1H),7.24(d,J＝8.4Hz,2H),6.90(d,J＝8.4Hz,2H),5.11(s,2H),3.73(s,3H)。
步骤E：5-氯-2-(4-甲氧基苄基)-4-(三氟甲基)哒嗪-3(2H)-酮的制备
将5-羟基-2-(4-甲氧基苄基)-4-(三氟甲基)哒嗪-3(2H)-酮(2.49克，8.29毫摩尔，1.0eq.)溶于N,N-二甲基甲酰胺(13毫升)，于冰浴中降温至0℃，向反应液中滴加草酰氯(2.11克，16.59毫摩尔，2.0eq.)。反应液于10℃反应8小时。向反应液加水(80毫升)淬灭，乙酸乙酯(2x80毫升)萃取。合并有机相，饱和盐水洗涤(2x80毫升)，无水硫酸钠干燥并浓缩有机相。所得粗品用硅胶柱[(二氯甲烷/乙酸乙酯＝1/1；V/V)/石油醚＝1/5；V/V]分离纯化得到5-氯-2-(4-甲氧基苄基)-4-(三氟甲基)哒嗪-3(2H)-酮(2.51克,淡黄色固体)，收率：95.0％。
LCMS:(ESI)[M+Na]+＝341.0。
1H NMR:(400MHz,DMSO-d6)δ8.23(s,1H),7.29(d,J＝8.4Hz,2H),6.91(d,J＝8.4Hz,2H),5.20(s,2H),3.73(s,3H)。
步骤F：5-氯-4-(三氟甲基)哒嗪-3(2H)-酮(中间体Q)的制备
将5-氯-2-(4-甲氧基苄基)-4-(三氟甲基)哒嗪-3(2H)-酮(2.00克，6.28毫摩尔,1.0eq.)溶于三氟乙酸(32毫升)，加入浓硫酸(5.3毫升)。反应液加热至120℃反应3小时。反应液冷却至室温并旋蒸除去三氟乙酸，加水(100毫升)稀释，加入饱和碳酸氢钠水溶液调节至pH＝7，乙酸乙酯(3x70毫升)萃取。合并有机相，无水硫酸钠干燥并浓缩有机相得到中间体Q，5-氯-4-(三氟甲基)哒嗪-3(2H)-酮(1.05克,白色固体)，收率：84.3％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝199.0。
32.2)中间体R的合成
步骤A：(S)-(1-((1,3-二氧异吲哚-2-基)氧基)丙基-2-基)氨基甲酸叔丁酯的制 备
氮气保护下，将N-羟基邻苯二甲酰亚胺(4.90克，30.04毫摩尔，1.0eq.)，N-Boc-L-丙氨醇(5.32克，30.34毫摩尔，1.01eq.)及三苯基膦(8.82克，33.64毫摩尔，1.12eq.)溶于四氢呋喃(100毫升)，于冰浴中降至0℃，滴加偶氮二甲酸二异丙酯(6.68克，33.04毫摩尔，1.1eq.)。反应液于15℃反应3小时。反应液加水(50毫升)淬灭，用乙酸乙酯(3x100毫升)萃取。合并有机相，无水硫酸钠干燥并浓缩有机相。得到的粗产物用C18反相柱(乙腈/去离子水＝2/3；V/V)分离纯化得到(S)-(1-((1,3-二氧异吲哚-2-基)氧基)丙基-2-基)氨基甲酸叔丁酯(7.80克，白色固体81.1％)，收率：81.1％。
LCMS:(ESI)[M+H-100]+＝221.2。
1H NMR:(400MHz,CDCl3)δ7.87–7.81(m,2H),7.79–7.73(m,2H),5.15(br s,1H),4.25(dd,J＝9.6,4.4Hz,1H),4.20–4.11(m,1H),4.02–3.89(m,1H),1.42(s,9H),1.36(d,J＝6.8Hz,3H)。
步骤B：(S)-(1-(氨基氧基)丙烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯(中间体R)的制备
将(S)-(1-((1,3-二氧异吲哚-2-基)氧基)丙-2-基)氨基甲酸叔丁酯(1.00克，3.12毫摩尔)溶于二氯甲烷(20毫升)与甲醇(6毫升)，加入水合肼(98％，0.16克，3.12毫摩尔)。反应液于15℃反应3小时。反应液浓缩，得到的粗产物中加入二氯甲烷(40毫升)，滤除不溶物。滤液浓缩得到中间体R，(S)-(1-(氨基氧基)丙烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯(650毫克，白色固体)，收率：96.3％。
32.3)化合物32的合成
步骤A：2-{1-[5-(三氟甲基)吡啶-2-基]哌啶-4-基}乙酸甲酯的制备
室温下将4-哌啶基乙酸甲酯盐酸盐(1.00克，5.16毫摩尔，1.0eq.)溶于N,N-二甲基甲酰胺(20毫升)，依次加入碳酸钾(2.14克，15.49毫摩尔，3.0eq.)及2-氯-5-三氟甲基吡啶(1.03克，5.68毫摩尔，1.1eq.)。反应液加热至80℃反应3小时。反应液降至室温并加水(80毫升)稀释，乙酸乙酯(3x50毫升)萃取。合并有机相，用水(2x50毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩有机相。所得粗品用硅胶柱(石油醚/乙酸乙酯＝5/1；V/V)分离纯化得到2-{1-[5-(三氟甲基)吡啶-2-基]哌啶-4-基}乙酸甲酯(0.55克，黄色固体)，收率：35.2％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝303.2。
1H NMR:(400MHz,CDCl3)δ8.37(d,J＝0.8Hz,1H),7.59(dd,J＝9.2,2.4Hz,1H),6.63(d,J＝9.2Hz,1H),4.44–4.35(m,2H),3.69(s,3H),2.93(td,J＝13.2,2.4Hz,2H),2.28(d,J＝7.2Hz,2H),2.16–2.01(m,1H),1.89–1.76(m,2H),1.34–1.19(m,2H)。
步骤B：2-{1-[5-(三氟甲基)吡啶-2-基]哌啶-4-基}乙酸的制备
将2-{1-[5-(三氟甲基)吡啶-2-基]哌啶-4-基}乙酸甲酯(300毫克，0.99毫摩尔，1.0eq.)溶于四氢呋喃(3毫升)、甲醇(1毫升)以及水(1毫升)混合溶剂，加入氢氧化锂(48毫克，1.99毫摩尔，2.0eq.)。反应液于15℃反应4小时。反应液用2M盐酸中和至pH＝7并浓缩。所得粗品用硅胶柱(二氯甲烷/甲醇＝9/1；V/V)分离纯化得到2-{1-[5-(三氟甲基)吡啶-2-基]哌啶-4-基}乙酸(200毫克，白色固体)，收率：69.9％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝289.2。
步骤C：(S)-{1-[(2-{1-[5-(三氟甲基)吡啶-2-基]哌啶-4-基}乙酰胺)氧基]丙 烷-2-基}氨基甲酸叔丁酯的制备
将2-{1-[5-(三氟甲基)吡啶-2-基]哌啶-4-基}乙酸(150毫克，0.52毫摩尔，1.0eq.)与(S)-[1-(氨基氧基)丙烷-2-基]氨基甲酸叔丁酯(109毫克，0.57毫摩尔，1.1eq.)溶于N,N-二甲基甲酰胺(10毫升)，依次加入N,N-二异丙基乙胺(168毫克，1.30毫摩尔，2.5eq.)及2-(7-氮杂苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(297毫克，0.78毫摩尔，1.5eq.)。反应液于10℃反应2小时。反应液加水(50毫升)淬灭，乙酸乙酯(2x60毫升)萃取。合并有机相，饱和盐水(2x50毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩有机相。所得粗品用硅胶柱(石油醚/乙酸乙酯＝3/7；V/V)分离纯化得到(S)-{1-[(2-{1-[5-(三氟甲基)吡啶-2-基]哌啶-4-基}乙酰胺)氧基]丙烷-2-基}氨基甲酸叔丁酯(220毫克，白色固体)，收率：91.8％。
LCMS:(ESI)[M+H-100]+＝461.2。
步骤D：(S)-N-(2-氨基丙氧基)-2-{1-[5-(三氟甲基)吡啶-2-基]哌啶-4-基}乙酰 胺的制备
将(S)-{1-[(2-{1-[5-(三氟甲基)吡啶-2-基]哌啶-4-基}乙酰胺)氧基]丙烷-2-基}氨基甲酸叔丁酯(100毫克，0.22毫摩尔，1.0eq.)溶于二氯甲烷(3毫升)，加入三氟乙酸(1毫升)。反应液于15℃反应1小时。向反应液加入饱和碳酸氢钠水溶液(20毫升)中和三氟乙酸，用混合溶剂(二氯甲烷/甲醇＝10/1；V/V，6x40毫升)萃取。合并有机相，无水硫酸钠干燥并浓缩有机相得到(S)-N-(2-氨基丙氧基)-2-{1-[5-(三氟甲基)吡啶-2-基]哌啶-4-基}乙酰胺(75毫克，黄色固体)，收率：95.8％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝361.2。
步骤E：(S)-N-(2-{[6-氧代-5-(三氟甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基]氨基}丙氧基)- 2-{1-[5-(三氟甲基)吡啶-2-基]哌啶-4-基}乙酰胺的制备
将(S)-N-(2-氨基丙氧基)-2-{1-[5-(三氟甲基)吡啶-2-基]哌啶-4-基}乙酰胺(75毫克，0.21毫摩尔，1.0eq.)溶于乙醇(2毫升)，加入5-氯-4-(三氟甲基)哒嗪-3(2H)-酮(41毫克，0.21毫摩尔，1.0eq.)。反应液于60℃反应3小时。反应液降至室温并加水(20毫升)稀释，二氯甲烷(2x20毫升)萃取。合并有机相，无水硫酸钠干燥并浓缩有机相。所得粗品先用prep-TLC(二氯甲烷/甲醇＝10/1；V/V)纯化，然后再用prep-HPLC进一步纯化得到化合物32，(S)-N-(2-{[6-氧代-5-(三氟甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基]氨基}丙氧基)-2-{1-[5-(三氟甲基)吡啶-2-基]哌啶-4-基}乙酰胺(10.57毫克，白色固体)，收率：9.7％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝523.2。
1H NMR:(400MHz,DMSO-d6)δ12.51(s,1H),11.15(s,1H),8.39(s,1H),7.92(s,1H),7.76(dd,J＝9.2,2.4Hz,1H),6.95(d,J＝9.2Hz,1H),6.63(s,1H),4.39(d,J＝13.6Hz,2H),4.27–4.17(m,1H),3.96–3.83(m,2H),2.93(t,J＝12.4Hz,2H),2.06–1.97(m,1H),1.93(d,J＝6.8Hz,2H),1.70(d,J＝11.6Hz,2H),1.21(d,J＝6.4Hz,3H),1.17–1.06(m,2H)。
实施例33：化合物33的合成
(S)-2-[1-(5-氰基嘧啶-2-基)哌啶-4-基]-N-(2-{[6-氧代-5-(三氟甲基)-1,6- 二氢哒嗪-4-基]氨基}丙氧基)乙酰胺
步骤A：2-[1-(5-氰基嘧啶-2-基)哌啶-4-基]乙酸甲酯的制备
将2-氯-5-氰基嘧啶(698.0毫克，5.00毫摩尔，1.0eq.)与4-哌啶基乙酸甲酯盐酸盐(1.02克，5.25毫摩尔，1.05eq.)溶于N-甲基吡咯烷酮(10毫升)，加入碳酸钾(2.07克，15.00毫摩尔，3.0eq.)。反应液于80℃反应16小时。将反应液降至室温并加水(100毫升)稀释，乙酸乙酯(2x80毫升)萃取。合并有机相，饱和盐水(2x100毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩有机相。所得粗品用硅胶柱(石油醚/乙酸乙酯＝3/1；V/V)分离纯化得到2-[1-(5-氰基嘧啶-2-基)哌啶-4-基]乙酸甲酯(1.04克，淡黄色固体)，收率：79.9％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝261.1。
1H NMR:(400MHz,CDCl3)δ8.46(s,2H),4.88–4.79(m,2H),3.69(s,3H),2.97(td,J＝13.2,2.8Hz,2H),2.29(d,J＝6.8Hz,2H),2.18–2.06(m,1H),1.90–1.82(m,2H),1.29–1.17(m,2H)。
步骤B：2-[1-(5-氰基嘧啶-2-基)哌啶-4-基]乙酸的制备
将2-[1-(5-氰基嘧啶-2-基)哌啶-4-基]乙酸甲酯(390毫克，1.50毫摩尔，1.0eq.)溶于四氢呋喃(6毫升)与水(3毫升)，加入氢氧化锂(126毫克，3.00毫摩尔，2.0eq.)。反应液于10℃反应16小时。反应液加水(10毫升)稀释并用1M盐酸中和至pH＝7，用乙酸乙酯(2x60毫升)萃取。合并有机相，饱和盐水(40毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩有机相得到2-[1-(5-氰基嘧啶-2-基)哌啶-4-基]乙酸(365毫克，白色固体)，收率：98.8％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝247.2。
步骤C：(S)-[1-({2-[1-(5-氰基嘧啶-2-基)哌啶-4-基]乙酰氨基}氧基)丙烷-2- 基]氨基甲酸叔丁酯的制备
将2-[1-(5-氰基嘧啶-2-基)哌啶-4-基]乙酸(246毫克，1.00毫摩尔，1.0eq.)溶于N,N-二甲基甲酰胺(5毫升)，依次加入N,N-二异丙基乙胺(388毫克，3.00毫摩尔，3.0eq.)，2-(7-氮杂苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(456毫克，1.20毫摩尔，1.2eq.)以及(S)-[1-(氨基氧基)丙烷-2-基]氨基甲酸叔丁酯(190毫克，1.00毫摩尔，1.0eq.)。反应液于10℃反应2小时。反应液加水(80毫升)淬灭，用乙酸乙酯(2x80毫升)萃取。合并有机相，饱和盐水(2x80毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩有机相。所得粗品用硅胶柱(石油醚/乙酸乙酯＝3/7；V/V)分离纯化得到(S)-[1-({2-[1-(5-氰基嘧啶-2-基)哌啶-4-基]乙酰氨基}氧基)丙烷-2-基]氨基甲酸叔丁酯(295毫克，白色固体)，收率：70.5％。
LCMS:(ESI)[M+H-100]+＝319.2。
1H NMR:(400MHz,CDCl3)δ9.68(s,1H),8.50(s,2H),4.93–4.83(m,2H),4.62(d,J＝8.8Hz,1H),4.10–4.00(m,1H),3.98–3.90(m,1H),3.50(t,J＝10.2Hz,1H),3.05–2.95(m,2H),2.35–2.17(m,1H),2.14–2.00(m,2H),1.97–1.84(m,2H),1.49(s,9H),1.34–1.23(m,2H),1.17(d,J＝6.8Hz,3H)。
步骤D：(S)-N-(2-氨基丙氧基)-2-[1-(5-氰基嘧啶-2-基)哌啶-4-基]乙酰胺的制 备
将(S)-[1-({2-[1-(5-氰基嘧啶-2-基)哌啶-4-基]乙酰氨基}氧基)丙烷-2-基]氨基甲酸叔丁酯(126毫克，0.30毫摩尔，1.0eq.)溶于二氯甲烷(3毫升)，加入三氟乙酸(1毫升)。反应液于10℃反应1小时。向反应液加入饱和碳酸氢钠水溶液(20毫升)中和三氟乙酸，用混合溶剂(二氯甲烷/甲醇＝10/1；V/V，6x60毫升)萃取。合并有机相，无水硫酸钠干燥并浓缩有机相得到(S)-N-(2-氨基丙氧基)-2-[1-(5-氰基嘧啶-2-基)哌啶-4-基]乙酰胺(96毫克，淡黄色油状物)，收率：99.5％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝319.2。
步骤E：(S)-2-[1-(5-氰基嘧啶-2-基)哌啶-4-基]-N-(2-{[6-氧代-5-(三氟甲 基)-1,6-二氢哒嗪-4-基]氨基}丙氧基)乙酰胺的制备
将(S)-N-(2-氨基丙氧基)-2-[1-(5-氰基嘧啶-2-基)哌啶-4-基]乙酰胺(96毫克，0.30毫摩尔，1.0eq.)溶于乙醇(3毫升)，加入5-氯-4-(三氟甲基)哒嗪-3(2H)-酮(60毫克，0.30毫摩尔，1.0eq.)。反应液于60℃反应3小时。反应液降至室温并加水(20毫升)稀释，二氯甲烷(2x20毫升)萃取。合并有机相，无水硫酸钠干燥并浓缩有机相。所得粗品用prep-TLC(二氯甲烷/甲醇＝10/1；V/V)纯化，然后再用prep-HPLC进一步纯化得到化合物33，(S)-2-[1-(5-氰基嘧啶-2-基)哌啶-4-基]-N-(2-{[6-氧代-5-(三氟甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基]氨基}丙氧基)乙酰胺(12.22毫克，白色固体)，收率：8.46％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝481.2。
1H NMR:(400MHz,DMSO-d6)δ12.49(s,1H),11.14(s,1H),8.72(s,2H),7.91(s,1H),6.66–6.57(m,1H),4.67(d,J＝13.2Hz,2H),4.26–4.15(m,1H),3.95–3.81(m,2H),3.01(t,J＝12.4Hz,2H),2.07–1.97(m,1H),1.93(d,J＝7.2Hz,2H),1.77–1.68(m,2H),1.19(d,J＝6.4Hz,3H),1.15–1.04(m,2H)。
实施例34：化合物34的合成
(S)-2-[1-(5-氰基吡啶-2-基)哌啶-4-基]-N-(2-{[6-氧代-5-(三氟甲基)-1,6- 二氢哒嗪-4-基]氨基}丙氧基)乙酰胺
步骤A：2-[1-(5-氰基吡啶-2-基)哌啶-4-基]乙酸甲酯的制备
将2-氯-5-氰基吡啶(831毫克，6.00毫摩尔，1.0eq.)与4-哌啶基乙酸甲酯盐酸盐(1.16克，6.00毫摩尔，1.0eq.)溶于N-甲基吡咯烷酮(11毫升)，加入碳酸钾(2.49克，18.00毫摩尔，3.0eq.)。反应液于80℃反应16小时。反应液降至室温并加水(100毫升)稀释，乙酸乙酯(2x80毫升)萃取。合并有机相，饱和盐水(2x100毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩有机相。得到的粗产物用硅胶柱(石油醚/乙酸乙酯＝3/1；V/V)分离纯化得到2-[1-(5-氰基吡啶-2-基)哌啶-4-基]乙酸甲酯(1.35克,黄色固体)，收率：86.8％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝260.2。
1H NMR:(400MHz,CDCl3)δ8.38(dd,J＝2.4,0.4Hz,1H),7.57(dd,J＝8.8,2.4Hz,1H),6.59(d,J＝9.2Hz,1H),4.46–4.38(m,2H),3.69(s,3H),2.96(td,J＝13.2,2.8Hz,2H),2.28(d,J＝6.8Hz,2H),2.18–2.04(m,1H),1.92–1.79(m,2H),1.32–1.19(m,2H)。
步骤B：2-[1-(5-氰基吡啶-2-基)哌啶-4-基]乙酸的制备
将2-[1-(5-氰基吡啶-2-基)哌啶-4-基]乙酸甲酯(389毫克，1.50毫摩尔，1.0eq.)溶于四氢呋喃(6毫升)与水(3毫升)，加入氢氧化锂(126毫克，3.00毫摩尔，2.0eq.)。反应液于10℃反应16小时。反应液加水(10毫升)稀释并用1M盐酸中和至pH＝7，用乙酸乙酯(2x60毫升)萃取。合并有机相，饱和盐水(40毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩有机相得到2-[1-(5-氰基吡啶-2-基)哌啶-4-基]乙酸(365毫克，淡黄色固体)，收率：99.2％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝246.2。
步骤C：(S)-[1-({2-[1-(5-氰基吡啶-2-基)哌啶-4-基]乙酰氨基}氧基)丙烷-2- 基]氨基甲酸叔丁酯的制备
将2-[1-(5-氰基吡啶-2-基)哌啶-4-基]乙酸(245毫克，1.00毫摩尔，1.0eq.)溶于N,N-二甲基甲酰胺(5毫升)，依次加入N,N-二异丙基乙胺(388毫克，3.00毫摩尔，3.0eq.)，2-(7-氮杂苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(456毫克，1.20毫摩尔，1.2eq.)以及(S)-[1-(氨基氧基)丙烷-2-基]氨基甲酸叔丁酯(190毫克，1.00毫摩尔，1.0eq.)。反应液于10℃反应2小时。反应液加水(80毫升)淬灭，用乙酸乙酯(2x80毫升)萃取。合并有机相，饱和盐水(2x80毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩有机相。得到的粗产物用硅胶柱(石油醚/乙酸乙酯＝3/7；V/V)分离纯化得到(S)-[1-({2-[1-(5-氰基吡啶-2-基)哌啶-4-基]乙酰氨基}氧基)丙烷-2-基]氨基甲酸叔丁酯(300毫克，白色固体)，收率：71.9％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝418.2。
1H NMR:(400MHz,CDCl3)δ9.81(s,1H),8.52(s,1H),7.73–7.68(m,1H),6.73(d,J＝9.2Hz,1H),4.77(d,J＝7.6Hz,1H),4.56(t,J＝11.2Hz,2H),4.20–4.09(m,1H),4.03(d,J＝12.0Hz,1H),3.61(t,J＝10.8Hz,1H),3.15–3.01(m,2H),2.41–2.27(m,1H),2.20(d,J＝7.2Hz,2H),2.07–1.93(m,2H),1.59(s,9H),1.45–1.33(m,2H),1.27(d,J＝6.8Hz,3H)。
步骤D：(S)-N-(2-氨基丙氧基)-2-[1-(5-氰基吡啶-2-基)哌啶-4-基]乙酰胺的制 备
将(S)-[1-({2-[1-(5-氰基吡啶-2-基)哌啶-4-基]乙酰氨基}氧基)丙烷-2-基]氨基甲酸叔丁酯(50毫克，0.12毫摩尔，1.0eq.)溶于二氯甲烷(4毫升)，加入三氟乙酸(1毫升)。反应液于15℃反应0.5小时。向反应液加入饱和碳酸氢钠水溶液(20毫升)中和三氟乙酸，用混合溶剂(二氯甲烷/甲醇＝10/1；V/V,4x60毫升)萃取。合并有机相，无水硫酸钠干燥并浓缩有机相得到(S)-N-(2-氨基丙氧基)-2-[1-(5-氰基吡啶-2-基)哌啶-4-基]乙酰胺(32毫克，白色固体)，收率：84.2％。LCMS:(ESI)[M+H]+＝318.2。
步骤E：(S)-2-[1-(5-氰基吡啶-2-基)哌啶-4-基]-N-(2-{[6-氧代-5-(三氟甲 基)-1,6-二氢哒嗪-4-基]氨基}丙氧基)乙酰胺的制备
将(S)-N-(2-氨基丙氧基)-2-[1-(5-氰基吡啶-2-基)哌啶-4-基]乙酰胺(16毫克，0.05毫摩尔，1.0eq.)溶于乙醇(1毫升)，加入5-氯-4-(三氟甲基)哒嗪-3(2H)-酮(10毫克，0.05毫摩尔，1.0eq.)。反应液于60℃反应2小时。反应液降至室温并加水(10毫升)稀释，乙酸乙酯(3x15毫升)萃取。合并有机相，无水硫酸钠干燥并浓缩有机相。得到的粗产物用prep-HPLC(FA)纯化得到化合物34，(S)-2-[1-(5-氰基吡啶-2-基)哌啶-4-基]-N-(2-{[6-氧代-5-(三氟甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基]氨基}丙氧基)乙酰胺(3.12毫克，白色固体)，收率：12.9％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝480.2。
1H NMR:(400MHz,CDCl3)δ10.45(s,1H),9.00(s,1H),8.37(d,J＝2.0Hz,1H),7.71(s,1H),7.57(dd,J＝9.2,2.4Hz,1H),6.59(d,J＝9.6Hz,1H),5.96(s,1H),4.48–4.35(m,2H),4.18–4.02(m,2H),3.93–3.82(m,1H),3.02–2.90(m,2H),2.25–2.12(m,1H),2.12–2.00(m,2H),1.90–1.78(m,2H),1.35(d,J＝6.4Hz,3H),1.27–1.17(m,2H)。
实施例35：化合物35的合成
(S)-N-(2-((5-溴-6-氧代-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)-2-(1-(5-(三氟甲 基)嘧啶-2-基)哌啶-4-基)乙酰胺
35.1)中间体T的合成
步骤A：(S)-4-溴-5-((1-羟基丙烷-2-基)氨基)-2-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧 基)甲基)哒嗪-3(2H)-酮的制备
将4,5-二溴-2-((2-(三甲硅基)乙氧基)甲基)哒嗪-3(2H)-酮(2.60克，6.79毫摩尔，1.0eq.)溶于异丙醇(40毫升)，依次加入N,N-二异丙基乙胺(2.63克，20.37毫摩尔，3.0eq.)，L-氨基丙醇(510毫克，6.79毫摩尔，1.0eq.)。反应液于100℃反应16小时。反应液降至室温并加水(200毫升)淬灭，乙酸乙酯(3x150毫升)萃取。合并有机相，饱和盐水(500毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩。得到的粗产物通过柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝4/1；V/V)纯化得到(S)-4-溴-5-((1-羟基丙基-2-基)氨基)-2-((2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)哒嗪-3(2H)-酮(1.32克，白色固体)，收率：51.6％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝378.0，380.0。
1H NMR:(400MHz,CDCl3)δ7.63(s,1H),5.52–5.40(m,2H),5.01(d,J＝8.0Hz,1H),3.92–3.77(m,2H),3.74–3.65(m,3H),1.32(d,J＝6.4Hz,3H),0.99–0.93(m,2H),0.02(s,9H)。
步骤B：(S)-2-(2-((5-溴-6-氧代-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1,6- 二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)异吲哚-1,3-二酮(中间体T)的制备
将(S)-4-溴-5-((1-羟基丙基-2-基)氨基)-2-((2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)哒嗪-3(2H)-酮(1.32克，3.49毫摩尔，1.0eq.)溶于四氢呋喃(15毫升)，依次加入N-羟基邻苯二甲酰亚胺(569毫克，3.49毫摩尔，1.0eq.)，三苯基膦(1.01克，3.84毫摩尔，1.1eq.)，最后滴加偶氮二甲酸二异丙酯(776毫克，3.84毫摩尔，1.1eq.)。反应液于25℃反应1小时。反应液加水(100毫升)淬灭，乙酸乙酯(3x80毫升)萃取。合并有机相，饱和盐水(300毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩。得到的粗产物通过柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝3/1；V/V)纯化得到中间体T，(S)-2-(2-((5-溴-6-氧-1-((2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)异吲哚-1,3-二酮(1.44克，无色油状物)，收率：78.9％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝523.0。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.97(s,1H),7.89(s,4H),6.32(d,J＝8.3Hz,1H),5.34(s,2H),4.44(d,J＝6.6Hz,2H),4.26(d,J＝6.4Hz,1H),3.65(t,J＝8.0Hz,2H),1.28(d,J＝5.5Hz,3H),0.89(t,J＝8.0Hz,2H),0.00(s,9H)。
35.2)化合物35的合成
步骤A：(S)-5-((1-(氨基氧基)丙烷-2-基)氨基)-4-溴-2-((2-(三甲基甲硅烷基) 乙氧基)甲基)哒嗪-3(2H)-酮的制备
将(S)-2-(2-((5-溴-6-氧代-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)异二氢吲哚-1,3-二酮(410毫克，0.784毫摩尔，1.0eq.)溶于乙醇(5毫升)，然后在0℃下加水合肼(58毫克，1.16毫摩尔，1.5eq.)。反应液于室温反应30分钟。反应液浓缩，粗品用甲基叔丁基醚(10毫升)洗涤并过滤，滤液浓缩得到(S)-5-((1-(氨基氧基)丙烷-2-基)氨基)-4-溴-2-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)哒嗪-3(2H)-酮(170毫克,白色固体)，收率：55％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝393.2,395.2。
步骤B：(S)-N-(2-((5-溴-6-氧代-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1,6- 二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)-2-(1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-基)乙酰胺的制备
将2-(1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-基)乙酸(89毫克，0.308毫摩尔，1.1eq.)溶于N,N-二甲基甲酰胺(2毫升)，依次加入N,N-二异丙基乙胺(108毫克，0.842毫摩尔，3.0eq.)，2-(7-氮杂苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(128毫克，0.336毫摩尔，1.2eq.)，然后将(S)-5-((1-(氨基氧基)丙烷-2-基)氨基)-4-溴-2-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)哒嗪-3(2H)-酮(110毫克，0.280毫摩尔，1.0eq.)加至反应液中。反应液于25℃反应1小时。向反应液中加水(10毫升)淬灭反应，乙酸乙酯(3x10毫升)萃取。合并有机相，饱和盐水(10毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩有机相。得到的粗产物用硅胶柱柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝1/2；V/V)分离纯化得到(S)-N-(2-((5-溴-6-氧代-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)-2-(1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-基)乙酰胺(100毫克，无色液体)，收率：53％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝664.2,666.2。
1H NMR:(400MHz,CDCl3)δ8.98(s,1H),8.45(s,2H),7.58(s,1H),5.49(d,J＝9.8Hz,1H),5.35(d,J＝9.8Hz,1H),5.28(s,1H),4.84(d,J＝12.0Hz,2H),4.17–4.08(m,1H),4.06–3.88(m,2H),3.68(t,J＝8.1Hz,2H),2.95(t,J＝12.7Hz,2H),2.31–2.14(m,1H),2.14–2.01(m,2H),1.85(d,J＝12.8Hz,2H),1.36(d,J＝6.5Hz,3H),1.27–1.14(m,2H),0.93(t,J＝8.4Hz,2H),-0.02(s,9H)。
步骤C：(S)-N-(2-((5-溴-6-氧代-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)-2-(1-(5- (三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-基)乙酰胺的制备
将(S)-N-(2-((5-溴-6-氧代-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)-2-(1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-基)乙酰胺(90毫克，0.135毫摩尔，1.0eq.)溶于二氯甲烷(2毫升)，加入三氟乙酸(0.3毫升)。反应液于25℃反应1小时。向反应液中加入饱和碳酸氢钠水溶液(10毫升)中和，二氯甲烷(3x10毫升)萃取。合并有机相，无水硫酸钠干燥并浓缩有机相。将粗品重新溶于甲醇(3毫升)，加入碳酸钾(46毫克，0.339毫摩尔，2.5eq.)。反应液于25℃继续反应1小时。反应液过滤，滤液通过反相柱柱层析(乙腈/水＝1:10～10:1；V/V)分离纯化得到化合物35，(S)-N-(2-((5-溴-6-氧代-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)-2-(1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-基)乙酰胺(49毫克，白色粉末)，收率：68％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝534.2。
1H NMR:(400MHz,CDCl3)δ10.62(s,1H),9.50(s,1H),8.45(s,2H),7.59(s,1H),5.30(s,1H),4.82(d,J＝13.5Hz,2H),4.22–4.10(m,1H),4.10–3.98(m,1H),3.96–3.86(m,1H),2.94(t,J＝12.4Hz,2H),2.29–2.14(m,1H),2.13–2.00(m,2H),1.83(d,J＝12.7Hz,2H),1.34(d,J＝5.9Hz,3H),1.26–1.11(m,2H)。
实施例36：化合物36的合成
(S)-N-(2-((5-乙酰基-6-氧代-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)-2-(1-(5-(三 氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-基)乙酰胺
36.1)中间体W的合成
步骤A：(S)-2-(2-((5-乙酰基-6-氧-1-((2-(三甲硅基)乙氧基)甲基)-1,6-二氢 哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)异吲哚-1,3-二酮的制备
氮气保护下，将(S)-2-(2-((5-溴-6-氧-1-((2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)异吲哚-1,3-二酮(733毫克，1.40毫摩尔，1.0eq.)与三丁基(1-乙氧基乙烯)锡(607毫克，1.68毫摩尔，1.2eq.)溶于甲苯(28毫升)，加入四三苯基膦钯(323毫克，0.28毫摩尔，0.2eq.)。反应液于100℃反应16小时。反应液降至室温并加水(50毫升)稀释，乙酸乙酯(3x40毫升)萃取。合并有机相，饱和盐水(150毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩。得到的粗产物通过柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝1/1；V/V)纯化得到(S)-2-(2-((5-乙酰基-6-氧-1-((2-(三甲硅基)乙氧基)甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)异吲哚-1,3-二酮(446毫克，白色固体)，收率：61.9％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝487.2。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.82(d,J＝8.4Hz,1H),8.15(s,1H),7.92–7.84(m,4H),5.31(s,2H),4.65–4.50(m,1H),4.39–4.27(m,2H),3.70–3.61(m,2H),2.52(s,3H),1.32(d,J＝6.8Hz,3H),0.92–0.86(m,2H),0.00(s,9H)。
步骤B：(S)-4-乙酰基-5-((1-(氨基氧基)丙-2-基)氨基)-2-((2-(三甲基硅基)乙 氧基)甲基)哒嗪-3(2H)-酮的制备
将(S)-2-(2-((5-乙酰基-6-氧-1-((2-(三甲硅基)乙氧基)甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)异吲哚-1,3-二酮(390毫克，0.80毫摩尔，1.0eq.)溶于二氯甲烷(10毫升)与甲醇(5毫升)混合溶剂，加入水合肼(76毫克,1.52毫摩尔，1.9eq.)。反应液于25℃反应1小时。反应液浓缩，得到的粗产物中加入乙醇(20毫升)，过滤，滤液浓缩。得到的粗产物通过柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝2/1；V/V)纯化得到中间体W，(S)-4-乙酰基-5-((1-(氨基氧基)丙-2-基)氨基)-2-((2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)哒嗪-3(2H)-酮(230毫克，黄色油状物)，收率：80.5％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝357.2。
36.2)化合物36的合成
步骤A：(S)-N-(2-((5-乙酰基-6-氧代-1-((2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)-1,6- 二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)-2-(1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-基)乙酰胺的制备
将(S)-4-乙酰基-5-((1-(氨基氧基)丙-2-基)氨基)-2-((2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)哒嗪-3(2H)-酮(230毫克，0.65毫摩尔，1.0eq.)与2-(1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-基)乙酸(208毫克，0.72毫摩尔，1.1eq.)溶于N,N-二甲基甲酰胺(15毫升)，依次加入N,N-二异丙基乙胺(252毫克，1.95毫摩尔，3.0eq.)及2-(7-氮杂苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(297毫克，0.78毫摩尔，1.2eq.)。反应液于25℃反应1小时。反应液加水(50毫升)淬灭，乙酸乙酯(3x40毫升)萃取。合并有机相，饱和盐水(200毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩。得到的粗产物通过柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝1/1；V/V)纯化得到(S)-N-(2-((5-乙酰基-6-氧代-1-((2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)-2-(1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-基)乙酰胺(360毫克，白色固体)，收率：88.9％。LCMS:(ESI)[M+H]+＝628.2。
步骤B：(S)-N-(2-((5-乙酰基-6-氧代-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)-2-(1- (5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-基)乙酰胺的制备
将(S)-N-(2-((5-乙酰基-6-氧代-1-((2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)-2-(1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-基)乙酰胺(180毫克，0.28毫摩尔，1.0eq.)溶于二氯甲烷(6毫升)，加入三氟乙酸(2毫升)。反应液于25℃反应0.5小时。反应液浓缩，得到的粗产物溶于甲醇(6毫升)，加入水(6毫升)，碳酸钾(174毫克，1.26毫摩尔，4.5eq.)及乙二胺(124毫克，2.07毫摩尔，7.4eq.)。反应液于25℃继续反应1小时。反应液加水(50毫升)稀释，乙酸乙酯(3x40毫升)萃取。合并有机相，饱和盐水(200毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩。得到的粗产物通过prep-HPLC纯化得到化合物36，(S)-N-(2-((5-乙酰基-6-氧代-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)-2-(1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-基)乙酰胺(30.83毫克，白色固体)，收率：21.6％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝498.2。
1H NMR:220817-072-P(400MHz,DMSO-d6)δ12.35(s,1H),11.11(s,1H),10.72(d,J＝8.4Hz,1H),8.68(s,2H),7.98(s,1H),4.69(d,J＝13.2Hz,2H),4.37–4.25(m,1H),3.98–3.89(m,1H),3.87–3.78(m,1H),3.00(t,J＝12.0Hz,2H),2.55(s,3H),2.07–2.00(m,1H),1.95–1.91(m,2H),1.89–1.69(m,2H),1.25(d,J＝6.4Hz,3H),1.18–1.02(m,2H)。
实施例37：化合物37的合成
N-(2-(5-氧代-3,4,5,6-四氢吡啶并[2,3-d]哒嗪-1(2H)-基)丙氧基)-2-(1-(5- (三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-基)乙酰胺
步骤A：6-{[2-(三甲基硅基)乙氧基]甲基}吡啶并[2,3-d]哒嗪-5(6H)-酮的制备
将吡啶并[2,3-d]哒嗪-5(6H)-酮(1.03克，7.00毫摩尔，1.0eq.)溶于N,N-二甲基甲酰胺(35毫升)，氮气保护下，反应液于冰浴中降至0℃，分批加入氢化钠(60％,0.70克，17.50毫摩尔，2.5eq.)。反应液于0℃搅拌30分钟。向反应液中加入2-(三甲基硅烷基)乙氧甲基氯(1.75克，10.50毫摩尔，1.5eq.)。反应液于10℃反应2小时。加入饱和氯化铵水溶液(120毫升)淬灭反应，乙酸乙酯(2x100毫升)萃取。合并有机相，饱和盐水(2x100毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩。得到的粗产物用硅胶柱柱层析(乙酸乙酯/石油醚＝1/3；V/V)分离纯化得到6-{[2-(三甲基硅基)乙氧基]甲基}吡啶并[2,3-d]哒嗪-5(6H)-酮(1.26克，黄色油状物)，收率：64.9％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝278.1。
1H NMR:(400MHz,DMSO-d6)δ9.18(dd,J＝4.4,1.6Hz,1H),8.66(d,J＝8.0Hz,1H),8.53(s,1H),7.90(dd,J＝8.0,4.4Hz,1H),5.47(s,2H),3.70(t,J＝8.0Hz,2H),0.89(t,J＝8.0Hz,2H),0.00(s,9H)。
步骤B：6-{[2-(三甲基硅基)乙氧基]甲基}-1,2,3,4-四氢吡啶并[2,3-d]哒嗪-5 (6H)-酮的制备
将6-{[2-(三甲基硅基)乙氧基]甲基}吡啶并[2,3-d]哒嗪-5(6H)-酮(1.38克，4.98毫摩尔，1.0eq.)溶于乙醇(50毫升)，氮气保护下，加入钯碳(10％，0.20克)。氢气氛围下，反应液于10℃氢化反应16小时。反应液过滤除去钯碳，滤液浓缩得到6-{[2-(三甲基硅基)乙氧基]甲基}-1,2,3,4-四氢吡啶并[2,3-d]哒嗪-5(6H)-酮(1.38克，类白色固体)，收率：98.6％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝282.0。
1H NMR:(400MHz,DMSO-d6)δ7.43(s,1H),6.94(br s,1H),5.23(s,2H),3.61(t,J＝8.0Hz,2H),3.24–3.17(m,2H),2.38(t,J＝6.0Hz,2H),1.80–1.71(m,2H),0.87(t,J＝8.0Hz,2H),0.00(s,9H)。
步骤C：2-(5-氧-6-{[2-(三甲基硅基)乙氧基]甲基}-3,4,5,6-四氢吡啶并[2,3- d]哒嗪-1(2H)-基)丙酸甲酯的制备
将6-{[2-(三甲基硅基)乙氧基]甲基}-1,2,3,4-四氢吡啶并[2,3-d]哒嗪-5(6H)-酮(790毫克，2.81毫摩尔，1.0eq.)溶于N,N-二甲基甲酰胺(12毫升)，氮气保护下，反应液于冰浴中降至0℃，加入氢化钠(60％，898.0毫克，22.46毫摩尔，8.0eq.)。反应液于0℃搅拌30分钟。向反应液中加入2-溴丙酸甲酯(2.11克，12.63毫摩尔，4.5eq.)。反应液升至40℃反应0.5小时。反应液降至室温，并用冷水(60毫升)淬灭，乙酸乙酯(2x120毫升)萃取。合并有机相，饱和盐水(60毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩。得到的粗产物用硅胶柱柱层析(乙酸乙酯/石油醚＝2/3；V/V)分离纯化得到2-(5-氧-6-{[2-(三甲基硅基)乙氧基]甲基}-3,4,5,6-四氢吡啶并[2,3-d]哒嗪-1(2H)-基)丙酸甲酯(660毫克，黄色油状物)，收率：64.0％。LCMS:(ESI)[M+H]+＝367.8。
1H NMR:(400MHz,CDCl3)δ7.57(s,1H),5.46–5.38(m,2H),4.57(q,J＝7.2Hz,1H),3.75(s,3H),3.73–3.67(m,2H),3.32–3.15(m,2H),2.70–2.50(m,2H),1.95–1.86(m,2H),1.54(d,J＝7.2Hz,3H),1.03–0.93(m,2H),0.00(s,9H)。
步骤D：1-(1-羟基丙烷-2-基)-6-{[2-(三甲基硅基)乙氧基]甲基}-1,2,3,4-四氢 吡啶基[2,3-d]哒嗪-5(6H)-酮的制备
将2-(5-氧-6-{[2-(三甲基硅基)乙氧基]甲基}-3,4,5,6-四氢吡啶并[2,3-d]哒嗪-1(2H)-基)丙酸甲酯(890毫克，2.42毫摩尔，1.0eq.)溶于四氢呋喃(10毫升)，氮气保护下，反应液于冰浴中降至0℃，加入二异丁基氢化铝溶液(1M,12.1毫升，12.10毫摩尔，5.0eq.)。反应液于10℃反应1小时。反应液用饱和氯化铵(100毫升)淬灭，二氯甲烷(4x180毫升)萃取。合并有机相，无水硫酸钠干燥并浓缩。得到的粗产物用硅胶柱柱层析(甲醇/二氯甲烷＝1/20；V/V)分离纯化得到1-(1-羟基丙烷-2-基)-6-{[2-(三甲基硅基)乙氧基]甲基}-1,2,3,4-四氢吡啶基[2,3-d]哒嗪-5(6H)-酮(426毫克，黄色油状物)，收率：51.8％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝340.2。
1H NMR:(400MHz,DMSO-d6)δ7.93(s,1H),5.24(s,2H),4.79(t,J＝5.6Hz,1H),4.22(q,J＝6.8Hz,1H),3.66–3.58(m,2H),3.55–3.38(m,2H),3.18(t,J＝5.6Hz,2H),2.39(t,J＝6.4Hz,2H),1.86–1.66(m,2H),1.10(d,J＝6.8Hz,3H),0.7(t,J＝8.0Hz,2H),0.00(s,9H)。
步骤E：2-(5-氧代-6-((2-(三甲基硅烷基)乙氧基)甲基)-3,4,5,6-四氢吡啶并 [2,3-d]哒嗪-1(2H)-基)丙基4-甲基苯磺酸酯的制备
将1-(1-羟基丙烷-2-基)-6-(2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1,2,3,4-四氢吡啶并[2,3-d]哒嗪-5(6H)-酮(100毫克，0.29毫摩尔，1.0eq.)溶于二氯甲烷(10毫升)，依次加入三乙胺(59毫克，0.58毫摩尔，2.0eq.)，4-二甲氨基吡啶(18毫克，0.15毫摩尔，0.5eq.)以及对甲苯磺酰氯(55毫克，0.29毫摩尔，1.0eq.)。反应液于35℃反应16小时。反应液加水(30毫升)淬灭，乙酸乙酯(3x40毫升)萃取。合并有机相，饱和盐水(100毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩有机相。得到的初产物通过柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝1/1；V/V)分离纯化得到2-(5-氧代-6-((2-(三甲基硅烷基)乙氧基)甲基)-3,4,5,6-四氢吡啶并[2,3-d]哒嗪-1(2H)-基)丙基4-甲基苯磺酸酯(120毫克，黄色油状物)，收率：83.9％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝493.9。
步骤F：2-(2-(5-氧代-6-((2-(三甲基硅烷基)乙氧基)甲基)-3,4,5,6-四氢吡啶 并[2,3-d]哒嗪-1(2H)-基)丙氧基)异吲哚-1,3-二酮的制备
将2-(5-氧代-6-((2-(三甲基硅烷基)乙氧基)甲基)-3,4,5,6-四氢吡啶并[2,3-d]哒嗪-1(2H)-基)丙基4-甲基苯磺酸酯(150毫克，0.30毫摩尔，1.0eq.)溶于N,N-二甲基甲酰胺(10毫升)，依次加入N-羟基邻苯二甲酰亚胺(49毫克，0.30毫摩尔，1.0eq.)以及碳酸钾(124毫克，0.90毫摩尔，3.0eq.)。反应液于60℃反应16小时。反应液降至室温并加水(50毫升)稀释，乙酸乙酯(3x50毫升)萃取。合并有机相，饱和盐水(2x60毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩有机相。得到的初产物通过柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝2/1；V/V)分离纯化得到2-(2-(5-氧代-6-((2-(三甲基硅烷基)乙氧基)甲基)-3,4,5,6-四氢吡啶并[2,3-d]哒嗪-1(2H)-基)丙氧基)异吲哚-1,3-二酮(108毫克，无色油状物)，收率：74.5％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝484.9。
步骤G：1-(1-(氨基氧基)丙烷-2-基)-6-((2-(三甲基硅烷基)乙氧基)甲基)-1,2, 3,4-四氢吡啶并[2,3-d]哒嗪-5(6H)-酮的制备
将2-(2-(5-氧代-6-((2-(三甲基硅烷基)乙氧基)甲基)-3,4,5,6-四氢吡啶并[2,3-d]哒嗪-1(2H)-基)丙氧基)异吲哚-1,3-二酮(90毫克，0.18毫摩尔，1.0eq.)溶于二氯甲烷(4毫升)与甲醇(2毫升)混合溶剂，加入水合肼(14毫克，0.27毫摩尔，1.5eq.)。反应液于35℃反应1小时。反应液浓缩，浓缩物中加入乙醇(20毫升)，滤除不溶物，将滤液浓缩得到1-(1-(氨基氧基)丙烷-2-基)-6-((2-(三甲基硅烷基)乙氧基)甲基)-1,2,3,4-四氢吡啶并[2,3-d]哒嗪-5(6H)-酮(70毫克，黄色油状物)，收率：100％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝355.2。
步骤H：N-(2-(5-氧代-6-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-3,4,5,6-四氢吡 啶并[2,3-d]哒嗪-1(2H)-基)丙氧基)-2-(1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-基)乙酰胺 的制备
将1-(1-(氨基氧基)丙烷-2-基)-6-((2-(三甲基硅烷基)乙氧基)甲基)-1,2,3,4-四氢吡啶并[2,3-d]哒嗪-5(6H)-酮(64毫克，0.18毫摩尔，1.0eq.)与2-(1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-基)乙酸(57毫克，0.20毫摩尔，1.1eq.)溶于N,N-二甲基甲酰胺(5毫升)，依次加入N,N-二异丙基乙胺(70毫克，0.54毫摩尔，3.0eq.)以及2-(7-氮杂苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(82毫克，0.21毫摩尔，1.2eq.)。反应液于35℃反应1小时。反应液加水(50毫升)淬灭，乙酸乙酯(3x40毫升)萃取。合并有机相，饱和盐水(2x60毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩有机相。得到的初产物通过柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝1/1；V/V)分离纯化得到N-(2-(5-氧代-6-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-3,4,5,6-四氢吡啶并[2,3-d]哒嗪-1(2H)-基)丙氧基)-2-(1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-基)乙酰胺(60毫克，白色固体)，收率：53.5％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝626.0。
1H NMR:(400MHz,CDCl3)δ9.82(s,1H),8.47(s,2H),7.73(s,1H),5.47(d,J＝9.6Hz,1H),5.26(d,J＝9.6Hz,1H),4.84(d,J＝13.6Hz,2H),4.47–4.31(m,1H),4.12–3.95(m,2H),3.75–3.60(m,2H),3.19(t,J＝5.2Hz,2H),3.04–2.95(m,2H),2.60–2.40(m,2H),2.27–2.05(m,3H),1.95–1.75(m,4H),1.30–1.17(m,5H),0.99–0.91(m,2H),0.04(s,9H)。
步骤I：N-(2-(5-氧代-3,4,5,6-四氢吡啶并[2,3-d]哒嗪-1(2H)-基)丙氧基)-2- (1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-基)乙酰胺的制备
将N-(2-(5-氧代-6-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-3,4,5,6-四氢吡啶并[2,3-d]哒嗪-1(2H)-基)丙氧基)-2-(1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-基)乙酰胺(60毫克，0.09毫摩尔，1.0eq.)溶于二氯甲烷(3毫升)，加入三氟乙酸(1毫升)。反应液于35℃反应0.5小时。反应液浓缩，得到的初产物溶于甲醇(2毫升)，加入碳酸钾(20毫克，0.14毫摩尔，1.5eq.)。反应液于35℃反应0.5小时。反应液过滤，滤液通过prep-HPLC纯化得到化合物37，N-(2-(5-氧代-3,4,5,6-四氢吡啶并[2,3-d]哒嗪-1(2H)-基)丙氧基)-2-(1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-基)乙酰胺(15.16毫克，白色固体)，收率：33.6％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝495.9。
1H NMR:(400MHz,CDCl3)δ11.12(s,1H),10.41(s,1H),8.44(s,2H),7.72(s,1H),4.80(d,J＝12.4Hz,2H),4.47–4.36(m,1H),4.15–3.93(m,2H),3.18(t,J＝5.6Hz,2H),2.93(t,J＝12.4Hz,2H),2.52–2.39(m,1H),2.37–2.15(m,2H),2.14–2.05(m,2H),1.93–1.73(m,4H),1.27–1.12(m,5H)。
实施例38：化合物38的合成
(S)-2-(1-(7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基)哌啶-4-基)-N-(2-((6-氧代-5-(三氟 甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)乙酰胺
步骤A：2-氯-7-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶的 制备
氮气保护下，将2-氯-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶(150毫克，0.98毫摩尔，1.0eq.)溶于N,N-二甲基甲酰胺(5毫升)，冰浴下冷却至0℃，加入氢化钠(60％,47毫克，1.18毫摩尔，1.2eq.)。反应液于25℃反应1小时。反应液降至0℃，向反应液中滴加2-(三甲基硅烷基)乙氧甲基氯(179毫克，1.08毫摩尔，1.1eq.)。反应液于25℃继续反应2小时。反应液加水(150毫升)淬灭，乙酸乙酯(2x100毫升)萃取。合并有机相，饱和盐水(2x80毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩有机相。得到的粗产物用硅胶柱柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝9/1；V/V)分离纯化得到2-氯-7-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶(160毫克，黄色固体)，收率：57.7％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝284.2。
步骤B：2-(1-(7-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶- 2-基)哌啶-4-基)乙酸甲酯的制备
将2-氯-7-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶(160毫克，0.59毫摩尔，1.0eq.)溶于N,N-二甲基甲酰胺(5毫升)，依次加入碳酸钾(246毫克，1.78毫摩尔，3.0eq.)以及4-哌啶基乙酸甲酯盐酸盐(114毫克，0.59毫摩尔，1.0eq.)。反应液于100℃反应1小时。反应液降至室温并加水(100毫升)稀释，乙酸乙酯(2x100毫升)萃取。合并有机相，饱和盐水(2x80毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩有机相。得到的粗产物用prep-TLC(石油醚/乙酸乙酯＝10/1；V/V)分离纯化得到2-(1-(7-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基)哌啶-4-基)乙酸甲酯(140毫克，无色油状物)，收率：60.5％。LCMS:(ESI)[M+H]+＝404.9。
1H NMR:(400MHz,CDCl3)δ8.60(s,1H),6.99(d,J＝3.6Hz,1H),6.40(d,J＝3.6Hz,1H),5.52(s,2H),4.89–4.81(m,2H),3.74(s,3H),3.60–3.56(m,2H),3.02–2.89(m,2H),2.32(d,J＝6.8Hz,2H),2.19–2.05(m,1H),1.85(d,J＝11.6Hz,2H),1.36–1.27(m,2H),0.98–0.94(m,2H),-0.02(s,9H)。
步骤C：2-(1-(7-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶- 2-基)哌啶-4-基)乙酸的制备
将2-(1-(7-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基)哌啶-4-基)乙酸甲酯(130毫克，0.32毫摩尔，1.0eq.)溶于四氢呋喃(4毫升)与水(4毫升)混合溶剂，加入氢氧化锂(54毫克，1.29毫摩尔，4.0eq.)。反应液于25℃反应2小时。反应液加水(20毫升)稀释，用稀盐酸调节至pH＝6。乙酸乙酯(2x100毫升)萃取。合并有机相，饱和盐水(100毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩有机相得到2-(1-(7-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基)哌啶-4-基)乙酸(110毫克，黄色固体)，收率87.7％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝390.9。
步骤D：(S)-N-(2-((6-氧代-5-(三氟甲基)-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲 基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)-2-(1-(7-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)- 7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基)哌啶-4-基)乙酰胺的制备
将2-(1-(7-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基)哌啶-4-基)乙酸(110毫克，0.28毫摩尔，1.0eq.)溶于N,N-二甲基甲酰胺(5毫升)，依次加入(S)-5-((1-(氨基氧基)丙-2-基)氨基)-4-(三氟甲基)-2-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)哒嗪-3(2H)-酮(119毫克，0.31毫摩尔，1.1eq.)，N,N-二异丙基乙胺(0.14毫升，0.85毫摩尔，3.0eq.)以及2-(7-氮杂苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(129毫克，0.34毫摩尔，1.2eq.)。反应液于25℃反应1小时。反应液加水(100毫升)淬灭，乙酸乙酯(2x150毫升)萃取。合并有机相，饱和盐水(2x80毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩有机相。得到的粗产物用硅胶柱柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝1/1；V/V)分离纯化得到(S)-N-(2-((6-氧代-5-(三氟甲基)-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)-2-(1-(7-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基)哌啶-4-基)乙酰胺(110毫克，淡黄色油状物)，收率：51.7％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝755.4。
步骤E：(S)-2-(1-(7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基)哌啶-4-基)-N-(2-((6-氧代-5- (三氟甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)乙酰胺的制备
将(S)-N-(2-((6-氧代-5-(三氟甲基)-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)-2-(1-(7-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基)哌啶-4-基)乙酰胺(95毫克，0.13毫摩尔，1.0eq.)溶于二氯甲烷(6毫升)，加入三氟乙酸(2毫升)。反应液于25℃反应1小时。反应液加入饱和碳酸氢钠(50毫升)淬灭，二氯甲烷(3x100毫升)萃取。合并有机相，无水硫酸钠干燥并浓缩有机相。得到的粗产物溶于甲醇(3毫升)，加入碳酸钾(81毫克，0.45毫摩尔)。反应液于25℃继续反应1小时。反应液过滤，滤液通过prep-HPLC纯化得到化合物38，(S)-2-(1-(7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基)哌啶-4-基)-N-(2-((6-氧代-5-(三氟甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)乙酰胺(8.03毫克，白色固体)，收率：12.9％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝495.2。
1H NMR:(400MHz,DMSO-d6)δ12.49(s,1H),11.26(s,1H),11.11(s,1H),8.57(s,1H),7.91(s,1H),7.05(dd,J＝3.6,2.0Hz,1H),6.68–6.55(m,1H),6.29(dd,J＝3.6,2.0Hz,1H),4.63(d,J＝12.8Hz,2H),4.27–4.13(m,1H),3.95–3.80(m,2H),2.91–2.76(m,2H),2.03–1.85(m,3H),1.66(d,J＝12.4Hz,2H),1.19(d,J＝6.8Hz,3H),1.16–1.04(m,2H)。
实施例39：化合物39的合成
(S)-2-(1-(6-氟喹唑啉-2-基)哌啶-4-基)-N-(2-((6-氧代-5-(三氟甲基)-1,6- 二氢哒嗪-4-基的)氨基)丙氧基)乙酰胺
步骤A：2-氯-6-氟喹唑啉的合成
将2,4-二氯-6-氟喹唑啉(350毫克，1.61毫摩尔，1.0eq.)溶于二氯甲烷(7毫升)，加入氨水(1毫升)和饱和氯化钠水溶液(7毫升)，然后加入锌粉(316毫克，4.84毫摩尔，3.0eq.)。氮气保护下，反应液于40℃反应3小时。反应液降至室温并加入二氯甲烷(15毫升)稀释，饱和氯化铵溶液(2x10毫升)洗涤。有机相经无水硫酸钠干燥并浓缩。得到的粗产物通过柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝2/1；V/V)纯化得到2-氯-6-氟喹唑啉(150毫克，黄色固体)，收率：50.9％。
1H NMR:(400MHz,CDCl3)δ9.26(s,1H),8.04–7.97(m,1H),7.77–7.69(m,1H),7.56(dd,J＝7.6,2.4Hz,1H)。
步骤B：2-(1-(6-氟喹唑啉-2-基)哌啶-4-基)乙酸甲酯的制备
将哌啶-4-基乙酸甲酯盐酸盐(145毫克，0.75毫摩尔，1.05eq.)与N,N-二异丙基乙胺(276毫克，2.13毫摩尔，3.0eq.)溶于N-甲基吡咯烷酮(8毫升)，加入2-氯-6-氟喹唑啉(130毫克，0.71毫摩尔，1.0eq.)。反应液于70℃反应2小时。反应液降至室温并加水(30毫升)淬灭，乙酸乙酯(3x30毫升)萃取。合并有机相，饱和盐水(2x30毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩。得到的粗产物通过柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝2/1；V/V)纯化得到2-(1-(6-氟喹唑啉-2-基)哌啶-4-基)乙酸甲酯(150毫克，白色固体)，收率：69.4％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝304.2。
1H NMR:(400MHz,DMSO-d6)δ9.17(s,1H),7.69–7.58(m,2H),7.57–7.49(m,1H),4.84–4.73(m,2H),3.61(s,3H),2.96(td,J＝12.8,2.4Hz,2H),2.29(d,J＝7.2Hz,2H),1.95–2.06(m,1H),1.80–1.70(m,2H),1.18–1.13(m,2H)。
步骤C：2-(1-(6-氟喹唑啉-2-基)哌啶-4-基)乙酸的制备
将2-(1-(6-氟喹唑啉-2-基)哌啶-4-基)乙酸甲酯(145毫克，0.48毫摩尔，1.0eq.)溶于四氢呋喃(2毫升)，甲醇(2毫升)与水(1毫升)的混合溶剂，加入氢氧化锂(80毫克，1.92毫摩尔，4.0eq.)。反应液于50℃反应12小时。反应液降至室温并加水(6毫升)稀释，用1M稀盐酸调节至pH＝6，乙酸乙酯(3x10毫升)萃取。合并有机相，饱和盐水(10毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩得到2-(1-(6-氟喹唑啉-2-基)哌啶-4-基)乙酸(110毫克，白色固体)，收率：79.5％。LCMS:(ESI)[M+H]+＝290.2。
步骤D：(S)-2-(1-(6-氟喹唑啉-2-基)哌啶-4-基)-N-(2-((6-氧代-5-(三氟甲 基)-1-((2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)乙酰胺的制备
将2-(1-(6-氟喹唑啉-2-基)哌啶-4-基)乙酸(100毫克,0.35毫摩尔,1.0eq.)与(S)-5-((1-(氨基氧基)丙-2-基)氨基)-4-(三氟甲基)-2-((2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)哒嗪-3(2H)酮(159毫克，0.42毫摩尔，1.2eq.)溶于N,N-二甲基甲酰胺(5毫升)，依次加入N,N-二异丙基乙胺(134毫克，1.05毫摩尔，3.0eq.)，2-(7-氮杂苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(158毫克，0.42毫摩尔，1.2eq.)。反应液于25℃反应2小时。反应液加水(10毫升)淬灭，乙酸乙酯(3x15毫升)萃取。合并有机相，饱和氯化铵溶液(2x20毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩。得到的粗产物用硅胶柱柱层析(乙酸乙酯/石油醚＝1/1；V/V)分离纯化得到(S)-2-(1-(6-氟喹唑啉-2-基)哌啶-4-基)-N-(2-((6-氧代-5-(三氟甲基)-1-((2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)乙酰胺(195毫克，黄色固体)，收率：86.3％。LCMS:(ESI)[M+H]+＝654.2。
步骤E：(S)-2-(1-(6-氟喹唑啉-2-基)哌啶-4-基)-N-(2-((6-氧代-5-(三氟甲 基)-1,6-二氢哒嗪-4-基的)氨基)丙氧基)乙酰胺的制备
将(S)-2-(1-(6-氟喹唑啉-2-基)哌啶-4-基)-N-(2-((6-氧代-5-(三氟甲基)-1-((2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)乙酰胺(140毫克，0.21毫摩尔，1.0eq.)溶于二氯甲烷(4.5毫升)，加入三氟乙酸(1.5毫升)。反应液于25℃反应0.5小时。反应液浓缩，得到的粗产物溶于甲醇(4毫升)，加入碳酸钾(176毫克，1.26毫摩尔，6.0eq.)。反应液于25℃继续反应0.5小时。反应液过滤，滤液通过prep-HPLC纯化得到化合物39，(S)-2-(1-(6-氟喹唑啉-2-基)哌啶-4-基)-N-(2-((6-氧代-5-(三氟甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基的)氨基)丙氧基)乙酰胺(14.73毫克，白色固体)，收率：13.1％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝524.2。
1H NMR:(400MHz,DMSO-d6)δ12.52(s,1H),11.15(s,1H),9.20(s,1H),7.93(s,1H),7.70–7.61(m,2H),7.58–7.35(m,1H),6.69–6.58(m,1H),4.78(d,J＝13.2Hz,2H),4.30–4.16(m,1H),4.00–3.81(m,2H),2.97(t,J＝12.0Hz,2H),2.07–1.99(m,1H),1.95(d,J＝6.8Hz,2H),1.74(d,J＝11.2Hz,2H),1.22(d,J＝6.4Hz,3H),1.18–1.07(m,2H)。
实施例40：化合物40的合成:
(S)-2-(1-(4-(羟甲基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-基)哌啶-4-基)-N-(2-((6-氧代- 5-(三氟甲基))-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)乙酰胺
步骤A：2-(4-(2-甲氧基-2-氧代乙基)哌啶-1-基)-5-(三氟甲基)异烟酸的制备
将2-(哌啶-4-基)乙酸甲酯(380毫克，1.97毫摩尔，1.5eq.)溶于N-甲基吡咯烷酮(8毫升)，然后加入N,N-二异丙基乙胺(1克，7.92毫摩尔，6.0eq.)和2-氯-5-(三氟甲基)异烟酸(300毫克，1.32毫摩尔，1eq.)。反应液在封管中于120℃反应16小时。反应液冷却至室温，加入水(80毫升)，用乙酸乙酯萃取(3x50毫升)，水相用稀盐酸水溶液调pH＝6，乙酸乙酯萃取(3x50毫升)，将有机相合并后用无水硫酸钠干燥，并浓缩有机相。粗品用硅胶柱柱层析层析(二氯甲烷/甲醇＝95/5；V/V)分离纯化得到2-(4-(2-甲氧基-2-氧代乙基)哌啶-1-基)-5-(三氟甲基)异烟酸(340毫克，无色油状)，收率：51.8％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝347.1。
步骤B：2-(1-(4-(羟甲基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-基)哌啶-4-基)乙酸甲酯的制备
将2-(4-(2-甲氧基-2-氧代乙基)哌啶-1-基)-5-(三氟甲基)异烟酸(280毫克，0.81毫摩尔，1.0eq.)溶于四氢呋喃(3毫升)，然后滴加硼烷四氢呋喃溶液(1.62毫升，1.62毫摩尔，2.0eq.)。反应液于25℃反应16小时。向反应液慢慢滴加甲醇(5毫升)淬灭，混合物用硅胶柱柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝2/1；V/V)分离纯化得到2-(1-(4-(羟甲基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-基)哌啶-4-基)乙酸甲酯(130毫克，无色油状)，收率：48.6％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝333.1。
1H NMR:(400MHz,DMSO-d6)δ8.26(s,1H),7.04(s,1H),5.56(t,J＝5.7Hz,1H),4.55(d,J＝5.6Hz,2H),4.45–4.31(m,2H),3.60(s,3H),2.94(td,J＝12.8,2.6Hz,2H),2.28(d,J＝7.0Hz,2H),2.08–1.96(m,1H),1.73(dd,J＝13.7,3.6Hz,2H),1.11–1.18(m,2H)。
步骤C：2-(1-(4-(羟甲基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-基)哌啶-4-基)乙酸的制备
将2-(1-(4-(羟甲基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-基)哌啶-4-基)乙酸甲酯(130毫克，0.392毫摩尔，1.0eq.)溶于四氢呋喃(3毫升)，然后加入水(3毫升)和氢氧化锂(38毫克，1.568毫摩尔，4.0eq.)。反应液于40℃反应1小时。向反应液加入水(15毫升)，用乙酸乙酯萃取(3x10毫升)，水相用稀盐酸水溶液调pH＝6,乙酸乙酯萃取(3x15毫升)，将有机相合并后用无水硫酸钠干燥，并浓缩有机相得到2-(1-(4-(羟甲基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-基)哌啶-4-基)乙酸(90毫克，无色油状)，收率：72.5％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝319.2。
步骤D：(S)-2-(1-(4-(羟甲基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-基)哌啶-4-基)-N-(2-((6- 氧代-5-(三氟甲基))-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基) 丙氧基)乙酰胺的制备
将2-(1-(4-(羟甲基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-基)哌啶-4-基)乙酸(92毫克，0.24毫摩尔，1.0eq.)溶于四氢呋喃(3.6毫升)，依次加入N,N-二异丙基乙胺(62毫克，0.48毫摩尔，2.0eq.)，2-(7-氮杂苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(137毫克，0.36毫摩尔，1.5eq.)，然后将(S)-5-((1-(氨基氧基)丙烷-2-基)氨基)-4-(三氟甲基)-2-((2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)哒嗪-3(2H)-酮(80毫克，0.252毫摩尔，1.05eq.)加至反应液中。反应液于25℃反应1小时。向反应液中加水(10毫升)淬灭反应，乙酸乙酯(3x10毫升)萃取。合并有机相，饱和盐水(10毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩。得到的粗产物用硅胶柱柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝3/7；V/V)分离纯化得到((S)-2-(1-(4-(羟甲基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-基)哌啶-4-基)-N-(2-((6-氧代-5-(三氟甲基))-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)乙酰胺(120毫克，无色油状)，收率：62.1％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝683.4。
步骤E：(S)-2-(1-(4-(羟甲基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-基)哌啶-4-基)-N-(2-((6- 氧代-5-(三氟甲基))-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)乙酰胺的制备
将((S)-2-(1-(4-(羟甲基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-基)哌啶-4-基)-N-(2-((6-氧代-5-(三氟甲基))-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)乙酰胺(120毫克,0.176毫摩尔，1.0eq.)溶于二氯甲烷(2毫升)，加入三氟乙酸(0.2毫升)。反应液于25℃反应20分钟。向反应液中加入饱和碳酸氢钠水溶液(5毫升)中和，二氯甲烷(3x10毫升)萃取。合并有机相，无水硫酸钠干燥并浓缩。将粗品重新溶于甲醇(2毫升)，加入碳酸钾(83毫克，0.6毫摩尔，3.0eq.)。反应液于21℃继续反应1小时。反应液过滤，滤液通过硅胶柱柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝1/100；V/V)分离纯化得到化合物40，(S)-2-(1-(4-(羟甲基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-基)哌啶-4-基)-N-(2-((6-氧代-5-(三氟甲基))-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)乙酰胺(25.5毫克,白色粉末)，收率：28.1％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝553.4。
1H NMR:(400MHz,DMSO)δ8.28(s,1H),7.93(s,1H),7.06(s,1H),6.64(s,1H),4.57(s,2H),4.39(d,J＝13.1Hz,2H),4.30–4.17(m,1H),3.99–3.79(m,2H),2.95(t,J＝13.2Hz,2H),2.13–1.85(m,3H),1.73(d,J＝15.1Hz,2H),1.21(d,J＝6.4Hz,3H),1.18–1.06(m,2H)。
实施例41：化合物41的合成
(S)-N-(2-((6-氧代-5-(三氟甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)-2-(1- (噻唑-2-基)哌啶-4-基)乙酰胺
步骤A：2-(1-(噻唑-2-基)哌啶-4-基)乙酸甲酯的制备
将2-溴噻唑(800毫克，4.88毫摩尔，1.0eq.)溶于N,N-二甲基甲酰胺(16毫升)，依次加入碳酸铯(4.77g，14.63毫摩尔，3.0eq.)以及(4-哌啶)乙酸甲酯盐酸盐(1.13g，5.85毫摩尔，1.2eq.)。反应液加热至100℃反应16小时。反应液降至室温并加水(50毫升)稀释，乙酸乙酯(2x60毫升)萃取。合并有机相，饱和盐水(2x60毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩有机相。得到的粗产物用硅胶柱柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝4/1；V/V)分离纯化得到2-(1-(噻唑-2-基)哌啶-4-基)乙酸甲酯(250毫克，淡黄色固体)，收率：21.3％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝241.2。
步骤B：2-(1-(噻唑-2-基)哌啶-4-基)乙酸的制备
将2-(1-(噻唑-2-基)哌啶-4-基)乙酸甲酯(150毫克，0.62毫摩尔，1.0eq.)溶于四氢呋喃(3毫升)与水(1毫升)的混合溶剂，加入氢氧化钠(75毫克，1.87毫摩尔，3.0eq.)。反应液加热至50℃反应3小时。反应液降至室温并加水(30毫升)稀释，用稀盐酸调节pH＝6，乙酸乙酯(2x50毫升)萃取。合并有机相，无水硫酸钠干燥并浓缩有机相得到2-(1-(噻唑-2-基)哌啶-4-基)乙酸(140毫克,白色固体)，收率：99.1％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝227.2。
1H NMR:(400MHz,CDCl3)δ7.10(d,J＝3.7Hz,1H),6.46(d,J＝3.6Hz,1H),3.99–3.86(m,2H),3.62(s,3H),2.96(td,J＝12.7,2.9Hz,2H),2.22(d,J＝7.0Hz,2H),2.04–1.89(m,1H),1.80–1.70(m,2H),1.31(qd,J＝12.4,4.4Hz,2H)。
步骤C：(S)-N-(2-((6-氧代-5-(三氟甲基)-1-((2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)- 1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)-2-(1-(噻唑-2-基)哌啶-4-基)乙酰胺的制备
将2-(1-(噻唑-2-基)哌啶-4-基)乙酸(142毫克，0.63毫摩尔，1.2eq.)溶于N,N-二甲基甲酰胺(3毫升)，依次加入(S)-5-((1-(氨基氧基)丙烷-2-基)氨基)-4-(三氟甲基)-2-((2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)哒嗪-3(2H)-酮(200毫克，0.52毫摩尔，1.0eq.)，N,N-二异丙基乙胺(203毫克，1.57毫摩尔，3.0eq.)以及2-(7-氮杂苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(239毫克，0.63毫摩尔，1.2eq.)。反应液于25℃反应2小时。反应液加水(30毫升)淬灭，乙酸乙酯(2x50毫升)萃取。合并有机相，饱和盐水(2x50毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩有机相。得到的粗产物用硅胶柱柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝3/7；V/V)分离纯化得到(S)-N-(2-((6-氧代-5-(三氟甲基)-1-((2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)-2-(1-(噻唑-2-基)哌啶-4-基)乙酰胺(150毫克，淡黄色固体)，收率：48.6％。LCMS:(ESI)[M+H]+＝591.2。
步骤D：(S)-N-(2-((6-氧代-5-(三氟甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)- 2-(1-(噻唑-2-基)哌啶-4-基)乙酰胺的制备
将(S)-N-(2-((6-氧代-5-(三氟甲基)-1-((2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)-2-(1-(噻唑-2-基)哌啶-4-基)乙酰胺(150毫克，0.25毫摩尔，1.0eq.)溶于二氯甲烷(6毫升)，加入三氟乙酸(1.5毫升)。反应液于25℃反应1小时。反应液浓缩，得到的粗产物溶于甲醇(3毫升)，加入碳酸钾(70毫克，0.51毫摩尔)。反应液于25℃反应1小时。反应液过滤，滤液通过prep-HPLC(FA)纯化得到化合物41，(S)-N-(2-((6-氧代-5-(三氟甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)-2-(1-(噻唑-2-基)哌啶-4-基)乙酰胺(17.56毫克，白色固体)，收率：15.0％。LCMS:(ESI)[M+H]+＝461.2。
1H NMR:(400MHz,DMSO-d6)δ12.49(s,1H),11.14(s,1H),7.91(s,1H),7.12(d,J＝3.6Hz,1H),6.79(d,J＝3.6Hz,1H),6.65–6.56(m,1H),4.25–4.15(m,1H),3.94–3.79(m,4H),2.97(t,J＝12.0Hz,2H),1.98–1.83(m,3H),1.69(d,J＝12.8Hz,2H),1.26–1.14(m,5H)。
实施例42：化合物42的合成
(S)-N-(2-((6-氧代-5-(三氟甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)-2-(1- (5-氧代-6,7-二氢-5H-环戊烷[d]嘧啶-2-基)哌啶-4-基)乙酰胺
步骤A：2-((二甲氨基)亚甲基)环戊烷-1,3-二酮的制备
将1,3-环戊二酮(5.00克，50.97毫摩尔，1.0eq.)溶于N,N-二甲基甲酰胺二甲基缩醛(10毫升)。反应液于25℃反应18小时。反应液浓缩，得到的粗产物用硅胶柱柱层析(二氯甲烷/甲醇＝9/1；V/V)分离纯化得到2-((二甲氨基)亚甲基)环戊烷-1,3-二酮(4.00克，黄色固体)，收率：49.1％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝154.1。
1H NMR:(400MHz,CDCl3)δ7.47(s,1H),3.76(s,3H),3.39(s,3H),2.54(s,4H)。
步骤B：2-(甲硫基)-6,7-二氢-5H-环戊基[d]嘧啶-5-酮的制备
将2-((二甲氨基)亚甲基)环戊烷-1,3-二酮(3.00克，19.59毫摩尔，1.0eq.)溶于乙酸(15毫升)，加入S-甲基异硫脲硫酸盐(4.06克,21.55毫摩尔，1.1eq.)。反应液于120℃反应18小时。反应液降至室温，缓慢加入饱和碳酸氢钠溶液中和至pH＝7，乙酸乙酯(2x250毫升)萃取。合并有机相，饱和盐水(100毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩有机相。得到的粗产物通过柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝7/3；V/V)分离纯化得到2-(甲硫基)-6,7-二氢-5H-环戊基[d]嘧啶-5-酮(370毫克，白色固体)，收率：10.5％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝181.4。
1H NMR:(400MHz,CDCl3)δ8.81(s,1H),3.21–3.15(m,2H),2.77–2.71(m,2H),2.65(s,3H)。
步骤C：2-(甲基亚磺酰基)-6,7-二氢-5H-环戊基[d]嘧啶-5-酮的制备
将2-(甲硫基)-6,7-二氢-5H-环戊基[d]嘧啶-5-酮(200毫克，1.11毫摩尔，1.0eq.)溶于二氯甲烷(10毫升)，加入间氯过氧苯甲酸(226毫克，1.11毫摩尔，1.0eq.)。反应液于25℃反应2小时。反应液加水(100毫升)淬灭，二氯甲烷(3x100毫升)萃取。合并有机相，饱和盐水(100毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩有机相得到粗品2-(甲基亚磺酰基)-6,7-二氢-5H-环戊基[d]嘧啶-5-酮(260毫克，白色固体)。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝197.0。
步骤D：2-(1-(5-氧代-6,7-二氢-5H-环戊基[d]嘧啶-2-基)哌啶-4-基)乙酸甲酯 的制备
将2-(甲基亚磺酰基)-6,7-二氢-5H-环戊基[d]嘧啶-5-酮(500毫克，2.36毫摩尔，1.0eq.)溶于N,N-二甲基甲酰胺(8毫升)，依次加入2-(哌啶-4-基)乙酸甲酯盐酸盐(500毫克，2.59毫摩尔，1.1eq.)以及N,N-二异丙基乙胺(1.17毫升，7.07毫摩尔，3.0eq.)。反应液于80℃反应2小时。反应液降至室温并加水(200毫升)稀释，乙酸乙酯(2x100毫升)萃取。合并有机相，饱和盐水(100毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩有机相。得到的粗产物通过柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝7/3；V/V)分离纯化得到2-(1-(5-氧代-6,7-二氢-5H-环戊基[d]嘧啶-2-基)哌啶-4-基)乙酸甲酯(270毫克，黄色固体)，收率：39.6％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝289.9。
1H NMR:(400MHz,DMSO-d6)δ8.62(s,1H),4.82(d,J＝13.2Hz,2H),3.62(s,3H),3.05(t,J＝12.4Hz,2H),2.96–2.91(m,2H),2.56–2.54(m,2H),2.31(d,J＝7.2Hz,2H),2.12–2.00(m,1H),1.78(d,J＝12.0Hz,2H),1.24–1.08(m,2H)。
步骤E：2-(1-(5-氧代-6,7-二氢-5H-环戊基[d]嘧啶-2-基)哌啶-4-基)乙酸的制 备
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将2-(1-(5-氧代-6,7-二氢-5H-环戊基[d]嘧啶-2-基)哌啶-4-基)乙酸甲酯(50毫克，0.17毫摩尔，1.0eq.)溶于四氢呋喃(2毫升)与水(1毫升)混合溶剂，加入氢氧化锂(29毫克，0.69毫摩尔，4.0eq.)。反应液于25℃反应1小时。反应液加水(30毫升)稀释，用稀盐酸调节至pH＝6，乙酸乙酯(2x50毫升)萃取。合并有机相，饱和盐水(100毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩有机相得到粗品2-(1-(5-氧代-6,7-二氢-5H-环戊基[d]嘧啶-2-基)哌啶-4-基)乙酸(45毫克，黄色固体)。LCMS:(ESI)[M+H]+＝276.2。
步骤F：(S)-N-(2-((6-氧代-5-(三氟甲基)-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲 基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)-2-(1-(5-氧代-6,7-二氢-5H-环戊烷[d]嘧啶-2- 基)哌啶-4-基)乙酰胺的制备
将2-(1-(5-氧代-6,7-二氢-5H-环戊基[d]嘧啶-2-基)哌啶-4-基)乙酸(45毫克，0.16毫摩尔，1.0eq.)溶于N,N-二甲基甲酰胺(2毫升)，依次加入(S)-5-((1-(氨基氧基)丙-2-基)氨基)-4-(三氟甲基)-2-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)哒嗪-3(2H)-酮(69毫克，0.18毫摩尔，1.1eq.)，N,N-二异丙基乙胺(63毫克，0.49毫摩尔，3.0eq.)以及2-(7-氮杂苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(75毫克，0.20毫摩尔，1.2eq.)。反应液于25℃反应1小时。反应液加水(100毫升)淬灭，乙酸乙酯(2x100毫升)萃取。合并有机相，饱和盐水(2x80毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩有机相。得到的粗产物通过柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝7/3；V/V)分离纯化得到(S)-N-(2-((6-氧代-5-(三氟甲基)-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)-2-(1-(5-氧代-6,7-二氢-5H-环戊烷[d]嘧啶-2-基)哌啶-4-基)乙酰胺(70毫克，黄色固体)，收率：64.5％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝640.2。
步骤G：(S)-N-(2-((6-氧代-5-(三氟甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)- 2-(1-(5-氧代-6,7-二氢-5H-环戊烷[d]嘧啶-2-基)哌啶-4-基)乙酰胺的制备
将(S)-N-(2-((6-氧代-5-(三氟甲基)-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)-2-(1-(5-氧代-6,7-二氢-5H-环戊烷[d]嘧啶-2-基)哌啶-4-基)乙酰胺(70毫克，0.11毫摩尔，1.0eq.)溶于二氯甲烷(3毫升)，加入三氟乙酸(1毫升)。反应液于25℃反应1小时。反应液加入饱和碳酸氢钠(50毫升)淬灭，二氯甲烷(3x100毫升)萃取。合并有机相，无水硫酸钠干燥并浓缩有机相。得到的粗产物溶于甲醇(3毫升)，加入碳酸钾(70毫克，0.50毫摩尔，4.6eq.)。反应液于25℃继续反应1小时。反应液过滤，滤液通过prep-HPLC纯化得到化合物42，(S)-N-(2-((6-氧代-5-(三氟甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)-2-(1-(5-氧代-6,7-二氢-5H-环戊烷[d]嘧啶-2-基)哌啶-4-基)乙酰胺(18.48毫克，白色固体)，收率：32.5％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝510.2。
1H NMR:(400MHz,DMSO-d6)δ12.49(s,1H),11.13(s,1H),8.61(s,1H),7.91(s,1H),6.64–6.58(m,1H),4.78(d,J＝12.8Hz,2H),4.24–4.16(m,1H),3.93–3.82(m,2H),3.02(t,J＝12.4Hz,2H),2.94–2.89(m,2H),2.54–2.52(m,2H),2.07–1.98(m,1H),1.93(d,J＝6.8Hz,2H),1.74(d,J＝12.8Hz,2H),1.19(d,J＝6.4Hz,3H),1.16–1.08(m,2H)。
实施例43：化合物43的合成
2-(1-(5-羟基-6,7-二氢-5H-环戊基[d]嘧啶-2-基)哌啶-4-基)-N-((S)-2-((6-氧代-5-(三氟甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)乙酰胺
步骤A：2-(1-(5-羟基-6,7-二氢-5H-环戊基[d]嘧啶-2-基)哌啶-4-基)-N-((S)- 2-((6-氧代-5-(三氟甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)乙酰胺的制备
将(S)-N-(2-((6-氧代-5-(三氟甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)-2-(1-(5-氧代-6,7-二氢-5H-环戊烷[d]嘧啶-2-基)哌啶-4-基)乙酰胺(40毫克，0.08毫摩尔，1.0eq.)溶于无水四氢呋喃(1毫升)，冰浴下冷却至0℃，加入二异丁基氢化铝(1M，0.24毫升，0.24毫摩尔，3.0eq.)。反应液于25℃反应2小时。反应液过滤，滤液加水(20毫升)淬灭，乙酸乙酯(3x30毫升)萃取。合并有机相，无水硫酸钠干燥并浓缩。得到的粗产物通过prep-HPLC纯化得到化合物43，2-(1-(5-羟基-6,7-二氢-5H-环戊基[d]嘧啶-2-基)哌啶-4-基)-N-((S)-2-((6-氧代-5-(三氟甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)乙酰胺(0.94毫克，白色固体)，收率：2.3％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝494.0。
1H NMR:(400MHz,DMSO-d6)δ12.49(s,1H),11.13(s,1H),8.23(s,1H),7.90(s,1H),6.62(s,1H),5.19–5.13(m,1H),5.03–4.95(m,1H),4.62(d,J＝12.8Hz,2H),4.26–4.15(m,1H),3.93–3.80(m,2H),2.88–2.77(m,3H),2.64–2.58(m,1H),2.02–1.92(m,2H),1.90(d,J＝6.0Hz,2H),1.78–1.73(m,1H),1.67–1.62(m,2H),1.19(d,J＝6.6Hz,3H),1.07–1.03(m,2H)。
实施例44：化合物44的合成
(S)-N-(2-(6-氧代-5-(三氟甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)-N-(2-(4- (5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)乙基)乙酰胺
步骤A：4-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯的制备
将1-哌嗪甲酸叔丁酯(1.00克，5.37毫摩尔，1.0eq.)溶于N-甲基吡咯烷酮(20毫升)，依次加入N,N-二异丙基乙胺(2.08克，16.11毫摩尔，3.0eq.)及2-氯-5-(三氟甲基)嘧啶(0.98克，5.37毫摩尔，1.0eq.)。反应液加热至80℃反应12小时。反应液降至室温并加水(40毫升)，用乙酸乙酯(3x40毫升)萃取。合并有机相，饱和盐水(2x50毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩有机相。所得粗产物用硅胶柱(石油醚/乙酸乙酯＝4/1；V/V)分离纯化得到4-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(1.78克，白色固体)，收率：99.5％。
LCMS:(ESI)[M+H-56]+＝277.2。
步骤B：2-(哌嗪-1-基)-5-(三氟甲基)嘧啶盐酸盐的制备
将4-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(1.78克，5.36毫摩尔)溶于二氧六环(5毫升)，加入盐酸二氧六环溶液(4M，5毫升)。反应液于20℃反应1小时。反应液浓缩得到2-(哌嗪-1-基)-5-(三氟甲基)嘧啶盐酸盐(1.43克，白色固体)，收率：99.4％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝233.2。
步骤C：2-(4-(2,2-二乙氧基乙基)哌嗪-1-基)-5-(三氟甲基)嘧啶的制备
将2-(哌嗪-1-基)-5-(三氟甲基)嘧啶盐酸盐(300毫克，1.12毫摩尔，1.0eq.)溶于N,N-二甲基甲酰胺(10毫升)，依次加入N,N-二异丙基乙胺(577毫克，4.48毫摩尔，4.0eq.)以及溴代乙醛缩二乙醇(264毫克，1.34毫摩尔，1.2eq.)。反应液加热至80℃反应12小时。反应液降至室温并加水(50毫升)，乙酸乙酯(3x50毫升)萃取。合并有机相，饱和盐水(2x50毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩有机相。所得粗产物用硅胶柱(石油醚/乙酸乙酯＝3/2；V/V)分离纯化得到2-(4-(2,2-二乙氧基乙基)哌嗪-1-基)-5-(三氟甲基)嘧啶(140毫克，黄色油状物)，收率：36.0％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝349.2。
1H NMR:(400MHz,CDCl3)δ8.47(s,2H),4.68(t,J＝5.2Hz,1H),3.91(t,J＝4.8,4H),3.74–3.66(m,2H),3.60–3.52(m,2H),2.61(t,J＝4.8,4H),2.59(d,J＝5.2Hz,2H),1.23(t,J＝7.2Hz,6H)。
步骤D：2-(4-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)乙醛的制备
将2-(4-(2,2-二乙氧基乙基)哌嗪-1-基)-5-(三氟甲基)嘧啶(70毫克，0.19毫摩尔，1.0eq.)溶于盐酸二氧六环溶液(4M，2毫升)。反应液加热至40℃反应3小时。反应液浓缩得到2-(4-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)乙醛(50毫克，黄色油状物)，收率：94.5％。
LCMS:(ESI)[M+H+18]+＝293.1。
步骤E：(S)-4-(三氟甲基)-5-(1-(2-(4-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)乙 基)氨基)氧基)丙烷-2-氨基)-2-(2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)哒嗪-3(2H)-酮的制备
将(S)-5-(1-(氨基氧基)丙烷-2-基)氨基)-4-(三氟甲基)-2-(2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)哒嗪-3(2H)-酮(58毫克，0.15毫摩尔，1.0eq.)溶于甲醇(4毫升)，依次加入2-(4-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)乙醛(50毫克，0.18毫摩尔，1.2eq.)，乙酸(0.02毫升)以及氰基硼氢化钠(57毫克，0.91毫摩尔，6.0eq.)。反应液加热至70℃反应12小时。反应液降至室温并加水(10毫升)，二氯甲烷(3x20毫升)萃取。合并有机相，无水硫酸钠干燥并浓缩有机相。所得粗产物用prep-TLC(石油醚/乙酸乙酯＝1/1；V/V)纯化得到(S)-4-(三氟甲基)-5-(1-(2-(4-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)乙基)氨基)氧基)丙烷-2-氨基)-2-(2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)哒嗪-3(2H)-酮(50毫克，黄色固体)，收率：51.3％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝641.3。
1H NMR:(400MHz,CDCl3)δ8.50(s,2H),7.72(s,1H),6.95(s,1H),5.46–5.36(m,2H),4.04–3.97(m,1H),3.96–3.91(m,4H),3.90–3.87(m,1H),3.76–3.70(m,3H),3.06(t,J＝5.6Hz,2H),2.61–2.49(m,6H),1.37(d,J＝6.8Hz,3H),1.02–0.95(m,2H),0.03(s,9H)。
步骤F：(S)-N-(2-(6-氧代-5-(三氟甲基)-1-(2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)-1, 6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)-N-(2-(4-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)乙基)乙 酰胺的制备
将(S)-4-(三氟甲基)-5-(1-(2-(4-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)乙基)氨基)氧基)丙烷-2-氨基)-2-(2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)哒嗪-3(2H)-酮(50毫克，0.07毫摩尔，1.0eq.)溶于二氯甲烷(4毫升)，依次加入三乙胺(36毫克，0.35毫摩尔，5.0eq.)，4-二甲氨基吡啶(35毫克，0.28毫摩尔，4.0eq.)以及乙酸酐(15毫克，0.14毫摩尔，2.0eq.)。反应液于25℃反应1小时。反应液加水(10毫升)淬灭，二氯甲烷(3x20毫升)萃取。合并有机相，无水硫酸钠干燥并浓缩有机相。所得粗产物用prep-TLC(石油醚/乙酸乙酯＝1/1；V/V)分离纯化得到(S)-N-(2-(6-氧代-5-(三氟甲基)-1-(2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)-N-(2-(4-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)乙基)乙酰胺(40.0毫克，淡黄色固体)，收率：83.4％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝683.3。
步骤G：(S)-N-(2-(6-氧代-5-(三氟甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)-N- (2-(4-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)乙基)乙酰胺的制备
将(S)-N-(2-(6-氧代-5-(三氟甲基)-1-(2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)-N-(2-(4-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)乙基)乙酰胺(35毫克，0.05毫摩尔，1.0eq.)溶于二氯甲烷(1.5毫升)，加入三氟乙酸(0.5毫升)。反应液于25℃反应0.5小时。反应液浓缩，将所得粗产物溶于甲醇(2毫升)，加入碳酸钾(20毫克，0.15毫摩尔)。反应液于25℃继续反应0.5小时。反应液过滤，滤液通过prep-HPLC(FA)分离纯化得到化合物44，(S)-N-(2-(6-氧代-5-(三氟甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)-N-(2-(4-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)乙基)乙酰胺(11.97毫克，白色固体)，收率：41.6％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝553.4。
1H NMR:(400MHz,CDCl3)δ11.24(s,1H),8.40(s,2H),7.62(s,1H),5.66(br,1H),4.06–3.96(m,2H),3.88–3.83(m,1H),3.82–3.75(m,4H),3.73–3.64(m,2H),2.54–2.47(m,2H),2.47–2.42(m,4H),2.06(s,3H),1.34(d,J＝6.0Hz,3H)。
实施例45：化合物45的合成
(S)-N-甲基-N-(2-(6-氧代-5-(三氟甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)- 2-(1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-基)乙酰胺
步骤A：(S)-N-甲基-N-(2-(6-氧代-5-(三氟甲基)-1-((2-(三甲基硅基)乙氧基) 甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)-2-(1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-基)乙 酰胺的制备
将(S)-N-(2-(6-氧代-5-(三氟甲基)-1-(2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)-2-(1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-基)乙酰胺(100毫克，0.15毫摩尔，1.0eq.)溶于N,N-二甲基甲酰胺(5毫升)，依次加入碳酸钾(62毫克，0.45毫摩尔，3.0eq.)，碘甲烷(21毫克，0.15毫摩尔，1.0eq.)。反应液于25℃反应2小时。反应液加水(20毫升)淬灭，乙酸乙酯(3x30毫升)萃取。合并有机相，饱和盐水(2x30毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩有机相。所得的粗产物用硅胶柱(乙酸乙酯/石油醚＝1/1；V/V)分离纯化得到(S)-N-甲基-N-(2-(6-氧代-5-(三氟甲基)-1-(2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)-2-(1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-基)乙酰胺(60毫克，黄色固体)，收率：60.0％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝668.3。
步骤D：(S)-N-甲基-N-(2-(6-氧代-5-(三氟甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙 氧基)-2-(1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-基)乙酰胺的制备
将(S)-N-甲基-N-(2-(6-氧代-5-(三氟甲基)-1-(2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)-2-(1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-基)乙酰胺(80毫克，0.12毫摩尔)溶于二氯甲烷(3毫升)，加入三氟乙酸(1毫升)。反应液于25℃反应0.5小时。反应液浓缩，所得的粗产物溶于甲醇(2毫升)，加入碳酸钾(20毫克，0.15毫摩尔)。反应液于25℃继续反应0.5小时。反应液过滤，滤液通过prep-HPLC(FA)纯化得到化合物45，(S)-N-甲基-N-(2-(6-氧代-5-(三氟甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)-2-(1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-基)乙酰胺(15.31毫克，白色固体)，收率：23.7％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝538.2。
1H NMR:(400MHz,CDCl3)δ11.48(s,1H),8.46(s,2H),7.68(s,1H),5.64(br s,1H),4.86–4.81(m,2H),4.13–3.98(m,2H),3.91–3.81(m,1H),3.21(s,3H),3.00–2.87(m,2H),2.35–2.25(m,2H),2.24–2.10(m,1H),1.85(t,J＝11.2Hz,2H),1.40(d,J＝6.8Hz,3H),1.25–1.10(m,2H)。
实施例46：化合物46的合成
(S)-1-(2-((6-氧代-5-(三氟甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)-3-(1- (5-(三氟甲基)
嘧啶-2-基)哌啶-4-基)脲
步骤A：(2-(叔丁氧羰基)氨基)丙氧基)氨基甲酸4-硝基苯酯的制备
将对硝基苯基氯甲酸酯(200毫克，0.99毫摩尔，1.2eq.)溶于二氯甲烷(10毫升)，与冰浴中降至0℃，依次加入(S)-(1-(氨基氧基)丙烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯(157毫克，0.82毫摩尔，1.0eq.)的二氯甲烷溶液(10毫升)，三乙胺(100毫克，0.99毫摩尔，1.2eq.)。反应液于15℃反应0.5小时。反应液加水(10毫升)淬灭。有机相用饱和盐水(10毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩有机相得到(2-(叔丁氧羰基)氨基)丙氧基)氨基甲酸4-硝基苯酯(350毫克，黄色油状物)。该粗产品直接用于步骤D。
步骤B：(1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯的制备
将4-叔丁氧羰基氨基哌啶(1.09克，5.42毫摩尔，1.1eq.)溶于N-甲基吡咯烷酮(10毫升)，加入2-氯-5-三氟甲基嘧啶(900毫克，4.93毫摩尔，1.0eq.)及碳酸钾(2.04克，14.79毫摩尔，3.0eq.)。反应液于80℃反应3小时。反应液降至室温并加水(80毫升)稀释，用乙酸乙酯(2x80毫升)萃取。合并有机相，饱和盐水(100毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩有机相。得到的粗产物柱层析(乙酸乙酯/石油醚＝1/3；V/V)分离纯化得到(1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯(1.30克，黄色固体)，收率：48.0％。
LCMS:(ESI)[M+H-56]+＝291.0。
1H NMR:(400MHz,CDCl3)δ8.46(s,2H),4.76–4.69(m,2H),4.45(s,1H),3.75(s,1H),3.16–3.08(m,2H),2.09–2.00(m,2H),1.46(s,9H),1.40–1.30(m,2H)。
步骤C：1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-胺盐酸盐的制备
将(1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯(200毫克，0.58毫摩尔)溶于二氯甲烷(4毫升)，加入盐酸二氧六环溶液(4M，4毫升)。反应液于15℃反应1小时。反应液浓缩得到1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-胺盐酸盐(130毫克，白色固体)，收率：91.4％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝247.2。
步骤D：(S)-(1-((3-(1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-基)脲)氧基)丙烷-2- 基)氨基甲酸叔丁酯的制备
将(2-(叔丁氧羰基)氨基)丙氧基)氨基甲酸4-硝基苯酯(350毫克，0.82毫摩尔，1.0eq.)溶于乙腈(10毫升)，加入1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-胺盐酸盐(228毫克，0.99毫摩尔，1.2eq.)。反应液于80℃反应2小时。反应液降至室温并加水(40毫升)稀释，二氯甲烷(2x80毫升)萃取。合并有机相，饱和盐水(60毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩有机相。得到的粗产物柱层析(乙酸乙酯/石油醚＝8/1；V/V)分离纯化得到(S)-(1-((3-(1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-基)脲)氧基)丙烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯(120毫克，白色固体)，收率：27.0％。
LCMS:(ESI)[M+H-100]+＝363.2。
1H NMR:(400MHz,CDCl3)δ8.51(s,2H),7.62–7.53(m,1H),6.06(s,1H),4.83(d,J＝13.6Hz,2H),4.47–4.41(m,1H),4.13–4.00(m,2H),3.82(dd,J＝11.2,3.6Hz,1H),3.62(dd,J＝11.2,8.8Hz,1H),3.22–3.12(m,2H),2.09–2.16(m,2H),1.54–1.48(m,2H),1.44(s,9H),1.16(d,J＝6.8Hz,3H)。
步骤E：(S)-1-(2-氨基丙氧基)-3-(1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-基)脲的 制备
将(S)-(1-((3-(1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-基)脲)氧基)丙烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯(50毫克，0.11毫摩尔，1.0eq.)溶于二氯甲烷(3毫升)，加入三氟乙酸(1毫升)。反应液于15℃反应1小时。反应液加入饱和碳酸氢钠水溶液(20毫升)中和，二氯甲烷(2x40毫升)萃取。合并有机相，饱和盐水(20毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩有机相得到(S)-1-(2-氨基丙氧基)-3-(1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-基)脲(30毫克，黄色油状物)，收率：76.6％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝363.2。
步骤F：(S)-1-(2-((6-氧代-5-(三氟甲基)-1-((2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)- 1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)-3-(1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-基)脲的制备
将(S)-1-(2-氨基丙氧基)-3-(1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-基)脲(30毫克，0.08毫摩尔，1.0eq.)溶于乙醇(5毫升)，依次加入5-氯-4-(三氟甲基)-2-((2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)哒嗪-3(2H)-酮(27毫克，0.08毫摩尔，1.0eq.)及三乙胺(8毫克，0.08毫摩尔，1.0eq.)。反应液于60℃反应3小时。反应液降至室温并浓缩，得到的粗产物柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝1/2；V/V)分离纯化得到(S)-1-(2-((6-氧代-5-(三氟甲基)-1-((2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)-3-(1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-基)脲(30毫克，黄色油状物)，收率：55.4％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝655.2。
步骤G：(S)-1-(2-((6-氧代-5-(三氟甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)- 3-(1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-基)脲的制备
将(S)-1-(2-((6-氧代-5-(三氟甲基)-1-((2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)-3-(1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-基)脲(30毫克，0.05毫摩尔，1.0eq.)溶于二氯甲烷(3毫升)，加入三氟乙酸(1毫升)。反应液于15℃反应1小时。反应液加入饱和碳酸氢钠水溶液(20毫升)中和，二氯甲烷(3x40毫升)萃取。合并有机相，无水硫酸钠干燥并浓缩有机相。得到的粗产物溶于甲醇(2毫升)，加入碳酸钾(29毫克，0.21毫摩尔)。反应液于15℃继续反应1小时。反应液过滤，滤液用prep-HPLC(FA)纯化得到化合物46，(S)-1-(2-((6-氧代-5-(三氟甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)-3-(1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-基)脲(13.15毫克，白色固体)，收率：54.4％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝525.2。
1H NMR:(400MHz,CDCl3)δ10.81(s,1H),8.45(s,2H),7.76(s,1H),7.65(s,1H),5.56–5.50(m,1H),5.48(d,J＝7.6Hz,1H),4.74(d,J＝13.2Hz,2H),4.09(s,1H),3.96–3.87(m,2H),3.82–3.76(m,1H),3.11–3.02(m,2H),2.06–1.97(m,2H),1.40–1.29(m,5H)。
实施例47：化合物47的合成
(S)-N-(2-((6-氧代-5-(三氟甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)-1-(1- (5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-基)甲磺酰胺
步骤A：(1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-基)甲醇的制备
将4-羟甲基哌啶(530毫克，4.60毫摩尔，1.2eq.)溶于N-甲基吡咯烷酮(10毫升)，依次加入2-氯-5-(三氟甲基)嘧啶(700毫克，3.84毫摩尔，1.0eq.)以及N,N-二异丙基乙胺(1.98克，15.34毫摩尔，4.0eq.)。反应液于80℃反应2小时。反应液降至室温并加水(60毫升)稀释，乙酸乙酯(2x50毫升)萃取，合并有机相，饱和盐水(2x50毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩有机相。得到的粗产物通过柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝2/1；V/V)分离纯化得到(1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-基)甲醇(900毫克，白色固体)，收率：89.8％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝262.1。
1H NMR:(400MHz,CDCl3)δ8.50(s,2H),4.98–4.85(m,2H),3.59(d,J＝6.0Hz,2H),3.07–2.92(m,2H),1.97–1.79(m,3H),1.42(br s,1H),1.33–1.23(m,2H)。
步骤B：(1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-基)甲基磺酸甲酯的制备
将(1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-基)甲醇(1.58克，6.05毫摩尔，1.0eq.)溶于二氯甲烷(10毫升)，冰浴下冷却至0℃，依次加入三乙胺(1.84克，18.14毫摩尔，3.0eq.)以及甲磺酰氯(1.39克，12.10毫摩尔，2.0eq.)。反应液于25℃反应3小时。反应液加入饱和氯化铵(40毫升)淬灭，二氯甲烷(2x50毫升)萃取。合并有机相，饱和盐水(50毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩有机相得到粗品(1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-基)甲基磺酸甲酯(2.00克，白色固体)。LCMS:(ESI)[M+H]+＝340.2。
步骤C：S-((1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-基)甲基)硫代乙酸酯的制备
将(1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-基)甲基磺酸甲酯(2.00克，5.89毫摩尔，1.0eq.)溶于N,N-二甲基甲酰胺(25毫升)，加入硫代乙酸钾(2.72克，23.58毫摩尔，4.0eq.)。反应液于60℃反应3小时。反应液降至室温并加水(70毫升)稀释，乙酸乙酯(2x50毫升)萃取。合并有机相，饱和盐水(2x60毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩有机相。得到的粗产物用硅胶柱柱层析(乙酸乙酯/石油醚＝1/2；V/V)分离纯化得到S-((1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-基)甲基)硫代乙酸酯(1.65克，淡黄色固体)，收率：87.7％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝320.0。
1H NMR:(400MHz,CDCl3)δ8.45(s,2H),4.89–4.80(m,2H),2.94–2.84(m,4H),2.35(s,3H),1.92–1.84(m,2H),1.83–1.73(m,1H),1.28–1.15(m,2H)。
步骤D：(1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-基)甲磺酰氯的制备
将稀盐酸(2M,3.13毫升,6.26毫摩尔,4.0eq.)溶于乙腈(8毫升)，于冰浴下降至0℃，加入N-氯代丁二酰亚胺(836毫克，6.26毫摩尔，4.0eq.)。向反应液中滴加S-((1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-基)甲基)硫代乙酸酯(500毫克，1.57毫摩尔，1.0eq.)的乙腈(2毫升)溶液。反应液于0℃反应15分钟。反应液加入二氯甲烷(80毫升)稀释，饱和盐水(2x50毫升)洗涤。无水硫酸钠干燥有机相，浓缩得到粗品(1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-基)甲磺酰氯(500毫克，淡黄色油状物)，收率：92.9％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝344.0。
1H NMR:(400MHz,CDCl3)δ8.48(d,J＝0.4Hz,2H),4.96–4.86(m,2H),3.69(d,J＝6.4Hz,2H),3.07–2.96(m,2H),2.60–2.46(m,1H),2.14–2.06(m,2H),1.47–1.36(m,2H)。
步骤E：(S)-(1-(((1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-基)甲基磺酰胺基)氧基) 丙-2-基)
氨基甲酸叔丁酯的制备
将(1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-基)甲磺酰氯(536毫克，1.56毫摩尔，1.0eq.)与(S)-(1-(氨基氧基)丙-2-基)氨基甲酸叔丁酯(297毫克，1.56毫摩尔，1.0eq.)溶于二氯甲烷(10毫升)，冰浴下冷至0℃，滴加三乙胺(316毫克，3.12毫摩尔，2.0eq.)。反应液于25℃反应1小时。反应液加水(40毫升)淬灭，乙酸乙酯(3x40毫升)萃取。合并有机相，饱和盐水(80毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩有机相。得到的粗产物通过柱层析(乙酸乙酯/石油醚＝1/1；V/V)分离纯化得到(S)-(1-(((1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-基)甲基磺酰胺基)氧基)丙-2-基)氨基甲酸叔丁酯(420毫克，黄色油状物)，收率：54.1％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝498.2。
步骤F：(S)-N-(2-氨基丙氧基)-1-(1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-基)甲磺 酰胺的制备
将(S)-(1-(((1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-基)甲基磺酰胺基)氧基)丙-2-基)氨基甲酸叔丁酯(148毫克，0.30毫摩尔，1.0eq.)溶于二氯甲烷(8毫升)，加入三氟乙酸(2毫升)。反应液于25℃反应1小时。反应液加入饱和碳酸氢钠溶液(20毫升)淬灭，二氯甲烷(3x20毫升)萃取。合并有机相，饱和硫酸钠干燥并浓缩有机相得到(S)-N-(2-氨基丙氧基)-1-(1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-基)甲磺酰胺(112毫克，黄色油状物)，收率：94.1％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝398.1。
步骤G:(S)-N-(2-((6-氧代-5-(三氟甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)- 1-(1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-基)甲磺酰胺的制备
将(S)-N-(2-氨基丙氧基)-1-(1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-基)甲磺酰胺(50毫克，0.13毫摩尔，1.0eq.)溶于乙醇(5毫升)，加入5-氯-4-(三氟甲基)哒嗪-3(2H)-酮(26毫克，0.13毫摩尔，1.0eq.)。反应液于60℃反应18小时。反应液过滤，滤液通过prep-HPLC纯化得到化合物47，(S)-N-(2-((6-氧代-5-(三氟甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)-1-(1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-基)甲磺酰胺(6.78毫克，白色固体)，收率：9.3％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝560.2。
1H NMR:(400MHz,CDCl3)δ10.60(s,1H),8.45(s,2H),8.36(s,1H),7.70(s,1H),5.74–5.48(m,1H),4.81(d,J＝13.6Hz,2H),4.15–4.12(m,2H),3.94–3.83(m,1H),3.21–3.08(m,2H),3.02–2.92(m,2H),2.41–2.25(m,1H),2.10–1.95(m,2H),1.43–1.32(m,2H),1.28(d,J＝6.4Hz,3H)。
实施例48：化合物48的合成
2-氟-N-(S)-2-(6-氧代-5-(三氟甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)-2- (4-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)乙酰胺
步骤A：4-(2-乙氧基-1-氟-2-氧代亚乙基)哌啶-1-羧酸苄酯的制备
氮气保护下，将2-氟-2-磷酰基乙酸三乙酯(799毫克，3.30毫摩尔，1.1eq.)溶于四氢呋喃(12毫升)，于冰浴下降至0℃，加入氢化钠(60％,144毫克，3.60毫摩尔，1.2eq.)。反应液于0℃反应10分钟。向反应液中加入1-Cbz-4-哌啶酮(700毫克，3.00毫摩尔，1.0eq.)。反应液于25℃反应12小时。反应液倒入冰水(30毫升)中淬灭，乙酸乙酯(3x30毫升)萃取。合并有机相，无水硫酸钠干燥并浓缩有机相。所得的粗产品用硅胶柱(石油醚/乙酸乙酯＝3/1；V/V)分离纯化得到4-(2-乙氧基-1-氟-2-氧代亚乙基)哌啶-1-羧酸苄酯(300毫克，无色油状物)，收率：31.1％。.
LCMS:(ESI)[M+Na]+＝344.1。
步骤B：2-氟-2-(哌啶-4-基)乙酸乙酯的制备
将4-(2-乙氧基-1-氟-2-氧代亚乙基)哌啶-1-羧酸苄酯(300毫克，1.11毫摩尔，1.0eq)溶于甲醇(5毫升)，氮气氛围下加入钯碳(10％，100毫克)。将反应液置换氢气，氢气氛围下，反应液于25℃反应1小时。反应液过滤，滤液浓缩得到2-氟-2-(哌啶-4-基)乙酸乙酯(150毫克，无色油状物)，收率：87.7％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝190.2。
1H NMR:(400MHz,DMSO-d6)δ5.01(dd,J＝48.0,4.0Hz,1H),4.20(q,J＝7.2Hz,2H),3.12(d,J＝12.0Hz,2H),2.71–2.61(m,2H),2.13–2.00(m,1H),1.71(d,J＝12.8Hz,1H),1.57–1.40(m,4H),1.24(t,J＝7.2Hz,3H)。
步骤C：2-氟-2-(1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-基)乙酸乙酯的制备
将2-氟-2-(哌啶-4-基)乙酸乙酯(150毫克，0.79毫摩尔，1.1eq.)溶于N-甲基吡咯烷酮(12毫升)，依次加入N,N-二异丙基乙胺(373毫克，2.88毫摩尔，4.0eq.)以及2-氯-5-(三氟甲基)嘧啶(131毫克，0.72毫摩尔，1.0eq.)。反应液加热至80℃反应1.5小时。反应液降至室温并加水(50毫升)稀释，乙酸乙酯(3x50毫升)萃取。合并有机相，饱和氯化铵溶液(2x50毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩有机相。所得的粗产品用硅胶柱(石油醚/乙酸乙酯＝3/1；V/V)分离纯化得到2-氟-2-(1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-基)乙酸乙酯(140毫克，黄色固体)，收率：57.9％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝336.1。
步骤D：2-氟-2-(1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-基)乙酸的制备
将2-氟-2-(1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-基)乙酸乙酯(95毫克，0.28毫摩尔，1.0eq.)溶于四氢呋喃(1.8毫升)与水(0.6毫升)的混合溶剂，加入氢氧化锂(36毫克，0.84毫摩尔，3.0eq.)。反应液加热至40℃反应12小时。反应液加水(15毫升)稀释并用1M盐酸中和至pH＝7，乙酸乙酯(2x30毫升)萃取。合并有机相，饱和盐水(20毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩有机相得到2-氟-2-(1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-基)乙酸(80毫克，白色固体)，收率：91.9％。LCMS:(ESI)[M+H]+＝308.1。
步骤E：2-氟-N-(S)-2-(6-氧代-5-(三氟甲基)-1-(2-(三甲基硅基)乙氧基)甲 基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)-2-(1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-基)乙酰 胺的制备
将(S)-5-(1-(氨基氧基)丙烷-2-基)氨基)-4-(三氟甲基)-2-(2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)哒嗪-3(2H)-酮(68毫克，0.18毫摩尔，1.1eq.)溶于N,N-二甲基甲酰胺(5毫升)，依次加入2-氟-2-(1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-基)乙酸(50毫克，0.16毫摩尔，1.0eq.)，N,N-二异丙基乙胺(63毫克，0.48毫摩尔，3.0eq.)以及2-(7-氮杂苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(74毫克，0.19毫摩尔，1.2eq.)。反应液于25℃反应12小时。反应液加水(30毫升)淬灭，乙酸乙酯(3x40毫升)萃取。合并有机相，饱和盐水(20毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩有机相。所得的粗产品通过prep-TLC(石油醚/乙酸乙酯＝1/1；V/V)分离纯化得到2-氟-N-(S)-2-(6-氧代-5-(三氟甲基)-1-(2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)-2-(1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-基)乙酰胺(80毫克，黄色固体)，收率：73.1％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝672.2。
步骤F：2-氟-N-(S)-2-(6-氧代-5-(三氟甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧 基)-2-(4-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)乙酰胺的制备
将2-氟-N-(S)-2-(6-氧代-5-(三氟甲基)-1-(2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)-2-(1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-基)乙酰胺(40毫克，0.06毫摩尔，1.0eq.)溶于二氯甲烷(1.5毫升)，加入三氟乙酸(0.5毫升)。反应液于25℃反应0.5小时。反应液浓缩，所得的粗产品溶于甲醇(2毫升)，加入碳酸钾(25毫克，0.18毫摩尔，3.0eq.)。反应液于25℃继续反应0.5小时。反应液过滤，滤液通过prep-HPLC纯化得到化合物48，2-氟-N-(S)-2-(6-氧代-5-(三氟甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)-2-(4-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)乙酰胺(19.08毫克，白色固体)，收率：59.1％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝542.2。
1H NMR:(400MHz,DMSO-d6)δ12.53(s,1H),11.77(s,1H),8.70(s,2H),7.93(s,1H),6.64–6.55(m,1H),4.91–4.71(m,3H),4.30–4.18(m,1H),4.02–3.84(m,2H),3.00(q,J＝13.2Hz,2H),2.32–2.16(m,1H),1.72(t,J＝14.4Hz,2H),1.37–1.25(m,2H),1.22(d,J＝6.4Hz,3H)。
实施例49：化合物49的合成
(S)-2-甲基-N-(2-(6-氧代-5-(三氟甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)- 2-(1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-基)丙酰胺
49.1)中间体U的制备
步骤A：4-(1-甲氧基-2-甲基-1-氧丙烷-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯[2]与4-(1-甲 氧基-1-氧丙烷-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯[2a]的制备
将N-Boc-4-哌啶乙酸甲酯(2.00克，7.77毫摩尔，1.0eq.)溶于四氢呋喃(30毫升)，氮气保护下，于干冰-乙醇浴降至-78℃，滴加二异丙基氨基锂(2M,15.6毫升，31.2毫摩尔，4.0eq.)。反应液于-78℃反应1小时。于-78℃将碘甲烷(3.31克，23.31毫摩尔，3.0eq.)滴加至反应液中。反应液缓慢升到室温，并于25℃反应16小时。反应液加水(50毫升)淬灭，乙酸乙酯(2x50毫升)萃取。合并有机相，无水硫酸钠干燥并浓缩有机相。所得的粗产物通过prep-HPLC分离纯化得到中间体U，4-(1-甲氧基-1-氧丙烷-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(2a,1.26克，无色油状物)，收率：59.7％；和4-(1-甲氧基-2-甲基-1-氧丙烷-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(2,330毫克，无色油状物)，收率：14.9％。
4-(1-甲氧基-1-氧丙烷-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯：
LCMS:(ESI)[M+H-100]+＝172.2
4-(1-甲氧基-2-甲基-1-氧丙烷-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯
LCMS:(ESI)[M+H-100]+＝186.2
49.2)化合物49的制备
步骤A：2-甲基-2-(哌啶-4-基)丙酸甲酯盐酸盐的制备
将4-(1-甲氧基-2-甲基-1-氧丙烷-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(320毫克，1.12毫摩尔，1.0eq.)溶于二氯甲烷(5毫升)，加入盐酸二氧六环溶液(4M,5毫升)。反应液于25℃反应1小时。反应液浓缩得到2-甲基-2-(哌啶-4-基)丙酸甲酯盐酸盐(330毫克，白色固体)。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝186.2。
步骤B：2-甲基-2-(1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-基)丙酸甲酯的制备
将2-甲基-2-(哌啶-4-基)丙酸甲酯盐酸盐(243毫克，1.10毫摩尔，1.0eq.)溶于N-甲基吡咯烷酮(20毫升)，依次加入N,N-二异丙基乙胺(426毫克，3.30毫摩尔，3.0eq.)以及2-氯-5-(三氟甲基)嘧啶(200毫克，1.10毫摩尔，1.0eq.)。反应液加热至80℃反应2小时。反应液降至室温并加水(50毫升)淬灭，乙酸乙酯(3x50毫升)萃取。合并有机相，饱和盐水(2x60毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩有机相。所得的粗产物用硅胶柱(石油醚/乙酸乙酯＝2/1；V/V)分离纯化得到2-甲基-2-(1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-基)丙酸甲酯(253毫克，白色固体)，收率：70.0％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝332.2。
1H NMR:(400MHz,CDCl3)δ8.45(s,2H),4.99–4.83(m,2H),3.69(s,3H),2.85(td,J＝13.2,2.0Hz,2H),1.97–1.85(m,1H),1.70–1.62(m,2H),1.35–1.22(m,2H),1.14(s,6H)。
步骤C：2-甲基-2-(1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-基)丙酸的制备
将2-甲基-2-(1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-基)丙酸甲酯(200毫克，0.60毫摩尔，1.0eq.)溶于四氢呋喃(5毫升)与水(5毫升)的混合溶剂，加入氢氧化锂(36毫克，1.50毫摩尔，2.5eq.)。反应液于25℃反应1小时。反应液加水(20毫升)稀释，并用稀盐酸(1M)调节至pH＝6，并用乙酸乙酯(3x40毫升)萃取。合并有机相，饱和盐水洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩有机相得到2-甲基-2-(1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-基)丙酸(170毫克，黄色固体)，收率：89.4％。LCMS:(ESI)[M+H]+＝318.1。
步骤D：(S)-2-甲基-N-(2-(6-氧代-5-(三氟甲基)-1-(2-(三甲基硅基)乙氧基)甲 基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)-2-(1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-基)丙酰 胺的制备
将2-甲基-2-(1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-基)丙酸(57毫克，0.18毫摩尔，1.1eq.)溶于N,N-二甲基甲酰胺(2毫升)，依次加入(S)-5-(1-(氨基氧基)丙烷-2-基)氨基)-4-(三氟甲基)-2-(2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)哒嗪-3(2H)-酮(60毫克，0.16毫摩尔，1.0eq.)，N,N-二异丙基乙胺(62毫克，0.48毫摩尔，3.0eq.)以及2-(7-氮杂苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(72毫克，0.19毫摩尔，1.2eq.)。反应液于25℃反应1小时。反应液加水(50毫升)淬灭，乙酸乙酯(2x50毫升)萃取。合并有机相，饱和盐水(2x50毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩有机相。所得的粗产物用硅胶柱(石油醚/乙酸乙酯＝2/3；V/V)分离纯化得到(S)-2-甲基-N-(2-(6-氧代-5-(三氟甲基)-1-(2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)-2-(1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-基)丙酰胺(70毫克，黄色固体)，收率：64.2％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝682.3。
步骤E：(S)-2-甲基-N-(2-(6-氧代-5-(三氟甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙 氧基)-2-(1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-基)丙酰胺的制备
将(S)-2-甲基-N-(2-(6-氧代-5-(三氟甲基)-1-(2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)-2-(1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-基)丙酰胺(70毫克，0.10毫摩尔，1.0eq.)溶于二氯甲烷(3毫升)，加入三氟乙酸(1毫升)。反应液于25℃反应1小时。反应液浓缩，将所得的粗产物溶于甲醇(2毫升)，加入碳酸钾(62毫克，0.45毫摩尔)。反应液于25℃继续反应1小时。反应液过滤，滤液通过prep-HPLC(FA)分离纯化得到化合物49，(S)-2-甲基-N-(2-(6-氧代-5-(三氟甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)-2-(1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-基)丙酰胺(33.10毫克，白色固体)，收率：60.0％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝552.2。
1H NMR:(400MHz,CDCl3)δ10.12(s,1H),8.66(s,1H),8.45(s,2H),7.70(s,1H),6.08–5.98(m,1H),4.93(d,J＝13.2Hz,2H),4.15–4.03(m,2H),3.98–3.87(m,1H),2.86(t,J＝12.4Hz,2H),2.15–1.95(m,1H),1.75–1.60(m,2H),1.37(d,J＝6.4Hz,3H),1.32–1.23(m,2H),1.14(s,6H)。
实施例50：化合物50的合成
(S)-N-(2-(6-氧代-5-(三氟甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)-1-(1-(5- (三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-基)环丙烷甲酰胺
步骤A：1-(哌啶-4-基)环丙烷羧酸盐酸盐的制备
将1-(吡啶-4-基)环丙烷羧酸(100毫克，0.61毫摩尔，1.0eq.)溶于乙醇(5毫升)，氮气氛围下，加入浓盐酸(0.1毫升)以及氧化铂(20毫克)。将反应液置换氢气，在氢气氛围下，反应液于25℃反应16小时。反应液过滤，滤液浓缩得到1-(哌啶-4-基)环丙烷羧酸盐酸盐(126毫克,淡黄色油状物)，收率：99.9％。LCMS:(ESI)[M+H]+＝170.2。
步骤B：1-(1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-基)环丙烷羧酸的制备
将2-氯-5-(三氟甲基)嘧啶(91毫克，0.50毫摩尔，1.0eq.)溶于N-甲基吡咯烷酮(3毫升)，依次加入1-(哌啶-4-基)环丙烷羧酸盐酸盐(123毫克，0.60毫摩尔，1.2eq.)以及N,N-二异丙基乙胺(323毫克，2.50毫摩尔，5.0eq.)。反应液加热至80℃反应2小时。反应液降至室温并加水(40毫升)稀释，乙酸乙酯(2x40毫升)萃取。合并有机相，饱和氯化铵溶液(2x30毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩有机相。所得的粗产物通过prep-TLC(石油醚/乙酸乙酯＝2/1；V/V)分离纯化得到1-(1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-基)环丙烷羧酸(120毫克，淡黄色固体)，收率：76.1％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝316.2。
步骤C：(S)-N-(2-(6-氧代-5-(三氟甲基)-1-(2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)-1, 6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)-1-(1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-基)环丙烷甲酰 胺的制备
将1-(1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-基)环丙烷羧酸(50毫克，0.16毫摩尔，1.5eq.)溶于N,N-二甲基甲酰胺(2毫升)，依次加入N,N-二异丙基乙胺(68毫克，0.52毫摩尔，5.0eq.)，2-(7-氮杂苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(80毫克，0.21毫摩尔，2.0eq.)以及(S)-5-(1-(氨基氧基)丙烷-2-基)氨基)-4-(三氟甲基)-2-(2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)哒嗪-3(2H)-酮(40毫克，0.11毫摩尔，1.0eq.)。反应液于25℃反应2小时。反应液加水(30毫升)淬灭，乙酸乙酯(2x40毫升)萃取。合并有机相，饱和盐水(2x40毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩有机相。所得的粗产物用硅胶柱(石油醚/乙酸乙酯＝2/3；V/V)分离纯化得到(S)-N-(2-(6-氧代-5-(三氟甲基)-1-(2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)-1-(1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-基)环丙烷甲酰胺(55毫克，淡黄色油状物)，收率：77.4％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝680.2。
步骤D：(S)-N-(2-(6-氧代-5-(三氟甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)-1- (1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-基)环丙烷甲酰胺的制备
将(S)-N-(2-(6-氧代-5-(三氟甲基)-1-(2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)-1-(1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-基)环丙烷甲酰胺(45毫克，0.066毫摩尔，1.0eq.)溶于二氯甲烷(3毫升)，加入三氟乙酸(1毫升)。反应液于25℃反应0.5小时。反应液浓缩，所得的粗产物溶于甲醇(2毫升)，加入碳酸钾(40毫克，0.29毫摩尔)。反应液于25℃继续反应0.5小时。反应液过滤，滤液通过prep-HPLC(FA)纯化得到化合物50，(S)-N-(2-(6-氧代-5-(三氟甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)-1-(1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-基)环丙烷甲酰胺(6.57毫克，白色固体)，收率：18.1％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝550.2。
1H NMR:(400MHz,DMSO-d6)δ12.49(s,1H),11.07(s,1H),8.70–8.60(m,2H),7.87(s,1H),6.66–6.57(m,1H),4.78(d,J＝12.0Hz,2H),4.22–4.09(m,1H),3.88–3.74(m,2H),2.92–2.80(m,2H),1.81–1.61(m,3H),1.28–1.19(m,2H),1.17(d,J＝6.8Hz,3H),0.80–0.72(m,2H),0.68–0.60(m,2H)。
实施例51：化合物51的合成
N-(S)-2-{[6-氧代-5-(三氟甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基]氨基}丙氧基)-2-{1-[5- (三氟甲基)嘧啶-2-基]哌啶-4-基}丙酰胺
步骤A：2-(哌啶-4-基)丙酸甲酯盐酸盐的制备
将4-(1-甲氧基-1-氧代丙烷-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(300毫克，1.11毫摩尔，1.0eq.)溶于二氯甲烷(2毫升)，加入盐酸二氧六环溶液(4M，0.5毫升)。反应液于25℃反应1小时。反应液浓缩得到2-(哌啶-4-基)丙酸甲酯盐酸盐(230毫克，白色固体)，收率：100％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝172.1。
步骤B：2-{1-[5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]哌啶-4-基}丙酸甲酯的制备
将2-氯-5-(三氟甲基)嘧啶(235毫克，1.29毫摩尔，1.0eq.)溶于N-甲基吡咯烷酮(20毫升)，依次加入2-(哌啶-4-基)丙酸甲酯盐酸盐(267毫克，1.29毫摩尔，1.0eq.)及N,N-二异丙基乙胺(498毫克，3.85毫摩尔，3.0eq.)。反应液加热至80℃反应2小时。反应液降至室温并加水(80毫升)稀释，乙酸乙酯(3x50毫升)萃取。合并有机相，饱和盐水(2x50毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩有机相。得到的粗产物用硅胶柱(石油醚/乙酸乙酯＝1/1；V/V)分离纯化得到2-{1-[5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]哌啶-4-基}丙酸甲酯(320毫克，黄色固体)，收率：78.5％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝318.1。
1H NMR:(400MHz,CDCl3)δ8.46(s,2H),4.93–4.82(m,2H),3.69(s,3H),2.89(td,J＝12.8,2.4Hz,2H),2.37–2.28(m,1H),1.93–1.78(m,2H),1.73–1.66(m,1H),1.34–1.20(m,2H),1.16(d,J＝7.2Hz,3H)。
步骤C：2-{1-[5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]哌啶-4-基}丙酸的制备
将2-{1-[5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]哌啶-4-基}丙酸甲酯(110毫克，0.35毫摩尔，1.0eq.)溶于四氢呋喃(2毫升)与水(1毫升)的混合溶剂，加入氢氧化钠(55毫克，1.39毫摩尔，4.0eq.)。反应液加热至70℃反应18小时。反应液降至室温并加水(15毫升)稀释，用1M盐酸调节至pH＝5，乙酸乙酯(3x40毫升)萃取。合并有机相，无水硫酸钠干燥并浓缩有机相得到2-{1-[5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]哌啶-4-基}丙酸(105毫克，淡黄色固体)，收率：99.9％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝304.0。
步骤D：N-(S)-2-{[6-氧代-5-(三氟甲基)-1-{[2-(三甲基硅基)乙氧基]甲基}-1, 6-二氢哒嗪-4-基]氨基}丙氧基)-2-{1-[5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]哌啶-4-基}丙酰胺的制 备
将2-{1-[5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]哌啶-4-基}丙酸(70毫克，0.23毫摩尔，1.1eq.)溶于N,N-二甲基甲酰胺(3毫升)，依次加入N,N-二异丙基乙胺(135毫克，1.05毫摩尔，5.0eq.)，2-(7-氮杂苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(95毫克，0.25毫摩尔，1.2eq.)以及(S)-5-{[1-(氨基氧基)丙烷-2-基]氨基}-4-(三氟甲基)-2-{[2-(三甲基硅基)乙氧基]甲基}哒嗪-3(2H)-酮(80毫克，0.21毫摩尔，1.0eq.)。反应液于25℃反应2小时。向反应液加入饱和氯化铵溶液(30毫升)稀释，乙酸乙酯(2x50毫升)萃取。合并有机相，饱和盐水(2x40毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩有机相。得到的粗产物用硅胶柱(石油醚/乙酸乙酯＝3/7；V/V)分离纯化得到N-(S)-2-{[6-氧代-5-(三氟甲基)-1-{[2-(三甲基硅基)乙氧基]甲基}-1,6-二氢哒嗪-4-基]氨基}丙氧基)-2-{1-[5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]哌啶-4-基}丙酰胺(70毫克，淡黄色固体)，收率：50.2％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝668.4。
步骤E：N-(S)-2-{[6-氧代-5-(三氟甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基]氨基}丙氧基)-2- {1-[5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]哌啶-4-基}丙酰胺的制备
将N-(S)-2-{[6-氧代-5-(三氟甲基)-1-{[2-(三甲基硅基)乙氧基]甲基}-1,6-二氢哒嗪-4-基]氨基}丙氧基)-2-{1-[5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]哌啶-4-基}丙酰胺(90毫克，0.14毫摩尔，1.0eq.)溶于二氯甲烷(4毫升)，加入三氟乙酸(1毫升)。反应液于25℃反应0.5小时。反应液浓缩，得到的粗产物溶于甲醇(2毫升)，加入碳酸钾(40毫克，0.29毫摩尔)。反应液于25℃继续反应0.5小时。反应液过滤，滤液通过prep-HPLC(FA)纯化得到化合物51，N-(S)-2-{[6-氧代-5-(三氟甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基]氨基}丙氧基)-2-{1-[5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]哌啶-4-基}丙酰胺(17.08毫克，白色固体)，收率：23.5％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝538.2。
1H NMR:(400MHz,DMSO-d6)δ12.49(s,1H),11.14(s,1H),8.66(s,2H),7.90(s,1H),6.64–6.53(m,1H),4.72(t,J＝13.6Hz,2H),4.25–4.12(m,1H),3.96–3.78(m,2H),3.01–2.84(m,2H),1.89–1.78(m,2H),1.77–1.67(m,1H),1.62(d,J＝12.4Hz,1H),1.19(d,J＝6.8Hz,3H),1.16–0.96(m,5H)。
实施例52：化合物52的合成
2-(3-甲基-1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-基)-N-((S)-2-((6-氧代-5-(三 氟甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)乙酰胺
步骤A：(E)-4-(2-甲氧基-2-氧代亚乙基)-3-甲基哌啶-1-羧酸叔丁酯的制备
将2-(二甲氧基磷酰基)乙酸甲酯(95.0毫克，0.52毫摩尔，1.1eq.)溶于无水四氢呋喃(8毫升)，然后在0℃下加入氢化钠(21.0毫克，0.52毫摩尔，1.1eq.)。反应液在0℃反应20分钟，然后在0℃下加入3-甲基-4-氧代哌啶-1-羧酸叔丁酯(100.0毫克，0.47毫摩尔，1.0eq.)，反应液于室温反应40分钟。反应液加入冰水(15毫升)，用乙酸乙酯萃取(3x20毫升)，将有机相合并后用无水硫酸钠干燥并浓缩有机相。粗品用硅胶柱柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝4/1；V/V)分离纯化得到(E)-4-(2-甲氧基-2-氧代亚乙基)-3-甲基哌啶-1-羧酸叔丁酯(120毫克，无色油状)，收率：95.2％。
LCMS:(ESI)[M+H-100]+＝170.2。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ5.70(d,J＝1.6Hz,1H),3.90–3.76(m,1H),3.62(s,3H),3.58–3.40(m,2H),3.18–2.79(m,3H),2.46–2.36(m,1H),1.41(s,9H),1.02(d,J＝6.8Hz,3H)。
步骤B：4-(2-甲氧基-2-氧代乙基)-3-甲基哌啶-1-羧酸叔丁酯的制备
将(E)-4-(2-甲氧基-2-氧代亚乙基)-3-甲基哌啶-1-羧酸叔丁酯(120毫克，0.44毫摩尔，1.0eq.)溶于甲醇(2毫升)，然后加入钯碳(12毫克)。反应液多次真空置换氢气，并于40℃在氢气环境下反应40分钟。反应液用硅藻土过滤，滤饼用甲醇清洗，滤液浓缩得到4-(2-甲氧基-2-氧代乙基)-3-甲基哌啶-1-羧酸叔丁酯(110毫克，无色油状)，收率：91.6％。
LCMS:(ESI)[M+H-56]+＝216.2。
1H NMR:(400MHz,DMSO-d6)δ3.91–3.77(m,1H),3.62(ddd,J＝14.1,4.0,2.0Hz,1H),3.59(s,3H),3.03–2.88(m,1H),2.85–2.64(m,1H),2.23(dd,J＝7.5,3.1Hz,2H),2.08–1.98(m,1H),1.75(qt,J＝7.2,3.4Hz,1H),1.38(s,9H),1.36–1.31(m,1H),1.30–1.19(m,1H),0.76(d,J＝7.0Hz,3H)。
步骤C：2-(3-甲基哌啶-4-基)乙酸甲酯盐酸盐的制备(5)
将4-(2-甲氧基-2-氧代乙基)-3-甲基哌啶-1-羧酸叔丁酯(110.0毫克，0.406毫摩尔，1.0eq.)溶于甲醇(1毫升)，然后加入盐酸二氧六环溶液(1毫升)。反应液于25℃反应30分钟。反应液浓缩得到2-(3-甲基哌啶-4-基)乙酸甲酯(70.0毫克，无色油状)，收率：100％。
步骤D：2-(3-甲基-1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-基)乙酸甲酯的制备
将2-(3-甲基哌啶-4-基)乙酸甲酯(180.0毫克，1.06毫摩尔，1.1eq.)溶于N-甲基吡咯烷酮(3毫升)，然后加入N,N-二异丙基乙胺(372.0毫克，2.88毫摩尔，2.2eq.)和2-氯-5-(三氟甲基)嘧啶(300.0毫克，1.32毫摩尔，1eq.)。反应液于80℃反应1小时。反应液冷却至室温，加入水(25毫升)，用乙酸乙酯萃取(2x20毫升)，将有机相合并后用无水硫酸钠干燥，并浓缩有机相。粗品用硅胶柱柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝9/1；V/V)分离纯化得到2-(3-甲基-1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-基)乙酸甲酯(200.0毫克，淡黄色油状)，收率：60.8％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝318.2。
1H NMR:(400MHz,DMSO-d6)δ8.64(s,2H),4.49(dtd,J＝13.2,4.3,1.5Hz,1H),4.36(ddd,J＝13.2,4.1,1.7Hz,1H),3.61(s,3H),3.36–3.29(m,1H),3.19(ddd,J＝13.6,11.0,3.6Hz,1H),2.32–2.28(m,2H),2.26–2.16(m,1H),1.94(tq,J＝7.1,3.6Hz,1H),1.58–1.50(m,1H),1.47–1.39(m,1H),0.75(d,J＝7.0Hz,3H)。
步骤E：2-(3-甲基-1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-基)乙酸的制备
将2-(3-甲基-1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-基)乙酸甲酯(240.0毫克，0.723毫摩尔，1.0eq.)溶于四氢呋喃(3毫升)，然后加入水(3毫升)和氢氧化锂(70.0毫克，2.9毫摩尔，4.0eq.)。反应液于40℃反应1小时。向反应液加入水(25毫升)，用乙酸乙酯萃取(3x10毫升)，水相用稀盐酸调pH＝6,乙酸乙酯萃取(3x15毫升)，将有机相合并后用无水硫酸钠干燥，并浓缩有机相得到2-(3-甲基-1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-基)乙酸(140.0毫克，无色油状)，收率：61.3％。LCMS:(ESI)[M+H]+＝304.1。
步骤F：2-(3-甲基-1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-基)-N-((S)-2-((6-氧 代-5-(三氟甲基)-1)-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙 氧基)乙酰胺的制备
将2-(3-甲基-1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-基)乙酸(160.0毫克，0.42毫摩尔，1.0eq.)溶于四氢呋喃(5毫升)，依次加入N,N-二异丙基乙胺(109.0毫克，0.84毫摩尔，2.0eq.)，2-(7-氮杂苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(239.0毫克，0.63毫摩尔，1.5eq.)，然后将(S)-5-((1-(氨基氧基)丙烷-2-基)氨基)-4-(三氟甲基)-2-((2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)哒嗪-3(2H)-酮(140毫克，0.46毫摩尔，1.1eq.)加至反应液中。反应液于25℃反应1小时。向反应液中加水(10毫升)淬灭反应，乙酸乙酯(3x10毫升)萃取。合并有机相，饱和盐水(10毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩有机相。得到的粗产物用硅胶柱柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝4/6；V/V)分离纯化得到2-(3-甲基-1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-基)-N-((S)-2-((6-氧代-5-(三氟甲基)-1)-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)乙酰胺(170.0毫克，无色油状)，收率：48.9％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝668.3。
步骤G：2-(3-甲基-1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-基)-N-((S)-2-((6-氧 代-5-(三氟甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)乙酰胺的制备
将2-(3-甲基-1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-基)-N-((S)-2-((6-氧代-5-(三氟甲基)-1)-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)乙酰胺(170.0毫克，0.256毫摩尔，1.0eq.)溶于二氯甲烷(2毫升)，加入三氟乙酸(0.2毫升)。反应液于25℃反应20分钟。向反应液中加入饱和碳酸氢钠水溶液(5毫升)中和，二氯甲烷(3x10毫升)萃取。合并有机相，无水硫酸钠干燥并浓缩。将粗品重新溶于甲醇(3毫升)，加入碳酸钾(93.0毫克，0.67毫摩尔，3.0eq.)。反应液于25℃继续反应1小时。反应液过滤，滤液通过硅胶柱柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝1/100；V/V)分离纯化得到化合物52，2-(3-甲基-1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-基)-N-((S)-2-((6-氧代-5-(三氟甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)乙酰胺(5.7毫克，白色粉末)，收率：4.1％。
LCMS:LCMS(ESI)[M+H]+＝538.4。
1H NMR:(400MHz,DMSO-d6)δ12.52(s,1H),11.20(s,1H),8.66(s,2H),7.92(s,1H),6.63(s,1H),4.52(d,J＝13.3Hz,1H),4.37(d,J＝13.2Hz,1H),4.27–4.13(m,1H),4.00–3.80(m,2H),3.33–3.28(m,1H),3.20–3.11(m,1H),2.05–1.88(m,3H),1.54–1.45(m,1H),1.45–1.33(m,1H),1.23–1.16(m,4H),0.77(d,J＝6.9Hz,3H)。
实施例53：化合物53的合成
2-(3-氟-1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-基)-N-((S)-2-((6-氧代-5-(三氟 甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)乙酰胺
步骤A：(E)-3-氟-4-(2-甲氧基-2-氧代亚乙基)哌啶-1-羧酸叔丁酯的制备
氮气保护下，将磷酸乙酸三甲酯(755毫克，4.14毫摩尔，1.0eq.)溶于四氢呋喃(12毫升)，于冰浴下降至0℃，加入氢化钠(60％，174毫克，4.35毫摩尔，1.05eq.)。反应液于0℃反应0.5小时。将3-氟-4-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯(900毫克，4.14毫摩尔，1.0eq.)溶于四氢呋喃(4毫升)并滴加至反应液中。反应液于25℃反应2.5小时。反应液滴入冷饱和氯化铵溶液(30毫升)中淬灭，乙酸乙酯(2x40毫升)萃取。合并有机相，无水硫酸钠干燥并浓缩有机相。得到的粗产物用硅胶柱柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝10/1；V/V)分离纯化得到(E)-3-氟-4-(2-甲氧基-2-氧代亚乙基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(280毫克，白色固体)，收率：24.7％。CMS:(ESI)[M+H-100]+＝174.1。
1H NMR:(400MHz,CDCl3)δ6.01(s,1H),4.86(d,J＝47.6Hz,1H),4.19–3.82(m,1H),3.75(s,3H),3.74–3.69(m,1H),3.53–3.13(m,3H),2.58(s,1H),1.49(s,9H)。
步骤B：3-氟-4-(2-甲氧基-2-氧代乙基)哌啶-1-羧酸叔丁酯的制备
氮气保护下，将(E)-3-氟-4-(2-甲氧基-2-氧代亚乙基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(250毫克，0.92毫摩尔，1.0eq.)溶于四氢呋喃(6毫升)，加入氧化铂(46毫克)。反应液用氢气置换三次后，在氢气球保护下，反应液于25℃反应3小时。反应液过滤，滤液浓缩得到3-氟-4-(2-甲氧基-2-氧代乙基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(250毫克，白色固体)，收率：99.3％。
LCMS:(ESI)[M+H-56]+＝220.2。
步骤C：2-(3-氟哌啶-4-基)乙酸甲酯盐酸盐的制备
将3-氟-4-(2-甲氧基-2-氧代乙基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(250毫克，0.91毫摩尔，1.0eq.)溶于二氯甲烷(6毫升)，加入盐酸二氧六环溶液(4M，3毫升)。反应液于25℃反应1小时。反应液浓缩得到2-(3-氟哌啶-4-基)乙酸甲酯盐酸盐(170毫克，白色固体)，收率：88.5％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝176.1。
步骤D：2-(3-氟-1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-基)乙酸甲酯的制备
将2-(3-氟哌啶-4-基)乙酸甲酯盐酸盐(165毫克，0.78毫摩尔，1.0eq.)溶于N-甲基吡咯烷酮(2毫升)，依次加入N,N-二异丙基乙胺(302毫克，2.34毫摩尔，3.0eq.)以及2-氯-5-(三氟甲基)嘧啶(157毫克，0.86毫摩尔，1.1eq.)。反应加热至80℃反应2小时。反应液降至室温并加水(30毫升)稀释，乙酸乙酯(2x50毫升)萃取。合并有机相，饱和盐水(2x50毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩有机相。得到的粗产物用硅胶柱柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝7/1；V/V)分离纯化得到2-(3-氟-1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-基)乙酸甲酯(100毫克，白色固体)，收率：39.9％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝322.1。
1H NMR:(400MHz,CDCl3)δ8.48(s,2H),5.31–5.22(m,1H),4.97–4.92(m,1H),4.81(d,J＝47.6Hz,1H),3.71(s,3H),3.18–3.02(m,1H),3.01–2.92(m,1H),2.63–2.53(m,1H),2.40–2.32(m,1H),2.31–2.18(m,1H),1.71–1.65(m,2H)。
步骤E:2-(3-氟-1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-基)乙酸的制备
将2-(3-氟-1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-基)乙酸甲酯(95毫克，0.30毫摩尔，1.0eq.)溶于四氢呋喃(3毫升)与水(1.5毫升)的混合溶剂中，加入氢氧化锂(29毫克，1.18毫摩尔，4.0eq.)。反应液于25℃反应1小时。反应液加水(20毫升)稀释，用稀盐酸调节pH＝6。乙酸乙酯(2x50毫升)萃取。合并有机相，饱和盐水(50毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩得到2-(3-氟-1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-基)乙酸(90毫克，白色固体)，收率：99.1％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝308.1。
步骤F：2-(3-氟-1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-基)-N-((S)-2-((6-氧代- 5-(三氟甲基)-1-((2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)乙 酰胺的制备
室温下，将2-(3-氟-1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-基)乙酸(95毫克，0.31毫摩尔，1.0eq.)溶于N,N-二甲基甲酰胺(5毫升)，依次加入(S)-5-((1-(氨基氧基)丙烷-2-基)氨基)-4-(三氟甲基)-2-((2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)哒嗪-3(2H)-酮(126毫克，0.34毫摩尔，1.1eq.)，N,N-二异丙基乙胺(120毫克，0.93毫摩尔，3.0eq.)以及2-(7-氮杂苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(142毫克，0.37毫摩尔，1.2eq.)。反应液于25℃反应1小时。反应液加水(30毫升)淬灭，乙酸乙酯(2x50毫升)萃取。合并有机相，饱和盐水(2x50毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩有机相。得到的粗产物用硅胶柱柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝3/7；V/V)分离纯化得到2-(3-氟-1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-基)-N-((S)-2-((6-氧代-5-(三氟甲基)-1-((2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)乙酰胺(140毫克，白色固体)，收率：68.9％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝672.2。
步骤G:2-(3-氟-1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-基)-N-((S)-2-((6-氧代- 5-(三氟甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)乙酰胺的制备
将2-(3-氟-1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-基)-N-((S)-2-((6-氧代-5-(三氟甲基)-1-((2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)乙酰胺(130毫克，0.2毫摩尔，1.0eq.)溶于二氯甲烷(6毫升)，加入三氟乙酸(2毫升)。反应液于25℃反应1小时。反应液浓缩，粗产物溶于甲醇(4毫升)，加入碳酸钾(126毫克，0.91毫摩尔)。反应液于25℃继续反应1小时。反应液过滤，滤液通过prep-HPLC(FA)纯化得到化合物53，2-(3-氟-1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-基)-N-((S)-2-((6-氧代-5-(三氟甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)乙酰胺(24.34毫克，白色固体)，收率：22.7％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝542.2。
1H NMR:(400MHz,DMSO-d6)δ12.49(s,1H),11.22(s,1H),8.68(s,2H),7.91(s,1H),6.60(s,1H),5.10–4.98(m,1H),4.86–4.71(m,2H),4.28–4.15(m,1H),3.97–3.80(m,2H),3.27–3.15(m,1H),3.02(t,J＝12.8Hz,1H),2.34–2.27(m,1H),2.19–2.12(m,1H),2.03–1.93(m,1H),1.63–1.54(m,1H),1.47–1.33(m,1H),1.19(d,J＝6.4Hz,3H)。
实施例54：化合物54的合成
2-(3S,4R)-(3-羟基-1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-基)-N-((S)-2-((6-氧 代-5-(三氟甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)乙酰胺
步骤A：3-羟基-4-(2-甲氧基-2-氧代亚乙基)哌啶-1-羧酸叔丁酯的制备
将叔丁基过氧化氢(1.59克，17.60毫摩尔，1.0eq.)溶于1,2-二氯乙烷(60毫升)，依次加入4-(2-甲氧基-2-氧代亚乙基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(4.50克，17.60毫摩尔，1.0eq.)以及二氧化硒(1.96克，17.60毫摩尔，1.0eq.)。反应液于70℃反应12小时。反应液降至室温并加水(40毫升)稀释，二氯甲烷(3x50毫升)萃取。合并有机相，饱和盐水(50毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩有机相。得到的粗产物柱层析(乙酸乙酯/石油醚＝1/1；V/V)分离纯化得到3-羟基-4-(2-甲氧基-2-氧代亚乙基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(740毫克，黄色固体)，收率：15.5％。LCMS:(ESI)[M+H-100]+＝172.2。
1H NMR:(400MHz,CDCl3)δ6.05(s,1H),4.21–4.12(m,1H),4.02(d,J＝11.2Hz,1H),3.84–3.74(m,1H),3.72(s,3H),3.54(dt,J＝14.4,4.4Hz,1H),3.19–2.99(m,2H),2.48–2.37(m,1H),1.47(s,9H)。
步骤B：3-羟基-4-(2-甲氧基-2-氧代乙基)哌啶-1-羧酸叔丁酯的制备
氮气保护下，将钯碳(10％，483毫克)加入甲醇(10毫升)中，加入3-羟基-4-(2-甲氧基-2-氧代亚乙基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(740毫克，2.72毫摩尔，1.0eq.)。反应液置换氢气三次，于25℃氢化反应0.5小时。反应液过滤除去钯碳，滤液浓缩得到3-羟基-4-(2-甲氧基-2-氧代乙基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(670毫克，无色油状物)，收率：89.9％。
LCMS:(ESI)[M+Na]+＝295.9。
步骤C：2-(3-羟基哌啶-4-基)乙酸甲酯盐酸盐的制备
将3-羟基-4-(2-甲氧基-2-氧代乙基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(640毫克，2.34毫摩尔，1.0eq.)溶于二氯甲烷(3毫升)，加入盐酸二氧六环溶液(4M，2毫升)。反应液于25℃反应1小时。反应液浓缩得到2-(3-羟基哌啶-4-基)乙酸甲酯盐酸盐(490毫克，无色油状物)，收率：99.0％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝174.2。
步骤D：2-(3-羟基-1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-基)乙酸甲酯的制备
将2-(3-羟基哌啶-4-基)乙酸甲酯盐酸盐(490毫克，2.34毫摩尔，1.1eq.)与N,N-二异丙基乙胺(1.09克，8.44毫摩尔，4.0eq.)溶于N-甲基吡咯烷酮(12毫升)，加入2-氯-5-三氟甲基嘧啶(385毫克，2.11毫摩尔，1.0eq.)。反应液于25℃反应3小时。反应液加水(60毫升)稀释，乙酸乙酯(3x50毫升)萃取。合并有机相，饱和氯化铵溶液(2x50毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩有机相。得到的粗产物通过柱层析(乙酸乙酯/石油醚＝1/3；V/V)分离纯化得到2-(3-羟基-1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-基)乙酸甲酯(170毫克，黄色固体)，收率：25.3％。LCMS:(ESI)[M+H]+＝320.1。
1H NMR:(400MHz,CDCl3)δ8.49(s,2H),4.99(ddd,J＝12.8,4.8,2.0Hz,1H),4.84–4.76(m,1H),3.73(s,3H),3.45–3.36(m,1H),2.96(td,J＝12.8,2.8Hz,1H),2.82(dd,J＝12.8,10.4Hz,1H),2.76–2.71(m,1H),2.45(d,J＝5.2Hz,1H),2.33(dd,J＝16.0,6.4Hz,1H),2.14–2.01(m,1H),1.96–1.87(m,1H),1.55–1.45(m,1H)。
步骤E：2-(3-((四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)-1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4- 基)乙酸甲酯的制备
将2-(3-羟基-1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-基)乙酸甲酯(160毫克，0.50毫摩尔，1.0eq.)溶于四氢呋喃(6毫升)，依次加入3,4-二氢-2H-吡喃(129毫克，1.50毫摩尔，3.0eq.)以及4-甲基苯磺酸吡啶(13毫克，0.05毫摩尔，0.1eq.)。反应液于25℃反应12小时。反应液加水(10毫升)稀释，二氯甲烷(3x15毫升)萃取。合并有机相，饱和盐水(2x10毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩有机相。得到的粗产物通过柱层析(乙酸乙酯/石油醚＝1/3；V/V)分离纯化得到2-(3-((四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)-1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-基)乙酸甲酯(160毫克，黄色固体)，收率：79.0％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝404.2。
1H NMR:(400MHz,CDCl3)δ8.46(s,2H),5.27–4.96(m,1H),4.81–4.54(m,2H),4.02–3.82(m,1H),3.69(d,J＝4.0Hz,3H),3.63–3.48(m,1H),3.44–3.21(m,1H),3.01–2.75(m,2H),2.68–2.45(m,1H),2.24–2.09(m,2H),2.02–1.90(m,1H),1.86–1.70(m,3H),1.68–1.60(m,1H),1.56–1.50(m,2H),1.35–1.24(m,1H)。
步骤F：2-(3-((四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)-1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4- 基)乙酸的制备
将2-(3-((四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)-1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-基)乙酸甲酯(160毫克，0.40毫摩尔，1.0eq.)溶于四氢呋喃(3毫升)与水(1毫升)的混合溶剂，加入氢氧化锂(50毫克，1.20毫摩尔,3.0eq.)。反应液于25℃反应12小时。反应液加水(6毫升)稀释，1M稀盐酸中和至pH＝7。乙酸乙酯(3x10毫升)萃取。合并有机相，饱和盐水(10毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩有机相得到2-(3-((四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)-1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-基)乙酸(153毫克，白色固体)，收率：98.0％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝390.2。
步骤G：N-((S)-2-((6-氧代-5-(三氟甲基)-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲 基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)-2-(3-((四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)-1-(5-(三氟 甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-基)乙酰胺的制备
将2-(3-((四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)-1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-基)乙酸(153毫克，0.39毫摩尔，1.0eq.)与(S)-5-((1-(氨基氧基)丙基-2-基)氨基)-4-(三氟甲基)-2-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)哒嗪-3(2H)-酮(164毫克，0.43毫摩尔，1.1eq.)溶于N,N-二甲基甲酰胺(5毫升)，依次加入N,N-二异丙基乙胺(152毫克，1.18毫摩尔，3.0eq.)以及2-(7-氮杂苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(178毫克，0.47毫摩尔，1.2eq.)。反应液于25℃反应5小时。反应液加水(30毫升)稀释，乙酸乙酯(3x30毫升)萃取。合并有机相，饱和氯化铵溶液(2x30毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩有机相。得到的粗产物通过制备硅胶板(甲醇/二氯甲烷＝1/20；V/V)分离纯化得到N-((S)-2-((6-氧代-5-(三氟甲基)-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)-2-(3-((四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)-1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-基)乙酰胺(135毫克，黄色固体)，收率：45.5％。
LCMS:(ESI)[M+Na]+＝776.2。
步骤H：2-(3S,4R)-(3-羟基-1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-基)-N-((S)-2- ((6-氧代-5-(三氟甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)乙酰胺的制备
将N-((S)-2-((6-氧代-5-(三氟甲基)-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)-2-(3-((四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)-1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-基)乙酰胺(65毫克，0.086毫摩尔，1.0eq.)溶于二氯甲烷(2.0毫升)，加入三氟乙酸(0.6毫升)。反应液于25℃反应0.5小时。将反应液浓缩，向得到的粗产物中加入甲醇(2毫升)及碳酸钾(36毫克，0.26毫摩尔，3.0eq.)。反应液于25℃继续反应0.5小时。反应液过滤，滤液通过prep-HPLC纯化得到化合物54，2-(3S,4R)-(3-羟基-1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-基)-N-((S)-2-((6-氧代-5-(三氟甲基)-1,6-二氢哒嗪-4基)氨基)丙氧基)乙酰胺(9.17毫克，白色固体)，收率：21.0％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝540.2。
1H NMR:(400MHz,DMSO-d6)δ12.51(s,1H),11.14(s,1H),8.69(s,2H),7.93(s,1H),6.64(s,1H),5.22(d,J＝3.2Hz,1H),4.77(dd,J＝12.4,3.6Hz,1H),4.63(d,J＝13.2Hz,1H),4.29–4.16(m,1H),3.95–3.80(m,2H),3.16–3.06(m,1H),2.93(t,J＝12.4Hz,1H),2.80–2.71(m,1H),2.51–2.45(m,1H),1.95–1.83(m,1H),1.82–1.66(m,2H),1.21(d,J＝6.4Hz,3H),1.16–1.05(m,1H)。
实施例55：化合物55的合成
2-(3R,4R)-(3-羟基-1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-基)-N-((S)-2-((6-氧 代-5-(三氟甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)乙酰胺
步骤A：2-(3R,4R)-(3-羟基-1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-基)-N-((S)-2- ((6-氧代-5-(三氟甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)乙酰胺的制备
将N-((S)-2-((6-氧代-5-(三氟甲基)-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)-2-(3-((四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)-1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-基)乙酰胺(65毫克，0.086毫摩尔，1.0eq.)溶于二氯甲烷(2.0毫升)，加入三氟乙酸(0.6毫升)。反应液于25℃反应0.5小时。将反应液浓缩，向得到的粗产物中加入甲醇(2毫升)及碳酸钾(36毫克，0.26毫摩尔，3.0eq.)。反应液于25℃继续反应0.5小时。反应液过滤，滤液通过prep-HPLC纯化得到化合物55，2-(3R,4R)-(3-羟基-1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌啶-4-基)-N-((S)-2-((6-氧代-5-(三氟甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)乙酰胺(11.25毫克，白色固体)，收率：22.5％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝540.2。
1H NMR:(400MHz,DMSO-d6)δ12.50(s,1H),11.13(s,1H),8.67(s,2H),7.91(s,1H),6.67–6.56(m,1H),5.25–5.16(m,1H),4.80–4.71(m,1H),4.62(d,J＝13.2Hz,1H),4.27–4.16(m,1H),3.95–3.80(m,2H),3.14–3.05(m,1H),2.95–2.86(m,1H),2.78–2.70(m,1H),2.50–2.44(m,1H),1.90–1.82(m,1H),1.80–1.66(m,2H),1.19(d,J＝6.4Hz,3H),1.15–1.05(m,1H)。
实施例56：化合物56的合成(S)-N-(2-((6-氧代-5-(三氟甲基)-1,6-二氢哒嗪-4- 基)氨基)丙氧基)-2-(8-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-基)乙酰 胺
步骤A：8-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-羧酸叔丁酯的 制备
将2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-羧酸叔丁酯(200.0毫克，0.833毫摩尔，1.0eq.)溶于N-甲基吡咯烷酮(4毫升)，依次加入碳酸钾(345.0毫克，2.500毫摩尔，3.0eq.)以及2-氯-5-(三氟甲基)嘧啶(167.0毫克，0.916毫摩尔，1.1eq.)。反应液加热至80℃反应3小时。反应液降至室温，加水(10毫升)，乙酸乙酯(3x10毫升)萃取。合并有机相，饱和盐水(10毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩有机相。得到的粗产物用硅胶柱柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝1/1；V/V)分离纯化得到8-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-羧酸叔丁酯(290毫克，白色固体)，收率：90％。
LCMS:(ESI)[M+H-56]+＝331.2。
1H NMR:(400MHz,CDCl3)δ8.47(s,2H),4.15–4.03(m,1H),4.01–3.90(m,1H),3.87–3.77(m,1H),3.74–3.64(m,1H),3.44(dt,J＝22.3,7.0Hz,2H),3.31(s,1H),3.22(s,1H),1.79(t,J＝7.2Hz,2H),1.66–1.56(m,4H),1.47(s,9H)。
步骤B：8-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷的制备
将8-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-羧酸叔丁酯(290.0毫克，0.732毫摩尔，1.0eq)溶于1,4-二氧六环(2毫升)，然后加1,4-二氧六环-盐酸溶液(2毫升)。反应液于室温反应30分钟。反应液浓缩得到粗品8-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷(209毫克，白色固体)，收率：100％。LCMS:(ESI)[M+H]+＝287.2。
步骤C：2-(8-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2基)乙酸乙酯 的制备
将8-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷(130.0毫克，0.454毫摩尔，1.0eq.)溶于N,N-二甲基甲酰胺(3毫升)，然后加入2-溴乙酸乙酯(91.0毫克，0.545毫摩尔，1.2eq.)，N,N-二异丙基乙胺(70.3毫克，0.545毫摩尔，1.2eq.)。反应液于65℃反应1小时。向反应液中加水(10毫升)淬灭反应，乙酸乙酯(3x10毫升)萃取。合并有机相，饱和盐水(10毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩有机相。得到的粗产物用硅胶柱柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝3/1；V/V)分离纯化得到2-(8-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-基)乙酸乙酯(150毫克，无色液体)，收率：88％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝373.2。
1H NMR:(400MHz,CDCl3)δ8.45(d,2H),4.19(q,J＝7.1Hz,2H),3.85(dt,J＝8.0,4.6Hz,4H),3.33(s,2H),2.80(t,J＝6.9Hz,2H),2.63(s,2H),1.76(t,J＝6.9Hz,2H),1.71–1.59(m,4H),1.28(t,J＝7.1Hz,3H)。
步骤D：2-(8-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-基)乙酸的 制备
将2-(8-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-基)乙酸乙酯(150.0毫克，0.403毫摩尔，1.0eq.)溶于四氢呋喃(3毫升)，然后加入水(3毫升)和氢氧化锂(29.0毫克，1.209毫摩尔，3.0eq.)。反应液于25反应1小时。向反应液加入水(5毫升)，用乙酸乙酯萃取(3x10毫升)，水相用柠檬酸水溶液调pH＝6,乙酸乙酯萃取(3x15毫升)，将有机相合并后用无水硫酸钠干燥,浓缩有机相得到2-(8-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-基)乙酸(120毫克，白色固体)，收率：86％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝345.2。
步骤E：(S)-N-(2-((6-氧代-5-(三氟甲基)-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲 基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)-2-(8-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)-2,8-二氮杂螺 [4.5]癸烷-2-基)乙酰胺的制备
将2-(8-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-基)乙酸(120毫克，0.348毫摩尔，1.0eq.)溶于N,N-二甲基甲酰胺(2毫升)，依次加入N,N-二异丙基乙胺(135毫克，1.046毫摩尔，3.0eq.)，2-(7-氮杂苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(158毫克，0.417毫摩尔，1.2eq.)，然后将(S)-5-((1-(氨基氧基)丙烷-2-基)氨基)-4-(三氟甲基)-2-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)哒嗪-3(2H)-酮(159毫克，0.417毫摩尔，1.2eq.)加至反应液中。反应液于25℃反应1小时。向反应液中加水(10毫升)淬灭反应，乙酸乙酯(3x10毫升)萃取。合并有机相，饱和盐水(10毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩有机相。得到的粗产物用硅胶柱柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝1/3；V/V)分离纯化得到(S)-N-(2-((6-氧代-5-(三氟甲基)-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)-2-(8-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-基)乙酰胺(120毫克，白色固体)，收率：40％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝709.4。
步骤F：(S)-N-(2-((6-氧代-5-(三氟甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)- 2-(8-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-基)乙酰胺的制备
将(S)-N-(2-((6-氧代-5-(三氟甲基)-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)-2-(8-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-基)乙酰胺(120毫克，0.169毫摩尔，1.0eq.)溶于二氯甲烷(2毫升)，加入三氟乙酸(0.3毫升)。反应液于25℃反应1小时。向反应液中加入饱和碳酸氢钠水溶液(30毫升)中和，二氯甲烷(3x10毫升)萃取。合并有机相，无水硫酸钠干燥并浓缩有机相。将粗品重新溶于甲醇(2毫升)，加入碳酸钾(58毫克，0.423毫摩尔，2.5eq.)。反应液于25℃继续反应1小时。反应液过滤并浓缩。得到的粗产物用硅胶柱柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝1/5；V/V)分离纯化得到化合物56，(S)-N-(2-((6-氧代-5-(三氟甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)-2-(8-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-基)乙酰胺(60毫克，白色固体)，收率：61％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝579.4。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.49(s,1H),8.66(s,2H),7.90(s,1H),6.61(s,1H),4.28–4.14(m,1H),3.99–3.69(m,6H),3.01(s,2H),2.65–2.58(m,2H),2.48–2.43(m,2H),1.64(t,J＝6.7Hz,2H),1.58–1.47(m,4H),1.20(d,J＝6.5Hz,3H)。
实施例57：化合物57的合成
(S)-N-(2-((6-氧代-5-(三氟甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)-2-(1- (5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)氮杂环丁烷-3-基)乙酰胺的制备
步骤A：2-(氮杂环丁烷-3-基)乙酸甲酯的制备
将3-(2-甲氧基-2-氧代乙基)氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯(500.0毫克，2.183毫摩尔，1.0eq)溶于1,4-二氧六环(2毫升)，然后加盐酸-1,4-二氧六环溶液(2毫升)。反应液于室温反应30分钟。反应液浓缩得到粗品2-(氮杂环丁烷-3-基)乙酸甲酯(281.0毫克，白色固体)，收率：100％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝130.2。
步骤B：2-(1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)氮杂环丁烷-3-基)乙酸甲酯
将2-氯-5-(三氟甲基)嘧啶(200.0毫克，1.098毫摩尔，1.0eq.)溶于N-甲基吡咯烷酮(4毫升)，依次加入碳酸钾(455.0毫克，3.296毫摩尔，3.0eq.)以及2-(氮杂环丁烷-3-基)乙酸甲酯(184.0毫克，1.443毫摩尔，1.3eq.)。反应液加热至65℃反应3小时。反应液降至室温，加水(10毫升)，乙酸乙酯(3x10毫升)萃取。合并有机相，饱和食盐水(10毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩有机相。得到的粗产物用硅胶柱柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝1/3；V/V)分离纯化得到2-(1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)氮杂环丁烷-3-基)乙酸甲酯(160.0毫克，白色固体)，收率：53％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝276.2。
1H NMR:(400MHz,CDCl3)δ8.47(s,2H),4.38(t,J＝9.0Hz,2H),3.89(dd,J＝9.7,5.5Hz,2H),3.70(s,3H),3.21–3.03(m,1H),2.74(d,J＝7.8Hz,2H)。
步骤C：2-(1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)氮杂环丁烷-3-基)乙酸的制备
将2-(1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)氮杂环丁烷-3-基)乙酸甲酯(140.0毫克，0.509毫摩尔，1.0eq.)溶入四氢呋喃(3毫升)，然后加入水(3毫升)和氢氧化锂(36毫克，1.527毫摩尔，3.0eq.)。反应液于25℃反应3小时。向反应液加入水(5毫升)，用乙酸乙酯萃取(3x10毫升)，水相用柠檬酸水溶液调pH＝6,乙酸乙酯萃取(3x15毫升)，将有机相合并后用无水硫酸钠干燥，并浓缩有机相得到2-(1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)氮杂环丁烷-3-基)乙酸(120毫克，白色固体)，收率：90％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝262.2。
步骤D：(S)-N-(2-((6-氧代-5-(三氟甲基)-1-((2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)- 1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)-2-(1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)氮杂环丁-3-基)乙酰 胺的制备
将2-(1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)氮杂环丁烷-3-基)乙酸(90.0毫克，0.343毫摩尔，1.2eq.)溶于N,N-二甲基甲酰胺(2毫升)，依次加入N,N-二异丙基乙胺(110毫克，0.858毫摩尔，3.0eq.)，2-(7-氮杂苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(130.0毫克，0.343毫摩尔，1.2eq.)，然后将(S)-5-((1-(氨基氧基)丙烷-2-基)氨基)-4-(三氟甲基)-2-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)哒嗪-3(2H)-酮(109.0毫克，0.286毫摩尔，1.0eq.)加至反应液中。反应液于25℃反应2小时。向反应液中加水(10毫升)淬灭反应，乙酸乙酯(3x10毫升)萃取。合并有机相，饱和食盐水(10毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩有机相。得到的粗产物用硅胶柱柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝1/3；V/V)分离纯化得到(S)-N-(2-((6-氧代-5-(三氟甲基)-1-((2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)-2-(1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)氮杂环丁-3-基)乙酰胺(120毫克，白色固体)，收率：67％。LCMS:(ESI)[M+H]+＝626.4。
1H NMR:(400MHz,CDCl3)δ9.26(s,1H),8.48(s,2H),7.72(s,1H),5.93(s,1H),5.42(d,J＝9.9Hz,1H),5.29(d,J＝9.9Hz,1H),4.39(t,J＝8.9Hz,2H),4.16–4.04(m,2H),3.99–3.83(m,3H),3.68(t,J＝8.4Hz,2H),3.24–3.12(m,1H),2.65–2.50(m,2H),1.36(d,J＝6.5Hz,3H),0.95(t,J＝8.3Hz,2H),0.00(s,9H)。
步骤E：(S)-N-(2-((6-氧代-5-(三氟甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)- 2-(1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)氮杂环丁烷-3-基)乙酰胺的制备
将(S)-N-(2-((6-氧代-5-(三氟甲基)-1-((2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)-2-(1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)氮杂环丁-3-基)乙酰胺(110.0毫克，0.176毫摩尔，1.0eq.)溶于二氯甲烷(2毫升)，加入三氟乙酸(0.3毫升)。反应液于25℃反应1小时。向反应液中加入饱和碳酸氢钠水溶液(30毫升)中和，二氯甲烷(3x10毫升)萃取。合并有机相，无水硫酸钠干燥并浓缩有机相。将粗品重新溶于甲醇(2毫升)，加入碳酸钾(61毫克，0.44毫摩尔，2.5eq.)。反应液于25℃继续反应1小时。反应液过滤并浓缩，得到的粗产物用硅胶柱柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝1/5；V/V)分离纯化得到化合物57，(S)-N-(2-((6-氧代-5-(三氟甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)-2-(1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)氮杂环丁烷-3-基)乙酰胺(40毫克，白色固体)，收率：46％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝496.2。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ10.94(s,1H),9.90(s,1H),8.48(s,2H),7.75(s,1H),5.77(s,1H),4.37(q,J＝9.0Hz,2H),4.22–4.08(m,2H),4.07–3.98(m,1H),3.90(dd,J＝9.5,5.1Hz,1H),3.85–3.75(m,1H),3.22–3.08(m,1H),2.65–2.45(m,2H),1.32(d,J＝6.3Hz,3H)。
实施例58：化合物58的合成
N-((S)-2-((6-氧代-5-(三氟甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)-2-(3- (5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-6-基)乙酰胺
步骤A：3-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-6-羧酸叔丁 酯的制备
将6-(叔丁氧羰基)-3,6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷(522毫克，2.63毫摩尔，1.2eq.)溶于N-甲基吡咯烷酮(8毫升)，依次加入N,N-二异丙基乙胺(1.13克，8.77毫摩尔，4.0eq.)以及2-氯-5-(三氟甲基)嘧啶(400毫克，2.19毫摩尔，1.0eq.)。反应液加热至80℃反应2小时。反应液降至室温并加水(50毫升)稀释，乙酸乙酯(3x50毫升)萃取。合并有机相，饱和盐水(2x50毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩有机相。得到的粗产物用硅胶柱柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝7/3；V/V)分离纯化得到3-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-6-羧酸叔丁酯(680毫克，淡黄色固体)，收率：90.0％。
LCMS:(ESI)[M+H-100]+＝245.1。
1H NMR:(400MHz,CDCl3)δ8.60(s,2H),4.40–4.17(m,4H),3.71(d,J＝12.8Hz,2H),2.76–2.68(m,1H),1.52(d,J＝8.8Hz,1H),1.42(s,9H)。
步骤B：3-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷盐酸盐的制备
将3-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-6-羧酸叔丁酯(612毫克，1.78毫摩尔)溶于二氯甲烷(5毫升)，加入盐酸二氧六环溶液(4M，5毫升)。反应液于25℃反应1小时。反应液浓缩得到3-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷盐酸盐(499毫克，白色固体)，收率：99％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝245.1。
步骤C：2-(3-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-6-基)乙 酸乙酯的制备
将3-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷盐酸盐(499毫克，1.78毫摩尔，1.0eq.)溶于N-甲基吡咯烷酮(5毫升)，依次加入N,N-二异丙基乙胺(1.15克，8.89毫摩尔，5.0eq.)以及溴乙酸乙酯(594毫克，3.56毫摩尔，2.0eq.)。反应液加热至70℃反应1.5小时。反应液降至室温并加乙酸乙酯(60毫升)稀释，饱和氯化铵水溶液(3x40毫升)洗涤。有机相用无水硫酸钠干燥并浓缩有机相。得到的粗产物用硅胶柱柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝1/1；V/V)分离纯化得到2-(3-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-6-基)乙酸乙酯(394毫克，白色固体)，收率：67.1％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝331.1。
步骤D：2-(3-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-6-基)乙 酸的制备
将2-(3-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-6-基)乙酸乙酯(150毫克，0.46毫摩尔，1.0eq.)溶于四氢呋喃(3毫升)与水(1.5毫升)的混合溶剂，加入氢氧化锂(44毫克，1.82毫摩尔，4.0eq.)。反应液于25℃反应1小时。向反应液中加入1M盐酸调节至pH＝6。粗品溶液用反相色谱(乙腈/水＝20/80；V/V)分离纯化得到2-(3-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-6-基)乙酸(80毫克，黄色固体)，收率：58.3％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝303.1。
步骤E：N-((S)-2-((6-氧代-5-(三氟甲基)-1-((2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)- 1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)-2-(3-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)-3,6-二氮杂二环 [3.1.1]庚烷-6-基)乙酰胺的制备
将2-(3-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-6-基)乙酸(40毫克，0.13毫摩尔，1.1eq.)溶于N,N-二甲基甲酰胺(5毫升)，依次加入(S)-5-((1-(氨基氧基)丙烷-2-基)氨基)-4-(三氟甲基)-2-((2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)哒嗪-3(2H)-酮(44毫克，0.12毫摩尔，1.0eq.)，N,N-二异丙基乙胺(47毫克，0.36毫摩尔，3.0eq.)以及2-(7-氮杂苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(53毫克，0.14毫摩尔，1.2eq.)。反应液于25℃反应1小时。反应液加水(50毫升)淬灭，乙酸乙酯(2x40毫升)萃取。合并有机相，饱和盐水(2x40毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩有机相。得到的粗产物用硅胶柱柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝1/1；V/V)分离纯化得到N-((S)-2-((6-氧代-5-(三氟甲基)-1-((2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)-2-(3-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-6-基)乙酰胺(50毫克，黄色固体)，收率：62.5％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝667.3。
步骤F：N-((S)-2-((6-氧代-5-(三氟甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)- 2-(3-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-6-基)乙酰胺的制备
将N-((S)-2-((6-氧代-5-(三氟甲基)-1-((2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)-2-(3-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-6-基)乙酰胺(50毫克，0.07毫摩尔，1.0eq.)溶于二氯甲烷(3毫升)，加入三氟乙酸(1毫升)。反应液于25℃反应0.5小时。反应液浓缩，得到的粗产物溶于甲醇(2毫升)，加入碳酸钾(62毫克，0.45毫摩尔)。反应液于25℃继续反应0.5小时。反应液过滤，滤液通过prep-HPLC(FA)纯化得到化合物58，N-((S)-2-((6-氧代-5-(三氟甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)-2-(3-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-6-基)乙酰胺(10.18毫克，白色固体)，收率：25.3％。LCMS:(ESI)[M+H]+＝537.2。
1H NMR:(400MHz,CDCl3)δ11.26(br s,1H),8.63(s,2H),7.77(s,1H),5.99(s,1H),4.25–4.08(m,4H),4.06–3.85(m,5H),3.60–3.30(m,2H),3.03–2.90(m,1H),1.78(d,J＝9.2Hz,1H),1.36(d,J＝6.0Hz,3H)。
实施例59：化合物59的合成
N-((S)-2-((6-氧代-5-(三氟甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)-2-(3- (5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)-3,8-二氮杂二环[3.2.1]辛烷-8-基)乙酰胺
步骤A：3-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)-3,8-二氮杂二环[3.2.1]辛烷-8-羧酸叔丁 酯的制备
将2-氯-5-(三氟甲基)嘧啶(250毫克，1.37毫摩尔，1.0eq.)溶于N-甲基吡咯烷酮(5毫升)，依次加入3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛烷-8-羧酸叔丁酯(291毫克，1.37毫摩尔，1.0eq.)以及N,N-二异丙基乙胺(531毫克，4.11毫摩尔，3.0eq.)。反应液加热至80℃反应2小时。反应液降至室温并加水(50毫升)稀释，乙酸乙酯(2x50毫升)萃取。合并有机相，饱和盐水(2x50毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩有机相。得到的粗产物用硅胶柱柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝4/1；V/V)分离纯化得到3-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)-3,8-二氮杂二环[3.2.1]辛烷-8-羧酸叔丁酯(453毫克，白色固体)，收率：92.2％。
LCMS:(ESI)[M+H-56]+＝303.1。
1H NMR:(400MHz,CDCl3)δ8.53(s,2H),4.59–4.49(m,2H),4.49–4.27(m,2H),3.34–3.12(m,2H),2.06–1.88(m,2H),1.73–1.67(m,2H),1.54(s,9H)。
步骤B：3-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)-3,8-二氮杂二环[3.2.1]辛烷盐酸盐的制备
将3-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)-3,8-二氮杂二环[3.2.1]辛烷-8-羧酸叔丁酯(275毫克，0.77毫摩尔，1.0eq.)溶于二氯甲烷(3毫升)，加入盐酸二氧六环溶液(4M，3毫升)。反应液于25℃反应1小时。反应液浓缩得到3-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)-3,8-二氮杂二环[3.2.1]辛烷盐酸盐(200毫克，白色固体)，收率：88.5％。LCMS:(ESI)[M+H]+＝259.1。
步骤C：2-(3-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)-3,8-二氮杂二环[3.2.1]辛烷-8-基)乙 酸乙酯的制备
将3-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)-3,8-二氮杂二环[3.2.1]辛烷盐酸盐(270毫克，0.92毫摩尔，1.0eq.)溶于N-甲基吡咯烷酮(5毫升)，依次加入N,N-二异丙基乙胺(592毫克，4.58毫摩尔，5.0eq.)以及溴乙酸乙酯(306毫克，1.83毫摩尔，2.0eq.)。反应液加热至70℃反应1.5小时。反应液降至室温并加水(50毫升)稀释，乙酸乙酯(2x80毫升)萃取。合并有机相，饱和盐水(2x60毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩有机相。得到的粗产物用硅胶柱柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝4/1；V/V)分离纯化得到2-(3-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)-3,8-二氮杂二环[3.2.1]辛烷-8-基)乙酸乙酯(300毫克，黄色固体)，收率：95.1％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝345.1。
1H NMR:(400MHz,CDCl3)δ8.50(s,2H),4.41(dd,J＝13.2,2.0Hz,2H),4.26(q,J＝7.2Hz,2H),3.49–3.43(m,2H),3.34(d,J＝12.4Hz,2H),3.28(s,2H),2.03–1.94(m,2H),1.72–1.61(m,2H),1.33(t,J＝7.2Hz,3H)。
步骤D：2-(3-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)-3,8-二氮杂二环[3.2.1]辛烷-8-基)乙 酸的制备
将2-(3-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)-3,8-二氮杂二环[3.2.1]辛烷-8-基)乙酸乙酯(150毫克，0.44毫摩尔，1.0eq.)溶于四氢呋喃(4毫升)与水(2毫升)的混合溶剂，加入氢氧化锂(42毫克，1.74毫摩尔，4.0eq.)。反应液于25℃反应1小时。向反应液中加入1M盐酸调节pH＝6。粗品溶液通过反相色谱(乙腈/水＝20/80；V/V)分离纯化得到2-(3-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)-3,8-二氮杂二环[3.2.1]辛烷-8-基)乙酸(100毫克，黄色固体)，收率：72.6％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝317.2。
步骤E：N-((S)-2-((6-氧代-5-(三氟甲基)-1-((2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)- 1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)-2-(3-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)-3,8-二氮杂二环 [3.2.1]辛烷-8-基)乙酰胺的制备
将2-(3-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)-3,8-二氮杂二环[3.2.1]辛烷-8-基)乙酸(57毫克，0.18毫摩尔，1.1eq.)溶于N,N-二甲基甲酰胺(1毫升)，依次加入(S)-5-((1-(氨基氧基)丙烷-2-基)氨基)-4-(三氟甲基)-2-((2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)哒嗪-3(2H)-酮(60毫克，0.16毫摩尔，1.0eq.)，N,N-二异丙基乙胺(63毫克，0.49毫摩尔，3.0eq.)以及2-(7-氮杂苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(112毫克，0.29毫摩尔，1.8eq.)。反应液于25℃反应1小时。反应液加水(40毫升)淬灭，乙酸乙酯(2x50毫升)萃取。合并有机相，饱和盐水(2x50毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩有机相。得到的粗产物用硅胶柱柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝3/7；V/V)分离纯化得到N-((S)-2-((6-氧代-5-(三氟甲基)-1-((2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)-2-(3-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)-3,8-二氮杂二环[3.2.1]辛烷-8-基)乙酰胺(70毫克，黄色固体)，收率：65.4％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝681.2。
步骤F：N-((S)-2-((6-氧代-5-(三氟甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)- 2-(3-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)-3,8-二氮杂二环[3.2.1]辛烷-8-基)乙酰胺的制备
将N-((S)-2-((6-氧代-5-(三氟甲基)-1-((2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)-2-(3-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)-3,8-二氮杂二环[3.2.1]辛烷-8-基)乙酰胺(65毫克，0.1毫摩尔，1.0eq.)溶于二氯甲烷(3毫升)，加入三氟乙酸(1毫升)。反应液于25℃反应1小时。反应液浓缩，得到的粗产物溶于甲醇(2毫升)，加入碳酸钾(62毫克，0.45毫摩尔)。反应液于25℃继续反应1小时。反应液过滤，滤液通过prep-HPLC(FA)纯化得到化合物59，N-((S)-2-((6-氧代-5-(三氟甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)-2-(3-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)-3,8-二氮杂二环[3.2.1]辛烷-8-基)乙酰胺(12.30毫克，白色固体)，收率：22.9％。LCMS:(ESI)[M+H]+＝551.2。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ11.64(s,1H),8.54(s,2H),7.72(s,1H),6.00(s,1H),4.82–4.68(m,2H),4.4–4.36(m,1H),4.22–4.07(m,3H),3.98–3.82(m,2H),3.71(d,J＝14.4Hz,3H),2.34–2.25(m,2H),1.99(d,J＝8.7Hz,2H),1.30(d,J＝6.3Hz,3H)。
实施例60：化合物60的合成
(S)-N-(2-((5-乙酰基-6-氧代-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)-2-(1-(5-(三 氟甲基)嘧啶-2-基)-1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)乙酰胺
步骤A：(S)-N-(2-((5-乙酰基-6-氧代-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)- 1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)-2-(1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)-1,2,3,6-四氢吡啶- 4-基)乙酰胺的制备
将(S)-4-乙酰基-5-((1-(氨基氧基)丙-2-基)氨基)-2-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)哒嗪-3(2H)-酮(260毫克，0.73毫摩尔，1.0eq.)与2-(1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)-1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)乙酸(229毫克，0.80毫摩尔，1.1eq.)溶于N,N-二甲基甲酰胺(10毫升)，依次加入N,N-二异丙基乙胺(283毫克，2.19毫摩尔，3.0eq.)，2-(7-氮杂苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(335毫克，0.88毫摩尔，1.2eq.)。反应液于25℃反应1小时。反应液加水(50毫升)淬灭，乙酸乙酯(3x40毫升)萃取。合并有机相，饱和盐水(200毫升)洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩。得到的粗产物通过柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝1/2；V/V)纯化得到(S)-N-(2-((5-乙酰基-6-氧代-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)-2-(1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)-1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)乙酰胺(200毫克，白色固体)，收率：43.7％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝626.4。
步骤B：(S)-N-(2-((5-乙酰基-6-氧代-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)-2-(1- (5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)-1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)乙酰胺的制备
将(S)-N-(2-((5-乙酰基-6-氧代-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)-2-(1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)-1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)乙酰胺(200毫克，0.32毫摩尔，1.0eq.)溶于二氯甲烷(6毫升)，加入三氟乙酸(2毫升)。反应液于25℃反应0.5小时。反应液加入饱和碳酸氢钠溶液(30毫升)中和，二氯甲烷(3x50毫升)萃取。合并有机相，无水硫酸钠干燥并浓缩。向得到的粗产物中加入甲醇(2毫升)，水(2毫升)，碳酸钾(200毫克，1.45毫摩尔，4.5eq.)及乙二胺(132毫克，2.20毫摩尔，6.8eq.)。反应液于25℃继续反应1小时。反应加水(30毫升)稀释，二氯甲烷(3x30毫升)萃取。合并有机相，无水硫酸钠干燥并浓缩。得到的粗产物通过prep-HPLC(FA)纯化得到化合物60，(S)-N-(2-((5-乙酰基-6-氧代-1,6-二氢哒嗪-4-基)氨基)丙氧基)-2-(1-(5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)-1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)乙酰胺(38.14毫克，白色固体24.1％)，收率：24.1％。
LCMS:(ESI)[M+H]+＝496.2。
1H NMR:(400MHz,DMSO-d6)δ12.32(s,1H),11.20(s,1H),10.70(d,J＝8.4Hz,1H),8.70(s,2H),7.95(s,1H),5.62(s,1H),4.33–4.25(m,1H),4.25–4.18(s,2H),3.97–3.86(m,3H),3.85–3.78(m,1H),2.75(s,2H),2.53(s,3H),2.17–2.08(m,2H),1.23(d,J＝6.8Hz,3H)。
实施例61～87：
以下表格化合物61～87按照与实施例1～60类似的方法合成。
/>
实施例88
生物学检测
化合物对PARP7生物学酶活性的抑制测定
采用重组人PARP7蛋白试剂盒(Recombinant PARP7 protein，Abcam，目录号ab271651)进行测定。根据试剂盒说明书，首先用30μL组蛋白包被液(1.5μg/mL)涂在384孔反应板的孔中，4℃包被2小时。洗去组蛋白包被液，每孔中添加50μL封闭缓冲液，25℃孵育60分钟后洗去封闭缓冲液。配置1000倍的化合物，从1mM开始三倍稀释直至0.05μM，将配置好的化合物利用Echo转移至384孔板中，每孔25nL，使得化合物在反应体系中的最终浓度为1000nM、333.33nM、111.11nM、37.03nM、12.34nM、4.11nM、1.37nM、0.45nM、0.15nM、0.05nM，作为试验孔；同时在阴性对照孔和阳性对照孔中加入25nL DMSO。配制浓度为1.67倍的PARP7酶溶液，试验孔和阳性对照孔中各加入15μL配制好的PARP7酶溶液，同时阴性对照孔加入15μL基础Buffer，25℃孵育15分钟。接着加入10μL 2.5倍的Biotin-NAD+底物溶液，25℃孵育60分钟。洗去反应液后，用封闭缓冲液稀释链霉亲和素(streptavidin-HRP，1:5000)处理384孔反应板，每孔30μL，25℃孵育30分钟。洗去HRP缓冲液后，在每孔加入30μL HRP化学发光底物混合液，用Envision检测各孔的发光信号(RLU)。
计算公式：抑制率％＝(阳性对照平均值-RLU化合物)/(阳性对照平均值-阴性对照平均值))*100％。各化合物的剂量-反应曲线由GraphPad Prism 8拟合并得到IC50值。
各化合物对PARP7生物学酶活性抑制测定的结果列于下表1。就此而言，小于0.01μM的IC50值标记为“+++”，从0.01至0.1μM的IC50值标记为“++”，并且大于0.1至10.0μM的IC50值标记为“+”。
表1.各化合物对PARP7生物学酶活性的抑制测定(IC50)
化合物编号 PARP7 IC50 化合物编号 PARP7 IC50
1 +++ 17 +++
2 +++ 18 +++
3 ++ 19 +++
4 ++ 22 +++
5 +++ 23 +++
6 +++ 24 +++
7 +++ 26 +++
8 ++ 27 +++
9 +++ 28 +++
10 +++ 29 +++
11 +++ 30 +++
12 +++ 36 +++
13 +++ 38 +++
14 +++ 39 +++
15 +++ 48 +++
16 ++ 53 +++
通过用PARP7抑制剂处理抑制NCI-H1373癌细胞生长
采用Promega CellTiter-Glo发光法细胞活性检测试剂盒(货号：Promege-G7573)进行测定。取90μL体积NCI-H1373细胞(ATCC，目录号CRL-5866，批号58078716)悬液以3500细胞/每孔铺至96孔板的孔中，24小时后取10μL配制好的10×化合物工作液加入到细胞培养板的孔中，化合物的终浓度为10μM，3.3333μM，1.1111μM，0.3704μM，0.1235μM，0.0412μM，0.0137μM，0.0046μM，0.0015μM，0.0005μM，在溶媒对照中加入10μL DMSO，DMSO终浓度为0.2％。并且收集第0天板用于分析，培养144小时后按照CellTiter-Glo发光法细胞活性检测试剂盒说明书检测细胞的生长状态。将细胞培养板的每孔中加入50μL的CellTiter-Glo工作液，避光震荡2分钟至细胞裂解，室温放置10分钟后在2104EnVision读板器上检测各细胞孔的发光信号(RUL)。
计算公式：生长抑制率％＝(1-(RLU化合物-RLU Day0)/(RLU溶媒对照-RLUDay0))*100％。各化合物的剂量-反应曲线由GraphPad Prism 8拟合并得到IC50值。
各化合物对NCI-H1373癌细胞生长抑制测定的结果列于下表2。就此而言，小于0.1μM的IC50值标记为“+++”，从0.1至lμM标记为“++”，并且大于1至10μM标记为“+”。
表2：各化合物对NCI-H1373癌细胞的生长抑制测定(IC50)
化合物编号 NCI-H1373 IC50 化合物编号 NCI-H1373 IC50
5 +++ 31 ++
6 ++ 32 ++
7 + 34 ++
9 ++ 36 +++
10 ++ 38 ++
11 + 39 ++
12 ++ 42 +
13 + 45 +
14 + 47 +
15 ++ 48 +++
17 +++ 50 +
18 + 52 +
19 + 53 ++
20 + 54 +
22 +++ 55 +
23 ++ 56 +
24 ++ 61 +
25 +++ 62 +
26 +++
27 ++
28 ++
29 +++
30 +++
化合物药代动力学测试
实施例中，分别对化合物RBN-2397(Cat.No:HY-136174,MedChemEcpress,中国上海)、化合物17和化合物25进行小鼠药代动力学测试，以说明其在小鼠体内的药代动力学性能。
待测化合物药液的配制方法：
静脉给药溶液和灌胃给药溶液的配制：将待测化合物溶解在5％ DMSO，10％solutol HS15，85％saline配制成的溶液中。
给药剂量(以给药溶液中的化合物的量(mg)/小鼠体重(kg)计)：静脉注射(IV)3mg/kg，灌胃(PO)10mg/kg。
小鼠的药代动力学研究实验方法:
取CD-1小鼠(上海吉辉实验动物饲养有限公司)18只，雄性，体重28-31g，禁食12小时，随机分为2组(A组和B组)，每组9只，A组动物按10mg/kg剂量灌胃给予待测化合物溶液；B组动物按3mg/kg剂量尾静脉注射给予待测化合物溶液，给药前取空白血，A组动物于给药后0.25h、0.5h、1h、2h、4h、8h、24h取静脉血约110μL，B组动物于给药后0.083h、0.25h、0.5h、1h、2h、4h、8h、24h取静脉血约110μL，均置于加有肝素的试管中，离心，取血浆，-70℃保存供测试。
实验结果如表3所示。
表3：化合物RBN-2397、化合物17和化合物25的药代动力学数据比较
AUClast表示从给药时间开始到最后一个点的这段时间的药时曲线下面积，即血药浓度曲线对时间轴所包围的面积；CL(iv)表示静脉给药的药物清除率；T1/2表示药物的血浆半衰期,系指药物自体内消除半量所需的时间；Cmax表示给药后药物在血浆中所达到的最大药物浓度；F％表示药物的口服生物利用度。
如表3所示，尾静脉注射3mg/kg后，化合物17的药时曲线下面积(AUClast)，即血浆暴露量约为RBN-2397的4.4倍，化合物25的血浆暴露量约为RBN-2397的3.8倍；化合物17和25在静脉给药后的药物清除率(CL(iv))仅为RBN-2397的1/5左右，化合物17和25的药物血浆半衰期(T1/2)分别为RBN-2397的8倍和27.8倍。口服(灌胃)给药10mg/kg后，化合物17和25的最大血药浓度(Cmax)分别为RBN-2397的7.8倍和10.6倍；药时曲线下面积(AUClast)，即血浆暴露量分别约为RBN-2397的11.3倍和12.1倍；口服生物利用度(F％)分别为RBN-2397的2.6倍和3.2倍。该实验结果表明化合物17和25具有比RBN-2397更为优异的药代动力学性质，克服了化合物RBN-2397半衰期短，口服生物利用度差等缺点，有望转化为更优的临床疗效，其优异的靶点抑制活性和药代动力学性质为其扩展更广泛的临床适应症提供了更多的可能性。

Claims (21)

1.一种聚(腺苷二磷酸-核糖)聚合酶-7抑制剂，其为式(I)的化合物或其药学可接受的盐或氘代化合物，
其中，
表示双键或单键，条件是任一个原子上最多连接一个双键；
X选自卤素、C1-6卤代烷基、和C2-6烷酰基，或与Y以及与它们相连的碳原子一起形成稠合苯环或稠合哌啶环；
Y选自NH和O，或与X以及与它们相连的碳原子一起形成稠合苯环或稠合哌啶环；
A为选自-N-O-、＝N-O-、-O-N-和-O-N＝的氮氧基，且N原子在价键未饱和时任选地被氢、C1-6烷基、C2-6酰基、或C1-6磺酰基取代；
L选自-(CH2)n-、其中n为1、2或3，R5和R5’各自独立地选自氢、C1-3烷基、卤素、氘、和羟基，或R5和R5’以及与它们相连的碳原子一起形成C3-6环烷基；
R1和R2各自独立地选自氢、C1-6烷基、C1-6羟基烷基、C1-6卤代烷基、C3-6环烷基、C3-6羟基环烷基或C3-6卤代环烷基，或者R1与R2以及与它们相连的碳原子一起形成C5-8环烷基；
M为选自式(M-l)、(M-2)、(M-3)、(M-4)和(M-5)的基团：
其中D1、D2、D4、D6和D8各自独立地选自N和CH，D3、D5、D7、D9和D10各自为N，
R3各自独立地选自氢、卤素、羟基、C1-4烷基、C1-6卤代烷基、和C1-6羟基烷基，m各自独立地选自0、1或2；
G为任选地被一个或两个R4基团取代的5-6元芳杂环基团，其中R4基团各自独立地选自羟基、氰基、C1-6烷基、C1-6羟基烷基、C1-6卤代烷基、卤素、C3-6环烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、-NR6R6’、-C(O)NR6R6’、-NR6C(O)R7、-C(O)OR6、-OR6、-S(O)2NR6R6’、-NR6S(O)2R7、-S(O)2R7、-C(O)R6、和任选地被卤素取代的苯基，或者两个R4以及与它们相连的碳原子一起形成任选地被羟基、甲基、卤素或氧代取代的C5-8环烷基、苯基或吡咯基，其中R6、R6’和R7各自独立地选自氢、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、C3-6环烷基、和C1-6羟基烷基。
2.如权利要求1所述的抑制剂，其中M为选自式(M-1a)、(M-2a)、(M-3a)、(M-4a)和(M-5a)的基团：
其中D1选自N或CH，m各自独立地选自0、1或2，R3各自独立地选自氢、羟基、卤素或C1-4烷基。
3.如权利要求1所述的抑制剂，其中G为选自式(G-1)、(G-2)、(G-3)、(G-4)、(G-5)、(G-6)和(G-7)的基团：
其中Q各自独立地选自N或CH；
R4基团为任选的取代基，且各自独立地选自氰基、C1-4烷基、C1-4羟基烷基、C1-4卤代烷基、卤素、C3-6环烷基、C2-4烯基、C2-4炔基、-NR6R6’、-C(O)NR6R6’、-C(O)OR6、-OR6、-C(O)R6、和任选地被卤素取代的苯基，其中R6和R6’各自独立地选自氢和C1-4烷基。
4.如权利要求3所述的抑制剂，其中G为选自式(G-1)、(G-2)、(G-3)、(G-4)、(G-5)、(G-6)和(G-7)的基团：其中Q各自独立地为N。
5.如权利要求1所述的抑制剂，其中X选自溴、三氟甲基、和乙酰基；
Y选自NH。
6.如权利要求2所述的抑制剂，其中当式(M-1)或式(M-1a)中D1为N时，L选自-(CH2)n-、当D1为CH时，L选自-(CH2)n-、/>
7.如权利要求1所述的抑制剂，其中当A为-N-O-时，L为当A为＝N-O-时，L为当A为-O-N-时，L为/>
当A为-O-N＝时，L为/>
8.如权利要求1所述的抑制剂，其中，
X选自C1-6卤代烷基和C2-6烷酰基；
Y选自NH；
A为选自＝N-O-、-O-N-和-O-N＝的氮氧基；
L选自其中R5和R5’各自独立地选自氢或卤素；
M为选自式(M-1a)和(M-5a)的基团，
其中D1选自N或CH，m各自为1，R3独立地选自氢、卤素或C1-3烷基；
G为选自式(G-1)、(G-3)和(G-4)的基团，
其中Q选自N或CH，R4基团为任选的取代基，选自C1-6卤代烷基、卤素、C3-6环烷基、和任选地被卤素取代的苯基；
R1和R2各自独立地选自氢、C1-6烷基、和C3-6环烷基，或者R1与R2以及与它们相连的碳原子一起形成C5-8环烷基。
9.如权利要求8所述的抑制剂，其中所述抑制剂满足以下一项或多项：
X为C1-6卤代烷基；
A为-O-N-；
L为其中R5和R5’各自独立地选自氢或卤素；
M为选自式(M-1a)和(M-5a)的基团，其中D1为CH，m各自为1，R3独立地选自氢、卤素或C1-3烷基；
G为式(G-1)的基团，其中Q选自N或CH，R4选自C1-6卤代烷基、卤素、C3-6环烷基、和任选地被卤素取代的苯基；
R1和R2各自独立地选自氢和C1-6烷基。
10.如权利要求9所述的抑制剂，其中所述抑制剂满足以下一项或多项：X为三氟甲基；
L为其中R5和R5’各自为氢；
R3为氢；
G为式(G-1)的基团，其中Q为N，R4为C1-6卤代烷基。
11.如权利要求1所述的抑制剂，其中，
表示双键或单键，条件是任一个原子上最多连接一个双键；
X选自卤素和C1-6卤代烷基，或与Y以及与它们相连的碳原子一起形成稠合苯环或稠合哌啶环；
Y选自NH，或与X以及与它们相连的碳原子一起形成稠合苯环或稠合哌啶环；
A为选自-N-O-、＝N-O-、-O-N-和-O-N＝的氮氧基，且N原子在价键未饱和时任选地被氢、C1-6烷基、C2-6酰基、或C1-6磺酰基取代；
L选自-(CH2)n-、其中n为1、2或3，R5和R5’各自独立地选自氢或C1-3烷基，或R5和R5’以及与它们相连的碳原子一起形成C3-6环烷基；
R1和R2各自独立地选自氢、C1-6烷基、C1-6羟基烷基、C1-6卤代烷基、C3-6环烷基、C3-6羟基环烷基或C3-6卤代环烷基，或者R1与R2以及与它们相连的碳原子一起形成C5-8环烷基；
M为选自式(M-l)、(M-2)、(M-3)和(M-4)的基团：
其中D1、D2、D4、D6和D8各自独立地选自N和CH，D3、D5、D7和D9各自为N，R3各自独立地选自卤素、羟基、C1-4烷基和C1-6卤代烷基，
m各自独立地选自0、1或2；
G为任选地被一个或两个R4基团取代的5-6元芳杂环基团，其中R4基团各自独立地选自羟基、氰基、C1-6烷基、C1-6羟基烷基和C1-6卤代烷基，或者两个R4以及与它们相连的碳原子一起形成任选地被羟基、或甲基取代的C5-8环烷基。
12.如权利要求11所述的抑制剂，其中M为选自式(M-1a)、(M-2a)、(M-3a)和(M-4a)的基团：
其中D1选自N或CH，m各自独立地选自0、1或2，R3各自独立地选自羟基、卤素或C1-4烷基。
13.如权利要求11所述的抑制剂，其中G为选自式(G-1)和(G-2)的基团：
其中Q选自N或CH。
14.如权利要求12所述的抑制剂，其中当式(M-1)或式(M-1a)中D1为N时，L选自-(CH2)n-、当D1为CH时，L选自-(CH2)n-、/>
15.如权利要求12所述的抑制剂，其中当A为-N-O-时，L为当A为＝N-O-时，L为/>当A为-O-N-时，L为/>
当A为-O-N＝时，L为
16.如权利要求11所述的抑制剂，其为式(II)的化合物、或其药学可接受的盐或氘代化合物，
其中，表示双键或单键，条件是任一个原子上最多连接一个双键，
X选自卤素和C1-6卤代烷基，或与Y以及与它们相连的碳原子一起形成稠合苯环或哌啶环；
Y选自NH，或与X以及与它们相连的碳原子一起形成稠合苯环或哌啶环；
A为选自-N-O-、＝N-O-、-O-N-和-O-N＝的氮氧基，且N原子在价键未饱和时任选地被氢、C1-6烷基、C2-6酰基、或C1-6磺酰基取代；
L选自-(CH2)n-、其中n为1、2或3，R5和R5’各自独立地选自氢或C1-3烷基，或R5和R5’以及与它们相连的碳原子一起形成C3-6环烷基；
D选自N或CH；
Q选自N或CH；
R1和R2各自独立地选自氢、C1-6烷基、C3-6环烷基，或者R1与R2以及与它们相连的碳原子一起形成C5-8环烷基；
R3选自氢或C1-3烷基；
R4选自羟基、氰基、C1-6烷基、C1-6羟基烷基和C1-6卤代烷基。
17.如权利要求1所述的抑制剂，其中，式(I)的化合物选自：
/>
/>
/>
18.一种药物组合物，其包括根据权利要求1-17中任一项所述的抑制剂，和药学上可接受的载体或赋形剂，以及任选的其它治疗剂。
19.如权利要求1-17中任一项所述的抑制剂在制备用于治疗或预防由PARP7活性调节的或受其影响的或者其中涉及PARP7活性或过表达的疾病、障碍或病症的药物中的用途。
20.如权利要求19所述的用途，其中所述疾病、障碍或病症为过度增殖性疾病、自身免疫性或炎症性疾病。
21.如权利要求19或20所述的用途，其中所述疾病、障碍或病症为选自非小细胞肺癌、小细胞肺癌、头颈鳞癌、乳腺癌、胰腺癌、胰腺导管腺癌、结直肠癌、黑色素瘤、卵巢癌、食管鳞癌、胃癌、肝癌、口腔癌、尿路上皮癌、前列腺癌、膀胱癌、肾细胞癌、胃肠间质瘤、子宫颈癌、子宫内膜癌、横纹肌肉瘤、纤维肉瘤、神经内分泌瘤、间皮瘤、脑癌、或恶性胶质瘤的癌症，或
所述疾病、障碍或病症为选自溃疡性结肠炎、克劳恩病、多发性硬化症、自身免疫性肝病、I型糖尿病、支气管哮喘、系统性红斑狼疮、类风湿性关节炎、强制性脊柱炎、幼年特发性关节炎、银屑病、多发性肌炎、或皮肌炎的自身免疫性或炎症性疾病。
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