KR20240021923A - Parp7 억제제 및 이의 용도 - Google Patents

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Abstract

본원의 개시내용은 폴리(아데노신 디포스페이트-리보스)폴리머라제-7(PARP7) 억제제, 및 PARP7 활성을 선택적으로 억제하거나 PARP7 활성에 의해 조절되거나 영향을 받거나 PARP7 활성 또는 과발현과 관련된 질병, 장애 또는 병태를 치료 또는 예방하는데 있어서의 이의 용도에 관한 것이고, 여기서 상기 억제제는 화학식 I의 화합물 또는 약학적으로 허용 가능한 염, 중수소화 화합물, 용매화물, 에스테르, 산, 대사물 또는 이의 프로드럭을 포함한다.

Description

PARP7 억제제 및 이의 용도
본 발명은 약제 분야, 특히 피리다지논 유도체 및 이의 제조, 질환의 치료 및/또는 예방을 위한 이의 방법 및 용도에 관한 것이다.
PARP(폴리 ADP-리보스 폴리머라제)는 니코틴아미드 아데닌 디뉴클레오타이드(NAD+)를 기질로 활용하여 ADP-리보스(ADPR)를 표적 단백질로 전달하는 17가지 효소 계열로, 대부분의 진핵 세포에 존재하는 효소를 해독후 변형시키는 다기능 단백질이다. 구조적으로 손상된 DNA 분절을 인지하여 활성화되고, DNA 복구 및 게놈 안정성과 같은 다양한 세포 과정에 관여하는 DNA 손상 수용체로 간주된다.
PARP 계열은 폴리-PARP와 모노-PARP의 2개의 서브부류로 나뉜다. 폴리-PARP는 다수의 ADPR(ADP-리보스) 분자를 단백질에 순차적으로 추가하여 수백 유닛에 도달할 수 있는 ADPR 쇄를 생성한다. 대조적으로, 모노-PARP는 하나의 ADPR 분자만 부착시켜 단백질을 변형시킨다. 따라서 폴리-PARP와 모노-PARP는 상이한 ADP-리보실화된 단백질 기질을 갖고 세포 신호 전달 및 단백질 기능 조절에서 상이한 역할을 수행하기 때문에 2개의 상이한 유형의 치료 표적을 나타낸다.
모노-PARP인 PARP7(TIPARP)은 선천성 면역, 전사 인자 활성 및 세포 스트레스 반응 조절의 핵심 요소이다. 여러 연구는 PARP7이 선천적 면역 신호전달 경로, 특히 I형 인터페론 항바이러스 반응의 음성 조절자로서 중요한 역할을 하고, PARP7의 녹다운이 상이한 세포 유형에서 핵산 센서 효능제 또는 바이러스 유도된 인터페론 베타(IFN-β) 발현을 증진시킴을 보여주었다. PARP7은 바이러스 감염이나 담배 연기에 노출된 후 세포 스트레스의 상향 조절된 발현에 반응하여 활성화되는 아릴 탄화수소 수용체(AHR)의 활성의 리프레서로서 작용한다. 또한 PARP7은 간 X 수용체(LXR), 저산소증 유도성 인자 1(HIF-1)에 의해 조절된다.
PARP7은 정상 세포에서는 높게 발현되지 않고 다양한 종양에서 과활성이다. 암세포나 바이러스가 감염되는 경우, 세포 내 유리된 핵산 단편이 세포질 인터페론 조절자인 IRF-3을 인산화하여 TBK1 매개된 I형 IFN 경로를 통해 선천적 면역 인식을 유발한 다음, 핵으로 이동하여 전사 보조 활성화제와 결합하여 IFN-α 및 IFN-β의 전사를 촉진하고, 이는 이어서 수지상 세포, 대식세포, 림프구와 같은 면역 세포를 동원하여 암세포를 인지하고 사멸시킨다. 그러나 고도로 발현된 PARP7은 암세포에서 브레이크로서 작용하여 IRF-3의 인산화를 방지하고, 결과적으로 I형 IFN의 생성을 방지하여 면역 세포의 인지와 추적을 회피한다. PARP7의 억제는 암세포 성장을 효과적으로 억제하고 인터페론 신호전달을 복원하여 선천적 및 적응성 면역을 효과적으로 활성화시킨다.
PARP7은 아릴 탄화수소 수용체(AHR) 및 I형 인터페론(IFN-I) 신호전달을 음으로 조절하고, 이들 둘다는 장의 항상성 및 면역과 관련된다. PARP7의 발현 부재는 AHR 및 IFN-I 신호 전달 경로를 증진시키기 때문에, PARP7의 발현 부재는 덱스트로스 황산 나트륨(DSS) 유도된 마우스 대장염의 모델에서 IL-6, CXCL1 및 리포칼린-2를 포함한 염증 유전자의 발현을 감소시켰다. 실험 결과는 PARP7이 염증 부위로 면역 세포를 동원하는 데 관여할 수 있음을 시사한다. 따라서, PARP7의 억제는 마우스에서 DSS 유도된 대장염의 중증도를 감소시키고 염증성 장 질환 환자의 조직에서 염증 촉진성 사이토킨의 생성을 억제하였다.
비교적 적은 수의 PARP7 억제제가 보고되었고, 가장 진보된 억제제는 아직 초기 임상 개발 단계에 있다. 미국 리본 테라퓨틱스(Ribon Therapeutics)가 개발한 트리플루오로피리다지논 화합물인 RBN-2397은 PARP7의 효소 활성을 억제하고 광범위한 암세포의 성장과 증식을 억제해 마우스 이종이식 종양 모델과 동계 종양 모델에서 종양 퇴행을 유도한다(문헌참조: Gozgit J. M. et al. Cancer Cell 2021, 39, 1-13). 그러나, RBN-2397은 생체 내 혈장 노출이 낮고 혈장 반감기가 짧으며 경구 생체 이용률이 낮은것과 같은 생체 내 약동학적 성질이 불량하다. 따라서, 생체 내 약동학적 성질을 개선하고, 보다 우수한 항종양 활성 및 치료학적 효능을 가지며, 임상적 부작용을 감소시킬 수 있고, 더 많은 종양 적응증에 적용할 수 있는 PARP7 억제제의 개발이 필요하다.
발명의 요약
본 발명은 PARP7의 효소 활성을 선택적으로 억제할 수 있는 화합물을 제공하는 것을 목적으로 한다.
하나의 양상에서, 화학식 I의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염, 중수소화 화합물, 용매화물, 에스테르, 산, 대사물 또는 이의 프로드럭을 포함하는 폴리(아데노신 디포스페이트-리보스) 폴리머라제-7(PARP7) 억제제가 제공된다.
（I）
상기식에서,
는 이중 또는 단일 결합을 나타내고, 단 최대 하나의 이중 결합이 원자 중 어느 하나에 부착되어 있고;
X는 할로겐, C1-6 할로알킬 및 C2-6 알카노일로 이루어진 그룹으로부터 선택되거나, Y 및 이들이 부착된 탄소 원자와 함께 융합된 벤젠 환 또는 헤테로사이클을 형성하고;
Y는 NH와 O로 이루어진 그룹으로부터 선택되거나, X 및 이들이 부착된 탄소 원자와 함께 융합된 벤젠 환 또는 헤테로사이클을 형성하고;
A는 -N-O-, =N-O-, -O-N- 및 -O-N=으로 이루어진 그룹으로부터 선택된 질소-옥소 그룹이고, N 원자는 이의 원자가가 포화되지 않은 경우 수소, C1-6 알킬, C2-6 알카노일 또는 C1-6설포닐로 임의로 치환되고;
L은 -(CH2)n-, ,, 및 로 이루어진 그룹으로부터 선택되고, 여기서 n은 1, 2 또는 3이고, R5 및 R5'는 각각 수소, C1-3 알킬, 할로겐, 중수소 및 하이드록실로 이루어진 그룹으로부터 독립적으로 선택되거나, R5 및 R5'는 이들이 부착된 탄소 원자와 함께 C3-6 사이클로알킬을 형성하고;
R1 및 R2는 각각 독립적으로 수소, C1-6 알킬, C1-6 하이드록시알킬, C1-6 할로알킬, C3-6 사이클로알킬, C3-6 하이드록시사이클로알킬 또는 C3-6 할로사이클로알킬로 이루어진 그룹으로부터 선택되거나, R1 및 R2는 이들이 부착된 탄소 원자와 함께 C5-8 사이클로알킬을 형성하고;
M은 화학식 (M-1), (M-2), (M-3), (M-4) 및 (M-5)로 이루어진 그룹으로부터 선택된 모이어티이다:
여기서 D1, D2, D3, D4, D5, D6, D7, D8, D9 및 D10은 각각 독립적으로 N 및 CH로 이루어진 그룹으로부터 선택되고, 단 적어도 하나의 N이 M 모이어티의 환 원자로 포함되고,
R3은 각각 독립적으로 수소, 할로겐, 하이드록실, C1-4 알킬, C1-6 할로알킬, 및 C1-6 하이드록시알킬로 이루어진 그룹으로부터 선택되고,
m은 각각 독립적으로 0, 1 또는 2로 이루어진 그룹으로부터 선택되고;
G는 1개 또는 2개의 R4 그룹으로 임의로 치환된 5- 내지 6-원 방향족 헤테로사이클릭 그룹이고, 여기서 R4는 각각 독립적으로 하이드록실, 시아노, C1-6 알킬, C1-6 하이드록시알킬, C1-6 할로알킬, 할로겐, C3-6 사이클로알킬, C2-6 알케닐, C2-6 알키닐, -NR6R6', -C(O)NR6R6', -NR6C(O)R7, -C(O)OR6, -OR6, -S(O)2NR6R6', -NR6S(O)2R7, -S(O)2R7, -C(O)R6 및 임의로 할로겐으로 치환된 페닐로 이루어진 그룹으로부터 선택되거나, 2개의 R4 그룹이 이들이 부착된 탄소 원자와 함께, 하이드록실, 메틸, 할로겐 또는 옥소로 임의로 치환된 C5-8 사이클로알킬, 페닐 또는 헤테로아릴을 형성하고, 여기서 R6, R6' 및 R7은 각각 독립적으로 수소, C1-6 알킬, C1-6 할로알킬, C3-6 사이클로알킬 및 C1-6 하이드록시알킬로 이루어진 그룹으로부터 선택된다. 바람직한 구현예에서, 상기 헤테로사이클은 N 원자를 함유하는 5- 내지 8-원 모노사이클릭 환, 바람직하게는 피페리딘, 피롤리딘, 피페라진 또는 테트라하이드로피리딘이다.
일부 구현예에서, M은 화학식 (M-1a), (M-2a), (M-3a), (M-4a) 및 (M-5a)로 이루어진 그룹으로부터 선택된 모이어티이다:
여기서 D1은 N 또는 CH로 이루어진 그룹으로부터 선택되고, m은 각각 독립적으로 0, 1 또는 2로 이루어진 그룹으로부터 선택되고, R3은 각각 독립적으로 수소, 하이드록실, 할로겐 또는 C1-4 알킬로 이루어진 그룹으로부터 선택된다.
일부 구현예에서, G는 화학식 (G-1), (G-2), (G-3), (G-4), (G-5), (G- 6) 및 (G-7)으로 이루어진 그룹으로부터 선택된 모이어티이다:
여기서 Q는 각각 독립적으로 N 또는 CH로 이루어진 그룹으로부터 선택되고, 보다 바람직하게는 Q는 N이다. R4는 이전에 정의되어 있다.
바람직하게, R4 그룹은 임의의 치환체이고 각각 독립적으로 시아노, C1-4 알킬, C1-4 하이드록시알킬, C1-4 할로알킬, 할로겐, C3-6 사이클로알킬, C2-4 알케닐, C2-4 알키닐, -NR6R6', -C(O)NR6R6', -C(O)OR6, -OR6, -C(O)R6, 및 할로겐으로 임의로 치환된 페닐로 이루어진 그룹으로부터 선택되고, 여기서, R6 및 R6'은 각각 독립적으로 수소와 C1-4 알킬로 이루어진 그룹으로부터 선택된다.
바람직한 양상에서, X는 브롬, 트리플루오로메틸 및 아세틸로 이루어진 그룹으로부터 선택되거나, X는 Y 및 이들이 부착된 탄소 원자와 함께 융합된 벤젠 환 또는 융합된 피페리딘 환을 형성하고, Y는 NH로부터 선택되거나, X 및 이들이 부착된 탄소 원자와 함께 융합된 벤젠 환 또는 융합된 피페리딘 환을 형성한다.
추가의 바람직한 구현예에서, L은 화학식 (M-1) 또는 화학식 (M-1a)에서 D1이 N인 경우 -(CH2)n-, , 또는 으로 이루어진 그룹으로부터 선택되고; L은 D1이 CH인 경우 -(CH2)n-, , , 또는 으로 이루어진 그룹으로부터 선택되고, n, R5, R5'은 이전에 정의된 바와 같다.
일부 구현예에서, L은 A가 -N-O-인 경우 이고; L은 A가 =N-O-인 경우 또는 이고; L은 A가 -O-N-인 경우 , , , , , , 또는 이고; L은 A가 -O-N=인 경우 또는 이다.
본 발명의 바람직한 양상에서, 화학식 I의 화합물 또는 약제학적으로 허용되는 염, 중수소화 화합물, 용매화물, 에스테르, 산, 대사물 또는 이의 프로드럭을 포함하는 PARP7 억제제가 제공되고, 여기서, X는 C1-6 할로알킬 및 C2-6 알카노일로 이루어진 그룹에서 선택되고, X는 보다 바람직하게 C1-6 할로알킬, 특히 트리플루오로메틸이고; Y는 NH이고; A는 =N-O-, -O-N- 및 -O-N=로 이루어진 그룹으로부터 선택된 질소-옥소 그룹, 보다 바람직하게는 -O-N-이고; L은 및 으로 이루어진 그룹으로부터 선택되고, 보다 바람직하게 이고, 여기서 R5 및 R5'--는 각각 독립적으로 수소 또는 할로겐으로 이루어진 그룹으로부터 선택되고, 보다 바람직하게는 수소이고; M은 화학식 (M-1a) 및 (M-5a)로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 모이어티이고, 여기서 D1은 N 또는 CH로 이루어진 그룹으로부터 선택되고, 보다 바람직하게는 CH이고, m은 독립적으로 1이고, R3은 각각 독립적으로 수소, 할로겐 또는 C1-3 알킬로 이루어진 그룹으로부터 독립적으로 선택되고, , 보다 바람직하게는 수소이고; G는 화학식 (G-1), (G-3) 및 (G-4)로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 모이어티이고, 보다 바람직하게는 화학식 (G-1)이고, 여기서 Q는 N 또는 CH로 이루어진 그룹으로부터 선택되고, 보다 바람직하게는 N이고, R4는 C1-6 할로알킬, 할로겐, C3-6 사이클로알킬 및 임의로 할로겐으로 치환된 페닐, 특히 트리플루오로메틸로 이루어진 그룹으로부터 선택되고; R1 및 R2는 각각 독립적으로 수소, C1-6 알킬 및 C3-6 사이클로알킬로 이루어진 그룹으로부터 선택되거나, R1 및 R2는 이들이 부착된 탄소 원자와 함께 C5-8 사이클로알킬을 형성하고, 보다 바람직하게는 R1 및 R2는 각각 독립적으로 수소 및 C1-6 알킬로 이루어진 그룹으로부터 선택된다.
추가의 바람직한 양상에서, 본 발명은 화학식 I의 화합물 또는 약제학적으로 허용되는 염, 중수소화 화합물, 용매화물, 에스테르, 산, 대사물 또는 이의 프로드럭을 포함하는 PARP7 억제제를 제공하고, 여기서
는 이중 또는 단일 결합을 나타내고, 단 최대 하나의 이중 결합이 원자 중 어느 하나에 부착되어 있고;
X는 할로겐, 및 C1-6 할로알킬로 이루어진 그룹으로부터 선택되거나, Y 및 이들이 부착된 탄소 원자와 함께 융합된 벤젠 환 또는 헤테로사이클을 형성하고;
Y는 NH이거나, X 및 이들이 부착된 탄소 원자와 함께 융합된 벤젠 환 또는 헤테로사이클을 형성하고;
A는 -N-O-, =N-O-, -O-N- 및 -O-N=으로 이루어진 그룹으로부터 선택된 질소-옥소 그룹이고, N 원자는 이의 원자가가 포화되지 않은 경우 수소, C1-6 알킬, C2-6 알카노일 또는 C1-6설포닐로 임의로 치환되고;
L은 -(CH2)n-, , , 및 로 이루어진 그룹으로부터 선택되고, 여기서 n은 1, 2 또는 3이고, R5 및 R5’--는 각각 독립적으로 수소 또는 C1-3 알킬로 이루어진 그룹으로부터 선택되거나, R5 및 R5‘는 이들이 부착된 탄소 원자와 함께 C3-6 사이클로알킬을 형성하고;
R1 및 R2는 각각 독립적으로 수소, C1-6 알킬, C1-6 하이드록시알킬, C1-6 할로알킬, C3-6 사이클로알킬, C3-6 하이드록시사이클로알킬 또는 C3-6 할로사이클로알킬로 이루어진 그룹으로부터 선택되거나, R1 및 R2는 이들이 부착된 탄소 원자와 함께 C5-8 사이클로알킬을 형성하고;
M은 화학식 (M-1), (M-2), (M-3) 및 (M-4)로 이루어진 그룹으로부터 선택된 모이어티이다:
여기서 D1, D2, D3, D4, D5, D6, D7, D8 및 D9은 각각 독립적으로 N 및 CH로 이루어진 그룹으로부터 선택되고, 단 적어도 하나의 N이 M 모이어티의 환 원자로 포함된다.
R3은 각각 독립적으로 할로겐, 하이드록실, C1-4 알킬 및 C1-6 할로알킬로 이루어진 그룹으로부터 선택된다.
m은 각각 독립적으로 0, 1 또는 2로 이루어진 그룹으로부터 선택되고;
G는 1개 또는 2개의 R4 그룹으로 임의로 치환된 5- 내지 6-원 방향족 헤테로사이클릭 그룹이고, 여기서 R4는 각각 독립적으로 하이드록실, 시아노, C1-6 알킬, C1-6 하이드록시알킬 및 C1-6 할로알킬로 이루어진 그룹으로부터 선택되거나, 2개의 R4 그룹은 이들이 부착된 탄소 원자와 함께 하이드록실 또는 메틸로 임의로 치환된 C5-8 사이클로알킬을 형성한다.
추가로 바람직하게, M은 화학식 (M-1a), (M-2a), (M-3a) 및 (M-4a)로 이루어진 그룹으로부터 선택된 모이어티이다:
여기서 D1은 N 또는 CH로 이루어진 그룹으로부터 선택되고, m은 각각 독립적으로 0, 1 또는 2로 이루어진 그룹으로부터 선택되고, R3은 각각 독립적으로 하이드록실, 할로겐 또는 C1-4 알킬로 이루어진 그룹으로부터 선택된다.
또한, 추가로 바람직하게는, G는 화학식 (G-1) 및 (G-2)로 이루어진 그룹으로부터 선택된 모이티이다:
여기서 Q는 N 또는 CH로 이루어진 그룹으로부터 선택된다.
또한 특히 바람직하게, L은 화학식 (M-1) 또는 화학식 (M-1a)에서 D1이 N인 경우, -(CH2)n-, , 또는 으로 이루어진 그룹으로부터 선택되고; L은 D1이 CH인 경우 -(CH2)n-, , , 또는 으로 이루어진 그룹으로부터 선택된다.
또한 특히 바람직하게, L은 A가 -N-O-인 경우 이고; L은 A가 =N-O-인 경우 또는 이고; L은 A가 -O-N-인 경우 , , ,, , , 또는 이고; L은 A가 -O-N=인 경우 또는 이다.
본 발명은 또한 바람직하게 화학식 II의 화합물 또는 약제학적으로 허용되는 염, 중수소화 화합물, 용매화물, 에스테르, 산, 대사물 또는 이의 프로드럭을 포함하는 PARP7 억제제를 제공한다.
（II）
여기서 는 이중 또는 단일 결합을 나타내고, 단 최대 하나의 이중 결합이 원자 중 어느 하나에 부착되어 있고;
X는 할로겐 및 C1-6 할로알킬로 이루어진 그룹으로부터 선택되거나, Y 및 이들이 부착된 탄소 원자와 함께 융합된 벤젠 환 또는 피페리딘 환을 형성하고;
Y는 NH로부터 선택되거나, X 및 이들이 부착된 탄소 원자와 함께 융합된 벤젠 환 또는 피페리딘 환을 형성하고;
A는 -N-O-, =N-O-, -O-N- 및 -O-N=으로 이루어진 그룹으로부터 선택된 질소-옥소 그룹이고, N 원자는 이의 원자가가 포화되지 않은 경우 수소, C1-6 알킬, C2-6 알카노일 또는 C1-6설포닐로 임의로 치환되고;
L은 -(CH2)n-, , , 및 로 이루어진 그룹으로부터 선택되고, 여기서 n은 1, 2 또는 3이고, R5 및 R5’--는 각각 독립적으로 수소 또는 C1-3 알킬로 이루어진 그룹으로부터 선택되거나, R5 및 R5‘는 이들이 부착된 탄소 원자와 함께 C3-6 사이클로알킬을 형성하고;
D는 N 또는 CH로 이루어진 그룹으로부터 선택되고;
Q는 N 또는 CH로 이루어진 그룹으로부터 선택되고;
R1 및 R2는 각각 독립적으로 수소, C1-6 알킬, C3-6 사이클로알킬로 이루어진 그룹으로부터 선택되거나, R1 및 R2는 이들이 부착된 탄소 원자와 함께 C5-8 사이클로알킬을 형성하고;
R3은 수소 또는 C1-3 알킬로 이루어진 그룹으로부터 선택되고;
R4는 하이드록실, 시아노, C1-6 알킬, C1-6 하이드록시알킬 및 C1-6 할로알킬로 이루어진 그룹으로부터 선택된다.
본 발명의 다른 양상에서, 본 발명의 화합물, 또는 약제학적으로 허용되는 염, 중수소화 화합물, 용매화물, 에스테르, 산, 대사물 또는 이의 프로드럭 및 약제학적으로 허용되는 담체 또는 부형제, 및 임의로 다른 치료학적 제제를 포함하는 약학적 조성물이 제공된다.
본 발명의 다른 양상은 또한 PARP7의 활성을 선택적으로 억제하기 위한 본 발명의 화합물, 또는 약제학적으로 허용되는 염, 중수소화 화합물, 용매화물, 에스테르, 산, 대사물 또는 이의 프로드럭의 방법 또는 용도에 관한 것이거나, PARP7의 활성을 선택적으로 억제하기 위한 약물의 제조에서 본 발명의 화합물, 또는 약제학적으로 허용되는 염, 중수소화 화합물, 용매화물, 에스테르, 산, 대사물 또는 이의 프로드럭의 용도에 관한 것이다.
본 발명의 추가의 양상에서, 또한 PARP7 활성에 의해 조절되거나 영향을 받거나 PARP7 활성을 수반하는 질환, 장애 또는 병태를 치료 또는 예방하기 위한, 본 발명의 화합물, 또는 약제학적으로 허용되는 염, 중수소화 화합물, 용매화물, 에스테르, 산, 대사물 또는 이의 프로드럭의 방법 또는 용도에 관한 것이거나, PARP7 활성에 의해 조절되거나 영향을 받거나 PARP7 활성 또는 과발현을 수반하는 질환, 장애 또는 병태를 치료 또는 예방하기 위한 약품의 제조에 있어서본 발명의 화합물, 또는 약제학적으로 허용되는 염, 중수소화 화합물, 용매화물, 에스테르, 산, 대사물 또는 이의 프로드럭에 관한 것이다.
바람직하게는, PARP7 활성에 의해 조절되거나 영향을 받거나 PARP7 활성 또는 과발현을 수반하는 질환, 장애 또는 병태는 과증식성 질환, 특히 암, 자가면역 또는 염증성 질환이다.
보다 바람직한 양상에서, 상기 질환, 장애 또는 병태는 편평 폐암, 폐 선암종, 비소세포 폐암, 소세포 폐암, 두경부 편평 세포 암종, 유방암, 췌장암, 췌장관 선암종, 결장직장암, 흑색종, 난소암, 식도 편평 세포 암종, 위암, 간암, 구강암, 요로상피암, 전립선암, 방광암, 신장 세포 암종, 위장관 기질 종양, 자궁경부암, 자궁내막암, 횡문근육종, 섬유육종, 신경내분비 종양, 중피종, 뇌암 또는 악성 신경교종 등을 포함하지만 이에 제한되지 않는 암으로 이루어진 그룹으로부터 선택된다.
다른 바람직한 양상에서, 상기 질환, 장애 또는 병태는 궤양성 대장염, 크론 질환, 다발성 경화증, 자가면역성 간 질환, I형 진성 당뇨병, 기관지 천식, 전신성 홍반성 루푸스, 류마티스 관절염, 강직성 척추염, 청소년 특발성 관절염, 건선, 다발성 근염 또는 피부근염 등을 포함하지만 이에 제한되지 않는 자가면역 또는 염증성 질환으로 구성된 그룹으로부터 선택된다.
정의
달리 정의되지 않는 한, 본원에서 사용된 모든 기술 용어 및 과학 용어들은 본 발명이 속하는 기술분야의 당업자에 의해 통상적으로 이해되는 바와 동일한 의미를 갖는다. 본원 명세서에서, 내용이 명백하게 달리 나타내지 않는 한, 단수 형태는 복수 형태도 포함한다. 본원에서 언급된 모든 공개공보, 특허 출원, 특허 및 기타 참조 문헌은 참조로서 본원에 인용된다. 이해충돌이 발생하는 경우 정의를 포함한 본원 명세서가 우선한다. 또한, 재료, 방법 및 구현예는 예시적인 것일 뿐이며 본 발명의 범위를 제한하려고 하는 것이 아니다.
달리 지적되지 않는 경우, 본 발명은 당업계의 기술 범위 내에 있는 질량 분광법, NMR, HPLC, 단백질 화학, 생화학, 재조합 DNA 기술 및 약리학의 통상적인 방법을 사용한다. 구체적인 정의가 제공되지 않는 경우, 본원에 기재된 분석 화학, 합성 유기 화학, 의료 및 약제학적 화학에 화학적으로 관련된 명명법 및 실험실 운영 및 기술은 당업자에게 공지되어 있다. 일반적으로, 전술한 기술 및 단계는 당업자에게 널리 공지되어 있고 , 본 명세서에서 인용 및 논의되는 다양한 일반적이고 보다 구체적인 문헌에 기재된 통상적인 방법에 의해 수행될 수 있다.
용어 "알킬"은 분지형 또는 직쇄형 알킬일 수 있는, 지방족 탄화수소 그룹을 지칭한다. 구조에 따라 알킬 그룹은 1가 그룹 또는 2가 그룹(즉, 알킬렌)일 수 있다. 본 발명의 목적을 위해, 알킬 그룹은 바람직하게 탄소수 1 내지 8의 알킬 그룹, 보다 바람직하게 탄소수 1 내지 6의 "저급 알킬 그룹", 및 보다 더 바람직하게 탄소수 1 내지 4의 알킬이다. 예시적인 알킬 그룹은 메틸, 에틸, 프로필, 부틸, 펜틸, 헥실 등을 포함하지만 이에 제한되지 않는다. 본원에서 "알킬"에 대한 언급은 그러한 알킬 그룹의 모든 가능한 구성 및 형태를 포함하고, 예를 들어, 본원에서 "프로필"에 대한 언급은 n-프로필 및 이소프로필을 포함하고, "부틸"은 n-부틸, 이소부틸 및 3급-부틸을 포함하며, "펜틸"은 무엇보다 n-펜틸, 이소펜틸, 네오펜틸, 3급-펜틸 및 펜탄-3-일을 포함하는 것으로 이해되어야 한다.
용어 "알콕시"는 -O-알킬을 지칭하고, 여기서 알킬은 본원에서 정의된 바와 같다. 전형적인 알콕시 그룹은 메톡시, 에톡시, 프로폭시, 부톡시, 펜톡시, 헥속시 등을 포함하지만 이에 제한되지 않는다.
용어 "알콕시알킬"은 본원에 정의된 바와 같은 알킬 그룹이 본원에 정의된 바와 같은 알콕시 그룹으로 치환됨을 의미한다.
용어 "사이클로알킬"은 탄소와 수소만을 포함하는 모노사이클릭 또는 폴리사이클릭 그룹을 지칭한다. 사이클로알킬 그룹은 3 내지 12개 환 탄소 원자를 갖는 그룹을 포함한다. 구조에 따라 사이클로알킬 그룹은 1가 그룹 또는 2가 그룹(예를 들어, 사이클로알킬렌)일 수 있다. 본 발명에서 사이클로알킬 그룹은 바람직하게 탄소수 3 내지 8의 사이클로알킬, 및 보다 바람직하게 탄소수 3 내지 6의 "저급 사이클로알킬 그룹"이다. 사이클로알킬의 예는 사이클로프로필, 사이클로부틸, 사이클로펜틸, 사이클로헥실, 사이클로헵틸, 사이클로옥틸, 사이클로펜테닐, 사이클로헥세닐, 사이클로헵테닐 및 아다만틸을 포함하지만 이에 제한되지 않는다.
용어 "알킬(사이클로알킬)" 또는 "사이클로알킬알킬"은 본원에 정의된 바와 같은 알킬 그룹이 본원에 정의된 바와 같은 사이클로알킬 그룹으로 치환됨을 의미한다. 사이클로알킬알킬 그룹의 예는 사이클로프로필메틸, 사이클로부틸메틸, 사이클로펜틸메틸, 사이클로헥실메틸 등을 포함한다.
"방향족"이라는 용어는 외곽 π 전자계를 갖고 4n+2 π 전자를 포함하는 평면 환(여기서, n은 정수이다)을 지칭한다. 방향족 환은 5개, 6개, 7개, 8개, 9개 또는 9개 초과의 원자를 포함할 수 있다. 방향족 그룹은 임의로 치환될 수 있다. 용어 "방향족"은 카보사이클릭 아릴(예를 들어, 페닐) 및 헤테로사이클릭 아릴(또는 "헤테로아릴" 또는 "헤테로방향족") 그룹(예를 들어, 피리딘)을 포함한다. 상기 용어는 모노사이클릭 또는 헤테로사이클릭 폴리사이클릭(즉, 인접한 탄소 원자 쌍을 공유하는 환) 그룹을 포함한다.
본원에서 사용되는 "아릴"이라는 용어는 환을 포함하는 각 원자가 탄소 원자인 방향족 환을 지칭한다. 아릴 환은 5개, 6개, 7개, 8개, 9개 또는 9개 초과의 원자를 포함할 수 있다. 아릴 환은 임의로 치환될 수 있다. 아릴 그룹의 예는 페닐, 나프틸, 페난트레닐, 안트라세닐, 플루오레닐 및 인데닐을 포함하지만 이에 제한되지 않는다. 구조에 따라 아릴 그룹은 1가 그룹 또는 2가 그룹(즉, 아릴리덴)일 수 있다.
용어 "아릴옥시"는 -O-아릴을 지칭하고, 여기서 아릴은 본원에 정의된 바와 같다.
용어 "헤테로아릴"은 질소, 산소 및 황으로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 하나 이상의 사이클릭 헤테로원자를 포함한다. N-함유 "헤테로아릴" 부분은 방향족 그룹에서 환의 백본 원자가 질소 원자임을 의미한다. 구조에 따라 헤테로아릴 그룹은 1가 그룹 또는 2가 그룹(즉, 서브헤테로아릴 그룹)일 수 있다. 헤테로아릴 그룹의 예는 피리디닐, 이미다졸릴, 피리미디닐, 피라졸릴, 트리아졸릴, 피라지닐, 테트라졸릴, 푸라닐, 티에닐, 이속사졸릴, 티아졸릴, 옥사졸릴, 이소티아졸릴, 피롤릴, 퀴놀릴, 이소퀴놀릴, 인돌릴, 벤조이미다졸릴, 벤조푸라닐, 인다졸릴, 인다졸릴, 프탈라지닐, 피리다지닐, 이소인돌릴, 프테리디닐, 퓨리닐, 옥사디아졸릴, 티아디아졸릴, 푸라자닐, 벤조푸라자닐, 벤조티에닐, 벤조티아졸릴, 벤족사졸릴, 퀴나졸리닐, 나프티리디닐, 푸라조피리디닐 등을 포함하지만 이에 제한되지 않는다.
용어 "알킬(아릴)" 또는 "아릴알킬"은 본원에 정의된 바와 같은 알킬 그룹이 본원에 정의된 바와 같은 아릴 그룹으로 치환됨을 의미한다. 알킬(아릴)의 예는 벤질, 페닐에틸 등을 포함한다.
용어 "알킬(헤테로아릴)" 또는 "사이클로아릴알킬"은 본원에 정의된 바와 같은 알킬 그룹이 본원에 정의된 바와 같은 헤테로아릴 그룹으로 치환됨을 의미한다.
본원에 사용된 용어 "헤테로알킬"은 하나 이상의 백본 쇄 원자가 산소, 질소, 황, 규소, 인 또는 이들의 조합과 같은 헤테로원자인 본원에 정의된 바와 같은 알킬 그룹을 지칭한다. 상기 헤테로원자(또는 원자들)은 헤테로알킬 그룹 내 임의의 위치에서 또는 헤테로알킬 그룹이 분자의 나머지 부분과 연결된 위치에 위치할 수 있다.
본원에 사용된 바와 같은 용어 '헤테로사이클로알킬'은 환을 포함하는 원자 중 하나 이상이 질소, 산소 및 황으로 이루어진 그룹으로부터 선택된 헤테로원자인 비방향족 환을 지칭한다. 헤테로사이클로알킬 환은 3개, 4개, 5개, 6개, 7개, 8개, 9개 이상의 원자를 포함하는 모노사이클릭 환 또는 폴리사이클릭 환일 수 있다. 헤테로사이클로알킬 환은 임의로 치환될 수 있다. 헤테로사이클로알킬의 예는 락탐, 락톤, 사이클릭 이민, 사이클릭 티오이민, 사이클릭 카바메이트, 테트라하이드로티오피란, 4H-피란, 테트라하이드로피란, 피페리딘, 1,3-다이옥신, 1,3-디옥산, 1,4-디옥산(dioxan), 1,4-디옥산(dioxane), 피페라진, 1,3-옥사티오사이클로헥산, 1,4-옥사티오사이클로헥산, 1,4-옥사티오사이클로헥산, 테트라하이드로-1.4-티아진, 2H-1,2-옥사진, 말레이미드, 숙신이미드, 바비투르산, 티오바비투르산, 디옥시피페라진, 에틸렌카바존, 디하이드로우라실, 모르폴린, 트리옥산, 헤사하이드로-1,3,5-트리아진, 테트라하이드로티오펜, 테트라하이드로푸란, 피롤리딘, 피롤리딘, 이미다졸리딘, 피롤리돈, 피라졸린, 피라졸리딘, 이미다졸리딘, 이미다졸리딘, 1,3-디옥사헥센, 1 ,3-디옥솔란, 1,3-디티올란, 1,3-디티올란, 1,3-디티올란, 이속사졸린, 이속사졸리딘, 옥사졸린, 옥사졸리딘, 옥사졸리디논, 티아졸린, 티아졸리딘 ?? 1,3-옥사티올란을 포함하지만 이에 제한되지 않는다. 구조에 따라 헤테로사이클로알킬 그룹은 1가 그룹 또는 2가 그룹(즉, 서브헤테로사이클로알킬 그룹)일 수 있다.
용어 "알킬(헤테로사이클로알킬)" 또는 "헤테로사이클로알킬알킬"은 본원에 정의된 바와 같은 알킬 그룹이 본원에 정의된 바와 같은 헤테로사이클로알킬 그룹으로 치환됨을 의미한다.
용어 "알콕시(헤테로사이클로알킬)" 또는 "헤테로사이클로알킬알콕시"는 본원에 정의된 바와 같은 알콕시 그룹이 본원에 정의된 바와 같은 헤테로사이클로알킬 그룹으로 치환됨을 의미한다.
용어 “할로겐” 또는 “할로겐들”은 불소, 염소, 브롬 및 요오드를 의미한다.
용어 "할로알킬", "할로알콕시" 및 "할로헤테로알킬"은 적어도 하나의 수소가 할로겐 원자로 대체된 알킬, 알콕시 또는 헤테로알킬 구조를 포함한다. 일부 구현예에서, 2개 이상의 수소 원자가 할로겐 원자로 대체된 경우, 상기 할로겐 원자는 서로 동일하거나 상이하다.
용어 "하이드록실"은 -OH 그룹을 지칭한다.
용어 "시아노"는 -CN 그룹을 지칭한다.
용어 “에스테르 그룹”은 화학식 -COOR을 갖는 화학 부위를 의미하고, 여기서 R은 알킬, 사이클로알킬, 아릴, 헤테로아릴(사이클릭 탄소로 연결된) 및 헤테로사이클릭(사이클릭 탄소로 연결된)으로 이루어진 그룹으로부터 선택된다.
용어 "아미노"는 -NH2 그룹을 지칭한다.
용어 "카바모일"은 -CO-NH2 그룹을 지칭한다.
용어 "알킬카바모일"은 -CO-NH-R 그룹을 지칭하고, 여기서 R은 본원에 정의된 바와 같은 알킬 그룹이다.
용어 "아미드" 또는 "아실아미노"는 -NR-CO-R'을 지칭하고, 여기서 R 및 R'는 각각 독립적으로 수소 또는 알킬이다.
용어 "알킬아미노"는 1개 또는 2개의 알킬 그룹으로 추가로 치환된 아미노 치환체를 지칭하고, 구체적으로 그룹 -NRR'을 지칭하고, 여기서 R 및 R'는 각각 독립적으로 수소 또는 저급 알킬 그룹으로 이루어진 그룹으로부터 선택되고, 단, -NRR'은 -NH가 아니다. “알킬아미노"는 -NH의 질소가 적어도 하나의 알킬 그룹에 부착된 화합물 그룹을 포함한다. 알킬아미노 그룹의 예는 메틸아미노, 에틸아미노 등을 포함하지만 이에 제한되지 않는다. “디알킬아미노"는 -NH2의 질소가 적어도 2개의 다른 알킬 그룹에 부착된 모이어티를 포함한다. 디알킬아미노 그룹의 예는 디메틸아미노, 디에틸아미노 등을 포함하지만 이에 제한되지 않는다.
"아릴아미노" 및 "디아릴아미노"라는 용어는 1개 또는 2개의 아릴 그룹으로 추가로 치환된 아미노 치환체, 특히 -NRR' 그룹을 지칭하고, 여기서 R 및 R'--는 각각 독립적으로 수소, 저급 알킬 또는 아릴로 이루어진 그룹으로부터 선택되고, 여기서 N은 각각 적어도 1개 또는 2개의 아릴 그룹에 부착되어 있다.
용어 "사이클로알킬아미노"는 본원에 정의된 바와 같은 1개 또는 2개의 사이클로알킬 그룹으로 추가로 치환된 아미노 치환체를 의미한다.
용어 "헤테로알킬아미노"는 본원에 정의된 바와 같은 1개 또는 2개의 헤테로알킬 그룹으로 추가로 치환된 아미노 치환체를 의미한다.
본원에서 용어 "아릴알킬아미노"는 그룹 -NRR'을 지칭하고, 여기서 R은 저급 아릴알킬 그룹이고 R'는 수소, 저급 알킬, 아릴 또는 저급 아릴알킬이다.
용어 "헤테로아릴아미노"는 본원에 정의된 바와 같은 1개 또는 2개의 헤테로아릴 그룹으로 추가로 치환된 아미노 치환체를 의미한다.
용어 "헤테로사이클로알킬아미노"는 본원에 정의된 바와 같은 아미노 그룹이 본원에 정의된 바와 같은 헤테로사이클로알킬 그룹으로 치환됨을 의미한다.
용어 "알킬아미노알킬"은 본원에 정의된 바와 같은 알킬 그룹이 본원에 정의된 바와 같은 알킬아미노 그룹으로 치환됨을 의미한다.
용어 "아미노알킬"은 하나 이상의 아미노 그룹으로 추가로 치환된 알킬 치환체를 의미한다.
용어 "아미노알콕시"는 하나 이상의 아미노 그룹으로 추가로 치환된 알콕시 치환체를 의미한다.
용어 "하이드록시알킬” 또는 “하이드록실알킬”은 하나 이상의 하이드록실 그룹으로 추가로 치환된 알킬 치환체를 지칭한다.
용어 "시아노알킬"은 하나 이상의 시아노 그룹으로 추가로 치환된 알킬 치환체를 의미한다.
"알카노일"이라는 용어는 유기 또는 무기 산소 함유 산에서 하이드록실 그룹을 제거한 후 남은 원자의 1가 그룹을 지칭하고, 일반 화학식 R-M(O)-을 갖고, 여기서 M은 일반적으로 C이다.
용어 "카보닐"은 이중 결합 (C=O)에 의해 연결된, 2개의 원자인 탄소 및 산소로 이루어진 유기기능성 그룹이다.
용어 "알카노일" 또는 "알킬 카보닐"은 알킬 그룹으로 추가로 치환된 카보닐 그룹을 지칭한다. 예시적인 알카노일 그룹은 아세틸, 프로파노일, 부타노일, 펜타노일, 헥사노일 등을 포함하지만 이에 제한되지 않는다.
용어 "아릴 카보닐"은 본원에 정의된 바와 같은 카보닐 그룹이 본원에 정의된 바와 같은 아릴 그룹으로 치환됨을 의미한다.
'알콕시카보닐'이라는 용어는 알콕시 그룹으로 추가 치환된 카보닐 그룹을 의미한다.
‘헤테로사이클로알킬'이라는 용어는 헤테로사이클로알킬 그룹으로 추가 치환된 카보닐 그룹을 의미한다.
"알킬아미노카보닐", "사이클로알킬아미노카보닐", "아릴아미노카보닐", "아릴알킬아미노카보닐", "사이클로알킬아미노카보닐", "아릴아미노카보닐", "헤테로아릴아미노카보닐"이라는 용어는 본원에 정의된 바와 같은 카보닐 그룹이 본원에 정의된 바와 같은 알킬아미노 그룹, 사이클로 알킬아미노 그룹, 아릴아미노 그룹, 아릴알킬아미노 그룹 또는 헤테로아릴아미노 그룹으로 치환되는 것을 의미한다.
용어 "알킬카보닐알킬" 또는 "알카노일알킬"은 알킬카보닐 그룹으로 추가로 치환된 알킬 그룹을 지칭한다.
"알킬카보닐알콕시" 또는 "알카노일알콕시"라는 용어는 알킬카보닐 그룹으로 추가로 치환된 알콕시 그룹을 지칭한다.
용어 ‘헤테로사이클로알킬카보닐알킬'은 헤테로사이클로알킬카보닐 그룹으로 추가 치환된 알킬 그룹을 의미한다.
용어 "설프하이드릴"은 -SH 그룹을 지칭한다. 용어 "알킬티오"는 본원에 정의된 바와 같은 머캅토 그룹이 본원에 정의된 바와 같은 알킬 그룹으로 치환됨을 의미한다.
"설폰" 또는 "설포닐"이라는 용어는 하이드록실 그룹이 손실된 후의 설폰산의 기능성 그룹, 특히 -S(=O)2 -그룹을 지칭한다.
용어 "설피닐" 또는 "설피닐"은 -S(=O)-를 지칭한다.
용어 "아미노설포닐" 또는 "아미노설포닐"은 -S(=O)2-NH2 그룹을 지칭한다.
"알킬설피닐" 또는 "알킬설피닐"이라는 용어는 알킬-S(=O)-를 지칭한다.
"알킬 설폰" 또는 "알킬 설포닐"이라는 용어는 -S(=O)2 -R을 지칭하고, 여기서 R은 알킬이다.
용어 "알킬아미노 설폰"은 본원에 정의된 바와 같은 설폰 그룹이 본원에 정의된 바와 같은 알킬아미노 그룹으로 치환됨을 의미한다.
"알킬설포닐아미노" 또는 "알킬설포닐아미노" 및 "사이클로알킬설포닐아미노" 또는 "사이클로알킬설포닐아미노"라는 용어는 본원에 정의된 바와 같은 아미노 그룹이 본원에 정의된 바와 같은 알킬설포닐 또는 사이클로알킬 설포닐 그룹으로 치환되고, 즉 -NH-S(=O)2 -R이고, 여기서 R은 각각 알킬 및 사이클로알킬임을 의미한다.
용어 "사이클로알킬 설폰" 및 "사이클로알킬 설포닐"은 -S(=O)2-R을 지칭하고, 여기서 R은 사이클로알킬이다.
"4급 암모늄 그룹"이란 용어는 탄소 원자가 1 내지 8개인 알킬 그룹으로 이루어진 그룹으로부터 R, R' 및 R"이 각각 독립적으로 선택되는 -N+ RR'R"을 의미한다.
용어 "임의로"는 이후 기재된 하나 이상의 이벤트가 일어날 수도 있고 일어나지 않을 수도 있음을 의미하고, 일어날 수 있는 이벤트와 일어나지 않을 수 있는 이벤트 둘다를 포함한다. 용어 "임의로 치환된" 또는 "치환된"은 언급된 그룹이 하나 이상의 추가의 그룹으로 치환될 수 있음을 의미하고, 이의 각각은 개별적으로 및 독립적으로 알킬 그룹, 사이클로알킬 그룹, 아릴 그룹, 헤테로아릴 그룹, 헤테로사이클로알킬 그룹, 하이드록실, 알콕시, 시아노, 할로겐, 아미드, 니트로, 할로알킬, 아미노, 메틸설포닐, 알킬카보닐, 알콕시카보닐, 헤테로아릴알킬, 헤테로사이클로알킬알킬, 아미노카보닐, 아미노보호 그룹 등으로 이루어진 그룹으로부터 선택된다. 이들 중에서, 아미노 보호 그룹은 바람직하게 피발로일, 3급-부톡시카보닐, 벤질옥시카보닐, 9-플루오레닐메톡시카보닐, 벤질, p-메톡시벤질, 알릴옥시카보닐, 및 트리플루오로아세틸 등으로 이루어진 그룹으로부터 선택된다.
본원에서, 용어 "약제학적으로 허용되는 염"은 본원의 화합물의 목적하는 생물학적 활성을 유지하고 최소한의 목적하지 않은 독성학적 효과를 보여주는 염을 지칭한다. 이들 약제학적으로 허용되는 염은 화합물의 최종 단리 및 정제 과정동안에 현장에서 제조할 수 있거나, 정제된 화합물의 유리산 또는 유리염기 형태만을 각각 적합한 염기 또는 산과 반응시켜 제조할 수 있다.
"용매" 또는 "용매 화합물"은 화학량론적 또는 비화학량론적 용매를 포함하는 용매 첨가 형태를 지칭한다. 일부 화합물은 용매 분자의 고정된 몰 비율을 결정성 고체 상태에 포집하여 용매 화합물의 형성을 초래한다. 용매가 물인 경우, 형성된 용매 화화물은 수화물이고; 용매가 알코올인 경우, 형성된 용매 화합물은 알코올레이트이다. 수화물은 하나 이상의 물 분자가 해당 물질의 한 분자에 결합하여 형성되고, 상기 물은 분자 상태를 H2O로 유지한다.
본원에 기재된 화합물의 "대사물"은 화합물이 대사될 때 형성되는 화합물의 유도체이다. 용어 "활성 대사물"은 화합물이 대사될 때 형성되는 화합물의 생물학적 활성 유도체를 지칭한다. 본원에서 사용되는 '대사화된'이라는 용어는 특정 물질이 유기체에 의해 변경되는 과정(가수분해 및 산화와 같은 효소 촉매 반응을 포함하지만 이에 제한되지 않음)의 합계를 지칭한다. 따라서, 효소는 화합물의 특정 구조 전환을 생성할 수 있다. 예를 들어, 시토크롬 P450은 다양한 산화 및 환원 반응을 촉매하는 반면, 디포스포글루쿠로노실 트랜스퍼라제는 활성화된 글루쿠론산 분자를 방향족 알코올, 지방족 알코올, 카복실산, 아민 및 유리된 설프하이드릴 그룹으로의 전환을 촉매한다. 대사에 대한 추가의 정보는 문헌(참조: The Pharmacological Basis of Therapeutics, Ninth Edition, McGraw-Hill (1996))으로부터 수득될 수 있다. 본원에 개시된 화합물의 대사물은 숙주에 화합물을 투여하고 해당 숙주의 조직 샘플을 분석하거나 시험관 내에서 화합물을 간세포로 항온처리하고 수득한 화합물을 분석함으로써 동정할 수 있다. 방법 둘다는 당업계에 공지되어 있다. 일부 구현예에서, 화합물의 대사물은 산화 과정에 의해 형성되고 상응하는 하이드록실 함유 화합물에 상응한다. 일부 구현예에서, 화합물은 약제학적 활성 대사물로 대사된다.
본원에 사용된 용어 "조절하는"은 표적의 활성을 변경하기 위해 직접적으로 또는 간접적으로 표적과 상호작용하는 것을 지칭하고, 예를 들어, 표적의 활성을 증진시키거나, 표적의 활성을 억제하거나, 표적의 활성을 제한하거나, 표적의 활성을 연장함을 포함한다.
"프로드럭" 또는 "전구체 약물"이라는 용어는 약리학적 활성이 없을 수 있지만 일부 경우에 경구 또는 비경구로 투여될 수 있고 이후 생체 내에서 대사되어 본 발명의 약리학적 활성 화합물을 형성할 수 있는 유도체들을 지칭한다. 프로드럭의 비제한적인 예는 에스테르, 카보네이트, 세스키테르펜, 포스페이트 에스테르, 니트로 에스테르, 설페이트, 설폭사이드, 아미드, 카바메이트, 질소 함유 화합물, 포스포르아미디트, 글리코사이드, 에테르, 아세탈 및 케톤 아세탈을 포함한다.
"유효량"은 연구자 또는 실무자가 연구 중인 조직, 시스템, 동물 또는 사람에서 생물학적 또는 의학적 반응을 유발할 수 있는 약물 또는 약리학적 제제의 양을 의미한다. 또한 용어 "치료학적 유효량"은 해당 양을 투여받지 않은 해당 대상체와 비교하여 질환 또는 장애의 치료, 치유, 예방 또는 완화, 부작용 변형 또는 질환 또는 장애의 발병률 감소를 유발하는 임의의 양을 의미한다. 상기 용어는 또한 정상적인 생리학적 기능을 개선하는 데 효과적인 양을 포함한다.
본원에서 사용되는 "치료"라는 용어는 질환, 장애 또는 병태의 적어도 하나의 증상을 완화시키는 것을 지칭한다. 상기 용어는 병태에 대한 관리 또는 치료를 제공하기 위해 본원에 기재된 하나 이상의 화합물을 대상체에게 투여하거나 본원에 기재된 화합물 중 하나 이상을 적용하는 것을 포함한다. 본원 개시내용의 목적을 위한 "치료"는 치유를 제공할 수 있지만 반드시 그럴 필요는 없고, 오히려 "치료"는 상태 관리의 형태일 수 있다. 본원에 기재된 화합물이 암을 비롯한 해로운 증식 세포를 치료하기 위해 사용되는 경우, "치료"는 정상 세포의 파괴에 대한 최소 영향을 갖는 상기 해로운 증식 세포의 부분적 또는 전체 파괴를 포함한다. 암세포를 포함하여 빠르게 증식하는 유해한 세포를 치료하는 목적하는 기전은 세포 수준에서의 아폽토시스이다.
본원에 사용되는 '예방'이라는 용어는 위험에 처한 개체의 임상적으로 유의적인 질환 진행 또는 전임상적으로 유의적인 질환 단계의 발병을 공동으로 예방하거나 완화하는 것을 포함한다. 이것은 질환 발병 위험이 있는 개체의 예방적 치료를 포함한다.
"대상체" 또는 "환자"라는 용어는 병태 또는 감소되거나 불충분한 프로그램화된 세포 사멸(아폽토시스)과 관련된 병태를 앓을 수 있거나 사람 및 비사람 동물과 같이 본 발명의 화합물의 투여로 인해 다른 방식으로 이득을 얻을 수 있는 유기체를 포함한다. 바람직한 사람은 본원에 기재된 바와 같은 질환 또는 관련 병태를 앓거나 앓을 경향이 있는 사람 환자를 포함한다. “비사람 동물”이라는 용어는 포유류, 예를 들어, 비사람 영장류, 양, 소, 개, 고양이, 마우스와 같은 설치류와 같은 척추동물과 닭, 양서류, 파충류 등과 같은 비포유류를 포함한다.
여기서 사용되는 GI50은 50%의 세포 성장 억제를 유발하는 데 필요한 약물의 농도, 즉 약물이 세포(예를 들어, 암세포)의 50% 성장을 유발하는 경우 억제 또는 제어하는 데 필요한 약물의 농도를 지칭한다.
본원에 사용된 바와 같이, IC50은 효과를 측정하는 분석에서 최대 효과의 50% 억제를 달성하는 특정 시험 화합물의 양, 농도 또는 용량을 지칭한다.
본원에 사용된 바와 같이, EC50은 특정 검정 화합물에 의해 유도, 자극 또는 증진되는 특정 반응의 최대 발현의 50%에서 용량 의존적 반응을 유발하는 검정 화합물의 용량, 농도 또는 양을 지칭한다.
본 발명의 PARP7 억제제
본 발명은 화학식 I의 화합물 또는 약제학적으로 허용되는 염, 중수소화 화합물, 용매화물, 에스테르, 산, 대사물 또는 이의 프로드럭을 포함하는 PARP7 억제제에 관한 것이다.,
（I）
상기식에서,
는 이중 또는 단일 결합을 나타내고, 단 최대 하나의 이중 결합이 원자 중 어느 하나에 부착되어 있고;
X는 할로겐, C1-6 할로알킬 및 C2-6 알카노일로 이루어진 그룹으로부터 선택되거나, Y 및 이들이 부착된 탄소 원자와 함께 융합된 벤젠 환 또는 헤테로사이클을 형성하고;
Y는 NH와 O로 이루어진 그룹으로부터 선택되거나, X 및 이들이 부착된 탄소 원자와 함께 융합된 벤젠 환 또는 헤테로사이클을 형성하고;
A는 -N-O-, =N-O-, -O-N- 및 -O-N=으로 이루어진 그룹으로부터 선택된 질소-옥소 그룹이고, N 원자는 이의 원자가가 포화되지 않은 경우 수소, C1-6 알킬, C2-6 알카노일 또는 C1-6설포닐로 임의로 치환되고;
L은 -(CH2)n-, , , 및 로 이루어진 그룹으로부터 선택되고, 여기서 n은 1, 2 또는 3이고, R5 및 R5'는 각각 수소, C1-3 알킬, 할로겐, 중수소 및 하이드록실로 이루어진 그룹으로부터 독립적으로 선택되거나, R5 및 R5'는 이들이 부착된 탄소 원자와 함께 C3-6 사이클로알킬을 형성하고;
R1 및 R2는 각각 독립적으로 수소, C1-6 알킬, C1-6 하이드록시알킬, C1-6 할로알킬, C3-6 사이클로알킬, C3-6 하이드록시사이클로알킬 또는 C3-6 할로사이클로알킬로 이루어진 그룹으로부터 선택되거나, R1 및 R2는 이들이 부착된 탄소 원자와 함께 C5-8 사이클로알킬을 형성하고;
M은 화학식 (M-1), (M-2), (M-3), (M-4) 및 (M-5)로 이루어진 그룹으로부터 선택된 모이어티이다:
여기서 D1, D2, D3, D4, D5, D6, D7, D8, D9 및 D10은 각각 독립적으로 N 및 CH로 이루어진 그룹으로부터 선택되고, 단 적어도 하나의 N이 M 모이어티의 환 원자로 포함되고,
R3은 각각 독립적으로 수소, 할로겐, 하이드록실, C1-4 알킬, C1-6 할로알킬, 및 C1-6 하이드록시알킬로 이루어진 그룹으로부터 선택되고,
m은 각각 독립적으로 0, 1 또는 2로 이루어진 그룹으로부터 선택되고;
G는 1개 또는 2개의 R4 그룹으로 임의로 치환된 5- 내지 6-원 방향족 헤테로사이클릭 그룹이고, 여기서 R4는 각각 독립적으로 하이드록실, 시아노, C1-6 알킬, C1-6 하이드록시알킬, C1-6 할로알킬, 할로겐, C3-6 사이클로알킬, C2-6 알케닐, C2-6 알키닐, -NR6R6', -C(O)NR6R6', -NR6C(O)R7, -C(O)OR6, -OR6, -S(O)2NR6R6', -NR6S(O)2R7, -S(O)2R7, -C(O)R6 및 임의로 할로겐으로 치환된 페닐로 이루어진 그룹으로부터 선택되거나, 2개의 R4 그룹이 이들이 부착된 탄소 원자와 함께, 하이드록실, 메틸, 할로겐 또는 옥소로 임의로 치환된 C5-8 사이클로알킬, 페닐 또는 헤테로아릴을 형성하고, 여기서 R6, R6' 및 R7은 각각 독립적으로 수소, C1-6 알킬, C1-6 할로알킬, C3-6 사이클로알킬 및 C1-6 하이드록시알킬로 이루어진 그룹으로부터 선택된다. 바람직한 구현예에서, 상기 헤테로사이클은 N 원자를 함유하는 5- 내지 8-원 모노사이클릭 환, 바람직하게는 피페리딘, 피롤리딘, 피페라진 또는 테트라하이드로피리딘이다.
일부 구현예에서, M은 화학식 (M-1a), (M-2a), (M-3a), (M-4a) 및 (M-5a)로 이루어진 그룹으로부터 선택된 모이어티이다:
여기서 D1은 N 또는 CH로 이루어진 그룹으로부터 선택되고, m은 각각 독립적으로 0, 1 또는 2로 이루어진 그룹으로부터 선택되고, R3은 각각 독립적으로 수소, 하이드록실, 할로겐 또는 C1-4 알킬로 이루어진 그룹으로부터 선택된다.
일부 구현예에서, G는 화학식 (G-1), (G-2), (G-3), (G-4), (G-5), (G- 6) 및 (G-7)으로 이루어진 그룹으로부터 선택된 모이어티이다:
여기서 Q는 각각 독립적으로 N 또는 CH로 이루어진 그룹으로부터 선택되고, 보다 바람직하게는 Q는 N이다. R4는 이전에 정의되어 있다.
본 명세서의 기재에서, 임의의 치환제 R4의 치환 위치는 제한되지 않고, G로 표시되는 헤테로아릴 부분의 임의의 불포화 탄소에 부착될 수 있다. 예를 들어, G로 표시되는 헤테로아릴 부분이 융합된 바이사이클릭을 형성하는 경우(예를 들어, 상기 화학식 G-3, G-4), 본원에서의 표시는 R4 치환체의 위치를 부착된 모노사이클릭 환으로 제한되지 않고, 오히려 R4 치환체는 융합된 바이사이클릭 환 중 어느 환의 임의의 불포화 탄소에서 이루어질 수 있다.
바람직하게, R4 그룹은 임의의 치환체이고 각각 독립적으로 시아노, C1-4 알킬, C1-4 하이드록시알킬, C1-4 할로알킬, 할로겐, C3-6 사이클로알킬, C2-4 알케닐, C2-4 알키닐, -NR6R6', -C(O)NR6R6', -C(O)OR6, -OR6, -C(O)R6, 및 할로겐으로 임의로 치환된 페닐로 이루어진 그룹으로부터 선택되고, 여기서, R6 및 R6'은 각각 독립적으로 수소와 C1-4 알킬로 이루어진 그룹으로부터 선택된다.
바람직한 양상에서, X는 브롬, 트리플루오로메틸 및 아세틸로 이루어진 그룹으로부터 선택되거나, X는 Y 및 이들이 부착된 탄소 원자와 함께 융합된 벤젠 환 또는 융합된 피페리딘 환을 형성하고, Y는 NH로부터 선택되거나, X 및 이들이 부착된 탄소 원자와 함께 융합된 벤젠 환 또는 융합된 피페리딘 환을 형성한다.
추가의 바람직한 구현예에서, L은 화학식 (M-1) 또는 화학식 (M-1a)에서 D1이 N인 경우 -(CH2)n-, , 또는 으로 이루어진 그룹으로부터 선택되고; L은 D1이 CH인 경우 -(CH2)n-, , , 또는 으로 이루어진 그룹으로부터 선택되고, n, R5, R5'은 이전에 정의된 바와 같다.
일부 구현예에서, L은 A가 -N-O-인 경우 이고; L은 A가 =N-O-인 경우 또는 이고; L은 A가 -O-N-인 경우 , , , , , , 또는 이고; L은 A가 -O-N=인 경우 또는 이다.
본 발명의 바람직한 양상에서, 화학식 I의 화합물 또는 약제학적으로 허용되는 염, 중수소화 화합물, 용매화물, 에스테르, 산, 대사물 또는 이의 프로드럭을 포함하는 PARP7 억제제가 제공되고, 여기서, X는 C1-6 할로알킬 및 C2-6 알카노일로 이루어진 그룹에서 선택되고, X는 보다 바람직하게 C1-6 할로알킬, 특히 트리플루오로메틸이고; Y는 NH이고; A는 =N-O-, -O-N- 및 -O-N=로 이루어진 그룹으로부터 선택된 질소-옥소 그룹, 보다 바람직하게는 -O-N-이고; L은 및 으로 이루어진 그룹으로부터 선택되고, 보다 바람직하게 이고, 여기서 R5 및 R5'--는 각각 독립적으로 수소 또는 할로겐으로 이루어진 그룹으로부터 선택되고, 보다 바람직하게는 수소이고; M은 화학식 (M-1a) 및 (M-5a)로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 모이어티이고, 여기서 D1은 N 또는 CH로 이루어진 그룹으로부터 선택되고, 보다 바람직하게는 CH이고, m은 독립적으로 1이고, R3은 각각 독립적으로 수소, 할로겐 또는 C1-3 알킬로 이루어진 그룹으로부터 독립적으로 선택되고, , 보다 바람직하게는 수소이고; G는 화학식 (G-1), (G-3) 및 (G-4)로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 모이어티이고, 보다 바람직하게는 화학식 (G-1)이고, 여기서 Q는 N 또는 CH로 이루어진 그룹으로부터 선택되고, 보다 바람직하게는 N이고, R4는 C1-6 할로알킬, 할로겐, C3-6 사이클로알킬 및 임의로 할로겐으로 치환된 페닐, 특히 트리플루오로메틸로 이루어진 그룹으로부터 선택되고; R1 및 R2는 각각 독립적으로 수소, C1-6 알킬 및 C3-6 사이클로알킬로 이루어진 그룹으로부터 선택되거나, R1 및 R2는 이들이 부착된 탄소 원자와 함께 C5-8 사이클로알킬을 형성하고, 보다 바람직하게는 R1 및 R2는 각각 독립적으로 수소 및 C1-6 알킬로 이루어진 그룹으로부터 선택된다.
추가의 바람직한 양상에서, 본 발명은 화학식 I의 화합물 또는 약제학적으로 허용되는 염, 중수소화 화합물, 용매화물, 에스테르, 산, 대사물 또는 이의 프로드럭을 포함하는 PARP7 억제제를 제공하고, 여기서
는 이중 또는 단일 결합을 나타내고, 단 최대 하나의 이중 결합이 원자 중 어느 하나에 부착되어 있고;
X는 할로겐, 및 C1-6 할로알킬로 이루어진 그룹으로부터 선택되거나, Y 및 이들이 부착된 탄소 원자와 함께 융합된 벤젠 환 또는 헤테로사이클을 형성하고;
Y는 NH이거나, X 및 이들이 부착된 탄소 원자와 함께 융합된 벤젠 환 또는 헤테로사이클을 형성하고;
A는 -N-O-, =N-O-, -O-N- 및 -O-N=으로 이루어진 그룹으로부터 선택된 질소-옥소 그룹이고, N 원자는 이의 원자가가 포화되지 않은 경우 수소, C1-6 알킬, C2-6 알카노일 또는 C1-6설포닐로 임의로 치환되고;
L은 -(CH2)n-, , , 및 로 이루어진 그룹으로부터 선택되고, 여기서 n은 1, 2 또는 3이고, R5 및 R5’--는 각각 독립적으로 수소 또는 C1-3 알킬로 이루어진 그룹으로부터 선택되거나, R5 및 R5‘는 이들이 부착된 탄소 원자와 함께 C3-6 사이클로알킬을 형성하고;
R1 및 R2는 각각 독립적으로 수소, C1-6 알킬, C1-6 하이드록시알킬, C1-6 할로알킬, C3-6 사이클로알킬, C3-6 하이드록시사이클로알킬 또는 C3-6 할로사이클로알킬로 이루어진 그룹으로부터 선택되거나, R1 및 R2는 이들이 부착된 탄소 원자와 함께 C5-8 사이클로알킬을 형성하고;
M은 화학식 (M-1), (M-2), (M-3) 및 (M-4)로 이루어진 그룹으로부터 선택된 모이어티이다:
여기서 D1, D2, D3, D4, D5, D6, D7, D8 및 D9는 각각 독립적으로 N 및 CH로 이루어진 그룹으로부터 선택되고, 단 적어도 하나의 N이 M 모이어티의 환 원자로 포함된다.
R3은 각각 독립적으로 할로겐, 하이드록실, C1-4 알킬 및 C1-6 할로알킬로 이루어진 그룹으로부터 선택된다.
m은 각각 독립적으로 0, 1 또는 2로 이루어진 그룹으로부터 선택되고;
G는 1개 또는 2개의 R4 그룹으로 임의로 치환된 5- 내지 6-원 방향족 헤테로사이클릭 그룹이고, 여기서 R4는 각각 독립적으로 하이드록실, 시아노, C1-6 알킬, C1-6 하이드록시알킬 및 C1-6 할로알킬로 이루어진 그룹으로부터 선택되거나, 2개의 R4 그룹은 이들이 부착된 탄소 원자와 함께 하이드록실 또는 메틸로 임의로 치환된 C5-8 사이클로알킬을 형성한다.
추가로 바람직하게, M은 화학식 (M-1a), (M-2a), (M-3a) 및 (M-4a)로 이루어진 그룹으로부터 선택된 모이어티이다:
여기서 D1은 N 또는 CH로 이루어진 그룹으로부터 선택되고, m은 각각 독립적으로 0, 1 또는 2로 이루어진 그룹으로부터 선택되고, R3은 각각 독립적으로 하이드록실, 할로겐 또는 C1-4 알킬로 이루어진 그룹으로부터 선택된다.
또한, 추가로 바람직하게는, G는 화학식 (G-1) 및 (G-2)로 이루어진 그룹으로부터 선택된 모이티이다:
여기서 Q는 N 또는 CH로 이루어진 그룹으로부터 선택된다.
또한 특히 바람직하게, L은 화학식 (M-1) 또는 화학식 (M-1a)에서 D1이 N인 경우, -(CH2)n-,, 또는 으로 이루어진 그룹으로부터 선택되고; L은 D1이 CH인 경우 -(CH2)n-, , , 또는 으로 이루어진 그룹으로부터 선택된다.
또한 특히 바람직하게, L은 A가 -N-O-인 경우 이고; L은 A가 =N-O-인 경우 또는 이고; L은 A가 -O-N-인 경우 , , ,, , , 또는 이고; L은 A가 -O-N=인 경우 또는 이다.
본 발명은 또한 바람직하게 화학식 II의 화합물 또는 약제학적으로 허용되는 염, 중수소화 화합물, 용매화물, 에스테르, 산, 대사물 또는 이의 프로드럭을 포함하는 PARP7 억제제를 제공한다.
（II）
여기서 는 이중 또는 단일 결합을 나타내고, 단 최대 하나의 이중 결합이 원자 중 어느 하나에 부착되어 있고;
X는 할로겐 및 C1-6 할로알킬로 이루어진 그룹으로부터 선택되거나, Y 및 이들이 부착된 탄소 원자와 함께 융합된 벤젠 환 또는 피페리딘 환을 형성하고;
Y는 NH로부터 선택되거나, X 및 이들이 부착된 탄소 원자와 함께 융합된 벤젠 환 또는 피페리딘 환을 형성하고;
A는 -N-O-, =N-O-, -O-N- 및 -O-N=으로 이루어진 그룹으로부터 선택된 질소-옥소 그룹이고, N 원자는 이의 원자가가 포화되지 않은 경우 수소, C1-6 알킬, C2-6 알카노일 또는 C1-6설포닐로 임의로 치환되고;
L은 -(CH2)n-, , , 및 로 이루어진 그룹으로부터 선택되고, 여기서 n은 1, 2 또는 3이고, R5 및 R5’--는 각각 독립적으로 수소 또는 C1-3 알킬로 이루어진 그룹으로부터 선택되거나, R5 및 R5‘는 이들이 부착된 탄소 원자와 함께 C3-6 사이클로알킬을 형성하고;
D는 N 또는 CH로 이루어진 그룹으로부터 선택되고;
Q는 N 또는 CH로 이루어진 그룹으로부터 선택되고;
R1 및 R2는 각각 독립적으로 수소, C1-6 알킬, C3-6 사이클로알킬로 이루어진 그룹으로부터 선택되거나, R1 및 R2는 이들이 부착된 탄소 원자와 함께 C5-8 사이클로알킬을 형성하고;
R3은 수소 또는 C1-3 알킬로 이루어진 그룹으로부터 선택되고;
R4는 하이드록실, 시아노, C1-6 알킬, C1-6 하이드록시알킬 및 C1-6 할로알킬로 이루어진 그룹으로부터 선택된다.
추가로 바람직하게는, 본 발명은 하기 표에 나타낸 바와 같이 화합물, 또는 약제학적으로 허용되는 염, 중수소화 화합물, 용매화물, 에스테르, 산, 대사물 또는 이의 프로드럭에 관한 것이다.
본원에서는 신규한 PARP7 억제제가 기재된다. 또한 본원에서는 상기 화합물의 약제학적으로 허용되는 염, 중수소화 화합물, 용매화물, 에스테르, 산, 대사물 또는 프로드럭이 기재된다.
본 발명의 화합물은 유리된 형태로, 예를 들어, 유리된 염기 또는 유리된 산 또는 양쪽성 이온의 형태로 존재할 수 있거나, 염의 형태로 존재할 수 있다. 상기 염은 임의의 염일 수 있고, 이는 유기 또는 무기염, 특히 약학에서 통상적으로 사용되는 임의의 생리학적으로 허용되는 유기 또는 무기염일 수 있다.
본 발명의 목적에 바람직한 염은 본 발명의 화합물의 생리학적으로 허용되는 염이다. 그러나, 염 자체는 약리학적 적용에 적합하지 않지만, 이는 예를 들어 본 발명의 화합물의 단리 또는 정제에 사용될 수 있는 염도 포함된다.
용어 "약제학적으로 허용되는 염"은 본 발명의 화합물의 상대적 비-독성, 무기 또는 유기산 부가염을 지칭하고, 예를 들어, 문헌(S. M. Berge, et al. "Pharmaceutical Salts," J. Pharm. Sci. 1977, 66, 1-19)을 참조한다.
본 발명의 화합물의 약제학적으로 허용되는 염은 무기산, 카복실산 및 설폰산의 산 부가 염, 예를 들어 하기 산의 염을 포함한다: 염산, 브롬화수소산, 요오드화수소산, 황산, 피로황산, 인산 및 질산; 또는 포름산, 아세트산, 아세토아세트산, 피루브산, 트리플루오로아세트산, 프로피온산, 부티르산, 카프로산, 헵탄산, 운데실렌산, 라우르산, 벤조산, 살리실산, 2-(4-하이드록시벤조일)-벤조산, 캄포산, 신남산, 사이클로펜탄 프로피온산, 디글루콘산, 3-하이드록시-2-나프탈렌카복실산, 니코틴산, 파라핀산, 펙틴산, 과황산, 3-페닐프로피온산, 피크릭산, 3급 발레릭산, 2-하이드록시 에탄설폰산, 이타콘산, 설파메이트산, 트리플루오로메탄설폰산, 도데실 설푸르산, 에틸설폰산, 페닐설폰산, p-톨루엔 설폰산, 메틸설폰산, 2-나프탈렌 설폰산, 나프탈렌 디설폰산, 캄포르설폰산, 시트르산, 타르타르산, 스테아르산, 락트산, 옥살산, 말론산, 숙신산, 말산, 아디프산, 알긴산, 말레산, 푸마르산, D-글루콘산, 만델산, 아스코르브산, 글루코헵탄산, 글리세로인산, 아스파르트산, 설포살리실산, 헤미설퍼산 또는 티오시안산 염과 같은 유기산과 본 발명의 화합물의 염.
본 발명의 화합물의 약제학적으로 허용되는 염은 또한 통상적으로 사용되는 염기, 예를 들어, 바람직하게 알칼리 금속염(예를 들어, 나트륨 및 칼륨염), 알칼린 토금속염(예를 들어, 칼슘 및 마그네슘염), 및 암모니아로부터 또는 1 내지 16개의 탄소 원자를 갖는 유기 아민으로부터 유래한 암모니아 염을 포함하고, 상기 유기 아민은 예를 들어, 바람직하게는 에틸아민, 디에틸아민, 트리에틸아민, 에틸 디이소프로필아민, 모노에탄올아민, 디에탄올아민, 트리에탄올아민, 디사이클로헥실아민, 디메틸아미노에탄올, 프로카인, 디벤질아민, N-메틸모르폴린, 아르기닌, 라이신, 에틸렌디아민, N-메틸피페리딘, N-메틸글루코사민, 디메틸글루코사민, 에틸글루코사민, 1,6-헥산디아민, 아미노글루코스, 사르코신, 세로토닌, 트리스(히드록시메틸)아미노메탄, 아미노프로필렌글리콜, 소바킨 및 1- 아미노-2,3,4-부탄트리올의 염을 포함한다.
본 발명은 본 발명의 화합물의 가능한 모든 염을 포함하고, 이는 단일 염 또는 임의의 비율로 상기 염의 임의의 혼합물일 수 있다.
본 발명은 본 발명의 모든 가능한 중수소화 화합물을 포함하고, 여기서 중수소 원자는 탄소 또는 질소 원자상에서 임의로 치환될 수 있다.
용매화물은 고체 또는 액체 상태에서 배위 반응에 의해 용매 분자와 복합체를 형성하는 본 발명의 화합물의 형태에 대해 본 발명의 목적을 위해 사용되는 용어이다. 수화물은 물과의 배위 반응이 일어나는 특정 용매화물의 형태이다. 수화물은 본 발명의 범위 내에서 용매화물로서 바람직하다.
추가로, 본 발명은 본 발명의 화합물의 프로드럭을 포함한다. "프로드럭"이라는 용어는 그 자체로는 생물학적으로 활성 또는 불활성일 수 있지만, 체내 체류 시간 동안 본 발명의 화합물로 전환(예를 들어, 대사 또는 가수분해에 의해)되는 화합물을 포함한다.
또한, 본 발명은 본 발명의 화합물의 모든 가능한 결정 형태 또는 다형태를 개별 다형태 또는 임의의 비율의 하나 초과의 다형태의 혼합물로서 포함한다.
본원 명세서에서는 편의상 일부 경우에, 화합물의 구조식은 특정 이성질체를 나타내지만, 본 발명은 기하학적 이성질체, 비대칭 탄소 원자에 기초한 광학 이성질체, 입체 이성질체, 상호 이성질체 등과 같은 모든 이성질체를 포함한다.
본 발명에 포함되는 키랄성을 갖는 화합물은 임의의 구성 또는 혼합된 라세미체일 수 있다. 본 발명에 따라 사용되는 화합물이 하나 초과의 키랄 중심을 함유하는 경우, 이는 부분입체이성질체 형태로 존재할 수 있다. 상기 부분입체이성질체 화합물은 당업자에게 공지된 방법(예를 들어, 크로마토그래피 또는 결정화)에 의해 분리될 수 있고 개별 거울상이성질체는 상기 기재된 바와 같이 분리될 수 있다. 본 발명은 본 발명에 따라 사용되는 부분입체이성질체 화합물 및 이들의 혼합물의 적용을 포함한다. 본 발명에 사용되는 화합물은 상이한 이성질체 형태 또는 상이한 기하학적 이성질체일 수 있고, 본 발명은 본 발명에 따라 사용되는 화합물의 개별 이성질체 및/또는 기하학적 이성질체 및 이들의 혼합물의 적용을 포함한다. 본 발명에 따라 사용되는 화합물은 양쪽성 형태로 존재할 수 있다. 본 발명은 본 발명에 따라 사용되는 화합물의 개별 양쪽성 형태 및 이들의 혼합물의 적용을 포함한다.
약제학적으로 허용되는 염, 다형태 및/또는 용매화물의 스크리닝 및 특징분석은 열 분석, X-선 회절, 분광법, 현미경법 및 원소 분석을 포함하지만 이에 제한되지 않는 다양한 기술을 사용하여 달성될 수 있다. 사용되는 다양한 분광측정 기술은 Raman, FTIR, UVIS 및 NMR(액체 및 고체 상태)을 포함하지만 이에 제한되지 않는다. 다양한 현미경 기술은 IR 현미경 및 Raman 현미경을 포함하지만 이에 제한되지 않는다.
따라서, 본 발명은 본 발명의 화합물의 가능한 모든 염,다형태, 대사물, 수화물, 중수소화 화합물, 용매화물 또는 프로드럭(예를 들어, 에스테르), 개별 염, 중합체, 대사물, 수화물, 중수소화 화합물, 용매화물 또는 프로드럭 또는 임의의 비율의 혼합물에서 하나 초과의 염, 다형태, 대사물, 수화물, 탈수소화 화합물, 용매화물, 프로드럭을 포함한다.
본 발명의 약제학적 용도
본 발명의 화학식 I 또는 화학식 II의 화합물, 또는 약제학적으로 허용되는 염, 중수소화 화합물, 용매화물, 에스테르, 산, 대사물 또는 이의 전구체는 PARP7의 효소 활성을 선택적으로 억제할 수 있고, 따라서 PARP7 활성에 의해 조절되거나 영향을 받거나 PARP7 활성 또는 과발현을 수반하는 질환, 장애 또는 병태를 치료하거나 예방하는 데 사용할 수 있다.
바람직한 양상에서, PARP7 활성에 의해 조절되거나 영향을 받거나 PARP7 활성 또는 과발현을 수반하는 질환, 장애 또는 병태는 과증식성 질환, 특히 편평 폐암, 폐 선암종, 비소세포 폐암, 소세포 폐암, 두경부 편평 세포 암종, 유방암, 췌장암, 췌장관 선암종, 결장직장암, 흑색종, 난소암, 식도 편평 세포 암종, 위암, 간암, 구강암, 요로상피암, 전립선암, 방광암, 신장 세포 암종, 위장관 기질 종양, 자궁경부암, 자궁내막암, 횡문근육종, 섬유육종, 신경내분비 종양, 중피종, 뇌암 또는 악성 신경교종 등을 포함하지만 이에 제한되지 않는 암이다.
다른 바람직한 양상에서, PARP7 활성에 의해 조절되거나 영향을 받거나 PARP7 활성 또는 과발현을 수반하는 상기 질환, 장애 또는 병태는 궤양성 대장염, 크론 질환, 다발성 경화증, 자가면역성 간 질환, I형 진성 당뇨병, 기관지 천식, 전신성 홍반성 루푸스, 류마티스 관절염, 강직성 척추염, 청소년 특발성 관절염, 건선, 다발성 근염 또는 피부근염 등을 포함하지만 이에 제한되지 않는 자가면역 또는 염증성 질환이다.
본 발명의 화합물은 전신적으로 및/또는 국소적으로 작용할 수 있다. 이를 위해 이들은 예를 들어, 경구 경로, 비경구 경로, 폐 경로, 비강 경로, 설하 경로, 설측 경로, 비강 내 경로, 직장 경로, 피부 경로, 경피 경로, 결막 경로 또는 귓바퀴 경로 또는 임플란트 또는 스캐폴드의 형태로 적절한 방식으로 투여할 수 있다.
바람직하게는, 본 발명의 구현예에서, 본 발명의 화합물을 포함하는 약물은 주사, 경구, 흡입, 직장 및 경피 투여 중 적어도 하나에 의해 환자에게 투여될 수 있다.
선택된 투여 경로와 상관없이, 본 발명의 PARP7 억제제 및/또는 본 발명의 약제학적 조성물은 당업자에게 공지된 통상적인 방법에 의해 약제학적으로 허용되는 투여 형태로 제형화된다.
본 발명에 따라 환자를 치료하는 경우, 투여되는 약물의 양은 특정 투여 용법, 질환 또는 병태의 유형 및 이의 중증도, 치료 대상자 또는 치료 대상 숙주의 특이성(예를 들어, 체중)과 같은 수많은 요인에 따라 달라지지만, 예를 들어, 사용된 특정 약물, 투여 경로, 치료될 상태 및 치료받은 대상자 또는 치료될 숙주를 포함한 특정 주변 상황에 따라 투여되는 용량은 당업자에게 공지된 방법에 의해 일상적으로 결정될 수 있다. 전형적으로 성인의 치료용 용량과 관련하여, 투여 용량은 전형적으로 0.02-5000 mg/일, 예를 들어, 약 1-1500 mg/일의 범위이다. 상기 목적하는 용량은 편리하게 단일 용량으로 표현하거나, 동시에(또는 단기간에 걸쳐) 또는 적절한 간격, 예를 들어, 하루에 2회, 3회, 4회 또는 그 이상의 분할 용량으로 투여하는 분할 용량으로 표현할 수 있다. 당업자에게는 상기 투여 범위가 제공되더라도, 구체적인 유효량은 환자의 상태에 따라 그리고 의사의 진단과 함께 적절하게 조정될 수 있음을 알 수 있을 것이다.
본 발명의 화합물의 실제 용량 수준 및 시간 과정을 다양하게 하여 환자에게 독성 없이 특정 환자를 위해 목적하는 치료학적 반응을 달성하기 위해 효과적인 양의 활성 성분을 수득할 수 있다.
약제학적 조성물
본 발명의 또 다른 양상은 본 발명의 화학식 I 또는 화학식 II의 화합물, 또는 약제학적으로 허용되는 염, 중수소화 화합물, 용매화물, 에스테르, 산, 대사물 또는 이의 프로드럭 및 약제학적으로 허용되는 희석제, 담체 또는 부형제, 및 임의로 하나 이상의 다른 치료학적 제제를 포함하는 약제학적 조성물에 간한 것이다.
본 발명의 화합물은 별도의 약제학적 제제로서 또는 하나 이상의 다른 치료학적 제제와 조합된 형태로 투여될 수 있고, 상기 조합은 허용할 수 없는 부작용을 야기하지 않는다. 이러한 약제제학적 조성물은 본 발명의 화합물 및 하나 이상의 추가의 치료학적 제제를 포함하는 단일 약제학적 투여 제형의 투여 및 본 발명의 화합물 및 자체의 별도의 약제학적 투여 제형에서 다양한 다른 추가 치료학적 제제의 투여를 포함한다. 예를 들어, 화학식 I 또는 화학식 II의 화합물은 다른 치료학적 제제와 함께 단일 경구 투여 조성물의 형태, 예를 들어, 정제 또는 캡슐 형태로 환자에게 투여될 수 있거나 각각의 약제를 이의 자체의 개별적인 투여 제형으로 투여할 수 있다.
별도의 투여 제형으로 사용되는 경우, 본 발명의 화합물 및 하나 이상의 다른 치료학적 제제는 실질적으로 동일한 시점에(예를 들어, 동시에) 또는 개별적으로 엇갈린 시간에(예를 들어, 순차적으로) 투여될 수 있다.
특히, 본 발명의 화합물은 알킬화제, 항대사제, 식물 유래 항종양 제제, 호르몬 치료제, 토포이소머라제 억제제, 캄토테신 유도체, 키나제 억제제, 표적화된 제제, 항체, 인터페론 및/또는 생물학적 반응 변형제, 항 혈관 형성 화합물 및 기타 항암제와 고정된 조합 또는 개별 조합으로 사용될 수 있다.
본 발명의 화합물은 또한 방사선 치료요법 및/또는 외과적 개입과 함께 암 치료에 사용될 수 있다.
화합물의 제조
본 발명의 화합물은 당업자에게 공지된 표준 합성 기술을 사용하거나 본원에 기재된 방법과 함께 당업계에 공지된 방법을 사용하여 합성할 수 있다. 추가로, 본원에 기재된 용매, 온도 및 기타 반응 조건은 해당 분야의 당업자에 따라 다양할 수 있다. 추가 지침으로 다음 합성 방법을 사용할 수도 있다.
상기 반응은 본원에 기재된 화합물을 제공하기 위해 순차적으로 사용될 수 있거나 이들은 단편을 합성하고 이후 본원에 기재된 방법 및/또는 당업계에 공지된 방법에 의해 조합되어 사용될 수 있다.
본원에 기재된 화합물의 합성을 위한 개시 물질은 합성될 수 있거나 상업적 공급원으로부터 수득할 수 있다. 본원에 기재된 화합물 및 상이한 치환체를 갖는 다른 관련 화합물은 당업자에게 공지된 기술 및 원료를 사용하여 합성될 수 있다. 본원에 기재된 화합물을 제조하는 일반적인 방법은 당업자에게 공지된 반응으로부터 도출될 수 있고, 반응은 당업자가 본원에 제공된 분자의 다양한 부분을 도입하기 위해 적절하다고 간주되는 시약 및 조건에 의해 변형될 수 있다.
경우에 따라, 반응 생성물은 여과, 증류, 결정화, 크로마토그래피 및 기타 방법을 포함하지만 이에 제한되지 않는 통상적인 기술을 사용하여 분리 및 정제할 수 있다. 이들 생성물은 물리적 상수 및 스펙트럼 데이터를 포함한 기존 방법을 사용하여 특징 분석될 수 있다.
화학식 I 또는 화학식 II의 화합물을 제조하기 위한 반응식의 비제한적인 구현예는 하기에 기재되어 있다.
실시예
하기의 특정 비제한적인 구현예는 단지 설명을 위한 것으로 해석되어야 하고 어떠한 방식으로든지 본 발명을 제한하지 않는다. 더 이상의 상세한 설명은 필요하지 않으나, 당업자라면 본원에 기재된 내용을 바탕으로 본원 개시내용을 충분히 활용할 수 있을 것으로 사료된다.
화합물의 구조는 핵 자기 공명 (NMR) 또는/및 질량 분광측정(MS)에 의해 결정하였다. NMR 결정을 위한 용매는 중수소화된 디메틸 설폭사이드 (DMSO-d6), 중수소화된 클로로포름(CDCl3) 또는 중수소화 메탄올 (CD3OD)이다.
구현예에서 달리 특정되지 않은 경우, 용액은 수용액이다.
구현예에서 반응의 온도는 달리 명시되지 않는 한 실온, 예를 들어, 20℃ 내지 30℃이다.
구현예에서의 반응 과정의 모니터링은 박층 크로마토그래피(TLC) 및 LCMS에 의해 수행되었고, 반응을 위해 사용된 전개제, 정제된 화합물의 컬럼 크로마토그래피에 사용된 용출제 및 박층 크로마토그래피용 전개제의 시스템이 포함되었다: A: 디클로로메탄/메탄올 시스템, B: n-헥산/에틸 아세테이트 시스템, 및 C: 석유 에테르/에틸 아세테이트 시스템. 용매의 용적 비율은 화합물의 극성에 따라 조정되고, 트리에틸아민 및 아세트산과 같은 염기성 또는 산성 시약을 소량 첨가하여 조정할 수도 있다.
실시예 1
(S)-5-((1-((2-옥소-2-(4-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페라진-1-일)에톡시)아미노)프로판-2-일)아미노)-4-(트리플루오로메틸)피리다진-3(2H)-온
1.1) 중간체의 합성
단계 A: 4,5-디브로모-2-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)피리다진-3(2H)-온의 합성
DMF(84mL) 중의 4,5-디브로모피리다진-3(2H)-온(10.00 g, 39.39 mmol, 1.0 eq.)의 용액에 질소하에 빙수 욕조에서 0℃에서 NaH(60%, 1.89 g, 47.27 mmol, 1.2 eq.)를 분획으로 첨가하였다. 수득한 혼합물은 1 h 동안 0 ℃에서 교반하였고 이어서 0 ℃에서　2-(트리메틸실릴)에톡시메틸 클로라이드(7.22 g, 43.33 mmol, 1.1 eq.)를 적가하였다. 반응 혼합물은 25 ℃에서 추가로 3시간 동안 교반하였다. 혼합물은 물(400 mL)을 첨가하여 조심스럽게 켄칭시키고 혼합물은 EtOAc (3 x 400 mL)로 추출하였다. 유기층을 배합하고 염수 (400 mL)로 세척하고, Na2SO4상에서 건조시키고, 진공 농축시켰다. 조 생성물을 실리카 겔 크로마토그래피(석유 에테르/EtOAc= 20/1; V/V)로 정제하여 4,5-디브로모-2-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)피리다진-3(2H)-온(7.45g, 수율 49.2%)을 황색 오일로서 수득하였다.
LCMS: (ESI) (M+H-28)+ = 356.6.
1H NMR: (400 MHz, CDCl3) δ 7.85 (s, 1H), 5.52 (s, 2H), 3.80 - 3.71 (m, 2H), 1.03 - 0.95 (m, 2H), 0.03 (s, 9H).
단계 B: 4-브로모-5-클로로-2-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)피리다진-3(2H)-온의 합성
NMP (15 mL) 중의 4,5-디브로모-2-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)피리다진-3(2H)(7.45 g, 19.39 mmol, 1.00 eq.)의 용액에 LiCl(814 mg, 19.39 mmol, 1.0 eq.)을 첨가하였다. 혼합물은 4시간동안 95 ℃에서 교반하였다. 혼합물은 실온으로 냉각시키고 물(100 mL)로 희석하였다. 혼합물은 EtOAc (3 x 80 mL)로 추출하였다. 유기층을 배합하고 염수 (80 mL)로 세척하고, Na2SO4상에서 건조시키고, 진공 농축시켰다. 잔사를 컬럼 크로마토그래피(석유 에테르/EtOAc= 20/1; V/V)로 정제하여 4-브로모-5-클로로-2-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)피리다진-3(2H)-온(5.45 g, 수율 82.7%)을 황색 오일로서 수득하였다.
LCMS: (ESI) (M+H-28)+ = 312.8.
1H NMR: (400 MHz, CDCl3) δ 7.77 (s, 1H), 5.53 (s, 2H), 3.80 - 3.70 (m, 2H), 1.07 - 0.95 (m, 2H), 0.03 (s, 9H).
단계 C: 5-클로로-4-(트리플루오로메틸)-2-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)피리다진-3(2H)-온(중간체 A)의 합성
DMF (10mL) 중의 4-브로모-5-클로로-2-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)피리다진-3(2H)-온(3.25 g, 9.57 mmol, 1.0 eq.)의 용액에 CuI(1.28 g, 6.70 mmol, 0.7 eq.)를 첨가한 후 메틸 2,2-디플루오로-2-(플루오로설포닐)아세테이트(5.52 g, 28.71 mmol, 3.0 eq.)를 적가하였다. 수득한 혼합물은 95 ℃에서 3시간 동안 교반하였다. 혼합물은 실온으로 냉각시키고 물(80 mL)을 첨가하여 켄칭하였다. 혼합물은 EtOAc (3 x 80 mL)로 추출하였다. 유기층을 배합하고 염수 (80 mL)로 세척하고, Na2SO4상에서 건조시키고, 감압하에 농축시켰다. 잔사를 컬럼 크로마토그래피(석유 에테르/EtOAc= 10/1; V/V)로 정제하여 5-클로로-4-(트리플루오로메틸)-2-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)피리다진-3(2H)-온(2.80 g, 수율 89.0%)을 무색 오일로서 수득하였다.
LCMS: (ESI) (M+H-28)+ = 301.8.
1H NMR: (400 MHz, CDCl3) δ 8.12 (s, 1H), 5.54 (s, 2H), 3.81 - 3.73 (m, 2H), 1.02 - 0.96 (m, 2H), 0.02 (s, 9H).
단계 D: (S)-5-((1-하이드록시프로판-2-일)아미노)-4-(트리플루오로메틸)-2-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)피리다진-3(2H)-온(중간체 B)의 합성
EtOH (21 mL) 중의 5-클로로-4-(트리플루오로메틸)-2-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸) 피리다진-3(2H)-온(2.80 g, 8.51 mmol, 1.0 eq. )의 용액에 TEA (860 mg, 8.51 mmol, 1.0 eq.) 및 L- 알라니놀 (2.56 g, 34.04 mmol, 4.0 eq.)을 첨가하고, 수득한 혼합물을 60 ℃에서 3 시간 동안 교반하였다. 혼합물은 실온으로 냉각시키고 물(50 mL)로 희석하였다. 혼합물은 EtOAc (3 x 50 mL)로 추출하였다. 유기층을 배합하고 염수 (50 mL)로 세척하고, Na2SO4상에서 건조시키고, 감압하에 농축시켰다. 잔사를 컬럼 크로마토그래피(석유 에테르/EtOAc= 1/1; V/V)로 정제하여 (S)-5-((1-하이드록시프로판-2-일)아미노)-4-(트리플루오로메틸)-2-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)피리다진-3(2H)-온(450 mg, 수율 14.4%)을 황색 오일로서 수득하였다.
LCMS: (ESI) (M+H)+ = 367.8.
1H NMR: (400 MHz, CDCl3) δ 7.74 (s, 1H), 5.90 - 5.79 (m, 1H), 5.45 - 5.35 (m, 2H), 4.00 - 3.89 (m, 1H), 3.87 - 3.80 (m, 1H), 3.76 - 3.65 (m, 3H), 1.35 (d, J = 6.4 Hz, 3H), 1.02 - 0.94 (m, 2H), 0.02 (s, 9H).
단계 E: 3급-부틸 4-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페라진-1-카복실레이트의 합성
NMP(40 mL) 중의 2-클로로-5-(트리플루오로메틸)피리미딘(4.00 g, 21.92 mmol, 1.05 eq.) 및 3급-부틸 피페라진-1-카복실레이트(3.89 g, 20.87 mmol, 1.0 eq.) 용액에 K2CO3(3.46 g, 25.04 mmol, 1.2 eq)을 첨가하였다. 혼합물을 80 ℃로 가열하고 5시간 동안 교반하였다. 혼합물은 실온으로 냉각시키고 물(150 mL)로 희석하였다. 침전된 고체는 여과에 의해 수거하였다. 생성물을 EtOAc (150 mL)에 재용해시키고 Na2SO4상에서 건조시켰다. 진공하에 용매를 제거하여 백색 고체로서 3급-부틸 4-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페라진-1-카복실레이트(6.4g, 수율 87.9%)를 수득하였다.
LCMS: (ESI) (M+H-56)+ = 276.8.
1H NMR: (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 8.74 (s, 2H), 3.89 - 3.79 (m, 4H), 3.49 - 3.42 (m, 4H), 1.44 (s, 9H).
단계 F: 2-(피페라진-1-일)-5-(트리플루오로메틸)피리미딘(중간체 C)의 합성
DCM (10mL) 중의 3급-부틸 4-(5-트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페라진-1-카복실레이트 (3.00 g, 9.03 mmol, 1.0 eq)의 용액에 HCl/디옥산(4M, 10 mL)을 첨가하였다. 수득한 혼합물은 1시간동안 25 ℃에서 교반하였다. 혼합물에 DIPEA를 적가하여 pH 7~8로 조정하였다. 진공하에 혼합물을 농축시켜 백색 고체로서 2-(피페라진-1-일)-5-(트리플루오로메틸)피리미딘(2.90 g, 수율 100%)를 수득하였다.
LCMS: (ESI) (M+H)+ = 233.0.
단계 G: 3급-부틸 2-옥소-2-(4-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페라진-1-일)에톡시카바메이트의 합성
DMF(50mL) 중의 2-(피페라진-1-일)-5-(트리플루오로메틸)피리미딘(2.90 g, 12.49 mmol, 1.0 eq.)의 용액에 DIPEA(8.07 g, 62.45 mmol, 5.0 eq. ) 및 HATU(5.70 g, 14.99 mmol, 1.2 eq.)를 첨가한 후 2-(((3급-부톡시카보닐)아미노)옥시)아세트산(2.62 g, 13.74 mmol, 1.1 eq.)을 적가하였다. 수득한 혼합물은 2시간동안 25 ℃에서 교반하였다. 수득한 혼합물은 물(200 mL)로 켄칭시키고 EtOAc (3 x 150 mL)로 추출하였다. 유기층을 배합하고 염수 (150 mL)로 세척하고, Na2SO4상에서 건조시키고, 진공 농축시켰다. 잔사를 실리카겔 크로마토그래피(석유 에테르/EtOAc= 1/1; V/V)로 정제하여 황색 오일로서 3급-부틸 2-옥소-2-(4-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페라진-1-일)에톡시카바메이트(4.50g, 수율 88.9%)를 수득하였다.
LCMS: (ESI) (M+H-56)+ = 349.8.
단계 H: 2-(아미노옥시)-1-(4-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)헥사하이드로피라진-1-일)에타논 하이드로클로라이드(중간체 D)의 합성
DCM (60mL) 중의 3급-부틸 2-옥소-2-(4-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페라진-1-일)에톡시카바메이트(2.25 g, 5.55 mmol, 1.0 eq)의 용액에 HCl/디옥산(디옥산 중의 4M HCl 가스, 12 mL)을 첨가하였다. 수득한 혼합물은 2시간동안 25 ℃에서 교반하였다. 진공하에 반응 혼합물을 농축시켜 황색 고체로서 2-(아미노옥시)-1-(4-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)헥사하이드로피라진-1-일)에타논 하이드로클로라이드(1.73 g, 수율 91.2%)를 수득하였다.
LCMS: (ESI) (M+H)+ = 305.8.
1.2) 화합물 1의 합성
단계 A: (S)-3급-부틸 (1-((2-옥소-2-(4-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일) 피페라진-1-일)에톡시)아미노)프로판-2-일)카바메이트(중간체 E)의 합성
MeOH(10mL) 중의 2-(아미노옥시)-1-(4-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일) 헥사하이드로피라진-1-일)에타논 하이드클로라이드(342mg, 1.00mmol, 1.0 eq)의 혼합물에 DIPEA(388mg, 3.00mmol, 3.0 eq) 및 Boc-L-알라니날(208mg, 1.20mmol, 1.2 eq)을 첨가하였다. 혼합물은 3시간동안 55 ℃에서 교반하였다. 혼합물을 실온으로 냉각시키고 아세트산(240 mg, 4.00 mmol, 4.0 eq.) 및 나트륨 시아노보로하이드라이드(629 mg, 10.00 mmol, 10.0 eq.)을 혼합물에 첨가하였다. 혼합물은 추가로 16시간동안 55 ℃에서 교반하였다. 혼합물을 실온으로 냉각시키고 포화 NaHCO3 수용액(100mL)으로 켄칭시키고 EtOAc(2 x 80mL)로 추출하였다. 유기층을 배합하고 Na2SO4상에서 건조시키고, 진공 농축시켰다. 잔사를 실리카 겔 크로마토그래피(EtOAc/석유 에테르= 2/1; V/V)로 정제하여 백색 고체로서 (S)-3급-부틸 (1-((2-옥소-2-(4-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페라진-1-일)에톡시)아미노)프로판-2-일)카바메이트(330 mg, 71.3%)를 수득하였다.
LCMS: (ESI) (M+H)+ = 463.2.
1H NMR: (400 MHz, CDCl3) δ 8.51 (s, 2H), 6.58 (br s, 1H), 4.75 - 4.65 (m, 1H), 4.52 - 4.39 (m, 2H), 4.03 - 3.89 (m, 4H), 3.74 - 3.68 (m, 2H), 3.68 - 3.60 (m, 2H), 3.49 - 3.42 (m, 2H), 3.13 - 3.09 (m, 1H),1.45 (s, 9H), 1.19 - 1.14 (m, 3H).
단계 B: (S)-2-(((2- 아미노프로필)아미노)옥시)-1-(4-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페라진-1-일)에타논의 합성
DCM (3mL) 중의 (S)-3급-부틸 (1-((2-옥소-2-(4-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페라진-1-일)에톡시)아미노)프로판-2-일)카바메이트(148 mg, 0.32 mmol, 1.0 eq)의 용액에 TFA(1.5 mL)를 첨가하였다. 혼합물은 1시간동안 25 ℃에서 교반하였다. 과량의 TFA를 포화 NaHCO3 수용액(40mL)으로 중화시키고 혼합물을 DCM(2 x 50mL)으로 추출하였다. 유기층을 배합하고 Na2SO4상에서 건조시키고, 진공하에 농축하여 담황색 고체로서 (S)-2-(((2-아미노프로필)아미노)옥시)-1-(4-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페라진-1-일)에타논(116mg, 99.0%)을 수득하였다.
LCMS: (ESI) (M+H)+ = 363.2.
단계 C: (S)-5-((1-((2-옥소-2-(4-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페라진-1-일)에톡시)아미노)프로판-2-일)아미노)-4-(트리플루오로메틸)-2-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)피리다진-3(2H)-온의 합성
EtOH(6mL) 중의 (S)-2-(((2-아미노프로필)아미노)옥시)-1-(4-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페라진-1-일)에타논(116 mg, 0.32 mmol, 1.0 eq.)의 용액에 TEA(162 mg, 1.60 mmol, 5.0 eq.) 및 5-클로로-4-(트리플루오로메틸)-2-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)피리다진-3(2H)-온(316 mg, 0.96 mmol, 3.0 eq.)을 첨가하였다. 혼합물을 60 ℃로 가열하고 3시간 동안 교반하였다. 혼합물은 실온으로 냉각시키고 진공 농축시켰다. 잔사를 실리카 겔 크로마토그래피(EtOAc/석유 에테르= 2/1; V/V)로 정제하여 담황색 고체로서 (S)-5-((1-((2-옥소-2-(4-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페라진-1-일)에톡시)아미노)프로판-2-일)아미노)-4-(트리플루오로메틸)-2-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)피리다진-3(2H)-온(37 mg, 17.7%)를 수득하였다.
LCMS: (ESI) (M+H)+ = 655.2.
단계 D: (S)-5-((1-((2-옥소-2-(4-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페라진-1-일)에톡시)아미노)프로판-2-일)아미노)-4-(트리플루오로메틸)피리다진-3(2H)-온의 합성
DCM (3mL) 중의 (S)-5-((1-((2-옥소-2-(4-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페라진-1-일)에톡시)아미노)프로판-2-일)아미노)-4-(트리플루오로메틸)-2-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)피리다진-3(2H)-온(26 mg, 0.04 mmol, 1.0 eq)의 용액에 TFA(0.4 mL)를 첨가하였다. 혼합물은 0.5시간동안 25 ℃에서 교반하였다. 혼합물을 포화 NaHCO3 수용액(30mL)으로 중화시키고 DCM(3 x 50mL)으로 추출하였다. 유기층을 배합하고 Na2SO4상에서 건조시키고, 진공 농축시켰다. 잔사를 MeOH(3mL)에 재용해하고 탄산칼륨(20mg, 0.15mmol, 3.6 eq.)을 첨가하였다. 혼합물은 추가로 1시간동안 25 ℃에서 교반하였다. 혼합물을 여과하고 여과물을 prep-HPLC로 정제하여 담황색 고체로서 (S)-5-((1-((2-옥소-2-(4-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘 -2-일)피페라진-1-일)에톡시)아미노)프로판-2-일)아미노)-4-(트리플루오로메틸)피리다진-3(2H)-온(3.62 mg, 15.7%)를 수득하였다.
LCMS: (ESI) (M+H)+ = 525.5.
1H NMR: (400 MHz, CDCl3)　δ　10.50 (br s, 1H), 8.52 (s, 2H), 7.70 (s, 1H), 7.05 - 6.97 (m, 1H), 6.33 - 6.22 (m, 1H), 4.44 (s, 2H), 4.08 - 3.99 (m, 1H), 3.98 - 3.89 (m, 4H), 3.76 - 3.66 (m, 2H), 3.43 - 3.34 (m, 2H), 3.33 - 3.23 (m, 1H), 3.07 - 2.96 (m, 1H), 1.36 (d,　J　= 6.4 Hz, 3H).
실시예 2:
(S)-5-((1-(메틸(2-옥소-2-(4-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페라진-1-일)에톡시)아미노)프로판-2-일)아미노)-4-(트리플루오로메틸)피리다진-3(2H)-온
단계 A: (S)-3급-부틸 (1-(메틸(2-옥소-2-(4-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페라진-1-일)에톡시)아미노)프로판-2-일)카바메이트의 합성
MeOH (10mL) 중의 (S)-3급-부틸 (1-((2-옥소-2-(4-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페라진-1-일)에톡시)아미노)프로판-2-일)카바메이트(240 mg, 0.52 mmol, 1.0 eq)의 용액에 포름알데히드(물 중 37%, 421 mg, 5.19 mmol, 10.0 eq.)를 첨가하였다. 혼합물은 3시간동안 23 ℃에서 교반하였다. 아세트산(125 mg, 2.08 mmol, 4.0 eq.) 및 나트륨 시아노보로하이드라이드(326 mg, 5.19 mmol, 10.0 eq.)을 반응 혼합물에 첨가하였다. 혼합물은 추가로 16시간동안 23℃에서 교반하였다. 혼합물은 물(80 mL)로 희석하고 포화된 NaHCO3 수용액(10mL)으로 중화시켰다. 혼합물은 EtOAc (3 x 80 mL)로 추출하였다. 유기층을 배합하고 염수 (80 mL)로 세척하고, Na2SO4상에서 건조시키고, 진공 농축시켰다. 잔사를 컬럼 크로마토그래피(석유 에테르/EtOAc= 2/1; V/V)로 정제하여 무색 오일로서 (S)-3급-부틸 (1-(메틸(2-옥소-2-(4-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페라진-1-일)에톡시)아미노)프로판-2-일)카바메이트(200 mg, 76.0% 수율)를 수득하였다.
LCMS: (ESI) (M+H)+ = 477.2.
단계 B: (S)-2-(((2-아미노프로필)(메틸)아미노)옥시)-1-(4-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페라진-1-일)에타논의 합성
DCM (4mL) 중의 (S)-3급-부틸 (1-(메틸(2-옥소-2-(4-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페라진-1-일)에톡시)아미노)프로판-2-일)카바메이트(170 mg, 0.36 mmol, 1.0 eq.)의 용액에 TFA(2 mL)를 첨가하였다. 혼합물은 1시간동안 23 ℃에서 교반하였다. 과량의 TFA를 포화 NaHCO3 수용액(50mL)으로 중화시키고 혼합물을 DCM(3 x 80mL)으로 추출하였다. 유기층을 배합하고 Na2SO4상에서 건조시키고, 진공하에 농축하여 백색 고체로서 (S)-2-(((2-아미노프로필)(메틸)아미노)옥시)-1-(4-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페라진-1-일)에타논(120 mg, 78.6%)을 수득하였다.
LCMS: (ESI) (M+H)+ = 377.2.
단계 C: (S)-5-((1-(메틸(2-옥소-2-(4-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페라진-1-일)에톡시)아미노)프로판-2-일)아미노)-4-(트리플루오로메틸)-2-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)피리다진-3(2H)-온의 합성
EtOH(10mL) 중의 (S)-2-(((2-아미노프로필)(메틸)아미노)옥시)-1-(4-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페라진-1-일)에타논(120 mg, 0.32 mmol, 1.0 eq.)의 용액에 TEA(162 mg, 1.60 mmol, 5.0 eq.)을 첨가하고 이어서 5-클로로-4-(트리플루오로메틸)-2-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)피리다진-3(2H)-온(210 mg, 0.64 mmol, 2.0 eq.)을 첨가하였다. 혼합물을 60 ℃로 가열하고 3시간 동안 교반하였다. 혼합물은 25 ℃로 냉각시키고 진공 농축시켰다. 잔사를 컬럼 크로마토그래피(석유 에테르/EtOAc= 2/1; V/V)로 정제하여 황색 오일로서 (S)-5-((1-(메틸(2-옥소-2-(4-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페라진-1-일)에톡시)아미노)프로판-2-일)아미노)-4-(트리플루오로메틸)-2-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)피리다진-3(2H)-온(50 mg, 15.0%)을 수득하였다.
LCMS: (ESI) (M+H)+ = 669.3.
단계 D: (S)-5-((1-(메틸(2-옥소-2-(4-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페라진-1-일)에톡시)아미노)프로판-2-일)아미노)-4-(트리플루오로메틸)피리다진-3(2H)-온의 합성
DCM (2mL) 중의 (S)-5-((1-(메틸(2-옥소-2-(4-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페라진-1-일)에톡시)아미노)프로판-2-일)아미노)-4-(트리플루오로메틸)-2-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)피리다진-3(2H)-온(25 mg, 0.037 mmol, 1.0 eq.)의 용액에 TFA(0.2 mL)를 첨가하였다. 혼합물은 2시간동안 21 ℃에서 교반하였다. 혼합물을 포화 NaHCO3(30mL)로 중화시키고 DCM(3 x 50mL)으로 추출하였다. 유기층을 배합하고 Na2SO4상에서 건조시키고, 진공 농축시켰다. 잔사를 MeOH(2mL)에 재용해하고 탄산칼륨(19 mg, 0.14 mmol, 3.6 eq.)을 첨가하였다. 혼합물은 추가로 1시간동안 21 ℃에서 교반하였다. 혼합물을 여과하고 여과물을 prep-HPLC로 정제하여 백색 고체로서 (S)-5-((1-(메틸(2-옥소-2-(4-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페라진-1-일)에톡시)아미노)프로판-2-일)아미노)-4-(트리플루오로메틸)피리다진-3(2H)-온(4.8 mg, 22.9% 수율)을 수득하였다.
LCMS: (ESI) (M+H)+=539.2.
1H NMR: (400 MHz, CDCl3) δ 10.23 (br s, 1H), 8.51 (s, 2H), 7.75 (s, 1H), 6.04 - 5.95 (m, 1H), 4.46 - 4.36 (m, 2H), 4.19 - 4.09 (m, 1H), 3.96 - 3.86 (m, 4H), 3.73 - 3.59 (m, 2H), 3.48 - 3.39 (m, 2H), 3.06 - 2.94 (m, 1H), 2.92 - 2.83 (m, 1H), 2.71 (s, 3H), 1.34 (d, J = 6.4 Hz, 3H).
실시예 3:
(S)-5-((1-(에틸(2-옥소-2-(4-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페라진-1-일)에톡시)아미노)프로판-2-일)아미노)-4-(트리플루오로메틸)피리다진-3(2H)-온
단계 A: (S)-3급-부틸 (1-(에틸(2-옥소-2-(4-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페라진-1-일)에톡시)아미노)프로판-2-일)카바메이트의 합성
MeOH (10mL) 중의 (S)-3급-부틸(1-((2-옥소-2-(4-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페라진-1-일)에톡시)아미노)프로판-2-일)카바메이트(250 mg, 0.54 mmol, 1.0 eq.)의 용액에 아세트알데히드(238 mg, 5.41 mmol, 10.0 eq.)를 첨가하였다. 혼합물은 3시간동안 23 ℃에서 교반하였다. 이어서, 혼합물에 아세트산(32 mg, 0.54 mmol, 1.0 eq.) 및 나트륨 시아노보로하이드라이드(340 mg, 5.41 mmol, 10.0 eq.)를 첨가하였다. 혼합물은 추가로 16시간동안 23℃에서 교반하였다. 혼합물은 물(80 mL)로 희석하고 포화된 NaHCO3 수용액(5mL)으로 중화시켰다. 혼합물은 EtOAc (3 x 80 mL)로 추출하였다. 유기층을 배합하고 염수 (80 mL)로 세척하고, Na2SO4상에서 건조시키고, 진공 농축시켰다. 잔사를 컬럼 크로마토그래피(석유 에테르/EtOAc= 2/1; V/V)로 정제하여 황색 오일로서 (S)-3급-부틸 (1-(에틸(2-옥소-2-(4-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페라진-1-일)에톡시)아미노)프로판-2-일)카바메이트(180 mg, 63.8% 수율)를 수득하였다.
LCMS: (ESI) (M+H)+ = 491.2.
단계 B: (S)-2-(((2-아미노프로필)(에틸)아미노)옥시)-1-(4-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페라진-1-일)에타논의 합성
DCM (4mL) 중의 (S)-3급-부틸(1-(에틸(2-옥소-2-(4-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페라진-1-일)에톡시)아미노)프로판-2-일)카바메이트(160 mg, 0.33 mmol, 1.0 eq)의 용액에 TFA(2 mL)를 첨가하였다. 혼합물은 1시간동안 23 ℃에서 교반하였다. 과량의 TFA를 포화 NaHCO3 수용액(40mL)으로 중화시키고 혼합물을 DCM(3 x 50mL)으로 추출하였다. 유기층을 배합하고 Na2SO4상에서 건조시키고, 진공하에 농축하여 백색 고체로서 (S)-2-(((2-아미노프로필)(에틸)아미노)옥시)-1-(4-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페라진-1-일)에타논(160 mg, 95.5%)을 수득하였다.
LCMS: (ESI) (M+H)+ = 391.2.
단계 C: (S)-5-((1-(에틸(2-옥소-2-(4-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페라진-1-일)에톡시)아미노)프로판-2-일)아미노)-4-(트리플루오로메틸)-2-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)피리다진-3(2H)-온의 합성
EtOH(2 mL) 중의 (S)-2-(((2-아미노프로필)(에틸)아미노)옥시)-1-(4-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페라진-1-일)에타논(160 mg, 0.41 mmol, 1.0 eq.)의 용액에 TEA(207 mg, 2.05 mmol, 5.0 eq.) 및 5-클로로-4-(트리플루오로메틸)-2-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)피리다진-3(2H)-온(270 mg, 0.82 mmol, 2.0 eq.)을 첨가하였다. 혼합물을 60 ℃로 가열하고 3시간 동안 교반하였다. 혼합물은 실온으로 냉각시키고 진공 농축시켰다. 잔사를 컬럼 크로마토그래피(석유 에테르/EtOAc= 1/1; V/V)로 정제하여 황색 오일로서 (S)-5-((1-(에틸(2-옥소-2-(4-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘 -2-일)피페라진-1-일)에톡시)아미노)프로판-2-일)아미노)-4-(트리플루오로메틸)-2-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)피리다진-3(2H)-온(110 mg, 33.4%)를 수득하였다.
LCMS: (ESI) (M+H)+ = 683.4.
단계 D: (S)-5-((1-(에틸(2-옥소-2-(4-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페라진-1-일)에톡시)아미노)프로판-2-일)아미노)-4-(트리플루오로메틸)피리다진-3(2H)-온의 합성
DCM (2mL) 중의 (S)-5-((1-(에틸(2-옥소-2-(4-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페라진-1-일)에톡시)아미노)프로판-2-일)아미노)-4-(트리플루오로메틸)-2-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)피리다진-3(2H)-온(105 mg, 0.15 mmol, 1.0 eq)의 용액에 TFA(0.2 mL)를 첨가하였다. 혼합물은 2시간동안 21 ℃에서 교반하였다. 혼합물을 포화 NaHCO3 수용액(50mL)으로 중화시키고 DCM(2 x 80mL)으로 추출하였다. 유기층을 배합하고 Na2SO4상에서 건조시키고, 진공 농축시켰다. 잔사를 MeOH(2mL)에 재용해하고 탄산칼륨(77 mg, 0.55 mmol, 3.6 eq.)을 첨가하였다. 혼합물은 추가로 1시간동안 21 ℃에서 교반하였다. 혼합물을 여과하고 여과물을 prep-HPLC로 정제하여 백색 고체로서 (S)-5-((1-(에틸(2-옥소-2-(4-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘 -2-일)피페라진-1-일)에톡시)아미노)프로판-2-일)아미노)-4-(트리플루오로메틸)피리다진-3(2H)-온(23.29 mg, 27.4% 수율)을 수득하였다.
LCMS: (ESI) (M+H)+ = 553.2.
1H NMR: (400 MHz, CDCl3) δ 10.15 (br s, 1H), 8.51 (s, 2H), 7.76 (s, 1H), 6.04 - 5.92 (m, 1H), 4.49 - 4.40 (m, 2H), 4.24 - 4.15 (m, 1H), 3.95 - 3.85 (m, 4H), 3.73 - 3.54 (m, 2H), 3.46 - 3.35 (m, 2H), 3.01 - 2.83 (m, 4H), 1.33 (d, J = 6.4 Hz, 3H), 1.16 (t, J = 7.2 Hz, 3H).
실시예 4:
(S)-2-(4-(2-((메틸(2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로필)아미노)옥시)아세틸)피페라진-1-일)피리미딘-5-카보니트릴
4.1) 중간체 G의 합성
단계 A: 3급-부틸 4-(5-시아노피리미딘-2-일)피페라진-1-카복실레이트의 합성
NMP(30 mL) 중의 2-클로로피리미딘-5-카보니트릴(3.0 g, 21.50 mmol, 1.0 eq.) 및 3급-부틸 피페라진-1-카복실레이트(4.00 g, 21.50 mmol, 1.0 eq.) 용액에 K2CO3(5.94 g, 43.00 mmol, 2.0 eq)을 첨가하였다. 혼합물을 80 ℃로 가열하고 1.0시간 동안 교반하였다. 혼합물은 실온으로 냉각시키고 물(40 mL)로 희석하였다. 혼합물은 EtOAc (3 x 50 mL)로 추출하였다. 유기층을 배합하고 염수 (50 mL)로 세척하고, Na2SO4상에서 건조시키고, 진공 농축시켰다. 잔사를 실리카 겔 크로마토그래피(석유 에테르/EtOAc=5/1; V/V)로 정제하여 황색 고체로서 3급-부틸 (4-(5-시아노피리미딘-2-일)피페라진-1-카복실레이트(4.0 g, 수율 64.3%)를 수득하였다.
LCMS: (ESI) (M+H-56)+ = 234.2.
1H NMR: (400 MHz, CDCl3) δ 8.50 (s, 2H), 3.95 - 3.84 (m, 4H), 3.58 - 3.45 (m, 4H), 1.49 (s, 9H).
단계 B: 2-(피페라진-1-일)피리미딘-5-카보니트릴 하이드로클로라이드(중간체 G)의 합성
DCM (5mL) 중의 3급-부틸 4-(5-시아노피리미딘-2-일)피페라진-1-카복실레이트 (1.0 g, 3.46 mmol, 1.0 eq)의 용액에 HCl/디옥산(4M, 15 mL)을 첨가하였다. 수득한 혼합물은 1시간동안 15 ℃에서 교반하였다. 진공하에 혼합물을 농축시켜 백색 고체로서 2-(피페라진-1-일)피리미딘-5-카보니트릴 하이드로클로라이드(720 mg, 수율 92.3%)를 수득하였다.
LCMS: (ESI) (M+H)+ = 190.2.
4.2) 화합물 4의 합성
단계 A: 3급-부틸 (2-(4-(5-시아노피리미딘-2-일)피페라진-2-옥소에톡시)카바메이트의 합성
THF(100mL) 중의 2-(피페라진-1-일)피리미딘-5-카보니트릴 하이드로클로라이드(7.1 g, 37.57 mmol, 1.0 eq.)의 용액에 DIEA(7.2 g, 56.25 mmol, 1.5 eq.) 및 HATU(21 g, 56.25 mmol, 1.5 eq.)를 첨가한 후 2-(((3급-부톡시카보닐)아미노)옥시)아세트산(7.1 g, 37.57 mmol, 1.1 eq.)을 적가하였다. 수득한 혼합물은 2시간동안 25 ℃에서 교반하였다. 반응 혼합물은 물(200 mL)로 켄칭시키고 EtOAc (3 x 150 mL)로 추출하였다. 유기층을 배합하고 염수 (150 mL)로 세척하고, Na2SO4상에서 건조시키고, 진공 농축시켰다. 잔사를 실리카 겔 크로마토그래피(석유 에테르/EtOAc=1/1; V/V)로 정제하여 백색 고체로서 3급-부틸 (2-(4-(5-시아노피리미딘 -2-일)피페라진-1-일)-2-옥소에톡시)카바메이트(8.3 g, 수율 61%)를 수득하였다.
LCMS: (ESI) (M+H-56)+ = 306.1.
단계 B: 2-(4-(2-(아미노옥시)아세틸)피페라진-1-일)피리미딘-5-카보니트릴 하이드로클로라이드의 합성
DCM (5mL) 중의 3급-부틸 (2-(4-(5-시아노피리미딘-2-일)피페라진-1-일)-2-옥소에톡시)카바메이트 (500 mg, 1.38 mmol, 1.0 eq)의 용액에 HCl/디옥산(4M, 3 mL)을 첨가하였다. 수득한 혼합물은 2시간동안 25 ℃에서 교반하였다. 반응 혼합물은 진공 농축시켰다. 잔사를 실리카 겔 크로마토그래피(DCM/MeOH=92/8; V/V)로 정제하여 백색 고체로서 2-(4-(2-(아미노옥시)아세틸)피페라진-1-일)피리미딘-5-카보니트릴 하이드로클로라이드(200 mg, 수율 72%)를 수득하였다.
LCMS: (ESI) (M+H)+ = 263.1.
단계 C: 3급-부틸 (S)-(1-((2-(4-(5-시아노피리미딘-2-일)피페라진-1-일)-2-옥소에톡시)아미노)프로판-2-일)카바메이트의 합성
MeOH(4 mL) 중 2-(4-(2-(아미노옥시)아세틸)피페라진-1-일)피리미딘-5-카보니트릴 하이드로클로라이드(200 mg, 0.764 mmol, 1.0 eq)의 용액에 3급-부틸(S)-(1-옥소프로판-2-일)카바메이트(200mg, 1.15mmol, 1.5eq)을 첨가하였다. 혼합물은 2시간동안 55 ℃에서 교반하였다. 아세트산(182 mg, 3.1 mmol, 4.0 eq.) 및 나트륨 시아노보로하이드라이드(380 mg, 7.6 mmol, 10.0 eq.)을 반응 합물에 첨가하였다. 혼합물은 추가로 16시간동안 55 ℃에서 교반하였다. 혼합물은 포화된 NH4Cl 수용액으로 켄칭시키고 EtOAc (3 x 30 mL)로 추출하였다. 유기층을 배합하고 염수 (40 mL)로 세척하고, Na2SO4상에서 건조시키고, 진공 농축시켰다. 잔사를 컬럼 크로마토그래피(석유 에테르/EtOAc=1/1; V/V)로 정제하여 백색 고체로서 3급-부틸(S)-(1-((2-(4-(5-시아노피리미딘 -2-일)피페라진-1-일)-2-옥소에톡시)아미노)프로판-2-일)카바메이트(200 mg, 수율 62.0%)를 수득하였다.
LCMS: (ESI) (M+H)+ = 420.2.
단계 D: 3급-부틸 (S)-(1-((2-(4-(5-시아노피리미딘-2-일)피페라진-1-일)-2-옥소에톡시)(메틸)아미노)프로판-2-일)카바메이트의 합성
MeOH (12mL) 중의 (S)-(1-((2-(4-(5-시아노피리미딘-2-일)피페라진-1-일)-2-옥소에톡시)아미노)프로판-2-일)카바메이트(850 mg, 2.03 mmol, 1.0 eq)의 용액에 포름알데히드(290 mg, 2.44 mmol, 1.2 eq.)를 첨가하였다. 혼합물은 2시간동안 35 ℃에서 교반하였다. 아세트산(125 mg, 2.08 mmol, 4.0 eq.) 및 나트륨 시아노보로하이드라이드(1.2 g, 20.3 mmol, 10.0 eq.)을 반응 혼합물에 첨가하였다. 혼합물은 추가로 16시간동안 35 ℃에서 교반하였다. 혼합물은 물(35 mL)로 희석하고 EtOAc (3 x 30 mL)로 추출하였다. 유기층을 배합하고 염수 (40 mL)로 세척하고, Na2SO4상에서 건조시키고, 진공 농축시켰다. 잔사를 컬럼 크로마토그래피(석유 에테르/EtOAc=1/2, V/V)로 정제하여 담황색 고체로서 3급-부틸(S)-(1-((2-(4-(5-시아노피리미딘 -2-일)피페라진-1-일)-2-옥소에톡시)(메틸)아미노)프로판-2-일)카바메이트(650 mg, 수율 74.0%)를 수득하였다.
LCMS: (ESI) (M+H)+ = 434.2.
단계 E: (S)-2-(4-(2-(((2-아미노프로필)(메틸)아미노)옥시)아세틸)피페라진-1-일)피리미딘-5-카보니트릴의 합성
DCM (9mL) 중의 3급-부틸(S)-(1-((2-(4-(5-시아노피리미딘-2-일)피페라진-1-일)-2-옥소에톡시)(메틸)아미노)프로판-2-일)카바메이트(900 mg, 2.08 mmol, 1.0 eq)의 용액에 TFA(4 mL)를 첨가하였다. 혼합물은 1시간동안 23 ℃에서 교반하였다. 과량의 TFA를 포화 NaHCO3(50mL)으로 중화시키고 혼합물을 DCM(3 x 80mL)으로 추출하였다. 유기층을 배합하고 Na2SO4상에서 건조시키고, 진공하에 농축하여 백색 고체로서 (S)-2-(4-(2-(((2-아미노프로필)(메틸)아미노)옥시)아세틸)피페라진-1-일)피리미딘-5-카보니트릴(500 mg, 72%)을 수득하였다.
LCMS: (ESI) (M+H)+ = 334.2.
단계 F: (S)-2-(4-(2-((메틸(2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로필)아미노)옥시)아세틸)피페라진-1-일)피리미딘-5-카보니트릴의 합성
EtOH(10mL) 중의 (S)-2-(4-(((2-아미노프로필)(메틸)아미노)옥시)아세틸)피페라진-1-일)피리미딘-5-카보니트릴(340 mg, 1.02 mmol, 1.0 eq. )의 용액에 TEA(247 mg, 2.44 mmol, 2.0 eq.) 및 5-클로로-4-(트리플루오로메틸)-2-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)피리다진-3(2H)-온(400 mg, 1.22 mmol, 1.20 eq.)을 첨가하였다. 혼합물을 60 ℃에서 가열하고 1시간 동안 교반하였다. 혼합물은 실온으로 냉각시키고 진공 농축시켰다. 잔사를 컬럼 크로마토그래피(석유 에테르/EtOAc= 1/1, V/V)로 정제하여 무색 오일로서 (S)-2-(4-(2-((메틸(2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로필)아미노)옥시)아세틸)피페라진-1-일)피리미딘-5-카보니트릴 (70 mg, 11.0%)을 수득하였다.
LCMS: (ESI) (M+H)+ = 626.4.
단계 G: (S)-2-(4-(2-((메틸(2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로필)아미노)옥시)아세틸)피페라진-1-일)피리미딘-5-카보니트릴의 합성
DCM(3 mL) 중의 (S)-2-(4-(2-((메틸(2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로필)아미노)옥시)아세틸)피페라진-1-일)피리미딘-5-카보니트릴(70 mg, 0.112 mmol, 1.0 eq.)의 용액에 TFA(0.3 mL)를 첨가하였다. 혼합물은 2시간동안 21 ℃에서 교반하였다. 혼합물을 포화 NaHCO3(30mL)로 중화시키고 DCM(3 x 50mL)으로 추출하였다. 유기층을 배합하고 Na2SO4상에서 건조시키고, 진공 농축시켰다. 잔사를 MeOH(3mL)에 용해하고 탄산칼륨(60 mg, 0.4 mmol, 3 eq.)을 반응 혼합물에 첨가하였다. 혼합물은 추가로 1시간동안 21 ℃에서 교반하였다. 혼합물을 진공 농축시키고, 잔사를 컬럼 크로마토그래피(석유 에테르/EtOAc= 1/100, V/V)로 정제하여 백색 고체로서 (S)-2-(4-(2-((메틸(2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로필)아미노)옥시)아세틸)피페라진-1-일)피리미딘-5-카보니트릴 (20 mg, 수율 36.3%)을 수득하였다.
LCMS: (ESI) (M+H)+ = 496.2.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 10.34 (s, 1H), 8.52 (s, 2H), 7.74 (s, 1H), 6.12 - 5.82 (m, 1H), 4.40 (d, J = 1.4 Hz, 2H), 4.19 - 4.07 (m, 1H), 3.99 - 3.84 (m, 4H), 3.74 - 3.58 (m, 2H), 3.49 - 3.37 (m, 2H), 3.08 - 2.93 (m, 1H), 2.93 - 2.81 (m, 1H), 2.71 (s, 3H), 1.34 (d, J = 6.5 Hz, 3H).
실시예 5:
(S,E)-2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노) 프로파날 O-(2-옥소-2-(4-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페라진-1-일)에틸)옥심의 합성
단계 A：Boc-L-알라니날의 합성
DCM(120mL) 중의 Boc-L-알라니놀(5.26 g, 30.00 mmol, 1.0 eq.) 용액에 빙수 욕조에서 0℃에서 데스-마틴 페리오디난(Dess-Martin periodinane)(17.81 g, 42.00 mmol, 1.4 eq.)를 첨가하였다. 혼합물은 1시간 동안 20 ℃에서 교반하였다. 혼합물은 물(756 mg, 42.00 mmol, 1.4 eq.)을 첨가하고 이어서 EtOAc/석유 에테르(1/15; V/V, 150 mL)를 첨가하여 서서히 켄칭하였다. 혼합물을 여과하고, 여과물을 농축하였다. 잔사를 EtOAc/석유 에테르(1/15; V/V, 150 mL)에 재용해시키고 포화 NaHCO3 수용액과 10% 티오황산나트륨 수용액(1:1; V/V, 3 x 120mL)의 혼합 용액으로 세척하였다. 수성층은 EtOAc/석유 에테르(1/10; V/V, 5 x 150 mL)로 역추출하였다. 유기층을 배합하고 Na2SO4상에서 건조시키고, 진공하에 농축시켜 담황색 고체로서 Boc-L-알라니날(3.02g, 17.44mmol, 수율 58.1%)을 수득하였다.
1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 9.56 (s, 1H), 5.11 (br s, 1H), 4.30 - 4.17 (m, 1H), 1.46 (s, 9H), 1.34 (d, J = 7.2 Hz, 3H).
단계 B: (S,E)-3급-부틸 (1-((2-옥소-2-(4-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페라진-1-일)에톡시)이미노)프로판-2-일)카바메이트의 합성
MeOH(20mL) 중의 2-(아미노옥시)-1-(4-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페라진-1-일)에타논 하이드클로라이드(400 mg, 1.17 mmol, 1.0 eq)의 용액에 DIPEA(454 mg, 3.51 mmol, 3.0 eq) 및 Boc-L-알라니날(284 mg, 1.64 mmol, 1.4 eq)을 첨가하였다. 혼합물은 3시간동안 55 ℃에서 교반하였다. 아세트산(71 mg, 1.17 mmol, 1.0 eq.) 및 나트륨 시아노보로하이드라이드(111 mg, 1.76 mmol, 1.5 eq.)을 반응 혼합물에 첨가하였다. 혼합물은 추가로 0.5시간동안 55 ℃에서 교반하였다. 혼합물을 포화 NaHCO3 수용액(50mL)으로 희석시키고 EtOAc(3 x 100mL)으로 추출하였다. 유기층을 배합하고 염수 (80 mL)로 세척하고, Na2SO4상에서 건조시키고, 진공 농축시켰다. 잔사를 컬럼 크로마토그래피(EtOAc/석유 에테르= 3/4; V/V)로 정제하여 백색 고체로서 (S, E)-3급-부틸 (1-((2-옥소-2-(4-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페라진-1-일)에톡시)이미노)프로판-2-일)카바메이트(350 mg, 수율 64.3%)를 수득하였다.
LCMS:(ESI)(M+H-100)+ = 361.2.
1H NMR(400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 8.73 - 8.71 (m, 2H), 7.39 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 7.12 -7.10 (d, J = 8 Hz, 1H), 4.74 - 4.70 (m, 2H), 4.17 - 4.08 (m, 1H), 3.93 - 3.77 (m, 4H), 3.61 -3.50 (m, 4H), 1.35 (s, 9H), 1.15 (d, J = 7.2 Hz, 3H).
단계 C: (S,E)-2-아미노프로파날 O-(2-옥소-2-(4-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페라진-1-일)에틸)옥심의 합성
DCM (6mL) 중의 (S,E)-3급-부틸 (1-((2-옥소-2-(4-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페라진-1-일)에톡시)이미노)프로판-2-일)카바메이트(300 mg, 0.65 mmol, 1.0 eq)의 용액에 TFA(2 mL)를 첨가하였다. 혼합물은 1시간동안 23 ℃에서 교반하였다. 과량의 TFA를 포화 NaHCO3 수용액(50mL)으로 중화시키고 혼합물을 DCM(3 x 80mL)으로 추출하였다. 유기층을 배합하고 Na2SO4상에서 건조시키고, 진공하에 농축하여 백색 고체로서 (S,E)-2-아미노프로파날 O-(2-옥소-2-(4-(5-트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페라진-1-일)에틸)옥심(200 mg, 수율 57.9%)을 수득하였다.
LCMS:(ESI)(M+H)+ = 361.2.
단계 D: (S,E)-2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노) 프로파날 O-(2-옥소-2-(4-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페라진-1-일)에틸)옥심의 합성
EtOH(10mL) 중의 (S,E)-2-아미노프로파날 O-(2-옥소-2-(4-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페라진-1-일)에틸)옥심(200 mg, 0.56 mmol, 1.0 eq.)의 용액에 TEA(281 mg, 2.76 mmol, 5.0 eq.)을 첨가하고 이어서 5-클로로-4-(트리플루오로메틸)-2-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)피리다진-3(2H)-온(365 mg, 1.11 mmol, 2.0 eq.)을 첨가하였다. 혼합물을 60 ℃로 가열하고 3시간 동안 교반하였다. 혼합물은 실온으로 냉각시키고 진공 농축시켰다. 잔사를 컬럼 크로마토그래피(EtOAc/석유 에테르= 3/5; V/V)로 정제하여 황색 오일로서 (S,E)-2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로파날 O-(2-옥소-2-(4-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페라진-1-일)에틸)옥심(160mg, 수율 40.0%)을 수득하였다.
LCMS:(ESI)(M+H)+ = 653.2.
단계 E: (S,E)-2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로파날 O-(2-옥소-2-(4-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페라진-1-일)에틸)옥심의 합성
DCM (10 mL) 중의 (S,E)-2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로파날 O-(2-옥소-2-(4-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페라진-1-일)에틸)옥심(150 mg, 0.23 mmol, 1.0 eq.)의 용액에 TFA(1mL)를 첨가하였다. 혼합물은 1시간동안 21 ℃에서 교반하였다. 혼합물을 포화 NaHCO3 수용액(50mL)으로 중화시키고 DCM(2 x 80mL)으로 추출하였다. 유기층을 배합하고 Na2SO4상에서 건조시키고, 진공 농축시켰다. 잔사를 MeOH(5mL)에 재용해시키고 탄산칼륨(114 mg, 0.83 mmol, 3.6 eq.)을 첨가하였다. 혼합물은 추가로 1시간동안 21 ℃에서 교반하였다. 혼합물을 여과하고, 여과물을 prep-HPLC로 정제하여 백색 고체로서 (S,E)-2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로파날 O-(2-옥소-2-(4-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페라진-1-일) 에틸)옥심(43.89 mg, 수율 36.6%)을 수득하였다.
LCMS:(ESI)(M+H)+=523.2.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 11.06 (br s, 1H), 8.58 - 8.47 (m, 2H), 7.71 (s, 1H), 7.50 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 5.91 - 5.81 (m, 1H), 4.84 - 4.74 (m, 2H), 4.48 - 4.39 (m, 1H), 3.99 - 3.88 (m, 4H), 3.77 - 3.68 (m, 2H), 3.56 - 3.48 (m, 2H), 1.52 (d, J = 6.8 Hz, 3H).
실시예 6:
(S,E)-2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)부타날 O-(2-옥소-2-(4-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페라진-1-일)에틸)옥심
단계 A: (S)-3급-부틸(1-옥소부탄-2-일)카바메이트의 합성
디클로로메탄(20 mL)중의 (S)-3급-부틸 (1-하이드록시부탄-2-일)카바메이트(600 mg, 3.17 mmol, 1.0 eq.) 용액에 데스-마틴 페리오디난(1.88 g, 4.44 mmol, 1.4 eq.))을 0℃에서 첨가하였다. 혼합물은 1시간동안 15 ℃에서 교반하였다. 혼합물은 물(12 mL) 및 EtOAc/석유 에테르(1:15; V/V, 18 mL)로 희석하였다. 혼합물을 여과하고, 여과물을 농축하였다. 잔사를 EtOAc/석유 에테르(1/15; V/V, 18 mL)에 재용해시키고 포화 NaHCO3 수용액과 10% 티오황산나트륨 수용액(1:1; V/V, 3 x 15mL)의 혼합 용액으로 세척하였다. 수성층은 EtOAc/석유 에테르(1/10, 3 x 18 mL)로 역추출하였다. 유기층을 배합하고 Na2SO4상에서 건조시키고, 진공하에 농축시켜 황색 고체로서 (S)-3급-부틸(1-옥소부탄-2-일)카바메이트(355mg, 수율 53.8%)을 수득하였다.
LCMS: (ESI) (M+H-56)+ = 132.0.
1H NMR: (400 MHz, CDCl3) δ 9.58 (s, 1H), 5.07 (br s, 1H), 4.27 - 4.12 (m, 1H), 2.00 - 1.83 (m, 1H), 1.74 - 1.62 (m, 1H), 1.46 (s, 9H), 0.97 (t, J = 7.6 Hz, 3H).
단계 B: (S,E)-3급-부틸 (1-((2-옥소-2-(4-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페라진-1-일)에톡시)이미노)부탄-2-일)카바메이트의 합성
THF(10 mL) 중의 (S)-3급-부틸 (1-옥소부탄-2-일)카바메이트(150 mg, 0.81 mmol, 1.0 eq.)의 용액에 2-(아미노옥시)-1-(4-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페라진-1-일)에타논 하이드로클로라이드(329 mg, 0.96 mmol, 1.2 eq.), 테트라에톡시 티타늄(457 mg, 2.01 mmol, 2.5 eq.) 및 DIPEA(311 mg, 2.41mmol, 3.0eq.)을 첨가하였다. 수득한 혼합물은 2시간동안 80℃에서 교반하였다. 혼합물을 실온으로 냉각시키고 물(50mL)으로 켄칭시키고 EtOAc(3 x 80mL)로 추출하였다. 유기층을 배합하고 염수 (100 mL)로 세척하고, 무수 Na2SO4상에서 건조시키고, 진공 농축시켰다. 잔사를 컬럼 크로마토그래피(EtOAc/석유 에테르= 1/2; V/V)로 정제하여 백색 고체로서 (S, E)-3급-부틸 (1-((2-옥소-2-(4-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페라진-1-일)에톡시)이미노)부탄-2-일)카바메이트(260 mg, 수율 68.4%)를 수득하였다.
LCMS: (ESI) (M+H)+ = 475.2.
단계 C: (S,E)-2-아미노부타날 O-(2-옥소-2-(4-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페라진-1-일)에틸)옥심의 합성
DCM (6mL) 중의 (S,E)-3급-부틸 (1-((2-옥소-2-(4-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페라진-1-일)에톡시)이미노)부탄-2-일)카바메이트(220 mg, 0.46 mmol, 1.0 eq)의 용액에 TFA(2 mL)를 첨가하였다. 수득한 혼합물은 1시간동안 15 ℃에서 교반하였다. 반응 혼합물을 포화 NaHCO3 수용액(20mL)으로 켄칭시키고 DCM(2 x 50mL)으로 추출하였다. 유기층을 배합하고, 염수로 세척하고, Na2SO4상에서 건조시키고, 진공하에 농축하여 황색 고체로서 (S,E)-2-아미노부타날 O-(2-옥소-2-(4-(5-트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페라진-1-일)에틸)옥심(170 mg, 수율 60.7%)을 수득하였다.
LCMS: (ESI) (M+H)+ = 375.2.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.55 (s, 2H), 7.48 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 4.89 - 4.71 (m, 2H), 4.04 - 3.93 (m, 4H), 3.80 - 3.72 (m, 2H), 3.66 - 3.55 (m, 2H), 3.49 (q, J = 6.8 Hz, 1H), 1.83 (br s, 2H), 1.70 - 1.56 (m, 2H), 1.05 - 0.96 (m, 3H).
단계 D: (S,E)-2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)부타날 O-(2-옥소-2-(4-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페라진-1-일)에틸)옥심의 합성
EtOH(10mL) 중의 (S,E)-2-아미노부타날 O-(2-옥소-2-(4-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페라진-1-일)에틸)옥심(170 mg, 0.45 mmol, 1.0 eq.)의 용액에 5-클로로-4-(트리플루오로메틸)-2-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)피리다진-3(2H)-온(224 mg, 0.68 mmol, 1.5 eq.) 및 TEA(230 mg, 2.27 mmol, 5.0 eq)를 첨가하였다. 혼합물은 4시간동안 60 ℃에서 교반하였다. 혼합물은 실온으로 냉각시키고, 물(100 mL)로 희석하고 에틸 아세테이트 (2 x 100 mL)로 추출하였다. 유기층을 염수 (100 mL)로 세척하고, Na2SO4상에서 건조시키고, 진공 농축시켰다. 잔사를 컬럼 크로마토그래피(EtOAc/석유 에테르= 1/2; V/V)로 정제하여 황색 오일로서 (S,E)-2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)부타날 O-(2-옥소-2-(4-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페라진-1-일)에틸)옥심(110 mg, 수율 34.1%)을 수득하였다.
LCMS: (ESI) (M+H-28)+ = 638.6.
단계 E: (S,E)-2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)부타날 O-(2-옥소-2-(4-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페라진-1-일)에틸)옥심
DCM (3 mL) 중의 (S,E)-2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노) 부타날 O-(2-옥소-2-(4-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페라진-1-일)에틸)옥심(100 mg, 0.15 mmol, 1.0 eq.)의 용액에 TFA(1mL)를 첨가하였다. 혼합물은 1시간동안 15 ℃에서 교반하였다. 혼합물을 포화 NaHCO3 수용액(50mL)으로 중화시키고 DCM(3 x 80mL)으로 추출하였다. 유기층을 배합하고 Na2SO4상에서 건조시키고, 진공 농축시켰다. 잔사를 MeOH(4mL)에 재용해하고 탄산칼륨(77 mg, 0.55 mmol, 3.6 eq.)을 첨가하였다. 혼합물은 추가로 1시간동안 15 ℃에서 교반하였다. 혼합물을 여과하고, 여과물을 prep-HPLC로 정제하여 백색 고체로서 (S,E)-2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)부타날 O-(2-옥소-2-(4-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페라진-1-일)에틸)옥심(14.66 mg, 수율 18.1%)을 수득하였다.
LCMS: (ESI) (M+H)+=536.7.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 11.02 (s, 1H), 8.52 (s, 2H), 7.72 (s, 1H), 7.46 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 5.82 - 5.73 (m, 1H), 4.84 - 4.76 (m, 2H), 4.29 - 4.20 (m, 1H), 4.01 - 3.88 (m, 4H), 3.76 - 3.68 (m, 2H), 3.56 - 3.47 (m, 2H), 1.93 - 1.80 (m, 2H), 1.04 (t, J = 7.2 Hz, 3H).
실시예 7:
(S,E)-2-(4-(2-(((2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로필리덴)아미노)옥시)아세틸)피페라진-1-일)피리미딘-5-카보니트릴
단계 A: 메틸 2-(((3급-부톡시카보닐)아미노)옥시)아세테이트의 합성
DMF(50 mL) 중의 2-(((3급-부톡시카보닐)아미노)옥시)아세트산(6.00 g, 31.38 mmol, 1.0 eq.) 및 K2CO3 (5.21 g, 37.66 mmol, 1.2 eq.) 용액에 요오도메탄(4.45 g, 31.38 mmol, 1.0 eq)을 첨가하였다. 혼합물을 1시간 동안 15 ℃에서 교반하였다. 반응물은 물(100 mL)로 켄칭시키고 EtOAc (3 x 60 mL)로 추출하였다. 유기층을 배합하고 염수 (40 mL)로 세척하고, 무수 Na2SO4상에서 건조시키고, 감압하에 농축시켰다. 잔사를 컬럼 크로마토그래피(석유 에테르/EtOAc= 2/1; V/V)로 정제하여 무색 오일로서 메틸 2-(((3급-부톡시카보닐)아미노)옥시)아세테이트(5.08 g, 78.9%)를 수득하였다.
0LCMS:　(ESI)　(M+H-56)+ = 150.2.
1H NMR: (400 MHz, CDCl3)　δ　7.82 (br s, 1H), 4.48 (s, 2H), 3.82 (s, 3H), 1.51 (s, 9H).
단계 B: 메틸 2-(아미노옥시)아세테이트 하이드로클로라이드의 합성
DCM(10 mL) 중의 메틸 2-(((3급-부톡시카보닐)아미노)옥시)아세테이트(2.85 g, 13.89 mmol, 1.0 eq.)의 용액에 HCl/디옥산(4M, 50 mL)을 첨가하였다. 혼합물을 1시간 동안 15 ℃에서 교반하였다. 감압하에 혼합물을 농축시켜 백색 고체로서 메틸 2-(아미노옥시)아세테이트 하이드로클로라이드(1.96 g, 수율 99.9%)를 수득하였다.
LCMS: (ESI)　(M+H)+ = 106.2.
단계 C: 메틸 (S,E)-6,10,10-트리메틸-8-옥소-3,9-디옥사-4,7-디아자운덱-4-에노에이트의 합성
THF(120 mL) 중의 메틸 2-(아미노옥시)아세테이트 하이드로클로라이드(1.96 g, 13.85 mmol, 1.2 eq.)의 혼합물에 DIPEA(5.7 mL, 34.62 mmol, 3.0 eq.), (S)-3급-부틸(1-옥소프로판-2-일)카바메이트(2.00g, 11.54mmol, 1.0eq.) 및 테트라에톡시 티타늄(2.63g, 11.54mmol, 1.0eq.)을 첨가하였다. 혼합물은 2시간 동안 80 ℃에서 교반하였다. 반응물은 이어서 물(100 mL)로 켄칭시키고 EtOAc (3 x 100 mL)로 추출하였다. 유기층을 배합하고 염수 (100 mL)로 세척하고, 무수 Na2SO4상에서 건조시키고, 감압하에 농축시켰다. 잔사를 컬럼 크로마토그래피(석유 에테르/EtOAc= 2/1)로 정제하여 백색 고체로서 메틸 (S,E)-6,10,10-트리메틸-8-옥소-3,9-디옥사-4,7-디아자운덱-4-에노에이트(1.69 g, 56.3%)를 수득하였다.
LCMS: (ESI)　(M+H-100)+ = 161.2.
1H NMR: (400 MHz, CDCl3)　δ　7.59 - 7.49 (m, 1H), 5.01 - 4.80 (br, 1H), 4.63 (s, 2H), 4.33 - 4.26 (m, 1H), 3.81 (s, 3H), 1.48 (s, 9H), 1.34 (d, J = 6.8 Hz, 3H).
단계 D: ((((6S,7E)-2,2,6-트리메틸-4-옥소-5-아자-3-옥사헵탄-7-일리덴)아미노)옥시)아세트산(중간체 F)의 합성
MeOH (30 mL) 및 H2O (5 mL) 중의 메틸 (S,E)-6,10,10-트리메틸-8-옥소-3,9-디옥사-4,7-디아자운덱-4-에노에이트 (900 mg, 3.46 mmol, 1.0 eq.)의 용액에 LiOH (124 mg, 5.19 mmol, 1.5 eq.)를 첨가하였다. 상기 혼합물을 40℃에서 2시간 동안 교반하였다. 혼합물은 실온으로 냉각시키고 물(40 mL)로 희석하였다. 혼합물은 1M HCl 수용액으로 pH3으로 산성화시키고 DCM(3 x 50 mL)로 추출하였다. 유기층을 배합하고, 염수(80 mL)로 세척하고, Na2SO4상에서 건조시키고, 감압 하에 농축하여 황색 오일로서 ((((6S,7E)-2,2,6-트리메틸-4-옥소-5-아자-3-옥사헵탄-7-일리덴)아미노)옥시)아세트산(851mg, 99.9%)을 수득하였다.
LCMS:　(ESI)　(M+Na)+ = 269.2.
단계 E: (S,E)-3급-부틸 (1-((2-(4-(5-시아노피리미딘-2-일)피페라진-1-일)-2-옥소에톡시)이미노)프로판-2-일)카바메이트의 합성
DMF(8 mL) 중의 ((((6S,7E)-2,2,6-트리메틸-4-옥소-5-아자-3-옥사헵탄-7-일리덴)아미노)옥시)아세트산(135 mg, 0.55 mmol, 1.0 eq.) 및 2-(피페라진-1-일)피리미딘-5-카보니트릴 하이드로클로라이드(136 mg, 0.60 mmol, 1.1 eq.)의 용액에 실온에서 DIPEA(0.54 mL, 3.30 mmol, 6.0 eq.), HATU(250 mg, 0.66 mmol, 1.2 eq.)을 첨가하였다. 혼합물은 2시간동안 25 ℃에서 교반하였다. 반응물은 물(40 mL)로 켄칭시키고 EtOAc (3 x 40 mL)로 추출하였다. 유기층을 배합하고 염수 (50 mL)로 세척하고, Na2SO4상에서 건조시키고, 감압하에 농축시켰다. 잔사를 컬럼 크로마토그래피(석유 에테르/EtOAc=1/1)로 정제하여 황색 오일로서 (S,E)-3급-부틸(1-((2-(4-(5-시아노피리미딘-2-일)피페라진-1-일)-2-옥소에톡시)이미노)프로판-2-일)카바메이트(180 mg, 수율 78.7%)를 수득하였다.
LCMS: (ESI)　(M+H-100)+ = 318.2.
1H NMR: (400 MHz, CDCl3)　δ　8.52 (d, J = 2.8 Hz, 2H), 7.50 (d, J = 4.4 Hz, 1H), 4.82 - 4.77 (m, 1H), 4.75 (s, 2H), 4.35 (br s, 1H), 3.98 - 3.93 (m, 4H), 3.76 - 3.69 (m, 2H), 3.62 - 3.55 (m, 2H), 1.43 (s, 9H), 1.31 (d, J = 6.8 Hz, 3H).
단계 F: (S,E)-2-(4-(2-(((2-아미노프로필리덴)아미노)옥시)아세틸)피페라진-1-일)피리미딘-5-카보니트릴의 합성
DCM (8mL) 중의 (S,E)-3급-부틸 (1-((2-(4-(5-시아노피리미딘-2-일)피페라진-1-일)-2-옥소에톡시)이미노)프로판-2-일)카바메이트(210 mg, 0.52 mmol, 1.0 eq)의 용액에 TFA(2 mL)를 첨가하였다. 수득한 용액은 0.5시간동안 15 ℃에서 교반하였다. 혼합물을 포화 NaHCO3(40mL)로 중화시키고 DCM(3 x 50mL)으로 추출하였다. 유기층을 배합하고 Na2SO4상에서 건조시키고, 진공하에 농축하여 황색 오일로서 (S,E)-2-(4-(2-(((2-아미노프로필리덴)아미노)옥시)아세틸)피페라진-1-일)피리미딘-5-카보니트릴(150 mg, 95.0%)을 수득하였다.
LCMS:　(ESI)　(M+H)+ = 318.2.
단계 G: (S,E)-2-(4-(2-(((2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로필리덴)아미노)옥시)아세틸)피페라진-1-일)피리미딘-5-카보니트릴의 합성
EtOH(3mL) 중의 (S,E)-2-(4-(2-(((2-아미노프로필리덴)아미노)옥시)아세틸)피페라진-1-일)피리미딘-5-카보니트릴(64 mg, 0.20 mmol, 1.0 eq. ) 및 5-클로로-4-(트리플루오로메틸)-2-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)피리다진-3(2H)-온(73 mg, 0.22 mmol, 1.1 eq.)의 용액에 TEA(41 mg, 0.40 mmol, 2.0 eq)를 첨가하였다. 혼합물을 60 ℃로 가열하고 2시간 동안 교반하였다. 반응물은 이어서 물(20 mL)로 켄칭시키고 EtOAc (3 x 30 mL)로 추출하였다. 유기층을 배합하고 염수 (30 mL)로 세척하고, Na2SO4상에서 건조시키고, 감압하에 농축시켰다. 잔사를 컬럼 크로마토그래피(석유 에테르/EtOAc= 1/3)로 정제하여 황색 오일로서 (S,E)-2-(4-(2-(((2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로필리덴)아미노)옥시)아세틸)피페라진-1-일)피리미딘-5-카보니트릴 (56 mg, 45.5%)을 수득하였다.
LCMS:　(ESI)　(M+H-28)+ = 582.2.
단계 H: (S,E)-2-(4-(2-(((2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로필리덴)아미노)옥시)아세틸)피페라진-1-일)피리미딘-5-카보니트릴의 합성
DCM(3 mL) 중의 (S,E)-2-(4-(2-(((2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로필리덴)아미노)옥시)아세틸)피페라진-1-일)피리미딘-5-카보니트릴(56 mg, 0.09 mmol, 1.0 eq)의 용액에 TFA(1 mL)를 첨가하였다. 수득한 용액은 0.5시간동안 15 ℃에서 교반하였다. 혼합물은 진공하에 농축시켰다. 잔사는 MeOH (1 mL)에 재용해시키고, K2CO3 (10 mg, 0.07 mmol)를 첨가하였다. 혼합물은 0.5시간동안 15 ℃에서 교반하였다. 혼합물을 여과하고, 여과물을 prep-HPLC로 정제하여 백색 고체로서 (S,E)-2-(4-(2-(((2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로필리덴)아미노)옥시)아세틸)피페라진-1-일)피리미딘-5-카보니트릴 (18.42 mg, 수율 41.8%)을 수득하였다.
LCMS:　(ESI)　(M+H)+ = 480.2.
1H NMR: (400 MHz, CDCl3)　δ　10.82 (s, 1H), 8.53 (s, 2H), 7.70 (s, 1H), 7.49 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 5.89 - 5.76 (m, 1H), 4.87 - 4.71 (m, 2H), 4.50 - 4.37 (m, 1H), 4.05 - 3.88 (m, 4H), 3.79 - 3.67 (m, 2H), 3.59 - 3.48 (m, 2H), 1.52 (d, J = 6.8 Hz, 3H).
실시예 8:
(S,E)-5-((3-((2-옥소-2-(4-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페라진-1-일)에톡시)이미노)부탄-2-일 )아미노)-4-(트리플루오로메틸)피리다진-3(2H)-온
단계 A: (S)-3급-부틸(3-옥소부탄-2-일)카바메이트의 합성
THF (12 mL) 중의 (S)-3급-부틸 (1-(메톡시(메틸)아미노)-1-옥소프로판-2-일) 카바메이트의 용액 (581 mg, 2.50 mmol, 1.0 eq.)의 용액에 MeMgBr (1M, 7.5 mL, 7.50 mmol, 3.0 eq.)를 N2 대기하에 빙수 욕조에서 0 ℃에서 서서히 첨가하였다. 혼합물은 1시간동안 0 ℃에서 교반하였다. 혼합물은 포화된 NH4Cl 수용액(30 mL)으로 서서히 켄칭시키고 EtOAc (2 x 50 mL)로 추출하였다. 유기층을 배합하고 Na2SO4상에서 건조시키고, 진공 농축시켰다. 잔사를 실리카 겔 크로마토그래피(EtOAc/석유=1/4; V/V)로 정제하여 담황색 고체로서 (S)-3급-부틸 (3-옥소부탄-2-일)카바메이트(400 mg, 수율 85.4%)를 수득하였다.
LCMS:　(ESI)　(M+H-56)+ = 132.2.
1H NMR: (400 MHz, CDCl3)　δ　5.25 (br s, 1H), 4.39 - 4.23 (m, 1H), 2.20 (s, 3H), 1.44 (s, 9H), 1.34 (d,　J　= 7.2 Hz, 3H).
단계 B: (S,E)-3급-부틸 (3-((2-옥소-2-(4-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일) 피페라진-1-일)에톡시)이미노)부탄-2-일)카바메이트의 합성
THF(8 mL) 중의 2-(아미노옥시)-1-(4-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)헥사하이드로피라진-1-일)에타논 하이드로클로라이드(205 mg, 0.60 mmol, 1.0 0eq.)의 현탁액에 DIPEA(233 mg, 1.80 mmol, 3.0 eq.), (S)-3급- 부틸(3-옥소프로판-2-일)카바메이트(135 mg, 0.72mmol, 1.2 eq.) 및 테트라에톡시 티타늄(342 mg, 11.54mmol, 2.5 eq.)을 첨가하였다. 혼합물은 2시간 동안 80 ℃에서 교반하였다. 혼합물을 실온으로 냉각시키고 포화 NaHCO3 수용액(50mL)으로 켄칭시키고 DCM(3 x 80mL)로 추출하였다. 유기층을 배합하고 Na2SO4상에서 건조시키고, 진공 농축시켰다. 잔사를 실리카 겔 크로마토그래피(MeOH/DCM = 1/33; V/V)로 정제하여 담황색 오일로서 (S, E)-3급-부틸 (1-((2-옥소-2-(4-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘 -2-일)피페라진-1-일)에톡시)이미노)부탄-2-일)카바메이트(240 mg, 수율 84.3%)를 수득하였다.
LCMS:　(ESI)　(M+H-100)+ = 374.8.
1H NMR: (400 MHz,　CDCl3)　δ　8.51 (s, 2H), 5.03 (br s, 1H), 4.76 (s, 2H), 4.31 - 4.19 (m, 1H), 3.97 - 3.90 (m, 4H), 3.75 - 3.67 (m, 2H), 3.63 - 3.56 (m, 2H), 1.90 (s, 3H), 1.42 (s, 9H), 1.29 (d,　J　= 6.8 Hz, 3H).
단계 C: (S, E)-2-(((3- 아미노부탄-2-일리덴)아미노)옥시)-1-(4-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페라진-1-일)에타논의 합성
DCM (4mL) 중의 (S,E)-3급-부틸 (3-((2-옥소-2-(4-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페라진-1-일)에톡시)이미노)부탄-2-일)카바메이트(250 mg, 0.53 mmol, 1.0 eq)의 용액에 TFA(1 mL)를 첨가하였다. 혼합물은 0.5시간동안 10℃에서 교반하였다. 과량의 TFA를 포화 NaHCO3 수용액(40mL)으로 중화시키고 혼합물을 DCM(3 x 60mL)으로 추출하였다. 유기층을 배합하고 Na2SO4상에서 건조시키고, 진공하에 농축하여 담황색 오일로서 (S,E)-2-(((3-아미노부탄-2-일리덴)아미노)옥시)-1-(4-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페라진-1-일)에타논(197 mg, 수율 99.9%)을 수득하였다.
LCMS:　(ESI)　(M+H)+ = 374.8.
단계 D: (S,E)-5-((3-((2-옥소-2-(4-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페라진-1-일)에톡시)아미노)부탄-2-일)아미노)-4-(트리플루오로메틸)-2-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)피리다진-3(2H)-온의 합성
EtOH(8mL) 중의 (S,E)-2-(((3-아미노부탄-2-일리덴)아미노)옥시)-1-(4-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페라진-1-일)에타논(197 mg, 0.53 mmol, 1.0 eq.)의 용액에 TEA(213 mg, 2.11 mmol, 4.0 eq.)을 첨가하고 이어서 5-클로로-4-(트리플루오로메틸)-2-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)피리다진-3(2H)-온(346 mg, 1.05 mmol, 2.0 eq.)을 첨가하였다. 혼합물을 60 ℃로 가열하고 3시간 동안 교반하였다. 혼합물은 실온으로 냉각시키고 진공 농축시켰다. 잔사를 실리카 겔 크로마토그래피(MeOH/DCM = 1/33; V/V)로 정제하여 담황색 오일로서 (S,E)-5-((3-((2-옥소-2-(4-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘 -2-일)피페라진-1-일)에톡시)이미노)부탄-2-일)아미노)-4-(트리플루오로메틸)-2-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)피리다진-3(2H)-온(190 mg, 수율 30.9%)을 수득하였다.
LCMS: (ESI)　(M+H)+ = 666.6.
단계 E: (S,E)-5-((3-((2-옥소-2-(4-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페라진-1-일)에톡시)이미노)부탄-2-일)아미노)-4-(트리플루오로메틸)피리다진-3(2H)-온의 합성
DCM (3mL) 중의 (S,E)-5-((3-((2-옥소-2-(4-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페라진-1-일)에톡시)이미노)부탄-2-일)아미노)-4-(트리플루오로메틸)-2-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)피리다진-3(2H)-온(187 mg, 0.16 mmol, 1.0 eq)의 용액에 TFA(1 mL)를 첨가하였다. 혼합물은 0.5시간동안 10℃에서 교반하였다. 혼합물을 포화 NaHCO3 수용액(30mL)으로 중화시키고 DCM(3 x 50mL)으로 추출하였다. 유기층을 배합하고 Na2SO4상에서 건조시키고, 진공 농축시켰다. 잔사는 MeOH (3 mL)에 재용해시키고, K2CO3 (30 mg, 0.22 mmol)를 첨가하였다. 혼합물은 추가로 1시간동안 10 ℃에서 교반하였다. 혼합물을 여과하고 여과물을 prep-HPLC(FA)로 정제하여 황색 고체로서 (S,E)-5-((3-((2-옥소-2-(4-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘 -2-일)피페라진-1-일)에톡시)이미노)부탄-2-일)아미노)-4-(트리플루오로메틸)피리다진-3(2H)-온(36.39 mg, 수율 41.8% )을 수득하였다.
LCMS: (ESI)　(M+H)+ = 537.2.
1H NMR: (400 MHz, CDCl3)　δ　11.36 (br s, 1H), 8.51 (s, 2H), 7.70 (s, 1H), 6.11 - 6.02 (m, 1H), 4.85 - 4.75 (m, 2H), 4.39 - 4.29 (m, 1H), 3.98 - 3.88 (m, 4H), 3.78 - 3.65 (m, 2H), 3.60 - 3.44 (m, 2H), 1.95 (s, 3H), 1.49 (d,　J　= 6.8 Hz, 3H).
실시예 9:
(S,E)-5-((2-((2-옥소-2-(4-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페라진-1-일)에톡시)이미노)사이클로펜틸)아미노)-4-(트리플루오로메틸)피리다진-3(2H)-온
단계 A: 3급-부틸((1S, 2S)-2-하이드록시사이클로펜틸)카바메이트의 합성
MeOH(40 mL) 중의 (1S,2S)-2-아미노사이클로펜타놀 하이드로클로라이드 (2.00 g, 14.53 mmol, 1.0 eq.)의 용액에 TEA (5.88 g, 58.12 mmol, 4.0 eq.) 및 Boc2O (327 mg, 21.80 mmol, 1.5 eq.)를 첨가하였다. 혼합물은 18시간동안 25 ℃에서 교반하였다. 반응물은 물(40 mL)로 켄칭시키고 DCM (3 x 50 mL)로 추출하였다. 유기층을 배합하고 염수 (200 mL)로 세척하고, 무수 Na2SO4상에서 건조시키고, 감압하에 농축시켰다. 잔사를 컬럼 크로마토그래피(석유 에테르/EtOAc= 1/1; V/V)로 정제하여 백색 고체로서 3급-부틸 ((1S,2S)-2-하이드록시사이클로펜틸)카바메이트(2.80 g, 95.7%)를 수득하였다.
LCMS: (ESI) (M+H-56)+ = 146.2.
1H NMR: (400 MHz, CDCl3) δ 4.72 (s, 1H), 4.01 - 3.95 (m, 1H), 3.67 - 3.58 (m, 1H), 2.14 - 2.05 (m, 1H), 2.04 - 1.95 (m, 1H), 1.84 - 1.72 (m, 1H), 1.71 - 1.58 (m, 2H), 1.45 (s, 9H), 1.41 - 1.28 (m, 1H).
단계 B: (S)-3급-부틸 (2-옥소사이클로펜틸)카바메이트의 합성
DCM(25 mL)중의 3급-부틸 ((1S, 2S)-2-하이드록시사이클로펜틸)카바메이트(1.00 g, 4.97 mmol, 1.0 eq.) 용액에 데스-마틴 페리오디난(4.22 g, 9.94 mmol, 2.0 eq.)을 첨가하였다. 혼합물은 2시간동안 15 ℃에서 교반하였다. 반응물을 포화 NaHCO3 수용액(100mL)으로 켄칭시키고 DCM(3 x 50mL)으로 추출하였다. 유기층을 배합하고 염수 (200 mL)로 세척하고, 무수 Na2SO4상에서 건조시키고, 감압하에 농축시켰다. 잔사를 컬럼 크로마토그래피(석유 에테르/EtOAc= 1/1; V/V)로 정제하여 무색 오일로서 (S)-3급-부틸(2-옥소사이클로펜틸)카바메이트(980 mg, 99.0%)를 수득하였다.
1H NMR: (400 MHz, CDCl3) δ 4.98 (s, 1H), 3.92 (s, 1H), 2.62 - 2.53 (m, 1H), 2.45 - 2.36 (m, 1H), 2.22 - 2.11 (m, 1H), 2.07 - 1.99 (m, 1H), 1.89 - 1.76 (m, 1H), 1.68 - 1.57 (m, 1H), 1.45 (s, 9H).
단계 C: (S,E)-3급-부틸 (2-((2-옥소-2-(4-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일) 피페라진-1-일)에톡시)이미노)사이클로펜틸)카바메이트의 합성
THF(15 mL) 중의 2-(아미노옥시)-1-(4-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페라진-1-일)에타논 하이드로클로라이드(229 mg, 0.67 mmol, 1.0 0eq.)의 혼합물에 DIPEA(233 mg, 2.01 mmol, 3.0 eq.), (S)-3급- 부틸(2-옥소사이클로펜틸)카바메이트(159 mg, 0.80 mmol, 1.2 eq.) 및 테트라에톡시 티타늄(383 mg, 1.68mmol, 2.5 eq.)을 첨가하였다. 혼합물은 2시간 동안 80 ℃에서 교반하였다. 혼합물을 실온으로 냉각시키고 포화 NaHCO3 수용액(20mL)으로 켄칭시키고 DCM(3 x 50mL)으로 추출하였다. 유기층을 배합하고 Na2SO4상에서 건조시키고, 진공 농축시켰다. 잔사를 실리카 겔 크로마토그래피(DCM/MeOH= 20/1;V/V)로 정제하여 담황색 오일로서 (S,E)-3급-부틸 (2-((2-옥소-2-(4-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘 -2-일)피페라진-1-일)에톡시) 이미노)사이클로펜틸)카바메이트(290 mg, 89.0%)를 수득하였다.
LCMS: (ESI) (M+H-100)+ = 387.0.
단계 D: (S,E)-2-(((2-아미노사이클로펜틸리덴)아미노)옥시)-1-(4-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페라진-1-일)에타논의 합성
DCM (9 mL) 중의 (S,E)-3급-부틸 (2-((2-옥소-2-(4-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페라진-1-일)에톡시)이미노)사이클로펜틸)카바메이트(290 mg, 0.60 mmol, 1.0 eq)의 용액에 TFA(3 mL)를 첨가하였다. 혼합물은 0.5시간동안 15 ℃에서 교반하였다. 혼합물을 포화 NaHCO3 수용액(30mL)으로 켄칭시키고 DCM(3 x 50mL)으로 추출하였다. 유기층을 배합하고 Na2SO4상에서 건조시키고, 감압하에 농축하여 백색 고체로서 (S,E)-2-(((2-아미노사이클로펜틸리덴)아미노)옥시)-1-(4-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페라진-1-일)에타논(135 mg, 45.3%)을 수득하였다.
LCMS: (ESI) (M+H)+ = 387.2.
단계 E: (S,E)-5-((2-((2-옥소-2-(4-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페라진-1-일)에톡시)이미노)사이클로펜틸)아미노)-4-(트리플루오로메틸)-2-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)피리다진-3(2H)-온의 합성
EtOH(5mL) 중의 (S,E)-2-(((2-아미노사이클로펜틸리덴)아미노)옥시)-1-(4-(5-트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페라진-1-일)에타논(151 mg, 0.39 mmol, 1.0 eq. ) 및 5-클로로-4-(트리플루오로메틸)-2-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)피리다진-3(2H)-온(256 mg, 0.78 mmol, 2.0 eq.)의 용액에 TEA(158 mg, 1.56 mmol, 4.0 eq)를 첨가하였다. 혼합물을 60 ℃로 가열하고 3시간 동안 교반하였다. 반응물을 실온으로 냉각시키고 물(20mL)으로 켄칭시키고 EtOAc(3 x 20mL)로 추출하였다. 유기층을 배합하고 염수 (40 mL)로 세척하고, Na2SO4상에서 건조시키고, 감압하에 농축시켰다. 잔사를 컬럼 크로마토그래피(DCM/MeOH= 20/1; V/V)로 정제하여 황색 오일로서 (S,E)-5-((2-((2-옥소-2-(4-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘 -2-일)피페라진-1-일)에톡시)이미노)사이클로펜틸)아미노)-4-(트리플루오로메틸)-2-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)피리다진-3(2H)-온(145 mg, 55.0%)를 수득하였다.
LCMS: (ESI) (M+H-28)+ = 651.2.
단계 F: (S,E)-5-((2-((2-옥소-2-(4-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페라진-1-일)에톡시)이미노)사이클로펜틸)아미노)-4-(트리플루오로메틸)피리다진-3(2H)-온의 합성
DCM (6mL) 중의 (S,E)-5-((2-((2-옥소-2-(4-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페라진-1-일)에톡시)이미노)사이클로펜틸)아미노)-4-(트리플루오로메틸)-2-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)피리다진-3(2H)-온(149 mg, 0.22 mmol, 1.0 eq)의 용액에 TFA(2 mL)를 첨가하였다. 혼합물은 0.5시간동안 15 ℃에서 교반하였다. 혼합물은 진공하에 농축시켰다. 잔사는 MeOH (2 mL)에 재용해시키고, K2CO3(21 mg, 0.15 mmol)를 첨가하였다. 혼합물은 추가로 1시간동안 15 ℃에서 교반하였다. 혼합물을 여과하고 여과물을 prep-HPLC(FA)로 정제하여 백색 고체로서 (S,E)-5-((2-((2-옥소-2-(4-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페라진-1-일)에톡시)이미노)사이클로펜틸)아미노)-4-(트리플루오로메틸)피리다진-3(2H)-온(50.87 mg, 수율 42.9% )을 수득하였다.
LCMS: (ESI) (M+H)+ = 549.2.
1H NMR: (400 MHz, CDCl3) δ 10.61 (s, 1H), 8.55 (s, 2H), 7.74 (s, 1H), 6.05 - 5.98 (m, 1H), 4.87 - 4.79 (m, 2H), 4.49 - 4.42 (m, 1H), 4.01 - 3.92 (m, 4H), 3.79 - 3.70 (m, 2H), 3.60 - 3.51 (m, 2H), 2.74 - 2.65 (m, 2H), 2.53 - 2.43 (m, 1H), 2.12 - 2.01 (m, 1H), 1.92 - 1.80 (m, 1H), 1.77 - 1.68 (m, 1H).
실시예 10:
(S,E)-2-사이클로프로필-2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)아세트알데히드 O-(2-옥소-2-(4-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페라진-1-일)에틸)옥심
단계 A: (S)-메틸 2-아미노-2-사이클로프로필아세테이트 하이드로클로라이드의 합성
MeOH(9 mL) 중의 (S)-2-아미노-2-사이클로프로필아세트산(806 mg, 7.00 mmol, 1.0 eq.)의 용액에 빙수 욕조에서 0℃에서 SOCl2 (3.1 mL, 42.01 mmol, 6.0 eq.)를 서서히 첨가하였다. 혼합물은 16시간동안 10℃에서 교반하였다. 진공하에 혼합물을 농축시켜 담황색 고체로서 (S)-메틸 2-아미노-2-사이클로프로필아세테이트 하이드로클로라이드(1.16 g, 99.1%)를 수득하였다.
LCMS:　(ESI)　(M+H)+ = 130.0.
1H NMR:　(400 MHz, CD3OD)　δ　3.89 (s, 3H), 3.40 (d,　J　= 10.0 Hz, 1H), 1.25 - 1.14 (m, 1H), 0.89 - 0.77 (m, 2H), 0.76 - 0.68 (m, 1H), 0.65 - 0.57 (m, 1H).
단계 B: (S)-메틸 2-((3급-부톡시카보닐)아미노)-2-사이클로프로필아세테이트의 합성
DCM(20 mL) 중의 (S)-메틸 2-아미노-2-사이클로프로필아세테이트 하이드로클로라이드 (1.16 g, 7.00 mmol, 1.0 eq.)의 용액에 빙수 욕조에서 0℃에서 TEA (4.9 mL, 35.02 mmol, 5.0 eq.) 및 이어서 Boc2O (1.83 g, 8.40 mmol, 1.2 eq.)를 첨가하였다. 혼합물은 16시간동안 10℃에서 교반하였다. 혼합물을 포화 수용액(80mL)으로 희석시키고 EtOAc(2 x 80mL)으로 추출하였다. 유기층을 배합하고 포화 NH4Cl 수용액 (80 mL)으로 세척하고, Na2SO4상에서 건조시키고, 진공 농축시켰다. 잔사를 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(EtOAc/석유 에테르= 1/9; V/V)로 정제하여 담황색 오일로서 (S)-메틸 2-((3급-부톡시카보닐)아미노)-2-사이클로프로필아세테이트(1.56 g, 96.9%)를 수득하였다.
LCMS:　(ESI)　(M+H-56)+ = 174.0.
1H NMR:　(400　MHz,　CDCl3)　δ　5.11 (br s, 1H), 3.85 - 3.80 (m, 1H), 3.79 (s, 3H), 1.47 (s, 9H), 1.13 - 1.03 (m, 1H), 0.64 - 0.47 (m, 3H), 0.46 - 0.37 (m, 1H).
단계 C: (S)-3급-부틸 (1-사이클로프로필-2-옥소에틸)카바메이트의 합성
무수 THF(3 mL) 중의 (S)-메틸 2-((3급-부톡시카보닐)아미노)-2-사이클로프로필아세테이트(229 mg, 1.00 mmol, 1.0 eq.)의 혼합물에 N2 대기 하에 DIBAL-H(1M, 1.40 mL, 1.40 mmol, 1.4 eq.)을 드라이아이스-EtOH 욕조에서 -78℃에서 적가하였다. 혼합물은 0.5시간동안 -78℃에서 교반하였다. 혼합물은 포화 NH4Cl 수용액(50 mL)으로 켄칭시키고 석유 에테르 및 EtOAc (1/1; V/V, 3 x 50 mL)의 혼합 용매로 추출하였다. 유기층을 배합하고 포화 NH4Cl 수용액(2 x 50 mL)으로 세척하고 Na2SO4상에서 건조시키고 진공하에 농축하여 황색 오일로서 조 (S)-3급-부틸 (1-사이클로프로필-2-옥소에틸) 카바메이트(230 mg, 57.7% 수율)를 수득하였다.
LCMS:　(ESI)　(M+H-56)+ = 144.2.
단계 D: (S,E)-3급-부틸 (1-사이클로프로필-2-((2-옥소-2-(4-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페라진-1-일)에톡시)이미노)에틸)카바메이트의 합성
THF(7 mL) 중의 2-(아미노옥시)-1-(4-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)헥사하이드로피라진-1-일)에타논 하이드로클로라이드(150 mg, 0.44 mmol, 1.0 0eq.)의 혼합물에 DIPEA(175 mg, 1.32 mmol, 3.0 eq.), (S)-3급- 부틸(1-사이클로프로필-2-옥소에틸)카바메이트(175 mg, 0.44 mmol, 1.0 eq.) 및 테트라에톡시 티타늄(250 mg, 1.10 mmol, 2.5 eq.)을 첨가하였다. 혼합물은 2시간 동안 80 ℃에서 교반하였다. 혼합물을 실온으로 냉각시키고 포화 NaHCO3 수용액(50mL)으로 켄칭시키고 EtOAc(2 x 80mL)로 추출하였다. 유기층을 배합하고 Na2SO4상에서 건조시키고, 진공 농축시켰다. 잔사를 실리카 겔 크로마토그래피(EtOAc/석유 에테르= 9/11; V/V)로 정제하여 백색 고체로서 (S,E)-3급-부틸 (1-사이클로프로필-2-((2-옥소-2-(4-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페라진-1-일)에톡시)이미노)에틸)카바메이트(133 mg, 62.3%)를 수득하였다.
LCMS: (ESI)　(M+H-100)+ = 387.2.
1H NMR: (400 MHz, CDCl3)　δ　8.54 (s, 2H), 7.55 (d,　J　= 5.2 Hz, 1H), 5.06 - 4.89 (m, 1H), 4.84 - 4.74 (m, 2H), 4.05 - 3.89 (m, 4H), 3.83 - 3.67 (m, 3H), 3.66 - 3.55 (m, 2H), 1.45 (s, 9H), 1.07 - 0.94 (m, 1H), 0.66 - 0.55 (m, 2H), 0.53 - 0.44 (m, 1H), 0.39 - 0.29 (m, 1H).
단계 E: (S,E)-2-아미노-2-사이클로프로필아세트알데히드 O-(2-옥소-2-(4-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페라진-1-일)에틸)옥심의 합성
DCM (8 mL) 중의 (S,E)-3급-부틸 (1-사이클로프로필-2-((2-옥소-2-(4-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페라진-1-일)에톡시)이미노)에틸)카바메이트(163 mg, 0.34 mmol, 1.0 eq)의 용액에 TFA(2 mL)를 첨가하였다. 혼합물은 1시간동안 15 ℃에서 교반하였다. 혼합물을 포화 NaHCO3 수용액(40mL)으로 켄칭시키고 DCM(3 x 35mL)으로 추출하였다. 유기층을 배합하고 Na2SO4상에서 건조시키고, 진공하에 농축하여 황색 고체로서 (S,E)-2-아미노-2-사이클로프로필아세트알데히드 O-(2-옥소-2-(4-(5-트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페라진-1-일)에틸)옥심(106 mg, 수율 81.9%)을 수득하였다.
LCMS: (ESI) (M+H)+ = 387.2.
단계 F: (S,E)-2-사이클로프로필-2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)아세트알데히드 O-(2-옥소-2-(4-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페라진-1-일)에틸)옥심의 합성
EtOH(3mL) 중의 (S,E)-2-아미노-2-사이클로프로필아세트알데히드 O-(2-옥소-2-(4-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페라진-1-일)에틸)옥심(106 mg, 0.27 mmol, 1.0 eq.) 및 5-클로로-4-(트리플루오로메틸)-2-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)피리다진-3(2H)-온(178 mg, 0.54 mmol, 2.0 eq.)의 용액에 TEA(55 mg, 0.54 mmol, 2.0 eq)를 첨가하였다. 혼합물을 60 ℃로 가열하고 2시간 동안 교반하였다. 반응물을 실온으로 냉각시키고 물(15mL)로 켄칭시키고 EtOAc(3 x 20mL)로 추출하였다. 유기층을 배합하고 염수 (40 mL)로 세척하고, Na2SO4상에서 건조시키고, 감압하에 농축시켰다. 잔사를 컬럼 크로마토그래피(석유 에테르/EtOAc = 1/3; V/V)로 정제하여 황색 오일로서 (S,E)-2-사이클로프로필-2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)아세트알데히드 O-(2-옥소-2-(4-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페라진-1-일)에틸)옥심(74 mg, 수율 39.7%)을 수득하였다.
LCMS: (ESI) (M+H)+ = 679.2.
단계 G: (S,E)-2-사이클로프로필-2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)아세트알데히드 O-(2-옥소-2-(4-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페라진-1-일)에틸)옥심의 합성
DCM (3 mL) 중의 (S,E)-2-사이클로프로필-2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노) 아세트알데히드 O-(2-옥소-2-(4-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페라진-1-일)에틸)옥심(74 mg, 0.11 mmol, 1.0 eq.)의 용액에 TFA(1mL)를 첨가하였다. 혼합물은 0.5시간동안 15 ℃에서 교반하였다. 혼합물은 진공하에 농축시켰다. 잔사는 MeOH (1 mL)에 재용해시키고, K2CO3 (10 mg, 0.07 mmol)를 첨가하였다. 혼합물은 추가로 0.5시간동안 15 ℃에서 교반하였다. 혼합물을 여과하였다. 여과물을 prep-HPLC로 정제하여 백색 고체로서 (S,E)-2-사이클로프로필-2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)아세트알데히드 O-(2-옥소-2-(4-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페라진-1-일) 에틸)옥심(15.28 mg, 수율 25.6%)을 수득하였다.
LCMS:　(ESI)　(M+H)+ = 549.2.
1H NMR: (400 MHz, CDCl3) δ 10.82 (s, 1H), 8.56 (s, 2H), 7.71 (s, 1H), 7.54 (d, J = 6.4 Hz, 1H), 5.98 - 5.90 (m, 1H), 4.83 (s, 2H), 4.05 - 3.90 (m, 4H), 3.83 - 3.72 (m, 3H), 3.62 - 3.50 (m, 2H), 1.24 - 1.14 (m, 1H), 0.87 - 0.73 (m, 2H), 0.59 - 0.46 (m, 2H).
실시예 11:
(S,E)-6-(4-(2-(((2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로필리덴)아미노)옥시)아세틸)피페라진-1-일)니코티노니트릴
11.1) 중간체 H의 합성
단계 A: 3급-부틸 4-(5-시아노피리딘-2-일)피페라진-1-카복실레이트의 합성
NMP (150 mL) 중의 6-클로로니코티노니트릴(5.00 g, 36.09 mmol, 1.0 eq.)의 용액에 3급-부틸 피페라진-1-카복실레이트 (7.39 g, 39.70 mmol, 1.1 eq.) 및 K2CO3 (14.96 g, 108.27 mmol, 3.0 eq.)를 첨가하였다. 수득한 용액은 2시간동안 80℃에서 교반하였다. 반응물은 실온으로 냉각시켰다. 혼합물은 물(150 mL)로 켄칭시키고 EtOAc (3 x 150 mL)로 추출하였다. 유기층을 배합하고 염수 (500 mL)로 세척하고, 무수 Na2SO4상에서 건조시키고, 감압하에 농축시켰다. 잔사를 컬럼 크로마토그래피(석유 에테르/EtOAc=2/1; V/V)로 정제하여 황색 고체로서 3급-부틸 4-(5-시아노피리미딘-2-일)피페라진-1-카복실레이트(8.40 g, 수율 80.7%)를 수득하였다.
LCMS: (ESI) (M+H-56)+ = 233.2.
1H NMR: (400 MHz, CDCl3) δ 8.41 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.64 (dd, J = 8.8, 2.4 Hz, 1H), 6.61 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 3.3.70 - 3.67 (m, 4H), 3.56 - 3.53 (m, 4H), 1.49 (s, 9H).
단계 B: 6-(피페라진-1-일)니코티노니트릴 하이드로클로라이드(중간체 H)의 합성
DCM (2mL) 중의 3급-부틸 4-(5-시아노피리딘-2-일)피페라진-1-카복실레이트 (1.30 g, 4.51 mmol, 1.0 eq)의 용액에 HCl/디옥산(4M, 15 mL)을 첨가하였다. 혼합물은 1시간동안 15 ℃에서 교반하였다. 감압하에 혼합물을 농축시켜 백색 고체로서 6-(피페라진-1-일)니코티노니트릴 하이드로클로라이드(0.99 g, 97.2%)를 수득하였다.
LCMS: (ESI) (M+H)+ = 189.2.
11.2) 화합물 11의 합성
단계 A: (S,E)-3급-부틸 (1-((2-(4-(5-시아노피리딘-2-일)피페라진-1-일)-2-옥소에톡시)이미노)프로판-2-일)카바메이트의 합성
DMF(6 mL) 중의 ((((6S,7E)-2,2,6-트리메틸-4-옥소-5-아자-3-옥사헵탄-7-일리덴)아미노)옥시)아세트산(100 mg, 0.40 mmol, 1.0 eq.) 및 6-(피페라진-1-일)니코티노니트릴 하이드로클로라이드(99 mg, 0.44 mmol, 1.1 eq.)의 용액에 DIPEA(315 mg, 2.40 mmol, 6.0 eq.) 및 HATU(185 mg, 0.48 mmol, 1.2 eq.)을 첨가하였다. 혼합물은 2시간동안 25 ℃에서 교반하였다. 혼합물은 물(40 mL)로 켄칭시키고 EtOAc (3 x 50 mL)로 추출하였다. 유기층을 배합하고 염수 (80 mL)로 세척하고, 무수 Na2SO4상에서 건조시키고, 감압하에 농축시켰다. 잔사를 컬럼 크로마토그래피(DCM/MeOH=20/1; V/V)로 정제하여 황색 오일로서 (S,E)-3급-부틸(1-((2-(4-(5-시아노피리딘-2-일)피페라진-1-일)-2-옥소에톡시)이미노)프로판-2-일)카바메이트(120 mg, 수율 71.0%)를 수득하였다.
LCMS: (ESI) (M+H-100)+ = 317.2.
1H NMR: (400 MHz, CDCl3) δ 8.48 - 8.43 (m, 1H), 7.69 (dd, J = 8.8, 2.4 Hz, 1H), 7.53 (d, J = 4.4 Hz, 1H), 6.66 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 4.98 - 4.86 (m, 1H), 4.78 (s, 2H), 4.48 - 4.28 (m, 1H), 3.88 - 3.76 (m, 4H), 3.75 - 3.62 (m, 4H), 1.46 (s, 9H), 1.34 (d, J = 6.8 Hz, 3H).
단계 B: (S,E)-6-(4-(2-(((2-아미노프로필리덴)아미노)옥시)아세틸)피페라진-1-일)니코티노니트릴의 합성
DCM (4mL) 중의 (S,E)-3급-부틸 (1-((2-(4-(5-시아노피리딘-2-일)피페라진-1-일)-2-옥소에톡시)이미노)프로판-2-일)카바메이트(120 mg, 0.29 mmol, 1.0 eq)의 용액에 TFA(1 mL)를 첨가하였다. 수득한 용액은 0.5시간동안 15 ℃에서 교반하였다. 혼합물을 포화 NaHCO3 수용액(20mL)으로 켄칭시키고 DCM(3 x 20mL)으로 추출하였다. 유기층을 배합하고 Na2SO4상에서 건조시키고, 진공하에 농축하여 황색 오일로서 (S,E)-6-(4-(2-(((2-아미노프로필리덴)아미노)옥시)아세틸)피페라진-1-일)니코티노니트릴(70 mg, 76.8%)을 수득하였다.
LCMS:　(ESI)　(M+H)+ = 317.2.
단계 C: (S,E)-6-(4-(2-(((2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로필리덴)아미노)옥시)아세틸)피페라진-1-일)니코티노니트릴의 합성
EtOH(3mL) 중의 (S,E)-6-(4-(2-(((2-아미노프로필리덴)아미노)옥시)아세틸)피페라진-1-일)니코티노니트릴(70 mg, 0.22 mmol, 1.0 eq. ) 및 5-클로로-4-(트리플루오로메틸)-2-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)피리다진-3(2H)-온(80 mg, 0.24 mmol, 1.1 eq.)의 용액에 TEA(45 mg, 0.44 mmol, 2.0 eq)를 첨가하였다. 혼합물을 60 ℃로 가열하고 2시간 동안 교반하였다. 반응물은 물(20 mL)로 켄칭시키고 EtOAc (3 x 20 mL)로 추출하였다. 유기층을 배합하고 염수 (80 mL)로 세척하고, Na2SO4상에서 건조시키고, 감압하에 농축시켰다. 잔사를 컬럼 크로마토그래피(석유 에테르/EtOAc= 1/3; V/V)로 정제하여 황색 오일로서 (S,E)-6-(4-(2-(((2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로필리덴)아미노)옥시)아세틸)피페라진-1-일)니코티노니트릴(75 mg, 56.0%)을 수득하였다.
LCMS:　(ESI)　(M+H)+ = 609.2.
단계 D: (S,E)-6-(4-(2-(((2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로필리덴)아미노)옥시)아세틸)피페라진-1-일)니코티노니트릴의 합성
DCM(3 mL) 중의 (S,E)-6-(4-(2-(((2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로필리덴)아미노)옥시)아세틸)피페라진-1-일)니코티노니트릴(70 mg, 0.12 mmol, 1.0 eq)의 용액에 TFA(1 mL)를 첨가하였다. 수득한 용액은 0.5시간동안 15 ℃에서 교반하였다. 혼합물은 진공하에 농축시켰다. 잔사는 MeOH (1 mL)에 재용해시키고, K2CO3 (10 mg, 0.07 mmol)를 첨가하였다. 혼합물은 추가로 0.5시간동안 15 ℃에서 교반하였다. 혼합물을 여과하고, 여과물을 prep-HPLC로 정제하여 백색 고체로서 (S,E)-6-(4-(2-(((2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로필리덴)아미노)옥시)아세틸)피페라진-1-일)니코티노니트릴 (25.97 mg, 49.4%)을 수득하였다.
LCMS:　(ESI)　(M+H)+ = 479.2.
1H NMR: (400 MHz, CDCl3)　δ　11.16 (s, 1H), 8.42 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.70 (s, 1H), 7.66 (dd, J = 9.2, 2.4 Hz, 1H), 7.49 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 6.62 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 5.89 - 5.73 (m, 1H), 4.83 - 4.72 (m, 2H), 4.49 - 4.36 (m, 1H), 3.86 - 3.72 (m, 4H), 3.71 - 35.2 (m, 4H), 1.52 (d, J = 6.8 Hz, 3H).
실시예 12:
(S,E)-2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로파날 O-(2-옥소-2-(4-(5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)피페라진-1-일)에틸)옥심
12.1) 중간체 I의 합성
단계 A: 3급-부틸 4-(5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)피페라진-1-카복실레이트의 합성
NMP(30 mL) 중의 2-클로로-5-(트리플루오로메틸)피리미딘(4.13 g, 22.75 mmol, 1.0 eq.) 및 3급-부틸 피페라진-1-카복실레이트(3.26 g, 25.02 mmol, 1.1 eq.)의 용액에 실온에서 K2CO3(9.43 g, 68.25 mmol, 3.0 eq)을 첨가하였다. 혼합물을 80 ℃로 가열하고 1시간 동안 교반하였다. 혼합물은 실온으로 냉각시키고 물(500 mL)로 희석하였다. 형성된 침전물을 여과하여 수거하였다. 생성물을 EtOAc (500 mL)에 재용해시키고 Na2SO4상에서 건조시켰다. 진공하에 용매를 제거하여 백색 고체로서 3급-부틸 4-(5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)피페라진-1-카복실레이트(3.50 g, 수율 44.8%)를 수득하였다.
LCMS: (ESI) (M+H)+=332.2.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.42 - 8.39 (m, 1H), 7.65 (dd, J = 8.8, 2.4 Hz, 1H), 6.64 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 3.68 - 3.61 (m, 4H), 3.58 - 3.52 (m, 4H), 1.49 (s, 9H).
단계 B: 1-(5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)피페라진 하이드로클로라이드 (중간체 I)의 합성
DCM (10mL) 중의 3급-부틸 4-(5-트리플루오로메틸)피리딘-2-일)피페라진-1-카복실레이트 (1.00 g, 3.02 mmol, 1.0 eq)의 용액에 HCl/디옥산(4M, 10 mL)을 첨가하였다. 수득한 혼합물은 1시간동안 20 ℃에서 교반하였다. 진공하에 혼합물을 농축시켜 백색 고체로서 1-(5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)피페라진 하이드로클로라이드(808 mg, 수율 99.9%)를 수득하였다.
LCMS: (ESI) (M+H)+ = 231.8.
12.2) 화합물 12의 합성
단계 A: (S,E)-3급-부틸 (1-((2-옥소-2-(4-(5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)피페라진-1-일)에톡시)이미노)프로판-2-일)카바메이트의 합성
DMF(10 mL) 중의 ((((6S,7E)-2,2,6-트리메틸-4-옥소-5-아자-3-옥사헵탄-7-일리덴)아미노)옥시)아세트산(200 mg, 0.81 mmol, 1.0 eq.) 및 1-(5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)피페라진 하이드로클로라이드(630 mg, 4.86 mmol, 6.0 eq.)의 용액에 DIPEA(630 mg, 4.86 mmol, 6.0 eq.) 및 HATU(371 mg, 0.97 mmol, 1.2 eq.)을 첨가하였다. 혼합물은 2시간동안 25 ℃에서 교반하였다. 혼합물은 물(40 mL)로 켄칭시키고 EtOAc (3 x 40 mL)로 추출하였다. 유기층을 배합하고 염수 (80 mL)로 세척하고, 무수 Na2SO4상에서 건조시키고, 감압하에 농축시켰다. 잔사를 컬럼 크로마토그래피(DCM/MeOH=20/1; V/V)로 정제하여 황색 오일로서 (S,E)-3급-부틸(1-((2-옥소-2-(4-(5-트리플루오로메틸)피리딘-2-일)피페라진-1-일)에톡시)이미노)프로판-2-일)카바메이트(275 mg, 수율 73.7%)를 수득하였다.
LCMS: (ESI) (M+H)+ = 460.2.
단계 B: (S,E)-2-아미노프로파날 O-(2-옥소-2-(4-(5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)피페라진-1-일)에틸)옥심의 합성
DCM (8mL) 중의 (S,E)-3급-부틸 (1-((2-옥소-2-(4-(5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)피페라진-1-일)에톡시)이미노)프로판-2-일)카바메이트(275 mg, 0.60 mmol, 1.0 eq)의 용액에 TFA(2 mL)를 첨가하였다. 수득한 용액은 0.5시간동안 15 ℃에서 교반하였다. 혼합물을 포화 NaHCO3 수용액(20mL)으로 켄칭시키고 DCM(3 x 20mL)으로 추출하였다. 유기층을 배합하고 Na2SO4상에서 건조시키고, 진공하에 농축하여 황색 오일로서 (S,E)-2-아미노프로파날 O-(2-옥소-2-(4-(5-트리플루오로메틸)피리딘-2-일)피페라진-1-일)에틸)옥심(180 mg, 83.7%)을 수득하였다.
LCMS:　(ESI)　(M+H)+ = 360.2.
1H NMR: (400 MHz, CDCl3) δ 8.44 (s, 1H), 7.70 (dd, J = 8.8, 2.0 Hz, 1H), 7.50 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 6.69 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 4.76 (s, 2H), 3.83 - 3.76 (m, 4H), 3.75 - 3.71 (m, 3H), 3.69 - 3.58 (m, 4H), 1.26 (d, J = 6.8 Hz, 3H).
단계 C: (S,E)-2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로파날 O-(2-옥소-2-(4-(5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)피페라진-1-일)에틸)옥심의 합성
EtOH(3mL) 중의 (S,E)-2-아미노프로파날 O-(2-옥소-2-(4-(5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)피페라진-1-일)에틸)옥심(79 mg, 0.22 mmol, 1.0 eq. ) 및 5-클로로-4-(트리플루오로메틸)-2-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)피리다진-3(2H)-온(80 mg, 0.24 mmol, 1.1 eq.)의 용액에 TEA(44 mg, 0.44 mmol, 2.0 eq)를 첨가하였다. 혼합물을 60 ℃로 가열하고 2시간 동안 교반하였다. 반응물은 물(20 mL)로 켄칭시키고 EtOAc (3 x 20 mL)로 추출하였다. 유기층을 배합하고 염수 (80 mL)로 세척하고, Na2SO4상에서 건조시키고, 감압하에 농축시켰다. 잔사를 컬럼 크로마토그래피(석유 에테르/EtOAc = 1/3; V/V)로 정제하여 황색 오일로서 (S,E)-2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1-((2-( 트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로파날 O-(2-옥소-2-(4-(5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)피페라진-1-일)에틸)옥심(72 mg, 50.3%)을 수득하였다.
LCMS:　(ESI)　(M+H)+ = 652.2.
단계 D: (S,E)-2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노) 프로파날 O-(2-옥소-2-(4-(5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)피페라진-1-일)에틸)옥심의 합성
DCM (3 mL) 중의 (S,E)-2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로파날 O-(2-옥소-2-(4-(5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)피페라진-1-일)에틸)옥심(72 mg, 0.11 mmol, 1.0 eq.)의 용액에 TFA(1mL)를 첨가하였다. 수득한 용액은 0.5시간동안 15 ℃에서 교반하였다. 혼합물은 진공하에 농축시켰다. 잔사는 MeOH (1 mL)에 재용해시키고, K2CO3 (10 mg, 0.07 mmol)를 첨가하였다. 혼합물은 추가로 0.5시간동안 15 ℃에서 교반하였다. 혼합물을 여과하고, 여과물을 prep-HPLC로 정제하여 백색 고체로서 (S,E)-2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로파날 O-(2-옥소-2-(4-(5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)피페라진-1-일)에틸)옥심(31.76 mg, 55.3%)을 수득하였다.
LCMS: (ESI)　(M+H)+ = 522.2.
1H NMR: (400 MHz, CDCl3)　δ　10.77 (s, 1H), 8.41 (s, 1H), 7.70 (s, 1H), 7.68 (dd, J = 9.2, 2.4 Hz, 1H), 7.49 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 6.66 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 5.88 - 5.79 (m, 1H), 4.83 - 4.73 (m, 2H), 4.47 - 4.38 (m, 1H), 3.82 - 3.70 (m, 4H), 3.69 - 3.52 (m, 4H), 1.51 (d, J = 6.8 Hz, 3H).
실시예 13:
6-((R)-3-메틸-4-(2-(((E)-((S)-2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로필리덴)아미노)옥시)아세틸)피페라진-1-일)니코티노니트릴
단계 A: (R)-3급-부틸 4-(5-시아노피리딘-2-일)-2-메틸피페라진-1-카복실레이트의 합성
NMP (120 mL) 중의 6-클로로니코티노니트릴(2.51 g, 18.11 mmol, 1.0 eq.)의 용액에 (R)-3급-부틸 2-메틸피페라진-1-카복실레이트 (3.99 g, 19.92 mmol, 1.1 eq.) 및 K2CO3 (7.51 g, 54.33 mmol, 3.0 eq.)를 첨가하였다. 혼합물은 1시간 동안 80 ℃에서 교반하였다. 혼합물을 실온으로 냉각시키고 물(150mL)로 희석시키고 EtOAc(3 x 150mL)로 추출하였다. 유기층을 배합하고 염수 (500 mL)로 세척하고, 무수 Na2SO4상에서 건조시키고, 감압하에 농축시켰다. 잔사를 컬럼 크로마토그래피(석유 에테르/EtOAc=2/1; V/V)로 정제하여 황색 고체로서 (R)-3급-부틸 4-(5-시아노피리미딘 -2-일)-2-메틸피페라진-1-카복실레이트(4.20 g, 76.7%)를 수득하였다.
LCMS: (ESI) (M+H-56)+ = 247.0.
1H NMR: (400 MHz, CDCl3) δ 8.40 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.62 (dd, J = 8.8, 2.0 Hz, 1H), 6.56 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 4.37 - 4.27 (m, 1H), 4.20 - 4.12 (m, 1H), 4.12 - 4.04 (m, 1H), 4.00 - 3.90 (m, 1H), 3.42 (dd, J = 13.6, 4.0 Hz, 1H), 3.31 - 3.21 (m, 1H), 3.19 - 3.08 (m, 1H), 1.48 (s, 9H), 1.15 (d, J = 6.8 Hz, 3H).
단계 B: (R)-6-(3-메틸피페라진-1-일)니코티노니트릴 하이드로클로라이드의 합성
DCM (2mL) 중의 (R)-3급-부틸 4-(5-시아노피리딘-2-일)-2-메틸피페라진-1-카복실레이트 (500 mg, 1.65 mmol, 1.0 eq)의 용액에 HCl/디옥산(4M, 10 mL)을 첨가하였다. 혼합물은 1시간동안 15 ℃에서 교반하였다. 감압하에 혼합물을 농축시켜 백색 고체로서 (R)-6-(3-메틸피페라진-1-일)니코티노니트릴 하이드로클로라이드(384 mg, 99.8%)를 수득하였다.
LCMS:　(ESI)　(M+H)+ = 203.2.
단계 C: 3급-부틸 ((S, E)-1-((2-((R)-4-(5-시아노피리딘-2-일)-2-메틸피페라진-1-일)-2-옥소에톡시)이미노)프로판-2-일)카바메이트의 합성
DMF(12 mL) 중의 ((((6S,7E)-2,2,6-트리메틸-4-옥소-5-아자-3-옥사헵탄-7-일리덴)아미노)옥시)아세트산(200 mg, 0.84 mmol, 1.0 eq.) 및 (R)-6-(3-메틸피페라진-1-일)니코티노니트릴 하이드로클로라이드(227 mg, 0.92 mmol, 1.1 eq.)의 용액에 DIPEA(651 mg, 5.04 mmol, 6.0 eq.) 및 HATU(384 mg, 1.01 mmol, 1.2 eq.)을 첨가하였다. 혼합물은 2시간동안 25 ℃에서 교반하였다. 반응물은 물(50 mL)로 켄칭시키고 EtOAc (3 x 50 mL)로 추출하였다. 유기층을 배합하고 염수 (80 mL)로 세척하고, 무수 Na2SO4상에서 건조시키고, 감압하에 농축시켰다. 잔사를 컬럼 크로마토그래피(DCM/MeOH=20/1; V/V)로 정제하여 황색 오일로서 3급-부틸 ((S,E)-1-((2-((R)-4-(5-시아노피리딘 -2-일)-2- 메틸피페라진-1-일)-2-옥소에톡시)이미노)프로판-2-일)카바메이트(280 mg, 77.3%)를 수득하였다.
LCMS: (ESI) (M+H)+ = 431.2.
단계 D: 6-((R)-4-(2-(2-(((E)-((S)-2-아미노프로필리덴)아미노)옥시)아세틸)-3-메틸피페라진-1-일)니코티노니트릴의 합성
DCM (8mL) 중의 3급-부틸 ((S,E)-1-((2-((R)-4-(5-시아노피리딘-2-일)-2-메틸피페라진-1-일)-2-옥소에톡시)이미노)프로판-2-일)카바메이트(280 mg, 0.65 mmol, 1.0 eq)의 용액에 TFA(2 mL)를 첨가하였다. 수득한 용액은 0.5시간동안 15 ℃에서 교반하였다. 혼합물을 포화 NaHCO3 수용액(20mL)으로 켄칭시키고 DCM(3 x 20mL)으로 추출하였다. 유기층을 배합하고 Na2SO4상에서 건조시키고, 진공하에 농축하여 황색 오일로서 6-((R)-4-(2-(((E)-((S)-2-아미노프로필리덴)아미노)옥시)아세틸)-3-메틸피페라진-1-일)니코티노니트릴(209 mg, 97.3%)을 수득하였다.
LCMS:　(ESI)　(M+H)+ = 331.2.
1H NMR: (400 MHz, CDCl3) δ 8.43 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.67 (dd, J = 8.8, 2.4 Hz, 1H), 7.49 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 6.62 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 4.85 - 4.65 (m, 2H), 4.60 - 4.05 (m, 3H), 3.78 - 3.63 (m, 4H), 3.56 - 3.04 (m, 3H), 1.28 - 1.25 (m, 6H).
단계 E: 6-((R)-3-메틸-4-(2-(((E)-((S)-2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노) 프로필리덴)아미노)옥시)아세틸)피페라진-1-일)니코티노니트릴의 합성
EtOH(3mL) 중의 6-((R)-4-(2-(((E)-((S)-2-아미노프로필리덴)아미노)옥시)아세틸)-3-메틸피페라진-1-일)니코티노니트릴(73 mg, 0.22 mmol, 1.0 eq. ) 및 5-클로로-4-(트리플루오로메틸)-2-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)피리다진-3(2H)-온(80 mg, 0.24 mmol, 1.1 eq.)의 용액에 TEA(45 mg, 0.44 mmol, 2.0 eq)를 첨가하였다. 혼합물을 60 ℃로 가열하고 2시간 동안 교반하였다. 반응물은 물(20 mL)로 켄칭시키고 EtOAc (3 x 20 mL)로 추출하였다. 유기층을 배합하고 염수 (80 mL)로 세척하고, Na2SO4상에서 건조시키고, 감압하에 농축시켰다. 잔사를 컬럼 크로마토그래피(석유 에테르/EtOAc= 1/3; V/V)로 정제하여 황색 오일로서 6-((R)-3-메틸-4-(2-(((E)-((S)-2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로필리덴)아미노)옥시)아세틸)피페라진-1-일)니코티노니트릴(73 mg, 53.1%)을 수득하였다.
LCMS:　(ESI)　(M+H)+ = 623.4.
단계 F: 6-((R)-3-메틸-4-(2-(((E)-((S)-2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일 )아미노)프로필리덴)아미노)옥시)아세틸)피페라진-1-일)니코티노니트릴의 합성
DCM(3 mL) 중의 6-((R)-3-메틸-4-(2-(((E)-((S)-2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노) 프로필리덴)아미노)옥시)아세틸)피페라진-1-일)니코티노니트릴(72 mg, 0.12 mmol, 1.0 eq)의 용액에 TFA(1 mL)를 첨가하였다. 수득한 용액은 0.5시간동안 15 ℃에서 교반하였다. 혼합물은 진공하에 농축시켰다. 잔사는 MeOH (1 mL)에 재용해시키고, K2CO3 (10 mg, 0.07 mmol)를 첨가하였다. 혼합물은 0.5시간동안 15 ℃에서 교반하였다. 혼합물을 여과하고, 여과물을 prep-HPLC로 정제하여 백색 고체로서 6-((R)-3-메틸-4-(2-(((E)-((S)-2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로필리덴)아미노)옥시)아세틸)피페라진-1-일)니코티노니트릴 (30.73 mg, 52.0%)을 수득하였다.
LCMS:　(ESI)　(M+H)+ = 493.2.
1H NMR: (400 MHz, CDCl3) δ 11.10 (s, 1H), 8.41 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.70 (s, 1H), 7.65 (dd, J = 9.2, 2.4 Hz, 1H), 7.50 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 6.60 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 5.90 - 5.81 (m, 1H), 4.84 - 4.71 (m, 2H), 4.50 - 4.00 (m, 4H), 3.74 - 3.05 (m, 4H), 1.51 (d, J = 6.8 Hz, 3H), 1.31 - 1.14 (m, 3H).
실시예 14:
(S,E)-2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로파날 O-(2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)에틸)옥심
단계 A: 2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페 리딘-4-일)에탄올의 합성
N,N-디메틸포름아미드(10 mL) 중의 2-(피페리딘-4-일)에탄올(900 mg, 6.97 mmol, 1.0 eq.)의 용액에 2-클로로-5-(트리플루오로메틸)피리미딘(1.29 g, 7.04 mmol, 1.01 eq.) 및 DIPEA(2.70 g, 20.9 mmol, 3.0 eq.)를 첨가하였다. 혼합물은 18시간 동안 110 ℃에서 교반하였다. 혼합물은 실온으로 냉각시키고, 물(100 mL)로 희석하고 에틸 아세테이트 (2 x 100 mL)로 추출하였다. 유기층을 배합하고 염수 (100 mL)로 세척하고, Na2SO4상에서 건조시키고, 진공 농축시켰다. 잔사를 컬럼 크로마토그래피(EtOAc/석유 에테르= 1/2; V/V)로 정제하여 황색 고체로서 2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘 -2-일)피페리딘-4-일)에탄올(1.40 g, 수율 70.8%)을 수득하였다.
LCMS: (ESI) (M+H)+ = 276.0.
단계 B: 2-(2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)에톡시)이소인돌린-1,3-디온의 합성
THF(5 mL) 중의 2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)에탄올(150 mg, 0.55 mmol, 1.0 eq.)의 용액에 2-하이드록시이소인돌린-1,3-디온(98mg, 0.60mmol, 1.1eq.), 디에틸 아조디카복실레이트(116mg, 0.67mmol, 1.22eq.) 및 트리페닐포스핀(172mg, 0.65mmol, 1.2eq.)을 0℃에서 첨가하였다. 수득한 혼합물은 1시간동안 15 ℃에서 교반하였다. 혼합물은 물(100 mL)로 희석하고 에틸 아세테이트 (2 x 80 mL)로 추출하였다. 유기층을 배합하고 염수 (100 mL)로 세척하고, Na2SO4상에서 건조시키고, 진공 농축시켰다. 잔사를 컬럼 크로마토그래피(EtOAc/석유 에테르= 1/4; V/V)로 정제하여 황색 고체로서 2-(2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)에톡시)이소인돌린-1,3-디온(128 mg, 수율 47.5%)을 수득하였다.
LCMS: (ESI) (M+H)+ = 420.8.
1H NMR: (400 MHz, CDCl3) δ 8.50 (s, 2H), 7.92 - 7.86 (m, 2H), 7.83 - 7.77 (m, 2H), 4.95 - 4.85 (m, 2H), 4.33 (t, J = 6.4 Hz, 2H), 3.08 - 2.96 (m, 2H), 2.01 - 1.93 (m, 2H), 1.81 (q, J = 6.4 Hz, 2H), 1.35 - 1.20 (m, 3H).
단계 C: O-(2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페 리딘-4-일) 에틸)하이드록실아민의 합성
EtOH(5 mL) 중의 2-(2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)에톡시)이소인돌린-1,3-디온(110 mg, 0.26 mmol, 1.0 eq.)의 용액에 하이드라진 수화물(27 mg, 0.52 mmol, 2.0 eq.)을 첨가하였다. 수득한 혼합물은 2시간동안 15 ℃에서 교반하였다. 혼합물은 여과하고 여과물을 물(30 mL)로 희석하였다. 혼합물은 DCM (2 x 80 mL)으로 추출하였다. 유기층을 배합하고, 염수(40 mL)로 세척하고, Na2SO4상에서 건조시키고, 진공하에 농축하여 황색 고체로서 O-(2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)에틸)하이드록실아민(68 mg, 수율 90.8%)을 수득하였다.
LCMS: (ESI) (M+H)+ = 291.2.
단계 D: (S,E)-3급-부틸 (1-((2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)에톡시)이미노)프로판-2-일)카바메이트의 합성
THF(5 mL) 중의 O-(2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)에틸)하이드록실아민(100 mg, 0.34 mmol, 1.0 0eq.)의 용액에 (S)-3급- 부틸(1-옥소프로판-2-일)카바메이트(72 mg, 0.42 mmol, 1.2 eq.) 및 테트라에톡시 티타늄(79 mg, 11.54mmol, 1.0 eq.)을 첨가하였다. 수득한 혼합물은 1시간동안 80℃에서 교반하였다. 혼합물은 실온으로 냉각시키고, 물(100 mL)로 희석하고 에틸 아세테이트 (2 x 80 mL)로 추출하였다. 유기층을 배합하고 염수 (100 mL)로 세척하고, Na2SO4상에서 건조시키고, 진공 농축시켰다. 잔사를 컬럼 크로마토그래피(EtOAc/석유 에테르= 20/1; V/V)로 정제하여 황색 고체로서 (S, E)-3급-부틸 (1-((2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)에톡시)이미노)프로판-2-일)카바메이트(120 mg, 수율 75.9%)를 수득하였다.
LCMS: (ESI) (M+H)+ = 445.8.
단계 E: (S,E)-2-아미노프로파날 O-(2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)에틸)옥심의 합성
DCM (3mL) 중의 (S,E)-3급-부틸 (1-((2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)에톡시)이미노)프로판-2-일)카바메이트(120 mg, 0.27 mmol, 1.0 eq)의 용액에 TFA(1 mL)를 첨가하였다. 수득한 혼합물은 1시간동안 15 ℃에서 교반하였다. 반응 혼합물을 NaHCO3 수용액(20mL)으로 켄칭시키고 DCM(2 x 50mL)으로 추출하였다. 유기층을 배합하고, 염수(20 mL)로 세척하고, Na2SO4상에서 건조시키고, 진공하에 농축하여 황색 고체로서 O-(2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)에틸)옥심(90 mg, 수율 96.8%)을 수득하였다.
LCMS: (ESI) (M+H)+ = 346.2.
단계 F: (S,E)-2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노) 프로파날 O-(2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)에틸)옥심의 합성
EtOH(5mL) 중의 (S,E)-2-아미노프로파날 O-(2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)에틸)옥심(100 mg, 0.29 mmol, 1.0 eq.)의 용액에 5-클로로-4-(트리플루오로메틸)-2-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)피리다진-3(2H)-온(143 mg, 0.43 mmol, 1.5 eq.) 및 TEA(147 mg, 1.45 mmol, 5.0 eq)를 첨가하였다. 혼합물은 4시간동안 60 ℃에서 교반하였다. 혼합물은 실온으로 냉각시키고, 물(100 mL)로 희석하고 에틸 아세테이트 (2 x 100 mL)로 추출하였다. 유기층을 배합하고 염수 (100 mL)로 세척하고, Na2SO4상에서 건조시키고, 진공 농축시켰다. 잔사를 컬럼 크로마토그래피(EtOAc/석유 에테르 = 1/1; V/V)로 정제하여 황색 오일로서 (S,E)-2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로파날 O-(2-옥소-2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)에틸)옥심(40 mg, 19.5%)을 수득하였다.
LCMS: (ESI) (M+H)+ = 638.2.
1H NMR: (400 MHz, CDCl3) δ 8.49 (s, 2H), 7.77 (s, 1H), 7.36 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 6.04 - 5.96 (m, 1H), 5.48 - 5.38 (m, 2H), 4.90 - 4.83 (m, 2H), 4.50 - 4.41 (m, 1H), 4.19 - 4.14 (m, 2H), 3.77 - 3.70 (m, 2H), 3.03 - 2.91 (m, 2H), 1.93 - 1.82 (m, 2H), 1.70 - 1.63 (m, 2H), 1.57 - 1.47 (m, 3H), 1.29 - 1.18 (m, 3H), 1.03 - 0.95 (m, 2H), 0.03 (s, 9H).
단계 G: (S,E)-2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로파날 O-(2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)에틸)옥심의 합성
DCM (1 mL) 중의 (S,E)-2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노) 프로파날 O-(2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)에틸)옥심(30 mg, 0.05 mmol, 1.0 eq.)의 용액에 TFA(0.3mL)를 첨가하였다. 혼합물은 1시간동안 15 ℃에서 교반하였다. 혼합물을 포화 NaHCO3 수용액(20mL)으로 중화시키고 DCM(3 x 40mL)으로 추출하였다. 유기층을 배합하고 Na2SO4상에서 건조시키고, 진공 농축시켰다. 잔사를 MeOH(2mL)에 재용해하고 탄산칼륨(24 mg, 0.17 mmol, 3.6 eq.)을 첨가하였다. 혼합물은 추가로 1시간동안 15 ℃에서 교반하였다. 혼합물을 여과하고, 여과물을 prep-HPLC로 정제하여 백색 고체로서 (S,E)-2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로파날 O-(2-옥소-2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일) 에틸)옥심(3.47 mg, 수율 14.4%)을 수득하였다.
LCMS: (ESI) (M+H)+ = 507.8.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 10.96 (s, 1H), 8.45 (s, 2H), 7.72 (s, 1H), 7.32 (d, J = 5.2 Hz, 1H), 6.04 - 5.95 (m, 1H), 4.89 - 4.77 (m, 2H), 4.45 - 4.36 (m, 1H), 4.14 (t, J = 6.8 Hz, 2H), 3.01 - 2.85 (m, 2H), 1.86 - 1.77 (m, 2H), 1.75 - 1.67 (m, 1H), 1.66 - 1.58 (m, 4H), 1.50 (d, J = 6.4 Hz, 3H).
실시예 15:
(S,E)-2-옥소-2-(4-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페라진-1-일)아세트알데히드 O-(2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로필)옥심
단계 A: (S)-2-(2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1-((2-(트리메틸실릴)에톡시) 메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)이소인돌린-1,3-디온의 합성
THF(5mL) 중 (S)-5-((1-하이드록시프로판-2-일)아미노)-4-(트리플루오로메틸)-2-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)피리다진-3(2H)-온(360mg, 0.981mmol, 1.0eq), 2-하이드록시이소인돌린-1,3-디온(192mg, 1.177mmol, 1.2eq) 및 PPh3(308mg, 1.177mmol, 1.2eq)의 용액에 N2 대기 하에 0℃에서 DEAD(238mg, 1.177mmol, 1.2eq)를 첨가하였다. 혼합물은 N2 대기하에 1시간동안 25 ℃에서 교반하였다. 혼합물은 진공하에 농축시켰다. 잔사를 석유 에테르와 EtOAc(1/1; V/V, 50 mL)의 혼합 용매에 용해시켰다. 혼합물을 여과하고, 여과물을 진공 농축시켰다. 잔사를 컬럼 크로마토그래피(석유 에테르/EtOAc= 2/3; V/V)로 정제하여 백색 고체로서 (S)-2-(2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)이소인돌린-1,3-디온(350 mg, 수율 70.0%)을 수득하였다.
LCMS:　(ESI)　(M+H)+ = 513.2.
1H NMR: (400 MHz, DMSO) δ 8.10 (s, 1H), 7.96 - 7.82 (m, 4H), 6.83 (dd, J = 8.3, 3.8 Hz, 1H), 5.31 - 5.17 (m, 2H), 4.53 (s, 1H), 4.44 (dd, J = 10.8, 8.0 Hz, 1H), 4.26 (dd, J = 10.8, 3.8 Hz, 1H), 3.68 - 3.58 (m, 2H), 1.26 (d, J = 6.5 Hz, 3H), 0.95 - 0.83 (m, 2H), 0.03 - -0.02 (m, 9H).
단계 B: (S)-5-((1-(아미노옥시)프로판-2-일)아미노)-4-(트리플루오로메틸)-2-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)피리다진-3(2H)-온(중간체 J)
EtOH(5 mL) 중 (S)-2-(2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)이소인돌린-1,3-디온(350 mg, 0.683 mmol, 1.0 eq.)의 용액에 하이드라진 수화물(100 mg, 1.025 mmol, 1.5 eq.)을 0℃에서 첨가하였다. 수득한 혼합물을 1시간 동안 25 ℃에서 교반하였다. 혼합물은 진공하에 농축시켰다. 형성된 침전물을 여과하고 MTBE(10 mL)로 세척하였다. 여과물을 진공에서 농축하여 백색 고체로서 (S)-5-((1-(아미노옥시)프로판-2-일)아미노)-4-(트리플루오로메틸)-2-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)피리다진-3(2H)-온(250mg, 수율 95.8% )을 수득하였다.
LCMS:　(ESI)　(M+H)+ = 383.2.
단계 C: (S,E)-2-((2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1-((2-(트리메틸실릴)에톡시) 메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)이미노)아세트산의 합성
MeOH(3 mL) 중 (S)-5-((1-(아미노옥시)프로판-2-일)아미노)-4-(트리플루오로메틸)-2-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)피리다진-3(2H)-온(100 mg, 0.261 mmol, 1.0 eq.)의 용액에 2-옥소아세트산(20 mg, 0.274 mmol, 1.05 eq.)을 첨가하였다. 혼합물을 1시간 동안 25 ℃에서 교반하였다. 혼합물을 물(5 mL)로 희석하고 EtOAc(2 x 5 mL)로 추출하였고, Na2SO4 상에서 건조시키고 진공하에 농축하여 백색 고체로서 (S,E)-2-((2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)이미노)아세트산(90mg, 79% 수율)을 수득하였다.
LCMS:　(ESI)　(M+H)+ = 439.2.
단계 D: (S,E)-2-옥소-2-(4-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페라진-1-일)아세트알데히드 O-(2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸) -1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로필)옥심의 합성
DMF(2 mL) 중의 (S,E)-2-((2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)이미노)아세트산(90 mg, 0.205 mmol, 1.0 eq.)의 용액에 DIPEA(79 mg, 0.616 mmol, 3.0 eq.) 및 HATU(93 mg, 0.246 mmol, 1.2 eq.)를 첨가하고, 이어서 2-(피페라진-1-일)-5-(트리플루오로메틸)피리미딘(57 mg, 0.246 mmol, 1.2 eq.)을 적가하였다. 수득한 혼합물은 1시간동안 25 ℃에서 교반하였다. 반응 혼합물은 물(10 mL)로 켄칭시키고 EtOAc (3 x 10 mL)로 추출하였다. 유기층을 배합하고 염수 (10 mL)로 세척하고, Na2SO4상에서 건조시키고, 진공 농축시켰다. 잔사를 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(석유 에테르/EtOAc= 1/2; V/V)로 정제하여 백색 고체로서 (S,E)-2-옥소-2-(4-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페라진-1-일)아세트알데히드 O-(2-((6-옥소-5-트리플루오로메틸)-1-((2-트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로필)옥심(90 mg, 수율 67%)을 수득하였다.
LCMS:　(ESI)　(M+H)+ = 653.2.
단계 E: (S,E)-2-옥소-2-(4-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페라진-1-일)아세트알데히드 O-(2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로필)옥심의 합성
DCM(2mL) 중의 (S,E)-2-옥소-2-(4-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페라진-1-일)아세트알데히드 O-(2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로필)옥심(90mg, 0.138mmol, 1.0 eq.)의 용액에 TFA(0.3mL)를 첨가하였다. 수득한 혼합물은 1시간동안 25 ℃에서 교반하였다. 혼합물을 포화 NaHCO3 수용액(5mL)으로 중화시키고 DCM(3 x 10mL)으로 추출하였다. 유기층을 배합하고 Na2SO4상에서 건조시키고, 진공 농축시켰다. 잔사를 MeOH(5mL)에 재용해시키고 Na2CO3(36 mg, 0.345 mmol, 2.5 eq.)을 첨가하였다. 혼합물은 추가로 1시간동안 25 ℃에서 교반하였다. 반응 혼합물을 여과하고, 여과물을 역상 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(CH3CN/H2O= 1/10으로 용출시키는; V/V)로 정제하여 백색 고체로서 (S,E)-2-옥소-2-(4-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페라진-1-일)아세트알데히드 O-(2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로필)옥심(14 mg, 수율 19%)을 수득하였다.
LCMS: (ESI)　(M+H)+ = 522.8.
1H NMR: (400 MHz, DMSO) δ 12.47 (s, 1H), 8.74 (s, 2H), 8.00 (s, 1H), 7.88 (s, 1H), 6.48 (dd, J = 8.3, 3.8 Hz, 1H), 4.32 - 4.11 (m, 3H), 3.91 - 3.84 (m, 4H), 3.67 - 3.60 (m, 4H), 1.21 (d, J = 6.3 Hz, 3H).
실시예 16:
(S,E)-5-((1-(((1-옥소-1-(4-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페라진-1-일)프로판-2-일리덴)아미노)옥시)프로판-2-일)아미노)-4-(트리플루오로메틸)피리다진-3(2H)-온
단계 A: (S,E)-2-((2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1-((2-(트리메틸실릴)에톡시) 메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)이미노)프로판산
MeOH(3 mL) 중 (S)-5-((1-(아미노옥시)프로판-2-일)아미노)-4-(트리플루오로메틸)-2-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)피리다진-3(2H)-온(90 mg, 0.235 mmol, 1.0 eq.)의 용액에 2-옥소프로판산(22 mg, 0.247 mmol, 1.05 eq.)을 첨가하였다. 혼합물은 1시간 동안 20 ℃에서 교반하였다. 혼합물을 물(5 mL)로 희석하고 EtOAc(2 x 5 mL)로 추출하였고, Na2SO4 상에서 건조시키고 진공하에 농축하여 백색 고체로서 (S,E)-2-((2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)이미노)프로판산(90mg, 수율 85%)을 수득하였다.
LCMS:　(ESI)　(M+H)+ = 453.2.
단계 B: (S,E)-5-((1-(((1-옥소-1-(4-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페라진-1-일)프로판-2-일리덴)아미노)옥시)프로판-2-일)아미노)-4-(트리플루오로메틸)-2-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)피리다진-3(2H)-온의 합성
DMF(2 mL) 중 (S,E)-2-((2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)이미노)프로판산(95 mg, 0.210 mmol, 1.0 eq.)의 용액에 DIPEA(81 mg, 0.630 mmol, 3.0 eq.) 및 HATU(96 mg, 0.252 mmol, 1.2 eq.)를 첨가하고, 이어서 2-(피페라진-1-일)-5-(트리플루오로메틸)피리미딘(54 mg, 0.231 mmol, 1.2 eq.)을 적가하였다. 수득한 혼합물은 1시간동안 20 ℃에서 교반하였다. 반응 혼합물은 물(10 mL)로 켄칭시키고 EtOAc (3 x 10 mL)로 추출하였다. 유기층을 배합하고 염수 (10 mL)로 세척하고, Na2SO4상에서 건조시키고, 진공 농축시켰다. 잔사를 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(석유 에테르/EtOAc= 1/1; V/V)로 정제하여 황색 오일로서 (S,E)-5-((1-(((1-옥소-1-(4-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페라진-1-일)프로판-2-일리덴)아미노)옥시)프로판-2-일)아미노)-4-(트리플루오로메틸)-2-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)피리다진-3(2H)-온(90 mg, 64% 수율)을 수득하였다.
LCMS:　(ESI)　(M+H)+ = 667.2.
1H NMR: (400 MHz, DMSO) δ 8.80 (s, 2H), 8.08 (s, 1H), 6.75 (dd, J = 8.3, 3.7 Hz, 1H), 5.27 (s, 2H), 4.49 - 4.33 (m, 1H), 4.31 - 4.18 (m, 2H), 4.02 - 3.83 (m, 4H), 3.61 - 3.68 (m, 6H), 1.95 (s, 3H), 1.28 (d, J = 6.5 Hz, 3H), 0.89 (dd, J = 10.4, 5.6 Hz, 2H), 0.05 (s, 9H).
단계 C: (S,E)-5-((1-(((1-옥소-1-(4-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페라진-1-일)프로판-2-일리덴)아미노)옥시)프로판-2-일)아미노)-4-(트리플루오로메틸)피리다진-3(2H)-온의 합성
DCM (2mL) 중의 (S,E)-5-((1-(((1-옥소-1-(4-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페라진-1-일)프로판-2-일리덴)아미노)옥시)프로판-2-일)아미노)-4-(트리플루오로메틸)-2-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)피리다진-3(2H)-온(90 mg, 0.135 mmol, 1.0 eq)의 용액에 TFA(0.3 mL)를 첨가하였다. 수득한 혼합물은 0.5시간동안 20 ℃에서 교반하였다. 혼합물을 포화 NaHCO3 수용액(5mL)으로 중화시키고 DCM(3 x 10mL)으로 추출하였다. 유기층을 배합하고 Na2SO4상에서 건조시키고, 진공 농축시켰다. 잔사는 MeOH (5 mL)에 재용해시키고, K2CO3 (46 mg, 0.3338 mmol, 2.5 eq.)를 첨가하였다. 혼합물은 추가로 1시간동안 20℃에서 교반하였다. 반응 혼합물을 여과하고, 여과물을 역상 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(CH3CN/H2O= 1/10 - 10/1로 용출시키는; V/V)로 정제하여 백색 고체로서 (S,E)-5-((1-(((1-옥소-1-(4-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페라진-1-일)프로판-2-일리덴)아미노)옥시)프로판-2-일)아미노-4-(트리플루오로메틸)피리다진-3(2H)-온(52 mg, 수율 72%)을 수득하였다.
LCMS:　(ESI)　(M+H)+ = 537.2.
1H NMR: (400 MHz, DMSO) δ 12.49 (s, 1H), 8.77 (s, 2H), 7.93 (s, 1H), 6.54 (d, J = 4.2 Hz, 1H), 4.32 (s, 1H), 4.24 - 4.17 (m, 2H), 3.92 - 3.87 (m, 4H), 3.58 - 3.66 (m, 4H), 1.92 (s, 3H), 1.23 (d, J = 6.4 Hz, 3H).
실시예 17:
(S)-N-(2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)-2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)아세트아미드
17.1) 중간체 S의 합성
단계 A: 에틸 2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)아세테이트의 합성
NMP (3 mL) 중의 2-클로로-5-(트리플루오로메틸)피리미딘(200 mg, 1.09 mmol, 1.0 eq.)의 용액에 K2CO3(455 mg, 3.29 mmol, 3.0 eq.) 및 에틸 2-(피페리딘-4-일)아세테이트 하이드로클로라이드(251 mg, 1.19 mmol, 1.1 eq.)을 첨가하고, 수득한 혼합물을 65 ℃에서 2 시간 동안 교반하였다. 혼합물은 실온으로 냉각시키고 물(5 mL)로 희석하였다. 혼합물은 EtOAc (3 x 10 mL)로 추출하였다. 유기층을 배합하고 염수 (10 mL)로 세척하고, Na2SO4상에서 건조시키고, 감압하에 농축시켰다. 잔사를 컬럼 크로마토그래피(석유 에테르/EtOAc= 4/1; V/V)로 정제하여 백색 고체로서 2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘 -2-일)피페리딘-4-일)아세테이트(300 mg, 수율 86.8%)을 수득하였다.
LCMS: (ESI)(M+H)+ = 318.2.
1H NMR: (400 MHz, DMSO) δ 8.66(s, 2H), 4.70(d, J = 13.3 Hz, 2H), 4.07(q, J = 7.1 Hz, 2H), 3.00(td, J = 13.0, 2.4 Hz, 2H), 2.27(d, J = 7.1 Hz, 2H), 2.10 - 1.93(m, 1H), 1.75(dd, J = 12.6, 2.1 Hz, 2H), 1.21 - 1.08(m, 5H).
단계 B: 2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)아세트산(중간체 S)의 합성
THF(3 mL) 및 물(3 mL)의 혼합 용매 중의 에틸 2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일) 아세테이트 (300 mg, 0.946 mmol, 1.0 eq.)의 용액에 LiOH (68 mg, 2.839 mmol, 3.0 eq.)를 첨가하였다. 혼합물은 16시간동안 25 ℃에서 교반하였다. 혼합물은 물(5 mL)로 희석하고 EtOAc (3 x 10 mL)로 추출하였다. 물 층을 시트르산에 의해 pH 6으로 조정하였다. 수득한 혼합물을 EtOAc(3 x 15 mL)로 추출하고, Na2SO4상에서 건조시키고, 진공하에 농축하여 백색 고체로서 2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)아세트산(220 mg, 수율 80%)을 수득하였다.
LCMS: (ESI)(M+H)+ = 290.2.
17.2) 중합체 V의 합성
단계 A: (S)-N-(2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)-2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)아세트아미드의 합성
DMF(2 mL) 중의 2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)아세트산(69 mg, 0.238 mmol, 1.3 eq.)의 용액에 DIPEA (118 mg, 0.914 mmol, 5.0 eq.) 및 HATU (83 mg, 0.219 mmol, 1.2 eq.)을 첨가하고, 이어서 (S)-5-((1-(아미노옥시)프로판-2-일)아미노)-4-(트리플루오로메틸)-2-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)피리다진-3(2H)-온 (70 mg, 0.183 mmol, 1.0 eq.)을 적가하였다. 수득한 혼합물은 2시간동안 25 ℃에서 교반하였다. 반응 혼합물은 물(10 mL)로 켄칭시키고 EtOAc (3 x 10 mL)로 추출하였다. 유기층을 배합하고 염수 (10 mL)로 세척하고, Na2SO4상에서 건조시키고, 진공 농축시켰다. 잔사를 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(석유 에테르/EtOAc= 1/2; V/V)로 정제하여 백색 고체로서 (S)-N(2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)-2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)아세트아미드(80 mg, 수율 67%)을 수득하였다.
LCMS: (ESI)(M+H)+ = 654.2.
17.3) 화합물 17의 합성
단계 A: (S)-N-(2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)-2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)아세트아미드의 합성
DCM (2 mL) 중의 (S)-N-(2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)-2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)아세트아미드(80 mg, 0.122 mmol, 1.0 eq.)의 용액에 TFA(0.3mL)를 첨가하였다. 수득한 혼합물은 0.5시간동안 25 ℃에서 교반하였다. 혼합물을 포화 NaHCO3 수용액(5mL)으로 중화시키고 DCM(3 x 10mL)으로 추출하였다. 유기층을 배합하고 Na2SO4상에서 건조시키고, 진공 농축시켰다. 잔사는 MeOH (5 mL)에 재용해시키고, K2CO3 (42 mg, 0.306 mmol, 2.5 eq.)를 첨가하였다. 혼합물은 추가로 1시간동안 25 ℃에서 교반하였다. 반응 혼합물을 여과하고, 여과물을 역상 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(CH3CN/H2O= 1/10 - 10/1로 용출시키는; V/V)로 정제하여 백색 고체로서 (S)-N-(2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)-2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)아세트아미드(25.58 mg, 수율 40%)을 수득하였다.
LCMS: (ESI)(M+H)+ = 524.2.
1H NMR: (400 MHz, DMSO) δ 12.48 (s, 1H), 11.13 (s, 1H), 8.66 (s, 2H), 7.90 (s, 1H), 6.61 (s, 1H), 4.67 (d, J = 13.1 Hz, 2H), 4.20 (s, 1H), 3.94 - 3.78 (m, 2H), 2.98 (t, J = 12.2 Hz, 2H), 2.04 - 2.04 (m, 1H), 1.92 (d, J = 6.9 Hz, 2H), 1.72 (d, J = 12.7 Hz, 2H), 1.19 (d, J = 6.4 Hz, 3H), 1.15 - 1.01 (m, 2H).
실시예 18:
(E)-2-(1-옥소-1,2-디하이드로프탈라진-5-일)프로파날 O-(2-옥소-2-(4-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페라진-1-일)에틸)옥심
단계 A: 4-브로모-3-하이드록시이소벤조푸란-1(3H)-온의 합성
질소하의 -20℃에서 n-BuLi 용액(헥산 2.5M, 45mL, 112.50mmol, 2.2 eq)의 교반 용액에 무수 THF(120mL) 중에 2,2,6,6-테트라메틸헥사하이드로피리딘(15.71g, 111.19mmol, 2.2 eq)의 용액을 적가하였다. 혼합물은 30분동안 -20 ℃에서 교반하였다. -50℃로 냉각시킨 후, 무수 THF(40mL)에 3-브로모벤조산 용액(10.16g, 50.54mmol, 1.0 eq.)을 적가하고 혼합물을 -50℃에서 1시간 동안 교반하였다. 이어서 혼합물을 -50℃에서 DMF(15mL, 202.17mmol, 4.0 eq.)로 처리하였다. 생성된 용액을 실온으로 가온하고 물(100mL)로 켄칭하였다. 혼합물은 2M HCl 수용액으로 pH 4로 산성화시키고 EtOAc(3 x 100 mL)로 추출하였다. 유기층을 배합하고 염수 (2 x 100 mL)로 세척하고, Na2SO4상에서 건조시키고, 진공 농축시켰다. 잔사를 EtOAc와 석유 에테르의 혼합 용매(1/1; V/V, 300 mL)로 결정화함에 의해 정제하여 황색 고체로서 4-브로모-3-하이드록시이소벤조푸란-1(3H)-온(10.65 g, 92.0% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다.
LCMS: (ESI) (M+H)+ = 229.0.
단계 B: 5-브로모프탈라진-1(2H)-온의 합성
EtOH(170mL) 중의 4-브로모-3-하이드록시이소벤조푸란-1(3H)-온(10.65g, 46.50mmol, 1.0 eq)의 용액에 하이드라진 수화물(13.02g, 260.40mmol, 5.6 eq)을 첨가하였다. 수득한 용액은 2시간동안 80℃에서 교반하였다. 혼합물은 실온으로 냉각시키고 물(150 mL)로 켄칭하였다. 혼합물은 EtOAc (3 x 150 mL)로 추출하였다. 유기층을 배합하고 염수 (300 mL)로 세척하고, Na2SO4상에서 건조시키고, 진공 농축시켰다. 잔사를 컬럼 크로마토그래피(DCM/MeOH= 10/1)로 정제하여 5-브로모프탈라진-1(2H)-온(3.5g, 수율 33.5%)을 백색 고체로서 수득하였다.
LCMS: (ESI) (M+H)+ = 225.0.
1H NMR: (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 12.84(br s, 1H), 8.42(s, 1H), 8.24(d, J = 8.0 Hz, 1H), 8.21(dd, J = 8.0, 1.2 Hz, 1H), 7.76(t, J = 8.0 Hz, 1H).
단계 C: 5-브로모-2-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)프탈라진-1(2H)-온의 합성
DMF(50mL) 중의 5-브로모프탈라진-1(2H)-온(2.25 g, 4.00 mmol, 1.0 eq)의 용액에 NaH(60%, 400 mg, 10.00 mmol, 2.5 eq)을 0 ℃에서 첨가하였다. 혼합물은 1.5시간동안 0 ℃에서 교반하였다. 2-(트리메틸실릴)에톡시메틸 클로라이드(1.00 g, 6.00 mmol, 1.5 eq.)를 0℃에서 혼합물에 첨가하였다. 혼합물은 추가로 2시간동안 15 ℃에서 교반하였다. 혼합물은 물(100 mL)로 켄칭시키고 EtOAc (2 x 100 mL)로 추출하였다. 유기층을 배합하고 염수 (50 mL)로 세척하고, Na2SO4상에서 건조시키고, 진공 농축시켰다. 잔사를 컬럼 크로마토그래피(EtOAc/석유 에테르= 1/10; V/V)로 정제하여 5-브로모-2-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)피리다진-1(2H)-온(2.40 g, 수율 67.9%)을 황색 오일로서 수득하였다.
LCMS: (ESI) (M+H-28)+ = 327.0.
1H NMR: (400 MHz, CDCl3) δ 8.44 (s, 1H), 8.36 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 7.94 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 7.55 (t, J = 8.0 Hz, 1H), 5.51 (s, 2H), 3.71 - 3.66 (m, 2H), 0.96 - 0.91 (m, 2H), -0.06 (s, 9H).
단계 D: 5-(프로프-1-엔-2-일)-2-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)프탈라진 -1(2H)-온의 합성
디옥산 및 H2O(4/1; V/V, 45 mL)의 혼합 용매에 5-브로모-2-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)프탈라진-1(2H)-온(4.50 g, 12.66 mmol, 1.0 eq.)의 용액에 질소하에 실온에서 이소프로페닐보론산 피나콜 에스테르 (2. 34 g, 13.93 mmol, 1.1 eq.), K2CO (3.50 g, 25.33 mmol, 2.0 eq.) 및 Pd(dppf)Cl2 (0.93 g, 1.27 mmol, 0.1 eq.)를 첨가하였다. 혼합물은 질소하에 16시간동안 65 ℃에서 교반하였다. 혼합물은 실온으로 냉각시키고, 물(80 mL)로 희석하고 에틸 아세테이트 (2 x 100 mL)로 추출하였다. 유기층을 배합하고, Na2SO4상에서 건조시키고, 진공 농축시켜 황색 고체로서 5-(프로프-1-엔-2-일)-2-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)프탈라진-1(2H)-온(3.10 g, 62.7%) 을 수득하였다.
LCMS: (ESI) (M+H-28)+ = 289.0.
단계 E: 5-(1-하이드록시프로판-2-일)-2-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)프탈라진 -1(2H)-온의 합성
THF (85 mL) 중의 5-(프로프-1-엔-2-일)-2-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)프탈라진-1(2H)-온(3.10 g, 19.39 mmol, 1.00 eq.)의 용액에 0℃에서 NaBH4(0.59 g, 19.39 mmol, 1.0 eq.)를 첨가하였다. 혼합물은 1시간동안 0 ℃에서 교반하였다. THF(5mL) 중에 BF3-OEt2(1.53g, 10.78mmol, 1.1 eq.) 용액을 상기 혼합물에 첨가하였다. 혼합물은 추가로 1.5시간동안 15 ℃에서 교반하였다. 물(5 mL)을 0℃에서 혼합물에 첨가하고 혼합물을 15℃에서 3.5시간 동안 교반하였다. 물(5 mL) 중의 옥손(9.98 g, 33.30 mmol, 3.4 eq.)의 용액을 상기 혼합물에 0 ℃에서 첨가하였다. 혼합물은 24시간동안 15 ℃에서 교반하였다. 혼합물은 물(80 mL)로 희석하고 에틸 아세테이트 (2 x 100 mL)로 추출하였다. 유기층을 배합하고 염수 (50 mL)로 세척하고, Na2SO4상에서 건조시키고, 진공 농축시켰다. 잔사를 컬럼 크로마토그래피(EtOAc/석유 에테르= 1/2; V/V)로 정제하여 5-(1-하이드록시프로판-2-일)-2-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)피리다진-1(2H)-온(1.40 g, 수율 39.3%)을 황색 고체로서 수득하였다.
LCMS: (ESI) (M+H-28)+ = 307.2.
단계 F: 2-(1-옥소-2-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1,2-디하이드로프탈라진-5-일)프로파날의 합성
DCM (15 mL) 중의 5-(1-하이드록시프로판-2-일)-2-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)프탈라진-1(2H)-온(700 mg, 2.09 mmol, 1.0 eq.)의 용액에 실온에서 데스-마틴 페리오디난(1.33 g, 3.14 mmol, 1.5 eq.)를 첨가하였다. 혼합물은 2시간동안 15 ℃에서 교반하였다. 혼합물을 포화 NaHCO3 수용액(50mL)으로 켄칭시키고 DCM(2 x 100mL)으로 추출하였다. 유기층을 배합하고 염수 (100 mL)로 세척하고, Na2SO4상에서 건조시키고, 진공 농축시켰다. 잔사를 컬럼 크로마토그래피(EtOAc/석유 에테르= 2/1; V/V)로 정제하여 2-(1-옥소-2-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1,2-디하이드로프탈라진-5-일)(350 mg, 수율 50.3%)을 황색 오일로서 수득하였다.
LCMS: (ESI) (M+H-28)+ = 304.8.
단계 G: (E)-2-(1-옥소-2-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1,2-디하이드로피리다진-5-일) O-(2-옥소-2-(4-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페라진-1-일)에틸)옥심의 합성
MeOH(5 mL) 중의 2-(아미노옥시)-1-(4-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페라진-1-일)에타논 하이드클로라이드(100 mg, 0.33 mmol, 1.0 eq)의 용액에 2-(1-옥소-2-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1,2-디하이드로프탈라진-5-일)프로파날 (131 mg, 0.39 mmol, 1.2 eq.) 및 DIPEA(128 mg, 0.98 mmol, 3.0 eq)를 첨가하였다. 혼합물은 3시간동안 55 ℃에서 교반하였다. 아세트산(79 mg, 1.31 mmol, 4.0 eq.) 및 나트륨 시아노보로하이드라이드(31 mg, 0.49 mmol, 1.5 eq.)을 혼합물에 첨가하였다. 혼합물은 추가로 0.5시간동안 55 ℃에서 교반하였다. 혼합물을 포화 NaHCO3 수용액(50mL)으로 켄칭시키고 DCM(2 x 100mL)으로 추출하였다. 유기층을 배합하고 염수 (50 mL)로 세척하고, Na2SO4상에서 건조시키고, 진공 농축시켰다. 잔사를 컬럼 크로마토그래피(EtOAc/석유 에테르 = 2/1; V/V)로 정제하여 황색 오일로서 (E)-2-(1-옥소-2-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1,2-디하이드로프탈라진-5-일)프로파날 O-(2-옥소-2-(4-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페라진-1-일)에틸)옥심(40 mg, 22.1%)을 수득하였다.
LCMS: (ESI) (M+H-28)+ = 592.2.
1H NMR: (400 MHz, CDCl3) δ 8.59 - 8.52 (m, 3H), 8.43 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.82 - 7.71 (m, 2H), 7.67 (d, J = 6.4 Hz, 1H), 5.66 - 5.54 (m, 2H), 4.89 - 4.79 (m, 2H), 4.45 - 4.33 (m, 1H), 4.00 - 3.93 (s, 4H), 3.81 - 3.73 (m, 4H), 3.64 - 3.52 (m, 2H), 1.63 (d, J = 7.2 Hz, 3H), 1.07 - 0.98 (m, 2H), 0.03 (s, 9H).
단계 H: (E)-2-(1-옥소-1,2-디하이드로프탈라진-5-일)프로파날 O-(2-옥소-2-(4-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페라진-1-일)에틸)옥심의 합성
DCM (8 mL) 중의 (E)-2-(1-옥소-2-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1,2-디하이드로프탈라진-5-일)프로파날 O-(2-옥소-2-(4-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페라진-1-일)에틸)옥심(35 mg, 0.06 mmol, 1.0 eq.)의 용액에 TFA(1mL)를 첨가하였다. 혼합물은 1시간동안 15 ℃에서 교반하였다. 혼합물을 포화 NaHCO3 수용액(50mL)으로 중화시키고 DCM(3 x 80mL)으로 추출하였다. 유기층을 배합하고 Na2SO4상에서 건조시키고, 진공 농축시켰다. 잔사를 MeOH(3mL)에 재용해하고 탄산칼륨(28 mg, 0.21 mmol, 3.6 eq.)을 첨가하였다. 혼합물은 추가로 1시간동안 15 ℃에서 교반하였다. 혼합물을 여과하고, 여과물을 prep-HPLC로 정제하여 백색 고체로서 (E)-2-((1-옥소-1,2-디하이드로프탈라진-5-일)프로파날 O-(2-옥소-2-(4-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페라진-1-일) 에틸)옥심(9.48 mg, 수율 33.8%)을 수득하였다.
LCMS: (ESI) (M+H)+=490.2.
1H NMR: (400 MHz, CDCl3) δ 10.49 (s, 1H), 8.59 - 8.51 (m, 3H), 8.41 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 7.83 - 7.72 (m, 2H), 7.67 (d, J = 6.4 Hz, 1H), 4.82 (s, 2H), 4.45 - 4.35 (m, 1H), 4.01 - 3.90 (m, 4H), 3.81 - 3.72 (m, 2H), 3.63 - 3.54 (m, 2H), 1.64 (d, J = 6.8 Hz, 3H).
실시예 19:
(E)-2-(1-옥소-1,2-디하이드로프탈라진-5-일)프로파날 O-(2-옥소-2-(4-(5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)피페라진-1-일)에틸)옥심
단계 A: 3급-부틸 2-옥소-2-(4-(5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)피페라진-1-일)에톡시카바메이트의 합성
DMF(20 mL) 중의 1-(5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)피페라진 하이드로클로라이드(808 mg, 3.02 mmol, 1.0 eq.)의 용액에 DIPEA(1.95 g, 15.09 mmol, 5.0 eq.) 및 HATU(1.38 g, 3.62 mmol, 1.2 eq.)를 첨가하고 이어서 2-(((3급-부톡시카보닐)아미노)옥시)아세트산(635 mg, 3.32 mmol, 1.1 eq.)을 적가하였다. 수득한 혼합물은 2시간동안 15 ℃에서 교반하였다. 반응 혼합물은 물(100 mL)로 켄칭시키고 EtOAc (2 x 100 mL)로 추출하였다. 유기층을 배합하고 염수 (50 mL)로 세척하고, Na2SO4상에서 건조시키고, 진공 농축시켰다. 잔사를 실리카겔 크로마토그래피(EtOAc/석유 에테르= 1/3; V/V)로 정제하여 황색 오일로서 3급-부틸 2-옥소-2-(4-(5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)피페라진-1-일)에톡시카바메이트(1.03 g, 수율 84.4%)를 수득하였다.
LCMS: (ESI) (M+H-56)+ = 348.8.
단계 B: 2-(아미노옥시)-1-(4-(5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일) 피페라진-1-일)에타논 하이드로클로라이드의 합성
Figure pct00260
HCl/디옥산 (4M, 10 mL) 중의 3급-부틸 2-옥소-2- (4-(5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)피페라진-1-일)에톡시카바메이트 (700mg, 1.73 mmol, 1.0 eq)의 용액을 15 ℃에서 1 시간 동안 교반하였다. 진공하에 반응 혼합물을 농축시켜 백색 고체로서 2-(아미노옥시)-1-(4-(5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)피페라진-1-일)에타논 하이드로클로라이드(590 mg, 수율 99.9%)를 수득하였다.
LCMS: (ESI) (M+H)+ = 305.2.
단계 C: (E)-2-(1-옥소-2-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1,2-디하이드로프탈라진-5-일)프로파날 O-(2-옥소-2-(4-(5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)피페라진-1-일)에틸)옥심의 합성
THF(10 mL) 중의 2-(아미노옥시)-1-(4-(5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)피페라진-1-일)에타논 하이드클로라이드(100 mg, 0.29 mmol, 1.0 eq)의 용액에 2-(1-옥소-2-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1,2-디하이드로프탈라진-5-일)프로파날 (118 mg, 0.35 mmol, 1.2 eq.), DIPEA(114 mg, 0.88 mmol, 3.0 eq) 및 테트라에톡시 티타늄 (74 mg, 0.32 mmol, 1.1 eq.)를 첨가하였다. 혼합물은 1시간 동안 80 ℃에서 교반하였다. 혼합물은 물(50 mL)로 희석하고 에틸 아세테이트 (2 x 100 mL)로 추출하였다. 유기층을 염수 (50 mL)로 세척하고, Na2SO4상에서 건조시키고, 진공 농축시켰다. 잔사를 컬럼 크로마토그래피(EtOAc/석유 에테르 = 2/3; V/V)로 정제하여 황색 오일로서 (E)-2-(1-옥소-2-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1,2-디하이드로프탈라진-5-일)프로파날 O-(2-옥소-2-(4-(5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)피페라진-1-일)에틸)옥심(80 mg, 44.1%)을 수득하였다.
LCMS: (ESI) (M+H)+ = 620.2.
단계 D: (E)-2-(1-옥소-1,2-디하이드로프탈라진-5-일)프로파날 O-(2-옥소-2-(4-(5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)피페라진-1-일)에틸)옥심의 합성
DCM (5 mL) 중의 (E)-2-(1-옥소-2-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1,2-디하이드로프탈라진-5-일)프로파날 O-(2-옥소-2-(4-(5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)피페라진-1-일)에틸)옥심(60 mg, 0.097 mmol, 1.0 eq.)의 용액에 TFA(1.5 mL)를 첨가하였다. 혼합물은 1시간동안 15 ℃에서 교반하였다. 혼합물을 포화 NaHCO3 수용액(50mL)으로 중화시키고 DCM(3 x 80mL)으로 추출하였다. 유기층을 배합하고 Na2SO4상에서 건조시키고, 진공 농축시켰다. 잔사를 MeOH(3mL)에 재용해하고 탄산칼륨(49 mg, 0.35 mmol, 3.6 eq.)을 첨가하였다. 혼합물은 추가로 1시간동안 15 ℃에서 교반하였다. 혼합물을 여과하고, 여과물을 prep-HPLC로 정제하여 백색 고체로서 (E)-2-((1-옥소-1,2-디하이드로프탈라진-5-일)프로파날 O-(2-옥소-2-(4-(5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)피페라진-1-일) 에틸)옥심(9.26 mg, 수율 16.2%)을 수득하였다.
LCMS: (ESI) (M+H)+ = 488.8.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 10.20 (s, 1H), 8.50 (s, 1H), 8.43 - 8.39 (m, 1H), 8.36 (dd, J = 7.2, 1.6 Hz, 1H), 7.78 - 7.70 (m, 2H), 7.69 - 7.65 (m, 1H), 7.63 (d, J = 6.4 Hz, 1H), 6.68 - 6.62 (m, 1H), 4.77 (s, 2H), 4.40 - 4.32 (m, 1H), 3.78 - 3.69 (m, 4H), 3.64 - 3.58 (m, 4H), 1.59 (d, J = 7.2 Hz, 3H).
실시예 20:
(S)-N-(2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)-2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일리덴)아세트아미드
20.1) 중간체 O의 합성 및 중간체 N의 합성
단계 A: 3급-부틸 4-(2-메톡시-2-옥소에틸리덴)피페리딘-1-카복실레이트의 합성
THF(350 mL) 중의 트리메틸 포스포노아세이트(27.32 g, 150.00 mmol, 1.0 eq.) 용액에 N2 대기 하에 빙수 욕조에서 0℃에서 NaH(60%, 6.30 g, 157.50 mmol, 1.05 eq.)를 분획으로 첨가하였다. 혼합물은 0.5시간동안 0 ℃에서 교반하였다. N-(3급-부톡시카보닐)-4-피페리돈(29.89 g, 150.00 mmol, 1.0 eq.)를 혼합물에 첨가하였다. 혼합물은 3시간동안 25 ℃에서 교반하였다. 혼합물은 냉각 포화된 NH4Cl 수용액(400 mL)으로 켄칭시키고 EtOAc (2 x 350 mL)로 추출하였다. 유기층을 배합하고 Na2SO4상에서 건조시키고, 진공 농축시켰다. 잔사를 실리카 겔 크로마토그래피(EtOAc/석유 에테르=1/10; V/V)로 정제하여 백색 고체로서 3급-부틸 4-(2-메톡시-2-옥소에틸리덴)피페리딘-1-카복실레이트(30.83 g, 80.5%)를 수득하였다.
LCMS:　(ESI)　(M+H-100)+ = 156.2.
1H NMR: (400 MHz, CDCl3) δ 5.65 (s, 1H), 3.63 (s, 3H), 3.48 - 3.35 (m, 4H), 2.91 - 2.82 (m, 2H), 2.26 - 2.15 (m, 2H), 1.40 (s, 9H).
단계 B: 메틸 2-(피페리딘-4-일리덴)아세테이트 하이드로클로라이드(중간체 O)의 합성
DCM (200 mL) 중의 3급-부틸 4-(2-메톡시-2-옥소에틸리덴)피페리딘-1-카복실레이트 (36.00 g, 47.00 mmol, 1.0 eq)의 혼합물에 HCl/디옥산(4M, 150 mL)을 첨가하였다. 혼합물은 1시간동안 25 ℃에서 교반하였다. 혼합물을 진공 농축시켜 백색 고체로서 메틸 2-(피페리딘-4-일리덴)아세테이트 하이드로클로라이드(34.84 g, 조 생성물)를 수득하였다.
LCMS: (ESI)　(M+H)+ = 156.2.
단계 C: 메틸 2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일리덴)아세테이트(중간체 N)의 합성
DCM(300 mL) 중의 메틸 2-(피페리딘-4-일리덴)아세테이트 하이드로클로라이드(21.96g, 114.66mmol, 1.2 eq.)와 TEA(29.01g, 286.65mmol, 3.0 eq.)의 혼합물에 2-클로로-5-(트리플루오로메틸)피리미딘(17.44g, 95.55mmol, 1.0 eq)을 첨가하였다. 반응 혼합물은 18시간 동안 25℃에서 교반시켰다. 혼합물은 물(500 mL)로 켄칭시키고 DCM (3 x 300 mL)로 추출하였다. 유기층을 배합하고 Na2SO4상에서 건조시키고, 진공 농축시켰다. 잔사를 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(석유 에테르/EtOAc= 10/1; V/V)로 정제하여 백색 고체로서 메틸 2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘 -2-일)피페리딘-4-일리덴)아세테이트(22.50 g, 78.2%)을 수득하였다.
LCMS: (ESI)　(M+H)+ = 302.0.
1H NMR: (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 8.72 (d, J = 0.4 Hz, 2H), 5.84 (s, 1H), 3.98 - 3.87 (m, 4H), 3.64 (s, 3H), 2.96 (t, J = 5.2 Hz, 2H), 2.45 - 2.38 (m, 2H).
20.2) 화합물 20의 합성
단계 A: 2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일리덴)아세트산의 합성
THF(100 mL) 및 H2O(100 mL)의 혼합 용매 중의 메틸 2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일리덴) 아세테이트 (11.38 g, 37.77 mmol, 1.0 eq.)의 혼합물에 NaOH (4.53 g, 113.31 mmol, 3.0 eq.)를 첨가하였다. 혼합물은 3시간동안 70℃에서 교반하였다. 반응 혼합물은 1M HCl을 사용하여 pH 6으로 조정하였다. 혼합물은 EtOAc (2 x 300 mL)로 추출하였다. 유기층을 배합하고, 염수(1000 mL)로 세척하고, Na2SO4상에서 건조시키고, 진공하에 농축하여 황색 고체로서 2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일리덴)아세트산(9.67 g, 수율 89.1%)을 수득하였다.
LCMS: (ESI)　(M+H)+ = 288.0.
단계 B: 4-브로모-5-(2,2,2-(트리메플루오로에톡시)-2-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)피리다진-3(2H)-온의 합성
2,2,2-트리플루오로에탄올 (280 mL) 중의 4,5-디브로모-2-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)피리다진-3(2H)-온(68.80 g, 179.10 mmol, 1.00 eq.)의 용액에 DIPEA(46.29 g, 358.20 mmol, 2.0 eq.)을 첨가하였다. 혼합물은 18시간동안 70℃에서 교반하였다. 혼합물은 실온으로 냉각시키고 물(800 mL)로 켄칭하였다. 혼합물은 EtOAc (3 x 500 mL)로 추출하였다. 유기층을 배합하고 염수 (3 x 1 L)로 세척하고, Na2SO4상에서 건조시키고, 진공 농축시켰다. 조 생성물을 실리카 겔 크로마토그래피(석유 에테르/EtOAc= 3/1; V/V)로 정제하여 황색 고체로서 4-브로모-5-(2,2,2-트리플루오로에톡시)-2-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)피리다진-3(2H)-온(82.80 g, 100%)을 수득하였다.
LCMS: (ESI)　(M+H-28)+ = 375.0.
1H NMR: (400　MHz,　CDCl3)　δ　7.72 (s, 1H), 5.53 (s, 2H), 4.65 (q, J = 7.6 Hz, 2H), 3.76 - 3.68 (m, 2H), 1.01 - 0.93 (m, 2H), 0.02 (s, 9H).
단계 C: 5-(2,2,2-트리플루오로에톡시)-4-(트리플루오로메틸)-2-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)피리다진-3(2H)-온의 합성
DMF (800 mL) 중의 4-브로모-5-(2,2,2-(트리플루오로에톡시)-2-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)피리다진-3(2H)-온(82.80 g, 205.32 mmol, 1.0 eq.)의 용액에 CuI(19.55 g, 102.66 mmol, 0.5 eq.)를 첨가한 후 메틸 2,2-디플루오로-2-(플루오로설포닐)아세테이트(157.78 g, 821.28 mmol, 4.0 eq.)를 적가하였다. 혼합물은 3시간동안 100℃에서 교반하였다. 혼합물은 실온으로 냉각시키고 물(1.5 L)로 켄칭하였다. 혼합물은 EtOAc (3 x 1 L)로 추출하였다. 유기층을 배합하고 염수 (2 x 2 L)로 세척하고, 무수 Na2SO4상에서 건조시키고, 진공 농축시켰다. 잔사를 컬럼 크로마토그래피(석유 에테르/EtOAc= 5/1; V/V)로 정제하여 5-(2,2,2-트리플루오로에톡시)-4-(트리플루오로메틸-2-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)피리다진-3(2H)-온(78.00 g, 96.8%)을 백색 고체로서 수득하였다.
LCMS: (ESI)　(M+H-28)+ = 365.0.
1H NMR:　(400　MHz,　CDCl3)　δ 7.85 (s, 1H), 5.48 (s, 2H), 4.65 (q, J = 7.6 Hz, 2H), 3.79 - 3.68 (m, 2H), 1.04 - 0.91 (m, 2H), 0.03 (s, 9H).
단계 D: (S)-5-((1-하이드록시프로판-2-일)아미노)-4-(트리플루오로메틸)-2-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)피리다진-3(2H)-온(중간체 B)의 합성
DMF (780 mL) 중의 5-(2,2,2-트리플루오로에톡시-4-(트리플루오로메틸)-2-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)피리다진-3(2H)-온(78.00 g, 198.79 mmol, 1.0 eq.)의 용액에 TEA (20.12 g, 198.79 mmol, 1.0 eq.) 및 L- 알라니놀 (29.86 g, 397.58 mmol, 2.0 eq.)을 첨가하였다. 혼합물은 3시간동안 60 ℃에서 교반하였다. 혼합물은 실온으로 냉각시키고 물(1 L)로 켄칭하였다. 혼합물은 EtOAc (3 x 800 mL)로 추출하였다. 유기층을 배합하고 염수 (2 x 1.5 L)로 세척하고, 무수 Na2SO4상에서 건조시키고, 진공 농축시켰다. 잔사를 컬럼 크로마토그래피(석유 에테르/EtOAc= 2/1; V/V)로 정제하여 (S)-5-((1-하이드록시프로판-2-일)아미노)-4-(트리플루오로메틸)-2-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)피리다진-3(2H)-온(72.08 g, 수율 98.7%)을 백색 고체로서 수득하였다.
LCMS: (ESI)　(M+H-28)+ = 340.1.
1H NMR:　(400 MHz, CDCl3)　δ 7.74 (s, 1H), 5.95 - 5.81 (m, 1H), 5.37 (dd, J = 22.8, 10.0 Hz, 2H), 4.0 - 3.85 (m, 1H), 3.84 - 3.75 (m, 1H), 3.73 - 3.63 (m, 3H), 1.32 (d, J = 6.4 Hz, 3H), 1.10 - 0.90 (m, 2H), 0.00 (s, 9H).
단계 E: (S)-2-(2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)이소인돌린-1,3-디온의 합성
THF (400 mL) 중의 (S)-5-((1-하이드록시프로판-2-일)아미노)-4-(트리플루오로메틸)-2-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)피리다진-3(2H)-온(57.00 g, 155.25 mmol, 1.0 eq.)의 용액에 N-하이드록시프탈이미드(25.33 g, 155.25 mmol, 1.0 eq.), PPh3(44.79 g, 170.78 mmol, 1.1 eq.)를 첨가하고 이어서 DIAD(34.53 g, 170.78 mmol, 1.1 eq.)를 적가하였다. 혼합물은 16시간동안 25 ℃에서 교반하였다. 혼합물은 물(800 mL)로 켄칭시키고 EtOAc (3 x 600 mL)로 추출하였다. 유기층을 배합하고 염수(1000 mL)로 세척하고, 무수 Na2SO4상에서 건조시키고, 진공 농축시켰다. 잔사를 컬럼 크로마토그래피(석유 에테르/EtOAc= 3/1; V/V)로 정제하여 무색 오일로서 (S)-2-(2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)이소인돌린-1,3-디온(79.02 g, 99.3%)을 수득하였다.
LCMS: (ESI) (M+H)+ = 513.2.
단계 F: (S)-5-((1-(아미노옥시)프로판-2-일)아미노)-4-(트리플루오로메틸)-2-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)피리다진-3(2H)-온(중간체 J)의 합성
DCM (120 mL) 및 MeOH (60 mL)의 혼합 용매 중 (S)-2-(2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)이소인돌린-1,3-디온(40.00 g, 78.04 mmol, 1.0 eq.)의 용액에 하이드라진 수화물(7.40 g, 116.96 mmol, 1.5 eq.)을 첨가하였다. 혼합물은 1시간동안 25 ℃에서 교반하였다. 혼합물을 감압하에 농축시켰다. 잔사는 EtOH (100 mL) 중에 현탁시켰다. 혼합물을 여과하고, 여과물을 진공 농축시켰다. 잔사를 컬럼 크로마토그래피(석유 에테르/EtOAc= 2/1; V/V)로 정제하여 (S)-5-((1-(아미노옥시)프로판-2-일)아미노)-4-(트리플루오로메틸)-2-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)피리다진-3(2H)-온(27.8 g, 93.1%)을 황색 오일로서 수득하였다.
LCMS: (ESI) (M+H)+ = 383.1.
1H NMR:　(400 MHz, CDCl3)　δ 7.73 (s, 1H), 6.45 - 6.35 (m, 1H), 5.59 (s, 2H), 5.43 - 5.34 (m, 2H), 4.07 - 3.98 (m, 1H), 3.85 - 3.77 (m, 1H), 3.74 - 3.64 (m, 3H), 1.32 (d, J = 6.8 Hz, 3H), 0.99 - 0.93 (m, 2H), 0.00 (s, 9H).
단계 G: (S)-N-(2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)-2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)아세트아미드의 합성
DMF(300 mL) 중의 2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일리덴)아세트산(9.53 g, 33.18 mmol, 1.1 eq.) 및 (S)-5-((1-(아미노옥시)프로판-2-일)아미노)-4-(트리플루오로메틸)-2-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)피리다진-3(2H)-온(11.53 g, 30.16 mmol, 1.0 eq.)의 용액에 DIPEA(11.69 g, 90.48 mmol, 3.0 eq.)와 HATU(13.76 g, 36.19 mmol, 1.2 eq.)를 첨가하였다. 혼합물은 1시간동안 25 ℃에서 교반하였다. 혼합물은 물(800 mL)로 켄칭시키고 EtOAc (3 x 500 mL)로 추출하였다. 유기층을 배합하고 염수 (2 x 1000 mL)로 세척하고, Na2SO4상에서 건조시키고, 감압하에 농축시켰다. 잔사를 컬럼 크로마토그래피(EtOAc/석유 에테르= 2/1; V/V)로 정제하여 황색 오일로서 (S)-N(2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)-2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일리덴)아세트아미드(4.40 g, 22.4%)을 수득하였다.
LCMS: (ESI) (M+H)+ = 652.2.
1H NMR: (400 MHz, CDCl3) δ 8.97 (s, 1H), 8.52 (s, 2H), 7.76 (s, 1H), 6.09 (s, 1H), 5.74 - 5.56 (m, 1H), 5.48 - 5.40 (m, 1H), 5.39 - 5.28 (m, 1H), 4.18 - 4.10 (m, 2H), 4.08 - 3.91 (m, 5H), 3.75 - 3.68 (m, 2H), 3.18 - 3.05 (m, 2H), 2.39 (t, J = 5.6 Hz, 2H), 1.39 (d, J = 6.4 Hz, 3H), 1.01 - 0.95 (m, 2H), 0.02 (s, 9H).
단계 H: (S)-N-(2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)-2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일리덴)아세트아미드의 합성
DCM (18 mL) 중의 (S)-N-(2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)-2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)아세트아미드(300 mg, 0.46 mmol, 1.0 eq.)의 용액에 TFA(3 mL)를 첨가하였다. 수득한 용액은 0.5시간동안 25 ℃에서 교반하였다. 혼합물은 진공하에 농축시켰다. MeOH (3 mL) 및 K2CO3 (100 mg, 0.72 mmol)을 수득한 혼합물에 첨가하였다. 혼합물은 추가로 0.5시간동안 25 ℃에서 교반하였다. 혼합물을 여과하고, 여과물을 prep-HPLC(FA)로 정제하여 백색 고체로서 (S)-N-(2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)-2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일리덴)아세트아미드(41.89 mg, 17.5%)을 수득하였다.
LCMS: (ESI)　(M+H)+ = 522.2.
1H NMR: (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 12.49 (s, 1H), 11.21 (s, 1H), 8.72 (s, 2H), 7.93 (s, 1H), 6.68 - 6.60 (m, 1H), 5.57 (s, 1H), 4.39 - 4.15 (m, 1H), 3.97 - 3.82 (m, 6H), 3.02 - 2.90 (m, 2H), 2.37 - 2.25 (m, 2H), 1.20 (d, J = 6.8 Hz, 3H).
실시예 21:
단계 F: (S)-2-플루오로-N-(2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)-2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일리덴)아세트아미드의 합성
21.1) 중간체 L의 합성
단계 A: 3급-부틸 4-(2-에톡시-2-플루오로-2-옥소에틸리덴)피페리딘-1-카복실레이트의 합성
THF(20 mL) 중의 에틸 2-(디메톡시포스포릴)-2-플루오로아세테이트(1.34 g, 5.52 mmol, 1.1 eq)의 용액에 NaH(240 mg, 6.02 mmol, 1.2 eq)를 0 ℃에서 첨가하였다. 수득한 혼합물은 20분동안 0℃에서 교반하였다. 0℃에서 3급-부틸 4-옥소피페리딘-1-카복실레이트 (1g, 5.02 mmol, 1.0 eq.)를 첨가하고 수득한 혼합물을 25 ℃에서 40분 더 교반하였다. 혼합물은 물(30 mL)로 켄칭시키고 EtOAc (3 x 20 mL)로 추출하였다. 유기층을 배합하고, Na2SO4상에서 건조시키고 감압하에 농축시켰다. 잔사를 컬럼 크로마토그래피(석유 에테르/EtOAc=9/1; V/V)로 정제하여 무색 오일로서 3급-부틸 4-(2-에톡시-1-플루오로-2-옥소에틸리덴)피페리딘-1-카복실레이트(900 mg, 64.2%)를 수득하였다.
LCMS: (ESI) (M+H-100)+ = 188.1.
단계 B: 에틸 2-플루오로-2-(피페리딘-4-일리덴)아세테이트 하이드로클로라이드의 합성
MeOH (5 mL) 중의 3급-부틸 4-(2-에톡시-1-플루오로-2-옥소에틸리덴)피페리딘-1-카복실레이트 (900 mg)의 용액에 HCl/디옥산(5 mL)을 첨가하였다. 혼합물은 30분 동안 25 ℃에서 교반하였다. 혼합물은 진공 농축시켜 에틸 2-플루오로-2-(피페리딘-4-일리덴)아세테이트 하이드로클로라이드(70 mg, 수율 100%)를 수득하였다.
LCMS: (ESI) (M+H)+ = 188.2.
단계 C: 에틸 2-플루오로-2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일리덴)아세테이트(중간체 L)의 합성
NMP(15 mL) 중의 에틸 2-플루오로-2-(피페리딘-4-일리덴)아세테이트 하이드로클로라이드(700 mg, 4.06 mmol, 1.1 eq.)의 용액에 DIPEA(1.4 g, 11.04 mmol, 3.0 eq.)와 2-클로로-5-(트리플루오로메틸)피리미딘(670 mg, 3.68 mmol, 1 eq.)을 첨가하였다. 수득한 혼합물은 1시간동안 80℃에서 교반하였다. 혼합물은 실온으로 냉각시키고 물(40 mL)로 희석하였다. 혼합물은 EtOAc (2 x 35 mL)로 추출하였다. 유기층을 배합하고, Na2SO4상에서 건조시키고 감압하에 농축시켰다. 잔사를 컬럼 크로마토그래피(석유 에테르/EtOAc= 9/1; V/V)로 정제하여 백색 고체로서 에틸 2-플루오로-2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일리덴)아세테이트(1 g, 86.9%)를 수득하였다.
LCMS: (ESI) (M+H)+ = 334.2.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 8.73 (s, 2H), 4.30 - 4.16 (m, 2H), 4.02 - 3.78 (m, 4H), 2.98 - 2.83 (m, 2H), 2.57 - 2.52 (m, 2H), 1.27 (t, J = 7.1 Hz, 3H).
21.2) 화합물 21의 합성
단계 A: 2-플루오로-2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일리덴)아세트산의 합성
THF(8 mL) 및 물(8 mL)의 혼합 용매 중의 에틸 2-플루오로-2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일리덴)아세테이트 (1 g, 3.01 mmol, 1.0 eq.)의 용액에 LiOH (289 mg, 12.04 mmol, 4.0 eq.)를 첨가하였다. 상기 혼합물을 40℃에서 1시간 동안 교반하였다. 혼합물은 물(30 mL)로 희석하고 EtOAc (3 x 25 mL)로 추출하였다. 물 층은 1M HCL 수용액을 사용하여 pH =　6으로 조정하였다. 수득한 혼합물을 EtOAc(3 x 25 mL)로 추출하고, Na2SO4상에서 건조시키고, 진공하에 농축하여 백색 고체로서 2-플루오로-2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일리덴)아세트산(720 mg, 수율 91.3%)을 수득하였다.
LCMS: (ESI) (M+H)+ = 306.2.
단계 B: (S)-2-플루오로-N-(2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)-2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일리덴)아세트아미드의 합성
THF(5 mL) 중의 2-플루오로-2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일리덴)아세트산(200 mg, 0.66 mmol, 1.1 eq.)의 용액에 DIPEA (153 mg, 1.18 mmol, 2.0 eq.) 및 HATU (337 mg, 0.89 mmol, 1.5 eq.)을 첨가하고, 이어서 (S)-5-((1-(아미노옥시)프로판-2-일)아미노)-4-(트리플루오로메틸)-2-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)피리다진-3(2H)-온 (230 mg, 0.59 mmol, 1.0 eq.)을 적가하였다. 수득한 혼합물은 1시간동안 25 ℃에서 교반하였다. 반응 혼합물은 물(35 mL)로 켄칭시키고 EtOAc (3 x 30 mL)로 추출하였다. 유기층을 배합하고 염수 (10 mL)로 세척하고, Na2SO4상에서 건조시키고, 진공 농축시켰다. 잔사를 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(석유 에테르/EtOAc= 7/3; V/V)로 정제하여 무색 오일로서 (S)-2-플루오로-N-(2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)-2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일리덴)아세트아미드(290 mg, 수율 66.9%)을 수득하였다.
LCMS: (ESI) (M+H)+ = 670.4.
단계 C: (S)-2-플루오로-N-(2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)-2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일리덴)아세트아미드의 합성
DCM (3 mL) 중의 (S)-2-플루오로-N-(2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)-2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)아세트아미드(290 mg, 0.434 mmol, 1.0 eq.)의 용액에 TFA(0.3 mL)를 첨가하였다. 수득한 혼합물을 20분 동안 25 ℃에서 교반하였다. 혼합물을 포화 NaHCO3 수용액(5mL)으로 중화시키고 DCM(3 x 10mL)으로 추출하였다. 유기층을 배합하고 Na2SO4상에서 건조시키고, 진공 농축시켰다. 잔사는 MeOH (3 mL)에 재용해시키고, K2CO3 (230 mg, 1.67 mmol, 3.0 eq.)를 첨가하였다. 혼합물은 추가로 1시간동안 25 ℃에서 교반하였다. 반응 혼합물을 여과하고, 여과물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(석유 에테르/EtOAc= 1/100, V/V)로 정제하여 백색 고체로서 (S)-2-플루오로-N-(2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)-2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일리덴)아세트아미드(5.7 mg, 수율 4.1%)을 수득하였다.
LCMS: (ESI) (M+H)+ = 540.2.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 12.49 (s, 1H), 11.86 (s, 1H), 8.72 (s, 2H), 7.92 (s, 1H), 6.64 - 6.51 (m, 1H), 4.32 - 4.18 (m, 1H), 4.05 - 3.93 (m, 1H), 3.94 - 3.84 (m, 5H), 2.91 (s, 2H), 2.46 (s, 2H), 1.21 (d, J = 6.6 Hz, 3H).
실시예 22:
2-플루오로-N-((S)-2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)-2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)-1,2,3,6-테트라하이드로피리딘-4-일)아세트아미드
단계 A: 에틸 2-플루오로-2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)-1,2,3,6-테트라하이드로피리딘-4-일)아세테이트의 합성
THF(15 mL) 중의 에틸 2-플루오로-2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일리덴)아세테이트 (930 mg, 2.8 mmol, 1 eq.)의 용액에 DBU (2.1 g, 13.9 mmol, 5.0 eq.)를 첨가하였다. . 수득한 혼합물은 3시간동안 70℃에서 교반하였다. 혼합물을 감압하에 농축시켰다. 잔사를 컬럼 크로마토그래피(석유 에테르/EtOAc= 95/5, V/V)로 정제하여 무색 오일로서 에틸 2-플루오로-2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)-1,2,3,6-테트라하이드로피리딘-4-일)아세테이트(210 mg, 22.8%)를 수득하였다.
LCMS: (ESI) (M+H)+ = 334.2.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 8.73 (s, 2H), 6.14 (s, 1H), 5.58 (d, J = 47.3 Hz, 1H), 4.45 - 4.33 (m, 1H), 4.33 - 4.23 (m, 1H), 4.20 (q, J = 7.1 Hz, 2H), 4.12 - 4.03 (m, 1H), 3.91 - 3.82 (m, 1H), 2.29 - 2.17 (m, 1H), 2.16 - 2.03 (m, 1H), 1.19 (t, J = 7.1 Hz, 3H).
단계 B: 2-플루오로-2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)-1,2,3,6-테트라하이드로피리딘-4-일)아세트산의 합성
THF(3 mL) 및 물(3 mL)의 혼합 용매 중의 에틸 2-플루오로-2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)-1,2,3,6-테트라하이드로피리딘-4-일)아세테이트 (210 mg, 0.64 mmol, 1.0 eq.)의 용액에 LiOH (46 mg, 1.9 mmol, 3.0 eq.)를 첨가하였다. 상기 혼합물을 40℃에서 1시간 동안 교반하였다. 혼합물은 물(30 mL)로 희석하고 EtOAc (3 x 25 mL)로 추출하였다. 물 층을 pH 6으로 조정하였다. 수득한 혼합물을 EtOAc(3 x 25 mL)로 추출하고, Na2SO4상에서 건조시키고, 진공하에 농축하여 백색 고체로서 2-플루오로-2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)-1,2,3,6-테트라하이드로피리딘-4-일)아세트산(210 mg, 수율 100%)을 수득하였다.
LCMS: (ESI) (M+H)+ = 306.2.
단계 C: 2-플루오로-N-((S)-2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)-2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)-1,2,3,6-테트라하이드로피리딘-4-일)아세트아미드의 합성
THF(5 mL) 중의 2-플루오로-2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)-1,2,3,6-테트라하이드로피리딘-4-일)아세트산(170 mg, 0.56 mmol, 1 eq.)의 용액에 DIPEA (145 mg, 1.12 mmol, 2.0 eq.) 및 HATU (320 mg, 0.84 mmol, 1.5 eq.)을 첨가하고, 이어서 (S)-5-((1-(아미노옥시)프로판-2-일)아미노)-4-(트리플루오로메틸)-2-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)피리다진-3(2H)-온 (230 mg, 0.59 mmol, 1.05 eq.)을 적가하였다. 반응 혼합물은 1시간동안 40℃에서 교반하였다. 반응 혼합물은 물(35 mL)로 켄칭시키고 EtOAc (3 x 30 mL)로 추출하였다. 유기층을 배합하고 염수 (10 mL)로 세척하고, Na2SO4상에서 건조시키고, 진공 농축시켰다. 잔사를 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(DCM/EtOAc= 98/2; V/V)로 정제하여 무색 오일로서 2-플루오로-N-((S)-2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)-2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)-1,2,3,6-테트라하이드로피리딘-4-일)아세트아미드(450 mg, 수율 100%)을 수득하였다.
LCMS: (ESI) (M+H)+ = 670.4.
단계 D: 2-플루오로-N-((S)-2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)-2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)-1,2,3,6-테트라하이드로피리딘-4-일)아세트아미드의 합성
DCM (5 mL) 중의 2-플루오로-N-((S)-2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)-2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)-1,2,3,6-테트라하이드로피리딘-4-일)아세트아미드(450 mg, 0.672 mmol, 1.0 eq.)의 용액에 TFA(1 mL)를 첨가하였다. 수득한 혼합물을 20분 동안 25 ℃에서 교반하였다. 혼합물을 포화 NaHCO3 수용액(5mL)으로 중화시키고 DCM(3 x 10mL)으로 추출하였다. 유기층을 배합하고 Na2SO4상에서 건조시키고, 진공 농축시켰다. 잔사는 MeOH (3 mL)에 재용해시키고, K2CO3 (230 mg, 1.67 mmol, 3.0 eq.)를 첨가하였다. 혼합물은 추가로 1시간동안 25 ℃에서 교반하였다. 반응 혼합물을 여과하고, 여과물을 prep-HPLC로 정제하여 백색 고체로서 2-플루오로-N-((S)-2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)-2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)-1,2,3,6-테트라하이드로피리딘-4-일) 아세트아미드(1.5 mg, 수율 0.4%)을 수득하였다.
LCMS: (ESI) (M+H)+ = 540.2.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 10.37 (s, 1H), 9.25 (s, 1H), 8.44 (s, 2H), 7.62 (s, 1H), 6.01 (s, 1H), 5.92 - 5.79 (m, 1H), 5.22 (d, J = 46.9 Hz, 1H), 4.46 - 4.19 (m, 2H), 4.14 - 3.81 (m, 5H), 2.35 - 2.21 (m, 1H), 2.21 - 2.10 (m, 1H), 1.31 (d, J = 6.4 Hz, 3H).
실시예 23
(E)-2-(3-플루오로-1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일리덴)-N-((S)-2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)아세트아미드
23.1) 중간체 M의 합성
단계 A: (E)-3급-부틸 3-플루오로-4-(2-메톡시-2-옥소에틸리덴)피페리딘-1-카복실레이트 및 (Z)-3급-부틸 3-플루오로-4-(2-메톡시-2-옥소에틸리덴)피페리딘-1-카복실레이트 합성(중간체 M)의 합성
THF(45 mL) 중의 트리메틸 포스포노아세이트(3.35 g, 18.41 mmol, 1.0 eq.) 용액에 N2 대기하에 빙수 욕조에서 0℃에서 NaH(60%, 0.77 g, 19.33 mmol, 1.05 eq.)를 분획으로 첨가하였다. 혼합물은 0.5시간동안 0 ℃에서 교반하였다. THF(45mL)의 용액 중의 3급-부틸 3-플루오로-4-옥소피페리딘-1-카복실레이트(4.00g, 18.41mmol, 1.0 eq.)를 혼합물에 적가하였다. 혼합물은 추가로 2.5시간동안 25 ℃에서 교반하였다. 혼합물은 냉각 포화된 NH4Cl 수용액(100 mL)으로 켄칭시키고 EtOAc (2 x 100 mL)로 추출하였다. 유기층을 배합하고 염수 (100 mL)로 세척하고, Na2SO4상에서 건조시키고, 진공 농축시켰다. 잔사를 실리카 겔 크로마토그래피(석유 에테르/EtOAc= 10/1; V/V)로 정제하여 담황색 오일로서 (E)-3급-부틸 3-플루오로-4-(2-메톡시-2-옥소에틸리덴)피페리딘-1-카복실레이트(940 mg, 18. 7%) 및 담황색 오일로서 (Z)-3급-부틸 3-플루오로-4-(2-메톡시-2-옥소에틸리덴)-피페리딘-1-카복실레이트(1.30 g, 25.8%)를 수득하였다.
(E)-3급-부틸 3-플루오로-4-(2-메톡시-2-옥소에틸리덴)피페리딘-1-카복실레이트:
LCMS: (ESI)　(M+H-100)+ = 174.2.
1H NMR: (400 MHz, CDCl3) δ 5.99 (s, 1H), 4.95 - 4.72 (m, 1H), 4.21 - 3.89 (m, 1H), 3.78 - 3.67 (m, 4H), 3.54 - 3.13 (m, 3H), 2.66 - 2.45 (m, 1H), 1.48 (s, 9H).
(Z)-3급-부틸 3-플루오로-4-(2-메톡시-2-옥소에틸리덴)피페리딘-1-카복실레이트:
LCMS: (ESI)　(M+H-100)+ = 174.2.
1H NMR: (400 MHz, CDCl3) δ 6.40 (d, J = 48.0 Hz, 1H), 5.83 (s, 1H), 4.72 - 4.16 (m, 2H), 3.73 (s, 3H), 3.07 - 2.86 (m, 1H), 2.85 - 2.68 (m, 2H), 2.17 - 2.07 (m, 1H), 1.48 (s, 9H).
23.2) 화합물 23의 합성
단계 A: (E)-메틸 2-(3-플루오로피페리딘-4-일리덴)아세테이트 하이드로클로라이드의 합성
DCM (5 mL) 중의 (E)-3급-부틸 3-플루오로-4-(2-메톡시-2-옥소에틸리덴)피페리딘-1-카복실레이트 (250 mg, 0.92 mmol, 1.0 eq)의 혼합물에 HCl/디옥산(4M, 3 mL)을 첨가하였다. 혼합물은 1시간동안 25 ℃에서 교반하였다. 혼합물을 진공 농축시켜 백색 고체로서 (E)-메틸 2-(3-플루오로피페리딘-4-일리덴)아세테이트 하이드로클로라이드(200 mg, 조 생성물)를 수득하였다.
LCMS: (ESI)　(M+H)+ = 174.0.
단계 B: (E)-메틸 2-(3-플루오로-1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일리덴)아세테이트의 합성
NMP(2 mL) 중의 (E)-메틸 2-(3-플루오로피페리딘-4-일리덴)아세테이트 하이드로클로라이드(170 mg, 0.76 mmol, 1.2 eq.)의 혼합물에 DIPEA(263.2 mg, 2.04 mmol, 3.0 eq.)와 2-클로로-5-(트리플루오로메틸)피리미딘(124 mg, 0.68 mmol, 1.0 eq.)을 첨가하였다. 혼합물은 2시간 동안 80 ℃에서 교반하였다. 혼합물은 실온으로 냉각시키고 포화 NH4Cl 수용액(60 mL)으로 희석하였다. 혼합물은 EtOAc (2 x 40 mL)로 추출하였다. 유기층을 배합하고 포화 NH4Cl 수용액 (2 x 60 mL)으로 세척하고, Na2SO4상에서 건조시키고, 진공 농축시켰다. 잔사를 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(석유 에테르/EtOAc= 6/1; V/V)로 정제하여 백색 고체로서 (E)-메틸 2-(3-플루오로-1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일리덴)아세테이트(207 mg, 95.6%)을 수득하였다.
LCMS: (ESI)　(M+H)+ = 319.9.
1H NMR : (400 MHz, CDCl3) δ 8.53 (s, 2H), 6.06 (s, 1H), 4.99 - 4.87 (m, 1H), 4.54 - 4.47 (m, 1H), 4.28 - 4.19 (m, 1H), 3.95 - 3.88 (m, 1H), 3.76 (s, 3H), 3.75 - 3.71 (m, 1H), 3.52 - 3.45 (m, 1H), 2.77 - 2.68 (m, 1H).
단계 C: (E)-2-(3-플루오로-1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페 리딘-4-일리덴)아세트산의 합성
THF(3 mL) 및 H2O(1.5 mL 중의 (E)-메틸 2-(3-플루오로-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일리덴) 아세테이트 (100 mg, 0.31 mmol, 1.0 eq.)의 혼합물에 LiOH (53 mg, 1.25 mmol, 4.0 eq.)를 첨가하였다. 혼합물은 2시간동안 50℃에서 교반하였다. 혼합물은 실온으로 냉각시키고 물(20 mL)로 희석하였다. 혼합물은 1M HCl로 pH 6으로 산성화시키고 EtOAc(2 x 50 mL)로 추출하였다. 유기층을 배합하고, 염수(100 mL)로 세척하고, Na2SO4상에서 건조시키고, 진공하에 농축하여 백색 고체로서 (E)-2-(3-플루오로-1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일리덴)아세트산(93 mg, 수율 97.3%)을 수득하였다.
LCMS: (ESI)　(M+H)+ = 306.2.
단계 D: (E)-2-(3-플루오로-1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일리덴)-N-((S)-2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)아세트아미드의 합성
DMF(3 mL) 중의 (E)-2-(3-플루오로-1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일리덴)아세트산(90 mg, 0.30 mmol, 1.0 eq.)의 혼합물에 (S)-5-((1-(아미노옥시)프로판-2-일)아미노)-4-(트리플루오로메틸)-2-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)피리다진-3(2H)-온(124 mg, 0.32 mmol, 1.1 eq.), DIPEA(0.15 mL, 0.89 mmol, 3.0 eq.)와 HATU(135 mg, 0.35 mmol, 1.2 eq.)를 첨가하였다. 혼합물은 1시간동안 25 ℃에서 교반하였다. 반응 혼합물은 물(100 mL)로 켄칭시키고 EtOAc (2 x 100 mL)로 추출하였다. 유기층을 배합하고 염수 (2 x 100 mL)로 세척하고, Na2SO4상에서 건조시키고, 진공 농축시켰다. 잔사를 컬럼 크로마토그래피(석유 에테르/EtOAc= 3/2; V/V)로 정제하여 황색 고체로서 (E)-2-(3-플루오로-1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일리덴)-N-((S)-2-((6-옥소-5-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)아세트아미드(90 mg, 46.6%)을 수득하였다.
LCMS: (ESI) (M+H)+ = 669.9.
단계 E: (E)-2-(3-플루오로-1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일리덴)-N-((S)-2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)아세트아미드의 합성
DCM(3 mL) 중 (E)-2-(3-플루오로-1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일리덴)-N-((S)-2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)아세트아미드(80 mg, 0.12 mmol, 1.0 eq.)의 혼합물에 TFA(1 mL)를 첨가하였다. 혼합물은 1시간동안 25 ℃에서 교반하였다. 혼합물을 포화 NaHCO3 수용액(50 mL)으로 켄칭시키고 DCM(3 x 80mL)으로 추출하였다. 유기층을 배합하고 Na2SO4상에서 건조시키고, 진공 농축시켰다. 잔사는 MeOH (2 mL)에 재용해시키고, K2CO3 (76 mg, 0.55 mmol)를 첨가하였다. 혼합물은 추가로 1시간동안 25 ℃에서 교반하였다. 혼합물을 여과하고 여과물을 prep-HPLC(FA)로 정제하여 백색 고체로서 (E)-2-(3-플루오로-1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일리덴)-N-((S)-2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)아세트아미드(8.66 mg, 13.4%)을 수득하였다.
LCMS: (ESI)　(M+H)+ = 540.2.
1H NMR: (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 12.49 (s, 1H), 11.45 (s, 1H), 8.76 (d, J = 0.4 Hz, 2H), 7.93 (s, 1H), 6.65 - 6.59 (m, 1H), 5.84 (s, 1H), 5.21 -5.05 (m, 1H), 4.33 - 4.17 (m, 2H), 4.05 - 4.16 (m, 1H), 3.93 - 4.03 (m, 2H), 3.80 - 3.92 (m, 2H), 3.09 - 3.12 (m, 1H), 2.94 - 3.97 (m, 1H), 1.20 (d, J = 6.8 Hz, 3H).
실시예 24
(Z)-2-(3-플루오로-1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일리덴)-N-((S)-2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)아세트아미드
단계 A: (Z)-메틸 2-(3-플루오로피페리딘-4-일리덴)아세테이트 하이드로클로라이드의 합성
DCM (4 mL) 중의 (Z)-3급-부틸 3-플루오로-4-(2-메톡시-2-옥소에틸리덴)피페리딘-1-카복실레이트 (400 mg, 1.46 mmol, 1.0 eq)의 용액에 HCl/디옥산(4M, 2 mL)을 첨가하였다. 혼합물은 1시간동안 25 ℃에서 교반하였다. 혼합물을 진공 농축시켜 백색 고체로서 (Z)-메틸 2-(3-플루오로피페리딘-4-일리덴)아세테이트 하이드로클로라이드(310 mg, 100%)를 수득하였다.
LCMS: (ESI)　(M+H)+ = 174.2.
단계 B: (Z)-메틸 2-(3-플루오로-1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일리덴)아세테이트의 합성
NMP(5 mL) 중의 (Z)-메틸 2-(3-플루오로피페리딘-4-일리덴)아세테이트 하이드로클로라이드(310 mg, 1.48 mmol, 1.1 eq.)의 용액에 DIPEA(520 mg, 4.03 mmol, 3.0 eq.)와 2-클로로-5-(트리플루오로메틸)피리미딘(245 mg, 1.34 mmol, 1.0 eq.)을 첨가하였다. 혼합물은 2시간동안 60 ℃에서 교반하였다. 혼합물을 실온으로 냉각시키고 물(50 mL)로 희석시키고 EtOAc(2 x 50mL)로 추출하였다. 유기층을 배합하고 염수 (2 x 50 mL)로 세척하고, Na2SO4상에서 건조시키고, 진공 농축시켰다. 잔사를 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(EtOAc/석유 에테르= 1/5; V/V)로 정제하여 담황색 고체로서 (Z)-메틸 2-(3-플루오로-1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘 -2-일)피페리딘-4-일리덴)아세테이트(360 mg, 84.0%)을 수득하였다.
LCMS: (ESI)　(M+H)+ = 320.0.
1H NMR: (400 MHz, CDCl3) δ 8.51 (s, 2H), 6.57 (dd, J = 47.6, 2.8 Hz, 1H), 5.91 (s, 1H), 5.47 - 5.36 (m, 1H), 5.13 - 5.05 (m, 1H), 3.76 (s, 3H), 3.21 - 2.98 (m, 2H), 2.91 - 2.81 (m, 1H), 2.28 (dt, J = 13.6, 2.4 Hz, 1H).
단계 C: (Z)-2-(3-플루오로-1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일리덴)아세트산의 합성
THF(4 mL) 및 H2O(2 mL) 중의 (Z)-메틸 2-(3-플루오로-1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일리덴) 아세테이트 (200 mg, 0.63 mmol, 1.0 eq.)의 용액에 LiOH (79 mg, 1.88 mmol, 3.0 eq.)를 첨가하였다. 혼합물을 60 ℃로 가열하고 2시간 동안 교반하였다. 혼합물은 물(20 mL)로 희석하고 1M HCl을 사용하여 산성화하였다. 혼합물은 EtOAc (3 x 40 mL)로 추출하였다. 유기층을 배합하고, Na2SO4상에서 건조시키고, 진공하에 농축하여 담황색 고체로서 (Z)-2-(3-플루오로-1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일리덴)아세트산(190 mg, 99.4%)을 수득하였다.
LCMS:　(ESI)　(M+H)+ = 306.0.
단계 D: (Z)-2-(3-플루오로-1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일리덴)-N-((S)-2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)아세트아미드의 합성
DMF(5 mL) 중의 (Z)-2-(3-플루오로-1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일리덴)아세트산(182 mg, 0.60 mmol, 1.2 eq.)의 용액에 DIPEA (193 mg, 1.49 mmol, 3.0 eq.), HATU (283 mg, 0.75 mmol, 1.5 eq.)을 첨가하고, 이어서 (S)-5-((1-(아미노옥시)프로판-2-일)아미노)-4-(트리플루오로메틸)-2-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)피리다진-3(2H)-온 (190 mg, 0.50 mmol, 1.0 eq.)을 첨가하였다. 혼합물은 2시간동안 25 ℃에서 교반하였다. 혼합물은 물(30 mL)로 켄칭시키고 EtOAc (2 x 50 mL)로 추출하였다. 유기층을 배합하고 염수 (2 x 40 mL)로 세척하고, Na2SO4상에서 건조시키고, 진공 농축시켰다. 잔사를 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(석유 에테르/EtOAc= 4/6; V/V)로 정제하여 담황색 오일로서 (Z)-2-(3-플루오로-1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일리덴)-N-((S)-2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)아세트아미드(120 mg, 36.1%)을 수득하였다.
LCMS: (ESI)　(M+H)+ = 669.9.
단계 E: (Z)-2-(3-플루오로-1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일리덴)-N-((S)-2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)아세트아미드의 합성
DCM(3 mL) 중 (Z)-2-(3-플루오로-1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일리덴)-N-((S)-2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)아세트아미드(100 mg, 0.15 mmol, 1.0 eq.)의 용액에 TFA(1 mL)를 첨가하였다. 혼합물은 0.5시간동안 25 ℃에서 교반하였다. 혼합물은 진공하에 농축시켰다. 잔사는 MeOH (2 mL)에 재용해시키고, K2CO3 (40 mg, 0.29 mmol)를 첨가하였다. 혼합물은 추가로 0.5시간동안 25 ℃에서 교반하였다. 혼합물을 여과하고 여과물을 prep-HPLC로 정제하여 백색 고체로서 (Z)-2-(3-플루오로-1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일리덴)-N-((S)-2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)아세트아미드(3.47 mg, 4.31%)을 수득하였다.
LCMS: (ESI)　(M+H)+ = 540.0.
1H NMR: (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 12.49 (s, 1H), 11.52 (s, 1H), 8.76 - 8.70 (m, 2H), 7.93 (s, 1H), 6.72 - 6.52 (m, 2H), 5.78 (s, 1H), 5.27 - 5.15 (m, 1H), 4.95 - 4.84 (m, 1H), 4.31 - 4.21 (m, 1H), 4.01 - 3.95 (m, 1H), 3.93 - 3.86 (m, 1H), 3.32 - 3.17 (m, 1H), 3.13 - 3.02 (m, 1H), 2.64 - 2.57 (m, 1H), 2.35 - 2.30 (m, 1H), 1.20 (d, J = 6.4 Hz, 3H).
실시예 25
(S)-N-2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)-2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)-1,2,3,6-테트라하이드로피리딘-4-일)아세트아미드
25.1) 중간체 X의 합성
단계 A: 메틸 2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)-1,2,3,6-테트라하이드로피리딘-4-일)아세테이트의 합성
THF(100 mL) 중의 메틸 2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일리덴)아세테이트 (10.00 g, 33.19 mmol, 1 eq.)의 혼합물에 DBU (40.43 g, 265.54 mmol, 8.0 eq.)를 첨가하였다. 혼합물은 18시간동안 70℃에서 교반하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고 물(300mL)으로 켄칭시키고 EtOAc(3 x 200mL)로 추출하였다. 유기층을 배합하고 Na2SO4상에서 건조시키고, 진공 농축시켰다. 잔사를 컬럼 크로마토그래피(석유 에테르/EtOAc= 10/1; V/V)로 정제하여 무색 오일로서 메틸 2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)-1,2,3,6-테트라하이드로피리딘-4-일)아세테이트(7.45 g, 74.5%)를 수득하였다.
LCMS:　(ESI)　(M+H)+ = 302.2.
1H NMR: (400 MHz, DMSO-d 6) δ 8.73 - 8.68 (m, 2H), 5.70 - 5.65 (m, 1H), 4.26 - 4.21 (m, 2H), 3.95 (t, J = 5.6 Hz, 2H), 3.60 (s, 3H), 3.12 (s, 2H), 2.22 - 2.13 (m, 2H).
단계 B: 2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)-1,2,3,6-테트라하이드로피리딘-4-일)아세트산의 합성
THF(34 mL) 및 H2O(17 mL) 중의 메틸 2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)-1,2,3,6-테트라하이드로피리딘-4-일)아세테이트 (6.93 g, 23.00 mmol, 1.0 eq.)의 혼합물에 NaOH (2.76 g, 69.00 mmol, 3.0 eq.)를 첨가하였다. 혼합물은 2시간동안 50℃에서 교반하였다. 혼합물은 실온으로 냉각시키고 1M HCl을 사용하여 pH 6으로 조정하였다. 혼합물은 EtOAc (2 x 100 mL)로 추출하였다. 유기층을 배합하고, 염수(300 mL)로 세척하고, Na2SO4상에서 건조시키고, 진공하에 농축하여 황색 고체로서 2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)-1,2,3,6-테트라하이드로피리딘-4-일)아세트산(6.18 g, 93.5%)을 수득하였다.
LCMS:　(ESI)　(M+H)+ = 288.0.
1H NMR: (400 MHz, CDCl3) δ 8.43 (s, 2H), 5.67 - 5.60 (m, 1H), 4.26 - 4.18 (m, 2H), 3.96 (t, J = 5.6 Hz, 2H), 3.05 (s, 2H), 2.27 - 2.16 (m, 2H).
25.2) 화합물 25의 합성
단계 A: (S)-N-(2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)-2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)-1,2,3,6-테트라하이드로피리딘-4-일)아세트아미드의 합성
DMF(200 mL) 중의 2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)-1,2,3,6-테트라하이드로피리딘-4-일)아세트산(6.10 g, 21.23 mmol, 1.1 eq.) 및 (S)-5-((1-(아미노옥시)프로판-2-일)아미노)-4-(트리플루오로메틸)-2-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)피리다진-3(2H)-온(7.38 g, 19.30 mmol, 1.0 eq.)의 용액에 DIPEA(7.48 g, 57.90 mmol, 3.0 eq.)와 HATU(8.81 g, 23.16 mmol, 1.2 eq.)를 첨가하였다. 혼합물은 1시간동안 25 ℃에서 교반하였다. 혼합물은 물(600 mL)로 켄칭시키고 EtOAc (3 x 500 mL)로 추출하였다. 유기층을 배합하고 염수 (2 x1000 mL)로 세척하고, Na2SO4상에서 건조시키고, 감압하에 농축시켰다. 잔사를 컬럼 크로마토그래피(EtOAc/석유 에테르= 2/1; V/V)로 정제하여 황색 오일로서 (S)-N-(2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)-2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)-1,2,3,6-테트라하이드로피리딘-4-일)아세트아미드(10.69 g, 84.9%)을 수득하였다.
LCMS: (ESI) (M+H)+ = 652.2.
단계 B: (S)-N-2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)-2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)-1,2,3,6-테트라하이드로피리딘-4-일)아세트아미드의 합성
DCM (60 mL) 중의 (S)-N-(2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)-2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)-1,2,3,6-테트라하이드로피리딘-4-일)아세트아미드(5.74 g, 8.81 mmol, 1.0 eq.)의 용액에 TFA(20 mL)를 첨가하였다. 수득한 용액은 0.5시간동안 25 ℃에서 교반하였다. 혼합물은 진공하에 농축시켰다. 잔사를 MeOH(100 mL)와 H2O(100 mL)의 혼합 용매에 용해시켰다. K2CO3 (4.87 g, 35.24 mmol, 4.0 eq.) 및 에틸렌디아민 (3.92 g, 65.19 mmol, 7.4 eq.)을 반응 혼합물에 첨가하였다. 혼합물은 추가로 1시간동안 25 ℃에서 교반하였다. 혼합물은 물(300 mL)로 켄칭시키고 DCM (3 x 200 mL)로 추출하였다. 유기층을 배합하고 염수 (300 mL)로 세척하고, Na2SO4상에서 건조시키고, 진공 농축시켰다. 잔사를 prep-HPLC로 정제하여 백색 고체로서 (S)-N-(2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)-2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)-1,2,3,6-테트라하이드로피리딘-4-일)아세트아미드(1.54 g, 33.6%)을 수득하였다.
LCMS: (ESI)　(M+H)+ = 522.2.
1H NMR: (400 MHz, DMSO-d 6) δ 12.49 (s, 1H), 11.23 (s, 1H), 8.70 (s, 2H), 7.90 (s, 1H), 6.65 - 6.48 (m, 1H), 5.63 (s, 1H), 4.28 - 4.15 (m, 3H), 3.97 - 3.88 (m, 3H), 3.86 - 3.79 (m, 1H), 2.76 (s, 2H), 2.19 - 2.10 (m, 2H), 1.18 (d, J = 6.8 Hz, 3H).
실시예 26
(S)-2-(1-(5-(2-(플루오로페닐)피리미딘-2-일)-1,2,3,6-테트라하이드로피리딘-4-일)-N-(2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)아세트아미드
단계 A: 메틸 2-(1-(5-(요오도피리미딘-2-일)피페리딘-4-일리덴)아세테이트의 합성
DCM(80 mL) 중의 메틸 2-(피페리딘-4-일리덴)아세테이트 하이드로클로라이드(7.51 g, 39.18 mmol, 1.0 eq.)의 용액에 TEA(11.90 g, 117.55 mmol, 3.0 eq.)와 2-클로로-5-요오도피리미딘(9.61 g, 39.97 mmol, 1.02 eq.)을 첨가하였다. 혼합물은 16시간동안 25 ℃에서 교반하였다. 혼합물은 물(100 mL)로 희석하고 EtOAc (2 x 150 mL)로 추출하였다. 유기층을 배합하고 포화 NH4Cl 수용액 (2 x 120 mL)으로 세척하고, Na2SO4상에서 건조시키고, 진공 농축시켰다. 잔사를 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(EtOAc/석유 에테르= 5/1; V/V)로 정제하여 백색 고체로서 메틸 2-(1-(5-요오도피리미딘-2-일)피페리딘-4-일리덴)아세테이트(8.20 g, 58.3%)을 수득하였다.
LCMS: (ESI)　(M+H)+ = 360.0.
1H NMR: (400 MHz, CDCl3)　δ　8.40 (s, 2H), 5.78 - 5.75 (m, 1H), 3.91 - 3.83 (m, 4H), 3.71 (s, 3H), 3.06 - 2.96 (m, 2H), 2.41 - 2.32 (m, 2H).
단계 B: 메틸 2-(1-(5-요오도피리미딘-2-일)-1,2,3,6-테트라하이드로피리딘-4-일)아세테이트의 합성
THF(30 mL) 중의 메틸 2-(1-(5-요오도피리미딘-2-일)피페리딘-4-일리덴)아세테이트 (2.5 g, 6.94 mmol, 1 eq.)의 용액에 DBU (5.3 g, 34.72 mmol, 5.0 eq.)를 첨가하였다. 수득한 혼합물은 3시간동안 70℃에서 교반하였다. 혼합물을 감압하에 농축시켰다. 잔사를 컬럼 크로마토그래피(석유 에테르/EtOAc= 8/1; V/V)로 정제하여 무색 오일로서 메틸 2-(1-(5-요오도피리미딘-2-일)-1,2,3,6-테트라하이드로피리딘-4-일)아세테이트(1.7 g, 68 %)를 수득하였다.
LCMS: (ESI) (M+H)+ = 360.0.
1H NMR : N001-08173-1 (400 MHz, DMSO) δ 8.51 (s, 2H), 5.71 - 5.60 (m, 1H), 4.14 - 4.05 (m, 2H), 3.81 (t, J = 5.8 Hz, 2H), 3.60 (s, 3H), 3.10 (s, 2H), 2.10 - 2.14 (m, 2H).
단계 C: 메틸 2-(1-(5-(2-플루오로페닐)피리미딘-2-일)-1,2,3,6-테트라하이드로피리딘-4-일)아세테이트의 합성
디옥산 (6 mL) 중의 메틸 2-(1-(5-요오도피리미딘-2-일)-1,2,3,6-테트라하이드로피리딘-4-일)아세테이트(700 mg, 1.949 mmol, 1.0 eq), (2-플루오로페닐)보론산(542 mg, 3. 899 mmol, 2.0 eq), 물(1mL) 및 Na2CO3 (515 mg, 4.861 mmol, 2.5 eq)의 용액에 N2 대기하에 0℃에서 Pd(dppf)Cl2(114 mg, 0.155 mmol, 0.08 eq)를 첨가하였다. 혼합물은 N2 대기하에 3시간동안 90 ℃에서 교반하였다. 혼합물은 진공하에 농축시켰다. 잔사를 컬럼 크로마토그래피(석유 에테르/EtOAc= 10/1; V/V)로 정제하여 백색 고체로서 메틸 2-(1-(5-(2-플루오로페닐)피리미딘 -2-일)-1,2,3,6-테트라하이드로피리딘-4-일)아세테이트(600 mg, 수율 94%)를 수득하였다.
LCMS: (ESI)　(M+H)+ = 327.9.
1H NMR: (400 MHz, DMSO) δ 8.59 (d, J = 1.5 Hz, 2H), 7.57 (td, J = 7.8, 1.5 Hz, 1H), 7.45 - 7.36 (m, 1H), 7.30 - 7.28 (m, 2H), 5.69 (s, 1H), 4.21 (s, 2H), 3.93 (t, J = 5.8 Hz, 2H), 3.61 (s, 3H), 3.12 (s, 2H), 2.19 - 2.17 (m, 2H).
단계 D: 2-(1-(5-(2-플루오로페닐)피리미딘-2-일)-1,2,3,6-테트라하이드로피리딘-4-일)아세트산의 합성
THF(6 mL) 및 물(4 mL)의 혼합 용매 중의 메틸 2-(1-(5-(2-플루오로페닐)피리미딘-2-일)-1,2,3,6-테트라하이드로피리딘-4-일)아세테이트 (600 mg, 1.834 mmol, 1.0 eq.)의 용액에 LiOH (45 mg, 3.669 mmol, 2.0 eq.)를 첨가하였다. 상기 혼합물을 40℃에서 1시간 동안 교반하였다. 혼합물은 물(5 mL)로 희석하고 EtOAc (2 x 10 mL)로 추출하였다. 물 층은 1M HCl을 사용하여 pH =　6으로 조정하였다. 혼합물을 EtOAc(3 x 15 mL)로 추출하고, Na2SO4상에서 건조시키고, 진공하에 농축하여 백색 고체로서 2-(1-(5-(2-플루오로페닐)피리미딘-2-일)-1,2,3,6-테트라하이드로피리딘-4-일)아세트산(500 mg, 수율 87%)을 수득하였다.
LCMS: (ESI)　(M+H)+ = 314.2.
1H NMR : (400 MHz, DMSO) δ 12.24 (s, 1H), 8.59 (d, J = 1.5 Hz, 2H), 7.57 (td, J = 7.8, 1.5 Hz, 1H), 7.44 - 7.37 (m, 1H), 7.35 - 7.26 (m, 2H), 5.67 (s, 1H), 4.21 (s, 2H), 3.93 (t, J = 5.7 Hz, 2H), 3.02 (s, 2H), 2.19 (s, 2H).
단계 E: (S)-2-(1-(5-(2-(플루오로페닐)피리미딘-2-일)-1,2,3,6-테트라하이드로피리딘-4-일)-N-(2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)아세트아미드의 합성
THF(5 mL) 중의 2-(1-(5-(2-플루오로페닐)피리미딘-2-일)-1,2,3,6-테트라하이드로피리딘-4-일)아세트산(300 mg, 0.958 mmol, 1.0 eq.)의 용액에 DIPEA (371 mg, 2.875 mmol, 3.0 eq.) 및 HATU (437 mg, 1.150 mmol, 1.2 eq.)을 첨가하고, 이어서 (S)-5-((1-(아미노옥시)프로판-2-일)아미노)-4-(트리플루오로메틸)-2-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)피리다진-3(2H)-온 (402 mg, 1.054 mmol, 1.1 eq.)을 적가하였다. 수득한 혼합물은 2시간동안 25 ℃에서 교반하였다. 반응 혼합물은 물(10 mL)로 켄칭시키고 EtOAc (3 x 10 mL)로 추출하였다. 유기층을 배합하고 염수 (10 mL)로 세척하고, Na2SO4상에서 건조시키고, 진공 농축시켰다. 잔사를 컬럼 크로마토그래피(석유 에테르/EtOAc= 1/3, V/V)로 정제하여 황색 고체로서 (S)-2-(1-(5-(2-플루오로페닐)피리미딘-2-일)-1,2,3,6-테트라하이드로피리딘-4-일)-N-(2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)아세트아미드(500 mg, 수율 77%)을 수득하였다.
LCMS: (ESI)　(M+H)+ = 678.2.
단계 F: (S)-2-(1-(5-(2-(플루오로페닐)피리미딘-2-일)-1,2,3,6-테트라하이드로피리딘-4-일)-N-(2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)아세트아미드의 합성
DCM(3 mL) 중의 (S)-2-(1-(5-(2-플루오로페닐)피리미딘-2-일)-1,2,3,6-테트라하이드로피리딘-4-일)-N-(2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)아세트아미드(350 mg, 0.516 mmol, 1.0 eq.)의 용액에 TFA(0.5 mL)를 첨가하였다. 수득한 혼합물은 0.5시간동안 25 ℃에서 교반하였다. 혼합물을 포화 NaHCO3(5 mL)로 중화시키고 DCM(3 x 10mL)으로 추출하였다. 유기층을 배합하고 Na2SO4상에서 건조시키고, 진공 농축시켰다. 잔사는 MeOH (5 mL)에 재용해시키고, K2CO3 (178 mg, 1.292 mmol, 2.5 eq.)를 첨가하였다. 혼합물은 추가로 1시간동안 25 ℃에서 교반하였다. 혼합물을 여과하고 여과물을 prep-HPLC로 정제하여 백색 고체로서 (S)-2-(1-(5-(2-플루오로페닐)피리미딘-2-일)-1,2,3,6-테트라하이드로피리딘-4-일)-N-(2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)아세트아미드(122 mg, 수율 43%)을 수득하였다.
LCMS: (ESI)　(M+H)+ = 548.2.
1H NMR: (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 12.51 (s, 1H), 11.26 (s, 1H), 8.61 (d, J = 1.4 Hz, 2H), 7.92 (s, 1H), 7.59 (dd, J = 8.8, 7.0 Hz, 1H), 7.42 (dt, J = 7.2, 3.7 Hz, 1H), 7.33 (dd, J = 15.8, 8.1 Hz, 2H), 6.60 (s, 1H), 5.67 (s, 1H), 4.23 (s, 3H), 3.94 - 3.91 (m, 3H), 3.88 - 3.84 (m, 1H), 2.78 (s, 2H), 2.16 (s, 2H), 1.21 (d, J = 6.5 Hz, 3H).
실시예 27
2-(1-(5-(2-(플루오로페닐)피리미딘-2-일)-3-메틸-1,2,3,6-테트라하이드로피리딘-4-일)-N-((S)-2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)아세트아미드
27.1) 중간체 P의 합성
단계 A: 3급-부틸 (E)-4-(2-메톡시-2-옥소에틸리덴)-3-메틸피페리딘-1-카복실레이트의 합성
THF(2 mL) 중의 메틸 2-(디메톡시포스포릴)아세테이트(95 mg, 0.517 mmol, 1.1 eq)의 용액에 NaH(21 mg, 0.517 mmol, 1.1 eq)를 0 ℃에서 첨가하였다. 수득한 혼합물은 20분동안 0℃에서 교반하였다. 이어서 0 ℃에서 혼합물에 3급-부틸 3-메틸-4-옥소피페리딘-1- 카복실레이트 (100 mg, 0.47 mmol, 1.0 eq.)를 첨가하였다. 수득한 혼합물은 40분동안 25℃에서 교반하였다. 혼합물은 물(15 mL)로 켄칭시키고 EtOAc (3 x 20 mL)로 추출하였다. 유기층을 배합하고, Na2SO4상에서 건조시키고 감압하에 농축시켰다. 잔사를 컬럼 크로마토그래피(석유 에테르/EtOAc=4/1; V/V)로 정제하여 무색 오일로서 3급-부틸 (E)-4-(2-메톡시-2-옥소에틸리덴)-3-메틸피페리딘-1-카복실레이트(120 mg, 95.2%)를 수득하였다.
LCMS: (ESI) (M+H-100)+ = 170.2.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 5.70 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 3.90 - 3.76 (m, 1H), 3.62 (s, 3H), 3.58 - 3.40 (m, 2H), 3.18 - 2.79 (m, 3H), 2.46 - 2.36 (m, 1H), 1.41 (s, 9H), 1.02 (d, J = 6.8 Hz, 3H).
단계 B: 메틸 (E)-2-(3-메틸피페리딘-4-일리덴)아세테이트 하이드로클로라이드의 합성
MeOH (30 mL) 중의 3급-부틸 (E)-4-(2-메톡시-2-옥소에틸리덴)-3-메틸피페리딘-1-카복실레이트 (3.8 g, 14.13 mmol, 1.0 eq)의 용액에 HCl/디옥산(4M, 15 mL)을 첨가하였다. 혼합물은 3시간동안 25 ℃에서 교반하였다. 혼합물을 진공 농축시켜 무색 오일로서 (E)-2-(3-메틸피페리딘-4-일리덴)아세테이트(3.18 g, 수율 100%)를 수득하였다.
LCMS: (ESI) (M+H)+ = 170.2.
단계 C: 메틸 (E)-2-(1-(5-브로모피리미딘-2-일)-3-메틸피페리딘-4-일리덴)아세테이트의 합성
NMP(30 mL) 중의 메틸 (E)-2-(3-메틸피페리딘-4-일리덴)아세테이트 하이드로클로라이드(2.7 g, 15.98 mmol, 1 eq.)의 용액에 DIPEA(6.1 g, 47.94 mmol, 3.0 eq.)와 5-브로모-2-클로로피리미딘(3 g, 15.98 mmol, 1 eq.)을 첨가하였다. 수득한 혼합물은 1시간동안 80℃에서 교반하였다. 혼합물은 실온으로 냉각시키고 물(25 mL)로 희석하였다. 혼합물은 EtOAc (2 x 20 mL)로 추출하였다. 유기층을 배합하고, Na2SO4상에서 건조시키고 감압하에 농축시켰다. 잔사를 컬럼 크로마토그래피(석유 에테르/EtOAc= 96/4; V/V)로 정제하여 담황색 오일로서 메틸 (E)-2-(1-(5-브로모피리미딘-2-일)-3-메틸피페리딘-4-일리덴)아세테이트(3.5 g, 68.8%)를 수득하였다.
LCMS: (ESI) (M+H)+ = 326.0.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 8.49 (s, 2H), 5.74 (d, J = 1.4 Hz, 1H), 4.20 - 4.11 (m, 1H), 4.12 - 4.02 (m, 1H), 3.65 (s, 3H), 3.60 - 3.51 (m, 1H), 3.34 - 3.25 (m, 3H), 2.67 - 2.59 (m, 1H), 1.06 (d, J = 6.8 Hz, 3H).
단계 D: 메틸 2-(1-(5-브로모피리미딘-2-일)-3-메틸-1,2,3,6-테트라하이드로피리딘-4-일)아세테이트(중간체 P)의 합성
THF (18 mL) 중의 메틸 (E)-2-(1-(5-브로모피리미딘-2-일)-3-메틸피페리딘-4-일리덴)아세테이트 (1.78 g, 5.48 mmol, 1 eq.)의 용액에 DBU (4.2 g, 27.3 mmol, 5.0 eq.)를 첨가하였다. 수득한 혼합물은 3시간동안 70℃에서 교반하였다. 혼합물을 감압하에 농축시켰다. 잔사를 컬럼 크로마토그래피(석유 에테르/EtOAc= 96/4; V/V)로 정제하여 무색 오일로서 메틸 2-(1-(5-브로모피리미딘-2-일)-3-메틸-1,2,3,6-테트라하이드로피리딘-4-일)아세테이트(1 g, 56.8%)를 수득하였다.
LCMS: (ESI) (M+H)+ = 326.0.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 8.46 (d, J = 1.3 Hz, 2H), 5.69 - 5.51 (m, 1H), 4.35 - 4.12 (m, 1H), 4.04 - 3.96 (m, 1H), 3.96 - 3.87 (m, 1H), 3.62 (s, 3H), 3.61 - 3.56 (m, 1H), 3.20 - 3.09 (m, 2H), 2.45 - 2.31 (m, 1H), 0.96 (d, J = 7.0 Hz, 3H).
27.2) 화합물 27의 합성
단계 A: 메틸 2-(1-(5-(2-플루오로페닐)피리미딘-2-일)-3-메틸-1,2,3,6-테트라하이드로피리딘-4-일)아세테이트의 합성
디옥산(7 mL)과 H2O(1 mL)의 혼합 용매 중의 메틸 2-(1-(5-브로모피리미딘-2-일)-3-메틸-1,2,3,6-테트라하이드로피리딘-4-일)아세테이트(450 mg, 1.39 mmol, 1 eq. )의 용액에 (2-플루오로페닐)보론산(388 mg, 2.77 mmol, 2.0 eq), Pd(dppf)Cl2(102 mg, 0.19 mmol, 0.14 eq) 및 Na2CO3(294 mg, 2.77 mmol, 2.0 eq)를 첨가하였다.수득한 혼합물은 N2 대기하에 16시간동안 90 ℃에서 교반하였다. 반응 혼합물은 EtOAc (3 x 20 mL)로 추출하고 물 (20 mL)로 세척하였다. 유기층을 배합하고 염수 (10 mL)로 세척하고, Na2SO4상에서 건조시키고, 진공 농축시켰다. 잔사를 실리카 겔 크로마토그래피(석유 에테르/EtOAc= 97/3; V/V)로 정제하여 황색 오일로서 메틸 2-(1-(5-(2-플루오로페닐)피리미딘 -2-일)-3-메틸-1,2,3,6-테트라하이드로피리딘-4-일)아세테이트(590 mg, 수율 100%)를 수득하였다.
LCMS: (ESI) (M+H)+ = 342.2.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 8.60 (s, 2H), 7.62 - 7.54 (m, 1H), 7.47 - 7.38 (m, 1H), 7.37 - 7.27 (m, 2H), 5.66 (d, J = 3.4 Hz, 1H), 4.42 - 4.28 (m, 1H), 4.10 - 3.98 (m, 2H), 3.72 - 3.65 (m, 1H), 3.64 (s, 3H), 3.22 - 3.14 (m, 2H), 2.46 - 2.35 (m, 1H), 1.00 (d, J = 6.9 Hz, 3H).
단계 B: 2-(1-(5-(2-플루오로페닐)피리미딘-2-일)-3-메틸-1,2,3,6-테트라하이드로피리딘-4-일)아세트산의 합성
THF(6 mL) 및 물(2 mL)의 혼합 용매 중의 메틸 2-(1-(5-(2-플루오로페닐)피리미딘-2-일)-3-메틸-1,2,3,6-테트라하이드로피리딘-4-일)아세테이트 (590 mg, 1.74 mmol, 1.0 eq.)의 용액에 LiOH (125mg, 5.2 mmol, 3.0 eq.)를 첨가하였다. 상기 혼합물을 40℃에서 1시간 동안 교반하였다. 혼합물은 물(25 mL)로 희석하고 EtOAc (3 x 10 mL)로 추출하였다. 물 층은 1M HCl을 사용하여 pH =　6으로 조정하였다. 혼합물을 EtOAc(3 x 15 mL)로 추출하고, Na2SO4상에서 건조시키고, 진공하에 농축하여 황색 오일로서 2-(1-(5-(2-플루오로페닐)피리미딘-2-일)-3-메틸-1,2,3,6-테트라하이드로피리딘-4-일)아세트산(470 mg, 수율 84.3%)을 수득하였다.
LCMS: (ESI) (M+H)+ = 328.2.
단계 C: 2-(1-(5-(2-(플루오로페닐)피리미딘-2-일)-3-메틸-1,2,3,6-테트라하이드로피리딘-4-일)-N-((S)-2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)아세트아미드의 합성
DMF(8 mL) 중의 2-(1-(5-(2-플루오로페닐)피리미딘-2-일)-3-메틸-1,2,3,6-테트라하이드로피리딘-4-일)아세트산(470 mg, 1.44 mmol, 1 eq.)의 용액에 DIPEA (372 mg, 2.88 mmol, 2.0 eq.) 및 HATU (820 mg, 2.16 mmol, 1.5 eq.)을 첨가하고, 이어서 (S)-5-((1-(아미노옥시)프로판-2-일)아미노)-4-(트리플루오로메틸)-2-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)피리다진-3(2H)-온 (570 mg, 1.51 mmol, 1.05 eq.)을 적가하였다. 수득한 혼합물은 2시간동안 25 ℃에서 교반하였다. 수득한 혼합물은 물(30 mL)로 켄칭시키고 EtOAc (3 x 20 mL)로 추출하였다. 유기층을 배합하고 염수 (10 mL)로 세척하고, Na2SO4상에서 건조시키고, 진공 농축시켰다. 잔사를 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(석유 에테르/EtOAc= 3/7, V/V)로 정제하여 황색 고체로서 2-(1-(5-(2-플루오로페닐)피리미딘-2-일)-3-메틸-1,2,3,6-테트라하이드로피리딘-4-일)-N-((S)-2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)아세트아미드(540 mg, 수율 54.3%)를 수득하였다.
LCMS: (ESI) (M+H)+ = 692.4.
단계 D: 2-(1-(5-(2-(플루오로페닐)피리미딘-2-일)-3-메틸-1,2,3,6-테트라하이드로피리딘-4-일)-N-((S)-2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)아세트아미드의 합성
DCM(5 mL) 중의 2-(1-(5-(2-플루오로페닐)피리미딘-2-일)-3-메틸-1,2,3,6-테트라하이드로피리딘-4-일)-N-((S)-2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)아세트아미드(540 mg, 0.78 mmol, 1.0 eq.)의 용액에 TFA(0.5 mL)를 첨가하였다. 수득한 혼합물은 0.5시간동안 25 ℃에서 교반하였다. 혼합물을 포화 NaHCO3 수용액(5mL)으로 중화시키고 DCM(3 x 10mL)으로 추출하였다. 유기층을 배합하고 Na2SO4상에서 건조시키고, 진공 농축시켰다. 잔사는 MeOH (5 mL)에 재용해시키고, K2CO3 (337 mg, 2.44 mmol, 3.0 eq.)를 첨가하였다. 혼합물은 추가로 1시간동안 25 ℃에서 교반하였다. 반응 혼합물을 여과하고 여과물을 prep-HPLC로 정제하여 백색 고체로서 2-(1-(5-(2-플루오로페닐)피리미딘-2-일)-3-메틸-1,2,3,6-테트라하이드로피리딘-4-일)-N-((S)-2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)아세트아미드(46.9 mg, 수율 10.7%)을 수득하였다.
LCMS: (ESI) (M+H)+ = 562.2.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 12.48 (s, 1H), 11.25 (s, 1H), 8.58 (d, J = 1.4 Hz, 2H), 7.90 (s, 1H), 7.60 - 7.53 (m, 1H), 7.46 - 7.35 (m, 1H), 7.35 - 7.25 (m, 2H), 6.68 - 6.54 (m, 1H), 5.60 (s, 1H), 4.36 (d, J = 18.2 Hz, 1H), 4.20 (s, 1H), 4.08 (dd, J = 12.9, 4.1 Hz, 1H), 4.03 - 3.78 (m, 3H), 3.57 (dd, J = 12.6, 3.9 Hz, 1H), 2.86 - 2.70 (m, 2H), 2.35 (d, J = 17.7 Hz, 1H), 1.19 (d, J = 6.5 Hz, 3H), 0.99 (d, 3H).
실시예 28
(S)-2-(1-(5-(2-(플루오로페닐)피리미딘-2-일)-5-메틸-1,2,3,6-테트라하이드로피리딘-4-일)-N-(2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)아세트아미드
단계 A: (S)-2-(1-(5-(2-(플루오로페닐)피리미딘-2-일)-5-메틸-1,2,3,6-테트라하이드로피리딘-4-일)-N-(2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)아세트아미드의 합성
DCM(5 mL) 중의 2-(1-(5-(2-플루오로페닐)피리미딘-2-일)-3-메틸-1,2,3,6-테트라하이드로피리딘-4-일)-N-((S)-2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)아세트아미드(540 mg, 0.78 mmol, 1.0 eq.)의 용액에 TFA(0.5 mL)를 첨가하였다. 수득한 혼합물은 0.5시간동안 25 ℃에서 교반하였다. 혼합물을 포화 NaHCO3 수용액(5mL)으로 중화시키고 DCM(3 x 10mL)으로 추출하였다. 유기층을 배합하고 Na2SO4상에서 건조시키고, 진공 농축시켰다. 잔사는 MeOH (5 mL)에 재용해시키고, K2CO3 (337 mg, 2.44 mmol, 3.0 eq.)를 첨가하였다. 혼합물은 추가로 1시간동안 25 ℃에서 교반하였다. 반응 혼합물을 여과하고 여과물을 prep-HPLC로 정제하여 백색 고체로서 (S)-2-(1-(5-(2-플루오로페닐)피리미딘-2-일)-5-메틸-1,2,3,6-테트라하이드로피리딘-4-일)-N-(2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)아세트아미드(33 mg, 수율 15.1%)를 수득하였다.
LCMS: (ESI) (M+H)+ = 562.2.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 12.49 (s, 1H), 11.19 (s, 1H), 8.58 (d, J = 1.5 Hz, 2H), 7.89 (s, 1H), 7.61 - 7.52 (m, 1H), 7.44 - 7.36 (m, 1H), 7.35 - 7.26 (m, 2H), 6.66 - 6.54 (m, 1H), 4.20 (s, 1H), 4.10 (s, 2H), 3.94 - 3.78 (m, 4H), 2.82 (s, 2H), 2.15 (s, 2H), 1.71 (s, 3H), 1.19 (d, J = 6.5 Hz, 3H).
실시예 29
(S)-2-(1-(5-사이클로프로필피리미딘-2-일)-1,2,3,6-테트라하이드로피리딘-4-일)-N-(2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)아세트아미드
단계 A: 메틸 2-(1-(5-브로모피리미딘-2-일)피페리딘-4-일리덴)아세테이트의 합성
NMP(10 mL) 중의 메틸 2-(피페리딘-4-일리덴)아세테이트 (707 mg, 4.559 mmol, 1.1 eq.)의 용액에 DIPEA (1.6 g, 12.53 mmol, 3.0 eq.) 및 5-브로모-2-클로로피리미딘 (800 mg, 4.145 mmol, 1.0 eq.)를 첨가하였다. 수득한 혼합물은 2시간동안 70℃에서 교반하였다. 혼합물을 감압하에 농축시켰다. 잔사를 컬럼 크로마토그래피(석유 에테르/EtOAc= 10/1, V/V)로 정제하여 무색 오일로서 메틸 2-(1-(5-브로모피리미딘-2-일)피페리딘-4-일리덴)아세테이트(870 mg, 67 %)를 수득하였다.
LCMS: (ESI) (M+H)+ = 312.0.
1H NMR: (400 MHz, DMSO) δ 8.48 (s, 2H), 5.82 (s, 1H), 3.81 (dd, J = 11.6, 5.6 Hz, 4H), 3.62 (s, 3H), 2.91 (t, J = 5.5 Hz, 2H), 2.63 (t, J = 5.5 Hz, 2H).
단계 B: 메틸 2-(1-(5-브로모피리미딘-2-일)-1,2,3,6-테트라하이드로피리딘 -4-일)아세테이트의 합성
THF(10 mL) 중의 메틸 2-(1-(5-브로모피리미딘-2-일)피페리딘-4-일리덴)아세테이트 (870 mg, 2.797 mmol, 1 eq.)의 용액에 DBU (2.12 g, 13.98 mmol, 5.0 eq.)를 첨가하였다. 수득한 혼합물은 3시간동안 70℃에서 교반하였다. 혼합물을 감압하에 농축시켰다. 잔사를 컬럼 크로마토그래피(석유 에테르/EtOAc= 10/1, V/V)로 정제하여 백색 고체로서 메틸 2-(1-(5-브로모피리미딘-2-일)-1,2,3,6-테트라하이드로피리딘-4-일)아세테이트(570 mg, 65 %)를 수득하였다.
LCMS: (ESI)　(M+H)+ = 312.0.
1H NMR: (400 MHz, DMSO) δ 8.46 (s, 2H), 5.68 - 5.64 (m, 1H), 4.14 - 4.07 (m, 2H), 3.83 (t, J = 5.8 Hz, 2H), 3.60 (s, 3H), 3.11 (s, 2H), 2.14 (d, J = 1.6 Hz, 2H).
단계 C: 메틸 2-(1-(5-사이클로프로필피리미딘-2-일)-1,2,3,6-테트라하이드로피리딘 -4-일)아세테이트의 합성
디옥산 (6 mL) 중의 메틸 2-(1-(5-브로모피리미딘-2-일)-1,2,3,6-테트라하이드로피리딘-4-일)아세테이트 (530 mg, 1.704 mmol, 1 eq.)의 용액에 사이클로프로필보론산 (293 mg, 3.408 mmol, 2.0 eq.), Na2CO3 (542 mg, 5.112 mmol, 3.0 eq.), 물 (1ml) 및 Pd(dppf)Cl2 (124 mg, 0.170 mmol, 0.1 eq.)을 N2 대기하에 첨가하였다. 수득한 혼합물은 N2 대기하에 3시간동안 90 ℃에서 교반하였다. 혼합물은 진공하에 농축시켰다. 잔사를 컬럼 크로마토그래피(석유 에테르/EtOAc= 10/1, V/V)로 정제하여 황색 오일로서 메틸 2-(1-(5-사이클로프로필피리미딘-2-일)-1,2,3,6-테트라하이드로피리딘-4-일)아세테이트(260 mg, 수율 55%)를 수득하였다.
LCMS:　(ESI)　(M+H)+ = 274.2.
단계 D: 2-(1-(5-사이클로프로필피리미딘-2-일)-1,2,3,6-테트라하이드로피리딘-4-일)아세트산의 합성
THF(3 mL) 및 물(2 mL)의 혼합 용매 중의 메틸 2-(1-(5-사이클로프로필피리미딘-2-일)-1,2,3,6-테트라하이드로피리딘-4-일)아세테이트 (260 mg, 0.952 mmol, 1.0 eq.)의 용액에 LiOH (45 mg, 1.904 mmol, 2.0 eq.)를 첨가하였다. 혼합물은 1시간동안 25 ℃에서 교반하였다. 혼합물은 물(5 mL)로 희석하고 EtOAc (2 x 10 mL)로 추출하였다. 물 층은 1M HCl을 사용하여 pH 6으로 조정하였다. 혼합물을 EtOAc(3 x 15 mL)로 추출하고, Na2SO4상에서 건조시키고, 진공하에 농축하여 백색 고체로서 2-(1-(5-사이클로프로필피리미딘-2-일)-1,2,3,6-테트라하이드로피리딘-4-일)아세트산(230 mg, 수율 93%)을 수득하였다.
LCMS: (ESI)　(M+H)+ = 260.2.
단계 E: (S)-2-(1-(5-사이클로프로필피리미딘-2-일)-1,2,3,6-테트라하이드로피리딘-4-일)-N-(2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)아세트아미드의 합성
THF(4 mL) 중의 2-(1-(5-사이클로프로필피리미딘-2-일)-1,2,3,6-테트라하이드로피리딘-4-일)아세트산(240 mg, 0.926 mmol, 1.0 eq.)의 용액에 DIPEA (358 mg, 2.779 mmol, 3.0 eq.) 및 HATU (422 mg, 1.111 mmol, 1.2 eq.)을 첨가하고, 이어서 (S)-5-((1-(아미노옥시)프로판-2-일)아미노)-4-(트리플루오로메틸)-2-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)피리다진-3(2H)-온 (389 mg, 1.019 mmol, 1.1 eq.)을 적가하였다. 수득한 혼합물은 2시간동안 25 ℃에서 교반하였다. 혼합물은 진공하에 농축시켰다. 잔사를 실리카 겔 크로마토그래피(석유 에테르/EtOAc= 1/3, V/V)로 정제하여 백색 고체로서 (S)-2-(1-(5-사이클로프로필피리미딘-2-일)-1,2,3,6-테트라하이드로피리딘-4-일)-N-(2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)아세트아미드(300 mg, 수율 52%)을 수득하였다.
LCMS: (ESI)　(M+H)+ = 623.9.
단계 F: (S)-2-(1-(5-사이클로프로필피리미딘-2-일)-1,2,3,6-테트라하이드로피리딘-4-일)-N-(2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)아세트아미드의 합성
DCM(3 mL) 중의 (S)-2-(1-(5-사이클로프로필피리미딘-2-일)-1,2,3,6-테트라하이드로피리딘-4-일)-N-(2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)아세트아미드(300 mg, 0.481 mmol, 1.0 eq.)의 용액에 TFA(0.5 mL)를 첨가하였다. 수득한 혼합물은 0.5시간동안 25 ℃에서 교반하였다. 혼합물을 포화 NaHCO3 수용액(5mL)으로 중화시키고 DCM(3 x 10mL)으로 추출하였다. 유기층을 배합하고 Na2SO4상에서 건조시키고, 진공 농축시켰다. 잔사는 MeOH (5 mL)에 재용해시키고, K2CO3 (166 mg, 1.203 mmol, 2.5 eq.)를 첨가하였다. 혼합물은 추가로 1시간동안 25 ℃에서 교반하였다. 혼합물을 여과하고 여과물을 prep-HPLC로 정제하여 백색 고체로서 (S)-2-(1-(5-사이클로프로필피리미딘-2-일)-1,2,3,6-테트라하이드로피리딘-4-일)-N-(2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)아세트아미드(100 mg, 수율 42%)을 수득하였다.
LCMS: (ESI)　(M+H)+ = 493.9.
1H NMR: (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 12.46 (s, 1H), 11.17 (s, 1H), 8.16 (s, 2H), 7.89 (s, 1H), 6.60 (s, 1H), 5.60 (s, 1H), 4.20 - 4.18 (m, 1H), 4.08 (s, 2H), 3.93 - 3.82 (m, 2H), 3.79 (t, J = 5.7 Hz, 2H), 2.72 (s, 2H), 2.08 (s, 2H), 1.81 - 1.67 (m, 1H), 1.18 (d, J = 6.6 Hz, 3H), 0.89 - 0.82 (m, 2H), 0.64 - 0.58 (m, 2H).
실시예 30
2-(1-(5-사이클로프로필피리미딘-2-일)-3-메틸-1,2,3,6-테트라하이드로피리딘-4-일)-N-((S)-2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)아세트아미드
단계 A: 메틸 2-(1-(5-사이클로프로필피리미딘-2-일)-3-메틸-1,2,3,6-테트라하이드로피리딘 -4-일)아세테이트의 합성
디옥산(7 mL)과 H2O(1 mL)의 혼합 용매 중의 메틸 2-(1-(5-브로모피리미딘-2-일)-3-메틸-1,2,3,6-테트라하이드로피리딘-4-일)아세테이트(450 mg, 1.39 mmol, 1 eq. )의 용액에 사이클로프로필보론산(239 mg, 2.77 mmol, 2.0 eq), Pd(dppf)Cl2(102 mg, 0.19 mmol, 0.14 eq) 및 Na2CO3(294 mg, 2.77 mmol, 2.0 eq)를 첨가하였다. 수득한 혼합물은 16시간동안 90℃에서 교반하였다. 반응 혼합물은 EtOAc (3 x 20 mL)로 추출하고 물 (20 mL)로 세척하였다. 유기층을 배합하고 염수 (10 mL)로 세척하고, Na2SO4상에서 건조시키고, 진공 농축시켰다. 잔사를 실리카 겔 크로마토그래피(석유 에테르/EtOAc= 9/1, V/V)로 정제하여 무색 오일로서 메틸 2-(1-(5-사이클로프로필피리미딘-2-일)-3-메틸-1,2,3,6-테트라하이드로피리딘-4-일)아세테이트(170 mg, 수율 42.8%)를 수득하였다.
LCMS: (ESI) (M+H)+ = 288.2.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 8.18 (s, 2H), 5.63 (s, 1H), 4.27 - 4.16 (m, 1H), 3.99 - 3.91 (m, 1H), 3.91 - 3.85 (m, 1H), 3.62 (s, 3H), 3.61 - 3.57 (m, 1H), 3.14 - 3.11 (m, 2H), 2.41 - 2.29 (m, 1H), 1.81 - 1.73 (m, 1H), 0.97 (d, J = 7.0 Hz, 3H), 0.91 - 0.84 (m, 2H), 0.67 - 0.61 (m, 2H).
단계 B: 2-(1-(5-사이클로프로필피리미딘-2-일)-3-메틸-1,2,3,6-테트라하이드로피리딘-4-일)아세트산의 합성
THF(4 mL) 및 물(2 mL)의 혼합 용매 중의 메틸 2-(1-(5-사이클로프로필피리미딘-2-일)-3-메틸-1,2,3,6-테트라하이드로피리딘-4-일)아세테이트 (170 mg, 0.593 mmol, 1.0 eq.)의 용액에 LiOH (43 mg, 1.78 mmol, 3.0 eq.)를 첨가하였다. 상기 혼합물을 40℃에서 1시간 동안 교반하였다. 혼합물은 물(25 mL)로 희석하고 EtOAc (3 x 10 mL)로 추출하였다. 물 층은 1M HCl을 사용하여 pH 6으로 조정하였다. 혼합물을 EtOAc(3 x 15 mL)로 추출하고, Na2SO4상에서 건조시키고, 진공하에 농축하여 무색 오일로서 2-(1-(5-사이클로프로필피리미딘-2-일)-3-메틸-1,2,3,6-테트라하이드로피리딘-4-일)아세트산(140 mg, 수율 86.9%)을 수득하였다.
LCMS: (ESI) (M+H)+ = 274.2.
단계 C: 2-(1-(5-사이클로프로필피리미딘-2-일)-3-메틸-1,2,3,6-테트라하이드로피리딘-4-일)-N-((S)-2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)아세트아미드의 합성
DMF(5 mL) 중의 2-(1-(5-사이클로프로필피리미딘-2-일)-1,2,3,6-테트라하이드로피리딘-4-일)아세트산(140 mg, 0.52 mmol, 1 eq.)의 용액에 DIPEA (135 mg, 1.04 mmol, 2.0 eq.) 및 HATU (296 mg, 0.78 mmol, 1.5 eq.)을 첨가하고, 이어서 (S)-5-((1-(아미노옥시)프로판-2-일)아미노)-4-(트리플루오로메틸)-2-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)피리다진-3(2H)-온 (140 mg, 0.52 mmol, 1 eq.)을 적가하였다.수득한 혼합물은 2시간동안 25 ℃에서 교반하였다. 반응 혼합물은 물(30 mL)로 켄칭시키고 EtOAc (3 x 20 mL)로 추출하였다. 유기층을 배합하고 염수 (10 mL)로 세척하고, Na2SO4상에서 건조시키고, 진공 농축시켰다. 잔사를 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(석유 에테르/EtOAc= 35/65, V/V)로 정제하여 백색 고체로서 2-(1-(5-사이클로프로필피리미딘-2-일)-3-메틸-1,2,3,6-테트라하이드로피리딘-4-일)-N-((S)-2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)아세트아미드(340 mg, 수율 100%)를 수득하였다.
LCMS: (ESI) (M+H)+ = 638.4.
단계 D: 2-(1-(5-사이클로프로필피리미딘-2-일)-3-메틸-1,2,3,6-테트라하이드로피리딘-4-일)-N-((S)-2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)아세트아미드의 합성
DCM(3 mL) 중의 2-(1-(5-사이클로프로필피리미딘-2-일)-3-메틸-1,2,3,6-테트라하이드로피리딘-4-일)-N-((S)-2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)아세트아미드(340 mg, 0.54 mmol, 1.0 eq.)의 용액에 TFA(0.5 mL)를 첨가하였다. 수득한 혼합물은 0.5시간동안 25 ℃에서 교반하였다. 혼합물을 포화 NaHCO3 수용액(5mL)으로 중화시키고 DCM(3 x 10mL)으로 추출하였다. 유기층을 배합하고 Na2SO4상에서 건조시키고, 진공 농축시켰다. 잔사는 MeOH (3 mL)에 재용해시키고, K2CO3 (186 mg, 1.35 mmol, 3.0 eq.)를 첨가하였다. 혼합물은 추가로 1시간동안 25 ℃에서 교반하였다. 반응 혼합물을 여과하고 여과물을 prep-HPLC로 정제하여 백색 고체로서 2-(1-(5-사이클로프로필피리미딘-2-일)-3-메틸-1,2,3,6-테트라하이드로피리딘-4-일)-N-((S)-2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)아세트아미드(15.7 mg, 수율 5.7%)을 수득하였다.
LCMS: (ESI) (M+H)+ = 508.2.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 12.46 (s, 1H), 11.22 (s, 1H), 8.16 (s, 2H), 7.89 (s, 1H), 6.65 - 6.53 (m, 1H), 5.57 (s, 1H), 4.20 - 4.25 (m, 2H), 3.99 - 3.76 (m, 4H), 3.48 (dd, J = 12.7, 4.0 Hz, 1H), 2.83 - 2.68 (m, 2H), 2.30 (s, 1H), 1.81 - 1.68 (m, 1H), 1.19 (d, J = 6.5 Hz, 3H), 0.95 (d, J = 6.9 Hz, 3H), 0.91 - 0.79 (m, 2H), 0.68 - 0.56 (m, 2H).
실시예 31
(S)-2-(1-(5-사이클로프로필피리미딘-2-일)-5-메틸-1,2,3,6-테트라하이드로피리딘-4-일)-N-(2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)아세트아미드
단계 A: (S)-2-(1-(5-(2-사이클로프로필피리미딘-2-일)-5-메틸-1,2,3,6-테트라하이드로피리딘-4-일)-N-(2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)아세트아미드의 합성
DCM(3 mL) 중의 2-(1-(5-사이클로프로필피리미딘-2-일)-3-메틸-1,2,3,6-테트라하이드로피리딘-4-일)-N-((S)-2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)아세트아미드(340 mg, 0.54 mmol, 1.0 eq.)의 용액에 TFA(0.5 mL)를 첨가하였다. 수득한 혼합물은 0.5시간동안 25 ℃에서 교반하였다. 혼합물을 포화 NaHCO3 수용액(5mL)으로 중화시키고 DCM(3 x 10mL)으로 추출하였다. 유기층을 배합하고 Na2SO4상에서 건조시키고, 진공 농축시켰다. 잔사는 MeOH (3 mL)에 재용해시키고, K2CO3 (186 mg, 1.35 mmol, 3.0 eq.)를 첨가하였다. 혼합물은 추가로 1시간동안 25 ℃에서 교반하였다. 반응 혼합물을 여과하고 여과물을 prep-HPLC로 정제하여 백색 고체로서 (S)-2-(1-(5-사이클로프로필피리미딘-2-일)-5-메틸-1,2,3,6-테트라하이드로피리딘-4-일)-N-(2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)아세트아미드(17 mg, 수율 12.6%)을 수득하였다.
LCMS: (ESI) (M+H)+ = 508.2.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 12.45 (s, 1H), 11.16 (s, 1H), 8.16 (s, 2H), 7.89 (s, 1H), 6.67 - 6.48 (m, 1H), 4.20 - 4.16 (m, 1H), 3.97 (s, 2H), 3.92 - 3.86 (m, 1H), 3.85 - 3.80 (m, 1H), 3.76 (t, J = 5.7 Hz, 2H), 2.79 (s, 2H), 2.08 (d, J = 5.5 Hz, 2H), 1.81 - 1.70 (m, 1H), 1.67 (s, 3H), 1.18 (d, J = 6.6 Hz, 3H), 0.89 - 0.82 (m, 2H), 0.64 - 0.57 (m, 2H).
실시예 32
(S)-N-(2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)-2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)피페리딘-4-일)아세트아미드
32.1) 중간체 Q의 합성
단계 A: 4,5-디브로모-2-(4-메톡시벤질)피리다진-3(2H)-온의 합성
DMF(100 mL) 중의 4,5-디브로모피리다진-3(2H)-온(10.16 g, 40.00 mmol, 1.0 eq.)의 혼합물에 N2 대기하에 빙수 욕조에서 0℃에서 NaH(60%, 2.40 g, 60.00 mmol, 1.5 eq.)를 첨가하였다. 혼합물은 0.5시간동안 0 ℃에서 교반하였다. 4-메톡시벤질클로라이드(6.26 g, 40.00 mmol, 1.0 eq.)를 혼합물에 첨가하였다. 혼합물은 추가로 3시간동안 10 ℃에서 교반하였다. 혼합물은 냉수(500 mL)로 켄칭시키고 EtOAc (3 x 400 mL)로 추출하였다. 유기층을 배합하고 염수 (2 x 400 mL)로 세척하고, Na2SO4상에서 건조시키고, 진공 농축시켰다. 조 생성물 고체를 MeOH (2 x 20 mL)로 세척하여 담갈색 고체로서 4,5-디브로모-2-(4-메톡시벤질)피리다진-3(2H)-온(11.27 g, 75.3%)을 수득하였다.
LCMS: (ESI)　(M+H)+ = 375.0.
1H NMR:　(400 MHz, DMSO-d 6 )　δ　8.18 (s, 1H), 7.28 (d,　J　= 8.4 Hz, 2H), 6.91 (d,　J　= 8.4 Hz, 2H), 5.20 (s, 2H), 3.74 (s, 3H).
단계 B: 4-브로모-5-메톡시-2-(4-메톡시벤질)피리다진-3(2H)-온의 합성
MeOH (52 mL) 중의 4,5-디브로모-2-(4-메톡시벤질)피리다진-3(2H)-온(6.18 g, 16.52 mmol, 1.00 eq.)의 혼합물에 KOH(2.78 g, 49.57 mmol, 3.0 eq.)을 첨가하였다. 혼합물은 3시간동안 10℃에서 교반하였다. 혼합물은 농축하고 혼합물을 물(80 mL)로 희석하였다. 혼합물은 DCM (3 x 100 mL)으로 추출하였다. 유기층을 배합하고 염수 (80 mL)로 세척하고, Na2SO4상에서 건조시키고, 진공 농축시켰다. 조 생성물 고체를 MeOH (10 mL)로 세척하여 황색 고체로서 4-브로모-5-메톡시-2-(4-메톡시벤질)피리다진-3(2H)-온(4.44 g, 82.6%)을 수득하였다.
LCMS:　(ESI)　(M+H)+ = 325.0.
1H NMR:　(400　MHz,　DMSO-d 6 )　δ　8.15 (s, 1H), 7.25 (d,　J　= 8.4 Hz, 2H), 6.89 (d,　J　= 8.8 Hz, 2H), 5.21 (s, 2H), 4.06 (s, 3H), 3.72 (s, 3H).
단계 C: 5-메톡시-2-(4-메톡시벤질)-4-(트리플루오로메틸)피리다진-3(2H)-온의 합성
DMF (42 mL) 중의 4-브로모-5-메톡시-2-(4-메톡시벤질)피리다진-3(2H)-온(8.08 g, 24.85 mmol, 1.0 eq.)과 CuI(2.37 g, 12.43 mmol, 0. 5 eq.)의 혼합물에 N2 대기하에 메틸 2,2-디플루오로-2-(플루오로설포닐)아세테이트(19.10 g, 99.40 mmol, 4.0 eq.)를 적가하였다. 혼합물은 3시간동안 100℃에서 교반하였다. 혼합물은 실온으로 냉각시키고 물(150 mL)로 켄칭하였다. 혼합물은 DCM (3 x 150 mL)으로 추출하였다. 유기층을 배합하고 Na2SO4상에서 건조시키고, 진공 농축시켰다. 잔사를 실리카 겔 크로마토그래피(EtOAc/석유 에테르= 2/3; V/V)로 정제하여 담황색 고체로서 5-메톡시-2-(4-메톡시벤질)-4-(트리플루오로메틸)피리다진-3(2H)-온 (5.30 g, 67.9%)을 수득하였다.
LCMS:　(ESI)　(M+H)+ = 314.8.
1H NMR:　(400　MHz,　DMSO-d 6 )　δ　8.34 (s, 1H), 7.28 (d,　J　= 8.4 Hz, 2H), 6.92 (d,　J　= 8.8 Hz, 2H), 5.19 (s, 2H), 4.11 (s, 3H), 3.75 (s, 3H).
단계 D: 5-하이드록시-2-(4-메톡시벤질)-4-(트리플루오로메틸)피리다진-3(2H)-온의 합성
DMF (16 mL) 중의 5-메톡시-2-(4-메톡시벤질)-4-(트리플루오로메틸)피리다진-3(2H)-온(3.14 g, 10.00 mmol, 1.0 eq.)의 용액에 요오도트리메틸실란(2.60 g, 13.00 mmol, 1.3 eq.)을 첨가하였다. 혼합물은 20시간 동안 90 ℃에서 교반하였다. 혼합물을 실온으로 냉각시키고 물(70 mL)로 켄칭시키고 DCM(2 x 80mL)으로 추출하였다. 유기층을 배합하고 Na2SO4상에서 건조시키고, 진공 농축시켰다. 잔사를 실리카 겔 크로마토그래피(EtOAc/석유 에테르= 3/2; V/V)로 정제하여 담갈색 고체로서 5-하이드록시-2-(4-메톡시벤질)-4-(트리플루오로메틸)피리다진-3(2H)-온 (2.82 g, 93.9%)을 수득하였다.
LCMS:　(ESI)　(M+H)+ = 300.8.
1H NMR:　(400 MHz, DMSO-d 6 )　δ　7.79 (s, 1H), 7.24 (d,　J　= 8.4 Hz, 2H), 6.90 (d,　J　= 8.4 Hz, 2H), 5.11 (s, 2H), 3.73 (s, 3H).
단계 E: 5-클로로-2-(4-메톡시벤질)-4-(트리플루오로메틸)피리다진-3(2H)-온의 합성
DMF (13 mL) 중의 5-하이드록시-2-(4-메톡시벤질)-4-(트리플루오로메틸)피리다진-3(2H)-온(2.49 g, 8.29 mmol, 1.0 eq.)의 용액에 옥살릴 클로라이드(2.11 g, 16.59 mmol, 2.0 eq.)을 빙수 욕조에서 0℃에서 첨가하였다. 혼합물은 8시간동안 10℃에서 교반하였다. 혼합물은 물(80 mL)로 켄칭시키고 EtOAc (2 x 80 mL)로 추출하였다. 유기층을 배합하고 염수 (2 x 80 mL)로 세척하고, Na2SO4상에서 건조시키고, 진공 농축시켰다. 잔사를 실리카 겔 크로마토그래피(EtOAc/석유 에테르= 1/5; V/V)로 정제하여 담황색 고체로서 5-클로로-2-(4-메톡시벤질)-4-(트리플루오로메틸)피리다진-3(2H)-온 (2.51 g, 95.0%)을 수득하였다.
LCMS: (ESI) (M+Na)+ = 341.0.
1H NMR: (400 MHz, DMSO-d 6 )　δ　8.23 (s, 1H), 7.29 (d,　J　= 8.4 Hz, 2H), 6.91 (d,　J　= 8.4 Hz, 2H), 5.20 (s, 2H), 3.73 (s, 3H).
단계 F: 5-클로로-4-(트리플루오로메틸)피리다진-3(2H)-온(중간체 Q)의 합성
TFA (32 mL) 중의 5-클로로-2-(4-메톡시벤질)-4-(트리플루오로메틸)피리다진-3(2H)-온(2.00 g, 6.28 mmol, 1.0 eq.)의 용액에 H2SO4(5.3 mL)을 첨가하였다. 혼합물은 3시간동안 120℃에서 교반하였다. 혼합물은 실온으로 냉각시키고 물(100 mL)로 켄칭하였다. 혼합물을 포화 NaHCO3 수용액으로 pH 7로 중화시키고 EtOAc(3 x 70mL)로 추출하였다. 유기층을 배합하고, Na2SO4상에서 건조시키고, 진공 농축시켜 백색 고체로서 5-클로로-4-(트리플루오로메틸)피리다진-3(2H)-온(1.05 g, 84.3%)을 수득하였다.
LCMS: (ESI) (M+H)+ = 199.0.
32.2) 중간체 R의 합성
단계 A: (S)-3급-부틸(1-((1,3-디옥소이소인돌린-2-일)옥시)프로판-2-일) 카바메이트의 합성
THF(100mL) 중의 2-하이드록시이소인돌-1,3-디온(4.90 g, 30.04 mmol, 1.0 eq.), N-Boc-L-알라니놀(5.32 g, 30.34 mmol, 1.01 eq.) 및 PPh3(8. 82 g, 33.64 mmol, 1.12 eq.)의 혼합물에 0℃에서 N2 대기하에 DIAD(6.68 g, 33.04 mmol, 1.1 eq.)를 첨가하였다. 반응 혼합물은 3시간 동안 15℃에서 교반시켰다. 반응 혼합물은 물(50 mL)로 켄칭시키고 EtOAc (3 x 100 mL)로 추출하였다. 유기층을 배합하고 Na2SO4상에서 건조시키고, 진공 농축시켰다. 잔사를 실리카 역상 크로마토그래피(CH3CN/H2O=2/3; V/V)로 정제하여 백색 고체로서 (S)-3급-부틸(1-((1,3-디옥소이소인돌린-2-일)옥시)프로판-2-일)카바메이트(7.80 g, 81.1%)를 수득하였다.
LCMS: (ESI)　(M+H-100)+ = 221.2.
1H NMR:　(400 MHz, CDCl3) δ 7.87 - 7.81 (m, 2H), 7.79 - 7.73 (m, 2H), 5.15 (br s, 1H), 4.25 (dd, J = 9.6, 4.4 Hz, 1H), 4.20 - 4.11 (m, 1H), 4.02 - 3.89 (m, 1H), 1.42 (s, 9H), 1.36 (d, J = 6.8 Hz, 3H).
단계 B: (S)-3급-부틸(1-(아미노옥시)프로판-2-일)카바메이트(중간체 R)의 합성
DCM(20 mL)과 MeOH(6 mL) 중의 (S)-3급-부틸 (1-((1,3-디옥소이소인돌린-2-일)옥시)프로판-2-일)카바메이트(1.00 g, 3.12 mmol)의 혼합물에 하이드라진 수화물(0.16 g, 3.12 mmol)을 첨가하였다. 혼합물은 3시간동안 15 ℃에서 교반하였다. 혼합물은 진공하에 농축시켰다. 잔사는 DCM (40 mL)으로 처리하였다. 혼합물을 여과하고 여과물을 농축시켜 백색 고체로서 (S)-3급-부틸(1-(아미노옥시)프로판-2-일)카바메이트(650 mg, 96.3%)를 수득하였다.
32.3) 화합물 32의 합성
단계 A: 메틸 2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)피페리딘-4-일)아세테이트의 합성
DMF(20 mL) 중의 메틸 4-피페리딘아세테이트 하이드로클로라이드(1.00 g, 5.16 mmol, 1.0 eq.)와 K2CO3(2.14 g, 15.49 mmol, 3.0 eq.)의 혼합물에 2-클로로-5-(트리플루오로메틸)피리미딘(1.03 g, 5.68 mmol, 1.1 eq)을 첨가하였다. 혼합물은 3시간 동안 80 ℃에서 교반하였다. 혼합물을 실온으로 냉각시키고 물(70 mL)에 붓고 EtOAc(3 x 50mL)로 추출하였다. 유기층을 배합하고 물(2 x 50 mL)로 세척하고, 무수 Na2SO4상에서 건조시키고, 감압하에 농축시켰다. 조 생성물을 플래시 컬럼 크로마토그래피(석유 에테르/EtOAc= 5/1; V/V)로 정제하여 황색 고체로서 메틸 2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)피페리딘-4-일)아세테이트(0.55 g, 35.2%)을 수득하였다.
LCMS: (ESI)　(M+H)+ = 303.2.
1H NMR:　(400 MHz, CDCl3)　δ　8.37 (d, J = 0.8 Hz, 1H), 7.59 (dd, J = 9.2, 2.4 Hz, 1H), 6.63 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 4.44 - 4.35 (m, 2H), 3.69 (s, 3H), 2.93 (td, J = 13.2, 2.4 Hz, 2H), 2.28 (d, J = 7.2 Hz, 2H), 2.16 - 2.01 (m, 1H), 1.89 - 1.76 (m, 2H), 1.34 - 1.19 (m, 2H).
단계 B: 2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)피페리딘-4-일)아세트산의 합성
THF(3 mL), MeOH(1mL) 및 H2O(1 mL)의 혼합 용매 중의 메틸 2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)피페리딘-4-일)아세테이트 (300 mg, 0.99 mmol, 1.0 eq.)의 용액에 LiOH (48 mg, 1.99 mmol, 2.0 eq.)를 첨가하였다. 혼합물은 4시간동안 15 ℃에서 교반하였다. 혼합물은 2M HCl을 사용하여 pH 7로 중화시키고, 진공 농축시켰다. 조 생성물을 플래시 컬럼 크로마토그래피(DCM/EtOAc= 9/1; V/V)로 정제하여 백색 고체로서 2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)피페리딘-4-일)아세트산(200 mg, 69.9%)을 수득하였다.
LCMS: (ESI)　(M+H)+ = 289.2.
단계 C: (S)-3급-부틸 (1-((2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일) 피페리딘-4-일)아세트아미도)옥시)프로판-2-일)카바메이트의 합성
DMF(10 mL) 중의 2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)피페리딘-4-일)아세트산(150 mg, 0.52 mmol, 1.0 eq.) 및 (S)-3급-부틸(1-(아미노옥시)프로판-2-일)카바메이트(109 mg, 0.57 mmol, 1.1 eq.)의 용액에 DIPEA(168 mg, 1.30 mmol, 2.5 eq.)와 HATU(297 mg, 0.78 mmol, 1.5 eq.)를 첨가하였다. 혼합물은 2시간동안 10℃에서 교반하였다. 혼합물은 물(50 mL)로 켄칭시키고 EtOAc (2 x 60 mL)로 추출하였다. 유기층을 배합하고 염수 (2 x 50 mL)로 세척하고, Na2SO4상에서 건조시키고, 진공 농축시켰다. 잔사를 실리카 겔 크로마토그래피(석유 에테르/EtOAc = 3/7; V/V)로 정제하여 백색 고체로서 (S)-3급-부틸(1-((2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리딘 -2-일)피페리딘-4-일)아세트아미도)옥시)프로판-2-일)카바메이트(220 mg, 91.8%)를 수득하였다.
LCMS:　(ESI)　(M+H-100)+ = 461.2.
단계 D: (S)-N-(2-아미노프로폭시)-2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)피페리딘-4-일)아세트아미드의 합성
DCM (3mL) 중의 (S)-3급-부틸 (1-((2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)피페리딘-4-일)아세트아미도)옥시)프로판-2-일)카바메이트(100 mg, 0.22 mmol, 1.0 eq)의 용액에 TFA(1 mL)를 첨가하였다. 혼합물은 1시간동안 15 ℃에서 교반하였다. 과량의 TFA를 포화 NaHCO3 수용액(20 mL)으로 중화시키고 혼합물을 DCM 및 MeOH(10/1; V/V, 6 x 40mL)의 혼합 용액으로 추출하였다. 유기층을 배합하고 Na2SO4상에서 건조시키고, 진공하에 농축하여 황색 고체로서 (S)-N-(2-아미노프로폭시)-2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)피페리딘-4-일)아세트아미드(75 mg, 95.8%)을 수득하였다.
LCMS: (ESI)　(M+H)+ = 361.2.
단계 E: (S)-N-(2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)-2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)피페리딘-4-일)아세트아미드의 합성
EtOH(2mL) 중의 (S)-N-(2-아미노프로폭시)-2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)피페리딘-4-일)아세트아미드(75 mg, 0. 21 mmol, 1.0 eq.)의 혼합물에 5-클로로-4-(트리플루오로메틸)피리다진-3(2H)-온(41 mg, 0.21 mmol, 1.0 eq.)을 첨가하였다. 혼합물은 3시간동안 60 ℃에서 교반하였다. 혼합물은 실온으로 냉각시키고 물(20 mL)로 희석하였다. 혼합물은 DCM (2 x 20 mL)으로 추출하였다. 유기층을 배합하고 Na2SO4상에서 건조시키고, 진공 농축시켰다. 잔사를 prep-HPLC로 정제하여 백색 고체로서 (S)-N-(2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)-2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)피페리딘-4-일)아세트아미드(10.57 mg, 9.7%)을 수득하였다.
LCMS: (ESI)　(M+H)+ = 523.2.
1H NMR: (400 MHz, DMSO-d 6 )　δ　12.51 (s, 1H), 11.15 (s, 1H), 8.39 (s, 1H), 7.92 (s, 1H), 7.76 (dd, J = 9.2, 2.4 Hz, 1H), 6.95 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 6.63 (s, 1H), 4.39 (d, J = 13.6 Hz, 2H), 4.27 - 4.17 (m, 1H), 3.96 - 3.83 (m, 2H), 2.93 (t, J = 12.4 Hz, 2H), 2.06 - 1.97 (m, 1H), 1.93 (d, J = 6.8 Hz, 2H), 1.70 (d, J = 11.6 Hz, 2H), 1.21 (d, J = 6.4 Hz, 3H), 1.17 - 1.06 (m, 2H).
실시예 33
(S)-2-(1-(5-시아노피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)-N-(2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)아세트아미드
단계 A: 메틸 2-(1-(5-시아노피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)아세테이트의 합성
NMP(10 mL) 중의 2-클로로피리미딘-5-카보니트릴(698 mg, 5.00 mmol, 1.0 eq.) 및 메틸 2-(피페리딘-4-일)아세테이트 하이드로클로라이드(1.02 g, 5.25 mmol, 1.0 eq.) 용액에 K2CO3(2.07 g, 15.00 mmol, 3.0 eq)을 첨가하였다. 혼합물은 16시간 동안 80 ℃에서 교반하였다. 혼합물은 실온으로 냉각시키고 물(100 mL)로 희석하였다. 혼합물은 EtOAc (2 x 80 mL)로 추출하였다. 유기층을 배합하고 염수 (2 x 100 mL)로 세척하고, Na2SO4상에서 건조시키고, 진공 농축시켰다. 잔사를 실리카 겔 크로마토그래피(석유 에테르/EtOAc= 3/1; V/V)로 정제하여 담황색 고체로서 메틸 2-(1-(5-(시아노피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)아세테이트(1.04 g, 79.9%)을 수득하였다.
LCMS:　(ESI)　(M+H)+ = 261.1.
1H NMR: (400 MHz, CDCl3)　δ　8.46 (s, 2H), 4.88 - 4.79 (m, 2H), 3.69 (s, 3H), 2.97 (td,　J　= 13.2, 2.8 Hz, 2H), 2.29 (d,　J　= 6.8 Hz, 2H), 2.18 - 2.06 (m, 1H), 1.90 - 1.82 (m, 2H), 1.29 - 1.17 (m, 2H).
단계 B: 2-(1-(5-시아노피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)아세트산의 합성
THF(6 mL) 및 H2O(3 mL) 중의 메틸 2-(1-(5-시아노피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)아세테이트 (390 mg, 1.50 mmol, 1.0 eq.)의 혼합물에 LiOH (126 mg, 3.00 mmol, 2.0 eq.)를 첨가하였다. 혼합물은 16시간동안 10℃에서 교반하였다. 혼합물은 물(10 mL)로 희석하고 1M HCl을 사용하여 pH 7로 중화시켰다. 혼합물은 EtOAc (2 x 60 mL)로 추출하였다. 유기층을 배합하고, 염수(40 mL)로 세척하고, Na2SO4상에서 건조시키고, 진공하에 농축하여 백색 고체로서 2-(1-(5-시아노피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)아세트산(365 mg, 98.8%)을 수득하였다.
LCMS:　(ESI)　(M+H)+ = 247.2.
단계 C: (S)-3급-부틸 (1-((2-(1-(5-시아노피리미딘-2-일) 피페리딘-4-일)아세트아미도)옥시)프로판-2-일)카바메이트의 합성
DMF(5 mL) 중의 2-(1-(5-시아노피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)아세트산(246 mg, 1.00 mmol, 1.0 eq.)의 용액에 DIPEA (388 mg, 3.00 mmol, 3.0 eq.), HATU (456 mg, 1.20 mmol, 1.2 eq.)을 첨가하고, 이어서 (S)-3급-부틸(1-(아미노옥시)프로판-2-일)카바메이트(190 mg, 1.00 mmol, 1.0 eq.)을 첨가하였다. 혼합물은 2시간동안 10℃에서 교반하였다. 혼합물은 물(80 mL)로 켄칭시키고 EtOAc (2 x 80 mL)로 추출하였다. 유기층을 배합하고 염수 (2 x 80 mL)로 세척하고, Na2SO4상에서 건조시키고, 진공 농축시켰다. 잔사를 실리카 겔 크로마토그래피(석유 에테르/EtOAc = 3/7; V/V)로 정제하여 백색 고체로서 (S)-3급-부틸 (1-((2-(1-(5-시아노피리미딘 -2-일)피페리딘-4-일)아세트아미도)옥시)프로판-2-일)카바메이트(295 mg, 70.5%)를 수득하였다.
LCMS:　(ESI)　(M+H-100)+ = 319.2.
1H NMR: (400　MHz,　CDCl3)　δ　9.68 (s, 1H), 8.50 (s, 2H), 4.93 - 4.83 (m, 2H), 4.62 (d,　J　= 8.8 Hz, 1H), 4.10 - 4.00 (m, 1H), 3.98 - 3.90 (m, 1H), 3.50 (t,　J　= 10.2 Hz, 1H), 3.05 - 2.95 (m, 2H), 2.35 - 2.17 (m, 1H), 2.14 - 2.00 (m, 2H), 1.97 - 1.84 (m, 2H), 1.49 (s, 9H), 1.34 - 1.23 (m, 2H), 1.17 (d,　J　= 6.8 Hz, 3H).
단계 D: (S)-N-(2-아미노프로폭시)-2-(1-(5-시아노피리미딘-2-일)피페리딘 -4-일)아세트아미드의 합성
DCM (3mL) 중의 (S)-3급-부틸 (1-((2-(1-(5-시아노피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)아세트아미도)옥시)프로판-2-일)카바메이트(126 mg, 0.30 mmol, 1.0 eq)의 용액에 TFA(1 mL)를 첨가하였다. 혼합물은 1시간동안 10℃에서 교반하였다. 과량의 TFA를 포화 NaHCO3 수용액(20 mL)으로 중화시키고 혼합물을 DCM 및 MeOH(10/1; V/V, 6 x 60mL)의 혼합 용액으로 추출하였다. 유기층을 배합하고 Na2SO4상에서 건조시키고, 진공하에 농축하여 담황색 오일로서 (S)-N-(2-아미노프로폭시)-2-(1-(5-시아노피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)아세트아미드(96 mg, 99.5%)을 수득하였다.
LCMS: (ESI)　(M+H)+ = 319.2.
단계 E: (S)-2-(1-(5-시아노피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)-N-(2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)아세트아미드의 합성
EtOH(3 mL) 중의 (S)-N-(2-아미노프로폭시)-2-(1-(5-시아노피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)아세트아미드(96 mg, 0. 30 mmol, 1.0 eq.)의 용액에 5-클로로-4-(트리플루오로메틸)피리다진-3(2H)-온(60 mg, 0.30 mmol, 1.0 eq.)을 첨가하였다. 혼합물을 60 ℃로 가열하고 3시간 동안 교반하였다. 혼합물은 실온으로 냉각시키고 물(20 mL)로 희석하였다. 혼합물은 DCM (2 x 20 mL)으로 추출하였다. 유기층을 배합하고 Na2SO4상에서 건조시키고, 진공 농축시켰다. 잔사를 prep-HPLC로 정제하여 백색 고체로서 (S)-2-(1-(5-시아노피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)-N-(2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)아세트아미드(12.22 mg, 수율 8.46%)을 수득하였다.
LCMS: (ESI)　(M+H)+ = 481.2.
1H NMR: (400 MHz, DMSO-d 6 )　δ　12.49 (s, 1H), 11.14 (s, 1H), 8.72 (s, 2H), 7.91 (s, 1H), 6.66 - 6.57 (m, 1H), 4.67 (d,　J　= 13.2 Hz, 2H), 4.26 - 4.15 (m, 1H), 3.95 - 3.81 (m, 2H), 3.01 (t,　J　= 12.4 Hz, 2H), 2.07 - 1.97 (m, 1H), 1.93 (d,　J　= 7.2 Hz, 2H), 1.77 - 1.68 (m, 2H), 1.19 (d,　J　= 6.4 Hz, 3H), 1.15 - 1.04 (m, 2H).
실시예 34
(S)-2-(1-(5-시아노피리딘-2-일)피페리딘-4-일)-N-(2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)아세트아미드
단계 A: 메틸 2-(1-(5-시아노피리딘-2-일)피페리딘-4-일)아세테이트의 합성
NMP(11 mL) 중의 6-클로로피리딘-3-카보니트릴(831 mg, 6.00 mmol, 1.0 eq.) 및 메틸 2-(피페리딘-4-일)아세테이트 하이드로클로라이드(1.16 g, 6.00 mmol, 1.0 eq.) 용액에 K2CO3(2.49 g, 18.00 mmol, 3.0 eq)을 첨가하였다. 혼합물은 16시간 동안 80 ℃에서 교반하였다. 혼합물은 실온으로 냉각시키고 물(100 mL)로 희석하였다. 혼합물은 EtOAc (2 x 80 mL)로 추출하였다. 유기층을 배합하고 염수 (2 x 100 mL)로 세척하고, Na2SO4상에서 건조시키고, 진공 농축시켰다. 잔사를 실리카 겔 크로마토그래피(석유 에테르/EtOAc= 3/1; V/V)로 정제하여 황색 고체로서 메틸 2-(1-(5-(시아노피리딘-2-일)피페리딘-4-일)아세테이트(1.35 g, 86.8%)을 수득하였다.
LCMS:　(ESI)　(M+H)+ = 260.2.
1H NMR:　(400 MHz, CDCl3)　δ　8.38 (dd,　J　= 2.4, 0.4 Hz, 1H), 7.57 (dd,　J　= 8.8, 2.4 Hz, 1H), 6.59 (d,　J　= 9.2 Hz, 1H), 4.46 - 4.38 (m, 2H), 3.69 (s, 3H), 2.96 (td,　J　= 13.2, 2.8 Hz, 2H), 2.28 (d,　J　= 6.8 Hz, 2H), 2.18 - 2.04 (m, 1H), 1.92 - 1.79 (m, 2H), 1.32 - 1.19 (m, 2H).
단계 B: 2-(1-(5-시아노피리딘-2-일)피페리딘-4-일)아세트산의 합성
THF(6 mL) 및 H2O(3 mL) 중의 메틸 2-(1-(5-시아노피리딘-2-일)피페리딘-4-일)아세테이트 (389 mg, 1.50 mmol, 1.0 eq.)의 혼합물에 LiOH (126 mg, 3.00 mmol, 2.0 eq.)를 첨가하였다. 혼합물은 16시간동안 10℃에서 교반하였다. 혼합물은 물(10 mL)로 희석하고 1M HCl을 사용하여 pH 7로 중화시켰다. 혼합물은 EtOAc (2 x 60 mL)로 추출하였다. 유기층을 배합하고, 염수(40 mL)로 세척하고, Na2SO4상에서 건조시키고, 진공하에 농축하여 담황색 고체로서 2-(1-(5-시아노피리딘-2-일)피페리딘-4-일)아세트산(365 mg, 99.2%)을 수득하였다.
LCMS: (ESI)　(M+H)+ = 246.2.
단계 C: (S)-3급-부틸 (1-((2-(1-(5-시아노피리딘-2-일)피페리딘-4-일)아세트아미도)옥시)프로판-2-일)카바메이트
DMF(5 mL) 중의 2-(1-(5-시아노피리딘-2-일)피페리딘-4-일)아세트산(245 mg, 1.00 mmol, 1.0 eq.)의 용액에 DIPEA (388 mg, 3.00 mmol, 3.0 eq.) 및 HATU (456 mg, 1.20 mmol, 1.2 eq.)을 첨가하고, 이어서 (S)-3급-부틸(1-(아미노옥시)프로판-2-일)카바메이트(190 mg, 1.00 mmol, 1.0 eq.)을 첨가하였다. 혼합물은 2시간동안 10℃에서 교반하였다. 혼합물은 물(80 mL)로 켄칭시키고 EtOAc (2 x 80 mL)로 추출하였다. 유기층을 배합하고 염수 (2 x 80 mL)로 세척하고, Na2SO4상에서 건조시키고, 진공 농축시켰다. 잔사를 실리카 겔 크로마토그래피(석유 에테르/EtOAc = 3/7; V/V)로 정제하여 백색 고체로서 (S)-3급-부틸 (1-((2-(1-(5-시아노피리딘-2-일)피페리딘-4-일)아세트아미도)옥시)프로판-2-일)카바메이트(300 mg, 71.9%)를 수득하였다.
LCMS: (ESI)　(M+H)+ = 418.2.
1H NMR:　(400　MHz,　CDCl3)　δ　9.81 (s, 1H), 8.52 (s, 1H), 7.73 - 7.68 (m, 1H), 6.73 (d,　J　= 9.2 Hz, 1H), 4.77 (d,　J　= 7.6 Hz, 1H), 4.56 (t,　J　= 11.2 Hz, 2H), 4.20 - 4.09 (m, 1H), 4.03 (d,　J　= 12.0 Hz, 1H), 3.61 (t,　J　= 10.8 Hz, 1H), 3.15 - 3.01 (m, 2H), 2.41 - 2.27 (m, 1H), 2.20 (d,　J　= 7.2 Hz, 2H), 2.07 - 1.93 (m, 2H), 1.59 (s, 9H), 1.45 - 1.33 (m, 2H), 1.27 (d,　J　= 6.8 Hz, 3H).
단계 D: (S)-N-(2-아미노프로폭시)-2-(1-(5-시아노피리딘-2-일)피페리딘-4-일)아세트아미드의 합성
DCM (4 mL) 중의 (S)-3급-부틸 (1-((2-(1-(5-시아노피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)아세트아미도)옥시)프로판-2-일)카바메이트(50 mg, 0.12 mmol, 1.0 eq)의 용액에 TFA(1 mL)를 첨가하였다. 혼합물은 0.5시간동안 15 ℃에서 교반하였다. 과량의 TFA를 포화 NaHCO3 수용액(20mL)으로 중화시키고 혼합물을 DCM(4 x 60mL)으로 추출하였다. 유기층을 배합하고 Na2SO4상에서 건조시키고, 진공하에 농축하여 백색 고체로서 (S)-N-(2-아미노프로폭시)-2-(1-(5-시아노피리딘-2-일)피페리딘-4-일)아세트아미드(32 mg, 84.2%)을 수득하였다.
LCMS:　(ESI)　(M+H)+ = 318.2.
단계 E: (S)-2-(1-(5-시아노피리딘-2-일)피페리딘-4-일)-N-(2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)아세트아미드의 합성
EtOH(1 mL) 중의 (S)-N-(2-아미노프로폭시)-2-(1-(5-시아노피리딘-2-일)피페리딘-4-일)아세트아미드(16 mg, 0.05 mmol, 1.0 eq.)의 용액에 5-클로로-4-(트리플루오로메틸)피리다진-3(2H)-온(10 mg, 0.05 mmol, 1.0 eq.)을 첨가하였다. 혼합물을 60 ℃로 가열하고 2시간 동안 교반하였다. 혼합물은 실온으로 냉각시키고 물(10 mL)로 희석하였다. 혼합물은 EtOAc (3 x 15 mL)로 추출하였다. 유기층을 배합하고 Na2SO4상에서 건조시키고, 진공 농축시켰다. 잔사를 prep-HPLC(FA)로 정제하여 백색 고체로서 (S)-2-(1-(5-시아노피리딘-2-일)피페리딘-4-일)-N-(2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)아세트아미드(3.12 mg, 수율 12.9%)을 수득하였다.
LCMS:　(ESI)　(M+H)+ = 480.2.
1H NMR: (400 MHz, CDCl3)　δ　10.45 (s, 1H), 9.00 (s, 1H), 8.37 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.71 (s, 1H), 7.57 (dd, J = 9.2, 2.4 Hz, 1H), 6.59 (d, J = 9.6 Hz, 1H), 5.96 (s, 1H), 4.48 - 4.35 (m, 2H), 4.18 - 4.02 (m, 2H), 3.93 - 3.82 (m, 1H), 3.02 - 2.90 (m, 2H), 2.25 - 2.12 (m, 1H), 2.12 - 2.00 (m, 2H), 1.90 - 1.78 (m, 2H), 1.35 (d, J = 6.4 Hz, 3H), 1.27 - 1.17 (m, 2H).
실시예 35:
(S)-N-(2-((5-브로모-6-옥소-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)-2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)아세트아미드
35.1) 중간체 T의 합성
단계 A: (S)-4-브로모-5-((1-하이드록시프로판-2-일)아미노)-2-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)피리다진-3(2H)-온
i-ProOH (40 mL) 중의 4,5-디브로모-2-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)피리다진-3(2H)-온(2.60 g, 6.79 mmol, 1.0 eq. )의 용액에 DIPEA (2.63 g, 20.37 mmol, 3.0 eq.) 및 L- 알라니놀 (510 mg, 6.79 mmol, 1.0 eq.)을 첨가하였다. 혼합물은 16시간동안 100℃에서 교반하였다. 혼합물을 실온으로 냉각시키고 물(200 mL)으로 켄칭시키고 EtOAc(3 x 150mL)로 추출하였다. 유기층을 배합하고 염수 (500 mL)로 세척하고, 무수 Na2SO4상에서 건조시키고, 감압하에 농축시켰다. 잔사를 컬럼 크로마토그래피(석유 에테르/EtOAc= 4/1; V/V)로 정제하여 백색 고체로서 (S)-4-브로모-5-((1-하이드록시프로판-2-일)아미노)-2-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)피리다진-3(2H)-온(1.32 g, 51.6%)을 수득하였다.
LCMS: (ESI)　(M+H)+ = 378.0，380.0.
1H NMR: (400 MHz, CDCl3) δ 7.63 (s, 1H), 5.52 - 5.40 (m, 2H), 5.01 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 3.92 - 3.77 (m, 2H), 3.74 - 3.65 (m, 3H), 1.32 (d, J = 6.4 Hz, 3H), 0.99 - 0.93 (m, 2H), 0.02 (s, 9H).
단계 B: (S)-2-(2-((5-브로모-6-옥소-1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)이소인돌린-1,3-디온(중간체 T)의 합성
THF (15 mL) 중의 (S)-4-브로모-5-((1-하이드록시프로판-2-일)아미노)-2-((2- (트리메틸실릴)에톡시)메틸)피리다진-3(2H)-온(1.32 g, 3.49 mmol, 1.0 eq.)의 용액에 N-하이드록시프탈이미드(569 mg, 3.49 mmol, 1.0 eq.), PPh3(1.01 g, 3.84 mmol, 1.1 eq.)를 첨가하고 이어서 DIAD(776 mg, 3.84 mmol, 1.1 eq.)를 적가하였다. 혼합물은 1시간동안 25 ℃에서 교반하였다. 혼합물은 물(100 mL)로 켄칭시키고 EtOAc (3 x 80 mL)로 추출하였다. 유기층을 배합하고 염수(300 mL)로 세척하고, 무수 Na2SO4상에서 건조시키고, 진공 농축시켰다. 잔사를 컬럼 크로마토그래피(석유 에테르/EtOAc= 3/1; V/V)로 정제하여 무색 오일로서 (S)-2-(2-((5-브로모-6-옥소-1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)이소인돌린-1,3-디온(1.44 g, 78.9%)을 수득하였다.
LCMS: (ESI) (M+H)+ = 523.0.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 7.97 (s, 1H), 7.89 (s, 4H), 6.32 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 5.34 (s, 2H), 4.44 (d, J = 6.6 Hz, 2H), 4.26 (d, J = 6.4 Hz, 1H), 3.65 (t, J = 8.0 Hz, 2H), 1.28 (d, J = 5.5 Hz, 3H), 0.89 (t, J = 8.0 Hz, 2H), 0.00 (s, 9H).
35.2) 화합물 35의 합성
단계 A: (S)-5-((1-(아미노옥시)프로판-2-일)아미노)-4-브로모-2-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)피리다진-3(2H)-온
EtOH(5 mL) 중의 (S)-2-(2-((5-브로모-6-옥소-1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)이소인돌린-1,3-디온(410 mg, 0.784 mmol, 1.0 eq.)의 용액에 하이드라진 수화물(58 mg, 1.16 mmol, 1.5 eq.)을 0℃에서 첨가하였다. 수득한 혼합물을 30분 동안 rt에서 교반하였다. 혼합물은 진공하에 농축시켰다. 잔사는 MTBE (10mL)로 연마하였다. 불용성 침전물을 여과 제거하고 MTBE (10 mL)로 세척하였다. 여과물을 진공에서 농축하여 백색 고체로서 (S)-5-((1-(아미노옥시)프로판-2-일)아미노)-4-브로모-2-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)피리다진-3(2H)-온(170 mg, 수율 55% )을 수득하였다.
LCMS: (ESI)　(M+H)+ = 393.2, 395.2.
단계 B: (S)-N-(2-((5-브로모-6-옥소-1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)-2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)아세트아미드의 합성
DMF(2 mL) 중의 2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)아세트산(89 mg, 0.308 mmol, 1.1 eq.)의 용액에 DIPEA (108 mg, 0.842 mmol, 3.0 eq.) 및 HATU (128 mg, 0.336 mmol, 1.2 eq.)을 첨가하고, 이어서 (S)-5-((1-(아미노옥시)프로판-2-일)아미노)-4-브로모-2-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)피리다진-3(2H)-온 (110 mg, 0.280 mmol, 1.0 eq.)을 적가하였다. 수득한 혼합물은 1시간동안 25 ℃에서 교반하였다. 반응 혼합물은 물(10 mL)로 켄칭시키고 EtOAc (3 x 10 mL)로 추출하였다. 유기층을 배합하고 염수 (10 mL)로 세척하고, Na2SO4상에서 건조시키고, 진공 농축시켰다. 잔사를 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(석유 에테르/EtOAc= 1/2; V/V)로 정제하여 무색 오일로서 (S)-N-(2-((5-브로모-6-옥소-1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)-2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)아세트아미드(100 mg, 수율 53%)을 수득하였다.
LCMS:　(ESI)　(M+H)+ = 664.2, 666.2.
1H NMR: (400 MHz, CDCl3) δ 8.98 (s, 1H), 8.45 (s, 2H), 7.58 (s, 1H), 5.49 (d, J = 9.8 Hz, 1H), 5.35 (d, J = 9.8 Hz, 1H), 5.28 (s, 1H), 4.84 (d, J = 12.0 Hz, 2H), 4.17 - 4.08 (m, 1H), 4.06 - 3.88 (m, 2H), 3.68 (t, J = 8.1 Hz, 2H), 2.95 (t, J = 12.7 Hz, 2H), 2.31 - 2.14 (m, 1H), 2.14 - 2.01 (m, 2H), 1.85 (d, J = 12.8 Hz, 2H), 1.36 (d, J = 6.5 Hz, 3H), 1.27 - 1.14 (m, 2H), 0.93 (t, J = 8.4 Hz, 2H), -0.02 (s, 9H).
단계 C: (S)-N-(2-((5-브로모-6-옥소-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노) 프로폭시)-2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)아세트아미드의 합성
DCM (2 mL) 중의 (S)-N-(2-((5-브로모-6-옥소-1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)-2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)아세트아미드(90 mg, 0.135 mmol, 1.0 eq.)의 용액에 TFA(0.3mL)를 첨가하였다. 수득한 혼합물은 1시간동안 25 ℃에서 교반하였다. 혼합물을 포화 NaHCO3 수용액(5mL)으로 중화시키고 DCM(3 x 10mL)으로 추출하였다. 유기층을 배합하고 Na2SO4상에서 건조시키고, 진공 농축시켰다. 잔사는 MeOH (5 mL)에 재용해시키고, K2CO3 (46 mg, 0.339 mmol, 2.5 eq.)를 첨가하였다. 혼합물은 추가로 1시간동안 25 ℃에서 교반하였다. 반응 혼합물을 여과하고, 여과물을 역상 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(CH3CN/H2O= 10/1, V/V)로 정제하여 백색 고체로서 (S)-N-(2-((5-브로모-6-옥소-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)-2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)아세트아미드(49 mg, 수율 68%)를 수득하였다.
LCMS:　(ESI)　(M+H)+ = 534.2.
1H NMR: (400 MHz, CDCl3) δ 10.62 (s, 1H), 9.50 (s, 1H), 8.45 (s, 2H), 7.59 (s, 1H), 5.30 (s, 1H), 4.82 (d, J = 13.5 Hz, 2H), 4.22 - 4.10 (m, 1H), 4.10 - 3.98 (m, 1H), 3.96 - 3.86 (m, 1H), 2.94 (t, J = 12.4 Hz, 2H), 2.29 - 2.14 (m, 1H), 2.13 - 2.00 (m, 2H), 1.83 (d, J = 12.7 Hz, 2H), 1.34 (d, J = 5.9 Hz, 3H), 1.26 - 1.11 (m, 2H).
실시예 36:
(S)-N-(2-((5-아세틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)-2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)아세트아미드
36.1) 중간체 W의 합성
단계 A: (S)-2-(2-((5-아세틸-6-옥소-1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)이소인돌린-1,3-디온의 합성
톨루엔 (28 mL) 중의 (S)-2-(2-((5-브로모-6-옥소-1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)이소인돌린-1,3-디온(733 mg, 1.40 mmol, 1.0 eq.) 및 트리부틸(1-에톡시비닐)스타난(607 mg, 1.68 mmol, 1.2 eq.)의 용액에 Pd(PPh3)4(323 mg, 0.28 mmol, 0.2 eq.)를 첨가하였다. 혼합물은 16시간동안 100℃에서 교반하였다. 반응물을 실온으로 냉각시키고 물(50 mL)로 켄칭시키고 EtOAc(3 x 40mL)로 추출하였다. 유기층을 배합하고 염수(150 mL)로 세척하고, 무수 Na2SO4상에서 건조시키고, 진공 농축시켰다. 잔사를 컬럼 크로마토그래피(석유 에테르/EtOAc= 1/1; V/V)로 정제하여 백색 고체로서 (S)-2-(2-((5-아세틸-6-옥소-1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)이소인돌린-1,3-디온(446 mg, 61.9%)을 수득하였다.
LCMS: (ESI) (M+H)+ = 487.2.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 10.82 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 8.15 (s, 1H), 7.92 - 7.84 (m, 4H), 5.31 (s, 2H), 4.65 - 4.50 (m, 1H), 4.39 - 4.27 (m, 2H), 3.70 - 3.61 (m, 2H), 2.52 (s, 3H), 1.32 (d, J = 6.8 Hz, 3H), 0.92 - 0.86 (m, 2H), 0.00 (s, 9H).
단계 B: (S)-4-아세틸-5-((1-(아미노옥시)프로판-2-일)아미노)-2-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)피리다진-3(2H)-온의 합성
DCM (10 mL) 및 MeOH (5 mL) 중의 (S)-2-(2-((5-아세틸-6-옥소-1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)이소인돌린-1,3-디온(390 mg, 0.80 mmol, 1.0 eq.)의 용액에 하이드라진 수화물(76 mg, 1.52 mmol, 1.9 eq.)을 첨가하였다. 혼합물은 1시간동안 25 ℃에서 교반하였다. 혼합물은 진공하에 농축시켰다. 잔사를 EtOH(20mL)로 연마하고 여과한 후, 여과물을 진공하에 농축하였다. 잔사를 컬럼 크로마토그래피(석유 에테르/EtOAc= 2/1; V/V)로 정제하여 황색 오일로서 (S)-4-아세틸-5-((1-(아미노옥시)프로판-2-일)아미노)-2-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)피리다진-3(2H)-온(230 mg, 80.5%)을 수득하였다.
LCMS: (ESI) (M+H)+ = 357.2.
36.2) 화합물 36의 합성
단계 A: (S)-N-(2-((5-아세틸-6-옥소-1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)-2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)아세트아미드의 합성
DMF(15 mL) 중의 ((S)-4-아세틸-5-((1-(아미노옥시)프로판-2-일)아미노)-2-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)피리다진-3(2H)-온(230 mg, 0.65 mmol, 1.0 eq.) 및 2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)아세트산(208 mg, 0.72 mmol, 1.1 eq.)의 용액에 DIPEA(252 mg, 1.95 mmol, 3.0 eq.)와 HATU(297 mg, 0.78 mmol, 1.2 eq.)를 첨가하였다. 혼합물은 1시간동안 25 ℃에서 교반하였다. 혼합물은 물(50 mL)로 켄칭시키고 EtOAc (3 x 40 mL)로 추출하였다. 유기층을 배합하고 염수(200 mL)로 세척하고, 무수 Na2SO4상에서 건조시키고, 진공 농축시켰다. 잔사를 컬럼 크로마토그래피(석유 에테르/EtOAc= 1/1; V/V)로 정제하여 백색 고체로서 (S)-N-(2-((5-아세틸-6-옥소-1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)-2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)아세트아미드(360 mg, 수율 88.9%)을 수득하였다.
LCMS: (ESI) (M+H)+ = 628.2.
단계 B: (S)-N-(2-((5-아세틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노) 프로폭시)-2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)아세트아미드의 합성
DCM (6 mL) 중의 (S)-N-(2-((5-아세틸-6-옥소-1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)-2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)아세트아미드(180 mg, 0.28 mmol, 1.0 eq.)의 용액에 TFA(2 mL)를 첨가하였다. 수득한 용액은 0.5시간동안 25 ℃에서 교반하였다. 혼합물은 진공하에 농축시켰다. 상기 잔사에 MeOH (6 mL), 물 (6 mL), K2CO3 (174 mg, 1.26 mmol, 4.5 eq.) 및 에틸렌디아민(124 mg, 2.07 mmol, 7.4 eq.)을 첨가하였다. 혼합물은 추가로 1시간동안 25 ℃에서 교반하였다. 혼합물은 물(50 mL)로 켄칭시키고 EtOAc (3 x 40 mL)로 추출하였다. 유기층을 배합하고 염수 (200 mL)로 세척하고, 무수 Na2SO4상에서 건조시키고, 감압하에 농축시켰다. 잔사를 prep-HPLC로 정제하여 백색 고체로서 (S)-N-(2-((5-아세틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)-2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)아세트아미드(30.83 mg, 21.6%)을 수득하였다.
LCMS:　(ESI)　(M+H)+ = 498.2.
1H NMR: 220817-072-P (400 MHz, DMSO-d 6) δ 12.35 (s, 1H), 11.11 (s, 1H), 10.72 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 8.68 (s, 2H), 7.98 (s, 1H), 4.69 (d, J = 13.2 Hz, 2H), 4.37 - 4.25 (m, 1H), 3.98 - 3.89 (m, 1H), 3.87 - 3.78 (m, 1H), 3.00 (t, J = 12.0 Hz, 2H), 2.55 (s, 3H), 2.07 - 2.00 (m, 1H), 1.95 - 1.91 (m, 2H), 1.89 - 1.69 (m, 2H), 1.25 (d, J = 6.4 Hz, 3H), 1.18 - 1.02 (m, 2H).
실시예 37
N-(2-(5-옥소-3,4,5,6-테트라하이드로피리도(2,3-d)피리다진-1(2H)-일)프로폭시)-2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)아세트아미드
단계 A: 6-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)피리도(2,3-d)피리다진-5(6H)-온의 합성
DMF(35 mL) 중의 피리도 (2,3-d)피리다진-5(6H)-온(1.03 g, 7.00 mmol, 1.0 eq.)의 혼합물에 N2 대기하에 빙수 욕조에서 0℃에서 NaH(60%, 0.70 g, 17.50 mmol, 2.5 eq.)를 분획으로 첨가하였다. 혼합물은 30분동안 0 ℃에서 교반하였다. 2-(트리메틸실릴)에톡시메틸 클로라이드(1.75 g, 10.50 mmol, 1.5 eq.)를 반응 혼합물에 첨가하였다. 혼합물은 10 ℃에서 2시간 동안 교반하였다. 혼합물은 포화된 NH4Cl 수용액(120 mL)으로 켄칭시키고 EtOAc (2 x 100 mL)로 추출하였다. 유기층을 배합하고 염수 (2 x 100 mL)로 세척하고, Na2SO4상에서 건조시키고, 진공 농축시켰다. 잔사를 실리카 겔 크로마토그래피(EtOAc/석유 에테르= 1/3; V/V)로 정제하여 6-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)피리도(2,3-d)피리다진-5(6H)-온(1.26 g, 64.9 %)을 황색 오일로서 수득하였다.
LCMS:　(ESI)　(M+H)+=278.1.
1H NMR: (400 MHz, DMSO-d 6 )　δ　9.18 (dd,　J　= 4.4, 1.6 Hz, 1H), 8.66 (d,　J　= 8.0 Hz, 1H), 8.53 (s, 1H), 7.90 (dd,　J　= 8.0, 4.4 Hz, 1H), 5.47 (s, 2H), 3.70 (t,　J　= 8.0 Hz, 2H), 0.89 (t,　J　= 8.0 Hz, 2H), 0.00 (s, 9H).
단계 B: 6-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1,2,3,4-테트라하이드로피리도(2,3-d)피리다진-5(6H)-온의 합성
EtOH (50 mL) 중의 6-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)피리도(2,3-d)피리다진-5(6H)-온(1.38 g, 4.98 mmol, 1.00 eq.)의 용액에 Pd/C (10%, 0.20g)을 첨가하였다. 혼합물을 탈기시키고 수소로 수회 퍼징하였다. 혼합물은 수소 대기하에 16시간동안 10℃에서 교반하였다. 혼합물을 여과하고 여과물을 진공 농축시켜 회색 고체로서 6-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1,2,3,4-테트라하이드로피리도(2,3-d)피리다진-5(6H)-온(1.38 g, 수율 98.6%)을 수득하였다.
LCMS:　(ESI)　(M+H)+=282.0.
1H NMR: (400 MHz,　DMSO-d 6 )　δ　7.43 (s, 1H), 6.94 (br s, 1H), 5.23 (s, 2H), 3.61 (t,　J　= 8.0 Hz, 2H), 3.24 - 3.17 (m, 2H), 2.38 (t,　J　= 6.0 Hz, 2H), 1.80 - 1.71 (m, 2H), 0.87 (t,　J　= 8.0 Hz, 2H), 0.00 (s, 9H).
단계 C: 메틸 2-(5-옥소-6-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-3,4,5,6-테트라하이드로피리도(2,3-d)피리다진-1(2H)-일)프로파노에이트의 합성
DMF(12 mL) 중의 6-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1,2,3,4-테트라하이드로피리도(2,3-d)피리다진-5(6H)-온(790 mg, 2.81 mmol, 1.0 eq.)의 혼합물에 N2 대기하에 빙수 욕조에서 0℃에서 NaH(60%, 898 mg, 22.46 mmol, 8.0 eq.)를 첨가하였다. 혼합물은 30분동안 0 ℃에서 교반하였다. 혼합물에 메틸 2-브로모프로파노에이트(2.11 g, 12.63 mmol, 4.5 eq.)를 첨가하였다. 상기 혼합물을 40℃에서 0.5시간 동안 교반하였다. 혼합물은 냉수(60 mL)로 켄칭시키고 EtOAc (2 x 120 mL)로 추출하였다. 유기층을 배합하고 염수 (60 mL)로 세척하고, Na2SO4상에서 건조시키고, 진공 농축시켰다. 잔사를 실리카 겔 크로마토그래피(EtOAc/석유 에테르= 6/10; V/V)로 정제하여 황색 오일로서 2-(5-옥소-6-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-3,4,5,6-테트라하이드로피리도(2,3-d)피리다진-1(2H)-일)프로파노에이트(660 mg, 수율 64.0%)를 수득하였다.
LCMS:　(ESI)　(M+H)+=367.8.
1H NMR: (400 MHz, CDCl3)　δ　7.57 (s, 1H), 5.46 - 5.38 (m, 2H), 4.57 (q,　J　= 7.2 Hz, 1H), 3.75 (s, 3H), 3.73 - 3.67 (m, 2H), 3.32 - 3.15 (m, 2H), 2.70 - 2.50 (m, 2H), 1.95 - 1.86 (m, 2H), 1.54 (d,　J　= 7.2 Hz, 3H), 1.03 - 0.93 (m, 2H), 0.00 (s, 9H).
단계 D: 1-(1-하이드록시프로판-2-일)-6-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1,2,3,4-테트라하이드로피리도(2,3-d)피리다진-5(6H)-온의 합성
THF(10 mL) 중의 2-(5-옥소-6-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-3,4,5,6-테트라하이드로피리도(2,3-d)피리다진-1(2H)-일)프로파노에이트(890 mg, 2.42 mmol, 1.0 eq.)의 용액에 N2 대기하에 빙수 욕조에서 0℃에서 DIBAL-H(1M, 12.1 mL, 12.10 mmol, 5.0 eq.)를 첨가하였다. 혼합물은 1시간동안 10℃에서 교반하였다. 혼합물은 포화된 NH4Cl 수용액(100 mL)으로 켄칭시키고 DCM (4 x 180 mL)로 추출하였다. 유기층을 배합하고 Na2SO4상에서 건조시키고, 진공 농축시켰다. 잔사를 실리카 겔 크로마토그래피(MeOH/DCM = 6/100; V/V)로 정제하여 황색 오일로서 1-(1-하이드록시프로판-2-일)-6-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1,2,3,4-테트라하이드로피리도(2,3-d)피리다진-5(6H)-온(426 mg, 수율 51.8%)를 수득하였다.
LCMS:　(ESI)　(M+H)+=340.2.
1H NMR: (400 MHz, DMSO-d 6 )　δ　7.93 (s, 1H), 5.24 (s, 2H), 4.79 (t,　J　= 5.6 Hz, 1H), 4.22 (q,　J　=　6.8 Hz, 1H), 3.66 - 3.58 (m, 2H), 3.55 - 3.38 (m, 2H), 3.18 (t,　J　= 5.6 Hz, 2H), 2.39 (t,　J　= 6.4 Hz, 2H), 1.86 - 1.66 (m, 2H), 1.10 (d,　J　= 6.8 Hz, 3H), 0.7 (t,　J　= 8.0 Hz, 2H), 0.00 (s, 9H).
단계 E: 2-(5-옥소-6-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-3,4,5,6-테트라하이드로피리도(2,3-d)피리다진-1(2H)-일)프로필 4-메틸벤젠설포네이트의 합성
DCM (10 mL) 중의 1-(1-하이드록시프로판-2-일)-6-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)피리다진-5(6H)-온(100 mg, 0.29 mmol, 1.0 eq.)의 용액에 TEA (59 mg, 0.58 mmol, 2.0 eq.), DMAP(18 mg, 0.15 mmol, 0.5 eq.) 및 토실 클로라이드 (55 mg, 0.29 mmol, 1.0 eq.)를 첨가하였다. 혼합물은 16시간동안 35 ℃에서 교반하였다. 혼합물은 물(30 mL)로 켄칭시키고 EtOAc (3 x 40 mL)로 추출하였다. 유기층을 배합하고 염수(100 mL)로 세척하고, 무수 Na2SO4상에서 건조시키고, 진공 농축시켰다. 잔사를 컬럼 크로마토그래피(석유 에테르/EtOAc= 1/1; V/V)로 정제하여 황색 오일로서 2-(5-옥소-6-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-3,4,5,6-테트라하이드로피리도(2,3-d)피리다진-1(2H)-일)프로필 4-메틸벤젠설포네이트(120 mg, 83.9%)를 수득하였다.
LCMS: (ESI)　(M+H)+ = 493.9.
단계 F: 2-(2-(5-옥소-6-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-3,4,5,6-테트라하이드로피리도(2,3-d)피리다진-1(2H)-일)프로폭시)이소인돌린 -1,3-디온의 합성
DMF (10 mL) 중의 2-(5-옥소-6-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-3,4,5,6-테트라하이드로피리도(2,3-d)피리다진-1(2H)-일)프로필 4-메틸벤젠설포네이트(150 mg, 0.30 mmol, 1.0 eq.)의 용액에 N-하이드록시프탈이미드(49 mg, 0.30 mmol, 1.0 eq.) 및 K2CO3 (124 mg, 0.90 mmol, 3.0 eq.)를 첨가하였다. 혼합물은 16시간동안 60 ℃에서 교반하였다. 혼합물을 실온으로 냉각시키고 물(50 mL)로 희석시키고 EtOAc(3 x 50mL)로 추출하였다. 유기층을 배합하고 염수 (2 x 60 mL)로 세척하고, 무수 Na2SO4상에서 건조시키고, 진공 농축시켰다. 잔사를 컬럼 크로마토그래피(석유 에테르/EtOAc= 2/1; V/V)로 정제하여 무색 오일로서 2-(2-(5-옥소-6-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-3,4,5,6-테트라하이드로피리도(2,3-d)피리다진-1(2H)-일)프로폭시)이소인돌린-1,3-디온(108 mg, 74.5%)를 수득하였다.
LCMS: (ESI) (M+H)+ = 484.9.
단계 G: 1-(1-(아미노옥시)프로판-2-일)-6-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1,2,3,4-테트라하이드로피리도(2,3-d)피리다진-5(6H)-온의 합성
DCM (4 mL) 및 MeOH (2 mL) 중의 2-(2-((5-옥소-6-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-3,4,5,6-테트라하이드로피리도(2,3-d)피리다진-1(2H)-일)프로폭시)이소인돌린-1,3-디온(90 mg, 0.18 mmol, 1.0 eq.)의 용액에 하이드라진 수화물(14 mg, 0.27 mmol, 1.5 eq.)을 첨가하였다. 혼합물은 1시간동안 35 ℃에서 교반하였다. 반응 혼합물은 진공 농축시켰다. 잔사를 EtOH(20 mL)로 연마하고 여과하고 여과물을 진공 농축시켜 황색 오일로서 1-(1-(아미노옥시)프로판-2-일)-6-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1,2,3,4-테트라하이드로피리도(2,3-d)피리다진-5(6H)-온(70 mg, 수율 100%)을 수득하였다.
LCMS: (ESI) (M+H)+ = 355.2.
단계 H: N-(2-(5-옥소-6-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-3,4,5,6-테트라하이드로피리도(2,3-d)피리다진-1(2H)-일)프로폭시)-2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)아세트아미드의 합성
DMF(5 mL) 중의 1-(1-(아미노옥시)프로판-2-일)-6-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1,2,3,4-테트라하이드로피리도(2,3-d)피리다진-5 (6H)-온(64 mg, 0.18 mmol, 1.0 eq.) 및 2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)아세트산(57 mg, 0.20 mmol, 1.1 eq.)의 용액에 DIPEA(70 mg, 0.54 mmol, 3.0 eq.)와 HATU(82 mg, 0.21 mmol, 1.2 eq.)를 첨가하였다. 혼합물은 1시간동안 35 ℃에서 교반하였다. 반응물은 물(50 mL)로 켄칭시키고 EtOAc (3 x 40 mL)로 추출하였다. 유기층을 배합하고 염수 (2 x 60 mL)로 세척하고, 무수 Na2SO4상에서 건조시키고, 진공 농축시켰다. 잔사를 컬럼 크로마토그래피(석유 에테르/EtOAc= 1/1; V/V)로 정제하여 백색 고체로서 N-(2-(5-옥소-6-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-3,4,5,6-테트라하이드로피리도(2,3-d)피리다진-1(2H)-일)프로폭시)-2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)아세트아미드(60 mg, 53.5%)을 수득하였다.
LCMS: (ESI) (M+H)+ = 626.0.
1H NMR: (400 MHz, CDCl3) δ 9.82 (s, 1H), 8.47 (s, 2H), 7.73 (s, 1H), 5.47 (d, J = 9.6 Hz, 1H), 5.26 (d, J = 9.6 Hz, 1H), 4.84 (d, J = 13.6 Hz, 2H), 4.47 - 4.31 (m, 1H), 4.12 - 3.95 (m , 2H), 3.75 - 3.60 (m , 2H), 3.19 (t, J = 5.2 Hz, 2H), 3.04 - 2.95 (m, 2H), 2.60 - 2.40 (m, 2H), 2.27 - 2.05 (m, 3H), 1.95 - 1.75 (m, 4H), 1.30 - 1.17 (m, 5H), 0.99 - 0.91 (m, 2H), 0.04 (s, 9H).
단계 I: N-(2-(5-옥소-3,4,5,6-테트라하이드로피리도(2,3-d)피리다진-1(2H)-일)프로폭시)-2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)아세트아미드의 합성
DCM (3 mL) 중의 N-(2-(5-옥소-6-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-3,4,5,6-테트라하이드로피리도(2,3-d)피리다진-1(2H)-일)프로폭시)-2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)아세트아미드(60 mg, 0.09 mmol, 1.0 eq.)의 용액에 TFA(1 mL)를 첨가하였다. 수득한 용액은 0.5시간동안 35 ℃에서 교반하였다. 혼합물을 진공하에 농축시키고 잔사에 MeOH (2 mL) 및 K2CO3 (20 mg, 0.14 mmol, 1.5 eq.)을 첨가하였다. 혼합물은 추가로 0.5시간동안 35 ℃에서 교반하였다. 혼합물을 여과하고, 여과물을 prep-HPLC로 정제하여 백색 고체로서 N-(2-(5-옥소-3,4,5,6-테트라하이드로피리도(2,3-d)피리다진-1(2H)-일)프로폭시)-2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)아세트아미드(15.16 mg, 33.6%)을 수득하였다.
LCMS: (ESI)　(M+H)+ = 495.9.
1H NMR: (400 MHz, CDCl3) δ 11.12 (s, 1H), 10.41 (s, 1H), 8.44 (s, 2H), 7.72 (s, 1H), 4.80 (d, J = 12.4 Hz, 2H), 4.47 - 4.36 (m, 1H), 4.15 - 3.93 (m, 2H), 3.18 (t, J = 5.6 Hz, 2H), 2.93 (t, J = 12.4 Hz, 2H), 2.52 - 2.39 (m, 1H), 2.37 - 2.15 (m, 2H), 2.14 - 2.05 (m, 2H), 1.93 - 1.73 (m, 4H), 1.27 - 1.12 (m, 5H).
실시예 38
(S)-2-(1-(7H-피롤로(2,3-d)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)-N-(2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)아세트아미드
단계 A: 2-클로로-7-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-7H-피롤로(2,3-d) 피리미딘의 합성
DMF(5 mL) 중의 2-클로로-7H-피롤로(2,3-d)피리미딘(150 mg, 0.98 mmol, 1.0 eq.)의 혼합물에 N2 대기하에 0℃에서 NaH(60%, 47 mg, 1.18 mmol, 1.2 eq.)를 첨가하였다. 혼합물은 1시간동안 25 ℃에서 교반하였다. 2-(트리메틸실릴)에톡시메틸 클로라이드(179 mg, 1.08 mmol, 1.1 eq.)를 0℃에서 혼합물에 적가하였다. 혼합물은 추가로 2시간동안 25 ℃에서 교반하였다. 혼합물은 물(150 mL)로 켄칭시키고 EtOAc (2 x 100 mL)로 추출하였다. 유기층을 배합하고 염수 (2 x 80 mL)로 세척하고, Na2SO4상에서 건조시키고, 진공 농축시켰다. 잔사를 실리카 겔 크로마토그래피(석유 에테르/EtOAc= 9/1; V/V)로 정제하여 황색 고체로서 2-클로로-7-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-7H-피롤로(2,3-d)피리미딘(160 mg, 57.7%)을 수득하였다.
LCMS: (ESI)　(M+H)+ = 284.2.
단계 B: 메틸 2-(1-(7-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-7H-피롤로(2,3-d)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)아세테이트의 합성
DMF (5 mL) 중의 2-클로로-7-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-7H-피롤로(2,3-d) 피리미딘(160 mg, 0.59 mmol, 1.0 eq.)의 혼합물에 K2CO3(246 mg, 1.78 mmol, 3.0 eq.) 및 메틸 2-(피페리딘-4-일)아세테이트 하이드로클로라이드(114 mg, 0.59 mmol, 1.0 eq.)을 첨가하였다. 혼합물은 1시간동안 100℃에서 교반하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고 물(100 mL)로 희석시키고 EtOAc(2 x 100mL)로 추출하였다. 유기층을 배합하고 염수 (2 x 80 mL)로 세척하고, Na2SO4상에서 건조시키고, 진공 농축시켰다. 잔사를 prep-TLC(석유 에테르/EtOAc= 10/1; V/V)로 정제하여 무색 오일로서 메틸 2-(1-(7-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-7H-피롤로(2,3-d)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)아세테이트(140 mg, 60.5%)를 수득하였다.
LCMS:　(ESI)　(M+H)+ = 404.9.
1H NMR : (400 MHz, CDCl3) δ 8.60 (s, 1H), 6.99 (d, J = 3.6 Hz, 1H), 6.40 (d, J = 3.6 Hz, 1H), 5.52 (s, 2H), 4.89 - 4.81 (m, 2H), 3.74 (s, 3H), 3.60 - 3.56 (m, 2H), 3.02 - 2.89 (m, 2H), 2.32 (d, J = 6.8 Hz, 2H), 2.19 - 2.05 (m, 1H), 1.85 (d, J = 11.6 Hz, 2H), 1.36 - 1.27 (m, 2H), 0.98 - 0.94 (m, 2H), -0.02 (s, 9H).
단계 C: 2-(1-(7-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-7H-피롤로(2,3-d)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)아세트산의 합성
THF(4 mL) 및 H2O(4 mL) 중의 메틸 2-(1-(7-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-7H-피롤로(2,3-d)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)아세테이트 (130 mg, 0.32 mmol, 1.0 eq.)의 혼합물에 LiOH (54 mg, 1.29 mmol, 4.0 eq.)를 첨가하였다. 혼합물은 2시간동안 25 ℃에서 교반하였다. 혼합물은 물(20 mL)로 희석하고 1M HCl을 사용하여 pH 6으로 조정하였다. 혼합물은 EtOAc (2 x 100 mL)로 추출하였다. 유기층을 배합하고, 염수(100 mL)로 세척하고, Na2SO4상에서 건조시키고, 진공하에 농축하여 황색 고체로서 2-(1-(7-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-7H-피롤로(2,3-d)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)아세트산(110 mg, 수율 87.7%)을 수득하였다.
LCMS:　(ESI)　(M+H)+ = 390.9.
단계 D: (S)-N-(2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)-2-(1-(7-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-7H-피롤로(2,3-d)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)아세트아미드의 합성
DMF(5 mL) 중의 2-(1-(7-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-7H-피롤로(2,3-d)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)아세트산(110 mg, 0.28 mmol, 1.0 eq.)의 혼합물에 (S)-5-((1-(아미노옥시)프로판-2-일)아미노)-4-(트리플루오로메틸)-2-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)피리다진-3(2H)-온(119 mg, 0.31 mmol, 1.1 eq.), DIPEA(0.14 mL, 0.85 mmol, 3.0 eq.) 및 HATU(129 mg, 0.34 mmol, 1.2 eq.)를 첨가하였다. 혼합물은 1시간동안 25 ℃에서 교반하였다. 반응 혼합물은 물(100 mL)로 켄칭시키고 EtOAc (2 x 150 mL)로 추출하였다. 유기층을 배합하고 염수 (2 x 80 mL)로 세척하고, Na2SO4상에서 건조시키고, 진공 농축시켰다. 잔사를 실리카 겔 크로마토그래피(석유 에테르/EtOAc= 1/1; V/V)로 정제하여 담황색 오일로서 (S)-N-(2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)-2-(1-(7-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-7H-피롤로(2,3-d)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)아세트아미드(110 mg, 51.7%)을 수득하였다.
LCMS: (ESI) (M+H)+ = 755.4.
단계 E: (S)-2-(1-(7H-피롤로(2,3-d)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)-N-(2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)아세트아미드의 합성
DCM (6 mL) 중의 (S)-N-(2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)-2-(1-(7-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-7H-피롤로(2,3-d)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)아세트아미드(95 mg, 0.13 mmol, 1.0 eq.)의 혼합물에 TFA(2 mL)를 첨가하였다. 혼합물은 1시간동안 25 ℃에서 교반하였다. 혼합물을 포화 NaHCO3 수용액(50 mL)으로 켄칭시키고 DCM(3 x 100mL)으로 추출하였다. 유기층을 배합하고 Na2SO4상에서 건조시키고, 진공 농축시켰다. 잔사는 MeOH (3 mL)에 재용해시키고, K2CO3 (81 mg, 0.45 mmol)를 첨가하였다. 혼합물은 추가로 1시간동안 25 ℃에서 교반하였다. 혼합물을 여과하고 여과물을 prep-HPLC로 정제하여 백색 고체로서 (S)-2-(1-(7H-피롤로(2,3-d)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)-N-(2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)아세트아미드(8.03 mg, 12.9%)을 수득하였다.
LCMS: (ESI)　(M+H)+ = 495.2.
1H NMR: (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 12.49 (s, 1H), 11.26 (s, 1H), 11.11 (s, 1H), 8.57 (s, 1H), 7.91 (s, 1H), 7.05 (dd, J = 3.6, 2.0 Hz, 1H), 6.68 - 6.55 (m, 1H), 6.29 (dd, J = 3.6, 2.0 Hz, 1H), 4.63 (d, J = 12.8 Hz, 2H), 4.27 - 4.13 (m, 1H), 3.95 - 3.80 (m, 2H), 2.91 - 2.76 (m, 2H), 2.03 - 1.85 (m, 3H), 1.66 (d, J = 12.4 Hz, 2H), 1.19 (d, J = 6.8 Hz, 3H), 1.16 - 1.04 (m, 2H).
실시예 39
(S)-2-(1-(6-플루오로퀴나졸린-2-일)피페리딘-4-일)-N-(2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)아세트아미드
단계 A: 2-클로로-6-플루오로퀴나졸린의 합성
DCM (7 mL) 중의 2,4-디클로로-6-플루오로퀴나졸린(350mg, 1.61mmol, 1.0 eq.)의 용액에 NH3-H2O(1mL) 및 포화 NaCl 수용액(7mL)을 첨가하였다. 이어서 Zn 분말 (316 mg, 4.84 mmol, 3.0 eq.)을 혼합물에 첨가하였다. 혼합물은 N2 대기하에 3시간동안 40 ℃에서 교반하였다. 혼합물은 실온으로 냉각시키고 DCM(15 mL)으로 희석하였다. 유기층을 포화 NH4Cl 수용액 (2 x 10 mL)으로 세척하고, Na2SO4상에서 건조시키고, 진공 농축시켰다. 잔사를 컬럼 크로마토그래피(석유 에테르/EtOAc=2/1; V/V)로 정제하여 황색 고체로서 2-클로로-6-플루오로퀴나졸린(150 mg, 50.9%)를 수득하였다.
1H NMR: (400 MHz, CDCl3)　δ　9.26 (s, 1H), 8.04 - 7.97 (m, 1H), 7.77 - 7.69 (m, 1H), 7.56 (dd, J = 7.6, 2.4 Hz, 1H).
단계 B: 메틸 2-(1-(6-플루오로퀴나졸린-2-일)피페리딘-4-일)아세테이트의 합성
NMP(8 mL) 중의 메틸 2-(피페리딘-4-일)아세테이트 하이드로클로라이드(145 mg, 0.75 mmol, 1.05 eq.)와 DIPEA(276 mg, 2.13 mmol, 3.0 eq.)의 혼합물에 2-클로로-6-플루오로퀴나졸린(130 mg, 0.71 mmol, 1.0 eq)을 첨가하였다. 혼합물은 2시간동안 70℃에서 교반하였다. 혼합물을 실온으로 냉각시키고 물(30 mL)로 켄칭시키고 EtOAc(3 x 30 mL)로 추출하였다. 유기층을 배합하고 염수 (2 x 30 mL)로 세척하고, Na2SO4상에서 건조시키고, 진공 농축시켰다. 잔사를 컬럼 크로마토그래피(석유 에테르/EtOAc= 2/1; V/V)로 정제하여 백색 고체로서 2-(1-(6-플루오로퀴나졸린-2-일)피페리딘-4-일)아세테이트(150 mg, 69.4%)을 수득하였다.
LCMS:　(ESI)　(M+H)+ = 304.2.
1H NMR: (400 MHz,　DMSO-d 6 )　δ 9.17 (s, 1H), 7.69 - 7.58 (m, 2H), 7.57 - 7.49 (m, 1H), 4.84 - 4.73 (m, 2H), 3.61 (s, 3H), 2.96 (td, J = 12.8, 2.4 Hz, 2H), 2.29 (d, J = 7.2 Hz, 2H), 1.95 - 2.06 (m, 1H), 1.80 - 1.70 (m, 2H),1.18 - 1.13 (m, 2H).
단계 C: 2-(1-(6-플루오로퀴나졸린-2-일)피페리딘-4-일)아세트산의 합성
THF(2 mL), MeOH(1mL) 및 H2O(1 mL)의 혼합 용액 중의 메틸 2-(1-(6-플루오로퀴나졸린-2-일)피페리딘-4-일)아세테이트 (145 mg, 0.48 mmol, 1.0 eq.)의 혼합물에 수산화리튬 (80 mg, 1.92 mmol, 4.0 eq.)를 첨가하였다. 혼합물은 12시간동안 50℃에서 교반하였다. 혼합물은 실온으로 냉각시키고 물(6 mL)로 희석하였다. 혼합물은 1M HCl을 사용하여 pH 6으로 조정하였다. 혼합물은 EtOAc (3 x 10 mL)로 추출하였다. 유기층을 배합하고, 염수(10 mL)로 세척하고, Na2SO4상에서 건조시키고, 진공하에 농축하여 백색 고체로서 2-(1-(6-플루오로퀴나졸린-2-일)피페리딘-4-일)아세트산(110 mg, 79.5%)을 수득하였다.
LCMS: (ESI)　(M+H)+ = 290.2.
단계 D: (S)-2-(1-(6-플루오로퀴나졸린-2-일)피페리딘-4-일)-N-(2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)아세트아미드의 합성
DMF(5 mL) 중의 2-(1-(6-플루오로퀴나졸린-2-일)피페리딘-4-일)아세트산(100 mg, 0.35 mmol, 1.0 eq.) 및 (S)-5-((1-(아미노옥시)프로판-2-일)아미노)-4-(트리플루오로메틸)-2-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)피리다진-3(2H)-온(159 mg, 0.42 mmol, 1.2 eq.)의 혼합물에 DIPEA(134 mg, 1.05 mmol, 3.0 eq.) 및 HATU(158 mg, 0.42 mmol, 1.2 eq.)를 첨가하였다. 혼합물은 2시간동안 25 ℃에서 교반하였다. 혼합물은 물(10 mL)로 희석하고 EtOAc (3 x 15 mL)로 추출하였다. 유기층을 배합하고 포화 NH4Cl 수용액 (2 x 20 mL)으로 세척하고, Na2SO4상에서 건조시키고, 진공 농축시켰다. 잔사를 실리카 겔 크로마토그래피(EtOAc/석유 에테르= 1/1, V/V)로 정제하여 황색 고체로서 (S)-2-(1-(6-플루오로퀴나졸린-2-일)피페리딘-4-일)-N-(2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)아세트아미드(195 mg, 86.3 %)을 수득하였다.
LCMS: (ESI) (M+H)+ = 654.2.
단계 E: (S)-2-(1-(6-플루오로퀴나졸린-2-일)피페리딘-4-일)-N-(2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)아세트아미드의 합성
DCM(4.5 mL) 중의 (S)-2-(1-(6-플루오로퀴나졸린-2-일)피페리딘-4-일)-N-(2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)아세트아미드(140 mg, 0.21 mmol, 1.0 eq.)의 혼합물에 TFA(1.5 mL)를 첨가하였다. 혼합물은 0.5시간동안 25 ℃에서 교반하였다. 혼합물은 진공하에 농축시켰다. MeOH (4 mL) 및 K2CO3 (176 mg, 1.26 mmol, 6.0 eq.)을 수득한 혼합물에 첨가하였다. 혼합물은 추가로 0.5시간동안 25 ℃에서 교반하였다. 혼합물을 여과하고 여과물을 prep-HPLC로 정제하여 백색 고체로서 (S)-2-(1-(6-플루오로퀴나졸린-2-일)피페리딘-4-일)-N-(2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)아세트아미드(14.73 mg, 13.1%)를 수득하였다.
LCMS: (ESI) (M+H)+ = 524.2.
1H NMR:　(400　MHz,　DMSO-d 6 ) δ 12.52 (s, 1H), 11.15 (s, 1H), 9.20 (s, 1H), 7.93 (s, 1H), 7.70 - 7.61 (m, 2H), 7.58 - 7.35 (m, 1H), 6.69 - 6.58 (m, 1H), 4.78 (d, J = 13.2 Hz, 2H), 4.30 - 4.16 (m, 1H), 4.00 - 3.81 (m, 2H), 2.97 (t, J = 12.0 Hz, 2H), 2.07 - 1.99 (m, 1H), 1.95 (d, J = 6.8 Hz, 2H), 1.74 (d, J = 11.2 Hz, 2H), 1.22 (d, J = 6.4 Hz, 3H), 1.18 - 1.07 (m, 2H).
실시예 40
(S)-2-(1-(4-(하이드록시메틸)-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)피페리딘-4-일)-N-(2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)아세트아미드
단계 A: 2-(4-(2-메톡시-2-옥소에틸)피페리딘-1-일)-5-(트리플루오로메틸)이소니코틴산의 합성
NMP (8 mL) 중의 메틸 2-(피페리딘-4-일)아세테이트(380 mg, 1.97 mmol, 1.5 eq.)의 용액에 DIPEA(1 g, 7.92 mmol, 6.0 eq.) 및 2-클로로-5-(트리플루오로메틸)이소니코틴산(300 mg, 1.32 mmol, 1 eq.)을 첨가하고, 수득한 혼합물을 밀봉 튜브에서 120 ℃에서 16 시간 동안 교반하였다. 혼합물은 실온으로 냉각시키고 물(80 mL)로 희석하였다. 혼합물은 EtOAc (3 x 50 mL)로 추출하였다. 물 상은 2M HCl로 pH 6으로 조정하고 EtOAc(3 x 50 mL)로 추출하였다.
유기층을 배합하고, Na2SO4상에서 건조시키고 감압하에 농축시켰다. 잔사를 컬럼 크로마토그래피(DCM/MeOH= 95/5, V/V)로 정제하여 무색 오일로서 2-(4-(2-메톡시-2-옥소에틸)피페리딘-1-일)-5-(트리플루오로메틸)이소니코틴산(340 mg, 51.8%)를 수득하였다.
LCMS: (ESI) (M+H)+ = 347.1.
단계 B: 메틸 2-(1-(4-(하이드록시메틸)-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)피페리딘-4-일)아세테이트의 합성
THF(30 mL) 중의 2-(4-(2-메톡시-2-옥소에틸)피페리딘-1-일)-5-(트리플루오로메틸)이소니코틴산(280 mg, 0.81 mmol, 1 eq.)의 용액에 THF 중의 BH3(1.62 mL, 1.62 mmol, 2.0 eq.)을 첨가하였다. 혼합물은 25℃에서 16시간 동안 교반하였다. 혼합물은 MeOH로 켄칭하였다. 혼합물은 진공하에 농축시켰다. 잔사를 실리카 겔 크로마토그래피(석유 에테르/EtOAc= 2/1, V/V)로 정제하여 무색 오일로서 메틸 2-(1-(4-(하이드록시메틸)-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)피페리딘-4-일)아세테이트(130 mg, 수율 48.6%)를 수득하였다.
LCMS: (ESI) (M+H)+ = 333.1.
1H NMR: (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 8.26 (s, 1H), 7.04 (s, 1H), 5.56 (t, J = 5.7 Hz, 1H), 4.55 (d, J = 5.6 Hz, 2H), 4.45 - 4.31 (m, 2H), 3.60 (s, 3H), 2.94 (td, J = 12.8, 2.6 Hz, 2H), 2.28 (d, J = 7.0 Hz, 2H), 2.08 - 1.96 (m, 1H), 1.73 (dd, J = 13.7, 3.6 Hz, 2H), 1.11 - 1.18 (m, 2H).
단계 C: 2-(1-(4-(하이드록시메틸)-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)피페리딘-4-일)아세트산의 합성
THF(3 mL) 및 물(3 mL) 중의 메틸 2-(1-(4-(하이드록시메틸)-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)피페리딘-4-일)아세테이트 (130 mg, 0.392 mmol, 1.0 eq.)의 용액에 LiOH (38 mg, 1.568 mmol, 4.0 eq.)를 첨가하였다. 상기 혼합물을 40℃에서 1시간 동안 교반하였다. 혼합물은 물(15 mL)로 희석하고 EtOAc (3 x 10 mL)로 추출하였다. 물 층은 2M HCl을 사용하여 pH 6으로 조정하였다. 혼합물을 EtOAc(3 x 15 mL)로 추출하고, Na2SO4상에서 건조시키고, 진공하에 농축하여 무색 오일로서 2-(1-(4-(하이드록시메틸)-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)피페리딘-4-일)아세트산(90 mg, 수율 72.5%)을 수득하였다.
LCMS: (ESI) (M+H)+ = 319.2.
단계 D: (S)-2-(1-(4-(하이드록시메틸)-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)피페리딘-4-일)-N-(2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)아세트아미드의 합성
THF(3.6 mL) 중의 2-(1-(4-(하이드록시메틸)-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)피페리딘-4-일)아세트산(92 mg, 0.24 mmol, 1 eq.)의 용액에 DIPEA (62 mg, 0.48 mmol, 2.0 eq.) 및 HATU (137 mg, 0.36 mmol, 1.5 eq.)을 첨가하고, 이어서 (S)-5-((1-(아미노옥시)프로판-2-일)아미노)-4-(트리플루오로메틸)-2-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)피리다진-3(2H)-온 (80 mg, 0.252 mmol, 1.05 eq.)을 적가하였다. 수득한 혼합물은 1시간동안 25 ℃에서 교반하였다. 반응 혼합물은 물(10 mL)로 켄칭시키고 EtOAc (3 x 10 mL)로 추출하였다. 유기층을 배합하고 염수 (10 mL)로 세척하고, Na2SO4상에서 건조시키고, 진공 농축시켰다. 잔사를 실리카 겔 크로마토그래피(석유 에테르/EtOAc= 3/7, V/V)로 정제하여 무색 오일로서 (S)-2-(1-(4-(하이드록시메틸)-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)피페리딘-4-일)-N-(2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)아세트아미드(120 mg, 수율 62.1%)을 수득하였다.
LCMS: (ESI) (M+H)+ = 683.4.
단계 E: (S)-2-(1-(4-(하이드록시메틸)-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)피페리딘-4-일)-N-(2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)아세트아미드의 합성
DCM(2 mL) 중의 (S)-2-(1-(4-(하이드록시메틸)-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)피페리딘-4-일)-N-(2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)아세트아미드(120 mg, 0.176 mmol, 1.0 eq.)의 용액에 TFA(0.2 mL)를 첨가하였다. 수득한 혼합물을 20분 동안 25 ℃에서 교반하였다. 혼합물을 포화 NaHCO3 수용액(5mL)으로 중화시키고 DCM(3 x 10mL)으로 추출하였다. 유기층을 배합하고 Na2SO4상에서 건조시키고, 진공 농축시켰다. 잔사는 MeOH (2 mL)에 재용해시키고, K2CO3 (83 mg, 0.6 mmol, 3.0 eq.)를 첨가하였다. 혼합물은 추가로 1시간동안 25 ℃에서 교반하였다. 반응 혼합물을 여과하고 여과물을 실리카 겔 크로마토그래피(석유 에테르/EtOAc= 1/100, V/V)로 정제하여 백색 고체로서 (S)-2-(1-(4-(하이드록시메틸)-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)피페리딘-4-일)-N-(2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)아세트아미드(25.5 mg, 수율 28.1%)을 수득하였다.
LCMS: (ESI) (M+H)+ = 553.4.
1H NMR: (400 MHz, DMSO) δ 8.28 (s, 1H), 7.93 (s, 1H), 7.06 (s, 1H), 6.64 (s, 1H), 4.57 (s, 2H), 4.39 (d, J = 13.1 Hz, 2H), 4.30 - 4.17 (m, 1H), 3.99 - 3.79 (m, 2H), 2.95 (t, J = 13.2 Hz, 2H), 2.13 - 1.85 (m, 3H), 1.73 (d, J = 15.1 Hz, 2H), 1.21 (d, J = 6.4 Hz, 3H), 1.18 - 1.06 (m, 2H).
실시예 41
(S)-N-(2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)-2-(1-(티아졸-2-일)피페리딘-4-일)아세트아미드
단계 A: 메틸 2-(1-(티아졸-2-일)피페리딘-4-일)아세테이트의 합성
DMF(16 mL) 중의 2-브로모티아졸(800 mg, 4.88 mmol, 1.0 eq.)의 용액에 Cs2CO3(4.77 g, 14.63 mmol, 3.0 eq.)와 메틸 2-(피페리딘-4-일)아세테이트 하이드로클로라이드(1.13 g, 5.85 mmol, 1.2 eq.)을 첨가하였다. 혼합물은 16시간동안 100℃에서 교반하였다. 혼합물은 실온으로 냉각시키고 물(50 mL)로 희석하였다. 혼합물은 EtOAc (2 x 60 mL)로 추출하였다. 유기층을 배합하고 염수 (2 x 60 mL)로 세척하고, Na2SO4상에서 건조시키고, 진공 농축시켰다. 잔사를 실리카 겔 크로마토그래피(석유 에테르/EtOAc= 4/1; V/V)로 정제하여 담황색 고체로서 메틸 2-(1-(티아졸-2-일)피페리딘-4-일)아세테이트(250 mg, 21.3%)을 수득하였다.
LCMS: (ESI)　(M+H)+ = 241.2.
단계 B: 2-(1-(티아졸-2-일)피페리딘-4-일)아세트산의 합성
THF(3 mL) 및 H2O(1 mL) 중의 메틸 2-(1-(티아졸-2-일)피페리딘-4-일)아세테이트 (150 mg, 0.62 mmol, 1.0 eq.)의 혼합물에 NaOH (75 mg, 1.87 mmol, 3.0 eq.)를 첨가하였다. 혼합물은 3시간동안 50℃에서 교반하였다. 혼합물은 실온으로 냉각시키고 물(30 mL)로 희석하고 1M HCl을 사용하여 pH 6으로 조정하였다. 혼합물은 EtOAc (2 x 50 mL)로 추출하였다. 유기층을 배합하고 Na2SO4상에서 건조시키고, 진공하에 농축하여 백색 고체로서 2-(1-(티아졸-2-일)피페리딘-4-일)아세트산(140 mg, 99.1%)을 수득하였다.
LCMS: (ESI)　(M+H)+ = 227.2.
1H NMR: (400 MHz, CDCl3) δ 7.10 (d, J = 3.7 Hz, 1H), 6.46 (d, J = 3.6 Hz, 1H), 3.99 - 3.86 (m, 2H), 3.62 (s, 3H), 2.96 (td, J = 12.7, 2.9 Hz, 2H), 2.22 (d, J = 7.0 Hz, 2H), 2.04 - 1.89 (m, 1H), 1.80 - 1.70 (m, 2H), 1.31 (qd, J = 12.4, 4.4 Hz, 2H).
단계 C: (S)-N-(2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)-2-(1-(티아졸-2-일)피페리딘-4-일)아세트아미드의 합성
DMF(3 mL) 중의 2-(1-(티아졸-2-일)피리미딘-4-일)아세트산(142 mg, 0.63 mmol, 1.2 eq.)의 혼합물에 (S)-5-((1-(아미노옥시)프로판-2-일)아미노)-4-(트리플루오로메틸)-2-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)피리다진-3(2H)-온(200 mg, 0.52 mmol, 1.0 eq.), DIPEA(203 mg, 1.57 mmol, 3.0 eq.)와 HATU(239 mg, 0.63 mmol, 1.2 eq.)를 첨가하였다. 혼합물은 2시간동안 25 ℃에서 교반하였다. 혼합물은 물(30 mL)로 켄칭시키고 EtOAc (2 x 50 mL)로 추출하였다. 유기층을 배합하고 염수 (2 x 50 mL)로 세척하고, Na2SO4상에서 건조시키고, 진공 농축시켰다. 잔사를 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(석유 에테르/EtOAc= 3/7; V/V)로 정제하여 담황색 고체로서 (S)-N-(2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)-2-(1-(티아졸-2-일)피페리딘-4-일)아세트아미드(150 mg, 수율 48.6%)를 수득하였다.
LCMS:　(ESI)　(M+H)+ = 591.2.
단계 D: (S)-N-(2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)-2-(1-(티아졸-2-일)피페리딘-4-일)아세트아미드의 합성
DCM (6 mL) 중의 (S)-N-(2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)-2-(1-(티아졸-2-일)피페리딘-4-일)아세트아미드(150 mg, 0.25 mmol, 1.0 eq.)의 혼합물에 TFA(1.5 mL)를 첨가하였다. 혼합물은 1시간동안 25 ℃에서 교반하였다. 혼합물은 진공하에 농축시켰다. 잔사는 MeOH (3 mL)에 재용해시키고, K2CO3 (70 mg, 0.51 mmol)를 첨가하였다. 혼합물은 추가로 1시간동안 25 ℃에서 교반하였다. 혼합물을 여과하고, 여과물을 prep-HPLC(FA)로 정제하여 백색 고체로서 (S)-N-(2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)-2-(1-(티아졸-2-일)피페리딘-4-일)아세트아미드(17.56 mg, 15.0%)을 수득하였다.
LCMS: (ESI)　(M+H)+ = 461.2.
1H NMR: (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 12.49 (s, 1H), 11.14 (s, 1H), 7.91 (s, 1H), 7.12 (d, J = 3.6 Hz, 1H), 6.79 (d, J = 3.6 Hz, 1H), 6.65 - 6.56 (m, 1H), 4.25 - 4.15 (m, 1H), 3.94 - 3.79 (m, 4H), 2.97 (t, J = 12.0 Hz, 2H), 1.98 - 1.83 (m, 3H), 1.69 (d, J = 12.8 Hz, 2H), 1.26 - 1.14 (m, 5H).
실시예 42
(S)-N-(2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)-2-(1-(5-옥소-6,7-디하이드로-5H-사이클로펜타(d)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)아세트아미드
단계 A: 2-((디메틸아미노)메틸렌)사이클로펜탄-1,3-디온의 합성
N,N-디메틸포름아미드 디메틸 아세탈(10 mL) 중의 사이클로펜탄-1,3-디온(5.00 g, 50.97 mmol, 1.0 eq.)의 혼합물을 25℃에서 18시간 동안 교반하였다. 혼합물은 진공하에 농축시켰다. 잔사를 실리카 겔 크로마토그래피(DCM/MeOH=9/1; V/V)로 정제하여 황색 고체로서 2-((디메틸아미노)메틸렌)사이클로펜탄-1,3-디온(4.00 g, 수율 49.1%)을 수득하였다.
LCMS: (ESI)　(M+H)+ = 154.1.
1H NMR: (400 MHz, CDCl3) δ 7.47 (s, 1H), 3.76 (s, 3H), 3.39 (s, 3H), 2.54 (s, 4H).
단계 B: 2-(메틸티오)-6,7-디하이드로-5H-사이클로펜타(d)피리미딘-5-온의 합성
AcOH (15 mL) 중의 2-(디메틸아미노)메틸렌)사이클로펜탄-1,3-디온(3.00 g, 19.59 mmol, 1.00 eq.)의 혼합물에 2-메틸-2-티오슈도우레아 설페이트(4.06 g, 21.55 mmol, 1.1 eq.)을 첨가하였다. 혼합물은 18시간동안 120℃에서 교반하였다. 혼합물은 실온으로 냉각시키고 혼합물은 포화 NH3Cl 수용액(60 mL)으로 pH 7로 중화시켰다. 혼합물은 EtOAc (2 x 250 mL)로 추출하였다. 유기층을 배합하고 염수 (100 mL)로 세척하고, Na2SO4상에서 건조시키고, 진공 농축시켰다. 잔사를 컬럼 크로마토그래피(석유 에테르/EtOAc= 7/3; V/V)로 정제하여 백색 고체로서 2-(메틸티오)-6,7-디하이드로-5H-사이클로펜타(d)피리미딘-5-온(370 mg, 10.5%)을 수득하였다.
LCMS: (ESI)　(M+H)+ = 181.4.
1H NMR: (400 MHz, CDCl3) δ 8.81 (s, 1H), 3.21 - 3.15 (m, 2H), 2.77 - 2.71 (m, 2H), 2.65 (s, 3H).
단계 C: 2-(메틸설피닐)-6,7-디하이드로-5H-사이클로펜타(d)피리미딘-5-온의 합성
DCM (10 mL) 중의 2-(메틸티오)-6,7-디하이드로-5H-사이클로펜타(d)피리미딘-5-온(200 mg, 1.11 mmol, 1.00 eq.)의 혼합물에 mCPBA(226 mg, 1.11 mmol, 1.0 eq.)을 첨가하였다. 혼합물은 2시간동안 25 ℃에서 교반하였다. 혼합물은 물(100 mL)로 켄칭시키고 DCM (3 x 100 mL)로 추출하였다. 유기층을 배합하고, 염수(100 mL)로 세척하고, Na2SO4상에서 건조시키고, 진공하에 농축하여 백색 고체로서 2-(메틸설피닐)-6,7-디하이드로-5H-사이클로펜타(d)피리미딘-5- 온(260 mg, 조 생성물)을 수득하였다.
LCMS: (ESI)　(M+H)+ = 197.0.
단계 D: 메틸 2-(1-(5-옥소-6,7-디하이드로-5H-사이클로펜타(d)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)아세테이트의 합성
DMF (8 mL) 중의 2-(메틸설피닐)-6,7-디하이드로-5H-사이클로펜타(d)피리미딘-5-온(500 mg, 2.36 mmol, 1.00 eq.)의 혼합물에 메틸 2-(피페리딘-4-일)아세테이트 하이드로클로라이드(500 mg, 2.59 mmol, 1.0 eq.) 및 DIPEA(1.17 mL, 7.07 mmol, 3.0 eq.)를 첨가하였다. 혼합물은 2시간 동안 80 ℃에서 교반하였다. 혼합물은 실온으로 냉각시키고 물(200 mL)로 희석하였다. 혼합물은 EtOAc (2 x 100 mL)로 추출하였다. 유기층을 배합하고 염수 (100 mL)로 세척하고, Na2SO4상에서 건조시키고, 진공 농축시켰다. 잔사를 컬럼 크로마토그래피(석유 에테르/EtOAc= 7/3; V/V)로 정제하여 황색 고체로서 메틸 2-(1-(5-옥소-6,7-디하이드로-5H-사이클로펜타(d)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)아세테이트(270 mg, 수율 39.6%)을 수득하였다.
LCMS: (ESI)　(M+H)+ = 289.9.
1H NMR: (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 8.62 (s, 1H), 4.82 (d, J = 13.2 Hz, 2H), 3.62 (s, 3H), 3.05 (t, J = 12.4 Hz, 2H), 2.96 - 2.91 (m, 2H), 2.56 - 2.54 (m, 2H), 2.31 (d, J = 7.2 Hz, 2H), 2.12 - 2.00 (m, 1H), 1.78 (d, J = 12.0 Hz, 2H), 1.24 - 1.08 (m, 2H).
단계 E: 2-(1-(5-옥소-6,7-디하이드로-5H-사이클로펜타(d)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)아세트산의 합성
THF(2 mL) 및 H2O(1 mL) 중의 메틸 2-(1-(5-옥소-6,7-디하이드로-5H-사이클로펜타(d)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)아세테이트 (50 mg, 0.17 mmol, 1.0 eq.)의 혼합물에 LiOH (29 mg, 0.69 mmol, 4.0 eq.)를 첨가하였다. 혼합물은 1시간동안 25 ℃에서 교반하였다. 혼합물은 물(30 mL)로 희석하고 1M HCl로 pH 6으로 조정하고 EtOAc(2 x 50 mL)로 추출하였다. 유기층을 배합하고, 염수(100 mL)로 세척하고, Na2SO4상에서 건조시키고, 진공하에 농축하여 황색 고체로서 2-(1-(5-옥소-6,7-디하이드로-5H-사이클로펜타(d)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일리덴)아세트산(45 mg, 조 생성물)을 수득하였다.
LCMS:　(ESI)　(M+H)+ = 276.2.
단계 F: (S)-N-(2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)-2-(1-(5-옥소-6,7-디하이드로-5H-사이클로펜타(d)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)아세트아미드의 합성
DMF(2 mL) 중의 2-(1-(5-옥소-6,7-디하이드로-5H-사이클로펜타(d)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)아세트산(45 mg, 0.16 mmol, 1.0 eq.)의 혼합물에 (S)-5-((1-(아미노옥시)프로판-2-일)아미노)-4-(트리플루오로메틸)-2-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)피리다진-3(2H)-온(69 mg, 0.18 mmol, 1.1 eq.), DIPEA(63 mg, 0.49 mmol, 3.0 eq.) 및 HATU(75 mg, 0.20 mmol, 1.2 eq.)를 첨가하였다. 혼합물은 1시간동안 25 ℃에서 교반하였다. 반응 혼합물은 물(100 mL)로 켄칭시키고 EtOAc (2 x 100 mL)로 추출하였다. 유기층을 배합하고 염수 (2 x 80 mL)로 세척하고, Na2SO4상에서 건조시키고, 진공 농축시켰다. 잔사를 컬럼 크로마토그래피(석유 에테르/EtOAc= 7/3; V/V)로 정제하여 황색 고체로서 (S)-N-(2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)-2-(1-(5-옥소-6,7-디하이드로-5H-사이클로펜타(d)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)아세트아미드(70 mg, 64.5%)를 수득하였다.
LCMS: (ESI) (M+H)+ = 640.2.
단계 G: (S)-N-(2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)-2-(1-(5-옥소-6,7-디하이드로-5H-사이클로펜타(d)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)아세트아미드의 합성
DCM (3 mL) 중의 (S)-N-(2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)-2-(1-(5-옥소-6,7-디하이드로-5H-사이클로펜타(d)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)아세트아미드(70 mg, 0.11 mmol, 1.0 eq.)의 혼합물에 TFA(1 mL)를 첨가하였다. 혼합물은 1시간동안 25 ℃에서 교반하였다. 혼합물을 포화 NaHCO3 수용액(50 mL)으로 켄칭시키고 DCM(3 x 100mL)으로 추출하였다. 유기층을 배합하고 Na2SO4상에서 건조시키고, 진공 농축시켰다. 잔사는 MeOH (3 mL)에 재용해시키고, K2CO3 (70 mg, 0.50 mmol, 4.6 eq.)를 첨가하였다. 혼합물은 추가로 1시간동안 25 ℃에서 교반하였다. 혼합물을 여과하고, 여과물을 prep-HPLC(FA)로 정제하여 백색 고체로서 (S)-N-(2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)-2-(1-(5-옥소-6,7-디하이드로-5H-사이클로펜타(d)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)아세트아미드(18.48 mg, 32.5%)을 수득하였다.
LCMS: (ESI)　(M+H)+ = 510.2.
1H NMR: (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 12.49 (s, 1H), 11.13 (s, 1H), 8.61 (s, 1H), 7.91 (s, 1H), 6.64 - 6.58 (m, 1H), 4.78 (d, J = 12.8 Hz, 2H), 4.24 - 4.16 (m, 1H), 3.93 - 3.82 (m, 2H), 3.02 (t, J = 12.4 Hz, 2H), 2.94 - 2.89 (m, 2H), 2.54 - 2.52 (m, 2H), 2.07 - 1.98 (m, 1H), 1.93 (d, J = 6.8 Hz, 2H), 1.74 (d, J = 12.8 Hz, 2H), 1.19 (d, J = 6.4 Hz, 3H), 1.16 - 1.08 (m, 2H).
실시예 43
2-(1-(5-하이드록시-6,7-디하이드로-5H-사이클로펜타(d)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)-N-((S)-2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)아세트아미드
단계 A: 2-(1-(5-하이드록시-6,7-디하이드로-5H-사이클로펜타(d)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)-N-((S)-2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)아세트아미드의 합성
THF (1 mL) 중의 (S)-N-(2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)-2-(1-(5-옥소-6,7-디하이드로-5H-사이클로펜타(d)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)아세트아미드(40 mg, 0.08 mmol, 1.0 eq.)의 혼합물에 0℃에서 DIBAL-H(1M, 0.24 mL, 3.0 eq.)를 첨가하였다. 혼합물은 2시간동안 25 ℃에서 교반하였다. 혼합물은 물(20 mL)로 켄칭하였다. 혼합물은 EtOAc (3 x 30 mL)로 추출하였다. 유기층을 배합하고 Na2SO4상에서 건조시키고, 진공 농축시켰다. 잔사를 prep-HPLC로 정제하여 백색 고체로서 2-(1-(5-하이드록시-6,7-디하이드로-5H-사이클로펜타(d)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)-N-((S)-2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)아세트아미드(0.94 mg, 수율 2.3%)을 수득하였다.
LCMS:　(ESI)　(M+H)+ = 494.0.
1H NMR: (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 12.49 (s, 1H), 11.13 (s, 1H), 8.23 (s, 1H), 7.90 (s, 1H), 6.62 (s, 1H), 5.19 - 5.13 (m, 1H), 5.03 - 4.95 (m, 1H), 4.62 (d, J = 12.8 Hz, 2H), 4.26 - 4.15 (m, 1H), 3.93 - 3.80 (m, 2H), 2.88 - 2.77 (m, 3H), 2.64 - 2.58 (m, 1H), 2.02 - 1.92 (m, 2H), 1.90 (d, J = 6.0 Hz, 2H), 1.78 - 1.73 (m, 1H), 1.67 - 1.62 (m, 2H), 1.19 (d, J = 6.6 Hz, 3H), 1.07 - 1.03 (m, 2H).
실시예 44
(S)-N-(2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)-N-(2-(4-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페라진-1-일)에틸)아세트아미드
단계 A: 3급-부틸 4-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페라진-1-카복실레이트의 합성
NMP(20 mL) 중의 3급-부틸 피페라진-1-카복실레이트(1.00 g, 5.37 mmol, 1.0 eq.)와 DIPEA(2.08 g, 16.11 mmol, 3.0 eq.)의 혼합물에 2-클로로-5-(트리플루오로메틸)피리미딘(0.98 g, 5.37 mmol, 1.0 eq)을 첨가하였다. 혼합물은 12시간 동안 80 ℃에서 교반하였다. 혼합물을 실온으로 냉각시키고 물(40 mL)에 붓고 EtOAc(3 x 40mL)로 추출하였다. 유기층을 배합하고 염수 (2 x 50 mL)로 세척하고, Na2SO4상에서 건조시키고, 진공 농축시켰다. 잔사를 플래시 크로마토그래피(석유 에테르/EtOAc=4/1; V/V)로 정제하여 백색 고체로서 3급-부틸 4-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페라진-1-카복실레이트(1.78 g, 99.5%)를 수득하였다.
LCMS:　(ESI)　(M+H-56)+ = 277.2.
단계 B: 2-(피페라진-1-일)-5-(트리플루오로메틸)피리미딘 하이드로클로라이드의 합성
디옥산(5 mL) 중의 3급-부틸 4-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페라진-1-카복실레이트 (1.78 g, 5.36 mmol)의 혼합물에 HCl/디옥산(4M, 5 mL)을 첨가하였다. 혼합물은 1시간 동안 20 ℃에서 교반하였다. 진공하에 혼합물을 농축시켜 백색 고체로서 2-(피페라진-1-일)-5-(트리플루오로메틸)피리미딘 하이드로클로라이드(1.43 g, 99.4%)를 수득하였다.
LCMS: (ESI) (M+H)+ = 233.2.
단계 C: 2-(4-(2,2-디에톡시에틸)피페라진-1-일)-5-(트리플루오로메틸)피리미딘)의 합성
DMF(10 mL) 중의 2-(피페라진-1-일)-5-(트리플루오로메틸)피리미딘 하이드로클로라이드(300 mg, 1.12 mmol, 1.0 eq.)와 DIPEA(577 mg, 4.48 mmol, 4.0 eq.)의 혼합물에 2-브로모-1,1-디에톡시에탄(264 mg, 1.34 mmol, 1.2 eq)을 첨가하였다. 반응 혼합물은 12시간 동안 80℃에서 교반시켰다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고 물(50 mL)에 붓고 EtOAc(3 x 50 mL)로 추출하였다. 배합된 유기 추출물을 염수(2 x 50 mL)로 세척하고, Na2SO4상에서 건조시키고 여과하고 진공하에 농축시켰다. 혼합물을 플래시 크로마토그래피(석유 에테르/EtOAc=3/2; V/V)로 정제하여 황색 오일로서 2-(4-(2,2-디에톡시에틸)피페라진-1-일)-5-(트리플루오로메틸)피리미딘(140 mg, 36.0 %)를 수득하였다.
LCMS:　(ESI)　(M+H)+ = 349.2.
1H NMR:　(400　MHz,　CDCl3)　δ　8.47 (s, 2H), 4.68 (t, J = 5.2 Hz, 1H), 3.91 (t, J = 4.8, 4H), 3.74 - 3.66 (m, 2H), 3.60 - 3.52 (m, 2H), 2.61 (t, J = 4.8, 4H), 2.59 (d, J = 5.2 Hz, 2H), 1.23 (t, J = 7.2 Hz, 6H).
단계 D: 2-(4-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페 라진-1-일)아세트알데하이드의 합성
HCl/디옥산 (4M, 2 mL) 중의 2-(4-(2,2-디에톡시에틸)피페라진-1-일)-5-(트리플루오로메틸)피리미딘(70 mg, 0.19 mmol, 1.0 eq)의 혼합물을 40 ℃에서 3 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 농축시켜 황색 고체로서 2-(4-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페라진-1-일)아세트알데하이드(50 mg, 94.5%)를 수득하였다.
LCMS: (ESI) (M+H+18)+ = 293.1.
단계 E: (S)-4-(트리플루오로메틸)-5-((1-((2-(4-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페라진-1-일)에틸)아미노)옥시)프로판-2-일)아미노)-2-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)피리다진-3(2H)-온의 합성
MeOH(4 mL) 중의 (S)-5-((1-(아미노옥시)프로판-2-일)아미노)-4-(트리플루오로메틸)-2-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)피리다진-3(2H)-온(58 mg, 0.15 mmol, 1.0 eq.) 및 2-(4-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페라진-1-일)아세트알데하이드(50 mg, 0.18 mmol, 1.1 eq.)의 혼합물에 AcOH(0.02 mL) 및 나트륨 시아노보라누이드(57 mg, 0.91 mmol, 6.0 eq.)를 첨가하였다. 혼합물은 12시간동안 70℃에서 교반하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고 물(10 mL)에 붓고 DCM(3 x 20 mL)로 추출하였다. 유기층을 배합하고 Na2SO4상에서 건조시키고, 진공 농축시켰다. 잔사를 prep-TLC(석유 에테르/EtOAc= 1/1; V/V)로 정제하여 황색 고체로서 (S)-4-(트리플루오로메틸)-5-((1-(((2-(4-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페라진-1-일)에틸)아미노)옥시)프로판-2-일)아미노)-2-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)피리다진-3(2H)-온(50 mg, 51.3%)을 수득하였다.
LCMS: (ESI) (M+H)+ = 641.3.
1H NMR:　(400　MHz,　CDCl3)　δ　8.50 (s, 2H), 7.72 (s, 1H), 6.95 (s, 1H), 5.46 - 5.36 (m, 2H), 4.04 - 3.97 (m, 1H), 3.96 - 3.91 (m, 4H), 3.90 - 3.87 (m, 1H), 3.76 - 3.70 (m, 3H), 3.06 (t, J = 5.6 Hz, 2H), 2.61 - 2.49 (m, 6H), 1.37 (d, J = 6.8 Hz, 3H), 1.02 - 0.95 (m, 2H), 0.03 (s, 9H).
단계 F: (S)-N-(2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)-N-(2-(4-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페라진-1-일)아세트아미드의 합성
DCM(4 mL) 중의 (S)-4-(트리플루오로메틸)-5-((1-(((2-(4-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페라진-1-일)에틸)아미노)옥시)프로판-2-일)아미노)-2-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)피리다진-3(2H)-온(50 mg, 0.07 mmol, 1.0 eq.)의 혼합물에 TEA(36mg, 0.35mmol, 5.0eq.), DMAP(35mg, 0.28mmol, 4.0 eq.) 및 Ac2O(15mg, 0.14mmol, 2.0 eq.)를 첨가하였다. 혼합물은 1시간 동안 25 ℃에서 교반하였다. 반응 혼합물은 물(10 mL)로 켄칭시키고 DCM (3 x 20 mL)로 추출하였다. 유기 추출물을 배합하고 Na2SO4상에서 건조시키고, 진공 농축시켰다. 잔사를 prep-TLC(석유 에테르/EtOAc= 1/1; V/V)로 정제하여 담황색 고체로서 (S)-N-(2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)-N-(2-(4-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페라진-1-일)에틸)아세트아미드(40.0 mg, 83.4%)을 수득하였다.
LCMS: (ESI) (M+H)+ = 683.3.
단계 G: (S)-N-(2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)-N-(2-(4-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페라진-1-일)에틸)아세트아미드의 합성
DCM (1.5 mL) 중의 (S)-N-(2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)-N-(2-(4-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페라진-1-일)아세트아미드(35 mg, 0.05 mmol, 1.0 eq.)의 혼합물에 TFA(0.5 mL)를 첨가하였다. 혼합물은 0.5시간동안 25 ℃에서 교반하였다. 반응 혼합물은 진공 농축시켰다. 잔사에 MeOH (2 mL) 및 K2CO3 (20 mg, 0.15 mmol)를 첨가하였다. 혼합물은 추가로 0.5시간동안 25 ℃에서 교반하였다. 혼합물을 여과하고, 여과물을 prep-HPLC로 정제하여 백색 고체로서 (S)-N-(2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)-N-2-(4-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페라진-1-일)에틸)아세트아미드(11.97 mg, 41.6%)을 수득하였다.
LCMS: (ESI) (M+H)+ = 553.4.
1H NMR:　(400　MHz,　CDCl3) δ 11.24 (s, 1H), 8.40 (s, 2H), 7.62 (s, 1H), 5.66 (br, 1H), 4.06 - 3.96 (m, 2H), 3.88 - 3.83 (m, 1H), 3.82 - 3.75 (m, 4H), 3.73 - 3.64 (m, 2H), 2.54 - 2.47 (m, 2H), 2.47 - 2.42 (m, 4H), 2.06 (s, 3H), 1.34 (d, J = 6.0 Hz, 3H).
실시예 45
(S)-N-메틸-N-(2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)-2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)아세트아미드
단계 A: (S)-N-메틸-N-(2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)-2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)아세트아미드의 합성
DMF (5 mL) 중의 (S)-N-(2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)-2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)아세트아미드(100 mg, 0.15 mmol, 1.0 eq.)의 용액에 K2CO3(62 mg, 0.45 mmol, 3.0 eq.) 및 요오도메탄 (21 mg, 0.15 mmol, 1.0 eq)를 첨가하였다. 혼합물은 2시간동안 25 ℃에서 교반하였다. 혼합물은 이어서 물(20 mL)로 켄칭시키고 EtOAc (3 x 30 mL)로 추출하였다. 유기층을 배합하고 염수 (2 x 30 mL)로 세척하고, Na2SO4상에서 건조시키고, 감압하에 농축시켰다. 잔사를 컬럼 크로마토그래피(EtOAc/석유 에테르= 1/1; V/V)로 정제하여 황색 고체로서 (S)-N-메틸-N-(2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)-2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)아세트아미드(60 mg, 60.0%)을 수득하였다.
LCMS: (ESI) (M+H)+ = 668.3.
단계 B: (S)-N-메틸-N-(2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)-2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)아세트아미드의 합성
DCM (3 mL) 중의 (S)-N-메틸-N-(2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)-2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)아세트아미드(80 mg, 0.12 mmol)의 용액에 TFA(1 mL)를 첨가하였다. 수득한 용액은 0.5시간동안 25 ℃에서 교반하였다. 혼합물은 진공하에 농축시켰다. MeOH (2 mL) 및 K2CO3 (20 mg, 0.15 mmol)은 혼합물에 첨가하였다. 혼합물은 추가로 0.5시간동안 25 ℃에서 교반하였다. 혼합물을 여과하고, 여과물을 prep-HPLC(FA)로 정제하여 백색 고체로서 (S)-N-메틸-N-(2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)-2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일리덴)아세트아미드(15.31 mg, 23.7%)을 수득하였다.
LCMS:　(ESI)　(M+H)+ = 538.2.
1H NMR: (400 MHz, CDCl3) δ 11.48 (s, 1H), 8.46 (s, 2H), 7.68 (s, 1H), 5.64 (br s, 1H), 4.86 - 4.81 (m, 2H), 4.13 - 3.98 (m, 2H), 3.91 - 3.81 (m, 1H), 3.21 (s, 3H), 3.00 - 2.87 (m, 2H), 2.35 - 2.25 (m, 2H), 2.24 - 2.10 (m, 1H), 1.85 (t, J = 11.2 Hz, 2H), 1.40 (d, J = 6.8 Hz, 3H), 1.25 - 1.10 (m, 2H).
실시예 46
(S)-1-(2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)-3-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)우레아
단계 A: 4-니트로페닐 (S)-(2-((3급-부톡시카보닐)아미노)프로폭시)카바메이트의 합성
DCM(10 mL) 중의 4-니트로페닐 클로로메타노에이트(200 mg, 0.99 mmol, 1.2 eq.)의 혼합물에 DCM(10 mL) 및 TEA (100mg, 0.99 mmol, 1.2 eq.) 중의 (S)-3급-부틸(1-(아미노옥시)프로판-2-일)카바메이트(157 mg, 0.82 mmol, 1.0 eq.) 용액을 0℃에서 첨가하였다. 혼합물은 0.5시간동안 15 ℃에서 교반하였다. 반응 혼합물은 물(10 mL)로 켄칭하였다. 유기층을 염수(10 mL)로 세척하고 Na2SO4 상에서 건조시키고 진공 하에 농축하여 황색 오일로서 4-니트로페닐 (S)-(2-((3급-부톡시카보닐)아미노)프로폭시)카바메이트(350 mg, 조 생성물)를 수득하였고. 이를 추가 정제 과정 없이 다음 단계에 사용하였다.
단계 B: 3급-부틸 1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페라진-4-일)카바메이트의 합성
NMP(10 mL) 중의 4-N-BOC-아미노피페리딘(1.09 g, 5.42 mmol, 1.1 eq.)의 혼합물에 2-클로로-5-(트리플루오로메틸)피리미딘(900 mg, 4.93 mmol, 1.0 eq.) 및 K2CO3(2.04 g, 14.79 mmol, 3.0 eq.)를 첨가하였다. 혼합물은 3시간 동안 80 ℃에서 교반하였다. 혼합물을 실온으로 냉각시키고 물(80 mL)로 희석시키고 EtOAc(2 x 80mL)로 추출하였다. 유기층을 배합하고 염수 (100 mL)로 세척하고, Na2SO4상에서 건조시키고, 진공 농축시켰다. 잔사를 컬럼 크로마토그래피(EtOAc/석유 에테르= 1/3; V/V)로 정제하여 황색 고체로서 3급-부틸 (1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘 -2-일)피페리딘-4-일)카바메이트(1.30 g, 48.0%)를 수득하였다.
LCMS:　(ESI)　(M+H-56)+ = 291.0.
1H NMR:　(400 MHz, CDCl3)　δ　8.46 (s, 2H), 4.76 - 4.69 (m, 2H), 4.45 (s, 1H), 3.75 (s, 1H), 3.16 - 3.08 (m, 2H), 2.09 - 2.00 (m, 2H), 1.46 (s, 9H), 1.40 - 1.30 (m, 2H).
단계 C: 1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-아민 하이드로클로라이드의 합성
DCM(4 mL) 중의 3급-부틸 1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)카바메이트 (200 mg, 0.58 mmol)의 혼합물에 HCl/디옥산(4M, 4 mL)을 첨가하였다. 혼합물은 1시간동안 15 ℃에서 교반하였다. 진공하에 혼합물을 농축시켜 백색 고체로서 1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-아민 하이드로클로라이드(130 mg, 91.43%)를 수득하였다.
LCMS: (ESI) (M+H)+ = 247.2.
단계 D: (S)-3급-부틸 (1-((3-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)우레이도)옥시)프로판-2-일)카바메이트의 합성
아세토니트릴(10 mL) 중 4-니트로페닐 (S)-(2-((3급-부톡시카보닐)아미노)프로폭시) 카바메이트(350 mg, 0.82 mmol, 1.0 eq.)의 용액에 1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-아민 하이드로클로라이드(228 mg, 0.99 mmol, 1.2 eq.)을 첨가하였다. 혼합물은 2시간 동안 80 ℃에서 교반하였다. 혼합물을 실온으로 냉각시키고 물(40 mL)로 희석시키고 DCM(2 x 80mL)으로 추출하였다. 유기층을 배합하고 염수 (60 mL)로 세척하고, Na2SO4상에서 건조시키고, 진공 농축시켰다. 잔사를 컬럼 크로마토그래피(EtOAc/석유 에테르 = 8/1; V/V)로 정제하여 백색 고체로서 (S)-3급-부틸 (1-((3-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)우레이도)옥시)프로판-2-일)카바메이트(120 mg, 27.0%)를 수득하였다.
LCMS: (ESI) (M+H-100)+ = 363.2.
1H NMR:　(400 MHz, CDCl3)　δ　8.51 (s, 2H), 7.62 - 7.53 (m, 1H), 6.06 (s, 1H), 4.83 (d, J = 13.6 Hz, 2H), 4.47 - 4.41 (m, 1H), 4.13 - 4.00 (m, 2H), 3.82 (dd, J = 11.2, 3.6 Hz, 1H), 3.62 (dd, J = 11.2, 8.8 Hz, 1H), 3.22 - 3.12 (m, 2H), 2.09 - 2.16 (m, 2H), 1.54 - 1.48 (m, 2H), 1.44 (s, 9H), 1.16 (d, J = 6.8 Hz, 3H).
단계 E: (S)-1-(2-아미노프로폭시)-3-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)우레아의 합성
DCM (3mL) 중의 (S)-3급-부틸 (1-((3-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-2-일)우레이도)옥시)프로판-2-일)카바메이트(50 mg, 0.11 mmol, 1.0 eq)의 현탁액에 TFA(1 mL)를 첨가하였다. 혼합물은 1시간동안 15 ℃에서 교반하였다. 혼합물을 포화 NaHCO3 수용액(20 mL)으로 켄칭시키고 DCM(2 x 40mL)으로 추출하였다. 유기층을 배합하고, 염수(20 mL)로 세척하고, Na2SO4상에서 건조시키고, 진공하에 농축하여 황색 오일로서 (S)-1-(2-아미노프로폭시-3-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)우레아(30 mg, 76.6%)를 수득하였다.
LCMS: (ESI) (M+H)+ = 363.2.
단계 F: (S)-1-(2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)-3-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)우레아의 합성
EtOH(5mL) 중의 (S)-1-(2-아미노프로폭시)-3-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)우레아(30 mg, 0.08 mmol, 1.0 eq.)의 혼합물에 5-클로로-4-(트리플루오로메틸)-2-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)피리다진-3(2H)-온(27 mg, 0.08 mmol, 1.0 eq.) 및 TEA(8 mg, 0.08 mmol, 1.0 eq)를 첨가하였다. 혼합물은 3시간동안 60 ℃에서 교반하였다. 혼합물은 실온으로 냉각시키고 진공 농축시켰다. 잔사를 컬럼 크로마토그래피(석유 에테르/EtOAc= 1/2; V/V)로 정제하여 황색 오일로서 (S)-1-(2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)-3-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)우레아(30 mg, 55.4%)를 수득하였다.
LCMS: (ESI) (M+H)+ = 655.2.
단계 G: (S)-1-(2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)-3-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)우레아의 합성
DCM (3 mL) 중의 (S)-1-(2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)-3-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)우레아(30 mg, 0.05 mmol, 1.0 eq.)의 혼합물에 TFA(1 mL)를 첨가하였다. 혼합물은 1시간동안 15 ℃에서 교반하였다. 혼합물을 포화 NaHCO3 수용액(20 mL)으로 켄칭시키고 DCM(3 x 40mL)으로 추출하였다. 유기층을 배합하고 Na2SO4상에서 건조시키고, 진공 농축시켰다. 잔사는 MeOH (2 mL)에 재용해시키고, K2CO3 (29 mg, 0.21 mmol)를 첨가하였다. 혼합물은 추가로 1시간동안 15 ℃에서 교반하였다. 혼합물을 여과하고, 여과물을 prep-HPLC(FA)로 정제하여 백색 고체로서 (S)-1-(2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)-3-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)우레아(13.15 mg, 54.38%)을 수득하였다.
LCMS: (ESI)　(M+H)+ = 525.2.
1H NMR: (400 MHz, CDCl3) δ 10.81 (s, 1H), 8.45 (s, 2H), 7.76 (s, 1H), 7.65 (s, 1H), 5.56 - 5.50 (m, 1H), 5.48 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 4.74 (d, J = 13.2 Hz, 2H), 4.09 (s, 1H), 3.96 - 3.87 (m, 2H), 3.82 - 3.76 (m, 1H), 3.11 - 3.02 (m, 2H), 2.06 - 1.97 (m, 2H), 1.40 - 1.29 (m, 5H).
실시예 47
(S)-N-(2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)-1-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)메탄설폰아미드
단계 A: (1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)메탄올의 합성
NMP(10 mL) 중의 4-피페리딘메탄올(530 mg, 4.60 mmol, 1.2 eq.)의 용액에 2-클로로-5-(트리플루오로메틸)피리미딘(700 mg, 3.84 mmol, 1.0 eq.) 및 DIPEA(1.98 g, 15.34 mmol, 4.0 eq.)를 첨가하였다. 혼합물은 2시간 동안 80 ℃에서 교반하였다. 혼합물을 실온으로 냉각시키고 물(60 mL)로 희석시키고 EtOAc(2 x 50mL)로 추출하였다. 유기층을 배합하고 염수 (2 x 50 mL)로 세척하고, Na2SO4상에서 건조시키고, 진공 농축시켰다. 잔사를 컬럼 크로마토그래피(석유 에테르/EtOAc= 2/1; V/V)로 정제하여 백색 고체로서 (1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)메탄올(900 mg, 89.8%)을 수득하였다.
LCMS: (ESI) (M+H)+ = 262.1.
1H NMR: (400 MHz, CDCl3) δ 8.50 (s, 2H), 4.98 - 4.85 (m, 2H), 3.59 (d, J = 6.0 Hz, 2H), 3.07 - 2.92 (m, 2H), 1.97 - 1.79 (m, 3H), 1.42 (br s, 1H), 1.33 - 1.23 (m, 2H).
단계 B: (1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)메틸 메탄설포네이트의 합성
DCM(10 mL) 중의 (1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)메탄올(1.58 mg, 6.05 mmol, 1.0 eq.)의 용액에 빙수 욕조에서 0℃에서 TEA (1.84 g, 18.14 mmol, 3.0 eq.) 및 MsCl (1.39 g, 12.10 mmol, 2.0 eq.)를 첨가하였다. 혼합물은 3시간동안 25 ℃에서 교반하였다. 혼합물은 포화된 NH4Cl 수용액(40 mL)으로 켄칭시키고 DCM (2 x 50 mL)로 추출하였다. 유기층을 배합하고, 염수(50 mL)로 세척하고, 무수 Na2SO4상에서 건조시키고, 진공하에 농축하여 백색 고체로서 (1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)메틸 메탄설포네이트(2.00 g, 조 생성물)을 수득하였다.
LCMS: (ESI) (M+H)+ = 340.2.
단계 C: S-((1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)메틸 에탄설포네이트의 합성
DMF(25 mL) 중의 (1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)메틸 메탄설포네이트 (2.00 g, 5.89 mmol, 1 eq.)의 용액에 칼륨 티오아세테이트 (2.72 g, 23.58 mmol, 4.0 eq.)를 첨가하였다. 혼합물은 3시간동안 60 ℃에서 교반하였다. 혼합물을 실온으로 냉각시키고 물(70 mL)로 희석시키고 EtOAc(2 x 50mL)로 추출하였다. 유기층을 배합하고 염수 (2 x 60 mL)로 세척하고, Na2SO4상에서 건조시키고, 진공 농축시켰다. 잔사를 실리카 겔 크로마토그래피(EtOAc/석유 에테르= 1/2; V/V)로 정제하여 담황색 고체로서 S-((1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)메틸)에탄티오에이트(1.65 g, 87.7%)을 수득하였다.
LCMS: (ESI) (M+H)+ = 320.0.
1H NMR: (400 MHz, CDCl3) δ 8.45 (s, 2H), 4.89 - 4.80 (m, 2H), 2.94 - 2.84 (m, 4H), 2.35 (s, 3H), 1.92 - 1.84 (m, 2H), 1.83 - 1.73 (m, 1H), 1.28 - 1.15 (m, 2H).
단계 D: (1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)메탄설포닐 클로라이드의 합성
ACN(8 mL) 중의 HCl(2M, 3.13 mL, 6.26 mmol, 4.0 eq.)의 용액에 빙수 욕조에서 0℃에서 NCS(836 mg, 6.26 mmol, 4.0 eq.)를 첨가하였다. ACN(2 mL) 중의 S-((1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)메틸)에탄티오에이트 (500 mg, 1.57 mmol, 1 eq.)의 용액을 혼합물에 적가하였다. 혼합물은 15분동안 0 ℃에서 교반하였다. 혼합물은 DCM(80 mL)로 희석하고 염수 (2 x 50 mL)로 세척하였다. 유기층을 Na2SO4상에서 건조시키고, 진공하에 농축하여 담황색 오일로서 (1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)메탄설포닐 클로라이드(500 mg, 92.9%)을 수득하였다.
LCMS: (ESI) (M+H)+ = 344.0.
1H NMR: (400 MHz, CDCl3) δ 8.48 (d, J = 0.4 Hz, 2H), 4.96 - 4.86 (m, 2H), 3.69 (d, J = 6.4 Hz, 2H), 3.07 - 2.96 (m, 2H), 2.60 - 2.46 (m, 1H), 2.14 - 2.06 (m, 2H), 1.47 - 1.36 (m, 2H).
단계 E: (S)-3급-부틸 (1-(((1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)메틸설폰아미도)옥시)프로판-2-일)카바메이트의 합성
DCM(10 mL) 중의 (1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)메탄설포닐 클로라이드(536 mg, 1.56 mmol, 1.0 eq.) 및 (S)-3급-부틸(1-(아미노옥시)프로판-2-일)카바메이트(297 mg, 1.56 mmol, 1.0 eq.)의 용액에 0℃에서 TEA(316 mg, 3.12 mmol, 2.0 eq.)를 적가하였다. 혼합물은 1시간동안 25 ℃에서 교반하였다. 혼합물은 물(40 mL)로 켄칭시키고 EtOAc (3 x 40 mL)로 추출하였다. 유기층을 배합하고 염수(80 mL)로 세척하고, 무수 Na2SO4상에서 건조시키고, 진공 농축시켰다. 잔사를 컬럼 크로마토그래피(EtOAc/석유 에테르 = 1/1; V/V)로 정제하여 황색 오일로서 (S)-3급-부틸 (1-(((1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)메틸설폰아미도)옥시)프로판-2-일)카바메이트(420 mg, 54.1%)를 수득하였다.
LCMS: (ESI) (M+H)+ = 498.2.
단계 F: (S)-N-(2-아미노프로폭시)-1-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)메탄설폰아미드의 합성
DCM (8mL) 중의 (S)-3급-부틸 (1-(((1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)메틸설폰아미도)옥시)프로판-2-일)카바메이트(148 mg, 0.30 mmol, 1.0 eq)의 용액에 TFA(2 mL)를 첨가하였다. 혼합물은 1시간동안 25 ℃에서 교반하였다. 혼합물을 포화 NaHCO3 수용액(20mL)으로 켄칭시키고 DCM(3 x 20mL)으로 추출하였다. 유기층을 배합하고 Na2SO4상에서 건조시키고, 진공하에 농축하여 황색 오일로서 (S)-N-(2-아미노프로폭시)-1-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)메탄설폰아미드(112 mg, 94.1%)을 수득하였다.
LCMS: (ESI)　(M+H)+ = 398.1.
단계 G: (S)-N-(2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)-1-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)메탄설폰아미드의 합성
EtOH(5 mL) 중의 (S)-N-(2-아미노프로폭시)-1-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)메탄설폰아미드(50 mg, 0. 30 mmol, 1.0 eq.)의 용액에 5-클로로-4-(트리플루오로메틸)피리다진-3(2H)-온(26 mg, 0.13 mmol, 1.0 eq.)을 첨가하였다. 혼합물을 60 ℃로 가열하고 18시간 동안 교반하였다. 혼합물을 여과하고, 여과물을 prep-HPLC로 정제하여 백색 고체로서 (S)-N-(2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)-1-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)메탄설폰아미드(6.78 mg, 9.3%)을 수득하였다.
LCMS: (ESI)　(M+H)+ = 560.2.
1H NMR: (400 MHz, CDCl3) δ 10.60 (s, 1H), 8.45 (s, 2H), 8.36 (s, 1H), 7.70 (s, 1H), 5.74 - 5.48 (m, 1H), 4.81 (d, J = 13.6 Hz, 2H), 4.15 - 4.12 (m, 2H), 3.94 - 3.83 (m, 1H), 3.21 - 3.08 (m, 2H), 3.02 - 2.92 (m, 2H), 2.41 - 2.25 (m, 1H), 2.10 - 1.95 (m, 2H), 1.43 - 1.32 (m, 2H), 1.28 (d, J = 6.4 Hz, 3H).
실시예 48
2-플루오로-N-((S)-2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)-2-(4-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페라진-1-일)아세트아미드
단계 A: 벤질 4-(2-에톡시-2-플루오로-2-옥소에틸리덴)피페리딘-1-카복실레이트의 합성
THF(12 mL) 중의 트리에틸 2-플루오로-2-포스포노아세이트(799 mg, 3.30 mmol, 1.1 eq.) 용액에 N2 대기하에 빙수 욕조에서 0℃에서 NaH(60%, 144 mg, 3.60 mmol, 1.2 eq.)를 첨가하였다. 혼합물은 10분동안 0 ℃에서 교반하였다. 벤질 4-옥소피페리딘-1-카복실레이트(700 mg, 3.00 mmol, 1.0 eq.)를 반응 혼합물에 첨가하였다. 혼합물은 12시간동안 25 ℃에서 교반하였다. 혼합물은 빙수(30 mL)로 켄칭시키고 EtOAc (3 x 30 mL)로 추출하였다. 유기층을 배합하고 Na2SO4상에서 건조시키고, 진공 농축시켰다. 잔사를 플래시 크로마토그래피(석유 에테르/EtOAc=3/1; V/V)로 정제하여 무색 오일로서 벤질 4-(2-에톡시-1-플루오로-2-옥소에틸리덴)피페리딘-1-카복실레이트(300 mg, 31.1%)를 수득하였다.
LCMS: (ESI)　(M+Na)+ =344.1.
단계 B: 에틸 2-플루오로-2-(피페리딘-4-일)아세테이트의 합성
MeOH (5 mL) 중의 벤질 4-(2-에톡시-1-플루오로-2-옥소에틸리덴)피페리딘-1-카복실레이트(300 mg, 1.11 mmol, 1.0 eq)의 혼합물에 N2 대기하에 Pd/C (10%, 100 mg)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 탈기시키고 H2로 수회 퍼징하였다. 반응 혼합물은 H2 대기하에 1시간 동안 25℃에서 교반하였다. 혼합물을 여과하고 여과물을 농축시켜 무색 오일로서 에틸 2-플루오로-2-(피페리딘-4-일)아세테이트(150 mg, 87.7%)를 수득하였다.
LCMS: (ESI)　(M+H)+ = 190.2.
1H NMR: (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 5.01 (dd, J = 48.0, 4.0 Hz, 1H), 4.20 (q, J = 7.2 Hz, 2H), 3.12 (d, J = 12.0 Hz, 2H), 2.71 - 2.61 (m, 2H), 2.13 - 2.00 (m, 1H), 1.71 (d, J = 12.8 Hz, 1H), 1.57 - 1.40 (m, 4H), 1.24 (t, J = 7.2 Hz, 3H).
단계 C: 에틸 2-플루오로-2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)아세테이트의 합성
NMP(12 mL) 중의 에틸 2-플루오로-2-(피페리딘-4-일)아세테이트 (150 mg, 0.79 mmol, 1.1 eq.)와 DIPEA(373 mg, 2.88 mmol, 4.0 eq.)의 혼합물에 2-클로로-5-(트리플루오로메틸)피리미딘(131 mg, 0.72 mmol, 1.0 eq)을 첨가하였다. 혼합물은 1.5시간 동안 80 ℃에서 교반하였다. 혼합물을 실온으로 냉각시키고 물(50 mL)에 붓고 EtOAc(3 x 50 mL)로 추출하였다. 유기 추출물을 배합하고 포화 NH4Cl 수용액 (2 x 50 mL)으로 세척하고, Na2SO4상에서 건조시키고, 진공 농축시켰다. 잔사를 플래시 크로마토그래피(석유 에테르/EtOAc= 3/1; V/V)로 정제하여 황색 고체로서 에틸 2-플루오로-2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)아세테이트(140 mg, 57.9 %)를 수득하였다.
LCMS: (ESI)　(M+H)+ = 336.1.
단계 D: 2-플루오로-2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)아세트산의 합성
THF(1.8 mL) 및 H2O(0.6 mL) 중의 에틸 2-플루오로-2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)아세테이트 (95 mg, 0.28 mmol, 1.0 eq.)의 혼합물에 LiOH (36 mg, 0.84 mmol, 3.0 eq.)를 첨가하였다. 상기 혼합물을 40℃에서 12시간 동안 교반하였다. 혼합물은 물(15 mL)로 희석하고 1M HCl을 사용하여 pH 7로 중화시켰다. 혼합물은 EtOAc (2 x 30 mL)로 추출하였다. 유기층을 배합하고, 염수(20 mL)로 세척하고, Na2SO4상에서 건조시키고, 진공하에 농축하여 백색 고체로서 2-플루오로-2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)아세트산(80 mg, 91.9%)을 수득하였다.
LCMS: (ESI)　(M+H)+ = 308.1.
단계 E: 2-플루오로-N-((S)-2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)-2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)아세트아미드의 합성
DMF(5 mL) 중의 (S)-5-((1-(아미노옥시)프로판-2-일)아미노)-4-(트리플루오로메틸)-2-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)피리다진-3(2H)-온(68 mg, 0.18 mmol, 1.1 eq.) 및 2-플루오로-2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)아세트산(50 mg, 0.16 mmol, 1.0 eq.)의 혼합물에 DIPEA(63 mg, 0.48 mmol, 3.0 eq.)와 HATU(74 mg, 0.19 mmol, 1.2 eq.)를 첨가하였다. 혼합물은 12시간동안 25 ℃에서 교반하였다. 혼합물은 물(30 mL)로 희석하고 EtOAc (3 x 40 mL)로 추출하였다. 유기 추출물을 배합하고 염수 (20 mL)로 세척하고, Na2SO4상에서 건조시키고, 진공 농축시켰다. 잔사를 prep-TLC(석유 에테르/EtOAc= 1/1; V/V)로 정제하여 황색 고체로서 2-플루오로-N-((S)-2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)-2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)아세트아미드(80 mg, 73.1%)을 수득하였다.
LCMS: (ESI) (M+H)+ = 672.2.
단계 F: 2-플루오로-N-((S)-2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)-2-(4-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페라진-1-일)아세트아미드의 합성
DCM (1.5 mL) 중의 2-플루오로-N-((S)-2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)-2-(4-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페라진-4-일)아세트아미드(40 mg, 0.06 mmol, 1.0 eq.)의 혼합물에 TFA(0.5 mL)를 첨가하였다. 반응 혼합물은 0.5시간 동안 25℃에서 교반시켰다. 혼합물은 진공하에 농축시켰다. 잔사는 MeOH (2 mL)에 재용해시키고, K2CO3 (25 mg, 0.18 mmol, 3.0 eq.)를 혼합물에 첨가하였다. 반응 혼합물은 추가로 0.5시간동안 25 ℃에서 교반하였다. 혼합물을 여과하고, 여과물을 prep-HPLC(FA)로 정제하여 백색 고체로서 2-플루오로-N-((S)-2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)-2-(4-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페라진-1-일)아세트아미드(19.08 mg, 59.1%)을 수득하였다.
LCMS: (ESI) (M+H)+ = 542.2.
1H NMR:　(400　MHz,　DMSO-d 6 ) δ 12.53 (s, 1H), 11.77 (s, 1H), 8.70 (s, 2H), 7.93 (s, 1H), 6.64 - 6.55 (m, 1H), 4.91 - 4.71 (m, 3H), 4.30 - 4.18 (m, 1H), 4.02 - 3.84 (m, 2H), 3.00 (q, J = 13.2 Hz, 2H), 2.32 - 2.16 (m, 1H), 1.72 (t, J = 14.4 Hz, 2H), 1.37 - 1.25 (m, 2H), 1.22 (d, J = 6.4 Hz, 3H).
실시예 49
(S)-2-메틸-N-(2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)-2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)프로판아미드
49.1) 중간체 U의 합성
단계 A: 3급-부틸 4-(1-메톡시-2-메틸-1-옥소프로판-2-일)피페리딘-1-카복실레이트 및 3급-부틸 4-(1-메톡시-1-옥소프로판-2-일)피페리딘-1-카복실레이트(중간체 U)의 합성
THF(30 mL) 중의 3급-부틸 4-(2-메톡시-2-옥소에틸)피페리딘-1-카복실레이트(2.00 g, 7.77 mmol, 1.0 eq.)의 혼합물에 N2 대기 하에 LDA(2M, 15.6 mL, 31.2 mmol, 4.0 eq.)를 드라이아이스-EtOH 욕조에서 -78℃에서 적가하였다. 혼합물은 1시간동안 -78℃에서 교반하였다. 요오도메탄(3.31 g, 23.31 mmol, 3.0 eq.)를 -78℃에서 혼합물에 적가하였다. 혼합물은 16시간동안 25 ℃에서 교반하였다. 혼합물은 물(50 mL)로 켄칭시키고 EtOAc (2 x 50 mL)로 추출하였다. 유기층을 배합하고 Na2SO4상에서 건조시키고, 진공 농축시켰다. 잔사를 prep-HPLC로 정제하여 3급-부틸 4-(1-메톡시-2-메틸-1-옥소프로판-2-일)피페리딘-1-카복실레이트(330 mg, 14.9%)를 무색 오일로서 수득하고 3급-부틸 4-(1-메톡시-1-옥소프로판-2-일)피페리딘-1-카복실레이트(1.26g, 59.7%)를 무색 오일로서 수득하였다.
3급-부틸 4-(1-메톡시-2-메틸-1-옥소프로판-2-일)피페리딘-1-카복실레이트:
LCMS: (ESI)　(M+H-100)+ = 186.2
3급-부틸 4-(1-메톡시-1-옥소프로판-2-일)피페리딘-1-카복실레이트:
LCMS: (ESI)　(M+H-100)+ = 172.2
49.2) 화합물 49의 합성
단계 A: 메틸 2-메틸-2-(피페리딘-4-일)프로파노에이트 하이드로클로라이드의 합성
DCM (5 mL) 중의 3급-부틸 4-(1-메톡시-2-메틸-1-옥소프로판-2-일)피페리딘-1-카복실레이트 (320 mg, 1.12 mmol, 1.0 eq)의 혼합물에 HCl/디옥산(4M, 5 mL)을 첨가하였다. 혼합물은 1시간동안 25 ℃에서 교반하였다. 혼합물을 진공 농축시켜 백색 고체로서 메틸 2-메틸-2-(피페리딘-4-일)프로파노에이트 하이드로클로라이드(330 mg, 조 생성물)를 수득하였다.
LCMS: (ESI)　(M+H)+ = 186.2.
단계 B: 메틸 2-메틸-2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페 리딘-4-일)프로파노에이트의 합성
NMP(20 mL) 중의 2-메틸-2-(피페리딘-4-일)프로파노에이트 하이드로클로라이드(243 mg, 1.10 mmol, 1.0 eq.), DIPEA(426 mg, 3.30 mmol, 3.0 eq.)의 혼합물에 2-클로로-5-(트리플루오로메틸)피리미딘(200 mg, 1.10 mmol, 1.0 eq)을 첨가하였다. 반응 혼합물은 2시간 동안 80℃에서 교반시켰다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고 물(50mL)으로 켄칭시키고 EtOAc(3 x 50mL)로 추출하였다. 유기층을 배합하고 염수 (2 x 60 mL)로 세척하고, Na2SO4상에서 건조시키고, 진공 농축시켰다. 잔사를 컬럼 크로마토그래피(석유 에테르/EtOAc= 2/1; V/V)로 정제하여 백색 고체로서 메틸 2-메틸-2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)프로파노에이트(253 mg, 70.0%)을 수득하였다.
LCMS: (ESI)　(M+H)+ = 332.2.
1H NMR: (400 MHz, CDCl3) δ 8.45 (s, 2H), 4.99 - 4.83 (m, 2H), 3.69 (s, 3H), 2.85 (td, J = 13.2, 2.0 Hz, 2H), 1.97 - 1.85 (m, 1H), 1.70 - 1.62 (m, 2H), 1.35 - 1.22 (m, 2H), 1.14 (s, 6H).
단계 C: 2-메틸-2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)프로판산의 합성
THF(5 mL) 및 H2O(5 mL) 중의 메틸 2-메틸-2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)프로파노에이트 (200 mg, 0.60 mmol, 1.0 eq.)의 혼합물에 수산화리튬(36 mg, 1.50 mmol, 2.5 eq.)을 첨가하였다. 혼합물은 1시간동안 25 ℃에서 교반하였다. 혼합물은 물(20 mL)로 희석하고 1M HCl을 사용하여 pH 6으로 조정하였다. 혼합물은 EtOAc (3 x 40 mL)로 추출하였다. 유기층을 배합하고, 염수(80 mL)로 세척하고, Na2SO4상에서 건조시키고, 진공하에 농축하여 황색 고체로서 2-메틸-2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)프로판산(170 mg, 89.4%)을 수득하였다.
LCMS: (ESI)　(M+H)+ = 318.1.
단계 D: (S)-2-메틸-N-(2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)-2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)프로판아미드의 합성
DMF(2 mL) 중의 2-메틸-2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)프로판산(57 mg, 0.18 mmol, 1.1 eq.)의 혼합물에 (S)-5-((1-(아미노옥시)프로판-2-일)아미노)-4-(트리플루오로메틸)-2-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)피리다진-3(2H)-온(60 mg, 0.16 mmol, 1.0 eq.), DIPEA(62 mg, 0.48 mmol, 3.0 eq.)와 HATU(72 mg, 0.19 mmol, 1.2 eq.)를 첨가하였다. 혼합물은 1시간동안 25 ℃에서 교반하였다. 반응 혼합물은 물(50 mL)로 켄칭시키고 EtOAc (2 x 50 mL)로 추출하였다. 유기층을 배합하고 염수 (2 x 50 mL)로 세척하고, Na2SO4상에서 건조시키고, 진공 농축시켰다. 잔사를 컬럼 크로마토그래피(석유 에테르/EtOAc= 2/3; V/V)로 정제하여 황색 고체로서 (S)-2-메틸-N-(2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)-2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)프로펜아미드(70 mg, 64.2%)을 수득하였다.
LCMS: (ESI) (M+H)+ = 682.3.
단계 E: (S)-2-메틸-N-(2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)-2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)프로판아미드의 합성
DCM (3 mL) 중의 (S)-2-메틸-N-(2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)-2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)프로판아미드(70 mg, 0.10 mmol, 1.0 eq.)의 혼합물에 TFA(1 mL)를 첨가하였다. 혼합물은 1시간동안 25 ℃에서 교반하였다. 혼합물은 진공하에 농축시켰다. 잔사는 MeOH (2 mL)에 재용해시키고, K2CO3 (62 mg, 0.45 mmol)를 첨가하였다. 혼합물은 추가로 1시간동안 25 ℃에서 교반하였다. 혼합물을 여과하고, 여과물을 prep-HPLC(FA)로 정제하여 백색 고체로서 (S)-2-메틸-N-(2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)-2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)프로판아미드(33.10 mg, 60.0%)을 수득하였다.
LCMS:　(ESI)　(M+H)+ = 552.2.
1H NMR: (400 MHz, CDCl3) δ 10.12 (s, 1H), 8.66 (s, 1H), 8.45 (s, 2H), 7.70 (s, 1H), 6.08 - 5.98 (m, 1H), 4.93 (d, J = 13.2 Hz, 2H), 4.15 - 4.03 (m, 2H), 3.98 - 3.87 (m, 1H), 2.86 (t, J = 12.4 Hz, 2H), 2.15 - 1.95 (m, 1H), 1.75 - 1.60 (m, 2H), 1.37 (d, J = 6.4 Hz, 3H), 1.32 - 1.23 (m, 2H), 1.14 (s, 6H).
실시예 50
(S)-N-(2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)-1-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)사이클로프로판카복스아미드
단계 A: 1-(피페리딘-4-일)사이클로프로판카복실산 하이드로클로라이드의 합성
EtOH(5 mL) 중의 1-(피리딘-4-일)사이클로프로판카복실산(100 mg, 0.61 mmol, 1.0 eq.) 용액에 농축 HCl(0.1 mL)을 첨가한 다음 N2 대기하에서 PtO2(20 mg)를 첨가하였다. 혼합물은 탈기시키고 3회 동안 H2로 퍼징하였다. 혼합물은 16시간 동안 H2 볼룬 대기하에 25 ℃에서 교반시켰다. 혼합물을 여과하고 여과물을 진공 농축시켜 담황색 오일로서 1-(피페리딘-4-일)사이클로프로판카복실산 하이드로클로라이드(126 mg, 99.9%)를 수득하였다.
LCMS:　(ESI)　(M+H)+ = 170.2.
단계 B: 1-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)사이클로프로판카복실산의 합성
NMP(3 mL) 중의 2-클로로-5-(트리플루오로메틸)피리미딘(91 mg, 0.50 mmol, 1.0 eq.) 및 1-(피페리딘-4-일)사이클로프로판카복실산 하이드로클로라이드(123 mg, 0.60 mmol, 1.2 eq.)의 용액에 DIPEA(323 mg, 2.50 mmol, 5.0 eq)을 첨가하였다. 혼합물은 2시간 동안 80 ℃에서 교반하였다. 혼합물은 실온으로 냉각시키고 물(40 mL)로 희석하였다. 혼합물은 EtOAc (2 x 40 mL)로 추출하였다. 유기층을 배합하고 포화 NH4Cl 수용액 (2 x 30 mL)으로 세척하고, Na2SO4상에서 건조시키고, 진공 농축시켰다. 잔사를 prep-TLC(석유 에테르/EtOAc= 2/1; V/V)로 정제하여 담황색 고체로서 1-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)사이클로프로판카복실산(120 mg, 76.1%)을 수득하였다.
LCMS:　(ESI)　(M+H)+ = 316.2.
단계 C: (S)-N-(2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)-1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)사이클로프로판카복스아미드의 합성
DMF(2 mL) 중의 1-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)사이클로프로판카복실산(50 mg, 0.16 mmol, 1.5 eq.)의 용액에 DIPEA (68 mg, 0.52 mmol, 5.0 eq.), HATU (80 mg, 0.21 mmol, 2.0 eq.)을 첨가하고, 이어서 (S)-5-((1-(아미노옥시)프로판-2-일)아미노)-4-(트리플루오로메틸)-2-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)피리다진-3(2H)-온 (40 mg, 0.11 mmol, 1.0 eq.)을 첨가하였다. 혼합물은 2시간동안 25 ℃에서 교반하였다. 혼합물은 물(30 mL)로 켄칭시키고 EtOAc (2 x 40 mL)로 추출하였다. 유기층을 배합하고 염수 (2 x 40 mL)로 세척하고, Na2SO4상에서 건조시키고, 진공 농축시켰다. 잔사를 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(석유 에테르/EtOAc= 2/3; V/V)로 정제하여 담황색 오일로서 (S)-N-(2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)-1-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)사이클로프로판카복스아미드(55 mg, 77.4%)을 수득하였다.
LCMS: (ESI)　(M+H)+ = 680.2.
단계 D: (S)-N-(2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)-1-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)사이클로프로판카복스아미드의 합성
DCM (3 mL) 중의 (S)-N-(2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)-1-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)사이클로프로판카복스아미드(45 mg, 0.066 mmol, 1.0 eq.)의 용액에 TFA(1 mL)를 첨가하였다. 혼합물은 0.5시간동안 25 ℃에서 교반하였다. 혼합물은 진공하에 농축시켰다. 잔사는 MeOH (2 mL)에 용해시키고, K2CO3 (40 mg, 0.29 mmol)를 혼합물에 첨가하였다. 혼합물은 추가로 0.5시간동안 25 ℃에서 교반하였다. 혼합물을 여과하고, 여과물을 prep-HPLC로 정제하여 백색 고체로서 (S)-N-(2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)-1-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)사이클로프로판카복스아미드(6.57 mg, 18.1%)을 수득하였다.
LCMS: (ESI)　(M+H)+ = 550.2.
1H NMR: (400 MHz, DMSO-d 6 )　δ　12.49 (s, 1H), 11.07 (s, 1H), 8.70 - 8.60 (m, 2H), 7.87 (s, 1H), 6.66 - 6.57 (m, 1H), 4.78 (d, J = 12.0 Hz, 2H), 4.22 - 4.09 (m, 1H), 3.88 - 3.74 (m, 2H), 2.92 - 2.80 (m, 2H), 1.81 - 1.61 (m, 3H), 1.28 - 1.19 (m, 2H), 1.17 (d, J = 6.8 Hz, 3H), 0.80 - 0.72 (m, 2H), 0.68 - 0.60 (m, 2H).
실시예 51
N-((S)-2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)-2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)프로판아미드
단계 A: 메틸 2-(피페리딘-4-일)프로파노에이트 하이드로클로라이드의 합성
DCM (2mL) 중의 3급-부틸 4-(1-메톡시-1-옥소프로판-2-일)피페리딘-1-카복실레이트 (300 mg, 1.11 mmol, 1.0 eq)의 용액에 HCl/디옥산(4M, 0.5 mL)을 첨가하였다. 혼합물은 1시간동안 25 ℃에서 교반하였다. 혼합물을 진공 농축시켜 백색 고체로서 메틸 2-(피페리딘-4-일)프로파노에이트 하이드로클로라이드(230 mg, 100%)를 수득하였다.
LCMS:　(ESI)　(M+H)+ = 172.1.
단계 B: 메틸 2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)프로파노에이트의 합성
NMP(20 mL) 중의 2-클로로-5-(트리플루오로메틸)피리미딘(235 mg, 1.29 mmol, 1.0 eq.)의 용액에 메틸 2-(피페리딘-4-일)프로파노에이트 하이드로클로라이드(267 mg, 1.29 mmol, 1.0 eq.) 및 DIPEA(498 mg, 3.85 mmol, 3.0 eq.)를 첨가하였다. 혼합물은 2시간 동안 80 ℃에서 교반하였다. 반응물은 실온으로 냉각시키고 물(80 mL)로 희석하였다. 혼합물은 EtOAc (3 x 50 mL)로 추출하였다. 유기층을 배합하고 염수 (2 x 50 mL)로 세척하고, Na2SO4상에서 건조시키고, 진공 농축시켰다. 잔사를 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(석유 에테르/EtOAc= 1/1; V/V)로 정제하여 황색 고체로서 메틸 2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)프로파노에이트(320 mg, 78.5%)을 수득하였다.
LCMS: (ESI)　(M+H)+ = 318.1.
1H NMR:　(400　MHz,　CDCl3) δ 8.46 (s, 2H), 4.93 - 4.82 (m, 2H), 3.69 (s, 3H), 2.89 (td, J = 12.8, 2.4 Hz, 2H), 2.37 - 2.28 (m, 1H), 1.93 - 1.78 (m, 2H), 1.73 - 1.66 (m, 1H), 1.34 - 1.20 (m, 2H), 1.16 (d, J = 7.2 Hz, 3H).
단계 C: 2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)프로판산의 합성
THF(2 mL) 및 H2O(1 mL) 중의 메틸 2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)프로파노에이트(110 mg, 0.35 mmol, 1.0 eq.)의 용액에 NaOH (55 mg, 1.39 mmol, 4.0 eq.)를 첨가하였다. 혼합물을 70 ℃로 가열하고 18시간 동안 교반하였다. 혼합물은 실온으로 냉각시키고 물(15 mL)로 희석하고 1M HCl을 사용하여 pH 5로 산성화하였다. 혼합물은 EtOAc (3 x 40 mL)로 추출하였다. 유기층을 배합하고, Na2SO4상에서 건조시키고, 진공하에 농축하여 담황색 고체로서 2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)프로판산(105 mg, 99.9%)을 수득하였다.
LCMS:　(ESI)　(M+H)+ = 304.0.
단계 D: N-((S)-2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)-2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일) 피페리딘-4-일)프로판아미드의 합성
DMF(3 mL) 중의 2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)프로판산(70 mg, 0.23 mmol, 1.1 eq.)의 용액에 DIPEA (135 mg, 1.05 mmol, 5.0 eq.), HATU (95 mg, 0.25 mmol, 1.2 eq.)을 첨가하고, 이어서 (S)-5-((1-(아미노옥시)프로판-2-일)아미노)-4-(트리플루오로메틸)-2-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)피리다진-3(2H)-온 (80 mg, 0.21 mmol, 1.0 eq.)을 첨가하였다. 혼합물은 2시간동안 25 ℃에서 교반하였다. 혼합물은 포화된 NH4Cl 수용액(30 mL)으로 희석시키고 EtOAc (2 x 50 mL)로 추출하였다. 유기층을 배합하고 염수 (2 x 40 mL)로 세척하고, Na2SO4상에서 건조시키고, 진공 농축시켰다. 잔사를 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(석유 에테르/EtOAc= 3/7; V/V)로 정제하여 담황색 고체로서 N-((S)-2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)-2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)프로판아미드(70 mg, 50.2%)을 수득하였다.
LCMS: (ESI)　(M+H)+ = 668.4.
단계 E: N-((S)-2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)-2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)프로판아미드의 합성
DCM (4 mL) 중의 N-((S)-2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)-2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)프로판아미드(90 mg, 0.14 mmol, 1.0 eq.)의 용액에 TFA(1 mL)를 첨가하였다. 혼합물은 0.5시간동안 25 ℃에서 교반하였다. 혼합물은 진공하에 농축시켰다. 잔사는 MeOH (2 mL)에 용해시키고, K2CO3 (40 mg, 0.29 mmol)를 혼합물에 첨가하였다. 혼합물은 추가로 0.5시간동안 25 ℃에서 교반하였다. 혼합물을 여과하고, 여과물을 prep-HPLC(FA)로 정제하여 백색 고체로서 N-((S)-2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)-2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페라진-4-일)프로판아미드(17.08 mg, 23.5%)을 수득하였다.
LCMS: (ESI)　(M+H)+ = 538.2.
1H NMR: (400 MHz, DMSO-d 6 )　δ　12.49 (s, 1H), 11.14 (s, 1H), 8.66 (s, 2H), 7.90 (s, 1H), 6.64 - 6.53 (m, 1H), 4.72 (t, J = 13.6 Hz, 2H), 4.25 - 4.12 (m, 1H), 3.96 - 3.78 (m, 2H), 3.01 - 2.84 (m, 2H), 1.89 - 1.78 (m, 2H), 1.77 - 1.67 (m, 1H), 1.62 (d, J = 12.4 Hz, 1H), 1.19 (d, J = 6.8 Hz, 3H), 1.16 - 0.96 (m, 5H).
실시예 52
2-(3-메틸-1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)-N-((S)-2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)아세트아미드
단계 A: 3급-부틸 (E)-4-(2-메톡시-2-옥소에틸리덴)-3-메틸피페리딘-1-카복실레이트의 합성
THF(8 mL) 중의 메틸 2-(디메톡시포스포릴)아세테이트(95 mg, 0.517 mmol, 1.1 eq)의 용액에 NaH(21 mg, 0.517 mmol, 1.1 eq)를 0 ℃에서 첨가하였다. 수득한 혼합물은 20분동안 0℃에서 교반하였다. 이어서 0 ℃에서 혼합물에 3급-부틸 3-메틸-4-옥소피페리딘-1- 카복실레이트 (100 mg, 0.47 mmol, 1.0 eq.)를 첨가하였다. 수득한 혼합물은 40분동안 25℃에서 교반하였다. 혼합물은 물(15 mL)로 켄칭시키고 EtOAc (3 x 20 mL)로 추출하였다. 유기층을 배합하고, Na2SO4상에서 건조시키고 감압하에 농축시켰다. 잔사를 컬럼 크로마토그래피(석유 에테르/EtOAc=4/1; V/V)로 정제하여 무색 오일로서 3급-부틸 (E)-4-(2-메톡시-2-옥소에틸리덴)-3-메틸피페리딘-1-카복실레이트(120 mg, 95.2%)를 수득하였다.
LCMS: (ESI) (M+H-100)+ = 170.2.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 5.70 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 3.90 - 3.76 (m, 1H), 3.62 (s, 3H), 3.58 - 3.40 (m, 2H), 3.18 - 2.79 (m, 3H), 2.46 - 2.36 (m, 1H), 1.41 (s, 9H), 1.02 (d, J = 6.8 Hz, 3H).
단계 B: 3급-부틸 4-(2-메톡시-2-옥소에틸)-3-메틸피페리딘-1-카복실레이트의 합성
MeOH (2 mL) 중의 3급-부틸 (E)-4-(2-메톡시-2-옥소에틸리덴)-3-메틸피페리딘-1-카복실레이트 (120 mg, 0.44 mmol, 1.0 eq)의 용액에 Pd/C (12 mg)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 탈기시키고 H2로 수회 퍼징하였다. 혼합물은 N2 대기하에 40분동안 40 ℃에서 교반하였다. 혼합물을 셀라이트 패드를 통해 여과시키고 MeOH로 세척하였다. 여과물을 진공 농축시켜 무색 오일로서 3급-부틸 4-(2-메톡시-2-옥소에틸)-3-메틸피페리딘-1-카복실레이트(110 mg, 수율 91.6%)를 수득하였다.
LCMS: (ESI) (M+H-56)+ = 216.2.
1H NMR: (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 3.91 - 3.77 (m, 1H), 3.62 (ddd, J = 14.1, 4.0, 2.0 Hz, 1H), 3.59 (s, 3H), 3.03 - 2.88 (m, 1H), 2.85 - 2.64 (m, 1H), 2.23 (dd, J = 7.5, 3.1 Hz, 2H), 2.08 - 1.98 (m, 1H), 1.75 (qt, J = 7.2, 3.4 Hz, 1H), 1.38 (s, 9H), 1.36 - 1.31 (m, 1H), 1.30 - 1.19 (m, 1H), 0.76 (d, J = 7.0 Hz, 3H).
단계 C: 메틸 2-(3-메틸피페리딘-4-일)아세테이트 하이드로클로라이드의 합성
MeOH (1 mL) 중의 3급-부틸 4-(2-메톡시-2-옥소에틸)-3-메틸피페리딘-1-카복실레이트 (110 mg, 0.406 mmol, 1.0 eq)의 용액에 HCl/디옥산(4M, 1 mL)을 첨가하였다. 혼합물은 30분 동안 25 ℃에서 교반하였다. 혼합물을 진공 농축시켜 메틸 2-(3-메틸피페리딘-4-일리덴)아세테이트 하이드로클로라이드(70 mg, 수율 100%)를 수득하였다. 수득된 생성물은 다음 반응 단계에서 추가의 정제 없이 사용하였다.
단계 D: 메틸 2-(3-메틸-1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)아세테이트의 합성
NMP(3 mL) 중의 메틸 2-(3-메틸피페리딘-4-일)아세테이트 하이드로클로라이드(180 mg, 1.06 mmol, 1.1 eq.)의 용액에 DIPEA(372 mg, 2.88 mmol, 3.0 eq.)와 2-클로로-5-(트리플루오로메틸)피리미딘(300 mg, 1.32 mmol, 1 eq.)을 첨가하였다. 수득한 혼합물은 1시간동안 80℃에서 교반하였다. 혼합물은 실온으로 냉각시키고 물(25 mL)로 희석하였다. 혼합물은 EtOAc (2 x 20 mL)로 추출하였다. 유기층을 배합하고, Na2SO4상에서 건조시키고 감압하에 농축시켰다. 잔사를 컬럼 크로마토그래피(석유 에테르/EtOAc= 9/1; V/V)로 정제하여 담황색 오일로서 2-(3-메틸-1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)아세테이트(200 mg, 60.8%)를 수득하였다.
LCMS: (ESI) (M+H)+ = 318.2.
1H NMR: (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 8.64 (s, 2H), 4.49 (dtd, J = 13.2, 4.3, 1.5 Hz, 1H), 4.36 (ddd, J = 13.2, 4.1, 1.7 Hz, 1H), 3.61 (s, 3H), 3.36 - 3.29 (m, 1H), 3.19 (ddd, J = 13.6, 11.0, 3.6 Hz, 1H), 2.32 - 2.28 (m, 2H), 2.26 - 2.16 (m, 1H), 1.94 (tq, J = 7.1, 3.6 Hz, 1H), 1.58 - 1.50 (m, 1H), 1.47 - 1.39 (m, 1H), 0.75 (d, J = 7.0 Hz, 3H).
단계 E: 2-(3-메틸)-1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘4-일)아세트산의 합성
THF(3 mL) 및 물(3 mL) 중의 메틸 2-(3-메틸-1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)아세테이트 (240 mg, 0.723 mmol, 1.0 eq.)의 용액에 LiOH (70 mg, 2.9 mmol, 4.0 eq.)를 첨가하였다. 상기 혼합물을 40℃에서 1시간 동안 교반하였다. 혼합물은 물(25 mL)로 희석하고 EtOAc (3 x 10 mL)로 추출하였다. 물 층은 2M HCl을 사용하여 pH 6으로 조정하였다. 혼합물을 EtOAc(3 x 15 mL)로 추출하고, Na2SO4상에서 건조시키고, 진공하에 농축하여 무색 오일로서 2-(3-메틸-1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)아세트산(140 mg, 수율 61.3%)을 수득하였다.
LCMS: (ESI) (M+H)+ = 304.1.
단계 F: 2-(3-메틸-1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)-N-((S)-2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)아세트아미드의 합성
THF(5 mL) 중의 2-(3-메틸-1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)아세트산(160 mg, 0.42 mmol, 1 eq.)의 용액에 DIPEA (109 mg, 0.84 mmol, 2.0 eq.) 및 HATU (239 mg, 0.63 mmol, 1.5 eq.)을 첨가하고, 이어서 (S)-5-((1-(아미노옥시)프로판-2-일)아미노)-4-(트리플루오로메틸)-2-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)피리다진-3(2H)-온 (140 mg, 0.46 mmol, 1.1 eq.)을 적가하였다. 반응 혼합물은 물(10 mL)로 켄칭시키고 EtOAc (3 x 10 mL)로 추출하였다. 유기층을 배합하고 염수 (10 mL)로 세척하고, Na2SO4상에서 건조시키고, 진공 농축시켰다. 잔사를 실리카 겔 크로마토그래피(석유 에테르/EtOAc= 4/6, V/V)로 정제하여 무색 오일로서 2-(3-메틸-1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)-N-((S)-2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)아세트아미드(170 mg, 수율 48.9%)을 수득하였다.
LCMS: (ESI) (M+H)+ = 668.3.
단계 G: 2-(3-메틸-1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)-N-((S)-2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)아세트아미드의 합성
DCM(2 mL) 중의 2-(3-메틸-1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)-N-((S)-2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)아세트아미드(170 mg, 0.256 mmol, 1.0 eq.)의 용액에 TFA(0.2 mL)를 첨가하였다. 수득한 혼합물을 20분 동안 25 ℃에서 교반하였다. 혼합물을 포화 NaHCO3 수용액(5mL)으로 중화시키고 DCM(3 x 10mL)으로 추출하였다. 유기층을 배합하고 Na2SO4상에서 건조시키고, 진공 농축시켰다. 잔사는 MeOH (3 mL)에 재용해시키고, K2CO3 (93 mg, 0.67 mmol, 3.0 eq.)를 첨가하였다. 혼합물은 추가로 1시간동안 25 ℃에서 교반하였다. 반응 혼합물을 여과하고 여과물을 실리카 겔 크로마토그래피(석유 에테르/EtOAc= 1/100, V/V)로 정제하여 백색 고체로서 2-(3-메틸-1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)-N-((S)-2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)아세트아미드(5.7 mg, 수율 4.1%)을 수득하였다.
LCMS: LCMS (ESI) (M+H)+ = 538.4.
1H NMR: (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 12.52 (s, 1H), 11.20 (s, 1H), 8.66 (s, 2H), 7.92 (s, 1H), 6.63 (s, 1H), 4.52 (d, J = 13.3 Hz, 1H), 4.37 (d, J = 13.2 Hz, 1H), 4.27 - 4.13 (m, 1H), 4.00 - 3.80 (m, 2H), 3.33 - 3.28 (m, 1H), 3.20 - 3.11 (m, 1H), 2.05 - 1.88 (m, 3H), 1.54 - 1.45 (m, 1H), 1.45 - 1.33 (m, 1H), 1.23 - 1.16 (m, 4H), 0.77 (d, J = 6.9 Hz, 3H).
실시예 53
2-(3-플루오로-1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)-N-((S)-2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)아세트아미드
단계 A: (E)-3급-부틸 3-플루오로-4-(2-메톡시-2-옥소에틸리덴)피페리딘-1-카복실레이트의 합성
THF(12 mL) 중의 트리메틸 포스포노아세이트(755 mg, 4.14 mmol, 1.0 eq.) 용액에 N2 대기하에 빙수 욕조에서 0℃에서 NaH(60%, 174 mg, 4.35 mmol, 1.05 eq.)를 첨가하였다. 혼합물은 0.5시간동안 0 ℃에서 교반하였다. THF(4 mL) 중의 3급-부틸 3-플루오로-4-옥소피페리딘-1-카복실레이트(900 mg, 4.14 mmol, 1.0 eq.)의 용액을 상기 반응 혼합물에 적가하였다. 혼합물은 3시간동안 25 ℃에서 교반하였다. 혼합물은 포화된 NH4Cl 수용액(30 mL)으로 켄칭시키고 EtOAc (2 x 40 mL)로 추출하였다. 유기층을 배합하고 Na2SO4상에서 건조시키고, 진공 농축시켰다. 잔사를 실리카 겔 크로마토그래피(석유 에테르/EtOAc=10/1; V/V)로 정제하여 백색 고체로서 (E)-3급-부틸 3-플루오로-4-(2-메톡시-2-옥소에틸리덴)피페리딘-1-카복실레이트(280 mg, 24.7%)를 수득하였다.
LCMS: (ESI)　(M+H-100)+ = 174.1.
1H NMR: (400 MHz, CDCl3) δ 6.01 (s, 1H), 4.86 (d, J = 47.6 Hz, 1H), 4.19 - 3.82 (m, 1H), 3.75 (s, 3H), 3.74 - 3.69 (m, 1H), 3.53 - 3.13 (m, 3H), 2.58 (s, 1H), 1.49 (s, 9H).
단계 B: 3급-부틸 3-플루오로-4-(2-메톡시-2-옥소에틸)피페리딘-1-카복실레이트의 합성
THF (6 mL) 중의 (E)-3급-부틸 3-플루오로-4-(2-메톡시-2-옥소에틸리덴)피페리딘-1-카복실레이트 (250 mg, 0.92 mmol, 1.0 eq)의 혼합물에 PtO2(46 mg)를 첨가하였다. 혼합물은 3시간 동안 H2 대기하에 25 ℃에서 교반시켰다. 혼합물을 여과하고 여과물을 진공하에 농축시켜 백색 고체로서 3급-부틸 3-플루오로-4-(2-메톡시-2-옥소에틸)피페리딘-2-카복실레이트(250 mg, 99.3%)를 수득하였다.
LCMS:　(ESI)　(M+H-56)+ = 220.2.
단계 C: 메틸 2-(3-플루오로피페리딘-4-일)아세테이트 하이드로클로라이드의 합성
DCM (6 mL) 중의 3급-부틸 3-플루오로-4-(2-메톡시-2-옥소에틸)피페리딘-1-카복실레이트 (250 mg, 0.91 mmol, 1.0 eq)의 혼합물에 HCl/디옥산(4M, 3 mL)을 첨가하였다. 혼합물은 1시간동안 25 ℃에서 교반하였다. 혼합물을 진공 농축시켜 백색 고체로서 메틸 2-(3-플루오로피페리딘-4-일)아세테이트 하이드로클로라이드(170 mg, 88.5%)를 수득하였다.
LCMS: (ESI)　(M+H)+ = 176.1.
단계 D: 메틸 2-(3-플루오로-1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)아세테이트의 합성
NMP(2 mL) 중의 메틸 2-(3-플루오로피페리딘-4-일)아세테이트 하이드로클로라이드(165 mg, 0.78 mmol, 1.0 eq.)의 혼합물에 DIPEA(302 mg, 2.34 mmol, 3.0 eq.)와 2-클로로-5-(트리플루오로메틸)피리미딘(157 mg, 0.86 mmol, 1.1 eq.)을 첨가하였다. 혼합물은 2시간 동안 80 ℃에서 교반하였다. 혼합물을 실온으로 냉각시키고 물(30 mL)로 희석시키고 EtOAc(2 x 50mL)로 추출하였다. 유기층을 배합하고 염수 (2 x 50 mL)로 세척하고, Na2SO4상에서 건조시키고, 진공 농축시켰다. 잔사를 컬럼 크로마토그래피(석유 에테르/EtOAc= 7/1; V/V)로 정제하여 백색 고체로서 2-(3-플루오로-1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)아세테이트(100 mg, 39.9%)을 수득하였다.
LCMS: (ESI)　(M+H)+ = 322.1.
1H NMR: (400 MHz, CDCl3) δ 8.48 (s, 2H), 5.31 - 5.22 (m, 1H), 4.97 - 4.92 (m, 1H), 4.81 (d, J = 47.6 Hz, 1H), 3.71 (s, 3H), 3.18 - 3.02 (m, 1H), 3.01 - 2.92 (m, 1H), 2.63 -2.53 (m, 1H), 2.40 - 2.32 (m, 1H), 2.31 - 2.18 (m, 1H), 1.71 - 1.65 (m, 2H).
단계 E: 2-(3-플루오로-1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)아세트산의 합성
THF(3 mL) 및 H2O(1.5 mL) 중의 메틸 2-(3-플루오로-1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)아세테이트 (95 mg, 0.30 mmol, 1.0 eq.)의 혼합물에 수산화리튬 (29 mg, 1.18 mmol, 4.0 eq.)를 첨가하였다. 혼합물은 1시간동안 25 ℃에서 교반하였다. 혼합물은 물(20 mL)로 희석하고 1M HCl을 사용하여 pH 6으로 조정하였다. 혼합물은 EtOAc (2 x 50 mL)로 추출하였다. 유기층을 배합하고, 염수(50 mL)로 세척하고, Na2SO4상에서 건조시키고, 진공하에 농축하여 백색 고체로서 2-(3-플루오로-1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)아세트산(90 mg, 99.1%)을 수득하였다.
LCMS:　(ESI)　(M+H)+ = 308.1.
단계 F: 2-(3-플루오로-1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)-N-((S)-2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)아세트아미드의 합성
DMF(5 mL) 중의 2-(3-플루오로-1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)아세트산(95 mg, 0.31 mmol, 1.0 eq.)의 혼합물에 (S)-5-((1-(아미노옥시)프로판-2-일)아미노)-4-(트리플루오로메틸)-2-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)피리다진-3(2H)-온(126 mg, 0.34 mmol, 1.1 eq.), DIPEA(120 mg, 0.93 mmol, 3.0 eq.)와 HATU(142 mg, 0.37 mmol, 1.2 eq.)를 첨가하였다. 혼합물은 1시간동안 25 ℃에서 교반하였다. 혼합물은 물(30 mL)로 켄칭시키고 EtOAc (2 x 50 mL)로 추출하였다. 유기층을 배합하고 염수 (2 x 50 mL)로 세척하고, Na2SO4상에서 건조시키고, 진공 농축시켰다. 잔사를 실리카 겔 크로마토그래피(석유 에테르/EtOAc= 3/7; V/V)로 정제하여 백색 고체로서 2-(3-플루오로-1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)-N-((S)-2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)아세트아미드(140 mg, 68.9%)을 수득하였다.
LCMS: (ESI) (M+H)+ = 672.2.
단계 G: 2-(3-플루오로-1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)-N-((S)-2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)아세트아미드의 합성
DCM(6 mL) 중의 2-(3-플루오로-1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)-N-((S)-2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)아세트아미드(130 mg, 0.2 mmol, 1.0 eq.)의 혼합물에 TFA(2 mL)를 첨가하였다. 혼합물은 1시간동안 25 ℃에서 교반하였다. 혼합물은 진공하에 농축시켰다. 잔사는 MeOH (4 mL)에 재용해시키고, K2CO3 (126 mg, 0.91 mmol)를 첨가하였다. 혼합물은 추가로 1시간동안 25 ℃에서 교반하였다. 혼합물을 여과하고 여과물을 prep-HPLC(FA)로 정제하여 백색 고체로서 2-(3-플루오로-1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)-N-((S)-2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)아세트아미드(24.34 mg, 22.7%)를 수득하였다.
LCMS: (ESI)　(M+H)+ = 542.2.
1H NMR: (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 12.49 (s, 1H), 11.22 (s, 1H), 8.68 (s, 2H), 7.91 (s, 1H), 6.60 (s, 1H), 5.10 - 4.98 (m, 1H), 4.86 - 4.71 (m, 2H), 4.28 - 4.15 (m, 1H), 3.97 - 3.80 (m, 2H), 3.27 - 3.15 (m, 1H), 3.02 (t, J = 12.8 Hz, 1H), 2.34 - 2.27 (m, 1H), 2.19 - 2.12 (m, 1H), 2.03 - 1.93 (m, 1H), 1.63 - 1.54 (m, 1H), 1.47 - 1.33 (m, 1H), 1.19 (d, J = 6.4 Hz, 3H).
실시예 54
2-((3S, 4R)-3-하이드록시-1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)-N-((S)-2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)아세트아미드
단계 A: 3급-부틸 3-하이드록시-4-(2-메톡시-2-옥소에틸리덴)피페리딘-1-카복실레이트의 합성
DCE (60 mL) 중의 3급-부틸 하이드로퍼옥사이드(1.59 g, 17.60 mmol, 1.0 eq.)의 용액에 3급-부틸 4-(2-메톡시-2-옥소에틸리덴)피페리딘-1-카복실레이트 (4.50 g, 17.60 mmol, 1.1 eq.) 및 SeO2 (1.96 g, 17.60 mmol, 1.0 eq.)를 첨가하였다. 혼합물은 12시간동안 70℃에서 교반하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고 물(40 mL)로 희석시키고 DCM(3 x 50 mL)로 추출하였다. 유기 추출물을 배합하고 염수 (50 mL)로 세척하고, Na2SO4상에서 건조시키고, 진공 농축시켰다. 잔사를 플래시 크로마토그래피(EtOAc/석유 에테르=1/1; V/V)로 정제하여 황색 고체로서 3급-부틸 3-하이드록시-4-(2-메톡시-2-옥소에틸리덴)피페리딘-1-카복실레이트(740 mg, 15.5%)를 수득하였다.
LCMS: (ESI)　(M+H-100)+ = 172.2.
1H NMR: (400 MHz, CDCl3)　δ　6.05 (s, 1H), 4.21 - 4.12 (m, 1H), 4.02 (d, J = 11.2 Hz, 1H), 3.84 - 3.74 (m, 1H), 3.72 (s, 3H), 3.54 (dt, J = 14.4, 4.4 Hz, 1H), 3.19 - 2.99 (m, 2H), 2.48 - 2.37 (m, 1H), 1.47 (s, 9H).
단계 B: 3급-부틸 3-하이드록시-4-(2-메톡시-2-옥소에틸)피페리딘-1-카복실레이트의 합성
MeOH (10 mL) 중의 3급-부틸 3-하이드록시-4-(2-메톡시-2-옥소에틸리덴)피페리딘-1-카복실레이트(740 mg, 2.72 mmol, 1.0 eq)의 혼합물에 N2 대기하에 Pd/C (10%, 483 mg)를 첨가하였다. 반응 혼합물은 탈기시키고 3회 동안 H2로 퍼징하였다. 혼합물은 0.5시간 동안 H2 대기하에 25 ℃에서 교반시켰다. 혼합물을 여과하고 여과물을 진공하에 농축시켜 무색 오일로서 3급-부틸 3-하이드록시-4-(2-메톡시-2-옥소에틸)피페리딘-2-카복실레이트(670 mg, 89.9%)를 수득하였다.
LCMS: (ESI)　(M+Na)+ = 295.9.
단계 C: 메틸 2-(3-하이드록시피페리딘-4-일)아세테이트 하이드로클로라이드의 합성
DCM (3 mL) 중의 3급-부틸 3-하이드록시-4-(2-메톡시-2-옥소에틸)피페리딘-1-카복실레이트 (640 mg, 2.34 mmol, 1.0 eq)의 혼합물에 HCl/디옥산(4M, 2 mL)을 첨가하였다. 혼합물은 1시간동안 25 ℃에서 교반하였다. 혼합물을 진공 농축시켜 무색 오일로서 메틸 2-(3-플루오로피페리딘-4-일)아세테이트 하이드로클로라이드(490 mg, 99.0%)를 수득하였다.
LCMS: (ESI)　(M+H)+ = 174.2.
단계 D: 메틸 2-(3-하이드록시-1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)아세테이트의 합성
NMP(12 mL) 중의 메틸 2-(3-하이드록시피페리딘-4-일)아세테이트 하이드로클로라이드(490 mg, 2.34 mmol, 1.1 eq.)와 DIPEA(1.09 g, 8.44 mmol, 4.0 eq.)의 혼합물에 2-클로로-5-(트리플루오로메틸)피리미딘(385 mg, 2.11 mmol, 1.0 eq)을 첨가하였다. 혼합물은 3시간동안 25 ℃에서 교반하였다. 혼합물은 물(60 mL)로 희석하고 EtOAc (3 x 50 mL)로 추출하였다. 유기 추출물을 배합하고 포화 수성 NH4Cl(2 x 50 mL)로 세척하고, Na2SO4상에서 건조시키고, 진공 농축시켰다. 잔사를 플래시 크로마토그래피(EtOAc/석유 에테르= 1/3; V/V)로 정제하여 황색 고체로서 메틸 2-(3-하이드록시-1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)아세테이트(170 mg, 25.3%)을 수득하였다.
LCMS: (ESI)　(M+H)+ = 320.1.
1H NMR: (400　MHz,　CDCl3) δ 8.49 (s, 2H), 4.99 (ddd, J = 12.8, 4.8, 2.0 Hz, 1H), 4.84 - 4.76 (m, 1H), 3.73 (s, 3H), 3.45 - 3.36 (m, 1H), 2.96 (td, J = 12.8, 2.8 Hz, 1H), 2.82 (dd, J = 12.8, 10.4 Hz, 1H), 2.76 - 2.71 (m, 1H), 2.45 (d, J = 5.2 Hz, 1H), 2.33 (dd, J = 16.0, 6.4 Hz, 1H), 2.14 -2.01 (m, 1H), 1.96 - 1.87 (m, 1H) , 1.55 - 1.45 (m, 1H).
단계 E: 메틸 2-(3-((테트라하이드로-2H-피란-2-일)옥시)-1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)아세테이트의 합성
THF(6 mL) 중의 메틸 2-(3-하이드록시-1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)아세테이트 (160 mg, 0.50 mmol, 1.0 eq.)와 3,4-디하이드로-2H-피란(129 mg, 1.50 mmol, 3.0 eq.)의 혼합물에 피리디늄 p-톨루엔설포네이트(13 mg, 0.05 mmol, 0.1 eq)을 첨가하였다. 반응 혼합물은 12시간 동안 25℃에서 교반시켰다. 혼합물은 물(10 mL)로 희석시키고 DCM (3 x 15 mL)로 추출하였다. 유기 추출물을 배합하고 염수 (2 x 10 mL)로 세척하고, Na2SO4상에서 건조시키고, 진공 농축시켰다. 잔사를 플래시 크로마토그래피(EtOAc/석유 에테르= 1/3; V/V)로 정제하여 황색 고체로서 메틸 2-(3-((테트라하이드로-2H-피란-2-일)옥시)-1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)아세테이트(160 mg, 79.0%)를 수득하였다.
LCMS: (ESI)　(M+H)+ = 404.2.
1H NMR:　(400　MHz,　CDCl3) δ 8.46 (s, 2H), 5.27 - 4.96 (m, 1H), 4.81 - 4.54 (m, 2H), 4.02 - 3.82 (m, 1H), 3.69 (d, J = 4.0 Hz, 3H), 3.63 - 3.48 (m, 1H), 3.44 - 3.21 (m, 1H), 3.01 - 2.75 (m, 2H), 2.68 - 2.45 (m, 1H), 2.24 - 2.09 (m, 2H), 2.02 - 1.90 (m, 1H), 1.86 - 1.70 (m, 3H), 1.68 - 1.60 (m, 1H), 1.56 - 1.50 (m, 2H), 1.35 - 1.24 (m, 1H).
단계 F: 2-(3-((테트라하이드로-2H-피란-2-일)옥시)-1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)아세트산의 합성
THF(3 mL) 및 H2O(1 mL) 중의 메틸 2-(3-((테트라하이드로-2H-피란-2-일)옥시)-1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)아세테이트 (160 mg, 0.40 mmol, 1.0 eq.)의 혼합물에 LiOH (50 mg, 1.20 mmol, 3.0 eq.)를 첨가하였다. 혼합물은 12시간동안 25 ℃에서 교반하였다. 혼합물은 물(6 mL)로 희석하고 1M HCl을 사용하여 pH 7로 중화시켰다. 혼합물은 EtOAc (3 x 10 mL)로 추출하였다. 유기층을 배합하고, 염수(10 mL)로 세척하고, Na2SO4상에서 건조시키고, 진공하에 농축하여 백색 고체로서 2-(3-((테트라하이드로-2H-피란-2-일)옥시)-1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)아세트산(153 mg, 수율 98.0%)을 수득하였다.
LCMS: (ESI)　(M+H)+ = 390.2.
단계 G: N-((S)-2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)-2-(3-((테트라하이드로-2H-피란-2-일)옥시)-1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)아세트아미드의 합성
DMF(5 mL) 중의 2-(3-((테트라하이드로-2H-피란-2-일)옥시)-1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)아세트산(153 mg, 0.39 mmol, 1.0 eq.) 및 (S)-5-((1-(아미노옥시)프로판-2-일)아미노)-4-(트리플루오로메틸)-2-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)피리다진-3(2H)-온(164 mg, 0.43 mmol, 1.1 eq.)의 혼합물에 DIPEA(152 mg, 1.18 mmol, 3.0 eq.)와 HATU(13.76 g, 0.47 mmol, 1.2 eq.)를 첨가하였다. 혼합물은 5시간동안 25 ℃에서 교반하였다. 혼합물은 물(30 mL)로 희석하고 EtOAc (3 x 30 mL)로 추출하였다. 유기 추출물을 배합하고 포화 NH4Cl 수용액 (2 x 30 mL)으로 세척하고, Na2SO4상에서 건조시키고, 진공하에 농축시켰다. 잔사를 prep-TLC(MeOH/DCM= 1/20; V/V)로 정제하여 황색 고체로서 N-((S)-2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)-2-(3-((테트라하이드로-2H-피란-2-일)옥시)-1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)아세트아미드(135 mg, 45.5%)를 수득하였다.
LCMS: (ESI) (M+Na)+ = 776.2.
단계 H: 2-((3S,4R)-3-하이드록시-1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일) 피페리딘-4-일)-N-((S)-2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)아세트아미드의 합성
DCM (2.0 mL) 중의 N-((S)-2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)-2-(3-((테트라하이드로-2H-피란-2-일)옥시)-1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)아세트아미드(65 mg, 0.086 mmol, 1.0 eq.)의 혼합물에 TFA(0.6 mL)를 첨가하였다. 혼합물은 0.5시간동안 25 ℃에서 교반하였다. 반응 혼합물은 진공 농축시켰다. 잔사는 MeOH (2 mL)에 용해시키고, K2CO3 (36 mg, 0.26 mmol, 3.0 eq.)를 혼합물에 첨가하였다. 혼합물은 추가로 0.5시간동안 25 ℃에서 교반하였다. 혼합물을 여과하고 여과물을 prep-HPLC로 정제하여 백색 고체로서 2-((3S,4R)-3-하이드록시-1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)-N-((S)-2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)아세트아미드(9.17 mg, 21.0%)를 수득하였다.
LCMS: (ESI) (M+H)+ = 540.2.
1H NMR: (400　MHz,　DMSO-d 6 ) δ 12.51 (s, 1H), 11.14 (s, 1H), 8.69 (s, 2H), 7.93 (s, 1H), 6.64 (s, 1H), 5.22 (d, J = 3.2 Hz, 1H), 4.77 (dd, J = 12.4, 3.6 Hz, 1H), 4.63 (d, J = 13.2 Hz, 1H), 4.29 - 4.16 (m, 1H), 3.95 - 3.80 (m, 2H), 3.16 - 3.06 (m, 1H), 2.93 (t, J = 12.4 Hz, 1H), 2.80 - 2.71 (m, 1H), 2.51 - 2.45 (m, 1H), 1.95 - 1.83 (m, 1H), 1.82 - 1.66 (m, 2H), 1.21 (d, J = 6.4 Hz, 3H), 1.16 - 1.05 (m, 1H).
실시예 55
2-((3R, 4R)-3-하이드록시-1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)-N-((S)-2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)아세트아미드
단계 A: 2-((3R,4R)-3-하이드록시-1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일) 피페리딘-4-일)-N-((S)-2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노) 프로폭시)아세트아미드의 합성
DCM (2.0 mL) 중의 N-((S)-2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)-2-(3-((테트라하이드로-2H-피란-2-일)옥시)-1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)아세트아미드(65 mg, 0.086 mmol, 1.0 eq.)의 혼합물에 TFA(0.6 mL)를 첨가하였다. 혼합물은 0.5시간동안 25 ℃에서 교반하였다. 반응 혼합물은 진공 농축시켰다. 잔사는 MeOH (2 mL)에 용해시키고, K2CO3 (36 mg, 0.26 mmol, 3.0 eq.)를 혼합물에 첨가하였다. 혼합물은 추가로 0.5시간동안 25 ℃에서 교반하였다. 혼합물을 여과하고 여과물을 prep-HPLC로 정제하여 백색 고체로서 2-((3R,4R)-3-하이드록시-1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)피페리딘-4-일)-N-((S)-2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)아세트아미드(11.25 mg, 22.5%)를 수득하였다.
LCMS: (ESI) (M+H)+ = 540.2.
1H NMR:　(400　MHz,　DMSO-d 6 ) δ 12.50 (s, 1H), 11.13 (s, 1H), 8.67 (s, 2H), 7.91 (s, 1H), 6.67 - 6.56 (m, 1H), 5.25 - 5.16 (m, 1H), 4.80 - 4.71 (m, 1H), 4.62 (d, J = 13.2 Hz, 1H), 4.27 - 4.16 (m, 1H), 3.95 - 3.80 (m, 2H), 3.14 - 3.05 (m, 1H), 2.95 - 2.86 (m, 1H), 2.78 - 2.70 (m, 1H), 2.50 - 2.44 (m, 1H), 1.90 - 1.82 (m, 1H), 1.80 - 1.66 (m, 2H), 1.19 (d, J = 6.4 Hz, 3H), 1.15 - 1.05 (m, 1H).
실시예 56
(S)-N-(2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)-2-(8-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)-2,8-디아자스피로(4.5)데칸-2-일)아세트아미드
단계 A: 3급-부틸 8-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)-2,8-디아자스피로(4.5)데칸-2-카복실레이트
NMP (4 mL) 중의 3급-부틸 2,8-디아자스피로(4.5)데칸-2-카복실레이트(200 mg, 0.833 mmol, 1.0 eq.)의 용액에 K2CO3(345 mg, 2.500 mmol, 3.0 eq.) 및 2-클로로-5-(트리플루오로메틸)피리미딘(167 mg, 0.916 mmol, 1.1 eq.)을 첨가하고, 수득한 혼합물을 3시간 동안 80℃에서 교반하였다. 혼합물은 실온으로 냉각시키고 물(10 mL)로 희석하였다. 혼합물은 EtOAc (3 x 10 mL)로 추출하였다. 유기층을 배합하고 염수 (10 mL)로 세척하고, Na2SO4상에서 건조시키고, 감압하에 농축시켰다. 잔사를 컬럼 크로마토그래피(석유 에테르/EtOAc=1/1; V/V)로 정제하여 백색 고체로서 3급-부틸 8-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)-2.8-디아자스피로(4.5)데칸-2-카복실레이트(290 mg, 90%)를 수득하였다.
LCMS: (ESI) (M+H-56)+ = 331.2.
1H NMR: (400 MHz, CDCl3) δ 8.47 (s, 2H), 4.15 - 4.03 (m, 1H), 4.01 - 3.90 (m, 1H), 3.87 - 3.77 (m, 1H), 3.74 - 3.64 (m, 1H), 3.44 (dt, J = 22.3, 7.0 Hz, 2H), 3.31 (s, 1H), 3.22 (s, 1H), 1.79 (t, J = 7.2 Hz, 2H), 1.66 - 1.56 (m, 4H), 1.47 (s, 9H).
단계 B: 8-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)-2,8-디아자스피로(4.5)데칸
디옥산 (2mL) 중의 3급-부틸 8-(5-트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)-2,8-디아자스피로(4.5)데칸-2-카복실레이트 (290 mg, 0.732 mmol, 1.0 eq)의 용액에 HCl/디옥산(4M, 2 mL)을 첨가하였다. 혼합물은 30분동안 실온에서 교반하였다. 진공하에 혼합물을 농축시켜 백색 고체로서 8-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)-2,8-디아자스피로(4.5)데칸(209 mg, 수율 100%)를 수득하였다.
LCMS: (ESI)　(M+H)+ = 287.2.
단계 C: 에틸 2-(8-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)-2,8-디아자스피로(4.5)데칸-2-일)아세테이트
DMF(3 mL) 중의 (8-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)-2,8-디아자스피로(4.5)데칸(130 mg, 0.454 mmol, 1.0 eq.)의 용액에 실온에서 에틸 2-브로모아세테이트(91 mg, 0.545 mmol, 1.2 eq.) 및 DIPEA (70.3 mg, 0.545 mmol, 1.2 eq.)를 첨가하였다. 수득한 혼합물을 1시간 동안 65 ℃에서 교반하였다. 혼합물은 실온으로 냉각시키고 물(10 mL)로 희석하였다. 혼합물은 EtOAc (3 x 10 mL)로 추출하였다. 유기층을 배합하고 염수 (10 mL)로 세척하고, Na2SO4상에서 건조시키고, 감압하에 농축시켰다. 잔사를 컬럼 크로마토그래피(석유 에테르/EtOAc= 3/1, V/V)로 정제하여 무색 오일로서 에틸 2-(8-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘 -2-일)-2,8-디아자스피로(4.5)데칸-2-일)아세테이트(150 mg, 88%)를 수득하였다.
LCMS: (ESI)　(M+H)+ = 373.2.
1H NMR: (400 MHz, CDCl3) δ 8.45 (d, 2H), 4.19 (q, J = 7.1 Hz, 2H), 3.85 (dt, J = 8.0, 4.6 Hz, 4H), 3.33 (s, 2H), 2.80 (t, J = 6.9 Hz, 2H), 2.63 (s, 2H), 1.76 (t, J = 6.9 Hz, 2H), 1.71 - 1.59 (m, 4H), 1.28 (t, J = 7.1 Hz, 3H).
단계 D: 2-(8-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)-2,8-디아자스피로(4.5)데칸-2-일)아세트산의 합성
THF(3 mL) 및 물(3 mL) 중의 에틸 2-(8-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)-2,8-디아자스피로(4.5)데칸-2-일)아세테이트 (150 mg, 0.403 mmol, 1.0 eq.)의 용액에 LiOH (29 mg, 1.209 mmol, 3.0 eq.)를 첨가하였다. 상기 혼합물을 실온에서 3시간 동안 교반하였다. 혼합물은 물(5 mL)로 희석하고 EtOAc (3 x 10 mL)로 추출하였다. 물 층을 시트르산에 의해 pH 6으로 조정하였다. 수득한 물 층을 EtOAc(3 x 15 mL)로 추출하고, Na2SO4상에서 건조시키고, 진공하에 농축하여 백색 고체로서 2-(8-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)-2,8-디아자스피로(4.5)데칸-2-일)아세트산(120 mg, 수율 86%)을 수득하였다.
LCMS:　(ESI)　(M+H)+ = 345.2.
단계 E: (S)-N-(2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)-2-(8-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)-2,8-디아자스피로(4.5)데칸-2-일)아세트아미드의 합성
DMF(2 mL) 중의 2-(8-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)-2,8-디아자스피로(4.5)데칸-2-일)아세트산(120 mg, 0.348 mmol, 1.0 eq.)의 용액에 DIPEA (135 mg, 1.046 mmol, 3.0 eq.) 및 HATU (158 mg, 0.417 mmol, 1.2 eq.)을 첨가하고, 이어서 (S)-5-((1-(아미노옥시)프로판-2-일)아미노)-4-(트리플루오로메틸)-2-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)피리다진-3(2H)-온 (159 mg, 0.417 mmol, 1.2 eq.)을 적가하였다. 수득한 혼합물은 1시간동안 25 ℃에서 교반하였다. 반응 혼합물은 물(10 mL)로 켄칭시키고 EtOAc (3 x 10 mL)로 추출하였다. 유기층을 배합하고 염수 (10 mL)로 세척하고, Na2SO4상에서 건조시키고, 진공 농축시켰다. 잔사를 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(석유 에테르/EtOAc= 1/3; V/V)로 정제하여 백색 고체로서 (S)-N(2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)-2-(8-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)-2,8-디아자스피로(4.5)데칸-2-일)아세트아미드(120 mg, 수율 40%)를 수득하였다.
LCMS: (ESI)　(M+H)+ = 709.4.
단계 F: (S)-N-2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)-2-(8-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)-2,8-디아자스피로(4.5)데칸-2-일)아세트아미드의 합성
DCM (2 mL) 중의 (S)-N-(2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)-2-(8-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)-2,8-디아자스피로(4.5)데칸-2-일)아세트아미드(120 mg, 0.169 mmol, 1.0 eq.)의 용액에 TFA(0.3 mL)를 첨가하였다. 수득한 혼합물은 1시간동안 25 ℃에서 교반하였다. 혼합물을 포화 NaHCO3 수용액(5mL)으로 중화시키고 DCM(3 x 10mL)으로 추출하였다. 유기층을 배합하고 Na2SO4상에서 건조시키고, 진공 농축시켰다. 잔사는 MeOH (2 mL)에 재용해시키고, K2CO3 (58 mg, 0.423 mmol, 2.5 eq.)를 혼합물에 첨가하였다. 혼합물은 추가로 1시간동안 25 ℃에서 교반하였다. 반응 혼합물을 여과하고, 여과물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(석유 에테르/EtOAc= 1/5, V/V)로 정제하여 백색 고체로서 (S)-N-(2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)-2-(8-5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)-2,8-디아자스피로(4.5)데칸-2-일)아세트아미드(60 mg, 수율 61%)을 수득하였다.
LCMS: (ESI)　(M+H)+ = 579.4.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 12.49 (s, 1H), 8.66 (s, 2H), 7.90 (s, 1H), 6.61 (s, 1H), 4.28 - 4.14 (m, 1H), 3.99 - 3.69 (m, 6H), 3.01 (s, 2H), 2.65 - 2.58 (m, 2H), 2.48 - 2.43 (m, 2H), 1.64 (t, J = 6.7 Hz, 2H), 1.58 - 1.47 (m, 4H), 1.20 (d, J = 6.5 Hz, 3H).
실시예 57
(S)-N-(2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)-2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)아제티딘-3-일)아세트아미드
단계 A: 메틸 2-(아제티딘-3-일)아세테이트
디옥산 (2 mL) 중의 3급-부틸 3-(2-메톡시-2-옥소에틸)아제티딘-1-카복실레이트 (500 mg, 2.183 mmol, 1.0 eq)의 용액에 HCl/디옥산(4M, 4 mL)을 첨가하였다. 혼합물은 30분동안 실온에서 교반하였다. 혼합물을 진공 농축시켜 백색 고체로서 메틸 2-(아제티딘-3-일)아세테이트(281 mg, 수율 100%)를 수득하였다.
LCMS: (ESI) (M+H)+ = 130.2.
단계 B: 메틸 2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)아제티딘-3-일)아세테이트
NMP (4 mL) 중의 2-클로로-5-(트리플루오로메틸)피리미딘(200 mg, 1.098 mmol, 1.0 eq.)의 용액에 K2CO3(455 mg, 3.296 mmol, 3.0 eq.) 및 메틸 2-(아제티딘-3-일)아세테이트(184 mg, 1.4427 mmol, 1.3 eq.)을 첨가하고, 수득한 혼합물을 65 ℃에서 3시간 동안 교반하였다. 혼합물은 실온으로 냉각시키고 물(10 mL)로 희석하였다. 혼합물은 EtOAc (3 x 100 mL)로 추출하였다. 유기층을 배합하고 염수 (50 mL)로 세척하고, Na2SO4상에서 건조시키고, 감압하에 농축시켰다. 잔사를 컬럼 크로마토그래피(석유 에테르/EtOAc= 1/3; V/V)로 정제하여 백색 고체로서 메틸 2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)아제티딘-3-일)아세테이트(160 mg, 53%)을 수득하였다.
LCMS: (ESI)　(M+H)+ = 276.2.
1H NMR: (400 MHz, CDCl3) δ 8.47 (s, 2H), 4.38 (t, J = 9.0 Hz, 2H), 3.89 (dd, J = 9.7, 5.5 Hz, 2H), 3.70 (s, 3H), 3.21 - 3.03 (m, 1H), 2.74 (d, J = 7.8 Hz, 2H).
단계 C: 2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)아제티딘-3-일)아세트산
THF(3 mL) 및 물(3 mL) 중의 메틸 2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)아제티딘-3-일)아세테이트 (140 mg, 0.509 mmol, 1.0 eq.)의 용액에 LiOH (36 mg, 1.527 mmol, 3.0 eq.)를 첨가하였다. 혼합물은 3시간동안 25 ℃에서 교반하였다. 혼합물은 물(5 mL)로 희석하고 EtOAc (3 x 10 mL)로 추출하였다. 물 층을 시트르산에 의해 pH 6으로 조정하였다. 수득한 혼합물을 EtOAc(3 x 15 mL)로 추출하고, Na2SO4상에서 건조시키고, 진공하에 농축하여 백색 고체로서 2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)아제티딘-3-일)아세트산(120 mg, 수율 90%)을 수득하였다.
LCMS: (ESI)　(M+H)+ = 262.2.
단계 D: (S)-N-(2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)-2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)아제티딘-3-일)아세트아미드의 합성
DMF(2 mL) 중의 2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)아제티딘-3-일)아세트산(90 mg, 0.343 mmol, 1.2 eq.)의 용액에 DIPEA (110 mg, 0.858 mmol, 3.0 eq.) 및 HATU (130 mg, 0.343 mmol, 1.2 eq.)을 첨가하고, 이어서 (S)-5-((1-(아미노옥시)프로판-2-일)아미노)-4-(트리플루오로메틸)-2-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)피리다진-3(2H)-온 (109 mg, 0.286 mmol, 1.0 eq.)을 적가하였다.수득한 혼합물은 2시간동안 25 ℃에서 교반하였다. 반응 혼합물은 물(10 mL)로 켄칭시키고 EtOAc (3 x 10 mL)로 추출하였다. 유기층을 배합하고 염수 (10 mL)로 세척하고, Na2SO4상에서 건조시키고, 진공 농축시켰다. 잔사를 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(석유 에테르/EtOAc= 1/3; V/V)로 정제하여 백색 고체로서 (S)-N-(2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)-2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)아제티딘-3-일)아세트아미드(120 mg, 수율 67%)을 수득하였다.
LCMS: (ESI)　(M+H)+ = 626.4.
1H NMR: (400 MHz, CDCl3) δ 9.26 (s, 1H), 8.48 (s, 2H), 7.72 (s, 1H), 5.93 (s, 1H), 5.42 (d, J = 9.9 Hz, 1H), 5.29 (d, J = 9.9 Hz, 1H), 4.39 (t, J = 8.9 Hz, 2H), 4.16 - 4.04 (m, 2H), 3.99 - 3.83 (m, 3H), 3.68 (t, J = 8.4 Hz, 2H), 3.24 - 3.12 (m, 1H), 2.65 - 2.50 (m, 2H), 1.36 (d, J = 6.5 Hz, 3H), 0.95 (t, J = 8.3 Hz, 2H), 0.00 (s, 9H).
단계 E: (S)-N-(2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)-2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)아제티딘-3-일)아세트아미드의 합성
DCM (2 mL) 중의 (S)-N-(2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)-2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)아제티딘-3-일)아세트아미드(110 mg, 0.176 mmol, 1.0 eq.)의 용액에 TFA(0.3mL)를 첨가하였다. 수득한 혼합물은 1시간동안 25 ℃에서 교반하였다. 혼합물을 포화 NaHCO3 수용액(5mL)으로 중화시키고 DCM(3 x 10mL)으로 추출하였다. 유기층을 배합하고 Na2SO4상에서 건조시키고, 진공 농축시켰다. 잔사는 MeOH (5 mL)에 재용해시키고, K2CO3 (61 mg, 0.44 mmol, 2.5 eq.)를 혼합물에 첨가하였다. 혼합물은 추가로 1시간동안 25 ℃에서 교반하였다. 반응 혼합물을 여과하고, 여과물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(석유 에테르/EtOAc= 1/5, V/V)로 정제하여 백색 고체로서 (S)-N-(2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)-2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)아제티딘-3-일)아세트아미드(40 mg, 수율 46%)을 수득하였다.
LCMS:　(ESI)　(M+H)+ = 496.2.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 10.94 (s, 1H), 9.90 (s, 1H), 8.48 (s, 2H), 7.75 (s, 1H), 5.77 (s, 1H), 4.37 (q, J = 9.0 Hz, 2H), 4.22 - 4.08 (m, 2H), 4.07 - 3.98 (m, 1H), 3.90 (dd, J = 9.5, 5.1 Hz, 1H), 3.85 - 3.75 (m, 1H), 3.22 - 3.08 (m, 1H), 2.65 - 2.45 (m, 2H), 1.32 (d, J = 6.3 Hz, 3H).
실시예 58
N-((S)-2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)-2-(3-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)-3,6-디아자바이사이클로(3.1.1)헵탄-6-일)아세트아미드
단계 A: 3급-부틸 3-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)-3,6-디아자바이사이클로(3.1.1)헵탄-6-카복실레이트의 합성
NMP(8 mL) 중의 3급-부틸 3,6-디아자바이사이클로(3.1.1)헵탄-6-카복실레이트(522 mg, 5.37 mmol, 1.0 eq.)와 DIPEA(1.13 g, 8.77 mmol, 4.0 eq.)의 혼합물에 2-클로로-5-(트리플루오로메틸)피리미딘(400 mg, 5.37 mmol, 1.0 eq)을 첨가하였다. 반응 혼합물은 2시간 동안 80℃에서 교반시켰다. 반응 혼합물은 실온으로 냉각시키고 물(50 mL)로 켄칭하였다. 혼합물은 EtOAc (3 x 50 mL)로 추출하였다. 유기층을 배합하고 염수 (2 x 50 mL)로 세척하고, Na2SO4상에서 건조시키고, 진공 농축시켰다. 잔사를 실리카 겔 크로마토그래피(석유 에테르/EtOAc=7/3; V/V)로 정제하여 담황색 고체로서 3급-부틸 3-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)-3,6-디아자바이사이클로(3.1.1)헵탄-6-카복실레이트(680 mg, 90.0%)를 수득하였다.
LCMS: (ESI)　(M+H-100)+ = 245.1.
1H NMR: (400 MHz, CDCl3) δ 8.60 (s, 2H), 4.40 - 4.17 (m, 4H), 3.71 (d, J = 12.8 Hz, 2H), 2.76 - 2.68 (m, 1H), 1.52 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 1.42 (s, 9H).
단계 B: 3-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)-3,6-디아자바이사이클로(3.1.1)헵탄 하이드로클로라이드의 합성
DCM(5 mL) 중의 3급-부틸 3-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)-3,6-디아자바이사이클로(3.1.1)헵탄-6-카복실레이트(612 mg, 1.78 mmol)의 용액에 HCl/디옥산(4M, 5 mL)을 첨가하였다. 혼합물은 1시간동안 25 ℃에서 교반하였다. 진공하에 혼합물을 농축시켜 백색 고체로서 3-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)-3,6-디아자바이사이클로(3.1.1)헵탄 하이드로클로라이드(499 mg, 99%)를 수득하였다.
LCMS: (ESI)　(M+H)+ = 245.1.
단계 C: 에틸 2-(3-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)-3,6-디아자바이사이클로(3.1.1)헵탄-6-일)아세테이트의 합성
NMP(5 mL) 중의 (3-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)-3,6-디아자바이사이클로(3.1.1)헵탄 하이드로클로라이드(499 mg, 1.78 mmol, 1.0 eq.)의 혼합물에 DIPEA(1.15 g, 8.89 mmol, 5.0 eq.) 및 에틸 2-브로모아세테이트 (594 mg, 3.56 mmol, 2.0 eq.)를 첨가하였다. 혼합물은 1.5시간동안 70℃에서 교반하였다. 혼합물은 실온으로 냉각시키고 EtOAc (60 mL)로 희석하였다. 혼합물은 포화된 NH4Cl 수용액(3 x 40 mL)으로 세척하였다. 유기층을 Na2SO4상에서 건조시키고; 진공하에 농축시켰다. 잔사를 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(석유 에테르/EtOAc= 1/1; V/V)로 정제하여 백색 고체로서 에틸 2-(3-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘 -2-일)-3.6-디아자바이사이클로(3.1.1)헵탄-6-일)아세테이트(394 mg, 67.1%)을 수득하였다.
LCMS: (ESI)　(M+H)+ = 331.1.
단계 D: 2-(3-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)-3,6-디아자바이사이클로(3.1.1)헵탄-6-일)아세트산의 합성
THF(3 mL) 및 H2O(1.5 mL) 중의 에틸 2-(3-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)-3,6-디아자바이사이클로(3.1.1)헵탄-6-일)아세테이트 (150 mg, 0.46 mmol, 1.0 eq.)의 혼합물에 수산화리튬 (44 mg, 1.82 mmol, 4.0 eq.)를 첨가하였다. 혼합물은 1시간동안 25 ℃에서 교반하였다. 혼합물은 1M HCl을 사용하여 pH 6으로 조정하였다. 혼합물을 역상 크로마토그래피(ACN/H2O = 20/80; V/V)로 정제하여 황색 고체로서 2-(3-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)-3,6-디아자바이사이클로(3.1.1)헵탄-6-일)아세트산(80 mg, 58.3%)을 수득하였다.
LCMS: (ESI)　(M+H)+ = 303.1.
단계 E: N-((S)-2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)-2-(3-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)-3,6-디아자바이사이클로(3.1.1)헵탄-6-일)아세트아미드의 합성
DMF(5 mL) 중의 2-(3-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)-3,6-디아자바이사이클로(3.1.1)헵탄-6-일)아세트산(40 mg, 0.13 mmol, 1.1 eq.)의 혼합물에 (S)-5-((1-(아미노옥시)프로판-2-일)아미노)-4-(트리플루오로메틸)-2-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)피리다진-3(2H)-온(44 mg, 0.12 mmol, 1.0 eq.), DIPEA(47 mg, 0.36 mmol, 3.0 eq.)와 HATU(53 mg, 0.14 mmol, 1.2 eq.)를 첨가하였다. 혼합물은 1시간동안 25 ℃에서 교반하였다. 반응 혼합물은 물(50 mL)로 켄칭시키고 EtOAc (2 x 40 mL)로 추출하였다. 유기층을 배합하고 염수 (2 x 40 mL)로 세척하고, Na2SO4상에서 건조시키고, 진공 농축시켰다. 잔사를 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(석유 에테르/EtOAc= 1/1; V/V)로 정제하여 황색 고체로서 N-((S)-2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)-2-(3-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)-3,6-디아자바이사이클로(3.1.1)헵탄-6-일)아세트아미드(50 mg, 62.5%)을 수득하였다.
LCMS: (ESI) (M+H)+ = 667.3.
단계 F: N-((S)-2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)-2-(3-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)-3,6-디아자바이사이클로(3.1.1)헵탄-6-일)아세트아미드의 합성
DCM (3 mL) 중의 N-((S)-2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)-2-(3-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)-3,6-디아자바이사이클로(3.1.1)헵탄-6-일)아세트아미드(50 mg, 0.07 mmol, 1.0 eq.)의 혼합물에 TFA(1 mL)를 첨가하였다. 혼합물은 0.5시간동안 25 ℃에서 교반하였다. 혼합물은 진공하에 농축시켰다. 잔사는 MeOH (2 mL)에 재용해시키고, K2CO3 (62 mg, 0.45 mmol)를 첨가하였다. 혼합물은 추가로 0.5시간동안 25 ℃에서 교반하였다. 혼합물을 여과하고, 여과물을 prep-HPLC로 정제하여 백색 고체로서 N-((S)-2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)-2-(3-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)-3,6-디아자바이사이클로(3.1.1)헵탄-6-일)아세트아미드(10.18 mg, 25.3%)을 수득하였다.
LCMS:　(ESI)　(M+H)+ = 537.2.
1H NMR: (400 MHz, CDCl3) δ 11.26 (br s, 1H), 8.63 (s, 2H), 7.77 (s, 1H), 5.99 (s, 1H), 4.25 - 4.08 (m, 4H), 4.06 - 3.85 (m, 5H), 3.60 - 3.30 (m, 2H), 3.03 - 2.90 (m, 1H), 1.78 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 1.36 (d, J = 6.0 Hz, 3H).
실시예 59
N-((S)-2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)-2-(3-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)-3,8-디아자바이사이클로(3.2.1)옥탄-8-일)아세트아미드
단계 A: 3급-부틸 3-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)-3,8-디아자바이사이클로(3.2.1)옥탄-8-카복실레이트의 합성
NMP(5 mL) 중의 2-클로로-5-(트리플루오로메틸)피리미딘(250 mg, 1.37 mmol, 1.0 eq.)의 혼합물에 3급-부틸 3,8-디아자바이사이클로(3.2.1)옥탄-8-카복실레이트(291 mg, 1.37 mmol, 1.0 eq.) 및 DIPEA(531 mg, 4.11 mmol, 3.0 eq.)를 첨가하였다. 혼합물은 2시간 동안 80 ℃에서 교반하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고 물(50 mL)로 희석시키고 EtOAc(2 x 50mL)로 추출하였다. 유기층을 배합하고 염수(2 x 50 mL)로 세척하고, Na2SO4상에서 건조시키고, 진공 농축시켰다. 잔사를 실리카 겔 크로마토그래피(석유 에테르/EtOAc=4/1; V/V)로 정제하여 백색 고체로서 3급-부틸 3-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)-3,8-디아자바이사이클로(3.2.1)옥탄-8-카복실레이트(453 mg, 92.2%)를 수득하였다.
LCMS: (ESI)　(M+H-56)+ = 303.1.
1H NMR: (400 MHz, CDCl3) δ 8.53 (s, 2H), 4.59 - 4.49 (m, 2H), 4.49 - 4.27 (m, 2H), 3.34 - 3.12 (m, 2H), 2.06 - 1.88 (m, 2H), 1.73 - 1.67 (m, 2H), 1.54 (s, 9H).
단계 B: 3-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)-3,8-디아자바이사이클로(3.2.1)옥탄 하이드로클로라이드의 합성
DCM(3 mL) 중의 3급-부틸 3-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)-3,8-디아자바이사이클로(3.2.1)옥탄-8-카복실레이트(275 mg, 0.77 mmol, 1.0 eq.)의 혼합물에 HCl/디옥산(4M, 3 mL)을 첨가하였다. 혼합물은 1시간동안 25 ℃에서 교반하였다. 진공하에 혼합물을 농축시켜 백색 고체로서 3-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)-3,8-디아자바이사이클로(3.2.1)옥탄 하이드로클로라이드(200 mg, 88.5%)를 수득하였다.
LCMS: (ESI)　(M+H)+ = 259.1.
단계 C: 에틸 2-(3-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)-3,8-디아자바이사이클로(3.2.1)옥탄-8-일)아세테이트의 합성
NMP(5 mL) 중의 (3-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)-3,8-디아자바이사이클로(3.2.1)옥탄 하이드로클로라이드(270 mg, 0.92 mmol, 1.0 eq.)의 혼합물에 DIPEA(592 mg, 4.58 mmol, 5.0 eq.) 및 에틸 2-브로모아세테이트 (306 mg, 1.83 mmol, 2.0 eq.)를 첨가하였다. 혼합물은 1.5시간동안 70℃에서 교반하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고 물(50 mL)로 희석시키고 EtOAc(2 x 80mL)로 추출하였다. 유기층을 배합하고 염수 (2 x 60 mL)로 세척하고, Na2SO4상에서 건조시키고, 진공 농축시켰다. 잔사를 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(석유 에테르/EtOAc= 4/1; V/V)로 정제하여 황색 고체로서 에틸 2-(3-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)-3,8-디아자바이사이클로(3.2.1)헵탄-8-일)아세테이트(300 mg, 95.1%)을 수득하였다.
LCMS:　(ESI)　(M+H)+ = 345.1.
1H NMR:　(400 MHz, CDCl3) δ 8.50 (s, 2H), 4.41 (dd, J = 13.2, 2.0 Hz, 2H), 4.26 (q, J = 7.2 Hz, 2H), 3.49 - 3.43 (m, 2H), 3.34 (d, J = 12.4 Hz, 2H), 3.28 (s, 2H), 2.03 - 1.94 (m, 2H), 1.72 - 1.61 (m, 2H), 1.33 (t, J = 7.2 Hz, 3H).
단계 D: 2-(3-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)-3,8-디아자바이사이클로(3.2.1)옥탄-8-일)아세트산의 합성
THF(4 mL) 및 H2O(2 mL) 중의 에틸 2-(3-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)-3,8-디아자바이사이클로(3.2.1)옥탄-8-일)아세테이트 (150 mg, 0.44 mmol, 1.0 eq.)의 혼합물에 수산화리튬 (42 mg, 1.74 mmol, 4.0 eq.)을 첨가하였다. 혼합물은 1시간동안 25 ℃에서 교반하였다. 혼합물은 1M HCl을 사용하여 pH 6으로 주의깊게 조정하였다. 혼합물을 역상 크로마토그래피(ACN/H2O = 20/80; V/V)로 정제하여 황색 고체로서 2-(3-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)-3,8-디아자바이사이클로(3.2.1)옥탄-8-일)아세트산(100 mg, 72.6%)을 수득하였다.
LCMS: (ESI)　(M+H)+ = 317.2.
단계 E: N-((S)-2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)-2-(3-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)-3,8-디아자바이사이클로(3.2.1)옥탄-8-일)아세트아미드의 합성
DMF(1 mL) 중의 2-(3-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)-3,8-디아자바이사이클로(3.2.1)옥탄-8-일)아세트산(57 mg, 0.18 mmol, 1.1 eq.)의 혼합물에 (S)-5-((1-(아미노옥시)프로판-2-일)아미노)-4-(트리플루오로메틸)-2-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)피리다진-3(2H)-온(60 mg, 0.16 mmol, 1.0 eq.), DIPEA(63 mg, 0.49 mmol, 3.0 eq.)와 HATU(112 mg, 0.29 mmol, 1.8 eq.)를 첨가하였다. 혼합물은 1시간동안 25 ℃에서 교반하였다. 수득한 혼합물은 물(40 mL)로 켄칭시키고 EtOAc (2 x 50 mL)로 추출하였다. 유기층을 배합하고 염수 (2 x 50 mL)로 세척하고, Na2SO4상에서 건조시키고, 진공 농축시켰다. 잔사를 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(석유 에테르/EtOAc= 3/7; V/V)로 정제하여 황색 고체로서 N-((S)-2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)-2-(3-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)-3,8-디아자바이사이클로(3.2.1)옥탄-8-일)아세트아미드(70 mg, 64.5%)를 수득하였다.
LCMS: (ESI) (M+H)+ = 681.2.
단계 F: N-((S)-2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)-2-(3-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)-3,8-디아자바이사이클로(3.2.1)옥탄-8-일)아세트아미드의 합성
DCM (3 mL) 중의 N-((S)-2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)-2-(3-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)-3,8-디아자바이사이클로(3.2.1)옥탄-8-일)아세트아미드(65 mg, 0.1 mmol, 1.0 eq.)의 혼합물에 TFA(1 mL)를 첨가하였다. 혼합물은 1시간동안 25 ℃에서 교반하였다. 혼합물은 진공하에 농축시켰다. 잔사는 MeOH (2 mL)에 재용해시키고, K2CO3 (62 mg, 0.45 mmol)를 첨가하였다. 혼합물은 추가로 1시간동안 25 ℃에서 교반하였다. 혼합물을 여과하고, 여과물을 prep-HPLC로 정제하여 백색 고체로서 N-((S)-2-((6-옥소-5-(트리플루오로메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)-2-(3-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)-3,8-디아자바이사이클로(3.2.1)옥탄-8-일)아세트아미드(12.30 mg, 22.9%)을 수득하였다.
LCMS:　(ESI)　(M+H)+ = 551.2.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 11.64 (s, 1H), 8.54 (s, 2H), 7.72 (s, 1H), 6.00 (s, 1H), 4.82 - 4.68 (m, 2H), 4.4 - 4.36 (m, 1H), 4.22 - 4.07 (m, 3H), 3.98 - 3.82 (m, 2H), 3.71 (d, J = 14.4 Hz, 3H), 2.34 - 2.25 (m, 2H), 1.99 (d, J = 8.7 Hz, 2H), 1.30 (d, J = 6.3 Hz, 3H).
실시예 60
(S)-N-2-((5-아세틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)-2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)-1,2,3,6-테트라하이드로피리딘-4-일)아세트아미드
단계 A: (S)-N-(2-((5-아세틸-6-옥소-1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)-2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)-1,2,3,6-테트라하이드로피리딘-4-일)아세트아미드의 합성
DMF(10 mL) 중의 (S)-4-아세틸-5-((1-(아미노옥시)프로판-2-일)아미노)-2-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)피리다진-3(2H)-온(260 mg, 0.73 mmol, 1.0 eq.) 및 2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)-1,2,3,6-테트라하이드로피리딘-4-일)아세트산(229 mg, 0.80 mmol, 1.1 eq.)의 용액에 DIPEA(283 mg, 2.19 mmol, 3.0 eq.)와 HATU(335 mg, 0.88 mmol, 1.2 eq.)를 첨가하였다. 혼합물은 1시간동안 25 ℃에서 교반하였다. 혼합물은 물(50 mL)로 켄칭시키고 EtOAc (3 x 40 mL)로 추출하였다. 유기층을 배합하고 염수(200 mL)로 세척하고, 무수 Na2SO4상에서 건조시키고, 진공하에 농축시켰다. 잔사를 컬럼 크로마토그래피(석유 에테르/EtOAc= 1/2; V/V)로 정제하여 백색 고체로서 (S)-N-(2-((5-아세틸-6-옥소-1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)-2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)-1,2,3,6-테트라하이드로피리딘-4-일)아세트아미드(200 mg, 43.7%)을 수득하였다.
LCMS: (ESI) (M+H)+ = 626.4.
단계 B: (S)-N-2-((5-아세틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)-2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)-1,2,3,6-테트라하이드로피리딘-4-일)아세트아미드의 합성
DCM (6 mL) 중의 (S)-N-(2-((5-아세틸-6-옥소-1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)-2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일)-1,2,3,6-테트라하이드로피리딘-4-일)아세트아미드(200 mg, 0.32 mmol, 1.0 eq.)의 혼합물에 TFA(2 mL)를 첨가하였다. 혼합물은 0.5시간동안 25 ℃에서 교반하였다. 혼합물을 포화 NaHCO3 수용액(30 mL)으로 켄칭시키고 DCM(3 x 50mL)으로 추출하였다. 유기층을 배합하고 Na2SO4상에서 건조시키고, 진공 농축시켰다. 잔사를 MeOH (2 mL), H2O (2 mL), K2CO3 (200 mg, 1.45 mmol, 4.5 eq.) 및 에틸렌디아민(132 mg, 2.20 mmol, 6.8 eq.)으로 처리하였다. 혼합물은 추가로 1시간동안 25 ℃에서 교반하였다. 혼합물은 물(30 mL)로 희석시키고 DCM (3 x 30 mL)으로 추출하였다. 유기층을 배합하고 Na2SO4상에서 건조시키고, 진공 농축시켰다. 잔사를 prep-HPLC로 정제하여 백색 고체로서 (S)-N-(2-((5-아세틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리다진-4-일)아미노)프로폭시)-2-(1-(5-(트리플루오로메틸)피리미딘-2-일-1,2,3,6-테트라하이드로피리딘-4-일)아세트아미드(38.14 mg, 24.1%)을 수득하였다.
LCMS: (ESI)　(M+H)+ = 496.2.
1H NMR: (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 12.32 (s, 1H), 11.20 (s, 1H), 10.70 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 8.70 (s, 2H), 7.95 (s, 1H), 5.62 (s, 1H), 4.33 - 4.25 (m, 1H), 4.25- 4.18 (s, 2H), 3.97 - 3.86 (m, 3H), 3.85 - 3.78 (m, 1H), 2.75 (s, 2H), 2.53 (s, 3H), 2.17 - 2.08 (m, 2H), 1.23 (d, J = 6.8 Hz, 3H).
실시예 61~87:
하기의 표에 열거된 화합물 61 내지 87은 실시예 1 내지 60과 유사한 방법에 따라 합성하였다.
실시예 88
생물학적 검출
화합물에 의한 PARP7 생물학적 효소 활성의 억제 결정.
검정에는 재조합 사람 PARP7 단백질 키트(Abcam, 카탈로그 번호 ab271651)가 사용되었다. 키트 지침에 따라 먼저 히스톤 코팅 용액 30μL(1.5μg/mL)를 반응 플레이트의 384개 웰 홀에 도포하고 4℃에서 2시간 동안 코팅하였다. 이어서, 히스톤 코팅된 용액을 세척 제거하고 각 웰에 50μL의 밀봉 완충액을 첨가하고 25℃에서 60분 동안 항온처리한 후 밀봉 완충액을 세척 제거하였다. 화합물 농도의 1000배를 구성하여 1mM에서 0.05μM로 희석하고, 구성된 화합물을 Echo를 사용하여 웰당 25nL로 384웰 플레이트에 전달하였다. 반응 시스템에서 화합물의 최종 농도는 시험 홀(hole)로 사용된 1000 nM, 333.33 nM, 111.11 nM, 37.03 nM, 12.34 nM, 4.11 nM, 1.37 nM, 0.45 nM, 0.15 nM, 0.05 nM이었다. 동시에 음성 대조군 웰과 양성 대조군 웰에 25 nL의 DMSO를 첨가하였다. 농도 1.67배의 PARP7 효소 용액을 제조하고, 시험 홀과 양성 대조군 홀에 각각 15μL씩, PARP7 효소 용액을 첨가하였고, 음성 대조군 홀에는 15μL 염기 완충액을 첨가하여 25℃에서 15분 동안 항온처리하였다. 이어서 10 μL의 2.5배 비오틴-NAD+ 기질 용액을 첨가하고 60분동안 25℃에서 항온처리하였다. 반응 용액을 세척 제거한 후 384웰 반응 플레이트를 스트렙타비딘-HRP(1:500)로 희석한 폐쇄 완충 용액으로 처리하고 각 웰에 30μL를 넣고 25℃에서 30분 동안 항온처리하였다. HRP 완충액을 세척 제거한 후, 30μL의 HRP 화학발광 기질 혼합물을 각 웰에 첨가하고, 각 웰의 발광 신호(RLU)를 Envision으로 검출하였다.
계산 식: 억제율 %= (평균 양성 대조군 -RLU 화합물)/(평균 양성 대조군 - 평균 음성 대조군))*100%. 각 화합물의 용량-반응 곡선을 그래프패드 프리즘(GraphPad Prism) 8에 피팅하여 IC50 값을 구하였다.
각 화합물에 의한 PARP7 생물학적 효소 활성 억제 결과는 하기 표 1에 열거되어 있다. IC50 값이 0.01 μM 미만이면 "+++"로 표시되고, 0.01 내지 0.1 μM이면 "++"로 표시되고, IC50 값이 0.1 초과 내지 10.0 μM이면 "+"로 표시된다.
표 1: 각 화합물에 의한 PARP7 생물학적 효소 활성의 억제(IC50)
PARP7 억제제 처리에 의한 NCI-H1373 암세포 성장의 억제
Promega 세포역가(CellTiter)-Glo 세포 활성 검정 키트 (항목 번호: Promege-G7573)를 사용하여 세포 활성을 결정하였다. 90μL의 NCI-H1373 세포 현탁액(ATCC, 카탈로그 번호 CRL-5866, 배치 번호 58078716)을 웰당 3500개의 세포가 있는 96웰 플레이트의 기공에 확산시켰다. 24시간 후, 제조된 10μL의 10배 화합물 작업 용액을 최종 농도 10μM로 세포 배양 플레이트의 기공에 첨가하였다. 3.3333μM, 1.1111μM, 0.3704μM, 0.1235μM, 0.0412μM, 0.0137μM, 0.0046μM, 0.0015μM, 0.0005μM, 10μL DMSO를 용매 대조군에 첨가하였고, DMSO의 최종 농도는 0.2%이었다. 분석을 위해 0일 플레이트를 수거하고, 144시간 배양 후 세포역가(CellTiter)-Glo 세포 활성 검정 키트의 지침에 따라 세포의 성장 상태를 검출하였다. 세포 배양 플레이트의 각 홀에 세포역가(CellTiter)-Glo 작업 용액 50μL를 첨가하고 세포가 용해될 때까지 암실에서 2분간 플레이트를 진탕시킨 후 실온에 10분간 두어 2104EnVision 보드 판독기상에서 각 세포 홀의 발광 신호(RUL)를 검출한다.
계산 식: 성장 억제율 %= (1-(RLU 화합물-RLU 0일)/(RLU 용매 대조군 -RLU 0일))*100%. 각 화합물의 용량-반응 곡선을 그래프패드 프리즘 8에 피팅하여 IC50 값을 구하였다.
각 화합물의 NCI-H1373 암세포 성장 억제에 대한 결과는 하기 표 2에 열거되어 있다. 상기와 관련하여, IC50 값이 0.1 μM 미만이면 "+++"로 표시되고, 0.1 내지 0.1 μM이면 "++"로 표시되고, 값이 1 초과 내지 10 μM이면 "+"로 표시된다.
표 2: 각 화합물에 의한 NCI-H1373 암세포의 성장 억제 검정(IC50)
화합물의 약동학적 시험
구현예에서, 화합물 RBN-2397 (Cat.No:HY-136174, MedChemEcpress, Shanghai, China), 화합물 17 및 화합물 25를 마우스에서 시험하여 마우스에서의 약동학적 성질을 입증하였다.
시험될 상기 화합물의 제조 방법:
정맥내 및 경구 위관영양투여 용액의 제형: 시험될 화합물은 5% DMSO, 10% 솔루톨 HS15, 85% 식염수로 제형화된 용액에 용해시켰다.
용량(투여 용액 내 화합물의 양(mg)/마우스 체중(kg)으로 측정됨): 3 mg/kg 정맥내 주사(IV), 10 mg/kg 경구 위관영양투여(PO).
마우스에서 약동학적 연구 실험 방법:
총 18마리 CD-1 마우스 (Shanghai Jihui Experimental Animal Feeding Co., LTD.), 수컷, 체중 28-31 g을 12시간동안 단식시키고 각 그룹에 9마리의 마우스를 갖는 2개 그룹(그룹 A 및 그룹 B)에 무작위로 분할하였다. 그룹 A에 속한 동물에게 화합물 용액을 10 mg/kg 용량으로 경구 위관영양투여하였다. 그룹 B에 속한 동물에게 3 mg/kg 용량으로 꼬리 정맥 주사에 의해 화합물 용액을 투여하고, 투여 전에 공혈을 채취하였다. 투여 후 0.25시간, 0.5시간, 1시간, 2시간, 4시간, 8시간, 24시간이 지난 시점에 그룹 A에서 약 110μL의 정맥혈을 채취하였다. 투여 후 0.083시간, 0.25시간, 0.5시간, 1시간, 2시간, 4시간, 8시간, 24시간이 지난 시점에 그룹 B에서의 동물로부터 약 110μL의 정맥혈을 채취하여 모두 헤파린과 함께 시험관에 넣고 원심분리한 후 혈장을 수거하여 시험을 위해-70℃에서 보관하였다.
실험 결과는 표 3에 나타낸다.
표 3: 화합물 RBN-2397, 화합물 17, 및 화합물 25의 약동학적 데이터의 비교
AUC마지막은 투여 시간 시작부터 마지막 지점까지의 약물 시간 곡선 이하 면적, 즉 시간 축에 대한 혈중 약물 농도 곡선에 의해 둘러싸인 면적을 나타낸다. CL(iv)는 정맥내 투여 시 약물 소거율을 나타내고; T1/2는 약물의 혈장 반감기를 나타내고, 이는 약물의 절반이 신체로부터 제거되는데 요구되는 시간을 지칭한다. Cmax는 투여 후 혈장 내 약물의 최대 농도를 나타낸다. F%는 약물의 경구 생체이용률을 지적한다.
표 3에 나타낸 바와 같이, 3 mg/kg 정맥 주사 후 화합물 17의 AUC마지막, 즉 혈장 노출량은 RBN-2397의 약 4.4배, 화합물 25의 혈장 노출량은 RBN-2397의 약 3.8배로 나타났다.
정맥내 투여 후 화합물 17과 25의 약물 소거율(CL(iv))은 RBN-2397의 약 1/5에 불과했고, 화합물 17과 25의 약물 혈장 반감기(T1/2)는 각각 RBN-2397의 8배 및 27.8배였다. 10mg/kg의 경구 위관양양투여 후, 화합물 17과 25의 최대 혈중 농도(Cmax)는 각각 RBN-2397의 7.8배와 10.6배였다. 약물 시간 곡선 이하 면적(AUC마지막), 즉 혈장 노출량은 각각 RBN-2397의 약 11.3배와 12.1배였다. 경구 생체이용률(F%)은 각각 RBN-2397의 2.6배 및 3.2배였다. 실험 결과는 화합물 17과 25가 RBN-2397보다 약동학적 성질이 우수해 짧은 반감기와 낮은 경구 생체이용률과 같은 화합물 RBN-2397의 단점을 극복하고 보다 우수한 임상 효능으로 이어질 것으로 기대된다. 우수한 표적 억제 활성과 약동학적 성질은 보다 광범위한 임상 적응증으로 확장할 수 있는 추가적인 가능성을 제공한다.
산업적 응용성
본 발명은 PARP7 활성을 억제하거나, PARP7 활성에 의해 조절되거나 영향을 받거나, PARP7 활성 또는 과발현과 관련된 질환, 장애 또는 병태를 치료 또는 예방하는 데 사용할 수 있는 PARP7 억제제를 제공한다. 따라서, 본 발명은 산업적 응용을 위해 적합하다.
본 발명은 본 명세서에 상세히 설명되어 있지만, 본 발명은 이에 한정되지 않으며, 당업자는 본 발명의 원리에 따라 변형시킬 수 있으므로, 본 발명의 원리에 따라 이루어진 모든 종류의 변형은 본 발명의 보호 범위에 속하는 것으로 이해되어야 한다.

Claims (21)

  1. 화학식 I의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염, 중수소화 화합물, 용매화물, 에스테르, 산, 대사물 또는 이의 프로드럭을 포함하는 폴리(아데노신 디포스페이트-리보스) 폴리머라제-7 억제제.
    （I）
    상기식에서,
    는 이중 또는 단일 결합을 나타내고, 단 최대 하나의 이중 결합이 원자 중 어느 하나에 부착되어 있고;
    X는 할로겐, C1-6 할로알킬 및 C2-6 알카노일로 이루어진 그룹으로부터 선택되거나, Y 및 이들이 부착된 탄소 원자와 함께 융합된 벤젠 환 또는 헤테로사이클을 형성하고;
    Y는 NH와 O로 이루어진 그룹으로부터 선택되거나, X 및 이들이 부착된 탄소 원자와 함께 융합된 벤젠 환 또는 헤테로사이클을 형성하고;
    A는 -N-O-, =N-O-, -O-N- 및 -O-N=으로 이루어진 그룹으로부터 선택된 질소-옥소 그룹이고, N 원자는 이의 원자가가 포화되지 않은 경우 수소, C1-6 알킬, C2-6 알카노일 또는 C1-6 설포닐로 임의로 치환되고;
    L은 -(CH2)n-, , , 및 로 이루어진 그룹으로부터 선택되고, 여기서 n은 1, 2 또는 3이고, R5 및 R5'는 각각 독립적으로 수소, C1-3 알킬, 할로겐, 중수소 및 하이드록실로 이루어진 그룹으로부터 선택되거나, R5 및 R5'는 이들이 부착된 탄소 원자와 함께 C3-6 사이클로알킬을 형성하고;
    R1 및 R2는 각각 독립적으로 수소, C1-6 알킬, C1-6 하이드록시알킬, C1-6 할로알킬, C3-6 사이클로알킬, C3-6 하이드록시사이클로알킬 또는 C3-6 할로사이클로알킬로 이루어진 그룹으로부터 선택되거나, R1 및 R2는 이들이 부착된 탄소 원자와 함께 C5-8 사이클로알킬을 형성하고;
    M은 화학식 (M-1), (M-2), (M-3), (M-4) 및 (M-5)로 이루어진 그룹으로부터 선택된 모이어티이다:

    여기서 D1, D2, D3, D4, D5, D6, D7, D8, D9 및 D10은 각각 독립적으로 N 및 CH로 이루어진 그룹으로부터 선택되고, 단 적어도 하나의 N이 M 모이어티의 환 원자로 포함되고,
    R3은 각각 독립적으로 수소, 할로겐, 하이드록실, C1-4 알킬, C1-6 할로알킬, 및 C1-6 하이드록시알킬로 이루어진 그룹으로부터 선택되고,
    m은 각각 독립적으로 0, 1 또는 2로 이루어진 그룹으로부터 선택되고;
    G는 1개 또는 2개의 R4 그룹으로 임의로 치환된 5- 내지 6-원 방향족 헤테로사이클릭 그룹이고, 여기서 R4는 각각 독립적으로 하이드록실, 시아노, C1-6 알킬, C1-6 하이드록시알킬, C1-6 할로알킬, 할로겐, C3-6 사이클로알킬, C2-6 알케닐, C2-6 알키닐, -NR6R6', -C(O)NR6R6', -NR6C(O)R7, -C(O)OR6, -OR6, -S(O)2NR6R6', -NR6S(O)2R7, -S(O)2R7, -C(O)R6 및 임의로 할로겐으로 치환된 페닐로 이루어진 그룹으로부터 선택되거나, 2개의 R4 그룹은 이들이 부착된 탄소 원자와 함께, 하이드록실, 메틸, 할로겐 또는 옥소로 임의로 치환된 C5-8 사이클로알킬, 페닐 또는 헤테로아릴을 형성하고, 여기서 R6, R6' 및 R7은 각각 독립적으로 수소, C1-6 알킬, C1-6 할로알킬, C3-6 사이클로알킬 및 C1-6 하이드록시알킬로 이루어진 그룹으로부터 선택된다.
  2. 제1항에 있어서, M이 화학식 (M-1a), (M-2a), (M-3a), (M-4a) 및 (M-5a)로 이루어진 그룹으로부터 선택된 모이어티인, 억제제:

    여기서 D1은 N 또는 CH로 이루어진 그룹으로부터 선택되고, m은 각각 독립적으로 0, 1 또는 2로 이루어진 그룹으로부터 선택되고, R3은 각각 독립적으로 수소, 하이드록실, 할로겐 또는 C1-4 알킬로 이루어진 그룹으로부터 선택된다.
  3. 제1항 또는 제2항에 있어서, G가 화학식 (G-1), (G-2), (G-3), (G-4), (G-5), (G- 6) 및 (G-7)로 이루어진 그룹으로부터 선택된 모이어티인, 억제제:

    여기서 Q는 각각 독립적으로 N 또는 CH로 이루어진 그룹으로부터 선택되고, 보다 바람직하게는 Q는 각각 독립적으로 N이고;
    R4 그룹은 임의의 치환체이고, 각각 독립적으로 시아노, C1-4 알킬, C1-4 하이드록시알킬, C1-4 할로알킬, 할로겐, C3-6 사이클로알킬, C2-4 알케닐, C2-4 알키닐, -NR6R6', -C(O)NR6R6', -C(O)OR6, -OR6, -C(O)R6, 및 할로겐으로 임의로 치환된 페닐로 이루어진 그룹으로부터 선택되고, 여기서, R6 및 R6'은 각각 독립적으로 수소 및 C1-4 알킬로 이루어진 그룹으로부터 선택된다.
  4. 제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서, X가 브롬, 트리플루오로메틸, 및 아세틸로 이루어진 그룹으로부터 선택되거나, X가 Y 및 이들이 부착된 탄소 원자와 함께 융합된 벤젠 환 또는 융합된 피페리딘 환을 형성하고;
    Y는 NH로부터 선택되거나, X 및 이들이 부착된 탄소 원자와 함께 융합된 벤젠 환 또는 융합된 피페리딘 환을 형성하는, 억제제.
  5. 제1항 내지 제4항 중 어느 한 항에 있어서, L은 화학식 (M-1) 또는 화학식 (M-1a)에서 D1이 N인 경우, -(CH2)n-, , 또는 으로 이루어진 그룹으로부터 선택되고; L은 D1이 CH인 경우 -(CH2)n-, , , 또는 으로 이루어진 그룹으로부터 선택되는, 억제제.
  6. 제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 있어서, L은 A가 -N-O-인 경우 이고; L은 A가 =N-O-인 경우 또는 이고; L은 A가 -O-N-인 경우 , , , , , , 또는 이고; L은 A가 -O-N=인 경우 또는인, 억제제.
  7. 제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서,
    X가 C1-6 할로알킬 및 C2-6 알카노일로 이루어진 그룹으로부터 선택되고, X가 보다 바람직하게는 C1-6 할로알킬, 특히 트리플루오로메틸이고;
    Y가 NH이고;
    A가 =N-O-, -O-N- 및 -O-N=로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 질소-옥소 그룹, 보다 바람직하게는 -O-N-이고;
    L이 및 로 이루어진 그룹으로부터 선택되고, 보다 바람직하게는 이고, 여기서 R5 및 R5'은 각각 독립적으로 수소 또는 할로겐으로 이루어진 그룹으로부터 선택되고, 보다 바람직하게는 수소이고;
    M이 화학식 (M-1a) 및 (M-5a)로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 모이어티이고, 여기서 D1은 N 또는 CH로 이루어진 그룹으로부터 선택되고, 보다 바람직하게는 CH이고, m은 독립적으로 1이고, R3은 각각 독립적으로 수소, 할로겐 또는 C1-3 알킬로 이루어진 그룹으로부터 선택되고, 보다 바람직하게는 수소이고;
    G가 화학식 (G-1), (G-3) 및 (G-4)로 이루어진 그룹으로부터 선택된 모이어티이고, 보다 바람직하게는 화학식 (G-1)이고, 여기서 Q는 N 또는 CH로 이루어진 그룹으로부터 선택되고, 보다 바람직하게는 N이고, R4는 C1-6 할로알킬, 할로겐, C3-6 사이클로알킬, 및 할로겐으로 임의로 치환된 페닐로 이루어진 그룹으로부터 선택되고, 보다 바람직하게는 C1-6 할로알킬, 특히 트리플루오로메틸이고;
    R1 및 R2가 각각 독립적으로 수소, C1-6 알킬, C3-6 사이클로알킬로 이루어진 그룹으로부터 선택되거나, R1 및 R2는 이들이 부착된 탄소 원자와 함께 C5-8 사이클로알킬을 형성하고; 보다 바람직하게는 R1 및 R2가 각각 독립적으로 수소 및 C1-6 알킬로 이루어진 그룹으로부터 선택되는, 억제제.
  8. 제1항 내지 제7항 중 어느 한 항에 있어서,
    는 이중 또는 단일 결합을 나타내고, 단 최대 하나의 이중 결합이 원자 중 어느 하나에 부착되어 있고;
    X가 할로겐, 및 C1-6 할로알킬로 이루어진 그룹으로부터 선택되거나, Y 및 이들이 부착된 탄소 원자와 함께 융합된 벤젠 환 또는 헤테로사이클을 형성하고;
    Y가 NH이거나, X 및 이들이 부착된 탄소 원자와 함께 융합된 벤젠 환 또는 헤테로사이클을 형성하고;
    A가 -N-O-, =N-O-, -O-N- 및 -O-N=으로 이루어진 그룹으로부터 선택된 질소-옥소 그룹이고, N 원자는 이의 원자가가 포화되지 않은 경우 수소, C1-6 알킬, C2-6 알카노일 또는 C1-6설포닐로 임의로 치환되고;
    L이 -(CH2)n-, , , 및 로 이루어진 그룹으로부터 선택되고, 여기서 n은 1, 2 또는 3이고, R5 및 R5’는 각각 독립적으로 수소 또는 C1-3 알킬로 이루어진 그룹으로부터 선택되거나, R5 및 R5’는 이들이 부착된 탄소 원자와 함께 C3-6 사이클로알킬을 형성하고;
    R1 및 R2가 각각 독립적으로 수소, C1-6 알킬, C1-6 하이드록시알킬, C1-6 할로알킬, C3-6 사이클로알킬, C3-6 하이드록시사이클로알킬 또는 C3-6 할로사이클로알킬로 이루어진 그룹으로부터 선택되거나, R1 및 R2는 이들이 부착된 탄소 원자와 함께 C5-8 사이클로알킬을 형성하고;
    M이 화학식 (M-1), (M-2), (M-3) 및 (M-4)로 이루어진 그룹으로부터 선택된 모이어티이고:

    여기서 D1, D2, D3, D4, D5, D6, D7, D8 및 D9는 각각 독립적으로 N 및 CH로 이루어진 그룹으로부터 선택되고, 단 적어도 하나의 N이 M 모이어티의 환 원자로 포함되고,
    R3이 각각 독립적으로 할로겐, 하이드록실, C1-4 알킬 및 C1-6 할로알킬로 이루어진 그룹으로부터 선택되고.
    m이 각각 독립적으로 0, 1 또는 2로 이루어진 그룹으로부터 선택되고;
    G가 1개 또는 2개의 R4 그룹으로 임의로 치환된 5- 내지 6-원 방향족 헤테로사이클릭 그룹이고, 여기서 R4는 각각 독립적으로 하이드록실, 시아노, C1-6 알킬, C1-6 하이드록시알킬 및 C1-6 할로알킬로 이루어진 그룹으로부터 선택되거나, 2개의 R4 그룹은 이들이 부착된 탄소 원자와 함께 하이드록실 또는 메틸로 임의로 치환된 C5-8 사이클로알킬을 형성하는, 억제제.
  9. 제8항에 있어서, M이 화학식 (M-1a), (M-2a), (M-3a), 및 (M-4a)로 이루어진 그룹으로부터 선택된 모이어티인, 억제제:

    여기서 D1은 N 또는 CH로 이루어진 그룹으로부터 선택되고, m은 각각 독립적으로 0, 1 또는 2로 이루어진 그룹으로부터 선택되고, R3은 각각 독립적으로 하이드록실, 할로겐 또는 C1-4 알킬로 이루어진 그룹으로부터 선택된다.
  10. 제8항 또는 제9항에 있어서, G가 화학식 (G-1) 및 (G-2)로 이루어진 그룹으로부터 선택된 모이어티인, 억제제:

    여기서 Q는 N 또는 CH로 이루어진 그룹으로부터 선택된다.
  11. 제8항 내지 제10항 중 어느 한 항에 있어서, L은 화학식 (M-1) 또는 화학식 (M-1a)에서 D1이 N인 경우, -(CH2)n-, , 또는 으로 이루어진 그룹으로부터 선택되고; L은 D1이 CH인 경우 -(CH2)n-, , , 또는 으로 이루어진 그룹으로부터 선택되는, 억제제.
  12. 제8항 내지 제11항 중 어느 한 항에 있어서, L은 A가 -N-O-인 경우 이고; L은 A가 =N-O-인 경우 또는 이고; L은 A가 -O-N-인 경우 , , , , , , 또는 이고; L은 A가 -O-N=인 경우 또는인, 억제제.
  13. 제8항 내지 제12항 중 어느 한 항에 있어서, 화학식 II의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염, 중수소화 화합물, 용매화물, 에스테르, 산, 대사물 또는 프로드럭을 포함하는 억제제.
    （II）
    상기식에서,
    는 이중 또는 단일 결합을 나타내고, 단 최대 하나의 이중 결합이 원자 중 어느 하나에 부착되어 있고;
    X는 할로겐 및 C1-6 할로알킬로 이루어진 그룹으로부터 선택되거나, Y 및 이들이 부착된 탄소 원자와 함께 융합된 벤젠 환 또는 피페리딘 환을 형성하고;
    Y는 NH로부터 선택되거나, X 및 이들이 부착된 탄소 원자와 함께 융합된 벤젠 환 또는 피페리딘 환을 형성하고;
    A는 -N-O-, =N-O-, -O-N- 및 -O-N=으로 이루어진 그룹으로부터 선택된 질소-옥소 그룹이고, N 원자는 이의 원자가가 포화되지 않은 경우 수소, C1-6 알킬, C2-6 알카노일 또는 C1-6설포닐로 임의로 치환되고;
    L은 -(CH2)n-, , , 및 로 이루어진 그룹으로부터 선택되고, 여기서 n은 1, 2 또는 3이고, R5 및 R5’는 각각 독립적으로 수소 또는 C1-3 알킬로 이루어진 그룹으로부터 선택되거나, R5 및 R5'는 이들이 부착된 탄소 원자와 함께 C3-6 사이클로알킬을 형성하고;
    D는 N 또는 CH로 이루어진 그룹으로부터 선택되고;
    Q는 N 또는 CH로 이루어진 그룹으로부터 선택되고;
    R1 및 R2는 각각 독립적으로 수소, C1-6 알킬, C3-6 사이클로알킬로 이루어진 그룹으로부터 선택되거나, R1 및 R2는 이들이 부착된 탄소 원자와 함께 C5-8 사이클로알킬을 형성하고;
    R3은 수소 또는 C1-3 알킬로 이루어진 그룹으로부터 선택되고;
    R4는 하이드록실, 시아노, C1-6 알킬, C1-6 하이드록시알킬 및 C1-6 할로알킬로 이루어진 그룹으로부터 선택된다.
  14. 제1항 내지 제13 항 중 어느 한 항에 있어서, 화학식 I의 화합물이 하기로 이루어진 그룹으로부터 선택되는, 억제제.



  15. 제1항 내지 제14항 중 어느 한 항에 따른 억제제, 및 약제학적으로 허용되는 담체 또는 부형제, 및 임의로 다른 치료학적 제제를 포함하는 약제학적 조성물.
  16. PARP7 활성에 의해 조절되거나 영향받거나 PARP7 활성 또는 과발현과 관련된 질환, 장애 또는 병태를 치료하거나 예방하기 위한 약물의 제조에 있어서 제1항 내지 제14항 중 어느 한 항에 따른 억제제의 용도.
  17. 제16항에 있어서, 상기 질환, 장애 또는 병태가 과증식성 질환, 자가면역 또는 염증성 질환인, 용도.
  18. 제16항 또는 제17항에 있어서, 상기 질환, 장애 또는 병태가 편평 폐암, 폐 선암종, 비소세포 폐암, 소세포 폐암, 두경부 편평 세포 암종, 유방암, 췌장암, 췌장관 선암종, 결장직장암, 흑색종, 난소암, 식도 편평 세포 암종, 위암, 간암, 구강암, 요로상피암, 전립선암, 방광암, 신장 세포 암종, 위장관 기질 종양, 자궁경부암, 자궁내막암, 횡문근육종, 섬유육종, 신경내분비 종양, 중피종, 뇌암 또는 악성 신경교종으로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 암이거나,
    상기 질환, 장애 또는 병태가 궤양성 대장염, 크론 질환, 다발성 경화증, 자가면역성 간 질환, I형 진성 당뇨병, 기관지 천식, 전신성 홍반성 루푸스, 류마티스 관절염, 강직성 척추염, 청소년 특발성 관절염, 건선, 다발성 근염 또는 피부근염으로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 자가면역 또는 염증성 질환인, 용도.
  19. 제1항 내지 제14항 중 어느 한 항에 있어서, PARP7 활성에 의해 조절되거나 영향받거나 PARP7 활성 또는 과발현과 관련된 질환, 장애 또는 병태의 치료 또는 예방에 사용하기 위한 억제제.
  20. 제19항에 있어서, 상기 질환, 장애 또는 병태가 과증식성 질환, 자가면역 또는 염증성 질환인, 억제제.
  21. 제19항 또는 제20항에 있어서, 상기 질환, 장애 또는 병태가 편평 폐암, 폐 선암종, 비소세포 폐암, 소세포 폐암, 두경부 편평 세포 암종, 유방암, 췌장암, 췌장관 선암종, 결장직장암, 흑색종, 난소암, 식도 편평 세포 암종, 위암, 간암, 구강암, 요로상피암, 전립선암, 방광암, 신장 세포 암종, 위장관 기질 종양, 자궁경부암, 자궁내막암, 횡문근육종, 섬유육종, 신경내분비 종양, 중피종, 뇌암 또는 악성 신경교종으로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 암이거나,
    상기 질환, 장애 또는 병태가 궤양성 대장염, 크론 질환, 다발성 경화증, 자가면역성 간 질환, I형 진성 당뇨병, 기관지 천식, 전신성 홍반성 루푸스, 류마티스 관절염, 강직성 척추염, 청소년 특발성 관절염, 건선, 다발성 근염 또는 피부근염으로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 자가면역 또는 염증성 질환인, 억제제.
KR1020247001388A 2022-04-01 2022-12-06 Parp7 억제제 및 이의 용도 KR20240021923A (ko)

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