JP5841315B2 - 微小粒子分析装置 - Google Patents
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Description
本発明においては、微小粒子から発せられた蛍光のスペクトラム情報を提示することができるため、ユーザーは、蛍光補正の有無及び蛍光補正の結果にかかわらず、測定データを視覚で理解することができる。そして、例えば、その特定領域のデータを抽出することにより、微小粒子について種々の情報が得られる。
複数の微小粒子の検出データを積算して得た蛍光スペクトルを表示する場合、前記蛍光スペクトルの表示形態は、例えば、密度プロット、ドットプロット又は等高線プロットとすることができる。
その場合、前記検出データの積算数に応じて色を変えて前記表示部に表示してもよい。
前記検出データは、例えば、電圧パルスの高さ、幅及び面積のうち少なくとも1種である。
その場合、抽出されたデータを、例えば二次元プロット表示することもできる。
この微小粒子分析装置は、前記検出部に前記色素の数以上のチャンネル数を有する光電子倍増管を備えていてもよい。
また、前記検出部での検出結果及び/又は前記解析部で定量化された検出データを保存する記憶部を有し、該記憶部に保存されたデータを前記表示部に表示することもできる。
1.第1の実施の形態
(スペクトル表示の方法の例)
2.第2の実施の形態
(スペクトル表示する微小粒子分析装置の例)
[全体構成]
先ず、本発明の第1の実施形態のデータ表示方法について説明する。本実施形態のデータ表示方法においては、細胞やマイクロビーズなどの微小粒子から発せられた蛍光を、複数の波長領域で同時に検出し、波長領域毎の検出データをスペクトル表示する。
本実施形態のデータ表示方法では、光検出器により検出された光を、波長領域毎に電圧パルス(電気的信号)に変換し、定量化して検出データとする。具体的には、電圧パルスの高さ、幅又は面積を求めて、検出データとする。
本実施形態のデータ表示方法では、前述した方法で求めた波長領域毎の検出データを、スペクトル表示する。その表示方法は、特に限定されるものではないが、例えば、密度プロット、ドットプロット又は等高線などが挙げられる。また、表示されているスペクトルから特定領域のデータのみを抽出し、そのスペクトラムチャートを拡大表示したり、ヒストグラムや二次元プロットを表示したりすることもできる。
[装置の全体構成]
次に、本発明の第2の実施形態に係る微小粒子分析装置について説明する。図1は本実施形態の微小粒子分析装置の構成を示す図であり、図2はその測定結果の表示例を示す図である。図1に示すように、本実施形態の微小粒子分析装置1には、少なくとも、検出部2と、変換部3と、解析部4と、表示部5が設けられている。
検出部2は、分析対象の微小粒子から発せられた蛍光を、複数の波長領域で同時に検出可能な構成であればよい。具体的には、波長領域毎にその波長領域を検出可能なセンサを配置した構成や、多チャンネル光電子倍増管(Photo-Multiplier Tube:PMT)などのように複数の光を同時に検出可能な検出器を備えた構成とすることができる。この検出部2で検出する波長領域の数、即ち、検出部2に配設される検出器のチャンネル数又はセンサ数などは、使用する色素の数以上であればよいが、現在のマルチカラー分析では6〜8色が一般的で、最大でも10〜12色であることから、12以上であることが好ましい。
変換部3は、検出部2で検出した各波長領域の光を、それぞれ電圧パルス(電気的信号)に変換するものであり、例えばADコンバータなどを使用することができる。
解析部4では、電子計算機などを用いて変換部3で変換された電圧パルスを処理して定量化し、検出データとする。具体的には、電圧パルスの高さ(peak)、幅(width)又は面積(integral)を求め、これらを検出データとして使用する。そして、その結果は、波長領域毎に関連付けられ、記憶部(図示せず)などに保存される。
表示部5は、解析部4での処理で得た検出データ、即ち、本実施形態の微小粒子分析装置1の測定結果を表示するものである。具体的には、表示部5には、例えば、図2に示すように、横軸に検出部のチャンネル番号をとり、縦軸に強度をとって、チャンネル毎の蛍光強度を示した「密度プロット」などが表示される。このとき、チャンネル番号が大きくなるに従い、検出波長が高くなるようにすると、検出光(蛍光)のスペクトラム情報が得られる。
次に、本実施形態の微小粒子分析装置1の動作について説明する。本実施形態の微小粒子分析装置1で分析する微小粒子は、特に限定されるものではないが、例えば細胞やマイクロビーズなどが挙げられる。また、これら微小粒子を修飾する蛍光色素の種類及び数も、特に限定されるものではなくFITC(fluorescein isothiocyanate:C21H11NO5S)、PE(phycoerythrin)、PerCP(peridinin chlorophyll protein)、PE−Cy5及びPE−Cy7などの公知の色素を、必要に応じて適宜選択して使用することができる。更に、各微小粒子が複数の蛍光色素で修飾されていてもよい。
2 検出部
3 変換部
4 解析部
5 表示部
Claims (8)
- 流路を通流する微小粒子に励起光を照射する光照射部と、
前記微小粒子から発せられた蛍光を、複数の波長領域で同時に検出する検出部と、
前記検出部で検出した各波長領域の光を電圧パルスに変換する変換部と、
前記変換部で変換された電圧パルスを定量化して検出データとする解析部と、
各波長領域における検出データを、波長をパラメーターとしてスペクトル表示する表示部と、
を有し、
前記流路に2以上の色素で修飾された微小粒子を複数個流通させるか又はそれぞれ異なる色素で修飾された2種以上の微小粒子を複数個通流させ、
前記検出部において前記微小粒子毎に前記色素の数以上の波長領域で蛍光を検出し、
複数の微小粒子の検出データについて、検出回数を積算して前記表示部に表示する微小粒子分析装置。 - 前記蛍光スペクトルの表示形態が、密度プロット、ドットプロット又は等高線プロットである請求項1に記載の微小粒子分析装置。
- 前記検出データの積算数に応じて色を変えて前記表示部に表示する請求項2に記載の微小粒子分析装置。
- 前記検出データは、電圧パルスの高さ、幅及び面積のうち少なくとも1種である請求項1〜3のいずれか1項に記載の微小粒子分析装置。
- 更に、前記蛍光スペクトルから選択された特定領域のデータのみを抽出して前記表示部に表示する請求項1〜4のいずれか1項に記載の微小粒子分析装置。
- 抽出されたデータを二次元プロット表示する請求項5に記載の微小粒子分析装置。
- 前記検出部は前記色素の数以上のチャンネル数を有する光電子倍増管を備える請求項1〜6のいずれか1項に記載の微小粒子分析装置。
- 前記検出部での検出結果及び/又は前記解析部で定量化された検出データを保存する記憶部を有し、該記憶部に保存されたデータを前記表示部に表示する請求項1〜7のいずれか1項に記載の微小粒子分析装置。
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