JP5822845B2 - アンジオポエチン様3発現の調節 - Google Patents
アンジオポエチン様3発現の調節 Download PDFInfo
- Publication number
- JP5822845B2 JP5822845B2 JP2012548193A JP2012548193A JP5822845B2 JP 5822845 B2 JP5822845 B2 JP 5822845B2 JP 2012548193 A JP2012548193 A JP 2012548193A JP 2012548193 A JP2012548193 A JP 2012548193A JP 5822845 B2 JP5822845 B2 JP 5822845B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- certain embodiments
- angptl3
- modified
- antisense
- oligonucleotide
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Fee Related
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H21/00—Compounds containing two or more mononucleotide units having separate phosphate or polyphosphate groups linked by saccharide radicals of nucleoside groups, e.g. nucleic acids
- C07H21/02—Compounds containing two or more mononucleotide units having separate phosphate or polyphosphate groups linked by saccharide radicals of nucleoside groups, e.g. nucleic acids with ribosyl as saccharide radical
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/11—DNA or RNA fragments; Modified forms thereof; Non-coding nucleic acids having a biological activity
- C12N15/113—Non-coding nucleic acids modulating the expression of genes, e.g. antisense oligonucleotides; Antisense DNA or RNA; Triplex- forming oligonucleotides; Catalytic nucleic acids, e.g. ribozymes; Nucleic acids used in co-suppression or gene silencing
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
- A61P1/16—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for liver or gallbladder disorders, e.g. hepatoprotective agents, cholagogues, litholytics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
- A61P3/04—Anorexiants; Antiobesity agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
- A61P3/06—Antihyperlipidemics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
- A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
- A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
- A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
- A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
- A61P9/12—Antihypertensives
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/11—DNA or RNA fragments; Modified forms thereof; Non-coding nucleic acids having a biological activity
- C12N15/113—Non-coding nucleic acids modulating the expression of genes, e.g. antisense oligonucleotides; Antisense DNA or RNA; Triplex- forming oligonucleotides; Catalytic nucleic acids, e.g. ribozymes; Nucleic acids used in co-suppression or gene silencing
- C12N15/1136—Non-coding nucleic acids modulating the expression of genes, e.g. antisense oligonucleotides; Antisense DNA or RNA; Triplex- forming oligonucleotides; Catalytic nucleic acids, e.g. ribozymes; Nucleic acids used in co-suppression or gene silencing against growth factors, growth regulators, cytokines, lymphokines or hormones
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
- C12Q1/6876—Nucleic acid products used in the analysis of nucleic acids, e.g. primers or probes
- C12Q1/6883—Nucleic acid products used in the analysis of nucleic acids, e.g. primers or probes for diseases caused by alterations of genetic material
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/5005—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving human or animal cells
- G01N33/5008—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving human or animal cells for testing or evaluating the effect of chemical or biological compounds, e.g. drugs, cosmetics
- G01N33/502—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving human or animal cells for testing or evaluating the effect of chemical or biological compounds, e.g. drugs, cosmetics for testing non-proliferative effects
- G01N33/5023—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving human or animal cells for testing or evaluating the effect of chemical or biological compounds, e.g. drugs, cosmetics for testing non-proliferative effects on expression patterns
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2310/00—Structure or type of the nucleic acid
- C12N2310/10—Type of nucleic acid
- C12N2310/11—Antisense
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2310/00—Structure or type of the nucleic acid
- C12N2310/10—Type of nucleic acid
- C12N2310/14—Type of nucleic acid interfering N.A.
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2310/00—Structure or type of the nucleic acid
- C12N2310/30—Chemical structure
- C12N2310/31—Chemical structure of the backbone
- C12N2310/315—Phosphorothioates
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2310/00—Structure or type of the nucleic acid
- C12N2310/30—Chemical structure
- C12N2310/32—Chemical structure of the sugar
- C12N2310/321—2'-O-R Modification
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2310/00—Structure or type of the nucleic acid
- C12N2310/30—Chemical structure
- C12N2310/32—Chemical structure of the sugar
- C12N2310/323—Chemical structure of the sugar modified ring structure
- C12N2310/3231—Chemical structure of the sugar modified ring structure having an additional ring, e.g. LNA, ENA
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2310/00—Structure or type of the nucleic acid
- C12N2310/30—Chemical structure
- C12N2310/33—Chemical structure of the base
- C12N2310/334—Modified C
- C12N2310/3341—5-Methylcytosine
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2310/00—Structure or type of the nucleic acid
- C12N2310/30—Chemical structure
- C12N2310/34—Spatial arrangement of the modifications
- C12N2310/341—Gapmers, i.e. of the type ===---===
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2320/00—Applications; Uses
- C12N2320/30—Special therapeutic applications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q2600/00—Oligonucleotides characterized by their use
- C12Q2600/136—Screening for pharmacological compounds
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q2600/00—Oligonucleotides characterized by their use
- C12Q2600/158—Expression markers
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Diabetes (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Hematology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Obesity (AREA)
- Immunology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Endocrinology (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Plant Pathology (AREA)
- Cardiology (AREA)
- Heart & Thoracic Surgery (AREA)
- Pathology (AREA)
- Emergency Medicine (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
Description
60%を超える糖尿病患者が太りすぎであるという点で相関がある。ほとんどのヒト肥満は、インスリン抵抗性およびレプチン抵抗性に関連する。実際には、肥満は糖尿病自体よりもインスリン活性にさらに大きな影響をもち得ることが、示唆されてきた(Sindelka et al.、Physiol Res.、2002、51、85−91)。さらに、糖尿病の治療用に市販されるいくつかの化合物が体重増加、この疾患の治療に非常に好ましくない副作用を導くことが知られている。
特別に定義しない限り、本明細書に記載する分析化学、合成有機化学、並びに薬化学および製薬化学に関連して用いた命名法、並びに手順および技術は、当該技術分野で周知の一般に用いられているものである。化学合成および化学的分析には標準技術を用いることができる。許される場合には、全ての特許、出願、公開出願、およびその他の刊行物、全米バイオテクノロジー情報センター(NCBI)等のデータベースを介して入手可能なGENBANK受託番号および関連する配列情報、並びに本明細書の開示中で参照されるその他のデータを、本明細書中で議論されている文献部分および文献全体に関して参照により本明細書に組み込まれる。
特定の実施形態では、本発明の化合物または組成物は、ANGPTL3を標的とする10〜30個のヌクレオシドが連結された長さの修飾オリゴヌクレオチドを含む。ANGPTL3標的は、配列番号1〜5のいずれか1つから選択される配列を有し得る。
(式中、Bxは、保護されていてもよいヘテロ環塩基部分である)で表される。特定の実施形態では、少なくとも1つの修飾糖は二環式糖である。特定の実施形態では、少なくとも1つの修飾糖は、2’−O−メトキシエチルまたは4’(CH2)n−O−2’架橋(式中、nは1または2である)を含む。
オリゴマー化合物には、オリゴヌクレオチド、ヌクレオシド、オリゴヌクレオチド類似体、オリゴヌクレオチド模倣物、アンチセンス化合物、アンチセンスオリゴヌクレオチド、及びsiRNAが含まれるがこれに限定されない。オリゴマー化合物は、標的核酸に対する「アンチセンス」であり得る。すなわち、水素結合により標的核酸とのハイブリダイゼーションを行う能力を有するという意味である。
特定の実施形態では、ANGPTL3核酸を標的化したアンチセンス化合物は、増強した阻害活性、標的核酸に対する増加した結合親和性、またはインビボヌクレアーゼによる分解抵抗(resistance to degradation)などのアンチセンス化合物特性を与えるパターンまたはモチーフに配列された、化学的に修飾されたサブユニットを持つ。
ANGPTL3をコードするヌクレオチド配列としては、これに限定されないが、以下が挙げられる:GenBank Accession No.BG400407.1(配列番号1として本明細書中に組み込まれる)、GenBank Accession No.BG562555.1(配列番号2として本明細書中に組み込まれる)、GenBank Accession No.BG562798.1(配列番号3として本明細書中に組み込まれる)、GenBank Accession No.NM_014495.1(配列番号4として本明細書中に組み込まれる)、GenBank Accession No.NT_032977.5ヌクレオチド15511702〜15521082(配列番号5として本明細書中に組み込まれる)、GenBank Accession No.AF162224.1(配列番号6として本明細書中に組み込まれる)、GenBank Accession No.AI195524.1(配列番号7として本明細書中に組み込まれる)、およびGenBank Accession No.BB717501.1(配列番号8として本明細書中に組み込まれる)に記載のヒトの配列。本明細書に含まれる実施例の各配列番号に記載の配列は、糖部分、ヌクレオシド間連結、または核酸塩基に対するいかなる修飾も無関係であることが理解される。そうしたことから、配列番号により定義されるアンチセンス化合物は独立して糖部分、ヌクレオシド間連結、または核酸塩基に対する1つ以上の修飾を含み得る。Isis番号(Isis No.)により記載されるアンチセンス化合物は核酸塩基配列とモチーフの組み合わせを示す。
いくつかの実施形態では、ハイブリダイゼーションは本明細書に記載のアンチセンス化合物とANGPTL3核酸の間で生じる。最も一般的なハイブリダイゼーション機構は核酸分子相補的核酸塩基間に水素結合(例えばWatson−Crick、Hoogsteenまたは逆Hoogsteen水素結合)を伴う。
アンチセンス化合物の十分な数の核酸塩基が対応する標的核酸の核酸塩基と水素結合して所望の効果が生じる場合(例えばANGPTL3核酸などの標的核酸のアンチセンス阻害)、アンチセンス化合物および標的核酸は互いに相補的である。
本明細書で提供するアンチセンス化合物はまた、特定のヌクレオチド配列、配列番号、または固有のIsis番号もしくはその一部分により表される化合物の配列に対する所定のパーセント同一性をもち得る。本明細書中に使用される際、アンチセンス化合物が同じ核酸塩基対形成能を持つ場合に、化合物は本明細書に記載の配列と同一性である。例えば、記載のDNA配列でチミジンの代わりにウラシルを含むRNAは、ウラシルとチミジンの両方がアデニンと対を形成するので、そのDNA配列と同一であると考えられる。本明細書に記載のアンチセンス化合物の短縮または延長した型が、本明細書で提供するアンチセンス化合物に対し同一でない塩基を持つ化合物と同様に考えられる。同一でない塩基は、互いに隣接してもよく、またはアンチセンス化合物全体にわたり分散してもよい。アンチセンス化合物のパーセント同一性は、それと比較する配列に対し同一の塩基対合を持つ塩基数により算出される。
ヌクレオシドは塩基−糖の組み合わせである。ヌクレオシドの核酸塩基(塩基としても知られる)部は、本来はヘテロ環式塩基部分である。ヌクレオチドは、ヌクレオシドの糖部分と共有結合で連結したリン酸基をさらに含むヌクレオシドである。ペントフラノシル糖を含む前記ヌクレオシドに関して、リン酸基は糖の2’、3’、または5’ヒドロキシル部分と連結し得る。オリゴヌクレオチドは隣接ヌクレオシドが互いに共有結合して高分子の直鎖状オリゴヌクレオチドを形成することにより形成される。オリゴヌクレオチド構造内では、リン酸基は通常、オリゴヌクレオチドのヌクレオシド間連結を形成しているとみなされる。
RNAおよびDNAの天然のヌクレオシド間連結は3’から5’のホスホジエステル結合である。1つ以上の修飾された、すなわち非天然のヌクレオシド間連結を持つアンチセンス化合物が、例えば細胞取込みの増強、核酸標的に対する親和性の増強、ヌクレアーゼ存在下での安定性の増大、または阻害活性の増大などの所望の特性のため、天然のヌクレオシド間連結を持つアンチセンス化合物にわたり、しばしば選択される。
アンチセンス化合物は、1つ以上のヌクレオシドを随意に含み得、その糖部分が修飾されている。この糖修飾ヌクレオシドは、ヌクレアーゼ安定性の増強、結合親和性の増大、またはいくつかの他の有利な生物学的性質をアンチセンス化合物に与え得る。特定の実施形態では、ヌクレオシドは化学的修飾リボフラノース環部分を含む。化学的修飾リボフラノース環の例としては、これに限定されないが、置換基の付加(5’および2’置換基を含む)、二環式核酸(BNA)を形成するための非ジェミナル環原子の架橋、S、N(R)、またはC(R1)(R)2(RはH、C1−C12アルキル、または保護基)でのリボシル環酸素原子の置き換え、およびそれらの組み合わせが挙げられる。化学的修飾糖の例としては、2’−F−5’−メチル置換ヌクレオシド(その他記載の5’,2’−ビス置換ヌクレオシドに関し、2008年8月21日公開の国際公開第2008/101157号参照のこと)、またはそのリボシル環酸素原子のSでの置き換え、さらには2’位での置換(2005年6月16日に公開された米国特許出願第US2005−0130923号を参照のこと)、あるいはBNAの5’置換(2007年11月22日に公開された国際公開第2007/134181号を参照のこと、ここでLNAは例えば5’−メチルまたは5’−ビニル基での置換)が挙げられる。
(式中、xは0、1、または2;
nは1、2、3、または4;
各RaおよびRbは独立してH、保護基、ヒドロキシル、C1−C12アルキル、置換C1−C12アルキル、C2−C12アルケニル、置換C2−C12アルケニル、C2−C12アルキニル、置換C2−C12アルキニル、C5−C20アリール、置換C5−C20アリール、複素環基、置換複素環基、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、C5−C7脂環式基、置換C5−C7脂環式基、ハロゲン、OJ1、NJ1J2、SJ1、N3、COOJ1、アシル(C(=O)−H)、置換アシル、CN、スルホニル(S(=O)2−J1)、またはスルホキシル(S(=O)−J1)であり;および
各J1およびJ2は独立してH、C1−C12アルキル、置換C1−C12アルキル、C2−C12アルケニル、置換C2−C12アルケニル、C2−C12アルキニル、置換C2−C12アルキニル、C5−C20アリール、置換C5−C20アリール、アシル(C(=O)−H)、置換アシル、複素環基、置換複素環基、C1−C12アミノアルキル、置換C1−C12アミノアルキル、または保護基である)。
(式中、Bxは塩基部分でありRは独立してH、保護基、またはC1−C12アルキルである)。
(式中:
Bxはヘテロ環式塩基部分であり;
−Qa−Qb−Qc−は−CH2−N(Rc)−CH2−、−C(=O)−N(Rc)−CH2−、−CH2−O−N(Rc)−、−CH2−N(Rc)−O−、またはN(Rc)−O−CH2であり;
RcはC1−C12アルキルまたはアミノ保護基であり;および
TaおよびTbはそれぞれ独立してH、ヒドロキシル保護基、共役基、反応性リン基、リン部分、または支持体との共役結合である)を持つ二環式ヌクレオシド。
(式中:
Bxはヘテロ環式塩基部分であり;
TaおよびTbはそれぞれ独立してH、ヒドロキシル保護基、共役基、反応性リン基、リン部分、または支持体との共役結合であり;
ZaはC1−C6アルキル、C2−C6アルケニル、C2−C6アルキニル、置換C1−C6アルキル、置換C2−C6アルケニル、置換C2−C6アルキニル、アシル、置換アシル、置換アミド、チオール、または置換チオ)を持つ二環式ヌクレオシド。
(式中:
Bxはヘテロ環式塩基部分であり;
TaおよびTbはそれぞれ独立してH、ヒドロキシル保護基、共役基、反応性リン基、リン部分、または支持体との共役結合であり;
ZbはC1−C6アルキル、C2−C6アルケニル、C2−C6アルキニル、置換C1−C6アルキル、置換C2−C6アルケニル、置換C2−C6アルキニル、または置換アシル(C(=O)−)である)を持つ二環式ヌクレオシド。
(式中:
Bxはヘテロ環式塩基部分であり;
TaおよびTbはそれぞれ独立してH、ヒドロキシル保護基、共役基、反応性リン基、リン部分、または支持体との共役結合であり;
RdはC1−C6アルキル、置換C1−C6アルキル、C2−C6アルケニル、置換C2−C6アルケニル、C2−C6アルキニル、または置換C2−C6アルキニルであり;
各qa、qb、qc、およびqdは独立してH、ハロゲン、C1−C6アルキル、置換C1−C6アルキル、C2−C6アルケニル、置換C2−C6アルケニル、C2−C6アルキニルまたは置換C2−C6アルキニル、C1−C6アルコキシル、置換C1−C6アルコキシル、アシル、置換アシル、C1−C6アミノアルキル、または置換C1−C6アミノアルキルである)を持つ二環式ヌクレオシド。
(式中:
Bxはヘテロ環式塩基部分であり;
TaおよびTbはそれぞれ独立してH、ヒドロキシル保護基、共役基、反応性リン基、リン部分、または支持体との共役結合であり;
qa、qb、qeおよびqfはそれぞれ独立して水素、ハロゲン、C1−C12アルキル、置換C1−C12アルキル、C2−C12アルケニル、置換C2−C12アルケニル、C2−C12アルキニル、置換C2−C12アルキニル、C1−C12アルコキシ、置換C1−C12アルコキシ、OJj、SJj、SOJj、SO2Jj、NJjJk、N3、CN、C(=O)OJj、C(=O)NJjJk、C(=O)Jj、O−C(=O)-NJjJk、N(H)C(=NH)NJjJk、N(H)C(=O)-NJjJk 、またはN(H)C(=S)NJjJkであり;
またはqeおよびqfは共に=C(qg)(qh)であり;
qgおよびqhはそれぞれ独立してH、ハロゲン、C1−C12アルキル、または置換C1−C12アルキルである)を持つ二環式ヌクレオシド。
(式中:
Bxはヘテロ環式塩基部分であり;
TaおよびTbはそれぞれ独立してH、ヒドロキシル保護基、共役基、反応性リン基、リン部分、または支持体との共役結合であり;
各qi、qj、qk、およびqlは独立してH、ハロゲン、C1−C12アルキル、置換C1−C12アルキル、C2−C12アルケニル、置換C2−C12アルケニル、C2−C12アルキニル、置換C2−C12アルキニル、C1−C12アルコキシ、置換C1−C12アルコキシル、OJj、SJj、SOJj、SO2Jj、NJjJk、N3、CN、C(=O)OJj、C(=O)NJjJk、C(=O)Jj、O−C(=O)-NJjJk、N(H)C(=NH)NJjJk、N(H)C(=O)NJjJk、またはN(H)C(=S)NJjJkであり;および
qiおよびqjまたはqlおよびqkは共に=C(qg)(qh)(式中qgおよびqhはそれぞれ独立してH、ハロゲン、C1−C12アルキル、または置換C1−C12アルキルである))を持つ二環式ヌクレオシド。
(但し、式VIIの前記少なくとも1つのテトラヒドロピランヌクレオシド類似体の各々に対し、独立して:
Bxはヘテロ環式塩基部分であり;
TaおよびTbはそれぞれ独立して、テトラヒドロピランヌクレオシド類似体とアンチセンス化合物を結ぶヌクレオシド間連結基であり、TaおよびTbのうち1つはテトラヒドロピランヌクレオシド類似体とアンチセンス化合物を結ぶヌクレオシド間連結基であり、またTa のTb の他の基はH、ヒドロキシル保護基、連結共役基、または5’もしくは3’−末端基であり;
q1、q2、q3、q4、q5、q6、およびq7はそれぞれ独立してH、C1−C6アルキル、置換C1−C6アルキル、C2−C6アルケニル、置換C2−C6アルケニル、C2−C6アルキニル、または置換C2−C6アルキニルであり;および各R1およびR2は水素、ヒドロキシル、ハロゲン、置換もしくは非置換アルコキシ、NJ1J2、SJ1、N3、OC(=X)J1、OC(=X)NJ1J2、NJ3C(=X)NJ1J2、およびCN(式中、XはO、S、またはNJ1であり、各J1、J2、およびJ3は独立してHまたはC1−C6アルキルである)から選択される)。
核酸塩基(または塩基)修飾または置換は、化学構造的に天然由来のまたは合成の非修飾核酸塩基と区別できるが、機能的に代替可能である。天然および修飾核酸塩基の両方が水素結合に関与することができる。この核酸塩基修飾物は、アンチセンス化合物にヌクレアーゼ安定性、結合親和性、または他の何らかの有益な生物学的性質を与える。修飾核酸塩基は、例えば5−メチルシトシン(5−me−C)などの合成のおよび天然の核酸塩基を含む。ある核酸塩基置換物(例えば5−メチルシトシン置換物を含む)は、特に標的核酸に対するアンチセンス化合物の結合親和性の増加に有用である。例えば5−メチルシトシン置換物は、0.6〜1.2℃で核酸二本鎖安定性を増すことが示されている(Sanghvi、Y.S.、Crooke、S.T. and Lebleu、B.、eds.、Antisense Research and Applications、CRC Press、Boca Raton、1993、pp. 276−278)。
アンチセンスオリゴヌクレオチドは、医薬組成物または製剤の調製のために、医薬的に許容可能な活性または不活性物質と混合し得る。組成物および医薬組成物の調製方法は、これに限定されないが投与経路、疾患の程度、または投与される用量などのいくつかの基準に依る。
アンチセンス化合物は、得られるアンチセンスオリゴヌクレオチドの活性、細胞分布、または細胞取込みを増強する1つ以上の部分もしくはコンジュゲートと共有結合で連結し得る。典型的な共役基としては、コレステロール部分および脂質部分が挙げれる。さらなる共役基としては、炭水化物、リン脂質、ビオチン、フェナジン、葉酸、フェナントリジン、アントラキノン、アクリジン、フルオレセイン、ローダミン、クマリン、および染料が挙げられる。
アンチセンス化合物のANGPTL3核酸のレベル、活性、または発現の効果は、様々な細胞タイプでインビトロで試験し得る。この分析用に使用される細胞タイプは商業販売業者(例えばAmerican Type Culture Collection、Manassus、VA; Zen−Bio、Inc.、Research Triangle Park、NC; Clonetics Corporation、Walkersville、MD)から入手可能であり、細胞は製造供給元の取扱説明書に従い市販の試薬(例えばInvitrogen Life Technologies、Carlsbad、CA)を用いて培養し得る。具体的な細胞タイプとしては、これに限定されないが、HepG2細胞、Hep3B細胞、Huh7(肝細胞癌)細胞、初期肝細胞、A549細胞、GM04281線維芽細胞、およびLLC−MK2細胞が挙げられる。
本明細書中に、細胞をアンチセンスオリゴヌクレオチドで処理する方法を記載するが、この方法は、他のアンチセンス化合物を用いた処理のために適宜変更してもよい。
RNA解析を総細胞RNAまたはpoly(A)+mRNAに関して実施し得る。RNA単離方法は当技術分野で公知である(Sambrooke and Russell、Molecular Cloning: A Laboratory Manual、3rd Ed.、2001)。RNAは、当技術分野で公知の方法を使用して調製し、例えばTRIZOL(登録商標)試薬(Invitrogen、Carlsbad、CA)を用いて製造業者の推奨手順に従い調製する。
ANGPTL3核酸のレベルまたは発現の阻害は、当技術分野で公知の様々な方法で分析し得る(Sambrooke and Russell、Molecular Cloning: A Laboratory Manual、3rd Ed.、2001)。例えば、標的核酸レベルは、例えばノーザンブロット法、競合ポリメラーゼ連鎖反応(PCR)、または定量リアルタイムPCRにより定量し得る。RNA解析は、総細胞RNAまたはpoly(A)+mRNAに実施し得る。RNA単離方法は、当技術分野で公知である。ノーザンブロット法はまた、当技術分野で常法である。定量リアルタイムPCRは、PE−Applied Biosystems、Foster City、CAから入手でき製造業者の取扱説明書に従い使用される市販のABI PRISM(登録商標)7600、7700、または7900Sequence Detection Systemを用いて好都合に行われる。
標的RNAレベの定量は、ABI PRISM(登録商標)7600、7700、または7900 Sequence Detection System(PE−Applied Biosystems、Foster City、CA)を用いて、製造業者の取扱説明書に従い、定量リアルタイムPCRにより行ってもよい。定量リアルタイムPCRの方法は、当技術分野で公知である。
ANGPTL3核酸のアンチセンス阻害は、ANGPTL3タンパク質レベルを測定することにより評価され得る。ANGPTL3のタンパク質レベルを、当技術分野で公知の様々な手法、例えば免疫沈降法、ウエスタンブロット法(免疫ブロット法)、酵素免疫吸着測定法(ELISA)、定量的タンパク質分析、タンパク質活性分析(例えばカスパーゼ活性アッセイ)、免疫組織学、免疫細胞化学、または蛍光活性化細胞分類(FACS)(Sambrooke and Russell、Molecular Cloning: A Laboratory Manual、3rd Ed.、2001)などで評定または定量化してもよい。標的に関する抗体は、抗体のMSRSカタログ(Aerie Corporation、Birmingham、MI)などの様々な供給源から単離および回収してもよく、あるいは当技術分野で公知の従来型モノクローナル抗体またはポリクローナル抗体生成方法により調製してもよい。
アンチセンス化合物、例えばアンチセンスオリゴヌクレオチドを、ANGPTL3の発現を阻害し表現型の変化を生じる機能を評価する動物にて試験する。試験は、正常動物で、または実験用疾患モデルで実施し得る。動物への投与に関し、アンチセンスオリゴヌクレオチドを、リン酸緩衝生理食塩水などの医薬的に許容可能な希釈剤にて製剤する。投与としては、非経口経路の投与が挙げられる。アンチセンスオリゴヌクレオチドによる処置期間後、RNAを細胞から単離してANGPTL3核酸発現の変化を測定する。ANGPTL3タンパク質レベルの変化もまた測定する。
特定の実施形態では、本明細書に記載の1つ以上の医薬組成物を投与することを含む、個体を処置する方法が本明細書で提供される。特定の実施形態では、個体は代謝疾患および/または心臓血管疾患を患う。特定の実施形態では、個体はアテローム性動脈硬化、肝脂肪症、または高脂血症を患う。
特定の実施形態では、本明細書に記載の化合物および組成物は、非経口で投与される。
特定の実施形態では、本発明の修飾オリゴヌクレオチを含む第1剤は、1つ以上の第2の薬剤と同時投与される。特定の実施形態では、この第2剤を設計して、本明細書に記載の第1剤と同じ疾患、障害、または症状を治療する。特定の実施形態では、この第2剤を設計して、本明細書に記載の第1剤と同じ疾患、障害、または症状を治療する。特定の実施形態では、この第2剤を設計して本明細書に記載の1つ以上の医薬組成物の望ましくない副作用を治療する。特定の実施形態では、第2剤を第1剤と同時投与して、第1剤の望ましくない効果を治療する。特定の実施形態では、第2剤を第1剤と同時投与し、併用効果を生じる。特定の実施形態では、第2剤を第1剤と同時投与し、相乗効果を生じる。
本明細書に記載のある化合物、組成物、および方法が、ある実施形態にしたがい具体的に記載されてきたが、いっぽうで、以下の実施例は本明細書に記載の化合物を例示するためのみ役に立ち、これを限定することを意図しない。本出願に記載の各参考文献は、その全体が引用により本明細書に組み込まれる。
一連のオリゴマー化合物を設計してヒトアンジオポエチン様3の様々な領域を標的化し、表1に示す公表された配列を使用した。化合物を表4に示す。表4の全ての化合物は、10この2’−デオキシヌクレオチドからなる中心「ギャップ」領域からなり、両端(5’および3’)に5ヌクレオチドの「ウィング」が配置された20ヌクレオチドの長さのキメラオリゴヌクレオチド(「ギャップマー」)である。ウィングは2’−O−(2−メトキシエチル)ヌクレオチドからなり、また2’−MOEヌクレオチドとして知られている。ヌクレオシド間(主鎖)結合はオリゴヌクレオチドの全体にわたりホスホロチオエートである。全てのシトシン残基は5−メチルシトシン類である。表4のオリゴマー化合物は具体的にはアンジオポエチン様3をコードする標的核酸分子とハイブリッドを形成し、結合親和性を増大させる領域からなり、これらの領域はオリゴマー化合物の「ウィング」である。オリゴマー化合物はそれぞれRNase H活性を導く領域を含み、この領域は「ギャップ」領域である。
一連のオリゴマー化合物を設計してマウスアンジオポエチン様3の様々な領域を標的化し、表1に示す公表された配列を使用した。化合物を表5に示す。表5の全ての化合物は、10この2’−デオキシヌクレオチドからなる中心「ギャップ」領域からなり、両端(5’および3’)に5ヌクレオチドの「ウィング」が配置された20ヌクレオチドの長さのキメラオリゴヌクレオチド(「ギャップマー」)である。ウィングは2’−O−(2−メトキシエチル)ヌクレオチドからなり、また2’−MOEヌクレオチドとして知られている。ヌクレオシド間(主鎖)結合はオリゴヌクレオチドの全体にわたりホスホロチオエートである。全てのシトシン残基は5−メチルシトシン類である。表5のオリゴマー化合物は具体的にはアンジオポエチン様3をコードする標的核酸分子とハイブリッドを形成し、結合親和性を増大させる領域からなり、これらの領域はオリゴマー化合物の「ウィング」である。オリゴマー化合物はそれぞれRNase H活性を導く領域を含み、この領域は「ギャップ」領域である。
本発明に従って、本発明のオリゴマー化合物を含む一連の二本鎖(dsRNAおよびその模倣)およびそれらの相補体を設計してアンジオポエチン様3を標的化し得る。その二本鎖のアンチセンス鎖の核酸塩基配列は、本明細書に記載のアンジオポエチン様3を標的化したオリゴヌクレオチドの少なくとも一部を含む。前記鎖の末端を1つ以上の天然または修飾核酸塩基の付加により修飾してオーバーハングを形成してもよい。核酸二本鎖のセンス鎖は、次いで、アンチセンス鎖の相補体として設計および合成され、核酸二本鎖のセンス鎖はまた、いずれの末端に修飾または付加を含んでいてもよい。二本鎖のアンチセンスおよびセンス鎖は約17〜25このヌクレオチド、または約19〜23このヌクレオチドを含む。あるいは、アンチセンスおよびセンス鎖は20、21、または22このヌクレオチドを含む。
本発明のさらなる実施形態では、3つのオリゴヌクレオチドをさらなる用量反応試験のために選定した。マウス初期肝細胞を6.25、25、100、または400nMのISIS233693(配列番号131)、ISIS233698(配列番号136)、もしくはISIS233725(配列番号159)、またはそのスクランブル対照(scrambled control)オリゴヌクレオチドISIS113529(5−10−5ギャップマー、CTCTTACTGTGCTGTGGACA、配列番号11として本明細書に組み込まれる)で処理し、mRNAレベルを本明細書の他の実施例に記載のように測定した。未処理細胞が、データをノーマライズする対照としての役割を果たした。
本発明に従い、マウスアンジオポエチン様3を標的化する2つのオリゴヌクレオチドをインビボ試験用に選択した。正常餌を給餌したC57BL/6雄マウスに週に2回ISIS233693(配列番号131)またはISIS233698(配列番号136)のいずれかの50mg/kg用量を2週間注射した。各処置群は5動物からなっていた。ある動物群は生理食塩水を週に2回で2週間注射を受けた。この生理食塩水注射群は、オリゴヌクレオチド処置群と比較する対照群としての役割を果たした。
C57BL/6マウス株は、高脂血症−誘導性アテローム斑形成の影響を受け易いことが報告されている。従って、これらのマウスに高脂肪餌を給餌して、アンジオポエチン様3アンチセンスオリゴヌクレオチドのmRNA発現に対する影響を評定するその後の試験に使用した。
肝脂肪症は脂質の肝臓への蓄積、しばしばアルコール摂取、糖尿病、および高脂血症により引き起こされる「脂肪肝(fatty liver)」、を意味し、末期の肝臓障害に進行し得る。脂肪肝症状のその有害な影響を考慮すると、肝脂肪症を予防または改善する化合物を特定することは有用である。肝脂肪症は、組織トリグリセリド量の測定、および肝臓組織の組織学的検査の両方により評定してもよい。
実施例6に記載の試験と同じ試験で、C57BL/6雄マウスを、脂質から得られる60%のカロリーを含む高脂肪給餌(例えば、Research Diet D12492、Research Diets Inc.、New Brunswick、NJ)の環境に置いた。高脂質餌を受けるマウスを処理群に分類した。1つの群がISIS233693(配列番号131)の注射を週に2回、50mg/kg用量で6週間受けた。
ISIS233693の抗アテローム性動脈硬化剤としての効果を、高コレステロール餌を給餌したLDL受容体ノックアウトマウス;アテローム性動脈硬化の試験用モデルで評定した。(Ishibashi et al、J Clin. Invest. 1994 May; 93:1885−93)。
LDL受容体遺伝子ノックアウトマウスC57Bl/6(Jackson Labs、#2207)にHarlan Tekland餌、TD94059(37%kCal脂肪(ココアバターの半分)、1.25%コレステロール)を給餌した。給餌開始後4週間で、マウスを処置用に各6〜8匹のマウスからなる2群に分けた。第一の群は、ISIS233693(配列番号131)の皮下注射を25mg/kg用量で週に2回、16週間受けた。第二の群は対照ミスマッチオリゴヌクレオチド、ISIS141923(CCTTCCCTGAAGGTTCCTCC、配列番号187として本明細書に組み込まれる)の皮下注射を25mg/kg用量で週に2回、16週間受けた。
RNAを、ANGPTL3のリアルタイムPCR解析のため、ANGPTL3 プライマープローブセット(フォワード配列CACCTGGGCAGTCACGAAA、配列番号188として本明細書に指定する;リバース配列GGAGGGCCCCAGGGATAT、配列番号189として本明細書に指定する;プローブ配列CACGCTACATGTGGCTGAGATTCGTGG、配列番号190として本明細書に指定する)を用いて肝臓組織から抽出した。結果をPBS対照と比較してマウスANGPTL3の阻害パーセントとして示す。表13に示すように、ISIS233693の処置は、PBS対照と比較するとANGPTL3mRNAの有意な減少をもたらした。対照オリゴヌクレオチド、ISIS141923による処置は、予想通り、ANGPTL3の有意な減少をもたらさなかった。
血漿および肝臓のトリグリセリド、ならびにコレステロールをBligh−Dyer法(Bligh、E and Dyer、W、Can J Biochem Physiol、37、911−917、1959)により抽出し、市販のトリグリセリドキット(DCLトリグリセリド試薬;Diagnostic Chemicals Ltd.)を用いて測定した。結果を表14〜17に示す。表14は、ISIS233693による処置が、16週間でのコレステロールレベルにPBS対照と比較して58%もの有意な減少をもたらしたことを実証している。総コレステロールレベルの減少は、表15に示すように、対照と比較して58%ものLDLコレステロールレベルの有意な減少の結果である。表16は、上記に詳述したように、マウスモデル依存的のようなHDLの減少を示す。同様に、表17は、ISIS233693の処置によりPBS対照と比較して16週間で75%トリグリセリドレベルが減少したことを実証している。
PBS、その後のホルマリンPBS溶液(5%ホルマリンのPBS)によるかん流後に、アテローム性動脈硬化症の重症度をマウスから採取した大動脈で評価した。マウス大動脈全体を解剖用顕微鏡を用いて近位上行大動脈から腸骨動脈の分岐部まで切開した。外膜脂肪を取り除き、大動脈を長手方向に開き、、解剖用の黒色ワックス上にピンで平らに留めて、スーダンIVで染色し、固定倍率で写真を撮影した。写真をデジタル化し、総大動脈弁領域および病変部位をAdobe Photoshop version 7.0およびNIH Scion Image software(http://rsb.info.nih.gov/nih−image/Default.html)を用いて算出した。表18に示す結果を、病変を含む総大動脈弁領域のパーセントとして報告する。示されるように、ISIS233693による処置が大動脈病変の顕著な減少とアテローム性動脈硬化の改善をもたらした。
肝機能に対するISISオリゴヌクレオチドの効果を評定するため、血漿アミノ基転移酵素濃度を臨床化学自動分析装置(Hitachi Olympus AU400e、Melville、NY)を用いて測定した。血漿のALT(アラニンアミノ基転移酵素)およびAST(アスパラギン酸アミノ基転移酵素)濃度を測定し、その結果をIU/L単位で示す表19および20に示す。測定を4週間ごとに行った。0週は、処置開始時であり、高脂肪餌給餌開始後4週間である。
脂質異常症治療薬としてのISIS233693の効果を、高コレステロール餌を給餌したヒトapoB−100トランスジェニックLDL受容体ノックアウトマウスで、評定した。これらの試験に使用したマウスは、先行論文(Sanan et al、Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 95: 4544-4549)に記載されている。簡潔には、このマウス株は、LDLr-/- マウス(Ishibashi et al.(J. Clin. Invest. 92: 883-893)により本来記載され、129svおよびC57BL/6株のハイブリッドである)とヒトapoB−100トランスジェニックマウス(Linton et al、J. Clin. Invest. 92: 3029-3037、SJLおよびC57BL/6B株のハイブリッドである)のハイブリッドである。交配によりLDLr-/-およびapoBの過剰発現特性が同型であることが示され、マウスはapoB−100−含有LDLの大幅な増加を示した。
マウスをHarlan Tekland社製餌TD88137または「Western diet」(21%無水乳脂肪(乳脂肪)、34%スクロース、および0.2%総コレステロール)で給餌した。給餌開始後1週間で、マウスを処置のため各5匹からなる群に分けた。第一コホートが、ISIS233693(配列番号131)の皮下注射を、週に2回、12.5mg/kg、25mg/kg、または50mg/kgの用量で4週間受けた。第二のコホートが、対照オリゴヌクレオチド、ISIS141923(配列番号187)の皮下注射を、週に2回、12.5mg/kgまたは50mg/kgの用量で4週間受けた。
RNAを、ANGPTL3のリアルタイムPCR解析のため、ANGPTL3プライマープローブセット(フォワード配列CACCTGGGCAGTCACGAAA、配列番号187として本明細書に指定する;リバース配列GGAGGGCCCCAGGGATAT、配列番号188として本明細書に指定する;プローブ配列CACGCTACATGTGGCTGAGATTCGTGG、配列番号189として本明細書に指定する)を用いて、およびApoCIIImRNAのリアルタイムPCR解析のため、ApoCIIIプライマープローブセット(フォワード:TGCAGGGCTACATGGAACAA、本明細書に配列番号12として組み込まれる;リバース:CGGACTCCTGCACGCTACTT、本明細書に配列番号13として組み込まれる;プローブ:CTCCAAGACGGTCCAGGATGCGC、本明細書に配列番号14として組み込まれる)を用いて肝臓組織から抽出した。結果を、PBS対照と比較したマウスANGPTL3およびマウス ApoCIIIの阻害パーセントで示す。表21に示すように、ISIS233693およびISIS233725による処置は、PBS対照と比較して、ANGPTL3mRNAの有意な用量依存的減少をもたらした。ISIS233693による処置はまた、50mg/kg/週でApoCIIImRNAの阻害をもたらした。
血漿および肝臓のトリグリセリド、ならびにコレステロールを、Bligh−Dyer法(Bligh、E and Dyer、W、Can J Biochem Physiol、37、911−917、1959)により抽出し、市販のトリグリセリドキット(DCLトリグリセリド試薬;Diagnostic Chemicals Ltd.)を用いて測定した。結果を表22に示す。試験は、ISIS233693およびISIS233725による処置がPBS対照と比較して25mg/kg/週でそれぞれコレステロールレベルを63%および37%減少させたことを実証する。総コレステロールレベルの減少は主に、上述のように対照と比較して63%および34%のそれぞれのLDLコレステロールレベルの有意な減少の結果であった。HDLの若干の減少は、脂質低下薬をマウスで試験した場合にHDL低下が通常マウスで認められるように、上記詳述のマウスモデル依存性であり得る。試験は、ISIS233693およびISIS233725による処置がPBS対照と比較して25mg/kg/週でそれぞれ82%および70%トリグリセリドレベルを減少させたことを実証する。
グルコース生成に対するISISオリゴヌクレオチドの効果を評定するために、血漿グルコース値をBeckmanグルコースアナライザII(Beckman Coulter)を用いてグルコースオキシダーゼ法により測定した。結果を表23に示し、また結果は、ISIS233693およびISIS233725による処置が、PBS対照と比較して50mg/kg/週でともに40%の血漿グルコース値の減少をもたらしたことを実証する。
肝機能に対するISISオリゴヌクレオチドの効果を評定するために、血漿アミノ基転移酵素濃度を臨床化学自動分析装置(Hitachi Olympus AU400e、Melville、NY)を用いて測定した。血漿のALT(アラニンアミノ基転移酵素)およびAST(アスパラギン酸アミノ基転移酵素)濃度を測定し、その結果をIU/L単位で示す表24に示す。
臓器重量に対するISISオリゴヌクレオチドの効果を評定するために、試験終了後に臓器を採取して計量した。結果を表25に示し、またこの結果は、ISISオリゴヌクレオチドによる処置が肝臓、脾臓、または腎臓重量に対し影響を与えないことを実証する。ISIS233693による処置により、PBS対照と比較して、50mg/kg/週で、まさに77%のマウスの脂肪パッド重量が減少した。
マウスANGPTL3を標的化するISIS233693を、フェノフィブラートと比較してナイーブC57BL/6マウスで評定した。フェノフィブラートは、対象での高コレステロール血症および高トリグリセリド血症の商業的に可能な療法であり、コレステロール、低比重リポタンパク質(LDL)、超低比重リポタンパク質(VLDL)、およびトリグリセリドレベルの減少させること、ならびに高比重リポタンパク質(HDL)レベルを上昇させることが知られている。
血漿および肝臓のトリグリセリドならびにコレステロールを、Bligh−Dyer法(Bligh、E and Dyer、W、Can J Biochem Physiol、37、911−917、1959)により抽出し、市販のトリグリセリドキット(DCLトリグリセリド試薬;Diagnostic Chemicals Ltd.)を用いて測定した。結果を表26に示す。試験は、ISIS233693による処置がPBS対照と比較して50mg/kg/週でコレステロールレベルを23%減少させたことを実証する。試験は、ISIS233693による処置がPBS対照と比較して50mg/kg/週で38%トリグリセリドレベルを減少させたことを実証する。フェノフィブラートによる処置は、コレステロールまたはトリグリセリドレベルに対する効果を持っていなかった。
グルコース生成に対するISISオリゴヌクレオチドの効果を評定するために、血漿グルコース値をBeckmanグルコースアナライザII(Beckman Coulter)を用いてグルコースオキシダーゼ法により測定した。結果を表27に示し、また結果は、ISIS233693による処置が、PBS対照と比較して50mg/kg/週でともに19%の血漿グルコース値の減少をもたらしたことを実証する。フェノフィブラートによる処置は、グルコース値に対する効果を持っていなかった。
肝機能に対するISISオリゴヌクレオチドの効果を評定するため、血漿アミノ基転移酵素濃度を臨床化学自動分析装置(Hitachi Olympus AU400e、Melville、NY)を用いて測定した。血漿のALT(アラニンアミノ基転移酵素)およびAST(アスパラギン酸アミノ基転移酵素)濃度を測定し、その結果をIU/L単位で示す表28に示す。
NEFAおよび3−HBレベルをマウス群で分析し、表29に示した。脂肪酸化の指標としてのNEFAおよび3−HBレベルは、ISISオリゴヌクレオチドによる処理により有意な悪影響を受けなかった。フェノフィブラートによる処置は、NEFAおよび3HBの両方のレベルの増加に示されるように、脂肪酸化を増加させた。
臓器重量に対するISISオリゴヌクレオチドの効果を評定するために、試験終了後に臓器を採取して計量した。結果を表30に示し、またこの結果は、ISIS233693による処置が肝臓、脾臓、または腎臓重量に対し影響を与えないことを実証する。ISIS233693による処置は、PBS対照と比較して、50mg/kg/週で、まさに45%のマウスの白色脂肪組織重量が減少した。
ISIS360363(GTGACATATTCTTCACCTCT;配列番号191)およびISIS360382(TTTAAGTGACGTTACCTCTG;配列番号192)(両5−10−5MOEギャップマーがラットmRNA配列、配列番号193(Genbank Accession No.XM_233218.1)とそれぞれ開始位置333および476を標的化している)を、Sprague Dawleyラットで評定した。
RNAを、ANGPTL3のリアルタイムPCR解析のため肝臓組織から抽出した。結果をPBS対照と比較したラットANGPTL3の阻害パーセントで示す。表31に示すように、ISIS360363およびISIS360382による処置は、PBS対照との比較で、ANGPTL3mRNAの有意な減少をもたらした。
血漿トリグリセリドおよびコレステロールを、Bligh−Dyer法(Bligh、E and Dyer、W、Can J Biochem Physiol、37、911−917、1959)により抽出し、市販のトリグリセリドキット(DCLトリグリセリド試薬;Diagnostic Chemicals Ltd.)を用いて測定した。結果を表26に示す。試験は、ISIS360363および360382による処置がPBS対照と比較してそれぞれトリグリセリドレベルを67%および81%減少させたことを実証する。従って、ANGPTL3を標的化するISISオリゴヌクレオチドによる処置により、このラットモデルでの血漿トリグリセリドの有意な改善が生じる。このモデルでのISISオリゴヌクレオチドによる処置は、総コレステロールまたはLDLレベルに対する効果を持っていなかった。
本出願は、電子様式の配列表と共に提出されている。配列表は、2011年1月7日に作成されたサイズが56KbのBIOL0120WOSEQ.txtという名称のファイルとして提供されている。電子様式の配列表に含まれる情報の全体を参照により本明細書に組み込まれる。
Claims (14)
- ANGPTL3を標的とする18〜24連結ヌクレオシドの長さの修飾オリゴヌクレオチドを含む、動物でのANGPTL3発現を低減させるための医薬組成物であって、
前記修飾オリゴヌクレオチドは、前記修飾オリゴヌクレオチドの全体にわたり測定された場合に、配列番号4の1094-1113位のヌクレオチドを含む18〜50ヌクレオチドの標的配列に対して、少なくとも90%相補的な核酸塩基配列を有し、
前記修飾オリゴヌクレオチドは、少なくとも1つのホスホロチオエート連結を有し、この組成物の投与により、動物においてANGPTL3の発現を少なくとも40%低減する、
動物におけるANGPTL3の発現を低減させるための医薬組成物。 - 動物におけるANGPTL3の発現の低減が、
(a) apoC-III発現レベルを減少させ;
(b) トリグリセリドレベルを減少させ;
(c) コレステロールレベルを減少させ;
(d) LDLレベルを減少させ;
(e) グルコースレベルを減少させ;および/または
(f) インスリン感受性を改善する;
請求項1に記載の医薬組成物。 - 前記修飾オリゴヌクレオチドが、前記修飾オリゴヌクレオチドの全体にわたり測定した場合に配列番号4の1094-1113位のヌクレオチドを含む18〜50ヌクレオチドの標的配列に対して少なくとも95%または100%相補的な核酸塩基配列を有する、請求項1または2に記載の医薬組成物。
- 前記動物がヒトである、請求項1または2に記載の医薬組成物。
- 前記修飾オリゴヌクレオチドの少なくとも1つのヌクレオシドが修飾糖を含み、および/または前記修飾オリゴヌクレオチドの少なくとも1つのヌクレオシドが修飾核酸塩基を含む、請求項1または2に記載の医薬組成物。
- 各ヌクレオシド間連結がホスホロチオエートヌクレオシド間連結である、請求項1に記載の医薬組成物。
- 少なくとも1つの修飾糖が二環式糖である、請求項6に記載の医薬組成物。
- 少なくとも1つの修飾糖が2'-O-メトキシエチル、(4’-CH(CH3)-O-2’)BNA、(4’-CH2-O-2’)BNA、または4'-(CH2)n-O-2'架橋(式中、nは1または2である)を含む、請求項5に記載の医薬組成物。
- 前記修飾核酸塩基が5-メチルシトシンである、請求項5に記載の医薬組成物。
- 前記修飾オリゴヌクレオチドは20連結ヌクレオシドからなる、請求項1または2に記載の医薬組成物。
- 前記修飾オリゴヌクレオチドは:
a.連結デオキシヌクレオシドからなるギャップセグメント;
b.連結ヌクレオシドからなる5'ウィングセグメント;
c.連結ヌクレオシドからなる3'ウィングセグメント;を含み、
前記ギャップセグメントは5'ウィングセグメントと3'ウィングセグメントとの間に位置し、各ウィングセグメントの各ヌクレオシドが修飾糖を含む、請求項1または2に記載の医薬組成物。 - 前記レベルが独立して少なくとも5%、10%、20%、30%、35%、または40%減少する、請求項2に記載の医薬組成物。
- 前記修飾オリゴヌクレオチドが共役基を有する、請求項1〜12のいずれか1項に記載の医薬組成物。
- 前記共役基が炭水化物である、請求項13に記載の医薬組成物。
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US29360410P | 2010-01-08 | 2010-01-08 | |
US61/293,604 | 2010-01-08 | ||
PCT/US2011/020606 WO2011085271A2 (en) | 2010-01-08 | 2011-01-07 | Modulation of angiopoietin-like 3 expression |
Related Child Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2015156939A Division JP6440592B2 (ja) | 2010-01-08 | 2015-08-07 | アンジオポエチン様3発現の調節 |
Publications (3)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2013516489A JP2013516489A (ja) | 2013-05-13 |
JP2013516489A5 JP2013516489A5 (ja) | 2013-08-08 |
JP5822845B2 true JP5822845B2 (ja) | 2015-11-25 |
Family
ID=44306180
Family Applications (4)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2012548193A Expired - Fee Related JP5822845B2 (ja) | 2010-01-08 | 2011-01-07 | アンジオポエチン様3発現の調節 |
JP2015156939A Expired - Fee Related JP6440592B2 (ja) | 2010-01-08 | 2015-08-07 | アンジオポエチン様3発現の調節 |
JP2017098842A Pending JP2017165765A (ja) | 2010-01-08 | 2017-05-18 | アンジオポエチン様3発現の調節 |
JP2020032712A Pending JP2020100654A (ja) | 2010-01-08 | 2020-02-28 | アンジオポエチン様3発現の調節 |
Family Applications After (3)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2015156939A Expired - Fee Related JP6440592B2 (ja) | 2010-01-08 | 2015-08-07 | アンジオポエチン様3発現の調節 |
JP2017098842A Pending JP2017165765A (ja) | 2010-01-08 | 2017-05-18 | アンジオポエチン様3発現の調節 |
JP2020032712A Pending JP2020100654A (ja) | 2010-01-08 | 2020-02-28 | アンジオポエチン様3発現の調節 |
Country Status (9)
Country | Link |
---|---|
US (5) | US8653047B2 (ja) |
EP (2) | EP3421040A1 (ja) |
JP (4) | JP5822845B2 (ja) |
CN (3) | CN106146591B (ja) |
AU (1) | AU2011203986C1 (ja) |
CA (1) | CA2786071C (ja) |
DK (1) | DK2521556T3 (ja) |
ES (1) | ES2677969T3 (ja) |
WO (1) | WO2011085271A2 (ja) |
Families Citing this family (60)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
ES2616051T3 (es) | 2008-12-02 | 2017-06-09 | Wave Life Sciences Japan, Inc. | Método para la síntesis de ácidos nucleicos modificados en el átomo de fósforo |
WO2011005761A1 (en) | 2009-07-06 | 2011-01-13 | Ontorii, Inc | Novel nucleic acid prodrugs and methods use thereof |
CN106146591B (zh) * | 2010-01-08 | 2020-07-31 | Ionis制药公司 | 血管生成素样3表达的调节 |
JP5868324B2 (ja) | 2010-09-24 | 2016-02-24 | 株式会社Wave Life Sciences Japan | 不斉補助基 |
AR087329A1 (es) | 2011-06-17 | 2014-03-19 | Regeneron Pharma | Anticuerpos humanos contra proteina 3 de tipo angiopoietina humana |
AU2012272970A1 (en) | 2011-06-21 | 2014-02-06 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Angiopoietin-like 3 (ANGPTL3) iRNA compositions and methods of use thereof |
WO2013012758A1 (en) | 2011-07-19 | 2013-01-24 | Ontorii, Inc. | Methods for the synthesis of functionalized nucleic acids |
US10023861B2 (en) | 2011-08-29 | 2018-07-17 | Ionis Pharmaceuticals, Inc. | Oligomer-conjugate complexes and their use |
EP2776564B1 (en) * | 2011-11-07 | 2019-10-02 | Ionis Pharmaceuticals, Inc. | Modulation of tmprss6 expression |
EA201490993A1 (ru) * | 2011-11-18 | 2014-09-30 | Элнилэм Фармасьютикалз, Инк. | МОДИФИЦИРОВАННЫЕ СРЕДСТВА РНКи |
WO2014010250A1 (en) | 2012-07-13 | 2014-01-16 | Chiralgen, Ltd. | Asymmetric auxiliary group |
SG11201500232UA (en) | 2012-07-13 | 2015-04-29 | Wave Life Sciences Pte Ltd | Chiral control |
BR112015000723A2 (pt) | 2012-07-13 | 2017-06-27 | Shin Nippon Biomedical Laboratories Ltd | adjuvante de ácido nucléico quiral |
JP6452614B2 (ja) | 2012-11-15 | 2019-01-16 | ロシュ イノベーション センター コペンハーゲン エーエス | オリゴヌクレオチドコンジュゲート |
AU2014211406B2 (en) | 2013-01-30 | 2019-07-18 | Roche Innovation Center Copenhagen A/S | LNA oligonucleotide carbohydrate conjugates |
KR20160002977A (ko) | 2013-05-01 | 2016-01-08 | 아이시스 파마수티컬즈 인코포레이티드 | 조성물 및 방법 |
TWI772856B (zh) * | 2013-07-19 | 2022-08-01 | 美商百健Ma公司 | 用於調節τ蛋白表現之組合物 |
ES2830257T3 (es) * | 2013-12-24 | 2021-06-03 | Ionis Pharmaceuticals Inc | Modulación de la expresión de la proteína de tipo angiopoyetina 3 |
EP3095460A4 (en) | 2014-01-15 | 2017-08-23 | Shin Nippon Biomedical Laboratories, Ltd. | Chiral nucleic acid adjuvant having anti-allergic activity, and anti-allergic agent |
US10144933B2 (en) | 2014-01-15 | 2018-12-04 | Shin Nippon Biomedical Laboratories, Ltd. | Chiral nucleic acid adjuvant having immunity induction activity, and immunity induction activator |
JPWO2015108048A1 (ja) | 2014-01-15 | 2017-03-23 | 株式会社新日本科学 | 抗腫瘍作用を有するキラル核酸アジュバンド及び抗腫瘍剤 |
KR20230152178A (ko) | 2014-01-16 | 2023-11-02 | 웨이브 라이프 사이언시스 리미티드 | 키랄 디자인 |
MX2016014102A (es) | 2014-05-01 | 2017-05-03 | Ionis Pharmaceuticals Inc | Composiciones y metodos para modular la expresion de similar a la angiopoyetina tipo 3. |
US10570169B2 (en) | 2014-05-22 | 2020-02-25 | Ionis Pharmaceuticals, Inc. | Conjugated antisense compounds and their use |
CA2979998A1 (en) * | 2015-03-20 | 2016-09-29 | Protiva Biotherapeutics, Inc. | Compositions and methods for treating hypertriglyceridemia |
KR102539587B1 (ko) | 2015-04-03 | 2023-06-01 | 아이오니스 파마수티컬즈, 인코포레이티드 | Tmprss6 발현을 조절하기 위한 화합물 및 방법들 |
CN115927335A (zh) * | 2015-04-13 | 2023-04-07 | 阿尔尼拉姆医药品有限公司 | 类血管生成素3(ANGPTL3)iRNA组合物及其使用方法 |
WO2017079745A1 (en) | 2015-11-06 | 2017-05-11 | Ionis Pharmaceuticals, Inc. | Conjugated antisense compounds for use in therapy |
BR122023026882A2 (pt) | 2015-11-06 | 2024-01-23 | Ionis Pharmaceuticals, Inc | Uso de um composto oligomérico |
RU2018120599A (ru) * | 2015-11-06 | 2019-12-09 | Джемфир Терапьютикс, Инк. | Лечение смешанной дислипидемии |
IL260931B2 (en) * | 2016-02-17 | 2024-09-01 | Regeneron Pharma | Methods of treating or preventing atherosclerosis by blocking ANGPTL3 |
AU2017234678A1 (en) * | 2016-03-16 | 2018-08-16 | Ionis Pharmaceuticals, Inc. | Methods of modulating KEAP1 |
KR20240019856A (ko) * | 2016-04-28 | 2024-02-14 | 리제너론 파아마슈티컬스, 인크. | 가족성 고콜레스테롤혈증을 지닌 환자를 치료하는 방법 |
EP3449002A4 (en) | 2016-04-29 | 2019-09-25 | Nanyang Technological University | ANTISENSE OLIGONUCLEOTIDES CONTAINING A G-QUADRUPLEX |
CN109477103A (zh) | 2016-06-22 | 2019-03-15 | ProQR治疗上市公司Ⅱ | 单链rna-编辑寡核苷酸 |
ES2837076T3 (es) | 2016-09-01 | 2021-06-29 | Proqr Therapeutics Ii Bv | Oligonucleótidos para la edición de ARN de cadena sencilla modificados químicamente |
CN110177544A (zh) | 2016-11-29 | 2019-08-27 | 普尔泰克健康有限公司 | 用于递送治疗剂的外泌体 |
CN108220293B (zh) * | 2016-12-21 | 2021-09-24 | 苏州瑞博生物技术股份有限公司 | 一种小干扰核酸和药物组合物及其用途 |
US11274300B2 (en) | 2017-01-19 | 2022-03-15 | Proqr Therapeutics Ii B.V. | Oligonucleotide complexes for use in RNA editing |
EP3678273A4 (en) | 2017-08-30 | 2021-01-06 | Kyocera Corporation | POWER SUPPLY MANAGEMENT PROCESS AND POWER SUPPLY MANAGEMENT DEVICE |
JOP20200050A1 (ar) | 2017-09-14 | 2020-03-05 | Arrowhead Pharmaceuticals Inc | عوامل RNAi وتركيبات لتثبيط التعبير عن شبيه آنجيوبويتين 3 (ANGPTL3)، وطرق استخدام |
EP3719125A4 (en) | 2017-12-01 | 2021-09-08 | Suzhou Ribo Life Science Co., Ltd. | NUCLEIC ACID, COMPOSITION AND CONJUGATE IN CONTAINER, AND PROCESS FOR PREPARATION AND USE |
WO2019105414A1 (zh) * | 2017-12-01 | 2019-06-06 | 苏州瑞博生物技术有限公司 | 一种核酸、含有该核酸的组合物与缀合物及制备方法和用途 |
EP3719127A4 (en) | 2017-12-01 | 2021-10-20 | Suzhou Ribo Life Science Co., Ltd. | NUCLEIC ACID, COMPOSITION AND CONJUGATE WITH IT, MANUFACTURING METHOD AND USE |
CN110944675B9 (zh) | 2017-12-01 | 2024-08-09 | 苏州瑞博生物技术股份有限公司 | 一种核酸、含有该核酸的组合物与缀合物及制备方法和用途 |
AU2018374219C1 (en) | 2017-12-01 | 2023-05-11 | Suzhou Ribo Life Science Co., Ltd. | Double-stranded oligonucleotide, composition and conjugate comprising double-stranded oligonucleotide, preparation method therefor and use thereof |
US11633482B2 (en) | 2017-12-29 | 2023-04-25 | Suzhou Ribo Life Science Co., Ltd. | Conjugates and preparation and use thereof |
JP2021533800A (ja) | 2018-08-21 | 2021-12-09 | スーチョウ リボ ライフ サイエンス カンパニー、リミテッドSuzhou Ribo Life Science Co., Ltd. | 核酸、当該核酸を含む薬物組成物及び複合体ならびにその使用 |
CN111655297A (zh) | 2018-09-30 | 2020-09-11 | 苏州瑞博生物技术有限公司 | 一种siRNA缀合物及其制备方法和用途 |
KR20210090660A (ko) * | 2018-11-13 | 2021-07-20 | 리피곤 파마슈티컬스 에이비 | 지방산 대사의 조절에 영향을 미치는 angptl4 올리고뉴클레오타이드 |
CN112423795A (zh) * | 2018-12-28 | 2021-02-26 | 苏州瑞博生物技术股份有限公司 | 一种核酸、含有该核酸的组合物与缀合物及制备方法和用途 |
EP3908287A1 (en) * | 2019-01-08 | 2021-11-17 | Avogadro Development Corp. | Treatment of fatty liver disease |
CN111973617A (zh) * | 2019-05-23 | 2020-11-24 | 苏州瑞博生物技术股份有限公司 | 核酸、药物组合物与缀合物及制备方法和用途 |
EP4331608A1 (en) * | 2020-09-30 | 2024-03-06 | Nanopeptide (Qingdao) Biotechnology Ltd. | Target ligand |
EP4301857A1 (en) | 2021-03-04 | 2024-01-10 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Angiopoietin-like 3 (angptl3) irna compositions and methods of use thereof |
MX2024000237A (es) * | 2021-06-21 | 2024-03-15 | Shanghai Junshi Biosciences Co Ltd | Arnip que inhibe la expresión del gen angptl3 y uso del mismo. |
AU2022420000A1 (en) | 2021-12-22 | 2024-07-11 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Treatment of kidney diseases with angiopoietin like 3 (angptl3) inhibitors |
WO2023134705A1 (zh) * | 2022-01-11 | 2023-07-20 | 上海金中锘美生物医药科技有限公司 | 抑制angptl3表达的rna干扰剂及其用途 |
WO2024032608A1 (zh) * | 2022-08-08 | 2024-02-15 | 大睿生物医药科技(上海)有限公司 | 调控ANGPTL3基因活性的siRNA分子 |
US20240158795A1 (en) | 2022-11-10 | 2024-05-16 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Treatment Of Kidney Diseases With A Combination of Angiopoietin Like 3 (ANGPTL3) Inhibitors And Solute Carrier Family 5 Member 2 (SLC5A2) Inhibitors |
Family Cites Families (53)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US2699808A (en) | 1944-10-06 | 1955-01-18 | Mark W Lowe | Apparatus for peeling tomatoes |
US2699508A (en) | 1951-12-21 | 1955-01-11 | Selectronics Inc | Method of mounting and construction of mounting for low frequency piezoelectric crystals |
US6582908B2 (en) | 1990-12-06 | 2003-06-24 | Affymetrix, Inc. | Oligonucleotides |
JPH08504559A (ja) | 1992-12-14 | 1996-05-14 | ハネウエル・インコーポレーテッド | 個別に制御される冗長巻線を有するモータシステム |
US5801154A (en) | 1993-10-18 | 1998-09-01 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Antisense oligonucleotide modulation of multidrug resistance-associated protein |
US5656408A (en) | 1996-04-29 | 1997-08-12 | Xerox Corporation | Coated carrier particles |
US6770748B2 (en) | 1997-03-07 | 2004-08-03 | Takeshi Imanishi | Bicyclonucleoside and oligonucleotide analogue |
JP3756313B2 (ja) | 1997-03-07 | 2006-03-15 | 武 今西 | 新規ビシクロヌクレオシド及びオリゴヌクレオチド類縁体 |
NZ503765A (en) | 1997-09-12 | 2002-04-26 | Exiqon As | Bi-cyclic and tri-cyclic nucleotide analogues |
US6794499B2 (en) | 1997-09-12 | 2004-09-21 | Exiqon A/S | Oligonucleotide analogues |
US20030228597A1 (en) | 1998-04-13 | 2003-12-11 | Cowsert Lex M. | Identification of genetic targets for modulation by oligonucleotides and generation of oligonucleotides for gene modulation |
JP2002524506A (ja) * | 1998-09-15 | 2002-08-06 | ビーティージー・インターナショナル・リミテッド | 治療用組成物(ii) |
PT1178999E (pt) | 1999-05-04 | 2007-06-26 | Santaris Pharma As | Análogos de l-ribo-lna |
US6525191B1 (en) | 1999-05-11 | 2003-02-25 | Kanda S. Ramasamy | Conformationally constrained L-nucleosides |
EP1210363A2 (en) * | 1999-07-16 | 2002-06-05 | Hyseq, Inc. | Novel angiopoietin materials and methods |
HUP0203408A3 (en) | 1999-12-09 | 2005-01-28 | Sankyo Co | Method of testing remedy or preventive for hyperlipemia |
EP1403367A4 (en) | 2001-06-08 | 2005-08-17 | Sankyo Co | A MEDICAMENT TEST METHOD FOR TREATING OR PREVENTING DISEASES SUCH AS HYPERLIPEMIA |
WO2003004602A2 (en) | 2001-07-03 | 2003-01-16 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Nuclease resistant chimeric oligonucleotides |
KR20100029861A (ko) | 2001-11-16 | 2010-03-17 | 제넨테크, 인크. | 안지오포이에틴-유사 단백질 3 angptl3을 함유하는 조성물 및 이를 사용하는 방법 |
WO2004044132A2 (en) | 2002-11-05 | 2004-05-27 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Modified oligonucleotides for use in rna interference |
US7696345B2 (en) | 2002-11-05 | 2010-04-13 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Polycyclic sugar surrogate-containing oligomeric compounds and compositions for use in gene modulation |
US7511131B2 (en) * | 2002-11-13 | 2009-03-31 | Genzyme Corporation | Antisense modulation of apolipoprotein B expression |
WO2006006948A2 (en) | 2002-11-14 | 2006-01-19 | Dharmacon, Inc. | METHODS AND COMPOSITIONS FOR SELECTING siRNA OF IMPROVED FUNCTIONALITY |
ATE517992T1 (de) | 2002-11-14 | 2011-08-15 | Dharmacon Inc | Funktionelle und hyperfunktionelle sirna |
WO2004072046A2 (en) | 2003-02-12 | 2004-08-26 | Carex S.A. | Quinoline derivatives and their use for modulation of lxr activity |
WO2004106356A1 (en) | 2003-05-27 | 2004-12-09 | Syddansk Universitet | Functionalized nucleotide derivatives |
JPWO2005021745A1 (ja) | 2003-08-22 | 2006-10-26 | 学校法人日本大学 | 肝細胞癌に関連する遺伝子 |
ES2382807T3 (es) | 2003-08-28 | 2012-06-13 | Takeshi Imanishi | Nuevos ácidos nucleicos artificiales del tipo de enlace N-O con reticulación |
EP1677822B1 (en) | 2003-09-18 | 2014-04-23 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | 4'-thionucleosides and oligomeric compounds |
US7468431B2 (en) * | 2004-01-22 | 2008-12-23 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Modulation of eIF4E-BP2 expression |
EP1735622A2 (en) * | 2004-04-13 | 2006-12-27 | Arena Pharmaceuticals, Inc. | Modulators of human g protein-coupled receptors for the treatment of hyperglycemia and related disorders |
JPWO2005116204A1 (ja) | 2004-05-11 | 2008-06-19 | 株式会社アルファジェン | Rna干渉を生じさせるポリヌクレオチド、および、これを用いた遺伝子発現抑制方法 |
EP2172482A1 (en) | 2004-07-20 | 2010-04-07 | Genentech, Inc. | Inhibitors of angiopoietin-like 4 protein, combinations, and their use |
US7371384B2 (en) | 2004-07-20 | 2008-05-13 | Genentech, Inc. | Compositions and methods of using angiopoietin-like 4 protein antibody |
CA2580504C (en) * | 2004-09-17 | 2013-10-29 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Enhanced antisense oligonucleotides |
US20060147894A1 (en) | 2004-12-30 | 2006-07-06 | Vicam, L.P. | Jacketed vessel for holding semen for sex biasing mammals through artificial insemination and systems and methods for enhancing the probability of sex biasing using the same |
PL1984381T3 (pl) | 2006-01-27 | 2011-03-31 | Isis Pharmaceuticals Inc | Zmodyfikowane w pozycji 6 analogi bicykliczne kwasów nukleinowych |
US9045754B2 (en) * | 2006-05-05 | 2015-06-02 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Short antisense compounds with gapmer configuration |
EP2066684B1 (en) | 2006-05-11 | 2012-07-18 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | 5'-modified bicyclic nucleic acid analogs |
US8101585B2 (en) | 2006-08-04 | 2012-01-24 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Compositions and methods for the modulation of JNK proteins |
CN101589143A (zh) * | 2006-11-27 | 2009-11-25 | Isis药物公司 | 用于治疗高胆固醇血症的方法 |
US8093222B2 (en) | 2006-11-27 | 2012-01-10 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Methods for treating hypercholesterolemia |
US7935796B2 (en) * | 2006-12-08 | 2011-05-03 | Lexicon Pharmaceuticals, Inc. | Monoclonal antibodies against ANGPTL3 |
EP2125852B1 (en) | 2007-02-15 | 2016-04-06 | Ionis Pharmaceuticals, Inc. | 5'-substituted-2'-f modified nucleosides and oligomeric compounds prepared therefrom |
EP2251423B1 (en) | 2008-03-07 | 2016-01-13 | National University Corporation University Of Toyama | Homologous recombination method, cloning method, and kit |
JP5207355B2 (ja) | 2008-03-12 | 2013-06-12 | 凸版印刷株式会社 | 標的ヌクレオチド配列を有する核酸の検出方法、プローブセット、及び核酸の識別方法 |
WO2009148605A2 (en) | 2008-06-04 | 2009-12-10 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Methods for treating hypercholesterolemia |
AT507215B1 (de) | 2009-01-14 | 2010-03-15 | Boehler Edelstahl Gmbh & Co Kg | Verschleissbeständiger werkstoff |
CN106146591B (zh) * | 2010-01-08 | 2020-07-31 | Ionis制药公司 | 血管生成素样3表达的调节 |
US9984408B1 (en) | 2012-05-30 | 2018-05-29 | Amazon Technologies, Inc. | Method, medium, and system for live video cooperative shopping |
EP2733390B1 (en) | 2012-11-15 | 2020-05-13 | Volvo Car Corporation | Dampening structure for gear shift cables |
US10120707B2 (en) | 2015-12-08 | 2018-11-06 | Paypal, Inc. | Deployment of development environments |
US9778708B1 (en) | 2016-07-18 | 2017-10-03 | Lenovo Enterprise Solutions (Singapore) Pte. Ltd. | Dual sided latching retainer for computer modules |
-
2011
- 2011-01-07 CN CN201610643333.5A patent/CN106146591B/zh not_active Expired - Fee Related
- 2011-01-07 CN CN202010636959.XA patent/CN111700901A/zh active Pending
- 2011-01-07 WO PCT/US2011/020606 patent/WO2011085271A2/en active Application Filing
- 2011-01-07 ES ES11732249.5T patent/ES2677969T3/es active Active
- 2011-01-07 AU AU2011203986A patent/AU2011203986C1/en not_active Ceased
- 2011-01-07 DK DK11732249.5T patent/DK2521556T3/en active
- 2011-01-07 US US13/520,997 patent/US8653047B2/en active Active
- 2011-01-07 EP EP18174926.8A patent/EP3421040A1/en not_active Withdrawn
- 2011-01-07 CA CA2786071A patent/CA2786071C/en active Active
- 2011-01-07 EP EP11732249.5A patent/EP2521556B1/en active Active
- 2011-01-07 JP JP2012548193A patent/JP5822845B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 2011-01-07 CN CN201180008657.7A patent/CN102753186B/zh not_active Expired - Fee Related
-
2014
- 2014-01-07 US US14/149,715 patent/US9139831B2/en active Active
-
2015
- 2015-08-07 JP JP2015156939A patent/JP6440592B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 2015-08-10 US US14/821,982 patent/US20160060626A1/en not_active Abandoned
-
2017
- 2017-05-18 JP JP2017098842A patent/JP2017165765A/ja active Pending
-
2018
- 2018-01-12 US US15/870,306 patent/US20180142244A1/en not_active Abandoned
-
2019
- 2019-12-20 US US16/722,043 patent/US11225664B2/en active Active
-
2020
- 2020-02-28 JP JP2020032712A patent/JP2020100654A/ja active Pending
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
US20200115711A1 (en) | 2020-04-16 |
US8653047B2 (en) | 2014-02-18 |
CN111700901A (zh) | 2020-09-25 |
US9139831B2 (en) | 2015-09-22 |
JP2020100654A (ja) | 2020-07-02 |
WO2011085271A3 (en) | 2011-09-09 |
US20160060626A1 (en) | 2016-03-03 |
JP2013516489A (ja) | 2013-05-13 |
JP6440592B2 (ja) | 2018-12-19 |
US20140193825A1 (en) | 2014-07-10 |
DK2521556T3 (en) | 2018-08-13 |
WO2011085271A2 (en) | 2011-07-14 |
JP2017165765A (ja) | 2017-09-21 |
EP3421040A1 (en) | 2019-01-02 |
EP2521556B1 (en) | 2018-05-30 |
AU2011203986C1 (en) | 2015-03-05 |
US11225664B2 (en) | 2022-01-18 |
EP2521556A2 (en) | 2012-11-14 |
CN106146591A (zh) | 2016-11-23 |
CA2786071C (en) | 2021-01-12 |
AU2011203986B2 (en) | 2014-11-27 |
JP2015232017A (ja) | 2015-12-24 |
US20180142244A1 (en) | 2018-05-24 |
CA2786071A1 (en) | 2011-07-14 |
AU2011203986A1 (en) | 2012-07-19 |
ES2677969T3 (es) | 2018-08-07 |
EP2521556A4 (en) | 2014-09-10 |
US20130023579A1 (en) | 2013-01-24 |
CN106146591B (zh) | 2020-07-31 |
CN102753186A (zh) | 2012-10-24 |
CN102753186B (zh) | 2016-09-14 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
US11225664B2 (en) | Modulation of angiopoietin-like 3 expression | |
RU2603076C9 (ru) | Модулирование экспрессии аполипопротеина сiii (аросiii) | |
JP6538736B2 (ja) | Gcgr発現のアンチセンス調整 | |
US20130150425A1 (en) | Antisense modulation of gccr expression | |
US20130053430A1 (en) | Modulation of cetp expression | |
US20150152411A1 (en) | Methods and compositions for modulating apolipoprotein (a) expression | |
RU2737719C2 (ru) | Модулирование экспрессии аполипопротеина с-iii (аросiii) у пациентов с липодистрофией | |
AU2019201882B2 (en) | Modulation of angiopoietin-like 3 expression |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20130514 |
|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20130514 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20140617 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20140917 |
|
A602 | Written permission of extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A602 Effective date: 20140925 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20141017 |
|
A02 | Decision of refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A02 Effective date: 20150407 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20150807 |
|
A911 | Transfer to examiner for re-examination before appeal (zenchi) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A911 Effective date: 20150821 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20150907 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20151006 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 5822845 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
S533 | Written request for registration of change of name |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R313533 |
|
R350 | Written notification of registration of transfer |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R350 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
LAPS | Cancellation because of no payment of annual fees |