JP5711887B2 - 短いタンデム反復遺伝子座の多重増幅 - Google Patents
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Description
この出願は、1996年4月15日に出願され現在米国特許第5843660号である、米国特許出願第08/632575号の部分継続出願であり、この出願は、1998年12月1日に発行され、1994年9月30日に出願された米国特許出願第08/316544号の部分継続である。これらの出願の全開示は、ここで参考として組み込む。
(連邦政府主催の研究開発に関する申告)
適用はない。
(a)分析すべき少なくとも1つのDNAサンプルを得る工程
(b)DNAサンプルの一組の対立遺伝子を選択する工程であって、共増幅できる、少なくとも13個のタンデム反復遺伝子座を含む工程
(c)多重増幅反応で組の中の遺伝子座を共増幅する工程であって、反応生成物が、組の中の共増幅された各遺伝子座から増幅された対立遺伝子の混合物である工程
(d)混合物中の増幅された対立遺伝子を評価して、DNAサンプル中の、組の中の分析された各遺伝子座に存在する対立遺伝子を決定する工程。
少なくとも13個の短いタンデム反復遺伝子座の少なくとも4個が、以下の遺伝子座及びこれらの任意の組合せに係る遺伝子座であることが好ましい。
D3S1539、D4S2368、D5S818、D7S820、D9S930、D10S1239、D13S317、D14S118、D14S548、D14S562、D16S490、D16S539、D16S753、D17S1298、D17S1299、D19S253、D20S481、D22S683、HUMCSF1PO、HUMTPOX、HUMTH01、HUMF13A01、HUMBFXIII、HUMLIPOL及びHUMvWFA31
本発明の別の態様において、方法の工程(b)で選択された遺伝子座の組は、13個のCODIS STR 遺伝子座(即ち、D3S1358、D5S818、D7S820、D8S1179、D13S317、D16S539、D18S51、D21S11、HUMCSF1PO、HUMFIBRA、HUMTH01、HUMTPOX、及びHUMvWFA31)を含み、本発明の方法を使用して、遺伝子座自体又は追加の遺伝子座と共に、共増幅され、分析される。
以下の定義は、以下の用語の範囲及び詳細の、明確な矛盾の無い理解を提供することにおいて補助するものであり、本発明を記述し、定義するのに使用される。
「対立遺伝子ラダー(allelic ladder)」;遺伝子座から増幅された対立遺伝子を含むスタンダードサイズマーカー。
「対立遺伝子(allele)」;DNAセグメントに関連する遺伝的変異であり、即ち、同じ遺伝子座を占有するDNA配列の2つ以上の別形態の1つ。
「生化学的命名法(biochemical nomenclature)」;標準生化学的命名法は、ここで使用され、ヌクレオチドの塩基は、アデニン(A)、チミン(T)、グアニン(G)及びシトシン(C)と呼ばれる。対応するヌクレオチドは、例えば、デオキシグアノシン−5’−トリフォスフェート(dGTP)である。
「座(locus)」又は「遺伝子座(genetic locus)」;染色体上の特異的な場所。遺伝子座の対立遺伝子は、相同染色体上の同じ位置に位置する。
「遺伝子座特異的プライマー(locus−specific primer)」;少なくとも遺伝子座の1つの対立遺伝子に対して、示された遺伝子座又はその相補鎖の一部で特異的にハイブリダイズするプライマーで、かつ、増幅法を用いた状態の下で、他のDNA配列で有効にハイブリダイズしない。
「ペンタヌクレオチドタンデム反復(pentanucleotide tandem repeat)」;下記に定義されたSTR多型のサブクラス。別に詳述されていなければ、「ペンタヌクレオチドタンデム反復」の用語は、反復単位が5塩基配列である完全STR、及び少なくとも1つの反復単位が、5塩基反復である不完全STRを含む。
「多型情報量(polymorphism information content)」又は「PIC」;遺伝子座に存在する多型の量の測定(Bosteinら、1980)。PICは、多型のより大きな程度を示すより高い値で、0〜1.0の範囲を評価する。この測定は、一般に、測定に通常使用される他のものよりも小さい値を表示し、即ち、
異型接合性;高い有益な(約70%を超える異型接合性)マーカーに対して、異型接合性とPICとの違いは僅かである。
「プライマー対(primer pair)」;2つのプライマーを含み、プライマー1は、増幅すべきDNA配列の一方の端の1本鎖にハイブリダイズし、プライマー2は、増幅すべきDNA配列の相補鎖上のもう一方の端でハイブリダイズする。
「プライマー部位(primer site)」;プライマーがハイブリダイズする目的DNAの領域。
ここで、A、G、T及びCは、どんな順でも存在するヌクレオチドを示し、w、x、y及びzは、配列の各ヌクレオチドの数を示し、0〜7の範囲で変化し、w+x+y+zの合計は3〜7の範囲であり、nは、タンデムで繰り返される配列回数の数を示し、少なくとも2である。
本発明の方法は、複数の共増幅される遺伝子座から増幅された対立遺伝子を生ずるのに適切な、遺伝子座の組、プライマー及び増幅プロトコルを選択し、好ましくは共増幅される遺伝子座は、サイズで重複せず、より好ましくは、共増幅される遺伝子座は、サイズが重複する異なる遺伝子座の対立遺伝子間を識別することを可能にする方法で、ラベルされる。加えて、この方法は、単一の増幅プロトコルでの使用に融和性のある、短いタンデム反復遺伝子座を選択することを企図する。ここで説明される遺伝子座の特定の組合せは、この用途において唯一のものである。遺伝子座の組合せは、前述の2つの理由のどちらかによって、又はこれと組合せて、1以上の遺伝子座が、十分な生成物収量を生成せず又は真の対立遺伝子を表現しないフラグメントがこの反応で生成しない理由によって、却下されるかもしれない。
いずれの異なる技術も、本発明に使用する一組の遺伝子座を選択するのに使用することができる。この分析方法で使用する遺伝子座の有用な組を開発するための好ましい技術の1つが以下に記述される。3つのSTR遺伝子座を含む多重体が一旦開発されれば、3つより多い遺伝子座を含む多重体を作る核として使用できる。従って、3つより多い遺伝子座の新しい組合せは、始めの3つの遺伝子座を含んで作られる。例えば、遺伝子座D7S820、D13S317及びD5S818を含む核となる多重体を使って、以下の誘導多重体を生成した。
HUMCSF1PO、HUMTPOX、D16S539、D7S820、D13S317及びD5S818
HUMCSF1PO、HUMTPOX、HUMTH01、D16S539、D7S820、D13S317及びD5S818
HUMCSF1PO、HUMTPOX、HUMTH01、HUMvWFA31、D16S539、D7S820、D13S317及びD5S818
D3S1358、D5S818、D7S820、D8S1179、D13S317、D16S539、D18S51、D21S11、HUMCSF1PO、HUMFIBRA、HUMTH01、HUMTPOX及びHUMvWFA31
D3S1358、D5S818、D7S820、D8S1179、D13S317、D16S539、D18S51、D21S11、HUMCSF1PO、HUMFIBRA、HUMTH01、HUMTPOX及びHUMvWFA31
D3S1358、D5S818、D7S820、D8S1179、D13S317、D16S539、D18S51、D21S11、HUMCSF1PO、HUMFIBRA、HUMTH01、HUMTPOX、HUMvWFA31、G475、S159及びアメロゲニン
本発明の方法を使用して分析される遺伝子座を選択するために使用されるどんな方法にもかかわらず、多重体分析のために選択された遺伝子座のすべては、以下の特徴を共有する。(1)遺伝子座は、評価できるだけの十分な増幅生成物を調製する。(2)遺伝子座は、多重増幅工程中の増幅された対立遺伝子座への塩基の付加(又は塩基の付加なし)による人工産物でさえ、ほとんど生成しない。(3)遺伝子座は、ポリメラーゼによる増幅反応の未熟終結による人工産物でさえ、ほとんど生成しない。(4)遺伝子座は、供給された真の増幅された対立遺伝子の下流の継続的な1塩基欠失から、より小さい分子量の「引きずった(trailing)」バンドをほとんど又はまったく生成しない。例えば、Schummら、Fourth International Symposium on Human Identification 1993、pp.177−187(pub.by Promega Corp.,1994)を参照されたい。
D3S1539、D4S2368、D5S818、D7S820、D9S930、D10S1239、D13S317、D14S118、D14S548、D14S562、D16S490、D16S539、D16S753、D17S1298、D17S1299、D19S253、D20S481、D22S683、HUMCSF1PO、HUMTPOX、HUMTH01、HUMF13A01、HUMBFXIII、HUMLIPOL及びHUMvWFA31
更により好ましくは、本発明に従って分析された遺伝子座の組は、13個のCODIS遺伝子座のすべて、即ち、D3S1358、D5S818、D7S820、D8S1179、D13S317、D16S539、D18S51、D21S11、HUMCSF1PO、HUMFIBRA、HUMTH01、HUMTPOX、及びHUMvWFA31を含む。
S159クローンの配列は、配列ID番号26として上記米国明細書で記述され、配列番号110として本明細書で特定される。また、G475、C221及びS159の増幅に使用する特定された個々のプライマーとプライマー対は、本発明に従って共増幅され分析される少なくとも13個の遺伝子座の組の中の同じ遺伝子座を増幅するのに使用される。
単一の多重反応での共増幅のための一組の遺伝子座が一旦特定されると、その組で共増幅する各遺伝子座に適合できるプライマーを決定することができる。多重反応で使用されるプライマーの配列の選択に注意すべきである。プライマーの不適切な選択は、増幅の不足、複数の部位での増幅、プライマーのダイマー形成、異なる遺伝子座のプライマー配列の望ましくない相互作用、別の遺伝子座の対立遺伝子と重複するある遺伝子座の対立遺伝子の生成、又は多重体に不適合な異なる遺伝子座に対する増幅の条件又はプロトコルの必要性といった、いくつかの望ましくない効果を生む。好ましくは、本発明の方法で使用されるプライマー又は本発明のキットに含まれるプライマーは、以下の選択プロセスに従って選択される。
ゲノムDNAサンプルは、本発明の方法に使用するために調製され、DNAの増幅に適合性のあるDNA調製方法を使用する。このような多くの方法は、当業者に公知である。この例として、フェノール抽出によるDNA精製(Sambrook,J.,ら(1998)Molecular Cloning: A Laboratory Manual,Second Edition,Cold Spring Harbor Laboratory Press,Cold Spring Harbor,New York.,pp.9.14−9.19)、及び塩析による部分的精製(Miller,S.ら(1998)Nucl.Acids Res.16:1215)又はチレックス(chelex)(Walshら、(1991) Bio Techniques 10:506−513,Comey,ら(1994)Forensic Sci.39:1254)及び未処理血液を使用する未精製材料の遊離(Burckhardt,J(1994) PCR Methods and Applications 3:239−243,McCabe,Edward R.B.,(1991) PCR Methods and Applications 1:99−106,Mordvag,Byorn−Yngvar(1992) Bio Techniques 12:4 pp.490−492)によるDNA精製が挙げられるが、これらに限定されない。
増幅反応における非常に多量の鋳型DNAの使用は、真の対立遺伝子を表さない過剰なバンドとして示される人工産物を生成する。
ゲノムDNAのサンプが一旦調製されると、目的にされた遺伝子座は、本発明の多重増幅工程で共増幅される。多くの異なる増幅方法の一つは、遺伝子座を増幅するのに使用され、ポリメラーゼ連鎖反応(PCR)(Saiki,R.K.,ら(1985),Science 230:1350−1354)、増幅の基礎を形成する転写(Kwoh,D.Y.及びKwoh,T.J.(1990),American Biotechnology Laboratory,October,1990)及び鎖置換増幅(strand displacement amplification)(SDA)(Walker,G.T.,ら(1992)Proc.Natl.Acad.Sci.,U.S.A.89:392−396)を含むが、これらに限定されない。好ましくは、DNAサンプルは、組の各遺伝子座に特異的なプライマー対を使用してPCR増幅にかけられる。参考に、以下の実施例で使用されるプライマー配列の詳細において、本明細書の最後に配列一覧表にし、プライマー配列のいくつかは、本発明の別の態様である。
一組の増幅された対立遺伝子が本発明の多重増幅工程から一旦調製されると、増幅された対立遺伝子が評価される。この方法の評価工程は、多くの異なる方法によって行われるが、最も好ましい方法は、以下に記述される。
本発明の方法の最も好ましい態様の一つ、蛍光検出は、多重増幅反応によって生成された混合物の中の増幅対立遺伝子を評価するのに使用される。以下は、好ましい検出方法が実施される方法の概要である。
また、本発明は、上述のプロセスを利用するキットに関する。基本的なキットは、1以上の遺伝子座特異的プライマーを有する容器を含む。任意で使用説明書を含んでもよい。
この実施例において、DNA鋳型を、単一の反応容器で、個々の遺伝子座D3S1358、HUMTH01、D21S11、D18S51、HUMvWFA31、D8S1179、HUMTPOX、HUMFIBRA、D5S818、D7S820、D13S317、D16S539、及びHUMCSF1POで同時に増幅した。PCR増幅を、25μlの1×Gold ST*R緩衝液(50mM KCl、10mM Tris−HCl(25℃でpH8.3)、0.1%Triton X−100、1.5mM MgCl2、160μg/ml BSA 及び各200μMのdATP、dCTP、dGTP及びdTTP)中で実施し、1ngの鋳型及び3.25UのAmpliTaq Gold(登録商標)DNAポリメラーゼを使用した。GeneAmp(登録商標)PCR System 9600(Perkin Elmer、Foster City,CA)を、以下の増幅プロトコルで使用した。96℃で12分、次に、94℃で30秒、68秒で58℃にし、30秒保持、50秒で70℃にし、45秒保持を10サイクル、続いて、30秒で90℃、60秒で58℃にし、30秒保持、50秒で70℃にし、45秒保持を20サイクル、続いて、60℃で30分を1サイクル行なった。
この実施例において、DNA鋳型を、単一反応容器で、個々の遺伝子座D3S1358、HUMTH01、D21S11、D18S51、G475、アメロゲニン、HUMvWFA31、D8S1179、HUMTPOX、HUMFIBRA、D5S818、D7S820、D13S317、D16S539、HUMCSF1PO及びS159で同時に増幅した。PCR増幅を、25μlの1×Gold ST*R緩衝液(50mM KCl、10mM Tris−HCl(25℃でPH8.3)、0.1%Triton X−100、1.5mM MgCl2、160μg/ml BSA及び200μMの各dATP、dCTP、dGTP及びdTTP)で行ない、1ngの鋳型、及び4UのAmpliTaq Gold DNAポリメラーゼを使用した。GeneAmp PCR System 9600(Perkin Elmer,Foster City,CA)を、以下の増幅プロトコルで使用した。96℃で12分、次に、94℃で30秒、68秒で58℃にし、30秒保持、50秒で70℃にし、45秒保持を10サイクル、続いて、90℃で30秒、60秒で58℃にし、30秒保持、50秒で70℃にし、45秒保持を20サイクル、続いて、60℃で30分を1サイクル行なった。
この実施例において、DNA鋳型を、実施例2と同様に増幅した。増幅生成物を、ABI PRISM(登録商標)377 DNA Sequencerを使用して分離した。これを、0.2mm厚さの、5%Long Ranger(商標出願中)Acrylamide(FMC BioProducts、Rockland、ME)、7Mのウレアゲルを使用して実施した。DNAサンプルを、1.5μlの添加液(88.25%ホルムアミド、4.1mM EDTA、15mg/mlブルーデキストラン)及び0.5μlのインターナルレーンサイズスタンダードと混合し、95℃で2分間変性させ、装入する前に氷で冷却した。電気泳動を、Prerun(PR GS 36A−2400)及びRun(GS 36A−2400)用の、製造業者のGeneScan(登録商標)モジュールを使用して行なった。泳動時間は3時間で、仮フィルターAを用いた。
この実施例において、2つのDNA鋳型を、遺伝子座D3S1358、HUMTH01、D21S11、D18S51、G475、アメロゲニン、HUMvWFA31、D8S1179、HUMTPOX、HUMFIBRA、D5S818、D7S820、D13S317、D16S539、HUMCSF1PO及びS159又はこれらの任意の組合せに係る遺伝子座から選択された3つの異なる遺伝子座の各々で同時に各々増幅した。各遺伝子座の組合せの増幅において、単一の反応容器に5ngの鋳型を含め、反応容器に、25μlの1×Gold ST*R緩衝液(50mM KCl、10mM Tris−HCl(25℃でPH8.3)、0.1%Triton X−100、1.5mM MgCl2、160μg/ml BSA及び200μMの各dATP、dCTP、dGTP及びdTTP)を含めた。
この実施例において、2つのDNA鋳型を、遺伝子座D3S1358、HUMTH01、D21S11、D18S51、G475、アメロゲニン、HUMvWFA31、D8S1179、HUMTPOX、HUMFIBRA、D5S818、D7S820、D13S317、D16S539、HUMCSF1PO及びS159又はこれらの任意の組合せの遺伝子座から選択された2つの異なる遺伝子座の各組合せで各々同時に増幅した。各遺伝子座の組合せの増幅には、単一の反応容器に5ngの鋳型を含み、反応容器に、25μlの1×Gold ST*R緩衝液(50mM KCl、10mMTris−HCl(25℃でpH8.3)、0.1%のTritonX−100、1.5mM MgCl2、160μg/ml BSA及び200μMの各dATP、dCTP、dGTP及びdTTP)を含めた。
この実施例において、2つのDNA鋳型を、遺伝子座D3S1358、HUMTH01、D21S11、D18S51、S159、アメロゲニン、HUMvWFA31、D8S1179、HUMTPOX、HUMFIBRA、D5S818、D7S820、D13S317、D16S539、HUMCSF1PO及びC221又はこれらの任意の組合せの遺伝子座から選択された3つの異なる遺伝子座の各組合せで各々同時に増幅した。各遺伝子座の組合せの増幅には、単一の反応容器に10ngの鋳型を含め、反応容器に、25μlの1×Gold ST*R緩衝液(50mM KCl、10mMTris−HCl(25℃でpH8.3)、0.1%のTritonX−100、1.5mM MgCl2、160μg/ml BSA及び200μMの各dATP、dCTP、dGTP及びdTTP)を含めた。
〔配列表〕
Claims (7)
- 1以上のヒトゲノムDNAサンプルから、遺伝子座の一組に存在する対立遺伝子を同時に特定する方法であって、
(a)多重増幅反応で分析すべきヒトゲノムDNAサンプルの少なくとも16個の遺伝子座の一組において遺伝子座を共増幅する工程であって、該遺伝子座の組が、D3S1358、HUMTH01、D21S11、D18S51、G475、アメロゲニン、HUMvWFA31、D8S1179、HUMTPOX、HUMFIBRA、D5S818、D7S820、D13S317、D16S539、HUMCSF1PO及びS159を含み、反応生成物は、前記組の各共増幅された遺伝子座から増幅された対立遺伝子の混合物である工程と、
(b)前記混合物中の前記増幅された対立遺伝子を評価する工程であって、ヒトゲノムDNAサンプルの、前記少なくとも16個の遺伝子座の各々における対立遺伝子の存在を決定する工程と、
を含むことを特徴とする方法。 - 前記多重増幅反応が、工程(a)で選択された16個のプライマーの組における各遺伝子座をフランキングするプライマーの少なくとも1対を使用して行なわれる、請求項1記載の方法。
- 1以上のヒトゲノムDNAサンプルから、一組の遺伝子座に存在する対立遺伝子を同時に特定する方法であって、
(a)多重増幅反応で、分析すべきヒトゲノムDNAサンプルの少なくとも16個の遺伝子座の一組における遺伝子座を共増幅する工程であって、該遺伝子座の組は、D3S1358、HUMTH01、D21S11、D18S51、S159、アメロゲニン、HUMvWFA31、D8S1179、HUMTPOX、HUMFIBRA、D5S818、D7S820、D13S317、D16S539、HUMCSF1PO及びC221を含み、反応生成物は、前記組の各共増幅された遺伝子座から共増幅された対立遺伝子の混合物である工程と、
(b)該混合物中の増幅対立遺伝子を評価して、前記ヒトゲノムDNAサンプルの少なくとも16個の遺伝子座の各々に存在する対立遺伝子を決定する工程と、
を含むことを特徴とする方法。 - 前記多重増幅反応は、工程(a)で選択された16個のプライマーの組の各遺伝子座をフランキングする少なくとも1対のプライマーを使用して行なう、請求項3記載の方法。
- ゲノムDNAの一組の遺伝子座を同時に分析するキットであって、分析すべきゲノムDNAの一組の遺伝子座を共増幅するためのオリゴヌクレオチドプライマーを含み、前記遺伝子座の組が、共増幅することができる少なくとも13個の短いタンデム反復遺伝子座を含み、該プライマーは、1以上の容器にあり、前記ゲノムDNAが、ヒトゲノムDNAであり、共増幅できる少なくとも13個の短いタンデム反復遺伝子座が、D3S1358、D5S818、D7S820、D8S1179、D13S317、D16S539、D18S51、D21S11、HUMCSF1PO、HUMFIBRA、HUMTH01、HUMTPOX及びHUMvWFA31を含むことを特徴とするキット。
- ゲノムDNAの遺伝子座の一組を同時に分析するためのキットであって、各遺伝子座をフランキングするオリゴヌクレオチドプライマーを含み、前記プライマーが、1以上の容器にあり、かつ少なくとも16個の遺伝子座の一組を共増幅し、前記少なくとも16個の遺伝子座の組が、D3S1358、HUMTH01、D21S11、D18S51、G475、アメロゲニン、HUMvWFA31、D8S1179、HUMTPOX、HUMFIBRA、D5S818、D7S820、D13S317、D16S539、HUMCSF1PO及びS159を含むことを特徴とするキット。
- ゲノムDNAの遺伝子座の一組を同時に分析するためのキットであって、各遺伝子座をフランキングするオリゴヌクレオチドプライマーを含み、前記プライマーが、1以上の容器にあり、かつ少なくとも16個の遺伝子座の一組を共増幅し、前記少なくとも16個の遺伝子座の組が、D3S1358、HUMTH01、D21S11、D18S51、S159、アメロゲニン、HUMvWFA31、D8S1179、HUMTPOX、HUMFIBRA、D5S818、D7S820、D13S317、D16S539、HUMCSF1PO及びC221を含むことを特徴とするキット。
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US6531282B1 (en) * | 2000-05-30 | 2003-03-11 | Oligotrail, Llc | Multiplex amplification and analysis of selected STR loci |
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US20030235837A1 (en) * | 2001-12-11 | 2003-12-25 | Paul Keim | High resolution typing system for pathogenic E. coli |
FR2836484B1 (fr) * | 2002-02-25 | 2005-02-04 | Assist Publ Hopitaux De Paris | Procede de detection in vitro des cancers par la mise en evidence de desequilibres alleliques de marqueurs d'insertion-deletion |
US7445893B2 (en) * | 2002-04-12 | 2008-11-04 | Primera Biosystems, Inc. | Sampling method for amplification reaction analysis |
US7081339B2 (en) * | 2002-04-12 | 2006-07-25 | Primera Biosystems, Inc. | Methods for variation detection |
EP1546177A2 (en) * | 2002-07-19 | 2005-06-29 | Arizona Board of Regents, acting on behalf of Arizona State University | Dna fingerprinting for cannabis sativa (marijuana) using short tandem repeat (str) markers |
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US20040219533A1 (en) * | 2003-04-29 | 2004-11-04 | Jim Davis | Biological bar code |
US20050026181A1 (en) * | 2003-04-29 | 2005-02-03 | Genvault Corporation | Bio bar-code |
US20050112591A1 (en) * | 2003-11-25 | 2005-05-26 | Applera Corporation | Novel method for isolating single stranded product |
WO2005102309A2 (en) * | 2004-04-26 | 2005-11-03 | Ltb4 Sweden Ab | In vivo release of endogenous anti-microbial mediators by leukotriene b4 (ltb4) administration |
US20060008823A1 (en) * | 2004-05-12 | 2006-01-12 | Kemp Jennifer T | DNA profiling and SNP detection utilizing microarrays |
CN1327005C (zh) * | 2004-12-03 | 2007-07-18 | 公安部第二研究所 | 荧光标记短串联重复序列基因座的复合扩增检验系统 |
EP1863908B1 (de) | 2005-04-01 | 2010-11-17 | Qiagen GmbH | Reverse transkription und amplifikation von rna bei simultaner degradierung von dna |
US10083273B2 (en) | 2005-07-29 | 2018-09-25 | Natera, Inc. | System and method for cleaning noisy genetic data and determining chromosome copy number |
US10081839B2 (en) | 2005-07-29 | 2018-09-25 | Natera, Inc | System and method for cleaning noisy genetic data and determining chromosome copy number |
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US20070178501A1 (en) * | 2005-12-06 | 2007-08-02 | Matthew Rabinowitz | System and method for integrating and validating genotypic, phenotypic and medical information into a database according to a standardized ontology |
US20070027636A1 (en) * | 2005-07-29 | 2007-02-01 | Matthew Rabinowitz | System and method for using genetic, phentoypic and clinical data to make predictions for clinical or lifestyle decisions |
US11111544B2 (en) | 2005-07-29 | 2021-09-07 | Natera, Inc. | System and method for cleaning noisy genetic data and determining chromosome copy number |
US9424392B2 (en) | 2005-11-26 | 2016-08-23 | Natera, Inc. | System and method for cleaning noisy genetic data from target individuals using genetic data from genetically related individuals |
EP1762627A1 (de) | 2005-09-09 | 2007-03-14 | Qiagen GmbH | Verfahren zur Aktivierung einer Nukleinsäure für eine Polymerase-Reaktion |
US20080057499A1 (en) * | 2006-02-06 | 2008-03-06 | Affymetrix, Inc. | Methods for high specificity whole genome amplification and hybridization |
US8153372B2 (en) * | 2006-12-19 | 2012-04-10 | The Board Of Regents For Oklahoma State University | Method for simultaneously determining in a single multiplex reaction gender of donors and quantities of genomic DNA and ratios thereof, presence and extent of DNA degradation, and PCR inhibition within a human DNA sample |
CA2984820C (en) | 2007-04-04 | 2021-12-07 | Ande Corporation | Plastic microfluidic separation and detection platforms |
US20090004662A1 (en) | 2007-06-18 | 2009-01-01 | Applera Corporation | Method and compositions for nucleic acid amplification |
SI2294225T1 (sl) | 2008-06-30 | 2015-04-30 | Life Technologies Corporation | Postopek za neposredno amplifikacijo iz vzorcev surove nukleinske kisline |
CA3116156C (en) | 2008-08-04 | 2023-08-08 | Natera, Inc. | Methods for allele calling and ploidy calling |
WO2010045252A1 (en) * | 2008-10-14 | 2010-04-22 | Casework Genetics | System and method for inferring str allelic genotype from snps |
JP2012530243A (ja) * | 2009-06-15 | 2012-11-29 | ビージー リサーチ エルティーディー | 核酸検出方法 |
JP2012529908A (ja) | 2009-06-15 | 2012-11-29 | ネットバイオ・インコーポレーテッド | 法医学的dnaの定量化のための改善された方法 |
EP2290004B1 (de) | 2009-07-31 | 2016-08-31 | Ems-Patent Ag | Polyamid-Blend-Formmasse |
CN101691607B (zh) * | 2009-08-14 | 2013-07-17 | 河北医科大学 | 荧光标记mini-STR进行人类基因分型的测试方法及试剂盒 |
WO2011041485A1 (en) | 2009-09-30 | 2011-04-07 | Gene Security Network, Inc. | Methods for non-invasive prenatal ploidy calling |
US11332793B2 (en) | 2010-05-18 | 2022-05-17 | Natera, Inc. | Methods for simultaneous amplification of target loci |
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US11408031B2 (en) | 2010-05-18 | 2022-08-09 | Natera, Inc. | Methods for non-invasive prenatal paternity testing |
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ES2378204B1 (es) * | 2010-08-19 | 2013-03-13 | Universidad Del Pais Vasco | Método para la obtención del perfil genético de un individuo. |
WO2012022821A1 (es) * | 2010-08-19 | 2012-02-23 | Universidad Del País Vasco | Método para la obtención del perfil genético de un individuo |
ES2378203B1 (es) * | 2010-08-19 | 2013-03-04 | Universidad Del Pais Vasco | Método para la obtención del perfil genético de un individuo. |
RU2620959C2 (ru) | 2010-12-22 | 2017-05-30 | Натера, Инк. | Способы неинвазивного пренатального установления отцовства |
WO2012108920A1 (en) | 2011-02-09 | 2012-08-16 | Natera, Inc | Methods for non-invasive prenatal ploidy calling |
CA3106132C (en) * | 2011-05-12 | 2023-08-29 | Ande Corporation | Methods and compositions for rapid multiplex amplification of str loci |
ES2416836B1 (es) * | 2011-12-29 | 2014-04-07 | Universidad Del País Vasco | Método para la obtención del perfil genético de un individuo |
CN102605052B (zh) * | 2012-02-14 | 2014-01-29 | 北京科聆金仪生物技术有限公司 | 一种聋病易感基因GJB2 235delC荧光检测试剂盒及其应用 |
CN102586433B (zh) * | 2012-02-14 | 2014-01-29 | 北京科聆金仪生物技术有限公司 | 一种聋病易感基因12S rRNA 1494C>T荧光检测试剂盒及其应用 |
CN104685064A (zh) * | 2012-07-24 | 2015-06-03 | 纳特拉公司 | 高度复合pcr方法和组合物 |
WO2015048535A1 (en) | 2013-09-27 | 2015-04-02 | Natera, Inc. | Prenatal diagnostic resting standards |
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US10822647B2 (en) | 2016-07-12 | 2020-11-03 | Biodynamics S.R.L. | Methods for using long ssDNA polynucleotides as primers (superprimers) in PCR assays |
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US10894976B2 (en) | 2017-02-21 | 2021-01-19 | Natera, Inc. | Compositions, methods, and kits for isolating nucleic acids |
CN107012225B (zh) * | 2017-04-20 | 2020-10-09 | 司法鉴定科学研究院 | 一种基于高通量测序的str基因座的检测试剂盒及检测方法 |
JP2021520816A (ja) | 2018-04-14 | 2021-08-26 | ナテラ, インコーポレイテッド | 循環腫瘍dnaの個別化された検出を用いる癌検出およびモニタリングの方法 |
US11525159B2 (en) | 2018-07-03 | 2022-12-13 | Natera, Inc. | Methods for detection of donor-derived cell-free DNA |
CN110229871B (zh) * | 2019-04-26 | 2023-06-23 | 上海晶准生物医药有限公司 | 一种通用的短串联重复序列等位基因阶梯的制备方法 |
EP3739064A1 (en) * | 2019-05-15 | 2020-11-18 | Biotype GmbH | Comparative analysis of microsatellites by capillary electrophoresis (ce) dna profiles |
Family Cites Families (16)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US4683195A (en) | 1986-01-30 | 1987-07-28 | Cetus Corporation | Process for amplifying, detecting, and/or-cloning nucleic acid sequences |
US4683202A (en) | 1985-03-28 | 1987-07-28 | Cetus Corporation | Process for amplifying nucleic acid sequences |
GB8606719D0 (en) | 1986-03-19 | 1986-04-23 | Lister Preventive Med | Genetic probes |
DE68929070T2 (de) | 1988-02-18 | 2000-05-25 | Univ Utah | Verwendung von dna-proben mit variabler anzahl von tandem-repetitiven stellen zur genetischen identifizierung |
US4963663A (en) | 1988-12-23 | 1990-10-16 | University Of Utah | Genetic identification employing DNA probes of variable number tandem repeat loci |
US5766847A (en) | 1988-10-11 | 1998-06-16 | Max-Planck-Gesellschaft Zur Forderung Der Wissenschaften E.V. | Process for analyzing length polymorphisms in DNA regions |
US5582979A (en) | 1989-04-21 | 1996-12-10 | Marshfield Clinic | Length polymorphisms in (dC-dA)n.(dG-dT)n sequences and method of using the same |
US5192659A (en) | 1989-08-25 | 1993-03-09 | Genetype Ag | Intron sequence analysis method for detection of adjacent and remote locus alleles as haplotypes |
US5364759B2 (en) * | 1991-01-31 | 1999-07-20 | Baylor College Medicine | Dna typing with short tandem repeat polymorphisms and identification of polymorphic short tandem repeats |
WO1993018177A1 (en) | 1992-03-13 | 1993-09-16 | The Children's Hospital Of Philadelphia | Diagnosis of cystic fibrosis using allele specific multiplex polymerase chain reactions |
WO1993018178A1 (en) | 1992-03-13 | 1993-09-16 | The Children's Hospital Of Philadelphia | DIAGNOSIS OF β-THALASSEMIA USING A MULTIPLEX AMPLIFICATION REFRACTORY MUTATION SYSTEM |
US5422252A (en) | 1993-06-04 | 1995-06-06 | Becton, Dickinson And Company | Simultaneous amplification of multiple targets |
US5599666A (en) | 1994-03-28 | 1997-02-04 | Promega Corporation | Allelic ladders for short tandem repeat loci |
US5843660A (en) | 1994-09-30 | 1998-12-01 | Promega Corporation | Multiplex amplification of short tandem repeat loci |
GB9625124D0 (en) | 1996-12-03 | 1997-01-22 | Sec Dep Of The Home Department | Improvements in and relating to identification |
US6013444A (en) * | 1997-09-18 | 2000-01-11 | Oligotrail, Llc | DNA bracketing locus compatible standards for electrophoresis |
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