JP5669132B2 - アデニウム・オベスムの抽出物を含む化粧品組成物、その使用、及びその使用を含む美容ケアの方法 - Google Patents
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Description
皮膚の最浅層をなす角層及び表皮は、それらに働く力及び機械的ストレスに対する抵抗性を示さなければならず、水の蒸発に対する抵抗性も示さなければならない。
− 細胞同士の機械的付着を可能にし、且つ密封系の機械的固体性を補強する接着又は固定結合、別名「デスモソーム」;
− 表皮によって構成された重層上皮の透過性を制限することができ、且つ2つの細胞コンパートメント間の水封をもたらす密着結合、別名「閉鎖結合」。
〔従来技術〕
〔発明の目的〕
〔発明の説明〕
実施例1−アデニウム・オベスムの葉からの抽出物の調製
当業者によく知られている通常の植物細胞培地を用いて、アデニウム・オベスムの葉からの細胞をバイオテクノロジーで培養して、何週間か後に、カルス(Calli)と呼ばれる未分化細胞凝集塊を得る。
当業者が通常使用するこのような植物細胞培地の例は、以下の論文に記載されている。
E.F.Georges、D.J.Puttock及びJ.G.Heather、(1987年)Plant Culture Media、(1巻、Formulations and uses)、Exegetics Ltd.。
Dodds J.H.、Roberts L.W.(1982年)。Experiments in Plant Tissue Culture、Cambridge Univ.Press、Cambridge、178頁。
Evans D.A.、Sharp W.R.、Ammirato P.V.、Yamada Y.(1984年)。Handbook of Plant Cell Culture.Techniques for Propagation and Breeding.Macmillan Publ.Co.、New York、970頁、1〜6巻。
Reinert J.、Yeoman M.M.(1982年)。Plant Cell and Tissue Culture、A Laboratory Manual、Springer−Verlag、Berlin、Heidelberg、New York、83頁。
Sala F.、Parisi B.、Cella R.、Cifferi O.(1980年)。Plant cell cultures.Elsevier/North Holland、Amsterdam。
Sharp W.R.、Larsen P.O.、Paddock E.F.、Raghavan V.(1979年)。Plant Cell and tissue culture、Principles and applications、Ohio State University Press、Columbus。
Vasil I.(1985〜1991年)。Cell Culture and Somatic Cell Genetics of Plants、1〜8巻。
Bhojwani S.、Razdan I.Z.K.(1983年)。Plant tissue culture:theory and practice、Elsevier、Amsterdam。
Debergh P.、Zimmermann(1991年)。Micropropagation、Technology and application、Kluwer、London。
Zyrd J.P.(1988年)。Cultures de cellules、tissus et organes vegetaux[Plant organ,tissue and cell cultures]。Presses Polytechniques Romandes、Lausanne。
これらのカルスは、水、砂糖、鉱物塩、及びビタミンを含む培養液に連続継代培養することによって得られる。
細胞を何回か慎重に洗浄し、凍結乾燥し、次いで細かく粉砕し、スクリーニングする。凍結乾燥物は、タンパク質、脂質、グルコース、フルクトース、及びスクロース、ビタミン類(PP、B1、B5、B6、B8、B9)、及び構成要素、より特定すれば膜要素に富む。
凍結乾燥物を滅菌水に10%で再溶解する。
この凍結乾燥した抽出物を、化粧剤又は化粧品組成物の活性成分であるように、特に実施例4の試験を実施するために使用してもよい。
地上部の抽出物を、攪拌しながら、蒸留水及び/又は10%エタノールで冷却する。植物/溶媒の比は、1〜10(重量による)。次いで、抽出物を0.45μmのフィルターで濾過し、使用する前に真空下で濃縮又は凍結乾燥する。
この凍結乾燥した抽出物又は真空下の抽出物を、化粧剤又は化粧品組成物の活性成分であるように使用してもよい。
アデニウム・オベスムの挺幹を回収し、粉砕し、5時間攪拌しながら1:20の重量比で蒸留水を用いて解離によって冷温抽出し、次いで濾過し、凍結乾燥する。
この凍結乾燥した抽出物又は真空下の抽出物を、化粧剤又は化粧品組成物の活性成分であるように使用してもよい。
一変形は、臨時の媒体、例えばグリコール中に前記抽出物を再分散したものである。
正常なヒト角化細胞を、0.25ng/mlのEGF(上皮成長因子;Invitrogen)及び25μg/mlの下垂体抽出物(Invitrogen)を含むSFM培地(無血清培地;Invitrogen)中で、湿度飽和雰囲気、37℃、及び5%のCO2下に3回繰り返して培養する。
培養物はコンフルエントの状態まで達し、次いでさらに6日間培養する(ポストコンフルエンス)。
続いて、実施例1に従って得られたアデニウム・オベスムの抽出物の溶液を用いて、ジメチルスルホキシド(DMSO)中10%重量/体積(w/v)で、培養物中0.02及び0.04%(w/v)の最終濃度で24時間処理する。
同様に3回繰り返して行われる対照培養物は、同じ量のDMSO溶媒で同じ時間処理した。
抽出した後24時間インキュベーションした終わりに、培養上清を除去し、細胞のカーペットを2回PBS(リン酸緩衝生理食塩水、Invitrogenから入手可能)ですすぐ。
次いで、細胞をトリリエージェント(Trireagent)(商標)(Sigma)300μl/培養ウェルの存在下で溶解し、次いでそれからRNAを抽出するために使用するまで−80℃で凍結させる。各細胞試料の全RNAを、Sigmaから供給された通常のプロトコルに従って抽出する。
潜在的に混入している微量のDNAを、DNA Free(Ambion)システムで処理することによって除去する。
続いて、全mRNAを、オリゴ(dT)プライマー及び酵素逆転写酵素(GibcoからのSuperscript II)の存在下で逆転写にかけて、対応する全相補的DNA(cDNA)を得る。
定量PCR反応(ポリメラーゼ連鎖反応)は、Roche Molecular SystemsからのLightcyclerシステムを用いて、供給業者が推奨する手順に従って実施した。
最終反応混合物の構成は以下の通りである。
− cDNA、
− 研究の異なる標的(デスモグレイン1及びデスモプラキン)の特定のプライマー(オリゴヌクレオチド)、
− 酵素DNAポリメラーゼ(初期のcDNA及び特定のプライマーからDNAの連続的複製物が形成することを可能にする)、蛍光色素SYBR Green I(式C32H37N4Sの芳香族有機化合物、不斉シアニンの一部分を構成し、二本鎖DNA複製に挿入される)、及び塩化マグネシウムMgCl2を含有する反応混合物(Roche)。
ハウスキーピング遺伝子(G3PDH)、言い換えれば細胞によって構成的に発現している遺伝子に対応するmRNAに関する内部細胞チェックを、この方法について通常述べられているように、所望のmRNAの定量化と同時に実施した。このチェックによって、抽出物の作用の結果生じるはずのない所望のmRNAの変種からの分離が可能になる。
タンパク質であるデスモグレイン−1及びデスモプラキンのそれぞれについて得られた結果を、添付の図1及び2に示す。
結果は、任意の単位で表され、それによって、対照培養物中のタンパク質のそれぞれについて表された量(図中で「対照」と呼ばれる)は値100を基準とする。
下記に示し、図中に示した結果は、3つの試験培養物について測定された発現値の相加平均に対応し、これは、3つの対照培養物について得られた値の相加平均で表される対照に対して、それ自体規準化されていることを意味する。
DMSO中0.02%(w/v)の濃度のアデニウム・オベスムの抽出物で処理した培養物:
試験 対照
デスモグレイン1 112 100
デスモプラキン 113 100
DMSO中0.04%(w/v)の濃度のアデニウム・オベスムの抽出物で処理した培養物:
試験 対照
デスモグレイン1 143 100
デスモプラキン 120 100
試験したアデニウム・オベスムの抽出物は、デスモソーム結合の主な構成タンパク質であるデスモグレイン1とデスモプラキンの両方の発現を刺激する。したがって、本発明によるアデニウム・オベスムの抽出物によって、mRNAの発現を刺激することが可能になり、デスモソームタンパク質の生合成が可能になる。
したがって、このことから、それらがもたらすデスモソーム結合の改善に基づいて、アデニウム・オベスムの抽出物は、皮膚バリアの強化及び/又は真皮−表皮接合部の接着の補強を可能にすると結論付けることが可能である。
したがって、これらの抽出物は、皮膚老化の影響を防止又は遅延させ、或いは水分補給又は保湿効果を得ることを可能にする化粧剤又は活性成分を構成する。
実施例1〜3の1つに従って得られたアデニウム・オベスムの抽出物を含む再生保湿セラムを調製する。
処方は以下の通りである(%(組成物の重量に対する乾燥重量で表す)):
アデニウム・オベスムの抽出物 0.15%
エクジステロン 0.08%
ヒアルロン酸 0.4%
酢酸トコフェロール 0.1%
グリコール酸 0.15%
D−キシロース 0.05%
香料、保存剤 0.2%
ゲル化賦形剤及び水 100%にするだけの十分量
アデニウム・オベスムの抽出物を含む再生保湿セラムは、メーキャップが施される前に適用され、浸透されるべきである。
実施例1〜3の1つに従って得られたアデニウム・オベスムの抽出物を含む高保護日中用保湿クリームを調製する。
処方は以下の通りである(%(組成物の重量に対する乾燥重量で表す)):
アデニウム・オベスムの抽出物 0.2%
ヨーロッパグリの抽出物 1.0%
ワレモコウのグリコール抽出物 0.1%
ヒアルロン酸ナトリウム 0.4%
L−セリン 0.2%
テトライソパルミチン酸アスコルビル 0.05%
Parsol MCX 5.0%
グリセロール 3.0%
香り付き賦形剤及び水 100%にするだけの十分量
高保護日中用保湿クリームは午前中に適用されるべきである。
実施例1〜3の1つに従って得られたアデニウム・オベスムの抽出物を含む夜用リストラクチャリングクリームを調製する。
処方は以下の通りである(%(組成物の重量に対する乾燥重量で表す)):
アデニウム・オベスムの抽出物 0.2%
セラミド3 0.1%
ヒアルロン酸 0.4%
ビタミンAパルミタート 0.05%
トコトリエノール 0.05%
シアバター 1.0%
グリセロール 2.0%
ツバキ油 2.0%
マデカッソシド 0.5%
賦形剤及び水 100%にするだけの十分量
夜用リストラクチャリングクリームは、就寝前の夜に適用されるべきである。これには、2つの作用がある。これは、皮膚バリアを強化することによって、皮膚の深部まで保湿し、且つ真皮−表皮接合部の接着を補強することによって、しわの形成に対抗するように働く。
実施例1〜3の1つに従って得られたアデニウム・オベスムの抽出物を含む日中用ライトニング及び保湿ケア製品を調製する。
処方は以下の通りである(%(組成物の重量に対する乾燥重量で表す)):
アデニウム・オベスムの抽出物 0.2%
カルシウムパントテノスルホナート 0.1%
甘草の抽出物 0.5%
グリセロール 2.0%
賦形剤及び水 100%にするだけの十分量
実施例1〜3の1つに従って得られたアデニウム・オベスムの抽出物を含むハイドロゲルマスクを調製する。
処方は以下の通りである(%(組成物の重量に対する乾燥重量で表す)):
アデニウム・オベスムの抽出物 0.05%
グルコン酸カルシウム 0.2%
ヒアルロン酸 0.2%
賦形剤及び水 100%にするだけの十分量
実施例1〜3の1つに従って得られたアデニウム・オベスムの抽出物を含む保護用保湿ファンデーションを調製する。
処方は以下の通りである(%(組成物の重量に対する乾燥重量で表す)):
アデニウム・オベスムの抽出物 0.02%
吸着剤ナイロン粉末 2.0%
着色顔料 5.0%
ホホバ油 2.0%
UVフィルター 4.0%
微粒子化二酸化チタン 2.0%
グリセロール 2.0%
賦形剤 100%にするだけの十分量
保湿ファンデーションで使用するため、アデニウム・オベスムの抽出物をナイロン粉末に予め吸着させる。
Claims (15)
- アデニウム・オベスムの抽出物を含み、皮膚バリアの強化及び/又は真皮−表皮接合部の接着の補強に寄与する化粧活性剤であって、アデニウム・オベスムの抽出物が、水、C1〜C4アルコール及びこれらの混合物からなる群から選択される少なくとも1種の溶媒で抽出することによって得られる、化粧活性剤。
- アデニウム・オベスムの抽出物が、植物全体、葉、茎、花、又は根の抽出物から選択される、請求項1に記載の活性剤。
- アデニウム・オベスムの抽出物が、植物全体の細胞、又はアデニウム・オベスムの葉の細胞を、植物細胞培地中で培養することによって得られる、請求項1又は2に記載の活性剤。
- 前記アルコールがエタノールである、請求項3に記載の活性剤。
- 得られたアデニウム・オベスムの抽出物を、続いて凍結乾燥又は噴霧して、粉末の形にする、請求項1〜4のいずれか一項に記載の活性剤。
- 粉末が、溶媒又は溶媒の混合物中に分散又は溶解している、請求項5に記載の活性剤。
- 得られたアデニウム・オベスムの抽出物を、多孔質又は非多孔質のナイロン粉末、及び雲母からなる群から選択される支持体に吸着させる、請求項5に記載の活性剤。
- 支持体に吸着させたアデニウム・オベスムの抽出物が、水性抽出物である、請求項7に記載の活性剤。
- 0.001重量%〜5重量%の請求項1〜8のいずれか一項に記載の前記化粧活性剤を含むことを特徴とし、皮膚バリアを強化し、真皮−表皮接合部の接着を補強し、皮膚老化の影響を防止若しくは遅延させ、しわの形成を防止若しくは遅延させ、保護、修正、再構築、水分補給、若しくは保湿効果をもたらすためのケアから選択される美容ケアのための化粧品組成物。
- 0.01重量%〜1重量%の請求項1〜8のいずれか一項に記載の前記化粧活性剤を含むことを特徴とする、請求項9に記載の組成物。
- サポニン又はサポゲノール;大豆のサポニン又はサポゲノール、ウマゴヤシのサポニン又はサポゲノール、サンシチニンジンのサポニン又はサポゲノール、ジンセノサイドサポニン、ジンセノサイドRb1及びRdからなる群から選択される化粧活性剤をさらに含むことを特徴とする、請求項9又は10に記載の組成物。
- ヨーロッパグリの抽出物、アジュガツルケスタニカの抽出物、セラミド、遊離脂肪酸、ステロール、エクジステロン、グルコン酸カルシウム、D−キシロース、L−セリン又はピロリドンカルボン酸及びその化粧品として許容できる塩からなる群から選択される1種又は複数の化粧活性剤をさらに含むことを特徴とする、請求項9〜11のいずれか一項に記載の組成物。
- コハクのグリコール抽出物、コハク酸、リンゴ酸、サリチル酸、ゲンチジン酸、トコフェロールゲンチサート、エクトイン及び/又はそのヒドロキシ誘導体、マンニトール、ホルスコリン、尿素、サルコシン、トリメチルグリシン、クレアチン、グルタチオン、UVA及び/又はUVBフィルター、フリーラジカル捕捉剤;ワレモコウの抽出物、トコフェロールホスファート;クシェノールB、アルブチン、コウジ酸、及びカルシウムパントテノスルホナートから選択される顔色を明るくする物質;甘草の抽出物、ユリの抽出物;アスコルビン酸又はエリソルビン酸の誘導体からなる群から選択される1種又は複数の活性剤をさらに含むことを特徴とする、請求項9〜12のいずれか一項に記載の組成物。
- 前記フリーラジカル捕捉剤が、トコフェロール、リスベラトロール、リスベラトロールオリゴマー、アストリンギニン、トコトリエノールから選択されることを特徴とする、請求項13に記載の組成物。
- 顔又は体の皮膚の全部又は一部に適用するのに適した、セラム、ローション、乳濁液、リッチクリーム、着色クリーム、ヒドロゲル、マスク、スティック、及び口紅から選択される形であることを特徴とする、請求項9〜14のいずれか一項に記載の組成物。
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