JP5558408B2 - ガンボージ樹脂から得られる分画生成物及びその医学的使用 - Google Patents

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Description

本出願は、２０１０年６月１１日に出願の台湾特許出願第０９９１１９１０７号に基づく優先権を主張する。
本発明は、ガンボージ樹脂のアセトン抽出生成物から得られる１７種の新規化合物及び５つの分画生成物に関する。１７種の新規化合物及び５つの分画生成物は、腫瘍／がん細胞の成長を阻害する上で活性を有することが立証された。加えて、ガンボージ樹脂のアセトン抽出生成物、及びそれから得られる５つの分画生成物は、鎮痛及び抗炎症効果を有することが立証された。したがって、本発明は、また、医薬組成物の調製におけるガンボージ樹脂の前記アセトン抽出生成物、その５つの分画生成物、及び１７種の新規化合物の使用に関する。
ガンボージ樹脂は、オトギリソウ（Ｇｕｔｔｉｆｅｒａｅ）科のガルシニア（Ｇａｒｃｉｎｉａ）種の植物によって分泌されるガム状樹脂である。それは、昔から植物性の染料及び顔料の供給源として使用されてきた。それは、また、インド及びタイなどのいくつかの地域で民間薬として使用される。
ガルシニア（ピンインでＴＥＮＧＨＵＡＮＧ）は、一般にはガンボージとして知られ、熱帯地方で生育する常緑樹の一種である。インドで生育する主な種は、「ガルシニア・モレラ・デスブ（Ｇａｒｃｉｎｉａ ｍｏｒｅｌｌａ Ｄｅｓｖ）」であり、一方、タイで生育する主な種は、「Ｇ．ｈａｒｂｕｒｙｉ Ｈｏｏｋ ｆ．」である。開花期の前に、樹皮を、地面から約２メートルで螺旋形状に切り開き、滲出する樹脂を集める。次いで、樹脂を加熱乾燥に供して凝固したガンボージ樹脂を得る。
伝統中国医学（ＴＣＭ）によれば、ガンボージは、炎症、毒素除去、止血、及び殺虫に立ち向かう上で有効である。１９３４年以来、ガンボージ樹脂の成分に関して多くの報告がなされてきた。現在、ガンボージ樹脂の抽出物から、多くの化合物、例えば、モレリン（ｍｏｒｅｌｌｉｎ）、モレリックアシッド（ｍｏｒｅｌｌｉｃ ａｃｉｄ）、ガンボジックアシッド（ｇａｍｂｏｇｉｃ ａｃｉｄ）、モレリノール（ｍｏｒｅｌｌｉｎｏｌ）、イソモレリン（ｉｓｏｍｏｒｅｌｌｉｎ）、イソモレリックアシッド（ｉｓｏｍｅｒｅｌｌｉｃ ａｃｉｄ）、イソガンボジックアシッド（ｉｓｏｇａｍｂｏｇｉｃ ａｃｉｄ）、イソモレリノール（ｉｓｏｍｏｒｅｌｌｉｎｏｌ）、ネオガンボジックアシッド（ｎｅｏｇａｍｂｏｇｉｃ ａｃｉｄ）、デスオキシモレリン（ｄｅｓｏｘｙｍｏｒｅｌｌｉｎ）、ジヒドロイソモレリン（ｄｉｈｙｄｒｏｉｓｏｍｏｒｅｌｌｉｎ）、α−グティフェリン（α−ｇｕｔｔｉｆｅｒｉｎ）、β−グティフェリン（β−ｇｕｔｔｉｆｅｒｉｎ）、ガンボゲニックアシッド（ｇａｍｂｏｇｅｎｉｃ ａｃｉｄ）、デスオキシガンボゲニン（ｄｅｓｏｘｙｇａｍｂｏｇｅｎｉｎ）、ガンボゲリックアシッド（ｇａｍｂｏｇｅｌｌｉｃ ａｃｉｄ）、エピガンボジックアシッド（ｅｐｉｇａｍｂｏｇｉｃ ａｃｉｄ）、エピイソガンボジックアシッド（ｅｐｉｉｓｏｇａｍｂｏｇｉｃ ａｃｉｄ）、イソガンボゲニックアシッド（ｉｓｏｇａｍｂｏｇｅｎｉｃ ａｃｉｄ）、３０−ヒドロキシガンボジックアシッド（３０−ｈｙｄｒｏｘｙｇａｍｂｏｇｉｃ ａｃｉｄ）などを単離できることが知られている。
いくつかの研究は、ヒト子宮頸部がん細胞ＨｅＬａ、ヒト上咽腔がん細胞ＫＢ、ヒト白血病細胞Ｋ５６２、及びドキソルビシン抵抗性Ｋ５６２細胞系などに対するガンボージ樹脂の特定の成分の細胞毒性活性を報告している（Ｊ．Ａｓａｎｏら（１９９６）、Ｐｈｙｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，４１：８１５〜８２０；Ｌ．Ｊ．Ｌｉｎら（１９９３）、Ｍａｇｎｅｔｉｃ Ｒｅｓｏｎａｎｃｅ ｉｎ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，３１：３４０〜３４７；Ｑ．Ｂ．Ｈａｎら（２００６）、Ｐｌａｎｔａ Ｍｅｄ．，７２：２８１〜２８４：Ｑ．Ｂ．Ｈａｎら（２００６）、Ｃｈｅｍ．Ｐｈａｒｍ．Ｂｕｌｌ．，５４：２６５〜２６７；Ｑ．Ｂ．Ｈａｎら（２００６）、Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ＆ Ｂｉｏｄｉｖｅｒｓｉｔｙ，３：１０１〜１０５）。
米国特許第６４６２０４１号には、次式Ｉ、ＩＩ及びＩＩＩで表されるようなガンボジックアシッド、並びにその類似体及び誘導体：
Figure 0005558408
Figure 0005558408
、及び、
Figure 0005558408
（ここで、点線は、単結合、二重結合、又はエポキシ基を意味し；Ｘ、Ｙ、及びＲ１〜Ｒ３は前記米国特許中に開示のように定義される）が開示されている。
前記式Ｉ〜ＩＩＩの１つを有する化合物は、カスパーゼ活性化剤及びアポトーシス誘発剤であることが開示されている。しかし、米国特許第６４６２０４１号には、３２，３３−エポキシ基を有する式Ｉの化合物も、それを調製する方法も開示されていない。
Ａｃｔａ Ｃｈｉｍｉｃａ Ｓｉｎｉｃａ，２００８，６６（２２）：２５１３〜２５１７において、Ｍｉｎｇ−Ｍｅｉａ Ｊｉａらは、Ｇａｒｃｉｎｉａ ｈａｎｂｕｒｙｉの化学成分について研究し、Ｇａｒｃｉｎｉａ ｈａｎｂｕｒｙｉの冷エタノール抽出生成物から、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（勾配溶出溶媒系：石油エーテル−アセトン、アセトン、メタノール）及び分取ＨＰＬＣによって１５の化合物を単離した。構造同定によれば、１５の化合物は、（１）２α−ヒドロキシ−３β−アセトキシルプ−ルプ−２０（２９）−エン−２８−オイックアシッド、（２）１０α−ヒドロキシエピガンボジックアシッド、（３）ガンボジックアシッド、（４）イガンボジックアシッド、（５）ガンボジン（ｇａｍｂｏｇｉｎ）、（６）ガンボゴイックアシッドＢ（ｇａｍｂｏｇｏｉｃ ａｃｉｄ Ｂ）、（７）デスオキシモレリン、（８）イソモレリン、（９）ガンボゲニックアシッド、（１０）イソガンボゲニン、（１１）ガンボゲリックアシッド、（１２）デスオキシガンボゲニン、（１３）モレリックアシッド、（１４）イソモレリックアシッド、及び（１５）３０−ヒドロキシガンボジックアシッドと同定された。
米国特許第７１３８４２８号（ＴＷ１２８２２８０及びＣＮ１００４１３８６８Ｃに対応する）には、ガンボージ樹脂からのアセトン抽出生成物、すなわちＴＳＢ−１４が開示されている。加えて、前記アセトン抽出生成物ＴＳＢ−１４から、新規化合物フォルモキサントンＡ（ｆｏｒｍｏｘａｎｔｈｏｎｅ Ａ）並びに８つの既知化合物ベツリン（ｂｅｔｕｌｉｎ）、ベツリニックアシッド（ｂｅｔｕｌｉｎｉｃ ａｃｉｄ）、モレリックアシッド、イソモレリックアシッド、ガンボジックアシッド、イソガンボジックアシッド、イソモレリノール、及びデスオキシモレリンを含む、９つの化合物がさらに精製された。
アセトン抽出生成物ＴＳＢ−１４、及び９つの精製化合物は、肝がん細胞（ＨｅｐＧ２）、肺がん細胞（Ａ５４９）、乳がん細胞（ＭＣＦ−７）、結腸がん細胞（ＨＴ−２９）、白血病細胞（ＨＬ−６０）、及びリンパ腫がん細胞（Ｕ９３７）などの腫瘍／がんの成長を阻害する上で効果を有することが立証された。
米国特許出願公開第２００７／００９３４５６号には、「メチル３７，３８−ジヒドロキシ−ガンボゲート（ｇａｍｂｏｇａｔｅ）」と同定され、次の化学構造：
Figure 0005558408
を有する、ガンボジックアシッドの誘導体が開示されている。
実験から、メチル３７，３８−ジヒドロキシ−ガンボゲートは、カスパーゼ活性化剤及びアポトーシス誘発剤として作用し得ることが見出された。
Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｎａｔｕｒａｌ Ｐｒｏｄｕｃｔｓ（２００９）、７２：１１７〜１２４において、Ｓ．Ｊ．Ｔａｏらは、１２の新規キサントン類（下記に示すオキシガンボジックアシッド、メチル８，８ａ−ジヒドロモレレート、７−メトキシガンボゲリックアシッドなど）並びに一対の新規天然物（すなわち、８，８ａ−ジヒドロ−８−ヒドロキシガンボジックアシッド及びその異性体）がＧ．ｈａｎｂｕｒｙの樹脂から単離されることを報告した。
Figure 0005558408
オキシガンボジックアシッドの立体構造は、１Ｈ−ＮＭＲスペクトルデータにおけるＨ−１５とＨ−１６とのシグナルの重なりのため、Ｃ１５／Ｃ１６二重結合の立体配置を決定することができないので、まだ確立されていない。Ｓ．Ｊ．Ｔａｏらは、さらに、薬理実験から、メチル８，８ａ―ジヒドロモレレートに加えて、試験された他の１３の化合物のすべてがＨｅＬａがん細胞の成長を抑制する上で有効であることを見出した。
腫瘍／がん細胞の成長を阻害する上での活性に加えて、ガンボージ樹脂の抽出物は、その他の生物学的活性を有することが立証された。例えば、Ａ．Ｐａｎｔｈｏｎｇら、Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｅｔｈｎｏｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ（２００７），１１１：３３５〜３４０の報告において、Ｇ．ｈａｎｂｕｒｙｉ Ｈｏｏｋ ｆ．の樹脂から得られ、ＧＨ５７６３と命名された酢酸エチル抽出物は、抗炎症、鎮痛、及び解熱活性を示すことが立証された。
それにもかかわらず、製薬産業の医化学者及び製薬業者が、容易に調製することができ、且つ抗がん活性、鎮痛活性、抗炎症活性などの望ましい生物学的活性を示す新規化合物（単数又は複数）又は新規抽出物（単数又は複数）を探索する必要性がなお存在する。
さらなる研究により、本発明者らは、米国特許第７１３８４２８号中に開示されているようなガンボージ樹脂からのアセトン抽出生成物、すなわちＴＳＢ−１４が、鎮痛及び抗炎症活性を示すことを見出した。本発明者らは、さらに、ガンボージ樹脂のアセトン抽出生成物ＴＳＢ−１４から１７種の新規化合物及び５つの分画生成物を得た。その中で、１７種の新規化合物は、抗がん活性を有することが立証され、５つの分画生成物は、抗がん、鎮痛及び抗炎症活性を有することが立証された。
したがって、第１態様によれば、本発明は、
ガンボージ樹脂の分画生成物を提供し、分画生成物は、
ガンボージ樹脂を粉末に微粉砕し、続いて前記微粉砕粉末をアセトンで抽出することによって、ガンボージ樹脂からアセトン抽出生成物を得るステップ；
アセトン抽出生成物をセミ分取ＲＰ−ＨＰＬＣによって分画して、５つの溶出物を得るステップ；
別々に、５つの溶出物を濃縮して、続いて、Ｈ２Ｏ及び酢酸エチル中に分配して、５つの粗分画生成物を得るステップ；並びに、
別々に、５つの粗分画生成物をセミ分取ＲＰ−ＨＰＬＣによって精製して、濃縮して、Ｈ２Ｏ及び酢酸エチルに分配して、５つの粗分画生成物のそれぞれについて一定の溶出プロフィールを得るステップ；
を含む方法によって調製されるものであり、
前記分画生成物が、
（１）フォルモキサントンＡ、
式：
Figure 0005558408
の化合物、
式：
Figure 0005558408
の化合物、
式：
Figure 0005558408
の化合物、
式：
Figure 0005558408
の化合物、
式：
Figure 0005558408
の化合物、
式：
Figure 0005558408
の化合物、
式：
Figure 0005558408
の化合物、
式：
Figure 0005558408
の化合物、
式：
Figure 0005558408
の化合物、
式：
Figure 0005558408
の化合物、及び、
式：
Figure 0005558408
の化合物、
を含む分画生成物；
（２）イソモレリックアシッド、モレリックアシッド及びイソモレリノールを含む分画生成物；
（３）３０−ヒドロキシエピガンボジックアシッド、３０−ヒドロキシガンボジックアシッド、ネオガンボジックアシッド、式：
Figure 0005558408
の化合物、及び、
式：
Figure 0005558408
の化合物、
を含む分画生成物；
（４）イソモレリン、イソガンボゲニックアシッド、ガンボゲニックアシッド、及び式：
Figure 0005558408
の化合物、
を含む分画生成物；並びに、
（５）ガンボジックアシッド、エピガンボジックアシッド、イソガンボジックアシッド、エピイソガンボジックアシッド、デスオキシモレリン、デスオキシガンボゲニン、ガンボゲリックアシッド、エピガンボゲリックアシッド、式：
Figure 0005558408
の化合物、
式：
Figure 0005558408
の化合物、及び、
式：
Figure 0005558408
の化合物、
を含む分画生成物、
からなる群から選択される。
第２態様によれば、本発明は、前記分画生成物の少なくとも１種を含む医薬組成物を提供する。
第３態様によれば、本発明は、
（１）ガンボージ樹脂から、ガンボージ樹脂を粉末に微粉砕し、続いて前記微粉砕粉末をアセトンで抽出することによって得られるアセトン抽出生成物；及び、
（２）前記分画生成物、
の少なくとも１種を含む鎮痛組成物を提供する。
第４態様によれば、本発明は、
（１）ガンボージ樹脂から、ガンボージ樹脂を粉末に微粉砕し、続いて前記微粉砕粉末をアセトンで抽出することによって得られるアセトン抽出生成物；及び、
（２）前記分画生成物、
の少なくとも１種を含む抗炎症組成物を提供する。
第５態様によれば、本発明は、前記分画生成物の少なくとも１種を含む抗がん組成物。を提供する。
第６態様によれば、本発明は、細胞を前記分画生成物の少なくとも１種と接触させることを含む、腫瘍／がん細胞の成長を阻害する方法を提供する。
第７態様によれば、本発明は、対象に前記分画生成物の少なくとも１種を投与することを含む、対象のがんを治療する方法を提供する。
本発明の前記の及びその他の目的、特徴及び利点は、添付の図面と連結して考慮される以下の詳細な説明及び好ましい実施形態を参照することによって明らかになるであろう。
以後、「ＴＳＢ−１４」と呼ばれ、米国特許第７１３８４２８号の例１に開示の方法により調製された、ガンボージ樹脂からのアセトン抽出生成物に関する分析ＲＰ−ＨＰＬＣの溶出プロフィールを示す図であり、図中で、０〜８０分の保持時間中のピーク１〜３５は、発見された３５種の主要成分にそれぞれ対応する。 後記例２の「生成物ＴＳＢ−１４のセミ分取ＲＰ−ＨＰＬＣ分析」と題するセクションＡで実施されたセミ分取ＲＰ−ＨＰＬＣ分析から得られた、生成物ＴＳＢ−１４に関する溶出プロフィールを示す図であり、図中で観察されるピーク１〜３５は、それぞれ、図１に示したピークに対応する。 後記例２の「画分１〜３の調製」と題するセクションＢで得られた画分１に関するセミ分取ＲＰ−ＨＰＬＣの溶出プロフィールを示す図であり、図中で観察される１２個のピークは、それぞれ、図２に示したピーク１〜１２に対応する。 後記例２で得られた画分２に関するセミ分取ＲＰ−ＨＰＬＣの溶出プロフィールを示す図であり、図中で観察される１２個のピークは、それぞれ、図２に示したピーク１３〜２４に対応する。 後記例２で得られた画分３に関するセミ分取ＲＰ−ＨＰＬＣの溶出プロフィールを示す図であり、図中で観察される１１個のピークは、それぞれ、図２に示したピーク２５〜３５に対応する。 後記例４の「生成物ＴＳＢ−１４のセミ分取ＲＰ−ＨＰＬＣ分析」と題するセクションＡで実施されたセミ分取ＲＰ−ＨＰＬＣ分析から得られた生成物ＴＳＢ−１４に関する溶出プロフィールを示す図である。 後記例４で得られた分画生成物ＴＳＢ−１４Ａに関するセミ分取ＲＰ−ＨＰＬＣの溶出プロフィールを示す図であり、図中で観察される１２個のピークは、それぞれ、図１に示したピーク１〜１２に対応する。 後記例４で得られた分画生成物ＴＳＢ−１４Ｂに関するセミ分取ＲＰ−ＨＰＬＣの溶出プロフィールを示す図であり、図中で観察される３個のピークは、それぞれ、図１に示したピーク１３〜１５に対応する。 後記例４で得られた分画生成物ＴＳＢ−１４Ｃに関するセミ分取ＲＰ−ＨＰＬＣの溶出プロフィールを示す図であり、図中で観察される５個のピーク、それぞれ、図１に示したピーク１６〜２０に対応する。 後記例４で得られた分画生成物ＴＳＢ−１４Ｄに関するセミ分取ＲＰ−ＨＰＬＣの溶出プロフィールを示す図であり、図中で観察される４個のピークは、それぞれ、図１に示したピーク２１〜２４に対応する。 後記例４で得られた分画生成物ＴＳＢ−１４Ｅに関するセミ分取ＲＰ−ＨＰＬＣの溶出プロフィールを示す図であり、図中で観察される１１個のピークは、それぞれ、図１に示したピーク２５〜３５に対応する。
任意の先行技術刊行物が本明細書に引用される場合、このような参考文献は、刊行物が、台湾又は任意の他の国において当技術分野に共通な一般的知識の一部を形成することの承認を構成するものではないことを理解されたい。
本明細書の目的に関して、単語「含むこと」は、「それを含むがそれに限定されない」ことを意味すること、及び単語「含む」は、それに対応する意味を有することが明瞭に理解されるであろう。
別途定義しない限り、本明細書中で使用されるすべての技術及び科学用語は、本発明が属する技術分野の当業者によって一般的に理解される意味を有する。当業者は、本明細書に記載のものと類似又は等価の、本発明を実施する上で使用できる多くの方法及び材料を認識するであろう。実際、本発明は、決して記載の方法及び材料に限定されるものではない。明瞭性のため、本明細書中では、以下の定義が使用される。
本明細書中で使用する場合、用語「活性成分」又は「生物学的に活性な化合物」は、薬理学的活性があり、それゆえ治療上の価値を有する任意の物質又は材料、或いは物質及び材料の組合せを包含すると解される。
本明細書中で使用する場合、用語「分画生成物」は、生物学的サンプルを、生物学的サンプルから２つ以上の画分を分離、捕集するような分画処理（例えば、クロマトグラフィー）に供することによって得られる生成物を指す。
米国特許第７１３８４２８号の例１において、発明者らは、ガンボージ樹脂から、ガンボージ樹脂を粉末に微粉砕し、続いて前記微粉砕粉末をアセトンで抽出することによって得られるアセトン抽出生成物、すなわちＴＳＢ−１４を開示した。さらに、アセトン抽出生成物ＴＳＢ−１４は、フォルモキサントンＡ、ベツリン、ベツリニックアシッド、モレリックアシッド、イソモレリックアシッド、ガンボジックアシッド、イソガンボジックアシッド、イソモレリノール、及びデスオキシモレリンを含むことが確認された。アセトン抽出生成物ＴＳＢ−１４中に存在する可能性のある任意の他の生物学的に活性のある成分（単数又は複数）を探索するため、本発明において本発明者らは、分析ＲＰ−ＨＰＬＣ（逆相高側液体クロマトグラフィー）及びセミ分取ＲＰ−ＨＰＬＣを採用して、アセトン抽出生成物ＴＳＢ−１４中に存在する任意の考え得る新規な生物学的活性成分（単数又は複数）を単離、精製し、且つアセトン抽出生成物ＴＳＢ−１４から生物学的に活性のある分画生成物を調製した。
最初に、アセトン抽出生成物ＴＳＢ−１４を、分析用ＲＰ−Ｃ８カラム（Ｌｕｎａ ３μ Ｃ８（２））を使用する分析ＲＰ−ＨＰＬＣ分析に供した。図１に示すように、得られた分析ＲＰ−ＨＰＬＣの溶出プロフィールは、それぞれピーク１〜３５と称する３５個の主要ピークを有することが観察された。
アセトン抽出生成物ＴＳＢ−１４を、次いで、セミ分取用ＲＰ−Ｃ１２カラム（Ｓｙｎｅｒｇｉ ４μ Ｃ１２）を使用するセミ分取ＲＰ−ＨＰＬＣに供した。図２に示すような得られるセミ分取ＲＰ−ＨＰＬＣの溶出プロフィールは、図１に示したものに比較的対応している３５個の主要ピークを有することが見出され、３つの領域に分割され、領域１は、０〜４２分の保持時間中に見出されるピーク１〜１２を含み、領域２は、４２〜１３５分の保持時間中に見出されるピーク１３〜２４を含み、領域３は、１３５〜２８０分の保持時間中に見出されるピーク２５〜３５を含んでいた。
図２に示す３つの分割された領域に基づいて、アセトン抽出生成物ＴＳＢ−１４を、セミ分取ＲＰ−ＨＰＬＣで分画して、それぞれ前記３つの分割された領域に対応する３つの溶出物を得た。こうして集めた３つの溶出物を、それぞれ、集めた溶出物をＨ２Ｏと酢酸エチルとに分配する処理；Ｈ２Ｏで洗浄してＴＦＡを除去した後に、有機層を無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、真空ロータリーエバポレーターを使用して有機溶媒を除去する処理に供した。こうして得られた３つの対応する画分１〜３を別々にセミ分取ＲＰ−ＨＰＬＣ分析に供して、それぞれピーク１〜１２、１３〜２４及び２５〜３５を有することが観察される、図３、４及び５に示すような溶出プロフィールが得られた。
得られた画分１をセミ分取ＲＰ−ＨＰＬＣ分析に供し、図３に示すその溶出プロフィールにより、図３に示すピーク１〜１２にそれぞれ対応する１２の溶出物を集めた。集めた溶出物１〜１２を、次いで、集めた溶出物をＨ２Ｏと酢酸エチルとに分配する処理；ＴＦＡを除去するためＨ２Ｏで洗浄した後に、有機層を無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、真空ロータリーエバポレーターを使用して有機溶媒を除去する処理に供した。１２の粗生成物を得て、そのそれぞれをさらに精製した。精製を完結した後、画分１の溶出物１〜１２から、１２の精製された生成物を得て、それらを、それぞれ、Ｇｈ−３２６１、Ｇｈ−３２７１、Ｇｈ−３２７２、Ｇｈ−３３１１、Ｇｈ−３３３２、Ｇｈ−１０３６、Ｇｈ−３２９１、Ｇｈ−６３１、Ｇｈ−１０５２、Ｇｈ−３３５１、Ｇｈ−３３５３及びＧｈ−３３５２と称した（後記例２の表１を参照されたい）。
画分２を、画分１と同様の方式で処理し、図４に示すその溶出プロフィールにより、図４に示すピーク１３〜２４にそれぞれ対応する溶出物１３〜２４を集め、さらに、画分２の溶出物１３〜２４から１２の精製された生成物を得て、それらを、それぞれ、Ｇｈ−４７、Ｇｈ−４６０２、Ｇｈ−４６０１、Ｇｈ−１６０１−Ａ、Ｇｈ−１０５０、Ｇｈ−１６０２、Ｇｈ−１６３１、Ｇｈ−２６４１−１、Ｇｈ−２５０１、Ｇｈ−２６４２、Ｇｈ−２５０７及びＧｈ−２５０５と称した（後記例２の表２を参照されたい）。
画分３を、画分１と同様の方式で同様に処理し、図５に示すその溶出プロフィールにより、図５に示すピーク２５〜３５にそれぞれ対応する溶出物２５〜３５を集め、さらに、画分３の溶出物２５〜３５から１１の精製された生成物を得て、それらを、それぞれ、Ｇｈ−２５０８、Ｇｈ−２６０３−１、Ｇｈ−２６０３−２、Ｇｈ−１６４１、Ｇｈ−１６４２、Ｇｈ−２６０５、Ｇｈ−２６０６、Ｇｈ−２６０７−Ｂ、Ｇｈ−２６０７−１Ａ、Ｇｈ−２３０１及びＧｈ−４３０１と称した（後記例２の表３を参照されたい）。
画分１〜３から精製された３５種の生成物を、融点測定、核磁気共鳴（ＮＭＲ）分光法（例えば１Ｈ−ＮＭＲ及び１３Ｃ−ＮＭＲ分光法）、質量分析法（例えば、電子衝撃質量分析法（ＥＩＭＳ）、高分解能電子衝撃質量分析法（ＨＲＥＩＭＳ）、高速原子衝撃質量分析法（ＦＡＢＭＳ）、及び高分解能高速原子衝撃質量分析法（ＨＲＦＡＢＭＳ）など）などを含む、物理及び化学的分析に供した。
生成物Ｇｈ−６３１は、既知化合物、すなわち、次の化学構造：
Figure 0005558408
を有し、米国特許第７１３８４２８号中に開示されている既知化合物、すなわち「フォルモキサントンＡ」であることが化学構造解析によって確認された。
生成物Ｇｈ−４６０２及びＧｈ−４７は、それぞれ、次の化学構造：
Figure 0005558408
を有する２つの既知のモレリックアシッド立体異性体、すなわち、モレリックアシッド及びイソモレリックアシッドであることが化学構造解析によって確認された。
生成物Ｇｈ−４６０１は、次の化学構造：
Figure 0005558408
を有する既知のイソモレリックアシッド誘導体、すなわち、イソモレリノールであることが化学構造解析によって確認された。
生成物Ｇｈ−１６０１−Ａ及びＧｈ−１６０２は、それぞれ次の化学構造：
Figure 0005558408
Figure 0005558408
を有する、３０−ヒドロキシガンボジックアシッドの２つの既知Ｃ−２エピマー、すなわち、３０−ヒドロキシガンボジックアシッド及び３０−ヒドロキシエピガンボジックアシッドであることが化学構造解析によって確認された。
生成物Ｇｈ−２６４１−１は、次の化学構造：
Figure 0005558408
を有するネオガンボジックアシッドであることが化学構造解析によって確認された。
生成物Ｇｈ−２５０１は、次の化学構造：
Figure 0005558408
を有するイソモレリンであることが化学構造解析によって確認された。
生成物Ｇｈ−２５０５及びＧｈ−２６４２は、それぞれ次の化学構造：
Figure 0005558408
Figure 0005558408
を有する、２つの既知ガンボゲニック立体異性体、すなわち、ガンボゲニックアシッド及びイソガンボゲニックアシッドであることが化学構造解析によって確認された。
生成物Ｇｈ−２６０３−２及びＧｈ−２６０３−１は、すなわち、それぞれ次の化学構造：
Figure 0005558408
を有する、ガンボゲリックアシッドの２つの既知Ｃ−２エピマー、すなわち、ガンボゲリックアシッド及びエピガンボゲリックアシッドであることが化学構造解析によって確認された。
生成物Ｇｈ−１６４１及びＧｈ−１６４２は、それぞれ次の化学構造：
Figure 0005558408
Figure 0005558408
を有する、イソガンボジックアシッドの２つの既知Ｃ−２エピマー、すなわち、イソガンボジックアシッド及びエピイソガンボジックアシッドであることが化学構造解析によって確認された。
生成物Ｇｈ−２６０５及びＧｈ−２６０６は、それぞれ次の化学構造：
Figure 0005558408
Figure 0005558408
を有する、ガンボジックアシッドの２つの既知Ｃ−２エピマー、すなわち、ガンボジックアシッド及びエピガンボジックアシッドであることが化学構造解析によって確認された。
生成物Ｇｈ−２３０１は、次の化学構造：
Figure 0005558408
を有する既知化合物、すなわち、デスオキシモレリンであることが化学構造解析によって確認された。
生成物Ｇｈ−４３０１は、次の化学構造：
Figure 0005558408
を有する既知化合物、すなわち、デスオキシガンボゲニンであることが化学構造解析によって確認された。
生成物Ｇｈ−３３５２及びＧｈ−３３５１は、化学構造解析の結果及び既知化合物の分光データとの比較から、今まで報告されていない２つの新規化合物であることが確認された。生成物Ｇｈ−３３５２及びＧｈ−３３５１は、次の化学構造：
Figure 0005558408
Figure 0005558408
を有するＣ−２エピマーであり、本明細書中で、それぞれ「フォルモキサントンＥ」及び「エピフォルモキサントンＥ」と呼ばれる。
生成物Ｇｈ−１０５２及びＧｈ−１０３６は、化学構造解析の結果及び既知化合物の分光データとの比較から、今まで報告されていない２つの新規化合物であることが確認された。生成物Ｇｈ−１０５２及びＧｈ−１０３６は、次の化学構造：
Figure 0005558408
Figure 0005558408
を有するＣ−２エピマーであり、本明細書中で、それぞれ「フォルモキサントンＦ」及び「エピフォルモキサントンＦ」と呼ばれる。
生成物Ｇｈ−３３５３及びＧｈ−３３１１は、化学構造解析の結果及び既知化合物の分光データとの比較から、今まで報告されていない２つの新規化合物であることが確認された。生成物Ｇｈ−３３５３及びＧｈ−３３１１は、次の化学構造：
Figure 0005558408
Figure 0005558408
を有するＣ−２エピマーであり、本明細書中で、それぞれ「フォルモキサントンＧ」及び「エピフォルモキサントンＧ」と呼ばれる。
生成物Ｇｈ−３２６１及びＧｈ−３２７１は、化学構造解析の結果及び既知化合物の分光データとの比較から、今まで報告されていない新規化合物であることが確認された。生成物Ｇｈ−３２６１及びＧｈ−３２７１は、次の化学構造：
Figure 0005558408
Figure 0005558408
を有するＣ−２エピマーであり、本明細書中で、それぞれ「フォルモキサントンＪ」及び「エピフォルモキサントンＪ」と呼ばれる。
生成物Ｇｈ−３２７２は、化学構造解析の結果及び既知化合物の分光データとの比較から、今まで報告されていない新規化合物であることが確認された。生成物Ｇｈ−３２７２は、本明細書中で「フォルモキサントンＨ」と呼ばれ、次の化学構造：
Figure 0005558408
を有する。
生成物Ｇｈ−３３３２は、化学構造解析の結果及び既知化合物の分光データとの比較から、今まで報告されていない新規化合物であることが確認された。生成物Ｇｈ−３３３２は、本明細書中で「イソフォルモキサントンＩ」と呼ばれ、次の化学構造：
Figure 0005558408
を有する。
生成物Ｇｈ−３２９１は、化学構造解析の結果及び既知化合物の分光データとの比較から、今まで報告されていない新規化合物であることが確認された。生成物Ｇｈ−３２９１は、本明細書中で、「フォルモキサントンＤ」と呼ばれ、次の化学構造：
Figure 0005558408
を有する。
生成物Ｇｈ−１６３１は、化学構造解析の結果及び既知化合物の分光データとの比較から、今まで報告されていない新規化合物であることが確認された。生成物Ｇｈ−１６３１は、本明細書中で「フォルモキサントンＣ」と呼ばれ、次の化学構造：
Figure 0005558408
を有する。
生成物Ｇｈ−１０５０は、化学構造解析の結果及び既知化合物の分光データとの比較から、今まで報告されていない新規化合物であることが確認された。生成物Ｇｈ−１０５０は、本明細書中で「３α−ヒドロキシガンボゲリックアシッド」と呼ばれ、次の化学構造：
Figure 0005558408
を有する。
生成物Ｇｈ−２５０８及びＧｈ−２５０７は、化学構造解析の結果及び既知化合物の分光データとの比較から、今まで報告されていない２つの新規化合物であることが確認された。生成物Ｇｈ−２５０８及びＧｈ−２５０７は、次の化学構造：
Figure 0005558408
を有するＣ−２エピマーであり、本明細書中で、それぞれ「β−ガンボゲリックアシッド」及び「β−エピガンボゲリックアシッド」と呼ばれる。
生成物Ｇｈ−２６０７−Ｂ及びＧｈ−２６０７−１Ａは、化学構造解析の結果及び既知化合物の分光データとの比較から、今まで報告されていない２つの新規化合物であることが確認された。生成物Ｇｈ−２６０７−Ｂ及びＧｈ−２６０７−１Ａは、次の化学構造：
Figure 0005558408
を有するＣ−２エピマーであり、本明細書中で、それぞれ「フォルモキサントンＢ」及び「エピフォルモキサントンＢ」と呼ばれる。
画分１〜３から得られる１７種の新規化合物の化学構造を比較した後、本発明者らは、これら１７種の新規化合物は、共通の骨格構造を共有し、次式（Ｉ）：
Figure 0005558408
によって表すことができることを見出した。
式中、
Ｒ１及びＲ２は、一緒になって、
Figure 0005558408
からなる群から選択される部分を形成し、
Ｒ３は、３−メチル−２−ブテニル、１−ヒドロキシ−２，３−エポキシ−３−メチルブチル、２，３−エポキシ−３−メチルブチル、及び２，３−ジヒドロキシ−３−メチルブチルからなる群から選択され、且つ
Ｒ４は、３−カルボキシル−２Ｚ−ブテニル、３−カルボキシル−２Ｅ−ブテニル、３−カルボキシル−１Ｅ−ブテニルからなる群から選択され；
但し、次式：
Figure 0005558408
の化合物を除く。
前記の式（Ｉ）で示される化学構造によれば、本発明で得られる１７種の新規化合物は、当業者に周知の方法論によって化学的に合成することができる。
本発明において、アセトン抽出生成物ＴＳＢ−１４を、さらに、図６に示すような溶出プロフィールが得られるような別の溶出条件下で実施されるセミ分取ＲＰ−ＨＰＬＣに供した。図６の溶出プロフィールを、次いで、５つの領域に分割した。その領域Ａは０〜１３．７分の保持時間に対応し、領域Ｂは１３．７〜２０．４分の保持時間の対応し、領域Ｃは２０．４〜２６．１分の保持時間に対応し、領域Ｄは２６．１〜３４．９分の保持時間に対応し、領域Ｅは３４．９〜５３．８分の保持時間に対応する。
図６に示す５つの分割領域に基づいて、アセトン抽出生成物ＴＳＢ−１４を、セミ分取ＲＰ−ＨＰＬＣによって分画して、それぞれ５つの分割領域Ａ〜Ｅに対応する５つの溶出物を得た。こうして集めた５つの溶出物Ａ〜Ｅを、それぞれ、集めた溶出物をＨ２Ｏと酢酸エチルとに分配する処理；ＴＦＡを除去するためＨ２Ｏで洗浄した後に、有機層を無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、真空ロータリーエバポレーターを使用して有機溶媒を除去する処理に供した。こうして得られた５つの対応する粗画分生成物Ａ〜Ｅを、続いて、５つの粗分画生成物のそれぞれに関して一定の溶出プロフィールが得られるように、それぞれ、セミ分取ＲＰ−ＨＰＬＣで精製し、濃縮し、Ｈ２Ｏと酢酸エチルとに分配した。精製後に、生成物ＴＳＢ−１４から５つの分画生成物、すなわち、ＴＳＢ−１４Ａ、ＴＳＢ−１４Ｂ、ＴＳＢ−１４Ｃ、ＴＳＢ−１４Ｄ、及びＴＳＢ−１４Ｅを得た。そのセミ分取ＲＰ−ＨＰＬＣの溶出プロフィールを、それぞれ、図７〜１１に示す。
図７〜１１に示す溶出プロフィールを図１のそれと比較すると、分画生成物ＴＳＢ−１４Ａ、ＴＳＢ−１４Ｂ、ＴＳＢ−１４Ｃ、ＴＳＢ−１４Ｄ、及びＴＳＢ１４Ｅは、それぞれ、図１に示すピーク１〜１２、ピーク１３〜１５、ピーク１６〜２０、ピーク２１〜２４、及びピーク２５〜３５に対応するピークを含むことが見出され、分画生成物ＴＳＢ−１４Ａは、生成物Ｇｈ−３２６１、Ｇｈ−３２７１、Ｇｈ−３２７２、Ｇｈ−３３１１、Ｇｈ−３３３２、Ｇｈ−１０３６、Ｇｈ−３２９１、Ｇｈ−６３１、Ｇｈ−１０５２、Ｇｈ−３３５１、Ｇｈ−３３５３及びＧｈ−３３５２を含み；分画生成物ＴＳＢ−１４Ｂは、生成物Ｇｈ−４７、Ｇｈ−４６０２及びＧｈ−４６０１を含み；分画生成物ＴＳＢ−１４Ｃは、生成物Ｇｈ−１６０１−Ａ、Ｇｈ−１０５０、Ｇｈ−１６０２、Ｇｈ−１６３１及びＧｈ−２６４１−１を含み；分画生成物ＴＳＢ−１４Ｄは、生成物Ｇｈ−２５０１、Ｇｈ−２６４２、Ｇｈ−２５０７及びＧｈ−２５０５を含み；分画生成物ＴＳＢ−１４Ｅは、生成物Ｇｈ−２５０８、Ｇｈ−２６０３−１、Ｇｈ−２６０３−２、Ｇｈ−１６４１、Ｇｈ−１６４２、Ｇｈ−２６０５、Ｇｈ−２６０６、Ｇｈ−２６０７−Ｂ、Ｇｈ−２６０７−１Ａ、Ｇｈ−２３０１及びＧｈ−４３０１を含むことを示している。
本発明において、ガンボージ樹脂からのアセトン抽出生成物ＴＳＢ−１４から得られる１７種の精製された新規化合物及び５つの分画生成物ＴＳＢ−１４Ａ〜ＴＳＢ−１４Ｅは、ｉｎ ｖｉｔｒｏ抗がん試験に供され、腫瘍／がん細胞（ヒト乳房腺癌細胞、ヒト結腸腺癌細胞、ヒト前骨髄球性白血病細胞、ヒト肝細胞癌細胞、ヒト肺癌細胞、及びヒト組織球リンパ腫細胞など）の成長に対して阻害活性を示すことが見出された。とりわけ、分画生成物ＴＳＢ−１４Ａ〜ＴＳＢ−１４Ｅは、腫瘍／がん細胞の成長を阻害する上でアセトン抽出生成物ＴＳＢ−１４に比べてより有効であることが見出された。
したがって、精製された１７種の新規化合物及び５つの分画生成物ＴＳＢ−１４Ａ〜ＴＳＢ−１４Ｅ、並びにアセトン抽出生成物ＴＳＢ−１４それ自体は、がん療法での使用に関して潜在能力を有すると考えられる。
アセトン抽出生成物ＴＳＢ−１４及びそれから得られる５つの分画生成物ＴＳＢ−１４Ａ〜ＴＳＢ−１４Ｅを、さらに、シクロオキシゲナーゼ−２（ＣＯＸ−２）；タンパク質セリン／トレオニンキナーゼＡＵＲＫＢ（Ａｕｒｏｒａ−Ｂキナーゼ）及びＣＤＣ２／ＣＣＮＢ１（ｃｄｋ１／サイクリンＢ）；タンパク質チロシンキナーゼＡＢＬ１（ＡＢＬ）、上皮成長因子受容体（ＥＧＦＲ）、ＥＲＢＢ２（ＨＥＲ２）、インスリン受容体、及びＫＤＲ（ＶＥＧＦＲ−２）を含む９種のがん関連タンパク質に対するそれらの活性及び結合形成能力について試験した。得られた結果は、アセトン抽出生成物ＴＳＢ−１４及びそれから得られる５つの分画生成物ＴＳＢ−１４Ａ〜ＴＳＢ−１４Ｅは、被験がん関連タンパク質に対して有意な阻害活性を示すことを示している。９つの被験がん関連タンパク質は、種々の腫瘍／がん（例えば、結腸直腸がん、胃がん、非小細胞肺がん、脳がん、甲状腺がん、上咽頭がん、慢性骨髄球性白血病、Ｔ−細胞急性リンパ芽球性白血病、肺がん、結腸がん、乳がん、白血病、肝臓がん、卵巣がん、腎臓がん、膵臓がん、及び子宮内膜がん）と関連することが知られているので、アセトン抽出生成物ＴＳＢ−１４及びそれから得られる５つの分画生成物ＴＳＢ−１４Ａ〜ＴＳＢ−１４Ｅは、腫瘍／がんの治療で使用できると考えられる。
したがって、本発明は、ガンボージ樹脂から精製され、且つ下記の化合物からなる群から選択される化合物を提供する。
（１）式：
Figure 0005558408
の化合物、
（２）式：
Figure 0005558408
の化合物、
（３）式：
Figure 0005558408
の化合物、
（４）式：
Figure 0005558408
の化合物、
（５）式：
Figure 0005558408
の化合物、
（６）式：
Figure 0005558408
の化合物、
（７）式：
Figure 0005558408
の化合物、
（８）式：
Figure 0005558408
の化合物、
（９）式：
Figure 0005558408
の化合物、
（１０）式：
Figure 0005558408
の化合物、
（１１）式：
Figure 0005558408
の化合物、
（１２）式：
Figure 0005558408
の化合物、
（１３）式：
Figure 0005558408
の化合物、
（１４）式：
Figure 0005558408
の化合物、
（１５）式：
Figure 0005558408
の化合物、
（１６）式：
Figure 0005558408
の化合物、及び、
（１７）式：
Figure 0005558408
の化合物。
本発明は、また、ガンボージ樹脂の分画生成物を提供し、分画生成物は、
ガンボージ樹脂を粉末に微粉砕し、続いて前記微粉砕粉末をアセトンで抽出することによって、ガンボージ樹脂からアセトン抽出生成物を得るステップ；
アセトン抽出生成物をセミ分取ＲＰ−ＨＰＬＣによって分画して、５つの溶出物を得るステップ；
別々に、５つの溶出物を濃縮して、続いて、Ｈ２Ｏ及び酢酸エチル中に分配して、５つの粗分画生成物を得るステップ；並びに、
別々に、５つの粗分画生成物をセミ分取ＲＰ−ＨＰＬＣによって精製して、濃縮して、Ｈ２Ｏ及び酢酸エチルに分配して、５つの粗分画生成物のそれぞれについて一定の溶出プロフィールを得るステップ；
を含む方法によって調製され、
前記分画生成物が、
（１）フォルモキサントンＡ、並びに下位項目に定義される前記（７）、（８）、（９）、（１０）、（１１）、（１２）、（１３）、（１４）、（１５）、（１６）及び（１７）の化合物を含む分画生成物；
（２）イソモレリックアシッド、モレリックアシッド、及びイソモレリノールを含む分画生成物；
（３）３０−ヒドロキシエピガンボジックアシッド、３０−ヒドロキシガンボジックアシッド、ネオガンボジックアシッド、並びに下位項目に定義される前記（５）及び（６）の化合物を含む分画生成物；
（４）イソモレリン、イソガンボゲニックアシッド、ガンボゲニックアシッド、及び下位項目に定義される前記（４）の化合物を含む分画生成物；
（５）ガンボジックアシッド、エピガンボジックアシッド、イソガンボジックアシッド、エピイソガンボジックアシッド、デスオキシモレリン、デスオキシガンボゲニン、ガンボゲリックアシッド、エピガンボゲリックアシッド、並びに下位項目に定義される前記（１）、（２）及び（３）の化合物を含む分画生成物からなる群から選択される。
本発明は、さらに、前記の化合物、前記の分画生成物、又はそれらの組合せを含む医薬組成物を提供する。
本発明は、また、細胞を、前記の化合物、前記の分画生成物、又はそれらの組合せと接触させることを含む、腫瘍／がん細胞の成長を阻害する方法を提供する。
加えて、本発明は、さらに、
（１）前記の化合物；
（２）前記の分画生成物；及び
（３）ガンボージ樹脂を粉末に微粉砕し、続いて前記微粉砕粉末をアセトンで抽出することによって、ガンボージ樹脂から得られるアセトン抽出生成物、
の少なくとも１種を含む抗がん組成物を提供する。
本発明は、また、対象に
（１）前記の化合物；
（２）前記の分画生成物；及び
（３）ガンボージ樹脂を粉末に微粉砕し、続いて前記微粉砕粉末をアセトンで抽出することによって、ガンボージ樹脂から得られるアセトン抽出生成物、
の少なくとも１種を投与することを含む、対象におけるがんを治療する方法を提供する。
本発明において、アセトン抽出生成物ＴＳＢ−１４及びそれから得られる５つの分画生成物ＴＳＢ−１４Ａ〜ＴＳＢ−１４Ｅは、鎮痛及び抗炎症効果を有することがさらに見出された。
したがって、本発明は、
（１）ガンボージ樹脂を粉末に微粉砕し、続いて前記微粉砕粉末をアセトンで抽出することによって、ガンボージ樹脂から得られるアセトン抽出生成物；及び
（２）前記の分画生成物、
の少なくとも１種を含む鎮痛組成物を提供する。
本発明は、また、
（１）ガンボージ樹脂を粉末に微粉砕し、続いて前記微粉砕粉末をアセトンで抽出することによって、ガンボージ樹脂から得られるアセトン抽出生成物；及び
（２）前記の分画生成物、
の少なくとも１種を含む抗炎症組成物を提供する。
本発明による医薬組成物は、当業者に周知の技術を使用して非経口、局所、又は経口投与に適した剤形に製剤化することができ、限定はされないが、注射剤（例えば、無菌の水性溶液剤又は分散剤）、無菌散剤、錠剤、トローチ剤、丸剤、カプセル剤などが含まれる。
本発明による医薬組成物は、次の経路；静脈内注射、筋内注射、及び皮下注射、の少なくとも１種によって、非経口的に投与することができる。
本発明による好ましい実施形態において、医薬組成物は、経口投与に適した剤形に製剤化される。
本発明による医薬組成物は、付加的に、薬物製造の技術分野で広く採用される薬学的に許容される担体を含むことができる。例えば、薬学的に許容される担体は、次の物質：溶媒、乳化剤、懸濁化剤、分解剤、結合形成剤、添加剤、安定化剤、キレート化剤、賦形剤、ゲル化剤、保存剤、滑沢剤、吸収遅延剤、可塑剤、充填剤、崩壊剤、界面活性剤、増粘剤、リポソームなどの１種又は複数を含むことができる。
本発明による医薬組成物の投与量及び投与頻度は、次の因子：治療すべき疾患の重症度、投与経路、並びに治療すべき対象の体重、年齢、身体状態及び応答に応じて変えることができる。例えば、本発明による医薬組成物の１日量は、体重ｋｇ当たり２．１〜３．０ｍｇでよく、単回投与又は数回の投与で投与することができる。
本発明は、以下の実施例を参照してより詳細に説明されるが、実施例は、単に例示の目的で提供されるものであり、本発明の範囲を限定するものと解釈されない。
（一般手順）
融点は、微量融点測定装置（Ｙａｎａｃｏ、日本）を使用して測定した。
ＥＩＭＳスペクトル及びＨＲＥＩＭＳスペクトルは、ＭＡＴ−９５ＸＬ高分解能質量分析計で記録した。
ＦＡＢＭＳスペクトル及びＨＲＦＡＢＭＳスペクトルは、ＪＥＯＬ ＪＭＳＳＸ ＳＸ１０２Ａ質量分析計又はＦｉｎｎｉｇａｎ ＭＡＴ ９５ＸＬ質量分析計で記録した。
１Ｈ−ＮＭＲ及び１３Ｃ−ＮＭＲスペクトル、１Ｈ−１Ｈ ＣＯＳＹ（同種核相関分光法）スペクトル、ＨＭＱＣ（異種核多量子コヒーレンス）スペクトル、ＨＭＢＣ（異種核遠隔コヒーレンス）スペクトル、及びＮＯＥＳＹ（核オーバーハウザー効果分光法）スペクトルは、ＮＭＲ測定用溶媒としてＣＤＣｌ３又はアセトン−ｄ６を使用する、ＢＲＵＫＥＲ ＡＭ４００分光計、ＶＡＲＩＡＮ ＧＥＭＩＮＩ−４００分光計又はＢＲＵＫＥＲ ＡＤＶＡＮＣＥ ＤＭＸ−６００分光計で記録した。化学シフト（δ）は、基準に対するｐｐｍで表現する。
分析用逆相高速液体クロマトグラフィー（ＲＰ−ＨＰＬＣ）は、次の装置：日立Ｌ−７４００ ＵＶ検出器、日立Ｌ−７１００ポンプ、日立ＨＰＬＣ Ｄ−７０００型装置、カラムオーブン（Ｓｕｐｅｒ ＣＯ−１５０ Ｅｎｓｈｉｎｅ、台湾）、ガードカラム（ＳｅｃｕｒｉｔｙＧｕａｒｄカートリッジＣ８、サイズ：３．０ｍｍ×４．０ｍｍ、Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ、米国）、及び分析カラム（Ｌｕｎａ ３μ Ｃ８（２）１００Å、サイズ：４．６ｍｍ×１５０ｍｍ、Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ、米国）を使用して実施した。分析ＲＰ−ＨＰＬＣに関する操作条件は次の通りである：サンプル注入容積：５μＬ；移動相：０．０５％トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）（ａｑ．）／１００％アセトニトリル（３５：６５、ｖ／ｖ）；カラム流速：０．７５ｍＬ／分；カラムオーブン温度：３５℃；及び検出波長：３６０ｎｍ。
セミ分取ＲＰ−ＨＰＬＣは、次の装置：日立Ｌ−７４００ ＵＶ検出器、日立Ｌ−７１５０ポンプ、日立ＨＰＬＣ Ｄ−７０００型装置、カラムオーブン（Ｓｕｐｅｒ ＣＯ−１５０ Ｅｎｓｈｉｎｅ、台湾）、ガードカラム（ＳｅｃｕｒｉｔｙＧｕａｒｄカートリッジＣ１２、サイズ：１０ｍｍ×１０ｍｍ、Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ、米国）、及び分析カラム（Ｓｙｎｅｒｇｉ ４μ Ｃ１２ ８０Å、サイズ：１０ｍｍ×１５０ｍｍ、Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ、米国）を使用して実施した。セミ分取ＲＰ−ＨＰＬＣに関する操作条件は次の通りである：サンプル注入容積：２５０μＬ；移動相は実験に応じて選択；勾配溶出は実験に応じて選択；カラム流速：４．５ｍＬ／分、カラムオーブン温度：２７℃；検出波長：３６０ｎｍ。
（例１．分析ＲＰ−ＨＰＬＣによる、ガンボージ樹脂からのアセトン抽出生成物（ＴＳＢ−１４）の分析）
米国特許第７１３８４２８号の例１により調製された、ガンボージ樹脂からのアセトン抽出生成物、すなわちＴＳＢ−１４を、分析ＲＰ−ＨＰＬＣによる分析に供し、その中に含まれる化学成分（単数又は複数）を測定した。
簡潔には、１．０ｍｇの生成物ＴＳＢ−１４を、１ｍＬのアセトンに溶解し、次いで、前記セクションの「一般手順」に記載の道筋に沿って分析ＲＰ−ＨＰＬＣによる分析に供し、図１に示すような溶出プロフィールを得た。
図１を参照すると、生成物ＴＳＢ−１４の溶出プロフィールには、３５の主なピーク（１から３５まで番号付けられた）が０〜８０分の保持時間内に存在する。図１に示した結果により、本発明者らは、生成物ＴＳＢ−１４から３５種の化合物を単離できる可能性があると仮定した。この仮定を実証するために、生成物ＴＳＢ−１４を次の実験に供した。
（例２．生成物ＴＳＢ−１４から精製化合物の調製）
Ａ．生成物ＴＳＢ−１４のセミ分取ＲＰ−ＨＰＬＣによる分析
３ｇの生成物ＴＳＢ−１４を、３０ｍＬのアセトン／アセトニトリル（ｖ／ｖ＝１：９）に溶解し、次いで、前記セクションの「一般手順」に記載の道筋に沿って、０．０５％ＴＦＡ（ａｑ．）／６５％アセトニトリル（ａｑ．）（３５：６５）を含む移動相を使用する、セミ分取ＲＰ−ＨＰＬＣによる分析に供した。こうして得られた溶出プロフィールを図２に示す。
図１及び２に示す２つの溶出プロフィールを比較し、図１中で確認されるような主要ピーク１〜３５が、図２の溶出プロフィール中でも確認された。続いて、図２の溶出プロフィールを３つの領域、すなわち、０〜４２分の保持時間で溶出されるピーク１〜１２を含む領域１；４２〜１３５分の保持時間で溶出されるピーク１３〜２４を含む領域２；及び１３５〜２８０分の保持時間で溶出されるピーク２５〜３５を含む領域３に分割した。
Ｂ．画分１〜３の調製
３ｇの生成物ＴＳＢ−１４を、前記セクションＡに記載のセミ分取ＲＰ−ＨＰＬＣによる分析に供し、図２に示す溶出プロフィールの領域１、２及び３にそれぞれ対応する３つの溶出物を集め、次いで、それぞれ、集めた溶出物をＨ２Ｏと酢酸エチルに分配する処理；Ｈ２Ｏで洗浄してＴＦＡを除去した後に、有機層を無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、有機溶媒を、真空ロータリーエバポレーターを使用して除去する処理に供した。
集めた３つの溶出物を前記のように処理した後、３つの対応する画分１〜３を得た。
Ｃ．画分１〜３のセミ分取ＲＰ−ＨＰＬＣによる分析
前記セクションＢで得られた各画分１〜３の１００ｍｇを１ｍＬのアセトンに溶解し、続いて前記セクションＡに記載のセミ分取ＲＰ−ＨＰＬＣによる分析に供した。このようにして得られた画分１〜３の溶出プロフィールを図３〜５に示す。
図３、４及び５を図２と比較して、ピーク１〜１２、ピーク１３〜２４、及びピーク２５〜３５が、それぞれ、画分１、２及び３に関するセミ分取ＲＰ−ＨＰＬＣの溶出プロフィール中に存在することを、明らかに認めることができる。
Ｄ．画分１からの精製化合物の調製
前記セクションＢで得られるような画分１の１００ｍｇを１ｍＬのアセトンに溶解し、続いて前記Ａに記載のセミ分取ＲＰ−ＨＰＬＣによる分析に供し、図３に示すような画分１に関するセミ分取ＲＰ−ＨＰＬＣの溶出プロフィール中の溶出ピーク１〜１２にそれぞれ対応する溶出物１〜１２を集めた。
溶出物１〜１２を大量に得るために、前述のセミ分取ＲＰ−ＨＰＬＣ分析による画分１の溶出を５０〜１００回繰り返した。こうして集めた溶出物１〜１２を、個々に４Ｌ褐色ガラス瓶に入れ、続いて真空ロータリーエバポレーター中で濃縮し、それによって濃縮物１〜１２を得て、そのそれぞれを順次、次のように処理、すなわち濃縮物をＨ２Ｏと酢酸エチルに分配し；Ｈ２Ｏで洗浄してＴＦＡを除去した後に、有機層を無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、有機溶媒を、真空ロータリーエバポレーターを使用して除去した。
濃縮物１〜１２を前記のように処理した後、１２の粗生成物を得て、そのそれぞれを、さらに次のように精製した：１００ｍｇの粗生成物を１．０ｍＬのアセトンに溶解し、次いで、単一の溶出ピークだけを含む分析ＲＰ−ＨＰＬＣの溶出プロフィールが得られるように、前記セクション「一般手順」に記載の道筋に沿って分析ＲＰ−ＨＰＬＣによる分析に供した。得られた溶出プロフィールが単一ピークの存在を示すことに失敗した場合には、前記粗生成物の残りを、単一ピークを示す分析ＲＰ−ＨＰＬＣの溶出プロフィールが得られるまで前記処理を繰り返すことによって、さらなる精製に供した。
精製を完結した後、画分１の溶出物１〜１２から１２の精製生成物を得て、それらを、それぞれＧｈ−３２６１、Ｇｈ−３２７１、Ｇｈ−３２７２、Ｇｈ−３３１１、Ｇｈ−３３３２、Ｇｈ−１０３６、Ｇｈ−３２９１、Ｇｈ−６３１、Ｇｈ−１０５２、Ｇｈ−３３５１、Ｇｈ−３３５３、及びＧｈ−３３５２と称した。これら１２の精製生成物の得られた重量を表１に要約する。
Figure 0005558408
Ｅ．画分２からの精製化合物の調製
前記セクションＢで得られた画分２の１００ｍｇを１ｍＬのアセトンに溶解し、続いて前記セクションＡに記載のセミ分取ＲＰ−ＨＰＬＣによる分析に供し、図４に示すような画分２に関するセミ分取ＲＰ−ＨＰＬＣの溶出プロフィール中の溶出ピーク１３〜２４にそれぞれ対応する溶出物１３〜２４を集めた。
溶出物１３〜２４を大量に得るために、前述のセミ分取ＲＰ−ＨＰＬＣ分析による画分２の溶出を５０〜１００回繰り返した。こうして集めた溶出物１３〜２４を、個々に４Ｌ褐色ガラス瓶に入れ、続いて真空ロータリーエバポレーター中で濃縮し、それによって濃縮物１３〜２４を得て、そのそれぞれを順次、分配による分離、及び前記セクションＤに記載の手順による精製に供した。
精製を完結した後、画分２の溶出物１３〜２４から１２の精製生成物を得て、それらを、それぞれＧｈ−４７、Ｇｈ−４６０２、Ｇｈ−４６０１、Ｇｈ−１６０１−Ａ、Ｇｈ−１０５０、Ｇｈ−１６０２、Ｇｈ−１６３１、Ｇｈ−２６４１−１、Ｇｈ−２５０１、Ｇｈ−２６４２、Ｇｈ−２５０７、及びＧｈ−２５０５と称した。これら１２の精製生成物の得られた重量を表２に要約する。
Figure 0005558408
Ｆ．画分３からの精製化合物の調製
前記セクションＢで得られた画分３の１００ｍｇを１ｍＬのアセトンに溶解し、続いて前記セクションＡに記載のセミ分取ＲＰ−ＨＰＬＣによる分析に供し、図５に示すような画分３に関するセミ分取ＲＰ−ＨＰＬＣの溶出プロフィール中の溶出ピーク２５〜３５にそれぞれ対応する溶出物２５〜３５を集めた。
溶出物２５〜３５を大量に得るために、前述のセミ分取ＲＰ−ＨＰＬＣ分析による画分３の溶出を５０〜１００回繰り返した。こうして集めた溶出物２５〜３５を、個々に４Ｌ褐色ガラス瓶に入れ、続いて真空ロータリーエバポレーター中で濃縮し、それによって濃縮物２５〜３５を得て、そのそれぞれを順次、分配による分離、及び前記セクションＤに記載の手順による精製に供した。
精製を完結した後、画分３の溶出物２５〜３５から１１の精製生成物を得て、それらを、それぞれＧｈ−２５０８、Ｇｈ−２６０３−１、Ｇｈ−２６０３−２、Ｇｈ−１６４１、Ｇｈ−１６４２、Ｇｈ−２６０５、Ｇｈ−２６０６、Ｇｈ−２６０７−Ｂ、Ｇｈ−２６０７−１Ａ、Ｇｈ−２３０１、及びＧｈ−４３０１と称した。これら１１の精製生成物の得られた重量を表３に要約する。
Figure 0005558408
（例３．画分１〜３から単離、精製された化合物の同定及び特徴づけ）
前の例２で画分１〜３から得られるような精製された３５種の生成物の物理的及び化学的特性を、融点（ｍｐ）測定、１Ｈ−ＮＭＲ、１３Ｃ−ＮＭＲ、１Ｈ−１Ｈ ＣＯＳＹ、ＨＭＱＣ、ＨＭＢＣ、ＮＯＥＳＹ、ＥＩＭＳ、ＨＲＥＩＭＳ、ＦＡＢＭＳ、及びＨＲＦＡＢＭＳを含む、前記セクション「一般手順」に示した方法論により分析した。こうして得られた実験データを以下に要約する。
１．生成物Ｇｈ−４７
画分２の溶出物１３から精製された生成物Ｇｈ−４７は、次の特性を有すると判定された：
黄色薄片状結晶；ｍｐ２０４〜２０９℃。
EIMS m/z (相対強度): 560 [M]+ (100), 545 (47), 532 (22), 517 (36), 405 (44), 389 (11), 363 (24), 349 (17), 307 (12), 287 (22), 285 (16), 245 (15), 215 (12), 189 (5).
1H-NMR (400 MHz, CDCl3): d 7.56 (1H, d, J=6.9 Hz), 6.63 (1H, d, J=9.6 Hz), 5.51 (1H, d, J=9.6 Hz), 5.12 (1H, dd, J=13.6, 6.8 Hz), 3.52 (1H, dd, J=6.2, 4.7 Hz), 3.26 (2H, d, J=7.4 Hz), 2.66 (1H, m), 2.55 (2H, m), 2.35 (1H, dd, J=13.4, 4.6 Hz), 1.75 (3H, s), 1.72 (3H, s), 1.65 (3H, s), 1.44 (3H, s), 1.43 (3H, s), 1.35 (3H, s), 1.30 (3H, s).
13C-NMR (100 MHz, CDCl3): d 200.93, 178.91, 171.86, 161.10, 157.64, 157.28, 136.97, 135.39, 133.35, 131.70, 128.63, 126.18, 122.12, 115.44, 108.27, 103.18, 100.49, 90.71, 83.71, 83.64, 78.65, 49.06, 46.88, 29.95, 28.93, 28.33, 25.71, 25.31, 21.62, 18.09, 11.34.
得られたスペクトルデータにより、生成物Ｇ−４７は、次の化学構造：
Figure 0005558408
を有する既知化合物、すなわちイソモレリックアシッドであることが確認された。
２．生成物Ｇｈ−６３１
画分１の溶出物８から精製された生成物Ｇｈ−６３１は、次の特性を有すると判定された：
黄色針状結晶；ｍｐ１１５〜１１８℃。
EIMS m/z (相対強度): 394 [M]+ (66), 393 (23), 379 (100), 339 (30), 323 (16), 311 (13), 295 (5), 278 (10), 203 (4), 162 (7).
1H-NMR (600 MHz, アセトン-d6): d 13.09 (1H, s, OH-1), 7.40 (1H, s, H-8), 6.55 (1H, d, J=10.0 Hz, H-11), 6.32 (1H, s, H-2), 5.87 (1H, d, J=10.0 Hz, H-12), 5.36 (H, m, H-17), 3.55 (2H, d, J=7.3 Hz, H-16), 1.84 (3H, s, H-20), 1.63 (3H, s, H-19), 1.48 (6H, s, H-14, H-15).
13C-NMR (150 MHz, アセトン-d6): d 181.24 (C=O), 163.41 (C-3), 162.26 (C-1), 155.56 (C-4a), 146.94 (C-6), 146.43 (C-10a), 134.42 (C-18), 132.30 (C-12), 131.77 (C-5), 123.33 (C-17), 122.08 (C-11), 119.03 (C-7), 115.20 (C-8a), 113.15 (C-8), 107.54 (C-4), 103.26 (C-9a), 98.40 (C-2), 78.84 (C-13), 28.26 (C-14, 15), 25.93 (C-19), 22.16 (C-16), 18.00 (C-20).
得られたスペクトルデータにより、生成物Ｇ−６３１は、次の化学構造：
Figure 0005558408
を有する既知化合物、すなわちフォルモキサントンＡであることが確認された。
３．生成物Ｇｈ−４６０１
画分２の溶出物１５から精製された生成物Ｇｈ−４６０１は、次の特性を有すると判定された：
橙色粉末；ｍｐ１３７〜１３９℃。
EIMS m/z (相対強度): 546 [M]+ (100), 531 (18), 518 (44), 503 (40), 485 (9), 433 (7), 405 (33), 391 (10), 363 (19), 349 (13), 307 (10), 287 (25), 245 (8), 231 (18), 214 (12), 189 (5), 105 (6).
1H-NMR (400 MHz, CDCl3): d 12.68 (1H, s), 7.41 (1H, d, J=7.2 Hz), 6.59 (1H, d, J=10.0 Hz), 5.49 (1H, d, J=10.0 Hz), 5.19 (1H, t, J=7.0 Hz), 4.73 (1H, t, J=8.0 Hz), 3.61 (2H, q, J=10.2 Hz), 3.49 (1H, d, J=4.7 Hz), 3.47 (1H, d, J=4.7 Hz), 3.32 (1H, dd, J=14.5, 6.8 Hz), 3.24 (1H, dd, J=14.3, 7.7 Hz), 2.60 (1H, d, J=7.7 Hz), 2.48 (1H, d, J=9.4 Hz), 2.31(1H, dd, J=13.5, 4.7 Hz), 1.74, 1.68, 1.64, 1.25, 1.01 (それぞれ 3H, s), 1.41 (6H, s).
13C-NMR (100 MHz, CDCl3): d 203.35, 180.33, 161.06, 157.80, 157.44, 138.01, 134.40, 133.63, 131.87, 126.31, 121.90, 118.20, 115.50, 108.44, 103.00, 100.72, 90.48, 84.50, 83.41, 78.66, 67.92, 49.09, 47.00, 30.09, 28.96, 28.28, 28.21, 25.71, 25.29, 21.57, 18.14, 12.49.
得られたスペクトルデータにより、生成物Ｇ−４６０１は、次の化学構造：
Figure 0005558408
を有する既知化合物、すなわちイソモレリノールであることが確認された。
４．生成物Ｇｈ−４６０２
画分２の溶出物１４から精製された生成物Ｇｈ−４６０２は、次の特性を有すると判定された：
橙色粉末；ｍｐ１０６〜１０９℃。
EIMS m/z (相対強度): 560 [M]+ (100), 545 (56), 532 (63), 517 (48), 487 (12), 433 (9), 405 (81), 391 (22), 363 (38), 349 (24), 307 (18), 287 (64), 245 (40), 231 (21), 215 (20), 189 (10).
1H-NMR (400 MHz, CDCl3): d 12.71 (1H, s), 7.51 (1H, d, J=6.8 Hz), 6.49 (1H, d, J=10.0 Hz), 6.05 (1H, t, J=7.0 Hz), 5.39 (1H, d, J=10.0 Hz), 4.99 (1H, d, J=6.0 Hz), 3.45 (1H, dd, J=6.4, 4.7 Hz), 3.27 (1H, m), 3.08 (1H, m), 2.97 (2H, sept, J=8.0 Hz), 2.49 (1H, d, J=9.3 Hz), 2.28 (1H, dd, J=13.4, 4.5 Hz), 1.70, 1.69, 1.67, 1.60, 1.36, 1.34, 1.26 (それぞれ 3H, s).
13C-NMR (100 MHz, CDCl3): d 203.47, 179.07, 171.74, 161.22, 157.65, 157.34, 138.46, 135.39, 133.42, 131.46, 127.64, 126.00, 122.22, 115.44, 108.04, 103.16, 100.55, 90.93, 83.82, 78.55, 49.01, 46.80, 29.87, 29.26, 28.82, 28.40, 28.20, 25.68, 25.14, 21.57, 20.63, 18.06.
得られたスペクトルデータにより、生成物Ｇ−４６０２は、次の化学構造：
Figure 0005558408
を有する既知化合物、すなわちモレリックアシッドであることが確認された。
５．生成物Ｇｈ−２３０１
画分３の溶出物３４から精製された生成物Ｇｈ−２３０１は、次の特性を有すると判定された：
橙色針状結晶；ｍｐ１０９〜１１０℃。
EIMS m/z (相対強度): 530 [M]+ (100), 515 (22), 502 (92), 488 (30), 487 (83), 459 (11), 433 (20), 405 (49), 391 (15), 363 (24), 349 (16), 307 (13), 287 (27), 231 (13), 215 (37), 189 (6).
1H-NMR (400 MHz, CDCl3): d 12.89 (1H, s), 7.45 (1H, d, J=7.2 Hz), 7.27 (1H, s), 6.65 (1H, d, J=10.4 Hz), 5.53 (1H, d, J=9.6 Hz), 5.30 (1H, br d, J=6.0 Hz), 4.43 (1H, br s), 3.49 (1H, m), 3.32 (2H, m), 2.50 (2H, m), 2.34 (1H, m), 1.78, 1.71, 1.68, 1.59, 1.33, 1.03 (それぞれ 3H, s), 1.45 (6H, s).
得られたスペクトルデータにより、生成物Ｇ−２３０１は、次の化学構造：
Figure 0005558408
を有する既知化合物、すなわちデスオキシモレリンであることが確認された。
６．生成物Ｇｈ−４３０１
画分３の溶出物３５から精製された生成物Ｇｈ−４３０１は、次の特性を有すると判定された：
黄色ガム状固体；ｍｐ８５〜８８℃。
EIMS m/z (相対強度): 600 [M]+ (100), 572 (77), 557 (21), 531 (10), 503 (60), 475 (26), 449 (33), 393 (9), 357 (12), 351 (26), 323 (9), 309 (16), 295 (45), 281 (12), 253 (53), 231 (18), 215 (40), 189 (10), 177 (18), 173 (12), 69 (65).
1H-NMR (600 MHz, CDCl3): d12.92 (1H, s), 7.41 (1H, d, J=7.0 Hz), 6.45 (1H, s), 5.19 (2H, m), 5.03 (1H, m), 4.39 (1H, m), 3.45 (1H, dd, J=6.9, 4.5 Hz), 3.36 (4H, m), 2.52 (2H, m), 2.43 (1H, d, J=9.4 Hz), 2.30 (1H, dd, J=13.5, 4.7Hz), 2.05 (4H, m), 1.78 (3H, s), 1.74 (3H, s), 1.69 (3H, s), 1.654 (3H, s), 1.645 (3H, s), 1.56 (3H, s), 1.33 (3H, s), 1.30 (1H, m), 1.25 (3H, s), 0.98 (3H, s).
13C-NMR (150 MHz, CDCl3): d 203.55, 179.65, 162.98, 160.12, 156.29, 139.04, 134.91, 133.88, 133.80, 133.75, 131.88, 123.74, 121.86, 121.33, 117.76, 107.13, 106.39, 100.70, 90.12, 84.50, 83.11, 49.06, 46.90, 39.66, 30.03, 29.02, 28.78, 26.32, 25.70, 25.63, 25.49, 25.40, 22.05, 21.11, 18.01, 17.63, 16.68, 16.19.
得られたスペクトルデータにより、生成物Ｇ−４３０１は、次の化学構造：
Figure 0005558408
を有する既知化合物、すなわちデスオキシガンボゲニンであることが確認された。
７．生成物Ｇｈ−２６０５
画分３の溶出物３０から精製された生成物Ｇｈ−２６０５は、次の特性を有すると判定された：
黄色粉末；ｍｐ２０５〜２０８℃。
EIMS m/z (相対強度): 628 [M]+ (22), 600 (15), 545 (100), 517 (23), 473 (17), 431 (7), 389 (9), 355 (10), 295 (5), 271 (7), 245 (14), 215 (23), 189 (11), 69 (9).
1H-NMR (600 MHz, CDCl3): d 12.73 (1H, s), 7.52 (1H, d, J=6.9 Hz), 6.57 (1H, d, J=10.2 Hz), 6.08 (1H, dt, J=7.5, 1.3 Hz), 5.35 (1H, d, J=10.2 Hz), 5.01 (2H, m), 3.46 (1H, dd, J=6.8, 4.6 Hz), 3.27 (1H, dd, J=14.7, 8.1 Hz), 3.12 (1H, br dd, J=14.7, 5.3 Hz), 2.93 (2H, t, J=7.3 Hz), 2.49 (1H, d, J=9.3 Hz), 2.29 (1H, dd, J=13.4, 4.7 Hz), 1.98 (2H, m), 1.72 (3H, d, J=1.3Hz), 1.71 (1H, m), 1.70 (3H, s), 1.67 (3H, s), 1.62 (3H, s), 1.60 (3H, s), 1.56 (1H, m), 1.52 (3H, s), 1.35 (3H, s), 1.34 (1H, m), 1.27 (3H, s).
13C-NMR (150 MHz, CDCl3): d 203.28, 178.85, 170.88, 161.49, 157.55, 157.35, 137.90, 135.31, 133.34, 131.77, 131.49, 127.70, 124.49, 123.83, 122.25, 115.87, 107.60, 102.73, 100.44, 90.91, 83.92, 83.78, 81.28, 49.00, 46.81, 41.97, 29.85, 29.26, 28.84, 27.69, 25.64, 25.62, 25.16, 22.73, 21.60, 20.73, 18.06, 17.60.
得られたスペクトルデータにより、生成物Ｇｈ−２６０５は、次の化学構造：
Figure 0005558408
を有する既知化合物、すなわちガンボジックアシッドであることが確認された。
８．生成物Ｇｈ−２６０６
画分３の溶出物３１から精製された生成物Ｇｈ−２６０６は、次の特性を有すると判定された：
黄色粉末；ｍｐ８８〜９２℃。
EIMS m/z (相対強度): 628 [M]+ (24), 600 (11), 545 (100), 517 (21), 473 (12), 431 (4), 389 (8), 347 (6), 245 (7), 215 (14), 189 (5), 69 (4).
1H-NMR (600 MHz, CDCl3): d 12.74 (1H, s), 7.53 (1H, d, J=6.9Hz), 6.56 (1H, d, J=10.0 Hz), 6.10 (1H, dt, J=7.4, 1.2 Hz), 5.38 (1H, d, J=10.0 Hz), 5.07 (1H, br t, J=7.1 Hz), 5.01 (1H, br t, J=6.3 Hz), 3.45 (1H, dd, J=6.5, 4.9 Hz), 3.29 (1H, dd, J=14.6, 8.3 Hz), 3.13 (1H, br dd, J=14.6, 4.3 Hz), 2.94 (1H, dd, J=16.1, 7.7 Hz), 2.87 (1H, dd, J=16.3, 6.3 Hz), 2.49 (1H, d, J=9.3 Hz), 2.28 (1H, dd, J=13.4, 4.7 Hz), 2.05 (2H, m), 1.75 (1H, m), 1.72 (3H, s), 1.71 (3H, s), 1.68 (3H, s), 1.64 (3H, s), 1.62 (1H, m), 1.61 (3H, s), 1.55 (3H, s), 1.35 (1H, m), 1.31 (3H, s), 1.26 (3H, s).
13C-NMR (150 MHz, CDCl3): d 203.25, 178.92, 170.68, 161.33, 157.59, 157.33, 137.73, 135.51, 133.21, 131.99, 131.39, 127.76, 124.76, 123.82, 122.24, 115.88, 107.79, 102.88, 100.51, 90.98, 83.86, 83.67, 81.10, 49.00, 46.82, 41.69, 29.91, 29.26, 28.78, 26.91, 25.67, 25.60, 25.20, 22.73, 21.61, 20.71, 18.12, 17.58.
得られたスペクトルデータにより、生成物Ｇｈ−２６０６は、次の化学構造：
Figure 0005558408
を有する既知化合物、すなわちエピガンボジックアシッドであることが確認された。
９．生成物Ｇｈ−１６４１
画分３の溶出物２８から精製された生成物Ｇｈ−１６４１は、次の特性を有すると判定された：
黄色粉末；ｍｐ５３〜５６℃。
EIMS m/z (相対強度): 628 [M]+ (32), 600 (6), 545 (100), 517 (12), 473 (6), 431 (2), 389 (4), 355 (5), 245 (8), 215 (11), 189 (3), 69 (5).
1H-NMR (600 MHz, CDCl3): d 12.75 (1H, s), 7.53 (1H, d, J=6.9 Hz), 6.65 (1H, d, J=10.1 Hz), 6.61 (1H, t, J=7.5 Hz), 5.41 (1H, d, J=10.1 Hz), 5.09 (1H, t, J=6.9 Hz), 5.04 (1H, t, J=7.8 Hz), 3.49 (1H, dd, J=6.7, 4.6 Hz), 3.24 (2H, m), 2.63 (1H, dd, J=15.6, 8.2 Hz), 2.53 (1H, m), 2.51 (1H, d, J=9.3 Hz), 2.32 (1H, dd, J=13.5, 4.7 Hz), 2.02 (2H, dd, J=15.8, 7.7 Hz), 1.76 (1H, m), 1.70 (3H, s), 1.69 (3H, s), 1.63 (3H, s), 1.62 (3H, s), 1.59 (1H, m), 1.53 (3H, s), 1.38 (3H, s), 1.37 (1H, m), 1.34 (3H, s), 1.28 (3H, s).
13C-NMR (150 MHz, CDCl3): d 202.97, 178.81, 171.55, 161.41, 157.61, 157.35, 136.98, 135.31, 133.36, 131.81, 131.75, 128.56, 124.77, 123.82, 122.18, 115.93, 107.92, 102.82, 100.40, 90.71, 83.73, 83.65, 81.33, 49.05, 46.87, 41.92, 29.93, 29.05, 28.95, 27.49, 25.67, 25.61, 25.33, 22.75, 21.61, 18.08, 17.59, 11.39.
得られたスペクトルデータにより、生成物Ｇ−１６４１は、次の化学構造：
Figure 0005558408
を有する既知化合物、すなわちイソガンボジックアシッドであることが確認された。
１０．生成物Ｇｈ−１６４２
画分３の溶出物２９から精製された生成物Ｇｈ−１６４２は、次の特性を有すると判定された：
黄色粉末；ｍｐ５５〜６０℃。
EIMS m/z (相対強度): 628 [M]+ (63), 600 (13), 545 (100), 517 (17), 473 (17), 431 (8), 389 (7), 355 (7), 245 (8), 215 (10), 189 (3), 69 (18).
1H-NMR (600 MHz, CDCl3): d 12.74 (1H, s), 7.52 (1H, d, J=7.1 Hz), 6.66 (1H, d, J=10.2 Hz), 6.50 (1H, t, J=7.9 Hz), 5.44 (1H, d, J=10.2 Hz), 5.12 (1H, t, J=6.9 Hz), 5.06 (1H, t, J=7.8 Hz), 3.49 (1H, dd, J=6.8, 4.5 Hz), 3.25 (2H, m), 2.61 (2H, m), 2.49 (1H, d, J=9.5 Hz), 2.32 (1H, dd, J=13.3, 4.7 Hz), 2.06 (2H, m), 1.78 (1H, m), 1.73 (3H, s), 1.70 (3H, s), 1.64 (3H, s), 1.63 (3H, s), 1.62 (1H, m), 1.55 (3H, s), 1.36 (3H, s), 1.34 (1H, m), 1.28 (3H, s), 1.23 (3H, s).
13C-NMR (150 MHz, CDCl3): d 202.92, 178.88, 170.95, 161.32, 157.63, 157.36, 136.75, 135.31, 133.33, 131.97, 131.74, 128.81, 124.81, 123.76, 122.14, 115.96, 107.92, 102.93, 100.49, 90.64, 83.67, 83.62, 81.29, 49.07, 46.95, 41.88, 30.03, 29.06, 28.98, 27.32, 25.71, 25.64, 25.48, 22.75, 21.65, 18.16, 17.62, 11.43.
得られたスペクトルデータにより、生成物Ｇ−１６４２は、次の化学構造：
Figure 0005558408
を有する既知化合物、すなわちエピイソガンボジックアシッドであることが確認された。
１１．生成物Ｇｈ−２６０３−２
画分３の溶出物２７から精製された生成物Ｇｈ−２６０３−２は、次の特性を有すると判定された：
黄色粉末；ｍｐ１３１〜１３５℃。
EIMS m/z (相対強度): 628 [M]+ (92), 600 (91), 545 (54), 517 (46), 474 (100), 473 (88), 459 (18), 431 (29), 417 (15), 391 (33), 355 (37), 349 (25), 295 (18), 253 (21), 245 (25), 215 (30), 189 (18), 69 (20).
1H-NMR (600 MHz, CDCl3): d 12.62 (1H, s, OH-6), 7.47 (1H, d, J=6.9 Hz, H-10), 6.00 (1H, dd, J=7.6, 1.3 Hz, H-27), 5.04 (1H, t, J=6.9 Hz, H-32), 4.53 (1H, s, H1-40), 4.19 (1H, s, H2-40), 3.43 (1H, dd, J=13.4, 4.6 Hz, H-11), 3.40 (1H, br s, H-4), 3.23 (1H, dd, J=14.5, 8.1 Hz, H1-31), 3.10 (1H, dd, J=14.5, 5.6 Hz, H2-31), 2.94 (2H, d, J=7.5 Hz, H-26), 2.51 (1H, d, J=9.3 Hz, H-22), 2.28 (1H, dd, J=13.4, 4.7 Hz, H1-21), 2.08 (1H, br d, J=12.6 Hz, H-37), 1.88 (1H, br d, J=13.6 Hz, H1-20), 1.82 (3H, s, H-39), 1.77 (1H, dd, J=13.1, 2.8 Hz, H1-3), 1.71 (1H, m, H2-3), 1.70 (3H, s, H-34), 1.69 (3H, s, H-25), 1.68 (3H, s, H-29), 1.62 (3H, s, H-35), 1.52 (1H, dt, J=13.4, 4.9 Hz, H2-20), 1.36 (1H, m, H1-36), 1.33 (1H, m, H2-21), 1.30 (3H, s, H-19), 1.29 (1H, m, H2-36), 1.27 (3H, s, H-24).
13C-NMR (150 MHz, CDCl3): d 203.68 (C-12), 178.47 (C-8), 171.33 (C-30), 164.44 (C-18), 160.77 (C-6), 155.27 (C-16), 148.87 (C-38), 138.06 (C-27), 134.30 (C-10), 133.93 (C-9), 131.07 (C-33), 127.77 (C-28), 122.44 (C-32), 108.60 (C-40), 106.26 (C-17), 104.14 (C-5), 99.57 (C-7), 90.42 (C-14), 84.20 (C-23), 83.93 (C-13), 77.05 (C-2), 48.91 (C-22), 48.10 (C-37), 46.73 (C-11), 39.27 (C-20), 36.52 (C-3), 29.90 (C-25), 29.18 (C-26), 28.85 (C-4), 28.85 (C-24), 28.37 (C-19), 25.74 (C-35), 25.18 (C-21), 22.96 (C-39), 22.78 (C-36), 21.84 (C-31), 20.71 (C-29), 18.14 (C-34).
生成物Ｇｈ−２６０３−２のＥＩＭＳデータは、ｍ／ｚ ６２８に分子イオンピーク［Ｍ］＋を示し、ガンボジックアシッドで観察されるものと一致する。加えて、１Ｈ−１Ｈ ＣＯＳＹ、ＨＭＱＣ（Ｊ＝１５０Ｈｚ）及びＨＭＢＣ（Ｊ＝８Ｈｚ）スペクトル解析（データは示さない）によってさらに確証されるように、生成物Ｇｈ−２６０３−２の１Ｈ−ＮＭＲ及び１３Ｃ−ＮＭＲ記録データは、既知化合物、すなわちガンボゲリックアシッドのそれと一致することが見出された。
生成物Ｇｈ−２６０３−２のＮＯＥＳＹデータは、また、δ７．４７（Ｈ−１０）がδ３．４３（Ｈ−１１）と相関し；δ３．４３（Ｈ−１１）がδ２．２８（Ｈ１−２１）と相関し；δ１．３３（Ｈ２−２１）がδ２．５１（Ｈ−２２）と相関し；δ２．２８（Ｈ１−２１）がδ２．５１（Ｈ−２２）及びδ１．２７（Ｈ−２４）と相関し；且つδ６．００（Ｈ−２７）がδ１．６８（Ｈ−２９）と相関していたことを示し、生成物Ｇｈ−２６０３−２のこの部分の立体構造が、ガンボジックアシッドのそれと一致することを証明している。すなわち、生成物Ｇｈ−２６０３−２のこの部分の立体構造は、１１Ｓ、１３Ｒ、１４Ｓ、２２Ｓの立体配置を有し、トランス関係のＨ−２７及びカルボキシル基（Ｃ−３０）並びにＺ配置の二重結合Δ２７，２８を含む。
生成物Ｇｈ−２６０３−２のモノテルペン部分において、イソプロペニル基に結合したメチンプロトンのシグナル（すなわち、δ２．０８（１Ｈ、ｂｒ ｄ、Ｊ＝１２．６Ｈｚ、Ｈ−３７））は、イソプロペニル基に結合したメチンプロトン及び近接プロトンが比較的大きなビシナルカップリング定数（Ｊ＝１２．６Ｈｚ）を有し、それゆえ、それらは、アキシアル−アキシアルカップリングで存在することを示す。かくして、Ｈ−３７はアキシアル配向で存在する。
生成物Ｇｈ−２６０３−２のＮＯＥＳＹデータから、δ３．４０（Ｈ−４）は、δ２．０８（Ｈ−３７）のみならずδ１．７７（Ｈ１−３）及びδ１．７１（Ｈ２−３）とも相関し；δ１．７７（Ｈ１−３）はδ１．３０（Ｈ−１９）と相関し；δ２．０８（Ｈ−３７）はδ１．７７（Ｈ１−３）及びδ１．５２（Ｈ２−２０）と相関し；且つδ３．４０（Ｈ−４）はδ１．６８（Ｈ−２９）と相関していることがさらに見出された。δ３．４０（Ｈ−４）はδ１．６８（Ｈ−２９）と相関していたので、Ｃ−２はＲ配置で存在していた。生成物Ｇｈ−２６０３−２のモノテルペン部分は、Ｈ−３７、Ｈ−３、及びＨ−２０の間に１，３−ジアキシアル相互作用が存在し；Ｃ−２に結合したメチルプロトン（Ｈ−１９）とＣ−３７に結合したイソプロペニル基とが、エカトリアル配向で存在し、その結果、生成物Ｇｈ−２６０３−２のこの部分の立体化学が、２Ｒ、４Ｒ、３７Ｓの立体配置を有する、堅固な椅子型立体配座を有すると判定された。
上記の情報に基づいて、生成物Ｇｈ−２６０３−２は、次の化学構造：
Figure 0005558408
を有する既知化合物、すなわち、ガンボゲリックアシッドであることが確認された。
１２．生成物Ｇｈ−２６０３−１
画分３の溶出物２６から精製された生成物Ｇｈ−２６０３−１は、次の特性を有すると判定された：
黄色粉末；ｍｐ１１５〜１２０℃。
EIMS m/z (相対強度): 628 [M]+ (92), 600 (100), 545 (68), 517 (49), 474 (98), 473 (80), 459 (17), 431 (25), 417 (13), 391 (28), 355 (24), 349 (18), 295 (11), 253 (12), 245 (13), 215 (16), 189 (7), 69 (15).
1H-NMR (600 MHz, CDCl3): d 12.68 (1H, s, OH-6), 7.48 (1H, d, J=6.9 Hz, H-10), 5.99 (1H, dt, J=8.0, 1.3 Hz, H-27), 5.00 (1H, br t, J=6.7 Hz, H-32), 4.52 (1H, s, H1-40), 4.26 (1H, s, H2-40), 3.50 (1H, br s, H-4), 3.44 (1H, dd, J=6.8, 4.5 Hz, H-11), 3.31 (1H, dd, J=14.6, 8.2 Hz, H1-31), 3.20 (1H, br dd, J=14.5, 3.8 Hz, H2-31), 3.01 (1H, dd, J=16.5, 7.6 Hz, H1-26), 2.84 (1H, ddd, J=16.6, 7.1, 1.4 Hz, H2-26), 2.46 (1H, d, J=9.4 Hz, H-22), 2.29 (1H, dd, J=13.5, 4.6 Hz, H1-21), 2.13 (1H, br d, J=12.4 Hz, H-37), 1.92 (1H, br dd, J=13.8, 2.0 Hz, H1-20), 1.86 (1H, dd, J=6.6, 2.7 Hz, H1-3), 1.84 (3H, s, H-39), 1.70 (1H, m, H2-3), 1.695 (3H, s, H-34), 1.69 (6H, s, H-25, H-29), 1.61 (3H, s, H-35), 1.54 (1H, dt, J=13.5, 5.2 Hz, H2-20), 1.36 (2H, m, H-36), 1.34 (1H, m, H2-21), 1.33 (3H, s, H-19), 1.27 (3H, s, H-24).
13C-NMR (150 MHz, CDCl3): d 203.23 (C-12), 178.53 (C-8), 170.69 (C-30), 164.50 (C-18), 160.92 (C-6), 155.39 (C-16), 147.30 (C-38), 137.10 (C-27), 134.59 (C-10), 133.70 (C-9), 131.11 (C-33), 128.00 (C-28), 122.59 (C-32), 109.28 (C-40), 106.34 (C-17), 104.24 (C-5), 99.48 (C-7), 90.48 (C-14), 83.90 (C-23), 83.61 (C-13), 77.09 (C-2), 49.13 (C-22), 48.32 (C-37), 46.74 (C-11), 39.33 (C-20), 37.13 (C-3), 29.89 (C-25), 29.50 (C-26), 29.09 (C-4), 28.95 (C-24), 28.52 (C-19), 25.69 (C-35), 25.41 (C-21), 22.93 (C-39), 22.69 (C-36), 21.90 (C-31), 20.56 (C-29), 18.16 (C-34).
生成物Ｇｈ−２６０３−１のＥＩＭＳデータは、ｍ／ｚ ６２８に分子イオンピーク［Ｍ］＋を示し、生成物Ｇｈ−２６０３−１の分裂パターンが、生成物Ｇｈ−２６０３−２（すなわち、ガンボゲリックアシッド）のそれと一致することを示す。加えて、生成物Ｇｈ−２６０３−１の１Ｈ−ＮＭＲ及び１３Ｃ−ＮＭＲデータは、生成物Ｇｈ−２６０３−２のそれに概して類似している。
生成物Ｇｈ−２６０３−１の１Ｈ−ＮＭＲデータは、Ｃ−１３に連結された側鎖が、生成物Ｇｈ−２６０３−２の対応部位で観察されるものと異なるプロトンシグナルを有することを示す。すなわち、生成物Ｇｈ−２６０３−２において、２−メチル−２−ブテン酸のメチレンプロトンは、δ２．９４（２Ｈ、ｄ、Ｊ＝７．５Ｈｚ、Ｈ−２６）の単純な二重線シグナルを有するが、生成物Ｇｈ−２６０３−１において、２−メチル−２−ブテン酸のメチレンプロトンは、δ３．０１（１Ｈ、ｄｄ、Ｊ＝１６．５Ｈｚ、７．６Ｈｚ、Ｈ１−２６）及びδ２．８４（１Ｈ、ｄｄｄ、Ｊ＝１６．６Ｈｚ、７．１Ｈｚ、１．４Ｈｚ、Ｈ２−２６）のシグナルを有する。Ｃ−２がＲ配置で存在するガンボゲリックアシッド（生成物Ｇｈ−２６０３−２）の構造において、メチレン基（Ｃ−２６）は、自由回転が可能である。Ｃ−２がＳ配置で存在するなら、モノテルペンのｐ−メンテン環及びＣ−２を含むイソプロペニル基は、自由回転に対する立体障害を構成し、それによって、メチレン基の２つのプロトンの不同性、及び関連するプロトンに対して異方性効果を生じる。加えて、イソプロペニル基に結合したδ２．１３（１Ｈ、ｂｒ ｄ、Ｊ＝１２．４Ｈｚ、Ｈ−３７）のシグナルを有するメチンプロトンは、大きなカップリング定数（Ｊ＝１２．４Ｈｚ）を有し、イソプロペニル基に結合したメチンプロトンがアキシアル配向で存在することを示している。
生成物Ｇｈ−２６０３−１の構造は、１Ｈ−１Ｈ ＣＯＳＹ、ＨＭＱＣ及びＨＭＢＣ分析によってさらに確証され、ｐ−メンテンモノテルペンのＨＮＢＣデータは、ｅｘｏ−メチレンプロトン（δ４．５２（Ｈ１−４０）及びδ４．２６（Ｈ２−４０））が、δ２２．９３（Ｃ−３９）及びδ４８．３２（Ｃ−３７）と相関し；Ｃ−３メチレンプロトン（δ１．８６（Ｈ１−３））が、δ１０４．２４（Ｃ−５）、δ２９．０９（Ｃ−４）、δ４８．３２（Ｃ−３７）及びδ１４７．３０（Ｃ−３８）と相関し；且つＣ−２０メチレンプロトン（δ１．９２（Ｈ１−２０））が、δ４８．３２（Ｃ−３７）及びδ２９．０９（Ｃ−４）と相関していることを示す。さらに、Ｃ−２に結合したメチルプロトン（δ１．３３（Ｈ−１９））は、２つの隣接メチレン炭素（δ３７．１３（Ｃ−３）及びδ３９．３３（Ｃ−２０））と相関している。
生成物Ｇｈ−２６０３−１のＨＭＢＣデータは、また、Ｈ−３が芳香族環中のＣ−５と相関し、且つＣ−３７に結合したイソプロペニル基及びＣ−２に結合したメチレンプロトン（Ｈ−１９）の双方がエカトリアル配向で存在することを示す。したがって、モノテルペン部分は堅固な椅子型立体配座を有する。
生成物Ｇｈ−２６０３−１のＮＯＥＳＹデータから、δ２．１３（Ｈ−３７）はδ１．３６（Ｈ−３６）及びδ１．５４（Ｈ２−２０）と相関していることがさらに見出された。このことは、アキシアルＨ−３７とＣ−２に隣接したメチレン基の２つのアキシアルプロトン（Ｈ−３及びＨ−２０）との間に１，３−ジアキシアル相互作用が存在することを示す。したがって、生成物Ｇｈ−２６０３−２と対照的に、生成物Ｇｈ−２６０３−１中のｐ−メンテンは、２Ｓ、４Ｓ、３７Ｒ配置で存在する。加えて、生成物Ｇｈ−２６０３−１のＮＯＥＳＹデータは、δ７．４８（Ｈ−１０）がδ３．４４（Ｈ−１１）と相関し；δ３．４４（Ｈ−１１）がδ２．２９（Ｈ１−２１）と相関し；δ１．３４（Ｈ２−２１）がδ２．４６（Ｈ−２２）と相関し；δ２．２９（Ｈ１＝２１）及びδ２．４６（Ｈ−２２）の双方が、δ１．２７（Ｈ−２４）と相関し；且つδ５．９９（Ｈ−２７）がδ１．６９（Ｈ−２９）と相関していることを示す。これらのデータは、生成物Ｇｈ−２６０３−１の立体構造が、そのγ−ピロンの右側においてガンボジックアシッド又はガンボゲリックアシッドのそれに一致すること、すなわち、１１Ｓ、１３Ｒ、１４Ｓ、２２Ｓの立体配座を有し、トランス関係のＨ−２７及びカルボキシル基（Ｃ−３０）、並びにＺ配置の二重結合Δ２７，２８を含むことを証明している。
上記の情報に基づき、生成物Ｇｈ−２６０３−１は、次の化学構造：
Figure 0005558408
を有する既知化合物、すなわち、「エピガンボゲリックアシッド」｛ＩＵＰＡＣ名称：［２−ブテン酸、２−メチル−４−［（１Ｒ，３ａＳ，５Ｓ，９Ｓ，１０Ｒ，１３Ｓ，１６ａＳ）−３ａ，４，５，７，１０，１１，１２，１３−オクタヒドロ−８−ヒドロキシ−３，３，１３−トリメチル−１５−（３−メチル−２−ブテニル）−１０−（１−メチルエテニル）−７，１８−ジオキソ−１，５：９，１３−ジメタノ−１Ｈ，３Ｈ，９Ｈ−フロ［３．４−ｇ］オキソシノ［３．２−ｂ］キサンテン−１−イル］−，（２Ｚ）−］｝であることが確認された。
１３．生成物Ｇｈ−２６０７−Ｂ
画分３の溶出物３２から精製された生成物Ｇｈ−２６０７−Ｂは、次の特性を有すると判定：
黄色粉末；ｍｐ１２０〜１２５℃。
EIMS m/z (相対強度): 628 [M]+ (33), 600 (17), 545 (100), 517 (23), 499 (4), 474 (14), 431 (5), 389 (8), 355 (7), 347 (6), 245 (5), 215 (9), 189 (3), 69 (4); HREIMS [M]+ m/z: 628.3034; C38H44O8計算値628.3036.
1H-NMR (600 MHz, CDCl3): d 12.57 (1H, s, OH-6), 7.50 (1H, d, J=6.9 Hz, H-10), 5.86 (1H, dt, J=7.6, 1.2 Hz, H-27), 5.10 (1H, br t, J=7.0 Hz, H-32), 3.46 (1H, dd, J=6.8, 4.5 Hz, H-11), 3.28 (1H, dd, J=14.7, 8.5 Hz, H1-31), 3.15 (1H, m, H1-26), 3.12 (1H, m, H2-31), 2.95 (1H, d, J=9.6 Hz, H-3), 2.91 (1H, ddd, J=15.9, 6.9, 1.4 Hz, H2-26), 2.50 (1H, d, J=9.3 Hz, H-22), 2.42 (1H, dd, J=9.5, 7.4 Hz, H-4), 2.31 (1H, m, H-37), 2.29 (1H, m, H1-21), 1.74 (1H, m, H1-20), 1.71 (3H, s, H-34), 1.69 (3H, s, H-25), 1.67 (3H, s, H-29), 1.60(3H, s, H-35), 1.60 (1H, m, H1-36), 1.53 (1H, m, H2-20), 1.49 (1H, m, H2-36), 1.36 (1H, m, H2-21), 1.30 (3H, s, H-40), 1.28 (3H, s, H-19), 1.27 (3H, s, H-24), 0.71 (3H, s, H-39).
13C-NMR (150 MHz, CDCl3): d 203.71 (C-12), 178.89 (C-8), 171.22 (C-30), 161.53 (C-18), 161.17 (C-6), 155.04 (C-16), 137.79 (C-27), 134.63 (C-10), 133.88 (C-9), 130.85 (C-33), 128.20 (C-28), 122.37 (C-32), 108.88 (C-17), 105.32 (C-5), 100.38 (C-7), 90.33 (C-14), 85.18 (C-2), 84.18 (C-23), 83.86 (C-13), 48.94 (C-22), 46.81 (C-11), 46.23 (C-37), 38.81 (C-38), 38.58 (C-20), 36.93 (C-4), 35.01 (C-3), 33.45 (C-40), 29.91 (C-25), 29.25 (C-26), 28.93 (C-24), 27.35 (C-19), 25.74 (C-35), 25.61 (C-36), 25.32 (C-21), 21.83 (C-31), 20.78 (C-29), 18.19 (C-34), 17.68 (C-39).
生成物Ｇｈ−２６０７−ＢのＥＩＭＳデータは、ｍ／ｚ ６２８に分子イオンピーク［Ｍ］＋を示し、生成物Ｇｈ−２６０７−ＢのＨＲＥＩＭＳデータは、ｍ／ｚ ６２８．３０３４に分子イオンピーク［Ｍ］＋を示し、生成物Ｇｈ−２６０７−Ｂは、前述の化合物ガンボジックアシッド及びガンボゲリックアシッド並びにこれらのエピマーのそれと一致する分子式、すなわち、Ｃ３８Ｈ４４Ｏ８を有することを示している。
生成物Ｇｈ−２６０７−Ｂの１Ｈ−ＮＭＲ及び１３Ｃ−ＮＭＲデータは、生成物Ｇｈ−２６０７−Ｂが、そのピラン環中に二置換二重結合を有せず、末端二重結合を有するイソプロペニル基も有さないことを示す。
１Ｈ−１Ｈ ＣＯＳＹ、ＨＭＱＣ及びＨＭＢＣ分析によってさらに確証されるように、生成物Ｇｈ−２６０７−Ｂは、モノテルペン部分を除いて、構造的にガンボゲリックアシッドに類似している。生成物Ｇｈ−２６０７−Ｂは、ガンボゲリックアシッドに比較して、有する二重結合が１つ少ないことが見出された。生成物Ｇｈ−２６０７−Ｂは、したがって、ガンボゲリックアシッドに比べてもう１つの環を有すると推定された。
生成物Ｇｈ−２７０６−Ｂの１Ｈ−１Ｈ ＣＯＳＹデータは、二重線シグナル（δ２．９５（１Ｈ、Ｊ＝９．６Ｈｚ、Ｈ−３））を有するメチンプロトンが、さらなるメチンプロトン（δ２．３１（１Ｈ、ｍ、Ｈ−３７））とさらにカップリングしているもう１つのメチンプロトン（δ２．４２（１Ｈ、ｄｄ、Ｊ＝９．５Ｈｚ、７．４Ｈｚ、Ｈ−４））とのみカップリングし；メチンプロトン（δ２．３１（１Ｈ、ｍ、Ｈ−３７））が、Ｃ−３６の２つのメチレンプロトン（δ１．６０（１Ｈ、ｍ、Ｈ１−３６）及びδ１．４９（１Ｈ、ｍ、Ｈ２−３６））とカップリングし；且つさらなるメチレンプロトン（δ１．７４（１Ｈ、ｍ、Ｈ１−２０））が、Ｃ−３６の２つのメチレンプロトン（δ１．６０（１Ｈ、ｍ、Ｈ１−３６）及びδ１．４９（１Ｈ、ｍ、Ｈ２−３６））とカップリングしており、生成物Ｇｈ−２６０７−Ｂのモノテルペン部分が、やはり、２つの隣接メチレン基（Ｃ−３６（δ２５．６１）及びＣ−２０（δ３８．５８））並びに３つの隣接メチン基（Ｃ−３（δ３５．０１）、Ｃ−４（δ３６．９３）及びＣ−３７（δ４６．２３））を有することを証明している。生成物Ｇｈ−２６０７−Ｂのメチン基（Ｃ−３）は、ガンボゲリックアシッドのメチレン基（Ｃ−３）の変換であり、前記変換は、Ｃ−３とＣ−３８との間で結合を形成してＣ−３８とＣ−４０との間の末端二重結合に取って代わることによってもたらされ、それによって、シクロブタン、ｇｅｍ−ジメチル基（Ｃ−３９（δ１７．６８）及びＣ−４０（δ３３．４５））、酸素に結合した第４級炭素（Ｃ−２（δ８５．１８））、及び酸素に結合した第４級炭素に結合された第３級メチル基（Ｃ−１９（δ２７．３５））を含む、ピナン型モノテルペン構造の形成をもたらすと推定される。
生成物Ｇｈ−２６０７−ＢのＨＭＢＣデータは、δ２．９５（Ｈ−３）が、芳香族炭素δ１０５．３２（Ｃ−５）、δ１６１．１７（Ｃ−６）及びδ１６１．５３（Ｃ−１８）と相関していることに加え、δ８５．１８（Ｃ−２）、δ４６．２３（Ｃ−３７）、δ３８．８１（Ｃ−３８）、δ３８．５８（Ｃ−２０）、δ３６．９３（Ｃ−４）、δ３３．４５（Ｃ−４０）及びδ１７．６８（Ｃ−３９）と相関し；δ２．４２（Ｈ−４）は、δ１０５．３２（Ｃ−５）、δ８５．１８（Ｃ−２）、δ３８．８１（Ｃ−３８）、δ３５．０１（Ｃ−３）、δ２７．３５（Ｃ−１９）及びδ２５．６１（Ｃ−３６）と相関し；且つδ２．３１（Ｈ−３７）は、δ８５．１８（Ｃ−２）、δ３８．８１（Ｃ−３８）、δ３５．０１（Ｃ−３）、δ３６．９３（Ｃ−４）及びδ３３．４５（Ｃ−４０）と相関していることを示す。上記ＨＭＢＣデータから、生成物Ｇｈ−２６０７−Ｂのピナン型モノテルペン構造において、Ｃ−２は、芳香族環のＣ−１８にエーテル結合を介して連結され；Ｃ−４はＣ−５に連結され；且つＣ−２に結合したメチル基（Ｃ−１９）は、エカトリアル配向で存在することがわかる。
生成物Ｇｈ−２６０７−ＢのＮＯＥＳＹデータから、さらに、δ２．９５（Ｈ−３）は、δ２．４２（Ｈ−４）、δ１．２８（Ｈ−１９）及びδ１．３０（Ｈ−４０）と相関し；δ２．４２（Ｈ−４）は、δ２．３１（Ｈ−３７）及びδ１．３０（Ｈ−４０）と相関し；δ２．３１（Ｈ−３７）は、δ１．３０（Ｈ−４０）と相関し；δ０．７１（Ｈ−３９）は、δ１．３０（Ｈ−４０）、δ１．２８（Ｈ−１９）、δ１．７４（Ｈ１−２０）及びδ１．５３（Ｈ２−２０）と相関し；且つδ１．６７（Ｈ−２９）は、δ５．８６（Ｈ−２７）と相関しているが、δ１．６７（Ｈ−２９）、δ２．４２（Ｈ−４）及びδ２．３１（Ｈ−３７）の間に交差ピークは存在しないことが見出され、Ｃ−２はＲ配置で存在し；メチル基（Ｃ−１９）はα−エカトリアルで存在し；且つピナン構造において、シクロブタン環の３つのメチンプロトンＨ−３、Ｈ−４及びＨ−３７は、シスの関係で存在し、その結果、シクロブタン環は３Ｓ、４Ｓ、３７Ｒ配置で存在することを示している。
生成物Ｇｈ−２６０７−ＢのＮＯＥＳＹデータは、また、δ７．５０（Ｈ−１０）がδ３．４６（Ｈ−１１）と相関し；δ３．４６（Ｈ−１１）がδ２．２９（Ｈ１−２１）と相関し；δ１．３６（Ｈ２−２１）がδ２．５０（Ｈ−２２）と相関し；且つδ２．５０（Ｈ−２２）がδ１．６９（Ｈ−２５）と相関していることを示し、生成物Ｇｈ−２６０７−Ｂのこの部分の立体構造は、１１Ｓ、１３Ｒ、１４Ｓ、２２Ｓ配置を有し、δ１．６７（Ｈ−２９）がδ５．８６（Ｈ−２７）と相関しているので、トランス関係のＨ−２７及びカルボキシル基（Ｃ−３０）、並びにＺ配置の二重結合Δ２７，２８を含むことを証明している。
上記の情報に基づいて、生成物Ｇｈ−２６０７−Ｂは、次の化学構造：
Figure 0005558408
を有する新規化合物であることが確認された。
生成物Ｇ−２６０７−Ｂは、名称「フォルモキサントンＢ」｛ＩＵＰＡＣ名称：［２−ブテン酸、２−メチル−４−［（１Ｒ，３ａＳ，５Ｓ，９Ｓ，１０Ｓ，１２Ｒ，１５Ｒ，１８ａＳ）−３ａ，４，５，７，１２，１３，１４，１５−オクタヒドロ−８−ヒドロキシ−３，３，１１，１１，１５−ペンタメチル−１７−（３−メチル−２−ブテニル）−７，１９−ジオキソ−１，５−メタノ−１Ｈ，３Ｈ，９Ｈ−フロ［３．４−ｇ］−１６−オキサ−トリシクロ［４．４．０．０９，１２］デカノ［３．２−ｂ］キサンテン−１−イル］−，（２Ｚ）−］｝によって識別される。
１４．生成物Ｇｈ−２６０７−１Ａ
画分３の溶出物１４から精製された生成物Ｇｈ−２６０７−１Ａは、次の特性を有すると判定された：
黄色粉末；ｍｐ１４６〜１５１℃。
EIMS m/z (相対強度): 628 [M]+ (27), 601 (13), 545 (100), 517 (20), 473 (12), 389 (8), 355 (7), 347 (7), 245 (10), 215 (18), 189 (8), 69 (11); HREIMS [M+] m/z: 628.3046; C38H44O8計算値628.3036.
1H-NMR (600 MHz, CDCl3): d 12.55 (1H, s, OH-6), 7.49 (1H, d, J=6.9 Hz, H-10), 5.87 (1H, t, J=7.3 Hz, H-27), 5.00 (1H, br t, J=6.3 Hz, H-32), 3.46 (1H, t, J=5.6 Hz, H-11), 3.27 (1H, dd, J=14.3, 8.6 Hz, H1-31), 3.17 (1H, dd, J=15.9, 8.4 Hz, H1-26), 3.10 (1H, br dd, J=13.9, 4.4 Hz, H2-31), 2.93 (1H, m, H-3), 2.92 (1H, m, H2-26), 2.49 (1H, d, J=9.3 Hz, H-22), 2.40 (1H, t, J=8.4 Hz, H-4), 2.30 (1H, m, H-37), 2.28 (1H, m, H1-21), 1.72 (1H, m, H1-20), 1.70 (3H, s, H-34), 1.68 (3H, s, H-25), 1.66 (3H, s, H-29), 1.60 (3H, s, H-35), 1.58 (1H, m, H1-36), 1.52 (1H, m, H2-20), 1.50 (1H, m, H2-36), 1.35 (1H, dd, J=13.3, 9.6 Hz, H2-21), 1.28 (3H, s, H-19), 1.27 (6H, s, H-24, H-40), 0.69 (3H, s, H-39).
13C-NMR (150 MHz, CDCl3): d 203.75 (C-12), 178.86 (C-8), 171.59 (C-30), 161.51 (C-18), 161.15 (C-6), 155.01 (C-16), 138.12 (C-27), 134.58 (C-10), 133.85 (C-9), 130.79 (C-33), 128.07 (C-28), 122.35 (C-32), 108.85 (C-17), 105.28 (C-5), 100.34 (C-7), 90.32 (C-14), 85.12 (C-2), 84.20 (C-23), 83.80 (C-13), 48.93 (C-22), 46.79 (C-11), 46.19 (C-37), 38.77 (C-38), 38.53 (C-20), 36.90 (C-4), 34.97 (C-3), 33.41 (C-40), 29.90 (C-25), 29.19 (C-26), 28.91 (C-24), 27.31 (C-19), 25.73 (C-35), 25.59 (C-36), 25.29 (C-21), 21.80 (C-31), 20.77 (C-29), 18.16 (C-34), 17.65 (C-39).
生成物Ｇｈ−２６０７−１ＡのＥＩＭＳデータは、ｍ／ｚ ６２８に分子イオンピーク［Ｍ］＋を示し、生成物Ｇｈ−２６０７−１ＡのＨＲＥＩＭＳデータは、ｍ／ｚ ６２８．３０４６に分子イオンピーク［Ｍ］＋を示し、生成物Ｇｈ−２６０７−１Ａは、前記の化合物ガンボジックアシッド及びガンボゲリックアシッド並びにこれらのエピマーのそれと一致する分子式、すなわち、Ｃ３８Ｈ４４Ｏ８を有することを示している。
生成物Ｇｈ−２６０７−１Ａの１Ｈ−ＮＭＲ及び１３Ｃ−ＮＭＲデータは、生成物Ｇｈ−２６０７−１Ａが、そのピラン環中にシスの二置換二重結合を有せず、末端二重結合を有するイソプロペニル基も有さないことを示している。
１Ｈ−１Ｈ ＣＯＳＹ、ＨＭＱＣ及びＨＭＢＣ分析によってさらに確証されるように、生成物Ｇｈ−２６０７−１Ａは、モノテルペン部分を除いて、ガンボゲリックアシッドに構造的に類似している。ガンボゲリックアシッドに比較して、生成物Ｇｈ−２６０７−１Ａは、有する二重結合が１つ少ないことが見出された。生成物Ｇｈ−２６０７−１Ａは、したがって、ガンボゲリックアシッドに比べて１つ多い環を有すると推定された。
生成物Ｇｈ−２７０６−１Ａの１Ｈ−１Ｈ ＣＯＳＹデータは、メチンプロトン（δ２．９３（１Ｈ、ｍ、Ｈ−３））がもう１つのメチンプロトン（δ２．４０（１Ｈ、ｔ、Ｊ＝８．４Ｈｚ、Ｈ−４））とカップリングし；メチンプロトン（δ２．４０）がさらなるメチンプロトン（δ２．３０（１Ｈ、ｍ、Ｈ−３７））とカップリングし；メチレンプロトンδ２．３０が、Ｃ−３６の１つのメチレンプロトン（δ１．５０（１Ｈ、ｍ、Ｈ２−３６））とカップリングし；且つＣ−３６の残りのメチレンプロトン（δ１．５８（１Ｈ、ｍ、Ｈ１−３６））がもう１つのメチレンプロトン（δ１．７２（１Ｈ、ｍ、Ｈ１−２０））とカップリングしており、生成物Ｇｈ−２６０７−１Ａのモノテルペン部分が、２つの隣接メチレン基（Ｃ−２０（δ３８．５３）及びＣ−３６（δ２５．５９））並びに３つの隣接メチン基（Ｃ−３７（δ４６．１９）、Ｃ−４（δ３６．９０）及びＣ−３（δ３４．９７））を有することを証明している。生成物Ｇｈ−２６０７−１Ａのメチン基（Ｃ−３）は、ガンボゲリックアシッドのメチレン基（Ｃ−３）の変換であり、前記変換は、Ｃ−３とＣ−３８との間で結合を形成してＣ−３８とＣ−４０との間の末端二重結合に取って代わることによってもたらされ、それによって、シクロブタン、ｇｅｍ−ジメチル基（Ｃ−３９（δ１７．６５）及びＣ−４０（δ３３．４１））、酸素に結合した第４級炭素（Ｃ−２（δ８５．１２））、及び酸素に結合した第４級炭素に結合された第３級メチル基（Ｃ−１９（δ２７．３１））を含む、ピナン型モノテルペン構造の形成をもたらすと推定される。
生成物Ｇｈ−２６０７−１ＡのＨＭＢＣデータは、δ２．９３（Ｈ−３）が、芳香族環炭素δ１０５．２８（Ｃ−５）、δ１６１．１５（Ｃ−６）及びδ１６１．５１（Ｃ−１８）と相関していることに加え、δ８５．１２（Ｃ−２）、δ４６．１９（Ｃ−３７）、δ３８．７７（Ｃ−３８）、δ３８．５３（Ｃ−２０）、δ３６．９０（Ｃ−４）、δ３３．４１（Ｃ−４０）及びδ１７．６５（Ｃ−３９）と相関し；δ２．４０（Ｈ−４）が、δ１０５．２８（Ｃ−５）、δ３８．７７（Ｃ−３８）、δ３４．９７（Ｃ−３）、δ４６．１９（Ｃ−３７）、δ２５．５９（Ｃ−３６）、δ３８．５３（Ｃ−２０）及びδ２７．３１（Ｃ−１９）と相関し；且つδ２．３０（Ｈ−３７）が、δ１０５．２８（Ｃ−５）、δ８５．１２（Ｃ−２）、δ３８．７７（Ｃ−３８）、δ３４．９７（Ｃ−３）、δ３６．９０（Ｃ−４）、δ３８．５３（Ｃ−２０）、δ２５．５９（Ｃ−３６）及びδ３３．４１（Ｃ−４０）と相関していることを示す。上記ＨＭＢＣデータから、生成物Ｇｈ−２６０７−１Ａのピナン型モノテルペン構造において、Ｃ−２は、芳香族環のＣ−１８にエーテル結合を介して連結され；Ｃ−４はＣ−５に連結され；且つＣ−２に結合したメチル基（Ｃ−１９）は、エカトリアル配向で存在することがわかる。
生成物Ｇｈ−２６０７−１ＡのＮＯＥＳＹデータは、δ７．４９（Ｈ−１０）がδ３．４６（Ｈ−１１）と相関し；δ３．４６（Ｈ−１１）がδ２．２８（Ｈ１−２１）と相関し；δ１．３５（Ｈ２−２１）がδ２．４９（Ｈ−２２）と相関し；δ２．４９（Ｈ−２２）がδ１．６８（Ｈ−２５）と相関し；且つδ５．８７（Ｈ−２７）がδ１．６６（Ｈ−２９）と相関していることを示し、生成物Ｇｈ−２６０７−１Ａのこの部分の立体構造は、１１Ｓ、１３Ｒ、１４Ｓ、２２Ｓ配置を有し、トランス関係のＨ−２７及びカルボキシル基（Ｃ−３０）、並びにＺ配置の二重結合Δ２７，２８を含むことを証明している。加えて、δ２．９３（Ｈ−３）は、δ２．４０（Ｈ−４）、δ１．２８（Ｈ−１９）及びδ１．２７（Ｈ−４０）と相関し；δ２．４０（Ｈ−４）は、δ２．３０（Ｈ−３７）、δ１．２７（Ｈ−４０）及びδ１．６６（Ｈ−２９）と相関し；δ２．３０（Ｈ−３７）はδ１．６６（Ｈ−２９）及びδ１．７０（Ｈ−３４）と相関し：且つδ１．５０（Ｈ２−３６）はδ１．６６（Ｈ−２９）と相関している。したがって、Ｃ−２はＳ配置で存在し；ピナン構造において、シクロブタン環の３つのメチンプロトンＨ−３、Ｈ−４及びＨ−３７は、シス関係で存在し、その結果、シクロブタン環は３Ｓ、４Ｓ、３７Ｒ配置で存在することがわかる。ＮＯＥＳＹデータは、また、δ３．２７（Ｈ１−３１）及びδ３．１０（Ｈ２−３１）の双方がδ１．６６（Ｈ−２９）と相関し；δ３．１７（Ｈ１−２６）及びδ２．９２（Ｈ２−２６）の双方がδ１．７０（Ｈ−３４）と相関し；且つδ０．６９（Ｈ−３９）が、δ１．７２（Ｈ１−２０）、δ１．２８（Ｈ−１９）及びδ１．２７（Ｈ−４０）と相関していることを示す。
上記の情報に基づいて、生成物Ｇｈ−２６０７−１Ａは、次の化学構造：
Figure 0005558408
を有する新規化合物であることが確認された。
生成物Ｇｈ−２６０７−１Ａは、名称「エピフォルモキサントンＢ」｛ＩＵＰＡＣ名称：［２−ブテン酸、２−メチル−４−［（１Ｒ，３ａＳ，５Ｓ，９Ｒ，１０Ｒ，１２Ｓ，１５Ｓ，１８ａＳ）−３ａ，４，５，７，１２，１３，１４，１５−オクタヒドロ−８−ヒドロキシ−３，３，１１，１１，１５−ペンタメチル−１７−（３−メチル−２−ブテニル）−７，１９−ジオキソ−１，５−メタノ−１Ｈ，３Ｈ，９Ｈ−フロ［３．４−ｇ］−１６−オキサ−トリシクロ［４．４．０．０９，１２］デカノ［３．２−ｂ］キサンテン−１−イル］−，（２Ｚ）−］｝によって識別される。
１５．生成物Ｇｈ−２５０８
画分３の溶出物２５から精製された生成物Ｇｈ−２５０８は、次の特性を有すると判定された：
黄色粉末；ｍｐ１１３〜１１８℃。
EIMS m/z (相対強度): 628 [M]+ (71), 600 (100), 575 (14), 545 (52), 517 (68), 501 (12), 473 (96), 459 (12), 431 (26), 417 (18), 389 (29), 355 (64), 349 (26), 307 (12), 295 (22), 253 (24), 245 (29), 214.9 (26), 189 (17), 105 (15), 91 (18), 69 (35).
1H-NMR (600 MHz, CDCl3): d 12.57 (1H, s, OH-6), 7.50 (1H, d, J=6.9 Hz, H-10), 5.79 (1H, dd, J=16.0, 7.2 Hz, H-27), 5.30 (1H, d, J=16.0 Hz, H-26), 5.14 (1H, br t, J=6.9 Hz, H-32), 4.57 (1H, s, H1-40), 4.23 (1H, s, H2-40), 3.50 (1H, br d, J=2.8 Hz, H-4), 3.43 (1H, dd, J=6.8, 4.4 Hz, H-11), 3.23 (2H, m, H-31), 2.90 (1H, dq, J=7.2, 7.1 Hz, H-28), 2.56 (1H, d, J=9.3 Hz, H-22), 2.29 (1H, dd, J=13.4, 4.6 Hz, H1-21), 2.16 (1H, br d, J=12.5 Hz, H-37), 1.94 (1H, br d, J=12.9 Hz, H1-20), 1.89 (1H, m, H1-3), 1.86 (3H, s, H-39), 1.75 (1H, m, H2-3), 1.73 (6H, s, H-25, H-34), 1.65 (3H, s, H-35), 1.56 (1H, dt, J=13.4, 5.0 Hz, H2-20), 1.42 (1H, m, H2-21), 1.38 (3H, s, H-19), 1.36 (2H, m, H-36), 1.27 (3H, s, H-24), 0.90 (3H, d, J=7.1 Hz, H-29).
13C-NMR (150 MHz, CDCl3): d 203.38 (C-12), 179.21 (C-8), 177.35 (C-30), 164.29 (C-18), 160.61 (C-6), 155.79 (C-16), 147.66 (C-38), 134.54 (C-9, C-10), 134.33 (C-27), 131.17 (C-33), 123.80 (C-26), 122.45 (C-32), 108.83 (C-40), 106.65 (C-17), 104.18 (C-5), 100.11 (C-7), 91.46 (C-14), 84.76 (C-13), 84.13 (C-23), 77.07 (C-2), 48.27 (C-22), 48.13 (C-37), 47.06 (C-11), 41.74 (C-28), 39.31 (C-20), 36.92 (C-3), 30.03 (C-25), 28.94 (C-4), 28.73 (C-24), 28.50 (C-19), 25.74 (C-35), 25.51 (C-21), 22.98 (C-39), 22.74 (C-36), 21.94 (C-31), 18.18 (C-34), 15.80 (C-29).
生成物Ｇｈ−２５０８のＥＩＭＳデータは、ｍ／ｚ ６２８に分子イオンピーク［Ｍ］＋を示し、生成物Ｇｈ−２５０８の分裂パターンは生成物Ｇｈ−２６０３−２（すなわち、ガンボゲリックアシッド）のそれと一致することを示している。加えて、生成物Ｇｈ−２５０８の１Ｈ−ＮＭＲ及び１３Ｃ−ＮＭＲデータは、生成物Ｇｈ−２６０３−２のそれに概して類似している。
生成物Ｇｈ−２５０８の１Ｈ−ＮＭＲ及び１３Ｃ−ＮＭＲデータは、カルボキシル基を含みＣ−１３に連結された側鎖は、生成物Ｇｈ−２６０３−２のそれと異なり；生成物Ｇｈ−２６０３−２中の三置換二重結合Δ２７，２８及びメチレン基（Ｃ−２６）の代わりに、二置換二重結合Δ２６，２７（δ５．７９（１Ｈ、ｄｄ、Ｊ＝１６．０Ｈｚ、７．２Ｈｚ、Ｈ−２７）、δ１３４．３３（Ｃ−２７）、δ５．３０（１Ｈ、ｄ、Ｊ＝１６．０Ｈｚ、Ｈ−２６）、及びδ１２３．８０（Ｃ−２６））が存在する。加えて、２つのカップリングしたオレフィンプロトン（Ｈ−２６及びＨ−２７）は、１６．０Ｈｚのカップリング定数（Ｊ）を有し、二重結合Δ２６，２７は、トランス二重結合（すなわち、Ｅ配置）である。δ０．９０（３Ｈ、ｄ、Ｊ＝７．１Ｈｚ、Ｈ−２９）の二重線シグナルから、Ｃ−２９は、第２級メチル基を意味し、Ｈ−２９は、メチンプロトン（δ２．９０（１Ｈ、ｄｑ、Ｊ＝７．２Ｈｚ、７．１Ｈｚ、Ｈ−２８））とカップリングしていることがわかる。加えて、メチン基（δ２．９０（Ｈ−２８）及びδ４１．７４（Ｃ−２８））は、カルボニル炭素（δ１７７．３５（Ｃ−３０））に隣接し、カルボキシル炭素は、α，β−不飽和カルボニル炭素ではないことを示している。
生成物Ｇｈ−２５０８のＨＭＢＣデータは、δ５．７９（Ｈ−２７）が、δ１７７．３５（Ｃ−３０）、δ１５．８０（Ｃ−２９）、δ４１．７４（Ｃ−２８）及びδ８４．７６（Ｃ−１３）と相関し；δ５．３０（Ｈ−２６）が、δ１７７．３５（Ｃ−３０）、δ４１．７４（Ｃ−２８）、δ１３４．３３（Ｃ−２７）及びδ８４．７６（Ｃ−１３）と相関し；δ２．９０（Ｈ−２８）が、δ１７７．３５（Ｃ−３０）、δ１５．８０（Ｃ−２９）、δ１３４．３３（Ｃ−２７）及びδ１２３．８０（Ｃ−２６）と相関し；δ０．９０（Ｈ−２９）が、δ１７７．３５（Ｃ−３０）及びδ１３４．３３（Ｃ−２７）と相関していることを示し、Ｃ−１３に連結された側鎖は（Ｅ）−２−メチル−３−ブテン酸であることを証明している。
生成物Ｇｈ−２５０８のＮＯＥＳＹデータは、δ７．５０（Ｈ−１０）がδ３．４３（Ｈ−１１）と相関し；δ３．４３（Ｈ−１１）がδ２．２９（Ｈ１−２１）と相関し；且つδ２．５６（Ｈ−２２）が、δ１．４２（Ｈ２−２１）及びδ１．２７（Ｈ−２４）と相関していることを示し、生成物Ｇｈ−２５０８のこの部分の立体構造は、ガンボジックアシッド又はガンボゲリックアシッドのそれと一致する、すなわち、１１Ｓ、１３Ｒ、１４Ｓ、２２Ｓの配置で存在することを証明している。加えて、δ０．９０（Ｈ−２９）は、δ５．７９（Ｈ−２７）及びδ５．３０（Ｈ−２６）のみならず隣接のδ２．９０（Ｈ−２８）と相関している。
１Ｈ−１Ｈ ＣＯＳＹ、ＨＭＱＣ及びＨＭＢＣ分析によってさらに確証されるように、生成物Ｇｈ−２５０８のモノテルペン部分は、生成物Ｇｈ−２６０３−２のそれに一致している。イソプロペニル基に結合したメチンプロトンのシグナル（δ２．１６（１Ｈ、ｂｒ ｄ、Ｊ＝１２．５Ｈｚ、Ｈ−３７））は、イソプロペニル基に結合したメチンプロトン及び近接プロトンが比較的大きなビシナルカップリング定数（Ｊ＝１２．５Ｈｚ）を有し、それゆえ、それらはアキシアル−アキシアルカップリングの関係で存在することを示す。かくして、Ｈ−３７は、アキシアル配向で存在し、Ｃ−３７はＳ配置で存在する。
生成物Ｇｈ−２５０８のＮＯＥＳＹデータは、δ３．５０（Ｈ−４）が、δ２．１６（Ｈ−３７）のみならずδ１．８９（Ｈ１−３）及びδ１．７５（Ｈ２−３）とも相関し；δ１．８９（Ｈ１−３）はδ１．３８（Ｈ−１９）と相関し；且つアキシアル水素δ２．１６（Ｈ−３７）は、δ１．８９（Ｈ１−３）及びδ１．５６（Ｈ２−２０）と相関していることを示し、モノテルペン環は、１，３−ジアキシアル相互作用を伴う椅子型立体配座を有し、Ｃ−２に連結されたメチルプロトン（Ｈ−１９）及びＣ−３７に連結されたイソプロペニル基の双方ともエカトリアル配向で存在することを証明している。Ｃ−１３に結合した側鎖上のメチルプロトン（δ０．９０（Ｈ−２９））とモノテルペン部分のイソプロペニル基のｅｘｏ−メチレンプロトン（δ４．５７（Ｈ１−４０）及びδ４．２３（Ｈ２−４０））との間に、核オーバーハウザー効果（ＮＯＥ）は存在しないので、Ｃ−２は、Ｒ配置で存在すると推定される。かくして、モノテルペン部分は、２Ｒ、４Ｒ、３７Ｓ配置で存在すると判定される。
上記の情報に基づいて、生成物Ｇｈ−２５０８は、次の化学構造：
Figure 0005558408
を有する新規化合物であることが確認された。
生成物Ｇｈ−２５０８は、名称「β−ガンボゲリックアシッド」｛ＩＵＰＡＣ名称：［３−ブテン酸、２−メチル−４−［（１Ｒ，３ａＳ，５Ｓ，９Ｒ，１０Ｓ，１３Ｒ，１６ａＳ）−３ａ，４，５，７，１０，１１，１２，１３−オクタヒドロ−８−ヒドロキシ−３，３，１３−トリメチル−１５−（３−メチル−２−ブテニル）−１０（１−メチルエテニル）−７，１８−ジオキソ−１，５：９，１３−ジメタノ−１Ｈ，３Ｈ，９Ｈ−フロ［３．４−ｇ］オキソシノ［３．２−ｂ］キサンテン−１−イル］−，（３Ｅ）−］｝によって識別される。
１６．生成物Ｇｈ−２５０７
画分２の溶出物２３から精製された生成物Ｇｈ−２５０７は、次の特性を有すると判定された：
黄色針状晶；ｍｐ１４８〜１５２℃。
EIMS m/z (相対強度): 628 [M]+ (48), 600 (100), 585 (9), 545 (41), 517 (69), 510 (12), 473 (93), 431 (24), 417 (18), 389 (28), 355 (68), 347 (25), 307 (11), 299 (24), 295 (20), 253 (22), 245 (28), 214.9 (22), 199 (18), 189 (15), 105 (12), 91 (17), 69 (25).
1H-NMR (600 MHz, CDCl3): d 12.61 (1H, s, OH-6), 7.48 (1H, d, J=6.9 Hz, H-10), 6.06 (1H, dd, J=15.7, 7.2 Hz, H-27), 5.15 (1H, d, J=15.7 Hz, H-26), 5.11 (1H, br t, J=6.9 Hz, H-32), 4.56 (1H, s, H1-40), 4.20 (1H, s, H2-40), 3.54 (1H, br d, J=2.7 Hz, H-4), 3.44 (1H, dd, J=6.8, 4.5 Hz, H-11), 3.25 (1H, dd, J=14.4, 8.1 Hz, H1-31), 3.17 (1H, dd, J=14.4, 5.6 Hz, H2-31), 2.90 (1H, dq, J=7.2, 7.1 Hz, H-28), 2.56 (1H, d, J=9.3 Hz, H-22), 2.30 (1H, dd, J=13.5, 4.7 Hz, H1-21), 2.16 (1H, br d, J=12.4 Hz, H-37), 1.97 (1H, br d, J=12.8 Hz, H1-20), 1.88 (1H, m, H1-3), 1.87 (3H, s, H-39), 1.74 (1H, m, H2-3), 1.72 (3H, s, H-25), 1.71 (3H, s, H-34), 1.64 (3H, s, H-35), 1.55 (1H, dt, J=13.5, 4.9Hz, H2-20), 1.44 (1H, m, H2-21), 1.43 (1H, m, H1-36), 1.36 (3H, s, H-19), 1.32 (1H, m, H2-36), 1.27 (3H, s, H-24), 0.92 (3H, d, J=7.0 Hz, H-29).
13C-NMR (150 MHz, CDCl3): d 203.53 (C-12), 179.16 (C-8), 177.27 (C-30), 164.37 (C-18), 160.73 (C-6), 156.10 (C-16), 148.04 (C-38), 134.80 (C-10), 134.65 (C-27), 134.52 (C-9), 131.20 (C-33), 122.91 (C-26), 122.39 (C-32), 108.71 (C-40), 106.53 (C-17), 104.14 (C-5), 99.93 (C-7), 90.92 (C-14), 84.66 (C-13), 84.10 (C-23), 77.16 (C-2), 48.49 (C-22), 48.15 (C-37), 47.03 (C-11), 42.00 (C-28), 39.21 (C-20), 37.04 (C-3), 29.96 (C-25), 28.93 (C-4), 28.76 (C-24), 28.53 (C-19), 25.77 (C-35), 25.35 (C-21), 22.94 (C-39), 22.59 (C-36), 22.01 (C-31), 18.15 (C-34), 15.92 (C-29).
生成物Ｇｈ−２５０７のＥＩＭＳデータは、ｍ／ｚ ６２８に分子イオンピーク［Ｍ］＋を示し、生成物Ｇｈ−２６０３−１（すなわち、エピガンボゲリックアシッド）及びＧｈ−２６０３−２（すなわち、ガンボゲリックアシッド）のそれと一致することを示す。加えて、生成物Ｇｈ−２５０７の１Ｈ−ＮＭＲ及び１３Ｃ−ＮＭＲデータは、生成物Ｇｈ−２６０３−１のそれに概して類似している。
生成物Ｇｈ−２５０７の１Ｈ−ＮＭＲ及び１３Ｃ−ＮＭＲデータによれば、カルボキシル基を有しＣ−１３に連結された側鎖は、生成物Ｇｈ−２６０３−１のそれと異なり；生成物Ｇｈ−２６０３−１中の三置換二重結合Δ２７，２８及びメチレン基（Ｃ−２６）の代わりに、二置換二重結合Δ２６，２７（δ５．１５（１Ｈ、ｄ、Ｊ＝１５．７Ｈｚ、Ｈ−２６）、δ１２２．９１（Ｃ−２６）、δ６．０６（１Ｈ、ｄｄ、Ｊ＝１５．７Ｈｚ、７．２Ｈｚ、Ｈ−２７）及びδ１３４．６５（Ｃ−２７））が存在し、且つ２つのカップリングしたオレフィンプロトン（Ｈ−２６及びＨ−２７）は、１５．７Ｈｚのカップリング定数（Ｊ）を有する。かくして、二置換二重結合Δ２６，２７は、トランス二重結合で存在する（すなわち、Ｅ配置）。δ０．９２（３Ｈ、ｄ、Ｊ＝７．０Ｈｚ、Ｈ−２９）の二重線シグナルから、Ｃ−２９は、第２級メチル基を意味し、第２級メチル基のプロトン（Ｈ−２９）は、メチンプロトン（δ２．９０（１Ｈ、ｄｑ、Ｊ＝７．２Ｈｚ、７．１Ｈｚ、Ｈ−２８））とカップリングしていることがわかる。加えて、メチン基（δ２．９０（Ｈ−２８）及びδ４２．００（Ｃ−２８））は、カルボキシル炭素（δ１７７．２７（Ｃ−３０））に隣接し、カルボキシル炭素は、α，β−不飽和カルボニル炭素ではない。
生成物Ｇｈ−２５０７のＨＭＢＣデータは、δ６．０６（Ｈ−２７）が、δ１７７．２７（Ｃ−３０）、δ１５．９２（Ｃ−２９）、δ４２．００（Ｃ−２８）及びδ８４．６６（Ｃ−１３）と相関し；δ５．１５（Ｈ−２６）が、δ４２．００（Ｃ−２８）、δ１３４．６５（Ｃ−２７）、δ８４．６６（Ｃ−１３）及びδ２０３．５３（Ｃ−１２）と相関し；δ２．９０（Ｈ−２８）が、δ１７７．２７（Ｃ−３０）、δ１５．９２（Ｃ−２９）、δ１３４．６５（Ｃ−２７）及びδ１２２．９１（Ｃ−２６）と相関し；且つδ０．９２（Ｈ−２９）が、δ１７７．２７（Ｃ−３０）、δ４２．００（Ｃ−２８）及びδ１３４．６５（Ｃ−２７）と相関していることを示し、Ｃ−１３に結合した側鎖は（Ｅ）−２−メチル−３−ブテン酸であることを証明している。
生成物Ｇｈ−２５０７のＮＯＥＳＹデータは、δ７．４８（Ｈ−１０）がδ３．４４（Ｈ−１１）と相関し；δ３．４４（Ｈ−１１）が、δ２．３０（Ｈ１−２１）及びδ１．４４（Ｈ２−２１）と相関し；δ１．４４（Ｈ２−２１）はδ２．５６（Ｈ−２２）と相関し；且つδ２．５６（Ｈ−２２）はδ１．７２（Ｈ−２５）と相関していることを示し、生成物Ｇｈ−２５０７のこの部分の立体構造は、ガンボジックアシッド、ガンボゲリックアシッド、及びエピガンボゲリックアシッドのそれに一致し、すなわち、１１Ｓ、１３Ｒ、１４Ｓ、２２Ｓ配置で存在することを証明している。加えて、δ０．９２（Ｈ−２９）はδ２．９０（Ｈ−２８）、δ６．０６（Ｈ−２７）、δ５．１５（Ｈ−２６）及びδ４．２０（Ｈ２−４０）と相関している。メチルプロトン（Ｈ−２９）は、モノテルペン部分のイソプロペニル基のｅｘｏ−メチレンプロトン（δ４．５６（Ｈ１−４０）及びδ４．２０（Ｈ２−４０））と相関している。かくして、Ｃ−２は、Ｓ配置で存在すると推定される。Ｃ−２がＲ配置で存在するなら、交差ピークは現れない。
１Ｈ−１Ｈ ＣＯＳＹ、ＨＭＱＣ及びＨＭＢＣ分析によってさらに確証されるように、生成物Ｇｈ−２５０７のモノテルペン部分は、生成物Ｇｈ−２６０３−１のそれに一致している。イソプロペニル基に結合したメチンプロトンのシグナル（δ２．１６（１Ｈ、ｂｒ ｄ、Ｊ＝１２．４Ｈｚ、Ｈ−３７））は、イソプロペニル基に結合したメチンプロトン及び近接プロトンが比較的大きなビシナルカップリング定数（Ｊ＝１２．４Ｈｚ）を有し、それゆえ、それらはアキシアル−アキシアルカップリングの関係で存在することを示す。かくして、Ｈ−３７は、アキシアル配向で存在し、Ｃ−３７はＲ配置で存在する。
生成物Ｇｈ−２５０７のＮＯＥＳＹデータは、δ３．５４（Ｈ−４）が、δ２．１６（Ｈ−３７）のみならずδ１．８８（Ｈ１−３）及びδ１．７４（Ｈ２−３）とも相関し；メチレンプロトン（Ｈ１−３及びＨ２−３）は、双方ともδ１．３６（Ｈ−１９）と相関し；且つアキシアル水素δ２．１６（Ｈ−３７）は、δ１．８７（Ｈ−３９）のみならずδ１．８８（Ｈ１−３）、δ１．５５（Ｈ２−２０）及びδ１．４３（Ｈ１−３６）とも相関していることを示し、モノテルペン環は、１，３−ジアキシアル相互作用を伴う椅子型立体配座を有し、Ｃ−２に連結されたメチル基（Ｃ−１９）及びＣ−３７に連結されたイソプロペニル基の双方ともエカトリアル配向で存在することを証明している。かくして、ｐ−メンテンモノテルペンの立体構造は、２Ｓ、４Ｓ、３７Ｒ配置で存在する。
上記の情報に基づいて、生成物Ｇｈ−２５０７は、次の化学構造：
Figure 0005558408
を有する新規化合物であることが確認された。
生成物Ｇｈ−２５０７は、名称「β−エピガンボゲリックアシッド」｛ＩＵＰＡＣ名称：［３−ブテン酸、２−メチル−４−［（１Ｒ，３ａＳ，５Ｓ，９Ｓ，１０Ｒ，１３Ｓ，１６ａＳ）−３ａ，４，５，７，１０，１１，１２，１３−オクタヒドロ−８−ヒドロキシ−３，３，１３−トリメチル−１５−（３−メチル−２−ブテニル）−１０−（１−メチルエテニル）−７，１８−ジオキソ−１，５：９，１３−ジメタノ−１Ｈ，３Ｈ，９Ｈ−フロ［３．４−ｇ］オキソシノ［３．２−ｂ］キサンテン−１−イル］−，（３Ｅ）−］｝によって識別される。
１７．生成物Ｇｈ−２５０１
画分２の溶出物２１から精製された生成物Ｇｈ−２５０１は、次の特性を有すると判定された：
黄色粉末；ｍｐ１００〜１０３℃。
EIMS m/z (相対強度): 544 [M]+ (100), 529 (67), 516 (16), 501 (56), 473 (13), 435 (11), 405 (59), 389 (25), 363 (43), 349 (37), 337 (12), 307 (34), 287 (58), 259 (29), 229 (69), 215 (59), 189 (35), 147 (23), 135 (30), 105 (42), 91 (27), 83 (29), 69 (36), 55 (34).
1H-NMR (600 MHz, CDCl3): d 12.70 (1H, s), 9.21 (1H, s), 7.54 (1H, d, J=7.0 Hz), 6.59 (1H, d, J=10.0 Hz), 6.37 (1H, t, J=8.5 Hz), 5.50 (1H, d, J=10.0 Hz), 5.07 (1H, t, J=8.4 Hz), 3.51 (1H, dd, J=6.9, 4.5 Hz), 3.25 (1H, dd, J=14.4, 8.1 Hz), 3.17 (1H, br dd, J=13.9, 5.9 Hz), 2.71 (1H, ddd, J=16.0, 7.5, 0.8Hz), 2.62 (1H, ddd, J=16.0, 7.0, 0.9 Hz), 2.56 (1H, d, J=9.4 Hz), 2.34 (1H, dd, J=13.6, 4.7 Hz), 1.73 (3H, s), 1.71 (3H, s), 1.62 (3H, s), 1.43 (3H, s), 1.41 (3H, s), 1.39 (1H, m), 1.29 (3H, s), 1.28 (3H, d, J=1.2 Hz).
13C-NMR (150 MHz, CDCl3): d 203.02, 194.46, 178.84, 161.34, 157.68, 157.15, 146.51, 140.11, 135.62, 133.34, 131.98, 126.39, 121.82, 115.28, 108.07, 103.27, 100.36, 90.79, 83.98, 83.39, 78.87, 48.99, 46.85, 29.96, 28.96, 28.93, 28.39 (2C), 25.75, 25.26, 21.67, 18.16, 8.58.
得られたスペクトルデータにより、生成物Ｇｈ−２５０１は、次の化学構造：
Figure 0005558408
を有する既知化合物、すなわち、イソモレリンであることが確認された。
１８．生成物Ｇｈ−２５０５
画分２の溶出物２４から精製された生成物Ｇｈ−２５０５は、次の特性を有すると判定された：
黄色粉末；ｍｐ６７〜７０℃。
EIMS m/z (相対強度): 630 [M]+ (100), 602 (19), 545 (14), 507 (36), 479 (22), 475 (18), 433 (8), 351 (27), 309 (17), 295 (38), 253 (45), 245 (16), 231 (16), 213 (13), 177 (15), 147 (8), 69 (29).
1H-NMR (600 MHz, CDCl3): d 12.81 (1H, s), 7.52 (1H, d, J=6.9 Hz), 6.48 (1H, s), 5.83 (1H, t, J=7.2 Hz), 5.17 (1H, t, J=6.9 Hz), 5.06 (1H, br t, J=6.6 Hz), 5.02 (1H br t, J=6.7 Hz), 3.48 (1H, dd, J=6.6, 4.8 Hz), 3.30 (1H, m), 3.28 (2H, m), 3.24 (1H, dd, J=16.1, 7.1 Hz), 3.10 (1H, dd, J=15.7, 8.7 Hz), 2.86 (1H, ddd, J=15.9, 6.7, 1.1Hz), 2.49 (1H, d, J=9.4 Hz), 2.30 (1H, dd, J=13.5, 4.7 Hz), 2.06 (2H, m), 2.00 (2H, m), 1.74 (3H, s), 1.71 (3H, s), 1.70 (3H, s), 1.66 (3H, s), 1.65 (3H, s), 1.64 (3H, s), 1.56 (3H, s), 1.36 (1H, dd, J=13.5, 9.5 Hz), 1.27 (3H, s).
13C-NMR (150 MHz, CDCl3): d 203.38, 179.12, 170.39, 163.62, 160.34, 155.85, 139.06, 136.95, 135.15, 133.91, 133.52, 131.88, 128.50, 123.83, 121.91, 121.35, 107.50, 106.43, 100.64, 90.41, 83.94, 83.87, 48.90, 46.88, 39.68, 29.79, 29.46, 28.92, 26.33, 25.71, 25.67, 25.21, 22.03, 21.09, 20.74, 17.98, 17.68, 16.16.
得られたスペクトルデータにより、生成物Ｇｈ−２５０５は、次の化学構造：
Figure 0005558408
を有する既知化合物、すなわち、ガンボゲニックアシッドであることが確認された。
１９．生成物Ｇｈ−２６４２
画分２の溶出物２２から精製された生成物Ｇｈ−２６４２は、次の特性を有すると判定された：
黄色粉末；ｍｐ１５７〜１５９℃。
EIMS m/z (相対強度): 630 [M]+ (100), 602 (11), 545 (11), 533 (16), 507 (46), 479 (21), 475 (15), 433 (7), 419 (8), 381 (9), 357 (13), 351 (20), 309 (14), 295 (27), 253 (34), 245 (15), 231 (16), 213 (11), 177 (15), 147 (8), 135 (8), 105 (11), 69 (44).
1H-NMR (600 MHz, CDCl3): d 12.76 (1H, s), 7.52 (1H, d, J=7.0 Hz), 6.70 (1H, br s), 6.59 (1H, t, J=7.5 Hz), 5.19 (1H, t, J=7.0 Hz), 5.10 (1H, br t, J=6.0 Hz), 5.02 (1H, br t, J=6.1 Hz), 3.47 (1H, t, J=5.6 Hz), 3.34 (2H, m), 3.31 (2H, m), 2.60 (1H, dd, J=15.7, 7.9 Hz), 2.50 (1H, m), 2.49 (1H, d, J=9.5 Hz), 2.30 (1H, dd, J=13.3, 4.4 Hz), 2.06 (2H, m), 2.02 (2H, m), 1.76 (3H, s), 1.70 (3H, s), 1.66 (6H, s), 1.62 (3H, s), 1.54 (3H, s), 1.35 (1H, dd, J=13.3, 9.5 Hz), 1.30 (3H, s), 1.25 (3H, s).
13C-NMR (150 MHz, CDCl3): d 203.15, 179.02, 172.20, 163.51, 160.27, 155.87, 138.98, 136.90, 135.50, 133.72, 133.33, 131.75, 128.64, 123.81, 121.88, 121.15, 107.51, 106.63, 100.55, 90.37, 83.65, 83.49, 48.89, 46.82, 39.61, 29.80, 28.85 (2C), 26.27, 25.65, 25.60, 25.19, 21.98, 21.10, 17.93, 17.59, 16.16, 11.34.
得られたスペクトルデータにより、生成物Ｇｈ−２６４２は、次の化学構造：
Figure 0005558408
を有する既知化合物、すなわち、イソガンボゲニックアシッドであることが確認された。
２０．生成物Ｇｈ−１６０１−Ａ
画分２の溶出物２０から精製された生成物Ｇｈ−１６０１−Ａは、次の特性を有すると判定された：
黄色粉末；ｍｐ１４３〜１４５℃。
EIMS m/z (相対強度): 644 [M]+ (72), 598 (18), 561 (100), 515 (23), 474 (35), 431 (9), 391 (10), 355 (14), 349 (7), 347 (6), 253 (6), 248 (11), 215 (11), 189 (6), 125 (4), 69 (18).
1H-NMR (600 MHz, CDCl3): d 12.76 (1H, s), 7.54 (1H, d, J=6.9 Hz), 6.61 (1H, d, J=10.2 Hz), 6.31 (1H, t, J=7.2 Hz), 5.41 (1H, d, J=10.1 Hz), 5.02 (2H, br s), 4.09 (1H, d, J=13.3 Hz), 4.01 (1H, d, J=13.3 Hz), 3.49 (1H, br t, J=5.6 Hz), 3.27 (1H, dd, J=14.2, 8.0 Hz), 3.13 (1H, br dd, J=14.3, 5.2 Hz), 2.96 (2H, d, J=7.5 Hz), 2.51 (1H, d, J=9.6 Hz), 2.31 (1H, dd, J=13.4, 4.7 Hz), 2.00 (2H, m), 1.72 (1H, m), 1.70 (3H, s), 1.67 (3H, s), 1.62 (3H, s), 1.60 (3H, s), 1.58 (1H, m), 1.52 (3H, s), 1.38 (1H, m), 1.37 (3H, s), 1.26 (3H, s).
13C-NMR (150 MHz, CDCl3): d 203.04, 179.01, 169.43, 161.66, 157.50, 157.27, 139.33, 135.66, 133.20, 131.90, 131.87, 131.24, 124.80, 123.69, 121.96, 115.76, 107.75, 102.82, 100.47, 90.76, 84.25, 83.67, 81.47, 64.80, 48.92, 46.82, 41.93, 29.82, 29.14, 28.82, 27.76, 25.68, 25.65, 25.12, 22.70, 21.60, 18.13, 17.61.
得られたスペクトルデータにより、生成物Ｇｈ−１６０１−Ａは、次の化学構造：
Figure 0005558408
を有する既知化合物、すなわち、３０−ヒドロキシガンボジックアシッドであることが確認された。
２１．生成物Ｇｈ−１６０２
画分２の溶出物１８から精製された生成物Ｇｈ−１６０２は、次の特性を有すると判定された：
黄色粉末；ｍｐ９８〜１００℃。
EIMS m/z (相対強度): 644 [M]+ (28), 598 (5), 561 (100), 515 (15), 474 (9), 431 (3), 389 (5), 355 (5), 347 (5), 253 (3), 245 (6), 215 (10), 189 (5), 125 (3), 69 (8).
1H-NMR (600 MHz, CDCl3): d 12.73 (1H, s), 7.54 (1H, d, J=6.9 Hz), 6.60 (1H, d, J=10.1 Hz), 6.40 (1H, t, J=7.4 Hz), 5.39 (1H, d, J=10.2 Hz), 5.07 (1H, t, J=7.0 Hz), 5.01 (1H, br t, J=6.8 Hz), 4.09 (1H, d, J=13.1 Hz), 4.02 (1H, d, J=13.2 Hz), 3.46 (1H, t, J=5.6 Hz), 3.27 (1H, dd, J=14.6, 8.2 Hz), 3.12 (1H, dd, J=14.6, 5.0 Hz), 2.96 (2H, d, J=7.5 Hz), 2.50 (1H, d, J=9.3 Hz), 2.29 (1H, dd, J=13.5, 4.7 Hz), 2.04 (2H, m), 1.73 (1H, m), 1.71 (3H, s), 1.67 (3H, s), 1.64 (3H, s), 1.62 (1H, m), 1.61 (3H, s), 1.56 (3H, s), 1.36 (1H, m), 1.32 (3H, s), 1.26 (3H, s).
13C-NMR (150 MHz, CDCl3): d 203.08, 179.02, 169.57, 161.46, 157.50, 157.24, 140.20, 135.91, 133.02, 132.20, 131.62, 131.15, 124.94, 123.74, 122.04, 115.81, 107.89, 102.95, 100.50, 90.89, 84.02, 83.56, 81.21, 64.64, 48.91, 46.82, 41.67, 29.90, 29.14, 28.77, 26.91, 25.69, 25.61, 25.19, 22.73, 21.58, 18.15, 17.60.
得られたスペクトルデータにより、生成物Ｇｈ−１６０２は、次の化学構造：
Figure 0005558408
を有する既知化合物、すなわち、３０−ヒドロキシエピガンボジックアシッドであることが確認された。
２２．生成物Ｇｈ−２６４１−１
画分２の溶出物２０から精製された生成物Ｇｈ−２６４１−１は、次の特性を有すると判定された：
黄色粉末；ｍｐ９４〜９８℃。
EIMS m/z (相対強度): 646 [M]+ (100), 545 (18), 523 (80), 495 (28), 477 (17), 449 (16), 367 (44), 349 (20), 325 (37), 295 (41), 252.9 (49), 245 (27), 213 (32), 147 (16).
1H-NMR (600 MHz, CDCl3): d 12.84 (1H, s, OH-6), 7.46 (1H, d, J=7.0 Hz, H-10), 5.30 (1H, ddd, J=12.1, 4.0, 1.4 Hz, H-27), 5.19 (1H, dt, J=7.1, 1.2 Hz, H-32), 5.04 (1H, tt, J=6.9, 1.3 Hz, H-37), 4.68 (1H, dd, J=9.8, 6.5 Hz, H-4), 3.76 (1H, dd, J=14.5, 12.1 Hz, H1-26), 3.48 (1H, d, J=7.0, 4.2 Hz, H-11), 3.16 (2H, m, H-31), 3.13 (1H, dd, J=15.3, 6.5 Hz, H1-3), 3.03 (1H, dd, J=15.3, 9.8 Hz, H2-3), 2.76 (1H, ddd, J=14.5, 4.0, 2.2 Hz, H2-26), 2.39 (1H, d, J=9.6 Hz, H-22), 2.32 (1H, dd, J=13.5, 4.5 Hz, H1-21), 2.02 (2H, m, H-36), 1.91 (2H, m, H-20), 1.70 (3H, s, H-35), 1.64 (3H, s, H-25), 1.61 (3H, s, H-39), 1.53 (3H, s, H-40), 1.51 (3H, s, H-29), 1.43 (3H, s, H-19), 1.33 (1H, m, H2-21), 1.28 (3H, s, H-24), 1.25 (3H, s, H-34).
13C-NMR (150 MHz, CDCl3): d 202.10 (C-12), 178.09 (C-8), 168.66 (C-30), 167.88 (C-18), 163.12 (C-16), 152.96 (C-6), 135.41 (C-33), 135.12 (C-27), 134.13 (C-10), 133.72 (C-9), 131.18 (C-38), 129.76 (C-28), 124.36 (C-37), 121.53 (C-32), 104.85 (C-5), 103.47 (C-17), 100.53 (C-7), 90.43 (C-4), 90.21 (C-14), 84.37 (C-13), 83.66 (C-23), 73.26 (C-2), 48.88 (C-22), 46.61 (C-11), 39.67 (C-20), 30.13 (C-26), 29.92 (C-25), 29.15 (C-24), 26.65 (C-36, C-3), 26.60 (C-19), 25.60 (C-39), 25.19 (C-21), 24.65 (C-35), 21.25 (C-31), 20.47 (C-29), 17.58 (C-40), 16.04 (C-34).
生成物Ｇｈ−２６４１−１のＥＩＭＳデータは、Ｃ３８Ｈ４６Ｏ９の分子式を有するキサントンに相当する、ｍ／ｚ ６４６に分子イオンピーク［Ｍ］＋を示す。
生成物Ｇｈ−２６４１−１の１Ｈ−ＮＭＲデータは、キレート環を形成したヒドロキシ基（δ１２．８４）、４つのオレフィンプロトン（δ７．４６、δ５．３０、δ５．１９及びδ５．０４）、並びに第２級ヒドロキシ基（δ４．６８）を有することを示す。ガンボジックアシッドと比較すると、生成物Ｇｈ−２６４１−１の１Ｈ−ＮＭＲスペクトルは、カップリングしたシス−二置換二重結合のシグナルが１つ少なく、且つＡＸ２スピン系のプロトンシグナルが１つ多く（δ４．６８（１Ｈ、ｄｄ、Ｊ＝９．８Ｈｚ、６．５Ｈｚ、Ｈ−４）、δ３．１３（１Ｈ、ｄｄ、Ｊ＝１５．３Ｈｚ、６．５Ｈｚ、Ｈ１−３）及びδ３．０３（１Ｈ、ｄｄ、Ｊ＝１５．３Ｈｚ、９．８Ｈｚ、Ｈ２−３））、生成物Ｇｈ−２６４１−１は、既知化合物ネオガンボジックアシッドである可能性があることを示す。
生成物Ｇｈ−２６４１−１のＨＭＢＣデータは、ヒドロキシメチンプロトン（δ４．６８（１Ｈ、ｄｄ、Ｊ＝９．８Ｈｚ、６．５Ｈｚ、Ｈ−４））が、２つの第４級炭素（δ１０３．４７（Ｃ−１７）及びδ１６７．８８（Ｃ−１８））と相関していることに加えて、ピラン環の酸素に結合した第４級炭素（δ７３．２６（Ｃ−２））及び第３級メチル基（δ２６．６０（Ｃ−１９））と相関していることを示し、Ｃ−４にヒドロキシル基が結合されていることを証明している。Ｈ−４のカップリング定数（Ｊ＝９．８Ｈｚ、６．５Ｈｚ）から、Ｃ−４上の準アキシアルプロトンは、準アキシアルＨ２−３（Ｊ＝９．８Ｈｚ）及び準エカトリアルＨ１−３（Ｊ＝６．６Ｈｚ）とそれぞれカップリングしている。かくして、ヒドロキシ基は、β−配向で存在する。
生成物Ｇｈ−２６４１−１のＮＯＥＳＹデータは、δ７．４６（Ｈ−１０）がδ３．４８（Ｈ−１１）と相関し；δ３．４８（Ｈ−１１）がδ２．３２（Ｈ１−２１）と相関し；δ２．３２（Ｈ１−２１）がδ２．３９（Ｈ−２２）と相関し；δ２．３９（Ｈ−２２）がδ１．２８（Ｈ−２４）と相関し；且つδ５．３０（Ｈ−２７）がδ１．５１（Ｈ−２９）と相関していることを示し、生成物Ｇｈ−２６４１−１のこの部分の立体構造は、ガンボジックアシッドのそれと一致し、すなわち、１１Ｓ、１３Ｒ、１４Ｓ、２２Ｓの配置で存在し、トランス関係のＨ−２７及びカルボキシル基（Ｃ−３０）、並びにＺ配置の二重結合Δ２７，２８を含むことを証明している。加えて、δ４．６８（Ｈ−４）はδ１．４３（Ｈ−１９）と相関しており、Ｃ−２に連結されたメチルプロトンはアキシアル配向（又はα−配向）で存在することを示す。かくして、生成物Ｇｈ−２６４１−１のＣ−２は、ガンボジックアシッドのそれに一致する立体配置、すなわちＲ配置を有する。
得られたスペクトルデータによれば、生成物Ｇｈ−２６４１−１は、次の化学構造：
Figure 0005558408
を有する新規化合物、すなわち、ネオガンボジックアシッドであることが確認される。
２３．生成物Ｇｈ−１６３１
画分２の溶出物１９から精製された生成物Ｇｈ−１６３１は、次の特性を有すると判定された：
黄色針状晶；ｍｐ９５〜９７℃。
EIMS m/z (相対強度): 646 [M]+ (54), 618 (75), 573 (12), 545 (8), 520 (13), 492 (75), 491 (100), 477 (18), 449 (38), 373 (19), 349 (11), 321 (15), 295 (27), 267 (10), 252.9 (37), 245 (18), 213 (11), 188.9 (15), 176.9 (11), 109 (24), 99 (20), 69 (83); HREIMS [M]+ m/z: 646.3146; C38H46O9計算値646.3142.
1H-NMR (600 MHz, CDCl3): d 12.45 (1H, s, OH-6), 7.42 (1H, d, J=6.9 Hz, H-10), 5.32 (1H, br d, J=9.9 Hz, H-27), 5.18 (1H, t, J=6.8 Hz, H-32), 5.08 (1H, t, J=7.1 Hz, H-37), 4.75 (1H, t, J=8.1 Hz, H-3), 3.53 (1H, dd, J=15.7, 11.0 Hz, H1-26), 3.48 (1H, dd, J=6.6, 4.8 Hz, H-11), 3.29 (1H, dd, J=15.1, 7.3 Hz, H1-31), 3.24 (1H, dd, J=15.2, 6.3 Hz, H2-31), 3.07 (2H, d, J=8.1 Hz, H-4), 2.69 (1H, ddd, J=15.8, 4.0, 2.3 Hz, H2-26), 2.53 (1H, d, J=9.4 Hz, H-22), 2.30 (1H, dd, J=13.5, 4.8 Hz, H1-21), 2.09 (1H, m, H1-36), 2.02 (1H, m, H2-36), 1.72 (3H, s, H-34), 1.67 (3H, s, H-35), 1.66 (3H, s, H-39), 1.65 (3H, s, H-25), 1.601 (3H, s, H-40), 1.597 (3H, sh, H-29), 1.57 (1H, m, H1-20), 1.47 (1H, m, H2-20), 1.42 (1H, m, H2-21), 1.42 (3H, s, H-19), 1.23 (3H, s, H-24).
13C-NMR (150 MHz, CDCl3): d 204.15 (C-12), 179.64 (C-8), 168.08 (C-30), 168.02 (C-18), 158.45 (C-16), 157.32 (C-6), 136.74 (C-27, C-33), 134.37 (C-10), 132.40 (C-38), 132.12 (C-9), 128.40 (C-28), 123.56 (C-37), 121.83 (C-32), 105.90 (C-5), 103.96 (C-17), 101.72 (C-7), 90.28 (C-14), 90.00 (C-3), 84.40 (C-13), 83.45 (C-23), 75.77 (C-2), 75.70 (C-2), 48.78 (C-22), 47.71 (C-11), 36.93 (C-20), 29.87 (C-25), 29.32 (C-26), 28.87 (C-24), 25.93 (C-4), 25.71 (C-35),25.64 (C-39), 25.14 (C-21), 23.54 (C-19), 22.51 (C-31), 22.06 (C-36), 20.91 (C-29), 17.94 (C-34), 17.66 (C-40).
生成物Ｇｈ−１６３１のＥＩＭＳデータは、ｍ／ｚ ６４６（５４）に分子イオンピーク［Ｍ］＋を、及びｍ／ｚ ４９１（１００）にベースピークを示し、生成物Ｇｈ−１６３１のＨＲＥＩＭＳデータは、ｍ／ｚ ６４６．３１４６に［Ｍ］＋を示し、生成物Ｇｈ−１６３１が、生成物Ｇｈ−２６４１−１（すなわち、ネオガンボジックアシッド）のそれに一致する分子式、すなわちＣ３８Ｈ４６Ｏ９を有することを示している。
生成物Ｇｈ−１６３１の１Ｈ−ＮＭＲデータは、キレート環を形成したヒドロキシ基（δ１２．４５）、４つのオレフィンプロトン（δ７．４２、δ５．３２、δ５．１８及びδ５．０８）、及びメチレンプロトン（δ３．０７（２Ｈ、ｄ、Ｊ＝８．１Ｈｚ））とカップリングしたヒドロキシメチンプロトン（δ４．７５（１Ｈ、ｔ、Ｊ＝８．１Ｈｚ））を有する第２級ヒドロキシ基を有することを示す。生成物Ｇｈ−１６３１の１Ｈ−ＮＭＲデータは、生成物Ｇｈ−２６４１−１のそれに概して類似している。
生成物Ｇｈ−１６３１のＨＭＱＣデータは、δ９０．００（−ＯＣＨ−）及びδ２５．９３（−ＣＨ２−）が、それぞれ、ヒドロキシメチン炭素及びヒドロキシメチン炭素に隣接したメチレン炭素に対応するシグナルであることを示す。かくして、生成物Ｇｈ−１６３１及び生成物Ｇｈ−２６４１−１は、ヒドロキシ基の部位を互いに異にする異性体であり、生成物Ｇｈ−１６３１は、Ｃ−３に連結されたヒドロキシ基を有する可能性があると推定される。
生成物Ｇｈ−１６３１のＨＭＢＣデータは、δ４．７５が、δ１６８．０２（Ｃ−１８）、δ１０５．９０（Ｃ−５）、δ７５．７７（Ｃ−２）、δ７５．７０（Ｃ−２）、δ２５．９３（Ｃ−４）及びδ２３．５４（Ｃ−１９）と相関し；且つδ３．０７は、δ９０．００（Ｃ−３）、δ１０５．９０（Ｃ−５）、δ７５．７７（Ｃ−２）、δ７５．７０（Ｃ−２）、δ１５７．３２（Ｃ−６）、δ１６８．０２（Ｃ−１８）、δ１０３．９６（Ｃ−１７）、δ１０１．７２（Ｃ−７）及びδ１５８．４５（Ｃ−１６）と相関していることを示し、ヒドロキシル基はＣ−３に連結されていることを証明している。加えて、ピラン環中に共役二重結合は存在しないので、ピラン環の立体配座は、柔軟な形態で存在し、Ｃ−４メチレン基の２つのプロトンを等価で同じ化学シフト（δ３．０７（２Ｈ、ｄ、Ｊ＝８．１Ｈｚ、Ｈ−４））を有するようにし、そのδ３．０７は、δ４．７５（１Ｈ、ｔ、Ｊ＝８．１Ｈｚ、Ｈ−３）と相関している。かくして、Ｃ−３上のヒドロキシ基は、アキシアル配向（β−配向）で存在し、Ｃ−３はＲ配置で存在する。
生成物Ｇｈ−１６３１のＮＯＥＳＹデータは、δ７．４２（Ｈ−１０）がδ３．４８（Ｈ−１１）と相関し；δ３．４８（Ｈ−１１）がδ２．３０（Ｈ１−２１）と相関し；δ２．５３（Ｈ−２２）がδ１．４２（Ｈ２−２１）と相関し；δ２．３０（Ｈ１−２１）がδ１．２３（Ｈ−２４）と相関し；且つδ５．３２（Ｈ−２７）がδ１．５９７（Ｈ−２９）と相関していることを示し、生成物Ｇｈ−１６３１のこの部分の立体構造は、ガンボジックアシッドのそれに一致、すなわち、１１Ｓ、１３Ｒ、１４Ｓ、２２Ｓの配置で存在し、トランス関係のＨ−２７及びカルボキシル基（Ｃ−３０）、並びにＺ配置の二重結合Δ２７，２８を含むことを証明している。加えて、δ４．７５（Ｈ−３）はδ３．０７（Ｈ−４）、δ１．４２（Ｈ−１９）、δ１．４７（Ｈ２−２０）及びδ２．０２（Ｈ２−３６）と相関しており、Ｃ−３プロトンはエカトリアル配向（α−配向）で存在し、Ｃ−２に結合したメチル基は、アキシアル配向（α−配向）で存在する。かくして、Ｃ−２は、Ｒ配置で存在する。
上記の情報に基づいて、生成物Ｇｈ−１６３１は、次の化学構造：
Figure 0005558408
を有する新規化合物であることが確認される。
生成物Ｇｈ−１６３１は、名称「フォルモキサントンＣ」｛ＩＵＰＡＣ名称：［２−ブテン酸、２−メチル−４−［（１Ｒ，３ａＳ，５Ｓ，１０Ｒ，１１Ｒ，１４ａＳ）−３ａ，４，５，７，１０，１１−ヘキサヒドロ−８，１０−ジヒドロキシ−３，３，１１−トリメチル−１３−（３−メチル−２−ブテニル）−１１−（４−メチル−３−ペンテニル）−７，１５−ジオキソ−１，５−メタノ−１Ｈ，３Ｈ，９Ｈ−フロ［３．４−ｇ］ピラノ［３．２−ｂ］キサンテン−１−イル］−，（２Ｚ）−］｝によって識別される。
２４．生成物Ｇｈ−１０５０
画分２の溶出物１７から精製された生成物Ｇｈ−１０５０は、次の特性を有すると判定された：
黄色粉末；ｍｐ５５〜５７℃。
EIMS m/z (相対強度): 644 [M]+ (82), 616 (98), 601 (9), 598 (8), 571 (16), 533 (17), 517 (12), 490 (100), 489 (96), 475 (19), 447 (30), 433 (13), 405 (18), 371 (33), 363 (17), 309 (10), 295 (21), 253 (25), 230 (19), 213 (15), 189 (9), 173 (10), 147 (11), 105 (17), 99 (25), 69 (42); HREIMS [M]+ m/z: 644.2983; C38H44O9計算値644.2985.
1H-NMR (600 MHz, CDCl3): d 12.69 (1H, s, OH-6), 7.47 (1H, d, J=6.8 Hz, H-10), 5.57 (1H, t, J=7.5 Hz, H-27), 5.19 (1H, t, J=6.8 Hz, H-32), 4.63 (1H, s, H1-40), 4.29 (1H, s, H2-40), 3.86 (1H, d, J=3.4 Hz, H-3), 3.65 (1H, t, J=2.6 Hz, H-4), 3.49 (1H, t, J=5.7 Hz, H-11), 3.31 (1H, m, H1-31), 3.28 (1H, m, H1-26), 3.23 (1H, dd, J=14.6, 6.2 Hz, H2-31), 2.82 (1H, dd, J=14.9, 5.6 Hz, H2-26), 2.55 (1H, d, J=9.4 Hz, H-22), 2.31 (1H, m, H1-21), 2.29 (1H, m, H-37), 2.03 (1H, br d, J=13.3 Hz, H1-20), 1.92 (3H, s, H-39), 1.76 (3H, s, H-34), 1.70 (3H, s, H-25), 1.69 (3H, s, H-35), 1.62 (3H, s, H-29), 1.60 (1H, m, H2-20), 1.49 (3H, s, H-19), 1.39 (1H, m, H2-21), 1.31 (2H, m, H-36), 1.29 (3H, s, H-24).
13C-NMR (150 MHz, CDCl3): d 204.09 (C-12), 178.99 (C-8), 168.63 (C-30), 163.38 (C-18), 162.82 (C-6), 155.99 (C-16), 146.45 (C-38), 136.18 (C-27), 134.28 (C-10, C-9), 131.50 (C-33), 128.27 (C-28), 122.31 (C-32), 109.58 (C-40), 106.42 (C-17), 100.23 (C-5), 100.12 (C-7), 90.17 (C-14), 84.66 (C-23), 83.64 (C-13), 79.48 (C-2), 71.37 (C-3), 48.90 (C-22), 48.27 (C-37), 47.01 (C-11), 38.29 (C-20), 36.69 (C-4), 29.93 (C-25), 29.47 (C-26), 28.85 (C-24), 25.73 (C-35), 25.14 (C-21), 23.66 (C-19), 22.95 (C-39), 21.98 (C-36), 21.92 (C-31), 20.93 (C-29), 18.15 (C-34).
生成物Ｇｈ−１０５０のＥＩＭＳデータは、ｍ／ｚ ６４４に分子イオンピーク［Ｍ］＋を、及びｍ／ｚ ４８０（１００）にベースピークを示し、生成物Ｇｈ−１０５０のＨＲＥＩＭＳデータは、ｍ／ｚ ６４４．２９８３に［Ｍ］＋を示し、生成物Ｇｈ−１０５０の分裂パターンは、ガンボゲリックアシッドに比べて１６多い質量単位を有することを除いて、生成物Ｇｈ−２６０３−２（すなわち、ガンボゲリックアシッド）のそれと類似していることを示している。加えて、生成物Ｇｈ−１０５０の１Ｈ−ＮＭＲ及び１３Ｃ−ＮＭＲデータは、生成物Ｇｈ−２６０３−２のそれに概して類似している。
生成物Ｇｈ−１０５０の１Ｈ−ＮＭＲ及び１３Ｃ−ＮＭＲ及び１Ｈ−１Ｈ ＣＯＳＹデータは、生成物Ｇｈ−１０５０の構造が、イソプロペニル基中にｅｘｏ−メチレンプロトン（δ４．６３（Ｈ１−４０）、δ４．２９（Ｈ２−４０）及びδ１０９．５８（Ｃ−４０））、２つの隣接メチレン基（δ２．０３（１Ｈ、ｂｒ ｄ、Ｊ＝１３．３Ｈｚ、Ｈ１−２０）、δ１．６０（１Ｈ、ｍ、Ｈ２−２０）、δ３８．２９（Ｃ−２０）、δ１．３１（２Ｈ、ｍ、Ｈ−３６）及びδ２１．９８（Ｃ−３６））、第２級ヒドロキシル基（δ３．８６（１Ｈ、ｄ、Ｊ＝３．４Ｈｚ、Ｈ−３）及びδ７１．３７（Ｃ−３））、並びにメチン基（δ３．６５（１Ｈ、ｔ、Ｊ＝２．６Ｈｚ、Ｈ−４）及びδ３６．６９（Ｃ−４））を有するモノテルペン部分を含むことを示す。加えて、ヒドロキシルメチンプロトン（δ３．８６（１Ｈ、ｄ、Ｊ＝３．４Ｈｚ、Ｈ−３））及びメチンプロトン（δ３．６５（１Ｈ、ｔ、Ｊ＝２．６Ｈｚ、Ｈ−４））は、隣接し、互いにカップリングしている。
生成物Ｇｈ−１０５０のＨＭＢＣデータは、ヒドロキシメチンプロトン（δ３．８６（１Ｈ、ｄ、Ｊ＝３．１Ｈｚ、Ｈ−３））が、２つの第４級炭素（δ７９．４８（Ｃ−２）及びδ１００．２３（Ｃ−５））のみならず、２つのメチン基（δ３６．６９（Ｃ−４）及びδ４８．２７（Ｃ−３７））とも相関し；且つ、δ３．６５（Ｈ−４）が、δ２１．９８（Ｃ−３８）、δ４８．２７（Ｃ−３７）、δ７９．４８（Ｃ−２）、δ１００．２３（Ｃ−５）、δ１６２．８２（Ｃ−６）及びδ１００．１２（Ｃ−７）とのみならず、δ７１．３７（Ｃ−３）とも相関していることを示す。加えて、メチレンプロトン（δ２．０３（Ｈ１−２０）及びδ１．６０（Ｈ２−２０））は、δ７９．４８（Ｃ−２）、δ４８．２７（Ｃ−３７）、δ２３．６６（Ｃ−１９）及びδ７１．３７（Ｃ−３）と相関し；且つδ１．４９（Ｈ−１９）は、δ７９．４８（Ｃ−２）、δ７１．３７（Ｃ−３）、δ２１．９８（Ｃ−３６）及び芳香族炭素（δ１６３．３８（Ｃ−１８））と相関している。したがって、ヒドロキシル基はＣ−３に連結され；Ｃ−２はエーテル結合を介して芳香族環のＣ−１８に連結され；且つＣ−４は芳香族環のＣ−５に連結されることがわかる。
生成物Ｇｈ−１０５０のＮＯＥＳＹデータは、δ７．４７（Ｈ−１０）がδ３．４９（Ｈ−１１）と相関し；δ３．４９（Ｈ−１１）がδ２．３１（Ｈ１−２１）と相関し；δ１．３９（Ｈ２−２１）がδ２．５５（Ｈ−２２）と相関し；δ２．３１（Ｈ１−２１）及びδ２．５５（Ｈ−２２）の双方がδ１．２９（Ｈ−２４）と相関し；且つδ５．５７（Ｈ−２７）がδ１．６２（Ｈ−２９）と相関していることを示し、生成物Ｇｈ−１０５０のこの部分の立体構造は、ガンボジックアシッド又はガンボゲリックアシッドのそれに一致、すなわち１１Ｓ、１３Ｒ、１４Ｓ、２２Ｓ配置で存在し、トランス関係のＨ−２７及びカルボキシル基（Ｃ−３０）、並びにＺ配置の二重結合Δ２７，２８を含むことを証明している。生成物Ｇｈ−１０５０のＮＯＥＳＹデータは、また、δ２．２９（Ｈ−３７）が、δ３．６５（Ｈ−４）及びδ１．３１（Ｈ−３６）と相関していることに加えて、δ３．８６（Ｈ−３）及びδ１．６０（Ｈ２−２０）と相関していることを示し、モノテルペン環は、１，３−ジアキシアル相互作用を伴う椅子型立体配座を有し、Ｈ−３７及びＨ−３はアキシアル配向で存在し、且つメチレン基（Ｃ−１９）及びイソプロペニル基の双方は、エカトリアル配向で存在することを証明している。ヒドロキシメチンプロトン（Ｈ−３）はアキシアル配向で存在するので、Ｃ−３ヒドロキシル基はエカトリアル配向（α−配向）で存在し、Ｃ−３はＳ配置で存在する。加えて、δ１．６２（Ｈ−２９）は、δ４．６３（Ｈ１−４０）及びδ４．２９（Ｈ２−４０）と相関していないので、Ｃ−２はＲ配置で存在する。前記を考慮して、モノテルペン部分は、２Ｒ、３Ｓ、４Ｒ、３７Ｓの配置で存在することがわかる。
上記の情報に基づいて、生成物Ｇｈ−１０５０は、次の化学構造：
Figure 0005558408
を有する新規化合物であることが確認される。
生成物Ｇｈ−１０５０は、名称「３α−ヒドロキシガンボゲリックアシッド」｛ＩＵＰＡＣ名称：［２−ブテン酸、２−メチル−４−［（１Ｒ，３ａＳ，５Ｓ，９Ｒ，１０Ｓ，１３Ｒ，１６ａＳ，１７Ｓ）−３ａ，４，５，７，１０，１１，１２，１３−オクタヒドロ−８，１７−ジヒドロキシ−３，３，１３−トリメチル−１５−（３−メチル−２−ブテニル）−１０−（１−メチルエテニル）−７，１８−ジオキソ−１，５：９，１３−ジメタノ−１Ｈ，３Ｈ，９Ｈ−フロ［３．４−ｇ］オキソシノ［３．２−ｂ］キサンテン−１−イル］−，（２Ｚ）−］｝によって識別される。
２５．生成物Ｇｈ−３２９１
画分１の溶出物７から精製された生成物Ｇｈ−３２９１は、次の特性を有すると判定された：
黄色粉末；ｍｐ１０３〜１０６℃。
EIMS m/z (相対強度): 644 [M]+ (10), 626 (10), 616 (12), 545 (67), 517 (19), 471 (15), 459 (6), 419 (10), 389 (21), 349 (11), 347 (20), 309 (9), 295 (17), 271 (13), 253 (20), 245 (26), 227 (21), 215 (56), 189 (23), 171 (11), 147 (16), 129 (28), 105 (35), 99 (50), 84 (43), 69 (84), 55 (100); HREIMS [M]+ m/z: 644.2991; C38H44O9計算値644.2985.
1H-NMR (600 MHz, CDCl3): d 12.76 (1H, s, OH-6), 7.53 (1H, d, J=7.0 Hz, H-10), 6.60 (1H, d, J=10.2 Hz, H-4), 6.06 (1H, t, J=7.6 Hz, H-27), 5.36 (1H, d, J=10.3 Hz, H-3), 5.00 (1H, br t, J=6.3 Hz, H-32), 4.89 (1H, s, H1-40), 4.81 (1H, d, J=1.0 Hz, H2-40), 4.00 (1H, t, J=6.2 Hz, H-37), 3.46 (1H, dd, J=6.4, 5.1 Hz, H-11), 3.28 (1H, dd, J=14.9, 8.1 Hz, H1-31), 3.13 (1H, br dd, J=14.6, 4.7 Hz, H2-31), 2.93 (1H, dd, J=16.3, 7.9 Hz, H1-26), 2.87 (1H, dd, J=16.0, 7.6 Hz, H2-26), 2.51 (1H, d, J=9.3 Hz, H-22), 2.30 (1H, dd, J=13.5, 4.7 Hz, H1-21), 1.80 (1H, m, H1-20), 1.73 (3H, s, H-29), 1.71 (3H, s, H-25), 1.68 (3H, s, H-34), 1.67 (1H, m, H1-36), 1.66 (3H, m, H-39), 1.62 (3H, s, H-35), 1.61 (1H, m, H2-36), 1.54 (1H, m, H2-20), 1.39 (3H, s, H-19), 1.38 (1H, m, H2-21), 1.27 (3H, s, H-24).
13C-NMR (150 MHz, CDCl3): d 203.19 (C-12), 178.90 (C-8), 169.81 (C-30), 161.29 (C-18), 157.61 (C-16), 157.42 (C-6), 147.09 (C-38), 137.26 (C-27), 135.40 (C-10), 133.31 (C-9), 131.65 (C-33), 127.90 (C-28), 124.41 (C-3), 122.27 (C-32), 116.10 (C-4), 111.34 (C-40), 107.64 (C-17), 102.63 (C-5), 100.50 (C-7), 90.91 (C-14), 84.03 (C-23), 83.73 (C-13), 81.07 (C-2), 75.80 (C-37), 49.00 (C-22), 46.83 (C-11), 37.71 (C-20), 29.82 (C-25), 29.29 (C-36), 29.05 (C-26), 28.83 (C-24), 27.73 (C-19), 25.63 (C-35), 25.15 (C-21), 21.58 (C-31), 20.76 (C-29), 18.11 (C-34), 17.45 (C-39).
生成物Ｇｈ−３２９１のＥＩＭＳデータは、ｍ／ｚ ６４４に分子イオンピーク［Ｍ］＋を示し、且つ生成物Ｇｈ−３２９１のＨＲＥＩＭＳデータは、ｍ／ｚ ６４４．２９９１に［Ｍ］＋を示し、生成物Ｇｈ−３２９１は、ガンボゲリックアシッドの分子式に比べて１６多い質量単位を有する、Ｃ３８Ｈ４４Ｏ９の分子式を有することを示している。
生成物Ｇｈ−３２９１の１Ｈ−ＮＭＲ、１３Ｃ−ＮＭＲ及びＨＭＱＣデータは、生成物Ｇｈ−３２９１が、ガンボジックアシッドのそれと異なるＣ−２側鎖、すなわち、ガンボジックアシッド中の４−メチル−３−ペンテニル基の代わりに３−ヒドロキシ−４−メチル−４−ペンテニル基を有することを示す。生成物Ｇｈ−３２９１の１Ｈ−ＮＭＲ及び１３Ｃ−ＮＭＲデータは、また、生成物Ｇｈ−３２９１が、第２級ヒドロキシ基（δ４．００（１Ｈ、ｔ、Ｊ＝６．２Ｈｚ）及びδ７５．８０）及びｅｘｏ−メチレン基（δ４．８９（１Ｈ、ｓ）、δ４．８１（１Ｈ、ｄ）及びδ１１１．３４）を有することを示す。
生成物Ｇｈ−３２９１のＨＭＢＣデータは、ヒドロキシメチンプロトン（δ４．００）が、δ１１１．３４（Ｃ−４０）及びδ１４７．０９（Ｃ−３８）と相関していることに加え、δ１７．４５（Ｃ−３９）、δ２９．２９（Ｃ−３６）及びδ３７．７１（Ｃ−２０）と相関し；メチルプロトン（δ１．３９（Ｈ−１９））が、δ３７．７１（Ｃ−２０）と相関していることに加え、δ８１．０７（Ｃ−２）及びδ１２４．４１（Ｃ−３）と相関し；且つ、δ５．３６（Ｈ−３）が、δ８１．０７（Ｃ−２）、δ２７．７３（Ｃ−１９）及びδ３７．７１（Ｃ−２０）と相関していることを示す。
生成物Ｇｈ−３２９１の１Ｈ−１Ｈ ＣＯＳＹデータは、δ４．００（１Ｈ、ｔ、Ｊ＝６．２Ｈｚ、Ｈ−３７）がメチレンプロトン（δ１．６７（Ｈ１−３６）及びδ１．６１（Ｈ２−３６））とカップリングしていることを示し、ヒドロキシ基はＣ−３７に結合されていることを証明している。
生成物Ｇｈ−３２９１のＮＯＥＳＹデータは、δ７．５３（Ｈ−１０）がδ３．４６（Ｈ−１１）と相関し；δ３．４６（Ｈ−１１）がδ２．３０（Ｈ１−２１）と相関し；δ１．３８（Ｈ２−２１）がδ２．５１（Ｈ−２２）及びδ１．２７（Ｈ−２４）と相関し；且つδ６．０６（Ｈ−２７）がδ１．７３（Ｈ−２９）と相関していることを示し、生成物Ｇｈ−３２９１のこの部分の立体構造は、ガンボジックアシッドのそれと一致、すなわち、１１Ｓ、１３Ｒ、１４Ｓ、２２Ｓ配置で存在し、トランス関係のＨ−２７及びカルボキシル基（Ｃ−３０）、並びにＺ配置の二重結合Δ２７，２８を含むことを証明している。
生成物Ｇｈ−３２９１のＮＯＥＳＹデータは、また、ヒドロキシメチンプロトン（δ４．００（Ｈ−３７））が、δ４．８９（Ｈ１−４０）及びδ１．６６（Ｈ−３９）のみならず、２つのメチレン基のプロトン（δ１．８０（Ｈ１−２０）、δ１．５４（Ｈ２−２０）、δ１．６７（Ｈ１−３６）及びδ１．６１（Ｈ２−３６））とも相関し；且つδ５．３６（Ｈ−３）が、δ１．３９（Ｈ−１９）、δ１．８０（Ｈ１−２０）、δ１．５４（Ｈ２−２０）、δ１．６７（Ｈ１−３６）及びδ１．６１（Ｈ２−３６）と相関していることを示す。加えて、δ１．３９（Ｈ−１９）がδ１．７３（Ｈ−２９）と相関しているので、Ｃ−２はＲ配置で存在する。
上記の情報に基づいて、生成物Ｇｈ−３２９１は、次の化学構造：
Figure 0005558408
を有する新規化合物であることが確認される。
生成物Ｇｈ−３２９１は、名称「フォルモキサントンＤ」｛ＩＵＰＡＣ名称：［２−ブテン酸、２−メチル−４−［（１Ｒ，３ａＳ，５Ｓ，１１Ｒ，１４ａＳ）−３ａ，４，５，７−テトラヒドロ−８−ヒドロキシ−３，３，１１−トリメチル−１３−（３−メチル−２−ブテニル）−１１−（３−ヒドロキシ−４−メチル−４−ペンテニル）−７，１５−ジオキソ−１，５−メタノ−１Ｈ，３Ｈ，１１Ｈ−フロ［３．４−ｇ］ピラノ［３．２−ｂ］キサンテン−１−イル］−，（２Ｚ）−］｝によって識別される。
２６．生成物Ｇｈ−３３５２
画分１の溶出物１２から精製された生成物Ｇｈ−３３５２は、次の特性を有すると判定された：
黄色粉末；ｍｐ１９４〜１９７℃。
FABMS m/z (相対強度): 645 [M+H]+(11), 634 (10), 591 (11), 575 (13), 574 (22), 573 (45), 559 (12), 545(16), 544 (11), 487 (15), 417 (16), 405 (11), 391 (13), 375 (10), 371 (10), 349 (11), 338 (12), 321 (12), 307 (27), 299 (17), 295 (17), 289 (23), 259 (19), 255 (21), 219 (24), 215 (20), 213 (27), 189 (18), 176 (21), 165 (24), 154 (100), 136 (92), 121 (30), 107 (56), 91 (55), 89 (50), 77 (59), 69 (69), 57 (69), 55 (66); HRFABMS [M+H]+m/z: 645.3066; C38H45O9計算値645.3064.
1H-NMR (600 MHz, CDCl3): d 12.92 (1H, s, OH-6), 7.52 (1H, d, J=6.9Hz, H-10), 6.66 (1H, d, J=10.1 Hz, H-4), 5.58 (1H, br t, J=6.5 Hz, H-27), 5.45 (1H, d, J=10.2Hz, H-3), 5.03 (1H, t, J=7.0Hz, H-37), 3.79 (1H, dd, J=9.2, 3.1 Hz, H-32), 3.50 (1H, dd, J=6.8, 4.7 Hz, H-11), 3.30 (1H, dd, J=14.8, 10.1 Hz, H1-26), 2.90 (1H, ddd, J=15.3, 5.6, 1.3 Hz, H2-26), 2.85 (1H, dd, J=13.9, 9.7 Hz, H1-31), 2.71 (1H, dd, J=13.8, 3.4 Hz, H2-31), 2.49 (1H, d, J=9.3 Hz, H-22), 2.33 (1H, dd, J=13.5, 4.7 Hz, H1-21), 2.05 (2H, m, H-36), 1.74 (3H, s, H-25), 1.73 (1H, m, H1-20), 1.69 (3H, s, H-29), 1.66 (1H, m, H2-20), 1.63 (3H, s, H-39), 1.53 (3H, s, H-40), 1.45 (3H, s, H-19), 1.33 (1H, m, H2-21), 1.29 (3H, s, H-34), 1.27 (3H, s, H-35), 1.25 (3H, s, H-24).
13C-NMR (150 MHz, CDCl3): d 202.89 (C-12), 179.05 (C-8), 168.89 (C-30), 161.34 (C-18), 158.49 (C-6), 158.28 (C-16), 136.09 (C-27), 135.01 (C-10), 133.19 (C-9), 132.17 (C-38), 129.31 (C-28), 124.75 (C-3), 123.46 (C-37), 115.93 (C-4), 104.83 (C-17), 102.92 (C-5), 100.67 (C-7), 90.77 (C-14), 84.28 (C-13), 83.86 (C-23), 81.81 (C-2), 77.20 (C-32), 73.24 (C-33), 49.12 (C-22), 47.04 (C-11), 41.72 (C-20), 30.56 (C-25), 29.65 (C-26), 28.89 (C-24), 27.18 (C-19), 25.89 (C-31), 25.69 (C-39), 25.63 (C-35), 25.36 (C-21), 23.75 (C-34), 22.66 (C-36), 20.73 (C-29), 17.59 (C-40).
生成物Ｇｈ−３３５２のＨＲＦＡＢＭＳデータは、ｍ／ｚ ６４５．３０６６に擬分子イオンピーク［Ｍ＋Ｈ］＋を示し、生成物Ｇｈ−３３５２が、ガンボジックアシッドの分子式に比べて１６多い質量単位を有する、Ｃ３８Ｈ４４Ｏ９の分子式を有することを示唆している。
生成物Ｇｈ−３３５２の１Ｈ−ＮＭＲ、１３Ｃ−ＮＭＲ及びＨＭＱＣデータは、生成物Ｇｈ−３３５２が、ガンボジックアシッドのそれと異なるＣ−１７側鎖、すなわち、ガンボジックアシッド中の３−メチル−３−ブテニル基の代わりに２，３−エポキシ−３−メチルブチル基を有することを示す。ガンボジックアシッドと比較すると、生成物Ｇｈ−３３５２の不飽和数は不変のままである。
生成物Ｇｈ−３３５２の１Ｈ−１Ｈ ＣＯＳＹ、ＨＭＱＣ及びＨＭＢＣデータは、オキシメチンプロトン（δ３．７９（１Ｈ、ｄｄ、Ｊ＝９．２Ｈｚ、３．１Ｈｚ））がメチレンプロトン（δ２．８５（１Ｈ、ｄｄ、Ｊ＝１３．９Ｈｚ、９．７Ｈｚ、Ｈ１−３１））とカップリングし；且つδ２．８５がもう１つのメチレンプロトン（δ２．７１（１Ｈ、ｄｄ、Ｊ＝１３．８Ｈｚ、３．４Ｈｚ、Ｈ２−３１））とカップリングしていることを示す。加えて、生成物Ｇｈ−３３５２は、酸素に結合した第４級炭素に結合された２つの第３級メチル基（δ１．２９（３Ｈ、ｓ、Ｈ−３４）及びδ１．２７（３Ｈ、ｓ、Ｈ−３５））を有する。酸素に結合した第４級炭素（δ７３．２４（Ｃ−３３））、オキシメチン炭素（δ７７．２０（ＣＨ））及びメチレン炭素（δ２５．８９（ＣＨ２）、Ｃ−３１）のシグナルから、エポキシ基がＣ−３２及びＣ−３３に配置されていることがわかる。
生成物Ｇｈ−３３５２のＨＭＢＣデータは、δ２．８５（Ｈ１−３１）が、δ７７．２０（Ｃ−３２）及びδ１０４．８３（Ｃ−１７）と相関していることを示し、Ｃ−１７に結合された側鎖が、２，３−エポキシ−３−メチルブチル基であることを証明している。
生成物Ｇｈ−３３５２のＮＯＥＳＹデータは、δ７．５２（Ｈ−１０）がδ３．５０（Ｈ−１１）と相関し；δ３．５０（Ｈ−１１）がδ２．３３（Ｈ１−２１）及びδ１．３３（Ｈ２−２１）と相関し；δ１．３３（Ｈ２−２１）とδ２．４９（Ｈ−２２）とが相関し；δ２．４９（Ｈ−２２）がδ１．７４（Ｈ−２５）と相関し；且つδ５．５８（Ｈ−２７）がδ１．６９（Ｈ−２９）と相関していることを示し、生成物Ｇｈ−３３５２のこの部分の立体構造は、ガンボジックアシッドのそれと一致、すなわち、１１Ｓ、１３Ｒ、１４Ｓ、２２Ｓの配置で存在し、トランス関係のＨ−２７及びカルボキシル基（Ｃ−３０）、並びにＺ配置の二重結合Δ２７，２８を含むことを証明している。加えて、δ１．６９（Ｈ−２９）がδ１．４５（Ｈ−１９）と相関しているので、Ｃ−２はＲ配置で存在する。
上記の情報に基づいて、生成物Ｇｈ−３３５２は、次の化学構造：
Figure 0005558408
を有する新規化合物であることが確認される。
生成物Ｇｈ−３３５２は、名称「フォルモキサントンＥ」｛ＩＵＰＡＣ名称：［２−ブテン酸、２−メチル−４−［（１Ｒ，３ａＳ，５Ｓ，１１Ｒ，１４ａＳ）−３ａ，４，５，７−テトラヒドロ−８−ヒドロキシ−３，３，１１−トリメチル−１３−（２，３−エポキシ−３−メチルブチル）−１１−（４−メチル−３−ペンテニル）−７，１５−ジオキソ−１，５−メタノ−１Ｈ，３Ｈ，１１Ｈ−フロ［３．４−ｇ］ピラノ［３．２−ｂ］キサンテン−１−イル］−，（２Ｚ）−］｝によって識別される。
２７．生成物Ｇｈ−３３５１
画分１の溶出物１０から精製された生成物Ｇｈ−３３５１は、次の特性を有すると判定された：
黄色粉末；ｍｐ１６８〜１７１℃。
EIMS m/z (相対強度): 621 (6), 603 (17), 589 (100), 577 (23), 561 (19), 503 (47), 467 (6), 423 (8), 381 (5), 339 (4), 315 (15), 231 (7), 213 (9), 135 (4), 69 (15); HRFABMS [M+H]+ m/z: 645.3070; C38H45O9計算値645.3064.
1H-NMR (600 MHz, CDCl3): d 12.91 (1H, s, OH-6), 7.51 (1H, d, J=6.9 Hz, H-10), 6.49 (1H, d, J=10.1 Hz, H-4), 5.56 (1H, br t, J=7.3 Hz, H-27), 5.43 (1H, d, J=10.2 Hz, H-3), 5.03 (1H, t, J=7.0 Hz, H-37), 3.76 (1H, br d, J=7.0 Hz, H-32), 3.50 (1H, dd, J=6.6, 4.9 Hz, H-11), 3.29 (1H, dd, J=15.2, 10.1 Hz, H1-26), 2.89 (1H, ddd, J=15.3, 5.5, 1.5 Hz, H2-26), 2.82 (1H, dd, J=13.9, 9.9 Hz, H1-31), 2.69 (1H, br d, J=12.7 Hz, H2-31), 2.48 (1H, d, J=9.3 Hz, H-22), 2.32 (1H, dd, J=13.5, 4.0 Hz, H1-21), 2.03 (2H, m, H-36), 1.73 (3H, s, H-25), 1.68 (3H, s, H-29), 1.67 (2H, m, H-20), 1.62 (3H, s, H-39), 1.53 (3H, s, H-40), 1.43 (3H, s, H-19), 1.30 (1H, m, H2-21), 1.28 (3H, s, H-34), 1.26 (3H, s, H-35), 1.24 (3H, s, H-24).
13C-NMR (150 MHz, CDCl3): d 202.99 (C-12), 179.03 (C-8), 169.60 (C-30), 161.37 (C-18), 158.46 (C-6), 158.25 (C-16), 135.76 (C-27), 134.92 (C-10), 133.21 (C-9), 132.14 (C-38), 129.58 (C-28), 124.72 (C-3), 123.47 (C-37), 115.90 (C-4), 104.81 (C-17), 102.88 (C-5), 100.63 (C-7), 90.74 (C-14), 84.26 (C-13), 83.79 (C-23), 81.75 (C-2), 77.15 (C-32), 73.25 (C-33), 49.11 (C-22), 47.04 (C-11), 41.71 (C-20), 30.56 (C-25), 29.69 (C-26), 28.88 (C-24), 27.13 (C-19), 25.92 (C-31), 25.89 (C-39), 25.63 (C-35), 25.36 (C-21), 23.44 (C-34), 22.65 (C-36), 20.74 (C-29), 17.59 (C-40).
生成物Ｇｈ−３３５１のＥＩＭＳデータは、ｍ／ｚ ５８９（１００）にベースピークを示し、生成物Ｇｈ−３３５１のＨＲＦＡＢＭＳデータは、ｍ／ｚ ６４５．３０７０に擬分子イオンピーク［Ｍ＋Ｈ］＋を示し、生成物Ｇｈ−３３５１は、ガンボジックアシッドの分子式に比べて１６多い質量単位を有する、Ｃ３８Ｈ４４Ｏ９の分子式を有することを示している。
生成物Ｇｈ−３３５１の１Ｈ−ＮＭＲ、１３Ｃ−ＮＭＲ及びＨＭＱＣデータは、生成物Ｇｈ−３３５１が、ガンボジックアシッドのそれと異なるＣ−１７側鎖、すなわち、ガンボジックアシッド中の３−メチル−２−ブテニル基の代わりに２，３−エポキシ−３−メチルブチル基を有することを示す。ガンボジックアシッドと比較すると、生成物Ｇｈ−３３５１の不飽和数は不変のままである。
生成物Ｇｈ−３３５１の１Ｈ−１Ｈ ＣＯＳＹ、ＨＭＱＣ及びＨＭＢＣデータは、オキシメチンプロトン（δ３．７６（１Ｈ、ｂｒ ｄ、Ｊ＝７．０Ｈｚ））がメチレンプロトン（δ２．８２（１Ｈ、ｄｄ、Ｊ＝１３．９Ｈｚ、９．９Ｈｚ、Ｈ１−３１））とカップリングし；且つδ２．８２がもう１つのメチレンプロトン（δ２．６９（１Ｈ、ｂｒ ｄ、Ｊ＝１２．７Ｈｚ、Ｈ２−３１））とカップリングしていることを示す。加えて、生成物Ｇｈ−３３５１は、酸素に結合した２つの第３級メチルプロトン（δ１．２８（３Ｈ、ｓ、Ｈ−３４）及びδ１．２６（３Ｈ、ｓ、Ｈ−３５））を有する。酸素に結合した第４級炭素（δ７３．２５（Ｃ−３３））、オキシメチン基（δ７７．１５（Ｃ−３２））、及びメチレン基（δ２５．９２（Ｃ−３１））のシグナルから、エポキシ基はＣ−３２及びＣ−３３に配置されていることがわかる。
生成物Ｇｈ−３３５１のＨＭＢＣデータは、δ２．８２（Ｈ１−３１）が、δ７７．１５（Ｃ−３２）、δ１０２．８８（Ｃ−５）、δ１０４．８１（Ｃ−１７）、δ１５８．２５（Ｃ−１６）及びδ１６１．３７（Ｃ−１８）と相関していることを示し、Ｃ−１７に結合された側鎖は、２，３−エポキシ−３−メチルブチル基であることを証明している。
生成物Ｇｈ−３３５１のＮＯＥＳＹデータは、δ７．５１（Ｈ−１０）がδ３．５０（Ｈ−１１）と相関し；δ３．５０（Ｈ−１１）がδ２．３２（Ｈ１−２１）及びδ１．３０（Ｈ２−２１）と相関し；δ１．３０（Ｈ２−２１）がδ２．４８（Ｈ−２２）と相関し；δ２．４８（Ｈ−２２）がδ１．７３（Ｈ−２５）と相関し；且つδ５．５６（Ｈ−２７）がδ１．６８（Ｈ−２９）と相関していることを示し、生成物Ｇｈ−３３５１のこの部分の立体構造は、ガンボジックアシッドのそれに一致、すなわち、１１Ｓ、１３Ｒ、１４Ｓ、２２Ｓ配置で存在し、トランス関係のＨ−２７及びカルボキシル基（Ｃ−３０）、並びにＺ配置の二重結合Δ２７，２８を含むことを証明している。加えて、δ１．６８（Ｈ−２９）がδ２．０３（Ｈ−３６）と相関しているので、Ｃ−２はＳ配置で存在する。
上記の情報に基づいて、生成物Ｇｈ−３３５１は、次の化学構造：
Figure 0005558408
を有する新規化合物であることが確認される。
生成物Ｇｈ−３３５１は、名称「エピフォルモキサントンＥ」｛ＩＵＰＡＣ名称：［２−ブテン酸、２−メチル−４−［（１Ｒ，３ａＳ，５Ｓ，１１Ｓ，１４ａＳ）−３ａ，４，５，７−テトラヒドロ−８−ヒドロキシ−３，３，１１−トリメチル−１３−（２，３−エポキシ−３−メチルブチル）−１１−（４−メチル−３−ペンテニル）−７，１５−ジオキソ−１，５−メタノ−１Ｈ，３Ｈ，１１Ｈ−フロ［３．４−ｇ］ピラノ［３．２−ｂ］キサンテン−１−イル］−，（２Ｚ）−］｝によって識別される。
２８．生成物Ｇｈ−１０５２
画分１の溶出物９から精製された生成物Ｇｈ−１０５２は、次の特性を有すると判定された：
黄色粉末；ｍｐ８３〜８５℃。
EIMS m/z (相対強度): 662 [M]+ (6), 634 (8), 579 (100), 551 (16), 545 (9), 507 (14), 489 (6), 417 (12), 389 (4), 349 (4), 295 (5), 245 (8), 214.9 (14), 189 (8), 147 (4), 99 (7), 69 (29); HREIMS [M]+ m/z: 662.3096; C38H46O10計算値662.3091.
1H-NMR (600 MHz, CDCl3): d 12.92 (1H, s, OH-6), 7.52 (1H, d, J=7.0 Hz, H-10), 6.65 (1H, d, J=10.2 Hz, H-4), 5.63 (1H, t, J=7.4 Hz, H-27), 5.46 (1H, d, J=10.3 Hz, H-3), 5.07 (1H, t, J=7.1 Hz, H-37), 3.74 (1H, dd, J=10.0, 3.4 Hz, H-32), 3.49 (1H, dd, J=6.7, 4.7 Hz, H-11), 3.25 (1H, dd, J=15.2, 9.9 Hz, H1-26), 2.89 (1H, ddd, J=15.3, 5.9, 1.7 Hz, H2-26), 2.84 (1H, dd, J=13.9, 10.1 Hz, H1-31), 2.72 (1H, dd, J=13.9, 3.4 Hz, H2-31), 2.49 (1H, d, J=9.3 Hz, H-22), 2.32 (1H, dd, J=13.5, 4.7 Hz, H1-21), 2.07 (2H, m, H-36), 1.79 (1H, m, H1-20), 1.73 (3H, s, H-25), 1.69 (3H, s, H-29), 1.67 (1H, m, H2-20), 1.65 (3H, s, H-39), 1.57 (3H, s, H-40), 1.37 (3H, s, H-19), 1.33 (1H, dd, J=13.5, 9.6 Hz, H2-21), 1.27 (3H, s, H-35), 1.26 (3H, s, H-24), 1.24 (3H, s, H-34).
13C-NMR (150 MHz, CDCl3): d 202.93 (C-12), 179.10 (C-8), 169.18 (C-30), 161.47 (C-18), 158.49 (C-6), 158.22 (C-16), 136.45 (C-27), 135.16 (C-10), 133.12 (C-9), 132.66 (C-38), 129.08 (C-28), 124.56 (C-3), 123.36 (C-37), 116.12 (C-4), 104.92 (C-17), 102.95 (C-5), 100.63 (C-7), 90.82 (C-14), 84.18 (C-13), 83.82 (C-23), 81.76 (C-2), 77.11 (C-32), 73.09 (C-33), 49.08 (C-22), 47.03 (C-11), 41.74 (C-20), 30.62 (C-25), 29.54 (C-26), 28.83 (C-24), 27.21 (C-19), 25.87 (C-35), 25.68 (C-31), 25.65 (C-39), 25.33 (C-21), 23.65 (C-34), 22.91 (C-36), 20.74 (C-29), 17.71 (C-40).
生成物Ｇｈ−１０５２のＥＩＭＳデータは、ｍ／ｚ ６６２に分子イオンピーク［Ｍ］＋を、及びｍ／ｚ ５７９（１００）にベースピークを示し、且つ生成物Ｇｈ−１０５２のＨＲＥＩＭＳデータは、ｍ／ｚ ６６２．３０９６に［Ｍ］＋を示し、生成物Ｇｈ−１０５２は、ガンボジックアシッドの分子式に比べて３４多い質量単位を有する、Ｃ３８Ｈ４６Ｏ１０の分子式を有することを示している。
生成物Ｇｈ−１０５２の１Ｈ−ＮＭＲ、１３Ｃ−ＮＭＲ及びＨＭＱＣデータは、生成物Ｇｈ−１０５２が、ガンボジックアシッドのそれと異なるＣ−１７側鎖、すなわち、ガンボジックアシッド中の３−メチル−２−ブテニル基の代わりに２，３−ジヒドロキシ−３−メチルブチル基を有することを示す。
生成物Ｇｈ−１０５２の１Ｈ−ＮＭＲ、１３Ｃ−ＮＭＲデータは、生成物Ｇｈ−１０５２が、第２級ヒドロキシ基（δ３．７４（１Ｈ、ｄｄ、Ｊ＝１０．０Ｈｚ、３．４Ｈｚ）及びδ７７．１１）及び酸素に結合した第４級炭素（δ７３．０９）を有することを示す。加えて、生成物Ｇｈ−１０５２の１Ｈ−１Ｈ ＣＯＳＹデータは、ヒドロキシメチンプロトン（δ３．７４（１Ｈ、ｄｄ、Ｊ＝１０．０Ｈｚ、３．４Ｈｚ）が２つのメチレンプロトン（δ２．８４（１Ｈ、ｄｄ、Ｊ＝１３．９Ｈｚ、１０．１Ｈｚ、Ｈ１−３１）及びδ２．７２（１Ｈ、ｄｄ、Ｈ＝１３．９Ｈｚ、３．４Ｈｚ、Ｈ２−３１））とカップリングしていることを示す。
生成物Ｇｈ−１０５２のＨＭＱＣデータは、Ｃ−３１（δ２５．６８）がメチレン基であり；第２級ヒドロキシ基がＣ−３２（δ７７．１１）に連結され；第３級ヒドロキシ基がＣ−３３（δ７３．０９）に連結され；且つＣ−３５（δ２５．８７）及びＣ−３４（δ２３．６５）が第３級メチル基であることを示す。
生成物Ｇｈ−１０５２のＨＭＢＣデータは、δ３．７４（Ｈ−３２）が、δ７７．０９（Ｃ−３３）及びδ２３．６５（Ｃ−３４）と相関し；δ２．８４（Ｈ１−３１）及びδ２．７２（Ｈ２−３１）の双方が、δ１０４．９２（Ｃ−１７）、δ１６１．４７（Ｃ−１８）、δ１５８．２２（Ｃ−１６）及びδ７７．１１（Ｃ−３２）と相関し；Ｈ１−３１は、δ７３．０９（Ｃ−３３）とも相関し；δ１．２４（Ｈ−３４）及びδ１．２７（Ｈ−３５）が、双方ともδ７７．１１（Ｃ−３２）及びδ７３．０９（Ｃ−３３）と相関し；Ｈ−３４は、δ２５．８７（Ｃ−３５）とも相関し；且つＨ−３５がδ２３．６５（Ｃ−３４）と相関していることを示し、Ｃ−１７に結合された側鎖は、２，３−ジヒドロキシ−３−メチルブチル基であることを証明している。
生成物Ｇｈ−１０５２のＮＯＥＳＹデータは、δ７．５２（Ｈ−１０）がδ３．４９（Ｈ−１１）と相関し；δ３．４９（Ｈ−１１）がδ２．３２（Ｈ１−２１）及びδ１．３３（Ｈ２−２１）と相関し；δ１．３３（Ｈ２−２１）がδ２．４９（Ｈ−２２）と相関し；δ２．４９（Ｈ−２２）がδ１．７３（Ｈ−２５）と相関し；且つδ５．６３（Ｈ−２７）がδ１．６９（Ｈ−２９）と相関していることを示し、生成物Ｇｈ−１０５２のこの部分の立体構造は、ガンボジックアシッドのそれと一致、すなわち、１１Ｓ、１３Ｒ、１４Ｓ、２２Ｓ配置で存在し、トランス関係のＨ−２７及びカルボキシル基（Ｃ−３０）、並びにＺ配置の二重結合Δ２７，２８を含むことを証明している。加えて、δ１．３７（Ｈ−１９）がδ１．６９（Ｈ−２９）と相関しているので、Ｃ−２はＲ配置で存在する。
上記の情報に基づいて、生成物Ｇｈ−１０５２は、次の化学構造：
Figure 0005558408
を有する新規化合物であることが確認される。
生成物Ｇｈ−１０５２は、名称「フォルモキサントンＦ」｛ＩＵＰＡＣ名称：［２−ブテン酸、２−メチル−４−［（１Ｒ，３ａＳ，５Ｓ，１１Ｒ，１４ａＳ）−３ａ，４，５，７−テトラヒドロ−８−ヒドロキシ−３，３，１１−トリメチル−１３−（２，３−ジヒドロキシ−３−メチルブチル）−１１−（４−メチル−３−ペンテニル）−７，１５−ジオキソ−１，５−メタノ−１Ｈ，３Ｈ，１１Ｈ−フロ［３．４−ｇ］ピラノ［３．２−ｂ］キサンテン−１−イル］−，（２Ｚ）−］｝によって識別される。
２９．生成物Ｇｈ−１０３６
画分１の溶出物６から精製された生成物Ｇｈ−１０３６は、次の特性を有すると判定された：
黄色粉末；ｍｐ７６〜７８℃。
EIMS m/z (相対強度): 662 [M]+ (13), 634 (7), 579 (100), 551 (13), 545 (10), 507 (12), 489 (5), 417 (9), 375 (3), 349 (3), 295 (4), 245 (8), 215 (8), 213 (7), 147 (4), 105 (5), 69 (19); HREIMS [M]+ m/z 662.3098; C38H46O10計算値662.3091.
1H-NMR (600 MHz, CDCl3): d 12.91 (1H, s, OH-6), 7.52 (1H, d, J=6.9 Hz, H-10), 6.66 (1H, d, J=10.0 Hz, H-4), 5.53 (1H, br t, J=5.2 Hz, H-27), 5.47 (1H, d, J=10.1 Hz, H-3), 5.08 (1H, t, J=6.9 Hz, H-37), 3.74 (1H, dd, J=11.2, 2.6 Hz, H-32), 3.49 (1H, t, J=5.6 Hz, H-11), 3.27 (1H, dd, J=15.0, 10.4 Hz, H1-26), 2.87 (1H, dd, J=13.6, 11.7 Hz, H1-31), 2.82 (1H, br dd, J=15.3, 3.8 Hz, H2-26), 2.72 (1H, dd, J=13.7, 2.8 Hz, H2-31), 2.48 (1H, d, J=9.2 Hz, H-22), 2.32 (1H, dd, J=13.5, 4.5 Hz, H1-21), 2.10 (2H, m, H-36), 1.78 (1H, m, H1-20), 1.702 (3H, s, H-25), 1.697 (1H, m, H2-20), 1.653 (3H, s, H-29), 1.648 (3H, s, H-39), 1.58 (3H, s, H-40), 1.35 (3H, s, H-19), 1.33 (1H, m, H2-21), 1.28 (3H, s, H-35), 1.25 (3H, s, H-24), 1.24 (3H, s, H-34).
13C-NMR (150 MHz, CDCl3): d 202.96 (C-12), 179.04 (C-8), 168.66 (C-30), 161.45 (C-18), 158.35 (C-6), 158.28 (C-16), 135.28 (C-27), 134.98 (C-10), 133.19 (C-9), 132.39 (C-38), 129.46 (C-28), 124.77 (C-3), 123.52 (C-37), 116.07 (C-4), 104.54 (C-17), 103.19 (C-5), 100.64 (C-7), 90.87 (C-14), 84.28 (C-13), 83.60 (C-23), 81.71 (C-2), 76.57 (C-32), 73.06 (C-33), 49.07 (C-22), 46.99 (C-11), 41.68 (C-20), 30.76 (C-25), 29.96 (C-26), 28.86 (C-24), 26.79 (C-19), 26.29 (C-35), 25.63 (C-39), 25.42 (C-21), 24.62 (C-31), 23.56 (C-34), 22.82 (C-36), 20.52 (C-29), 17.62 (C-40).
生成物Ｇｈ−１０３６のＥＩＭＳデータは、ｍ／ｚ ６６２に分子イオンピーク［Ｍ］＋を、及びｍ／ｚ ５７９（１００）にベースピークを示し、且つ生成物Ｇｈ−１０３６のＨＲＥＩＭＳデータは、ｍ／ｚ ６６２．３０９８に［Ｍ］＋を示し、生成物Ｇｈ−１０３６は、ガンボジックアシッドの分子式に比べて３４多い質量単位を有する、Ｃ３８Ｈ４６Ｏ１０の分子式を有することを示している。
生成物Ｇｈ−１０３６の１Ｈ−ＮＭＲ、１３Ｃ−ＮＭＲ及びＨＭＱＣデータは、生成物Ｇｈ−１０３６が、ガンボジックアシッドのそれと異なるＣ−１７側鎖、すなわち、ガンボジックアシッド中の３−メチル−２−ブテニル基の代わりに２，３−ジヒドロキシ−３−メチルブチル基を有することを示す。
生成物Ｇｈ−１０３６の１Ｈ−ＮＭＲ及び１３Ｃ−ＮＭＲデータは、生成物Ｇｈ−１０３６が、第２級ヒドロキシ基（δ３．７４（１Ｈ、ｄｄ、Ｊ＝１１．２Ｈｚ、２．６Ｈｚ）及びδ７６．５７）、並びに酸素に結合した第４級炭素（δ７３．０６）を有することを示す。
加えて、生成物Ｇｈ−１０３６の１Ｈ−１Ｈ ＣＯＳＹデータは、ヒドロキシメチンプロトン（δ３．７４（１Ｈ、ｄｄ、Ｊ＝１１．２Ｈｚ、２．６Ｈｚ））が、２つのメチレンプロトン（δ２．８７（１Ｈ、ｄｄ、Ｊ＝１３．６Ｈｚ、１１．７Ｈｚ、Ｈ１−３１）及びδ２．７２（１Ｈ、ｄｄ、Ｊ＝１３．７Ｈｚ、２．８Ｈｚ、Ｈ２−３１））とカップリングしていることを示す。
生成物Ｇｈ−１０３６のＨＭＱＣデータは、Ｃ−３１（δ２４．６２）がメチレン基であり；第２級ヒドロキシ基がＣ−３２（δ７６．５７）に連結され；第３級ヒドロキシ基がＣ−３３（δ７３．０６）に連結され；且つＣ−３４（δ２３．５６）及びＣ−３５（δ２６．２９）が第３級メチル基であることを示す。
生成物Ｇｈ−１０３６のＨＭＢＣデータは、δ３．７４（Ｈ−３２）が、δ２４．６２（Ｃ−３１）、δ７３．０６（Ｃ−３３）及びδ２３．５６（Ｃ−３４）と相関していることに加え、δ１０４．５４（Ｃ−１７）と相関し；且つδ２．８７（Ｈ１−３１）及びδ２．７２（Ｈ２−３１）の双方が、δ７６．５７（Ｃ−３２）、δ７３．０６（Ｃ−３３）、δ１０４．５４（Ｃ−１７）、δ１６１．４５（Ｃ−１８）及びδ１５８．２８（Ｃ−１６）と相関していることを示し、Ｃ−１７に結合した側鎖が、２，３−ジヒドロキシ−３−メチルブチル基であることを証明している。
生成物Ｇｈ−１０３６のＮＯＥＳＹデータは、δ７．５２（Ｈ−１０）がδ３．４９（Ｈ−１１）と相関し；δ３．４９（Ｈ−１１）がδ２．３２（Ｈ１−２１）及びδ１．３３（Ｈ２−２１）と相関し；δ１．３３（Ｈ２−２１）がδ２．４８（Ｈ−２２）と相関し；δ２．４８（Ｈ−２２）がδ１．７０２（Ｈ−２５）と相関し；且つδ５．５３（Ｈ−２７）がδ１．６５３（Ｈ−２９）と相関していることを示し、生成物Ｇｈ−１０３６のこの部分の立体構造は、ガンボジックアシッドのそれと一致、すなわち、１１Ｓ、１３Ｒ、１４Ｓ、２２Ｓ配置で存在し、トランス関係のＨ−２７及びカルボキシル基（Ｃ−３０）、並びにＺ配置の二重結合Δ２７，２８を含むことを証明している。加えて、δ１．６５３（Ｈ−２９）がδ１．７８（Ｈ１−２０）及びδ２．１０（Ｈ−３６）と相関しているので、Ｃ−２はＳ配置で存在する。
上記の情報に基づいて、生成物Ｇｈ−１０３６は、次の化学構造：
Figure 0005558408
を有する新規化合物であることが確認される。
生成物Ｇｈ−１０３６は、名称「エピフォルモキサントンＦ」｛ＩＵＰＡＣ名称：［２−ブテン酸、２−メチル−４−［（１Ｒ，３ａＳ，５Ｓ，１１Ｓ，１４ａＳ）−３ａ，４，５，７−テトラヒドロ−８−ヒドロキシ−３，３，１１−トリメチル−１３−（２，３−ジヒドロキシ−３−メチルブチル）−１１−（４−メチル−３−ペンテニル）−７，１５−ジオキソ−１，５−メタノ−１Ｈ，３Ｈ，１１Ｈ−フロ［３．４−ｇ］ピラノ［３．２−ｂ］キサンテン−１−イル］−，（２Ｚ）−］｝によって識別される。
３０．生成物Ｇｈ−３３５３
画分１の溶出物１１から精製された生成物Ｇｈ−３３５３は、次の特性を有すると判定された：
黄色粉末；ｍｐ１５８〜１６２℃。
EIMS m/z (相対強度): 590 (32), 589 (100), 577 (24), 561 (19), 503 (44), 467 (6), 423 (8), 381 (5), 339 (4), 315 (8), 311 (3), 285 (2), 247 (4), 231 (6), 205 (2), 135 (4), 81 (3), 69 (14); HRFABMS [M+H]+ m/z: 661.3019; C38H45O10計算値661.3013.
1H-NMR (600 MHz, CDCl3): d 13.13 (1H, s, OH-6), 7.56 (1H, d, J=7.1 Hz, H-10), 6.62 (1H, d, J=10.1 Hz, H-4), 5.44 (1H, d, J=10.3 Hz, H-3), 5.15 (1H, d, J=8.9 Hz, H-31), 5.04 (1H, br t, J=3.5 Hz, H-37), 5.01 (1H, m, H-27), 4.70 (1H, d, J=8.9 Hz, H-32), 3.55 (1H, dd, J=6.6, 4.9 Hz, H-11), 3.42 (1H, t, J=13.4 Hz, H1-26), 2.73 (1H, br d, J=13.9 Hz, H2-26), 2.52 (1H, d, J=9.3 Hz, H-22), 2.36 (1H, dd, J=13.5, 7.7 Hz, H1-21), 2.05 (2H, m, H-36), 1.82 (3H, s, H-25), 1.76 (1H, m, H1-20), 1.64 (3H, s, H-35), 1.63 (1H, m, H2-20), 1.62 (3H, s, H-39), 1.54 (3H, s, H-40), 1.49 (3H, s, H-29), 1.44 (6H, s, H-19, H-34), 1.27 (1H, m, H2-21), 1.26 (3H, s, H-24).
13C-NMR (150 MHz, CDCl3): d 202.26 (C-12), 179.10 (C-8), 166.33 (C-30), 161.08 (C-18), 159.90 (C-16), 158.73 (C-6), 134.79 (C-10), 132.77 (C-9), 132.73 (C-28), 132.09 (C-38), 128.48(C-27), 124.60 (C-3), 123.55 (C-37), 115.48 (C-4), 105.98 (C-17), 101.92 (C-5), 99.90 (C-7), 91.89 (C-14), 84.63 (C-13), 83.75 (C-33), 83.70 (C-23), 82.16 (C-2), 76.83 (C-32), 67.26 (C-31), 49.47 (C-22), 46.71 (C-11), 41.97 (C-20), 31.14 (C-26), 30.13 (C-25), 29.42 (C-24), 27.60 (C-19), 26.05 (C-21), 25.63 (C-39), 23.89 (C-35), 22.43 (C-36), 19.98 (C-29), 18.80 (C-34), 17.66 (C-40).
生成物Ｇｈ−３３５３のＥＩＭＳデータは、ｍ／ｚ ５８９（１００）にベースピークを示し、且つ生成物Ｇｈ−３３５３のＨＲＦＡＢＭＳデータは、ｍ／ｚ ６６１．３０１９に擬分子イオンピーク［Ｍ＋Ｈ］＋を示し、生成物Ｇｈ−３３５３は、ガンボジックアシッドの分子式に比べて３２多い質量単位を有する、Ｃ３８Ｈ４４Ｏ１０の分子式を有することを示している。
生成物Ｇｈ−３３５３の１Ｈ−ＮＭＲ、１３Ｃ−ＮＭＲ及びＨＭＱＣデータは、生成物Ｇｈ−３３５３が、ガンボジックアシッドのそれと異なるＣ−１７側鎖、すなわち、ガンボジックアシッド中の３−メチル−２−ブテニル基の代わりに１−ヒドロキシ−２，３−エポキシ−３−メチルブチル基を有することを示す。
生成物Ｇｈ−３３５３の１Ｈ−ＮＭＲ、１３Ｃ−ＮＭＲ及び１Ｈ−１Ｈ ＣＯＳＹデータは、ヒドロキシメチンプロトン（δ５．１５（１Ｈ、ｄ、Ｊ＝８．９Ｈｚ））がエポキシ基上のオキシメチンプロトン（δ４．７０（１Ｈ、ｄ、Ｊ＝８．９Ｈｚ））とカップリングしていることを示す。エポキシ環上の２つの近接オキシメチンプロトンは、５Ｈｚ未満のカップリング定数（Ｊ）を有するのが通常なので、Ｊ＝８．９Ｈｚのカップリング定数は、エポキシ環上の２つの近接オキシメチンプロトンのカップリングを意味するはずがない。
生成物Ｇｈ−３３５３のＨＭＢＣデータは、δ５．１５が、δ１６１．０８（Ｃ−１８）、δ１５９．９０（Ｃ−１６）、δ１０５．９８（Ｃ−１７）及びδ７６．８３（Ｃ−３２）と相関し；且つδ４．７０が、δ８３．７５（Ｃ−３３）、δ１８．８０（Ｃ−３４）、δ２３．８９（Ｃ−３５）及びδ６７．２６（Ｃ−３１）と相関していることを示し、ヒドロキシ基がＣ−３１に連結され；エポキシ基がＣ−３２及びＣ−３３に配置され；且つＣ−１７に結合した側鎖は、１−ヒドロキシ−２，３−エポキシ−３−メチルブチル基であることを証明している。
生成物Ｇｈ−３３５３のＮＯＥＳＹデータは、δ７．５６（Ｈ−１０）がδ３．５５（Ｈ−１１）と相関し；δ３．５５（Ｈ−１１）がδ２．３６（Ｈ１−２１）及びδ１．２７（Ｈ２−２１）と相関し；δ２．３６（Ｈ１−２１）及びδ１．２７（Ｈ２−２１）の双方が、δ２．５２（Ｈ−２２）と相関し；δ２．５２（Ｈ−２２）がδ１．８２（Ｈ−２５）及びδ１．２６（Ｈ−２４）と相関し；δ５．０１（Ｈ−２７）がδ１．４９（Ｈ−２９）と相関し；且つδ１．４９（Ｈ−２９）がδ２．０５（Ｈ−３６）又はδ１．７６（Ｈ１−２０）と相関していないことを示し、生成物Ｇｈ−３３５３のこの部分の立体構造は、ガンボジックアシッドのそれと一致、すなわち、１１Ｓ、１３Ｒ、１４Ｓ、２２Ｓ配置で存在し、トランス関係のＨ−２７及びカルボキシル基（Ｃ−３０）、並びにＺ配置の二重結合Δ２７，２８を含むことを証明している。加えて、δ５．０４（Ｈ−３７）がδ１．６２（Ｈ−３９）及びδ１．５４（Ｈ−４０）と相関し、且つδ２．０５（Ｈ−３６）がδ１．７６（Ｈ１−２０）と相関している。δ１．４９（Ｈ−２９）が、δ２．０５（Ｈ−３６）又は１．７６（Ｈ１−２０）と相関していないので、Ｃ−２はＲ配置を有する。
上記の情報に基づいて、生成物Ｇｈ−３３５３は、次の化学構造：
Figure 0005558408
を有する新規化合物であることが確認される。
生成物Ｇｈ−３３５３は、名称「フォルモキサントンＧ」｛ＩＵＰＡＣ名称：［２−ブテン酸、２−メチル−４−［（１Ｒ，３ａＳ，５Ｓ，１１Ｒ，１４ａＳ）−３ａ，４，５，７−テトラヒドロ−８−ヒドロキシ−３，３，１１−トリメチル−１３−（１−ヒドロキシ−２，３−エポキシ−３−メチルブチル）−１１−（４−メチル−３−ペンテニル）−７，１５−ジオキソ−１，５−メタノ−１Ｈ，３Ｈ，１１Ｈ−フロ［３．４−ｇ］ピラノ［３．２−ｂ］キサンテン−１−イル］−，（２Ｚ）−］｝によって識別される。
３１．生成物Ｇｈ−３３１１
画分１の溶出物４から精製された生成物Ｇｈ−３３１１は、次の特性を有すると判定された：
黄色粉末；ｍｐ１４４〜１４８℃。
EIMS m/z (相対強度): 590 (7), 589 (18), 577 (5), 561 (9), 503 (11), 467 (2), 423 (2), 347 (5), 315 (3), 285 (3), 247 (6), 233 (13), 231 (22), 230 (16), 215 (8), 202 (4), 131 (6), 117 (100), 115 (19), 91 (12), 69 (14); HRFABMS [M+H]+ m/z: 661.3010; C38H45O10計算値661.3013.
1H-NMR (600 MHz, CDCl3): d 13.12 (1H, s, OH-6), 7.56 (1H, d, J=7.1Hz, H-10), 6.65 (1H, d, J=10.0 Hz, H-4), 5.52 (1H, d, J=10.2Hz, H-3), 5.17 (1H, d, J=9.0Hz, H-31), 5.05 (1H, m, H-37), 5.03 (1H, m, H-27), 4.71 (1H, d, J=9.0 Hz, H-32), 3.56 (1H, dd, J=6.8, 4.8 Hz, H-11), 3.42 (1H, t, J=13.5 Hz, H1-26), 2.74 (1H, br d, J=13.7Hz, H2-26), 2.54 (1H, d, J=9.3 Hz, H-22), 2.37 (1H, dd, J=13.5, 4.8 Hz, H1-21), 2.05 (2H, m, H-36), 1.86 (1H, m, H1-20), 1.83 (3H, s, H-25), 1.69 (1H, m, H2-20), 1.66 (3H, s, H-39), 1.64 (3H, s, H-35), 1.56 (3H, s, H-40), 1.49 (3H, s, H-29), 1.45 (3H, s, H-34), 1.35 (3H, s, H-19), 1.28 (1H, m, H2-21), 1.26 (3H, s, H-24).
13C-NMR (150 MHz, CDCl3): d 202.22 (C-12), 179.25 (C-8), 166.30 (C-30), 160.99 (C-18), 159.85 (C-16), 158.80 (C-6), 134.86 (C-10), 132.81 (C-9), 132.75 (C-28), 132.17 (C-38), 128.54 (C-27), 125.25 (C-3), 123.50 (C-37), 116.08 (C-4), 106.57 (C-17), 102.68 (C-5), 100.01 (C-7), 91.92 (C-14), 84.65 (C-13), 83.80 (C-33), 83.66 (C-23), 81.92 (C-2), 76.98 (C-32), 67.16 (C-31), 49.47 (C-22), 46.75 (C-11), 41.64 (C-20), 31.16 (C-26), 30.15 (C-25), 29.43 (C-24), 26.90 (C-19), 26.08 (C-21), 25.67 (C-39), 23.83 (C-35), 23.21 (C-36), 19.89 (C-29), 18.91 (C-34), 17.72 (C-40).
生成物Ｇｈ−３３１１のＥＩＭＳデータは、ｍ／ｚ １１７（１００）にベースピークを示すが、分子イオンピーク［Ｍ］＋を示さず、且つ生成物Ｇｈ−３３１１のＨＲＦＡＢＭＳデータは、ｍ／ｚ ６６１．３０１０に擬分子イオンピーク［Ｍ＋Ｈ］＋を示し、生成物Ｇｈ−３３１１は、ガンボジックアシッドの分子式に比べて３２多い質量単位を有する、Ｃ３８Ｈ４４Ｏ１０の分子式を有することを示している。ガンボジックアシッドに比較して、生成物Ｇｈ−３３３１の不飽和数は、不変のままである。
生成物Ｇｈ−３３１１の１Ｈ−ＮＭＲ及び１３Ｃ−ＮＭＲデータは、生成物Ｇｈ−３３１１が、第２級ヒドロキシ基（δ５．１７（１Ｈ、ｄ、Ｊ＝９．０Ｈｚ）及びδ６７．１６）、並びにエポキシ基（δ４．７１（１Ｈ、ｄ、Ｊ＝９．０Ｈｚ）及びδ７６．９８）を有することを示す。生成物Ｇｈ−３３１１のこれらの１Ｈ−ＮＭＲ及び１３Ｃ−ＮＭＲデータは、生成物Ｇｈ−３３５３のそれに極めて類似している。
生成物Ｇｈ−３３１１の１Ｈ−１Ｈ ＣＯＳＹデータは、ヒドロキシメチンプロトン（δ５．１７（１Ｈ、ｄ、Ｊ＝９．０Ｈｚ））がエポキシ基のオキシメチンプロトン（δ４．７１（１Ｈ、ｄ、Ｊ＝９．０Ｈｚ））と９．０Ｈｚのカップリング定数（Ｊ）でカップリングしていることを示す。エポキシ環上の２つの近接オキシメチンプロトンは、５Ｈｚ未満のカップリング定数（Ｊ）を有するのが通常なので、Ｊ＝８．９Ｈｚのカップリング定数は、エポキシ環上の２つの近接オキシメチンプロトンのカップリングを意味するはずがない。
生成物Ｇｈ−３３１１のＨＭＢＣデータは、δ５．１７が、δ１６０．９９（Ｃ−１８）、δ１５９．８５（Ｃ−１６）、δ１０６．５７（Ｃ−１７）及びδ７６．９８（Ｃ−３２）と相関し；且つδ４．７１が、δ８３．８０（Ｃ−３３）、δ１８．９１（Ｃ−３４）及びδ６７．１６（Ｃ−３１）と相関していることを示し、ヒドロキシ基がＣ−３１に連結され；エポキシ基がＣ−３２及びＣ−３３に配置され；且つＣ−１７に結合した側鎖は、１−ヒドロキシ−２，３−エポキシ−３−メチルブチル基であることを証明している。
生成物Ｇｈ−３３１１のＮＯＥＳＹデータは、δ７．５６（Ｈ−１０）がδ３．５６（Ｈ−１１）と相関し；δ３．５６（Ｈ−１１）がδ２．３７（Ｈ１−２１）及びδ１．２８（Ｈ２−２１）と相関し；δ２．３７（Ｈ１−２１）及びδ１．２８（Ｈ２−２１）の双方が、δ２．５４（Ｈ−２２）と相関し；δ２．５４（Ｈ−２２）がδ１．８３（Ｈ−２５）及びδ１．２６（Ｈ−２４）と相関し；且つδ５．０３（Ｈ−２７）がδ１．４９（Ｈ−２９）と相関していることを示し、生成物Ｇｈ−３３１１のこの部分の立体構造が、ガンボジックアシッドのそれに一致、すなわち、１１Ｓ、１３Ｒ、１４Ｓ、２２Ｓ配置で存在し、トランス関係のＨ−２７及びカルボキシル基（Ｃ−３０）、並びにＺ配置の二重結合Δ２７，２８を含むことを証明している。加えて、δ１．４９（Ｈ−２９）がδ１．８６（Ｈ１−２０）及びδ１．６９（Ｈ２−２０）と相関しているので、Ｃ−２はＳ配置で存在する。
上記の情報に基づいて、生成物Ｇｈ−３３１１は、次の化学構造：
Figure 0005558408
を有する新規化合物であることが確認される。
生成物Ｇｈ−３３１１は、名称「エピフォルモキサントンＧ」｛ＩＵＰＡＣ名称：［２−ブテン酸、２−メチル−４−［（１Ｒ，３ａＳ，５Ｓ，１１Ｓ，１４ａＳ）−３ａ，４，５，７−テトラヒドロ−８−ヒドロキシ−３，３，１１−トリメチル−１３−（１−ヒドロキシ−２，３−エポキシ−３−メチルブチル）−１１−（４−メチル−３−ペンテニル）−７，１５−ジオキソ−１，５−メタノ−１Ｈ，３Ｈ，１１Ｈ−フロ［３．４−ｇ］ピラノ［３．２−ｂ］キサンテン−１−イル］−，（２Ｚ）−］｝によって識別される。
３２．生成物Ｇｈ−３２７２
画分１の溶出物３から精製された生成物Ｇｈ−３２７２は、次の特性を有すると判定された：
黄色粉末；ｍｐ１９０〜１９３℃。
EIMS m/z (相対強度): 626 [M-H2O]+ (2), 598 (2), 545 (100), 517 (3), 499 (2), 389 (3), 347 (3), 271 (2), 245 (4), 215 (11), 189 (4), 147 (1), 105 (2), 69 (2); HRFABMS [M-H2O+H]+ m/z: 627.2961; C38H43O8計算値627.2958.
1H-NMR (600 MHz, CDCl3): d 12.71 (1H, s, OH-6), 7.52 (1H, d, J=6.9 Hz, H-10), 6.57 (1H, d, J=10.1 Hz, H-4), 6.03 (1H, dt, J=7.5, 1.3 Hz, H-27), 5.59 (1H, d, J=15.7 Hz, H-37), 5.53 (1H, dt, J=15.6, 6.9 Hz, H-36), 5.34 (1H, d, J=10.1 Hz, H-3), 5.02 (1H, dt, J=6.2, 1.2 Hz, H-32), 3.46 (1H, dd, J=6.7, 4.6 Hz, H-11), 3.27 (1H, dd, J=14.7, 8.2 Hz, H1-31), 3.11 (1H, br dd, J=14.6, 5.2 Hz, H2-31), 2.94 (2H, br t, J=5.6 Hz, H-26), 2.49 (1H, d, J=9.3 Hz, H-22), 2.36 (1H, dd, J=13.9, 7.2 Hz, H1-20), 2.29 (1H, dd, J=13.6, 4.8 Hz, H1-21), 2.25 (1H, dd, J=14.0, 6.5 Hz, H2-20), 1.72 (3H, s, H-34), 1.70 (3H, d, J=1.1 Hz, H-29), 1.67 (3H, s, H-25), 1.63 (3H, s, H-35), 1.38 (3H, s, H-19), 1.37 (1H, m, H2-21), 1.27 (3H, s, H-24), 1.16 (6H, s, H-39、H-40).
13C-NMR (150 MHz, CDCl3): d 203.30 (C-12), 178.89 (C-8), 170.80 (C-30), 161.41 (C-18), 157.41 (C-16), 157.37 (C-6), 142.05 (C-37), 137.79 (C-27), 135.37 (C-10), 133.30 (C-9), 131.51 (C-33), 127.80 (C-28), 123.91 (C-3), 122.23 (C-32), 120.93 (C-36), 116.30 (C-4), 107.41 (C-17), 102.97 (C-5), 100.39 (C-7), 90.90 (C-14), 83.90 (C-23), 83.78 (C-13), 80.84 (C-2), 70.61 (C-38), 48.95 (C-22), 46.81 (C-11), 44.67 (C-20), 29.83 (C-25), 29.44 (C-39), 29.43 (C-40), 29.27 (C-26), 28.83 (C-24), 27.39 (C-19), 25.73 (C-35), 25.14 (C-21), 21.58 (C-31), 20.72 (C-29), 18.14 (C-34).
生成物Ｇｈ−３２７２のＥＩＭＳデータは、ｍ／ｚ ６２６に［Ｍ−Ｈ２Ｏ］＋（２）を、及びｍ／ｚ ５４５（１００）にベースピークを示し、且つ生成物Ｇｈ−３２７２のＨＲＦＡＢＭＳデータは、ｍ／ｚ ６２７．２９６１に擬分子イオンピーク［Ｍ−Ｈ２Ｏ＋Ｈ］＋を示し、生成物Ｇｈ−３２７２が、ガンボジックアシッドの分子式に比べて１６多い質量単位を有する、Ｃ３８Ｈ４４Ｏ９の分子式を有することを示している。ガンボジックアシッドに比較して、生成物Ｇｈ−３２７２の不飽和数は、不変のままである。
生成物Ｇｈ−３２７２の１Ｈ−ＮＭＲ及び１３Ｃ−ＮＭＲデータは、生成物Ｇｈ−３２７２が、ガンボジックアシッドのそれと異なるＣ−２結合側鎖、すなわち、ガンボジックアシッド中の４−メチル−３−ペンテニル基の代わりに４−ヒドロキシ−４−メチル−２−ペンテニル基を有することを示す。
生成物Ｇｈ−３２７２の１Ｈ−ＮＭＲ及び１３Ｃ−ＮＭＲデータは、また、生成物Ｇｈ−３２７２が、酸素に結合した第４級炭素（δ７０．６１）及び２つのカップリングしたオレフィンプロトン（δ５．５９（１Ｈ、ｄ、Ｊ＝１５．７Ｈｚ）及びδ５．５３（１Ｈ、ｄｔ、Ｊ＝１５．６Ｈｚ、６．９Ｈｚ））を有することを示す。１５．７Ｈｚのカップリング定数（Ｊ）を考慮すると、オレフィン基はトランス二重結合（すなわちＥ配置）で存在する。
生成物Ｇｈ−３２７２の１Ｈ−１Ｈ ＣＯＳＹデータは、δ５．５３（１Ｈ、ｄｔ、Ｊ＝１５．６Ｈｚ、６．９Ｈｚ）がδ５．５９（１Ｈ、ｄ、Ｊ＝１５．７Ｈｚ）のみならず、２つのメチレンプロトン（δ２．３６（Ｈ１−２０）及びδ２．２５（Ｈ２−２０））ともカップリングしていることを示し、トランス二置換二重結合がＣ−３６及びＣ−３７に配置されていることを証明している。
生成物Ｇｈ−３２７２のＨＭＢＣデータは、メチレンプロトン（δ２．２５（Ｈ２−２０）及びδ２．３６（Ｈ１−２０））が、δ２７．３９（Ｃ−１９）、δ８０．８４（Ｃ−２）、δ１２０．９３（Ｃ−３６）及びδ１４２．０５（Ｃ−３７）、並びにピラン環中のオレフィン炭素（δ１２３．９１（Ｃ−３））と相関し；δ５．５３（Ｈ−３６）がδ４４．６７（Ｃ−２０）、δ７０．６１（Ｃ−３８）及びδ１４２．０５（Ｃ−３７）と相関し；且つδ５．５９（Ｈ−３７）が、δ４４．６７（Ｃ−２０）、δ７０．６１（Ｃ−３８）、δ１２０．９３（Ｃ−３６）、δ２９．４４（Ｃ−３９）及びδ２９．４３（Ｃ−４０）と相関していることを示し、Ｃ−２に結合した側鎖が、４−ヒドロキシ−４−メチル−２−ペンテニル基であることを証明している。
生成物Ｇｈ−３２７２のＮＯＥＳＹデータは、δ７．５２（Ｈ−１０）がδ３．４６（Ｈ−１１）と相関し；δ３．４６（Ｈ−１１）がδ２．２９（Ｈ１−２１）及びδ１．３７（Ｈ２−２１）と相関し；δ１．３７（Ｈ１−２１）がδ２．４９（Ｈ−２２）と相関し；δ２．４９（Ｈ−２２）がｇｅｍ−ジメチル基（δ１．６７（Ｈ−２５）及びδ１．２７（Ｈ−２４））と相関し；且つδ６．０３（Ｈ−２７）がδ１．７０（Ｈ−２９）と相関していることを示し、生成物Ｇｈ−３２７２のこの部分の立体構造が、ガンボジックアシッドのそれに一致、すなわち、１１Ｓ、１３Ｒ、１４Ｓ、２２Ｓ配置で存在し、トランス関係のＨ−２７及びカルボキシル基（Ｃ−３０）、並びにＺ配置の二重結合Δ２７，２８を含むことを証明している。加えて、オレフィンプロトン（δ５．５３（Ｈ−３６））は、δ５．５９（Ｈ−３７）並びにメチレンプロトン（δ２．３６（Ｈ１−２０）及びδ２．２５（Ｈ２−２０））のみならず、ｇｅｍ−ジメチル基（δ１．１６（Ｈ−３９及びＨ−４０））とも相関し；且つもう１つのオレフィンプロトン（δ５．３４（Ｈ−３））は、δ１．３８（Ｈ−１９）及びδ２．２５（Ｈ２−２０）と相関している。δ１．３８（Ｈ−１９）がδ１．７０（Ｈ−２９）と相関しているので、Ｃ−２はＲ配置で存在する。
上記の情報に基づいて、生成物Ｇｈ−３２７２は、次の化学構造：
Figure 0005558408
を有する新規化合物であることが確認される。
生成物Ｇｈ−３２７２は、名称「フォルモキサントンＨ」｛ＩＵＰＡＣ名称：［２−ブテン酸、２−メチル−４−［（１Ｒ，３ａＳ，５Ｓ，１１Ｒ，１４ａＳ）−３ａ，４，５，７−テトラヒドロ−８−ヒドロキシ−３，３，１１−トリメチル−１３−（３−メチル−２−ブテニル）−１１−（４−ヒドロキシ−４−メチル−２Ｅ−ペンテニル）−７，１５−ジオキソ−１，５−メタノ−１Ｈ，３Ｈ，１１Ｈ−フロ［３．４−ｇ］ピラノ［３．２−ｂ］キサンテン−１−イル］−，（２Ｚ）−］｝によって識別される。
３３．生成物Ｇｈ−３３３２
画分１の溶出物５から精製された生成物Ｇｈ−３３３２は、次の特性を有すると判定された：
黄色粉末；ｍｐ１０２〜１０６℃。
EIMS m/z (相対強度): 626 [M-H2O]+ (5), 575 (2), 545 (100), 499 (2), 471 (1), 389 (4), 347 (4), 271 (3), 245 (5), 215 (15), 189 (5), 147 (2), 105 (3), 69 (2); HRFABMS [M-H2O+H]+ m/z: 627.2966; C38H43O8計算値627.2958.
1H-NMR (600 MHz, CDCl3): d 12.81 (1H, s, OH-6), 7.55 (1H, d, J=6.9 Hz, H-10), 6.83 (1H, dt, J=7.4, 1.3 Hz, H-27), 6.64 (1H, J=10.0 Hz, H-4), 5.68 (1H, d, J=8.4 Hz, H-37), 5.67 (1H, m, H-36), 5.44 (1H, d, J=10.0 Hz, H-3), 4.97 (1H, br t, J=6.2 Hz, H-32), 3.48 (1H, dd, J=6.8, 4.5 Hz, H-11), 3.28 (1H, dd, J=14.9, 8.9 Hz, H1-31), 3.14 (1H, br dd, J=13.5, 3.4 Hz, H2-31), 2.69 (1H, ddd, J=16.4, 6.2, 1.3 Hz, H1-26), 2.52 (1H, d, J=9.3 Hz, H-22), 2.42 (1H, dd, J=14.3, 4.8 Hz, H1-21), 2.32 (2H, m, H-20), 2.20 (1H, dd, J=16.3, 8.5 Hz, H2-26), 1.71 (3H, s, H-34), 1.69 (3H, s, H-25), 1.61 (3H, s, H-35), 1.38 (3H, s, H-19), 1.37 (3H, s, H-39), 1.36 (1H, m, H2-21), 1.33 (3H, s, H-40), 1.30 (3H, s, H-29), 1.27 (3H, s, H-24).
13C-NMR (150 MHz, CDCl3): d 203.38 (C-12), 178.82 (C-8), 169.45 (C-30), 161.28 (C-18), 157.69 (C-16), 157.35 (C-6), 141.00 (C-37), 136.22 (C-27), 135.59 (C-10), 133.32 (C-9), 131.48 (C-33), 128.43 (C-28), 125.06 (C-3), 122.22 (C-32), 121.48 (C-36), 116.22 (C-4), 108.22 (C-17), 102.82 (C-5), 100.33 (C-7), 91.06 (C-14), 83.85 (C-23), 83.55 (C-13), 80.41 (C-2), 71.65 (C-38), 49.14 (C-22), 46.72 (C-11), 43.61 (C-20), 29.84 (C-25), 29.53 (C-39), 29.23 (C-40), 28.81 (C-24), 28.63 (C-26), 26.48 (C-19), 25.74 (C-35), 24.95 (C-21), 21.70 (C-31), 18.16 (C-34), 11.96 (C-29).
生成物Ｇｈ−３３３２のＥＩＭＳデータは、ｍ／ｚ ６２６に［Ｍ−Ｈ２Ｏ］＋（５）を、及びｍ／ｚ ５４５（１００）にベースピークを示し、且つ生成物Ｇｈ−３３３２のＨＲＦＡＢＭＳデータは、ｍ／ｚ ６２７．２９６６に擬分子イオンピーク［Ｍ−Ｈ２Ｏ＋Ｈ］＋を示し、生成物Ｇｈ−３３３２は、生成物Ｇｈ−３２７２のそれに一致する分子式、すなわち、ガンボジックアシッド又はイソガンボジックアシッドの分子式に比べて１６多い質量単位を有する、Ｃ３８Ｈ４４Ｏ９の分子式を有することを示している。ガンボジックアシッドに比較して、生成物Ｇｈ−３３３２の不飽和数は不変のままである。
生成物Ｇｈ−３３３２のＥＩＭＳ、１Ｈ−ＮＭＲ及び１３Ｃ−ＮＭＲデータは、生成物Ｇｈ−３２７２のそれに概して類似しており、生成物Ｇｈ−３３３２が、生成物Ｇｈ−３２７２の異性体である可能性があることを暗示している。加えて、生成物Ｇｈ−３３３２のＣ−２０置換基の１Ｈ−ＮＭＲデータ（δ１．３３（３Ｈ、ｓ、Ｈ−４０）、δ１．３７（３Ｈ、ｓ、Ｈ−３９）、δ５．６８（１Ｈ、ｄ、Ｊ＝８．４Ｈｚ、Ｈ−３７）及びδ５．６７（１Ｈ、ｍ、Ｈ−３６））を生成物３２７２のそれと比較すると、生成物Ｇｈ−３３３２中のΔ３６，３７はＺ配置で存在することがわかる。さらに、生成物Ｇｈ−３２７２と比較すると、生成物Ｇｈ−３３３２において、Ｈ−２７はかなりの低磁場シフト（δＨ６．８３、Δδ＝０．８）を有し、且つＣ−２９は、γー効果により、高磁場シフト（δＣ１１．９６、Δδ＝−８．７６）を有するように影響される。かくして、生成物Ｇｈ−３３３２中のΔ２７，２８は、Ｅ配置で存在すると推定される。
上記の情報に基づいて、生成物Ｇｈ−３３３２は、次の化学構造：
Figure 0005558408
を有する新規化合物であることが確認される。
生成物Ｇｈ−３３３２は、名称「イソフォルモキサントンＩ」｛ＩＵＰＡＣ名称：［２−ブテン酸、２−メチル−４−［（１Ｒ，３ａＳ，５Ｓ，１４ａＳ）−３ａ，４，５，７−テトラヒドロ−８−ヒドロキシ−３，３，１１−トリメチル−１３−（３−メチル−２−ブテニル）−１１−（４−ヒドロキシ−４−メチル−２Ｚ−ペンテニル）−７，１５−ジオキソ−１，５−メタノ−１Ｈ，３Ｈ，１１Ｈ−フロ［３．４−ｇ］ピラノ［３．２−ｂ］キサンテン−１−イル］−，（２Ｅ）−］｝によって識別される。
３４．生成物Ｇｈ−３２６１
画分１の溶出物１から精製された生成物Ｇｈ−３２６１は、次の特性を有すると判定された：
黄色粉末；ｍｐ１０３〜１０５℃。
EIMS m/z (相対強度): 662 [M]+ (15), 647 (5), 603 (2), 545 (100), 517 (12), 499 (2), 389 (4), 347 (3), 295 (1), 245 (3), 215 (6), 189 (2), 147 (1), 105 (2), 69 (3), 59 (3); HREIMS [M]+ m/z: 662.3098; C38H46O10計算値662.3091.
1H-NMR (600 MHz, CDCl3): d 12.73 (1H, s, OH-6), 7.49 (1H, d, J=7.0 Hz, H-10), 6.65 (1H, dd, J=10.2, 2.5 Hz, H-4), 5.54 (1H, br t, J=4.6 Hz, H-27), 5.36 (1H, d, J=10.3 Hz, H-3), 5.06 (1H, br s, H-32), 3.50 (1H, t, J=5.7 Hz, H-11), 3.39 (1H, m, H1-26), 3.36 (1H, d, J=10.1 Hz, H-37), 3.27 (1H, dd, J=14.9, 7.4 Hz, H1-31), 3.22 (1H, br dd, J=14.3, 4.7 Hz, H2-31), 2.86 (1H, br d, J=14.1 Hz, H2-26), 2.51 (1H, d, J=9.4 Hz, H-22), 2.33 (1H, dd, J=13.5, 4.7 Hz, H1-21), 2.04 (1H, m, H1-20), 1.74 (1H, m, H1-36), 1.72 (3H, s, H-34), 1.68 (1H, m, H2-20), 1.65 (3H, s, H-25), 1.64 (3H, s, H-35), 1.60 (3H, s, H-29), 1.459 (1H, m, H2-36), 1.456 (3H, s, H-19), 1.39 (1H, dd, J=13.5, 9.6 Hz, H2-21), 1.27 (3H, s, H-24), 1.21 (3H, s, H-39), 1.11 (3H, s, H-40).
13C-NMR (150 MHz, CDCl3): d 203.34 (C-12), 179.20 (C-8), 168.78 (C-30), 161.13 (C-18), 157.75 (C-16), 157.43 (C-6), 136.34 (C-27), 134.74 (C-10), 133.91 (C-9), 131.41 (C-33), 128.56 (C-28), 124.18 (C-3), 122.33 (C-32), 116.18 (C-4), 107.80 (C-17), 102.49 (C-5), 100.63 (C-7), 90.57 (C-14), 84.03 (C-13), 83.64 (C-23), 81.24 (C-2), 78.23 (C-37), 73.70 (C-38), 49.01 (C-22), 47.02 (C-11), 38.73 (C-20), 29.92 (C-25), 29.87 (C-26), 29.05 (C-24), 27.88 (C-19), 26.70 (C-39), 25.70 (C-35), 25.28 (C-36), 25.25 (C-21), 24.28 (C-40), 21.71 (C-31), 20.85 (C-29), 18.22 (C-34).
生成物Ｇｈ−３２６１のＥＩＭＳデータは、ｍ／ｚ ６６２に分子イオンピーク［Ｍ］＋を、及びｍ／ｚ ５４５（１００）にベースピークを示し、且つ生成物Ｇｈ−３２６１のＨＲＥＩＭＳデータは、ｍ／ｚ ６６２．３０９８に［Ｍ］＋を示し、生成物Ｇｈ−３２６１は、ガンボジックアシッドの分子式に比べて３４多い質量単位を有する、Ｃ３８Ｈ４６Ｏ１０の分子式を有することを示している。
生成物Ｇｈ−３２６１の１Ｈ−ＮＭＲ、１３Ｃ−ＮＭＲ及びＨＭＱＣデータは、生成物Ｇｈ−３２６１が、ガンボジックアシッドのそれと異なるＣ−２側鎖、すなわち、ガンボジックアシッド中の４−メチル−３−ペンテニル基の代わりに３，４−ジヒドロキシ−４−メチルペンチル基を有することを示す。加えて、生成物Ｇｈ−３２６１の１Ｈ−ＮＭＲ及び１３Ｃ−ＮＭＲデータは、生成物Ｇｈ−３２６１が、第２級ヒドロキシ基（δ３．３６（１Ｈ、ｄ、Ｊ＝１０．１Ｈｚ）及びδ７８．２３）、並びに酸素に結合した第４級炭素（δ７３．７０）を有することを示す。
生成物Ｇｈ−３２６１の１Ｈ−１Ｈ ＣＯＳＹデータは、ヒドロキシメチンプロトン（δ３．３６（１Ｈ、ｄ、Ｊ＝１０．１Ｈｚ））がδ１．４５９（１Ｈ、ｍ）とカップリングし；δ１．４５９（１Ｈ、ｍ）がδ２．０４（１Ｈ、ｍ、Ｈ１−２０）とカップリングし；且つＣ−２０及びＣ−３６の２つの隣接メチレン基の４つのプロトン（δ２．０４（Ｈ１−２０）、δ１．６８（Ｈ１−２０）及びδ３８．７３（Ｃ−２０）、並びにδ１．７４（Ｈ１−３６）、δ１．４５９（Ｈ２−３６）及びδ２５．２８（Ｃ−３６））が互いにカップリングしていることを示し、ヒドロキシメチンプロトンはＨ−３７であることを示している。かくして、第２級ヒドロキシ基はＣ−３７（δ７８．２３）に；第３級ヒドロキシ基はＣ−３８（δ７３．７０）に結合されており；且つＣ−３９（δ２６．７０）及びＣ−４０（δ２４．２８）は第３級メチル基であることがわかる。
生成物Ｇｈ−３２６１のＨＭＢＣデータは、ヒドロキシメチンプロトン（δ３．３６（Ｈ−３７））がδ３８．７３（Ｃ−２０）と相関し；δ２．０４（Ｈ１−２０）及びδ１．６８（Ｈ２−２０）の双方が、δ２５．２８（Ｃ−３６）、δ８１．２４（Ｃ−２）及びδ１２４．１８（Ｃ−３）と相関し；δ５．３６（Ｈ−３）がδ１０２．４９（Ｃ−５）、δ８１．２４（Ｃ−２）及びδ２７．８８（Ｃ−１９）と相関し；δ１．４５６（Ｈ−１９）がδ８１．２４（Ｃ−２）、δ１２４．１８（Ｃ−３）、δ１１６．１８（Ｃ−４）及びδ３８．７３（Ｃ−２０）と相関し；δ１．２１（Ｈ−３９）がδ７８．２３（Ｃ−３７）、δ７３．７０（Ｃ−３８）及びδ２４．２８（Ｃ−４０）と相関し；且つδ１．１１（Ｈ−４０）が、δ７８．２３（Ｃ−３７）、δ７３．７０（Ｃ−３８）及びδ２６．７０（Ｃ−３９）と相関していることを示し、Ｃ−２に結合した側鎖は、３，４−ジヒドロキシ−４−メチルペンチル基であることを証明している。
生成物Ｇｈ−３２６１のＮＯＥＳＹデータは、δ７．４９（Ｈ−１０）がδ３．５０（Ｈ−１１）と相関し；δ３．５０（Ｈ−１１）がδ２．３３（Ｈ１−２１）及びδ１．３９（Ｈ２−２１）と相関し；δ１．３９（Ｈ１−２１）がδ２．５１（Ｈ−２２）及びδ１．２７（Ｈ−２４）と相関し；δ２．５１（Ｈ−２２）がδ１．６５（Ｈ−２５）と相関し；且つδ５．５４（Ｈ−２７）がδ１．６０（Ｈ−２９）と相関していることを示し、生成物Ｇｈ−３２６１のこの部分の立体構造が、ガンボジックアシッドのそれに一致、すなわち、１１Ｓ、１３Ｒ、１４Ｓ、２２Ｓ配置で存在し、トランス関係のＨ−２７及びカルボキシル基（Ｃ−３０）、並びにＺ配置の二重結合Δ２７，２８を含むことを証明している。加えて、δ３．３６（Ｈ−３７）がδ１．２１（Ｈ−３９）及びδ１．１１（Ｈ−４０）と相関し、δ１．４５６（Ｈ−１９）がδ１．６０（Ｈ−２９）と相関しているので、Ｃ−２はＲ配置で存在する。
上記の情報に基づいて、生成物Ｇｈ−３２６１は、次の化学構造：
Figure 0005558408
を有する新規化合物であることが確認される。
生成物Ｇｈ−３２６１は、名称「フォルモキサントンＪ」｛ＩＵＰＡＣ名称：［２−ブテン酸、２−メチル−４−［（１Ｒ，３ａＳ，５Ｓ，１１Ｒ，１４ａＳ）−３ａ，４，５，７−テトラヒドロ−８−ヒドロキシ−３，３，１１−トリメチル−１３−（３−メチル−２−ブテニル）−１１−（３，４−ジヒドロキシ−４−メチルペンチル）−７，１５−ジオキソ−１，５−メタノ−１Ｈ，３Ｈ，１１Ｈ−フロ［３．４−ｇ］ピラノ［３．２−ｂ］キサンテン−１−イル］−，（２Ｚ）−］｝によって識別される。
３５．生成物Ｇｈ−３２７１
画分１の溶出物２から精製された生成物Ｇｈ−３２７１は、次の特性を有すると判定された：
黄色粉末；ｍｐ９９〜１０２℃。
EIMS m/z (相対強度): 662 [M]+ (14), 644 (5), 603 (4), 545 (100), 517 (15), 499 (3), 419 (4), 389 (6), 347 (5), 283 (5), 245 (6), 215 (11), 213 (5), 189 (5), 147 (4), 129 (4), 117 (5), 105 (8), 91 (7), 85.9 (12), 83.9 (19), 69 (11), 59 (8), 57 (11), 55 (11); HREIMS [M]+ m/z: 662.3097; C38H46O10計算値662.3091.
1H-NMR (600 MHz, CDCl3): d 12.75 (1H, s, OH-6), 7.50 (1H, d, J=7.0Hz, H-10), 6.65 (1H, d, J=10.0 Hz, H-4), 5.46 (1H, d, J=10.0Hz, H-3), 5.39 (1H, ddd, J=10.7, 3.9, 1.4 Hz, H-27), 5.08 (1H, dd, J=7.2, 5.9 Hz, H-32), 3.50 (1H, m, H-11), 3.49 (1H, m, H1-26), 3.38 (1H, dd, J=10.5, 1.9 Hz, H-37), 3.28 (1H, br dd, J=15.1, 5.6 Hz, H1-31), 3.23 (1H, dd, J=15.0, 7.4Hz, H2-31), 2.83 (1H, ddd, J=15.8, 3.9, 2.4 Hz, H2-26), 2.50 (1H, d, J=9.4 Hz, H-22), 2.34 (1H, dd, J=13.5, 4.7 Hz, H1-21), 2.05 (1H, m, H1-20), 1.71 (3H, s, H-34), 1.68 (1H, m, H1-36), 1.64 (3H, s, H-35), 1.63 (3H, s, H-25), 1.62 (1H, m, H2-20), 1.58 (3H, s, H-29), 1.52 (1H, m, H2-36), 1.44 (3H, s, H-19), 1.37 (1H, dd, J=13.5, 9.5 Hz, H2-21), 1.27 (3H, s, H-24), 1.18 (6H, s, H-39, H-40).
13C-NMR (150 MHz, CDCl3): d 203.26 (C-12), 179.32 (C-8), 168.56 (C-30), 160.44 (C-18), 157.89 (C-16), 157.53 (C-6), 135.74 (C-27), 134.69 (C-10), 133.85 (C-9), 131.67 (C-33), 129.00 (C-28), 125.28 (C-3), 122.40 (C-32), 116.13 (C-4), 108.14 (C-17), 102.95 (C-5), 100.68 (C-7), 90.47 (C-14), 84.20 (C-13), 83.57 (C-23), 80.56 (C-2), 78.09 (C-37), 73.63 (C-38), 49.07 (C-22), 47.05 (C-11), 36.88 (C-20), 29.99 (C-26), 29.86 (C-25), 29.11 (C-24), 26.39 (C-19), 25.89 (C-39), 25.66 (C-35), 25.56 (C-36), 25.22 (C-21), 23.40 (C-40), 21.76 (C-31), 20.81 (C-29), 18.07 (C-34).
生成物Ｇｈ−３２７１のＥＩＭＳデータは、ｍ／ｚ ６６２に分子イオンピーク［Ｍ］＋を、及びｍ／ｚ ５４５（１００）にベースピークを示し、且つ生成物Ｇｈ−３２７１のＨＲＥＩＭＳデータは、ｍ／ｚ ６６２．３０９７に［Ｍ］＋を示し、生成物Ｇｈ−３２７１が、ガンボジックアシッドの分子式に比べて３４多い質量単位を有する、Ｃ３８Ｈ４６Ｏ１０の分子式を有することを示している。
生成物Ｇｈ−３２７１の１Ｈ−ＮＭＲ、１３Ｃ−ＮＭＲ及びＨＭＱＣデータは、生成物Ｇｈ−３２７１が、ガンボジックアシッドのそれと異なるＣ−２側鎖、すなわち、ガンボジックアシッド中の４−メチル−３−ペンテニルの代わりに３，４−ジヒドロキシ−４−メチルペンチル基を有することを示している。加えて、生成物Ｇｈ−３２７１の１Ｈ−ＮＭＲ及び１３Ｃ−ＮＭＲデータは、生成物Ｇｈ−３２７１が、第２級ヒドロキシ基（δ３．３８（１Ｈ、ｄｄ、Ｊ＝１０．５Ｈｚ、１．９Ｈｚ）及びδ７８．０９）、並びに酸素に結合した第４級炭素（δ７３．６３）を有することを示す。
生成物Ｇｈ−３２７１の１Ｈ−１Ｈ ＣＯＳＹデータは、ヒドロキシメチンプロトン（δ３．３８（１Ｈ、ｄｄ、Ｊ＝１０．５Ｈｚ、１．９Ｈｚ））がδ１．５２（１Ｈ、ｍ）とカップリングし；δ１．５２（１Ｈ、ｍ）がδ２．０５（１Ｈ、ｍ、Ｈ１−２０）とカップリングし；且つ２つの隣接メチレンプロトン（δ２．０５（Ｈ１−２０）、δ１．６２（Ｈ２−２０）、δ１．６８（Ｈ１−３６）及びδ１．５２（Ｈ２−３６））が互いにカップリングしていることを示し、ヒドロキシメチンプロトンはＨ−３７であることを証明している。
生成物Ｇｈ−３２７１のＨＭＱＣデータは、δ３６．８８（Ｃ−２０）、δ２５．５６（Ｃ−３６）及びδ７３．６３（Ｃ−３８）を示し、第２級ヒドロキシ基はＣ−３７に、第３級ヒドロキシ基はＣ−３８に結合されていることを証明している。
生成物Ｇｈ−３２７１のＨＭＢＣデータは、δ３．３８（Ｈ−３７）がδ３６．８８（Ｃ−２０）と相関し；δ２．０５（Ｈ１−２０）及びδ１．６２（Ｈ２−２０）の双方が、δ２５．５６（Ｃ−３６）、δ７８．０９（Ｃ−３７）、δ８０．５６（Ｃ−２）、δ１２５．２８（Ｃ−３）及びδ２６．３９（Ｃ−１９）と相関し；δ５．４６（Ｈ−３）がδ８０．５６（Ｃ−２）、δ２６．３９（Ｃ−１９）及びδ１０２．９５（Ｃ−５）と相関し；δ１．４４（Ｈ−１９）がδ８０．５６（Ｃ−２）、δ１２５．２８（Ｃ−３）、δ１１６．１３（Ｃ−４）及びδ１６０．４４（Ｃ−１８）と相関し；且つδ１．１８（Ｈ−３９及びＨ−４０）が、δ７８．０９（Ｃ−３７）及びδ７３．６３（Ｃ−３８）と相関していることを示し、Ｃ−２に結合した側鎖は、３，４−ジヒドロキシ−４−メチルペンチル基であることを証明している。
生成物Ｇｈ−３２７１のＮＯＥＳＹデータは、δ７．５０（Ｈ−１０）がδ３．５０（Ｈ−１１）と相関し；δ３．５０（Ｈ−１１）がδ２．３４（Ｈ１−２１）及びδ１．３７（Ｈ２−２１）と相関し；δ１．３７（Ｈ１−２１）がδ２．５０（Ｈ−２２）及びδ１．２７（Ｈ−２４）と相関し；δ２．５０（Ｈ−２２）がδ１．６３（Ｈ−２５）と相関し；且つδ５．３９（Ｈ−２７）がδ１．５８（Ｈ−２９）と相関していることを示し、生成物Ｇｈ−３２７１のこの部分の立体構造は、ガンボジックアシッドのそれに一致、すなわち、１１Ｓ、１３Ｒ、１４Ｓ、２２Ｓ配置で存在し、トランス関係のＨ−２７及びカルボキシル基（Ｃ−３０）、並びにＺ配置の二重結合Δ２７，２８を含むことを証明している。加えて、δ３．３８（Ｈ−３７）がδ１．１８（Ｈ−３９及びＨ−４０）と相関し；且つδ２．０５（Ｈ１−２０）がδ１．５８（Ｈ−２９）と相関しているので、Ｃ−２はＳ配置で存在する。
上記の情報に基づいて、生成物Ｇｈ−３２７１は、次の化学構造：
Figure 0005558408
を有する新規化合物であることが確認される。
生成物Ｇｈ−３２７１は、名称「エピフォルモキサントンＪ」｛ＩＵＰＡＣ名称：［２−ブテン酸、２−メチル−４−［（１Ｒ，３ａＳ，５Ｓ，１１Ｓ，１４ａＳ）−３ａ，４，５，７−テトラヒドロ−８−ヒドロキシ−３，３，１１−トリメチル−１３−（３−メチル−２−ブテニル）−１１−（３，４−ジヒドロキシ−４−メチルペンチル）−７，１５−ジオキソ−１，５−メタノ−１Ｈ，３Ｈ，１１Ｈ−フロ［３．４−ｇ］ピラノ［３．２−ｂ］キサンテン−１−イル］−，（２Ｚ）−］｝によって識別される。
（結論）
前記で得られた実験結果によれば、次表４に要約されるように、画分１〜３から精製された３５種の生成物には、１７種の新規化合物及び１８種の既知化合物が含まれることがわかる。生成物Ｇｈ−４７、Ｇｈ−６３１、Ｇｈ−４６０１、Ｇｈ−４６０２及びＧｈ−２３０１は既知化合物であることが判明し、そのｉｎ ｖｉｔｒｏ抗がん活性は、米国特許第７１３８４２８号中で試験されているので、以下の薬理実験において、これら５つの生成物については試験しない。
Figure 0005558408
（例４．生成物ＴＳＢ−１４からの分画生成物ＴＳＢ−１４Ａ〜ＴＳＢ−１４Ｅの調製）
Ａ．生成物ＴＳＢ−１４のセミ分取ＲＰ−ＨＰＬＣ
米国特許第７１３８４２８号の例１により調製されたガンボージ樹脂からのアセトン抽出生成物である３ｇの生成物ＴＳＢ−１４を、３０ｍＬのアセトン／アセトニトリル（ｖ／ｖ＝１：９）に溶解し、次いで、前記セクションの「一般手順」に記載の道筋に沿って、Ａ（０．０４７５％ＴＦＡと５％アセトニトリルとの水性混合物）及びＢ（９５％アセトニトリル）を含む移動相を使用し、Ａの比率を４０％から３２％まで、Ｂの比率を６０％から６８％まで変えることによって１００分以内で勾配溶出を実施するセミ分取ＲＰ−ＨＰＬＣによる分析に供した。こうして得られた溶出プロフィールを図６に示す。
Ｂ．生成物ＴＳＢ−１４からの５つの粗分画生成物の調製
図６を参照して、そこに示したようなセミ分取ＲＰ−ＨＰＬＣの溶出プロフィールを５つの領域：０〜１３．７分の範囲の保持時間に対応する領域Ａ、１３．７〜２０．４分の範囲の保持時間に対応する領域Ｂ、２０．４〜２６．１分の範囲の保持時間に対応する領域Ｃ、２６．１〜３４．９分の範囲の保持時間に対応する領域Ｄ、及び３４．９〜５３．８分の範囲の保持時間に対応する領域Ｅに分割した。
３ｇの生成物ＴＳＢ−１４を、前記セクションＡに記載のようにセミ分取ＲＰ−ＨＰＬＣによる分析に供し、図６に示した溶出プロフィールの領域Ａ〜Ｅにそれぞれ対応する５つの溶出物を集めた。
溶出物Ａ〜Ｅを大量に得るため、前記のセミ分取ＲＰ−ＨＰＬＣ分析による生成物ＴＳＢ−１４の溶出を５０回繰り返した。こうして集めた溶出物Ａ〜Ｅを、個々に、４Ｌ褐色ガラス瓶に入れ、続いて真空ロータリーエバポレーター中で濃縮し、それによって濃縮物Ａ〜Ｅを得て、そのそれぞれを、順次、次のように処理した。すなわち、濃縮物をＨ２Ｏと酢酸エチルに分配し；Ｈ２Ｏで洗浄してＴＦＡを除去した後に、有機層を無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、真空ロータリーエバポレーターを使用して有機溶媒を除去した。その後、溶出物Ａ〜Ｅからそれぞれ５つの粗分画生成物Ａ〜Ｅを得た。
Ｃ．５つの粗分画生成物Ａ〜Ｅの精製
５つの粗分画生成物Ａ〜Ｅを次のように精製した。すなわち、上で得られるような粗分画生成物を、１０ｍＬのアセトンに溶解し、次いで、前記セクションの「一般手順」中に記載の道筋に沿って、０．０５％ＴＦＡ（ａｑ．）及び９５％アセトニトリルを含む移動相を使用し、表５に示す溶出条件により勾配溶出を実施するセミ分取ＲＰ−ＨＰＬＣによる分析に供した。
Figure 0005558408
勾配溶出中に、図６に示したセミ分取ＲＰ−ＨＰＬＣの溶出プロフィールの領域Ａ〜Ｅに関して、５つの粗分画生成物Ａ〜Ｅから溶出物を集めた。こうして集めた溶出物のそれぞれを、次いで、次のように処理した。すなわち、溶出物をＨ２Ｏと酢酸エチルに分配し；Ｈ２Ｏで洗浄してＴＦＡを除去した後に、有機層を無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、真空ロータリーエバポレーターを使用して有機溶媒を除去した。その後、５つの部分的に精製された分画生成物を得た。
こうして得られた５つの部分的に精製された分画生成物のそれぞれを、このセクション中に記載のセミ分取ＲＰ−ＨＰＬＣによる分析を一定の溶出プロフィールが得られるまで繰り返すことによってさらに精製した。精製後、生成物ＴＳＢ−１４からの５つの分画生成物、すなわちＴＳＢ−１４Ａ（１２５ｍｇ）、ＴＳＢ−１４Ｂ（８５ｍｇ）、ＴＳＢ−１４Ｃ（５２ｍｇ）、ＴＳＢ−１４Ｄ（２６７ｍｇ）及びＴＳＢ−１４Ｅ（１０２６ｍｇ）を得た。
Ｄ．生成物ＴＳＢ−１４Ａ〜ＴＳＢ−１４Ｅの確認及び特徴づけ
前記セクションＣで得られるような分画生成物ＴＳＢ−１４Ａ〜ＴＳＢ−１４Ｅのそれぞれ１０ｍｇを、１ｍＬのアセトンに溶解し、続いて前記セクションＣに記載のようにセミ分取ＲＰ−ＨＰＬＣによる分析に供した。こうして得られた分画生成物ＴＳＢ−１４Ａ〜ＴＳＢ−１４Ｅの溶出プロフィールを図７〜１１に示す。
図７〜１１に示した溶出プロフィールを図１のそれと比較すると、分画生成物ＴＳＢ−１４Ａ〜ＴＳＢ−１４Ｅの溶出プロフィールは、それぞれ、図１に示すピーク１〜１２、ピーク１３〜１５、ピーク１６〜２０、ピーク２１〜２４、及びピーク２５〜３５に対応するピークを含むことがわかり、分画生成物ＴＳＢ−１４Ａは、生成物Ｇｈ−３２６１、Ｇｈ−３２７１、Ｇｈ−３２７２、Ｇｈ−３３１１、Ｇｈ−３３３２、Ｇｈ−１０３６、Ｇｈ−３２９１、Ｇｈ−６３１、Ｇｈ−１０５２、Ｇｈ３３５１、Ｇｈ−３３５３及びＧｈ−３３５２を含み；分画生成物ＴＳＢ−１４Ｂは、生成物Ｇｈ−４７、Ｇｈ−４６０２及びＧｈ−４６０１を含み；分画生成物ＴＳＢ−１４Ｃは、生成物Ｇｈ−１６０１−Ａ、Ｇｈ−１０５０、Ｇｈ−１６０２、Ｇｈ−１６３１及びＧｈ−２６４１−１を含み；分画生成物ＴＳＢ−１４Ｄは、生成物Ｇｈ−２５０１、Ｇｈ−２６４２、Ｇｈ−２５０７及びＧｈ−２５０５を含み；分画生成物ＴＳＢ−１４Ｅは、生成物Ｇｈ−２５０８、Ｇｈ−２６０３−１、Ｇｈ−２６０３−２、Ｇｈ−１６４１、Ｇｈ−１６４２、Ｇｈ−２６０５、Ｇｈ−２６０６、Ｇｈ−２６０７−Ｂ、Ｇｈ−２６０７−１Ａ、Ｇｈ−２３０１及びＧｈ−４３０１を含むことを示している。
（例５．生成物ＴＳＢ−１４に関する薬理実験）
米国特許第７１３８４２８号に開示されているような腫瘍細胞成長阻害活性以外の、生成物ＴＳＢ−１４のあり得る生物学的活性を探索するために、次の薬理実験を実施した。
（薬理実験１ がん関連タンパク質の活性又は結合形成能力に対する、生成物ＴＳＢ−１４を含む製剤の効果）
生成物ＴＳＢ−１４を赤砂糖と９：１（ｗｔ／ｗｔ）の比率で混合することによって製剤ＴＳＢ−９を得た。がん関連タンパク質の活性又は結合形成能力に対する製剤ＴＳＢ−９の影響を、ＭＤＳ Ｐｈａｒｍａ Ｓｅｒｖｉｃｅｓ社において、Ｄ．Ｒｉｅｎｄｅａｕら（１９９７）、Ｃａｎ．Ｊ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．，７５：１０８８〜１０９５；Ｔ．Ｄ．Ｗａｒｎｅｒら（１９９９）、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，９６：７５６３〜７５６８；Ｃ．Ｄｉｔｃｈｆｉｌｅｄら（２００３）、Ｊ．Ｃｅｌｌ Ｂｉｏｌ．，１６１：２６７〜２８０；Ｎ．Ｇｒａｙら（１９９９）、Ｃｕｒｒ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．，６：８５９〜８７５；Ｋ．Ｃｈｅｎｇ及びＪ．Ｇ．Ｋｏｌａｎｄ（１９９６）、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，２７１：３１１〜３１８；Ｋ．Ｆａｒｌｅｙら（１９９２）、Ａｎａｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．，２０３：１５１〜１５７；Ｅ．Ｂｕｃｈｄｕｎｇｅｒら（１９９６）、Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．，５６：１００〜１０４；Ｄ．Ｑ．Ｇｕｏら（２０００）、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，２７５：１１２１６〜１１２２１；Ｅ．Ｇ．Ｂａｒｂａｃｃｉら（２００３）、Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．，６３：４４５０〜４４５９；Ｅ．Ｌｉｕら（１９９２）、Ｏｎｃｏｇｅｎｅ，７：１０２７〜１０３２；Ｔ．Ｏｚａｗａら（１９９８）、Ａｎａｌ．Ｃｈｅｍ．，７０：２３４５〜２３５２；及びＪ．Ｄ．Ｏｂｏｕｒｎら（１９９３）、Ｂｉｏｃｈｅｍ．，３２：６２２９〜６２３６を参照し、これらの中で報告されているアッセイ法に若干の修正を加えて分析した。
簡潔には、この実験で、製剤ＴＳＢ−９を、１０μｇ／ｍＬの濃度で、次の９種のがん関連タンパク質、すなわち、シクロオキシゲナーゼ−２（ＣＯＸ−２）；タンパク質セリン／トレオニンキナーゼＡＵＲＫＢ（Ａｕｒｏｒａ−Ｂキナーゼ）及びＣＤＣ２／ＣＣＮＢ１（ｃｄｋ１／サイクリンＢ）；タンパク質チロシンキナーゼＡＢＬ１（ＡＢＬ）、上皮細胞成長因子受容体（ＥＧＦＲ）、ＥＲＢＢ２（ＨＥＲ２）、インスリン受容体、及びＫＤＲ（ＶＥＧＦＲ−２）；並びにエストロゲン受容体α（ＥＲα）を使用して試験した。これらの９種の標的の生体機能、及びそれらのがん類型との相互関係の概略を表６に示す。
Figure 0005558408
ＭＤＳ Ｐｈａｒｍａ Ｓｅｒｖｉｃｅｓ社が提出した実験報告書によれば、９種の被験がん関連タンパク質の活性又は結合形成能力に対する製剤ＴＳＢ−９の影響は、阻害率（％）で表現され、得られた結果を表７に要約する。
Figure 0005558408
表７に示した結果によれば、ガンボージ樹脂からのアセトン抽出生成物ＴＳＢ−１４が、被験がん関連タンパク質に対して有意な阻害活性を示すことは明白である。これらの９種のがん関連タンパク質は、種々の腫瘍／がん（例えば、結腸直腸がん、胃がん、非小細胞肺がん、脳がん、甲状腺がん、上咽頭がん、慢性骨髄性白血病、Ｔ−細胞急性リンパ芽球性白血病、肺がん、結腸がん、乳がん、白血病、肝臓がん、卵巣がん、腎臓がん、膵臓がん、及び子宮内膜がん）と関連していることが知られているので、ガンボージ樹脂からのアセトン抽出生成物ＴＳＢ−１４は、腫瘍／がんを治療するのに使用できると考えられる。
（薬理実験２ ｉｎ ｖｉｖｏ痛覚脱失試験）
製剤ＴＳＢ−９を粉砕して、ほぼ１０μｍの粒径を有する製剤ＴＳＢ−９−Ｗを得て、ＭＤＳ Ｐｈａｒｍａ Ｓｅｒｖｉｃｅｓ社において製剤ＴＳＢ−９−Ｗのｉｎ ｖｉｖｏ痛覚脱失試験を実施した。
簡潔には、雄性ＣＤ−１（Ｃｒｌ．）マウスを、実験群（すなわち、ＴＳＢ−９−Ｗ群）及び２つの対照群（すなわち、媒体規準対照群及びモルフィン陽性対照群）を含む３群（各群でｎ＝５）に無作為分割した。ＴＳＢ−９−Ｗ群のマウスには製剤ＴＳＢ−９−Ｗを１００ｍｇ／ｋｇの投与量で経口投与し、媒体規準対照群のマウスには２％Ｔｗｅｅｎ８０を１０ｍＬ／ｋｇの投与容積で経口投与し、モルフィン陽性対照群のマウスには、モルフィンを３０ｍｇ／ｋｇの投与量で経口投与した。１時間後に、０．０２ｍＬの２％ホルマリン溶液を、各群のマウスの後肢に足底下で注射し、各マウスについて後肢足舐め行動回数を、ホルマリン注射後の０〜５分及び１５〜３０分の間に計数した。各群のマウスにおける後肢足舐め行動の抑制率（％）を、次式（１）：
Ａ＝（Ｂ−Ｃ）／Ｂ×１００ （１）
［式中、
Ａ＝後肢足舐め行動の抑制率（％）、
Ｂ＝媒体規準対照群のマウスにおける後肢足舐め行動回数の平均値、及び
Ｃ＝各群のマウスにおける後肢足舐め行動回数の平均値］
を使用して計算した。
計算した抑制率が５０％以上であるなら、有意な鎮痛活性が存在することを示す。
得られた実験結果を表８に示す。表８を参照すると、媒体規準対照群のマウスに比較して、ＴＳＢ−９−Ｗ群のマウスについて計算された後肢足舐め行動の抑制率は、ホルマリン注射後の０〜５分及び１５〜３０分の間でかなり増大した。とりわけ、０〜５分の間に、ＴＳＢ−９−Ｗ群のマウスにおける後肢足舐め行動は、６８％まで抑制され、ガンボージ樹脂からのアセトン抽出生成物ＴＳＢ−１４が疼痛を抑制するのに有効であることを示している。
Figure 0005558408
（薬理実験３ ｉｎ ｖｉｖｏ抗炎症試験）
製剤ＴＳＢ−９を粉砕して、ほぼ５μｍの粒径を有する製剤ＴＳＢ−９−Ｗ１を得て、ＭＤＳ Ｐｈａｒｍａ Ｓｅｒｖｉｃｅｓ社において、製剤ＴＳＢ−９−Ｗ１のｉｎ ｖｉｖｏ抗炎症試験を実施した。
簡潔には、体重がほぼ１６０±５ｇの雄性Ｗｉｓｔａｒラットを、２つの実験群（すなわち、ＴＳＢ−９−Ｗ１−１群及びＴＳＢ−９−Ｗ１−２群）並びに２つの対照群（すなわち、媒体規準対照群及びアスピリン陽性対照群）を含む４群（各群でｎ＝５）に無作為分割した。一夜絶食後、ＴＳＢ−９−Ｗ１−１及びＴＳＢ−９−Ｗ１−２群のラットには製剤ＴＳＢ−９−Ｗ１をそれぞれ１０ｍｇ／ｋｇの投与量及び３０ｍｇ／ｋｇの投与量で経口投与し、媒体規準対照群のラットには２％Ｔｗｅｅｎ８０を１０ｍＬ／ｋｇの投与容積で経口投与し、アスピリン陽性対照群のラットはアスピリンを１５０ｍｇ／ｋｇの投与量で経口投与した。１時間後に、０．１ｍＬの１％カラゲナン懸濁液を、各群のラットの右後肢中に足底下で注射した。足底下注射の３時間後に、ウォーターセル（直径２５ｍｍ、＃７１５７、ＵＧＯ Ｂａｓｉｌｅ、イタリア）を含むプレチスモメーター（＃７１５０、ＵＧＯ Ｂａｓｉｌｅ、イタリア）を使用して、各ラットの左及び右後肢の容積を測定し、後肢の浮腫容積を、測定された左及び右後肢の容積の差として表現した。各群のラットにおける後肢浮腫の抑制率（％）を、次式（２）：
Ｄ＝（Ｅ−Ｆ）／Ｅ×１００ （２）
［式中、
Ｄ＝後肢浮腫の抑制率（％）、
Ｅ＝媒体規準対照群のラットにおける後肢浮腫の平均値、及び
Ｆ＝各群のラットにおける後肢浮腫容積の平均値］
を使用して計算した。
計算した抑制率が３０％以上であるなら、有意な抗炎症活性が存在することを示す。
得られた実験結果を表９に示す。表９を参照すると、媒体規準対照群のラットに比較して、ＴＳＢ−９−Ｗ１−１群及びＴＳＢ−９−Ｗ１−２群のラットについて計算された後肢浮腫の抑制率は、カラゲナン注射の３時間後にかなり増大した。特に、製剤ＴＳＢ−９−Ｗ１を３０ｍｇ／ｋｇの投与量で投与されたラットにおいて、後肢浮腫は３０％まで抑制された。実験結果は、ガンボージ樹脂からのアセトン抽出生成物ＴＳＢ−１４が、用量依存性の抗炎症効果を有することを示す。
Figure 0005558408
（例６．生成物ＴＳＢ−１４から得られた分画生成物及び精製化合物に関する薬理実験）
前記例４で得られた５つの分画生成物ＴＳＢ−１４Ａ〜ＴＳＢ−１４Ｅ、及び前記例２で得られた精製生成物（生成物Ｇｈ−４７、Ｇｈ−６３１、Ｇｈ−４６０１、Ｇｈ−４６０２及びＧｈ−２３０１を除く）のあり得る生物学的活性を探索するために、ＭＤＳ Ｐｈａｒｍａ Ｓｅｒｖｉｃｅｓ社において、次の薬理実験を実施した。
（薬理実験１ ｉｎ ｖｉｔｒｏ抗がん試験）
ｉｎ ｖｉｔｒｏ抗がん試験を主として使用して、がん細胞の増殖に対する候補薬物の効果を検出した。その試験に含まれる作用原理は、アラマーブルー（ＡｂＤ Ｓｅｒｏｔｅｃ社、英国）を、その初めは非蛍光性の酸化状態（非蛍光性、青色）から、代謝反応を介して蛍光を有する還元型（蛍光性、赤色）へ転換する生存細胞の能力である。こうして得られる、アラマーブルー試薬によって生じる蛍光データの結果によって、生存細胞の増殖及び細胞活性を定量して検出することができる。
ｉｎ ｖｉｔｒｏ抗がん試験において、候補薬物は、０．０１、０．１、１、１０、及び１００μｇ／ｍＬの５種の異なる濃度で試験され、６種のヒトがん細胞系及び正常ヒト細胞系を使用した（表１０参照）。加えて、４０％ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）を規準対照として使用し、マイトマイシンを陽性対照として使用した。
Figure 0005558408
ＭＤＳ Ｐｈａｒｍａ Ｓｅｒｖｉｃｅｓ社が提出した実験報告によれば、前記例４で得られた５つの分画生成物ＴＳＢ−１４Ａ〜ＴＳＢ−１４Ｅ、及び前記例２で得られた３０の精製生成物のＩＣ５０（５０％阻害濃度）及びＬＣ５０（５０％致死濃度）を、それぞれ表１１〜１４に示す。
Figure 0005558408
Figure 0005558408
Figure 0005558408
Figure 0005558408
表１１〜１４に示した結果から、前記例４で得られた５つの分画生成物ＴＳＢ−１４Ａ〜ＴＳＢ−１４Ｅ及び前記例２で得られた１７種の新規化合物が、すべて、腫瘍／がん細胞の成長を阻害すること、及び腫瘍／がん細胞を死滅させることにおいて有意な効果を有することがわかる。とりわけ、分画生成物ＴＳＢ−１４Ａ〜ＴＳＢ−１４Ｅの抗がん効果は、米国特許第７１３８４２８号中に開示の生成物ＴＳＢ−１４のそれに比べて概してより優れている。したがって、前記例４で得られた分画生成物ＴＳＢ−１４Ａ〜ＴＳＢ−１４Ｅ、及び前記例２で得られた１７種の新規化合物は、すべて、抗がん薬として役立つための大きな潜在能力を有する。
（薬理実験２ がん関連タンパク質の活性又は結合形成能力に対する分画生成物ＴＳＢ−１４Ａ〜ＴＳＢ−１４Ｅの効果）
９種のがん関連タンパク質の活性又は結合形成能力に対する分画生成物ＴＳＢ−１４Ａ〜ＴＳＢ−１４Ｅの効果を、実質上例５の薬理実験１に記載の方法により評価し、得られた結果を表１５に示す。
Figure 0005558408
表１５に示した結果から、本発明による分画生成物ＴＳＢ−１４Ａ〜ＴＳＢ−１４Ｅが、すべて、９種の被験がん関連タンパク質の活性又は結合形成能力を阻害することにおいて有意な効果を有することがわかる。これら９種のがん関連タンパク質は、種々の腫瘍／がん（例えば、結腸直腸がん、胃がん、非小細胞肺がん、脳がん、甲状腺がん、上咽頭がん、慢性骨髄球性白血病、Ｔ−細胞急性リンパ芽球性白血病、肺がん、結腸がん、乳がん、白血病、肝臓がん、卵巣がん、腎臓がん、膵臓がん、及び子宮内膜がん）と関連することが知られているので、本発明による分画生成物ＴＳＢ−１４Ａ〜ＴＳＢ−１４Ｅは、腫瘍／がんの治療で使用できると考えられる。
（薬理実験３ 分画生成物ＴＳＢ−１４Ａ〜ＴＳＢ−１４Ｅのｉｎ ｖｉｖｏ鎮痛試験）
前記例４で得られた分画生成物ＴＳＢ−１４Ａ〜ＴＳＢ−１４Ｅの鎮痛効果を、体重がほぼ２３±３ｇの雄性ＣＤ−１（Ｃｒｌ．）マウス（各群でｎ＝６）を使用し、媒体規準対照群のマウスに５％ＤＭＳＯ／２％Ｔｗｅｅｎ８０を１０ｍＬ／ｋｇの投与容積で経口投与することを除いて、実質上例５の薬理実験２に記載の方法により評価し、各群のマウスの後肢足舐め行動回数を、ホルマリン注射後の０〜５、１０〜１５、１５〜２０、２０〜２５及び２５〜３０分の間に計数した。得られた実験結果を表１６に示す。
表１６を参照すると、媒体規準対照群のマウスに比較して、本発明による分画生成物ＴＳＢ−１４Ａ〜ＴＳＢ−１４Ｅを投与されたマウスの５つの実験群について計算された後肢足舐め行動の抑制率は、ホルマリン注射後の０〜２０分の間にかなり増大した。とりわけ、分画生成物ＴＳＢ−１４Ｂ〜ＴＳＢ−１４Ｅを投与されたマウスの実験群について計算された後肢足舐め行動の抑制率は、ホルマリン注射後の少なくとも１０〜２０分の間に６２％及び１００％の範囲内であり、本発明による分画生成物ＴＳＢ−１４Ａ〜ＴＳＢ−１４Ｅは、すべて、鎮痛効果を有し、特に、分画生成物ＴＳＢ−１４Ｅが最も大きな効果を有することを示している。
Figure 0005558408
（薬理実験４ 分画生成物ＴＳＢ−１４Ａ〜ＴＳＢ−１４Ｅのｉｎ ｖｉｖｏ抗炎症試験）
前記例４で得られた分画生成物ＴＳＢ−１４Ａ〜ＴＳＢ−１４Ｅの抗炎症効果を、体重がほぼ１５５±５ｇの雄性Ｗｉｓｔａｒラット（各群でｎ＝５）を使用し、５つの実験群のマウスに、それぞれ分画生成物ＴＳＢ−１４Ａ〜ＴＢＳ−１４Ｅを３０ｍｇ／ｋｇの投与量で経口投与すること、及び媒体規準対照群のそれに５％ＤＭＳＯ／２％Ｔｗｅｅｎ８０を１０ｍＬ／ｋｇの投与容積で経口投与することを除いて、実質上、例５の薬理実験３に記載の方法により評価した。得られた実験結果を表１７に示す。
表１７を参照すると、媒体規準対照群のラットに比較して、本発明による分画生成物ＴＳＢ−１４Ａ〜ＴＳＢ−１４Ｅを投与されたラットの５つの実験群について計算された後肢浮腫の抑制率は、カラゲナン注射の３時間後にかなり増大した。とりわけ、分画生成物ＴＳＢ−１４Ａ、ＴＳＢ−１４Ｃ、又はＴＳＢ−１４Ｅを投与されたラットの後肢浮腫は、３０％まで又はそれ以上抑制された。実験結果は、本発明による分画生成物ＴＳＢ１４Ａ〜ＴＳＢ−１４Ｅが、すべて、抗炎症効果を有し、特に、分画生成物ＴＳＢ−１４Ｅが最も大きな効果を有することを示す。
Figure 0005558408
本明細書中で引用したすべての特許及び文献は、参照によりその全体で本明細書に組み込まれる。矛盾する場合には、定義を含めて本明細書の説明が優先する。
本発明を、前記の特定の実施形態に関して説明してきたが、本発明の範囲及び精神から逸脱しないで、数多くの修正及び変更をなし得ることは明らかである。したがって、本発明は、もっぱら添付の特許請求範囲によって示されるようにのみ限定されると解釈される。

Claims (7)

  1. ガンボージ樹脂の分画生成物であって、
    ガンボージ樹脂を粉末に微粉砕し、続いて前記微粉砕粉末をアセトンで抽出することによって、ガンボージ樹脂からアセトン抽出生成物を得るステップ；
    アセトン抽出生成物をセミ分取ＲＰ−ＨＰＬＣによって分画して、５つの溶出物を得るステップ；
    別々に、５つの溶出物を濃縮して、続いて、Ｈ２Ｏ及び酢酸エチル中に分配して、そしてそれにより形成される酢酸エチル層を回収して、５つの粗分画生成物を得るステップ；並びに、
    別々に、５つの粗分画生成物をセミ分取ＲＰ−ＨＰＬＣによって精製して、濃縮して、Ｈ２Ｏ及び酢酸エチルに分配して、そしてそれにより形成される酢酸エチル層を回収して、５つの粗分画生成物のそれぞれについて一定の溶出プロフィールを得るステップ；
    を含む方法によって調製される分画生成物であり、
    前記分画生成物が、
    （１）フォルモキサントンＡ、
    式：
    Figure 0005558408
    の化合物、
    式：
    Figure 0005558408
    の化合物、
    式：
    Figure 0005558408
    の化合物、
    式：
    Figure 0005558408
    の化合物、
    式：
    Figure 0005558408
    の化合物、
    式：
    Figure 0005558408
    の化合物、
    式：
    Figure 0005558408
    の化合物、
    式：
    Figure 0005558408
    の化合物、
    式：
    Figure 0005558408
    の化合物、
    式：
    Figure 0005558408
    の化合物、及び、
    式：
    Figure 0005558408
    の化合物、
    を含む分画生成物；
    （２）イソモレリックアシッド、モレリックアシッド及びイソモレリノールを含む分画生成物；
    （３）３０−ヒドロキシエピガンボジックアシッド、３０−ヒドロキシガンボジックアシッド、ネオガンボジックアシッド、式：
    Figure 0005558408
    の化合物、及び、
    式：
    Figure 0005558408
    の化合物、
    を含む分画生成物；
    （４）イソモレリン、イソガンボゲニックアシッド、ガンボゲニックアシッド、及び式：
    Figure 0005558408
    の化合物、
    を含む分画生成物；並びに、
    （５）ガンボジックアシッド、エピガンボジックアシッド、イソガンボジックアシッド、エピイソガンボジックアシッド、デスオキシモレリン、デスオキシガンボゲニン、ガンボゲリックアシッド、エピガンボゲリックアシッド、式：
    Figure 0005558408
    の化合物、
    式：
    Figure 0005558408
    の化合物、及び、
    式：
    Figure 0005558408
    の化合物、
    を含む分画生成物、
    からなる群から選択される、
    分画生成物。
  2. 請求項１に記載の少なくとも１種の分画生成物を含む医薬組成物。
  3. （１）ガンボージ樹脂から、ガンボージ樹脂を粉末に微粉砕し、続いて前記微粉砕粉末をアセトンで抽出することによって得られるアセトン抽出生成物；及び、
    （２）請求項１に記載の分画生成物、
    の少なくとも１種を含む鎮痛組成物。
  4. （１）ガンボージ樹脂から、ガンボージ樹脂を粉末に微粉砕し、続いて前記微粉砕粉末をアセトンで抽出することによって得られるアセトン抽出生成物；及び、
    （２）請求項１に記載の分画生成物、
    の少なくとも１種を含む抗炎症組成物。
  5. 請求項１に記載の分画生成物の少なくとも１種を含む抗がん用組成物。
  6. 細胞（人間の細胞を除く）を請求項１に記載の分画生成物の少なくとも１種と接触させることを含む、腫瘍／がん細胞の成長を阻害する方法。
  7. 対象（人間を除く）に請求項１に記載の分画生成物の少なくとも１種を投与することを含む、対象のがんを治療する方法。
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