JP5492147B2 - 注入可能な架橋されたポリマー調製物およびその使用 - Google Patents
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Description
(a)アルギン酸ナトリウムを水または任意の他の好適な水性緩衝液に溶解する工程;
(b)工程(a)で得られたアルギン酸塩溶液を、好適な架橋剤を用いて、均一な架橋されたアルギン酸塩溶液が得られるまで激しく撹拌しながら、前記架橋剤の水溶液を加えることによって架橋する工程
を含む。
(a)本発明において規定されるような架橋されたポリマー溶液またはその組成物;
(b)必要としている患者の心臓部位に(a)のポリマー溶液を投与するための手段;
(c)前記ポリマー溶液をどのように使用するかの指示マニュアル;
を含む、損傷した組織を修復するためのキットを提供する。
BMP: 骨形態形成タンパク質
bFGF: 塩基性繊維芽細胞増殖因子
CHF: 慢性心不全
2−D: 二次元
DDW: 2回蒸留水
ECM: 細胞外マトリックス
EDA: 拡張期終期面積
ESA: 収縮期終期面積
GPC: ゲル浸透クロマトグラフィー
IGF: インスリン様増殖因子
LA: 左心房
LAD: 左前下行
LV: 左心室
LVEF: LV駆出率
LVID: LV内部大きさ
MALLS:多角度レーザー光散乱
MHC: ミオシン重鎖
MI: 心筋梗塞
Mn: 分子数
MR: 僧帽弁逆流
Mw: 分子量
PD: 多分散度
PM: 乳頭筋
SDF: 間質細胞由来因子
SMA: 平滑筋アクチン
TGF: トランスフォーミング増殖因子
VEGF: 血管内皮細胞増殖因子
WMSI: 壁運動スコア指数
動物モデルにおける心臓細胞移植または組織工学の有望な結果は、LV壁の構造、厚さおよび弾力性を維持する細胞外マトリックス(ECM)の再構築に起因すると部分的には考えられている。本発明者らは、架橋されたアルギン酸塩に基づく生体適合材料の注入によるECMの操作が、治癒および自己再生のための足場を提供しながら、LVの構造および機能を効率的に保持し得るかどうかを調べてきた。
(a)アルギン酸ナトリウムを水または任意の他の好適な水性緩衝液に溶解する工程;
(b)工程(a)で得られたアルギン酸塩溶液を、好適な架橋剤を用いて、均一な架橋されたアルギン酸塩溶液が得られるまで激しく撹拌しながら、前記架橋剤の水溶液を加えることによって架橋する工程
を含む。
(a)アルギン酸ナトリウムを水または任意の他の好適な水性緩衝液に溶解する工程;
(b)工程(a)で得られたアルギン酸塩溶液を、均一な溶液が得られるまで激しく撹拌しながら、好適な体積の2%(w/v)グルコン酸カルシウム溶液を加えることによってカルシウムイオンにより架橋する工程
を含む方法を提供する。
(a)本発明において規定されるようなポリマー溶液またはその組成物;
(b)必要としている患者の心臓部位にポリマー溶液を投与するための手段;
(c)前記ポリマー溶液をどのように使用するかの指示マニュアル;
を含む、損傷した組織を修復するためのキットを提供する。
本研究は、ベングリオン大学動物管理使用委員会およびテルアビブ大学Sheba医療センターのガイドラインに従って行われ、アメリカ心臓学会および「実験室動物の管理および使用のためのガイド」(保険福祉省、NIH刊行物番号85−23)の方針に合致している。
アルギン酸ナトリウム(3kDa〜300kDaの範囲にあるMw;FMC Biopolymers、Drammen、ノルウェー)を2回蒸留水(DDW)に溶解して、2%(w/v)の最終濃度にした。このアルギン酸塩溶液を、よりなめらかな溶液が得られるまで激しく撹拌しながら、2%(w/v)のグルコン酸カルシウム溶液(D−グルコン酸、ヘミカルシウム塩;Sigma)を加えることによってカルシウムイオンにより架橋する。架橋されたアルギン酸塩溶液の粘度は、カルシウムイオンおよびアルギン酸塩の重量比を変化させることによって、そしてまた、ポリマーの分子量および組成(M/G比)を慎重に選択することによって操作することができる。それにもかかわらず、すべての場合において、架橋されたアルギン酸塩溶液は、注入することを可能にする粘度を有した。架橋はホモジナイザーによって行われた。
様々なサンプルを、Waters606ポンプと、その後に直列につながれた2つのPSS Supremaゲル浸透カラムとを含むクロマトグラフィーシステムで分離した。カラムの説明:大きさ、300x8mm2;粒子サイズ、10mm;多孔性、3000Aおよび10000A。流速は0.5mL/分であった。カラムは、Techlab K−4の制御された加熱炉の内側で25℃の一定の温度で保たれた。このクロマトグラフィーシステムは、632.8nmで作動するHe/Neレーザー、K5屈折セル、および14°〜163°の角度での18個の検出器を備えるDawn DSP(Wyatt Technology Corporation)多角度レーザー光散乱(MALLS)光度計に取り付けられた。濃度を、校正された干渉分光法屈折計Optilab DSP(Wyatt Technology Corporation)によってモニターした。データ処理およびモル質量の計算を、Wyatt ASTRAソフトウェア(バーション4.7)を用いて行った。各サンプルは、再現性を保証するために3回注入された。アルギン酸塩のdn/dcは、Wyatt dn/dcソフトウェアによって制御されるOptilab DSPを用いて測定されたとき、0.155mL/g(水性緩衝液)であることが見出された。緩衝液水溶液を、0.1MのNaNO3、0.02%(w/v)のNaN3および10mMのイミダゾールが補充された超純水(0.055μs/cm、USF SERAL Purelab RO75、それに続くUSF SERAL Purelab UV)から調製した。緩衝液をNaNO3により滴定してpH7.0にし、0.1μmのフィルター(Gelman Sciences VacuCap60)によりろ過した。
レオロジー測定を、コーンプレートモード(1°および4°のコーン角度、60mmおよび40mmの直径をそれぞれ有する)で操作されるCarriMed CLS50制御の応力レオメーター(CarriMed Instruments Ltd.、Dorking、英国)において行った。小さい振幅の振動剪断の実験(0.1Hz〜10Hz)を線形粘弾性限界内で行った。振動数走査を、サンプルに対する損傷を防止するためにできる限り低い応力で行った。応答の直線性を、線形の粘弾性を確認するために連続してモニターした。
MIモデルは本発明者らによって以前に記載された[Etzion他(2001)、同上;Leor他(1996)、同上]。オスSprague−Dawleyラット(250gまで)を40mg/kgのケタミンおよび10mg/kgのキシラジンの組合せで麻酔し、ラットは挿管され、機械的に通気された。胸部を左開胸術によって開き、心膜を除き、近位左冠状動脈を壁内縫合により永続的に閉塞させた。梗塞後1週間目に、ラットを麻酔し、無菌技術下で胸部を開いた。梗塞した領域を、表面の瘢痕および壁運動の無動に基づいて目視により確認した。ラットを、27ゲージのニードルを使用する100μL〜200μLのアルギン酸塩系生体適合材料または無血清培養培地のいずれかの注入に対して選択した。瘢痕内への注入の後、手術による切開を縫合して閉じた。
注入後8週で、動物を過剰量のフェノバルビタールで屠殺した。心臓を集め、組織学的検査および免疫組織学的検査のために処理した。隣接するブロックをパラフィンに包埋し、5μmの薄片に切片化し、ヘマトキシリンおよびエオシンにより染色した。連続した切片を、胚性心筋細胞に存在するが、成体の正常な心筋細胞には存在しないα−アクチン平滑筋(SMA)イソ型[Leor,J,他(1996)、Circulation、94:II332〜336]に対する抗体、早性ミオシン重鎖(MHC)に対する抗体(Sigma)、Ki67に対する抗体(Novocastra Ltd)、SDF−1(R&D systems)に対する抗体により免疫標識した。
梗塞した心筋および梗塞周囲の心筋における血管新生に対するアルギン酸塩注入の影響を、周細胞および細動脈に対する抗α−SMA抗体(Sigma)による代表的なスライド片の免疫組織学的染色によって評価した。低倍率での検査の後、5つの連続した隣接する視野を200倍の倍率で各切片から写真撮影した。血管の数を、コンピュータ処理された画像分析によって顕微鏡写真から評価して、移植群および対照群の心臓において、血管の数を数え、かつ血管密度(1mm2あたりの毛細管および細動脈の平均数)を計算した。
経胸壁超音波心臓造影法を、MI後24時間以内(ベースラインとなる心エコー図)およびMI後8週においてすべての動物に対して行った。以前の報告では、ラットにおける経胸壁超音波心臓造影法の正確性および再現性が明らかにされている[Etzion他(2001)、同上;Leor,J.他(2000)、同上;Litwin,S.E.他(1994)、Circulation、89:345〜354;Schwarz,E.R.他(1998)、Basic Res.Cardiol、93:477〜486]。心エコー図を、以前に報告されたように、12MHzフェーズドアレイ変換器を備える市販の超音波心臓造影法システム(Hewlett Packard)を用いて行った。測定されたパラメーターは下記の通りであった:LV前壁の厚さ;LV拡張終期の最大の大きさ;Mモードおよび2D画像化における左心室収縮終期の最小の大きさ;ならびに、収縮期機能の尺度としての縮まり率(これはFS(%)=[(LVIDd−LVIDs)/LVIDd]x100として計算された;式中、LVIDはLVの内部の大きさを示し、sは収縮期であり、dは拡張期である)。LV面積の変化指数(%)が[(EDA−ESA)/EDA]x100として計算された(式中、EDAはLV拡張終期の面積を示し、ESAはLV収縮終期の面積を示す)[Mehta,P.M.他(1988)、J.Am.Coll.Cardiol.、11:630〜636]。すべての測定は、3回の連続した心臓周期について平均化され、処置群について知らされていない経験豊かな技師によって行われた。
心筋梗塞を生じさせるために使用された方法は、以前に記載された方法[Yau,T.M.他(2003)、Ann Thorac Surg、75:169〜176;Watanabe,E.他(1998)、Cell Transplant、7:239〜246]と同じであった。簡単に記載すると、メスSincklaire(ミニ)ブタを使用した(体重、30kg〜40kg)。ブタに対するすべての手術処置は全身麻酔下および連続した心電図記録法モニターリングのもとで行われた。動物は、4%イソフルランによる麻酔誘導の前にケタミン(20mg/kg〜30mg/kg、筋肉内)で準備投薬された。麻酔をイソフルラン(1%〜2.5%)で維持した。右大腿動脈を単離し、導入シースによりカニューレ挿入した。これを介して、X線透視装置による誘導のもとで、心臓カテーテルを左前下行動脈(LAD)の中央部分に入れ、塞栓形成コイル(Boston Scientific、米国)をガイドワイヤによりカテーテルから押し出し、LADの遠位部分に設置した。この手法は血栓を誘導し、これにより、血管造影法および心電図記録法により確認される左心室における心筋梗塞を生じさせた。電気的DCの電気的除細動を必要なときには与えた。
僧帽弁逆流を、回旋冠状動脈のコイル塞栓形成の後、広範囲の後部MIを生じさせることによって発生させた。
アルギン酸塩の注入をMI後7日目〜10日目に行った。ブタに麻酔し、無菌条件下で胸部を開いた。梗塞した領域を、表面の瘢痕および壁運動の異常に基づいて目視により確認した。ブタを、梗塞した心筋への2回〜3回のアルギン酸塩の注入(2.5mLまで)、または対照としての生理的食塩水の注入(2.5mLまで)に無作為に割り当てた。空気を胸部から追い出して、手術による切開を縫合して閉じた。最初の一連の先導実験において、この手法の技術的側面を改善した。移植後8週目に、ブタをフェノバルビタールの過剰量で安楽死させた。心臓を組織学および免疫組織化学のために集め、切片化して、処理した。
超音波心臓造影法を、(2.5MHz)フェーズドアレイ変換器を超音波システム(Sonos5500、Hewlett−Packard、Andover、Massachusetts)とともに使用して、MI直後、移植前、MI後10日目、ならびにMI後の30日目および60日目に麻酔下で行った。画像をVHSビデオテープに記録した。拡張終期および収縮終期のフレームを先端および胸骨近辺の標準的な図から選択した。
心室機能の浸襲的研究が終了した後、心臓を塩化カリウムにより停止させ、速やかに摘出した。心房を除き、心臓の重量を測定した。その後、冠状動脈を100mLの10%ホルムアルデヒドにより灌流し、心臓を、7日間、ホルムアルデヒド溶液中で30mmHgの心室内圧力を用いて拡張期の状態で固定処理し、その後、組織学のために切片化した。固定処理後、心臓を5mm厚の薄片に薄片化し、各切片を写真撮影した。各切片における平均瘢痕長さを心外膜瘢痕長さおよび心内膜瘢痕長さの平均値として計算した。その後、瘢痕面積を、0.5cmを乗じたその切片に対する平均瘢痕長さとして計算した。総瘢痕面積をすべての切片についての瘢痕面積の和として計算した。瘢痕の厚さを各切片において計算し、瘢痕体積を、平均瘢痕厚さを乗じた総瘢痕面積として計算した。一辺が5mmである梗塞域の中心部からの組織立方体をパラフィンに包埋し、ヘマトキシリンおよびエオシンによる染色のために5μmの切片に切断した。免疫組織化学研究のために、組織薄片を、トルエンによる脱パラフィン化の後、100%、95%および70%のエタノールにおいて連続的に水和した。サンプルにおける内因性ペルオキシダーゼをブロッキング処理し、サンプルを抗体により染色した。隣接するブロックをパラフィンに包埋し、5μmの薄片に切片化し、ヘマトキシリンおよびエオシンにより染色した。連続した切片を、SMAに対する抗体、遅性MHCに対する抗体(Sigma)、Ki67に対する抗体(Novocastra Ltd.)、およびSDF−1に対する抗体(R&D Systems)により免疫標識した。
対照群と処置群との間における一変量差を、連続変数についてのt検定を用いて評価した。両群における各ラットはそれ自身の対照として使用されたため、対照群および処置群におけるベースラインと8週目との間での変化を、ペアードt検定を用いて評価した。対照群および処置群におけるベースラインから8週目の変化の比較を、Windows(登録商標)用GraphPad Prism(バージョン4.00)(GraphPad Software、San Diego、California、米国)を使用して、反復測定によるANOVAを用いて行った。ANOVAモデルには、対照対処置およびベースライン対8週目が因子として含められ、また、これら2つの因子の間での相互作用が含められた[Perin,E.C.他(2003)、Circulation、107:2294〜2302]。p≦0.05の確率値を統計学的に有意であると見なした。
注入可能な架橋されたアルギン酸塩生体適合材料の調製およびレオロジー評価
生物ポリマーであるアルギン酸塩の分子量(Mw)およびその多分散度(PD)(分子量の分布範囲の目安)は、得られる絡み合った網目組織の形成速度および構造に対する影響を有し得る。従って、GPC−MALLSを(実験手法において記載されるように)使用して、アルギン酸塩のMwおよびPDを特徴づけた(表1)。
アルギン酸塩ゲルは、永続的でもなく、また、共有結合による架橋ほど強くない物理的な架橋が形成される物理的ゲルの範疇に含まれる。
粘度ηは、流れに対する流体の抵抗の尺度である。粘度ηは、剪断速度γに対する剪断応力τの比として定義される。
(1) η=τ/γ
材料(本件ではポリマー、すなわち、アルギン酸塩溶液)に関するレオロジー情報を得るために、動的粘弾性測定が使用される。動的粘弾性測定は、材料の構造が乱されず、また、材料の粘性特性および弾性特性の両方についての情報が得られるため、粘度測定法による測定よりも好ましい。測定は、振動数fの正弦波状の応力または歪みをサンプルに加え、その応答を測定することによって行われる。応答は、(i)加えられた応力または歪みと一致する弾性部分と、(ii)一致しない粘性部分とに分けられる。これら2つの成分のために、複素表記法が使用される。複素剪断弾性係数が、下記の式によって定義されるG*によって示される:
G*=G’+jG”
(式中、G’は貯蔵弾性係数(すなわち、弾性部分)であり、G”は損失弾性係数(粘性部分)であり、j2=−1)。
MIのラットモデルにおけるアルギン酸塩生体適合材料と心臓細胞移植との治療効果の比較
広範囲のMIの7日後、ラットを、心筋瘢痕内への、アルギン酸塩に基づく生体適合材料の注入、胚性心筋細胞(1.5x106個)の埋め込み、または培地注入に無作為に割り当てた。上記で記載されたように、アルギン酸塩生体適合材料はカルシウム架橋され、それにもかかわらず、注入条件のもとでは依然として流動した。超音波心臓造影法研究を埋め込み前ならびに埋め込み後の1ヶ月および2ヶ月において行って、LVリモデリングおよび機能を評価した。心臓を組織学的評価のために埋め込み後2ヶ月において集めた。
カルシウム架橋されたアルギン酸塩生体適合材料により処置されるMIの動物モデル
合計で39匹のラットが本研究に含まれた。13匹のラットが、MIを誘導するための手術処置の後で死亡した。超音波心臓造影法研究および分析が24匹のラットに対して行われた。15匹のラットがアルギン酸塩生体適合材料の注入により処置され、対照群(n=9)は無血清培養培地の注入を受けた。2匹のラットが、正常な心筋におけるその安全性および影響を調べるために、正常な心臓へのアルギン酸塩の注入を受けた。
アルギン酸塩生体適合材料の注入は瘢痕厚さを著しく増大させた(表4、p<0.0001)。さらに、アルギン酸塩生体適合材料の注入は、広範囲の前壁MIを合併するLV拡張の典型的な経過を効率的に弱めた(図5、表4)。
正常な心筋へのアルギン酸塩生体適合材料の注入は、α−SMAに対する抗体による免疫染色によって示されるように、集中的な血管形成および筋芽細胞の遊走をもたらした(図8A)。アルギン酸塩の注入により処置された梗塞した心臓の切片の検査では、集中した血管新生、および、梗塞した心筋に存在する数多くの筋繊維芽細胞が示された(図8B、図8C、図8D)。注入可能なアルギン酸塩生体適合材料により処置された動物の抗Ki67抗体による免疫染色(図11)では、内皮内の陽性の染色および梗塞部位における心筋細胞が明らかにされた。このことはDNA活性および複製を示している。従って、アルギン酸塩が、心臓の再生に関連する細胞複製を誘導することは明らかである。
アルギン酸塩の注入による心筋梗塞のブタモデルの処置
合計で18匹のブタが本研究に含まれた。周術期死亡率は27%であった(18匹中5匹)。超音波心臓造影法研究および分析が、前壁MIを有する10匹のブタに対して行われた。5匹のブタがアルギン酸塩の注入により処置され、対照群(n=5)はPBSの注入を受けた。4匹のブタが後側部MI(MR研究)に付された。
LAD閉塞または回旋閉塞(MR研究)の8週間後、アルギン酸塩の注入を受けているブタでは、Ki67に対して反応性のモノクローナル抗体による免疫染色によって明らかにされるように、高頻度の内皮細胞(図11A)および心筋細胞(図11B)がDNA活性を伴って明らかにされた。対照的に、生理的食塩水を受けている動物では、繊維芽細胞の形態学およびKi67との反応性を有する高頻度の細胞が梗塞域内にのみ認められた。これらの結果は、アルギン酸塩生体適合材料は、成体の心臓ではこの活性を通常の場合には有しない心筋細胞などの細胞において細胞増殖を誘導する能力を有することを示唆している。そのような現象は通常、心臓再生に関連する。
超音波心臓造影法による機能的研究:逆転した心室リモデリングは虚血性僧帽弁学流(MR)を低下させる
虚血性MRは、遅発性死亡率を2倍にする冠状動脈疾患の一般的な合併症である[Lamas、G.A.他(1997)、Circulation、96:827〜833]。広範囲の証拠により、虚血性MRが、乳頭筋(PM)の位置をずらし、僧帽弁尖を先端で拘束し、これにより僧帽弁の閉鎖を制限する左心室のゆがみから生じることが示されている。しかしながら、虚血性MRのための治療は依然として問題である。僧帽弁輪の輪状形成術がバイパス手術時に適用されることが多いが、これは僧帽弁の輪状サイズを減少させ、しかし、拘束による虚血性LVゆがみのより広い問題には直接的には対処していない。従って、その利益は、特にLVリモデリングが手術後も進行し続けているときには、不完全である。不確かな利益、ならびに心房切開および心肺バイパスに対する必要性は手術による修復を躊躇させ得る。外部からのデバイスを使用してPMを正常な位置に戻すことにより、虚血性MRを軽減することができる。
架橋されたアルギン酸塩溶液における骨格性筋芽細胞懸濁物の、ラットの正常な心臓への注入
アルギン酸塩生体適合材料を、血管形成を促進させ、細胞移植物の保持および生存を改善するために心臓の筋肉に注入した。本実施例は、アルギン酸塩生体適合材料の注入が、同時注入された細胞(例えば、骨格性筋芽細胞など)の長期間の保持のために好都合であり得ることを示す。
架橋されたアルギン酸塩生体適合材料の注入は梗塞した心筋への幹細胞の呼び寄せを高める
無胸腺ヌードラットを心筋梗塞にさらし、その後、架橋されたアルギン酸塩生体適合材料を梗塞した組織に注入した。梗塞後1週目に、動物を、ヒト臍帯血由来のCD133+の始原体細胞(2〜4x106個の細胞)の静脈内注入により処置した。輸注後1週間で、心臓を集め、代表的な切片を固定処理または凍結切片化のいずれかに供した。受容心臓におけるヒトドナー細胞の存在を、HLA−DRについての免疫染色によって確認した。HLA免疫染色(図14、褐色の色)では、注入されたドナー細胞が、架橋されたアルギン酸塩を瘢痕組織において注入した部位に向かい、定着したことが明らかにされた。この実験は、架橋されたアルギン酸塩の損傷した組織への注入が幹細胞の呼び寄せを高めたことを明瞭に明らかにしている。このことは、注入部位におけるSDF−1の強い発現と一致している。
Claims (27)
- アルギン酸塩をカルシウム陽イオンとともにホモジナイズすることにより得られる均一な架橋されたポリマーの水溶液を含む治療用組成物であって、前記水溶液は、
(a)0.1〜10Hzの範囲内の振動周期が加えられたときの貯蔵弾性係数G’が、損失弾性係数G’’と同等以上の値を有し;
(b)前記ポリマーはカルシウムカチオンにより架橋され;そして
(c)前記水溶液は0.1〜4%(w/v)のアルギン酸塩を含む;
ことを特徴とする治療用組成物。 - 前記カルシウム陽イオンが、0.3%(w/v)のグルコン酸カルシウムで与えられることを特徴とする請求項1に記載の治療用組成物。
- 前記組成物がニードルを介して前記体組織中に投与可能であることを特徴とする請求項1に記載の治療用組成物。
- 前記ニードルが18〜27ゲージのニードルであることを特徴とする請求項3に記載の治療用組成物。
- 前記組成物がカテーテルを介して前記体組織に投与可能であることを特徴とする請求項1に記載の治療用組成物。
- 細胞をさらに含むことを特徴とする請求項1に記載の治療用組成物。
- 前記細胞は、筋芽細胞、心筋細胞、繊維芽細胞、内皮細胞、始原細胞、および幹細胞からなる群から選択されることを特徴とする請求項6に記載の治療用組成物。
- 少なくとも一種の治療薬剤をさらに含むことを特徴とする請求項1に記載の治療用組成物。
- 前記少なくとも一種の治療薬剤は、抗生物質、増殖因子、血管形成因子、サイトカイン、抗炎症性薬物、ホルモン、抗アポトーシス薬物、および幹細胞刺激因子からなる群から選択されることを特徴とする請求項8に記載の治療用組成物。
- 損傷した体組織を修復するためのキットであって、
(a)請求項1の治療用組成物;
(b)必要としている患者の心臓部位に前記治療用組成物を投与するためのシリンジ又はカテーテル;および
(c)前記治療用組成物をどのように使用するかについての指示マニュアル;
を含むキット。 - 前記損傷した体組織が心臓組織であることを特徴とする請求項10に記載のキット。
- 心筋の損傷、リモデリングおよび/または機能不全から生じる状態の処置のためのものであることを特徴とする請求項1に記載の治療用組成物。
- 前記状態は、左心室リモデリング、梗塞拡大、心不全および虚血性僧帽弁逆流からなる群から選択されることを特徴とする請求項12に記載の治療用組成物。
- 治療的血管形成の誘導のためのものであることを特徴とする請求項1に記載の治療用組成物。
- 損傷した組織の修復および再生を促進させるためのものであることを特徴とする請求項1に記載の治療用組成物。
- 前記損傷した組織が心臓組織であることを特徴とする請求項15に記載の治療用組成物。
- 心筋の収縮性を改善するためのものであることを特徴とする請求項1に記載の治療用組成物。
- 心臓細胞の増殖を誘導するためのものであることを特徴とする請求項1に記載の治療用組成物。
- 心筋梗塞を処置するためのものであることを特徴とする請求項1に記載の治療用組成物。
- 心筋梗塞後の瘢痕の厚さを増強するためのものであることを特徴とする請求項1に記載の治療用組成物。
- 心筋梗塞後の収縮期機能を改善するためのものであることを特徴とする請求項1に記載の治療用組成物。
- (a)アルギン酸塩を水または水性緩衝液に溶解し;
(b)工程(a)で得られたアルギン酸塩溶液を、均一な溶液が得られるまで激しく撹拌しながら、カルシウム陽イオン水溶液を加えることにより、カルシウム陽イオンを用いて架橋すること;
によって調製されることを特徴とする請求項1に記載の治療用組成物。 - 室温で少なくとも24時間貯蔵されることを特徴とする請求項1に記載の治療用組成物。
- 400cP以下の粘度を有することを特徴とする請求項1に記載の治療用組成物。
- カルシウム陽イオンの単一源からなり、前記組成物が室温で少なくとも24時間その溶液形態を維持することを特徴とする請求項1に記載の治療用組成物。
- 室温以下の温度で少なくとも24時間安定であることを特徴とする請求項1に記載の治療用組成物。
- カルシウム陽イオンによって架橋されたアルギン酸塩の水溶液を含む治療用組成物であって、前記アルギン酸塩は25〜250kDaの分子量及び水溶液中で1% (w/v)の濃度を有し、前記カルシウム陽イオンは、0.1〜10Hzの範囲内の振動周期が水溶液に加えられたときに、貯蔵弾性係数G’が損失弾性係数G’’と同等以上の値を示す量のグルコン酸カルシウムによって与えられることを特徴とする治療用組成物。
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WO2004002364A2 (en) * | 2002-06-27 | 2004-01-08 | Levine Robert A | Ventricular remodeling for artioventricular valve regurgitation |
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US8073538B2 (en) | 2003-11-13 | 2011-12-06 | Cardio Polymers, Inc. | Treatment of cardiac arrhythmia by modification of neuronal signaling through fat pads of the heart |
US20050119704A1 (en) * | 2003-11-13 | 2005-06-02 | Peters Nicholas S. | Control of cardiac arrhythmias by modification of neuronal conduction within fat pads of the heart |
US20090169520A1 (en) * | 2004-01-09 | 2009-07-02 | Yissum Research Development Company Of The Hebrew University Of Jerusalem | Compounds, Pharmaceutical Compositions and Therapeutic Methods of Preventing and Treating Diseases and Disorders Associated With Amyloid Fibril Formation |
US8187621B2 (en) | 2005-04-19 | 2012-05-29 | Advanced Cardiovascular Systems, Inc. | Methods and compositions for treating post-myocardial infarction damage |
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US20080125745A1 (en) | 2005-04-19 | 2008-05-29 | Shubhayu Basu | Methods and compositions for treating post-cardial infarction damage |
US8568761B2 (en) * | 2005-07-15 | 2013-10-29 | Cormatrix Cardiovascular, Inc. | Compositions for regenerating defective or absent myocardium |
US20070014869A1 (en) * | 2005-07-15 | 2007-01-18 | Cormatrix Cardiovascular, Inc. | Compositions for reconstruction, replacement or repair of intracardiac tissue |
US8083726B1 (en) * | 2005-09-30 | 2011-12-27 | Advanced Cardiovascular Systems, Inc. | Encapsulating cells and lumen |
PT2347775T (pt) | 2005-12-13 | 2020-07-14 | The President And Fellows Of Harvard College | Estruturas em andaime para transplante celular |
CA2652295A1 (en) * | 2006-05-15 | 2007-11-22 | Symphony Medical, Inc. | Post-operative control of cardiac arrhythmia by modification of neuronal signaling through fat pads of the heart |
WO2007146319A2 (en) * | 2006-06-13 | 2007-12-21 | Symphony Medical, Inc. | Methods and apparatus for using polymer-based beads and hydrogels for cardiac applications |
AU2007260653B2 (en) | 2006-06-15 | 2013-01-24 | Microvention, Inc. | Embolization device constructed from expansible polymer |
JP5248492B2 (ja) * | 2006-07-14 | 2013-07-31 | エフエムシー バイオポリマー エイエス | 低分子量アルギネートを含むヒドロゲルおよびそれから製造されたバイオ構造物 |
US7732190B2 (en) * | 2006-07-31 | 2010-06-08 | Advanced Cardiovascular Systems, Inc. | Modified two-component gelation systems, methods of use and methods of manufacture |
US9242005B1 (en) | 2006-08-21 | 2016-01-26 | Abbott Cardiovascular Systems Inc. | Pro-healing agent formulation compositions, methods and treatments |
AU2007293055B2 (en) * | 2006-09-08 | 2013-08-01 | Cardiopolymers, Inc. | Intramyocardial patterning for global cardiac resizing and reshaping |
US9005672B2 (en) | 2006-11-17 | 2015-04-14 | Abbott Cardiovascular Systems Inc. | Methods of modifying myocardial infarction expansion |
US8741326B2 (en) | 2006-11-17 | 2014-06-03 | Abbott Cardiovascular Systems Inc. | Modified two-component gelation systems, methods of use and methods of manufacture |
US8192760B2 (en) | 2006-12-04 | 2012-06-05 | Abbott Cardiovascular Systems Inc. | Methods and compositions for treating tissue using silk proteins |
US20100216739A1 (en) * | 2007-03-13 | 2010-08-26 | Biolinerx Ltd | Method of promoting muscle tissue repair |
EP2146667A2 (en) * | 2007-04-11 | 2010-01-27 | Henry Ford Health System | Cardiac repair, resizing and reshaping using the venous system of the heart |
EP2157937B1 (en) | 2007-06-04 | 2017-03-22 | Sequent Medical, Inc. | Devices for treatment of vascular defects |
WO2008154033A2 (en) * | 2007-06-11 | 2008-12-18 | Symphony Medical, Inc. | Cardiac patterning for improving diastolic function |
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IL187707A0 (en) | 2007-11-27 | 2008-11-03 | Univ Ben Gurion | Alginate scaffold in hepatectomy |
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US8801665B2 (en) * | 2008-04-10 | 2014-08-12 | Henry Ford Health System | Apparatus and method for controlled depth of injection into myocardial tissue |
US20090259210A1 (en) * | 2008-04-10 | 2009-10-15 | Sabbah Hani N | Method, apparatus and kits for forming structural members within the cardiac venous system |
WO2009135166A2 (en) * | 2008-05-02 | 2009-11-05 | Sequent Medical Inc. | Filamentary devices for treatment of vascular defects |
WO2009146456A1 (en) | 2008-05-30 | 2009-12-03 | President And Fellows Of Harvard College | Controlled release of growth factors and signaling molecules for promoting angiogenesis |
AU2010216095B2 (en) * | 2009-02-18 | 2015-10-08 | Cormatrix Cardiovascular, Inc. | Compositions and methods for preventing cardiac arrhythmia |
US9297005B2 (en) | 2009-04-13 | 2016-03-29 | President And Fellows Of Harvard College | Harnessing cell dynamics to engineer materials |
US10639396B2 (en) | 2015-06-11 | 2020-05-05 | Microvention, Inc. | Polymers |
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JP6385937B2 (ja) | 2012-10-15 | 2018-09-05 | マイクロベンション インコーポレイテッドMicrovention, Inc. | ポリマーの治療用組成物 |
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WO2014102802A1 (en) | 2012-12-30 | 2014-07-03 | Hadasit Medical Research Services And Development Ltd. | Alginate compositions and uses thereof |
GB201304514D0 (en) * | 2013-03-13 | 2013-04-24 | Univ Birmingham | Cell delivery |
US10258698B2 (en) | 2013-03-14 | 2019-04-16 | Modernatx, Inc. | Formulation and delivery of modified nucleoside, nucleotide, and nucleic acid compositions |
US8980864B2 (en) | 2013-03-15 | 2015-03-17 | Moderna Therapeutics, Inc. | Compositions and methods of altering cholesterol levels |
WO2014192807A1 (ja) * | 2013-05-29 | 2014-12-04 | 株式会社大塚製薬工場 | 癒着防止材 |
KR102181336B1 (ko) | 2013-06-13 | 2020-11-24 | 오르제네시스 엘티디. | 세포 집단, 이의 전환분화 방법 및 이용 방법 |
US9955976B2 (en) | 2013-08-16 | 2018-05-01 | Sequent Medical, Inc. | Filamentary devices for treatment of vascular defects |
US9078658B2 (en) | 2013-08-16 | 2015-07-14 | Sequent Medical, Inc. | Filamentary devices for treatment of vascular defects |
WO2015034925A1 (en) | 2013-09-03 | 2015-03-12 | Moderna Therapeutics, Inc. | Circular polynucleotides |
US20160194625A1 (en) | 2013-09-03 | 2016-07-07 | Moderna Therapeutics, Inc. | Chimeric polynucleotides |
CN103480037B (zh) * | 2013-09-06 | 2015-12-02 | 奚廷斐 | 用于心衰辅助治疗的可注射型海藻酸基生物材料及其制备方法 |
CA2926218A1 (en) | 2013-10-03 | 2015-04-09 | Moderna Therapeutics, Inc. | Polynucleotides encoding low density lipoprotein receptor |
WO2015153996A1 (en) | 2014-04-03 | 2015-10-08 | Micro Vention, Inc. | Embolic devices |
WO2015160793A1 (en) | 2014-04-14 | 2015-10-22 | University Of Pittsburgh - Of The Commonwealth System Of Higher Education | Biodegradable, thermally responsive injectable hydrogel for treatment of ischemic cardiomyopathy |
US9629635B2 (en) | 2014-04-14 | 2017-04-25 | Sequent Medical, Inc. | Devices for therapeutic vascular procedures |
US10092663B2 (en) | 2014-04-29 | 2018-10-09 | Terumo Corporation | Polymers |
US10226533B2 (en) | 2014-04-29 | 2019-03-12 | Microvention, Inc. | Polymer filaments including pharmaceutical agents and delivering same |
US10682400B2 (en) | 2014-04-30 | 2020-06-16 | President And Fellows Of Harvard College | Combination vaccine devices and methods of killing cancer cells |
CA2955250A1 (en) | 2014-07-16 | 2016-01-21 | Moderna Therapeutics, Inc. | Chimeric polynucleotides |
EP3171895A1 (en) | 2014-07-23 | 2017-05-31 | Modernatx, Inc. | Modified polynucleotides for the production of intrabodies |
MA41296A (fr) | 2014-12-30 | 2017-11-07 | Orgenesis Ltd | Procédés de transdifférenciation et procédés d'utilisation de ceux-ci |
WO2016123573A1 (en) | 2015-01-30 | 2016-08-04 | President And Fellows Of Harvard College | Peritumoral and intratumoral materials for cancer therapy |
US20180085496A1 (en) | 2015-04-01 | 2018-03-29 | Yale University | Ferromagnetic particles bound to polymeric implants |
JP7064880B2 (ja) | 2015-04-01 | 2022-05-11 | イェール ユニバーシティー | 医療用インプラント上の生物製剤の付着のための鉄白金粒子 |
US11150242B2 (en) | 2015-04-10 | 2021-10-19 | President And Fellows Of Harvard College | Immune cell trapping devices and methods for making and using the same |
WO2017035542A1 (en) * | 2015-08-24 | 2017-03-02 | Geraghty, Erin | Pharmaceutical compositions and methods for the treatment of hypoxia-related diseases |
US9655842B1 (en) * | 2015-12-04 | 2017-05-23 | Covidien Lp | Injectable non-aqueous compositions and methods of treating vascular disease |
CN115531609A (zh) | 2016-02-06 | 2022-12-30 | 哈佛学院校长同事会 | 重塑造血巢以重建免疫 |
CN115305229A (zh) | 2016-07-13 | 2022-11-08 | 哈佛学院院长等 | 抗原呈递细胞模拟支架及其制备和使用方法 |
US10368874B2 (en) | 2016-08-26 | 2019-08-06 | Microvention, Inc. | Embolic compositions |
FR3055805B1 (fr) * | 2016-09-09 | 2020-05-15 | Assistance Publique - Hopitaux De Paris (Ap-Hp) | Biomateriau a usage therapeutique |
WO2018067948A1 (en) | 2016-10-07 | 2018-04-12 | University Of Pittsburgh - Of The Commonwealth System Of Higher Education | Biodegradable, antioxidant, thermally responsive injectable hydrogel and uses therefor |
US10505870B2 (en) | 2016-11-07 | 2019-12-10 | At&T Intellectual Property I, L.P. | Method and apparatus for a responsive software defined network |
US11389569B2 (en) | 2017-04-03 | 2022-07-19 | University of Pittsburgh—of the Commonwealth System of Higher Education | Biodegradable, porous, thermally responsive injectable hydrogel as soft tissue defect filler |
US10673751B2 (en) | 2017-04-27 | 2020-06-02 | At&T Intellectual Property I, L.P. | Method and apparatus for enhancing services in a software defined network |
US10749796B2 (en) | 2017-04-27 | 2020-08-18 | At&T Intellectual Property I, L.P. | Method and apparatus for selecting processing paths in a software defined network |
US10819606B2 (en) | 2017-04-27 | 2020-10-27 | At&T Intellectual Property I, L.P. | Method and apparatus for selecting processing paths in a converged network |
SG11201911256UA (en) | 2017-05-08 | 2020-01-30 | Orgenesis Ltd | Transdifferentiated cell populations and methods of use thereof |
US10257668B2 (en) | 2017-05-09 | 2019-04-09 | At&T Intellectual Property I, L.P. | Dynamic network slice-switching and handover system and method |
US10382903B2 (en) | 2017-05-09 | 2019-08-13 | At&T Intellectual Property I, L.P. | Multi-slicing orchestration system and method for service and/or content delivery |
KR102056007B1 (ko) * | 2017-06-19 | 2019-12-13 | 순천향대학교 산학협력단 | 근원세포 분화 억제 조성물, 이를 이용한 근육 소모성 질환의 치료제 스크리닝 시스템 및 스크리닝 방법 |
US10070344B1 (en) | 2017-07-25 | 2018-09-04 | At&T Intellectual Property I, L.P. | Method and system for managing utilization of slices in a virtual network function environment |
CN111200976B (zh) | 2017-10-09 | 2023-07-07 | 微仙美国有限公司 | 放射性液体栓塞 |
KR102071111B1 (ko) * | 2017-10-11 | 2020-01-29 | 아주대학교산학협력단 | 성장인자 모사 펩타이드가 도입된 생체물질, 이의 제조방법 및 이의 응용 |
US10104548B1 (en) | 2017-12-18 | 2018-10-16 | At&T Intellectual Property I, L.P. | Method and apparatus for dynamic instantiation of virtual service slices for autonomous machines |
US11504335B2 (en) | 2018-06-18 | 2022-11-22 | University Of Kentucky Research Foundation | Increased cell retention in diseased site when cells encapsulated in gelatin methacrylate and polyethylene glycol diacrylate hydrogels |
CN108853147B (zh) * | 2018-07-24 | 2021-12-24 | 苏州大学 | 一种缓释外泌体的多肽纳米纤维水凝胶及其制备方法与应用 |
US11559309B2 (en) | 2019-03-15 | 2023-01-24 | Sequent Medical, Inc. | Filamentary devices for treatment of vascular defects |
US11317921B2 (en) | 2019-03-15 | 2022-05-03 | Sequent Medical, Inc. | Filamentary devices for treatment of vascular defects |
WO2020190630A1 (en) | 2019-03-15 | 2020-09-24 | Sequent Medical, Inc. | Filamentary devices having a flexible joint for treatment of vascular defects |
KR102253619B1 (ko) | 2019-12-05 | 2021-05-20 | 한국철도기술연구원 | 아진공 튜브 내부 캡슐차량과 가이드와이어 사이의 마찰력 계측 실험장치 |
KR102299142B1 (ko) | 2019-12-31 | 2021-09-09 | 한국철도기술연구원 | 아진공 튜브 내부 캡슐차량 발사 진동 감쇄 시스템 |
WO2021181437A1 (en) * | 2020-03-10 | 2021-09-16 | University Of Petra | A method of preparing alginate micro-particulates |
GB202008857D0 (en) * | 2020-06-11 | 2020-07-29 | Univ Birmingham | Fluid gel compositions |
KR102545746B1 (ko) * | 2020-12-03 | 2023-06-20 | 가톨릭대학교 산학협력단 | 유도만능줄기세포 유래 혈관세포 및 SDF1a를 발현하는 중간엽 줄기세포를 포함하는 심장 재생용 조성물 |
US20220305171A1 (en) * | 2021-03-24 | 2022-09-29 | Aleo Bme, Inc. | Compositions comprising fluid gels for tissue separation |
CN114917407B (zh) * | 2022-05-07 | 2023-10-20 | 四川大学 | 具有心肌组织修复功能的抗心衰可注射水凝胶及其制备方法和应用 |
CN115475282A (zh) * | 2022-10-17 | 2022-12-16 | 中国人民解放军空军军医大学 | 一种海藻酸盐-胶原可注射复合水凝胶及其制备方法 |
Family Cites Families (35)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US4717713A (en) | 1983-10-31 | 1988-01-05 | Research Corporation | Controlled release liquid pharmaceutical |
US4604394A (en) * | 1984-10-01 | 1986-08-05 | Merck & Co., Inc. | Antiarrhythmic compositions and method |
US5318780A (en) * | 1991-10-30 | 1994-06-07 | Mediventures Inc. | Medical uses of in situ formed gels |
JP3841427B2 (ja) * | 1993-04-30 | 2006-11-01 | マサチューセッツ・インスティテュート・オブ・テクノロジー | 注入可能な多糖類−細胞組成物 |
US5709854A (en) | 1993-04-30 | 1998-01-20 | Massachusetts Institute Of Technology | Tissue formation by injecting a cell-polymeric solution that gels in vivo |
DK94693D0 (da) | 1993-08-19 | 1993-08-19 | Coloplast As | Ikke-fibroest poroest materiale, saarbandage omfattende en saadan bandage samt fremgangsmaade til fremstilling af materialet |
IL114193A (en) | 1994-06-20 | 2000-02-29 | Teva Pharma | Ophthalmic pharmaceutical compositions based on sodium alginate |
US6099876A (en) | 1994-10-11 | 2000-08-08 | Yissum Research Development Co. Of The Hebrew University Of Jerusalem | Temperature-stable liquid cells |
US5614204A (en) | 1995-01-23 | 1997-03-25 | The Regents Of The University Of California | Angiographic vascular occlusion agents and a method for hemostatic occlusion |
US6129761A (en) * | 1995-06-07 | 2000-10-10 | Reprogenesis, Inc. | Injectable hydrogel compositions |
US5924073A (en) | 1995-11-14 | 1999-07-13 | Beacon Patient Physician Association, Llc | System and method for assessing physician performance using robust multivariate techniques of statistical analysis |
CA2192773C (en) | 1995-12-15 | 2008-09-23 | Hiroaki Okada | Production of sustained-release preparation for injection |
GB9606040D0 (en) | 1996-03-22 | 1996-05-22 | Isis Innovation | Active peptide |
IL118376A0 (en) | 1996-05-22 | 1996-09-12 | Univ Ben Gurion | Polysaccharide sponges for cell culture and transplantation |
NO305441B1 (no) * | 1996-07-12 | 1999-05-31 | Norsk Hydro As | Anvendelse av G-blokk polysakkarider |
ES2317657T3 (es) | 1996-09-19 | 2009-04-16 | The Regents Of The University Of Michigan | Polimeros que contienen polisacaridos tales como alginatos o alginatos modificados. |
US5924973A (en) * | 1996-09-26 | 1999-07-20 | The Trustees Of Columbia University In The City Of New York | Method of treating a disease process in a luminal structure |
US5878147A (en) | 1996-12-31 | 1999-03-02 | Etymotic Research, Inc. | Directional microphone assembly |
CA2212300A1 (en) | 1997-08-04 | 1999-02-04 | Abdellatif Chenite | In vitro or in vivo gelfying chitosan and therapeutic uses thereof |
CA2304093A1 (en) * | 1997-09-19 | 1999-04-01 | Reprogenesis, Inc. | Improved hydrogel for tissue engineering |
WO2003064637A1 (en) | 2001-11-06 | 2003-08-07 | Medtronic, Inc. | Method and system for myocardial infarction repair |
CA2310435C (en) * | 1997-11-18 | 2008-12-30 | Mokesys Ag | Refractory tube wall lining |
US6171610B1 (en) * | 1998-04-24 | 2001-01-09 | University Of Massachusetts | Guided development and support of hydrogel-cell compositions |
US6360749B1 (en) | 1998-10-09 | 2002-03-26 | Swaminathan Jayaraman | Modification of properties and geometry of heart tissue to influence heart function |
DE19904785A1 (de) * | 1999-02-05 | 2000-08-10 | Ulrich Zimmermann | Verfahren zur Herstellung von stabilem Alginatmaterial |
US6592566B2 (en) * | 2000-02-03 | 2003-07-15 | Arizona Board Of Regents | Method for forming an endovascular occlusion |
US7214371B1 (en) | 2000-09-01 | 2007-05-08 | Ben-Gurion University Of The Negev Research & Development Authority | Tissue engineered biografts for repair of damaged myocardium |
ES2233570T3 (es) | 2000-11-30 | 2005-06-16 | Pfizer Products Inc. | Composicion que contiene agonistas/antagosnistas de estrogenos y testosterona para tratar un descenso en el nivel de la hormona testosterona. |
EP1458860A2 (en) | 2001-12-21 | 2004-09-22 | Nexia Biotechnologies, Inc. | Production of butyrylcholinesterases in transgenic mammals |
US6811777B2 (en) | 2002-04-13 | 2004-11-02 | Allan Mishra | Compositions and minimally invasive methods for treating incomplete connective tissue repair |
US20040106896A1 (en) | 2002-11-29 | 2004-06-03 | The Regents Of The University Of California | System and method for forming a non-ablative cardiac conduction block |
US7641643B2 (en) | 2003-04-15 | 2010-01-05 | Abbott Cardiovascular Systems Inc. | Methods and compositions to treat myocardial conditions |
WO2004098756A2 (en) | 2003-04-30 | 2004-11-18 | Drexel University | Thermogelling polymer blends for biomaterial applications |
JP2006525405A (ja) | 2003-05-05 | 2006-11-09 | ベン‐グリオン ユニバーシティ オブ ザ ネゲヴ リサーチ アンド デベロップメント オーソリティ | 注入可能な架橋されたポリマー調製物およびその使用 |
US20090169520A1 (en) | 2004-01-09 | 2009-07-02 | Yissum Research Development Company Of The Hebrew University Of Jerusalem | Compounds, Pharmaceutical Compositions and Therapeutic Methods of Preventing and Treating Diseases and Disorders Associated With Amyloid Fibril Formation |
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