JP5483661B2 - 藻類ネオクロリス・オレオアブンダンスのバイオマスの抽出物を含有する化粧料としての痩身組成物 - Google Patents
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Description
綱:Chlorophyceae
目:Chlorococcales
科:Chlorococcaceae
属:Neochloris
種:oleoabundans
使用した株は、UTEX algotheque(オースチンのテキサス大学(University of Texas)の藻類コレクション)に由来するものであり、参照番号はUTEX1185である。この株は、サウジアラビアで単離された。
FeCl3・6H2O: 1.58×10−3 g/l
NaHCO3: 0.6×10−3 g/l
MnCl2・4H2O: 0.36×10−3 g/l
CuSO4・5H2O: 1×10−5 g/l
ZnSO4・7H2O: 2.2×10−5 g/l
CoCl2・6H2O: 1×10−5 g/l
MgSO4: 4.95×10−2 g/l
NaNO3: 0.17 g/l
H3BO3: 2.47×10−3 g/l
NaHCO3: 4.23×10−3 g/l
K2HPO4: 3.475×10−2 g/l
CaCl2: 2.94×10−2 g/l
ビタミン B1: 1×10−4 g/l
ビタミン B12: 5×10−7 g/l
ビタミン H: 5×10−7 g/l
1.メタノールを用いた第一次抽出からの抽出物の調製
a. 500mlの丸底フラスコにおいて、26%の乾燥抽出物を含む藻類バイオマス100gに250mlのメタノールを添加した。混合物を、65°Cで窒素下に30分間加熱した。全体を400rpmで10分間遠心分離した。液相を固体残渣から分離して廃棄した。濾過残渣は次いで、250mlの丸底フラスコに写し、同じ条件下に250mlのメタノールで再抽出した。この操作を、もう一度繰り返した。3つの液相を集め、次いでロータリーエバポレータにて蒸発乾固させた。得られた固体を100mlの水に再溶解させ、次いで凍結して凍結乾燥させた。この抽出物は最終的に粉末形態となり、以下、抽出物Aと称した。
a. 水性エタノール抽出物Bの調製
500mlの丸底フラスコ中、250mlのエタノール/水混合物(94/4体積/体積、以下v/v)を、14.6%の乾燥抽出物を含有する100gの藻類バイオマスに添加した。混合物を30分間、還流した。冷却後、抽出物を4000rpmで20分間遠心分離し、遠心残渣を次いで250mlのアルコール水溶液溶液で合計3回、再抽出した。
2gの前記抽出物Bを約80mlのエタノール/水混合物(20/40、v/v)で希釈して、2.5%溶液を得る。53mlの酢酸エチルを添加して二相系を形成させた。第一有機相を回収するために、2相を分離させた。水相を53mlの酢酸エチルで再洗浄して、これを合計4回繰り返した。4つの有機相を集め、次いでロータリーエバポレータにて蒸発させて抽出物を得、これを以下、抽出物B1と称した。
III 1.評価の原理
本発明に係るネオクロリス・オレオアブンダンスの抽出物の脂肪分解活性を、生存状態を維持している脂肪組織の外植片について評価することを目的とした。
−外植片:
脂肪組織の9つの外植片を調製し、それらをBEM(BIO−EC´の外植片培地)において生存状態で維持した。
その外植片を3つの外植片の3バッチに分割
−培養液の存在下の対照バッチ
−陽性対照として、カフェインで処理したバッチ
−本発明に係る抽出物で処理したバッチ
−陽性対照:カフェインは、生存培地中、0.1%(1mg/ml)の最終濃度、すなわち、本発明に係る抽出物の濃度の10倍で用いるが、カフェインは0.01%(100μg/ml)の濃度では脂肪分解効果を示さない。
−本発明に係るNeochlorisの抽出物:抽出物は、乾燥粉末の形態にあり、これを50%の濃度でDMSOに可溶化し、その後0.01%(100μg/ml)の最終濃度での試験用に外植片培養液で1/500に希釈した。
第0日に、試験抽出物が入っている2mlの培養液の中で外植片を生存状態に維持した。
この処理を第2日、第4日及び第6日に繰り返す。
第2日、第4日、第6日、及び第8日に、培養液をサンプリングした。各外植片につき、第2日、第4日、第6日、及び第8日にサンプリングした培地を同じチューブに合わせて、培地中に存在する脂肪酸のアッセイ用に−20℃で貯蔵した。
培養液の抽出後に、その中に存在する遊離脂肪酸を分取して、高性能薄層クロマトグラフィーによって評価した。
脱イオン水 73.5%
96.2体積%アルコール 21%
AMPSポリマー(Sepigel 305) 3%
保存料 0.3%
濃縮香料 0.1%
ネオクロリス・オレオアブンダンス抽出物(3%抽出物B1溶液(水/ブチレングリコール:50/50) 2%
ヒアルロン酸ナトリウム(高分子量) 0.1%
ステアリン酸グリセリル+PEG100ステアリン酸誘導体 6.0%
水素化ポリイソブテン 3.0%
スクアレン 3.0%
カプリル酸/カプリン酸グリセリル トリグリセリド類 3.0%
グリセロール 2.0%
メトキシケイ皮酸オクチル 2.0%
オクタン酸セチルステアリル 1.5%
蜜蝋 1.5%
セチルアルコール 1.0%
ステアリルアルコール 1.0%
ジメチコーン(Dimethicone) 1.0%
キサンタンゴム 0.2%
ネオクロリス・オレオアブンダンス抽出物(3%抽出物B2溶液(水/ブチレングリコール:50/50) 2%
保存料、香料、着色料 0.2%
水 十分量
パルミチン酸オクチル 7.0%
カプリル酸/カプリン酸グリセリル トリグリセリド類 3.0%
オクタン酸オクチル 2.0%
フェニルトリメチコン(Phenyl trimethicone) 2.0%
グリセロール 2.0%
ステアリン酸 1.0%
ソルビタン 1.0%
セチルアルコール 0.5%
ステアリルアルコール 0.5%
ネオクロリス・オレオアブンダンス抽出物C 1%
保存料、香料、着色料、中和剤 0.1%
水 十分量
ブチレングリコール 3%
EDTA 0.1%
可溶化剤 1%
濃縮香料 0.1%
アルコール 5.2%
ネオクロリス・オレオアブンダンス抽出物A 0.5%
ベンゾフェノン−4 0.13%
保存料、香料、着色料、中和剤 0.1%
水 十分量
Claims (22)
- 藻類ネオクロリス・オレオアブンダンスのバイオマスの抽出物を活性作用物質として含有し、前記活性作用物質が局所適用に適合する、化粧品に許容される賦形剤と混合しており、前記抽出物は、アルコール又はアルコール水溶液からなる第一溶媒で前記バイオマスを抽出して第一抽出物を得る工程を少なくとも実施することによって得られるものである、化粧品組成物。
- 前記バイオマスを、10g/lから30g/lの塩化ナトリウム含量を有する海水又は汽水に基づく、任意に栄養素も含有する培養液で、藻類ネオクロリス・オレオアブンダンスを培養することにより得る、請求項1記載の組成物。
- 前記培養液中の塩化ナトリウム含有量が16g/lから20g/lである、請求項2記載の組成物。
- 前記培養液中の塩化ナトリウム含有量が18g/lである、請求項3記載の組成物。
- 前記培養液が汽水を含む、請求項2から4のいずれか1項に記載の組成物。
- 前記第一溶媒のアルコールが、C1〜C5モノアルコール類、C2〜C6グリコール類、及びその混合物からなる群より選択されるアルコールである、請求項1から5のいずれか1項に記載の組成物。
- 前記アルコールが、メタノール、エタノール又はブチレングリコールである、請求項6に記載の組成物。
- 前記第一溶媒が、体積比で100%〜40%のエタノール及び0%〜60%の水である、請求項1から7のいずれか1項に記載の組成物。
- 前記バイオマスの抽出物は、液体−液体抽出による、第一抽出物の、水性又はアルコール水溶液からなる第二溶媒と、第二溶媒と非混和性であって極性係数P’によって定義する極性が0から4.7である第三溶媒との分離工程をさらに実施することによって得られるものであり、前記分離工程により第二抽出物と呼称される第一抽出物の第一画分を含むアルコール水溶液相、及び第三抽出物と呼称される第一抽出物の第二画分を含む第三溶媒からなる相が生成する、請求項1から8のいずれか1項に記載の組成物。
- 前記第二溶媒はアルコール水溶液溶媒であって、この第二溶媒のアルコールが、C1〜C5モノアルコール類、C2〜C6グリコール類及びそれらの混合物からなる群より選択される、請求項9に記載の組成物。
- 前記第二溶媒のアルコールがメタノール、エタノール又はブチレングリコールである、請求項10に記載の組成物。
- 前記第二溶媒のアルコールがエタノールであって、体積比で少なくとも20%の比率にて存在する、請求項10又は11に記載の組成物。
- 第三溶媒がクロロホルム、酢酸エチル、ジエチルエーテル及びその混合物からなる群より選択される、請求項9から12のいずれか1項に記載の組成物。
- 前記抽出物が請求項1から8のいずれか1項で定義した第一抽出物である、請求項1から8のいずれか1項に記載の組成物。
- 前記抽出物が請求項9から13のいずれか1項で定義した第二抽出物である、請求項1から8のいずれか1項に記載の組成物。
- 前記抽出物が請求項9から13のいずれか1項で定義した第三抽出物である、請求項1から8のいずれか1項に記載の組成物。
- 請求項1から13で定義した、第一抽出物、及び/又は第二抽出物、及び/又は第三抽出物の少なくとも一つを含む、請求項1から8のいずれか1項に記載の組成物。
- ネオクロリス・オレオアブンダンスのバイオマスの抽出物を、組成物の総重量に基づき、固体状態で、0.0003から2重量%含む、請求項1から17のいずれか1項に記載の組成物。
- ネオクロリス・オレオアブンダンスのバイオマスの抽出物を、組成物の総重量に基づき、固体状態で、0.003から0.3重量%含む、請求項18に記載の組成物。
- 局所適用に適した、ゲル、クリーム、エマルション又はローションとして製剤化されている、請求項1から19のいずれか1項に記載の組成物。
- 藻類ネオクロリス・オレオアブンダンスのバイオマスの抽出物を有効成分として含有し、前記抽出物は、アルコール又はアルコール水溶液からなる第一溶媒で前記バイオマスを抽出して第一抽出物を得る工程を少なくとも実施することによって得られるものである、痩身用化粧料。
- 前記バイオマスの抽出物は請求項2から17のいずれか1項で定義した抽出物である、請求項21に記載の化粧料。
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