JP5400785B2

JP5400785B2 - リバースターン類似体の新規化合物およびその用途（１）

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Publication number: JP5400785B2
Application number: JP2010529859A
Authority: JP
Inventors: ジェウクチョン; ヘギョンジョン; ギョンユンジュン; ミンウクジョン; ヒュンジュラ; サンハクリ; ヘムンキム
Original assignee: チュンウェファーマコーポレーション
Priority date: 2007-10-15
Filing date: 2008-10-15
Publication date: 2014-01-29
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Description

本発明は、概して、リバースターン類似体の新規化合物および医学的病態、例えば癌疾患の治療におけるそれらの適用、およびその類似体を含む薬学組成物に関する。

治療剤として可能性のある活性に対する分子のランダムスクリーニングは、多年間にわたって行われてきており、多くの重要な薬物の発見をもたらしてきている。分子生物学およびコンピュータ化学の発展は、「合理的薬物設計」といわれるものに対する興味を増加させてきたが、それらの技術は、初期予測ほどの速さおよび信頼性を示すものとは証明されていない。よって、近年、ランダム薬物スクリーニングに対する新しい関心と回帰があった。このために、組み合わせ化学ライブラリー(combinatorial chemistry libraries)の開発、および生物学的に活性なメンバーに対するサーチにおけるそれらのライブラリーのスクリーニングに基づいた新規技術に顕著な進展がみられている。

初めは、組み合わせ化学ライブラリーは、一般に、ペプチドまたはヌクレオチド由来のメンバーに限定されていた。

ペプチドおよびヌクレオチド由来のメンバーを含有する組み合わせライブラリーは非常に価値がある一方、別の由来のメンバーを含有するライブラリーが依然として必要とされている。例えば、従来のペプチドライブラリーは、多くの場合、アミノ酸シーケンスのみが異なるライブラリーメンバーを含む。ペプチドの２次構造が生物学的活性に重要であることはよく認識されているが、そのようなペプチドライブラリーでは、そのライブラリーメンバーに２次構造の制限性が付与されていない。

そのために、一部の研究者は、より制限された２次構造を提供するための試みとして、ペプチドをジスルフィド架橋によって環化している(非特許文献１)。ところが、一般に、このような環化ペプチドは、未だ相当可変的で、バイオアベイラビリティが低い。よって、制限された成功に過ぎない。

より最近、生物学的に活性なタンパク質またはペプチドにおいて発見されたリバースターンの２次構造をさらに近く模倣した非ペプチド化合物が開発されている。例えば、特許文献１〜４は、それぞれコンフォメーションが制限された非ペプチド化合物を開示しており、それらはリバースターンの３次構造を模倣している。また、特許文献５及び６はいずれも、生物学的に活性なペプチドおよびタンパク質のリバースターン領域の２次構造を模倣した、コンフォメーションが制限された化合物を開示している。コンフォメーションが制限された、リバースターン類似体の合成および同定と疾患に対するそれらの適用は、Ｏｂｒｅｃｈｔ(非特許文献２)によってよく検討された。

コンフォメーションが制限された、リバースターン類似体の合成および同定において重要な発展があったが、ペプチドの２次構造を模倣した小さい分子に対する分野における必要性は未だ残っている。また、このようなメンバーを含有するライブラリーに対する分野だけでなく、生物活性なライブラリーメンバーを同定するために、関心のある標的、特に生物学的な標的に対するライブラリーメンバーを合成しスクリーニングするための技術においても必要性がある。

一方、プロトオンコジーン(proto-oncogene)は、突然変異または発現増加が原因で癌遺伝子(oncogene)となる可能性のある正常遺伝子である。ｃ−Ｍｙｃ（ＭＹＣ）は、プロトオンコジーンの一つとして知られており、ｃ−Ｍｙｃの調節異常は、哺乳類の腫瘍形成(tumorigenesis)のために要求される腫瘍発生性イベントのシリーズの一つとして考えられている(非特許文献３)。また、多様なメカニズムによるＭＹＣ調節異常は骨髄性白血病(myeloid leukaemias)に連関するものと解明された(非特許文献４)。また、ｃ−Ｍｙｃは、急性骨髄性白血病を速やかに誘発するものと解明された(非特許文献５)。

ｃ−Ｍｙｃは急性骨髄性白血病においてアップレギュレートされるため、前記ｃ−Ｍｙｃの腫瘍誘発性機能が研究されており、骨髄性白血病の誘発におけるその正確な役割が研究されている。最近、一部の科学者は、Ｍｙｃがメチルセルロースにおいて優先的に骨髄系前駆細胞の成長を刺激し、Ｍｙｃが骨髄性白血病誘発(ibid.)の重要な下流エフェクター(downstream effector)であることを発見した。

ｃ−Ｍｙｃが骨髄性白血病の誘発において重要な役割をするという発見は、ｃ−Ｍｙｃタンパク質の活性を抑えることにより急性骨髄性白血病が治療または予防できることを示唆する。

一方、シトクロムＰ４５０（ＣＹＰ）スーパーファミリーの酵素は、半減期の主要決定要因であり、多くの治療剤の薬理学的効果を実行する。前記ヒトのシトクロムＰ４５０（ＣＹＰ）３ＡサブファミリーはＣＹＰ３Ａ４を含み、それはヒトの肝臓で最も富み（〜４０％）、臨床的に使用される薬物の５０％超過を代謝する(Shimada et al 1994; Rendic and Di Carlo 1997)。

ＣＹＰ３Ａ４は薬物の代謝において重要な役割をするため、この酵素の深刻な不活性化は激しい薬物動態学的薬物間相互作用を引き起こすおそれがある。ＣＹＰ３Ａ４の抑制は、複合投与された薬物に対する暴露増大による深刻な薬物毒性を引き起こすおそれもある(Dresser et al 2000)。例えば、エリスロマイシン(erythromycin)またはクラリスロマイシン(clarithromycin)などの不可逆的なＣＹＰ３Ａ４抑制因子がテルフェナジン(terfenadine)、アステミゾール(astemizole)またはピモジド(pimozide)と複合投与されるとき、患者はＱＴ延長を伴った生命に関わる心室性不整脈(torsades de pointes)を経験することもある(Spinler et al 1995; Dresser et al 2000)。癌患者はときによっては複合治療療法を受けるが、それは薬物副作用に伴う薬物間相互作用の危険を増加させる。したがって、治療剤の開発において、特に、それが他の薬物と組み合わせて投与される場合、さらに低いＣＹＰ３Ａ４抑制活性を有する化合物を提供する必要性がある。

米国特許第５，４４０，０１３号明細書（Ｋａｈｎ）国際公開第９４／０３４９４号（Ｋａｈｎ）国際公開第０１／００２１０Ａ１号（Ｋａｈｎ）国際公開第０１／１６１３５Ａ２号（Ｋａｈｎ）米国特許第５，９２９，２３７号明細書（Ｋａｈｎ）米国特許第６，０１３，４５８号明細書（Ｋａｈｎ）

Tumelty et al., J. Chem. Soc. 1067-68, 1994; Eichler et al., Peptide Res. 7:300-306, 1994 Advances in Med. Chem., 4, 1-68, 1999 Pelengaris S, Khan M. The many faces of c-MYC. Arch Biochem Biophys. 2003; 416:129-136 Hoffman B, Amanullah A, Shafarenko M, Liebermann DA. The proto-oncogene c-Myc in hematopoietic development and leukemogenesis. Oncogene. 2002; 21: 3414-3421 Hui Luo et al. "c-Mycrapidly induces acute myeloid leukemia in mice without evidence of lymphoma-associated antiapoptotic mutations," Blood, 1 October 2005, volume 106, Number 7, pp 2452-2461

本発明の目的は、生物学的に活性なペプチドおよびタンパク質のリバースターン領域の２次構造を模倣した、抗癌効果などの生物学的活性を有する新規化合物を提供することにある。

本発明の他の目的は、Ｗｎｔシグナルを抑制する新規化合物を提供することにある。

本発明の別の目的は、薬、特にさらに低いＣＹＰ３Ａ４抑制活性（さらに高いＩＣ５０）を有する薬として使用できる新規化合物を提供することにある。

本発明のさらに別の目的は、ｃ−Ｍｙｃ発現のダウンレギュレーションによる急性骨髄性白血病の治療または予防のための新規化合物を提供することにある。

本発明は、生物学的に活性なペプチドおよびタンパク質のリバースターン領域の２次構造を模倣した、新規タイプのコンフォメーションが制限された化合物、およびそのプロドラッグを含む誘導体に関する。また、本発明は、そのような化合物を含有するライブラリーだけでなく、それらの合成およびスクリーニングも開示する。

本発明の化合物は、下記の一般式（Ｉ）を有する。

ここで、Ｅは−ＺＲ_３−または−（Ｃ＝Ｏ）−であり、ＺはＣＨまたはＮであり；Ｗは−（Ｃ＝Ｏ）−、−（Ｃ＝Ｏ）ＮＨ−、−（Ｃ＝Ｏ）Ｏ−、−（Ｃ＝Ｏ）Ｓ−、−Ｓ（Ｏ）_２−または結合であり；それぞれのＲ_１、Ｒ_２、Ｒ_３、Ｒ_４およびＲ_５は同一または異なり、独立にアミノ酸側鎖モエティ(moiety)またはアミノ酸側鎖誘導体である。前記リバースターン類似体化合物は、単離された構造異性体、構造異性体の混合物、または薬学的に許容されるそれらの塩として存在しうる。

ある具体例において、一般式（Ｉ）化合物のＲ_１はインダゾリルまたは置換インダゾリルである。

Ｒ_１、Ｒ_２、Ｒ_３、Ｒ_４およびＲ_５の具体的な例は、次の詳細な記述から提供される。

ＥがＣＨＲ_３の具体例において、本発明の化合物は、下記の一般式（ＩＩ）を有する。

ここで、Ｗは上記で定義されたとおりであり、Ｒ_１、Ｒ_２、Ｒ_３、Ｒ_４およびＲ_５は次の詳細な記述で定義されたとおりである。

ある具体例において、本発明の化合物は、下記の一般式（ＩＩＩ）を有する。

ここで、Ｒ_１、Ｒ_４、Ｒ_６、Ｘ_１、Ｘ_２およびＸ_３は、次の詳細な記述に定義される。

本発明は、また、一般式（Ｉ）の一つ以上の化合物を含有する前記ライブラリーを使用するプロドラッグと関連がある。プロドラッグは、酵素による加水分解および／または化学的加水分解による吸収の間あるいはその後に体内で活性薬物を放出するように典型的にデザインされる。前記プロドラッグによるアプローチは、水にさらによく溶ける薬物への化学的誘導体化(chemical derivatization)により、水によく溶けない薬物の経口バイオアベイラビリティおよび静脈内投与を改善する効果的な手段である。ヒドロキシ基を含有する薬物の水溶性を増加させるために最も一般に使用されるプロドラッグによるアプローチでは、イオン性基；例えば、リン酸基、カルボキシレート基、アルキルアミノ基などを含有するエステルを生成する(Fleisher et al., Advanced Drug Delivery Reviews, 115-130, 1996; Davis et al., Cancer Res., 7247-7253, 2002, Golik et al., Bioorg. Med. Chem. Lett., 1837-1842, 1996)。

体内で放出できる前記作用基の例は、リン酸基、

および

を含むことができるが、プロドラッグにおいてイオン性基として通常使用されるいずれかの他の作用基も使用できる。

ある具体例において、前記本発明のプロドラッグは、下記一般式（ＩＶ）を有する。
（ＩＩＩ）−Ｒ_７（ＩＶ）
ここで、（ＩＩＩ）は上述した一般式（ＩＩＩ）であり；Ｒ_１、Ｒ_４、Ｒ_６、Ｘ_１、Ｘ_２、およびＸ_３のいずれか一つはＹを介してＲ_７に連結され；ＹはＲ_１、Ｒ_４またはＲ_６中の酸素、硫黄または窒素であり、またはＸ_１、Ｘ_２またはＸ_３中の酸素であり；Ｒ_７はヒドロキシアルキル、グリコシル、ホスホリルオキシメチルオキシカルボニル、置換または非置換のピペリジンカルボニルオキシ、またはこれらの塩であり；または、Ｙ−Ｒ_７はアミノ酸残基、アミノ酸残基の組み合わせ、ホスフェート、ヘミマレート、ヘミスクシネート、ジメチルアミノアルキルカルバメート、ジメチルアミノアセテート、またはこれらの塩であり；Ｒ_７に連結されないとき：Ｒ_１、Ｒ_４、Ｒ_６、Ｘ_１、Ｘ_２およびＸ_３は次の詳細な記述で定義される。

ある具体例において、本発明のプロドラッグは、ホスファターゼ、カルボキシラーゼまたは他の酵素に対する基質として作用することができ、それによって、一般式（ＩＩＩ）を有する化合物に転換されることも可能である。また、本発明は、一つ以上の一般式（Ｉ）の化合物を含有するライブラリーだけでなく、そのようなライブラリーの合成方法、および生物学的活性化合物を同定するためにそのようなライブラリーをスクリーニングする方法に関する。関連した側面で、本発明は、さらに低いＣＹＰ３Ａ４抑制活性を有する新規化合物をさらに提供する。また、本発明は、Ｗｎｔシグナルに対する抑制活性を有する新規化合物を提供する。また、本発明は、急性骨髄性白血病の治療または予防のための医薬を製造するために使用できる新規化合物を提供する。

本発明は、リバースターン類似体の新規化合物を提供する。本発明の化合物は、低いＣＹＰ３Ａ４抑制活性（高いＩＣ５０）を示すため、特に他の薬物と組み合わせて投与される場合、潜在的な薬となる。本発明の化合物は、Ｗｎｔシグナルに強い抑制活性を示した。前記化合物は、ＡＭＬ癌細胞の成長を抑制するうえ、急逝骨髄性白血病の治療または予防に使用できる。

本発明のリバースターン類似体を製造するための一般な合成反応を示す。ＣＹＰ３Ａ４の活性に対するテスト化合物（化合物Ａ、ＢおよびＣ）の効果を示す図であって、本発明の前記化合物に対するＣＹＰ３Ａ４抑制アッセイによるＩＣ_５０の測定に基づいており、ここで前記ＩＣ_５０値を得るために、ＣＹＰ３Ａ４活性の抑制は前記化合物の多様な濃度で測定した。その詳細な手順は実施例１に開示される。ＴｏｐＦｌａｓｈレポーター(TopFlash Reporter)遺伝子バイオアッセイによるＳＷ４８０細胞に対する化合物ＤのＩＣ_５０の測定結果を示す。テスト化合物（化合物ＡおよびＣ）の濃度による前記テスト化合物によるＡＭＬ癌細胞の成長抑制を示す。

以下、本発明の好適な実施形態を説明する。それらの実施例はここに添付した図面で示される。実施形態は、前記図面を参考することにより本発明を説明するように下記に述べる。

明細書および添付の請求項で使用されたものとして、別に特定されない限り、下記の用語は次に表示された意味を有する。

「アミノ」は−ＮＨ_２ラジカルを示す。

「アミジノ」は−Ｃ（＝ＮＨ）−ＮＨ_２ラジカルを示す。前記アミジノのアミン基の一つまたは二つの水素は、ここに定義された一つまたは二つのアルキル基で置換できる。また、前記アルキル−誘導アミジノラジカルはそれぞれ「アルキルアミジノ」および「ジアルキルアミジノ」として表される。

「シアノ」は−ＣＮラジカルを示す。

「カルボキシ」は−ＣＯＯＲラジカルを示し、ここで、Ｒは水素、またはここに定義されたアルキルである。

「アシル」は−ＣＯＲラジカルを示し、ここで、Ｒはここに定義されたアルキル、アリール、シクロアルキル、ヘテロシクリル(heterocyclyl)を示す。例えば、Ｒはメチル、ブテニル、シクロプロピルなどでありうる。前記アルキルまたはアリールは、それぞれアルキルまたはアリール基に対して記述された置換基で選択的に置換できる。典型的なアシル基は、制限なく、フェニルアシル、ベンジルアシル、Ｃ_１−６アシル（例えば、アセチル）などを含む。

「アルキルスルホネート」は−Ｓ（Ｏ）_２−ＯＲラジカルを示し、ここで、Ｒはここに定義されたアルキルである。

「アミドスルホネート」は−ＯＳ（Ｏ）_２−ＮＲ_２ラジカルを示し、各Ｒは独立に水素またはアルキルである。典型的なアミドスルホネートは−ＯＳ（Ｏ）_２ＮＨ_２、−ＯＳ（Ｏ）_２ＮＨＭｅを含む。

［アミノカルボニル］は−Ｃ（Ｏ）ＮＲ_２ラジカルを示し、各Ｒは独立にここに定義された水素、アルキル、アミノ、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクリル、アルコキシアルキル、ヒドロキシアルキル、ヒドロキシル、アルコキシ、アリールアルキル、ヘテロシクリルアルキルであり、または二つのＲはそれらが結合している窒素原子と共にヘテロシクリルを形成する。前記Ｒのいずれか一つが水素であり、残りのＲがＣ_１−４アルキルである場合、アミノカルボニルは「Ｃ_１−４アルキルホルムアミジル」で表される。

「Ｎ−ホルムアミジル」は−ＮＨＣ（Ｏ）Ｈラジカルを示す。

「フェニルスルホニル」は−Ｓ（Ｏ）_２−Ｒラジカルを示し、ここで、Ｒはフェニルであり、前記フェニルはアルキルまたはクロロでさらに置換できる。

「フェニルスルホネート」は−Ｏ−Ｓ（Ｏ）_２−Ｒラジカルを示し、ここで、Ｒはフェニルであり、前記フェニルはアルキルまたはクロロでさらに置換できる。

「アルキルスルホニル」は−Ｓ（Ｏ）_２−Ｒラジカルを示し、ここで、Ｒはここに定義されたアルキルである。典型的なアルキルスルホニルラジカルはメチルスルホニルを含む。

「アルキルチオ」は−ＳＲラジカルを示し、ここで、Ｒはここに定義されたアルキルである。

「アリールチオ」は−ＳＲラジカルを示し、ここで、Ｒはここに定義されたアリールである。前記アリールチオのアリール基はアルキルまたはクロロでさらに置換できる。

「アルールオキシ」は−ＯＲラジカルを示し、ここで、Ｒはここに定義されたアリールである。前記アリール基はアルキル、アルコキシなどでさらに置換できる。

「アシルオキシアルキル」は−Ｒ’−ＯＣ（Ｏ）−Ｒラジカルを示し、ここで、Ｒはここに定義されたアルキル、アリール、シクロアルキル、ヘテロシクリルであり；Ｒ’はアルキルである。

「グアニジノ」は−ＮＨ−Ｃ（＝ＮＨ）−ＮＨ_２ラジカルを示す。前記グアニジノのアミン基の一つまたは二つの水素は、ここに定義された一つまたは二つのアルキル基で置換できる。また、前記アルキル−誘導グアニジンラジカルはそれぞれ「アルキルグアニジノ」および「ジアルキルグアニジノ」として表される。

「ニトロ」は−ＮＯ_２ラジカルを示す。

「アルキル」は炭素および水素原子のみからなる直鎖または分岐鎖の炭化水素鎖ラジカルを示す。アルキルは飽和（単一結合のみによって一緒に連結された炭素を含有）または不飽和（少なくとも一つの二重結合または三重結合によって一緒に連結された炭素を含有）でもよい。また、１〜１２の炭素原子を有するアルキルは「低級鎖アルキルモエティ(moiety)」として見なされ、「Ｃ_１−１２アルキル」で表される。他の具体例において、アルキルは１〜４の炭素原子を含むことができ、「Ｃ_１−４アルキル」で表される。他の具体例において、アルキルは２〜５の炭素原子を含むことができ、「Ｃ_２−５アルキル」で表される。アルキルは前記分子の残り部分に単一結合によって結合する。飽和アルキルの例は、制限なく、メチル、エチル、ｎ−プロピル、１−メチルエチル（イソ−プロピル）、ｎ−ブチル、ｎ−ペンチル、１，１−ジメチルエチル（ｔ−ブチル）、３−メチルヘキシル、２−メチルヘキシルなどを含む。不飽和アルキルの例は、制限なく、エテニル（すなわち、ビニル）、プロプ−１−エニル（すなわち、アリル）、ブト−１−エニル、ペント−１−エニル、ペンタ−１，４−ジエニル、エチニル（すなわち、アセチレニル）、プロプ−１−イニル(prop-1-ynyl)などを含む。

また、アルキルは、単環式または二環式炭化水素環ラジカルでありうり、二環式炭化水素環ラジカルは接合または架橋環系を含むことができる。環状アルキルは、また、「シクロアルキル」で表される。ある具体例において、シクロアルキルは３〜６の炭素原子を含むことができ、「Ｃ_３−６シクロアルキル」で表される。単環式シクロアルキルラジカルの例は、例えば、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチル、およびシクロオクチルを含む。不飽和シクロアルキルはエンド(endo)二重結合（すなわち、環内二重結合）を含有する。不飽和シクロアルキルの例はシクロヘキセニルを含む。二環式シクロアルキルラジカルの例は、例えば、ノルボニル（すなわち、ビシクロ［２．２．１］ヘプチル）、７，７−ジメチル−ビシクロ［２．２．１］ヘプチルなどを含む。

明細書で別に具体的に特定されない限り、前記用語「アルキル」は、アルキルおよび「置換アルキル」の両方ともを含むことを意味し、前記置換アルキルは、一つ以上の水素原子が、ここで定義されたアシル、アミジノ、アルキルアミジノ、ジアルキルアミジノ、アルコキシ、アリール、シアノ、シクロアルキル、グアニジノ、アルキルグアニジノ、ジアルキルグアニジノ、ハロ、ヘテロシクリル、ヒドラジニル、ヒドロキシル、ニトロ、−ＯＣ（Ｏ）−Ｒ^１１、−Ｎ（Ｒ^１１）_２、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ^１１、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ^１１）_２、−Ｎ（Ｒ^１１）Ｃ（Ｏ）ＯＲ^１１、−Ｎ（Ｒ^１１）Ｃ（Ｏ）Ｒ^１１、−Ｎ（Ｒ^１１）Ｓ（Ｏ）_ｔＲ^１１（ここで、ｔは１または２）、−Ｓ（Ｏ）_ｔＯＲ^１１（ここで、ｔは１または２）、−Ｓ（Ｏ）_ｐＲ^１１（ここで、ｐは０、１または２）、および−Ｓ（Ｏ）_ｔＮ（Ｒ^１１）_２（ここで、ｔは１または２）から独立に選ばれた一つ以上の置換基で置換されたアルキルラジカルを示し、ここで、それぞれのＲ^１１は独立に水素、アルキル、アリール、アリールアルキル、ヘテロシクリルまたはヘテロシクリルアルキルである。

「アルコキシ」は一般式アルキル−Ｏ−で表示されるラジカルを示し、ここで、アルキルはここに定義されたとおりである。前記アルキル部分は一つ以上のハロゲンでさらに置換できる。また、アルコキシは、アルキル基内の炭素の数によって、例えば、Ｃ_１−６アルコキシまたはＣ_１−３アルコキシで表示できる。

「アリール」は、環炭素原子から一つの水素原子を除去することにより、芳香族単環式または二環式環系から誘導されたラジカルを示す。前記芳香族単環式または二環式炭化水素環系は６〜１２の炭素原子（すなわち、Ｃ_６−１２アリール）を含み、ここで、前記環系内の少なくとも一つの環は完全に不飽和され、すなわち、それはヒュッケル理論(Huckel theory)にしたがって環の非局在化(delocalized)（４ｎ＋２）π−電子システムを含む。選択的に、前記アリールの一つまたは二つの環原子は窒素、酸素または硫黄から選ばれたヘテロ原子でありうる。アリールラジカルの例は、これに限定されないが、フェニルおよびナフチルを含む。明細書で別に具体的に特定されない限り、前記用語「アリール」は、アリールおよび「置換アリール」の両方ともを含むことを意味し、前記置換アリールは、一つ以上の水素原子がアルキル、アシル、アミジノ、アミドスルホネート、アルコキシ、アリールオキシ、シアノ、グアニジノ、アルキルグアニジノ、ジアルキルグアニジノ、ハロ、ヒドラジニル、ヒドロキシル、ニトロ、ヘテロシクリル、−ＯＣ（Ｏ）−Ｒ^１１、−Ｎ（Ｒ^１１）_２、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ^１１、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ^１１）_２、−Ｎ（Ｒ^１１）Ｃ（Ｏ）ＯＲ^１１、−Ｎ（Ｒ^１１）Ｃ（Ｏ）Ｒ^１１、−Ｎ（Ｒ^１１-）Ｓ（Ｏ）_ｔＲ^１１（ここで、ｔは１または２）、−Ｓ（Ｏ）_ｔＯＲ^１１（ここで、ｔは１または２）、−Ｓ（Ｏ）_ｐＲ^１１（ここで、ｐは０、１または２）、および−Ｓ（Ｏ）_ｔＮ（Ｒ^１１）_２（ここで、ｔは１または２）から独立に選ばれた一つ以上の置換基で置換されたアリールラジカルを示し、ここで、それぞれのＲ^１１は独立に水素、アルキル、アリール、アリールアルキル、ヘテロシクリルまたはヘテロシクリルアルキルである。

「アリールアルキル」は、ここに定義されたとおり、アルキルの一つ以上の水素が一つ以上のアリール基で置換されたアルキルラジカルを示す。多様な具体例において、アリールアルキルは、７〜１５の炭素を含み、Ｃ_７−１５アリールアルキルで表される。ある具体例において、アリールアルキルはアリールＣ_１−４アルキルであり、ここで、Ｃ_１−４アルキルは一つのアリール基または二つのアリール基で置換され、後者は、また、「ジアリールアルキル」または「ビスアリールアルキル」で表示される。アリールＣ_１−４アルキルの例は、これに限定されないが、アリールメチル、アリールエチル、アリールプロピル、アリールブチル、ビスアリールメチル、ビスアリールエチル、ビスアリールプロピル、ビスアリールブチルを含む。典型的なアリールアルキルラジカルは、制限なく、ベンジル、ナフチルメチル、ジフェニルメチル、３，３−ビスフェニルプロピルなどを含む。明細書で別に具体的に特定されない限り、前記用語「アリールアルキル」はアリールアルキルおよび「置換アリールアルキル」の両方ともを含むことを意味し、ここで、前記アリールアルキルラジカルのアルキル部分および／またはアリール部分はそれぞれここに記述されたアルキルラジカルおよびアリールラジカルで置換できる。

「シクロアルキルアルキル」は、ここに定義されたとおり、アルキルの一つ以上の水素が一つ以上のシクロアルキル基で置換されたアルキルラジカルを示す。ある具体例において、シクロアルキルアルキルは、シクロアルキルメチル、シクロアルキルエチルなどのシクロアルキルＣ_１−２アルキルである。典型的なシクロアルキルアルキルラジカルは、制限なく、シクロヘキシルアルキル（例えば、シクロヘキシルメチルおよびシクロヘキシルエチル）およびシクロペンチルアルキル（例えば、シクロペンチルメチルおよびシクロペンチルエチル）などを含む。明細書で別に具体的に特定されない限り、前記用語「シクロアルキルアルキル」はシクロアルキルアルキルおよび「置換シクロアルキルアルキル」の両方ともを含むことを意味し、ここで、前記シクロアルキルアルキルラジカルのアルキル部分および／またはシクロアルキル部分はそれぞれここに記述されたアルキルラジカルおよびシクロアルキルラジカルで置換できる。

「グリコシル」は、環状の単糖類（例えば、グルコース）、二糖類、オリゴ糖（３〜１０個の単糖類を含む）、または多糖類（１０個を超過する単糖類を含む）からヘミアセタールヒドロキシル基を除去したラジカルを示す。

「ハロ」または「ハロゲン」はフルオロ、クロロ、ブロモまたはヨードラジカルを示す。

「ハロアルキル」は、ここに定義されたとおり、一つ以上のハロラジカルで置換されたアルキルラジカルを示す。典型的なハロアルキルは、制限なく、トリフルオロメチル、ジフルオロメチル、トリクロロメチル、２，２，２−トリフルオロエチル、１−フルオロメチル−２−フルオロエチル、３−ブロモ−２−フルオロプロピル、１−ブロモメチル−２−ブロモエチルなどを含む。また、一つ以上のフッ素で置換されたアルキルは、「ペルフルオロアルキル」、例えば「ペルフルオロＣ_１−４アルキル」で表示される。前記ハロアルキルラジカルのアルキル部分は、ここに定義されたとおり、アルキル基で選択的に置換できる。

「ヘテロシクリル」は、２〜１１の炭素原子、並びに窒素、酸素および硫黄から選ばれた１〜３のヘテロ原子を含む安定なヘテロ環式環ラジカルを示す。ある具体例において、前記へテロシクリルは、一つまたは二つのヘテロ原子を含有する。明細書で別に具体的に特定されない限り、前記ヘテロシクリルラジカルは、単環式または二環式環系であり、前記二環式環系は、接合または架橋環系を含むことができる。ある具体例において、前記へテロシクリルは、５−、６−または７−員の単環式環である。他の具体例において、前記ヘテロシクリルは８−、９−、１０−、１１−または１２−員の接合二環式環でありうる。前記ヘテロシクリルラジカルにおいて、ヘテロ原子は選択的に酸化できる。一つ以上の窒素原子は、もし存在すれば、選択的に四級化(quaternization)できる。前記へテロシクリルラジカルは、非芳香性または芳香性（すなわち、ヘテロシクリルラジカル内の少なくとも一つの環はヒュッケル理論(Huckel theory)にしたがって非局在化（４ｎ＋２）π−電子システムを有する。）でありうる。前記へテロシクリルは、前記環のいずれかの原子を介して前記分子の残余部分に結合できる。非芳香性ヘテロシクリルラジカルの例は、これに限定されないが、ジオキソラニル、デカヒドロイソキノリル、イミダゾリニル、イミダゾリジニル、イソチアゾリジニル、イソオキサゾリジニル、モルホリニル、オクタヒドロインドリル、オクタヒドロイソインドリル、２−オキソピペラジニル、２−オキソピペリジニル、２−オキソピロリジニル、オキサゾリジニル、ピペリジニル（または「ピペリジル」としても表される）、ピペラジニル、４−ピペリドニル、３−ピロリニル、ピロリジニル、ピラゾリジニル、キヌクリジニル(quinuclidinyl)、チアゾリジニル、テトラヒドロフリル、トリチアニル、テトラヒドロピラニル、チオモルホリニル、およびチアモルホリニルを含む。芳香性ヘテロシクリルラジカルの例は、これに限定されないが、アゼピニル、アクリジニル、ベンズイミダゾリル、ベンズインドリル、１，３−ベンゾジオキソリル、ベンゾフラニル、ベンゾオキサゾリル、ベンゾイソオキサゾリル、ベンゾ［ｄ］チアゾリル、ベンゾチアジアゾリル、ベンゾ［ｂ］［１，４］ジオキセピニル、ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジニル、１，４−ベンゾジオキサニル、ベンゾオキサゾリル、ベンゾジオキソリル、ベンゾジオキシニル、ベンゾピラニル、ベンゾピラゾリル、ベンゾフラニル、ベンゾフラノニル、ベンゾチエニル（ベンゾチオフェニル）、ベンゾチエノ［３，２−ｄ］ピリミジニル、ベンゾトリアゾリル、カルバゾリル、クロモン、シンノリニル(cinnolinyl)、シクロペンタ［ｄ］ピリミジニル、ジベンゾフラニル、ジベンゾチオフェニル、フラニル、フラノニル、フロ［３，２−ｃ］ピリジニル、イソチアゾリル、イミダゾリル、インダゾリル、インドリル、インダゾリル、イソインドリル、インドリニル、イソインドリニル、イソキノリル、インドリジニル(indolizinyl)、イソオキサゾリル、５，８−メタノ−５，６，７，８−テトラヒドロキナゾリニル、ナフチリジニル、１，６−ナフチリジノニル、オキサジアゾリル、２−オキソアゼピニル、オキサゾリル、オキシラニル、５，６，６ａ，７，８，９，１０，１０ａ−オクタヒドロベンゾ［ｈ］キナゾリニル、フェナジニル(phenazinyl)、フェノチアジニル、フェノキサジニル、プテラジニル(phthalazinyl)、フタリジニル、プリニル、ピロリル、ピラゾリル、ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジニル、ピリジニル（または、ピリジルとして言及される）、ピリド［３，２−ｄ］ピリミジニル、ピリド［３，４−ｄ］ピリミジニル、ピラジニル、ピリミジニル、ピリダジニル、ピロリル、キナゾリニル、キノキサリニル、キノリニル、イソキノリニル、テトラヒドロキノリニル、１，２，３，４−テトラヒドロカルバゾリル、５，６，７，８−テトラヒドロキナゾリニル、チアゾリル、チアジアゾリル、トリアゾリル、テトラゾリル、トリアジン−２−イル、チエノ［２，３−ｄ］ピリミジニル、チエノ［３，２−ｄ］ピリミジニル、チエノ［２，３−ｃ］ピリジニル、およびチオフェニル（すなわち、チエニル）を含む。明細書で別に具体的に特定されない限り、前記用語「ヘテロシクリル」はヘテロシクリルおよび「置換ヘテロシクリル」の両方ともを含むことを意味し、前記置換ヘテロシクリルはアルキル、アシル、オキソ（例えば、ピリジノニル、ピロリドニル）、アリール、アリールアルキル、アシルオキシアルキル、アミジノ、アルコキシ、シアノ、グアニジノ、アルキルグアニジノ、ジアルキルグアニジノ、ハロ、ヒドラジニル、ヒドロキシル、ニトロ、−ＯＣ（Ｏ）−Ｒ^１１、−Ｎ（Ｒ^１１）_２、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ^１１、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ^１１）_２、−Ｎ（Ｒ^１１）Ｃ（Ｏ）ＯＲ^１１、−Ｎ（Ｒ^１１）Ｃ（Ｏ）Ｒ^１１、−Ｎ（Ｒ^１１）Ｓ（Ｏ）_ｔＲ^１１（ここで、ｔは１または２）、−Ｓ（Ｏ）_ｔＯＲ^１１（ここで、ｔは１または２）、−Ｓ（Ｏ）_ｐＲ^１１（ここで、ｐは０、１または２）、および−Ｓ（Ｏ）_ｔＮ（Ｒ^１１）_２（ここで、ｔは１または２）から選ばれた一つ以上の置換基で置換されたヘテロシクリルラジカルを示し、ここで、それぞれのＲ^１１は独立に水素、アルキル、アリール、アリールアルキル、ヘテロシクリルまたはヘテロシクリルアルキルである。

「ヘテロシクリルアルキル」は、アルキルの一つ以上の水素が、ここに定義されたように、一つ以上のヘテロシクリル基で置換されたアルキルラジカルを示す。もし前記へテロシクリルが窒素含有ヘテロシクリルであれば、前記ヘテロシクリルは窒素原子においてアルキルラジカルに付着できる。ある具体例において、前記ヘテロシクリルアルキルのアルキル部分は１〜４の炭素原子を含有し、ヘテロシクリルＣ_１−４アルキルで表される。ヘテロシクリルアルキルラジカルの例は、制限なく、モルホリニルメチルなどのモルホリニルアルキル、ピペリジニルメチルなどのピペリジルアルキル、イミダゾリジニルメチルなどのイミダゾリジニルアルキルなどを含む。ヘテロシクリル部分が芳香性であるヘテロシクリルアルキルラジカルの追加的な例は、これに限定されないが：ピリジルメチル、ピリジルエチル、ピリジルプロピル、ピリジルブチル、キノリニルメチル、キノリニルエチル、キノリニルプロピル、キノリニルブチル、インダゾリルメチル、インダゾリルエチル、インダゾリルプロピル、インダゾリルブチル、ベンズピラゾリルメチル、ベンズピラゾリルエチル、ベンズピラゾリルプロピル、ベンズピラゾリルブチル、イソキノリニルメチル、イソキノリニルエチル、イソキノリニルプロピル、イソキノリニルブチル、ベンゾトリアゾリルメチル、ベンゾトリアゾリルエチル、ベンゾトリアゾリルプロピル、ベンゾトリアゾリルブチルなどを含む。明細書で別に具体的に特定されない限り、前記用語「ヘテロシクリルアルキル」はヘテロシクリルアルキルおよび「置換ヘテロシクリルアルキル」の両方ともを含むことを意味し、ここで、前記ヘテロシクリルアルキルラジカルのアルキル部分および／またはヘテロシクリル部分は、ここに記述されたそれぞれのアルキルラジカルおよびヘテロシクリルラジカルで置換できる。

前記化合物、または薬学的に許容されるそれらの塩は、一つ以上の非対称センターを含むことができる。よって、絶対立体化学(absolute stereochemistry)の概念において、アミノ酸に対して（Ｒ）−または（Ｓ）−、または（Ｄ）−または（Ｌ）−として定義できる鏡像異性体(enantiomers)、ジアステレオ異性体(diastereomers)および他の立体異性体が生じうる。ここに記述された化合物がオレフィン二重結合または幾何学的非対称の他のセンターを含有する場合、そして別に特定されない限り、その化合物はＥおよびＺ幾何異性体（例えば、ｃｉｓまたはｔｒａｎｓ）の両方ともを含むことを意味し、同様に、全ての可能な異性体のみならず、それらのラセミ体および光学的に純粋な形態、および全ての互変体(tautomeric)形態も含むことを意味する。

本明細書において、「アミノ酸」は、天然α−アミノ酸および／またはβ−アミノ酸およびホモアミノ酸などの非天然アミノ酸を含むことを意味する。前記アミノ酸の例は、これに限定されないが、アラニン、アルギニン、アスパラギン、アスパラギン酸、システイン、グルタミン、グルタミン酸、グシリン、ヒスチジン、イソロイシン、ロイシン、リシン、メチオニン、フェニルアラニン、プロリン、セリン、トレオニン、トリプトファン、チロシン、バリン、ホスホセリン、ホスホトレオニン、ホスホチロシン、４−ヒドロキシプロリン、ヒドロキシリシン、デモシン(demosine)、イソデモシン、γ−カルボキシグルタメート、馬尿酸(hippuric acid)、オクタヒドロインドル−２−カルボン酸、スタチン(statine)、１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン−３−カルボン酸、フェニシルアミン、オルニチン(ornithine)、３−メチルヒスチジン、ノルバリン(norvaline)、β−アラニン、γ−アミノ酪酸、シトルリン(cirtrulline)、ホモシステイン、ホモセリン、メチル−アラニン、パラ−ベンゾイルフェニルアラニン、フェニルグリシン、プロパギルグリシン、サルコシン、メチオニンスルホン、ｔｅｒｔ−ブチルグリシン、３，５−ジブロモチロシン、および３，５−ジヨードチロシンを含む。

「アミノ酸残基」または「アミノ酸側鎖モエティ(moiety)」は、アミノ酸がある分子と縮合されるとき、水分子（またはアルコール）を失った後に残っているアミノ酸の部分を示す。典型的に、アミノ酸は、ペプチド結合を形成することにより、一般式（Ｉ）−（ＩＶ）のいずれかの化合物を含む分子と縮合される。ある具体例において、前記アミノ酸のアミノ作用基はカルボン酸基またはその分子の反応等価物（例えば、カルボキシル無水物）と縮合できる。他の具体例において、前記アミノ酸のカルボン酸作用基は前記分子のアミン基と縮合されることも可能である。典型的に、水分子は前記ペプチド結合が形成される間に喪失される。前記「アミノ酸残基」または「アミノ酸側鎖モエティ(moiety)」の例は、これに限定されないが、アラニン、アルギニン、アスパラギン、アスパラギン酸、システイン、グルタミン、グルタミン酸、グリシン、ヒスチジン、イソロイシン、ロイシン、リシン、メチオニン、フェニルアラニン、プロリン、セリン、トレオニン、トリプトファン、チロシン、バリン、ホスホセリン、ホスホトレオニン、ホスホチロシン、４−ヒドロキシプロリン、ヒドロキシリシン、デモシン、イソデモシン、γ−カルボキシグルタメート、馬尿酸、オクタヒドロインドル−カルボン酸、スタチン、１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン−３−カルボン酸、フェニシルアミン、オルニチン、３−メチルヒスチジン、ノルバリン、β−アラニン、γ−アミノ酪酸、シトルリン、ホモシステイン、ホモセリン、メチル−アラニン、パラ−ベンゾイルフェニルアラニン、フェニルグリシン、プロパギルグリシン、サルコシン、メチオニンスルホン、ｔｅｒｔ−ブチルグリシン、３，５−ジブロモチロシン、３，５−ジヨードチロシン、グルコシル化トレオニン、グリコシル化セリン、およびグリコシル化アスパラギンの残基を含む。

「アミノ酸側鎖誘導体」は、表１に示されたアミノ酸側鎖モエティ(moiety)の任意の誘導体を示す。ある具体例において、前記アミノ酸側鎖誘導体は、ここに定義されたアルキル、アシル、アルコキシ、アリール、アリールアルキル、ヘテロシクリル、またはヘテロシクリルアルキルである。

「立体異性体」は、同一の結合によって結合した同一の原子からなるが、交替できない異なる三次元的構造を有する化合物を示す。よって、多様な立体異性体およびそれらの混合物は「鏡像異性体」を含むものと考えられ、前記鏡像異性体はそれらの分子が互いに重なり合えない鏡像を持つ二つの立体異性体を示す。

「互変体」は、分子の一つの原子から同一分子の他の原子へのプロトンの移動を示す。

「プロドラッグ」は、生理的条件の下でまたは加溶媒分解(solvolysis)によって、ここに記述された生物学的に活性な化合物に転換できる化合物を示すことを意味する。よって、前記用語「プロドラッグ」は、薬学的に許容される生物学的に活性な化合物の前駆体を示す。プロドラッグは、対象体に投与されるときに非活性でありうるが、例えば、加水分解によって、生体内で活性化合物に転換される。前記プロドラッグ化合物は、哺乳動物において溶解度、組織適合性(tissue compatibility)または徐放性放出の利点をよく提供する(Bundgard, H., Design of Prodrugs (1985), pp. 7-9, 21-24 (Elsevier, Amsterdam)参照)。

プロドラッグに対する論議は、文献『Higuchi, T., et al., "Pro_-drugs as Novel Delivery Systems," A.C.S. Symposium Series, Vol. 14』および文献『in Bioreversible Carriers in Drug Design, ed. Edward B. Roche, American Pharmaceutical Association and Pergamon Press, 1987』で提供され、これらの全ては、ここにおける引用により全体が本発明の内容に援用される。

また、前記用語「プロドラッグ」は、そのようなプロドラッグが哺乳類対象体に投与されるときに生体内で活性化合物を放出する、任意の共有的に結合した担体(carrier)を含むことを意味する。活性化合物のプロドラッグは、ここに記述されたように、活性化合物に存在する作用基を通常の操作でまたは生体内で元来の活性化合物に切断されるように変形することにより製造できる。プロドラッグは、前記活性化合物のプロドラッグが哺乳類対象体に投与されるとき、ヒドロキシ、アミノまたはメルカプト基がそれぞれ遊離ヒドロキシ、遊離アミノ、または遊離メルカプト基を形成するように切断される任意の基に結合する化合物を含む。前記プロドラッグの例は、これに限定されないが、アセテート、スクシネート、ホスフェート、ヘミスクシネート、マレート、ヘミマレート、ホルメートおよびアルコールのベンゾエート誘導体または前記活性化合物のアミン作用基などを含む。前記プロドラッグの他の例は、これに限定されないが、アルコールのアミノ酸誘導体または前記活性化合物のアミン作用基などを含む。

本発明は、生物学的ペプチドおよびタンパク質のリバースターン領域の２次構造を模倣した、コンフォメーションが制限された化合物（また、ここで「リバースターン類似体」として言及される）に関するものであり、また、それらに関連する化学的ライブラリーに関するものである。

本発明のリバースターン類似体構造は、診断、予防および／または治療剤としての用途を含んで（これに制限されない）、生物活性剤として有用である。前記本発明のリバースターン類似体構造ライブラリーは、そのような用途を有する生物活性剤の同定に有用である。本発明の実施において、前記ライブラリーは、数十から数百、数千（またはより大きい）に至る個別的なリバースターン構造（または、ここで「メンバー」として言及される）を含むことができる。

本発明の一つの側面において、下記の式（Ｉ）を有するリバースターン類似体構造が開示される。

ここで、Ｅは−ＺＲ_３−または−（Ｃ＝Ｏ）−であり、ここで、ＺはＣＨまたはＮであり；Ｗは−（Ｃ＝Ｏ）−、−（Ｃ＝Ｏ）ＮＨ−、−（Ｃ＝Ｏ）Ｏ−、−（Ｃ＝Ｏ）Ｓ−、−Ｓ（Ｏ）_２−または結合であり；それぞれのＲ_１、Ｒ_２、Ｒ_３、Ｒ_４およびＲ_５は同一または異なり、独立にアミノ酸側鎖モエティ(moiety)またはアミノ酸側鎖誘導体である。前記リバースターン類似体化合物は、単離された立体異性体または立体異性体の混合物として、または薬学的に許容されるそれらの塩として存在しうる。

ある具体例において、一般式（Ｉ）の化合物のＲ_１はインダゾリルまたは置換インダゾリルである。

前述された前記化合物のある具体例において、一般式（Ｉ）の化合物のＲ_１は、インダゾリルまたはＣ_１−７アルキル、Ｃ_６−１２アリール、Ｃ_７−１５アリールアルキル、置換Ｃ_７−１５アリールアルキル、シクロアルキルアルキル、ヒドロキシアルキル、Ｃ_１−１０アシル、アミノ、ハロゲン、ニトロ、Ｃ_２−１０アシルオキシアルキル、アミノカルボニル、アミノカルボニルアルキル、ジアルキルアミノカルボニルアルキル、アルコキシカルボニルアルキル、ヒドロキシアルキル、シアノＣ_１−３アルキル、モルホリニルＣ_１−３アルキル、アルコキシアルキルアミドおよびシクロアルキルカルボニルから独立に選ばれた一つ以上の置換基を有する置換インダゾリルでありうる。

ある具体例において、一般式（Ｉ）の化合物のＲ_２、Ｒ_４およびＲ_５は、Ｃ_１−１２アルキルまたはハロゲン、シアノ、Ｃ_１−６アルコキシ、アミノ、グアニジノ、Ｃ_１−４アルキルグアニジノ、ジＣ_１−４アルキルグアニジノ、アミジノ、Ｃ_１−４アルキルアミジノ、ジＣ_１−４アルキルアミジノ、Ｃ_１−５アルキルアミノ、ジＣ_１−５アルキルアミノ、アミノカルボニル、モルホリニル、メチル−ピペラジニル、フェニル、およびヒドロキシルから独立に選ばれた一つ以上の置換基を有する置換Ｃ_１−１２アルキル；
Ｃ_２−１２アルケニルまたはアミノ、グアニジノ、Ｃ_１−４アルキルグアニジノ、ジＣ_１−４アルキルグアニジノ、アミジノ、Ｃ_１−４アルキルアミジノ、ジＣ_１−４アルキルアミジノ、Ｃ_１−５アルキルアミノ、ジＣ_１−５アルキルアミノ、およびヒドロキシルから独立に選ばれた一つ以上の置換基を有する置換Ｃ_２−１２アルケニル；
Ｃ_６−１２アリールまたはハロゲン、アミノ、グアニジノ、Ｃ_１−４アルキルグアニジノ、ジＣ_１−４アルキルグアニジノ、アミジノ、Ｃ_１−４アルキルアミジノ、ジＣ_１−４アルキルアミジノ、Ｃ_１−５アルキルアミノ、ジＣ_１−５アルキルアミノ、およびヒドロキシルから独立に選ばれた一つ以上の置換基を有する置換Ｃ_６−１２アリール；
Ｃ_１−６アルコキシ；ジＣ_１−５アルキルアミノ；
窒素、酸素または硫黄から選ばれた一つまたは二つのヘテロ原子を有するＣ_６−１３ヘテロシクリルアルキル、または窒素、酸素または硫黄から選ばれた一つまたは二つのヘテロ原子を有し、ハロゲン、Ｃ_１−６アルキル、Ｃ_１−６アルコキシ、シアノおよびヒドロキシルから独立に選ばれた一つ以上の置換基を有する置換Ｃ_６−１３ヘテロシクリルアルキル；および
Ｃ_７−１３アリールアルキルまたはアミノ、アミジノ、グアニジノ、ヒドラジノ、Ｃ_１−４アルキルアミノ、Ｃ_１−４ジアルキルアミノ、ハロゲン、ペルフルオロＣ_１−６アルキル、Ｃ_１−６アルコキシ、ニトロ、カルボキシ、シアノ、スルフリル、アセチレニル、およびヒドロキシルから独立に選ばれた一つ以上の置換基を有する置換Ｃ_７−１３アリールアルキルよりなる群から独立に選択される。

Ｒ_３は、
水素；
Ｃ_１−１２アルキルまたはハロゲン、シアノ、Ｃ_１−６アルコキシ、アミノ、グアニジノ、Ｃ_１−４アルキルグアニジノ、ジＣ_１−４アルキルグアニジノ、アミジノ、Ｃ_１−４アルキルアミジノ、ジＣ_１−４アルキルアミジノ、Ｃ_１−５アルキルアミノ、ジＣ_１−５アルキルアミノ、およびヒドロキシルから独立に選ばれた一つ以上の置換基を有する置換Ｃ_１−１２アルキル；
Ｃ_２−１２アルケニルまたはアミノ、グアニジノ、Ｃ_１−４アルキルグアニジノ、ジＣ_１−４アルキルグアニジノ、アミジノ、Ｃ_１−４アルキルアミジノ、ジＣ_１−４アルキルアミジノ、Ｃ_１−５アルキルアミノ、ジＣ_１−５アルキルアミノ、およびヒドロキシルから独立に選ばれた一つ以上の置換基を有する置換Ｃ_２−１２アルケニル；
Ｃ_６−１２アリールまたはハロゲン、アミノ、グアニジノ、Ｃ_１−４アルキルグアニジノ、ジＣ_１−４アルキルグアニジノ、アミジノ、Ｃ_１−４アルキルアミジノ、ジＣ_１−４アルキルアミジノ、Ｃ_１−５アルキルアミノ、ジＣ_１−５アルキルアミノ、およびヒドロキシルから独立に選ばれた一つ以上の置換基を有する置換Ｃ_６−１２アリール；
Ｃ_１−６アルコキシ；
窒素、酸素または硫黄から選ばれた一つまたは二つのヘテロ原子を有するＣ_６−１３ヘテロシクリルアルキル、または窒素、酸素または硫黄から選ばれた一つまたは二つのヘテロ原子を有し、ハロゲン、Ｃ_１−６アルキル、Ｃ_１−６アルコキシ、シアノ、およびヒドロキシルから独立に選ばれた一つ以上の置換基を有する置換Ｃ_６−１３ヘテロシクリルアルキル；および
Ｃ_７−１３アリールアルキルまたはアミノ、アミジノ、グアニジノ、ヒドラジノ、Ｃ_１−４アルキルアミノ、Ｃ_１−４ジアルキルアミノ、ハロゲン、ペルフルオロＣ_１−６アルキル、Ｃ_１−６アルコキシ、ニトロ、カルボキシ、シアノ、スルフリル、およびヒドロキシルから独立に選ばれた一つ以上の置換基を有する置換Ｃ_７−１３アリールアルキルよりなる群から選ばれる。

ある具体例において、一般式（Ｉ）の化合物のＲ_２、Ｒ_４およびＲ_５は、アミノＣ_２−５アルキル；グアニジノＣ_２−５アルキル；Ｃ_１−４アルキルグアニジノＣ_２−５アルキル；ジＣ_１−４アルキルグアニジノ−Ｃ_２−５アルキル；アミジノＣ_２−５アルキル；Ｃ_１−４アルキルアミジノＣ_２−５アルキル；ジＣ_１−４アルキルアミジノＣ_２−５アルキル；Ｃ_１−３アルコキシ；
Ｃ_１−１２アルキル；Ｃ_６−１２アリール；Ｃ_６−１２アリールアルキル；Ｃ_２−１２アルケニル；
フェニルまたはアミノ、アミジノ、グアニジノ、ヒドラジノ、Ｃ_１−４アルキルアミノ、Ｃ_１−４ジアルキルアミノ、ハロゲン、ペルフルオロＣ_１−４アルキル、Ｃ_１−４アルキル、Ｃ_１−３アルコキシ、ニトロ、カルボキシ、シアノ、スルフリル、およびヒドロキシルから独立に選ばれた一つ以上の置換基を有する置換フェニル；
ナフチルまたはアミノ、アミジノ、グアニジノ、ヒドラジノ、Ｃ_１−４アルキルアミノ、Ｃ_１−４ジアルキルアミノ、ハロゲン、ペルフルオロＣ_１−４アルキル、Ｃ_１−４アルキル、Ｃ_１−３アルコキシ、ニトロ、カルボキシ、シアノ、スルフリル、およびヒドロキシルから独立に選ばれた一つ以上の置換基を有する置換ナフチル；
ベンジルまたはアミノ、アミジノ、グアニジノ、ヒドラジノ、Ｃ_１−４アルキルアミノ、Ｃ_１−４ジアルキルアミノ、ハロゲン、ペルフルオロＣ_１−４アルキル、Ｃ_１−３アルコキシ、ニトロ、カルボキシ、シアノ、スルフリル、Ｃ_１−４アルキル、アセチレニル、およびヒドロキシルから独立に選ばれた一つ以上の置換基を有する置換ベンジル；
ビスフェニルメチルまたはアミノ、アミジノ、グアニジノ、ヒドラジノ、Ｃ_１−４アルキルアミノ、Ｃ_１−４ジアルキルアミノ、ハロゲン、ペルフルオロＣ_１−４アルキル、Ｃ_１−３アルコキシ、ニトロ、カルボキシ、シアノ、スルフリル、およびヒドロキシルから独立に選ばれた一つ以上の置換基を有する置換ビスフェニルメチル；
ピリジルまたはアミノ、アミジノ、グアニジノ、ヒドラジノ、Ｃ_１−４アルキルアミノ、Ｃ_１−４ジアルキルアミノ、ハロゲン、ペルフルオロＣ_１−４アルキル、Ｃ_１−３アルコキシ、ニトロ、カルボキシ、シアノ、スルフリル、およびヒドロキシルから独立に選ばれた一つ以上の置換基を有する置換ピリジル；
ピリジルＣ_１-４アルキル、またはアミノ、アミジノ、グアニジノ、ヒドラジノ、Ｃ_１−４アルキルアミノ、Ｃ_１−４ジアルキルアミノ、ハロゲン、ペルフルオロＣ_１−４アルキル、Ｃ_１−４アルキル、Ｃ_１−３アルコキシ、ニトロ、カルボキシ、シアノ、スルフリル、およびヒドロキシルから独立に選ばれた一つ以上の置換基を有する置換ピリジルＣ_１−４アルキル；
ピリミジルＣ_１−４アルキル、またはアミノ、アミジノ、グアニジノ、ヒドラジノ、Ｃ_１−４アルキルアミノ、Ｃ_１−４ジアルキルアミノ、ハロゲン、ペルフルオロＣ_１−４アルキル、Ｃ_１−４アルキル、Ｃ_１−３アルコキシ、ニトロ、カルボキシ、シアノ、スルフリル、およびヒドロキシルから独立に選ばれた一つ以上の置換基を有する置換ピリミジルＣ_１−４アルキル；
トリアジン−２−イルＣ_１−４アルキル、またはアミン、アミジノ、グアニジノ、ヒドラジノ、Ｃ_１−４アルキルアミノ、Ｃ_１−４ジアルキルアミノ、ハロゲン、ペルフルオロＣ_１−４アルキル、Ｃ_１−４アルキル、Ｃ_１−３アルコキシ、ニトロ、カルボキシ、シアノ、スルフリル、およびヒドロキシルから独立に選ばれた一つ以上の置換基を有する置換トリアジン−２−イルＣ_１−４アルキル；
イミダゾリルＣ_１−４アルキルまたはアミノ、アミジノ、グアニジノ、ヒドラジノ、Ｃ_１−４アルキルアミノ、Ｃ_１−４ジアルキルアミノ、ハロゲン、ペルフルオロＣ_１−４アルキル、Ｃ_１−４アルキル、Ｃ_１−３アルコキシ、ニトロ、カルボキシ、シアノ、スルフリル、およびヒドロキシルから独立に選ばれた一つ以上の置換基を有する置換イミダゾリルＣ_１−４アルキル；
Ｎ−アミジノピペラジニル−Ｎ−Ｃ_０−４アルキル、Ｎ−アミジノピペリジニルＣ_１−４アルキル；および
４−アミノシクロヘキシルＣ_０−２アルキルよりなる群から独立に選ばれる。

Ｒ_３は、水素；アミノＣ_２−５アルキル；グアニジノＣ_２−５アルキル；Ｃ_１−４アルキルグアニジノＣ_２−５アルキル；ジＣ_１−４アルキルグアニジノ−Ｃ_２−５アルキル；アミジノＣ_２−５アルキル；Ｃ_１−４アルキルアミジノＣ_２−５アルキル；ジＣ_１−４アルキルアミジノＣ_２−５アルキル；Ｃ_１−３アルコキシ；
Ｃ_１−１２アルキル；Ｃ_６−１２アリール；Ｃ_６−１２アリールアルキル；Ｃ_２−１２アルケニル；
フェニルまたはアミノ、アミジノ、グアニジノ、ヒドラジノ、Ｃ_１−４アルキルアミノ、Ｃ_１−４ジアルキルアミノ、ハロゲン、ペルフルオロＣ_１−４アルキル、Ｃ_１−４アルキル、Ｃ_１−３アルコキシ、ニトロ、カルボキシ、シアノ、スルフリル、およびヒドロキシルから独立に選ばれた一つ以上の置換基を有する置換フェニル；
ナフチルまたはアミノ、アミジノ、グアニジノ、ヒドラジノ、Ｃ_１−４アルキルアミノ、Ｃ_１−４ジアルキルアミノ、ハロゲン、ペルフルオロＣ_１−４アルキル、Ｃ_１−４アルキル、Ｃ_１−３アルコキシ、ニトロ、カルボキシ、シアノ、スルフリル、およびヒドロキシルから独立に選ばれた一つ以上の置換基を有する置換ナフチル；
ベンジルまたはアミン、アミジノ、グアニジノ、ヒドラジノ、Ｃ_１−４アルキルアミノ、Ｃ_１−４ジアルキルアミノ、ハロゲン、ペルフルオロＣ_１−４アルキル、Ｃ_１−３アルコキシ、ニトロ、カルボキシ、シアノ、スルフリル、およびヒドロキシルから独立に選ばれた一つ以上の置換基を有する置換ベンジル；
ビスフェニルメチルまたはアミノ、アミジノ、グアニジノ、ヒドラジノ、Ｃ_１−４アルキルアミノ、Ｃ_１−４ジアルキルアミノ、ハロゲン、ペルフルオロＣ_１−４アルキル、Ｃ_１−３アルコキシ、ニトロ、カルボキシ、シアノ、スルフリル、およびヒドロキシルから選らばれた一つ以上の置換基を有する置換ビスフェニルメチル；
ピリジルまたはアミノ、アミジノ、グアニジノ、ヒドラジノ、Ｃ_１−４アルキルアミノ、Ｃ_１−４ジアルキルアミノ、ハロゲン、ペルフルオロＣ_１−４アルキル、Ｃ_１−３アルコキシ、ニトロ、カルボキシ、シアノ、スルフリル、およびヒドロキシルから独立に選ばれた一つ以上の置換基を有する置換ピリジル；
ピリジルＣ_１−４アルキル、またはアミノ、アミジノ、グアニジノ、ヒドラジノ、Ｃ_１−４アルキルアミノ、Ｃ_１−４ジアルキルアミノ、ハロゲン、ペルフルオロＣ_１−４アルキル、Ｃ_１−４アルキル、Ｃ_１−３アルコキシ、ニトロ、カルボキシ、シアノ、スルフリル、およびヒドロキシルから独立に選ばれた一つ以上の置換基を有する置換ピリジルＣ_１−４アルキル；
ピリミジルＣ_１−４アルキル、またはアミノ、アミジノ、グアニジノ、ヒドラジノ、Ｃ_１−４アルキルアミノ、Ｃ_１−４ジアルキルアミノ、ハロゲン、ペルフルオロＣ_１−４アルキル、Ｃ_１−４アルキル、Ｃ_１−３アルコキシ、ニトロ、カルボキシ、シアノ、スルフリル、およびヒドロキシルから独立に選ばれた一つ以上の置換基を有する置換ピリミジルＣ_１−４アルキル；
トリアジン−２−イルＣ_１−４アルキル、またはアミノ、アミジノ、グアニジノ、ヒドラジノ、Ｃ_１−４アルキルアミノ、Ｃ_１−４ジアルキルアミノ、ハロゲン、ペルフルオロＣ_１−４アルキル、Ｃ_１−４アルキル、Ｃ_１−３アルコキシ、ニトロ、カルボキシ、シアノ、スルフリル、およびヒドロキシルから独立に選ばれた一つ以上の置換基を有する置換トリアジン−２−イルＣ_１−４アルキル；
イミダゾリルＣ_１−４アルキルまたはアミノ、アミジノ、グアニジノ、ヒドラジノ、Ｃ_１−４アルキルアミノ、Ｃ_１−４ジアルキルアミノ、ハロゲン、ペルフルオロＣ_１−４アルキル、Ｃ_１−４アルキル、Ｃ_１−３アルコキシ、ニトロ、カルボキシ、シアノ、スルフリル、およびヒドロキシルから独立に選ばれた一つ以上の置換基を有する置換イミダゾリルＣ_１−４アルキル；
Ｎ−アミジノピペラジニル−Ｎ−Ｃ_０−４アルキル、Ｎ−アミジノピペリジニルＣ_１−４アルキル；および
４−アミノシクロヘキシルＣ_０−２アルキルよりなる群から選ばれる。

ある具体例において、一般式（Ｉ）の化合物のＲ_１は、インダゾリルまたはメチル；イソプロピル；シクロプロピルメチル；ヒドロキシエチル；シクロプロピルカルボニル；アミノカルボニル；シアノメチル；モルホリニルエチル；アミノカルボニルメチル；ジメチルアミノカルボニルメチル；メトキシエチルプロピオンアミド；エトキシカルボニルメチル；アセトキシエチル；フェニル；ベンジル；およびアミノとニトロから独立に選ばれた一つ以上の置換基を有する置換Ｃ_７−１５アリールアルキルから独立に選ばれた一つ以上の置換基を有する置換インダゾリルである。

ある具体例において、一般式（Ｉ）の化合物のＲ_１は、２−メチル−２Ｈ−インダゾリル、１−メチル−１Ｈ−インダゾリル、３−シクロプロピルカルボニル−１Ｈ−インダゾリル、１−ヒドロキシエチル−１Ｈ−インダゾリル、１Ｈ−インダゾリル、２−シクロプロピルメチル−２Ｈ−インダゾリル、３−アミノ−１Ｈ−インダゾリル、１−ベンジル−１Ｈ−インダゾリル、３−クロロ−１Ｈ−インダゾリル、６−クロロ−１Ｈ−インダゾリル、３−フェニル−１Ｈ−インダゾリル、１−ベンジル−３−フェニル−１Ｈ−インダゾリル、１−ニトロベンジル−１Ｈ−インダゾリル、１−アミノベンジル−１Ｈ−インダゾリル、２−メチル−３−シクロプロピルカルボニル−２Ｈ−インダゾリル、１−メチル−３−アミノカルボニル−１Ｈ−インダゾリル、カルボニル−インダゾリル、２−イソプロピル−２Ｈ−インダゾリル、２−アミノカルボニルメチル−２Ｈ−インダゾリル、１−シアノメチル−３−シクロプロピルカルボニル−１Ｈ−インダゾリル、２−シアノメチル−３−シクロプロピルカルボニル−２Ｈ−インダゾリル、１−モルホリニル−Ｎ−エチル−１Ｈ−インダゾリル、２−モルホリニル−Ｎ−エチル−２Ｈ−インダゾリル、２−ジメチルアミノカルボニルメチル−２Ｈ−インダゾリル、２−メトキシエチルプロピオンアミド−２Ｈ−インダゾリル、１−エトキシカルボニルメチル−１Ｈ−インダゾリル、２−エトキシカルボニルメチル−２Ｈ−インダゾリル、および１−アセトキシエチル−１Ｈ−インダゾリルよりなる群から選ばれる。

ある具体例において、一般式（Ｉ）の化合物のＲ_２、Ｒ_４およびＲ_５は、Ｃ_１−１２アルキルまたはアシル、カルボキシ、アルキルチオ、アミノカルボニル、モルホリニル、メチル−ピペラジニル、フェニル、シアノ、Ｃ_１−５アルキルアミノ、ジＣ_１−５アルキルアミノ、ヒドロキシル、Ｃ_１−６アルコキシ、およびフェニルスルホニルから独立に選ばれた一つ以上の置換基を有する置換Ｃ_１−１２アルキル；
Ｃ_２−１２アルケニルまたはアシル、カルボキシ、アルキルチオ、およびフェニルスルホニルから独立に選ばれた一つ以上の置換基を有する置換Ｃ_２−１２アルケニル；
アミドスルホネートで置換された置換Ｃ_６−１２アリール；
アリールＣ_１−４アルキルまたはアミノ、アミジノ、グアニジノ、ヒドラジノ、Ｃ_１−４アルキルアミノ、Ｃ_１−４ジアルキルアミノ、Ｃ_３−６シクロアルキル、ハロゲン、ペルフルオロＣ_１−４アルキル、Ｃ_１−６アルキル、アセチレニル、Ｃ_１−３アルコキシ、ニトロ、カルボキシ、シアノ、スルフリル、ヒドロキシル、Ｃ_１−６アルキルオキシＣ_１−６アシル、モルホリニルＣ_１−６アルキル、アリール、アリールオキシ、（アルキル）（アリールアルキル）アミノ、ヘテロシクリル、アシル、アミドスルホネート、アミノカルボニル、アルキルスルホネート、アルキルスルホニル、アルキルチオ、アリールチオ、フェニルスルホネート、フェニルスルホニル、モリホリニルＣ_１−３アルコキシ、Ｎ−ホルムアミジル、およびピロリドニルから独立に選ばれた一つ以上の置換基を有する置換アリールＣ_１−４アルキル；
ヘテロシクリルまたはアミノ、アミジノ、グアニジノ、ヒドラジノ、Ｃ_１−４アルキルアミノ、Ｃ_１−４ジアルキルアミノ、ハロゲン、ペルフルオロＣ_１−４アルキル、Ｃ_１−６アルキル、Ｃ_１−３アルコキシ、ニトロ、カルボキシ、シアノ、スルフリル、およびヒドロキシルから独立に選ばれた一つ以上の置換基を有する置換ヘテロシクリル；
ヘテロシクリルＣ_１−４アルキルまたはアミノ、アミジノ、グアニジノ、ヒドラジノ、Ｃ_１−４アルキルアミノ、Ｃ_１−４ジアルキルアミノ、Ｃ_３−６シクロアルキル、ハロゲン、ペルフルオロＣ_１−４アルキル、Ｃ_１−６アルキル、Ｃ_１−３アルコキシ、ニトロ、カルボキシ、シアノ、スルフリル、ヒドロキシル、Ｃ_１−６アルキルオキシＣ_１−６アシル、モルホリニルＣ_１−６アルキル、アリールアルキル、アリール、ヘテロシクリル、アシル、フェニルスルホニル、シクロアルキルアルキル、アシルオキシアルキル、アミノカルボニル、およびＣ_１−４アルキルホルムアミジルから独立に選ばれた一つ以上の置換基を有する置換ヘテロシクリルＣ_１−４アルキル；
シクロアルキルまたはアミノ、アミジノ、グアニジノ、ヒドラジノ、Ｃ_１−４アルキルアミノ、Ｃ_１−４ジアルキルアミノ、ハロゲン、ペルフルオロＣ_１−４アルキル、Ｃ_１−４アルキル、Ｃ_１−３アルコキシ、ニトロ、カルボキシ、シアノ、スルフリル、およびヒドロキシルから独立に選ばれた一つ以上の置換基を有する置換シクロアルキル；および
シクロアルキルアルキルまたはアミノ、アミジノ、グアニジノ、ヒドラジノ、Ｃ_１−４アルキルアミノ、Ｃ_１−４ジアルキルアミノ、ハロゲン、ペルフルオロＣ_１−４アルキル、Ｃ_１−４アルキル、Ｃ_１−３アルコキシ、ニトロ、カルボキシ、シアノ、スルフリル、およびヒドロキシルから独立に選ばれた一つ以上の置換基を有する置換シクロアルキルアルキルよりなる群から独立に選ばれる。

Ｒ_３は、
水素；
Ｃ_１−１２アルキルまたはアシル、カルボキシ、アルキルチオ、およびフェニルスルホニルから独立に選ばれた一つ以上の置換基を有する置換Ｃ_１−１２アルキル；
Ｃ_２−１２アルケニルまたはアシル、カルボキシ、アルキルチオ、およびフェニルスルホニルから独立に選ばれた一つ以上の置換基を有する置換Ｃ_２−１２アルケニル；
アミドスルホネートで置換された置換Ｃ_６−１２アリール；
アリールＣ_１−４アルキルまたはアミノ、アミジノ、グアニジノ、ヒドラジノ、Ｃ_１−４アルキルアミノ、Ｃ_１−４ジアルキルアミノ、Ｃ_３−６シクロアルキル、ハロゲン、ペルフルオロＣ_１−４アルキル、Ｃ_１−６アルキル、Ｃ_１−３アルコキシ、ニトロ、カルボキシ、シアノ、スルフリル、ヒドロキシル、Ｃ_１−６アルキルオキシＣ_１−６アシル、モルホリニルＣ_１−６アルキル、アリール、アリールオキシ、（アルキル）（アリールアルキル）アミノ、ヘテロシクリル、アシル、アミドスルホネート、アミノカルボニル、アルキルスルホネート、アルキルスルホニル、アルキルチオ、アリールチオ、フェニルスルホネート、フェニルスルホニル、モルホリニルＣ_１−３アルコキシ、Ｎ−ホルムアミジル、およびピロリドニルから独立に選ばれた一つ以上の置換基を有する置換アリールＣ_１−４アルキル；
ヘテロシクリルまたはアミノ、アミジノ、グアニジノ、ヒドラジノ、Ｃ_１−４アルキルアミノ、Ｃ_１−４ジアルキルアミノ、ハロゲン、ペルフルオロＣ_１−４アルキル、Ｃ_１−３アルコキシ、ニトロ、カルボキシ、シアノ、スルフリル、およびヒドロキシルから独立に選ばれた一つ以上の置換基を有する置換ヘテロシクリル；
ヘテロシクリルＣ_１−４アルキルまたはアミノ、アミジノ、グアニジノ、ヒドラジノ、Ｃ_１−４アルキルアミノ、Ｃ_１−４ジアルキルアミノ、Ｃ_３−６シクロアルキル、ハロゲン、ペルフルオロＣ_１−４アルキル、Ｃ_１−６アルキル、Ｃ_１−３アルコキシ、ニトロ、カルボキシ、シアノ、スルフリル、ヒドロキシル、Ｃ_１−６アルキルオキシＣ_１−６アシル、モルホリニルＣ_１−６アルキル、アリールアルキル、アリール、ヘテロシクリル、アシル、フェニルスルホニル、シクロアルキルアルキル、アシルオキシアルキル、アミノカルボニル、およびＣ_１−４アルキルホルムアミジルから独立に選ばれた一つ以上の置換基を有する置換ヘテロシクリルＣ_１−４アルキル；
シクロアルキルまたはアミノ、アミジノ、グアニジノ、ヒドラジノ、Ｃ_１−４アルキルアミノ、Ｃ_１−４ジアルキルアミノ、ハロゲン、ペルフルオロＣ_１−４アルキル、Ｃ_１−４アルキル、Ｃ_１−３アルコキシ、ニトロ、カルボキシ、シアノ、スルフリル、およびヒドロキシルから独立に選ばれた一つ以上の置換基を有する置換シクロアルキル；
シクロアルキルアルキルまたはアミノ、アミジノ、グアニジノ、ヒドラジノ、Ｃ_１−４アルキルアミノ、Ｃ_１−４ジアルキルアミノ、ハロゲン、ペルフルオロＣ_１−４アルキル、Ｃ_１−４アルキル、Ｃ_１−３アルコキシ、ニトロ、カルボキシ、シアノ、スルフリル、およびヒドロキシルから独立に選ばれた一つ以上の置換基を有する置換シクロアルキルアルキルよりなる群から選ばれる。

前述された化合物の具体例において、アリールＣ_１−４アルキルは、ベンジル、アセチレニルベンジル、Ｃ_１−４アルコキシベンジル、ヒドロキシベンジル、ビスフェニルメチル、ナフチルメチルまたは３，３−ビスフェニルプロピルであり；ヘテロシクリルＣ_１−４アルキルは、ベンゾトリアゾリルＣ_１−４アルキル、ベンゾピラゾリルＣ_１−４アルキル、インダゾリルＣ_１−４アルキル、イソキノリルＣ_１−４アルキル、ベンゾチアゾリルＣ_１−４アルキル、キノリニルＣ_１−４アルキル、イミダゾリニルＣ_１−４アルキル、チエニルＣ_１−４アルキル、テトラヒドロフラニルＣ_１−４アルキル、ピリジニルＣ_１−４アルキル、ベンズイミダゾリルＣ_１−４アルキル、またはインドリルＣ_１−４アルキルである。

ＥがＣＨＲ_３である具体例において、本発明のリバースターン類似体化合物は一般式（ＩＩ）の構造を有する。

ここで、Ｗは−（Ｃ＝Ｏ）−、−（Ｃ＝Ｏ）ＮＨ−、−（Ｃ＝Ｏ）Ｏ−、−（Ｃ＝Ｏ）Ｓ−、−Ｓ（Ｏ）_２−または結合であり；それぞれのＲ_１、Ｒ_２、Ｒ_３、Ｒ_４およびＲ_５は同一または異なり、独立にアミノ酸側鎖モエティ(moiety)またはアミノ酸側鎖誘導体である。

ある具体例において、一般式（ＩＩ）の化合物のＲ_１はインダゾリルまたは置換インダゾリルであり、すなわち、インダゾリルまたはＣ_１−７アルキル、Ｃ_６−１２アリール、Ｃ_７−１５アリールアルキル、置換Ｃ_７−１５アリールアルキル、シクロアルキルアルキル、ヒドロキシアルキル、Ｃ_１−１０アシル、アミノ、ハロゲン、ニトロ、Ｃ_２−１０アシルオキシアルキル、アミノカルボニル、アミノカルボニルアルキル、ジアルキルアミノカルボニルアルキル、アルコキシカルボニルアルキル、ヒドロキシアルキル、シアノＣ_１−３アルキル、モルホリニルＣ_１−３アルキル、アルコキシアルキルアミド、およびシクロアルキルカルボニルから独立に選ばれた一つ以上の置換基を有する置換インダゾリルである。

Ｒ_２、Ｒ_４およびＲ_６は、
Ｃ_１−１２アルキルまたはハロゲン、シアノ、Ｃ_１−６アルコキシ、アミノ、グアニジノ、Ｃ_１−４アルキルグアニジノ、ジＣ_１−４アルキルグアニジノ、アミジノ、Ｃ_１−４アルキルアミジノ、ジＣ_１−４アルキルアミジノ、Ｃ_１−５アルキルアミノ、ジＣ_１−５アルキルアミノ、アミノカルボニル、モルホリニル、メチル−ピペラジニル、フェニル、およびヒドロキシルから独立に選ばれた一つ以上の置換基を有する置換Ｃ_１−１２アルキル；
Ｃ_２−１２アルケニルまたはアミノ、グアニジノ、Ｃ_１−４アルキルグアニジノ、ジＣ_１−４アルキルグアニジノ、アミジノ、Ｃ_１−４アルキルアミジノ、ジＣ_１−４アルキルアミジノ、Ｃ_１−５アルキルアミノ、ジＣ_１−５アルキルアミノ、およびヒドロキシルから独立に選ばれた一つ以上の置換基を有する置換Ｃ_２−１２アルケニル；
Ｃ_６−１２アリールまたはハロゲン、アミノ、グアニジノ、Ｃ_１−４アルキルグアニジノ、ジＣ_１−４アルキルグアニジノ、アミジノ、Ｃ_１−４アルキルアミジノ、ジＣ_１−４アルキルアミジノ、Ｃ_１−５アルキルアミノ、ジＣ_１−５アルキルアミノ、およびヒドロキシルから独立に選ばれた一つ以上の置換基を有する置換Ｃ_６−１２アリール；
Ｃ_１−６アルコキシ；ジＣ_１−５アルキルアミノ；
窒素、酸素または硫黄から選ばれた一つまたは二つのヘテロ原子を有するＣ_６−１３ヘテロシクリルアルキル、または窒素、酸素または硫黄から選ばれた一つまたは二つのヘテロ原子を有し、ハロゲン、Ｃ_１−６アルキル、Ｃ_１−６アルコキシ、シアノ、およびヒドロキシルから独立に選ばれた一つ以上の置換基を有する置換Ｃ_６−１３ヘテロシクリルアルキル；および
Ｃ_７−１３アリールアルキルまたはアミノ、アミジノ、グアニジノ、ヒドラジノ、Ｃ_１−４アルキルアミノ、Ｃ_１−４ジアルキルアミノ、ハロゲン、ペルフルオロＣ_１−６アルキル、Ｃ_１−６アルコキシ、ニトロ、カルボキシ、シアノ、スルフリル、Ｃ_１−４アルキル、アセチレニル、ヒドロキシル、ホスフェート、ジメチルアミノアセテート、ジメチルアミノアルキルカルバメート、およびジエチル−ホスホノ−アセトアミドから独立に選ばれた一つ以上の置換基を有する置換Ｃ_７−１３アリールアルキルよりなる群から独立に選択される。

Ｒ_３は、
水素；
Ｃ_１−１２アルキルまたはハロゲン、シアノ、Ｃ_１−６アルコキシ、アミノ、グアニジノ、Ｃ-_１−４アルキルグアニジノ、ジＣ_１−４アルキルグアニジノ、アミジノ、Ｃ_１−４アルキルアミジノ、ジＣ_１−４アルキルアミジノ、Ｃ_１−５アルキルアミノ、ジＣ_１−５アルキルアミノ、およびヒドロキシルから独立に選ばれた一つ以上の置換基を有する置換Ｃ_１−１２アルキル；
Ｃ_２−１２アルケニルまたはアミノ、グアニジノ、Ｃ_１−４アルキルグアニジノ、ジＣ_１−４アルキルグアニジノ、アミジノ、Ｃ_１−４アルキルアミジノ、ジＣ_１−４アルキルアミジノ、Ｃ_１−５アルキルアミノ、ジＣ_１−５アルキルアミノ、およびヒドロキシルから独立に選ばれた一つ以上の置換基を有する置換Ｃ_２−１２アルケニル；
Ｃ_６−１２アリールまたはハロゲン、アミノ、グアニジノ、Ｃ_１−４アルキルグアニジノ、ジＣ_１−４アルキルグアニジノ、アミジノ、Ｃ_１−４アルキルアミジノ、ジＣ_１−４アルキルアミジノ、Ｃ_１−５アルキルアミノ、ジＣ_１−５アルキルアミノ、およびヒドロキシルから独立に選ばれた一つ以上の置換基を有する置換Ｃ_６−１２アリール；
Ｃ_１−６アルコキシ；
窒素、酸素または硫黄から選ばれた一つまたは二つのヘテロ原子を有するＣ_６−１３ヘテロシクリルアルキル、または窒素、酸素または硫黄から選ばれた一つまたは二つのヘテロ原子を有し、ハロゲン、Ｃ_１−６アルキル、Ｃ_１−６アルコキシ、シアノ、およびヒドロキシルから独立に選ばれた一つ以上の置換基を有する置換Ｃ_６−１３ヘテロシクリルアルキル；および
Ｃ_７−１３アリールアルキルまたはアミノ、アミジノ、グアニジノ、ヒドラジノ、Ｃ_１−４アルキルアミノ、Ｃ_１−４ジアルキルアミノ、ハロゲン、ペルフルオロＣ_１−６アルキル、Ｃ_１−６アルコキシ、ニトロ、カルボキシ、シアノ、スルフリル、およびヒドロキシルから独立に選ばれた一つ以上の置換基を有する置換Ｃ_７−１３アリールアルキルよりなる群から選ばれる。

前述された化合物の具体例において、一般式（ＩＩ）の化合物のＲ_１は、インダゾリルまたはメチル；イソプロピル；シクロプロピルメチル；ヒドロキシエチル；シクロプロピルカルボニル；アミノカルボニル；シアノメチル；モルホリニルエチル；アミノカルボニルメチル；ジメチルアミノカルボニルメチル；メトキシエチルプロピオンアミド；エトキシカルボニルメチル；アセトキシエチル；フェニル；ベンジル；およびアミノとニトロから独立に選ばれた一つ以上の置換基を有する置換Ｃ_７−１５アリールアルキルから独立に選ばれた一つ以上の置換基を有する置換インダゾリルであり、Ｒ_１の具体的な実施例は、ここに制限されないが、
２−メチル−２Ｈ−インダゾリル、１−メチル−１Ｈ−インダゾリル、３−シクロプロピルカルボニル−１Ｈ−インダゾリル、１−ヒドロキシエチル−１Ｈ−インダゾリル、１Ｈ−インダゾリル、２−シクロプロピルメチル−２Ｈ−インダゾリル、３−アミノ−１Ｈ−インダゾリル、１−ベンジル−１Ｈ−インダゾリル、３−クロロ−１Ｈ−インダゾリル、６−クロロ−１Ｈ−インダゾリル、３−フェニル−１Ｈ−インダゾリル、１−ベンジル−３−フェニル−１Ｈ−インダゾリル、１−ニトロベンジル−１Ｈ−インダゾリル、１−アミノベンジル−１Ｈ−インダゾリル、２−メチル−３−シクロプロピルカルボニル−２Ｈ−インダゾリル、１−メチル−３−アミノカルボニル−１Ｈ−インダゾリル、カルボニル−インダゾリル、２−イソプロピル−２Ｈ−インダゾリル、２−アミノカルボニルメチル−２Ｈ−インダゾリル、１−シアノメチル−３−シクロプロピルカルボニル−１Ｈ−インダゾリル、２−シアノメチル−３−シクロプロピルカルボニル−２Ｈ-インダゾリル、１−モルホリニル−Ｎ−エチル−１Ｈ−インダゾリル、２−モルホリニル−Ｎ−エチル−２Ｈ−インダゾリル、２−ジメチルアミノカルボニルメチル−２Ｈ−インダゾリル、２−メトキシエチルプロピオンアミド−２Ｈ−インダゾリル、１−エトキシカルボニルメチル−１Ｈ−インダゾリル、２−エトキシカルボニルメチル−２Ｈ−インダゾリル、および１−アセトキシエチル−１Ｈ−インダゾリルを含むことができる。

前述された化合物の具体例において、Ｒ_２およびＲ_５は、独立にＣ_１−１２アルキル、Ｃ_６−１２アリール、Ｃ_７−１２アリールアルキル、Ｃ_６−１１ヘテロシクリルアルキル、ヒドロキシベンジル、またはホスフェート、ジメチルアミノアセテート、（２−ジメチルアミノ−エチル）−カルバメート、およびジエチル−ホスホノ−アセトアミドから選ばれた置換基を有する置換ベンジルである。

Ｒ_３は水素またはＣ_１−１２アルキルである。

Ｒ_４はＣ_１−１２アルキル、Ｃ_７−１２アリールアルキル、またはＣ_２−１２アルケニルである。

これらの化合物は、適切な出発成分分子（以下、「構成断片」という）を用いることにより製造できる。要するに、一般式（Ｉ）を有するリバースターン類似体構造の合成において、前記式（Ｉ）のリバースターン類似体構造は、溶液内で順次行われる個別的な構成断片の連続的なカップリング、または固相ペプチド合成で通常実施されるような固相合成、および続く本発明のリバースターン類似体の構造を得るための環化によって製造できる。選択的に、第１および第２構成断片をカップリングすることにより、結合した第１−第２中間体を形成し、必要に応じて、第３および／または第４構成断片をカップリングすることにより、結合した第３−第４中間体（または、商業的に入手可能な場合、単一の第３中間体が使用されることも可能である）を形成し、しかる後に、前記結合した第１−第２中間体および第３−第４中間体（または第３中間体）をカップリングすることにより、第１−第２−第３−第４中間体（または第１−第２−第３中間体）を提供し、これを環化させて本発明のリバースターン類似体構造物を得る。

本発明の化合物を製造するための特定の構成断片およびそれらの組立体(assembly)は、図１に示されている。例えば、「第１構成断片」は下記の式Ｓ１を有することができる。

ここで、Ｒ_１は前記で定義したとおりであり、Ｒはペプチド合成への使用に適した保護基であり、ここで、この保護基は固相合成を行えるように高分子支持体に結合できる。好ましいＲ基はアルキル基を含み、好適な具体例において、Ｒはメチル基である。図１において、前記Ｒ基の一つは、図１において「Ｐｏｌ」で表示された高分子（固体）支持体である。このような第１構成断片は、ＣＨ（ＯＲ）_２−ＣＨＯとＨ_２Ｎ−Ｃ−Ｒ_１の還元的アミン化またはＨ_２Ｎ−Ｃ−Ｒ_１およびＣＨ（ＯＲ）_２−ＣＨ_２−ＬＧ（ここで、ＬＧは例えば、ハロゲン（Ｈａｌ）基としての離脱基を示す。）間の置換反応(displacement reaction)によって容易に合成できる。

「第２構成断片」は下記の一般式Ｓ２を有することができる。

ここで、Ｐはペプチド合成への使用に適したアミノ保護基であり、Ｌ_１はヒドロキシルまたはカルボキシル−活性化基であり、Ｒ_２は前記で定義したとおりである。好ましい保護基は、ｔ−ブチルジメチルシリル（ＴＢＤＭＳ）、ｔ−ブチルオキシカルボニル（ＢＯＣ）、メチルオキシカルボニル（ＭＯＣ）、９Ｈ−フルオレニルメチルオキシカルボニル（ＦＭＯＣ）、およびアリルオキシカルボニル（Ａｌｌｏｃ）を含む。Ｎ−保護アミノ酸は市販されており、例えば、ＦＭＯＣアミノ酸は多様な供給業者から市販される。前記第２構成断片を前記第１構成断片と反応させるために、Ｌ_１はカルボキシル活性化基であり、カルボキシル基の活性化されたカルボキシル基への転換はカルボキシル基の活性化に対する当該分野における公知の方法によって容易に達成できる。適切に活性化されたカルボン酸基は、Ｌ_１がクロライドまたはブロマイドなどのハロゲン化物としての酸ハロゲン化物、Ｌ_１がアセチルなどのアシル基としての酸無水物、Ｎ−ヒドロキシスクシニミドエステルおよびペンタフルオロフェニルエステルなどの反応性エステル、およびジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ）などのカルボジイミドを用いて、カップリング反応により形成された活性中間体のようなその他の活性化された中間体を含む。したがって、市販のＮ−保護アミノ酸は、当該分野における公知の手段によってカルボキシルの活性化された形態に転換できる。

前記第２構成断片として使用されるアミノ酸のアジド誘導体の場合、このような化合物は、文献『Zaloom et al. (J. Org. Chem. 46:5173-76, 1981)』に開示された反応による対応するアミノ酸から製造できる。

本発明の「第３構成断片」は、下記の一般式Ｓ３を有することができる。

ここで、Ｒ_４、ＥおよびＬ_１は前記で定義されたとおりである。適切な第３構成断片は多様な供給業者から市販されており、或いは有機化学でよく知られている方法によって製造できる。

図１は一般式（Ｉ）の化合物の製造を説明する。

したがって、上述したように、一般式（Ｉ）のリバースターン類似体化合物は、第１構成断片を第２構成断片と反応させ、結合した第１−第２中間体を得、前記結合した第１−第２中間体を第３構成断片と連続的に反応させ、結合した第１−第２−第３−第４中間体を提供し、しかる後に、この中間体を環化してリバースターン類似体構造を得ることにより合成できる。

本発明の代表的な構成断片の合成は製造実施例に記述される。

前記一般式（Ｉ）および（ＩＩ）のリバースターン類似体構造は、前記構成断片に対する適切な変形を有することを除いては、前記に開示されたモジュール構成要素合成(modular component synthesis)に類似した技術によって作られ得る。

本発明のリバースターン類似体構造は、生物活性剤、例えば診断用薬、予防薬および治療薬などとして有用である。例えば、本発明のリバースターン類似体構造は、有効量の前記一般式（Ｉ）の化合物を温血動物に投与することを含む方法により、温血動物において細胞シグナル転写因子関連ペプチドを調節するために使用できる。

また、本発明のリバースターン類似体は、温血動物でＰＴＢドメインに結合するペプチドを抑制すること；温血動物でＧＰＣＲ(G protein coupled receptor)およびイオンチャネルを調節すること；温血動物でサイトカインを調節することにより、効果的でありうる。

前記一般式（Ｉ）の化合物、特に一般式（ＩＩＩ）の化合物は、Ｗｎｔ−シグナル経路により調節される障害、例えば癌などを抑制または治療するのに効果的である。

一般式（ＩＩＩ）は前記のように表示され、ここで、それぞれのＲ_１、Ｒ_４およびＲ_６は同一または異なり、独立にアミノ酸側鎖モエティ(moiety)またはアミノ酸側鎖誘導体であり、Ｘ_１は水素、ヒドロキシル、またはハロゲンであり、Ｘ_２およびＸ_３は独立に水素、ヒドロキシル、または前記ホスフェート、カルボキシレート、カルバメートおよび置換アミンのようにプロドラッグを作ることが可能な任意の基であり得る。

一般式（ＩＩＩ）の化合物のある具体例において、
Ｒ_１は、インダゾリルまたはＣ_１−７アルキル、Ｃ_６−１２アリール、Ｃ_７−１５アリールアルキル、置換Ｃ_７−１５アリールアルキル、シクロアルキルアルキル、ヒドロキシアルキル、Ｃ_１−１０アシル、アミノ、ハロゲン、ニトロ、Ｃ_２−２０アシルオキシアルキル、アミノカルボニル、アミノカルボニルアルキル、ジアルキルアミノカルボニルアルキル、アルコキシカルボニルアルキル、ヒドロキシアルキル、シアノＣ_１−３アルキル、モルホリニルＣ_１−３アルキル、アルコキシアルキルアミドおよびシクロアルキルカルボニルから独立に選ばれた一つ以上の置換基を有する置換インダゾリルである。その置換基の具体的な例は、メチル；イソプロピル；シクロプロピルメチル；ヒドロキシエチル；シクロプロピルカルボニル；アミノカルボニル；シアノメチル；モルホリニルエチル；アミノカルボニルメチル；ジメチルアミノカルボニルメチル；メトキシエチルプロピオンアミド；エトキシカルボニルメチル；アセトキシエチル；フェニル；ベンジル；およびアミノとニトロから独立に選ばれた一つ以上の置換基を有する置換Ｃ_７−１５アリールアルキルである。

Ｒ_４はＣ_１−６アルキル、Ｃ_１−６アルコキシ、Ｃ_２−６アルケニルまたはペルフルオロＣ_１−６アルキルである。

Ｒ_６は、Ｃ_６−１２アリールまたはハロゲン、ヒドロキシル、シアノ、Ｃ_１−６アルキル、アセチレニル、およびＣ_１−６アルコキシよりなる群から選ばれた一つ以上の置換基を有する置換Ｃ_６−１２アリール；またはＣ_５−１２ヘテロシクリルまたはハロゲン、ヒドロキシル、シアノ、Ｃ_１−６アルキル、およびＣ_１−６アルコキシから独立に選ばれた一つ以上の置換基を有する置換Ｃ_５−１２ヘテロシクリルである。

Ｘ_１は水素、ヒドロキシルまたはハロゲンである。

それぞれのＸ_２およびＸ_３は独立に水素、ヒドロキシル、ホスフェート、ジメチルアミノアセテート、（２−ジメチルアミノ−エチル）−カルバメート、ジエチル−ホスホノ−アセトアミドまたはハロゲンである。

前述された化合物の具体例において、
Ｒ_１は、２−メチル−２Ｈ−インダゾリル、１−メチル−１Ｈ−インダゾリル、３−シクロプロピルカルボニル−１Ｈ−インダゾリル、１−ヒドロキシエチル−１Ｈ−インダゾリル、１Ｈ−インダゾリル、２−シクロプロピルメチル−２Ｈ−インダゾリル、３−アミノ−１Ｈ−インダゾリル、１−ベンジル−１Ｈ−インダゾリル、３−クロロ−１Ｈ−インダゾリル、６−クロロ−１Ｈ−インダゾリル、３−フェニル−１Ｈ−インダゾリル、１−ベンジル−３−フェニル−１Ｈ−インダゾリル、１−ニトロベンジル−１Ｈ−インダゾリル、１−アミノベンジル−１Ｈ−インダゾリル、２−メチル−３−シクロプロピルカルボニル−２Ｈ−インダゾリル、１−メチル−３−アミノカルボニル−１Ｈ−インダゾリル、カルボニル−インダゾリル、２−イソプロピル−２Ｈ−インダゾリル、２−アミノカルボニルメチル−２Ｈ−インダゾリル、１−シアノメチル−３−シクロプロピルカルボニル−１Ｈ−インダゾリル、２−シアノメチル−３−シクロプロピルカルボニル−２Ｈ−インダゾリル、１−モルホリニル−Ｎ−エチル−１Ｈ−インダゾリル、２−モルホリニル−Ｎ−エチル−２Ｈ−インダゾリル、２−ジメチルアミノカルボニルメチル−２Ｈ−インダゾリル、２−メトキシエチルプロピオンアミド−２Ｈ−インダゾリル、１−エトキシカルボニルメチル−１Ｈ−インダゾリル、２−エトキシカルボニルメチル−２Ｈ−インダゾリル、および１−アセトキシエチル−１Ｈ−インダゾリルよりなる群から選ばる。

Ｒ_４はＣ_１−３アルキルまたはアリルである。

Ｒ_６はフェニルまたはハロゲン、ヒドロキシル、シアノ、Ｃ_１−６アルキル、アセチレニル、およびＣ_１−６アルコキシから独立に選ばれた一つ以上の置換基を有する置換フェニル；またはピリジルまたはハロゲン、ヒドロキシル、シアノ、Ｃ_１−６アルキル、およびＣ_１−６アルコキシから独立に選ばれた一つ以上の置換基を有する置換ピリジルである。

本発明の他の側面で、一般式（Ｉ）を有する化合物から誘導されたプロドラッグが開示される。前記プロドラッグは、一般に、一般式（Ｉ）を有する化合物の水溶液に対する溶解度を増加させ、それによりバイオアベイラビリティも増加させる。ある具体例において、本発明のプロドラッグは、下記の一般式（ＩＶ）を有する。
（ＩＩＩ）−Ｒ_７（ＩＶ）
ここで、Ｒ_１、Ｒ_４、Ｒ_６、Ｘ_１、Ｘ_２、およびＸ_３のいずれか一つはＹを介してＲ_７に連結され、ここで：
ＹはＲ_１、Ｒ_４、またはＲ_６中の酸素、硫黄、または窒素であり、またはＸ_１、Ｘ_２またはＸ_３中の酸素であり；
Ｒ_７はヒドロキシアルキル、グリコシル、ホスホリルオキシメチルオキシカルボニル、置換または非置換のピペリジンカルボニルオキシ、またはこれらの塩であり；またはＹ−Ｒ_７はアミノ酸残基、アミノ酸残基の組み合わせ、ホスフェート、ヘミマレート、ヘミスクシネート、ジメチルアミノアルキルカルバメート、ジメチルアミノアセテート、またはこれらの塩であり；
Ｒ_７に連結されないとき：Ｒ_１、Ｒ_４、Ｒ_６、Ｘ_１、Ｘ_２、およびＸ_３は一般式（ＩＩＩ）での定義と同様に定義される。

本発明の他の側面で、本発明のリバースターン類似体構造を含有するライブラリーが開示される。本発明のライブラリーは、一応組み立てられると、生物活性を有する個別的なメンバーを同定するためにスクリーニングできる。このような生物活性メンバーに対する前記ライブラリーのスクリーニングは、例えば、ライブラリーのメンバーの結合活性を評価すること、または前記ライブラリーメンバーが有する機能検査に対する効果を評価することを伴うことができる。スクリーニングは、通常、前記ライブラリーメンバー（またはサブセットライブラリーメンバー）を、例えば抗体、酵素、受容体または細胞株のように、関心のあるターゲットと接触させることにより行われる。前記関心のあるターゲットと相互作用することが可能なライブラリーメンバーは、ここで「生物活性ライブラリーメンバー」または「生物活性類似体」として言及される。例えば、生物活性類似体は、抗体または受容体と結合することができるか、或いは酵素を抑制することができるか、或いは例えば、細胞株に連関した機能的な反応を引き出しまたは拮抗することが可能なライブラリーメンバーである。言い換えれば、本発明のライブラリーのスクリーニングは、一つ以上の関心のある生物学的標的と相互作用を行うことが可能ないずれかのライブラリーメンバーを決定する。ひいては、相互作用が起こる場合、前記生物活性類似体（または類似体）が前記ライブラリーメンバーから同定されることも可能である。前記ライブラリーから単一（または制限された数）の生物活性類似体を同定すれば、それ自体で生物学的活性があって診断、予防または治療物質として有用であり、また、この分野で鉛化合物の同定を相当発展させるのに使用されることも可能なリバースターン類似体が収得される。

本発明のライブラリーのペプチド類似体の合成は、本発明の一番目、二番目および三番目の構成断片の組み合わせで公知のペプチド合成技術を用いて行われ得る。より具体的に、任意のアミノ酸シーケンスは、コンフォメーションが制限されたリバースターン類似体のＮ−末端および／またはＣ−末端に付加できる。この目的のために、前記類似体は、公知の技術（例えば、John M. Stewart and Janis D. Young, Solid Phase Peptide Synthesis, 1984, Pierce Chemical Comp., Rockford, Ill参照）によって固体支持体上で合成されるか、或いはアルコール付着によるシリルリンクレジン上で合成されることも可能である（Randolph et al., J. Am Chem. Soc. 117:5712-14, 1995参照）。

また、溶液および固相合成技術の組み合わせは、本発明のペプチド類似体を合成するために利用できる。例えば、固体支持体は、前記コンフォメーションが制限されたリバースターンがシーケンスに付加される地点まで線形ペプチドシーケンスを合成するために利用できる。しかる後に、溶液合成技術によって予め合成された適切なコンフォメーションが制限されたリバースターン類似体構造は、次の「アミノ酸」として固相合成に付加できる（すなわち、Ｎ末端）およびＣ末端を全て有する、コンフォメーションが制限されたリバースターン類似体は線形ペプチドに付加される次のアミノ酸として利用できる）。前記コンフォメーションが制限されたリバースターン類似体構造の前記シーケンスへの混入(incorporation)によって、その後、追加的なアミノ酸が前記固体支持体に結合したペプチドを完成するように付加できる。選択的に、前記線形Ｎ末端およびＣ末端保護ペプチドシーケンスは、固体支持体上で合成され、その支持体から単離され、しかる後に、公知の溶液カップリング技術を用いて、溶液中で前記コンフォメーションが制限されたリバースターン類似体構造にカップリングできる。

本発明の一つの側面で、前記ライブラリーを構成するための方法が開示される。伝統的な組み合わせ化学技術（例えば、Gallop et al., J. Med. Chem. 37:1233-1251, 1994参照）は膨大な数の化合物が基本的な分子足場への試薬の順次的組み合わせによって迅速に製造できるようにする。組み合わせ技術は、天然アミノ酸から誘導されたペプチドライブラリーを構成するために使用されている。例えば、２０個の適宜保護される相異なるアミノ酸から２０個の混合物を取り、それぞれの２０個のアミノ酸中の一つとカップリングさせることにより、４００個（すなわち、２０^２）のジペプチドのライブラリーが作られる。前記手順を７回繰返し行うことは、約２６０億（すなわち、２０^８）個のオクタペプチドからなるペプチドライブラリーの製造をもたらす。

具体的に、本発明のライブラリーのペプチド類似体の合成は、公知のペプチド合成技術、例えば、次のリバースターン類似体ライブラリーの一般的な反応を用いて行われる。

本発明に係るライブラリーの前記ペプチド類似体の合成は、公知の技術によって９６ウェルプレートを有するＦｌｅｘＣｈｅｍＲｅａｃｔｏｒＢｌｏｃｋを用いて行われた。前記反応スキームにおいて、「Ｐｏｌ」はブロモアセタールレジン（ＡｄｖａｎｃｅｄＣｈｅｍＴｅｃｈ）を示し、その詳細な手順は下記に説明される。

段階１
ブロモアセタールレジン（３７ｍｇ、０．９８ｍｍｏｌ／ｇおよびＤＭＳＯ（１．４ｍＬ）中のＲ_１−アミン溶液を、９６ウェルプレートを有するＲｏｂｂｉｎｓｂｌｏｃｋ（ＦｌｅｘＣｈｅｍ）内に設置した。前記反応混合物を回転オーブン（ＲｏｂｂｉｎｓＳｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）を用いて６０℃で１２時間振とうした。前記レジンをＤＭＦ、ＭｅＯＨおよびＤＣＭで順次洗浄した。

段階２
市販のＦｍｏｃ−ＮＨ−ＣＨ（Ｒ_２）−ＣＯＯＨ（４当量）溶液、ＰｙＢｏｂ（４当量）、ＨＯＡｔ（４当量）、およびＤＭＦ中のＤＩＥＡ（１２当量）を前記レジンに添加した。前記反応混合物を室温で１２時間振とうした後、前記レジンをＤＭＦ、ＭｅＯＨよびＤＣＭで順次洗浄した。

段階３
反応の前にＤＭＦによって膨潤した前記レジンにＤＭＦ中の２５％ピペリジンを添加し、前記反応混合物を室温で３０分間振とうした。この脱保護段階をさらにさらに繰返し行い、前記レジンをＤＭＦ、ＭｅＯＨおよびＤＣＭで順次洗浄した。ＤＭＦ中のヒドラジン酸（４当量）、ＨＯＢｔ（４当量）、およびＤＩＣ（４当量）の溶液を前記レジンに添加し、前記反応混合物を室温で１２時間振とうした。前記レジンをＤＭＦ、ＭｅＯＨおよびＤＣＭで順次洗浄した。

段階４
段階３で得た前記レジンを室温で１８時間蟻酸（各ウェル当り１．２ｍＬ）で処理した。前記レジンは濾過によって除去した後、各濾過液をＳｐｅｅｄＶａｃ［ＳＡＶＡＮＴ］を用いて減圧の下に濃縮して油状の生成物を得た。前記生成物を５０％水／アセトニトリルで希釈し、凍らせた後、凍結乾燥させた。

これらのブロックライブラリーを作るために、核心中間体であるヒドラジン酸を、製造実施例１に説明された手順によって合成した。

表２は本発明によって製造された前記化合物を示し、それらの代表的な製造については製造例に記載した。

表２：リバースターン類似体ライブラリー

下記のものは、前記手順によって製造された幾つかの化合物のＮＭＲデータである。

（６Ｓ，９ａＳ）−８−（（１Ｈ−インダゾリル−７−イル）メチル）−２−アリル−Ｎ−ベンジル−６−（４−ヒドロキシ−ベンジル）−４，７−ジオキソ−ヘキサヒドロ−２Ｈ−ピラジノ［２，１−ｃ］［１，２，４］トリアジン−１（６Ｈ）−カルボキサミド（表２の化合物Ｎｏ．３）
¹H NMR (CDCl₃, 300 MHz) δ 8.09 (s, 1H), δ 7.73 (d, J = 3.0 Hz, 1H), δ 7.37-7.22 (m, 5H), δ 7.11-7.03 (m, 2H), δ 6.90 (d, J = 9.0 Hz, 1H), δ 6.74 (d, J = 6.0 Hz, 1H), δ 6.57 (d, J = 6.0 Hz, 2H), δ 5.65-4.56 (m, 1H), δ 5.48-5.35 (m, 1H), δ 5.31 (t, J = 3.0 Hz, 1H), δ 5.16-4.95 (m, 3H), δ 4.55 (d, J = 15.0 Hz, 1H), δ 4.40-4.12 (m, 2H), δ 3.46-3.23 (m, 8H)

（６Ｓ，９ａＳ）−２−アリル−Ｎ−ベンジル−６−（４−ヒドロキシ−ベンジル）−８−（（１−（３−ニトロベンジル）−１Ｈ−インダゾール−７−イル）メチル）−４，７−ジオキソ−ヘキサヒドロ−２Ｈ−ピラジノ［２，１−ｃ］［１，２，４］トリアジン−１（６Ｈ）−カルボキサミド（表２の化合物Ｎｏ．２０）
¹H NMR (CDCl₃, 300 MHz) δ 8.24 (s, 1H), δ 8.09 (d, J = 9.0 Hz, 1H), δ 7.83-7.12 (m, 3H), δ 7.10 (t, J = 9.0 Hz, 1H), δ7.32-7.17 (m, 4H), δ 7.10 (t, J = 9.0 Hz, 1H), δ 6.92-6.83 (m, 3H), δ 6.61 (d, J = 9.0 Hz, 1H), δ 5.79-5.68 (m, 1H), δ 5.41-5.36 (m, 1H), δ5.12-4.88 (m, 4H), δ 4.65 (d, J = 18.0 Hz, 1H), δ 4.28-4.18 (m, 2H), δ3.55-3.40 (m, 4H), δ 3.25-3.07 (m, 3H), δ 2.85 (dd, J = 3.0 Hz, J = 12.0 Hz,1H)

（６Ｓ，９ａＳ）−２−アリル−８−（（１−（３−アミノベンジル）−１Ｈ−インダゾール−７−イル）メチル）−Ｎ−ベンジル−６−（４−ヒドロキシ−ベンジル）−４，７−ジオキソ−ヘキサヒドロ−２Ｈ−ピラジノ［２，１−ｃ］［１，２，４］トリアジン−１（６Ｈ）−カルボキサミド（表２の化合物Ｎｏ．６）
¹H NMR (CDCl₃, 300 MHz) δ 8.09 (s, 1H), δ 7.73-7.68 (m, 1H), δ 7.38-7.21 (m, 5H), δ 7.11 (t, J = 9.0 Hz, 1H), δ 7.00-6.95 (m, 4H), δ 6.69-6.64 (m, 3H), δ 6.44 (d, J = 9.0 Hz, 1H), δ 6.23-6.18 (m, 2H), δ 5.71 (s, 2H), δ5.59-5.49 (m, 1H), δ 5.41-5.34 (m, 1H), δ 5.18-5.13 (m, 2H), δ 5.04 (d, J = 9.0 Hz, 1H), δ 4.84 (t, J = 15.0 Hz, 2H), δ 4.45-4.25 (m, 2H), δ3.44-3.22 (m, 6H), δ 2.99-2.95 (m, 2H)

ソジウム４−（（（６Ｓ，９ａＳ）−８−（（１Ｈ−インダゾール−７−イル）メチル）−２−アリル−１−（ベンジルカルバモイル）−４，７−ジオキソ−オクタヒドロ−１Ｈ−ピラジノ［２，１−ｃ］［１，２，４］トリアジン−６−イル）メチル）フェニルホスフェート（表２の化合物Ｎｏ．２３）
¹H NMR (CDCl₃, 300 MHz) δ 8.08 (s, 1H), δ 7.72 (t, J = 6.0 Hz, 1H), δ 7.34-7.09 (m, 6H), δ 7.00-6.92 (m, 3H), δ 5.56-5.47 (m, 1H), δ 5.40-5.36 (m, 1H), δ 5.18 (t, J = 6.0 Hz, 1H), δ 4.92-4.57 (m, 5H), δ 4.33-4.14 (m, 2H), δ 3.61-3.48 (m, 2H), δ 3.28-3.14 (m, 5H)

（６Ｓ，９ａＳ）２−アリル−６−（４−ヒドロキシ−ベンジル）−８−（１Ｈ−インダゾール−４−イルメチル）−４，７−ジオキソ−ヘキサヒドロ−ピラジノ［２，１−ｃ］［１，２，４］トリアジン−１−カルボン酸ベンジルアミド（表２の化合物Ｎｏ．２） ¹H NMR(CDCl₃, 300 MHz) δ 9.23 (s, 1H), 8.10 (s, 1H), 7.80 (t, J = 6.3 Hz, 1H), 7.17-7.48 (m, 8H), 6.85 (t, J = 8.4 Hz, 3H), 6.65 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 5.72-5.77 (m, 1H), 5.36-5.41 (dd, J = 3.6 Hz, 10.8 Hz, 1H), 4.89-5.09 (m, 5H), 4.64 (d, J = 15 Hz, 1H), 4.13-4.22 (m, 2H), 3.39-3.60 (m, 2H), 3.02-3.25 (m, 8H)

（６Ｓ，９ａＳ）−２−アリル−Ｎ−ベンジル−６−（４−ヒドロキシ−ベンジル）−８−（（２−メチル−２Ｈ−インダゾール−７−イル）メチル）−４，７−ジオキソ−ヘキサヒドロ−２Ｈ−ピラジノ［２，１−ｃ］［１，２，４］トリアジン−１（６Ｈ）−カルボキサミド（表２の化合物Ｎｏ．１８）
¹H NMR (CDCl₃, 300 MHz) δ 7.88 (s, 1H), δ 7.59 (d, J = 9.0 Hz, 1H), δ 7.38-7.22 (m, 4H), δ 7.12-7.03 (m, 2H), δ 6.94 (d, J = 9.0 Hz, 2H), δ 6.71 (t, J = 6.0 Hz, 1H), δ 6.58 (d, J = 6.0 Hz, 2H), δ5.61-5.49 (m, 2H), δ 5.35 (t, J = 6.0 Hz, 1H), δ 5.11-4.91 (m, 1H), δ4.40-4.34 (m, 2H), δ 4.17 (s, 3H), δ 3.40-3.25 (m, 6H)

（６Ｓ，９ａＳ）２−アリル−６−（４−ヒドロキシ−ベンジル）−８−（１−メチル−１Ｈ−インダゾール−４−イルメチル）−４，７−ジオキソ−ヘキサヒドロ−ピラジノ［２，１−ｃ］［１，２，４］トリアジン−１−カルボン酸ベンジルアミド（表２の化合物Ｎｏ．１９）
¹H NMR(CDCl₃, 300 MHz) δ 8.08 (s, 1H), 7.21-7.38 (m, 8H), 6.99 (d, J = 8.4 Hz), 6.89-6.94 (m, 1H), 6.62-6.69 (m, 3H), 5.40-5.59 (m, 2H), 5.34 (t, J = 5.4 Hz, 1H), 5.17-5.23 (m, 1H), 5.07 (d, J = 10.5 Hz, 1H), 4.67-4.96 (m, 2H), 4.26-4.45 (m, 1H), 4.08 (s, 3H), 3.23-3.44 (m, 9H)

リン酸モノ−｛４−［（６Ｓ，９ａＳ）２−アリル−１−ベンジルカルバモイル−８−（１−メチル−１Ｈ−インダゾール−４−イルメチル）−４，７−ジオキソ−オクタヒドロ−ピラジノ［２，１−ｃ］［１，２，４］トリアジン−６−イルメチル］−フェニル｝エステルジナトリウム塩（表２の化合物Ｎｏ．３０）
¹H NMR(D₂O, 300 MHz) δ 7.99 (s, 1H), 7.09-7.44 (m, 12H), 6.91 (d, J = 6.3 Hz, 1H), 5.58-5.61 (m, 2H), 5.32 (t, J = 6.3 Hz, 1H), 4.96-5.01 (m, 2H), 4.63-4.77 (m, 2H), 4.23-4.46 (m, 2H), 3.98 (s, 3H), 3.52-3.82 (m, 3H), 3.25-3.37 (m, 6H)

（６Ｓ，９ａＳ）２−アリル−８−（２−シクロプロピルメチル−２Ｈ−インダゾール−７−イルメチル）−６−（４−ヒドロキシ−ベンジル）−４，７−ジオキソ−ヘキサヒドロ−ピラジノ［２，１−ｃ］［１，２，４］トリアジン−１−カルボン酸ベンジルアミド（表２の化合物Ｎｏ．１４）
¹H NMR ( CDCl₃) : d8.041 (s, 1H), 7.641-7.599 (d, J =12.6 Hz, 1 H), 7.371-6.957 (m, 9 H), 6.723-6.669 (t, J =12.3 Hz, 1 H), 6.613-6.585 (d, J =8.4 Hz, 2 H), 5.652-5.561 (dt , J = 3.9 Hz, J = 10.5 Hz, 2 H), 5.162-4.853 (m, 4 H), 4.444-4.287 (dt , J = 6.0 Hz, J = 15.0 Hz, 2 H), 4.266-4.242 (d, J = 7.2 Hz, 2 H), 3.682-3.537 (m, 8 H)

リン酸モノ−｛４−［（６Ｓ，９ａＳ）２−アリル−１−ベンジルカルバモイル−８−（２−シクロプロピルメチル−２Ｈ−インダゾール−７−イルメチル）−４，７−ジオキソ−オクタヒドロ−ピラジノ［２，１−ｃ］［１，２，４］トリアジン−６−イルメチル］−フェニル｝エステルエステルジナトリウム塩（表２の化合物Ｎｏ．３１）
¹H NMR ( D₂O) : d8.179 (s, 1 H), 7.629-7.604 (d, J =7.5 Hz, 1 H), 7.341-7.002 (m, 11 H), 5.666-5.433 (m, 2 H), 5.298-5.257 (t, J =6.6 Hz, 1 H), 5.070-5.019 (d, J =15.3 Hz, 1 H), 4.834-4.723 (m, 1 H), 4.517-4.460 (d, J = 17.1 Hz, 1 H), 4.419-4.367 (d, J = 15.6 Hz, 1 H), 4.245-4.136 (m, 3 H), 3.656-3.598 (d, J = 17.4 Hz, 1 H), 3.539-3.463 (t, J = 11.7 Hz, 1 H), 3.384-3.151 (m, 6 H), 1.330-1.239 (tt, J = 7.5 Hz, J = 2.4 Hz, 1 H), 0.546-0.323 (m, 4 H)

リン酸モノ−｛４−［（６Ｓ，９ａＳ）２−アリル−１−ベンジルカルバモイル−８−（１Ｈ−インダゾール−４−イルメチル）−４，７−ジオキソ−オクタヒドロ−ピラジノ［２，１−ｃ］［１，２，４］トリアジン−６−イルメチル］−フェニル｝エステルジナトリウム塩（表２の化合物Ｎｏ．３３）
¹H NMR(D₂O, 300 MHz) δ 8.18 (s, 1H), 7.67 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 7.31-7.52 (m, 6H), 7.06-7.14 (m, 6H), 5.53-5.65 (m, 2H), 5.34 (t, J = 5.1 Hz, 1H), 5.01-5.16 (m, 2H), 4.67-4.90 (m, 3H), 4.28-4.47 (m, 2H), 3.57-3.75 (m, 2H), 3.32-3.43 (m, 7H)

（６Ｓ，９ａＳ）２−アリル−８−（３−アミノ−１Ｈ−インダゾール−７−イルメチル）−６−（４−ヒドロキシ−ベンジル）−４，７−ジオキソ−ヘキサヒドロ−ピラジノ［２，１−ｃ］［１，２，４］トリアジン−１−カルボン酸ベンジルアミド（表２の化合物Ｎｏ．５）
¹H NMR (CDCl₃, 300 MHz) δ 7.60 (d, J = 8.1 Hz, 1H), δ 7.53-7.25 (m, 5H), δ 7.13 (d, J = 6.9 Hz, 1H), δ 7.01 (t, J = 7.5 Hz, 1H), δ 6.84 (d, J = 8.1 Hz, 2H), δ 6.65 (t, J = 5.7 Hz, 1H), δ 6.57 (d, J = 8.1 Hz, 2H), δ 5.70-5.61 (m, 1H), δ 5.28 (t, J = 5.7 Hz, 1H), δ 5.21 (d, J = 10.2 Hz, 1H), δ 5.09 (d, J = 17.1 Hz, 1H), δ 4.95-4.91 (m, 2H), δ 4.55 (d, J = 14.4 Hz, 1H), δ 4.45 (dd, J = 6.3 Hz , J = 14.7 Hz, 1H), δ 4.34 (dd, J = 6.0 Hz , J = 15.0 Hz, 1H), δ 3.52-3.27 (m, 7H)

酢酸２−｛７−［（６Ｓ，９ａＳ）２−アリル−１−ベンジルカルバモイル−６−（４−ヒドロキシ−ベンジル）−４，７−ジオキソ−オクタヒドロ−ピラジノ［２，１−ｃ］［１，２，４］トリアジン−８−イルメチル］−インダゾール−１−イル｝−エチルエステル（表２の化合物Ｎｏ．１１）
¹H NMR(CDCl₃, 300 MHz) δ 8.05 (s, 1H), 7.71 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.22-7.38 (m, 6H), 7.12 (t, J = 7.2 Hz, 1H), 6.97-7.03 (m, 3H), 6.68-6.71 (m, 3H), 5.30-5.56 (m, 4H), 4.99-5.06 (m, 2H), 4.75-4.88 (m, 3H), 4.27-4.47 (m, 4H), 3.25-3.47 (m, 9H), 1.91 (s, 3H)

（６Ｓ，９ａＳ）２−アリル−６−（４−ヒドロキシ−ベンジル）−８−［１−（２−ヒドロキシ−エチル）−１Ｈ−インダゾール−７−イルメチル］−４，７−ジオキソ−ヘキサヒドロ−ピラジノ［２，１−ｃ］［１，２，４］トリアジン−１−カルボン酸ベンジルアミド(表２の化合物Ｎｏ．１７)
¹H NMR(CDCl₃, 300 MHz) δ 8.04 (s, 1H), 7.70 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 7.21-7.38 (m, 5H), 6.99-7.12 (m, 5H), 6.66-6.69 (m, 3H), 5.44-5.55 (m, 3H), 5.35 (t, J = 5.1 Hz, 1H), 4.90-5.01 (m, 2H), 4.56-4.77 (m, 3H), 4.24-4.44 (m, 2H), 4.03-4.11 (m, 2H), 3.17-3.48 (m, 8H), 3.02 (t, J = 5.7 Hz, 1H)

（６Ｓ，９ａＳ）２−アリル−８−（３−クロロ−１Ｈ−インダゾール−７−イルメチル）−６−（４−ヒドロキシ−ベンジル）−４，７−ジオキソ−ヘキサヒドロ−ピラジノ［２，１−ｃ］［１，２，４］トリアジン−１−カルボン酸ベンジルアミド（表２の化合物Ｎｏ．１５）
¹H NMR ( CDCl₃) : d11.506 (s, 1 H), 7.697-7.670 (d, J =8.1 Hz, 1 H), 7.392-7.096 (m, 8 H), 6.912-6.884 (d, J = 8.4 Hz, 2 H), 6.738-6.698 (t, J = 6.0 Hz, 1 H), 6.556-6.529 (d, J = 8.4 Hz, 2 H), 5.682-5.549 (dt, J = 6.3 Hz, J = 10.2 Hz, 1 H), 5.366-5.291 (m, 2 H), ), 5.187-5.153(d, J = 10.2 Hz, 1 H), 5.075-5.039 (d, J = 10.8 Hz, 1 H), 5.028-4.982 (d, J = 13.8 Hz, 1 H), 4.572-4.4.524 (d, J = 14.4 Hz, 1 H), 4.462-4.294 (dt, J = 6.0 Hz, J = 15.0 Hz, 2 H), 3.439-3.253 (m, 8 H)

リン酸モノ−｛４−［（６Ｓ，９ａＳ）２−アリル−１−ベンジルカルバモイル−８−（３−クロロ−１Ｈ−インダゾール−７−イルメチル）−４，７−ジオキソ−オクタヒドロ−ピラジノ［２，１−ｃ］［１，２，４］トリアジン−６−イルメチル］−フェニル｝エステルジナトリウム塩（表２の化合物Ｎｏ．３５）
¹H NMR ( D₂O) : d7.604-7.574 (t, J =9.0 Hz, 1 H) 7.369-7.166 (m, 7 H), 7.071-6.991 (q, J =6.0 Hz, 4 H), 5.640-5.447 (m, 2 H), 5.262-5.223 (t, J = 6.0 Hz, 1 H), 4.965-4.931 (d, J = 10.2 Hz, 1 H), 4.894-4.683 (m, 3 H), 4.392-4.183 (dd, J = 15.6 Hz, J = 47.4 Hz, 2 H), 3.678-3.250 (m, 8 H)

（６ａ，９ａＳ）２−アリル−８−（１−ベンジル−３−フェニル−１Ｈ−インダゾール−７−イルメチル）−６−（４−ヒドロキシ−ベンジル）−４，７−ジオキソ−ヘキサヒドロ−ピラジノ［２，１−ｃ］［１，２，４］トリアジン−１−カルボン酸ベンジルアミド（表２の化合物Ｎｏ．１０）
¹H NMR ( CDCl₃) : d 7.538-7.186 (m, 17 H), 7.110-6.951 (m, 3 H), 6.979-6.951 (d, J = 8.4 Hz, 2 H), 6.738-6.697 (t, J = 6.0 Hz, 1 H), 6.622-6.593 (d, J = 8.4 Hz, 2 H), 5.676-5.499 (m, 4 H), 5.367-5.329 (t, J = 5.7 Hz, 1 H), 5.120-4.984 (q, J = 15.0 Hz, 2 H), 5.059-5.034 (d, J = 7.5 Hz, 1 H), 4.984-4.884 (d, J = 30 Hz, 1 H), 4.478-4.303 (dt, J = 6.0 Hz, J = 15.0 Hz, J = 26.3 Hz, 2 H), 3.766-3.601 (m, 2 H), 3.452-3.224 (m, 6 H)

（６Ｓ，９ａＳ）２−アリル−６−（４−ヒドロキシ−ベンジル）−４，７−ジオキソ−８−（３−フェニル−１Ｈ−インダゾール−７−イルメチル）−ヘキサヒドロ−ピラジノ［２，１−ｃ］［１，２，４］トリアジン−１−カルボン酸ベンジルアミド（表２の化合物Ｎｏ．２１）
¹H NMR ( CDCl₃) : d8.037-8.012 (d, J = 7.5 Hz, 1 H), 7.997-7.973 (d, J = 7.2 Hz, 2 H), 7.522-7.472 (t, J = 7.2 Hz, 2 H), 7.522-7.100 (m, 10 H), 6.926-6.898 (d, J = 8.4 Hz, 2 H), 6.726-6.686 (t, J = 6.0 Hz, 1 H), 6.557-6.529 (d, J = 8.4 Hz, 2 H), 5.690-5.539 (dt, J = 6.0 Hz, J = 10.2 Hz, 1 H), 5.374-5.292 (m, 2 H), 5.175-5.141 (d, J = 10.5 Hz, 1 H), 5.110-5.062 (d, J = 14.4 Hz, 1 H), 5.027-4.970 (d, J = 17.1 Hz, 1 H), 4.614-4.566 (d, J = 14.4 Hz, 1 H), 4.458-4.284 (ddd, J = 6.0 Hz, J = 14.7 Hz J = 20.7 Hz,2 H), 3.491-3.228 (m, 8 H)

（６Ｓ，９ａＳ）２−アリル−８−（１−ベンジル−１Ｈ−インダゾール−３−イルメチル）−６−（４−ヒドロキシ−ベンジル）−４，７−ジオキソ−ヘキサヒドロ−ピラジノ［２，１−ｃ］［１，２，４］トリアジン−１−カルボン酸ベンジルアミド（表２の化合物Ｎｏ．９）
¹H NMR ( CDCl₃) : d7.984-7.957 (d, J = 8.1 Hz, 1 H), 7.397-7.129 (m, 14 H), 6.938-6.910 (d, J = 8.4 Hz, 2 H), 6.695-6.654 (t, J = 6.0 Hz, 1 H), 6.480-6.452 (d, J = 8.4 Hz, 2 H), 5.688-5.538 (dt, J = 6.6 Hz, J = 16.8 Hz, 1 H), 5.405-5.356 (dd, J = 5.1 Hz, J = 9.6 Hz, 1 H), 5.326-5.287 (t, J = 6.0 Hz, 1 H), 5.174-5.126 (d, J = 14.4 Hz, 1 H), 5.115-5.079 (d, J = 10.8 Hz, 1 H), 4.996-4.938 (d, J = 17.4 Hz, 1 H), 4.890-4.841 (d, J = 14.7 Hz, 1 H), 4.459-4.283 (ddd, J = 6.3 Hz, J = 15.0 Hz J = 31.8 Hz,2 H), 3.550-3.212 (m, 8 H)

（６Ｓ，９ａＳ）２−アリル−８−（５−クロロ−１Ｈ−インダゾール−７−イルメチル）−６−（４−ヒドロキシ−ベンジル）−４，７−ジオキソ−ヘキサヒドロ−ピラジノ［２，１−ｃ］［１，２，４］トリアジン−１−カルボン酸ベンジルアミド（表２の化合物Ｎｏ．１６）
¹H NMR ( CDCl₃) : d 8.064 (s, 1 H), 7.735-7.730 (d, J =1.5 Hz, 1 H), 7.404-7.245 (m, 8 H), 7.124-7.119 (d, J =1.5 Hz, 1 H), 6.932-6.904 (d, J = 8.4 Hz, 2 H), 6.730-6.690 (t, J = 6.0 Hz, 1 H), 6.578-6.550 (d, J = 8.4 Hz, 2 H), 5.708-5.575 (dt, J = 6.3 Hz,J = 12.6 Hz, 1 H), 5.393-5.300 (m, 2 H), 5.230-5.197 (d, J = 9.9 Hz, 1 H), 5.064-5.005 (d, J = 17.7 Hz, 2 H), 4.563-4.516 (d, J = 14.1 Hz, 1 H), 4.474-4.297 (ddd, J = 6.0 Hz,J = 14.7 Hz, J = 20.7 Hz, 2 H), 3.458-3.255 (m, 8 H)

（６Ｓ，９ａＳ）２−アリル−８−（３−シクロプロパンカルボニル−１Ｈ−インダゾール−７−イルメチル）−６−（４−ヒドロキシ−ベンジル）−４，７−ジオキソ−ヘキサヒドロ−ピラジノ［２，１−ｃ］［１，２，４］トリアジン−１−カルボン酸ベンジルアミド（表２の化合物Ｎｏ．１２）
¹H-NMR(300MHz, CDCl₃) δ8.32-8.29(dd, J=2.0Hz , J=2.0Hz , 1H) δ 7.34-7.14(m, 8H) δ 6.84(d, J=8.3Hz , 2H) δ6.70(t, J=5.9Hz , 1H) δ 6.49(d, J=8.4Hz , 2H) δ 5.60-5.49(m, 1H) δ5.34-5.24(m, 2H) δ 5.12(d, J=10.3Hz , 2H) δ 4.93(d, J=17.1Hz , 1H) δ4.42-4.25(m, 2H) δ 3.35(d, J=7.8Hz , 2H) δ 3.31-3.27(m, 2H) δ3.25-3.17(m, 2H) δ 1.28-1.15(m, 3H) δ 1.04-0.97(m, 2H)

（６Ｓ，９ａＳ）２−アリル−６−（４−ヒドロキシ−ベンジル）−８−（１Ｈ−インダゾール−３−イルメチル）−４，７−ジオキソ−ヘキサヒドロ−ピラジノ［２，１−ｃ］［１，２，４］トリアジン−１−カルボン酸ベンジルアミド（表２の化合物Ｎｏ．１） ¹H NMR(CDCl₃, 300 MHz) δ 10.55 (s, 1H), 8.00 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.18-7.36 (m, 8H), 6.80 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 6.68 (t, J = 6.0 Hz, 1H), 6.35 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 5.58-5.68 (m, 1H), 5.02-5.31 (m, 5H), 4.75 (d, J = 14.7 Hz, 1H), 4.23-4.40 (m, 2H), 3.27-3.57 (m, 8H)

リン酸ジナトリウム塩モノ−｛４−［（６Ｓ，９ａＳ）２−アリル−１−ベンジルカルバモイル−８−（１−ベンジル−３−フェニル−１Ｈ−インダゾール−７−イルメチル）−４，７−ジオキソ−オクタヒドロ−ピラジノ［２，１−ｃ］［１，２，４］トリアジン−６−イルメチル］−フェニル｝エステル（表２の化合物Ｎｏ．３６）
¹H-NMR (300 MHz, CDCl₃) : d3.02-3.36(m, 1H), 3.28-3.36(m, 4H), 3.48(d, J=17.1Hz , 1H), 3.62(dd, J=11.3 Hz, J=21.7 Hz , 2H), 3.80(dd, J=3.6 Hz, J=11.5 Hz , 1H), 4.25(dd, J=4.7 Hz, J=15.2 Hz , 1H), 4.33-4.38(m, 1H), 4.40(dd, J=6.7 Hz, J=15.1 Hz , 1H), 4.83(d, J=14.8 Hz , 1H), 4.98(d, J=14.8 Hz , 1H), 5.11(t, J=10.5 Hz , 2H), 5.18(dd, J=2.6 Hz, J=6.3 Hz , 1H), 5.46-5.58(m, 2H), 6.69(t, J=6.4 Hz , NH), 6.79(d, J=8.4 Hz , 2H), 6.92-6.95(m, 4H), 7.12-7.29(m, 10H), 7.42-7.55(m, 6H)

本発明のライブラリーについて、多様な技術と方法によって生物活性メンバーをスクリーニングした。一般に、スクリーニングアッセイは、（１）ライブラリーの類似体とターゲットとの間に結合が起こることが許容されるように、受容体のような関心のある生物学的ターゲットとライブラリーの類似体とを接触させること、および（２）文献『Lam et al. (Nature 354:82-84, 1991) 』または『Griminski et al. (Biotechnology 12:1008-1011, 1994)』（両方ともは参照としてここに援用される）に開示された熱量アッセイのように、適切なアッセイによって結合形成を検出することにより行われ得る。好適な具体例において、前記ライブラリーメンバーは溶液状態にあり、前記ターゲットは固相上に固定されている。選択的に、前記ライブラリーは、固相上に固定でき、溶液中でそれをターゲットと接触させることにより探知されることも可能である。

Ｗｎｔシグナルに対する抑制活性は、ＴｏｐＦｌａｓｈレポーター(TopFlash reporter)によって測定された。ＩＣ５０値がさらに低いほどさらに高い抑制活性を意味する。ＩＣ５０が１０μＭ以下の化合物は活性として分類できる。ＩＣ５０が５〜１０μｍの場合、その化合物は製薬のための候補になれる。ＩＣ５０が１〜５μＭの場合、その化合物は活性が強いものと見なされ、ＩＣ５０が１μＭ以下の場合、その化合物は活性が非常に強いものと見なされる。

本発明の大部分の化合物は、ＩＣ５０が５０μＭ以下であった。それは、その化合物がＷｎｔシグナルに対して強い抑制活性を有することを示唆する。

下記表３は、本発明のライブラリーから選択された生物活性テストのための化合物とそれらのＩＣ５０値を示し、前記ＩＣ５０値は、実施例２に記述されたように、レポーター遺伝子アッセイによって測定された。

表３：選択されたライブラリー化合物のＴｏｐＦｌａｓｈレポーター遺伝子アッセイによって測定されたＩＣ５０（μＭ）

本発明によれば、一般式（Ｉ）の化合物がさらに低いＣＹＰ３Ａ４抑制活性（さらに高いＩＣ５０）を有することが発見された。前記ＣＹＰ３Ａ４抑制活性のさらに低い測定値の詳細は実施例１に開示されている。さらに低いＣＹＰ３Ａ４抑制活性は、本発明の化合物が副作用の観点で薬理学的にさらに良いことを意味する。

下記表４は、本発明のライブラリーから選択された生物活性テストのための化合物とそれらのＩＣ５０値を示し、前記ＩＣ５０値は、実施例１に記述されたように、Ｐ４５０ＣＹＰ３Ａ４抑制活性スクリーニングによって測定された。

表４：選択されたライブラリー化合物のＰ４５０ＣＹＰ３Ａ４抑制活性スクリーニングによって測定されたＩＣ５０（μＭ）

本発明は、また、前記化学式（Ｉ）を有する化合物を対象体に投与することを含む急性骨髄性白血病を予防または治療する方法に関する。

一つの側面で、本発明は、ｃ−Ｍｙｃタンパク質に結合するβ−カテニン、ｐ３００およびＴＣＦの複合体の形成、並びにスルビビン(survivin)プロモーターに結合するβ−カテニン、ｐ３００およびＴＣＦの複合体の形成を抑制する化合物を提供する。

他の側面で、本発明は、ｃ−Ｍｙｃタンパク質を制御する化合物、特に一般式（ＩＩ）を有する化合物を提供する。

実施例３に記述されたように、一般式（Ｉ）の化合物が細胞増殖に影響を及ぼしＡＭＬ癌細胞の成長を抑制することは、本発明によって発見された。

ＭＶ−４−１１のＧＩ５０は、ＡＭＬ癌細胞に対して細胞成長抑制活性を示す。ＧＩ５０値が低いほどさらに高い抑制活性を意味する。ＧＩ５０が１０μＭ以下の化合物は活性として分類できる。ＧＩ５０が５〜１０μＭの場合、その化合物は製薬のための候補になれる。ＧＩ５０が１〜５μＭの場合、その化合物は活性が強いものと見なされ、ＧＩ５０が１μＭ以下の場合、その化合物は活性が非常に強いものと見なされる。

本発明の大部分の化合物は５μＭ以下のＧＩ５０を示す。これはその化合物がＡＭＬ癌細胞に対して強い抑制活性を有することを意味する。

下記表５は、本発明のライブラリーから選択された生物活性テストのための化合物およびそれらのＧＩ５０値を示し、前記ＧＩ５０値は、実施例３に記述されたように、細胞成長抑制アッセイによって測定された。

表５：選択されたライブラリー化合物のＡＭＬ癌細胞に対する細胞成長抑制活性（ＧＩ５０）アッセイ

次の非制限(non-limiting)的実施例は、前記化合物および本発明の用途を説明する。

製造実施例１
（Ｎ−Ｆｍｏｃ−Ｎ’−Ｒ_４−ヒドラジノ）−酢酸の製造

（１）Ｎ−Ｆｍｏｃ−Ｎ’−メチルヒドラジンの製造

２Ｌの二口丸底フラスコにガラスストッパーおよびカルシウムチューブを装着した。ＴＨＦ（３００ｍＬ）中のＲ４−ヒドラジン（２０ｇ、１３９ｍｍｏＬ、ここでＲ_４はメチル）溶液を入れ、ＴＨＦ中のＤｉＢｏｃ（３３ｇ、１５３ｍｍｏＬ）溶液を添加した。飽和重炭酸ナトリウム水溶液（５００ｍＬ）を激しくに攪拌しながら投入漏斗を介して２時間以上にわたって滴下した。６時間後に、ＴＨＦ中のＦｍｏｃ−Ｃｌ（３９ｇ、１５３ｍｍｏＬ）溶液を徐々に添加した。前記で得られた懸濁液を０℃〜６時間攪拌した。前記混合物を酢酸エチル（ＥＡ、５００ｍＬ）で抽出し、有機層を保有した。前記溶液を硫酸ナトリウムで乾燥させ、真空中で蒸発させた。次の段階は精製なしで行った。

１Ｌの二口丸底フラスコにガラスストッパーおよびカルシウムチューブを装着した。ＭｅＯＨ（３００ｍＬ）中の前段階からの生成物溶液を入れ、濃塩酸（３０ｍＬ、１２Ｎ）を氷水浴で攪拌器用磁石によって攪拌しながら投入漏斗を介して徐々に添加し、一晩攪拌した。前記混合物をＥＡ（１０００ｍＬ）で抽出し、有機層を保有した。前記溶液を硫酸ナトリウムで乾燥させ、真空中で蒸発させた。前記残留物をｎ−ヘキサンおよびＥＡで再結晶によって精製させ、Ｎ−Ｆｍｏｃ−Ｎ’−メチルヒドラジン（３２．２ｇ、８３％）を得た。¹HNMR (DMSO-D6) d7.90-7.88 (d, J=6 Hz, 2H,), d 7.73-7.70 (d, J=9 Hz, 2H,), 7.44-7.31 (m, 4H), 4.52-4.50 (d, J=6 Hz, 2H), 4.31-4.26 (t, J=6 Hz, 1H), 2.69 (s, 1H)

（２）（Ｎ−Ｆｍｏｃ−Ｎ’−Ｒ_４−ヒドラジノ）−酢酸ｔ−ブチルエステルの製造

１Ｌの二口丸底フラスコに、ガラスストッパーとカルシウムチューブに連結された還流コンデンサーを装着した。トルエン（３００ｍＬ）中のＮ−Ｆｍｏｃ−Ｎ’−Ｒ_４ヒドラジン（２０ｇ、７５ｍｍｏＬ）溶液を入れた。トルエン（５０ｍＬ）中のｔ−ブチルブロモアセテート（２２ｇ、１１１ｍｍｏＬ）溶液を徐々に添加した。Ｃｓ_２ＣＯ_３（４９ｇ、１４９ｍｍｏＬ）を徐々に添加した。激しく攪拌しながらＮａＩ（１１ｇ、７４ｍｍｏＬ）を徐々に添加した。前記反応混合物を還流温度で１日以上にわたって攪拌した。前記で得られた混合物を濾過し、ＥＡ（５００ｍＬ）で抽出した。前記溶液を硫酸ナトリウムで乾燥させ、真空中で蒸発させた。前記生成物をヘキサン：ＥＡ＝２：１の溶液でクロマトグラフィーによって精製し（Ｎ−Ｆｍｏｃ−Ｎ’−メチル−ヒドラジノ）−酢酸ｔ−ブチルエステル（１９．８ｇ、７０％）を得た。¹H-NMR (CDCl₃-d) d 7.78-7.75 (d, J=9 Hz, 2H,), d 7.61-7.59 (d, J=6 Hz, 2H,), 7.43-7.26 (m, 4H), 4.42-4.40 (d, J=6 Hz, 2H), 4.23 (b, 1H), 3.57 (s, 2H), 2.78 (s, 3H), 1.50 (s, 9H)

（３）（Ｎ−Ｆｍｏｃ−Ｎ’−メチル−ヒドラジノ）−酢酸の製造

１Ｌの二口丸底フラスコに、ガラスストッパーとカルシウムチューブに連結された還流コンデンサーを装着した。（Ｎ−Ｆｍｏｃ−Ｎ’−Ｒ_４−ヒドラジノ）−酢酸ｔ−ブチルエステル（２０ｇ、５２ｍｍｏＬ）溶液を入れた。氷水浴で激しく攪拌しながらＨＣｌ（１５０ｍＬ、ジオキサン中の４Ｍ溶液）溶液を徐々に添加した。前記反応混合物を室温で１日以上にわたって攪拌した。前記溶液を４０℃の減圧下で完全に濃縮した。飽和されたＮａＨＣＯ_３水溶液（１００ｍＬ）を添加し、水溶液層をジエチルエーテル（１００ｍＬ）で洗浄した。濃塩酸を０℃（ｐＨ２〜３）で徐々に滴下した。前記混合物を抽出し、有機層を保有した（５００ｍＬ、ＭＣ）。前記溶液を硫酸ナトリウムで乾燥させ、真空中で蒸発させた。前記残留物をｎ−ヘキサンおよび酢酸エチルで再結晶によって精製し（Ｎ−Ｆｍｏｃ−Ｎ’−メチル−ヒドラジノ）−酢酸（１２ｇ、７２％）を得た。¹H-NMR (DMSO-d₆) δ 12.38 (s, 1H), 8.56 (b, 1H), 7.89-7.86 (d, J=9 Hz, 2H,), 7.70-7.67 (d, J=9 Hz, 2H,), 7.43-7.29 (m, 4H), 4.29-4.27 (d, J=6 Hz, 2H), 4.25-4.20 (t, J=6 Hz, 1H), 3.47 (s, 2H), 2.56 (s, 3H)

製造実施例２
（６Ｓ，９ａＳ）２−アリル−６−（４−ヒドロキシ−ベンジル）−８−（１−メチル−１Ｈ−インダゾール−４−イルメチル）−４，７−ジオキソ−ヘキサヒドロ−ピラジノ［２，１−ｃ］［１，２，４］トリアジン−１−カルボン酸ベンジルアミド

前記標題化合物を製造するために、この明細書上で記述されたリバースターン類似体ライブラリーの一般な反応が次の反応によって行われる。

前記反応において、「Ｐｏ１」はブロモアセタールレジン（ＡｄｖａｎｃｅｄＣｈｅｍＴｅｃｈ）を示し、詳細な手順は下記に説明される：

段階１
ブロモアセタールレジン（３７ｍｇ、０．９８ｍｍｏＬ／ｇ）およびＤＭＳＯ（１．４ｍＬ）中の（１−メチル−１Ｈ−インダゾール−４−イル）メタンアミン溶液を、９６ウェルプレートを有するＲｏｂｂｉｎｓｂｌｏｃｋ（ＦｌｅｘＣｈｅｍ）内に置いた。前記反応混合物を回転オーブン［ＲｏｂｂｉｎｓＳｃｉｅｎｔｉｆｉｃ］を用いて６０℃で１２時間振とうした。前記レジンをＤＭＦ、ＭｅＯＨ、およびＤＣＭで順次洗浄した。

段階２
ＤＭＦ中の市販Ｆｍｏｃ−Ｔｙｒ（ＯｔＢｕ）−ＯＨ（４当量）、ＰｙＢｏｂ（４当量）、ＨＯＡｔ（４当量）、およびＤＩＥＡ（１２当量）溶液を前記レジンに添加した。前記反応混合物を室温で１２時間振とうし、前記レジンをＤＭＦ、ＭｅＯＨ、およびＤＣＭで順次洗浄した。

段階３
反応の前にＤＭＦによって膨潤した前記レジンにＤＭＦ中の２５％ピペリジンを添加し、その反応混合物を室温で３０分間振とうした。この脱保護段階をさらに繰返し行い、前記レジンをＤＭＦ、ＭｅＯＨ、およびＤＣＭで順次洗浄した。ＤＭＦ中のヒドラジン酸（４当量）、ＨＯＢｔ（４当量）、およびＤＩＣ（４当量）溶液を前記レジンに添加し、その反応混合物を室温で１２時間振とうした。前記レジンをＤＭＦ、ＭｅＯＨ、およびＤＣＭで順次洗浄した。

段階４
段階３で得られた前記レジンを室温で１８時間蟻酸（各ウェル当り１．２ｍＬ）で処理した。前記レジンを濾過によって除去した後、前記濾過液を減圧の下でＳｐｅｅｄＶａｃ［ＳＡＶＡＮＴ］を用いて濃縮して油状の生成物を得た。前記生成物を５０％水／アセトニトリルで希釈し、凍らせた後、凍結乾燥させた。¹H NMR(CDCl₃, 300 MHz) δ 8.08 (s, 1H), 7.21-7.38 (m, 8H), 6.99 (d, J = 8.4 Hz), 6.89-6.94 (m, 1H), 6.62-6.69 (m, 3H), 5.40-5.59 (m, 2H), 5.34 (t, J = 5.4 Hz, 1H), 5.17-5.23 (m, 1H), 5.07 (d, J = 10.5 Hz, 1H), 4.67-4.96 (m, 2H), 4.26-4.45 (m, 1H), 4.08 (s, 3H), 3.23-3.44 (m, 9H)

製造実施例３
（６Ｓ，９ａＳ）２−アリル−８−（３−シクロプロパンカルボニル−１Ｈ−インダゾール−７−イルメチル）−６−（４−ヒドロキシ−ベンジル）−４，７−ジオキソ−ヘキサヒドロ−ピラジノ［２，１−ｃ］［１，２，４］トリアジン−１−カルボン酸ベンジルアミドの製造

前記反応において、「Ｐｏ１」はブロモアセタールレジン（ＡｄｖａｎｃｅｄＣｈｅｍＴｅｃｈ）を示し、詳細な手順は下記に説明される。

段階１
ブロモアセタールレジン（３７ｍｇ、０．９８ｍｍｏＬ／ｇ）およびＤＭＳＯ（１．４ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル７−（アミノメチル）−３−（シクロプロパンカルボニル）−１Ｈ−インダゾール−１−カルボキシレート溶液を、９６ウェルプレートを有するＲｏｂｂｉｎｓｂｌｏｃｋ（ＦｌｅｘＣｈｅｍ）内に置いた。前記反応混合物を回転オーブン［ＲｏｂｂｉｎｓＳｃｉｅｎｔｉｆｉｃ］を用いて６０℃で１２時間振とうした。前記レジンをＤＭＦ、ＭｅＯＨ、およびＤＣＭで順次洗浄した。

段階２
ＤＭＦ中の市販のＦｍｏｃ−Ｔｙｒ（ＯｔＢｕ）−ＯＨ（４当量）、ＰｙＢｏｂ（４当量）、ＨＯＡｔ（４当量）、およびＤＩＥＡ（１２当量）溶液を前記レジンに添加した。前記反応混合物を室温で１２時間振とうし、前記レジンをＤＭＦ、ＭｅＯＨ、およびＤＣＭで順次洗浄した。

段階３
反応の前にＤＭＦによって膨潤した前記レジンにＤＭＦ中の２５％ピペリジンを添加し、その反応混合物を室温で３０分間振とうした。この脱保護段階をさらに繰返し行い、前記レジンをＤＭＦ、ＭｅＯＨ、およびＤＣＭで順次洗浄した。ＤＭＦ中のヒドラジン酸（４当量）、ＨＯＢｔ（４当量）およびＤＩＣ（４当量）溶液を前記レジンに添加し、その反応混合物を室温で１２時間振とうした。前記レジンをＤＭＦ、ＭｅＯＨ、およびＤＣＭで順次洗浄した。

段階４
段階３で得られた前記レジンを室温で１８時間蟻酸（各ウェル当り１．２ｍＬ）で処理した。前記レジンを濾過によって除去した後、前記濾過液を減圧の下でＳｐｅｅｄＶａｃ［ＳＡＶＡＮＴ］を用いて濃縮して油状の生成物を得た。前記生成物を５０％水／アセトニトリルで希釈し、凍らせた後、凍結乾燥させた。¹H-NMR(300MHz, CDCl₃) δ8.32-8.29(dd, J=2.0Hz , J=2.0Hz , 1H) δ 7.34-7.14(m, 8H) δ 6.84(d, J=8.3Hz , 2H) δ 6.70(t, J=5.9Hz , 1H) δ 6.49(d, J=8.4Hz , 2H) δ 5.60-5.49(m, 1H) δ 5.34-5.24(m, 2H) δ 5.12(d, J=10.3Hz , 2H) δ 4.93(d, J=17.1Hz , 1H) δ 4.42-4.25(m, 2H) δ 3.35(d, J=7.8Hz , 2H) δ 3.31-3.27(m, 2H) δ 3.25-3.17(m, 2H) δ 1.28-1.15(m, 3H) δ 1.04-0.97(m, 2H)

製造実施例４
（６Ｓ，９ａＳ）２−アリル−６−（４−ヒドロキシ−ベンジル）−８−［１−（２−ヒドロキシ−エチル）−１Ｈ−インダゾール−７−イルメチル］−４，７−ジオキソ−ヘキサヒドロ−ピラジノ［２，１−ｃ］［１，２，４］トリアジン−１−カルボン酸ベンジルアミドの製造

段階１
ブロモアセタールレジン（３７ｍｇ、０．９８ｍｍｏＬ／ｇ）およびＤＭＳＯ（１．４ｍＬ）中の２−（７−アミノメチル）−１Ｈ−インダゾール−１−イル）エチルｔｅｒｔ−ブチルカーボネート溶液を、９６ウェルプレートを有するＲｏｂｂｉｎｓｂｌｏｃｋ（ＦｌｅｘＣｈｅｍ）内に置いた。前記反応混合物を回転オーブン［ＲｏｂｂｉｎｓＳｃｉｅｎｔｉｆｉｃ］を用いて６０℃で１２時間振とうした。前記レジンをＤＭＦ、ＭｅＯＨ、およびＤＣＭで順次洗浄した。

段階４
段階３で得られた前記レジンを室温で１８時間蟻酸（各ウェル当り１．２ｍＬ）で処理した。前記レジンを濾過によって除去した後、前記濾過液を減圧の下でＳｐｅｅｄＶａｃ［ＳＡＶＡＮＴ］を用いて濃縮して油状の生成物を得た。前記生成物を５０％水／アセトニトリルで希釈し、凍らせた後、凍結乾燥させた。¹H NMR(CDCl₃, 300 MHz) δ 8.04 (s, 1H), 7.70 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 7.21-7.38 (m, 5H), 6.99-7.12 (m, 5H), 6.66-6.69 (m, 3H), 5.44-5.55 (m, 3H), 5.35 (t, J = 5.1 Hz, 1H), 4.90-5.01 (m, 2H), 4.56-4.77 (m, 3H), 4.24-4.44 (m, 2H), 4.03-4.11 (m, 2H), 3.17-3.48 (m, 8H), 3.02 (t, J = 5.7 Hz, 1H)

製造実施例５
ジソジウム４−（（２−アリル−１−（ベンジルカルバモイル）−８−（（２−メチル−２Ｈ−インダゾール−７−イル）メチル）−４，７−ジオキソ−オクタヒドロ−１Ｈ−ピラジノ［２，１−ｃ］［１，２，４］トリアジン−６−イル）メチル）フェニルホスフェート（２）の製造

ＴＨＦ（１０ｍＬ／ｍｍｏＬ）中の２−アリル−Ｎ−ベンジル−６−（４−ヒドロキシベンジル）−８−（（２−メチル−２Ｈ−インダゾール−７−イル）メチル）−４，７−ジオキソ−ヘキサヒドロ−２Ｈ−ピラジノ［２，１−ｃ］［１，２，４］トリアジン−１（６Ｈ）−カルボキサミド（１）（１．０当量）溶液に０℃でＰＯＣｌ_３（４．０当量）およびＴＥＡ（３．０当量）を添加した。飽和ＮａＨＣＯ_３水溶液を室温で１時間攪拌させた後、ゆっくり注ぎ、１時間攪拌した。前記反応混合物をＥｔＯＡｃで洗浄し、前記水溶液層を０℃で１ＮＨＣｌ水溶液で酸性化し、ＥｔＯＡｃで抽出した。前記有機層をＮａ_２ＳＯ_４で乾燥させ、真空中で濃縮した。前記残留物をＥｔＯＡおよびｎ−ヘキサンを用いて結晶して白色固体としての中間体化合物（２）を得た。前記固体を０．１ＮＮａＯＨ水溶液を用いてｐＨ１１．０に調節し、凍結乾燥させて目的化合物（３）（８７％）を得た。

実施例１
Ｐ４５０ＣＹＰ３Ａ４抑制活性スクリーニング
テスト化合物：

アッセイは、ｃＤＮＡ−発現ヒト肝臓のＣＹＰ３Ａ４（ｓｕｐｅｒｓｏｍｅ、ＢＤＧｅｎｔｅｓｔ^ＴＭ＃４５６２０２）を用いて９６−ウェルマイクロタイタープレートで２００μＬの体積で行われた。ＣＹＰ３Ａ４に対する基質として７−ベンジルオキシ−４−トリフルオロメチル−クマリン（ＢＦＣ）を使用した。テスト物質および基質ＢＦＣを１００％アセトニトリルに溶解した。前記培養混合物におけるアセトニトリルの最終体積は１％（ｖｏｌｕｍｅ／ｖｏｌｕｍｅ）未満であった。リン酸カルシウムバッファ（ｐＨ７．４、最終濃度０．１Ｍ）、ＭｇＣｌ_２（最終濃度８．３ｍＭ）、ＥＤＴＡ（最終濃度１．６７ｍＭ）、テスト物質貯蔵溶液、ＣＹＰ３Ａ４ｓｕｐｅｒｓｏｍｅおよびＮＡＤＰＨ（最終濃度０．２５ｍＭ）をそれぞれのウェルに添加した。前記反応を、３７℃で１０分のプレインキュベーションの後に基質（ＢＦＣ、最終濃度３０Ｍ）の添加によって開始した。３７℃で１０分のインキュベーション後、前記反応を７５μＬのアセトニトリル：０．５Ｍｔｒｉｓ−ｂａｓｅ＝４：１（体積／体積）の添加によって終了させた。その後、蛍光光度計を用いて蛍光シグナルを測定した。ＢＦＣ代謝物質、７−ヒドロキシ−４−トリフルオロメチル−クマリンは４０９ｎｍの励起波長と５３０ｎｍの放出波長を用いて測定された。図２はＣＹＰ３Ａ４抑制アッセイで前記テスト化合物ＡのＩＣ５０を示す。化合物Ａ、ＢおよびＣはＣＹＰ３Ａ４酵素に対する弱い抑制を示した。

実施例２
ＳＷ４８０細胞に対するＩＣ_５０の測定のためのＴｏｐＦｌａｓｈレポーター遺伝子バイオアッセイ
この実施例で使用されたテスト化合物（化合物Ｄ）は、製造実施例３で製造された。

ＳＷ４８０細胞をＳｕｐｅｒｆｅｃｔ^ＴＭトランスフェクション試薬（Ｑｉａｇｅｎ、３０１３０７）を用いてトランスフェクションさせた。細胞にトランスフェクションする日に５０〜８０％コンフルエント(confluent)状態にあるようにするために、トランスフェクション１日前に簡単にトリプシンで処理し、６ウェルプレート（５×１０^５細胞／ウェル）に播いた。

４マイクログラム（ＴｏｐＦｌａｓｈ）のＤＮＡおよび１μｇ（ｐＲＬ−ｎｕｌｌ）のＤＮＡを１５０μＬの無血清培地(serum-free medium)で希釈させ、３０μＬのＳｕｐｅｒｆｅｃｔ^ＴＭトランスフェクション試薬を添加した。前記ＤＮＡ−Ｓｕｐｅｒｆｅｃｔ^ＴＭ混合物を室温で１５分間インキュベーションし、しかる後に、追加的な３時間のインキュベーションのためにこの複合体に１ｍＬの１０％ＦＢＳＤＭＥＭを添加した。複合体が形成されている間、細胞を抗体なしでＰＢＳによって２回洗浄した。

３７℃、５％ＣＯ_２で３時間インキュベーションする前に、前記ＤＮＡ−Ｓｕｐｅｒｆｅｃｔ^ＴＭトランスフェクション試薬複合体を前記細胞に適用した。インキュベーション後に、１０％ＦＢＳを有する回復培地を最終体積が１．１８ｍＬとなるように添加した。３時間インキュベーションの後に、前記細胞を収穫し、９６ウェルプレート（３×１０^４細胞／ウェル）にまき直した。３７℃、５％ＣＯ_２で一晩インキュベーションした後、前記細胞を化合物Ｄで２５時間処理した。最終的に、前記活性をルシフェラーゼアッセイ（Ｐｒｏｍｅｇａ、Ｅ１９６０）方法によってチェックした。図３はＳＷ４８０細胞に対する化合物ＤのＩＣ_５０の測定結果を示す。ＩＣ_５０は０．０８３±０．００７μＭであった。

実施例３
ＡＭＬ癌細胞に対する細胞成長抑制活性（細胞成長抑制アッセイ）
テスト化合物：

細胞成長抑制アッセイは、テスト化合物による細胞増殖抑制率を調べるために行われた。ＭＶ−４−１１（ヒト、急性骨髄性白血病細胞株）細胞を１０％ウシ胎仔血清（ＦＢＳ）、１×ペニシリン／ストレプトマイシン（１０，０００ｕｎｉｔｓ／ｍＬペニシリン、０．８５％ＮａＣｌ中の１０，０００ｇ／ｍＬストレプトマイシン）を含むＩＭＤＭ(Iscove’s modified Dulbecco’s medium)培地で培養した。ＩＭＤＭ培地でＭＶ−４−１１細胞を収穫し、５×１０^４細胞／ウェルを９６ウェル培養プレート（Ｎｕｎｃ、＃１６７００８）のそれぞれのウェルに移した。前記テスト化合物を連続希釈(serial dilution)処理し、それぞれの濃度で複製した。前記連続希釈のために、前記テスト化合物を同じ体積の培地を用いて９６−ウェルアッセイブロック（ｃｏｓｔａｒ、＃３９５６）で反復的に希釈させた。前記希釈の後に、それぞれの化合物をそれぞれのウェルに添加した。また、バックグラウンド吸光度(background absorbance)は、前記テスト化合物の処理中に陰性対照群プレートにテスト化合物の代わりにＩＭＤＭ地を添加することにより測定された。前記プレートは、３７℃、５％ＣＯ_２を含有する加湿インキュベーター(humidified incubator)内で３日間（７２時間）インキュベーションした。最後の日、２０μＬのＣｅｌｌＴｉｔｅｒ９６ＡｑｕｅｏｕｓＯｎｅＳｏｌｕｔｉｏｎ（Ｐｒｏｍｅｇａ＃Ｇ３５８１）をそれぞれのウェル内の培養物に添加し、前記プレートを、３７℃、５％ＣＯ_２を含有する加湿インキュベーター内で数時間インキュベーションした。前記インキュベーションの後、それぞれの細胞の吸光度をＥｎＶｉＳｉｏｎ（Ｐｅｒｋｉｎｅｌｍｅｒ、ＵＳＡ）を用いて４９０ｎｍで測定した。ＧＩ５０値をＰｒｉｓｍ３．０プログラムを用いて計算した。その結果は、前記テスト化合物が前記細胞増殖に影響を及ぼしＡＭＬ癌細胞の成長を抑制させたことを示した。図４は化合物Ａの抑制の結果を示す。化合物Ａおよび化合物ＣのＧＩ５０はそれぞれ０．２２０μＭおよび０．０３７μＭであった。

上述したように、本発明は、リバースターン類似体の新規な化合物を提供し、その化合物は、薬学的化合物（特に、ＡＭＬ癌細胞に対して）として使用できる。本発明は、それらの好適な具体例を参考として詳細に記述された。ところが、これらの具体例の変更は本発明の原理または精神から逸脱することなくなされることもでき、本発明の範囲が添付の特許請求の範囲およびそれらと均等な範囲に定義されることは当業者に認められるであろう。

Claims

単離された立体異性体または立体異性体の混合物として、または薬学的に許容されるそれらの塩として一般式（ＩＩＩ）の構造を有する化合物。

Ｒ_１は、インダゾリル、またはメチル；イソプロピル；シクロプロピルメチル；ヒドロキシエチル；シクロプロピルカルボニル；アミノカルボニル；シアノメチル；モルホリニルエチル；アミノカルボニルメチル；ジメチルアミノカルボニルメチル；メトキシエチルプロピオンアミド；エトキシカルボニルメチル；アセトキシエチル；フェニル；ベンジル；およびアミノとニトロから独立に選ばれた一つ以上の置換基を有する置換Ｃ_７−１５アリールアルキルから独立に選ばれた一つ以上の置換基を有する置換インダゾリルであり；
Ｒ_４はＣ_３アルケニルであり；
Ｒ_６はＣ_６−１２アリールまたはハロゲン、ヒドロキシル、シアノ、Ｃ_１−６アルキル、アセチレニル、およびＣ_１−６アルコキシよりなる群から独立に選ばれた一つ以上の置換基を有する置換Ｃ_６−１２アリール；またはＣ_５−１２ヘテロシクリルまたはハロゲン、ヒドロキシル、シアノ、Ｃ_１−６アルキル、およびＣ_１−６アルコキシから独立に選ばれた一つ以上の置換基を有する置換Ｃ_５−１２ヘテロシクリルであり；
Ｘ_１は水素であり；
それぞれのＸ_２およびＸ_３は独立に水素、ヒドロキシル、ホスフェートである。
単離された立体異性体または立体異性体の混合物として、または薬学的に許容されるそれらの塩として一般式（ＩＩＩ）の構造を有する化合物。

Ｒ_１は、２−メチル−２Ｈ−インダゾリル、１−メチル−１Ｈ−インダゾリル、３−シクロプロピルカルボニル−１Ｈ−インダゾリル、１−ヒドロキシエチル−１Ｈ−インダゾリル、１Ｈ−インダゾリル、２−シクロプロピルメチル−２Ｈ−インダゾリル、３−アミノ−１Ｈ−インダゾリル、１−ベンジル−１Ｈ−インダゾリル、３−クロロ−１Ｈ−インダゾリル、６−クロロ−１Ｈ−インダゾリル、３−フェニル−１Ｈ−インダゾリル、１−ベンジル−３−フェニル−１Ｈ−インダゾリル、１−ニトロベンジル−１Ｈ−インダゾリル、１−アミノベンジル−１Ｈ−インダゾリル、２−メチル−３−シクロプロピルカルボニル−２Ｈ−インダゾリル、１−メチル−３−アミノカルボニル−１Ｈ−インダゾリル、カルボニル−インダゾリル、２−イソプロピル−２Ｈ−インダゾリル、２−アミノカルボニルメチル−２Ｈ−インダゾリル、１−シアノメチル−３−シクロプロピルカルボニル−１Ｈ−インダゾリル、２−シアノメチル−３−シクロプロピルカルボニル−２Ｈ−インダゾリル、１−モルホリニル−Ｎ−エチル−１Ｈ−インダゾリル、２−モルホリニル−Ｎ−エチル−２Ｈ−インダゾリル、２−ジメチルアミノカルボニルメチル−２Ｈ−インダゾリル、２−メトキシエチルプロピオンアミド−２Ｈ−インダゾリル、１−エトキシカルボニルメチル−１Ｈ−インダゾリル、２−エトキシカルボニルメチル−２Ｈ−インダゾリル、および１−アセトキシエチル−１Ｈ−インダゾリルよりなる群から選ばれ；
Ｒ_４はアリルであり；
Ｒ_６はフェニルまたはハロゲン、ヒドロキシル、シアノ、Ｃ_１−６アルキル、アセチレニル、およびＣ_１−６アルコキシから独立に選ばれた一つ以上の置換基を有する置換フェニル；またはピリジルまたはハロゲン、ヒドロキシル、シアノ、Ｃ_１−６アルキル、およびＣ_１−６アルコキシから独立に選ばれた一つ以上の置換基を有する置換ピリジルであり；
Ｘ _１は水素であり；
それぞれのＸ _２およびＸ _３は独立に水素、ヒドロキシル、ホスフェートである。
急性骨髄性白血病を治療または予防する医薬の製造のための請求項１または２による化合物の使用方法。
請求項１または２に記載の化合物を含む、急性骨髄性白血病を治療または予防するための医薬組成物。