JP5258578B2 - アレルギー性疾患を処置するための胸腺間質性リンホポエチン受容体に対する抗体 - Google Patents
アレルギー性疾患を処置するための胸腺間質性リンホポエチン受容体に対する抗体 Download PDFInfo
- Publication number
- JP5258578B2 JP5258578B2 JP2008550514A JP2008550514A JP5258578B2 JP 5258578 B2 JP5258578 B2 JP 5258578B2 JP 2008550514 A JP2008550514 A JP 2008550514A JP 2008550514 A JP2008550514 A JP 2008550514A JP 5258578 B2 JP5258578 B2 JP 5258578B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- antibody
- seq
- antibodies
- human
- htslpr
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Fee Related
Links
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
- C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
- A61P11/06—Antiasthmatics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
- A61P27/16—Otologicals
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/08—Antiallergic agents
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/11—DNA or RNA fragments; Modified forms thereof; Non-coding nucleic acids having a biological activity
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
- C07K2317/24—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin containing regions, domains or residues from different species, e.g. chimeric, humanized or veneered
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
- C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
- C07K2317/565—Complementarity determining region [CDR]
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
- C07K2317/73—Inducing cell death, e.g. apoptosis, necrosis or inhibition of cell proliferation
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
- C07K2317/76—Antagonist effect on antigen, e.g. neutralization or inhibition of binding
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Immunology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Pulmonology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Rheumatology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Plant Pathology (AREA)
- Dermatology (AREA)
- Pain & Pain Management (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
Description
サイトカインおよび免疫細胞は、例えば種々の炎症性障害に至る経路など、特定の生理学的機構または経路を媒介する。ヒト胸腺間質性リンホポエチン(TSLP)は、ヒト上皮細胞から生産されるIL−7様サイトカインである。これはB細胞の分化を促進し、また、胸腺細胞と成熟T細胞の双方を同時刺激することもできる。TSLPはヒトCD11c+樹状細胞(DC)上の特異的ヘテロ二量体受容体と結合する。この受容体ヘテロ二量体は、共通γ様受容体鎖(TSLP受容体;TSLPR)とIL−7R−α鎖からなる。例えば、Tonozuka et al., Cytogenet. Cell Genet. 93:23-25, 2001; Pandey et al., Nat. Immunol. 1:59-64, 2000; L. S. Park et al., J. Exp. Med. 192:659-670, 2000;およびReche et al., J. Immunol. 167:336-343, 2001参照。この受容体に結合するリガンドは、DCのTH2誘引ケモカイン、TARC(thymus and activation-regulated chemokine)およびMDC(macrophage-derived chemokine)分泌を誘導する。さらに、TSLPはまた、強いDCの活性化、ナイーブCD4+T細胞の拡大、続いてのTH2表現型への分極、プロアレルギー性サイトカインインターロイキン4(IL−4)、IL−5、IL−13および腫瘍壊死因子−αの産生も誘導する。
本明細書において本発明の態様は、標的タンパク質ヒト胸腺間質性リンホポエチン受容体(hTSLPR)に特異的な抗原結合領域を有する単離されたヒトまたはヒト化抗体またはその機能的フラグメントおよびhTSLPRと結合する抗体またはその機能的フラグメントを提供する。関連の態様では、このhTSLPRとの結合は少なくとも細胞表面hTSLP受容体結合により決定され、炎症性メディエーターの放出を妨げる。
図1はBaF3/hTSLPR/hIL7Rα細胞においてhTSLP依存性細胞増殖アッセイを用いた抗TSLPRアンタゴニスト抗体のスクリーニングを示す。
図2A〜2Cはマウスおよびキメラ抗hTSLPRモノクローナル抗体の精製を示す。A:キメラIgG1抗体;B:キメラIgG4抗体;およびC:マウスIgG1抗体。
図3A〜3Cは細胞増殖アッセイおよびルシフェラーゼリポーターアッセイによる精製マウス抗hTSLPR抗体(クローン1D6.C9)のアンタゴニスト活性を示す。A:Ba/F3−hTSLPR−hIL7Rα細胞の増殖;B:BaF3/hTSLPR/hIL7Rα/Stat5−Luc細胞の増殖;およびC:BaF3/hTSLPR/hIL7Rα/Stat5−Luc細胞のルシフェラーゼ活性。
図4はマウス抗hTSLPRモノクローナル抗体1D6.C9クローンの可変領域のヌクレオチド配列を示す。
図5はマウス抗hTSLPR抗体クローン1D6.C9の可変領域アミノ酸配列を示す。相補性決定領域(CDR)およびフレームワーク領域(FR)は下線の残基または斜体の残基で示される。
図6はhTSLPR、hIL7RαおよびStat5−Lucを過剰発現するBa/F3細胞における精製マウスおよびキメラ抗hTSLPR抗体のアンタゴニスト活性を含むルシフェラーゼリポーターアッセイの結果を示す。
図7はマウスおよびキメラ抗hTSLPR抗体によるヒト単球由来TSLP媒介TARC分泌(section)の阻害を示す。
図8は抗体結合ドメインの同定を示す − TSLPR抗体は不連続エピトープと結合する。
本発明は、一部分は本発明者らによるヒトTSLPRに対してアンタゴニスト抗体の開発に基づくものである。マウスにおいて生成した抗hTSLPR抗体またはin vitroで作製されたキメラ抗hTSLPR抗体が、TSLPシグナル伝達により媒介される活性、例えばTSLPにより媒介される細胞増殖を阻害できることが判明した。よって、これらの抗体は、TSLPシグナル伝達活性により媒介される、またはTSLPシグナル伝達活性に関連するいくつかの疾病または障害、例えば、アトピー性皮膚炎および喘息などのアレルギー性炎症性疾患に対する治療薬または予防薬として有用である。次の節で、本発明の組成物を作製および使用するため、また、本発明の方法を実施するための指針を示す。
特に断りのない限り、本明細書で用いる技術用語および科学用語は全て、本発明の属する技術分野の通常の技術者に共通に理解されているものと同義である。以下の参照文献は本発明で用いられる用語の多くの一般定義を当業者に示す:Oxford Dictionary of Biochemistry and Molecular Biology, Smith et al. (eds.), Oxford University Press (revised ed., 2000); Dictionary of Microbiology and Molecular Biology, Singleton et al. (Eds.), John Wiley & Sons (3PrdP ed., 2002);およびA Dictionary of Biology (Oxford Paperback Reference), Martin and Hine (Eds.), Oxford University Press (4PthP ed., 2000)。さらに、本発明の実施において読者の助けとなるために以下の定義を示す。
本明細書において「イソ型」とは、重鎖定常領域遺伝子により提供される抗体クラス(例えば、IgM、IgE、IgG1またはIgG4のようなIgG)を指す。
本明細書において「ヒトTSLPRと特異的に結合する」抗体とは、ヒトTSLPRとKD 200×10−12M以下、150×10−12M以下または100×10−12M以下で結合する抗体を指す。
1)アラニン(A)、グリシン(G);
2)アスパラギン酸(D)、グルタミン酸(E);
3)アスパラギン(N)、グルタミン(Q);
4)アルギニン(R)、リシン(K);
5)イソロイシン(I)、ロイシン(L)、メチオニン(M)、バリン(V);
6)フェニルアラニン(F)、チロシン(Y)、トリプトファン(W);
7)セリン(S)、トレオニン(T);および
8)システイン(C)、メチオニン(M)(例えば、Creighton, Proteins (1984)参照)。
1. 概要
本発明は、ヒトTSLPRと特異的に結合する抗体を提供する。これらの抗hTSLPR抗体はTSLPにより媒介されるシグナル伝達活性、例えば、以下の実施例に記載されるようなTSLPにより媒介される細胞増殖に拮抗作用を示し得る。モノクローナル抗体またはポリクローナル抗体の一般的な作製方法は当技術分野でよく知られている。例えば、Harlow & Lane, Using Antibodies, A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, New York, 1998; Kohler & Milstein, Nature 256:495-497, 1975; Kozbor et al., Immunology Today 4:72, 1983;およびCole et al., pp. 77-96 in Monoclonal Antibodies and Cancer Therapy, 1985参照。
本発明の抗hTSLPR抗体のいくつかは、ヒト抗体の領域とともに非ヒト抗hTSLPR抗体アンタゴニスト由来の領域からなるキメラ(例えばマウス/ヒト)抗体である。例えば、キメラH鎖はヒト重鎖定常領域の少なくとも一部と連結されたマウス抗TSLPR抗体の重鎖可変領域の抗原結合領域(例えば配列番号5で示される配列)を含み得る。このキメラ重鎖は、ヒト軽鎖定常領域の少なくとも一部と連結されたマウス抗hTSLPR抗体の軽鎖可変領域の抗原結合領域(例えば配列番号6で示される配列)を含むキメラL鎖と組み合わせることができる。
本発明には、キメラまたはヒト化抗hTSLPR抗体の他、同等の結合特異性および匹敵するまたはより良好な結合親和性を示す完全ヒト抗体も含まれる。例えば、これらのヒト抗体は、配列番号5の重鎖可変領域配列と配列番号6の軽鎖可変領域配列を含む参照ヒト抗体と同等かまたはより良好な特徴を持ち得る。キメラまたはヒト化抗体に比べ、本発明のヒト抗hTSLPR抗体はさらにヒト対象に投与された場合に、さらに抗原性の低減を示す。
本発明の抗hTSLPR抗体はまた、単鎖抗体、二重特異的抗体および多重特異的抗体も含む。いくつかの態様では、本発明の抗体は単鎖抗体である。単鎖抗体は、安定に折り畳まれたポリペプチド鎖内に、重鎖および軽鎖の双方に由来する抗原結合領域を含む。単鎖抗体は一般にそれ自体、結合特異性とモノクローナル抗体の親和性を保持しているが、従来の免疫グロブリンよりも大きさが著しく小さい。ある特定の適用では、本発明の抗hTSLPR単鎖抗体は完全な抗hTSLPR抗体に比べて多くの有利な特性を提供する。これらには例えば、身体からのより迅速なクリアランス、画像診断および治療の両面でより大きな組織浸透、ならびにマウスに基づく抗体に比べて免疫原性の有意な軽減が含まれる。単鎖抗体を用いる他の可能性のある利点としては、ハイスループットスクリーニング法におけるスクリーニング力の向上および非経腸適用の可能性が含まれる。
本発明は、上記の抗hTSLPR抗体のセグメントまたはドメインを含むポリペプチドをコードする実質的に精製されたポリヌクレオチド(DNAまたはRNA)を提供する。本発明のポリヌクレオチドのいくつかは、配列番号13で示される重鎖可変領域のヌクレオチド配列および/または配列番号14で示される軽鎖可変領域のヌクレオチド配列を含む。本発明の他のいくつかのポリヌクレオチドは、配列番号13または配列番号14のヌクレオチド配列と実質的に(例えば少なくとも65、80%、95%または99%)同一のヌクレオチド配列を含む。適当な発現ベクターから発現させると、これらのポリヌクレオチドによりコードされているポリペプチドは抗原結合能を示し得る。
上記の抗hTSLPR抗体が宿主細胞内で発現ベクターから、または内因的にハイブリドーマにおいて発現されると、それらは培養培地および宿主細胞から容易に精製することができる。通常、抗体鎖はシグナル配列ともに発現され、従って、培地に放出される。しかしながら、宿主細胞が抗体鎖を自然に分泌しない場合には、弱い洗剤で処理することで抗体鎖を放出させることができる。次に、硫酸アンモニウム沈殿、固定化標的に対するアフィニティークロマトグラフィー、カラムクロマトグラフィー、ゲル電気泳動などを含む常法により抗体鎖を精製することができる。これらの方法は全てよく知られており、当技術分野で慣例的に実施されている(例えば、Scopes, Protein Purification, Springer-Verlag, NY, 1982; and Harlow & Lane, 前掲)。
得られるポリペプチドが標的タンパク質に特異的な少なくとも1つの結合領域を含む限り、多様な抗体/免疫グロブリンフレームワークまたはスキャフォールドを使用することができる。このようなフレームワークまたはスキャフォールドとしては、5つの主要なイディオタイプのヒト免疫グロブリンまたはそのフラグメント(本明細書の他所に開示されているものなど)を含み、好ましくはヒト化局面を有する他の動物種の免疫グロブリンを含む。ラクダ科で同定されているものなどの単鎖重鎖抗体は、この点で特に着目されるものである。当業者により新規なフレームワーク、スキャフォールドおよびフラグメントの発見および開発が続いている。
アドネクチンスキャフォールドは、III型フィブロネクチンドメイン(例えば、III型フィブロネクチンの10番目のモジュール(10Fn3ドメイン)に基づくものである。このIII型フィブロネクチンドメインは2つのβシートの間に分布する7または8βストランドを有し、それら自体は互いに密集してタンパク質核を形成し、さらに互いにβストランドを接続し、溶媒に曝されるループ(CDRに類似)を含む。βシートサンドイッチの各端にはこのようなループが少なくとも3つあり、この端部はβストランドの方向と垂直にタンパク質の境界となっている(米国特許第6,818,418号)。
この技術は、種々の標的との結合に使用可能な可変領域を保持するためのスキャフォールドとしてアンキリン誘導化リピートモジュールを有するタンパク質の使用に基づくものである。このアンキリンリピートモジュールは2つの逆平行αヘリックスとβターンからなる33個のアミノ酸のポリペプチドである。これらの可変領域の結合はリボソームディスプレーを用いてほぼ至適化される。
アビマーはLRP−1などのタンパク質を含む天然Aドメインに由来する。これらのドメインはタンパク質−タンパク質相互作用により用いられ、ヒトでは250を超えるタンパク質が構造的にAドメインに基づいている。アビマーはアミノ酸リンカーを介して結合したいくつかの異なる「Aドメイン」モノマー(2〜10)からなる。アビマーは、例えば20040175756;20050053973;20050048512;および20060008844に記載されている方法論を用いて標的抗原と結合できるものを作製することができる。
アフィボディ(登録商標)親和性リガンドは、プロテインAのIgG結合ドメインの1つのスキャフォールドに基づく3本のヘリックス束からなる、小さな単純なタンパク質である。プロテインAは黄色ブドウ球菌(Staphylococcus aureus)由来の表面タンパク質である。このスキャフォールドドメインは58のアミノ酸からなり、そのうち13は多数のリガンド変異体を有するアフィボディ(登録商標)ライブラリーを作製するために無作為化されている(例えば、米国特許第5,831,012号参照)。アフィボディ(登録商標)分子は抗体を模倣し、抗体の分子量が150kDaであるのに対して、その分子量は6kDaである。その小さなサイズにもかかわらず、アフィボディ(登録商標)分子の結合部位は抗体のものと同等である。
アンチカリン(登録商標)は、Pieris ProteoLab AG社が開発した製品である。それらは化学的に感受性があるか、または不溶性の化合物の生理学的輸送または貯蔵に通常含まれる、小型かつ頑丈な広範なタンパク質群であるリポカリン類に由来する。数種の天然リポカリンはヒト組織または体液に見られる。
アフィリン(商標)分子は、タンパク質および小分子に対して特異的親和性を持つようにデザインされた小型の非免疫グロブリンタンパク質である。新しいアフィリン(商標)分子は、各々異なるヒト由来スキャフォールドタンパク質に基づく2つのライブラリーから極めて迅速に選択することができる。アフィリン(商標)分子は免疫グロブリンタンパク質に構造的ホモロジーを示さない。Scil Proteinは2つのアフィリン(商標)スキャフォールドを用い、その一方はヒト眼のレンズの構造タンパク質であるγクリスタリンであり、他方は「ユビキチン」スーパーファミリータンパク質である。両ヒトスキャフォールドとも極めて小さく、高温安定性を示し、pH変化および変性剤にほぼ耐性がある。この高い安定性は主としてこれらのタンパク質の拡張βシート構造によるものである。γクリスタリン由来タンパク質の例はWO200104144に記載されており、「ユビキチン様」タンパク質の例はWO2004106368に記載されている。
抗hTSLPR抗体は、TSLPシグナル伝達活性を阻害することにより、多くの治療的または予防的適用で使用することができる。これらには、B細胞の発達、T細胞の発達、T細胞受容体遺伝子再構成、またはStat5転写因子の調節に影響を及ぼすものなど、TSLPシグナル伝達により媒介される疾病または状態の処置を含む。例えば、抗hTSLPRアンタゴニスト抗体は、TH2細胞により媒介される望ましくない免疫応答を抑制または軽減するために使用することができる。特にそれらはTSLPシグナル伝達と関連するか、またはそれにより媒介されるアレルギー性炎症性障害に罹患しているヒト患者を処置するのに好適である。本発明の抗hTSLPR抗体による処置に従うアレルギー性炎症性疾患としては、例えば、(1)空気流の閉塞と気管支の過敏感反応性に関連する気道の慢性炎症性疾患である喘息;(2)長期の断続的処置を必要とする慢性、増悪性の炎症性皮膚疾患であるアトピー性皮膚炎;および(3)アトピーに関連する、TH2リンパ球により媒介される鼻腔粘膜の炎症性障害であるアレルギー性鼻炎が挙げられる。米国およびいくつかの主要な欧州諸国では、喘息、アトピー性皮膚炎およびアレルギー性鼻炎の診断罹患率は、2013年にはそれぞれ現在の4600万人から5300万人に、現在の3170万人から3720万人に、現在の5590万人から6450万人に増えると予測される。アトピー性皮膚炎患者の約50〜80%は喘息またはアレルギー性鼻炎を有しているか、または発症する。
別の態様では、処置される障害または状態は、小児に最も多い皮膚疾患であり、強いかゆみと慢性的湿疹病巣を特徴とするアトピー性(アレルギー性)皮膚炎である。
別の態様では、処置される障害または状態は、他の皮膚の炎症性状態、例えば、乾癬または紅斑性狼瘡から選択される。
別の態様では、処置される障害または状態は、全身性硬化症、肝繊維症、肺繊維症、特発性肺繊維症または繊維肺などの他の繊維性状態から選択される。
本発明の処置は対症的または予防的なものであり得る。
別の態様では、本発明は、医薬組成物および付加的治療薬を提供する。
本発明は、医薬上許容される担体とともに製剤された抗hTSLPRモノクローナル抗体(完全または結合フラグメント)を含む医薬組成物を提供する。これらの組成物は、所与のアレルギー性障害を処置または予防するのに好適な他の治療薬、例えば、上記の既知の抗アレルギー薬をさらに含み得る。医薬担体は組成物を増強または安定化するか、または組成物の調製を助ける。医薬上許容される担体としては、生理学的に適合する溶媒、分散媒、コーティング剤、抗菌薬および抗真菌薬、等張剤および吸収遅延剤などを含む。
本実施例はマウス抗hTSLPRアンタゴニスト抗体の開発について記載する。Bcl2 Wehi22マウス(#1770)を、R&D System (Minneapolis, MN) (カタログ番号981-TR, ロット番号EDY1312A)から購入したヒトTSLPR(Met1−Lys231)/ヒトIgG1 Fc(Pro100−Lys330)融合タンパク質で免疫化した。この免疫化は18日間で計8回の注射により行った。末梢リンパ節からB細胞を単離し、F0骨髄腫細胞(ATCC, Manassas, VA)と融合させた。抗体の産生をhTSLPR/Fcタンパク質に対するELISAによりスクリーニングした。hTSLPRを特異的に認識する抗体を産生する計24のクローンが得られた。hTSLPR抗体と細胞表面TSLPRとの結合はFACSアッセイ(BD Biosciences, San Jose, CA)で分析した。簡単に言うと、BaF3/hTSLPR/hIL7Rα細胞をハイブリドーマ培養上清、その後FITCコンジュゲート抗マウスIgGとともにインキュベートし、FACS装置で分析した。これらの結果は、24クローンのうち14のハイブリドーマクローンが細胞表面受容体と結合できたことを示した。
本実施例はキメラ抗hTSLPR抗体の作製および特性決定について記載する。これらのキメラ抗体は上記のマウス抗hTSLPR抗体1D6.C9クローン由来の可変領域とヒト免疫グロブリン(immuglobulins)由来の定常領域を含む。
本実施例は、抗hTSLPRアンタゴニスト抗体によるヒト単球からの、TSLPにより媒介されるTARC分泌(section)の阻害について記載する。上記のマウスおよびキメラ抗hTSLPR抗体の双方を、ヒト単球による、TH2誘引胸腺活性化調節ケモカイン(TARC)のTSLPにより媒介される分泌に対する作用に関して調べた。TARC分泌アッセイは、抗hTSLPR抗体を添加すること以外、本質的にSoumelis et al., Nat Immunol. 3:673-80, 2002に記載されているようにして行った。結果を図7に示す。図の上の2つのパネルはそれぞれ、TSLPで刺激されたヒト単球およびCD11+樹状細胞からのTARC分泌(section)を示す。下の3つのパネルはそれぞれ、ヒト単球からのTSLPにより媒介されるTARC分泌(section)に対する3つの異なる抗hTSLPR抗体の作用を示す。この図に示されているように、マウス抗hTSLPR抗体およびキメラ抗hTSLPR抗体(IgG1イソ型およびIgG4イソ型の双方)は全て、ヒト単球からのTARC分泌を用量依存的に阻害することができる。これによりさらに、TSLPシグナル伝達に対する抗hTSLPR抗体の拮抗活性が確認された。
NV115-3B配列
VH
QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTTYGISWLRQAPGQGLEWMGWVNTNTGNPRYAQGFTGRFVFSLDTSVSTAYLQISSLKAEDTAVYYCAREGFITTVVGAAGRFVYWGQGTLVTVSS (配列番号22)
VK
DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQDIHTRLAWYQQKPGQPPKLLIYWASTRASGVPDRFSGTGSGTDFTLTISSLQAEDVAVYYCQQYSTYPTFGQGTKLEIK (配列番号23)
NV115-3E配列
VH
QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTTYGISWLRQAPGQGLEWMGWVNTNTGNPRYAQGFTGRFVFSLDTSVSTAYLQISSLKAEDTAVYYCAREGFITTVVGAAGRFVYWGQGTLVTVSS (配列番号24)
VK
EIVMTQSPATLSLSPGERATLSCRASQSVSSSLAWYQQKPGQPPKLLIHWAVTRVSGVPDRFSGSGSGTDFTLTISSLQAEDVAVYYCQQYSTYPTFGQGTKLEIK (配列番号25)
NV115-3E配列
VH
QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTTYGISWLRQAPGQGLEWMGWVNTNTGNPRYAQGFTGRFVFSLDTSVSTAYLQISSLKAEDTAVYYCAREGFITTVVGAAGRFVYWGQGTLVTVSS (配列番号26)
VK
DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQDIHTRLAWYQQKPGQPPKLLIYWASTRGSGVPDRFSGSGSGTDFTLTISSLRAEDVAVYYCQQYSTYPTFGQGTKLEIK (配列番号27)
Claims (19)
- 重鎖CDR1、CDR2およびCDR3配列、それぞれTYGMS(配列番号7)、WINTYSGVPRYADDFKG(配列番号8)およびEGFITTVVGAAGRFVY(配列番号9)と、軽鎖CDR1、CDR2およびCDR3配列、それぞれKASQDVGTAVA(配列番号10)、WASTRHT(配列番号11)およびQQYSTYPT(配列番号12)を含む、単離された抗ヒト胸腺間質性リンホポエチン受容体抗体またはその抗原結合部分。
- 配列番号5の10位〜134位アミノ酸からなる重鎖可変領域アミノ酸配列と、配列番号6の21位〜128位アミノ酸からなる軽鎖可変領域アミノ酸配列を含む、単離された抗ヒト胸腺間質性リンホポエチン受容体抗体またはその抗原結合部分。
- マウス抗体である、請求項1に記載の抗体。
- キメラ抗体である、請求項1に記載の抗体。
- ヒト重鎖定常領域とヒト軽鎖定常領域を含む、請求項1に記載の抗体。
- ヒト化抗体である、請求項1に記載の抗体。
- ヒト抗体である、請求項2に記載の抗体。
- 単鎖抗体である、請求項1に記載の抗体。
- Fabフラグメントである、請求項1に記載の抗体。
- IgG1またはIgG4イソ型である、請求項1に記載の抗体。
- 請求項1に記載の抗体の重鎖可変領域および軽鎖可変領域を含むポリペプチドをコードする単離されたまたは組み換えポリヌクレオチド。
- 抗体がヒト化抗体またはヒト抗体である、請求項11に記載のポリヌクレオチド。
- 前記抗体をコードするポリヌクレオチドが重鎖CDR1、CDR2およびCDR3配列、それぞれTYGMS(配列番号7)、WINTYSGVPRYADDFKG(配列番号8)およびEGFITTVVGAAGRFVY(配列番号9)と、軽鎖CDR1、CDR2およびCDR3配列、それぞれKASQDVGTAVA(配列番号10)、WASTRHT(配列番号11)およびQQYSTYPT(配列番号12)を含む、請求項11に記載のポリヌクレオチド。
- 請求項2に記載の抗体またはその抗原結合部分をコードする単離されたまたは組み換えポリヌクレオチド。
- DNAである、請求項11または14に記載のポリヌクレオチド。
- (1)請求項1または2に記載の抗体の重鎖をコードする組み換えDNAセグメントと(
2)該抗体の軽鎖をコードする第二の組み換えDNAセグメントを含む、単離された宿主
細胞であって、該DNAセグメントがそれぞれ第一および第二のプロモーターに作動可能なように連結され、かつ、前記宿主細胞で発現することができる、宿主細胞。 - 前記モノクローナル抗体がヒト化抗体またはヒト抗体である、請求項16に記載の宿主細胞。
- 前記モノクローナル抗体が重鎖CDR1、CDR2およびCDR3配列、それぞれTYGMS(配列番号7)、WINTYSGVPRYADDFKG(配列番号8)およびEGFITTVVGAAGRFVY(配列番号9)と、軽鎖CDR1、CDR2およびCDR3配列、それぞれKASQDVGTAVA(配列番号10)、WASTRHT(配列番号11)およびQQYSTYPT(配列番号12)を含む、請求項16に記載の宿主細胞。
- 非ヒト哺乳類細胞系統である、請求項16に記載の宿主細胞。
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US75962506P | 2006-01-13 | 2006-01-13 | |
US60/759,625 | 2006-01-13 | ||
PCT/US2007/060379 WO2007112146A2 (en) | 2006-01-13 | 2007-01-11 | Antibodies against thymic stromal lymphopoietin receptor for treating allergic diseases |
Publications (3)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2009523426A JP2009523426A (ja) | 2009-06-25 |
JP2009523426A5 JP2009523426A5 (ja) | 2009-09-24 |
JP5258578B2 true JP5258578B2 (ja) | 2013-08-07 |
Family
ID=38541770
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2008550514A Expired - Fee Related JP5258578B2 (ja) | 2006-01-13 | 2007-01-11 | アレルギー性疾患を処置するための胸腺間質性リンホポエチン受容体に対する抗体 |
Country Status (13)
Country | Link |
---|---|
US (2) | US8097705B2 (ja) |
EP (2) | EP1981912A2 (ja) |
JP (1) | JP5258578B2 (ja) |
KR (1) | KR101383472B1 (ja) |
CN (1) | CN101370831B (ja) |
AR (1) | AR058983A1 (ja) |
AU (1) | AU2007230868B2 (ja) |
BR (1) | BRPI0706530A2 (ja) |
CA (1) | CA2635599C (ja) |
PE (1) | PE20081186A1 (ja) |
RU (1) | RU2486202C2 (ja) |
TW (1) | TWI401261B (ja) |
WO (1) | WO2007112146A2 (ja) |
Families Citing this family (28)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
DK1129190T4 (en) | 1998-11-13 | 2017-04-03 | Immunex Corp | Human TSLP DNA and polypeptides |
JP2004519205A (ja) * | 2000-06-28 | 2004-07-02 | アムジェン インコーポレイテッド | 胸腺間質リンホポイエチンレセプター分子およびその使用 |
DK1417231T3 (da) | 2001-07-23 | 2013-07-22 | Immunex Corp | Modificeret human thymisk stromal lymphopoietin |
EA201000006A1 (ru) * | 2007-06-20 | 2010-10-29 | Айрм Ллк | Способы и композиции для лечения аллергических заболеваний |
US20090176654A1 (en) | 2007-08-10 | 2009-07-09 | Protelix, Inc. | Universal fibronectin type III binding-domain libraries |
US8470966B2 (en) | 2007-08-10 | 2013-06-25 | Protelica, Inc. | Universal fibronectin type III binding-domain libraries |
US8680019B2 (en) | 2007-08-10 | 2014-03-25 | Protelica, Inc. | Universal fibronectin Type III binding-domain libraries |
US7982016B2 (en) | 2007-09-10 | 2011-07-19 | Amgen Inc. | Antigen binding proteins capable of binding thymic stromal lymphopoietin |
CN101986784A (zh) | 2008-02-07 | 2011-03-16 | 先灵公司 | 基因工程tslpr抗体 |
EP2213682A1 (en) | 2009-01-30 | 2010-08-04 | Institut Curie | TSLP promotes immune evasion and persistence of viruses |
SG10201401976YA (en) * | 2009-05-06 | 2014-10-30 | Biotest Ag | Uses of immunoconjugates targeting cd138 |
WO2012007495A1 (en) | 2010-07-15 | 2012-01-19 | F. Hoffmann-La Roche Ag | Antibodies specifically binding to human tslpr and methods of use |
CN104098696A (zh) * | 2013-04-07 | 2014-10-15 | 中美华世通生物医药科技(武汉)有限公司 | 一种抗血管内皮生长因子的单克隆抗体 |
JP6380394B2 (ja) | 2013-08-09 | 2018-08-29 | アステラス製薬株式会社 | 新規抗ヒトtslp受容体抗体 |
CN104804087A (zh) * | 2014-01-26 | 2015-07-29 | 中美华世通生物医药科技(武汉)有限公司 | 一种抗血管内皮生长因子的单克隆抗体16-3 |
CN104804088A (zh) * | 2014-01-26 | 2015-07-29 | 中美华世通生物医药科技(武汉)有限公司 | 一种抗vegf的单克隆抗体 |
SG10202001779UA (en) | 2015-01-20 | 2020-04-29 | Igm Biosciences Inc | Tumor necrosis factor (tnf) superfamily receptor binding molecules and uses thereof |
ES2883128T3 (es) | 2015-09-04 | 2021-12-07 | Health Research Inc | Anticuerpos anti-survivina para la terapia contra el cáncer |
CA2996635A1 (en) * | 2015-09-09 | 2017-03-16 | Novartis Ag | Thymic stromal lymphopoietin (tslp)-binding molecules and methods of using the molecules |
AU2016320748B2 (en) | 2015-09-09 | 2019-05-02 | Novartis Ag | Thymic stromal lymphopoietin (TSLP)-binding antibodies and methods of using the antibodies |
MX2018007520A (es) | 2015-12-18 | 2018-08-01 | Astellas Pharma Inc | Composicion farmaceutica que comprende un anticuerpo receptor de linfopoyetina estromal timica antihumano. |
US20190093164A1 (en) * | 2016-02-22 | 2019-03-28 | National University Corporation Chiba University | Biomarker for diagnosis of allergic rhinitis |
CN110997939A (zh) * | 2017-08-16 | 2020-04-10 | 免疫医疗有限责任公司 | 用于治疗特应性皮炎的组合物和方法以及治疗选择 |
CN109988759A (zh) * | 2017-12-29 | 2019-07-09 | 上海细胞治疗研究院 | 一种在t细胞中具有高转录活性的嵌合启动子 |
CN111196850B (zh) * | 2020-02-07 | 2020-10-30 | 北京汇智和源生物技术有限公司 | 人胸腺基质淋巴细胞生成素单克隆抗体及其应用 |
CN113069543B (zh) * | 2021-06-07 | 2021-08-06 | 迈威(上海)生物科技股份有限公司 | 包含抗胸腺基质淋巴细胞生成素的单克隆抗体的液体组合物 |
WO2023028612A2 (en) | 2021-08-27 | 2023-03-02 | Board Of Regents, The University Of Texas System | Anti-tslpr (crlf2) antibodies |
CN117209604B (zh) * | 2021-12-02 | 2024-03-22 | 北京东方百泰生物科技股份有限公司 | 一种抗tslp的单克隆抗体、其抗原结合片段及其应用 |
Family Cites Families (8)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
DE69333807T2 (de) * | 1992-02-06 | 2006-02-02 | Chiron Corp., Emeryville | Marker für krebs und biosynthetisches bindeprotein dafür |
DK1129190T4 (en) * | 1998-11-13 | 2017-04-03 | Immunex Corp | Human TSLP DNA and polypeptides |
JP2004519205A (ja) * | 2000-06-28 | 2004-07-02 | アムジェン インコーポレイテッド | 胸腺間質リンホポイエチンレセプター分子およびその使用 |
ES2357225T3 (es) * | 2001-11-01 | 2011-04-20 | Uab Research Foundation | Combinaciones de anticuerpos anti-dr5 y anticuerpos anti-dr4 y otros agentes terapéuticos. |
CA2469833C (en) * | 2001-12-21 | 2008-05-20 | Idexx Laboratories, Inc. | Canine immunoglobulin variable domains, caninized antibodies, and methods for making and using them |
US20050249712A1 (en) * | 2004-03-23 | 2005-11-10 | The Government Of The Usa As Represented By The Secretary Of The Dept. Of Health & Human Services | Methods for use of TSLP and agonists and antagonists thereof |
CN1964990B (zh) * | 2004-04-29 | 2012-12-12 | 大冢制药株式会社 | 糖蛋白ⅵ特异的抗体以及生产这些抗体的方法 |
US20060039910A1 (en) * | 2004-08-20 | 2006-02-23 | Amgen Inc. | Methods and compositions for treating allergic inflammation |
-
2007
- 2007-01-11 EP EP07756333A patent/EP1981912A2/en not_active Withdrawn
- 2007-01-11 PE PE2007000030A patent/PE20081186A1/es not_active Application Discontinuation
- 2007-01-11 KR KR1020087016912A patent/KR101383472B1/ko not_active IP Right Cessation
- 2007-01-11 WO PCT/US2007/060379 patent/WO2007112146A2/en active Application Filing
- 2007-01-11 CN CN2007800030912A patent/CN101370831B/zh not_active Expired - Fee Related
- 2007-01-11 AU AU2007230868A patent/AU2007230868B2/en not_active Ceased
- 2007-01-11 CA CA2635599A patent/CA2635599C/en not_active Expired - Fee Related
- 2007-01-11 JP JP2008550514A patent/JP5258578B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 2007-01-11 AR ARP070100117A patent/AR058983A1/es not_active Application Discontinuation
- 2007-01-11 EP EP10180544A patent/EP2287196A3/en not_active Withdrawn
- 2007-01-11 RU RU2008132968/10A patent/RU2486202C2/ru not_active IP Right Cessation
- 2007-01-11 BR BRPI0706530-2A patent/BRPI0706530A2/pt not_active IP Right Cessation
- 2007-01-11 US US12/160,868 patent/US8097705B2/en not_active Expired - Fee Related
- 2007-01-12 TW TW096101195A patent/TWI401261B/zh not_active IP Right Cessation
-
2011
- 2011-09-23 US US13/242,418 patent/US20120027756A1/en not_active Abandoned
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
CA2635599C (en) | 2014-06-17 |
EP2287196A2 (en) | 2011-02-23 |
KR20080090418A (ko) | 2008-10-08 |
US8097705B2 (en) | 2012-01-17 |
BRPI0706530A2 (pt) | 2011-03-29 |
WO2007112146A2 (en) | 2007-10-04 |
AU2007230868B2 (en) | 2012-02-02 |
EP1981912A2 (en) | 2008-10-22 |
PE20081186A1 (es) | 2008-09-24 |
RU2486202C2 (ru) | 2013-06-27 |
KR101383472B1 (ko) | 2014-04-08 |
RU2008132968A (ru) | 2010-02-20 |
US20120027756A1 (en) | 2012-02-02 |
AR058983A1 (es) | 2008-03-05 |
JP2009523426A (ja) | 2009-06-25 |
TWI401261B (zh) | 2013-07-11 |
EP2287196A3 (en) | 2011-05-04 |
AU2007230868A1 (en) | 2007-10-04 |
TW200736275A (en) | 2007-10-01 |
CN101370831A (zh) | 2009-02-18 |
US20090286312A1 (en) | 2009-11-19 |
CA2635599A1 (en) | 2007-10-04 |
CN101370831B (zh) | 2013-06-19 |
WO2007112146A3 (en) | 2008-06-05 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP5258578B2 (ja) | アレルギー性疾患を処置するための胸腺間質性リンホポエチン受容体に対する抗体 | |
US8101182B2 (en) | Methods and compositions for treating allergic diseases | |
US11124565B2 (en) | Method for treating pre-type 1 diabetes in a human subject | |
TWI431013B (zh) | 有機分子 | |
RU2412202C2 (ru) | Антитела рецептора 1 интерферона альфа и их применение | |
BRPI0708145A2 (pt) | compostos orgánicos | |
KR20100100985A (ko) | 인터루킨-4 수용체 알파(IL-4Rα)에 대한 결합 구성원-173 | |
CA2822515A1 (en) | Anti-il-18 antibodies and their uses | |
JP2010503381A (ja) | プロテアーゼ活性化受容体1(par1)のアンタゴニスト | |
CA3052095A1 (en) | Anti-tnf antibodies, compositions, and methods for the treatment of active psoriatic arthritis | |
JP2017520562A (ja) | コロニー刺激因子1受容体(csf1r)に結合する抗体で疾患を治療する方法 | |
US20220323580A1 (en) | Anti-tnf antibody compositions, and methods for the treatment of psoriatic arthritis | |
MX2008008949A (es) | Anticuerpos contra el receptor de linfopoietina estromal timico para el tratamiento de enfermedades alergicas | |
US20220064278A1 (en) | Anti-TNF Antibody Compositions for Use in Methods for the Treatment of Psoriatic Arthritis |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A521 | Written amendment |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20090731 |
|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20091225 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20120710 |
|
A521 | Written amendment |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20121009 |
|
A02 | Decision of refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A02 Effective date: 20121113 |
|
RD03 | Notification of appointment of power of attorney |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A7423 Effective date: 20121205 |
|
A521 | Written amendment |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20130305 |
|
A911 | Transfer to examiner for re-examination before appeal (zenchi) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A911 Effective date: 20130312 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20130409 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20130423 |
|
FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20160502 Year of fee payment: 3 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
LAPS | Cancellation because of no payment of annual fees |