MX2008008949A - Anticuerpos contra el receptor de linfopoietina estromal timico para el tratamiento de enfermedades alergicas - Google Patents

Abstract

En la presente invención se dan a conocer anticuerpos que reconocen y antagonizan específicamente al receptor de TSLP humano, y métodos para emplear estos anticuerpos con el fin de tratar o disminuir las enfermedades o los trastornos mediados por la señalización de TSLP:

Description

ANTICUERPOS CONTRA EL RECEPTOR DE LINFOPOIETINA ESTROMAL TIMICO PARA EL TRATAMIENTO DE ENFERMEDADES ALÉRGICAS ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN Las citoq uinas y las células inmunes median mecanismos o sendas fisiológicas específicas, por ejemplo las sendas que conducen a los diferentes trastornos inflamatorios. La linfopoietina estromal tímica humana (TSLP) es u na citoquina tipo I L-7 que se produce a partir de las células epiteliales humanas. Promueve la diferenciación de las células-B, y también puede co-estimular tanto a los timocitos como a las células-T maduras. La TSLP se enlaza con un receptor heterodimérico específico en las células dendríticas CD 1 1 c+ h umanas (DC) . El heterod ímero receptor consiste en u na cadena receptora tipo-gamma común (receptor de TSLP; TSLPR), y la cadena de I L-7R-a. Ver, por ejemplo, Tonozuka y colaboradores, Cytogenet. Cell Genet. 93:23-25, 2001 ; Pandey y colaboradores, Nat. Immunol. 1 :59-64, 2000; L. S. Park y colaboradores, J. Exp. Med. 1 92 :659-670, 2000; y Reche y colaboradores, J. Immunol. 1 67:336-343, 2001 . El enlace del ligando con el receptor induce a las células dend ríticas a secretar las quimiocinas atrayentes de TH2 , la TARC (quimiocina del timo y regulada por la activación) , y la M DC (quimiocina derivada de macrófagos) . En adición , la TSLP también induce una potente activación de las células dendríticas, expansión de las células-T CD4+ puras, y la subsecuente polarización hasta un fenotipo TH2 , produciendo las citoquinas pro-alérgicas: interleucina 4 (I L-4), I L-5, I L-1 3, y el factor de necrosis tumoral-a. También se encontró que la señalización de I TSLP da como resultado la activación del factor de transcripción Statd. Adicionalmente, se ha reportado que los pacientes con dermatitis atópica tanto aguda como crónica, sobre-expresan la TSLP en las lesiones de la piel , sugiriendo que la expresión de la TSLP está asociada con la inflamación alérgica in vivo. Aparte de los queratinocitos de la piel , también se ha encontrado un alto nivel de expresión de TSLP en las células epiteliales bronquiales, en los múscu los lisos, y en los fibroblastos pulmonares, apoyando un papel potencial de la TSLP en las indicaciones alérgicas respiratorias también . Más aún , los mastocitos activados por Ig E expresan un nivel muy alto de TSLP , un mecanismo que podría participar en el mantenimiento del fenotipo TH2. Aproximadamente el 20 por ciento de la población de los pa íses occidentales sufre de trastornos inflamatorios, por ejemplo las enfermedades alérgicas, las cuales incluyen asma , rinitis, dermatitis atópica, y alergia a los alimentos. Del 50 por ciento al 80 por ciento e los pacientes con dermatitis atópica tienen o desarrollan asma o rinitis alérgica. Hasta la fecha, no existe cura alguna para el asma inducido por alergia, la dermatitis atópica , y la rinitis alérgica. Los tratamientos actuales, tales como los antagonistas del ad renoceptor beta-2 para el asma, Elidel para la dermatitis atópica , y la anti-histamina-H 1 para la rinitis alérgica, se utilizan para resolver los s íntom as. Por consiguiente , existe una mayor necesidad en la técn ica de mejores terapias para tratar estos trastornos inflam atorios , en particular la infla mación alérgica . La presente invención resuelve este y otros problemas. BREVE DESCRIPCIÓN DE LA INVENCIÓN Una modalidad de la presente invención proporciona un anticuerpo humano o humanizado aislado, o un fragmento funcional del mismo, con una región de enlace de antígeno que es específica para la proteína objetiva del receptor de linfopoietina estromal tímica humana (hTSLPR), y el anticuerpo o fragmento funcional del mismo se enlaza con hTSLPR. En una modalidad relacionada, el enlace con el hTSLPR es determinado cuando menos por el enlace del receptor de hTSLP de superficie celular que previene la liberación del mediador inflamatorio. En todavía otra modalidad, la invención proporciona una región de enlace de antígeno aislada de un anticuerpo o fragmento funcional del mismo. En ciertas modalidades, la región de enlace de antígeno aislada incluye una región H-CDR 1 que tiene una secuencia de aminoácido de TYG MS (SEQ I D NO: 7) , y las variantes conservadoras de la misma. Como se describe en la presente, las variantes conservadoras incluyen los residuos de aminoácidos en cualquiera de las secuencias de aminoácidos identificadas. En una modalidad relacionada, la región de enlace de antígeno aislada es una región H-CDR2 q ue tiene una secuencia de aminoácidos de WI NTYSGVPRYADDFKG (SEQ I D NO:8) , y las variantes conservadoras de la misma. En otra modalidad relacionada, la región de enlace de antígeno aislada es una región h-CDR3 que tiene una secuencia de aminoácidos de EGFITTVVGAAGRFVY (SEQ ID NO:9), y las variantes conservadoras de la misma. En otra modalidad, la región de enlace de antígeno aislada es una región L-CDR1, que tiene una secuencia de aminoácidos de KASQDVGTAVA (SEQ ID NO:10), y las variantes conservadoras de la misma. En todavía otra modalidad relacionada, la región de enlace de antígeno aislada es una región L-CDR2, que tiene una secuencia de aminoácido de WASTRHT (SEQ ID NO:11), y las variantes conservadoras de la misma. En todavía otra modalidad relacionada, la región de enlace de antígeno aislada es una región L-CDR3, que tiene una secuencia de aminoácidos de QQYSTYPT (SEQ ID NO:12), y las variantes conservadoras de la misma. En otra modalidad, la región de enlace de antígeno aislada es una cadena pesada que tiene la secuencia de aminoácidos de región variable SEQ ID NO:5, y una secuencia que tiene una identidad de secuencia de cuando menos el 60, 70, 80, 90, ó 95 por ciento en las regiones CDR, con la región CDR de la SEQ ID NO:5. En una modalidad relacionada, la región de enlace de antígeno aislada es una cadena ligera que tiene la secuencia de aminoácidos de región variable SEQ ID NO:6, y una secuencia que tiene una identidad de secuencia de cuando menos el 60, 70, 80, 90, ó 95 por ciento en las regiones CDR con la región CDR de la SEQ ID NO:6. En otro aspecto, la presente invención proporciona anticuerpos monoclonales antagonistas contra hTSLPR. Algunos de los anticuerpos anti-TSLPR de la invención tienen la misma especificidad de enlace que aquélla de un anticuerpo de referencia que contiene una secuencia de región variable de cadena pesada de la SEQ ID NO:5, y una secuencia de región variable de cadena ligera de la SEQ ID NO:6. Algunos de estos anticuerpos son anticuerpos completamente humanos que exhiben la misma especificidad de enlace que aquélla del anticuerpo de referencia. Algunos de los anticuerpos tienen una secuencia de la región determinante de complementariedad (CDR) de cadena pesada de TYGMS (SEQ ID NO:7), WINTYSGVPRYADDFKG (SEQ ID NO:8) ó EGFITTVVGAAGRFVY (SEQ ID NO:9); o una secuencia de región determinante de complementariedad de cadena ligera de KASQDVGTAVA (SEQ ID NO:10), WASTRHT (SEQ ID NO:11), ó QQYSTYPT (SEQ ID NO:12). Algunos de los anticuerpos anti-hTSLPR tienen las secuencias CDR1, CDR2, y CDR3 de cadena pesada, TYGMS (SEQ ID NO:7), WINTYSGVPRYADDFKG (SEQ ID NO:8), y EGFITTVVGAAGRFVY (SEQ ID NO:9), respectivamente; y las secuencias CDR1, CDR2, y CDR3 de cadena ligera, KASQDVGTAVA (SEQ ID NO:10), WASTRHT (SEQ ID NO:11), y QQYSTYPT (SEQ ID NO:12), respectivamente. Algunos otros anticuerpos de la invención contienen una secuencia de aminoácidos de la región variable de cadena pesada que es cuando menos el 85 por ciento idéntica a la SEQ ID NO:5, y una secuencia de aminoácidos de la región variable de cadena ligera que es cuando menos 85 por ciento idéntica a la SEQ ID NO:6. Algunos otros anticuerpos anti-hTSLPR de la invención tienen una secuencia de aminoácidos de la región variable de cadena pesada que es idéntica a la SEQ ID NO:5, y una secuencia de aminoácidos de la región variable de cadena ligera que es idéntica a la SEQ ID NO:6. Algunos anticuerpos anti-hTSLPR de la invención son anticuerpos de ratón. Algunos otros son anticuerpos quiméricos. Algunos de los anticuerpos quiméricos tienen una región constante de cadena pesada humana y una región constante de cadena ligera humana. Algunos otros anticuerpos anti-hTSLPR de la invención son anticuerpos humanizados. Algunos otros anticuerpos anti-hTSLPR de la invención son anticuerpos completamente humanos que exhiben la misma especificidad de enlace que un anticuerpo que contenga una secuencia de la región variable de cadena pesada de la SEQ ID NO:5, y una secuencia de la región variable de cadena ligera de la SEQ ID NO:6. En la invención también se proporcionan anticuerpos de una sola cadena, por ejemplo un fragmento Fab. Algunos de los anticuerpos anti-hTSLPR son del isotipo IgG 1. Algunos otros anticuerpos son del isotipo lgG4. En otro aspecto, la invención proporciona polinucleótidos aislados o recombinantes (por ejemplo, ADN) que codifican un polipéptido que contiene la región variable de cadena pesada o la región variable de cadena ligera del anticuerpo anti-hTSLPR de la invención. Por ejemplo, los polinucleótidos que codifican una cadena pesada de anticuerpo que contiene las secuencias CDR1, CDR2, y CDR3 de cadena pesada, TYGMS (SEQ ID NO:7), WINTYSGVPRYADDFKG (SEQ ID NO:8), y EGFITTVVGAAGRFVY (SEQ ID NO:9), respectivamente. Los polinucleótidos también pueden codificar una cadena ligera de anticuerpo que contenga las secuencias CDR1, CDR2, y CDR3, KASQDVGTAVA (SEQ ID NO:10), WASTRHT (SEQ ID NO:11), y QQYSTYPT (SEQ ID NO:12), respectivamente. Algunos polinucleótidos de la invención codifican una secuencia de la región variable de cadena pesada madura que es cuando menos el 90 por ciento idéntica a la región madura de la SEQ ID NO:5. Algunos otros polinucleótidos codifican una secuencia de la región variable de cadena ligera madura que es cuando menos el 90 por ciento idéntica a la región madura de la SEQ ID NO:6. Algunos de estos polinucleótidos codifican una secuencia de la región variable de cadena pesada madura que es idéntica a la región madura de la SEQ ID NO:5, o una secuencia de la región variable de cadena ligera madura que es idéntica a la región madura de la SEQ ID NO:6. En otro aspecto, la invención proporciona células huéspedes aisladas que alojan: (1) un segmento de ADN recombinante que codifica una cadena pesada de un anticuerpo anti-hTSLPR de la invención, y (2) un segundo segmento de ADN recombinante que codifica una cadena ligera del anticuerpo. En algunas de las células huéspedes, los segmentos de ADN recombinante respectivamente se enlazan operativamente con un primero y un segundo promotor, y son capaces de expresarse en las células huéspedes. Algunas de estas células huéspedes expresan un anticuerpo monoclonal que tiene las secuencias CDR1, CDR2, y CDR3 de cadena pesada, TYGMS (SEQ ID NO:7), WINTYSGVPRYADDFKG (SEQ ID NO:8), y EGFITTVVGAAGRFVY (SEQ ID NO:9), respectivamente; y las secuencias CDR1, CDR2, y CDR3 de cadena ligera, KASQDVGTAVA (SEQ ID NO:10), WASTRHT (SEQ ID NO:11), y QQYSTYPT (SEQ ID NO:12), respectivamente. Algunas otras células huéspedes expresan un anticuerpo anti-hTSLPR que contiene una secuencia de la región variable de cadena pesada madura que es cuando menos el 90 por ciento idéntica a la región madura de la SEQ ID NO:5; y una secuencia de la región variable de cadena ligera madura que es cuando menos el 90 por ciento idéntica a la región madura de la SEQ ID NO:6. Algunas de estas células huéspedes expresan un anticuerpo anti-hTSLPR que contiene una secuencia de la región variable de cadena pesada madura que es idéntica a la región madura de la SEQ ID NO:5, y una secuencia de la región variable de cadena ligera madura que es idéntica a la región madura de la SEQ ID NO:6. Algunas de las células huéspedes son células de mamífero no humano. En otro aspecto, la invención proporciona métodos para el tratamiento de un trastorno inflamatorio en un sujeto, por ejemplo un paciente humano. Estos métodos implican administrar al sujeto una composición farmacéutica que contiene una cantidad efectiva de un anticuerpo anti-hTSLPR. Típicamente, el anticuerpo anti-hTSLPR tiene la misma especificidad de enlace que aquélla de un anticuerpo anti-hTSLPR que contiene una secuencia de la región variable de cadena pesada de la SEQ ID NO:5, y una secuencia de la región variable de cadena ligera de la SEQ ID NO:6. En algunos de estos métodos terapéuticos, se emplea un anticuerpo completamente humano. En algunos métodos, el anticuerpo anti-TSLPR aloja a las secuencias CDR1, CDR2, y CDR3 de cadena pesada, TYGMS (SEQ ID NO:7), WINTYSGVPRYADDFKG (SEQ ID NO:8), y EGFITTVVGAAGRFVY (SEQ ID NO:9), respectivamente; y a las secuencias CDR1, CDR2, y CDR3 de cadena ligera, KASQDVGTAVA (SEQ ID NO:10), WASTRHT (SEQ ID NO:11), y QQYSTYPT (SEQ ID NO:12), respectivamente. En algunos métodos, el anticuerpo anti-hTSLPR empleado contiene una secuencia de la región variable de cadena pesada madura que es idéntica a la región madura de la SEQ ID NO:5, y una secuencia de la región variable de cadena ligera madura que es idéntica a la región madura de la SEQ ID NO:6. Algunos de los métodos se dirigen al tratamiento de sujetos que sufran de una enfermedad inflamatoria alérgica. Los ejemplos de las enfermedades inflamatorias alérgicas que son susceptibles al tratamiento incluyen dermatitis atópica, asma, o rinitis alérgica. En todavía otra modalidad, la invención proporciona un inmunoconjugado hecho de un primer componente que es un anticuerpo o fragmento del mismo, y un segundo componente que tiene una segunda secuencia de aminoácidos. Por ejemplo, el inmunoconjugado es una citotoxina, o el inmunoconjugado es una proteína de enlace o un anticuerpo que tiene una especificidad de enlace para un objetivo que es diferente de hTSLPR. En otra modalidad, la invención proporciona un kit que tiene un anticuerpo o fragmento del mismo. En algunas modalidades, el kit contiene además un vehículo o excipiente farmacéuticamente aceptable para el mismo. En otras modalidades relacionadas, el anticuerpo del kit está presente en una dosis unitaria. En todavía otra modalidad relacionada, el kit incluye instrucciones para utilizarse en la administración a un sujeto. Se puede tener un entendimiento adicional de la naturaleza y de las ventajas de la presente invención haciendo referencia a las porciones restantes de la memoria descriptiva y a las reivindicaciones. BREVE DESCRIPCIÓN DE LOS DIBUJOS La Figura 1 muestra el rastreo de anticuerpos antagonistas anti-TSLPR, utilizando un ensayo de proliferación celular dependiente de hTSLP, en células BaF3/hTSLPR/hlL7Ra. Las Figuras 2A-2C muestran la purificación de los anticuerpos monoclonales anti-hTSLPR de ratón y quiméricos. A: anticuerpo lgG1 quimérico; B: anticuerpo lgG4 quimérico; y C: anticuerpo lgG1 de ratón. Las Figuras 3A-3C muestran la actividad antagonista del anticuerpo anti-hTSLPR de ratón purificado (clon 1D6.C9) mediante el ensayo de proliferación celular y el ensayo de reportero de luciferasa. A: proliferación de células Ba/F3-hTSLPR-hlL7Ra; B: proliferación de células BaF3/hTSLPR/hlL7Ra/Stat5-Luc; y C: actividad de luciferasa de las célu las BaF3/hTS LPR/h l L7 Ra/Stat5-Luc. La Figura 4 muestra las secuencias de nucleótidos de las regiones variables del clon 1 D6.C9 del anticuerpo monoclonal anti-hTSLPR de ratón . La Figura 5 exhibe las secuencias de aminoácidos de la región variable del clon 1 D6. C9 del anticuerpo anti-hTSLPR de ratón . Las regiones determinantes de complementariedad (CDRs) y las regiones de estructura (FRs) se indican mediante los residuos subrayados o los residuos en itálicas. La Figura 6 muestra los resultados de los ensayos del reportero de luciferasa, que comparan la actividad antagonista de los anticuerpos anti-hTSLPR de ratón y quiméricos purificados en células Ba/F3 que sobre-expresan hTSLPR, h l L7Ra, y Stat5-Luc. La Figura 7 muestra la inhibición de la sección TARC mediada por TSLP de los monocitos humanos, por parte de los anticuerpos anti-hTSLPR de ratón y quimérico. La Figura 8 muestra la identificación del Dominio de Enlace de Anticuerpo - el anticuerpo TSLPR se enlaza con un epítopo discontin uo. DESC RI PCIÓN DETALLADA DE LA INVENCIÓN La presente invención se predica en partes sobre el desarrollo por parte de los presentes inventores de anticuerpos antagonistas contra el TSLPR humano. Se encontró que los anticuerpos anti-hTSLPR generados en anticuerpos anti-hTSLPR de ratón o qu iméricos creados in vitro, son capaces de inhibir las actividades mediadas por la señalización de TSLP, por ejemplo la proliferación celular mediada por TSLP. Por consiguiente, estos anticuerpos son útiles como agentes terapéuticos o profilácticos contra un número de enfermedades o trastornos mediados por, o asociados con , las actividades de señalización de TSLP, por ejemplo enfermedades inflamatorias alérgicas, tales como dermatitis atópica y asma . Las siguientes secciones proporcionan una gu ía para hacer y usar las composiciones de la invención , y para llevar a cabo los métodos de la invención . I. Definiciones A menos que se definan de otra manera, todos los términos técnicos y científicos utilizados en la presente tienen el mismo significado que es entendido comúnmente por los expertos ordinarios en el campo al que pertenece esta invención . Las siguientes referencias proporcionan a un experto una definición general de muchos de los términos utilizados en esta invención : Oxford Dictionary of Biochemistry and Molecular Biology, Smith y colaboradores (editores) , Oxford U niversity Press (edición revisada , 2000) ; Dictionary of M icrobiology and Molecular Biology, Singleton y colaboradores (editores) , John Wiley and Sons (edición 3Prd P, 2002) ; y A Dictionary of Biology (Referencia de Contraportada de Oxford) , Martin y Hiñe (editores), Oxford University Press (edición 4PthP , 2000) . En adición , se proporcionan las siguientes definiciones para ayudar al lector en la práctica de la invención .

Con el objeto de que la presente invención se pueda entender más fácilmente, primero se definen ciertos términos. Se estipulan definiciones adicionales a través de toda la descripción detallada. El término "respuesta inmune" se refiere a la acción, por ejemplo, de los linfocitos, las células presentadoras de antígeno, las células fagocíticas, los granulocitos, y las macromoléculas solubles producidas por las células anteriores o por el hígado (incluyendo anticuerpos, citoquinas, y complementos), que da como resultado el daño selectivo a, la destrucción de, o la eliminación desde el cuerpo humano de, patógenos invasores, células o tejidos infectados con patógenos, células cancerosas, o en los casos de inflamación por autoinmunidad o patológica, las células o tejidos humanos normales.

Una "senda de transducción de señal" se refiere a la relación bioquímica entre una variedad de moléculas de transducción de señales que tienen un papel en la transmisión de una señal desde una porción de una célula hasta otra porción de una célula. El término "anticuerpo", como es referido en la presente, incluye los anticuerpos enteros y cualquier fragmento de enlace de antígeno (es decir, "porción de enlace de antígeno), o las cadenas individuales de los mismos. Un "anticuerpo" que se presenta naturalmente, es una glicoproteína que comprende cuando menos dos cadenas pesadas (H) y dos cadenas ligeras (L) interconectadas por enlaces de disulfuro. Cada cadena pesada está comprendida de una región variable de cadena pesada (abreviada en la presente como VH), y una región constante de cadena pesada. La región constante de cadena pesada está com prendida de tres dom in ios , C H 1 , C H2 , y C H 3. Cada cadena ligera está com prend ida de una región va ria ble de cadena ligera (abreviada en la presente com o VL), y una región constante de cadena ligera . La región constante de cadena ligera está comprendida de un dominio, CL. Las regiones VH y VL se pueden subdividir adicionalmente en regiones de hipervariabilidad , denominadas como regiones determinantes de complementariedad (CDR), intercaladas con regiones q ue están más conservadas, denominadas como regiones de estructu ra (FR) . Cada VH y VL está compuesta de tres regiones determinantes de complementariedad y cuatro regiones de estructura configuradas desde el término amino hasta el término carboxilo en el siguiente orden : FR 1 , CDR1 , FR2 , CDR2, FR3, CDR3, FR4. Las regiones variables de las cadenas pesada y ligera contienen un dominio de enlace que interactúa con un antígeno. Las regiones constantes de los anticuerpos pueden mediar el enlace de la inmunoglobulina a los tejidos huéspedes o a los factores, incluyendo diferentes células del sistema inmune (por ejemplo, células efectoras), y el primer componente (C1 q) del sistema de complemento clásico. El término "porción de enlace de antígeno" de un anticuerpo (o simplemente "porción de antígeno") , como se utiliza en la presente , se refiere a la longitud completa o a uno o más fragmentos de un anticuerpo que retengan la capacidad para enlazarse específicamente con un antígeno (por ejemplo, TSLPR) . Se ha demostrado que la función de enlace de antígeno de un anticuerpo puede ser llevada a cabo por fragmentos de un anticuerpo de longitud com pleta . Los ejem plos de los fragmentos de en lace aba rcados dentro del térm ino "porción de enlace de antígeno" de un anticuerpo incluyen un fragmento Fab, u n fragmento monovalente consistente en los dom inios VL, VH, CL, y CH 1 ; un fragmento F(ab)2, un fragmento bivalente que comprende dos fragmentos Fab enlazados por un puente de disulfuro en la región de articulación; un fragmento Fd consistente en los dominios VH y CH 1 ; un fragmento Fv consistente en los dominios VL y VH de un solo brazo de un anticuerpo; un fragmento dAb (Ward y colaboradores, 1 989 Nature 341 :544-546) , el cual consiste en un dominio VH; y una región determinante de complementariedad (CDR) aislada. Adicionalmente, aunque los dos dominios de los fragmentos Fv, L y VH, son codificados por genes separados, se pueden unir, empleando métodos recombinantes, mediante un enlazador sintético que les hace posible formarse como una sola cadena de proteína , en donde se emparejan las regiones V y VH para formar moléculas monovalentes (conocidas como Fv de una sola cadena (scFv); ver, por ejemplo, Bird y colaboradores, 1 988 Science 242 :423-426; y Huston y colaboradores, 1 988, Proc. Nati. Acad. Sci. 85:5879-5883) . Se pretende que estos anticuerpos de una sola cadena también sean abarcados dentro del término "porción de enlace de antígeno" de un anticuerpo. Estos fragmentos de anticuerpo se obtienen empleando técnicas convencionales conocidas por los expertos en la materia, y se rastrean los fragmentos para determinar su utilidad de la misma manera que los anticuerpos intactos. Un "anticuerpo aislado", como se utiliza en la presente, se refiere a un anticuerpo que está sustancialmente libre de otros anticuerpos que tengan diferentes especificidades antigénicas (por ejemplo, un anticuerpo aislado que se enlace específicamente al TSLPR está sustancialmente libre de anticuerpos que se enlacen específicamente con antígenos diferentes de TSLPR). Un anticuerpo aislado que se enlace específicamente con el TSLPR, sin embargo, puede tener una reactividad cruzada con otros antígenos, tales como moléculas de TSLPR de otras especies. Más aún, un anticuerpo aislado puede estar sustancialmente libre de otro material celular y/o productos químicos. Los términos "anticuerpo monoclonal" o "composición de anticuerpo monoclonal", como se utilizan en la presente, se refieren a una preparación de moléculas de anticuerpo de una sola composición molecular. Una composición de anticuerpo monoclonal exhibe una sola especificidad de enlace y afinidad para un epítopo particular. El término "anticuerpo humano", como se utiliza en la presente, pretende incluir los anticuerpos que tienen regiones variables en donde tanto las regiones de estructura como CDR se derivan a partir de secuencias de origen humano. Además, si el anticuerpo contiene una región constante, la región constante también se deriva de esas secuencias humanas, por ejemplo secuencias de la línea germinal humana, o versiones mutadas de las secuencias de la línea germinal h umana . Los anticuerpos hum anos de la invención pueden incluir resid uos de am inoácidos no codificados por las secuencias h u m anas (por ejem plo , m utaciones introducidas mediante m utagénesis aleatoria o específica del sitio in vitro, o mediante mutación somática in vivo) . El término "anticuerpo monoclonal humano" se refiere a los anticuerpos que exhiben u na sola especificidad de enlace, que tienen regiones variables en donde las regiones tanto de estructura como CDR se derivan a partir de secuencias humanas. En una modalidad , los anticuerpos monoclonales humanos son prod ucidos por un hibridoma que incluye una célula-B obtenida a partir de un animal no humano transgénico, por ejemplo un ratón transgénico, que tiene un genoma que comprende un transgén de cadena pesada h umano, y un transgén de cadena ligera fusionados a una célula inmortalizada. El término "anticuerpo humano recombinante", como se utiliza en la presente, incluye todos los anticuerpos humanos que son preparados, expresados, creados, o aislados por medios recombinantes, tales como los anticuerpos aislados a partir de un animal (por ejemplo, un ratón) que sea transgénico o transcromosómico para los genes de inmunoglobulina humanos , o un hibridoma preparado a partir de los mismos; los anticuerpos aislados a partir de una célula huésped transformada para expresar el anticuerpo humano, por ejemplo a partir de un transfectoma ; los anticuerpos aislados a partir de una biblioteca de anticuerpos humana de combinación recombinante, y los anticuerpos preparados, expresados, creados, o aislados por cualquier otro medio que involucre el empalme de todo o una porción de un gen de inmunoglobulina humano, y secuencias para otras secuencias de ADN. Estos anticuerpos humanos recombinantes tienen regiones variables en donde las regiones de estructura y CDR se derivan a partir de las secuencias de inmunoglobulina de la línea germinal humana. En ciertas modalidades, sin embargo, estos anticuerpos humanos recombinantes se pueden someter a mutagénesis in vitro (o, cuando se utilice un animal transgénico para las secuencias de Ig humanas, mutagénesis somática in vivo), y por lo tanto, las secuencias de aminoácidos de las regiones VH y V de los anticuerpos recombinantes son secuencias que, aunque se derivan a partir de, y están relacionadas con, las secuencias VH y VL de la línea germinal humana, pueden no existir naturalmente dentro del repertorio de anticuerpos de la línea germinal humana in vivo. Un "anticuerpo quimérico" es una molécula de anticuerpo en donde: (a) la región constante, o una porción de la misma, se altera, se reemplaza, o se intercambia, de tal manera que el sitio de enlace de antígeno (región variable) se enlaza con una región constante de una clase, función efectora, y/o especie diferente o alterada, o una molécula enteramente diferente que confiere nuevas propiedades al anticuerpo quimérico, por ejemplo una enzima, toxina, hormona, factor de crecimiento, fármaco, etc.; o (b) la región variable, o una porción de la misma, se altera, se reemplaza, o se intercambia con una región variable que tiene una especificidad de antígeno diferente o alterada. Por ejemplo, como se muestra en los ejemplos que se encuentran más adelante, un anticuerpo anti-TSLPR de ratón se puede modificar reemplazando su región constante con la región constante a partir de una inmunoglobulina humana. Debido al reemplazo con una región constante humana, el anticuerpo quimérico puede retener su especificidad para reconocer el TSLPR humano, mientras que tiene una antigenicidad reducida en el ser humano, comparándose con el anticuerpo de ratón original. Un anticuerpo "humanizado" es un anticuerpo que retiene la reactividad de un anticuerpo no humano, mientras que es menos inmunogénico en los seres humanos. Esto se puede lograr, por ejemplo, mediante la retención de las regiones determinantes de complementariedad no humanas, y reemplazando las partes restantes del anticuerpo con sus contrapartes humanas (es decir, la región constante así como las porciones de estructura de la región variable). Ver, por ejemplo, Morrison y colaboradores, Proc. Nati. Acad. Sci. EUA, 81:6851-6855, 1984; Morrison y Oi, Imm?nol. 44:65-92, 1988; Verhoeyen y colaboradores, Science, 239:1534-1536, 1988; Padlan, Molec. Immun., 28:489-498, 1991; y Padlan, Molec. Immun. 31:169-217, 1994. Otros ejemplos de la tecnología de ingeniería humana incluyen, pero no se limitan a, la tecnología Xoma dada a conocer en la Patente de los Estados Unidos de Norteamérica Número US 5,766,886. El término "Ingeniería humana", como se utiliza en la presente, se refiere a un método para convertir los anticuerpos no humanos en anticuerpos hum anos diseñados (ver, por ejem plo , KaloBios' H umaneeringM R Technology). Como se utiliza en la presente, "isotipo" se refiere a la clase de anticuerpo (por ejemplo, IgM , IgE, IgG tal como lgG 1 ó lgG4) , que es proporcionada por los genes de la región constante de cadena pesada. Las frases "un anticuerpo que reconoce un antígeno" y "u n anticuerpo específico para un antígeno" se utilizan de una manera intercambiable en la presente, con el término "un anticuerpo que se enlaza específicamente con un antígeno". Como se utiliza en la presente, un anticuerpo q ue "se enlaza específicamente con el TSLPR humano" se refiere a un anticuerpo que se enlaza con el TSLPR humano con una KD de 200 x 1 0"2 M ó menos, 1 50 x 1 0" 12 M ó menos, ó 1 00 x 1 0" 12 M ó menos. El término "especificidad de enlace", como se utiliza en la presente, se refiere a la capacidad de un sitio de combinación de anticuerpo individual para reaccionar con solamente un determinante antigénico. El sitio de combinación del anticuerpo se localiza en la porción Fab de la molécula , y se construye a partir de las regiones hipervariables de las cadenas pesada y ligera . La afinidad de enlace de un anticuerpo es la fuerza de la reacción entre un solo determinante antigénico y un solo sitio de combinación sobre el anticuerpo. Es la suma de las fuerzas de atracción y repulsión q ue operan entre el determinante antigénico y el sitio de combinación del anticuerpo. La afinidad es la constante de equilibrio que describe la reacción de antígeno-anticuerpo . El en lace específico entre dos entidades significa u n en lace con una consta nte de equilibrio (KA) de cuando menos 1 x 1 07 M"\ 1 08 M" 1 , 1 09 M" 1 , ó 1010 M"1. La frase "se enlaza específicamente (o selectivamente)" a un anticuerpo (por ejemplo, un anticuerpo anti-hTSLPR) , se refiere a una reacción de enlace que determina la presencia de un antígeno cognado (por ejemplo, un polipéptido de TSLPR humano) en una población heterogénea de proteínas y otros productos biológicos. En adición a la constante de equilibrio (KA) mencionada anteriormente, un anticuerpo anti-hTSLPR de la invención típicamente tiene también una constante de disociación (Kd) de aproximadamente 1 x 1 0"2 s" 1 , 1 x 10"3 s' 1 , 1 x 1 0"4 s" 1 , o más baja , y se enlaza con el TSLPR humano con una afinidad que es cuando menos dos veces mayor que su afinidad para enlazarse con un antígeno no específico (por ejemplo, albúmina de suero bovino). Las frases "un antígeno que reconoce un antígeno" y "un antígeno específico para un antígeno" se utilizan de una manera intercambiable en la presente con el término "un anticuerpo que se enlaza específicamente con un antígeno". El término "epítopo" significa un determinante de proteína capaz de enlazarse específicamente con un anticuerpo. Los epítopos normalmente consisten en ag rupaciones superficiales qu ímicamente activas de moléculas, tales como aminoácidos o cadenas laterales de azúcar, y normalmente tienen características estructurales tridimensionales específicas, así como características de carga específicas. Los epítopos de conformación y no de conformación se distinguen porque se pierde el enlace con los primeros pero no con los últimos en la presencia de solventes desnaturalizantes. El término "ácido nucleico" se utiliza en la presente de una manera intercambiable con el término "polinucleótido", y se refiere a los desoxirribonucleótidos o ribonucleótidos y polímeros de los mismos, ya sea en una forma de una sola cadena o de doble cadena. El término abarca los ácidos nucleicos que contienen análogos de nucleótidos conocidos o residuos de estructura base o enlaces modificados, que sean sintéticos, que se presenten naturalmente, o que no se presenten naturalmente, que tengan propiedades de enlace similares a las del ácido nucleico de referencia, y que se metabolicen de una manera similar a los nucleótidos de referencia. Los ejemplos de estos análogos incluyen, sin limitación, fosforotioatos, fosforamidatos, fosfonatos de metilo, fosfonatos de metilo quirales, ribonucleótidos de 2-O-metilo, ácidos nucleicos peptídicos (PNAs). A menos que se indique de otra manera, una secuencia de ácido nucleico particular también abarca implícitamente las variantes conservadoramente modificadas de la misma (por ejemplo, sustituciones de codones degenerados), y las secuencias complementarias, así como la secuencia explícitamente indicada. De una manera específica, como se detalla más adelante, se pueden lograr las sustituciones de codones degenerados mediante la generación de secuencias en donde la tercera posición de uno o más codones (o todos) seleccionados, es sustituida con residuos m ixtos de base y/o desoxi-inosina (Batzer y colaboradores, Nucleic Acid Res. 1 9:5081 , 1 991 ; Ohtsuka y colaboradores, J. Biol. Chem. 260:2605-2608, 1 985; y Rossolini y colaboradores, Mol. Cell. Probes 8:91 -98, 1994). El término "aminoácido" se refiere a los aminoácidos que se presentan naturalmente y sintéticos, así como a los análogos de aminoácidos y a los miméticos de aminoácidos que funcionen de una manera similar a los aminoácidos q ue se presenten naturalmente. Los aminoácidos que se presentan natu ralmente son aquéllos codificados por el código genético, así como los aminoácidos que son modificados posteriormente, por ejemplo hidroxi-prolina , ?-carboxi-glutamato, y O-fosfoserina . Los análogos de aminoácidos se refieren a los compuestos que tienen la misma estructu ra qu ímica básica q ue el aminoácido que se presenta naturalmente, es decir, un carbono alfa que se enlaza con u n hidrógeno, un grupo carboxilo, u n grupo amino, y un grupo R, por ejemplo homoserina , norleucina , sulfóxido de metionina, metionina-metil-sulfonio. Estos análogos tienen grupos R modificados (por ejemplo, norleucina) , o estructu ras base peptídicas modificadas, pero retienen la misma estructura qu ímica básica que el aminoácido que se presenta naturalmente. Los miméticos de aminoácidos se refieren a los compuestos qu ímicos que tienen una estructura q ue es diferente de la estructura qu ímica general de un aminoácido, pero que funciona de una manera similar a un aminoácido que se presenta naturalmente.

Los términos "polipéptido" y "proteína" se utilizan de una manera intercambiable en la presente para referirse a un polímero de residuos de aminoácidos. Los términos se aplican a los polímeros de aminoácidos en donde uno o más residuos de aminoácidos es un mimético químico artificial de un aminoácido que se presente naturalmente correspondiente, así como a los polímeros de aminoácidos que se presentan naturalmente y a los polímeros de aminoácidos que no se presentan naturalmente. A menos que se indique de otra manera, una secuencia de polipéptido particular también abarca implícitamente las variantes conservadoramente modificadas del mismo. El término "variante conservadoramente modificada" se aplica a las secuencias tanto de aminoácidos como de ácidos nucleicos. Con respecto a las secuencias de ácidos nucleicos particulares, las variantes conservadoramente modificadas se refieren a los ácidos nucleicos que codifican secuencias de aminoácidos idénticas o esencialmente idénticas, o en donde el ácido nucleico no codifica una secuencia de aminoácidos, a las secuencias esencialmente idénticas. Debido a la degeneración del código genético, un gran número de ácidos nucleicos funcionalmente idénticos codifican cualquier proteína dada. Por ejemplo, los codones GCA, GCC, GCG, y GCU codifican todos al aminoácido alanina. Por consiguiente, en cada posición en donde sea especificada una alanina por un codón, el codón se puede alterar hasta cualquiera de los codones correspondientes descritos sin alterar el polipéptido codificado.

Estas variaciones de ácidos nucleicos son "variaciones silenciosas", las cuales son una especie de variaciones conservadoramente modificadas. Cada secuencia de ácido nucleico de la presente que codifique un polipéptido también describe cada variación silenciosa posible del ácido nucleico. Un experto reconocerá que cada codón de un ácido nucleico (excepto AUG, que ordinariamente es el único codón para la metionina, y TGG, que ordinariamente es el único codón para el triptófano) se puede modificar para proporcionar una molécula funcionalmente idéntica. De conformidad con lo anterior, cada variación silenciosa de un ácido nucleico que codifique un polipéptido está implícita en cada secuencia descrita. Para las secuencias de polipéptidos, las "variantes conservadoramente modificadas" incluyen a las sustituciones, supresiones, o adiciones individuales a una secuencia de polipéptido que den como resultado la sustitución de un aminoácido con un aminoácido químicamente similar. Las tablas de sustitución conservadora que proporcionan aminoácidos funcionalmente similares son bien conocidas en la técnica. Estas variantes conservadoramente modificadas son en adición a y no excluyen a las variantes polimórficas, a los homólogos inter-especies, y a los alelos de la invención. Los siguientes ocho grupos contienen aminoácidos que son sustituciones conservadoras unos por otros: 1) Alanina (A), Glicina (G); 2) Ácido aspártico (D), Ácido glutámico (E); 3) Asparagina (N), Glutamina (Q); 4) Arginina (R) , Lisina (K); 5) Isoleucina (I) , Leucina (L), Metionina (M ), Valina (V); 6) Fenilalanina (F), Tirosina (Y), Triptófano (W); 7) Serina (S), Treonina (T) ; y 8) Cisteína (C) , Metionina (M ) (ver, por ejem plo , C reig hton , Proteins ( 1 984)) . Los términos "idéntica" o porcentaje de "identidad" , en el contexto de dos o más secuencias de ácidos nucleicos o de polipéptidos, se refieren a dos o más secuencias o subsecuencias que sean iguales. Dos secuencias son "sustancialmente idénticas" si las dos secuencias tienen un porcentaje especificado de residuos de aminoácidos o de nucleótidos que sean iguales (es decir, identidad del 60 por ciento, opcionalmente identidad del 65 por ciento, del 70 por ciento, del 75 por ciento, del 80 por ciento, del 85 por ciento, del 90 por ciento, del 95 por ciento, o del 99 por ciento sobre una región especificada, o cuando no se especifique, sobre toda la secuencia), al compararse y alinearse para una máxima correspondencia sobre una ventana de comparación , o la región designada medida utilizando uno de los siguientes algoritmos de comparación de secuencias, o mediante alineación manual e inspección visual . Opcionalmente, existe identidad sobre una región que es de cuando menos aproximadamente 50 nucleótidos (ó 1 0 aminoácidos) de longitud , o más preferiblemente sobre una región que es de 100 ó 500 ó 1 ,000 ó más nucleótidos) ó 20, 50, 200, 200 ó más aminoácidos) de longitud .

Para la comparación de secuencias, típicamente una secuencia actúa como una secuencia de referencia, con la cual se comparan las secuencias de prueba. Cuando se utiliza un algoritmo de comparación de secuencias, se introducen las secuencias de prueba y de referencia en una computadora, se designan las coordenadas de las subsecuencias, si es necesario, y se designan los parámetros del programa de algoritmos de secuencias. Se pueden utilizar los parámetros del programa por omisión, o se pueden designar parámetros alternativos. El algoritmo de comparación de secuencias calcula entonces el porcentaje de identidad de secuencia para las secuencias de prueba en relación con la secuencia de referencia, basándose en los parámetros del programa. Una "ventana de comparación", como se utiliza en la presente, incluye la referencia a un segmento de cualquiera del número de posiciones contiguas seleccionadas a partir del grupo que consiste en de 20 a 600, usualmente de aproximadamente 50 a aproximadamente 200, más usualmente de aproximadamente 100 a aproximadamente 150, en donde se puede comparar una secuencia con una secuencia de referencia del mismo número de posiciones contiguas después de alinear óptimamente las dos secuencias. Los métodos de alineación de secuencias para comparación son bien conocidos en este campo. Se puede conducir la alineación óptima de las secuencias para comparación, por ejemplo, mediante el algoritmo de homología local de Smith y Waterman (1970), Adv. Appl. Math. 2:482c, mediante el algoritmo de alineación de homología de Need leman y Wu nsch . J. Mol. Biol. 48:443, 1 970, mediante el método de búsqueda de similitudes de Pearson y Lipman , Proc. Nat'l. Acad. Sci. EUA 85:2444, 1 988 , mediante implementaciones computarizadas de estos algoritmos (GAP , BESTFIT, FASTA, y TFASTA, en el Wisconsin Genetics Software Package, Genetics Computer Group, 575 Science Dr. , Madison, Wl) , o mediante alineación manual e inspección visual (ver, por ejemplo, Brent y colaboradores, Current Protocols in Molecular Biology, John Wiley & Sons, I nc. (Ringbou ed . , 2003)). Dos ejemplos de algoritmos que son adecuados para determinar el porcentaje de identidad de secuencias y la similitud de secuencias , son los algoritmos BLAST y BLAST 2.0, los cuales se describen en Altschul y colaboradores, Nuc. Acids Res. 25:3389-3402 , 1 977; y Atlschul y colaboradores, J. Mol. Biol. 21 5:403-41 0, 1 990, respectivamente. El software para llevar a cabo los análisis BLAST está públicamente disponible a través del National Center for Biotechnology I nformation . Este algoritmo involucra identificar primero los pares de secuencias de alto puntaje (HSPs) , mediante la identificación de palabras cortas de longitud W en la secuencia pedida , que se acoplan o satisfacen con algún puntaje umbral T de valor positivo al alinearse con una palabra de la misma longitud de la secuencia de la base de datos. T es referido como el umbral de puntaje de palabra vecina (Altsch ul y colaboradores, supra) . Estos impactos iniciales de palabra vecina actúan como siembras para iniciar las búsquedas con el fin de encontrar HSPs más largos que las contengan. Los impactos de palabras se extienden en ambas direcciones a lo largo de cada secuencia, por tanto como se pueda incrementar el puntaje de alineación acumulativo. Los puntajes acumulativos se calculan utilizando, para las secuencias de nucleótidos, los parámetros M (puntaje de recompensa para un par de residuos que se acoplen; siempre >0), y N (puntaje de multa para los residuos de mal acoplamiento; siempre <0). Para las secuencias de aminoácidos, se utiliza una matriz de calificación para calcular el puntaje acumulativo. La extensión de los impactos de palabras en cada dirección se detiene cuando: el puntaje de alineación acumulativo cae fuera por la cantidad X desde su máximo valor alcanzado; el puntaje acumulativo llega a cero o menos, debido a la acumulación de una o más alineaciones de residuos de calificación negativa; o se llega al final de cualquier secuencia. Los parámetros W, T, y X del algoritmo BLAST determinan la sensibilidad y la velocidad de la alineación. El programa BLASTN (para secuencias de nucleótidos) utiliza por omisión una longitud de palabra (W) de 11, una expectativa (E) de 10, M = 5, N=-4, y una comparación de ambas cadenas. Para las secuencias de aminoácidos, el programa BLASTP utiliza por omisión una longitud de palabra de 3, y la expectativa (E) de 10, y la matriz de puntaje BLOSUM62 (ver Henikoff y Henikoff, Proc. Nati. Acad. Sci. EUA 89:10915, 1989), las alineaciones (B) de 50, la expectativa (E) de 10, M=5, N=-4, y una comparación de ambas cadenas. El algoritmo BLAST también lleva a cabo un análisis estadístico de la sim ilitud entre dos secuencias (ver, por ejem plo , Karlin y Altsch ul , Proc. Nati. Acad. Sci. EUA 90:5873-5787, 1 993). Una medida de similitud proporcionada por el algoritmo BLAST es la probabilidad de suma más pequeña (P(N)) , que proporciona una indicación de la probabilidad por la cual se presentaría por azar un acoplamiento entre dos secuencias de nucleótidos o aminoácidos. Por ejemplo, un ácido nucleico se considera similar a u na secuencia de referencia si la probabilidad de suma más pequeña en una comparación del ácido nucleico de prueba con el ácido nucleico de referencia es menor a aproximadamente 0.2 , más preferiblemente menor a aproximadamente 0.01 , y de u na manera muy preferible menor a aproximadamente 0.001 . Diferente del porcentaje de identidad de secuencias mencionado anteriormente, otra indicación de que dos secuencias de ácidos nucleicos o polipéptidos son sustancialmente idénticos, es que el polipéptido codificado por el primer ácido nucleico reaccione cruzado inmunológicamente con los anticuerpos reproducidos contra el polipéptido codificado por el segu ndo ácido nucleico, como se describe más adelante. Por consiguiente, un polipéptido es típicamente sustancialmente idéntico a un segundo polipéptido, por ejemplo, cuando los dos péptidos difieren solamente por sustituciones conservadoras. Otra indicación de que dos secuencias de ácidos nucleicos son sustancialmente idénticas, es que las dos moléculas o sus complementos se hibridan u nos a otros bajo condiciones restringentes, como se describe más adelante. Todavía otra indicación de que dos secuencias de ácidos nucleicos son sustancialmente idénticas, es que se pueden utilizar los mismos cebadores para amplificar la secuencia. El término "operativamente enlazado" se refiere a una relación funcional entre dos o más segmentos de polinucleótidos (por ejemplo, ADN). Típicamente, se refiere a la relación funcional de una secuencia reguladora de transcripción con una secuencia transcrita. Por ejemplo, una secuencia promotora o potenciadora se enlaza operativamente con una secuencia de codificación si estimula o modula la transcripción de la secuencia de codificación en una célula huésped apropiada o en otro sistema de expresión. En términos generales, las secuencias reguladoras de transcripción promotoras que se enlazan operativamente con una secuencia transcrita, están físicamente contiguas a la secuencia transcrita, es decir, son de acción -cis. Sin embargo, algunas secuencias reguladoras dé transcripción, tales como las potenciadoras, no necesitan estar físicamente contiguas o localizarse en estrecha proximidad a las secuencias de codificación cuya transcripción potencian. El término "vector" pretende referirse a una molécula de polinucleótido capaz de transportar otro polinucleótido con el que se haya enlazado. Un tipo de vector es un "plásmido", el cual se refiere a un ciclo de ADN de doble cadena circular en donde se pueden ligar segmentos de ADN adicionales. Otro tipo de vector es un vector viral, en donde se pueden ligar segmentos de ADN adicionales en el genoma viral. Ciertos vectores son capaces de tener réplica autónoma en una célula huésped en donde se introducen (por ejemplo, los vectores bacterianos que tienen un origen de réplica bacteriano, y los vectores de mamífero episomales). Se pueden integrar otros vectores (por ejemplo, vectores de mamífero no episomales) en el genoma de una célula huésped después de su introducción en la célula huésped, y de esta manera se replican junto con el genoma del huésped. Más aún, ciertos vectores son capaces de dirigir la expresión de genes con los que estén operativamente enlazados. Estos vectores son referidos en la presente como "vectores de expresión recombinante" (o simplemente, "vectores de expresión"). En general, los vectores de expresión de utilidad en las técnicas de ADN recombinante están con frecuencia en la forma de plásmidos. En la presente memoria descriptiva, "plásmido" y "vector" se pueden utilizar de una manera intercambiable, debido a que el plásmido es la forma más comúnmente utilizada del vector. Sin embargo, se pretende que la invención incluya otras formas de vectores de expresión, tales como vectores virales (por ejemplo, retrovirus defectuosos en réplica, adenovirus, y virus adeno-asociados), los cuales sirven para funciones equivalentes. El término "célula huésped recombinante" (o simplemente "célula huésped"), se refiere a una célula en donde se ha introducido un vector de expresión recombinante. Se debe entender que estos términos pretenden referirse no solamente a las células objeto particular, sino a la progenie de esa célula. Debido a que se pueden presentar ciertas modificaciones en las siguientes generaciones debido ya sea a mutación o a las influencias ambientales, de hecho esta progenie puede no ser idéntica a la célula progenitora, pero todavía puede incluirse dentro del alcance del término "célula huésped", como se utiliza en la presente. El término "enfermedad o condición inflamatoria" se refiere a cualquier condición caracterizada por inflamación local en un sitio de lesión o infección, e incluye las enfermedades autoinmunes, ciertas formas de estados inflamatorios infecciosos, una actividad de neutrófilos indeseable característica de los trasplantes de órganos u otros implantes, y virtualmente cualquier otra condición caracterizada por una acumulación indeseada de neutrófilos en un sitio del tejido local. Estas condiciones incluyen, pero no se limitan a, meningitis, edema cerebral, artritis, nefritis, síndrome de insuficiencia respiratoria de adultos, pancreatitis, miositis, neuritis, enfermedades del tejido conectivo, flebitis, arteritis, vasculitis, alergia, anafilaxis, erliquiosis, gota, trasplantes de órganos, y/o colitis ulcerativa. El término "sujeto" incluye animales humanos y no humanos. Los animales no humanos incluyen todos los vertebrados, por ejemplo mamíferos y no mamíferos, tales como primates no humanos, ovejas, perros, reses, pollos, anfibios, y reptiles. Excepto donde se observe, los términos "paciente" o "sujeto" se utilizan de una manera intercambiable en la presente. El término "tratamiento" incluye la administración de los compuestos o agentes para prevenir o demorar el establecimiento de los síntomas, complicaciones, o indicaciones bioquímicas de una enfermedad (por ejemplo, una enfermedad inflamatoria alérgica), el alivio de los síntomas, o la detención o inhibición del desarrollo adicional de la enfermedad, condición, o trastorno. El tratamiento puede ser profiláctico (para prevenir o demorar el establecimiento de la enfermedad, o para prevenir la manifestación de los síntomas clínicos o subclínicos de la misma), o la supresión terapéutica o el alivio de los síntomas después de la manifestación de la enfermedad. La frase "senda de transducción de señal" o "senda de señalización" (por ejemplo, la senda de señalización de TSLP) se refiere cuando menos a una reacción bioquímica, pero más comúnmente a una serie de reacciones bioquímicas, que resulten de la interacción de una célula con un compuesto o agente estimulante. Por lo tanto, la interacción de un compuesto estimulante (por ejemplo, TSLP) con una célula genera una "señal" que se transmite a través de la senda de transducción de señal, dando como resultado finalmente una respuesta celular, por ejemplo una respuesta inmune. II. Anticuerpos Antagonistas Contra el TSLPR Humano. 1. Generalidades La invención proporciona anticuerpos que se enlazan específicamente con el TSLPR humano. Estos anticuerpos anti-hTSLPR son capaces de antagonizar las actividades de señalización mediada por la TSLP, por ejemplo la proliferación celular mediada por TSLP, como se describe en los Ejemplos que se encuentran más adelante. Los métodos generales para la preparación de anticuerpos monoclonales o policlonales son bien conocidos en este campo. Ver, por ejem plo, H arlow y Lañe , Using Antibodies, A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, N ueva York, 1 998; Kohler & Milstein , Nature 256:495-497, 1 975; Kozbor y colaboradores, Immunology Today 4:72 , 1 983; y Colé y colaboradores, páginas 77-96 en Monoclonal Antibodies and Cáncer Therapy, 1 985. De preferencia, los anticuerpos anti-hTSLPR de la invención son monoclonales como el anticuerpo monoclonal de ratón reproducido contra el TSLPR humano (clon 1 D6. C9) , como se describe en los Ejemplos que se encuentran más adelante. Los anticuerpos monoclonales se refieren a los anticuerpos derivados a partir de un solo clon. Se puede emplear cualquier técnica para producir anticuerpos monoclonales, con el fin de producir los anticuerpos anti-hTSLPR de la invención , por ejemplo, transformación viral u oncogénica de linfocitos B. Un sistema animal para la preparación de hibridomas es el sistema de murino. La producción de hibridomas en el ratón es un procedimiento muy bien establecido. Como se ilustra en los Ejemplos que se encuentran más adelante, se pueden generar anticuerpos monoclonales anti-hTSLPR mediante la inmunización de un animal no humano (por ejemplo, un ratón) con un polipéptido de hTSLPR , o un fragmento, proteína de fusión , o variante del mismo. Entonces se fusionan las células-B aisladas del animal con las células de mieloma, para generar los hibridomas productores de anticuerpos. Los anticuerpos monoclonales de ratón anti-hTSLPR se pueden obtener mediante el rastreo de los hibridomas en un ensayo ELISA, utilizando un polipéptido o una proteína de fusión de hTSLPR. Los protocolos de inmunización y las técnicas para el aislamiento de los esplenocitos inmunizados para la fusión son conocidos en la técnica. Los componentes de fusión (por ejemplo, las células de mieloma de murino) y los procedimientos de fusión son también bien conocidos en este campo, por ejemplo, Harlow y Lañe, supra. Las secuencias de aminoácidos de las regiones variables de cadena pesada (SEQ ID NO:5) y de cadena ligera (SEQ ID NO:6) del anticuerpo de ratón anti-TSLPR de ejemplo, descritas en los Ejemplos que se encuentran más adelante, se muestran en la Figura 5. También, como se indica en la figura, las secuencias CDR de la región variable de cadena pesada de este anticuerpo son TYGMS 8CDR1; SEQ ID NO:7), WINTYSGVPRYADDFKG (CDR2; SEQ ID NO:8), y EGFITTVVGAAGRFVY (CDR3; SEQ ID NO:9). Las secuencias CDR de la región variable de cadena ligera son KASQDVGTAVA (CDR1; SEQ ID NO:10), WASTRHT (CDR2; SEQ ID NO:11), y QQYSTYPT (CDR3; SEQ ID NO:12). Los anticuerpos interactúan con los antígenos objetivos predominantemente a través de los residuos de aminoácidos que se localizan en las seis regiones determinantes de complementariedad de cadena pesada y ligera (CDRs). Típicamente, los anticuerpos anti-hTSLPR de la invención tienen cuando menos una de sus secuencias CDR de cadena pesada o de sus secuencias CDR de cadena ligera idéntica a las secuencias CDR correspondientes mostradas en la Figura 5. Algunos de estos anticuerpos anti-hTSLPR de la invención tienen la misma especificidad de enlace que aquélla del anticuerpo anti-TSLPR de ratón ejemplificado (clon 1D6.C9) dado a conocer en los Ejemplos que se muestran más adelante. Estos anticuerpos pueden competir con el anticuerpo anti-hTSLPR de ratón (clon 1D6.C9) por el enlace con hTSLPR. Algunos anticuerpos anti-hTSLPR de la invención tienen todas las secuencias CDR en sus regiones variables de la cadena pesada y la cadena ligera, respectivamente, idénticas a las secuencias CDR correspondientes mostradas en la Figura 5. Por consiguiente, estos anticuerpos anti-hTSLPR tienen las tres secuencias CDR de cadena pesada respectivamente idénticas a las SEQ ID NO:7, SEQ ID NO:8, y SEQ ID NO:9, y las tres secuencias CDR de cadena ligera respectivamente idénticas a las SEQ ID NO:10, SEQ ID NO:11, y SEQ ID NO:12. En adición a tener las secuencias CDR respectivamente idénticas a las secuencias CDR correspondientes del anticuerpo anti-hTSLPR de ratón (clon 1D6.C9), algunos de los anticuerpos anti-hTSLPR de la invención tienen todas sus secuencias de región variable de cadena pesada y de cadena ligera respectivamente idénticas a las secuencias de región variable correspondientes del anticuerpo de ratón mostrado en la Figura 5 (es decir, SEQ ID NO:5 y SEQ ID NO:6). En algunas otras modalidades, que no sean las secuencias CDR idénticas, los anticuerpos contienen residuos de aminoácidos en las porciones de estructura de las regiones variables que son diferentes de los residuos de aminoácidos correspondientes mostrados en la Figura 5 (por ejemplo, algunos de los anticuerpos anti-hTSLPR humanizados descritos más adelante). No obstante, estos anticuerpos típicamente tienen todas sus secuencias de región variable sustancialmente idénticas (por ejemplo, 75 por ciento, 85 por ciento, 90 por ciento, 95 por ciento, ó 99 por ciento) a las secuencias de región variable correspondientes mostradas en la Figura 5. Los anticuerpos anti-hTSLPR de la invención pueden ser un anticuerpo intacto que contenga dos cadenas pesadas y dos cadenas ligeras. También pueden ser fragmentos de enlace de antígeno de un anticuerpo intacto o anticuerpos de una sola cadena. Los anticuerpos anti-hTSLPR de la invención incluyen los anticuerpos producidos en un animal no humano (por ejemplo, el anticuerpo anti-hTSLPR de ratón mostrado en la Figura 5). También incluyen los anticuerpos modificados, los cuales son formas modificadas del anticuerpo anti-hTSLPR de ratón mostrado en la Figura 5. Con frecuencia, los anticuerpos modificados son anticuerpos recombinantes que tienen propiedades similares o mejoradas en relación con aquéllas del anticuerpo de ratón ejemplificado. Por ejemplo, el anticuerpo anti-hTSLPR de ratón ejemplificado en los Ejemplos que se encuentran más adelante, se puede modificar suprimiendo la región constante, y reemplazándola con una región constante diferente, que pueda conducir a una mayor vida media, por ejemplo vida media en suero, estabilidad, o afinidad del anticuerpo. Los anticuerpos modificados se pueden crea r, por ejem plo , mediante la construcción de vectores de expresión que incluyan a las secuencias C D R del anticuerpo de ratón injertadas sobre las secuencias de estructu ra de un a nticuerpo diferente con propiedades diferentes (Jones y colaboradores, 1 986 , Nature 321 , 522-525) . Estas secuencias de estructura se pueden obtener en las bases de datos de ADN públicas. Algunos de los anticuerpos modificados son anticuerpos quiméricos que contienen secuencias de inmunoglobulina humana parciales (por ejemplo, regiones constantes), y secuencias de inmunoglobulina no humana parciales (por ejemplo, las secuencias de región variable del anticuerpo anti-hTSLPR de ratón mostradas en la Fig ura 5) . Algunos otros anticuerpos modificados son los anticuerpos humanizados. En general, un anticuerpo h umanizado tiene uno o más residuos de aminoácidos introducidos en él a partir de una fuente que es no humana . Los métodos para humanizar los anticuerpos no humanos son bien conocidos en este campo, por ejemplo, Patentes de los Estados Unidos de Norteamérica N úmeros 5,585,089 y 5,693,762; Jones y colaboradores, Nature 321 :522-25, 1 986; Riechmann y colaboradores, Nature 332 :323-27, 1 988; y Verhoeyen y colaboradores, Science 239: 1 534-36, 1 988. Estos métodos se pueden emplear fácilmente para generar anticuerpos anti-hTSLPR h umanizados de la invención , mediante la sustitución de cuando menos una porción de una región determinante de complementariedad a partir de un anticuerpo anti-hTSLPR no humano, por las regiones correspondientes de un anticuerpo humano. En algunas modalidades, los anticuerpos anti-hTSLPR humanizados de la invención tienen las tres regiones determinantes de complementariedad en cada cadena de inmunoglobulina del anticuerpo anti-hTSLPR de ratón mostrado en la Figura 5, injertadas en las regiones de estructura humanas correspondientes. Los anticuerpos anti-hTSLPR descritos anteriormente, pueden sufrir sustituciones, adiciones, o supresiones de aminoácidos no críticas, tanto en las regiones variables como constantes, sin perder la especificidad de enlace o las funciones efectoras, o una reducción intolerable de afinidad de enlace. Usualmente, los anticuerpos que incorporan estas alteraciones exhiben una identidad de secuencia sustancial con un anticuerpo de referencia (por ejemplo, el anticuerpo anti-hTSLPR de ratón mostrado en la Figura 5), de donde fueron derivadas. Por ejemplo, las regiones variables de cadena ligera madura de algunos de los anticuerpos anti-hTSLPR de la invención tienen una identidad de secuencia de cuando menos el 75 por ciento o de cuando menos el 85 por ciento con la secuencia de la región variable de cadena ligera madura del anticuerpo anti-hTSLPR mostrada en la Figura 5. De una manera similar, las regiones variables de cadena pesada maduras de los anticuerpos típicamente muestran una identidad de secuencia de cuando menos el 75 por ciento o de cuando menos el 85 por ciento con la secuencia de la región variable de cadena pesada madura del anticuerpo anti-hTSLPR mostrada en la Figura 5. Algunos de los anticuerpos anti-hTSLPR modificados tienen la misma especificidad y una mayor afinidad, comparándose con el anticuerpo anti-hTSLPR de ratón (clon 1D6.C9) mostrado en la Figura 5. Normalmente, la afinidad de los anticuerpos anti-hTSLPR modificados (por ejemplo, anticuerpos humanizados), tiene una afinidad de enlace que es igual o mejor que la del anticuerpo de ratón original. La afinidad de enlace de los anticuerpos modificados es de cuando menos el 70 por ciento, el 75 por ciento, el 80 por ciento, el 85 por ciento, el 90 por ciento, el 95 por ciento, o el 100 por ciento del anticuerpo de ratón original. 2. Anticuerpos Anti-hTSLPR Quiméricos y Humanizados Algunos de los anticuerpos anti-hTSLPR de la invención son anticuerpos quiméricos (por ejemplo, de ratón/humanos) que se forman de regiones de un antagonista de anticuerpo anti-hTSLPR no humano, junto con regiones de anticuerpos humanos. Por ejemplo, una cadena H quimérica puede comprender a la región de enlace de antígeno de la región variable de cadena pesada del anticuerpo anti-hTSLPR de ratón (por ejemplo, la secuencia mostrada en la SEQ ID NO:5) enlazada con cuando menos una porción de la región constante de cadena pesada humana. Esta cadena pesada quimérica se puede combinar con una cadena L quimérica que comprenda a la región de enlace de antígeno de la región variable de cadena ligera del anticuerpo anti-hTSLPR de ratón (por ejemplo, la secuencia mostrada en la SEQ ID NO:6) enlazada con cuando menos una porción de la región constante de cadena ligera humana. Los anticuerpos anti-hTSLPR quiméricos de la invención se pueden producir de acuerdo con la divulgación de los ejemplos que se encuentran más adelante, así como con los métodos conocidos en este campo. Por ejemplo, un gen que codifique la cadena pesada o la cadena ligera de una molécula de anticuerpo monoclonal anti-hTSLPR de murino, se puede digerir con enzimas de restricción para remover la región Fe de murino, y se puede sustituir con la porción equivalente de un gen que codifique una región constante Fe humana. Los vectores de expresión y las células huéspedes adecuadas para la expresión de los anticuerpos recombinantes y de los anticuerpos humanizados en particular, son bien conocidos en la materia. Se pueden construir vectores que expresen los genes quiméricos que codifiquen las cadenas de inmunoglobulina anti-hTSLPR, empleando técnicas recombinantes convencionales, por ejemplo Sambrook y colaboradores, Molecular Cloning: A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Press (3a Edición, 2001); y Brent y colaboradores, Current Protocols in Molecular Biology, John Wiley & Sons, Inc. (Ringbou ed., 2003). Se pueden seleccionar las secuencias de región constante humanas a partir de diferentes fuentes de referencia, incluyendo, pero no limitándose a, las que se mencionan en Kabat y colaboradores, Sequences of Proteins of Immunological Interest, Quinta Edición, Departamento de Salud y Servicios Humanos de los Estados Unidos, Oficina de Impresión del Gobierno de los Estados Unidos, 1991. También se han dado enseñanzas más específicas para la producción de anticuerpos quiméricos mediante recombinación de ADN en la técnica, por ejemplo Robinson y colaboradores, Publicación de Patente Internacional Número PCT/US86/02269; Akira y colaboradores, Solicitud de Patente Europea Número 184,187; Taniguchi, M., Solicitud de Patente Europea Número 171,496; Morrison y colaboradores, Solicitud de Patente Europea Número 173,494; Neuberger y colaboradores, Solicitud Internacional Número WO 86/01533; Cabilly y colaboradores, Patente de los Estados Unidos de Norteamérica Número 4,816,567; Cabilly y colaboradores, Solicitud de Patente Europea Número 125,023; Better (1988) Science 240:1041-1043; Liu (1987) PNAS 84:3439-3443; Liu (1987) J. Immunol. 139:3521-3526; Sun (1987) PNAS 84:214-218; Nishimura (1987) Canc. Res. 47:999-1005; Wood (1985) Nature 314:446-449; Shaw (1988) J. Nati. Cáncer Inst. 80:1553-1559). Los anticuerpos quiméricos que tengan las regiones variables enteras de un anticuerpo no humano, se pueden humanizar adicionalmente para reducir la antigenicidad del anticuerpo en el ser humano. Esto típicamente se lleva a cabo mediante el reemplazo de ciertas secuencias o residuos de aminoácidos en las regiones variables Fv (regiones de estructura o regiones que no sean CDR), con secuencias o residuos de aminoácidos equivalentes a partir de las regiones variables Fv humanas. Estas secuencias o residuos de aminoácidos adicionalmente sustituidos, normalmente no están involucrados directamente en el enlace de antígeno. Con más frecuencia, la humanización de un anticuerpo no humano procede mediante la sustitución de solamente las regiones determinantes de complementariedad de un anticuerpo no humano (por ejemplo, el anticuerpo de ratón mostrado en la Figura 5), por las regiones determinantes de complementariedad en un anticuerpo humano. En algunos casos, esto es seguido por el reemplazo de algunos residuos adicionales en las regiones de estructura humanas, con los residuos correspondientes del anticuerpo donador no humano. Este injerto adicional con frecuencia es necesario para mejorar el enlace con el antígeno. Esto se debe a que los anticuerpos humanizados que solamente tienen regiones determinantes de complementariedad injertadas a partir de un anticuerpo no humano, pueden tener actividades de enlace menos que perfectas, comparándose con aquéllas del anticuerpo donador no humano. Por consiguiente, en adición a las regiones determinantes de complementariedad, los anticuerpos anti-hTSLPR humanizados de la invención con frecuencia pueden tener algunos residuos de aminoácidos en la región de estructura humana reemplazados con residuos de aminoácidos del anticuerpo donador no humano (por ejemplo, el anticuerpo de ratón mostrado en la Figura 5). Los métodos para generar anticuerpos humanizados mediante sustitución de las regiones determinantes de complementariedad, incluyendo los criterios para seleccionar los residuos de estructura para el reemplazo, son bien conocidos en la materia. Por ejemplo, en adición a la técnica anteriormente mencionada en relación con la producción de anticuerpos quiméricos, se proporcionan enseñanzas adicionales sobre la fabricación de anticuerpos humanizados en, por ejemplo, Winter y colaboradores, Solicitud de Patente del Reino Unido N ú mero G B 21 88638A ( 1 987) , Patente de los Estados U nidos de Norteamérica N úmero 5 ,225, 539 ; Jones ( 1 986) Nature 321 :552-525; Verhoeyen y colaboradores, 1 988 Science 239: 1 534; y Beidler ( 1 988) J. Immunol. 141 :4053-4060. También se puede llevar a cabo la sustitución de la región determinante de complementariedad utilizando mutagénesis dirigida al sitio de los oligonucleótidos, como se describe, por ejemplo, en la Publicación I nternacional N úmero WO 94/1 0332 titulada Humanized Antibodies to Fe Receptors for Immunoglobulin G on Human Mononuclear Phagocytes. Los anticuerpos anti-hTSLPR quiméricos o humanizados de la invención pueden ser inmunoglobulinas monovalentes , divalentes, o polivalentes. Por ejemplo, un anticuerpo quimérico monovalente es un d ímero (H L) formado por una cadena H quimérica asociada a través de puentes de disulfu ro con una cadena L quimérica , como se observa anteriormente. Un anticuerpo quimérico divalente es un tetrámero (H2 L2) formado por dos dímeros H L asociados a través de cuando menos u n puente de disulfuro. Un anticuerpo quimérico polivalente se basa en una acumulación de cadenas. 3. Anticuerpos anti-hTSLPR Humanos En adición a los anticuerpos anti-hTSLPR quiméricos o humanizados, también se incluyen en la invención los anticuerpos completamente humanos que exhiban la misma especificidad de enlace y una afinidad de enlace comparable o mejor. Por ejemplo, los anticuerpos humanos pueden tener las mismas o mejores características de enlace en relación con aquéllas de un anticuerpo no humano de referencia que contenga una secuencia de región variable de cadena pesada de la SEQ ID NO:5, y una secuencia de región variable de cadena ligera de la SEQ ID NO:6. Comparándose con los anticuerpos quiméricos o humanizados, los anticuerpos anti-hTSLPR humanos de la invención tienen una antigenicidad adicionalmente reducida cuando se administran a sujetos humanos. Los anticuerpos anti-hTSLPR humanos se pueden generar empleando métodos que son conocidos en este campo. Por ejemplo, un método in vivo para reemplazar una región variable de un anticuerpo no humano con una región variable humana en un anticuerpo, mientras que se mantengan las mismas, o se proporcionen mejores, características de enlace en relación con aquéllas del anticuerpo no humano, se ha dado a conocer en la Solicitud de Patente de los Estados Unidos de Norteamérica con Número de Serie 10/778,726 (Publicación Número 20050008625). El método se apoya en el reemplazo guiado por el epítopo de las regiones variables de un anticuerpo de referencia no humano con un anticuerpo completamente humano. El anticuerpo humano resultante generalmente no está relacionado estructuralmente con el anticuerpo no humano de referencia, pero se enlaza con el mismo epítopo sobre el mismo antígeno que el anticuerpo de referencia. Dicho de una manera breve, se hace posible el planteamiento de reemplazo de complementariedad guiado por el epítopo en serie mediante el establecimiento de una competencia en las células entre un "competidor" y una biblioteca de diversos híbridos del anticuerpo de referencia ("anticuerpos de prueba") por el enlace con cantidades limitantes de antígeno en la presencia de un sistema reportero que responda al enlace del anticuerpo de prueba con el antígeno. El competidor puede ser ePanticuerpo de referencia o un derivado del mismo, tal como un fragmento Fv de una sola cadena. El competidor también puede ser un ligando natural o artificial del antígeno que se enlace con el mismo epítopo que el anticuerpo de referencia. Los únicos requerimientos del competidor es que se enlace con el mismo epítopo que el anticuerpo de referencia, y que compita con el anticuerpo de referencia por el enlace del antígeno. Los anticuerpos de prueba tienen una región-V de enlace de antígeno en común a partir del anticuerpo de referencia no humano, y la otra región-V seleccionada al azar a partir de una fuente diversa, tal como una biblioteca de repertorio de anticuerpos humanos. La región-V común a partir del anticuerpo de referencia sirve como una guía, colocando a los anticuerpos de prueba sobre el mismo epítopo sobre el antígeno, y en la misma orientación, de tal manera que se inclina la selección hacia la fidelidad más alta de enlace de antígeno con el anticuerpo de referencia. La identificación del dominio de enlace de TSLPR se identificó mediante mapeo del epítopo, y se muestra en la Figura 8. El anticuerpo de TSLPR se enlaza con un epítopo discontinuo. Se pueden utilizar muchos tipos de sistemas reporteros para detectar las interacciones deseadas entre los anticuerpos de prueba y el antígeno. Por ejemplo, los fragmentos reporteros de complemento se pueden enlazar al antígeno y al anticuerpo de prueba, respectivamente, de tal manera que solamente se presente la activación del reportero mediante el complemento del fragmento cuando se enlace el anticuerpo de prueba con el antígeno. Cuando se co-expresan fusiones de fragmentos reporteros de anticuerpo de prueba y de antígeno con un competidor, la activación del reportero se hace dependiente de la capacidad del anticuerpo de prueba para competir con el competidor, que es proporcional a la afinidad del anticuerpo de prueba por el antígeno. Otros sistemas reporteros que se pueden utilizar incluyen el reactivador de un sistema de reactivación de reportero auto-inhibido (RAIR), como se da a cono.cer en la Solicitud de Patente de los Estados Unidos de Norteamérica con Número de Serie 10/208,730 (Publicación Número 20030198971), o el sistema de activación competitivo dado a conocer en la Solicitud de Patente de los Estados Unidos de Norteamérica con Número de Serie 10/076,845 (Publicación No. 20030157579). Con el sistema de reemplazo de complementariedad guiado por el epítopo en serie, se hace la selección para identificar las células que expresen un solo anticuerpo de prueba junto con el competidor, antígeno, y componentes reporteros. En estas células, cada anticuerpo de prueba compite uno a uno con el competidor por el enlace con una cantidad limitante de antígeno. La actividad del reportero es proporcional a la cantidad de antígeno enlazado con el anticuerpo de prueba, que a su vez es proporcional con la afinidad del anticuerpo de prueba por el antígeno y la estabilidad del anticuerpo de prueba. Los anticuerpos de prueba se seleccionan inicialmente con base en su actividad en relación con aquélla del anticuerpo de referencia cuando se expresan como el anticuerpo de prueba. El resultado de la primera ronda de selección es un conjunto de anticuerpos "híbridos", cada uno de los cuales está comprendido de la misma región-V no humana a partir del anticuerpo de referencia, y una región-V humana a partir de la biblioteca, y cada uno de los cuales se enlaza con el mismo epítopo sobre el antígeno que el anticuerpo de referencia. Uno o más de los anticuerpos híbridos seleccionados en la primera ronda tendrán una afinidad por el antígeno comparable o más alta que aquélla del anticuerpo de referencia. En el segundo paso de reemplazo de la región-V, se utilizan las regiones-V humanas seleccionadas en el primer paso como una guía para la selección de los reemplazos humanos por la región-V de anticuerpo de referencia no humano restante, con una biblioteca diversa de regiones-V humanas cognadas. Los anticuerpos híbridos seleccionados en la primera ronda también se pueden utilizar como competidores para la segunda ronda de selección. El resultado de la segunda ronda de selección es un conjunto de anticuerpos completamente humanos que difieren estructuralmente del anticuerpo de referencia, pero que compiten con el anticuerpo de referencia por el enlace con el mismo antígeno. Algunos de los anticuerpos humanos seleccionados se enlazan con el mismo epítopo sobre el mismo antígeno que el anticuerpo de referencia. Entre estos anticuerpos humanos seleccionados, uno o más se enlazan con el mismo epítopo con una afinidad que es comparable o más alta que aquélla del anticuerpo de referencia. Utilizando uno de los anticuerpos anti-hTSLPR de ratón o quiméricos descritos anteriormente como el anticuerpo de referencia, este método se puede emplear fácilmente para generar anticuerpos humanos que se enlazan con el TSLPR humano con la misma especificidad de enlace y con la misma o mejor afinidad de enlace. En adición, estos anticuerpos anti-hTSLPR humanos también se pueden obtener comercialmente en compañías que producen por costumbre anticuerpos humanos, por ejemplo KaloBios, Inc. (Mountain View, CA). 4. Otros Tipos de Anticuerpos anti-hTSLPR Los anticuerpos anti-hTSLPR de la invención también incluyen anticuerpos de una sola cadena, anticuerpos biespecíficos, y anticuerpos multiespecíficos. En algunas modalidades, los anticuerpos de la invención son anticuerpos de una sola cadena. Los anticuerpos de una sola cadena contienen, en una sola cadena de polipéptido establemente plegada, las regiones de enlace de antígeno tanto de la cadena pesada como de la cadena ligera. Como tales, los anticuerpos de una sola cadena típicamente retienen la especificidad y afinidad de enlace de los anticuerpos monoclonales, pero son de un tamaño considerablemente más pequeño que el de las inmunoglobulinas clásicas. Para ciertas aplicaciones, los anticuerpos de una sola cadena anti-hTSLPR de la invención pueden proporcionar muchas propiedades convenientes, comparándose con el anticuerpo anti-hTSLPR intacto. Éstas incluyen, por ejemplo, más rápida eliminación del cuerpo, mayor penetración en el tejido tanto para la toma de imágenes de diagnóstico como para la terapia, y una disminución significativa en la inmunogenicidad al compararse con los anticuerpos basados en ratón. Otros beneficios potenciales de utilizar los anticuerpos de una sola cadena incluyen mejores capacidades de rastreo en los métodos de rastreo de alta producción, y el potencial de una aplicación no parenteral. Los anticuerpos anti-hTSLPR de una sola cadena de la invención se pueden preparar empleando los métodos que se han descrito en este campo. Los ejemplos de estas técnicas incluyen las descritas en las Patentes de los Estados Unidos de Norteamérica Números 4,946,778 y 5,258,498; Huston y colaboradores, Methods in Enzymology 203:46-88, 1991; Shu y colaboradores, Proc. Nati. Acad. Sci. EUA 90:7995-7999, 1993; y Skerra y colaboradores, Science 240:1038-1040, 1988. En algunas modalidades, la invención proporciona anticuerpos anti-hTSLPR derivados o enlazados a otra molécula funcional para generar una molécula biespecífica o multiespecífica que se enlace con múltiples sitios de enlace o epítopos objetivos. La molécula funcional incluye otro péptido o proteína (por ejemplo, una citoquina, un agente citotóxico, un agente inmunoestimulante o inhibidor, un fragmento Fab', u otro fragmento de enlace de anticuerpo, como se describe anteriormente). Por ejemplo, un anticuerpo anti-hTSLPR o porción de enlace de antígeno del mismo, se puede enlazar funcionalmente (por ejemplo, mediante acoplamiento químico, fusión genética, asociación no covalente, o de otra manera) con una o más moléculas de enlace diferentes, tales como otro anticuerpo, fragmento de anticuerpo, péptido, o mimético de enlace. Por consiguiente, los anticuerpos anti-hTSLPR biespecíficos y multiespecíficos de la invención comprenden cuando menos un anticuerpo monoclonal anti-hTSLPR o fragmento de enlace de antígeno del mismo, con una primera especificidad de enlace para el TSLPR humano, y una segunda especificidad de enlace para un segundo epítopo objetivo. El segundo epítopo objetivo puede ser un receptor Fe, por ejemplo Fc?RI humano, o un receptor Fc? humano. Por consiguiente, la invención incluye moléculas biespecíficas y multiespecíficas capaces de enlazarse tanto con Fc?RI, como con las células efectoras que expresan Fc?R ó FceR (por ejemplo, monocitos, macrófagos, o células polimorfonucleares (PMNs)), y con las células objetivas que expresan el TSLPR humano (por ejemplo, células dendríticas CD11c+ humanas). Estas moléculas multiespecíficas (por ejemplo, biespecíficas o multiespecíficas) dirigen las células que expresan el TSLPR humano objetivo hacia las células efectoras, y disparan las actividades de las células efectoras mediadas por el receptor Fe, tal como la fagocitosis de una célula que expresa TSLPR humano, citotoxicidad mediada por células dependientes de anticuerpos (ADCC), liberación de citoquina, o generación de anión de superóxido . Las m oléculas anti-hTS LP R biespecíficas y m ultiespecíficas de la prese nte invención se pueden hacer media nte los métodos que se han descrito en la materia . Éstos incluyen las técnicas qu ím icas (ver, por ejem plo , Kranz , Proc. Nati. Acad. Sci. EUA 78:5807, 1 981 ), las técnicas de polidoma (ver, por ejemplo, la Patente de los Estados Unidos de Norteamérica Número 4,474,893) , o las técnicas de ADN recombinante. Las moléculas biespecíficas y multiespecíficas de la presente invención también se pueden preparar mediante la conjugación de las especificidades de enlace constituyentes, por ejemplo las especificidades de enlace anti-FcR y anti-TSLPR humano, empleando los métodos conocidos en la técnica , y como se describen en la presente. Por ejemplo, cada especificidad de enlace de la molécula biespecífica y multiespecífica , se puede generar por separado, y luego se conjugan unas con otras. Cuando las especificidades de enlace son proteínas o péptidos, se puede utilizar una variedad de agentes de acoplamiento o reticulantes para la conjugación covalente. Los ejemplos de los agentes reticulantes incluyen proteína A, carbodi-imida , N-succinimidil-S-acetil-tioacetato (SATA), N-succinimidil-3-(2-piridilditio)-propionato (SPDP) , y 4-(N-maleimido-metil)-ciclohexan-1 -carboxilato de sulfosuccinimidilo (sulfo-SMCC). Cuando las especificidades de enlace son anticuerpos (por ejemplo, dos anticuerpos humanizados), se pueden conjugar por medio de enlace de sulfhidrilo de las regiones de articulación del término-C de las dos cadenas pesadas. La región de articulación se puede modificar para contener un número non de residuos de sulfhid rilo , por ejemplo uno, antes de la conjugación. El enlace de las moléculas biespecíficas y multiespecíficas con sus objetivos específicos se puede confirmar mediante el ensayo inmunosorbente enlazado con enzima (ELISA), un radioinmunoensayo (RÍA), o el ensayo Western blot. Cada uno de estos ensayos detecta generalmente la presencia de los complejos de proteína-anticuerpo de interés particular, mediante el empleo de un reactivo marcado (por ejemplo, un anticuerpo específico para el complejo de interés. Por ejemplo, los complejos de FcR-anticuerpo se pueden detectar utilizando, por ejemplo, un anticuerpo enlazado con enzima o fragmento de anticuerpo que reconozca y se enlace específicamente con los complejos de anticuerpo-FcR. De una manera alternativa, los complejos se pueden detectar utilizando cualquiera de una variedad de otros inmunoensayos. Por ejemplo, el anticuerpo se puede marcar radioactivamente, y se puede utilizar en un radioinmunoensayo (RÍA) (ver, por ejemplo, Weintraub, B., Principies of Radioimmunoassays, Seventh Training Course on Radioligand Assay Techniques. The Endocrine Society, Marzo de 1986). El isótopo radioactivo se puede detectar por medios tales como el uso de un contador ? o un contador de cintilación, o mediante auto-radiografía. III. Polinucleótidos, Vectores, y Células Huéspedes para la Producción de Anticuerpos Anti-hTSLPR. La invención proporciona polinucleótidos sustancialmente purificados (ADN ó ARN) que codifican polipéptidos que comprenden segmentos o dominios de las cadenas de anticuerpo anti-hTSLPR descritas anteriormente. Algunos de los polinucleótidos de la invención comprenden la secuencia de nucleótidos de la región variable de cadena pesada mostrada en la SEQ ID NO:13, y/o la secuencia de nucleótidos de la región variable de cadena ligera mostrada en la SEQ ID NO:14. Algunos otros polinucleótidos de la invención comprenden secuencias de nucleótidos que son sustancialmente idénticas (por ejemplo, cuando menos el 65 por ciento, el 80 por ciento, el 95 por ciento, o el 99 por ciento) a las secuencias de nucleótidos de la SEQ ID NO:13 ó de la SEQ ID NO:14. Cuando se expresan a partir de vectores de expresión apropiados, los polipéptidos codificados por estos polinucleótidos son capaces de exhibir capacidad de enlace de antígeno. En la invención también se proporcionan polinucleótidos que codifican cuando menos una región determinante de complementariedad, y usualmente las tres regiones determinantes de complementariedad a partir de la cadena pesada o ligera del anticuerpo anti-hTSLPR mostrado en la Figura 5. Algunos otros polinucleótidos codifican toda o sustancialmente toda la secuencia de la región variable de la cadena pesada y/o la cadena ligera del anticuerpo anti-hTSLPR mostrado en la Figura 5. Por ejemplo, algunos de estos polinucleótidos codifican la secuencia de aminoácidos de la región variable de cadena pesada mostrada en la SEQ ID NO:5 y/o la secuencia de aminoácidos de la región variable de cadena ligera mostrada en la SEQ ID NO:6. Debido a la degeneración del código, una variedad de secuencias de ácidos nucleicos codificarán cada una de las secuencias de aminoácidos de inmunoglobulina. Los polinucleótidos de la invención pueden codificar solamente la secuencia de la región variable de un anticuerpo anti-hTSLPR. También pueden codificar tanto una región variable como una región constante del anticuerpo. Algunas de las secuencias de polinucleótidos de los ácidos nucleicos de la invención codifican una secuencia de región variable de cadena pesada madura que es sustancialmente idéntica (por ejemplo, cuando menos el 80 por ciento, el 90 por ciento, ó el 99 por ciento) a la secuencia de región variable de cadena pesada madura del anticuerpo anti-hTSLPR de ratón 1D6.C9 mostrado en la SEQ ID NO:5. Algunas otras secuencias de polinucleótidos codifican una secuencia de región variable de cadena ligera madura que es sustancialmente idéntica a la secuencia de región variable de cadena ligera madura del anticuerpo de ratón 1D6.C9 mostrado en la SEQ ID NO:6. Algunas de las secuencias de polinucleótidos codifican un polipéptido que comprende las regiones variables tanto de la cadena pesada como de la cadena ligera del anticuerpo de ratón. Algunos otros polinucleótidos codifican dos segmentos de polipéptido que respectivamente son sustancialmente idénticos a las regiones variables de la cadena pesada y de la cadena ligera del anticuerpo de ratón. Las secuencias de polinucleótidos se pueden producir mediante la síntesis de ADN en fase sólida de novo, o mediante mutagénesis con reacción en cadena de la polimerasa de u na secuencia existente (por ejemplo, las secuencias descritas en los Ejemplos que se encuentran más adelante) , que codifique un anticuerpo anti-hTSLPR o su fragmento de enlace. La síntesis química directa de los ácidos nucleicos se puede llevar a cabo mediante los métodos conocidos en la materia, tales como el método de fosfotriéster de Narang y colaboradores, 1 979, Meth. Enzymol. 68:90; el método de fosfodiéster de Brown y colaboradores, Meth. Enzymol. 68 : 109, 1 979; el método de dietil-fosforamidita de Beaucage y colaboradores, Terra. Lett. 22: 1 859, 1 981 ; y el método de soporte sólido de la Patente de los Estados Unidos de Norteamérica N úmero 4,458,066. La introducción de mutaciones a una secuencia de polinucleótido mediante reacción en cadena de la polimerasa, se puede llevar a cabo como se describe, por ejemplo, en PCR Technology: Principies and Applications for DNA Amplification, H . A. Erlich (Editor) , Freeman Press, NY, NY, 1 992 ; PCR Protocols: A Guide to Methods and Applications, I nnis y colaboradores (Editores) , Academic Press, San Diego, CA, 1 990; Mattila y colaboradores, N ucleic Acids Res. 19:967, 1991 ; y Eckert y colaboradores, PCR Methods and Applications 1 : 1 9, 1 991 . En la invención también se proporcionan vectores de expresión y células huéspedes para producir los anticuerpos anti-hTSLPR descritos anteriormente. Se pueden emplear diferentes vectores de expresión para expresar los polinucleótidos que codifiquen las cadenas de anticuerpos anti-hTSLPR o sus fragmentos de enlace. Se pueden utilizar vectores de expresión tanto basados en virus como no virales para producir los anticuerpos en una célula huésped de mamífero. Los vectores y sistemas no virales incluyen plásmidos, vectores episomales, típicamente con un cásete de expresión para expresar una proteína ó ARN, y cromosomas artificiales humanos (ver, por ejemplo, Harrington y colaboradores, Nat. Genet. 15:345, 1997). Por ejemplo, los vectores no virales útiles para la expresión de los polinucleótidos y polipéptidos anti-hTSLPR en células de mamífero (por ejemplo, humanas) incluyen pThioHis A, B, y C, pcDNA3.1/His, pEBVHis A, B, y C (Invitrogen, San Diego, CA), vectores MPSV, y otros numerosos vectores conocidos en la técnica para expresar otras proteínas. Los vectores virales útiles incluyen los vectores basados en retrovirus, adenovirus, virus adeno-asociados, virus de herpes, vectores basados en SV40, virus de papiloma, virus HBP Epstein Barr, vectores de virus de vacuna, y virus de Semliki Forest (SFV). Ver Brent y colaboradores, supra; Smith, Annu. Rev. Microbiol. 49:807, 1995; y Rosenfeld y colaboradores, Cell 68:143, 1992. La elección del vector de expresión depende de las células huéspedes pretendidas en las que se vaya a expresar el vector. Típicamente, los vectores de expresión contienen un promotor y otras secuencias reguladoras (por ejemplo, potenciadoras) que se enlazan operativamente con los polinucleótídos que codifiquen una cadena o fragmento de anticuerpo anti-hTSLPR. En algunas modalidades, se emplea un promotor inducible para prevenir la expresión de las secuencias insertadas, excepto bajo condiciones de inducción. Los promotores inducibles incluyen, por ejemplo, arabinosa, lacZ, el promotor de metalotioneína, o un promotor de choque por calor. Los cultivos de los organismos transformados se pueden extender bajo condiciones no inductoras sin forzar la población para las secuencias de codificación cuyos productos de expresión sean mejor tolerados por las células huéspedes. En adición a los promotores, también se pueden requerir o desear otros elementos reguladores para una expresión eficiente de una cadena o fragmento de anticuerpo anti-hTSLPR. Estos elementos típicamente incluyen un codón de inicio ATG y el sitio de enlace de ribosoma adyacente, u otras secuencias. En adición, se puede mejorar la eficiencia de la expresión mediante la inclusión de potenciadores apropiados para el sistema celular en uso (ver, por ejemplo, Scharf y colaboradores, Results Probl. Cell Differ. 20:125, 1994; y Bitner y colaboradores, Meth. Enzymol. 153:516, 1987). Por ejemplo, se puede utilizar el potenciador SV40 ó el potenciador CMV para aumentar la expresión en las células huéspedes de mamífero. Los vectores de expresión también pueden proporcionar una posición de secuencia de señal de secreción para formar una proteína de fusión con los polipéptidos codificados por las secuencias de anticuerpos anti-hTSLPR insertadas. Con más frecuencia, las secuencias de anticuerpos anti-hTSLPR insertadas se enlazan con una secuencia de señal antes de incluirse en el vector.

Los vectores que se van a utilizar para recibir las secuencias q ue codifiq uen los dom inios variables de cadena ligera y pesada del anticuerpo anti-hTS LPR , algunas veces tam bién codifican las regiones o partes constantes de los m ismos. Estos vectores perm iten la expresión de las regiones va ria bles como proteínas de fusión con las regiones constantes, conduciendo de esta m anera a la prod ucción de anticuerpos intactos o frag mentos de los m ism os . Típicamente , estas reg iones constantes son hum anas. Las células huéspedes para alojar y expresar las cadenas de anticuerpo a nti-hTS LPR , pueden ser procarióticas o euca rióticas . E. coli es un huésped procariótico útil para la clonación y expresión de los polinucleótidos de la presente invención . Otros huéspedes microbianos adecuados para utilizarse incluyen bacilos, tales como Bacillus subtilis, y otras enterobacteriáceas, tales como Salmonella, Serratia, y diferentes especies de Pseudomonas. En estos huéspedes procarióticos, también se pueden hacer vectores de expresión , que típicamente contengan secuencias de control de expresión compatibles con la célula huésped (por ejemplo, un origen de réplica). En adición , estará presente cualquier número de una variedad de promotores bien conocidos, tales como el sistema promotor de lactosa, un sistema promotor de triptófano (trp) , un sistema promotor de beta-lactamasa , o un sistema promotor a partir del fago lambda. Los promotores típicamente controlan la expresión , opcionalmente con una secuencia operadora , y tienen secuencias de sitio de enlace de ribosoma y similares, para iniciar y terminar la transcripción y la traducción. También se pueden emplear otros microbios, tales como levadura, para expresar los polipéptidos anti-hTSLPR de la invención. También se pueden utilizar células de insecto en combinación con los vectores de baculovirus. En algunas modalidades preferidas, se utilizan células huéspedes de mamífero para expresar y producir los polipéptidos anti-hTSLPR de la presente invención. Por ejemplo, puede ser una línea celular de hibridoma que exprese los genes de inmunoglobulina endógenos (por ejemplo, el clon de hibridoma de mieloma 1D6.C9, como se describe en los Ejemplos), o una línea celular de mamífero que aloje un vector de expresión exógeno (por ejemplo, las células de mieloma SP2/0 ejemplificadas más adelante). Éstas incluyen cualquier célula animal o humana mortal normal, o inmortal normal o anormal. Por ejemplo, se han desarrollado un número de líneas celulares huéspedes adecuadas capaces de secretar inmunoglobulinas intactas, incluyendo las líneas celulares de ovario de hámster chino, diferentes líneas celulares COS, células HeLa, líneas celulares de mieloma, células-B transformadas, e hibridomas. El uso de un cultivo celular de tejido de mamífero para expresar los polipéptidos se describe en general, en Winnacker, FROM GENES TO CLONES, VCH Publishers, N. Y., N. Y., 1987. Los vectores de expresión para las células huéspedes de mamífero pueden incluir secuencias de control de expresión, tales como un origen de réplica, un promotor, y un potenciador (ver, por ejemplo, Queen y colaboradores, Immunol. Rev. 89:49-68, 1986), y los sitios de información de procesamiento necesarios, tales como los sitios de enlace de ribosoma, los sitios de empalme de ARN, los sitios de poliadenilación, y secuencias terminadoras de transcripción. Estos vectores de expresión normalmente contienen promotores derivados a partir de genes de mamífero o a partir de virus de mamífero. Los promotores adecuados pueden ser constitutivos, específicos del tipo de célula, específicos de la etapa, y/o modulables o regulables. Los promotores útiles incluyen, pero no se limitan a, el promotor de metalotioneína, el promotor tardío mayor de adenovirus constitutivo, el promotor de MMTV inducible por dexametasona, el promotor de SV40, el promotor MRP pollll, el promotor de MPSV constitutivo, el promotor de CMV inducible por tetraciclina (tal como el promotor de CMV temprano-inmediato humano), el promotor de CMV constitutivo, y combinaciones de promotor-potenciador conocidas en la materia. Los métodos para introducir vectores de expresión que contengan las secuencias de polinucleótidos de interés varían dependiendo del tipo de huésped celular. Por ejemplo, comúnmente se utiliza la transfección con cloruro de calcio para las células procarióticas, mientras que se puede utilizar el tratamiento con fosfato de calcio o la electroporación para otros huéspedes celulares. (Ver en general Sambrook y colaboradores, supra). Otros métodos incluyen, por ejemplo, electroporación, tratamiento con fosfato de calcio, transformación mediada por liposomas, inyección y microinyección, métodos de balística, virosomas, inmunoliposomas, conjugados de policatión:ácido nucleico, ADN desnudo, viriones artificiales , fusión con la prote ína estructural VP22 de virus de herpes (E lliot y O' Hare, Cell 88:223, 1 997), absorción de ADN mejorada por el agente, y transducción ex vivo. Para la producción de alto rendimiento a largo plazo de proteínas recombinantes, con frecuencia se deseará la expresión estable. Por ejemplo, se pueden preparar líneas celulares q ue expresen establemente las cadenas de anticuerpos anti-hTSLPR o los fragmentos de enlace, utilizando los vectores de expresión de la invención que contengan orígenes de réplica virales o elementos de expresión endógenos y un gen marcador seleccionable. En seguida de la introducción del vector, se puede permitir que crezcan las células durante 1 a 2 d ías en un medio enriquecido, antes de cambiarse a un medio selectivo. El propósito del marcador seleccionable es conferir resistencia a la selección , y su presencia permite el crecimiento de células que expresen con éxito las secuencias introducidas en un medio selectivo. Las células resistentes establemente transfectadas se pueden proliferar empleando técnicas de cultivo de tejido apropiadas para el tipo de célula . IV. Propiedades de los Anticuerpos Anti-hTSLPR Una vez que se expresa el anticuerpo anti-hTSLPR descrito anteriormente a partir de un vector de expresión en una célula huésped , o endógenamente en un hibridoma, se puede purificar fácilmente del medio de cultivo y de las células huéspedes. Usualmente, las cadenas de anticuerpo se expresan con secuencias de señales, y por lo tanto, se liberan hacia el medio de cultivo. Sin em ba rgo, si las células h uéspedes no secretan naturalmente las cadenas de a nticuerpos , las cadenas de anticuerpos se pueden liberar mediante el tratam iento con u n detergente ligero . E ntonces las cadenas de anticuerpo se pueden purificar mediante métodos convencionales, incluyendo precipitación con sulfato de amonio, crom atografía por afinidad con el objetivo inmovilizado, crom atografía en columna , electroforesis en gel, y similares . Estos métodos son bien conocidos y rutinariamente practicados en la técnica , por ejem plo, Scopes, Protein Purification, Springer-Verlag , N . Y. , 1 982 ; y Harlow y Lañe, supra. A manera de ejemplo, se pueden cultivar hibridomas seleccionados que expresen los anticuerpos anti-hTSLPR de la invención , en matraces centrífugos de 2 litros para la purificación del anticuerpo monoclonal. Los sobrenadantes se pueden filtrar y concentrar antes de la cromatografía por afinidad con proteína A-Sepharose, o proteína C-Sepharose (Pharmacia , Piscataway, NJ). La IgG eluida se puede verificar mediante electroforesis en gel y cromatografía de líquidos de alto rendimiento para asegurar la pureza . La solución reguladora se puede intercambiar en suero reg ulado con fosfato, y se puede determinar la concentración mediante lectura de la OD280. Los anticuerpos monoclonales se pueden poner en al ícuotas y almacenar a -80°C. Sin importar su método de preparación, los anticuerpos monoclonales anti-hTSLPR de la presente invención se enlazan específicamente con el hTSLPR o un fragmento antigénico del m ism o . El enlace específico existe cuando la constante de disociación para el anticuerpo que se enlaza con hTS LP R o un fragmento antigénico del m ism o es < 1 µM , de preferencia < 1 00 nM , y muy preferiblemente < 1 nM . La capacidad de un anticuerpo para enlazarse con hTSLPR se puede detectar marcando el anticuerpo de interés directamente, o el anticuerpo puede no estar marcado y se puede detectar el enlace indirectamente utilizando diferentes formatos de ensayo de emparedado. Ver, por ejemplo, Harlow y Lañe, supra. Los anticuerpos que tengan esta especificidad de enlace tienen más probabilidades de compartir las propiedades convenientes exhibidas por el anticuerpo anti-hTSLPR de ratón 1 D6.C9 descrito en los Ejemplos más adelante. Los anticuerpos monoclonales anti-hTSLPR de la invención son capaces de antagonizar las actividades de señalización mediadas por la TSLP. Estas actividades incluyen , por ejemplo, la secreción de quimiocinas atrayentes de TH2 mediante las células dendríticas, tales como TARC y M DC; la activación de las células dendríticas, la expansión de las células T CD4 + y la polarización hasta un fenotipo TH2, la producción de citoquinas pro-alérgicas, tales como I L-4, I L-5, I L-1 3, TN Fa. Se pueden emplear un número de ensayos para determinar si un anticuerpo anti-hTSLPR puede inhibir las actividades celulares mediadas por TSLP. Éstos incluyen , por ejemplo, cualquiera de los ensayos descritos en los Ejemplos, tales como el ensayo de proliferación celular, utilizando células Ba/F3/hTSLPR/hl L7Ra, el ensayo de reportero de luciferasa utilizando células Ba/F3/hTS LP R/h l L7 Ra/Stat5-Luc, y el ensayo de secreción de TARC . También se han descrito en la materia ensayos adicionales para medir las actividades de señalización de TSLP . Ver, por ejemplo, Reche y colaboradores, J. Immunol. 167:336-43, 2001 ; e Isaksen y colaboradores, J. Immunol. 168:3288-94, 2002. En algunas modalidades, los anticuerpos anti-hTSLPR de la invención bloquean o compiten con el enlace de un anticuerpo anti-hTSLPR de referencia que tenga las secuencias de región variable mostradas en la Figura 5 (por ejemplo, el anticuerpo de ratón 1 D6. C9, o un anticuerpo quimérico del mismo descrito en los Ejemplos que se encuentran más adelante) con u n polipéptido de hTSLPR . Éstos pueden ser los anticuerpos anti-hTSLPR completamente humanos descritos anteriormente. También pueden ser otros anticuerpos anti-hTSLPR de ratón, quiméricos, o humanizados, que se enlacen con el mismo epítopo que el anticuerpo de referencia . La capacidad para bloquear o competir con el enlace del anticuerpo de referencia indica que un anticuerpo anti-hTSLPR bajo prueba se enlaza con el mismo epítopo o uno similar al definido por el anticuerpo de referencia, o con un epítopo que esté suficientemente proximal al epítopo enlazado por el anticuerpo anti-hTSLPR de referencia. Estos anticuerpos tienen especiales probabilidades de compartir las propiedades convenientes identificadas para el anticuerpo de referencia . La capacidad para bloquear o competir con el anticuerpo de referencia se puede determinar, por ejemplo, mediante un ensayo de enlace de competencia. Con un ensayo de enlace de competencia, el anticuerpo bajo prueba se examina para determinar su capacidad para inhibir el enlace específico del anticuerpo de referencia con un antígeno común, tal como un polipéptido de TSLPR. Un anticuerpo de prueba compite con el anticuerpo de referencia por el enlace específico con el antígeno si un exceso del anticuerpo de prueba inhibe sustancialmente el enlace del anticuerpo de referencia. La inhibición sustancial significa que el anticuerpo de prueba reduce el enlace específico del anticuerpo de referencia usualmente por cuando menos el 10 por ciento, el 25 por ciento, el 50 por ciento, el 75 por ciento, ó el 90 por ciento. Existen un número de ensayos de enlace de competencia conocidos que se pueden emplear para evaluar la competencia de un anticuerpo anti-hTSLPR con el anticuerpo anti-hTSLPR de referencia por el enlace con el TSLPR humano. Éstos incluyen, por ejemplo, radioinmunoensayo directo o indirecto en fase sólida (RÍA), inmunoensayo enzimático directo o indirecto en fase sólida (ElA), ensayo de competencia de emparedado (ver Stahli y colaboradores, Methods in Enzymology 9:242-253, 1983); ElA de biotina-avidina directo en fase sólida (ver Kirkland y colaboradores, J. Immunol. 137:3614-3619, 1986); ensayo marcado directo en fase sólida, ensayo de emparedado marcado directo en fase sólida (ver Harlow y Lañe, supra); RÍA de marca directo en fase sólida utilizando una marca de 1-125 (ver Morel y colaboradores, Molec. Immunol. 25:7-15, 1988); ElA de biotina-avidina directo en fase sólida (Cheung y colaboradores, Virology 1 76: 546-552 , 1990) ; y RÍA marcado directo (Molden hauer y colaboradores, Scand. J. Immunol. 32 :77-82 , 1 990). Típicamente, este ensayo involucra el uso del antígeno purificado enlazado a una superficie sólida o a células que lleven cualquiera de los mismos, un anticuerpo anti-hTSLPR de prueba no marcado, y un anticuerpo de referencia marcado. La inhibición competitiva se mide determinando la cantidad de marca enlazada a la superficie sólida o a las células en la presencia del anticuerpo de prueba . Normalmente , el anticuerpo de prueba está presente en exceso. Los anticuerpos identificados por el ensayo de competencia (anticuerpos competitivos) incluyen los anticuerpos que se enlazan al mismo epítopo que el anticuerpo de referencia , y los anticuerpos que se enlazan a un epítopo adyacente suficientemente proximal al epítopo enlazado por el anticuerpo de referencia para que se presente el impedimento estérico. Con el fin de determinar si los anticuerpos monoclonales anti-hTSLPR seleccionados se enlazan con epítopos únicos, cada anticuerpo se puede biotinilar utilizando reactivos comercialmente disponibles (por ejemplo, reactivos de Pierce, Rockford , I L). Se pueden llevar a cabo estudios de competencia utilizando anticuerpos monoclonales no marcados y anticuerpos monoclonales biotinilados, empleando placas ELISA recubiertas con polipéptido de TSLPR. El enlace del anticuerpo monoclonal biotinilado se puede detectar con una sonda de estreptavidina-fosfatasa alcalina. Con el objeto de determinar el isotipo de un anticuerpo anti-hTSLPR pu rificado, se pueden llevar a cabo ELISAs de isotipos. Por ejemplo, los pozos de las placas de microtitulación se pueden recubrir con 1 microgramo/mililitro de IgG anti-humana durante la noche a 4°C. Después de bloquear con albúmina de suero bovino al 1 por ciento, las placas se hacen reaccionar con 1 microgramo/mililitro o menos del anticuerpo monoclonal anti-hTSLPR, o los controles de isotipos purificados, a temperatura ambiente, durante 1 a 2 horas. Entonces se pueden hacer reaccionar los pozos ya sea con IgG 1 humana o con sondas conjugadas con fosfatasa alcalina específica de IgM humana. Luego se revelan y se analizan las placas, de tal manera que se pueda determinar el isotipo del anticuerpo purificado. Con el fin de demostrar el enlace de los anticuerpos monoclonales anti-hTSLPR con las células vivas que expresen un polipéptido de hTSLPR, se puede emplear citometría de flujo. Dicho de una manera breve, se pueden mezclar las líneas celulares que expresen hTSLPR (crecimiento bajo condiciones de crecimiento convencionales) con diferentes concentraciones de un anticuerpo anti-hTSLPR en suero regulado con fosfato conteniendo albúmina de suero bovino al 0.1 por ciento y suero fetal de becerro al 10 por ciento, y se incuban a 37°C durante 1 hora. Después de lavarse, las células se hacen reaccionar con anticuerpo anti-lgG humana fluorescentemente marcado bajo las mismas condiciones que el teñido de anticuerpo primario. Las muestras se pueden analizar mediante un instrumento FACScan utilizando las propiedades de dispersión de luz y dispersión lateral para dirigirse a las células individuales. Se puede utilizar un ensayo alternativo que use microscopio de fluorescencia (en adición a, o en lugar de) el ensayo de citometría de flujo. Las células se pueden teñir exactamente como se describe anteriormente, y se pueden examinar mediante el microscopio de fluorescencia. Este método permite la visualización de las células individuales, pero puede tener una sensibilidad disminuida, dependiendo de la densidad del antígeno. Los anticuerpos anti-hTSLPR de la invención se pueden probar adicionalmente para determinar su reactividad con un polipéptido de hTSLPR o fragmento antigénico mediante Western blot. Dicho de una manera breve, se pueden preparar polipéptidos o proteínas de fusión de hTSLPR purificados, o extractos celulares de células que expresen TSLPR, y se pueden someter a electroforesis en gel de poliacriiamida con dodecil-sulfato de sodio. Después de la electroforesis, los antígenos separados se transfieren a membranas de nitrocelulosa, se bloquean con suero fetal de becerro al 10 por ciento, y se sondean con los anticuerpos monoclonales que se vayan a probar. El enlace de la IgG humana se puede detectar utilizando fosfatasa alcalina anti-lgG humana, y se revela con tabletas de sustrato BCIP/NBT (Sigma Chem. Co., St. Louis, MO). V. Andamiajes que No Son de Inmunoglobulina Se pueden emplear una amplia variedad de estructuras o andamiajes de anticuerpo/inmunoglobulina, siempre que el polipéptido resultante incluya cuando menos una región de enlace que sea específica para la proteína objetiva. Estas estructuras o andamiajes incluyen los 5 idiotipos principales de las inmunoglobulinas humanas, o fragmentos de las mismas (tales como los que se dan a conocer en cualquier otra parte de la presente), e incluyen las inmunoglobulinas de otras especies de animales, de preferencia que tengan aspectos humanizados. Los anticuerpos de una sola cadena pesada, tales como los identificados en los camélidos, son un interés particular en este aspecto. Los expertos en este campo continúan descubriendo y desarrollando nuevas estructuras, andamiajes, y fragmentos. En un aspecto, la invención pertenece a la generación de anticuerpos no basados en inmunoglobulina, utilizando andamiajes que no son de inmunoglobulina, sobre los cuales se pueden injertar las regiones determinantes de complementariedad de la invención. Se pueden emplear las estructuras y andamiajes que no sean de inmunoglobulina conocidos o futuros, siempre que comprendan una región de enlace específica para la proteína objetiva de la SEQ ID NO:X. Estos compuestos se conocen en la presente como "polipéptidos que comprenden una región de enlace específica del objetivo". Las estructuras o andamiajes que no son de inmunoglobulina conocidos incluyen, pero no se limitan a, Adnectina (fibronectina) (Compound Therapeutics, Inc., Waltham, MA), anquirina (Molecular Partners AG, Zurich, Suiza), anticuerpos de dominio (Domantis, Ltd., Cambridge, MA), y Ablynx nv (Zwijnaarde, Bélgica)), lipocalina (Anticalina) (Pieris Proteolab AG, Freising, Alemania), productos inmuno-farmacéuticos modulares pequeños (Trubion Pharmaceuticals Inc., Seattle, WA), maxicuerpos (Avidia, Inc., Mountain View, CA)), Proteína A (Affibody AG, Suecia), y afilina (gamma-cristalina o ubiquitina) (Scil Proteins GmbH, Halle, Alemania). (i) Adnectinas - Productos Terapéuticos de Compuestos Los andamiajes de adnectina se basan en el dominio tipo III de fibronectina (por ejemplo, el décimo módulo de la fibronectina tipo III (dominio 10 Fn3). El dominio de fibronectina tipo III tiene 7 u 8 cadenas beta que están distribuidas entre dos hojas beta, que ellas mismas se empacan una contra la otra para formar el núcleo de la proteína, y que además contienen ciclos (análogos a las regiones determinantes de complementariedad) que conectan las cadenas beta unas con otras, y se exponen al solvente. Hay cuando menos tres de estos ciclos en cada orilla del emparedado de la hoja beta, en donde la orilla es el límite de la proteína perpendicular a la dirección de las cadenas beta. (Patente de los Estados Unidos de Norteamérica Número US 6,818,418). Estos andamiajes basados en fibronectina no son una inmunoglobulina, aunque el pliegue global está estrechamente relacionado con el del fragmento de anticuerpo funcional más pequeño, la región variable de la cadena pesada, que comprende la unidad de reconocimiento de antígeno entera en la IgG de camello y de llama. Debido a esta estructura, el anticuerpo que no es de inmunoglobulina imita las propiedades de enlace de antígeno que son de una naturaleza y afinidad similares a aquéllas que los anticuerpos . Estos andam iajes se pueden utiliza r en una estrategia de selección aleatoria de ciclo y mezcla in vitro que es similar al proceso de maduración por afinidad de los anticuerpos in vivo. Estas moléculas basadas en fibronectina se pueden utilizar como andamiajes, en donde las regiones de ciclo de la molécula pueden ser reemplazadas con las regiones determinantes de complementariedad de la invención , empleando técnicas de clonación convencionales. (ii) Anqui ri na - Componentes Moleculares La tecnología se basa en el uso de proteínas con módulos de repetición derivados de anquirina como andamiajes, para soportar las regiones variables que se pueden utilizar para enlazarse con diferentes objetivos. El módulo de repetición de anquirina es un polipéptido de 33 aminoácidos consistentes en dos hélices-a antiparalelas y una vuelta-ß. En enlace de las regiones variables se optimiza en su mayor parte mediante la utilización de la exhibición del ribosoma . (iii) Maxicuerpos/Avímeros - Avidia Los avímeros se derivan a partir de la proteína natural que contiene el dominio A, tal como LRP-1 . Estos dominios son utilizados por la naturaleza para las interacciones de proteína-proteína y en el ser humano, más de 250 proteínas se basan estructuralmente en los dominios-A. Los avímeros consisten en un número de diferentes monómeros del "dominio-A" (2-1 0) enlazados por medio de enlazadores de aminoácidos. Se pueden crear avímeros que se pueden enlaza r con el antígeno objetivo em pleando la metodolog ía descrita , por ejem plo , en las Patentes N úmeros 200401 75756 ; 20050053973; 2005004851 2 ; y 20060008844. (iv) Proteína A - Affibody Los ligandos por afinidad Affibody® son pequeñas proteínas simples compuestas de un haz de tres hélices basado en el andamiaje de uno de los dominios de enlace de IgG de la Proteína A. La Proteína A es una proteína superficial de la bacteria Staphylococcus aureus. Este dominio de andamiaje consiste en 58 aminoácidos, 1 3 de los cuales se seleccionan aleatoriamente para generar las bibliotecas Affibody® con un gran número de variantes de ligandos (ver, por ejemplo, la Patente de los Estados Unidos de Norteamérica N úmero US 5,831 ,01 2). Las moléculas Affibody® imitan a los anticuerpos, tienen un peso molecular de 6 kDa, comparándose con el peso molecular de los anticuerpos, q ue es de 1 50 kDa. A pesar de su pequeño tamaño, el sitio de enlace de las moléculas Affibody® es similar a aquél de un anticuerpo. (v) Anticalinas - Pieris Las Anticalinas® son productos desarrollados por la compañ ía Pieris ProteoLab AG . Se derivan de las lipocalinas , un grupo ampliamente extendido de proteínas pequeñas y robustas que normalmente están involucradas en el transporte fisiológico o almacenamiento de los compuestos qu ímicamente sensibles o insolubles. Se presentan varias lipocalinas naturales en los tejidos humanos o en los líquidos corporales.

La arquitectura de la proteína recuerda a la de las inmunoglobulinas, con ciclos hipervariables encima de una estructura rígida. Sin embargo, en contraste con los anticuerpos o con sus fragmentos recombinantes, las lipocalinas están compuestas de una sola cadena de polipéptido con 160 a 180 residuos de aminoácidos, siendo justo marginalmente más grande que un solo dominio de inmunoglobulina. El conjunto de cuatro ciclos, que forma el bolsillo de enlace, muestra una plasticidad estructural pronunciada, y tolera una variedad de cadenas laterales. El sitio de enlace, por lo tanto, se puede reconfigurar en un proceso registrado, con el objeto de reconocer las moléculas objetivas prescritas de diferente forma con una alta afinidad y especificidad. Una proteína de la familia de lipocalina, la proteína de enlace de bilina (BBP) de Pieris Brassicae, se ha utilizado para desarrollar anticalinas mediante la mutagénesis del conjunto de cuatro ciclos. Un ejemplo de una solicitud de patente que describe las "anticalinas" es la PCT WO 199916873. (vi) Affilin - Proteínas Scil Las moléculas AffiM nMR son pequeñas proteínas que no son de inmunoglobulina, las cuales están diseñadas para tener afinidades específicas hacia las proteínas y las moléculas pequeñas. Las nuevas moléculas AffilinMR se pueden seleccionar muy rápidamente a partir de dos bibliotecas, cada una de las cuales se basa en una proteína de andamiaje de derivación humana diferente. Las m oléculas Aff ili nMR no muestran ning una homología estructural con las proteínas de inmunoglobulina. Las proteínas Scil emplean dos andamiajes de Affilin R, uno de los cuales es gamma-cristalino, u na proteína de lente de ojo estructural humana , y la otra es la proteína de la superfamilia de "ubiquitina". Ambos andamiajes h umanos son muy pequeños, muestran estabilidad en alta temperatu ra , y son casi resistentes a los cambios de pH y a los agentes desnaturalizantes. Esta alta estabilidad se debe principalmente a la estructura de hoja beta expandida de las proteínas. Los ejemplos de las proteínas de derivación gamma-cristalina se describen en la Publicación I nternacional Número WO2001 04144, y los ejemplos de las proteínas "tipo ubiquitina" se describen en la Publicación Internacional Número WO20041 06368. VI . Aplicaciones Terapéuticas de los Anticuerpos Anti-hTSLPR Los anticuerpos anti-hTSLPR se pueden emplear en muchas aplicaciones terapéuticas o profilácticas mediante la inhibición de las actividades de señalización de TSLP. Éstas incluyen el tratamiento de las enfermedades o condiciones mediadas por la señalización de TSLP , tales como aquéllas que afectan al desarrollo de las células-B , al desarrollo de las células-T, a la reconfiguración genética del receptor de células-T, o a la regulación del factor de transcripción Stat5. Por ejemplo, los anticuerpo antagonistas anti-hTSLPR se pueden emplear para suprimir o reducir la respuesta inmune indeseada mediada por la célula TH2. En particular, son adecuados para el tratamiento de pacientes humanos que sufran de trastornos inflamatorios alérgicos asociados con, o mediados por, la señalización de TSLP. Las enfermedades inflamatorias alérgicas que son susceptibles al tratamiento con los anticuerpos anti-hTSLPR de la invención incluyen, por ejemplo, (1) asma, una enfermedad inflamatoria crónica de las vías respiratorias asociada con obstrucción del flujo de aire e hiper-responsividad bronquial; (2) dermatitis atópica, una enfermedad inflamatoria de la piel de exacerbación crónica que requiere de tratamiento intermitente a largo plazo; y (3) rinitis alérgica, un trastorno inflamatorio de la mucosa nasal, mediado por los linfocitos TH2 que están ligados con la atopia. En los Estados Unidos y en varios países europeos mayores, se espera que la prevalencia diagnosticada para asma, dermatitis atópica, y rinitis alérgica aumente desde 46 millones en el presente, hasta 53 millones, desde 31.7 millones en el presente hasta 37.2 millones, y desde 55.9 millones en el presente hasta 64.5 millones en el 2013, respectivamente. De aproximadamente el 50 al 80 por ciento de los pacientes con dermatitis atópica tienen o desarrollarán asma o rinitis alérgica. La mayoría de los fármacos que están actualmente disponibles para el tratamiento de alergias, tienen como objetivo proporcionar una alivio sintomático, mientras que hay relativamente poco esfuerzo en el campo de la inmunomodulación con probabilidades de proporcionar modificación de la enfermedad a largo plazo. Los anticuerpos anti-hTSLPR de la invención pueden proporcionar un tratamiento novedoso y efectivo de los sujetos (en especial de los pacientes h um anos) q ue sufren de cua lq uiera de estas enferm edades alérg icas. Al im pedi r q ue la TS LP active la senda de transd ucción de señal del receptor de TS LP , pueden bloquear la respuesta de TH2 y la producción de citoquinas responsables tanto del inicio como del mantenimiento de la inflamación alérgica. Por consiguiente, este planteamiento tiene el potencial de inducir un efecto terapéutico a largo plazo y un beneficio modificador de la enfermedad en los pacientes con dermatitis atópica, asma , y rinitis alérgica . En otra modalidad , la invención proporciona una composición farmacéutica que tiene cuando menos uno de cualq uiera de los anticuerpos anteriores o fragmentos funcionales o variantes conservadoras, y un veh ículo o excipiente farmacéuticamente aceptable para el mismo. En ciertas modalidades, la invención proporciona un método para el tratamiento de un trastorno o condición asociada con la presencia de una célula q ue tenga una hTSLP objetiva del receptor. El método involucra administrar a un sujeto que lo necesite, una cantidad efectiva de cualquiera de las composiciones farmacéuticas anteriores. En una modalidad relacionada, el trastorno o la condición que se va a tratar es un trastorno respiratorio. En otra modalidad , el trastorno o la condición que se va a tratar es asma bronquial, que es una enfermedad inflamatoria persistente común del pulmón caracterizada por h iper-responsividad de las vías respiratorias (AH R) , sobreproducción de moco, fibrosis, y niveles de Ig E elevados en suero.

En otra modalidad, el trastorno o la condición que se va a tratar es dermatitis atópica (alérgica), que es la enfermedad de la piel más común en la niñez, y se caracteriza por intenso prurito y placas eczematosas crónicas. En otra modalidad, el trastorno o la condición que se va a tratar se selecciona a partir de otras enfermedades y condiciones inflamatorias y obstructivas de las vías respiratorias, tales como COPD, lesión pulmonar aguda (ALI), síndrome de insuficiencia respiratoria aguda/de adultos (ARDS), dispnea, inflamación alérgica de las vías respiratorias, enfermedad de las vías respiratorias pequeñas, carcinoma pulmonar, síndrome de peso agudo en pacientes con enfermedad drepanocítica e hipertensión pulmonar, así como exacerbación de hiper-reactividad de las vías respiratorias a consecuencia de otra terapia con fármacos, en particular otra terapia con fármacos inhalados. En otra modalidad, el trastorno o la condición que se va a tratar es bronquitis de cualquier tipo o génesis, incluyendo, por ejemplo, bronquitis aguda, araquídica, catarral, cruposa, crónica, o ftinoide. En otra modalidad, el trastorno o la condición que se va a tratar incluye neumoconiosis (una enfermedad inflamatoria, comúnmente ocupacional, de los pulmones, con frecuencia acompañada por obstrucción de las vías respiratorias, ya sea crónica o aguda, y ocasionada por la inhalación repetida de polvos) de cualquier tipo o génesis, incluyendo, por ejemplo, aluminosis, antracosis, asbestosis, calicosis, ptilosis, siderosis, silicosis, tabacosis, y bisinosis.

En otra modalidad, el trastorno o la condición que se va a tratar se selecciona a partir de rinitis atópica (fiebre de heno) y sinusitis crónica. En otra modalidad, el trastorno o la condición que se va a tratar, se selecciona a partir de otras condiciones inflamatorias de la piel, por ejemplo psoriasis o lupus eritematoso. En otra modalidad, el trastorno o la condición que se va a tratar es la enfermedad inflamatoria del intestino, tal como colitis ulcerativa y enfermedad de Crohn. En otra modalidad, el trastorno o la condición que se va a tratar se selecciona a partir de otras condiciones fibróticas, tales como esclerosis sistémica, fibrosis hepática, fibrosis pulmonar, fibrosis pulmonar idiopática, o pulmón fibroide. En otra modalidad, el trastorno o la condición que se va a tratar es recurrencia o metástasis tumoral. Se ha demostrado que la inhibición de las citoquinas TH2 mejora las vacunas anti-virales en los modelos animales, y puede ser benéfica en el tratamiento de VIH y otras enfermedades infecciosas [Ahlers, J. D. y colaboradores, Proc. Nati. Acad. Sci. EUA, 2002]. En otra modalidad, el trastorno o la condición que se va a tratar es una infección respiratoria viral, la cual exacerba las condiciones crónicas subyacentes, tales como asma, bronquitis crónica, COPD, otitis media, y sinusitis. La infección respiratoria viral tratada puede estar asociada con infección bacteriana secundaria, tal como otitis media, sinusitis, o neumonía.

En otra modalidad, el trastorno la condición que se va a tratar se selecciona a partir de otras enfermedades o condiciones, en particular enfermedades o condiciones que tengan un componente inflamatorio, por ejemplo enfermedades de los huesos y articulaciones, incluyendo artritis reumatoide, artritis psoriática, y otras enfermedades, tales como ateroesclerosis, esclerosis múltiple, y rechazo de aloinjerto agudo y crónico, por ejemplo en seguida de trasplante de corazón, riñon, hígado, pulmón, o médula ósea. En otra modalidad, el trastorno o la condición que se va a tratar es choque endotóxico, glomerulonefritis, isquemia cerebral y cardíaca, enfermedad de Alzheimer, fibrosis quística, infecciones virales y las exacerbaciones asociadas con las mismas, síndrome de inmunodeficiencia adquirida (SIDA), esclerosis múltiple (MS), gastritis asociada con Helicobacter pylori, y cánceres, en particular el crecimiento de cáncer de ovario. En otra modalidad, el trastorno o la condición que se va a tratar es la de los síntomas causados por infección viral en un ser humano, que sea causada por el rinovirus humano, otros enterovirus, coronavirus, virus de herpes, virus de influenza, virus de parainfluenza, virus sincicial, o un adenovirus. El tratamiento de acuerdo con la presente invención puede ser sintomático o profiláctico. La efectividad de un agente de la invención para inhibir las condiciones inflamatorias, por ejemplo en las enfermedades inflamatorias de las vías respiratorias, se puede demostrar en un modelo a n imal , por ejem plo en u n modelo de ratón , rata , o conejo, de condiciones inflamatorias de las vías respiratorias y otras condiciones inflam atorias , por ejem plo como son descritas por Wada y colaboradores , J. Exp. Med. ( 1 994) 1 80: 1 1 35-40; Sekido y colaboradores, Nature ( 1 993) 365:654-57; Modelska y colaboradores, Am. J. Respir. Crit. Care Med. ( 1 999) 160: 1450-56; y Laffon y colaboradores (1999) Am. J. Respir. Crit. Care Med. 160: 1443-49. En todavía otra modalidad , la invención proporciona un método para identificar una célula que tenga un receptor de hTSLP . Este método involucra poner en contacto la célula con cualquiera de los anticuerpos o fragmentos de anticuerpos anteriores, que tenga además una marca detectable. La marca es radioactiva , fluorescente, magnética , paramagnética, o quimiluminescente. El método puede involucrar además cualquiera de la formación de imágenes anterior, o la separación de la célula marcada. En otra modalidad , cualquiera de los anticuerpos o fragmentos de anticuerpos humanos o humanizados anteriores son sintéticos. En otra modalidad , la invención proporciona una composición farmacéutica y un agente terapéutico adicional. El agente terapéutico adicional se puede seleccionar a partir del grupo que consiste en sustancias de fármaco anti-inflamatorias, broncodilatadoras, anti-histamínicas, o anti-tusivas, en particular en el tratamiento de enfermedades inflamatorias u obstructivas de las vías respiratorias, tales como las mencionadas anteriormente en la presente, por ejemplo como potenciadores de la actividad terapéutica de estos fármacos, o como un medio para reducir la dosificación requerida o los efectos secundarios potenciales de estos fármacos. Un agente terapéutico de la invención se puede mezclar con la otra sustancia de fármaco en una composición farmacéutica fija, o se puede administrar por separado, antes, de una manera simultánea, o después de la otra sustancia de fármaco. De conformidad con lo anterior, la invención incluye una combinación de un agente de la invención como se describe anteriormente en la presente, con una sustancia de fármaco anti-inflamatoria, broncodilatadora, anti-histamínica, o anti-tusiva, estando el agente de la invención y la sustancia de fármaco en la misma o diferente composición farmacéutica. Los fármacos anti-inflamatorios adecuados incluyen esteroides, en particular glucocorticosteroides, tales como budesonida, dipropionato de beclametasona, propionato de fluticasona, ciclesonida, o furoato de mometasona, o los esteroides descritos en las Publicaciones Internacionales Números WO 02/88167, WO 02/12266, WO 02/100879, WO 02/00679 (en especial aquéllos de los Ejemplos 3, 11, 14, 17, 19, 26, 34, 37, 39, 51, 60, 67, 72, 73, 90, 99 y 101), WO 03/35668, WO 03/48181, WO 03/62259, WO 03/64445, WO 03/72592, WO 04/39827 y WO 04/66920; agonistas del receptor glucocorticoide no esteroidales, tales como los descritos en las Patentes Números DE 10261874, WO 00/00531, WO 02/10143, WO 03/82280, WO 03/82787, WO 03/86294, WO 03/104195, WO 03/101932, WO 04/05229, WO 04/18429, WO 04/19935, y WO 04/26248; antagonistas LTB4, tales como BUL 284, CP-195543, DPC11870, LTB4 etanolamida, LY 293111, LY 255283, CGS025019C, CP-195543, ONO-4057, SB 209247, SC-53228, y aquéllos descritos en la Patente de los Estados Unidos de Norteamérica Número US 5451700; antagonistas de LTD4, tales como incluyendo montelukast, pranlukast, zafirlukast, acolato, SR2640, Wy-48,252, ICI 198615, MK-571, LY-171883, Ro 24-5913 y L-648051; inhibidores de PDE4, tales como cilomilast (Ariflo® GlaxoSmithKIine), Roflumilast (Byk Guiden), V-11294A (Napp), BAY19-8004 (Bayer), SCH-351591 (Schering-Plough), Arofilina (Almirall Prodesfarma), PD189659/PD168787 (Parke-Davis), AWD-12-281 (Asta Medica), CDC-801 (Celgene), SelCID(TM) CC-10004 (Celgene), VM554/UM565 (Vernalis), T-440 (Tanabe), KW-4490 (Kyowa Hakko Kogyo), y los dados a conocer en las Publicaciones Internacionales Números WO 92/19594, WO 93/19749, WO 93/19750, WO 93/19751, WO 98/18796, WO 99/16766, WO 01/13953, WO 03/104204, WO 03/104205, WO 03/39544, WO 04/000814, WO 04/000839, WO 04/005258, WO 04/018450, WO 04/018451, WO 04/018457, WO 04/018465, WO 04/018431, WO 04018449, WO 04/018450, WO 04/018451, WO 04/018457, WO 04/018465, WO 04/019944, WO 04/019945, WO 04/045607, y WO 04/037805; agonistas A2A, tales como los descritos en las Patentes Números EP 1052264, EP 1241176, EP 409595A2, WO 94/17090, WO 96/02543, WO 96/02553, WO 98/28319, WO 99/24449, WO 99/24450, WO 99/24451, WO 99/38877, WO 99/41267, WO 99/67263, WO 99/67264, WO 99/67265, WO 99/67266, WO 00/23457, WO 00/77018, WO 00/78774, WO 01/23399, WO 01/27130, WO 01/27131, WO 01/60835, WO 01/94368, WO 02/00676, WO 02/22630, WO 02/96462, y WO 03/086408; y antagonistas A2B, tales como los descritos en la Publicación Internacional Número WO 02/42298. Los fármacos broncodilatadores adecuados incluyen a los agentes anticolinérgicos o antimuscarínicos, en particular bromuro de ipratropio, bromuro de oxitropio, sales de tiotropio, y CHF 4226 (Chiesi), y glicopirrolato, pero también los descritos en las Patentes Números EP 424021, US 3714357, US 5171744, WO 01/04118, WO 02/00652, WO 02/51841, WO 02/53564, WO 03/00840, WO 03/33495, WO 03/53966, WO 03/87094, WO 04/018422, y WO 04/05285; y agonistas del adrenoceptor beta-2, tales como albuterol (salbutamol), metaproterenol, terbutalina, salmeterol, fénoterol, procaterol, y en especial formoterol, carmoterol, y las sales farmacéuticamente aceptables de los mismos, y los compuestos (en forma libre o de sal o de solvato) de la Fórmula I de la Publicación Internacional Número WO 00/75114, cuyo documento se incorpora a la presente como referencia, de preferencia los compuestos de los ejemplos de la misma, en especial el compuesto de (5-[(R)-2-(5,6-dietil-indan-2-ilamino)-1-hidroxi-etil]-8-hidroxi-1 H-quinolin-2-ona) y las sales farmacéuticamente aceptables del mismo, así como los compuestos (en forma libre o de sal o de solvato) de la Fórmula I de la Publicación Internacional Número WO 04/16601, y también los compuestos de las Patentes Números EP 1440966, JP 05025045, WO 93/18007, WO 99/64035, US 2002/0055651, WO 01/42193, WO 01/83462, WO 02/66422, WO 02/70490, WO 02/76933, WO 03/24439, WO 03/42160, WO 03/42164, WO 03/72539, WO 03/91204, WO 03/99764, WO 04/16578, WO 04/22547, WO 04/32921, WO 04/33412, WO 04/37768, WO 04/37773, WO 04/37807, WO 04/39762, WO 04/39766, WO 04/45618, WO 04/46083, WO 04/80964, EP1460064, WO 04/087142, WO 04/089892, EP 01477167, US 2004/0242622, US 2004/0229904, WO 04/108675, WO 04/108676, WO 05/033121, WO 05/040103, y WO 05/044787. Los fármacos anti-inflamatorios y broncodilatadores dobles adecuados incluyen los antagonistas del adrenoceptor beta-2/antagonistas muscarínicos dobles, tales como los que se dan a conocer en las Patentes Números US 2004/0167167, WO 04/74246, y WO 04/74812. Las sustancias de fármaco anti-histamínicas adecuadas incluyen clorhidrato de cetirizina, acetaminofeno, fumarato de clemastina, prometazina, loratidina, desloratidina, difenhidramina, y clorhidrato de fexofenadina, activastina, astemizol, azelastina, ebastina, epinastina, mizolastina, y tefenadina, así como los que se dan a conocer en las Patentes Números JP 2004107299, WO 03/099807, y WO 04/026841. También se pueden utilizar combinaciones de los agentes terapéuticos de la invención y agentes anticolinérgicos o antimuscarínicos, esteroides, agonistas beta-2, inhibidores de PDE4, agonistas del receptor de dopamina, antagonistas de LTD4, o antagonistas de LTB4. Otras combinaciones útiles de los agentes de la invención con fármacos anti-inflamatorias son aquéllas con otros antagonistas de los receptores de quimiocina, por ejemplo CCR-1, CCR-3, CCR-4, CCR-5, CCR-6, CCR-7, CCR-8, CCR-9, y CCR-10, CXCR1, CXCR2, CXCR3, CXCR4, CXCR5, en particular los antagonistas de CCR-5, tales como los antagonistas Schering-Plough SC-351125, SCH-55700, y SCH-D, los antagonistas Takeda, tales como cloruro de N-[[4-[[[6,7-dihidro-2-(4-metil-fenil)-5H-benzo-ciclohepten-8-il]-carbonil]-amino]-fenil]-metil]-tetrahidro-N,N-dimetil-2H-piran-4-aminio (TAK-770), los antagonistas de CCR-5 descritos en la Patente de los Estados Unidos de Norteamérica Número US 6166037 (en particular en las reivindicaciones 18 y 19), y en las Publicaciones Internacionales Números WO 0066558 (en particular reivindicación 8), WO 0066559 (en particular reivindicación 9), WO 04/018425, y WO 04/026873. El agente terapéutico adicional también se puede seleccionar a partir del grupo que consiste en otras moléculas de enlace de citoquina, en particular anticuerpos de otras citoquinas, en particular una combinación con un anticuerpo anti-IL4, tal como se describe en la Publicación PCT/EP2005/00836, un anticuerpo anti-lgE, tal como Xolair®, un anticuerpo anti-IL31, un anticuerpo anti-IL31R, un anticuerpo anti-l L 13, tal como se describe en la Publicación Internacional Número WO05/007699, un anticuerpo anti-endoglina, un anticuerpo anti-IL1b, un anticuerpo anti-TSLP, u otro anticuerpo anti-hTSLPR. Los anticuerpos antagonistas anti-hTSLPR de la invención, se pueden emplear para tratar a un sujeto, tanto de una manera terapéutica como profiláctica. En las aplicaciones terapéuticas, se administra una composición que comprenda un anticuerpo antagonista anti-hTSLPR (por ejemplo, un anticuerpo anti-hTSLPR humanizado) a un sujeto ya afectado por una enfermedad alérgica causada por, o asociada con, la señalización de TSLP. La composición contiene al anticuerpo en una cantidad suficiente para curar, detener parcialmente, o hacer más lento detectablemente el progreso de la condición y sus complicaciones. En las aplicaciones profilácticas, se administran las composiciones que contengan a los anticuerpos monoclonales anti-hTSLPR a un paciente que no esté ya sufriendo de un trastorno inflamatorio alérgico. Más bien, se dirigen a un sujeto que esté en riesgo de, o que tenga una predisposición a, desarrollar un trastorno inflamatorio alérgico. Estas aplicaciones permiten al sujeto mejorar la resistencia del paciente, o retardar el progreso de un trastorno inflamatorio alérgico mediado por la señalización de TSLP. Vil. Composiciones Farmacéuticas La invención proporciona composiciones farmacéuticas que comprenden a los anticuerpos monoclonales anti-hTSLPR (intactos o fragmentos de enlace) formulados junto con un vehículo farmacéuticamente aceptable. Las composiciones pueden contener adicionalmente otros agentes terapéuticos que sean adecuados para tratar o prevenir un trastorno alérgico dado, por ejemplo los agentes anti-alérgicos conocidos mencionados anteriormente. Los vehículos farmacéuticos mejoran o estabilizan la composición, o facilitan la preparación de la composición. Los vehículos farmacéuticamente aceptables incluyen solventes, medios de dispersión, recubrimientos, agentes antibacterianos y antifúngicos, agentes isotónicos y retardantes de absorción, y similares, que sean fisiológicamente compatibles. Una composición farmacéutica de la presente invención se puede administrar mediante una variedad de métodos conocidos en este campo. La vía y el modo de administración varían dependiendo de los resultados deseados. Se prefiere que la administración sea intravenosa, intramuscular, intraperitoneal, o subcutánea, o que se administre proximal al sitio del objetivo. El vehículo farmacéuticamente aceptable debe ser adecuado para administración intravenosa, intramuscular, subcutánea, parenteral, espinal, o epidérmica (por ejemplo, mediante inyección o infusión). Dependiendo de la vía de administración, el compuesto activo, es decir, la molécula de anticuerpo biespecífica y multiespecífica, se puede recubrir en un material para proteger al compuesto de la acción de los ácidos y otras condiciones naturales que puedan inactivar al compuesto. La composición debe ser estéril y fluida. Se puede mantener la fluidez apropiada, por ejemplo, mediante la utilización de un recubrimiento, tal como lecitina, mediante el mantenimiento del tamaño de partículas requerido en el caso de la dispersión, y mediante el uso de tensoactivos. En muchos casos, es preferible incluir agentes isotónicos, por ejemplo azúcares, polialcoholes, tales cómo manitol y sorbitol, y cloruro de sodio en la composición. Se puede provocar la absorción de largo plazo de las composiciones inyectables mediante la inclusión en la composición de un agente que demore la absorción, por ejemplo, monoestearato de aluminio o gelatina. Las composiciones farmacéuticas de la invención se pueden preparar de acuerdo con los métodos bien conocidos y rutinariamente practicados en este campo. Ver, por ejemplo, Remington: The Science and Practice of Pharmacy, Mack Publishing Co., 20a Edición, 2000; y Sustained and Controlled Reléase Drug Delivery Systems, J. R. Robinson, editor, Marcel Dekker, Inc., Nueva York, 1978. Las composiciones farmacéuticas de preferencia se fabrican bajo condiciones GMP. Típicamente, se emplea una dosis terapéuticamente efectiva o una dosis eficaz del anticuerpo anti-hTSLPR en las composiciones farmacéuticas de la invención. Los anticuerpos anti-hTSLPR se formulan en formas de dosificación farmacéuticamente aceptables mediante métodos convencionales conocidos por los expertos en la materia. Los regímenes de dosificación se ajustan para proporcionar la respuesta óptima deseada (por ejemplo, una respuesta terapéutica). Por ejemplo, se puede administrar un solo bolo, se pueden administrar varias dosis divididas a través del tiempo, o la dosis se puede reducir o aumentar proporcionalmente, como sea indicado por las exigencias de la situación terapéutica. Es especialmente conveniente formular las composiciones parenterales en una forma de dosificación unitaria para mayor facilidad de administración y uniformidad de la dosificación. La forma de dosificación unitaria, como se utiliza en la presente, se refiere a unidades físicamente separadas adecuadas como dosificaciones unitarias para los sujetos que se vayan a tratar; cada unidad contiene una cantidad previamente determinada del compuesto activo, calculada para producir el efecto terapéutico deseado, en asociación con el vehículo farmacéutico requerido. Los niveles de dosificación reales de los ingredientes activos en las composiciones farmacéuticas de la presente invención se pueden variar para obtener una cantidad del ingrediente activo que sea efectiva para lograr la respuesta terapéutica deseada para un paciente, composición, y modo de administración particular, sin que sean tóxicos para el paciente. El nivel de dosificación seleccionado depende de una variedad de factores far acocinéticos, incluyendo la actividad de las composiciones particulares de la presente invención empleadas, o el éster, sal, o amida de las mismas, la vía de administración, el tiempo de administración, la velocidad de excreción del compuesto particular empleado, la duración del tratamiento, otros fármacos, compuestos, y/o materiales utilizados en combinación con las composiciones particulares empleadas, la edad, sexo, peso, condición, salud general, e historia médica previa del paciente que se esté tratando, y factores similares. Un médico o veterinario puede iniciar las dosis de los anticuerpos de la invención empleados en la composición farmacéutica en niveles más bajos que los requeridos para alcanzar el efecto terapéutico deseado, y puede aumentar gradualmente la dosificación hasta que se alcance el efecto deseado. En general, las dosis efectivas de las composiciones de la presente invención, para el tratamiento de un trastorno inflamatorio alérgico descrito en la presente, varían dependiendo de muchos factores diferentes, incluyendo el medio de administración, el sitio objetivo, el estado fisiológico del paciente, si el paciente es un ser humano o un animal, otros medicamentos administrados, y si el tratamiento es profiláctico o terapéutico. Las dosificaciones de tratamiento necesitan titularse para optimizar la seguridad y la eficacia. Para administrarse con un anticuerpo, la dosificación está en el intervalo de aproximadamente 0.0001 a 100 miligramos/kilogramo, y más usualmente de 0.01 a 5 miligramos/kilogramo del peso corporal del huésped. Por ejemplo, las dosificaciones pueden ser de 1 miligramo/kilogramo de peso corporal o de 10 miligramos/kilogramo de peso corporal, o pueden estar dentro del intervalo de 1 a 10 miligramos/kilogramo. Un régimen de tratamiento de ejemplo implica la administración una vez cada dos semanas, o una vez al mes, o una vez cada 3 a 6 meses. El anticuerpo normalmente se administra en múltiples ocasiones. Los intervalos entre las dosificaciones individuales pueden ser semanales, mensuales, o anuales. Los intervalos pueden ser también irregulares, como sea indicado por la medición de los niveles en sangre del anticuerpo anti-hTSLPR en el paciente. En algunos métodos, la dosificación se ajusta para alcanzar una concentración de anticuerpo en plasma de 1 a 1,000 microgramos/mililitro, y en algunos métodos, de 25 a 300 microgramos/mililitro. De una manera alternativa, se puede administrar un anticuerpo como una formulación de liberación sostenida, en cuyo caso, se requiere una administración menos frecuente. La dosificación y la frecuencia varían dependiendo de la vida media del anticuerpo en el paciente. En general, los anticuerpos humanizados muestran una vida media más larga que aquélla de los anticuerpos quiméricos y de los anticuerpos no humanos. La dosificación y la frecuencia de administración pueden variar dependiendo de si el tratamiento es profiláctico o terapéutico. En las aplicaciones profilácticas, se administra una dosificación relativamente baja a intervalos relativamente infrecuentes durante un período de tiempo largo. Algunos pacientes continúan recibiendo el tratamiento por el resto de sus vidas. En las aplicaciones terapéuticas, algunas veces se requiere una dosificación relativamente alta a intervalos relativamente cortos hasta que se reduzca o se termine el progreso de la enfermedad, y de preferencia hasta que el paciente muestre una disminución parcial o completa de los síntomas de la enfermedad. Posteriormente, se puede administrar al paciente un régimen profiláctico. EJEMPLOS Los siguientes Ejemplos se proporcionan para ilustrar adicionalmente la invención, pero no para limitar su alcance. Otras variantes de la invención serán fácilmente aparentes para un experto ordinario en la técnica , y están abarcadas por las reivindicaciones adjuntas . Ejemplo 1 . Desarrollo de un anticuerpo antagonista anti-hTSLPR de ratón Este ejemplo describe el desarrollo de un anticuerpo antagonista anti-hTSLPR de ratón . El ratón Bcl2 Wehi22 (#1 770) se inmunizó con la proteína de fusión de TSLPR humano (Metí - Lys 231 )/Fc de lgG 1 humana (Pro 100 - Lys 330) adquirida en R&D System (Minneapolis, M N) (Número de Catálogo 981 -TR , Lote N úmero EDY1 312A) . La inmunización se llevó a cabo en un total de 8 inyecciones d urante 1 8 d ías. Las células-B se aislaron de los nodos linfáticos periféricos, y se fusionaron con células de mieloma FO (ATCC , Manassas, VA). La producción de anticuerpo se rastreó mediante ELISA contra hTSLPR/proteína Fe. Se obtuvieron un total de 24 clones que producen anticuerpos que reconocen específicamente el hTSLPR. El enlace de los anticuerpos hTSLPR al TSLPR de superficie celular se analizó en un ensayo FACS (BD Biosciences, San José, CA) . Dicho de una manera breve, las células BaF3/hTSLPR/h l L7Ra se incubaron con sobrenadantes de cultivo de hibridoma, seguido por IgG anti-ratón conj ugada con FITC, y se analizaron en u na máquina FACS. Los resultados mostraron que 14 clones de hibridoma de 24 clones fueron capaces de enlazarse con el receptor de superficie celular. Entonces se empleó un ensayo de proliferación celular dependiente de hTSLP en células BaF3/hTSLPR/h l L7Ra, para rastrear los anticuerpos antagonistas de hTS LPR . Las célu las expresan tanto el TS LPR h uma no com o la I L7 Ra, y son capaces de responder al estímulo de la TSLP humana (Reche y colaboradores, J. Immunol. , 167: 336-43, 2001 ). El ensayo de proliferación celular se llevó a cabo esencialmente como se describe en Reche y colaboradores. Dicho de una manera breve, las células BaF3/hTSLPR/hlL7Ra se incubaron previamente con anticuerpos de los sobrenadantes cultivados durante 1 hora, y se indujeron con hTSLP, en las concentraciones ind icadas en la Fig ura 1 . La proliferación celular se midió utilizando Azul Alamar (TREK Diagnostic Systems, Cleveland, OH). Para cada clon progenitor, se utilizaron de 1 a 3 subclones en el ensayo. Los resultados, como se muestra en la Fig ura 1 , indican que los tres subclones del clon 1 D6 mostraron una fuerte actividad antagonista. Se purificó el anticuerpo monoclonal (mAb) a partir de uno de los subclones, 1 D6. C9 (Figura 2C) . Brevemente , el medio acondicionado sin suero del cultivo Miniperm (Vivascience, Carlsbad , CA) se trató con Cleanasite (LigoChem, Fairfield , NJ) . Luego se purificó el anticuerpo sobre resina de Proteína G (Amersham Biosciences, Piscataway, NJ). El anticuerpo purificado se probó en el ensayo de proliferación celular como se describe anteriormente. Las células BaF3/hTSLPR/h l L7Ra o las células BaF3/hTSLPR/hl L7Ra/Stat5-Luc, se trataron con diferentes concentraciones del anticuerpo durante 1 hora, antes de la adición de 1 nanogramo/mililitro de hTSLP. Los resultados indican q ue se inhibió la proliferación dependiente de TSLP tanto de las células Ba F3/hTS LP R/h l L7 Ra (Figura 3A) como de las células BaF3/hTSLPR/h l L7Ra/Stat5-Luc, (Figura 3B) mediante la adición del anticuerpo anti-hTSLPR de ratón de una manera dependiente de la dosis. En adición , también se empleó un ensayo de reportero de luciferasa para examinar el efecto del anticuerpo sobre las actividades de señalización mediada por TSLP. La TSLP induce la fosforilación de Stat3 y Statd en las células BaF3/hTSLPR/h l L7Ra (Reche y colaboradores, supra) . Este ensayo se diseñó para medir la expresión del gen reportero bajo el control de Stat5 en las células BaF3/hTSLPR/hl L7Ra/Stat5-Luc en respuesta a la señalización de TSLP. Dicho de u na manera breve, se generó la construcción del reportero Stat-Luc mediante la inserción de un sitio de enlace en consenso Stat en un vector reportero Luc básico pG L2 (Promega , Madison , Wl), que no contiene promotor ni potenciador. El sitio de enlace Stat insertado contiene 8 copias de un elemento de secuencia GATTTCCCCGAAATG (SEQ I D NO: 1 5) que aloja a la secuencia de enlace Stat nuclear de TTCCCGGAA (SEQ I D NO: 1 6) (Yan y colaboradores, Cell. 84:421 -30, 1996; y Saylors y colaboradores, Gene Ther. 6:944-6, 1 999) . Se introdujo la construcción del reportero Stat-Luc en las células BaF3/hTSLPR/h l L7Ra. Las células BaF3/hTSLPR/h l L7Ra/Stat5-Luc resultantes se trataron con diferentes concentraciones del anticuerpo de ratón durante 1 hora antes de la adición de 1 nanogramo/mililitro de hTSLP . La actividad de luciferasa se midió utilizando el Bright Glo (Promega, Madison, Wl). Los resultados obtenidos del ensayo se muestran en la Figura 3C. De una manera similar a los resultados del ensayo de proliferación celular, los datos del ensayo del reportero Stat5-Luc también demostraron la actividad antagonista dependiente de la dosis del anticuerpo anti-hTSLPR de ratón. Se clonaron las regiones variables de la cadena pesada (VH) y de la cadena ligera (VL) del anticuerpo monoclonal 1D6.C9, mediante reacción en cadena de la polimerasa con transcripción inversa. Las secuencias de los cebadores utilizados para la identificación de las regiones variables de las cadenas pesada y ligera son como sigue. Los cebadores para VH son: (1) VH9: GATGGCAGCWGCYCAAAG (SEQ ID NO:1); y (2) constante-H: GCGTCTAGAAYCTCCACACACA GGRRCCAGTGGATAGAC (SEQ ID NO:2). Los cebadores para VL son: (1) LCV3: GGGTCTAGACACCATGGAGWCACAKWCTCAGGTC TTTRTA (SEQ ID NO:3); y constante-L: GCGTCTAGAACTGGATGGT GGGAAGATGG (SEQ ID NO:4). En breve, se aisló el ARN total del clon 1D6.C9. La reacción en cadena de la polimerasa con transcripción inversa se llevó a cabo con los cebadores hacia adelante contra la secuencia de señal ya sea de la región variable de cadena pesada o ligera, y los cebadores en reversa contra la región de cadena pesada CH1 o la región constante kappa de cadena ligera. Los productos de la región en cadena de la polimerasa se clonaron en el vector pCR II ó pcDNA3.1/V5-His-TPOP-TA para la secuenciación. Entonces se determinaron las secuencias de polinucleótidos de las secuencias de región variable de cadena pesada y de cadena ligera de este clon de anticuerpo (Figura 4). Las secuencias de aminoácidos correspondientes de las regiones variables (SEQ ID NO:5 y SEQ ID NO:6) se muestran en la Figura 5. En la Figura 5 también se indican las regiones CDR y las regiones de estructura deducidas de acuerdo con el sistema de numeración de Kabat y colaboradores, supra. Ejemplo 2. Generación de anticuerpos anti-hTSLPA quiméricos Este ejemplo describe la generación y caracterización de los anticuerpos anti-hTSLPR quiméricos. Los anticuerpos quiméricos contienen las regiones variables del clon ID6.C9 del anticuerpo anti-hTSLPR de ratón anteriormente mencionado, y las regiones constantes de las inmunoglobulinas humanas. Con el fin de generar los anticuerpos quiméricos, se prepararon las regiones variables del anticuerpo de ratón contra el clon 1D6.C9 de TSLPR humano, empleando técnicas de reacción en cadena de la polimerasa y las secuencias cebadoras descritas en el Ejemplo 1, diseñadas para clonarse en vectores de cásete. Entonces se clonaron respectivamente los productos de la reacción en cadena de la polimerasa en los vectores de cásete que contenían las fusiones dentro del marco, con las secuencias líder de inmunoglobulina humana, los segmentos-J, y las señales de empalmador-donador, utilizando las secuencias mostradas en la Tabla 1. Entonces se transfirieron las secuencias a los vectores de expresión de mamífero que conten ían la región constante de inm unoglobulina h umana , por ejem plo los vectores S P2/0. Tabla 1 . Secuencias de cebadores para clonarse en los vectores de expresión kappa lgG1 La selección para los clones que expresan la cadena pesada se basó en la selección de neomicina, mientras que los clones q ue expresaban la cadena ligera se seleccionaron utilizando selección con dhfr. La amplificación genética se inició utilizando metotrexato . El cásete de la región variable para la cadena pesada se transfirió a los vectores de expresión de mamífero de lgG 1 e lgG4 humanas, respectivamente. En seguida de la subclonación , con el fin de producir los anticuerpos quiméricos lgG 1 , los plásmidos de ADN de la cadena pesada de IgG 1 quimérica y la cadena ligera kappa se co-electroporaron en células de mieloma SP2/0. De la misma manera, para producir los anticuerpos quiméricos lgG4, la cadena pesada de lgG4 quimérica y la cadena ligera kappa se co-electroporaron en células de mieloma SP2/0. Las células se seleccionaron con geneticina, y luego se cultivaron y se expandieron en un medio de cultivo que contenía geneticina y metotrexato. Las células se adaptaron en un medio sin suero para la purificación del anticuerpo. Se purificaron los anticuerpos IgG 1 e lgG4 quiméricos a partir de las células SP2/0 transfectadas (Figura 2a y Figura 2B). La actividad antagonista de los anticuerpos lgG1 e lgG4 quiméricos purificados se comparó con aquélla del anticuerpo de ratón en el ensayo de reportero Luc. Se utilizó un anticuerpo quimérico IgG 1 contra el receptor de muerte 5 8DR5) como un control negativo. Como se midió mediante la expresión del gen reportero en las células Ba/F3 que sobre-expresaban hTSLPR, hlL7Ra, y Stat5-Luc, los resultados indican que los anticuerpos anti-hTSLPR quiméricos exhibieron una actividad antagonista similar a aquélla del anticuerpo lgG1 de ratón (Figura 6). Ejemplo 3. El anticuerpo anti-hTSLPR inhibe la secreción de TARC mediada por TSLP Este ejemplo describe la inhibición de la sección TARC mediada por TSLP de monocitos humanos mediante los anticuerpos antagonistas anti-hTSLPR. Tanto los anticuerpos anti-hTSLPR de ratón como quiméricos mencionados anteriormente, se examinaron para determ i nar su efecto sobre la secreción med iada por TS LP de la quim iocina regu lada por la activación y el tim o atrayente de TH2 (TARC) por parte de los monocitos humanos. Con la excepción de la adición de los anticuerpos anti-hTSLPR, los ensayos de secreción de TARC se llevaron a cabo esencialmente como se describe en Soumelis y colaboradores, Nat. Immunol. 3:673-80, 2002. Los resultados se muestran en la Figura 7. Los dos paneles superiores de la figura muestran respectivamente la sección de TARC de los monocitos humanos, y las células dendríticas C D1 1 + estimuladas con TSLP. Los tres paneles inferiores muestran respectivamente el efecto de tres anticuerpos anti-hTSLPR diferentes sobre la sección de TARC mediada por TSLP de monocitos humanos. Como se demuestra en la figura, el anticuerpo anti-hTSLPR de ratón y los anticuerpos anti-hTSLPR quiméricos (ambos isotipos lgG 1 e lgG4) fueron todos capaces de inhibir la secreción de TARC de los monocitos humanos de una manera dependiente de la dosis. Esto validó adicionalmente la actividad antagonizante de los anticuerpos anti-hTSLPR sobre la señalización de TSLP. Se condujeron estudios de enlace para determinar las afinidades de enlace de los anticuerpos anti-hTSLPR, utilizando el análisis de resonancia de plasmón Biacore estándar para medir los índices "activado" (ka) y "desactivado" (kd). Estas mediciones conducen al cálculo de la constante de enlace (KD) para el anticuerpo. También se condujo un análisis adicional utilizando ForteBiop con el fin de examinar la cinética de enlace de la solución .

En adición, se utilizaron ensayos celulares para determinar la IC50 para el anticuerpo. Los resultados de estos estudios se resumen en la Tabla 3. Tabla 3. Datos de afinidad, actividad biológica, especificidad, y cino-reactividad para el anticuerpo objetivo Secuencias de Anticuerpos Secuencia de NV115-EB VH QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTTYGISWLRQAPGQGLEW MGWVNTNTGNPRYAQGFTGRFVFSLDTSVSTAYLQISSLKAEDTAVYY CAEGFITTVVGAAGRFVYWGQGTLVTVSS (SEQ ID NO:22) VK DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQDIHTRLAWYQQKPGQPPKLLIY WASTRASGVPDRFSGTGSGTDFTLTISSLQAEDVAVYYCQQYSTYPTF GQGTKLEIK (SEQ ID NO: 23) Secuencia de NVI15-3E VH QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTTYGISWLRQAPGQGLEW MGWVNTNTGNPRYAQGFTGRFVFSLDTSVSTAYLQISSLKAEDTAVYY CAREGFITTVVGAAGRFVYWGQGTLVTVSS (SEQ ID NO: 24) VK EIVMTQSPATLSLSPGERATLSCRASQSVSSSLAWYQQKPGQPPKLLI HWAVTRVSGVPDRFSGSGSGTDFTLTISSLQAEDVAVYYCQQYSTYPT FGQGTKLEIK (SEQ ID NO:25) Secuencia de NVI15-3E VH QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTTYGISWLRQAPGQGLEW MGWVNTNTGNPRYAQGFTGRFVFSLDTSVSTAYLQISSLKAEDTAVYY CAREGFITTVVGAAGRFVYWGQGTLVTVSS (SEQ ID NO: 26) VK DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQDIHTRLAWYQQKPGQPPKLLIY WASTRGSGVPDRFSGSGSGTDFTLTISSLRAEDVAVYYCQQYSTYPTF GQGTKLEIK (SEQ ID NO: 27). Aunque la invención anterior se ha descrito con algún detalle a manera de ilustración y ejemplo para propósitos de claridad de entendimiento, será fácilmente aparente para un experto ordinario en la materia, a la luz de las enseñanzas de esta invención, que se pueden hacer ciertos cambios y modificaciones a la misma sin apartarse del espíritu o alcance de las reivindicaciones adjuntas. Todas las publicaciones, bases de datos, secuencias Genbank, patentes, y solicitudes de patente citadas en esta memoria descriptiva, se incorporan a la presente como referencia como si cada una fuera específica e individualmente indicada como incorporada por referencia.

Claims (32)

1. REIVINDICACIONES 1. Un anticuerpo aislado, o una porción de enlace de antígeno del mismo, que comprende una secuencia de región variable de cadena pesada de la SEQ ID NO:5.
2. 2. Un anticuerpo aislado, o una porción de enlace de antígeno del mismo, que comprende una secuencia de región variable de cadena pesada de la SEQ ID NO:5, y una secuencia de región variable de cadena ligera de la SEQ ID NO:6.
3. 3. El anticuerpo de la reivindicación 2, el cual comprende una secuencia de la región determinante de complementariedad (CDR) de cadena pesada de TYGMS (SEQ ID NO:7), WINTYSGVPRYADDFKG (SEQ ID NO:8), ó EGFITTVVGAAGRFVY (SEQ ID NO:9); o una secuencia de la región determinante de complementariedad de cadena ligera de KASQDVGTAVA (SEQ ID NO:10), WASTRHT (SEQ ID NO:11), ó QQYSTYPT (SEQ ID NO:12).
4. 4. El anticuerpo de la reivindicación 2, el cual comprende las secuencias de CDR1, CDR2, y CDR3 de cadena pesada, TYGMS (SEQ ID NO:7), WINTYSGVPRYADDFKG (SEQ ID NO:8), y EGFITTVVGAAGRFVY (SEQ ID NO:9), respectivamente; y las secuencias de CDR1, CDR2, y CDR3 de cadena ligera, KASQDVGTAVA (SEQ ID NO:10), WASTRHT (SEQ ID NO:11), y QQYSTYPT (SEQ ID NO:12), respectivamente. 5. El anticuerpo de la reivindicación 2, el cual comprende una secuencia de aminoácidos de la región variable de cadena pesada que es cuando menos el 80 por ciento idéntica a la SEQ ID
5. NO:5, y una secuencia de aminoácidos de la región variable de cadena ligera que es cuando menos el 80 por ciento idéntica a la SEQ ID NO:6.
6. 6. El anticuerpo de la reivindicación 2, el cual es un anticuerpo de ratón.
7. 7. El anticuerpo de la reivindicación 2, el cual es un anticuerpo quimérico.
8. 8. El anticuerpo de la reivindicación 1, el cual comprende una región constante de cadena pesada humana, y una región constante de cadena ligera humana.
9. 9. El anticuerpo de la reivindicación 2, el cual es un anticuerpo humanizado.
10. 10. El anticuerpo de la reivindicación 2, el cual es un anticuerpo humano.
11. 11. El anticuerpo de la reivindicación 2, el cual es un anticuerpo de una sola cadena.
12. 12. El anticuerpo de la reivindicación 2, el cual es un fragmento Fab.
13. 13. El anticuerpo de la reivindicación 2, el cual es del isotipo lgG1 ó lgG4.
14. 14. Un polinucleótido aislado o recombinante que codifica un polipéptido que comprende la región variable de la cadena pesada, o la región variable de la cadena ligera, del anticuerpo de la reivindicación 2.
15. 15. El polinucleótido de la reivindicación 14, en donde el anticuerpo es un anticuerpo humano.
16. 16. El polinucleótido de la reivindicación 14, en donde el polinucleótido que codifica el anticuerpo comprende las secuencias de CDR1, CDR2, y CDR3 de cadena pesada, TYGMS (SEQ ID NO:7), WINTYSGVPRYADDFKG (SEQ ID NO:8), y EGFITTVVGAAGRFVY (SEQ ID NO:9), respectivamente; y las secuencias de CDR1, CDR2, y CDR3 de cadena ligera, KASQDVGTAVA (SEQ ID NO:10), WASTRHT (SEQ ID NO:11), y QQYSTYPT (SEQ ID NO:12), respectivamente.
17. 17. El polinucleótido de la reivindicación 14, en donde el anticuerpo comprende una secuencia de región variable de cadena pesada madura que es cuando menos el 80 por ciento idéntica a la región madura de la SEQ ID NO:5; y una secuencia de región variable de cadena ligera madura que es cuando menos el 80 por ciento idéntica a la región madura de la ScpQ ID NO:6.
18. 18. El polinucleótido de la reivindicación 14, en donde el anticuerpo comprende una secuencia de región variable de cadena pesada madura que es idéntica a la región madura de la SEQ ID NO:5, y una secuencia de región variable de cadena ligera madura que es idéntica a la región madura de la SEQ ID NO:6.
19. 19. El polinucleótido de la reivindicación 14, el cual es un ADN.
20. 20. Una célula huésped aislada, la cual comprende: (1) un segmento de ADN recombinante que codifica una cadena pesada del anticuerpo de la reivindicación 2, y (2) un segundo segmento de ADN recombinante que codifica una cadena ligera del anticuerpo; en donde los segmentos de ADN respectivamente se enlazan operativamente con primero y segundo promotores, y son capaces de expresarse en la célula huésped mencionada.
21. 21. La célula huésped de la reivindicación 20, en donde el anticuerpo monoclonal es un anticuerpo humano.
22. 22. La célula huésped de la reivindicación 20, en donde el anticuerpo monoclonal comprende las secuencias de CDR1, CDR2, y CDR3 de cadena pesada, TYGMS (SEQ ID NO:7), WINTYSGVPRYADDFKG (SEQ ID NO:8), y EGFITTVVGAAGRFVY (SEQ ID NO:9), respectivamente; y las secuencias de CDR1, CDR2, y CDR3 de cadena ligera, KASQDVGTAVA (SEQ ID NO:10), WASTRHT (SEQ ID NO:11), y QQYSTYPT (SEQ ID NO:12), respectivamente.
23. 23. La célula huésped de la reivindicación 20, en donde el anticuerpo comprende una secuencia de región variable de cadena pesada madura que es cuando menos el 80 por ciento idéntica a la región madura de la SEQ ID NO:5; y una secuencia de región variable de cadena ligera madura que es cuando menos el 80 por ciento idéntica a la región madura de la SEQ ID NO:6.
24. 24. La célula huésped de la reivindicación 20, en donde el anticuerpo monoclonal comprende una secuencia de región variable de cadena pesada madura que es idéntica a la región madura de la SEQ ID NO:5, y una secuencia de región variable de cadena ligera madura que es idéntica a la región madura de la SEQ ID NO:6.
25. 25. La célula huésped de la reivindicación 20, que es una línea celular de mamífero no humana.
26. 26. Un método para el tratamiento de un trastorno inflamatorio en un sujeto, comprendiendo el método administrar al sujeto una composición farmacéutica que comprende una cantidad efectiva de un anticuerpo de la reivindicación 2.
27. 27. El método de la reivindicación 26, en donde el anticuerpo es un anticuerpo humano.
28. 28. El método de la reivindicación 26, en donde el anticuerpo comprende las secuencias de CDR1, CDR2, y CDR3 de cadena pesada, TYGMS (SEQ ID NO:7), WINTYSGVPRYADDFKG (SEQ ID NO:8), y EGFITTVVGAAGRFVY (SEQ ID NO:9), respectivamente; y las secuencias de CDR1, CDR2, y CDR3 de cadena ligera, KASQDVGTAVA (SEQ ID NO:10), WASTRHT (SEQ ID NO:11), y QQYSTYPT (SEQ ID NO:12).
29. 29. El método de la reivindicación 26, en donde el anticuerpo comprende: (i) una secuencia de región variable de cadena pesada madura que es idéntica a la región madura de la SEQ ID NO:5, y (ii) una secuencia de región variable de cadena ligera madura que es idéntica a la región madura de la SEQ ID NO:6.
30. 30. El método de la reivindicación 26, en donde el sujeto es un ser humano.
31. 31. El método de la reivindicación 26, en donde el sujeto sufre de una enfermedad inflamatoria alérgica.
32. 32. El método de la reivindicación 31, en donde la enfermedad inflamatoria alérgica es dermatitis atópica, asma, o rinitis alérgica . RESUM EN En la presente invención se dan a conocer anticuerpos que reconocen y antagonizan específicamente al receptor de TSLP humano, y métodos para emplear estos anticuerpos con el fin de tratar o disminuir las enfermedades o los trastornos mediados por la señalización de TSLP . * * * * *