JP5173808B2 - 横向き移動でのイムノクロマトの手段による検体アッセイ - Google Patents
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Description
毛管作用手段、
一つの毛管作用手段の競合領域、第二の検体に特異的な結合試薬、これは固定化され、リガンドと複合化され、マークされる、
毛管作用手段の検出領域、固定化され、上述の複合体およびマークされたリガンドの両方に結合することができる捕獲試薬、後者は前記複合体が競合領域において毛管作用手段において循環することによって置換または複合体化されえる。
参照毛管作用方向2を決定する横向き移動が関与し、液体サンプル沈着領域3、および前記沈着領域の下流に配置される検体検出領域5を具備している、毛管作用手段1
視認可能な及び/又は測定可能なマーカーに結合し、湿った場合に、前述の毛管作用手段1において参照方向に沿う毛管作用の手段で、自由に移動する、第一の検体に特異的な結合試薬4、
検出領域5が第二の特異的な結合試薬6から特定の距離で固定化および配置された検体または検体のアナログを具備することを特徴とする、検出領域5に固定化された第二の検体に特異的な結合試薬6。
この装置は、毛管作用手段と独立して、サンプルを沈着領域に循環させるための、沈着領域と接触させることが可能な液体サンプル捕獲部を具備してもよい。
液体サンプルは、毛管作用手段の沈着領域に沈着する、
十分な時間によって、液体サンプルが検出領域5へと毛管作用で移動するための通過が認容される、
検出領域において、一方で検体と複合型の特異的な結合試薬4は第二の特異的な結合試薬6に付着し、第一のシグナルが得られ、他方で第一の非結合型の結合試薬は検体7または検体のアナログに付着し、第二のシグナルが得られることでその程度が観察され、
検体は、第一および第二のシグナルから判定される。
本発明は、液体サンプル中の検体を判定するための装置に関し、該装置は毛管作用の方向(2)に以下を含んでいる毛管作用手段(1)を具備する:
a) サンプルの沈着または受領領域(3);
b) 毛管作用手段(1)において湿った場合に、毛管作用で自由に移動する、視認可能な及び/又は測定可能なマーカーに結合させた検体に特異的な結合試薬;
c) 検体検出領域(5);
ここで、検体検出領域(5)は、連続的に、毛管作用の方向(2)に、一方に第二の固定化された検体特異的結合試薬(6)、他方に固定化された検体(7)または検体のアナログを;第一の検体に特異的な結合試薬(4)および第二の検体に特異的な結合試薬(6)が液体サンプル中の検体をサンドイッチ検査で判定できるよう、他方で第一の検体に特異的な結合試薬(4)および固定化された検体(7)または検体のアナログが競合検査を用いて液体サンプル中の検体を判定できるように具備する。
a) サンプルの沈着領域(3);
b) 沈着乾燥し、毛管作用手段(1)において湿った場合に、自由に移動する、視認可能な及び/又は測定可能なマーカーに結合させた第一の検体に特異的な結合試薬(4);
c) 検体検出領域(5);
ここで、検体検出領域(5)は、連続的に、毛管作用の方向(2)に、固定化された第二の検体に特異的な結合試薬(6)、固定化された検体(7)または検体のアナログを;第一の検体に特異的な結合試薬(4)および第二の検体に特異的な結合試薬(6)が、液体サンプル中の検体をサンドイッチ検査で判定できるよう、他方で固定化された第一の検体に特異的な結合試薬(4)および検体(7)または検体のアナログが競合検査を用いて液体サンプル中の検体を判定できるように具備する。
a) サンプルの沈着または受領領域(2);
b) 毛管作用手段(1)において湿った場合に、毛管作用で自由に移動する、視認可能な及び/又は測定可能なマーカーに結合させた第一の検体の特異的な抗体(4);
c) 検体検出領域(5);
装置において、検体検出領域(5)は、連続的に、毛管作用の方向(2)に、一方で固定化された第二の検体に特異的な抗体(6)、他方で固定化された検体(7)または検体のアナログを;一方で固定化された第一の検体に特異的な抗体(4)および他方で検体(7)または検体のアナログが競合検査で液体サンプル中の検体を判定可能である間に、第一の検体に特異的な抗体(4)および第二の検体に特異的な抗体(6)が液体サンプル中の検体をサンドイッチ検査で判定可能であるように具備する。
a) サンプルの沈着または受領領域(3);
b) 沈着乾燥し、毛管作用手段(1)において湿った場合に、毛管作用で自由に移動する、視認可能な及び/又は測定可能なマーカーに結合させた第一の検体特異的抗体(4);
c) 検体検出領域(5);
装置において、検体検出領域(5)は、連続的に、毛管作用の方向(2)に、一方で固定化された第二の検体特異的抗体(6)、他方で固定化された検体(7)または検体のアナログを;一方で固定化された第一の検体に特異的な抗体(4)および他方で検体(7)または検体のアナログが競合検査で液体サンプル中の検体を判定可能である間に、第一の検体に特異的な抗体(4)および第二の検体に特異的な抗体(6)が液体サンプル中の検体をサンドイッチ検査で判定可能であるように具備する。
a) 少なくとも一つの沈着または受領領域, および検出領域を提供された少なくとも一つの毛管作用手段、前記検出領域に固定化された少なくとも一つの捕獲試薬を有させる工程、
b) 液体サンプルを少なくとも一回、毛管作用手段の沈着領域に別々に沈着させる工程、
c) 視認可能な及び/又は測定可能なマーカーに結合させた第一の特異的な結合試薬を含んでいる領域への液体サンプルの毛管作用での移動のために十分な時間を待つ工程、
d) 視認可能な及び/又は測定可能なマーカーに結合させた第一の特異的な結合試薬の及び前記検出領域への液体サンプルの毛管作用での移動のために十分な時間を待つ工程、
e) 視認可能な及び/又は測定可能なマーカーに結合させた特異的な結合試薬が検出領域に固定される程度を観察し、検体をサンドイッチ検査および競合検査で同時に判定する工程。
a) 以前に記載した装置を提供する工程;
b) 工程(a)からの装置の毛管作用手段(1)の沈着または受領領域(3)に液体サンプルを沈着させる工程;
c) 沈着または受領領域(3)から検出領域(5)への液体サンプルの毛管作用による移動のために十分な時間を待機し、視認可能な及び/又は測定可能なマーカーに結合させた第一の検体に特異的な抗体(4)を駆動する工程;
d) 視認可能な及び/又は測定可能なマーカーに結合させた第一の検体に特異的な抗体(4)が検出領域(5)に固定される程度を観察し、検体をサンドイッチ検査および競合検査で同時に判定する工程。一つの効果的な態様において、工程(b)で、工程(a)の装置の毛管作用手段(1)の沈着または受領領域(3)に液体サンプルおよび希釈剤を沈着させる工程を備える。
図1は、サンドイッチ検査での免疫学的なアッセイに関して得られたシグナル/濃度曲線を示す。得られた曲線は、ガウス曲線型であり、検体の二つの可能な濃度(C1およびC2)と対応して与えられたシグナル(S)を示している〔規定時間での結果を読む間に一つの低い(C1)および他の高い(C2)濃度〕。
a) 第一の毛細管材料20におけるサンプルの沈着または受領領域(3);
b) 毛管作用手段(1)において湿った場合に、毛管作用で自由に移動する、視認可能な及び/又は測定可能なマーカーに結合させた第一の検体特異的抗体(4); この第一のマークされた抗体は沈着乾燥し、第一の毛細管材料20での頻繁な毛細管循環において第二の毛細管材料21上で遊離する;
c) 検体検出領域(5)は、連続的に、毛管作用の方向(2)に、一方に第二の固定化された検体に特異的な抗体(6)、他方に固定化された検体(7)または検体のアナログを具備しており;第二の抗体および検体(または検体のアナログ)は、第二の毛細管材料21での頻繁な毛細管循環において第三の毛細管材料上で配置される又は沈着される;
B)で握り保持部(8)に統合された毛管作用手段(1)が示され、ここには検出領域(5)を観察できる少なくとも一つの観察窓(9)、および液体サンプルが沈着される又は受け取られる採取のための開口部23を備えている。
妊娠検査(尿の絨毛性ゴナドトロピンホルモン、またはhCGの検出)
図4は、本発明のクロマトグラフィー検査ストリップが挿入されたケース型の迅速検査の外観を示す。
Claims (8)
- 液体サンプル中の測定対象物を測定するための装置であって、
− 液体サンプルを沈着するための沈着領域と、前記沈着領域の下流に配置された測定対象物を検出するための検出領域と、少なくとも前記沈着領域に配置された希釈剤とを具備する、参照毛管作用方向を決定する横向き移動による毛管拡散のための毛管拡散手段、
− 当該サンプルを沈着するための前記沈着領域と連結され、または前記沈着領域の下流に配置され、且つ当該検出領域の上流に配置された、湿った状態において毛管拡散により前記毛管拡散手段内を参照毛管作用方向に沿って自由に移動する、測定可能なマーカーに結合された、当該測定対象物の特異的な結合のための第一の試薬、
− 前記検出領域に固定化された、当該測定対象物に特異的に結合する第二の試薬、
ここで、当該検出領域は、当該測定対象物または当該測定対象物のアナログを構成要素とする第三の試薬を含み、第三の試薬は、前記第二の試薬に特異的に結合するために当該第二の試薬から特定の距離をあけてその下流に配置されて固定化されていることを特徴とする、および
− 前記検出領域の下流に配置された測定対象から独立した対照領域、
を含む装置。 - 請求項1に記載の装置であって、毛管拡散手段と独立して、前記液体サンプルを前記沈着領域に流入するための、前記沈着領域と接触させることが可能な液体サンプル捕獲部を具備することを特徴とする装置。
- 請求項1に記載の装置であって、毛管拡散手段が、前記毛管拡散手段の中または上に、乾燥された遊離可能な第一の試薬を沈着させるための第一の試薬沈着領域を具備することを特徴とする装置。
- 請求項1に記載の装置であって、第二の試薬および/または第三の試薬は、参照方向に直交するラインに沿って毛管拡散手段に配置されることを特徴とする装置。
- 請求項1〜4の何れか1項に記載の装置を用いて、測定対象物を測定する方法であって:
− 液体サンプルを、前記毛管拡散手段の前記沈着領域に添加することと、
− 前記液体サンプルの当該検出領域までの毛管作用による移動に十分な時間だけ当該装置を放置することと、
− 前記検出領域において、測定機器により(1)前記測定対象物と複合した前記第一の試薬が第二の試薬に対して結合している程度を観察し、その観察結果を第一のシグナルとして得ること、(2)前記測定対象物と複合していない第一の試薬が第三の試薬に結合している程度を観察し、その検出結果を第二のシグナルとして得ることと、
−前記第一のシグナルと当該第二のシグナルのそれぞれの存在または不在に基づいて当該測定対象物が存在するのか、不在であるのかを、判定すること。 - 請求項5に記載の方法であって、第一の試薬の量は、前記液体サンプルに存在する測定対象物の量または前記液体サンプルに存在する測定対象物における第一の試薬と特異的に結合する部位の数よりも多いことを特徴とする方法。
- 請求項5に記載の方法であって、前記第一のシグナルが非存在であり、および前記第二のシグナルが存在することにより、当該測定対象物濃度が低いと判定されることを特徴とする方法。
- 請求項5に記載の方法であって、前記第一のシグナルおよび前記第二のシグナルが共に非存在である場合に、測定対象物濃度が高いと判定されることを特徴とする方法。
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