JP5166116B2 - 育毛剤 - Google Patents
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Description
具体的には、本発明の目的は、フコイダンの育毛効果が増強されており、より安全性の高い育毛剤を提供することにある。また、本発明の目的は、当該育毛剤を含有する製剤を提供することにある。
(1) 以下の成分:
(A)フコイダン、及び
(B)ダイズタンパク質のサーモリシン分解物又はダイズタンパク質のサーモリシン様プロテアーゼ分解物であって、サーモリシン分解物と同等の育毛活性を有する産物
を含有する育毛剤。
(2) 成分(B)が、ダイズタンパク質のサーモリシン分解物である(1)記載の育毛剤。
(3) 成分(A)の配合量が0.001〜99重量%であり、成分(B)の配合量が0.0001〜99重量%である、(1)又は(2)に記載の育毛剤。
(4) 成分(B)の平均分子量が300〜10000である、(1)〜(3)のいずれかに記載の育毛剤。
(5) さらに、成分(C)として細胞賦活剤、血行促進剤、抗男性ホルモン剤、皮脂分泌抑制剤、免疫抑制剤、抗ヒスタミン剤、殺菌消毒剤、局所刺激剤、角質軟化剤、消炎剤、及び抗アポトーシス剤からなる群より選択される1種又は2種以上をも含有する、(1)〜(4)のいずれかに記載の育毛剤。
(6) (1)〜(5)のいずれか1つに記載の育毛剤を含有する、製剤。
(7) 医薬品、医薬部外品、化粧品、食品である、(6)記載の製剤。
(8) シャンプー、ヘアコンディショナー、頭皮用ローション、頭皮用クリーム、ヘアトニック、全身クリーム、全身ローション、顔用クリーム、顔用ローション、アイライナー、アイブローである、(6)または(7)のいずれかに記載の製剤。
フコイダンは、動物、植物、真菌、単細胞生物、原生生物及び原核生物からなる群より選択される一種又は二種以上より抽出されたものや、合成によって得られるものであってもよい。
前記フコイダンとしては、例えば、ガゴメコンブ、マコンブ、トロロコンブ、ヒバマタ、モズク、オキナワモズク、ワカメ、ワカメ メカブ、クロメ、アラメ、カジメ、ジャイアントケルプ、レッソニア ニグレセンス、アスコフィラム ノドッサム等の昆布目、ながまつも目、ひばまた目等の海藻から抽出されたものが好ましい。
選択したサーモリシン様プロテアーゼを、該酵素に適した反応条件下でダイズタンパク質に適用し、得られたダイズタンパク質分解物の育毛促進活性を後述の実施例に記載の方法で試験することにより、育毛促進活性を有するサーモリシン様プロテアーゼのダイズタンパク質分解物を得ることができる。
サーモリシン分解物は、適切な反応条件下、常法に従ってダイズタンパク質をサーモリシンで処理することによって製造することができる。例えば、市販のサーモリシンの場合には、使用説明書に従って反応を行う。具体的な例として、水などの溶媒に、ダイズタンパク質濃度が、一般的には0.1〜30%(w/v)、好ましくは1〜10%(w/v)程度となるようにダイズタンパク質又はダイズタンパク質を含む原料を懸濁し、この懸濁液に、一般的には0.001〜3%(w/v)、好ましくは0.01〜0.125%(w/v)程度となるようにサーモリシンを加え、分解反応を行う。通常、30〜80℃、好ましくは40〜70℃、より好ましくは50〜60℃の反応温度で、2〜30時間、好ましくは3〜24時間、より好ましくは10〜20時間、さらに好ましくは12〜18時間反応させると、適当に断片化されたダイズタンパク分解物が得られる。反応液のpHとしては、サーモリシンの至適pH付近であることが好ましく、例えば7.0〜8.5付近であることが好ましい。
本願育毛剤中におけるダイズタンパク質のサーモリシン分解物の含有量は、例えば、0.0001〜99重量%、より好ましくは0.001〜80重量%、さらに好ましくは0.01〜50重量%、特に好ましくは0.1〜30重量%である。
粉末状分離ダイズタンパク質(製品名「PR-800」、不二製油株式会社製)50gを2Lの蒸留水に分散し、0.1N NaOHでpH8.0に調整した。500mgのサーモリシン(EC3.4.24..27、Bacillus thermoproteolyticus由来、製品名「サモアーゼPC10F」、大和化成株式会社製、100 units/mg)を添加して、60℃で15時間での分解を行なった。反応後、100℃で10分間煮沸してサーモリシンを失活させた。放冷後、25gのろ過助剤(ラジオライト500、昭和化学工業株式会社)を添加し、撹拌した後、ろ過を行なった。得られたろ液を500mlまで減圧濃縮し、その後凍結乾燥をして、最終的に約26gのダイズタンパク質サーモリシン分解物を得た。
分子量既知のペプチド標品として、Cytochrome C(シグマ社製、分子量12327)、Aprotinin(シグマ社製、分子量6518)、Hexaglycine(シグマ社製、分子量360)、Triglycine(シグマ社製、分子量189)、及びGlycine(シグマ社製、分子量75)を用いた。溶出時間から分子量分布及びピーク平均分子量を推定した。
その結果、コラプラスNのピーク平均分子量は711、分子量分布は100〜30000であることが推定された。
ここで、「ピーク平均分子量」とは、クロマトグラムのピークトップ(最も強い強度のピーク)の溶出時間に対応する分子量を意味する。
粉末状分離ダイズタンパク質(製品名「PR-800」、不二製油株式会社製)50gを2Lの蒸留水に分散し、0.1N NaOHでpH8.0に調整した。500mgのサーモリシン(EC3.4.24.27、Bacillus thermoproteolyticus由来、製品名「サモアーゼPC10F」、大和化成株式会社製、100 units/mg)を添加して、60℃で15時間での分解を行なった。反応後、100℃で10分間煮沸してサーモリシンを失活させた。放冷後、8.0Lのエタノールを添加し混合した(エタノールの終濃度:80%)。25gのろ過助剤(ラジオライト500、昭和化学工業株式会社)を添加し、撹拌した後、ろ過を行なった。得られたろ液を500mLまで減圧濃縮し、その後凍結乾燥をして、最終的に約20.2gのダイズタンパク質サーモリシン分解物(エタノール抽出物)を得た。
文献(特許文献1)既知の方法で、ガゴメ昆布由来のフコイダン抽出物を得た。すなわち、ガゴメコンブ500gを細断し、10リットルの80%エタノールで洗浄後、50リットルの1mM塩化カリウムを含有する10%エタノール中にて内径40cmの容器で25℃で2日間、1分間当り120回転の速度で攪拌し、フコイダンを抽出し、抽出物を網目32μmのステンレス金網でろ過し、フコイダン溶液を調製した。これを凍結乾燥し、フコイダン粉末を得た。
本発明のサーモリシン分解物の育毛効果を、毛包の器官培養系としてラットの髭器官培養毛を用いて確認した。
Wistar系新生ラットの髭毛包器官を外科的に摘出した。ステンレスグリッドを入れた器官培養シャーレ(Falcon 3037)に表1に記載の濃度に調整した被験薬を含有する培地(RPMI 1640)(0.4mL)を添加し、その上に摘出した髭毛包器官を10器官ずつ並べた。無菌条件下、5%CO2、90%O2の気相下にて、31℃で培養した。5日後、毛幹の長さを測定し、試験開始前の測定値との差から、毛幹の伸長量を計算した。対照群として、被験薬を含有しない培地を用いて同様に実験した。結果を表1及び図1に示す。なお、図1において、Controlは対照、Fcoはフコイダンを意味する。
製剤実施例1(外用育毛剤)
下記の各成分を秤量し、精製水にて100mLに調製した。
フコイダン 0.5 g
ダイズタンパク質のサーモリシン分解物(ピーク平均分子量約1500) 1.0 g
レゾルシン 1.0 g
パントテニルエチルエーテル 0.1 g
プロピレングリコール 10.0 g
95%エタノール 60.0 g
精製水にて全量 100mL
下記の各成分を秤量し、95%エタノールにて100mLに調製した。
フコイダン 1.0 g
ダイズタンパク質のサーモリシン分解物(ピーク平均分子量約1000) 0.5 g
ヒノキチオール 0.05 g
酢酸トコフェロール 0.5 g
プロピレングリコール 10.0 g
95%エタノールにて全量 100mL
下記の各成分を秤量し、精製水にて100mLに調製した。
フコイダン 1.0 g
ダイズタンパク質のサーモリシン分解物(ピーク平均分子量約1200) 0.5 g
ヒノキチオール 0.05 g
プロピレングリコール 10.0 g
95%エタノール 50.0 g
精製水にて全量 100mL
下記の各成分を秤量し、精製水にて100mLに調製した。
フコイダン 1.0 g
ダイズタンパク質のサーモリシン分解物(ピーク平均分子量約1800) 1.0 g
グリチルリチン酸ジカリウム 0.05 g
セファランチン 0.05 g
プロピレングリコール 10.0 g
95%エタノール 50.0 g
精製水にて全量 100mL
下記の各成分を秤量し、精製水にて100mLに調製した。
フコイダン 1.0 g
ダイズタンパク質のサーモリシン分解物(ピーク平均分子量約1500) 0.5 g
L−メントール 0.01 g
プロピレングリコール 10.0 g
95%エタノール 60.0 g
精製水にて全量 100mL
下記の各成分を秤量し、精製水にて100mLに調製した。
フコイダン 2.0 g
ダイズタンパク質のサーモリシン分解物(ピーク平均分子量約2000) 2.0 g
塩酸ピリドキシン 5.0 mg
パントテニルエチルエーテル 0.1 g
プロピレングリコール 10.0 g
95%エタノール 60.0 g
精製水にて全量 100mL
下記の各成分を秤量し、精製水にて100mLに調製した。
フコイダン 1.0 g
ダイズタンパク質のサーモリシン分解物(エタノール抽出物) 1.0 g
ニンジン抽出物 0.1 g
ヒノキチオール 0.05 g
グリチルリチン酸ジカリウム 0.05 g
L−メントール 0.01 g
プロピレングリコール 10.0 g
95%エタノール 60.0 g
精製水にて全量 100mL
下記の各成分を秤量し、常法に従って調製した。
フコイダン 5.0 g
ダイズタンパク質のサーモリシン分解物(ピーク平均分子量約1800) 1.0 g
カルボキシビニルポリマー 0.1 g
グリチルリチン酸ジカリウム 0.1 g
エデト酸ナトリウム水和物 0.05 g
ポリビニルアルコール 1.0 g
トリエタノールアミン 0.5 g
精製水 49.75 g
(以上、水相成分)
l−メントール 1.0 g
酢酸トコフェロール 0.1 g
エタノール 40.0 g
ポリソルベート80 0.6 g
プロピレングリコール 0.2 g
エトキシジグリコール 0.5 g
リン脂質 0.1 g
(以上、油相成分)
全量 100 g
下記の各成分を秤量し、常法に従って調製した。
フコイダン 2.0 g
ダイズタンパク質のサーモリシン分解物(ピーク平均分子量約1500) 0.1 g
カルボキシビニルポリマー 0.4 g
グリチルリチン酸ジカリウム 0.1 g
エデト酸ナトリウム水和物 0.05 g
ポリビニルアルコール 0.3 g
トリエタノールアミン 1.0 g
精製水 52.55 g
(以上、水相成分)
l−メントール 2.0 g
酢酸トコフェロール 0.1 g
エタノール 40.0 g
ポリソルベート80 0.6 g
プロピレングリコール 0.2 g
エトキシジグリコール 0.5 g
リン脂質 0.1 g
(以上、油相成分)
全量 100 g
下記の各成分を秤量し、常法に従って調製した。
フコイダン 2.0 g
ダイズタンパク質のサーモリシン分解物(ピーク平均分子量約1800) 2.0 g
N−ココイルメチルタウリンナトリウム(30%水溶液) 10.0 g
POE(2)ラウリルエーテル硫酸ナトリウム(27%水溶液) 20.0 g
ラウリルジメチルアミノ硫酸ベタイン(35%水溶液) 10.0 g
ヤシ油脂肪酸ジエタノールアミド 4.0 g
ジプロピレングリコール 2.0 g
クエン酸 0.1 g
メチルパラベン 0.2 g
精製水にて全量 100mL
下記の各成分を秤量し、常法に従って調製した。
フコイダン 1.0 g
ダイズタンパク質のサーモリシン分解物(ピーク平均分子量約2000) 1.0 g
テトラデセンスルホン酸ナトリウム 10.0 g
N−アシル−L−グルタミン酸トリエタノールアミン(30%水溶液) 5.0 g
N−アシル−メチルアラニンナトリウム(30%水溶液) 5.0 g
ヤシ油脂肪酸ジエタノールアミド 1.0 g
トリメチルグリシン 1.0 g
ジステアリン酸PEG−190 0.5 g
メチルパラベン 0.2 g
精製水にて全量 100mL
下記の各成分を秤量し、常法に従って調製した。
フコイダン 1.0 g
ダイズタンパク質のサーモリシン分解物(ピーク平均分子量約1500) 1.0 g
POE(2)ラウリルエーテル硫酸ナトリウム(27%水溶液) 10.0 g
ラウリン酸アミドプロピルベタイン(30%水溶液) 15.0 g
N−アシル−L−グルタミン酸トリエタノールアミン(30%水溶液) 5.0 g
1,3−ブチレングリコール 3.0 g
ジステアリン酸グリコール 2.0 g
ポリクオタニウム−10 0.2 g
水添レシチン 0.2 g
メチルパラベン 0.2 g
精製水にて全量 100mL
下記の各成分を秤量し、常法に従って調製した。
フコイダン 2.0 g
ダイズタンパク質のサーモリシン分解物(ピーク平均分子量約1800) 2.0 g
ジンクピリチオン 0.01 g
メチルフェニルポリシロキサン 1.0 g
ジメチルポリシロキサン 3.0 g
硬化ナタネ油アルコール 2.0 g
ミリスチン酸イソプロピル 2.0 g
プロピレングリコール 3.0 g
(アジピン酸・2エチルヘキサン酸・ステアリン酸)グリセリル 2.0 g
塩化ジステアリルジメチルアンモニウム 0.5 g
セタノール 1.0 g
メチルパラベン 0.2 g
精製水にて全量 100mL
下記の各成分を秤量し、常法に従って調製した。
フコイダン 2.0 g
ダイズタンパク質のサーモリシン分解物(ピーク平均分子量約1500) 2.0 g
グリチルリチン酸ジカリウム 0.1 g
シクロペンタシロキサン 3.0 g
ステアリルアルコール 2.0 g
パルミチン酸エチルヘキシル 2.0 g
ジプロピレングリコール 3.0 g
トリエチルヘキサン酸グリセリル 2.5 g
セタノール 1.0 g
メチルパラベン 0.2 g
精製水にて全量 100mL
下記の各成分を秤量し、常法に従って調製した。
フコイダン 1.0 g
ダイズタンパク質のサーモリシン分解物(ピーク平均分子量約2000) 1.0 g
ジメチルポリシロキサン 3.0 g
セチルアルコール 1.5 g
ステアリルアルコール 1.0 g
グリセリン 3.0 g
流動パラフィン 1.0 g
塩化ステアリルトリメチルアンモニウム 0.7 g
メチルパラベン 0.2 g
精製水にて全量 100mL
下記の各成分を秤量し、常法に従って調製した。
フコイダン 1.0 g
ダイズタンパク質のサーモリシン分解物(ピーク平均分子量約1200) 1.0 g
ジメチルポリシロキサン 2.0 g
ステアリルアルコール 1.5 g
ベヘニルアルコール 0.5 g
プロピレングリコール 3.0 g
塩化ベヘニルトリメチルアンモニウム 2.0 g
塩化ジステアリルジメチルアンモニウム 1.0 g
ヒドロキシエチルセルロース 0.3 g
セタノール 2.0 g
メチルパラベン 0.2 g
精製水にて全量 100mL
下記の各成分を秤量し、常法に従って調製した。
フコイダン 1.0 g
ダイズタンパク質のサーモリシン分解物(ピーク平均分子量約2000) 1.0 g
ステアリン酸グリセリル 1.0 g
ステアリン酸PEG−5グリセリル 1.0 g
ポリエーテル変性シリコーン 0.4 g
ステアリン酸K 0.4 g
べへニルアルコール 0.4 g
スクワラン 2.0 g
エチルヘキサン酸セチル 2.0 g
1,3−ブチレングリコール 10.0 g
グリセリン 5.0 g
カルボマー(カーボポールETD2050) 0.1 g
ポリビニルアルコール 0.3 g
メチルパラベン 0.2 g
精製水にて全量 100 g
下記の各成分を秤量し、常法に従って調製した。
フコイダン 1.0 g
ダイズタンパク質のサーモリシン分解物(ピーク平均分子量約1500) 1.0 g
ステアリン酸PEG−40 2.0 g
モノステアリン酸グリセリル(自己乳化型) 5.0 g
MCステアリン酸 5.0 g
ベヘニルアルコール 0.5 g
スクワラン 15.0 g
イソオクタン酸セチル 5.0 g
メチルパラベン 0.1 g
ブチルパラベン 0.1 g
1,3−ブチレングリコール 5.0 g
精製水にて全量 100 g
Claims (8)
- 以下の成分:
(A)フコイダン、及び
(B)ダイズタンパク質のサーモリシン分解物又はダイズタンパク質のサーモリシン様プロテアーゼ分解物(ここで、該サーモリシン様プロテアーゼとは、イソロイシン、ロイシン、バリン、フェニルアラニン、メチオニン及びアラニンからなる群より選択される少なくとも一種の大きな側鎖をもった疎水性アミノ酸残基のアミノ基側のペプチド結合を切断するプロテアーゼである)であって、平均分子量が300〜10000である分解物
を含有する育毛剤。 - 成分(B)が、ダイズタンパク質のサーモリシン分解物である請求項1記載の育毛剤。
- 成分(A)の配合量が0.001〜99重量%であり、成分(B)の配合量が0.0001〜99重量%である、請求項1又は2に記載の育毛剤。
- 成分(B)の平均分子量が400〜5000である、請求項1〜3のいずれかに記載の育毛剤。
- さらに、成分(C)として細胞賦活剤、血行促進剤、抗男性ホルモン剤、皮脂分泌抑制剤、免疫抑制剤、抗ヒスタミン剤、殺菌消毒剤、局所刺激剤、角質軟化剤、消炎剤、及び抗アポトーシス剤からなる群より選択される1種又は2種以上をも含有する、請求項1〜4のいずれかに記載の育毛剤。
- 請求項1〜5のいずれか1つに記載の育毛剤を含有する、製剤。
- 医薬品、医薬部外品、又は化粧品である、請求項6記載の製剤。
- シャンプー、ヘアコンディショナー、頭皮用ローション、頭皮用クリーム、ヘアトニック、全身クリーム、全身ローション、顔用クリーム、顔用ローション、アイライナー、アイブローである、請求項6または7のいずれかに記載の製剤。
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