JP5097738B2 - タンパク質精製法 - Google Patents
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Description
〔発明の分野〕
この発明は一般的なタンパク質の精製に関する。特に、当発明は、抗体や免疫付着因子のようなCH2/CH3領域を含むタンパク質の、プロテインA・アフィニティー・クロマトグラフィー法による精製方法に関する。
大規模に、経済的にタンパク質を精製することは、バイオテクロノジー産業にとってますます重要な問題となっている。一般的に、興味あるタンパク質を産生するために、そのタンパク質の遺伝子を含む組換え型プラスミドの挿入により遺伝子工学的に作られた哺乳類又はバクテリアいずれかの細胞株を用いて、タンパク質は細胞培養によって産生される。使用される細胞株は生きた組織であるので、糖質、アミノ酸及び通常は動物の血清の調合液から供給される増殖因子を含む複合増殖培地で養わなければならない。細胞に与えた組成物の混合物からのタンパク質と、細胞自身の副生成物からのタンパク質とを、ヒトの治療用として使うために差し支えない純度で分離することは、侮りがたい挑戦である。
本発明は、プロテインAクロマトグラフィーに用いる、TMAC又はTEAC以外の、多様な中間洗浄バッファーを提供する。
第一の実施形態では、本発明は、CH2/CH3領域を含むタンパク質を、その汚染液からプロテインAクロマトグラフィーによって精製する方法において:
(a)固相上に固定化されたプロテインAへタンパク質を吸着させ;
(b)洗浄剤と塩とを含む組成物で固相を洗浄することにより、汚染物質を除去し;
(c)固相からタンパク質を回収する、
ことを含んでなる方法を提供する。
(a)固相上に固定化されたプロテインAへタンパク質を吸着させ;
(b)約0.8Mより大きい濃度のバッファーを含む組成物で固相を洗浄することにより、汚染物質を除去し;
(c)固相からタンパク質を回収する、
ことを含んでなる方法を提供する。
(a)固相上に固定化されたプロテインAへタンパク質を吸着させ;
(b)塩と溶媒とを含む組成物で固相を洗浄することにより、汚染物質を除去し;
(c)固相からタンパク質を回収する、
ことを含んでなる方法にも関する。
(a)固相上に固定化されたプロテインAへタンパク質を吸着させ;
(b)塩とポリマーとを含む組成物で固相を洗浄することにより、汚染物質を除去し;
(c)固相からタンパク質を回収する、
ことを含んでなる方法を提供する。
〔定義〕
ここで用いられるとき、用語「プロテインA」は、その天然源から回収されたプロテインA、合成的に(例えば、ペプチド合成あるいは再組換え技術により)産生されたプロテインA、及びCH2/CH3領域を持つタンパク質と結合する能力を持つそれらの変異体とを包含している。プロテインAはRepligen, Pharmacia and Fermatech社から商業的に購入することができる。
ここでの「平衡バッファー」は、興味あるタンパク質をローディングするための(固定化プロテインAを伴う)固相を準備するために用いられる。平衡バッファーは好ましくはイオン性で、通常pHは6〜8の範囲である。平衡バッファーの実施例は、トリス25mM、塩化ナトリウム25mM、EDTA5mM、pH7.1であった。
ここで用いられる、「溶媒」とは、一つ又はそれ以上の物質を溶解又は分散することができる、溶液を準備するための液体物質を示す。好ましい溶媒は、有機物、非極性溶媒、例えばエタノール、メタノール、イソプロパノール、アセトニトリル、へキシレングリコール、プロピレングリコール、及び2,2−チオジグリコールである。
ここでの「ポリマー」とは二つ又はそれ以上のモノマーの共有結合によって形成された分子であり、そのモノマーはアミノ酸残基ではない。ポリマーの実施例は、ポリエチルグリコール、ポリプロピルグリコール、及び、エチレングリコール及びプロピレングリコールのコーポリマー類(例えば、プルロニクス(Pluronics)、PF68等)。好ましいポリマーはポリエチレングリコール(PEG)であり、例えば、PEG400及びPEG8000である。
「抗体断片」は、完全長抗体の一部分、一般的に抗原結合あるいはそれの可変領域を含む。抗体断片の実施例は、Fab、Fab’、F(ab’)2、又はFv断片類;単一の鎖の抗体分子類;ダイアボディ類(diabodies);線形の抗体;また、抗体断片から生じた多重特異抗体などを含む。
「トラスツズマブ (Trastuzumab)」あるいは「ハーセプチン(HERCEPTIN)(登録商標)」は、配列番号:1の軽鎖アミノ酸配列、及び配列番号:2の重鎖アミノ酸配列、あるいはHER2に結合するための能力を保持し、HER2(米国特許5,677,171参照;明確に参照文献よりここに合わせた)を過剰発現して癌細胞成長を阻害するアミノ酸配列変異体、を含むヒト化抗HER2抗体である。
ここでのプロセスはプロテインAクロマトグラフィーによって汚染物質からCH2/CH3領域を含むタンパク質を精製することを含む。好ましい実施形態では、プロテインAクロマトグラフィーを使用して精製されるタンパク質は、抗体、イムノアドヘシンあるいはCH2/CH3領域に融合、又は結合したタンパク質である。前記分子を生み出すための技術について、以下に論ずる。
本発明によって精製される好ましいタンパク質は抗体である。本発明の範囲内の抗体は、トラスツズマブ(ハーセプチン(登録商標))( Carter らProc. Natl. Acad. Sci. USA, 89:4285-4289 (1992), 米国特許5,725,856)を含む抗HER2抗体;例えば、米国特許5,736,137 (RITUXAN(登録商標))にあるようなキメラ抗CD20「C2B8」、米国特許5,721,108,B1にあるような2H7抗体のキメラ又はヒト化変異体、あるいはTositumomab(BEXXAR(登録商標))である抗CD20抗体;抗-IL-8(St John ら Chest, 103:932 (1993),及び国際公開WO 95/23865);、例えばヒト化抗VEGF抗体huA4.6.1 AVASTIN(登録商標)(Kim ら Growth Factors, 7:53-64 (1992), 国際公表 WO 96/30046, 及びWO 98/45331,1998年10月15日公開)のようなヒト化及び/又はアフィニティー成熟させた抗VEGF抗体を含む抗VEGF抗体;抗PSCA抗体(WO01/40309); S2C6及びそれのヒト化変異体(W00/75348)を含む抗CD40抗体;抗CD11a (米国特許 5,622,700,WO 98/23761,Steppe ら Transplant Intl. 4:3-7 (1991), 及び Hourmant ら Transplantation 58:377-380 (1994));抗IgE(Prestaら J. Immunol. 151:2623-2632 (1993),及び 国際公開 WO 95/19181);抗CD18(米国特許 5,622,700, 1997年4月22日発行,又は WO 97/26912,1997年7月31日公開);抗IgE(E25,E26 と E27を含む; 米国特許 5,714,338,1998年2月3日発行,あるいは米国特許5,091,313,1992年2月25日発行,WO 93/04173 1993年3月4日,又は国際出願PCT/US98/13410 1998年6月30日出願,米国特許 5,714,338);抗-Apo-2レセプター抗体(WO 98/51793 1998年11月19日公開);cA2(REMICADE(登録商標))、CDP571及びMAK-195(米国特許 5,672,347 1997年9月30日発行,Lorenzら J. Immunol. 156(4):1646-1653 (1996),及び Dhainautら Crit. Care Med. 23(9):1461-1469 (1995))を含む、抗TNF-a抗体;抗組織因子(TF)(欧州特許 0 420 937 B1,1994年11月9日取得);抗ヒトのα4β7インテグリン(WO 98/06248,1998年2月19日公開);抗EGFR(1996年12月19日に公表されたWO 96/40210でのようなキメラ化あるいはヒト化された225抗体);OKT3(米国特許4,515,893,1985年5月7日発行)のような抗CD3抗体;CHI-621(SIMULECT(登録商標)) 及び(ZENAPAX(登録商標))(米国特許5,693,762,1997年12月2日発行参照)のような、抗CD25抗体あるいは抗tac(anti-tac)抗体;cM-7412抗体(Choyら,Arthritis Rheum 39(1):52-56 (1996))のような抗CD4抗体;CAMPATH-1H(Riechmannら,Nature 332:323-337 (1988))のような抗CD52抗体;GrazianoらのJ. Immunol. 155(10):4996-5002 (1995)によるようなFcγRIに対して方向性をもったM22抗体のような抗Fcレセプター抗体;hMN-14(Sharkeyら、Cancer Res. 55(23Suppl): 5935s-5945s (1995))のような抗癌胎児性抗原(anti-carcinoembryonic antigen:CEA)抗体;huBrE-3、hu-Mc 3及びCHL6(Ceriani ら,Cancer Res. 55(23): 5852s-5856s (1995);及び Richman ら, Cancer Res. 55(23 Supp): 5916s-5920s (1995));C242(Litton ら, Eur J. Immunol. 26(1):1-9 (1996))のような結腸癌細胞に結合する抗体;抗CD38抗体、例えばAT 13/5(Ellis ら,J. Immunol. 155(2):925-937 (1995)); Hu M195(Jurcic ら, Cancer Res 55(23 Suppl):5908s-5910s (1995))、 及びCMA-676、又はCDP771のような抗CD33抗体;LL2あるいはLymphoCide(Juweidら、Cancer Res 55(23 Suppl):5899s-5907s (1995))のような抗CD22抗体;1/-1A(PANOREX(登録商標))のような抗EpCAM抗体;abciximabあるいはc7E3 Fab(REOPRO(登録商標))のような抗GpIIb/IIIa抗体;MEDI-493(SYNAGIS(登録商標))ような抗RSV抗体;PROTOVIR(登録商標)のような抗CMV抗体;PRO542のような抗HIV抗体;抗Hep B抗体OSTAVIR(登録商標)のような抗肝炎抗体;抗CA 125抗体OvaRex;抗イディオタイプ(anti-idiotypic)GD3エピトープ抗体BEC2;抗αvβ3抗体VITAXIN(登録商標);ch-G250のような抗ヒト腎臓細胞癌抗体;ING-1;抗ヒト17-1A抗体(3622W94);抗ヒト結腸直腸腫瘍抗体(A33);GD3ガングリオシドに対して方向性をもった抗ヒト黒色腫抗体R24;抗ヒトの扁平上皮細胞癌(SF-25);また、Smart ID10及び抗HLA DR抗体Oncolym(Lym-1)のような抗ヒト白血球抗原(HLA)抗体、などを含んでいるが、しかしそれらに制限されていない。ここでの抗体用の好ましいターゲット抗原はHER2受容体、VEGF、IgE、CD20、CD11a及びCD40である。
特に上に識別された抗体に加えて、熟練した実施者は、例えば、下記の技術の使用により、興味ある抗原に対して方向性をもった抗体を生成することができた。
ここでの抗体は、興味ある抗原に対して指図される。好ましくは、抗原は、生物学上重要なポリペプチドであり、哺乳動物の治療の利益に帰着することができる疾病や疾患に苦しむ哺乳動物の抗体の管理者である。しかしながら、非ポリペプチド抗原(腫瘍関連糖脂質抗原のような; 米国特許5,091,178参照)に対して方向性をもった抗体も熟考される。抗原がポリペプチドである場合、それは成長因子のような膜貫通型分子(例えば受容体)、あるいは配位子かもしれない。典型的な抗原は、下のセクション(iii)に記述されたタンパク質を含んでいる。本発明によって包含された抗体への典型的な分子ターゲットは、CD3、CD4、CD8、CD19、CD20、CD22及びCD34のようなCDタンパク質;EGF、HER2、HER3あるいはHER4受容体のようなErbB受容体ファミリーのメンバー;LFA-1のような細胞付着分子、Mac1、p150、95、VLA-4、ICAM-1、VCAM及びそこにαかβいずれかのサブユニット(例えば抗CD11 a、抗CD18あるいは抗CD11b抗体)を含むαv/β3インテグリン;VEGFのような成長因子;IgE;血液型抗原;flk2/flt3受容体;肥満(OB)受容体;mpl受容体;CTLA-4;プロテインC,あるいはここに言及された以外の抗原のいずれか、を含む。
抗体を準備するのに役立つ他の抗原及びその形式は、技術的に明らかであろう。
ポリクローナル抗体は、好ましくは、適切な抗原及びアジュバントの、多重皮下注射(sc)又は腹腔内投与(ip)によって、動物の中で育成される。例えば、キーホール・リンペット・ヘモシニアン(keyhole limpet hemocyanin)、血清アルブミン、牛サイログロブリン(bovine thyroglobulin)、二官能性又は被覆剤を使用する大豆トリプシン抑制剤(例えば、マレイミドベンゾイル硫化コハク酸イミドエステル(maleimidobenzoyl sulfosuccinimide ester)(システイン残基を経由して結合)、N−ヒドロキシコハク酸イミド(N-hydroxysuccinimide)(リジン残基経由)、グルタルアルデヒド、無水コハク酸、SOCl2、又はRとR1が異なるアルキル基である場合のR1=C=NRのように、免疫になる種において免疫原のタンパク質へ抗原を結合させることは有用かもしれない。動物は、抗原、免疫原性結合、連結による誘導体(例えば、タンパク質100μgないし5μg、あるいは完全フロインドアジュバント(Freund's complete adjuvant)の3体積量でその溶液を複数部位から皮内投与注射されるコンジュゲート(それぞれ、ウサギ又はマウスへ))に対して免疫を与えられる。1か月後に、動物は、複数部位からの皮下注射によって、完全フロインドアジュバント中の抗原又はコンジュゲートの初期量の1/5から1/10の量でブーストされる。7-14日後に、動物から採血し、血清の抗体力価を分析する。動物の抗体力価が一定になるまでブーストされる。好ましくは、動物は同じ抗原の結合したもので増加されるが、異なるタンパク質に、及び/又は異なる架橋試薬によっても結合する。結合を、タンパク質融合として組換え細胞培養の中で作ることができる。さらに、ミョウバンのような凝集剤は免疫反応を増強するために適宜用いられる。
モノクローナル抗体はKohlerらNature, 256:495 (1975)によって最初に記載されたハイブリドーマ法を使用して作られるか、あるいは組換えDNA法(米国特許4,816,567)によって作られるであろう。
このように 準備されたハイブリドーマ・セルは、融合されていない親骨髄腫細胞の成長又は生存を抑制する1つ以上の物質を好ましくは含んでいる適切な培養培地の中で植えられ育てられる。例えば、親骨髄腫細胞に、酵素ヒポキサンチン・グアニン・ホスホリボシル転移酵素(HGPR 1あるいはHPR 1 )が欠けるとき、ハイブリドーマ用の培養培地は典型的にはヒポキサンチン、アミノプテリン及びチミジン(HAT培地)( HGPRT−不完全細胞の成長を阻害する物質)を含む。
ヒト化抗体は、1つ以上のアミノ酸残基を非ヒトである出所からその中に導入します。これらの非ヒトアミノ酸残基は「インポート」残基(それらは典型的には「インポート」可変領域から取られる)としばしば呼ばれます。
様々な技術は抗体断片の産生のために開発されている。従来は、これらの断片は完全な抗体(Morimotoら,Journal of Biochemical and Biophysical Methods 24:107-117 (1992) 及び Brennanら,Science, 229:81 (1985))のタンパク質分解を生ずる消化によって引き出された。しかしながら、これらの断片を、現在は組換え宿主細胞によって直接産生することが可能である。例えば、抗体断片は上に議論された抗体ファージ・ライブラリから分離することができる。その代わりに、Fab'-SH断片は大腸菌(E. coli)から直接回収され、F(ab')2断片(Carterら,Bio/Technology 10:163-167 (1992))を形成するために化学的に連結される。別のアプローチによれば、F(ab')2断片は組換え宿主細胞培養から直接分離することができる。抗体断片の産生するための他の技術は熟練した実施者には明らかである。他の実施形態では、選択した抗体が単一鎖Fv断片(scFv)である。WO 93/16185を参照のこと。
多重特異抗体は、少なくとも二つの異なる抗原用の結合特異性を持っている。そのような分子は通常二つの抗原を単に結合するだけだが(つまり二重特異性抗体、BsAbs)、ここに使用されるときには、三重特異性抗体のような追加の特異性を備えた抗体は、この表現によって包含される。二重特異性抗体を作る方法は、技術的に知られている。完全長二重特異性抗体の従来の産生は、二つの免疫グロブリン重鎖−軽鎖ペアの同時発現に基づき、その二つの鎖は異なる特異性(Millsteinら, Nature, 305:537-539 (1983))を持つ。免疫グロブリン重鎖及び軽鎖の任意の類別のために、これらのハイブリドーマ(クアドローマ:quadromas)は、10の異なる抗体分子(1つだけがそれに的確な二重特異性構造を持っている)の潜在的な混合物を産生する。アフィニティー・クロマトグラフィー・ステップによって通常行われる正確な分子の精製はやや厄介であり、産生収量は低い。同様の処理はWO 93/08829、及びTrauneckerら,EMBO J.,10:3655-3659(1991)に開示されている。
二つ以上の原子価を備えた抗体が意図されている。例えば、三重特異的な抗体は準備される。Tuttら,J.Immunol., 147:60(1991)。
最も単純で最も簡単であるイムノアドヘシン設計では、免疫グロブリン重鎖のヒンジ領域とFc領域を持つ付着因子(例えば、受容体の細胞外ドメイン(ECD))の結合ドメインを組み合わせる。通常、本発明の免疫付着因子を準備する時、付着因子の結合ドメインをコードする核酸は、免疫グロブリン定数ドメイン配列のN-末端をコードする核酸にC-末端的に融合されるであろう。しかしながら、さらにN-末端融合は可能である。
(a) ACL - ACL;
(b) ACH - (ACH, ACL - ACH, ACL - VHCH, 又はVLCL - ACH);
(c) ACL - ACH - (ACL - ACH, ACL - VHCH, VLCL - ACH, 又はVLCL - VHCH)
(d) ACL - VHCH - (ACH, 又はACL - VHCH, 又はVLCL - ACH);
(e) VLCL - ACH - (ACL - VHCH, 又は VLCL - ACH); そして
(f) (A-Y)n - (VLCL-VHCH)2,
そこで各Aは同一か異なる付着因子アミノ酸配列を表わす;
VLは免疫グロブリン軽鎖変数ドメインであり;
VHは免疫グロブリン重鎖変数ドメインであり;
CLは免疫グロブリン軽鎖定数ドメインであり;
CHは免疫グロブリン重鎖定数ドメインであり;
nは1を越える整数であり;
Yは、共有結合の架橋剤の残基と定める。
手短に述べると、先の構造は重要な特徴のみを単に示す。すなわち、それらは連結する(J)あるいは免疫グロブリンの他のドメインを示さず、また、ジスルフィド結合も示さない。しかしながら、そのようなドメインが結合活性を必要とする場合、それらは、それらが免疫グロブリン分子の中で占める、通常の位置の中に存在するように構築されるものとする。
他の実施形態では、精製されるタンパク質は、CH2/CH3領域へ融合されるか、接合されるものである。そのような融合タンパク質は、タンパク質の血清半減期を増加させるかつ/又はプロテインAクロマトグラフィーによってタンパク質の精製を促進するために産生される。
ここに記載された方法を用いて精製されるタンパク質は、一般的に組換え技術を使用して産生される。組換えタンパク質を産生する方法は、例えば、米国特許5,534,615及び4,816,567、特にここの引用文献を併せて、記載されている。好ましい実施形態では、興味あるタンパク質がCHO細胞(参照、例えばWO 94/11026)の中で産生される。ここに記載されたプロセスを使用して精製することができるタンパク質の例は、上に記した。
抗HER2抗体トラスツズマブ(図1A-B;ハーセプチン(登録商標))、抗IgE抗体(E26;米国特許5,994,511,Lowmanら)及びヒト化抗CD11a抗体(XANELIM(登録商標); 米国特許6,037,454)は、チャイニーズ・ハムスター卵巣(CHO)細胞の中で遺伝子組換え的に産生され、汚染成分のCHOタンパク質(CHOP)を除去するための最初のクロマトグラフィーのステップとして、プロテインAクロマトグラフィーによって精製された。しかしながら、CHOPは、ProSepA(このステップで使用された樹脂)に非特異的に結合しやすい。ProSep Aはグリセロールでコートされた空孔制御ガラス上に固定化された抗体結合プロテインAを有する。グリセロール・コートは非特異性の結合を低減するが、ある種のCHOPはまだ樹脂のガラスバックボーンに付着してしまう。プロテインAオペレーションの溶出過程中に、どの非特異的に付着したCHOPも、製品プールの純度を危険にさらしながら、抗体と同時に溶出する。溶出過程の前にこのCHOPを除去するために、米国特許6,127,526及び6,333,398(Blank, G.)は、CHOPを除去するためにテトラメチルアンモニウム塩化物(TMAC)を用いて、中間洗浄ステップを例証している。TMACは非特異的付着CHOPを除去するには有効だが、取り扱い、分配することは困難であり、有毒あり、有害廃棄物として高価な処分を必要とし、高濃度及び低pHのものは腐食性である。以下の研究は、TMACの欠点無しに、中間洗浄ステップで代替洗浄組成物を用いることができることを示す。他のバッファー(平衡、ロード、溶出及び再生バッファー)は、米国特許6,127,526及び6,333,398中の例と同様であった。
CHOP除去に対する中間洗浄バッファーの (a)塩の種類及び濃度、(b)ポリソルベート濃度、及び(c) pH、の影響が評価された。抗体は、抗IgE抗体E26、及び抗HER2抗体トラスツズマブであった。
CHOPに対するpHの影響も評価され、その実験の結果は図9に示される。より低いpHでは、溶出されたタンパク質中のより少ないCHOP汚染に帰着した。好ましいpHは約5である。
CHOP除去、収量など(SDS-PAGE、HPLC-IEC、サイズ排除クロマトグラフィー(SEC)及びプロテインA浸出) での下流の実行は、E26とトラスツズマブのために決定された。下流の精製ステップは陽イオン交換クロマトグラフィー(SP-Sepharose)及び陰イオン交換クロマトグラフィー(Q-Sepharose)であった。
この実験の目的は中間洗浄バッファー中のポリソルベート20が樹脂の寿命に影響するかどうか決定することであった。バッファー(平衡状態、ポリソルベート20、中間洗浄、溶出及び再生)は、400サイクル以上の間、6.84mlのカラム(0.66cm×20cm)上で再利用された。HER2ブレークスルー・カーブは、樹脂の結合キャパシティー(容量)を決定するために、毎50サイクルごとに実行される。結合キャパシティーを最大にするための現在の仕様は、樹脂の1リットル当たり20グラムの抗体である。サイクル数増加による結合キャパシティーの低下は、ポリソルベート20が樹脂寿命を低下させていることを示すであろう。しかし、この実験では、ポリソルベート20が樹脂寿命を低下させないことを実証した。実際の再使用は140サイクルで終了し、収量の変化は見られない。
Claims (17)
- IgG免疫グロブリンのCH2/CH3領域を含むタンパク質を、その汚染液からプロテインAクロマトグラフィーによって精製する方法において:
(a)固相上に固定化されたプロテインAへタンパク質を吸着させ;
(b)(i)0.8M以上の濃度のトリス酢酸塩バッファー、(ii)塩及び溶媒、あるいは、(iii)塩及びポリマー、を含むpH4から8の組成物で固相を洗浄することにより、汚染物質を除去し;
(c)固相からタンパク質を回収する、
ことを含んでなり、
該塩は、0.2Mから0.6Mの酢酸塩又はクエン酸塩であり、
該溶媒は、エタノール、メタノール、イソプロパノール、アセトニトリル、へキシレングリコール、又はプロピレングリコールであり、
該ポリマーは、ポリエチレングリコール、ポリプロピルグリコール、又はエチレングリコール及びプロピレングリコールのコポリマー類である、方法。 - 工程(b)が、0.8M以上の濃度のトリス酢酸塩バッファーを含むpH4から8の組成物で固相を洗浄することを含む、請求項1の方法。
- トリス酢酸塩バッファーの濃度が0.8Mから1.5Mである、請求項2の方法。
- 工程(b)が、該塩及び溶媒を含むpH4から8の組成物で固相を洗浄することを含む、請求項1の方法。
- 溶媒がへキシレングリコールである、請求項4の方法。
- 工程(b)が、該塩及びポリマーを含むpH4から8の組成物で固相を洗浄することを含む、請求項1の方法。
- ポリマーがポリエチレングリコールである、請求項6の方法。
- 組成物がpH 4.5からpH5.5である、請求項4ないし7の何れか一項の方法。
- 固相がシリカ、ガラス、アガロース、又はポリスチレンを含んでなる、請求項1の方法。
- 固相がシリカ又はガラスを含んでなる、請求項9の方法。
- タンパク質が抗体あるいは免疫付着因子である、請求項1ないし10の何れか一項の方法。
- タンパク質が抗体である、請求項11の方法。
- 抗体が、HER2、血管内皮細胞増殖因子(VEGF)、IgE、CD20、CD40、CD11a、組織因子(TF)、前立腺幹細胞抗原(PSCA)、インターロイキン−8 (IL−8)、上皮細胞増殖因子受容体(EGFR)、HER3、HER4、α4β7あるいはα5β3から成る群から選択される抗原に結合する、請求項12の方法。
- 抗体が抗HER2抗体である、請求項13の方法。
- 抗体が抗IgE抗体である、請求項13の方法。
- 抗体が抗CD20抗体である、請求項13の方法。
- 抗体が抗VEGF抗体である、請求項13の方法。
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US8911964B2 (en) | 2006-09-13 | 2014-12-16 | Abbvie Inc. | Fed-batch method of making human anti-TNF-alpha antibody |
US8853371B2 (en) * | 2006-10-19 | 2014-10-07 | Janssen Biotech, Inc. | Process for preparing unaggregated antibody Fc domains |
JP5732196B2 (ja) * | 2006-11-01 | 2015-06-10 | バイオジェン アイデック エムエー インコーポレイティドBiogen Idec Inc. | 低pHおよび二価カチオンを用いる生物高分子を単離する方法 |
US7691980B2 (en) * | 2007-01-09 | 2010-04-06 | Bio-Rad Laboratories, Inc. | Enhanced capacity and purification of antibodies by mixed mode chromatography in the presence of aqueous-soluble nonionic organic polymers |
DE102007001370A1 (de) | 2007-01-09 | 2008-07-10 | Curevac Gmbh | RNA-kodierte Antikörper |
US7999085B2 (en) * | 2007-01-09 | 2011-08-16 | Bio-Rad Laboratories, Inc. | Enhanced capacity and purification of protein by mixed mode chromatography in the presence of aqueous-soluble nonionic organic polymers |
KR101431856B1 (ko) * | 2007-01-22 | 2014-08-27 | 제넨테크, 인크. | 항체의 고분자전해질 침전 및 정제 |
WO2008090217A1 (en) * | 2007-01-26 | 2008-07-31 | Merck Serono S.A. | Purification of fc-tact fusion proteins using the oilbody technology |
WO2009032949A2 (en) | 2007-09-04 | 2009-03-12 | The Regents Of The University Of California | High affinity anti-prostate stem cell antigen (psca) antibodies for cancer targeting and detection |
WO2009046294A2 (en) * | 2007-10-03 | 2009-04-09 | Cornell University | Treatment of proliferative disorders using antibodies to psma |
AU2009241589B2 (en) * | 2008-04-29 | 2013-10-10 | Abbvie Inc. | Dual variable domain immunoglobulins and uses thereof |
EP3002299A1 (en) | 2008-06-03 | 2016-04-06 | AbbVie Inc. | Dual variable domain immunoglobulins and uses thereof |
MX2010013236A (es) | 2008-06-03 | 2011-02-24 | Abbott Lab | Inmunoglobulinas de dominio variable doble y usos de las mismas. |
MX2010014574A (es) | 2008-07-08 | 2011-04-27 | Abbott Lab | Inmunoglobulinas de dominio variable dual para prostaglandina e2 y usos de las mismas. |
US20100069616A1 (en) * | 2008-08-06 | 2010-03-18 | The Regents Of The University Of California | Engineered antibody-nanoparticle conjugates |
RU2520838C2 (ru) | 2008-10-20 | 2014-06-27 | Эббви Инк | Выделение и очистка антител с использованием аффинной хроматографии на основе белка а |
CN104974251A (zh) | 2008-10-20 | 2015-10-14 | Abbvie公司 | 在抗体纯化过程中的病毒灭活 |
KR101093717B1 (ko) * | 2008-11-26 | 2011-12-19 | 한국생명공학연구원 | Vegf―특이적인 인간항체 |
CA2752510C (en) * | 2009-02-17 | 2024-01-23 | Neil Bander | Methods and kits for diagnosis of cancer and prediction of therapeutic value |
PE20121530A1 (es) * | 2009-09-01 | 2012-12-22 | Abbvie Inc | Inmunoglobulinas con dominio variable dual |
WO2011038894A1 (en) * | 2009-10-01 | 2011-04-07 | F. Hoffmann-La Roche Ag | Protein a chromatography |
LT2483305T (lt) | 2009-10-01 | 2016-11-25 | F.Hoffmann-La Roche Ag | Daugiakopis galutinis imunoglobulino filtravimas |
US8716450B2 (en) | 2009-10-15 | 2014-05-06 | Abbvie Inc. | Dual variable domain immunoglobulins and uses thereof |
UY32979A (es) | 2009-10-28 | 2011-02-28 | Abbott Lab | Inmunoglobulinas con dominio variable dual y usos de las mismas |
CA3040276A1 (en) | 2009-12-02 | 2011-06-09 | Imaginab, Inc. | J591 minibodies and cys-diabodies for targeting human prostate specific membrane antigen (psma) and methods for their use |
US8937159B2 (en) | 2009-12-16 | 2015-01-20 | Abbvie Biotherapeutics Inc. | Anti-HER2 antibodies and their uses |
JP5909450B2 (ja) | 2009-12-18 | 2016-04-26 | ノバルティス アーゲー | 洗浄溶液及びアフィニティークロマトグラフィーの方法 |
WO2011089212A1 (de) | 2010-01-22 | 2011-07-28 | Boehringer Ingelheim International Gmbh | Chromatographisches verfahren zur aufreinigung von fc enthaltenden proteinen |
US20120034207A1 (en) * | 2010-06-16 | 2012-02-09 | Mclean Michael D | Production of her receptor antibodies in plant |
RU2013109275A (ru) | 2010-08-03 | 2014-09-10 | Эббви Инк. | Иммуноглобулины с двумя вариабельными доменами и их применение |
WO2012019168A2 (en) | 2010-08-06 | 2012-02-09 | Moderna Therapeutics, Inc. | Engineered nucleic acids and methods of use thereof |
KR20130139884A (ko) | 2010-08-26 | 2013-12-23 | 애브비 인코포레이티드 | 이원 가변 도메인 면역글로불린 및 이의 용도 |
DK3590949T3 (da) | 2010-10-01 | 2022-07-11 | Modernatx Inc | Ribonukleinsyrer indeholdende n1-methyl-pseudouracil og anvendelse heraf |
US8962804B2 (en) | 2010-10-08 | 2015-02-24 | City Of Hope | Meditopes and meditope-binding antibodies and uses thereof |
BR112013012422A2 (pt) | 2010-12-21 | 2016-08-30 | Hoffmann La Roche | "método para produzir uma preparação de anticorpo e anticorpo anti-her2" |
CN107915769A (zh) * | 2011-03-29 | 2018-04-17 | 葛兰素史密斯克莱有限责任公司 | 用于蛋白纯化的缓冲液体系 |
US8710200B2 (en) | 2011-03-31 | 2014-04-29 | Moderna Therapeutics, Inc. | Engineered nucleic acids encoding a modified erythropoietin and their expression |
WO2012149197A2 (en) | 2011-04-27 | 2012-11-01 | Abbott Laboratories | Methods for controlling the galactosylation profile of recombinantly-expressed proteins |
WO2012151199A1 (en) | 2011-05-02 | 2012-11-08 | Immunomedics, Inc. | Ultrafiltration concentration of allotype selected antibodies for small-volume administration |
US9464124B2 (en) | 2011-09-12 | 2016-10-11 | Moderna Therapeutics, Inc. | Engineered nucleic acids and methods of use thereof |
RU2648950C2 (ru) | 2011-10-03 | 2018-04-02 | Модерна Терапьютикс, Инк. | Модифицированные нуклеозиды, нуклеотиды и нуклеиновые кислоты и их применение |
CN104039809A (zh) | 2011-10-10 | 2014-09-10 | 希望之城公司 | 中间位和中间位结合抗体及其用途 |
WO2013078191A1 (en) | 2011-11-23 | 2013-05-30 | Medimmune, Llc | Binding molecules specific for her3 and uses thereof |
US20130156849A1 (en) | 2011-12-16 | 2013-06-20 | modeRNA Therapeutics | Modified nucleoside, nucleotide, and nucleic acid compositions |
TW201333035A (zh) | 2011-12-30 | 2013-08-16 | Abbvie Inc | 針對il-13及/或il-17之雙特異性結合蛋白 |
US9303079B2 (en) | 2012-04-02 | 2016-04-05 | Moderna Therapeutics, Inc. | Modified polynucleotides for the production of cytoplasmic and cytoskeletal proteins |
US9572897B2 (en) | 2012-04-02 | 2017-02-21 | Modernatx, Inc. | Modified polynucleotides for the production of cytoplasmic and cytoskeletal proteins |
US9283287B2 (en) | 2012-04-02 | 2016-03-15 | Moderna Therapeutics, Inc. | Modified polynucleotides for the production of nuclear proteins |
WO2013151667A1 (en) | 2012-04-02 | 2013-10-10 | modeRNA Therapeutics | Modified polynucleotides |
US10317376B2 (en) * | 2012-04-11 | 2019-06-11 | Bioverativ Therapeutics Inc. | Methods of detecting glycosaminoglycans |
WO2013158273A1 (en) | 2012-04-20 | 2013-10-24 | Abbvie Inc. | Methods to modulate c-terminal lysine variant distribution |
US9334319B2 (en) | 2012-04-20 | 2016-05-10 | Abbvie Inc. | Low acidic species compositions |
US9067990B2 (en) | 2013-03-14 | 2015-06-30 | Abbvie, Inc. | Protein purification using displacement chromatography |
WO2013176754A1 (en) | 2012-05-24 | 2013-11-28 | Abbvie Inc. | Novel purification of antibodies using hydrophobic interaction chromatography |
EP2682168A1 (en) | 2012-07-02 | 2014-01-08 | Millipore Corporation | Purification of biological molecules |
WO2014034644A1 (ja) | 2012-08-27 | 2014-03-06 | 旭化成メディカル株式会社 | 温度応答性クロマトグラフィーによる抗体の精製方法 |
KR20150043523A (ko) | 2012-09-02 | 2015-04-22 | 애브비 인코포레이티드 | 단백질 불균일성의 제어 방법 |
US9512214B2 (en) | 2012-09-02 | 2016-12-06 | Abbvie, Inc. | Methods to control protein heterogeneity |
RU2017137740A (ru) | 2012-11-01 | 2019-02-11 | Эббви Инк. | Анти-vegf/dll4-иммуноглобулины с двойными вариабельными доменами и их применения |
RS63237B1 (sr) | 2012-11-26 | 2022-06-30 | Modernatx Inc | Terminalno modifikovana rnk |
US10421795B2 (en) * | 2012-12-17 | 2019-09-24 | Merck Sharp & Dohme Corp. | Process for purifying insulin and analogues thereof |
US9650412B2 (en) | 2013-03-08 | 2017-05-16 | Genzyme Corporation | Integrated continuous manufacturing of therapeutic protein drug substances |
EP2830651A4 (en) | 2013-03-12 | 2015-09-02 | Abbvie Inc | HUMAN ANTIBODIES THAT BIND TNF-ALPHA AND PREPARATION METHODS |
US10023608B1 (en) | 2013-03-13 | 2018-07-17 | Amgen Inc. | Protein purification methods to remove impurities |
US9017687B1 (en) | 2013-10-18 | 2015-04-28 | Abbvie, Inc. | Low acidic species compositions and methods for producing and using the same using displacement chromatography |
WO2014159579A1 (en) | 2013-03-14 | 2014-10-02 | Abbvie Inc. | MUTATED ANTI-TNFα ANTIBODIES AND METHODS OF THEIR USE |
US9499614B2 (en) | 2013-03-14 | 2016-11-22 | Abbvie Inc. | Methods for modulating protein glycosylation profiles of recombinant protein therapeutics using monosaccharides and oligosaccharides |
BR112015023797A2 (pt) | 2013-03-15 | 2017-10-24 | Abbvie Inc | proteínas de ligação de especificidade dupla dirigidas contra il-1b e/ou il-17 |
US8980864B2 (en) | 2013-03-15 | 2015-03-17 | Moderna Therapeutics, Inc. | Compositions and methods of altering cholesterol levels |
ES2894837T3 (es) | 2013-04-18 | 2022-02-16 | Inst Nat Sante Rech Med | Composición con inmunogenicidad reducida |
US10611826B2 (en) | 2013-07-05 | 2020-04-07 | Laboratoire Français Du Fractionnement Et Des Biotechnologies | Affinity chromatography matrix |
EP4163633A1 (en) | 2013-09-13 | 2023-04-12 | F. Hoffmann-La Roche AG | Compositions and methods for detecting and quantifying host cell protein in cell lines and recombinant polypeptide products |
NZ718144A (en) | 2013-09-13 | 2022-05-27 | Genentech Inc | Methods and compositions comprising purified recombinant polypeptides |
US11305012B2 (en) | 2013-09-24 | 2022-04-19 | Medimmune, Llc | Binding molecules specific for HER3 and uses thereof |
KR20160067219A (ko) | 2013-10-03 | 2016-06-13 | 모더나 세라퓨틱스, 인코포레이티드 | 저밀도 지단백질 수용체를 암호화하는 폴리뉴클레오타이드 |
EP3052640A2 (en) | 2013-10-04 | 2016-08-10 | AbbVie Inc. | Use of metal ions for modulation of protein glycosylation profiles of recombinant proteins |
US9085618B2 (en) | 2013-10-18 | 2015-07-21 | Abbvie, Inc. | Low acidic species compositions and methods for producing and using the same |
US9181337B2 (en) | 2013-10-18 | 2015-11-10 | Abbvie, Inc. | Modulated lysine variant species compositions and methods for producing and using the same |
US8946395B1 (en) | 2013-10-18 | 2015-02-03 | Abbvie Inc. | Purification of proteins using hydrophobic interaction chromatography |
US20150139988A1 (en) | 2013-11-15 | 2015-05-21 | Abbvie, Inc. | Glycoengineered binding protein compositions |
WO2015103545A1 (en) | 2014-01-03 | 2015-07-09 | Bio-Rad Laboratories, Inc. | Removal of impurities from protein a eluates |
TWI671312B (zh) | 2014-01-17 | 2019-09-11 | 美商健臻公司 | 無菌層析法及製法 |
TWI709569B (zh) | 2014-01-17 | 2020-11-11 | 美商健臻公司 | 無菌層析樹脂及其用於製造方法的用途 |
US10745490B2 (en) | 2014-04-11 | 2020-08-18 | Celldex Therapeutics, Inc. | Anti-ErbB antibodies and methods of use thereof |
TWI535784B (zh) | 2014-08-26 | 2016-06-01 | 財團法人工業技術研究院 | 剪切增稠配方、及包含其之複合材料 |
EA201790558A1 (ru) | 2014-10-15 | 2017-08-31 | Ксенотера | Композиция с пониженной иммуногенностью |
US11566082B2 (en) | 2014-11-17 | 2023-01-31 | Cytiva Bioprocess R&D Ab | Mutated immunoglobulin-binding polypeptides |
US10093733B2 (en) | 2014-12-11 | 2018-10-09 | Abbvie Inc. | LRP-8 binding dual variable domain immunoglobulin proteins |
KR102548827B1 (ko) * | 2014-12-22 | 2023-06-30 | 시스트이뮨, 인코포레이티드 | 이중특이적 4가 항체 및 이의 제조 및 사용방법 |
CN108064286A (zh) | 2015-01-26 | 2018-05-22 | 株式会社钟化 | 突变型免疫球蛋白κ链可变区结合性肽 |
WO2016121701A1 (ja) | 2015-01-26 | 2016-08-04 | 株式会社カネカ | 免疫グロブリンκ鎖可変領域含有タンパク質精製用アフィニティー分離マトリックス |
EP4194071A1 (en) | 2015-03-13 | 2023-06-14 | Bristol-Myers Squibb Company | Use of alkaline washes during chromatography to remove impurities |
TW201710286A (zh) | 2015-06-15 | 2017-03-16 | 艾伯維有限公司 | 抗vegf、pdgf及/或其受體之結合蛋白 |
AU2016304764C1 (en) | 2015-08-07 | 2023-06-01 | Imaginab, Inc. | Antigen binding constructs to target molecules |
WO2017195638A1 (ja) | 2016-05-09 | 2017-11-16 | 株式会社カネカ | 抗体またはκ鎖可変領域含有抗体断片の精製方法 |
JP7106187B2 (ja) | 2016-05-11 | 2022-07-26 | サイティバ・バイオプロセス・アールアンドディ・アクチボラグ | 分離マトリックスを保存する方法 |
US10730908B2 (en) | 2016-05-11 | 2020-08-04 | Ge Healthcare Bioprocess R&D Ab | Separation method |
US10703774B2 (en) | 2016-09-30 | 2020-07-07 | Ge Healthcare Bioprocess R&D Ab | Separation method |
US11753438B2 (en) | 2016-05-11 | 2023-09-12 | Cytiva Bioprocess R&D Ab | Method of cleaning and/or sanitizing a separation matrix |
US10654887B2 (en) | 2016-05-11 | 2020-05-19 | Ge Healthcare Bio-Process R&D Ab | Separation matrix |
US10889615B2 (en) | 2016-05-11 | 2021-01-12 | Cytiva Bioprocess R&D Ab | Mutated immunoglobulin-binding polypeptides |
ES2874974T3 (es) | 2016-05-11 | 2021-11-05 | Cytiva Bioprocess R & D Ab | Matriz de separación |
WO2018029158A1 (en) * | 2016-08-11 | 2018-02-15 | Repligen Corporation | Alkaline stable fc—binding proteins for affinity chromatography |
CN107964044B (zh) * | 2016-10-19 | 2021-11-19 | 无锡科捷诺生物科技有限责任公司 | 从乳样中纯化抗cd20单克隆抗体的方法 |
US11266745B2 (en) | 2017-02-08 | 2022-03-08 | Imaginab, Inc. | Extension sequences for diabodies |
CN110352201A (zh) | 2017-04-03 | 2019-10-18 | 免疫医疗公司 | 用于癌症疗法的抗体药物缀合物的皮下施用 |
WO2018237159A1 (en) | 2017-06-21 | 2018-12-27 | Cephalon, Inc. | WASH PAD FOR CATIONIC EXCHANGE CHROMATOGRAPHY |
JP7355729B2 (ja) | 2017-08-07 | 2023-10-03 | レプリゲン・コーポレイション | C末端ヘリカル領域にシステインを有するfc結合タンパク質 |
EP3668985B1 (en) | 2017-08-17 | 2021-06-16 | Just-Evotec Biologics, Inc. | Method of purifying glycosylated protein from host cell galectins and other contaminants |
EP3560945A1 (en) * | 2018-04-27 | 2019-10-30 | F. Hoffmann-La Roche AG | Methods for purification of polypeptides using polysorbates |
WO2020046602A1 (en) | 2018-08-31 | 2020-03-05 | Genzyme Corporation | Sterile chromatography resin and use thereof in manufacturing processes |
US11034774B2 (en) | 2018-10-30 | 2021-06-15 | The Regents Of The University Of California | Engineered antibodies for the detection of phosphorylated tyrosine |
WO2020125757A1 (en) * | 2018-12-21 | 2020-06-25 | Wuxi Biologics (Shanghai) Co., Ltd. | A method for improving aggregate removal by protein a chromatography |
EP3947440A1 (en) | 2019-03-29 | 2022-02-09 | F. Hoffmann-La Roche AG | Method for generating avid-binding multispecific antibodies |
AU2020266993A1 (en) | 2019-04-30 | 2022-01-06 | Xenothera | Association of polyclonal antibodies and anti-PD1 or anti-PDL1 antibodies for the treatment of cancer |
PE20220218A1 (es) | 2019-05-20 | 2022-02-02 | Novartis Ag | Conjugados de anticuerpo-farmaco inhibidores de mcl-1 y sus metodos de uso |
IL303048A (en) | 2020-11-24 | 2023-07-01 | Novartis Ag | BCL-XL inhibitor antibody-drug conjugates and methods of using them |
TW202408588A (zh) | 2022-05-20 | 2024-03-01 | 瑞士商諾華公司 | 抗體-藥物結合物抗腫瘤化合物及其使用方法 |
WO2023223097A1 (en) | 2022-05-20 | 2023-11-23 | Novartis Ag | Antibody drug conjugates |
Family Cites Families (42)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US4515893A (en) | 1979-04-26 | 1985-05-07 | Ortho Pharmaceutical Corporation | Hybrid cell line for producing complement-fixing monoclonal antibody to human T cells |
US4816567A (en) | 1983-04-08 | 1989-03-28 | Genentech, Inc. | Recombinant immunoglobin preparations |
US5672347A (en) | 1984-07-05 | 1997-09-30 | Genentech, Inc. | Tumor necrosis factor antagonists and their use |
US4676980A (en) | 1985-09-23 | 1987-06-30 | The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Department Of Health And Human Services | Target specific cross-linked heteroantibodies |
US5091178A (en) | 1986-02-21 | 1992-02-25 | Oncogen | Tumor therapy with biologically active anti-tumor antibodies |
ATE113062T1 (de) * | 1986-07-15 | 1994-11-15 | Kowa Co | Throminbindende substanz und verfahren zu ihrer herstellung. |
IL85035A0 (en) | 1987-01-08 | 1988-06-30 | Int Genetic Eng | Polynucleotide molecule,a chimeric antibody with specificity for human b cell surface antigen,a process for the preparation and methods utilizing the same |
EP0308936B1 (en) | 1987-09-23 | 1994-07-06 | Bristol-Myers Squibb Company | Antibody heteroconjugates for the killing of HIV-infected cells |
US5091313A (en) | 1988-08-05 | 1992-02-25 | Tanox Biosystems, Inc. | Antigenic epitopes of IgE present on B cell but not basophil surface |
JP3040121B2 (ja) | 1988-01-12 | 2000-05-08 | ジェネンテク,インコーポレイテッド | 増殖因子レセプターの機能を阻害することにより腫瘍細胞を処置する方法 |
US5720937A (en) | 1988-01-12 | 1998-02-24 | Genentech, Inc. | In vivo tumor detection assay |
ATE113846T1 (de) | 1988-06-21 | 1994-11-15 | Genentech Inc | Therapeutische zusammensetzungen für die behandlung von myocard-infarkten. |
US5683916A (en) * | 1988-10-31 | 1997-11-04 | Hemasure Inc. | Membrane affinity apparatus and purification methods related thereto |
US5530101A (en) | 1988-12-28 | 1996-06-25 | Protein Design Labs, Inc. | Humanized immunoglobulins |
EP0479909B1 (en) | 1989-06-29 | 1996-10-30 | Medarex, Inc. | Bispecific reagents for aids therapy |
US5173408A (en) * | 1989-11-13 | 1992-12-22 | Lange Louis George Iii | Mammalian pancreatic cholesterol esterase |
EP0586505A1 (en) | 1991-05-14 | 1994-03-16 | Repligen Corporation | Heteroconjugate antibodies for treatment of hiv infection |
CA2113813C (en) | 1991-08-14 | 2005-04-12 | Paula M. Jardieu | Immunoglobulin variants for specific fc epsilon receptors |
WO1993008829A1 (en) | 1991-11-04 | 1993-05-13 | The Regents Of The University Of California | Compositions that mediate killing of hiv-infected cells |
WO1993016185A2 (en) | 1992-02-06 | 1993-08-19 | Creative Biomolecules, Inc. | Biosynthetic binding protein for cancer marker |
ZA936128B (en) | 1992-08-21 | 1995-02-20 | Genentech Inc | Method for treating a LFA-1 mediated disorder |
US5726293A (en) * | 1992-10-02 | 1998-03-10 | The General Hospital Corporation | Affinity purification methods involving imidazole elution |
JP3095175B2 (ja) | 1992-11-13 | 2000-10-03 | アイデック ファーマシューティカルズ コーポレイション | B細胞リンパ腫の治療のためのヒトbリンパ球限定分化抗原に対するキメラ抗体と放射能標識抗体の療法利用 |
US5736137A (en) | 1992-11-13 | 1998-04-07 | Idec Pharmaceuticals Corporation | Therapeutic application of chimeric and radiolabeled antibodies to human B lymphocyte restricted differentiation antigen for treatment of B cell lymphoma |
CA2176811C (en) | 1993-12-10 | 2008-01-29 | David Tai Wai Fei | Methods for diagnosis of allergy and screening of anti-allergy therapeutics |
ATE164079T1 (de) | 1994-01-18 | 1998-04-15 | Genentech Inc | Verfahren zur behandlung von parasitären infektionen unter verwendung von ige-antagonisten |
US5429746A (en) * | 1994-02-22 | 1995-07-04 | Smith Kline Beecham Corporation | Antibody purification |
US5707622A (en) | 1994-03-03 | 1998-01-13 | Genentech, Inc. | Methods for treating ulcerative colitis |
US5534615A (en) | 1994-04-25 | 1996-07-09 | Genentech, Inc. | Cardiac hypertrophy factor and uses therefor |
US5731168A (en) | 1995-03-01 | 1998-03-24 | Genentech, Inc. | Method for making heteromultimeric polypeptides |
IL117645A (en) | 1995-03-30 | 2005-08-31 | Genentech Inc | Vascular endothelial cell growth factor antagonists for use as medicaments in the treatment of age-related macular degeneration |
CA2222231A1 (en) | 1995-06-07 | 1996-12-19 | Imclone Systems Incorporated | Antibody and antibody fragments for inhibiting the growth of tumors |
DE69714966T2 (de) | 1996-01-23 | 2003-04-24 | Genentech Inc | Antikörper gegen cd 18 zur verwendung gegen gehirnschlag |
US7147851B1 (en) | 1996-08-15 | 2006-12-12 | Millennium Pharmaceuticals, Inc. | Humanized immunoglobulin reactive with α4β7 integrin |
US6037454A (en) * | 1996-11-27 | 2000-03-14 | Genentech, Inc. | Humanized anti-CD11a antibodies |
DK1864999T3 (da) * | 1996-11-27 | 2009-06-29 | Genentech Inc | Affinitetsoprensning af polypeptid på protein A-matrix |
KR100532178B1 (ko) | 1996-11-27 | 2005-12-01 | 제넨테크, 인크. | 인간화 항-CD11a 항체 |
DE69829891T2 (de) | 1997-04-07 | 2005-10-06 | Genentech, Inc., South San Francisco | Anti-VEGF Antikörper |
DK1860187T3 (da) | 1997-05-15 | 2011-10-31 | Genentech Inc | Apo-2-receptor |
US5994511A (en) | 1997-07-02 | 1999-11-30 | Genentech, Inc. | Anti-IgE antibodies and methods of improving polypeptides |
NZ518477A (en) | 1999-10-29 | 2004-10-29 | Genentech Inc | Isolated anti-prostate stem cell antigen (PSCA) antibodies that internalise upon binding to PSCA on a mammalian cell, including a PSCA-expressing tumour cell, in vivo |
WO2003066662A2 (en) * | 2002-02-05 | 2003-08-14 | Genentech, Inc. | Protein purification |
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