JP5086633B2 - 細胞内に侵入する能力を有するペプチド及び核酸、物質を細胞内に侵入させるための物質移送用剤及び物質移送方法、並びに、らい菌による感染症を予防又は治療するためのワクチン、抗体及び医薬 - Google Patents
細胞内に侵入する能力を有するペプチド及び核酸、物質を細胞内に侵入させるための物質移送用剤及び物質移送方法、並びに、らい菌による感染症を予防又は治療するためのワクチン、抗体及び医薬 Download PDFInfo
- Publication number
- JP5086633B2 JP5086633B2 JP2006347090A JP2006347090A JP5086633B2 JP 5086633 B2 JP5086633 B2 JP 5086633B2 JP 2006347090 A JP2006347090 A JP 2006347090A JP 2006347090 A JP2006347090 A JP 2006347090A JP 5086633 B2 JP5086633 B2 JP 5086633B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- peptide
- thr
- substance
- cells
- val
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 title claims description 215
- 239000000126 substance Substances 0.000 title claims description 132
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 62
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 title claims description 42
- 239000003814 drug Substances 0.000 title claims description 41
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 title claims description 20
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 title claims description 20
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 title claims description 20
- 206010024229 Leprosy Diseases 0.000 title description 53
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 title description 31
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 title description 28
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 title description 20
- 210000004962 mammalian cell Anatomy 0.000 claims description 68
- 238000012546 transfer Methods 0.000 claims description 55
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 claims description 28
- 210000002919 epithelial cell Anatomy 0.000 claims description 23
- 229940079593 drug Drugs 0.000 claims description 22
- 239000000427 antigen Substances 0.000 claims description 18
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 claims description 18
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 claims description 18
- 241000186362 Mycobacterium leprae Species 0.000 claims description 15
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 claims description 9
- 239000000463 material Substances 0.000 claims description 6
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 claims 3
- 210000004748 cultured cell Anatomy 0.000 claims 2
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 claims 2
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 81
- 150000001413 amino acids Chemical group 0.000 description 36
- 230000009545 invasion Effects 0.000 description 30
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 26
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 24
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 24
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 23
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 19
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 18
- 102100022414 Axin interactor, dorsalization-associated protein Human genes 0.000 description 16
- 101000755748 Escherichia coli AIDA-I autotransporter Proteins 0.000 description 16
- 101000755749 Homo sapiens Axin interactor, dorsalization-associated protein Proteins 0.000 description 16
- 210000004379 membrane Anatomy 0.000 description 16
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 16
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 16
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 12
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 10
- 208000035473 Communicable disease Diseases 0.000 description 9
- 241000187479 Mycobacterium tuberculosis Species 0.000 description 8
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 8
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 8
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 8
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 239000011324 bead Substances 0.000 description 7
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 7
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- OGGXGZAMXPVRFZ-UHFFFAOYSA-N dimethylarsinic acid Chemical compound C[As](C)(O)=O OGGXGZAMXPVRFZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N gold Chemical compound [Au] PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- -1 patches Substances 0.000 description 6
- 239000013598 vector Substances 0.000 description 6
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 5
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 5
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 5
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 5
- 210000002850 nasal mucosa Anatomy 0.000 description 5
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 5
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 5
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 5
- 201000008827 tuberculosis Diseases 0.000 description 5
- VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L Calcium carbonate Chemical compound [Ca+2].[O-]C([O-])=O VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 4
- ZRALSGWEFCBTJO-UHFFFAOYSA-N Guanidine Chemical compound NC(N)=N ZRALSGWEFCBTJO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N Urea Chemical compound NC(N)=O XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 description 4
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 4
- 230000004709 cell invasion Effects 0.000 description 4
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 4
- 210000000805 cytoplasm Anatomy 0.000 description 4
- 238000000635 electron micrograph Methods 0.000 description 4
- 239000000796 flavoring agent Substances 0.000 description 4
- 235000013355 food flavoring agent Nutrition 0.000 description 4
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 4
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 4
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 4
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 4
- 210000004116 schwann cell Anatomy 0.000 description 4
- 210000003491 skin Anatomy 0.000 description 4
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 4
- 238000002255 vaccination Methods 0.000 description 4
- 241000282472 Canis lupus familiaris Species 0.000 description 3
- 241000282693 Cercopithecidae Species 0.000 description 3
- 241000282326 Felis catus Species 0.000 description 3
- 229930182566 Gentamicin Natural products 0.000 description 3
- CEAZRRDELHUEMR-URQXQFDESA-N Gentamicin Chemical compound O1[C@H](C(C)NC)CC[C@@H](N)[C@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O[C@@H]2[C@@H]([C@@H](NC)[C@@](C)(O)CO2)O)[C@H](N)C[C@@H]1N CEAZRRDELHUEMR-URQXQFDESA-N 0.000 description 3
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 3
- 102000057361 Pseudogenes Human genes 0.000 description 3
- 108091008109 Pseudogenes Proteins 0.000 description 3
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 3
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 3
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 3
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 3
- 210000000424 bronchial epithelial cell Anatomy 0.000 description 3
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 3
- 229950004243 cacodylic acid Drugs 0.000 description 3
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 3
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 3
- 230000008878 coupling Effects 0.000 description 3
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 description 3
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 3
- 210000004443 dendritic cell Anatomy 0.000 description 3
- 239000012091 fetal bovine serum Substances 0.000 description 3
- 229960002518 gentamicin Drugs 0.000 description 3
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 3
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 3
- 238000012744 immunostaining Methods 0.000 description 3
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 3
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 3
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 3
- 239000002674 ointment Substances 0.000 description 3
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 3
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 3
- 235000002639 sodium chloride Nutrition 0.000 description 3
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 3
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 3
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 3
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 3
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 3
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 3
- PMNLUUOXGOOLSP-UHFFFAOYSA-N 2-mercaptopropanoic acid Chemical compound CC(S)C(O)=O PMNLUUOXGOOLSP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 2
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 2
- FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N Dextrotartaric acid Chemical compound OC(=O)[C@H](O)[C@@H](O)C(O)=O FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N 0.000 description 2
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 2
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 2
- UQSXHKLRYXJYBZ-UHFFFAOYSA-N Iron oxide Chemical compound [Fe]=O UQSXHKLRYXJYBZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 2
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 2
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 2
- CHJJGSNFBQVOTG-UHFFFAOYSA-N N-methyl-guanidine Natural products CNC(N)=N CHJJGSNFBQVOTG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 206010039101 Rhinorrhoea Diseases 0.000 description 2
- PXIPVTKHYLBLMZ-UHFFFAOYSA-N Sodium azide Chemical compound [Na+].[N-]=[N+]=[N-] PXIPVTKHYLBLMZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M Sodium bicarbonate Chemical compound [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- FEWJPZIEWOKRBE-UHFFFAOYSA-N Tartaric acid Natural products [H+].[H+].[O-]C(=O)C(O)C(O)C([O-])=O FEWJPZIEWOKRBE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 2
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 2
- 235000010419 agar Nutrition 0.000 description 2
- 239000007640 basal medium Substances 0.000 description 2
- 239000002585 base Substances 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 2
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 2
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 2
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 2
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 2
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 2
- 239000006172 buffering agent Substances 0.000 description 2
- 229910000019 calcium carbonate Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000010216 calcium carbonate Nutrition 0.000 description 2
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 2
- 239000004202 carbamide Substances 0.000 description 2
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 description 2
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 2
- 239000003086 colorant Substances 0.000 description 2
- 239000006071 cream Substances 0.000 description 2
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 2
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 2
- SWSQBOPZIKWTGO-UHFFFAOYSA-N dimethylaminoamidine Natural products CN(C)C(N)=N SWSQBOPZIKWTGO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 2
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 2
- 239000007884 disintegrant Substances 0.000 description 2
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 2
- 238000004520 electroporation Methods 0.000 description 2
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 2
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 2
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 2
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 2
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 2
- JYGXADMDTFJGBT-VWUMJDOOSA-N hydrocortisone Chemical compound O=C1CC[C@]2(C)[C@H]3[C@@H](O)C[C@](C)([C@@](CC4)(O)C(=O)CO)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 JYGXADMDTFJGBT-VWUMJDOOSA-N 0.000 description 2
- NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N insulin Chemical compound N1C(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(NC(=O)CN)C(C)CC)CSSCC(C(NC(CO)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CCC(N)=O)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CSSCC(NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2C=CC(O)=CC=2)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(C)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2NC=NC=2)NC(=O)C(CO)NC(=O)CNC2=O)C(=O)NCC(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC(O)=CC=3)C(=O)NC(C(C)O)C(=O)N3C(CCC3)C(=O)NC(CCCCN)C(=O)NC(C)C(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(O)=O)=O)NC(=O)C(C(C)CC)NC(=O)C(CO)NC(=O)C(C(C)O)NC(=O)C1CSSCC2NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CC(N)=O)NC(=O)C(NC(=O)C(N)CC=1C=CC=CC=1)C(C)C)CC1=CN=CN1 NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000000936 intestine Anatomy 0.000 description 2
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 description 2
- BPHPUYQFMNQIOC-NXRLNHOXSA-N isopropyl beta-D-thiogalactopyranoside Chemical compound CC(C)S[C@@H]1O[C@H](CO)[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O BPHPUYQFMNQIOC-NXRLNHOXSA-N 0.000 description 2
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 2
- 230000003902 lesion Effects 0.000 description 2
- 239000003589 local anesthetic agent Substances 0.000 description 2
- 239000000314 lubricant Substances 0.000 description 2
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 description 2
- 208000010753 nasal discharge Diseases 0.000 description 2
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 2
- 239000003002 pH adjusting agent Substances 0.000 description 2
- 230000036961 partial effect Effects 0.000 description 2
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 2
- YBYRMVIVWMBXKQ-UHFFFAOYSA-N phenylmethanesulfonyl fluoride Chemical compound FS(=O)(=O)CC1=CC=CC=C1 YBYRMVIVWMBXKQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000001817 pituitary effect Effects 0.000 description 2
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 2
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 2
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 2
- 230000002335 preservative effect Effects 0.000 description 2
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 2
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 2
- 230000006798 recombination Effects 0.000 description 2
- 238000005215 recombination Methods 0.000 description 2
- 239000002356 single layer Substances 0.000 description 2
- 239000001509 sodium citrate Substances 0.000 description 2
- NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K sodium citrate Chemical compound O.O.[Na+].[Na+].[Na+].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 2
- 238000010532 solid phase synthesis reaction Methods 0.000 description 2
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 2
- 239000011975 tartaric acid Substances 0.000 description 2
- 235000002906 tartaric acid Nutrition 0.000 description 2
- CWERGRDVMFNCDR-UHFFFAOYSA-N thioglycolic acid Chemical compound OC(=O)CS CWERGRDVMFNCDR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- LNAZSHAWQACDHT-XIYTZBAFSA-N (2r,3r,4s,5r,6s)-4,5-dimethoxy-2-(methoxymethyl)-3-[(2s,3r,4s,5r,6r)-3,4,5-trimethoxy-6-(methoxymethyl)oxan-2-yl]oxy-6-[(2r,3r,4s,5r,6r)-4,5,6-trimethoxy-2-(methoxymethyl)oxan-3-yl]oxyoxane Chemical compound CO[C@@H]1[C@@H](OC)[C@H](OC)[C@@H](COC)O[C@H]1O[C@H]1[C@H](OC)[C@@H](OC)[C@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](OC)[C@H](OC)O[C@@H]2COC)OC)O[C@@H]1COC LNAZSHAWQACDHT-XIYTZBAFSA-N 0.000 description 1
- UCTWMZQNUQWSLP-VIFPVBQESA-N (R)-adrenaline Chemical compound CNC[C@H](O)C1=CC=C(O)C(O)=C1 UCTWMZQNUQWSLP-VIFPVBQESA-N 0.000 description 1
- 229930182837 (R)-adrenaline Natural products 0.000 description 1
- IXPNQXFRVYWDDI-UHFFFAOYSA-N 1-methyl-2,4-dioxo-1,3-diazinane-5-carboximidamide Chemical compound CN1CC(C(N)=N)C(=O)NC1=O IXPNQXFRVYWDDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NHBKXEKEPDILRR-UHFFFAOYSA-N 2,3-bis(butanoylsulfanyl)propyl butanoate Chemical compound CCCC(=O)OCC(SC(=O)CCC)CSC(=O)CCC NHBKXEKEPDILRR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 2-amino-2-(hydroxymethyl)propane-1,3-diol;hydron;chloride Chemical compound Cl.OCC(N)(CO)CO QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HVCOBJNICQPDBP-UHFFFAOYSA-N 3-[3-[3,5-dihydroxy-6-methyl-4-(3,4,5-trihydroxy-6-methyloxan-2-yl)oxyoxan-2-yl]oxydecanoyloxy]decanoic acid;hydrate Chemical compound O.OC1C(OC(CC(=O)OC(CCCCCCC)CC(O)=O)CCCCCCC)OC(C)C(O)C1OC1C(O)C(O)C(O)C(C)O1 HVCOBJNICQPDBP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920000936 Agarose Polymers 0.000 description 1
- 239000005995 Aluminium silicate Substances 0.000 description 1
- APKFDSVGJQXUKY-KKGHZKTASA-N Amphotericin-B Natural products O[C@H]1[C@@H](N)[C@H](O)[C@@H](C)O[C@H]1O[C@H]1C=CC=CC=CC=CC=CC=CC=C[C@H](C)[C@@H](O)[C@@H](C)[C@H](C)OC(=O)C[C@H](O)C[C@H](O)CC[C@@H](O)[C@H](O)C[C@H](O)C[C@](O)(C[C@H](O)[C@H]2C(O)=O)O[C@H]2C1 APKFDSVGJQXUKY-KKGHZKTASA-N 0.000 description 1
- 241000416162 Astragalus gummifer Species 0.000 description 1
- 241001416181 Axis axis Species 0.000 description 1
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- 229920002134 Carboxymethyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- 206010008342 Cervix carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 229920000742 Cotton Polymers 0.000 description 1
- 101710141836 DNA-binding protein HU homolog Proteins 0.000 description 1
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 1
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 102400001368 Epidermal growth factor Human genes 0.000 description 1
- 101800003838 Epidermal growth factor Proteins 0.000 description 1
- 241000588722 Escherichia Species 0.000 description 1
- 239000001856 Ethyl cellulose Substances 0.000 description 1
- ZZSNKZQZMQGXPY-UHFFFAOYSA-N Ethyl cellulose Chemical compound CCOCC1OC(OC)C(OCC)C(OCC)C1OC1C(O)C(O)C(OC)C(CO)O1 ZZSNKZQZMQGXPY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SXRSQZLOMIGNAQ-UHFFFAOYSA-N Glutaraldehyde Chemical compound O=CCCCC=O SXRSQZLOMIGNAQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229930186217 Glycolipid Natural products 0.000 description 1
- 229920000084 Gum arabic Polymers 0.000 description 1
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 1
- 229920002153 Hydroxypropyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- 102000004877 Insulin Human genes 0.000 description 1
- 108090001061 Insulin Proteins 0.000 description 1
- 206010024227 Lepromatous leprosy Diseases 0.000 description 1
- 239000006391 Luria-Bertani Medium Substances 0.000 description 1
- 229920000168 Microcrystalline cellulose Polymers 0.000 description 1
- 206010062207 Mycobacterial infection Diseases 0.000 description 1
- 101150111781 PGL1 gene Proteins 0.000 description 1
- 229930040373 Paraformaldehyde Natural products 0.000 description 1
- 239000004698 Polyethylene Substances 0.000 description 1
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 1
- 239000004793 Polystyrene Substances 0.000 description 1
- HCBIBCJNVBAKAB-UHFFFAOYSA-N Procaine hydrochloride Chemical compound Cl.CCN(CC)CCOC(=O)C1=CC=C(N)C=C1 HCBIBCJNVBAKAB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010076504 Protein Sorting Signals Proteins 0.000 description 1
- 241000978776 Senegalia senegal Species 0.000 description 1
- 229920001800 Shellac Polymers 0.000 description 1
- VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M Sodium acetate Chemical compound [Na+].CC([O-])=O VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- DBMJMQXJHONAFJ-UHFFFAOYSA-M Sodium laurylsulphate Chemical compound [Na+].CCCCCCCCCCCCOS([O-])(=O)=O DBMJMQXJHONAFJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 241000282887 Suidae Species 0.000 description 1
- AUYYCJSJGJYCDS-LBPRGKRZSA-N Thyrolar Chemical compound IC1=CC(C[C@H](N)C(O)=O)=CC(I)=C1OC1=CC=C(O)C(I)=C1 AUYYCJSJGJYCDS-LBPRGKRZSA-N 0.000 description 1
- GWEVSGVZZGPLCZ-UHFFFAOYSA-N Titan oxide Chemical compound O=[Ti]=O GWEVSGVZZGPLCZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920001615 Tragacanth Polymers 0.000 description 1
- 102000004338 Transferrin Human genes 0.000 description 1
- 108090000901 Transferrin Proteins 0.000 description 1
- COQLPRJCUIATTQ-UHFFFAOYSA-N Uranyl acetate Chemical compound O.O.O=[U]=O.CC(O)=O.CC(O)=O COQLPRJCUIATTQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000006105 Uterine Cervical Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- BZHJMEDXRYGGRV-UHFFFAOYSA-N Vinyl chloride Chemical compound ClC=C BZHJMEDXRYGGRV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 235000010489 acacia gum Nutrition 0.000 description 1
- 239000000205 acacia gum Substances 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 210000001789 adipocyte Anatomy 0.000 description 1
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 1
- 210000004504 adult stem cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000000443 aerosol Substances 0.000 description 1
- SHGAZHPCJJPHSC-YCNIQYBTSA-N all-trans-retinoic acid Chemical compound OC(=O)\C=C(/C)\C=C\C=C(/C)\C=C\C1=C(C)CCCC1(C)C SHGAZHPCJJPHSC-YCNIQYBTSA-N 0.000 description 1
- 235000012211 aluminium silicate Nutrition 0.000 description 1
- APKFDSVGJQXUKY-INPOYWNPSA-N amphotericin B Chemical compound O[C@H]1[C@@H](N)[C@H](O)[C@@H](C)O[C@H]1O[C@H]1/C=C/C=C/C=C/C=C/C=C/C=C/C=C/[C@H](C)[C@@H](O)[C@@H](C)[C@H](C)OC(=O)C[C@H](O)C[C@H](O)CC[C@@H](O)[C@H](O)C[C@H](O)C[C@](O)(C[C@H](O)[C@H]2C(O)=O)O[C@H]2C1 APKFDSVGJQXUKY-INPOYWNPSA-N 0.000 description 1
- 229960003942 amphotericin b Drugs 0.000 description 1
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 1
- 239000003443 antiviral agent Substances 0.000 description 1
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 210000002469 basement membrane Anatomy 0.000 description 1
- VBICKXHEKHSIBG-UHFFFAOYSA-N beta-monoglyceryl stearate Natural products CCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OCC(O)CO VBICKXHEKHSIBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HOQPTLCRWVZIQZ-UHFFFAOYSA-H bis[[2-(5-hydroxy-4,7-dioxo-1,3,2$l^{2}-dioxaplumbepan-5-yl)acetyl]oxy]lead Chemical compound [Pb+2].[Pb+2].[Pb+2].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O.[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O HOQPTLCRWVZIQZ-UHFFFAOYSA-H 0.000 description 1
- 210000002449 bone cell Anatomy 0.000 description 1
- 229910021538 borax Inorganic materials 0.000 description 1
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 description 1
- ZFXVRMSLJDYJCH-UHFFFAOYSA-N calcium magnesium Chemical compound [Mg].[Ca] ZFXVRMSLJDYJCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000001506 calcium phosphate Substances 0.000 description 1
- 229910000389 calcium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011010 calcium phosphates Nutrition 0.000 description 1
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 1
- FPPNZSSZRUTDAP-UWFZAAFLSA-N carbenicillin Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)C(C(O)=O)C1=CC=CC=C1 FPPNZSSZRUTDAP-UWFZAAFLSA-N 0.000 description 1
- 229960003669 carbenicillin Drugs 0.000 description 1
- 239000001768 carboxy methyl cellulose Substances 0.000 description 1
- 235000010948 carboxy methyl cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 239000008112 carboxymethyl-cellulose Substances 0.000 description 1
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 1
- 210000005056 cell body Anatomy 0.000 description 1
- 230000007969 cellular immunity Effects 0.000 description 1
- 239000007765 cera alba Substances 0.000 description 1
- 201000010881 cervical cancer Diseases 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 210000001612 chondrocyte Anatomy 0.000 description 1
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 description 1
- 230000001332 colony forming effect Effects 0.000 description 1
- 238000012790 confirmation Methods 0.000 description 1
- NKLPQNGYXWVELD-UHFFFAOYSA-M coomassie brilliant blue Chemical compound [Na+].C1=CC(OCC)=CC=C1NC1=CC=C(C(=C2C=CC(C=C2)=[N+](CC)CC=2C=C(C=CC=2)S([O-])(=O)=O)C=2C=CC(=CC=2)N(CC)CC=2C=C(C=CC=2)S([O-])(=O)=O)C=C1 NKLPQNGYXWVELD-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 210000000399 corneal endothelial cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 238000000502 dialysis Methods 0.000 description 1
- FPAFDBFIGPHWGO-UHFFFAOYSA-N dioxosilane;oxomagnesium;hydrate Chemical compound O.[Mg]=O.[Mg]=O.[Mg]=O.O=[Si]=O.O=[Si]=O.O=[Si]=O.O=[Si]=O FPAFDBFIGPHWGO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical group P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 1
- VHJLVAABSRFDPM-QWWZWVQMSA-N dithiothreitol Chemical compound SC[C@@H](O)[C@H](O)CS VHJLVAABSRFDPM-QWWZWVQMSA-N 0.000 description 1
- 210000001671 embryonic stem cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000002889 endothelial cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 229940116977 epidermal growth factor Drugs 0.000 description 1
- 229960005139 epinephrine Drugs 0.000 description 1
- 210000004920 epithelial cell of skin Anatomy 0.000 description 1
- 235000019325 ethyl cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 229920001249 ethyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- 125000001495 ethyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- 239000013604 expression vector Substances 0.000 description 1
- 239000000835 fiber Substances 0.000 description 1
- MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N fluorescein-5-isothiocyanate Chemical compound O1C(=O)C2=CC(N=C=S)=CC=C2C21C1=CC=C(O)C=C1OC1=CC(O)=CC=C21 MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000006260 foam Substances 0.000 description 1
- 108020001507 fusion proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000037865 fusion proteins Human genes 0.000 description 1
- 230000002496 gastric effect Effects 0.000 description 1
- 235000001727 glucose Nutrition 0.000 description 1
- 239000010931 gold Substances 0.000 description 1
- 229910052737 gold Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 1
- 210000003494 hepatocyte Anatomy 0.000 description 1
- 230000004727 humoral immunity Effects 0.000 description 1
- 229960000890 hydrocortisone Drugs 0.000 description 1
- 239000001341 hydroxy propyl starch Substances 0.000 description 1
- 239000001863 hydroxypropyl cellulose Substances 0.000 description 1
- 235000010977 hydroxypropyl cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 235000013828 hydroxypropyl starch Nutrition 0.000 description 1
- 210000002865 immune cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 1
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 1
- 230000016784 immunoglobulin production Effects 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 1
- 238000007689 inspection Methods 0.000 description 1
- 229940125396 insulin Drugs 0.000 description 1
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 1
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 1
- 239000007951 isotonicity adjuster Substances 0.000 description 1
- NLYAJNPCOHFWQQ-UHFFFAOYSA-N kaolin Chemical compound O.O.O=[Al]O[Si](=O)O[Si](=O)O[Al]=O NLYAJNPCOHFWQQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004816 latex Substances 0.000 description 1
- 229920000126 latex Polymers 0.000 description 1
- 201000010260 leiomyoma Diseases 0.000 description 1
- 229960004393 lidocaine hydrochloride Drugs 0.000 description 1
- YECIFGHRMFEPJK-UHFFFAOYSA-N lidocaine hydrochloride monohydrate Chemical compound O.[Cl-].CC[NH+](CC)CC(=O)NC1=C(C)C=CC=C1C YECIFGHRMFEPJK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940057995 liquid paraffin Drugs 0.000 description 1
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 238000001840 matrix-assisted laser desorption--ionisation time-of-flight mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 230000002503 metabolic effect Effects 0.000 description 1
- 229920000609 methyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 1
- 239000001923 methylcellulose Substances 0.000 description 1
- 235000010981 methylcellulose Nutrition 0.000 description 1
- 239000008108 microcrystalline cellulose Substances 0.000 description 1
- 229940016286 microcrystalline cellulose Drugs 0.000 description 1
- 235000019813 microcrystalline cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 1
- 208000027531 mycobacterial infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 239000004745 nonwoven fabric Substances 0.000 description 1
- QIQXTHQIDYTFRH-UHFFFAOYSA-N octadecanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(O)=O QIQXTHQIDYTFRH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940100688 oral solution Drugs 0.000 description 1
- 229910000489 osmium tetroxide Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000012285 osmium tetroxide Substances 0.000 description 1
- 239000012188 paraffin wax Substances 0.000 description 1
- 229920002866 paraformaldehyde Polymers 0.000 description 1
- 244000045947 parasite Species 0.000 description 1
- 239000006072 paste Substances 0.000 description 1
- 230000035515 penetration Effects 0.000 description 1
- 230000007903 penetration ability Effects 0.000 description 1
- 210000000578 peripheral nerve Anatomy 0.000 description 1
- 235000019271 petrolatum Nutrition 0.000 description 1
- ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N phenol group Chemical group C1(=CC=CC=C1)O ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920000573 polyethylene Polymers 0.000 description 1
- 229920002223 polystyrene Polymers 0.000 description 1
- 229920002635 polyurethane Polymers 0.000 description 1
- 239000004814 polyurethane Substances 0.000 description 1
- 239000001267 polyvinylpyrrolidone Substances 0.000 description 1
- 229920000036 polyvinylpyrrolidone Polymers 0.000 description 1
- 235000013855 polyvinylpyrrolidone Nutrition 0.000 description 1
- 230000003449 preventive effect Effects 0.000 description 1
- 229960001309 procaine hydrochloride Drugs 0.000 description 1
- BDERNNFJNOPAEC-UHFFFAOYSA-N propan-1-ol Chemical compound CCCO BDERNNFJNOPAEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000001436 propyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 239000012460 protein solution Substances 0.000 description 1
- 238000003259 recombinant expression Methods 0.000 description 1
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 1
- 210000002345 respiratory system Anatomy 0.000 description 1
- 229930002330 retinoic acid Natural products 0.000 description 1
- 238000003757 reverse transcription PCR Methods 0.000 description 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 1
- 235000013874 shellac Nutrition 0.000 description 1
- 239000004208 shellac Substances 0.000 description 1
- ZLGIYFNHBLSMPS-ATJNOEHPSA-N shellac Chemical compound OCCCCCC(O)C(O)CCCCCCCC(O)=O.C1C23[C@H](C(O)=O)CCC2[C@](C)(CO)[C@@H]1C(C(O)=O)=C[C@@H]3O ZLGIYFNHBLSMPS-ATJNOEHPSA-N 0.000 description 1
- 229940113147 shellac Drugs 0.000 description 1
- RMAQACBXLXPBSY-UHFFFAOYSA-N silicic acid Chemical compound O[Si](O)(O)O RMAQACBXLXPBSY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000012239 silicon dioxide Nutrition 0.000 description 1
- 235000020374 simple syrup Nutrition 0.000 description 1
- 239000001632 sodium acetate Substances 0.000 description 1
- 235000017281 sodium acetate Nutrition 0.000 description 1
- 235000010413 sodium alginate Nutrition 0.000 description 1
- 239000000661 sodium alginate Substances 0.000 description 1
- 229940005550 sodium alginate Drugs 0.000 description 1
- 235000017557 sodium bicarbonate Nutrition 0.000 description 1
- 229910000030 sodium bicarbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- HRZFUMHJMZEROT-UHFFFAOYSA-L sodium disulfite Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S(=O)S([O-])(=O)=O HRZFUMHJMZEROT-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 235000019333 sodium laurylsulphate Nutrition 0.000 description 1
- 235000010262 sodium metabisulphite Nutrition 0.000 description 1
- 239000001488 sodium phosphate Substances 0.000 description 1
- 229910000162 sodium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000004328 sodium tetraborate Substances 0.000 description 1
- 235000010339 sodium tetraborate Nutrition 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 239000007921 spray Substances 0.000 description 1
- 230000000087 stabilizing effect Effects 0.000 description 1
- 210000000130 stem cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 239000006188 syrup Substances 0.000 description 1
- 235000020357 syrup Nutrition 0.000 description 1
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 1
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 1
- OGIDPMRJRNCKJF-UHFFFAOYSA-N titanium oxide Inorganic materials [Ti]=O OGIDPMRJRNCKJF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000012929 tonicity agent Substances 0.000 description 1
- 235000010487 tragacanth Nutrition 0.000 description 1
- 239000000196 tragacanth Substances 0.000 description 1
- 229940116362 tragacanth Drugs 0.000 description 1
- 239000012581 transferrin Substances 0.000 description 1
- 229960001727 tretinoin Drugs 0.000 description 1
- QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H tricalcium bis(phosphate) Chemical compound [Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H 0.000 description 1
- 229940035722 triiodothyronine Drugs 0.000 description 1
- RYFMWSXOAZQYPI-UHFFFAOYSA-K trisodium phosphate Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[O-]P([O-])([O-])=O RYFMWSXOAZQYPI-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 201000006382 tuberculoid leprosy Diseases 0.000 description 1
- 241000701161 unidentified adenovirus Species 0.000 description 1
- VBEQCZHXXJYVRD-GACYYNSASA-N uroanthelone Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O)C(C)C)[C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC=1NC=NC=1)NC(=O)[C@H](CCSC)NC(=O)[C@H](CS)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CNC(=O)CNC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CS)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@H](CS)NC(=O)CNC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O)C(C)C)[C@@H](C)CC)C1=CC=C(O)C=C1 VBEQCZHXXJYVRD-GACYYNSASA-N 0.000 description 1
- 210000003556 vascular endothelial cell Anatomy 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000080 wetting agent Substances 0.000 description 1
- 239000003871 white petrolatum Substances 0.000 description 1
- 239000002759 woven fabric Substances 0.000 description 1
Landscapes
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
Description
ハンセン病の病型は、大別すると「類結核型」(tuberculoid leprosy、T型)と「らい腫型」(lepromatous leprosy、L型)とに分けられ、らい菌に対する宿主の免疫応答能力を反映している。類結核型は、細胞性免疫優位で小菌型とも呼ばれ、病巣や鼻粘膜からほとんど菌は検出されない。一方、らい腫型は、液性免疫優位で多菌型とも呼ばれ、病巣、特に鼻粘膜から多数のらい菌が検出される。このらい腫型患者の鼻汁が、ハンセン病の感染源であると考えられている。ハンセン病の感染様式については、以前は皮膚濃厚接触感染や創傷感染などが想定されてきたが、近年では、らい腫型患者の鼻汁に由来するエアロゾルに含まれるらい菌が上気道及び鼻粘膜から侵入し、感染すると考えられている(例えば、非特許文献1〜3参照)。
しかしながら、哺乳動物のシュワン細胞に感染するためには、その前に上皮細胞を通過しなければならないが、このらい菌の上皮細胞への侵入機構については、未だ解明がなされていないのが現状である。
しかしながら、らい菌のmce1Aの特定の領域(316〜486bp)にコードされるペプチド部分の全体又は一部が、らい菌の哺乳動物細胞(特に、上皮系細胞)への侵入活性を担う活性本体であることは、従来全く知られておらず、本発明者らによる新たな知見である。また、この、らい菌の哺乳動物細胞への侵入活性を担うペプチドを構成するアミノ酸配列は、従来知られていた結核菌のものとは配列が異なること、また、らい菌については、従来知られていた結核菌の侵入活性領域に対応した領域以外にも侵入活性が認められることなどからも、本発明に係る前記知見は、従来とは異なる、全く新たな知見であるということができる。
例えば、前記ペプチドは優れた哺乳動物細胞侵入能を有するので、(1)所望の物質を前記ペプチドと直接的又は間接的に結合させて作用させることにより、前記物質を所望の哺乳動物細胞内に効率的に移送することが可能であると考えられる。より具体的には、例えば、(i)薬剤を鼻腔粘膜や皮膚を介して投与する場合において、前記薬剤と前記ペプチドとを直接的又は間接的に結合させて投与することにより、前記薬剤の吸収をより促進させることができると考えられる。また、例えば、(ii)薬剤を標的細胞に移送する薬剤移送方法において、前記薬剤を前記ペプチドと直接的又は間接的に結合させて投与することにより、前記薬剤を所望の標的細胞により効率的に移送することができると考えられる。また、例えば、(iii)哺乳動物に対して免疫を行う方法において、所望の抗原を前記ペプチドと直接的又は間接的に結合させて投与することにより、より効率的に抗原を免疫細胞に移送することができると考えられる。
また、前記ペプチドは、(2)ハンセン病等のらい菌による感染症の予防又は治療にも有用であると考えられる。例えば、(i)前記ペプチドは、らい菌の哺乳動物への感染に関与すると考えられるタンパク質を構成するアミノ酸配列の一部からなることから、哺乳動物の体内に接種することにより、前記哺乳動物にらい菌に対する免疫を付与することができると考えられる。即ち、前記ペプチドは、らい菌による感染症を予防するワクチンとして使用できることが考えられる。また、例えば、(ii)前記ペプチドに対する抗体は、前記ペプチドに結合して前記ペプチドの哺乳動物細胞への侵入活性を妨げることにより、らい菌の哺乳動物への感染を抑制することができると考えられる。即ち、前記ペプチドに対する抗体は、らい菌による感染症の効果的な予防又は治療薬となり得ると考えられる。
<1> 哺乳動物細胞内に侵入する能力を有するペプチドであって、Val−Asn−Ala−Asp−Ile−Lys−Ala−Thr−Thr−Val−Phe−Gly−Gly−Lys−Tyr−Val−Ser−Leu−Thr−Thr−Pro−Glu−His−Pro−Ser−Gln−Lys−Arg−Leu−Thr−Pro−Gln−Thr−Val−Ile−Asp−Ala−Arg−Ser−Val−Thr−Thr−Glu−Ile−Asn−Thr−Leu−Phe−Gln−Thr−Ile−Thr−Leu−Ile−Ala−Glu−Lys(配列番号:1)で表されるアミノ酸配列の全体又は一部からなることを特徴とするペプチドである。
<2> Val−Asn−Ala−Asp−Ile−Lys−Ala−Thr−Thr−Val−Phe−Gly−Gly−Lys−Tyr−Val−Ser−Leu−Thr−Thr−Pro−Glu−His−Pro(配列番号:2)で表されるアミノ酸配列からなる前記<1>に記載のペプチドである。
<3> Ser−Gln−Lys−Arg−Leu−Thr−Pro−Gln−Thr−Val−Ile−Asp−Ala−Arg−Ser−Val−Thr−Thr−Glu−Ile−Asn−Thr(配列番号:3)で表されるアミノ酸配列からなる前記<1>に記載のペプチドである。
<4> Leu−Phe−Gln−Thr−Ile−Thr−Leu−Ile−Ala−Glu−Lys(配列番号:4)で表されるアミノ酸配列からなる前記<1>に記載のペプチドである。
<5> 哺乳動物細胞内に侵入する能力を有するペプチドであって、Val−Asn−Ala−Asp−Ile−Lys−Ala−Thr−Thr−Val−Phe−Gly−Gly−Lys−Tyr−Val−Ser−Leu−Thr−Thr−Pro−Glu−His−Pro−Ser−Gln−Lys−Arg−Leu−Thr−Pro−Gln−Thr−Val−Ile−Asp−Ala−Arg−Ser−Val−Thr−Thr−Glu−Ile−Asn−Thr−Leu−Phe−Gln−Thr−Ile−Thr−Leu−Ile−Ala−Glu−Lys(配列番号:1)で表されるアミノ酸配列の全体又は一部において1若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなることを特徴とするペプチドである。
<6> ペプチドが合成ペプチドである前記<1>から<5>のいずれかに記載のペプチドである。
<7> ペプチドが組換えペプチドである前記<1>から<5>のいずれかに記載のペプチドである。
<8> 哺乳動物細胞が上皮系細胞である前記<1>から<7>のいずれかに記載のペプチドである。
<10> 核酸がらい菌(Mycobacterium leprae)由来である前記<9>に記載の核酸である。
<12> 物質とペプチドとが直接的に結合した状態で含まれる前記<11>に記載の物質移送用剤である。
<13> 物質とペプチドとが間接的に結合した状態で含まれる前記<11>に記載の物質移送用剤である。
<14> 更に担体を含み、前記担体が物質及びペプチドの少なくともいずれかに直接的に結合した状態で含まれる前記<11>から<13>のいずれかに記載の物質移送用剤である。
<15> 担体がビーズである前記<14>に記載の物質移送用剤である。
<16> 哺乳動物細胞が上皮系細胞である前記<11>から<15>のいずれかに記載の物質移送用剤である。
<17> 物質が抗原である前記<11>から<16>のいずれかに記載の物質移送用剤である。
<18> 物質が抗原であり、哺乳動物細胞が免疫系細胞である前記<17>に記載の物質移送用剤である。
<19> ワクチンとして使用される前記<18>に記載の物質移送用剤である。
<20> 物質が薬剤である前記<11>から<16>のいずれかに記載の物質移送用剤である。
<21> 物質が薬剤であり、哺乳動物細胞が前記薬剤の標的細胞である前記<20>に記載の物質移送用剤である。
<23> 物質とペプチドとを直接的に結合させた状態で作用させる前記<22>に記載の物質移送方法である。
<24> 物質とペプチドとを間接的に結合させた状態で作用させる前記<22>に記載の物質移送方法である。
<25> 物質及びペプチドの少なくともいずれかを、担体に直接的に結合させた状態で作用させる前記<23>から<24>のいずれかに記載の物質移送方法である。
<26> 担体がビーズである前記<25>に記載の物質移送方法である。
<27> 哺乳動物細胞が上皮系細胞である前記<22>から<26>のいずれかに記載の物質移送方法である。
<28> 物質が抗原である前記<22>から<27>のいずれかに記載の物質移送方法である。
<29> 物質が抗原であり、哺乳動物細胞が免疫系細胞である前記<28>に記載の物質移送方法である。
<30> 予防接種方法として使用される前記<29>に記載の物質移送方法である。
<31> 物質が薬剤である前記<22>から<27>のいずれかに記載の物質移送方法である。
<32> 物質が薬剤であり、哺乳動物細胞が前記薬剤の標的細胞である前記<31>に記載の物質移送方法である。
<34> らい菌(Mycobacterium leprae)による哺乳動物の感染症を予防するための予防接種方法であって、前記<33>に記載のワクチンを哺乳動物に投与することを含むことを特徴とする予防接種方法である。
<35> 前記<1>から<8>のいずれかに記載のペプチドに対する抗体である。
<36> らい菌(Mycobacterium leprae)による哺乳動物の感染症を予防又は治療するための医薬であって、前記<35>に記載の抗体を含むことを特徴とする医薬である。
<37> らい菌(Mycobacterium leprae)による哺乳動物の感染症の予防又は治療方法であって、前記<35>に記載の抗体を哺乳動物に投与することを含むことを特徴とする予防又は治療方法である。
本発明のペプチドは、Val−Asn−Ala−Asp−Ile−Lys−Ala−Thr−Thr−Val−Phe−Gly−Gly−Lys−Tyr−Val−Ser−Leu−Thr−Thr−Pro−Glu−His−Pro−Ser−Gln−Lys−Arg−Leu−Thr−Pro−Gln−Thr−Val−Ile−Asp−Ala−Arg−Ser−Val−Thr−Thr−Glu−Ile−Asn−Thr−Leu−Phe−Gln−Thr−Ile−Thr−Leu−Ile−Ala−Glu−Lys(配列番号:1)で表されるアミノ酸配列の全体又は一部からなり、かつ、哺乳動物細胞内に侵入する能力を有するものである。
本発明者らは、らい菌のmce1A領域(NCBI−Gene ID:910890;1326bp)中316〜486bpにコードされる、前記配列番号:1で表されるアミノ酸配列の全体又は一部からなるペプチドが、哺乳動物細胞に対して優れた侵入活性を有することを見出した。
前記配列番号:1で表されるアミノ酸配列の一部からなるペプチドの具体例としては、例えば、Val−Asn−Ala−Asp−Ile−Lys−Ala−Thr−Thr−Val−Phe−Gly−Gly−Lys−Tyr−Val−Ser−Leu−Thr−Thr−Pro−Glu−His−Pro(配列番号:2)で表されるアミノ酸配列からなるペプチド、Ser−Gln−Lys−Arg−Leu−Thr−Pro−Gln−Thr−Val−Ile−Asp−Ala−Arg−Ser−Val−Thr−Thr−Glu−Ile−Asn−Thr(配列番号:3)で表されるアミノ酸配列からなるペプチド、及び、Leu−Phe−Gln−Thr−Ile−Thr−Leu−Ile−Ala−Glu−Lys(配列番号:4)で表されるアミノ酸配列からなるペプチドなどが挙げられる。これらのペプチドは全て、後述する実施例に示されるように、哺乳動物細胞に対して優れた侵入活性を有する。
なお、前記ペプチドとしては、哺乳動物細胞内に侵入する能力を有する限りは、前記配列番号:1で表されるアミノ酸配列の全体又は一部において、1若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなるものであってもよい。
前記ペプチドは、哺乳動物細胞内に侵入する能力を有する。
ここで、前記「哺乳動物細胞」の種類としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、口腔上皮細胞、鼻腔上皮細胞、消化管上皮細胞、気管支上皮細胞、皮膚上皮細胞等の上皮系細胞;血管内皮細胞、角膜内皮細胞等の内皮系細胞;骨細胞、軟骨細胞、脂肪細胞、肝細胞等の間葉系細胞;樹状細胞、マクロファージ、リンパ球等の免疫系細胞;胚性幹細胞、成体幹細胞等の幹細胞;などが挙げられる。中でも、前記哺乳動物細胞としては、上皮系細胞が好ましい。なお、前記哺乳動物細胞は、体内に存在する細胞であってもよいし、体外で培養された細胞であってもよい。
また、前記「哺乳動物」の種類としても、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、ヒト、マウス、ラット、ウシ、ブタ、サル、イヌ、ネコなどが挙げられる。
また、前記「哺乳動物細胞内に侵入する能力」とは、前記ペプチドを前記哺乳動物細胞に作用させた場合に、前記ペプチドが前記哺乳動物細胞の中に取り込まれる性質のことをいう。前記ペプチドが前記哺乳動物細胞内に侵入する能力を有していることは、例えば、培養した前記哺乳動物細胞に、前記ペプチドを単独で、或いは、所望の物質と直接的又は間接的に結合させた状態で添加し、インキュベートした後に、電子顕微鏡を用いて直接、或いは、前記ペプチド又は前記ペプチドに結合させた物質に付した標識のシグナルを検出することにより、確認することができる。
前記ペプチドの入手方法としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができる。例えば、前記ペプチドは、合成により得られた合成ペプチドであってもよいし、遺伝子組換え技術により得られた組換えペプチドであってもよい。前記ペプチドを得るための前記合成や前記組換えの手法としても、特に制限はなく、例えば、当該技術分野において公知の手法の中から、目的に応じて適宜選択することができる。
本発明の核酸は、前記した本発明のペプチドを構成するアミノ酸配列をコードする核酸である。
前記核酸としては、前記した本発明のペプチドを構成するアミノ酸配列をコードするものであれば、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができるが、中でも、らい菌(Mycobacterium leprae)由来の核酸であることが好ましい。
なお、前記核酸は、DNAであってもよいし、RNAであってもよい。
前記核酸の入手方法としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、らい菌のDNA或いはRNAを抽出して鋳型とし、らい菌のmce1A遺伝子領域(NCBI−Gene ID:910890;1326bp)中、前記配列番号:1で表されるペプチドをコードする遺伝子領域(316〜486bp)の全体又は一部を、PCR法やRT−PCR法を用いて増幅することにより得ることができる。
本発明の物質移送用剤は、物質を哺乳動物細胞内に侵入させるための物質移送用剤であり、少なくとも、前記物質と前記した本発明のペプチドとを含んでなる。
また、本発明の物質移送方法は、物質を哺乳動物細胞内に侵入させる物質移送方法であり、少なくとも、前記物質と前記した本発明のペプチドとを、前記哺乳動物細胞に作用させることを含む。
前記「ペプチド」、前記「哺乳動物細胞」としては、前記した本発明のペプチドの項目に記載した通りである。
前記「物質」としては、特に制限はなく、前記哺乳動物細胞内に侵入させたい任意の物質を、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、抗原、薬剤などが挙げられる。
前記抗原としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、体内に抗体を産生させたい病原体の一部等が挙げられる。例えば、前記病原体の一部を前記抗原として使用し、前記抗原と前記ペプチドとを含む物質移送用剤を、免疫系細胞、例えば、樹状細胞に作用させることにより、前記抗原をより効率的に前記樹状細胞に侵入させることができ、前記病原体に対する抗体を、より効率的に産生させることができる。即ち、前記抗原と前記ペプチドとを含む物質移送用剤は、前記哺乳動物に前記病原体に対する免疫をより効率的に付与することができることから、例えば、前記病原体に対するワクチンとして好適に利用可能である。
前記薬剤としても、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、抗がん剤、抗菌剤、抗ウイルス剤などが挙げられる。例えば、前記抗がん剤と前記ペプチドとを含む物質移送用剤を、所望のがん細胞に作用させることにより、前記抗がん剤をより効率的に前記がん細胞に侵入させることができ、したがって、前記抗がん剤をより効果的に作用させることができる。
前記物質移送用剤の態様としては、前記物質と前記ペプチドとを含むものであれば特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、前記物質と前記ペプチドとが直接的に結合した状態で含まれるものであってもよいし、前記物質と前記ペプチドとが間接的に結合した状態で含まれるものであってもよい。前記物質と前記ペプチドとが直接的には結合していない状態であっても、例えば、後述する担体等を介して前記物質と前記ペプチドとを間接的に結合した状態とすることにより、前記物質を所望の哺乳動物細胞に侵入させることができる。
前記物質と前記ペプチドとを直接的に結合させる方法としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、前記物質全体に前記ペプチドを被覆させてもよいし、前記物質の一部分に前記ペプチドを接着させてもよい。ここで、前記ペプチドは、少なくともその一部が前記物質の表面に露出していることが好ましい。前記ペプチドが前記物質に覆われた状態であると、前記物質を前記哺乳動物細胞内に侵入させる能力を発揮することができない場合があると考えられる。なお、前記結合時の、前記物質と前記ペプチドとの使用量比としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができる。
前記物質と前記ペプチドとを間接的に結合させる方法としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、前記物質と前記ペプチド以外に、適宜その他の成分を用い、前記その他の成分を介して、前記物質と前記ペプチドとを間接的に結合させることができる。前記その他の成分の種類としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、後述するような担体等が挙げられる。なお、ここでも、前記ペプチドは、少なくともその一部が前記その他の成分等の表面に露出していることが好ましい。前記ペプチドが前記その他の成分等に覆われた状態であると、前記物質を前記哺乳動物細胞内に侵入させる能力を発揮することができない場合があると考えられる。なお、前記結合時の、前記その他の成分、前記物質、及び前記ペプチドの各使用量比としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができる。
中でも、前記物質移送用剤は、前記物質と前記ペプチド以外に、更に担体を含み、かつ、前記担体が前記物質及び前記ペプチドの少なくともいずれかに直接的に結合した状態で含まれていることが好ましい。前記担体の種類としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、コロイダル金粒子、ポリスチレン粒子、ラテックス粒子等の各種ビーズなどが挙げられる。前記担体を用いると、例えば、前記ペプチドと結合した前記担体に、前記物質を直接コーティングさせた形態の前記物質移送用剤を作製し易い点で、有利である。なお、前記物質移送用剤が前記担体を含む場合においても、前記物質と前記ペプチドとは、互いに直接的に結合した状態にあってもよいし、間接的に結合した状態にあってもよい。
また、前記担体と、前記物質及び前記ペプチドの少なくともいずれかとを直接的に結合させる方法としては、特に制限はなく、前記した、前記物質と前記ペプチドとを直接的に結合させる方法同様、目的に応じて適宜選択することができる。なお、ここでも、前記ペプチドは、少なくともその一部が前記担体等の表面に露出していることが好ましい。前記ペプチドが前記担体等に覆われた状態であると、前記物質を前記哺乳動物細胞内に侵入させる能力を発揮することができない場合があると考えられる。なお、前記結合時の、前記担体、前記物質、及び前記ペプチドの各使用量比としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができる。
前記物質移送用剤の製造方法としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、前記物質、前記ペプチド、更に必要に応じて前記担体を、それぞれ前記したような任意の方法で直接的又は間接的に結合させることにより、製造することができる。
前記物質と前記ペプチドとを前記哺乳動物細胞に作用させる方法としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、培養した前記哺乳動物細胞の培養液中に前記物質移送用剤を添加してもよいし、前記物質移送用剤を、前記哺乳動物の体内に所望の方法で投与してもよい。前記方法は、前記物質移送用剤の態様に応じて、適宜選択することができる。
本発明のワクチンは、らい菌(Mycobacterium leprae)による哺乳動物の感染症を予防するためのワクチンであり、前記した本発明のペプチドを含み、更に必要に応じてその他の成分を含んでなる。
前記らい菌による感染症としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、ハンセン病などが挙げられる。
前記ペプチドとしては、前記した本発明のペプチドの項目に記載した通りである。前記ペプチドは、らい菌の哺乳動物への感染に関与すると考えられるタンパク質を構成するアミノ酸配列の一部からなるものであるため、前記ペプチドを哺乳動物に予防的に投与することにより、哺乳動物の体内にらい菌に対する免疫を付与することができ、らい菌による感染症を予防することができると考えられる。即ち、前記ペプチドは、前記ワクチンの有効成分となり得ると考えられる。
前記ワクチン中の、前記ペプチドの含有量としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができる。
前記その他の成分としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、医薬的に許容され得る担体などが挙げられる。前記医薬的に許容され得る担体としては、特に制限はなく、例えば、後述する本発明の医薬の項目に記載されるような各種担体などが挙げられる。また、前記ワクチンの剤型としても、特に制限はなく、例えば、後述する本発明の医薬の項目に記載されるような各種剤型などが挙げられる。
前記ワクチン中の、前記その他の成分の含有量としても、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができる。
前記ワクチンの製造方法としては、特に制限はなく、例えば、所望の剤型等に応じて適宜選択することができる。
前記ワクチンは、例えば、哺乳動物に投与することにより使用することができる。
前記ワクチンの投与対象となる哺乳動物としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、ヒト、マウス、ラット、ウシ、ブタ、サル、イヌ、ネコなどが挙げられる。
前記ワクチンの投与方法としては、特に制限はなく、前記ワクチンの剤型等に応じて適宜選択することができ、例えば、経口投与、腹腔内投与、血液中への注射、腸内への注入、鼻腔内への投与などが挙げられる。
前記ワクチンの投与量、投与回数としては、特に制限はなく、投与対象である哺乳動物の年齢、体重、所望の効果の程度等に応じて適宜選択することができる。
本発明の抗体は、前記した本発明のペプチドに対する抗体である。
前記抗体としては、前記ペプチドを認識可能な抗体であれば特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、前記ペプチドそのもの、又は、前記ペプチドを含むポリペプチド、タンパク質を抗原として用い、公知の手法により、適宜作製することができる。
前記抗体はポリクローナル抗体であってもよいし、モノクローナル抗体であってもよい。また、前記抗体は、標識されていてもよい。
本発明の医薬は、らい菌(Mycobacterium leprae)による哺乳動物の感染症を予防又は治療するための医薬であり、前記した本発明の抗体を含み、更に必要に応じてその他の成分を含んでなる。
前記らい菌による感染症としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、ハンセン病などが挙げられる。
前記抗体としては、前記した本発明の抗体の項目に記載した通りである。前記抗体は、らい菌の哺乳動物細胞への侵入を担う活性本体である前記ペプチドに対する抗体であるため、前記抗体をらい菌に作用させることにより、らい菌の哺乳動物細胞に対する侵入活性を阻害することができると考えられる。したがって、前記抗体は、前記医薬の有効成分となり得る。
前記医薬中、前記抗体の含有量としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができる。
前記その他の成分としては、特に制限はなく、本発明の効果を損なわない範囲内で、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、医薬的に許容され得る担体などが挙げられる。前記担体としても、特に制限はなく、例えば、後述する前記医薬の剤型等に応じて適宜選択することができる。また、前記医薬中の前記その他の成分の含有量としても、特に制限はなく、目的に応じて、適宜選択することができる。
前記医薬の剤型としては、特に制限はなく、例えば、後述するような所望の投与方法に応じて適宜選択することができ、例えば、経口固形剤(錠剤、被覆錠剤、顆粒剤、散剤、カプセル剤等)、経口液剤(内服液剤、シロップ剤、エリキシル剤等)、注射剤(溶液、懸濁液、用事溶解用固形剤等)、軟膏剤、貼付剤、ゲル剤、クリーム剤、外用散剤、スプレー剤、吸入散剤などが挙げられる。
前記賦形剤としては、例えば、乳糖、白糖、塩化ナトリウム、ブドウ糖、デンプン、炭酸カルシウム、カオリン、微結晶セルロース、珪酸などが挙げられる。前記結合剤としては、例えば、水、エタノール、プロパノール、単シロップ、ブドウ糖液、デンプン液、ゼラチン液、カルボキシメチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルスターチ、メチルセルロース、エチルセルロース、シェラック、リン酸カルシウム、ポリビニルピロリドンなどが挙げられる。前記崩壊剤としては、例えば、乾燥デンプン、アルギン酸ナトリウム、カンテン末、炭酸水素ナトリウム、炭酸カルシウム、ラウリル硫酸ナトリウム、ステアリン酸モノグリセリド、乳糖などが挙げられる。前記滑沢剤としては、例えば、精製タルク、ステアリン酸塩、ホウ砂、ポリエチレングリコールなどが挙げられる。前記着色剤としては、例えば、酸化チタン、酸化鉄などが挙げられる。前記矯味・矯臭剤としては、例えば、白糖、橙皮、クエン酸、酒石酸などが挙げられる。
前記矯味・矯臭剤としては、例えば、白糖、橙皮、クエン酸、酒石酸などが挙げられる。前記緩衝剤としては、例えば、クエン酸ナトリウムなどが挙げられる。前記安定化剤としては、例えば、トラガント、アラビアゴム、ゼラチンなどが挙げられる。
前記pH調節剤及び前記緩衝剤としては、例えば、クエン酸ナトリウム、酢酸ナトリウム、リン酸ナトリウムなどが挙げられる。前記安定化剤としては、例えば、ピロ亜硫酸ナトリウム、EDTA、チオグリコール酸、チオ乳酸などが挙げられる。前記等張化剤としては、例えば、塩化ナトリウム、ブドウ糖などが挙げられる。前記局所麻酔剤としては、例えば、塩酸プロカイン、塩酸リドカインなどが挙げられる。
前記基剤としては、例えば、流動パラフィン、白色ワセリン、サラシミツロウ、オクチルドデシルアルコール、パラフィンなどが挙げられる。前記保存剤としては、例えば、パラオキシ安息香酸メチル、パラオキシ安息香酸エチル、パラオキシ安息香酸プロピルなどが挙げられる。
前記医薬は、例えば、らい菌による感染症を患う患者、例えば、ハンセン病の患者に投与することにより使用することができる。
前記医薬の投与対象となる哺乳動物としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、ヒト、マウス、ラット、ウシ、ブタ、サル、イヌ、ネコなどが挙げられる。
前記医薬の投与方法としては、特に制限はなく、前記医薬の剤型等に応じて適宜選択することができ、例えば、経口投与、腹腔内投与、血液中への注射、腸内への注入、鼻腔内への投与などが挙げられる。
前記医薬の投与量、投与回数としては、特に制限はなく、投与対象である患者の年齢、体重、所望の効果の程度等に応じて適宜選択することができる。
また、前記医薬の投与時期としても、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、予防的に投与されてもよいし、治療的に投与されてもよい。
本発明のペプチドの哺乳動物細胞に対する侵入能を以下のようにして検討した。
−細胞培養−
哺乳動物細胞としては、ヒト上皮系細胞である、ヒト子宮頸癌由来のHeLa細胞(ATCC CCL−2)、及び、ヒト正常気管支上皮細胞由来のBEAS−2B細胞(ATCC CRL−9609)を用いた。HeLa細胞は、50μg/ml ゲンタマイシン(GM)、10% ウシ胎児血清(FBS;ICN Biomedicals社)を加えたダルベッコ変法イーグル培地(DME;GIBCO社)を用いて培養した。BEAS−2B細胞はアデノウイルス12−サルウイルス−40ハイブリッドウイルス(adeno virus 12−simian virus−40 hybrid virus)により形質転換させたヒト正常気管支上皮細胞で、10% FBS、13μg/ml ウシ下垂体抽出物(bovine pituitary extract)、0.5ng/ml 組換え型上皮細胞成長因子(recombinant epidermal growth factor)、0.5ng/ml ヒドロコルチゾン、0.5ng/ml エピネフリン、10μg/ml トランスフェリン、5μg/ml インスリン、0.1μg/ml レチノイン酸、6.5ng/ml トリヨードチロニン、50μg/ml GM、50ng/ml アンホテリシン−Bを加えた気管支上皮細胞用基礎培地(Bronchial Epithelial Cell Basal Medium:BEBM;Cambrex Bio Science社)を用いて培養した。両細胞ともAmerican Type Culture Collection(ATCC)より購入した。
−−試験用ペプチド−−
本発明のペプチドのうち、らい菌のmce1A領域(1326bp)中、316〜387bp領域にコードされるペプチド(Val−Asn−Ala−Asp−Ile−Lys−Ala−Thr−Thr−Val−Phe−Gly−Gly−Lys−Tyr−Val−Ser−Leu−Thr−Thr−Pro−Glu−His−Pro、配列番号:2)、388〜453bp領域にコードされるペプチド(Ser−Gln−Lys−Arg−Leu−Thr−Pro−Gln−Thr−Val−Ile−Asp−Ala−Arg−Ser−Val−Thr−Thr−Glu−Ile−Asn−Thr、配列番号:3)、及び、454〜486bp領域にコードされるペプチド(Leu−Phe−Gln−Thr−Ile−Thr−Leu−Ile−Ala−Glu−Lys、配列番号:4)を、それぞれ以下のようにして合成した。
また、比較対照として、本発明の範囲外である、らい菌のmce1A領域中487〜531bp領域をコードするペプチド(Val−Asp−Pro−Ile−Lys−Leu−Asn−Leu−Thr−Leu−Ser−Ala−Ala−Ala−Gln、配列番号:5)を、以下のようにして合成した。(各領域については図1を参照。)
前記配列番号:2〜配列番号:5の各ペプチドは、シグマジェノシス社に依頼して合成した。合成は、ABacusペプチドシンセサイザー(シグマ社)を用いて、9−フルオレニルメチルオキシカルボニル(Fmoc)法による固相法にて行い、ペプチドの純度をAUTOFLEX 01型質量分析装置(BRUKER社)及びLC8020高速液体クロマトグラムシステム(TOSOH社)を用いて確認した。
−−コントロールペプチド−−
結核菌(M.tuberculosis)では、InvIIIと称される領域に細胞侵入活性領域が存在する事が報告されている。そこで、結核菌中の198921〜198987bpをこのInvIII領域とし、本領域にコードされるペプチド(Thr−Lys−Arg−Arg−Ile−Thr−Pro−Lys−Asp−Val−Ile−Asp−Val−Arg−Ser−Val−Thr−Thr−Glu−Ile−Asn−Thr、配列番号:9)をポジティブコントロールペプチドとして、オペロン バイオテクノロジー株式会社に依頼して合成した。合成は、433Aペプチドシンセサイザー(Applied Biosystems社)を用いて、9−フルオレニルメチルオキシカルボニル(Fmoc)法による固相法にて行い、ペプチドの純度をVoyager−DE Pro MALDI−TOF型質量分析装置(Applied Biosystems社)及びModel1050高速液体クロマトグラフシステム(Agilent technologies社)を用いて確認した。
また、侵入活性を持たないネガティブコントロールペプチドとしての、結核菌の199021〜199551bpにコードされるペプチド(Val−Asp−Pro−Val−Lys−Leu−Asn−Leu−Thr−Leu−Ser−Ala−Ala−Ala−Glu、配列番号:10)は、前記配列番号:2〜配列番号:5の各ペプチドと同様に、シグマジェノシス社に依頼して合成した。
4.66×1012/mlのコロイダル金粒子(colloidal gold particles)液(直径10nm;Sigma社)8mlを遠心し、上清を除去した。0.5mg/mlに調整した各ペプチド及びBSA溶液0.5mlで、コロイダル金粒子(colloidal gold particles)を再浮遊させた後、室温で30分反応させ、各ペプチド及びBSAをコロイダル金粒子(colloidal gold particles)にコートした。安定化液(stabilizing solution;0.15M NaCl、0.05M Tris−Hcl pH9、0.5g/ml カーボワックス(Carbowax)20−M)0.9mlを加えて遠心し、PBS−(カルシウム・マグネシウム不含PBS)で1回遠心洗浄した後、25μlのPBS−に再浮遊させた。ペプチドコートコロイダル金粒子(colloidal gold particles)溶液を、1.05×106cellsに単層培養したHeLa細胞及びBEAS−2S細胞に添加し、CO2インキュベーターにて37℃で6時間反応させた。培養終了後、細胞表面をPBS−で洗浄し、セルスクレーパーを用いてHeLa細胞及びBEAS−2S細胞を回収した。
回収した各HeLa細胞及びBEAS−2S細胞を、0.1M カコジル酸バッファー(cacodylic acid buffer)を用いて1回遠心洗浄し、3% グルタールアルデヒドを加えた1M カコジル酸バッファー(cacodylic acid buffer)を加え、4℃にて一晩固定した。固定後、1% 四酸化オスミウムを加えたPBS−で処理し、エタノールで脱水した。Spurrの低粘性包埋剤(Spurr’s low−viscosity embedding media)にて包埋し、超薄切標本を酢酸ウラニル及びクエン酸鉛を用いて染色した。JEM−1230電子顕微鏡(日本電子株式会社(JEOL))を用いて、各ペプチドコートビーズのHeLa細胞及びBEAS−2B細胞への侵入の有無を観察した。
電子顕微鏡を用いた観察により、ポジティブコントロールである、結核菌のInvIII領域にコードされるペプチド(配列番号:9)については、細胞質内にペプチドコートビーズが侵入している像が認められた(図2B)。また、InvIII領域に相当する、らい菌のmce1A領域中388〜453bp領域にコードされるペプチド(配列番号:3)についても、細胞質内に多数のペプチドコートビーズが侵入している像が認められた(図2A)。また、らい菌については、前記388〜453bp領域の前後の、316〜387bp領域、454〜486bp領域にコードされるペプチド(それぞれ、配列番号:2、配列番号:4)についても、BEAS−2B細胞への侵入が認められた(図2A)。
一方で、比較対照であるらい菌のmce1A領域中487〜531bp領域をコードするペプチド(配列番号:5)については、結核菌のネガティブコントロールペプチド(配列番号:10)同様、細胞への侵入像は認められなかった(図2A、図2B)。
哺乳動物細胞に対して侵入能を有するペプチドが前記ペプチドに対する抗体により受ける影響を、以下のようにして検討した。
−抗体作製−
らい菌のmce1A領域中、316〜921bp領域(その一部に本発明のペプチドをコードする領域を含む)にコードされるタンパク質(以下、「r−lep27kDa」と称することがある)に対する抗体(抗r−lep27kDa抗体)を、以下のようにして作製した。
−−抗原タンパク質(r−lep27kDa)の準備−−
Chitaleらの方法(Chitale,S.ら(2001)Recombinant Mycobacterium tuberculosis protein associated with mammalian cell entry.Cell.Microbiol 3;247−254.参照)に従い、らい菌のM.leprae Thai53株の全DNAをテンプレートとし、r−lep27kDaをコードする遺伝子領域(3092761〜3093366bp:mce1A領域中316〜921bp領域)をPCR法にて増幅し、pQE30ベクター(QIAGEN社)のSacI、HindIII間に組み込んだ。エレクトロポレーション法(gene pulserII;BioRad社)にて宿主大腸菌であるM15(pRep4)株(QIAGEN社)に導入し、ヒスチジン(HIS)融合タンパク質として発現させた。r−lep27kDaタンパク質を、イソプロピル−β−D−チオガラクトピラノシド(IPTG)存在下で誘導発現させ、QIAGEN社の精製プロトコルに従い、8M 尿素又は6M グアニジン変性条件下でNi−NTAアガロースカラム(QIAGEN社)を用いて精製した。1mM ジチオスレイトール(Sigma社)、0.1mM フッ化フェニルメチルスルホニル(Sigma社)の存在下で、尿素またはグアニジンの濃度を段階的に下げながら、透析法によりタンパク質の立体構造を再構築し、溶媒をリン酸緩衝食塩水(PBS−)に置換した。
−−免疫−−
Ni−NTAカラムを用いて精製したr−lep27kDaタンパク質を、SDS−PAGEにて展開し、クマシーブリリアントブルーR−250で染色後、目的タンパクに相当するバンドを切り出した。切り出したバンド内のタンパク質をモデル422エレクトロエリューター(Model422electroeluter;BioRad社)を用いて回収し、PBS−で透析した。透析後のタンパク質溶液とフロイント不完全アジュバント(FIA;DIFCO Laboratories社)を1:1の割合で混合し、BALB/cマウスの皮下に数カ所に分けて合計150μg免疫した。2週間おきに5回接種した後、血清を回収し、これを抗r−lep27kDaHIS(抗r−lep27kDa抗体)とした。
Casaliらの方法に従い(Casali,N.ら(2002)Invasion activety of a Mycobacterium tuberculosis peptide presented by the Escherichia coli AIDA autotransporter.Infect Immun 70;6846−6852.参照)、らい菌の以下各遺伝子領域(lep316;3092761〜3092976bp(mce1A領域中316〜531bp)、lep532;3092977〜3093198bp(mce1A領域中532〜753bp)、lep754;3093199〜3093366bp(mce1A領域中754〜921bp))をPCR法にて増幅し、AIDA発現用ベクターであるpMK90ベクターのXmaI、XbaI間に組み込んだ。エレクトロポレーション法にて宿主大腸菌であるUT4400株に導入し、各領域にコードされるポリペプチド鎖を菌体表面に表出させた組換え大腸菌UT4400/lep316、UT4400/lep532、UT4400/lep754をそれぞれ作成した。なお、pMK90ベクター及びUT4400はカルファルニア大学バークレー校のLee W.Riley教授より分与されたものを使用した(例えば、INFECTION AND IMMUNITY,Dec.2002,p.6846−6852参照)。pMK90ベクターに組み込むことによって、各領域にコードされるアミノ酸配列が、ポリペプチド鎖として外膜表示される。なお、各領域のアミノ酸配列は次の通りである。(各領域については図3参照。)
lep316;Val−Asn−Ala−Asp−Ile−Lys−Ala−Thr−Thr−Val−Phe−Gly−Gly−Lys−Tyr−Val−Ser−Leu−Thr−Thr−Pro−Glu−His−Pro−Ser−Gln−Lys−Arg−Leu−Thr−Pro−Gln−Thr−Val−Ile−Asp−Ala−Arg−Ser−Val−Thr−Thr−Glu−Ile−Asn−Thr−Leu−Phe−Gln−Thr−Ile−Thr−Leu−Ile−Ala−Glu−Lys−Val−Asp−Pro−Ile−Lys−Leu−Asn−Leu−Thr−Leu−Ser−Ala−Ala−Ala−Gln(配列番号:6、本発明のペプチドを構成するアミノ酸配列が含まれる。)
lep532;Ser−Leu−Ala−Gly−Leu−Gly−Glu−Arg−Phe−Gly−Gln−Ser−Ile−Val−Asn−Gly−Asn−Ser−Val−Leu−Asp−Asp−Val−Asn−Ser−Gln−Leu−Pro−Gln−Ala−Arg−His−Asp−Ile−Gln−Gln−Leu−Ala−Ser−Leu−Gly−Asp−Thr−Tyr−Ala−Asn−Ser−Ala−Ser−Asp−Phe−Phe−Asp−Phe−Leu−Asn−Asn−Ser−Ile−Val−Thr−Ser−Arg−Thr−Ile−Asn−Gln−Gln−Gln−Lys−Asp−Leu−Asp−Gln(配列番号:7、本発明のペプチドを構成するアミノ酸配列は含まれない。)
lep754;Val−Leu−Leu−Ala−Ala−Val−Gly−Phe−Gly−Asn−Thr−Gly−Ala−Asp−Ile−Phe−Ser−Arg−Ser−Gly−Pro−Tyr−Leu−Ala−Arg−Gly−Ala−Ala−Asp−Leu−Val−Pro−Thr−Ala−Gln−Leu−Leu−Asp−Thr−Tyr−Ser−Pro−Ala−Ile−Phe−Cys−Thr−Leu−Arg−Asn−Tyr−His−Asp−Ile−Glu−Pro(配列番号:8、本発明のペプチドを構成するアミノ酸配列は含まれない。)
各AIDA外膜表示大腸菌を5mlの50μg/ml カルベニシリン(Sigma社)添加Luria−Bertani培地(LB培地;Invitrogen社)にて37℃、16時間振盪培養した前培養菌液を、20mlの新鮮LB培地に1/100量接種し、37℃で3時間振盪培養を行った。培養終了後、4℃、4000×gで10分の遠心により集菌し、PBS−に再浮遊させた後、OD600=1.0;1×108CFU/mlを指標にPBS−を用いて1×109CFU/mlに調整した。単層培養した1.15×106cellsのHeLa細胞及びBEAS−2B細胞の培地を抗生剤不含培地に交換した後、各AIDA外膜表示大腸菌を2.3×107CFU/ml添加し(細胞:菌=1:100)、CO2インキュベーターにて37℃で6〜9時間(HeLa細胞は9時間、BEAS−2B細胞は6時間)培養した。培養終了後、細胞表面をPBS−で洗浄し、セルスクレーパーを用いて細胞を回収した。
回収した各細胞については、実施例1と同様に、標本を作製し、各AIDA外膜表示大腸菌の各細胞への侵入の有無を、電子顕微鏡を用いて観察した。
前記で作製した前記抗r−lep27kDa抗体が、前記大腸菌表面に発現した各ポリペプチド鎖を認識する事を確認するため、抗r−lep27kDa抗体を一次抗体として蛍光免疫染色を行った。LB培地で培養した各AIDA外膜表示大腸菌、及び対照としてUT4400をPBS−で遠心洗浄し、抗r−lep27kDa抗体を1/100量添加し、氷中で30分反応させた。2% FCS、0.1% アジ化ナトリウム添加PBS−で2回洗浄後、FITC標識抗マウスIgG抗体(CHEMICON社)を1/70量添加し、氷中で30分反応させた。同様に洗浄し、0.5% パラホルムアルデヒド、2% FCS添加PBS−で固定後、ZEISS Axiovert200透過光・蛍光用倒立顕微鏡を用いて観察した。
1×108CFU/mlに調整したUT4400株及び各AIDA外膜表示大腸菌液に、抗r−lep27kDa抗体を1/1000量(約28.4μg)添加し、ローテーターを用いて4℃で一晩反応させ、抗体処理菌とした。また、抗r−lep27kDa抗体を添加せず、同様に反応させたUT4400株及び各AIDA外膜表示大腸菌液を抗体非処理菌とした。24ウェルプレートに1×105細胞/ウェルで単層培養したBEAS−2B細胞の培地を抗生剤不含BEBM培地に交換した後、抗体処理菌及び非処理菌を、細胞:菌=1:100の割合で添加した。培養中に増殖した菌に対応するため、抗体処理菌を添加するウェルにのみ抗r−lep27kDa抗体を1/1000量(28.4μg)加えた。CO2インキュベーターにて37℃で3時間培養後、細胞外の菌を殺菌するため、100μg/ml GM添加BEBM培地に交換し、更に2時間インキュベートした。細胞表面をPBS−で洗浄後、0.1%TritonX−100加PBS−を1ml/ウェル加え、細胞を破壊し、細胞内の菌を回収した。回収した菌液をPBS−で十段階希釈した後、ハートインフュージョン(Heart Infusion)寒天培地(Nissui社)に塗布した。37℃で一晩培養した後、コロニーを算定し細胞内侵入菌数とした。
まず、抗体無添加の場合の、各AIDA外膜表示大腸菌のHeLa細胞及びBEAS−2B細胞への侵入能を電子顕微鏡を用いて検討したところ、lep316(本発明のペプチドを構成するアミノ酸配列を含む)を表出させた大腸菌(UT4400/lep316)では、細胞質内に多数の大腸菌が侵入していた。一方で、lep532、lep754(いずれも本発明のペプチドを構成するアミノ酸配列を含まない)を表出させた大腸菌(UT4400/lep532、UT4400/lep754)、及び対照であるUT4400では、細胞周囲に大腸菌の存在は認められるものの、細胞質内への侵入は認められなかった(図4A、図4B)。
これらの結果から、大腸菌の菌体表面に発現させた、316〜531bp(本発明のペプチドをコードする領域を含む)にコードされるポリペプチド鎖を抗体で被覆する事により、前記ポリペプチド鎖の細胞への侵入活性が抑制される事が示された。
Claims (11)
- 哺乳動物の上皮細胞内に侵入する能力を有するペプチドであって、Val−Asn−Ala−Asp−Ile−Lys−Ala−Thr−Thr−Val−Phe−Gly−Gly−Lys−Tyr−Val−Ser−Leu−Thr−Thr−Pro−Glu−His−Pro(配列番号:2)で表されるアミノ酸配列、Ser−Gln−Lys−Arg−Leu−Thr−Pro−Gln−Thr−Val−Ile−Asp−Ala−Arg−Ser−Val−Thr−Thr−Glu−Ile−Asn−Thr(配列番号:3)で表されるアミノ酸配列、及びLeu−Phe−Gln−Thr−Ile−Thr−Leu−Ile−Ala−Glu−Lys(配列番号:4)で表されるアミノ酸配列のいずれかからなることを特徴とするペプチド。
- ペプチドが合成ペプチドである請求項1に記載のペプチド。
- ペプチドが組換えペプチドである請求項1に記載のペプチド。
- 請求項1から3のいずれかに記載のペプチドをコードすることを特徴とする核酸。
- 核酸がらい菌(Mycobacterium leprae)由来である請求項4に記載の核酸。
- 物質を、哺乳動物の上皮細胞内に侵入させるための物質移送用剤であって、前記物質と請求項1から3のいずれかに記載のペプチドとを含むことを特徴とする物質移送用剤。
- 物質が抗原である請求項6に記載の物質移送用剤。
- 物質が薬剤である請求項6に記載の物質移送用剤。
- 物質を、ヒトを除く哺乳動物細胞の上皮細胞内及び上皮細胞の培養細胞内の少なくともいずれかに侵入させるための物質移送用方法であって、
前記物質と請求項1から3のいずれかに記載のペプチドとを前記哺乳動物細胞の上皮細胞及び上皮細胞の培養細胞の少なくともいずれかに作用させることを特徴とする物質移送方法。 - 物質が抗原である請求項9に記載の物質移送方法。
- 物質が薬剤である請求項9に記載の物質移送方法。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP2006347090A JP5086633B2 (ja) | 2006-12-25 | 2006-12-25 | 細胞内に侵入する能力を有するペプチド及び核酸、物質を細胞内に侵入させるための物質移送用剤及び物質移送方法、並びに、らい菌による感染症を予防又は治療するためのワクチン、抗体及び医薬 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP2006347090A JP5086633B2 (ja) | 2006-12-25 | 2006-12-25 | 細胞内に侵入する能力を有するペプチド及び核酸、物質を細胞内に侵入させるための物質移送用剤及び物質移送方法、並びに、らい菌による感染症を予防又は治療するためのワクチン、抗体及び医薬 |
Related Child Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2012180114A Division JP5685562B2 (ja) | 2012-08-15 | 2012-08-15 | らい菌による感染症を予防又は治療するためのワクチン、抗体及び医薬 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2008154510A JP2008154510A (ja) | 2008-07-10 |
JP5086633B2 true JP5086633B2 (ja) | 2012-11-28 |
Family
ID=39656096
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2006347090A Active JP5086633B2 (ja) | 2006-12-25 | 2006-12-25 | 細胞内に侵入する能力を有するペプチド及び核酸、物質を細胞内に侵入させるための物質移送用剤及び物質移送方法、並びに、らい菌による感染症を予防又は治療するためのワクチン、抗体及び医薬 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
JP (1) | JP5086633B2 (ja) |
-
2006
- 2006-12-25 JP JP2006347090A patent/JP5086633B2/ja active Active
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
JP2008154510A (ja) | 2008-07-10 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
US9962434B2 (en) | Compositions and methods for treatment of microbial infections | |
Ribelles et al. | Protection against human papillomavirus type 16-induced tumors in mice using non-genetically modified lactic acid bacteria displaying E7 antigen at its surface | |
JP2007504144A (ja) | セリンプロテアーゼ活性阻害因子、ならびに細菌感染の治療法および組成物におけるその使用方法 | |
CN108779482B (zh) | 工程化肠道共生细菌在其外膜囊泡(omv)中表达异源蛋白质以递送至胃肠道 | |
CN101473028B (zh) | 重组乳杆菌及其用途 | |
KR101630858B1 (ko) | 항원 펩타이드-페리틴 융합단백질 및 이를 포함하는 백신 조성물 | |
JP2005538954A (ja) | 分子の経上皮輸送用組成物及び方法 | |
TW201021845A (en) | Prevention, treatment and diagnosis of P. gingivalis infection | |
JP2008249712A (ja) | ヒスチジンタグ付きインチミン、ならびに免疫応答を刺激し、標的能力を有する抗原担体としてインチミンを使用する方法 | |
JP2019013229A (ja) | 異種ポリペプチドを含むCyaAベースのキメラタンパク質及び免疫応答の誘導におけるその使用 | |
WO2023051701A1 (zh) | 抗SARS-CoV-2感染的mRNA、蛋白以及抗SARS-CoV-2感染的疫苗 | |
CN103906760B (zh) | 用作抗原掩蔽剂的人乳铁蛋白衍生肽 | |
JP5661744B2 (ja) | 腸球菌由来のポリペプチド、及びワクチン接種のためのその使用 | |
JP5086633B2 (ja) | 細胞内に侵入する能力を有するペプチド及び核酸、物質を細胞内に侵入させるための物質移送用剤及び物質移送方法、並びに、らい菌による感染症を予防又は治療するためのワクチン、抗体及び医薬 | |
JP5685562B2 (ja) | らい菌による感染症を予防又は治療するためのワクチン、抗体及び医薬 | |
JP7161729B2 (ja) | 多価ワクチン | |
WO2021212122A2 (en) | Engineered probiotics for treatment and immunity against viruses | |
CN113813375A (zh) | 一种新型抗新冠病毒复合物的组成及其在防治冠状病毒感染疾病药物中的应用 | |
WO2010089940A1 (ja) | 粘膜ワクチン | |
WO2016051154A1 (en) | Anti-microbial polypeptide vaccine | |
JP2009533478A (ja) | 黄色ブドウ球菌感染症の治療用薬剤の製造のための活性成分としてtrapタンパク質自体の使用 | |
EP2915543B1 (en) | Polypeptides derived from Enterococcus and their use for vaccination and the generation of therapeutic antibodies | |
KR20160000949A (ko) | Rankl를 생산하는 재조합 유산균 및 이의 용도 | |
EP1372709A2 (en) | Intimins for the prevention or treatment of infections: i | |
WO2004050119A1 (en) | Vaccine against enteropathogenic and enterohaemorragic escherichia coli |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20091130 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20120403 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20120521 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A821 Effective date: 20120522 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20120626 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20120815 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20120904 |
|
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20120907 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 5086633 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20150914 Year of fee payment: 3 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
S111 | Request for change of ownership or part of ownership |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R313113 |