JP4908211B2 - ブテン酸誘導体、その調製方法、それらを含む薬剤組成物、および脂質代謝異常、アテローム性動脈硬化症および糖尿病の治療のための使用 - Google Patents

Description

本発明は、脂質代謝異常、アテローム性動脈硬化症および糖尿病の治療に使用できる不飽和カルボン酸誘導体、それらを含む薬剤組成物、およびこれらの化合物の調製方法に関する。

本発明はまた、脂質代謝異常、アテローム性動脈硬化症および糖尿病の治療を目的とする薬剤の調製のためのこれらの化合物の使用に関する。

多くの国で、心血管疾患は、依然として主要疾患および主要死因の一つである。約３分の１の男性が６０歳以前に主な心血管疾患を発症し、女性はより低いリスクを示す（１対１０の比）。年をとると（６５歳以降では、女性も男性と全く同じように心血管疾患にかかり易くなり）、この疾患は比率がさらに増大する。冠動脈疾患、脳卒中、動脈硬化症および末梢血管疾患などの血管性疾患は、世界中で依然として死亡およびハンディキャップの主要原因である。

食物および生活様式が心血管疾患の発症を加速し得るが、脂質代謝異常をもたらす遺伝的素因が心血管偶発症候および死亡の重要な要因である。

アテローム性動脈硬化症の発症は、血漿中の異常な濃度のリポタンパク質を意味する脂質代謝異常に主に関連付けられように思われる。この機能障害は、冠動脈疾患、糖尿病および肥満症において特に明白である。

アテローム性動脈硬化症の発症の説明を意図する考え方は、主に、コレステロールの代謝およびトリグリセリドの代謝に焦点を合わせている。

しかし、Ｒａｎｄｌｅらの研究以降（Ｌａｎｃｅｔ、１９６３年、７８５〜７８９頁）、新しい概念、すなわち、トリグリセリドおよびコレステロールに関する脂質代謝と、グルコースの酸素化の間の平衡の調節を説明する、グルコース−脂肪酸サイクルまたはＲａｎｄｌｅサイクルが提案されてきた。本発明者らは、この概念に従って、脂質代謝およびグルコース代謝に同時に作用する新規の化合物を発見することを目的とする新しい計画を展開してきた。

フィブラートは、「ペルオキシソーム増殖因子活性化受容体」を介する作用機序を有するよく知られている治療剤である。これらの受容体は、肝臓における脂質代謝の主要な調節因子（ＰＰＡＲαアイソフォーム（ｉｓｏｆｏｒｍ））である。この１０年間、チアゾリジンジオンは、ヒトおよび動物における強力な血糖降下剤と評されている。チアゾリジンジオンは、ＰＰＡＲの別のアイソフォーム、ＰＰＡＲγの強力な選択的活性化因子であることが報告されている（Ｌｅｈｍａｎｎら、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．、（１９９５年）、２７０巻、１２９５３〜１２９５６頁）。

本発明者らは、ＰＰＡＲαおよびＰＰＡＲγアイソフォームの強力な活性化因子である新規なクラスの化合物を発見した。この活性の結果、これらの化合物は実質上の血中脂質降下および血糖降下効果作用を有する。

より具体的には、本発明は、式Ｉのブテン酸誘導化合物

［式中、
Ｒ¹は、場合によって置換され、および／またはＯ、ＮおよびＳから選択される１個または複数のヘテロ原子を場合によって含む飽和または不飽和、単環式または多環式の、５〜８員核に場合によって縮合した（Ｃ₆〜Ｃ₁₈）アリール基であって、前記核自体が場合によって置換されたアリール基；Ｏ、ＮおよびＳから選択される１個または複数のヘテロ原子を含む、場合によって置換された飽和、不飽和または芳香族５〜８員単環式の複素環基；場合によって置換されたＣ₂〜Ｃ₁₀アルケニル基；Ｃ₁〜Ｃ₁₀アルキル基を表し、
Ｒ²およびＲ³は、独立に、水素原子；場合によって置換された（Ｃ₆〜Ｃ₁₈）アリールを表し；あるいは、Ｒ²とＲ³は共にＣ₃〜Ｃ₆アルキレン鎖を表し；
Ｒは、水素原子；Ｃ₁〜Ｃ₁₀アルキル基；（Ｃ₆〜Ｃ₁₈）アリール（Ｃ₁〜Ｃ₁₀）アルキル基を表す］、
および酸または塩基とのこれらの塩に関するものであって、
以下の化合物（Ｒ³＝フェニル；Ｒ＝エチル；Ｒ¹＝エチルまたはフェニル；およびＲ²＝Ｈである場合）は、保護から除外されるものと理解される。

式Ｉの化合物の塩を形成するために使用することができる酸は、無機または有機酸である。得られる塩には、例えば、塩酸塩、臭化水素酸塩、硫酸塩、硫酸水素塩、リン酸二水素塩、クエン酸塩、マレイン酸塩、フマル酸塩、２−ナフタレンスルホン酸塩およびｐ−トルエンスルホン酸塩がある。

式Ｉの化合物の塩を形成するために使用することができる塩基は、無機または有機塩基である。得られる塩には、例えば、金属、特にアルカリ金属、アルカリ土類金属および遷移金属（ナトリウム、カリウム、カルシウム、マグネシウムまたはアルミニウムなど）と、あるいは、塩基、例えばアンモニアまたは第２級または第３級アミン（ジエチルアミン、トリエチルアミン、ピペリジン、ピペラジンまたはモルホリンなど）と、または塩基性アミノ酸と、またはオサミン（メグルミンなど）と、またはアミノアルコール（３−アミノブタノールおよび２−アミノエタノールなど）と形成された塩がある。

本発明は、特に、薬剤として許容される塩のみならず、キラルアミンで得た塩などの、式Ｉの化合物の適当な分離または結晶化を可能にする塩も包含される。

本発明はまた、式Ｉの化合物の光学活性形態、立体異性体、エナンチオマー、ラセミ化合物およびジアステレオアイソマー、ならびにこれらの形態のすべての比率の混合物も包含する。

本発明はまた、式Ｉの化合物の水和物または溶媒和物誘導体も含む。「溶媒和物誘導体」という用語は、式Ｉの化合物への１モルまたは複数モルの不活性溶媒の付加生成物であって、これら相互の引力のために形成された生成物を意味する。溶媒和物誘導体には、例えば、一水和物、二水和物、三水和物、等、あるいはアルコラートがある。

したがって、本発明には、薬剤の分野で使用可能なおよび許容される、式Ｉの化合物の誘導体すべて、例えば、塩のみならずこれらの化合物の「プロドラッグ」も含まれる。

「プロドラッグ」という用語は、例えば、特にアルキルまたはアシル基、糖またはオリゴペプチドで変性された式Ｉの化合物であって、これらが、体内で迅速に放出されて本発明による活性成分に戻る基である化合物を示す。

「プロドラッグ」にはまた、例えばＩｎｔ．Ｊ．Ｐｈａｒｍ、１１５巻、６１〜６７頁、（１９９５年）に記載のものなどの、生分解性ポリマーの形態の本発明の化合物の誘導体も含まれる。

本発明はまた、上記で定義した一般式Ｉの化合物のすべての比率、例えば、１：１、１：２、１：３、１：４、１：５、１：１０、１：１００または１：１０００の混合物、特に２種の光学活性形態、例えば２種のジアステレオアイソマーの混合物に関する。

したがって、本発明には、式Ｉの化合物、ならびに薬剤として許容されるその誘導体、塩、溶媒和物誘導体およびその立体異性体が含まれ、すべての割合のそれらの混合物も含まれる。

本発明によれば、「アリール基」という用語は、好ましくは６〜１８個の炭素原子を含む、単環式または多環式の炭素環芳香族基を意味する。挙げることができるアリール基としては、フェニル、ナフチル、アントリルおよびフェナントリル基がある。

「アルキル」という用語は、１〜１０個の炭素原子、より好ましくは１〜６個の炭素原子、例えば１〜４個の炭素原子を含む、直鎖または分枝の炭化水素系の鎖を意味する。

アルキル基の例には、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ｔ−ブチル、ペンチル、イソペンチル、ネオペンチル、２−メチルブチル、１−エチルプロピル、ヘキシル、イソヘキシル、ネオヘキシル、１−メチルペンチル、３−メチルペンチル、１，１−ジメチルブチル、１，３−ジメチルブチル、１−エチルブチル、１−メチル−１−エチルプロピル、ヘプチル、１−メチルヘキシル、１−プロピルブチル、４，４−ジメチルペンチル、オクチル、１−メチルヘプチル、２−メチルヘキシル、５，５−ジメチルヘキシル、ノニル、デシル、１−メチルノニル、３，７−ジメチルオクチルおよび７，７−ジメチルオクチルがある。

複素環基は、場合によって酸化された形態の（ＳおよびＮの場合）、一般にＯ、ＳおよびＮ、から選択されるヘテロ原子を含む単環式または多環式基である。

複素環を構成する少なくとも１つの単環は、好ましくは１〜４個の環内ヘテロ原子、より好ましくは１〜３個のヘテロ原子を含む。

本発明によれば、多環式複素環核は、それぞれが５〜８員である１つまたは複数の単環を含む。

５〜８員の単環式芳香族複素環基の例には、ピリジン、フラン、チオフェン、ピロール、イミダゾール、チアゾール、イソオキサゾール、イソチアゾール、フラザン、ピリダジン、ピリミジン、ピラジン、チアジン、オキサゾール、ピラゾール、オキサジアゾール、トリアゾールおよびチアジアゾールなどのヘテロアリールがある。

挙げることができる好ましいヘテロアリールとしては、ピリジル、ピリミジニル、トリアゾリル、チアジアゾリル、オキサゾリル、チアゾリルおよびチエニル核がある。

飽和または不飽和の複素環基は、それぞれ、不飽和を含まないか、または上記で定義した芳香族複素環基由来の１つまたは複数の不飽和を含む複素環基である。

「Ｃ₂〜Ｃ₁₀アルケニル基」という用語は、１つまたは複数のエチレン性タイプの不飽和、好ましくは１〜３つのエチレン性不飽和を含む脂肪族炭化水素系の基を意味する。こうしたＣ₂〜Ｃ₁₀アルケニル基の好ましい例には、特にビニル基およびＣＨ₂＝ＣＨ−ＣＨ₂＝ＣＨ−基がある。

Ｒ²とＲ³が共にＣ₃〜Ｃ₆アルキレン鎖を表す場合は、Ｒ²、Ｒ³およびこれらが結合する炭素（複数）は、シクロペンテンまたはシクロヘキセンを形成することが好ましい。

アリール、複素環基および複素環核は、１種または複数の以下の基：
トリフルオロメチル；ハロゲン原子；Ｏ、ＮおよびＳから選択される１個または複数のヘテロ原子を含み、以下に定義される１個または複数の基Ｔで場合によって置換された、単環式、二環式または三環式の芳香族複素環基；基Ｈｅｔ−ＣＯ−［式中、Ｈｅｔは、１個または複数の基Ｔで場合によって置換された、上記で定義した芳香族複素環基を表す］；Ｃ₁〜Ｃ₆アルキレンジイル鎖；Ｃ₁〜Ｃ₆アルキレンジオキシ鎖；ニトロ；シアノ；（Ｃ₁〜Ｃ₁₀）アルキル；（Ｃ₁〜Ｃ₁₀）アルキルカルボニル；（Ｃ₁〜Ｃ₁₀）アルコキシカルボニル−Ａ−［式中、Ａは、（Ｃ₁〜Ｃ₆）アルキレン、（Ｃ₂〜Ｃ₆）アルケニレンまたは結合を表す］；（Ｃ₃〜Ｃ₁₀）シクロアルキル；トリフルオロメトキシ；ジ（Ｃ₁〜Ｃ₁₀）アルキルアミノ；（Ｃ₁〜Ｃ₁₀）アルコキシ（Ｃ₁〜Ｃ₁₀）アルキル；（Ｃ₁〜Ｃ₁₀）アルコキシ；１個または複数の基Ｔで場合によって置換された（Ｃ₆〜Ｃ₁₈）アリール；（Ｃ₆〜Ｃ₁₈）アリール（Ｃ₁〜Ｃ₁₀）アルコキシ−（ＣＯ）_n−［式中、ｎは０または１であり、アリールは１個または複数の基Ｔで場合によって置換されている］；（Ｃ₆〜Ｃ₁₈）アリールオキシ（ＣＯ）_n−［式中、ｎは０または１であり、アリールは１個または複数の基Ｔで場合によって置換されている］；（Ｃ₆〜Ｃ₁₈）アリールチオ［式中、アリールは１個または複数の基Ｔで場合によって置換されている］；（Ｃ₆〜Ｃ₁₈）アリールオキシ（Ｃ₁〜Ｃ₁₀）アルキル（ＣＯ）_n−［式中、ｎは０または１であり、アリールは１個または複数の基Ｔで場合によって置換されている］；１個または複数の基Ｔで場合によって置換された、Ｏ、ＮおよびＳから選択される１個または複数のヘテロ原子を含む、飽和または不飽和の単環式５〜８員複素環；１個または複数の基Ｔで場合によって置換された（Ｃ₆〜Ｃ₁₈）アリールカルボニル；（Ｃ₆〜Ｃ₁₈）アリールカルボニル−Ｂ−（ＣＯ）_n−［式中、ｎは０または１であり、Ｂは、（Ｃ₁〜Ｃ₆）アルキレンまたは（Ｃ₂〜Ｃ₆）アルケニレンを表し、アリールは１個または複数の基Ｔで場合によって置換されている］；（Ｃ₆〜Ｃ₁₈）アリール−Ｃ−（ＣＯ）_n−［式中、ｎは０または１であり、Ｃは、（Ｃ₁〜Ｃ₆）アルキレンまたは（Ｃ₂〜Ｃ₆）アルケニレンを表し、アリールは１個または複数の基Ｔで場合によって置換されている］；１個または複数の基Ｔで場合によって置換された、上記で定義した飽和または不飽和の複素環に縮合した（Ｃ₆〜Ｃ₁₈）アリール；（Ｃ₂〜Ｃ₁₀）アルキニル；Ｔは、ハロゲン原子；（Ｃ₆〜Ｃ₁₈）アリール；（Ｃ₁〜Ｃ₆）アルキル；（Ｃ₁〜Ｃ₆）アルコキシ；ニトロ；カルボキシル；（Ｃ₁〜Ｃ₆）アルコキシカルボキシルから選択され、Ｔは、それが飽和または不飽和の複素環を置換している場合は、オキソを表すことができ、あるいはＴは、（Ｃ₁〜Ｃ₆）アルコキシカルボニル（Ｃ₁〜Ｃ₆）アルキル、または（Ｃ₁〜Ｃ₆）アルキルカルボニル（（Ｃ₁〜Ｃ₆）アルキル）_n−［式中、ｎは０または１である］を表す。

「ハロゲン原子」という用語は、塩素、臭素、ヨウ素またはフッ素原子を意味する。単環式、二環式または三環式の芳香族複素環基は、場合によって酸化された形態の（ＳおよびＮの場合）、一般にＯ、ＳおよびＮから選択される１個または複数のヘテロ原子を含むことが好ましい。複素環を構成する少なくとも１つの単環は、好ましくは１〜４個の環内ヘテロ原子、より好ましくは１〜３個のヘテロ原子を含む。

複素環は、好ましくは、それぞれが５〜８員である、１つまたは複数の単環を含む。

５〜８員の単環式ヘテロアリールの例には、特に、ピリジン、フラン、チオフェン、ピロール、イミダゾール、チアゾール、イソオキサゾール、イソチアゾール、フラザン、ピリダジン、ピリミジン、ピラジン、チアジン、オキサゾール、ピラゾール、オキサジアゾール、トリアゾールおよびチアジアゾールがある。

各単環が５〜８員である二環式ヘテロアリールの例は、インドリジン、インドール、イソインドール、ベンゾフラン、ベンゾチオフェン、インダゾール、ベンゾイミダゾール、ベンゾチアゾール、ベンゾフラザン、ベンゾチオフラザン、プリン、キノリン、イソキノリン、シンノリン、フタラジン、キナゾリン、キノキサリン、ナフチリジン、ピラゾロトリアジン（ピラゾロ−１，３，４トリアジンなど）、ピラゾロピリミジンおよびプテリジンから選択される。

挙げることができる好ましいヘテロアリールとしては、キノリル、ピリジル、ベンゾチアゾリルおよびトリアゾリルがある。

各単環が５〜８員である三環式ヘテロアリールは、例えば、アクリジン、フェナジンおよびカルバゾールから選択される。

「アルキレンジイル鎖」という用語は、上記で定義したアルキル基から水素原子を取り除くことにより誘導された、直鎖または分枝の脂肪族炭化水素系タイプの２価基を意味する。アルキレンジイル鎖の好ましい例には、鎖−（ＣＨ₂）_k−［式中、ｋは２、３、４、５および６から選択される整数を表す］および＞Ｃ（ＣＨ₃）₂および−ＣＨ₂−Ｃ（ＣＨ₃）₂−ＣＨ₂−鎖がある。アルキレンジオキシ鎖は、−Ｏ−Ａｌｋ−Ｏ−鎖［式中、Ａｌｋは直鎖または分枝のアルキレンを表し、アルキレンは、アルキレンジイルについて上記で定義した通りであると理解される］を示す。−Ｏ−Ａｌｋ−Ｏ−の好ましい意味は、例えば、−Ｏ−Ｃ（ＣＨ₃）₂−Ｏまたは−Ｏ−ＣＨ₂−ＣＨ₂−Ｏ−である。

「アルケニレン」という用語は、１つまたは複数のエチレン性不飽和、好ましくは１つから３つのエチレン性不飽和を含む不飽和アルキレン鎖と定義される。アルキレン鎖の例は、−ＣＨ＝ＣＨ−または−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ＝ＣＨ−である。

Ｃ₃〜Ｃ₁₀シクロアルキル基の例には、特にシクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチル、シクロオクチルまたはシクロデシル基がある。

飽和または不飽和の単環式５〜８員複素環は、芳香族複素環の飽和または不飽和の誘導体である。

特に、モルホリン、ピペリジン、チアゾリジン、オキサゾリジン、テトラヒドロチエニル、テトラヒドロフリル、ピロリジン、イソオキサゾリジン、イミダゾリジンまたはピラゾリジンを挙げることができる。

「アルキニル」という用語は、１つまたは複数のアセチレンタイプの不飽和を含む脂肪族炭化水素系基を意味する。好ましい例は−Ｃ≡Ｃ−である。

本発明の化合物の他の好ましい群は、Ｒ¹は、場合によって置換され、および／またはＯ、ＮおよびＳから選択される０〜４個のヘテロ原子を含む、場合によってそれ自体が置換された炭素環または複素環の単環式５〜８員核に縮合した（Ｃ₆〜Ｃ₁₀）アリール基、好ましくはフェニル；場合によって置換されたＣ₂〜Ｃ₁₀アルケニル基；水素原子を表し；Ｒ²およびＲ³は、独立に、水素原子；（Ｃ₆〜Ｃ₁₀）アリール、好ましくは場合によって置換されたフェニルを表し；または、Ｒ²とＲ³は共に、Ｃ₅〜Ｃ₈アルキレン鎖を表し；
Ｒは、水素原子；Ｃ₁〜Ｃ₁₀アルキル基；（Ｃ₆〜Ｃ₁₀）アリール（Ｃ₁〜Ｃ₁₀）アルキル基を表す、
式Ｉの化合物から成る。

本発明の化合物の他の好ましいサブグループは、Ｒ¹が置換された（Ｃ₆〜Ｃ₁₀）アリールを表す場合は、アリール核が１つまたは複数の以下の基：
トリフルオロメチル；ハロゲン原子；Ｏ、ＮおよびＳから選択される１個または複数のヘテロ原子を含み、以下に定義される１個または複数の基Ｔで場合によって置換された、単環式、二環式または三環式の芳香族複素環基；基Ｈｅｔ−ＣＯ−［式中、Ｈｅｔは、１個または複数の基Ｔで場合によって置換された、上記で定義した芳香族複素環基を表す］；Ｃ₁〜Ｃ₆アルキレンジイル鎖；Ｃ₁〜Ｃ₆アルキレンジオキシ鎖；ニトロ；シアノ；（Ｃ₁〜Ｃ₁₀）アルキル；（Ｃ₁〜Ｃ₁₀）アルキルカルボニル；（Ｃ₁〜Ｃ₁₀）アルコキシカルボニル−Ａ−［式中、Ａは、（Ｃ₁〜Ｃ₆）アルキレン、（Ｃ₂〜Ｃ₆）アルケニレンまたは結合を表す］；（Ｃ₃〜Ｃ₁₀）シクロアルキル；トリフルオロメトキシ；ジ（Ｃ₁〜Ｃ₁₀）アルキルアミノ；（Ｃ₁〜Ｃ₁₀）アルコキシ（Ｃ₁〜Ｃ₁₀）アルキル；（Ｃ₁〜Ｃ₁₀）アルコキシ；１個または複数の基Ｔで場合によって置換された（Ｃ₆〜Ｃ₁₈）アリール；（Ｃ₆〜Ｃ₁₈）アリール（Ｃ₁〜Ｃ₁₀）アルコキシ−（ＣＯ）_n−［式中、ｎは０または１であり、アリールは１個または複数の基Ｔで場合によって置換されている］；（Ｃ₆〜Ｃ₁₈）アリールオキシ（ＣＯ）_n−［式中、ｎは０または１であり、アリールは１個または複数の基Ｔで場合によって置換されている］；（Ｃ₆〜Ｃ₁₈）アリールチオ［式中、アリールは１個または複数の基Ｔで場合によって置換されている］；（Ｃ₆〜Ｃ₁₈）アリールオキシ（Ｃ₁〜Ｃ₁₀）アルキル（ＣＯ）_n−［式中、ｎは０または１であり、アリールは１個または複数の基Ｔで場合によって置換されている］；１個または複数の基Ｔで場合によって置換された、Ｏ、ＮおよびＳから選択される１個または複数のヘテロ原子を含む、飽和または不飽和の単環式５〜８員複素環；１個または複数の基Ｔで場合によって置換された（Ｃ₆〜Ｃ₁₈）アリールカルボニル；（Ｃ₆〜Ｃ₁₈）アリールカルボニル−Ｂ−（ＣＯ）_n−［式中、ｎは０または１であり、Ｂは、（Ｃ₁〜Ｃ₆）アルキレンまたは（Ｃ₂〜Ｃ₆）アルケニレンを表し、アリールは１個または複数の基Ｔで場合によって置換されている］；（Ｃ₆〜Ｃ₁₈）アリール−Ｃ−（ＣＯ）_n−［式中、ｎは０または１であり、Ｃは、（Ｃ₁〜Ｃ₆）アルキレンまたは（Ｃ₂〜Ｃ₆）アルケニレンを表し、アリールは１個または複数の基Ｔで場合によって置換されている］；１個または複数の基Ｔで場合によって置換された、上記で定義した飽和または不飽和の複素環に縮合した（Ｃ₆〜Ｃ₁₈）アリール；（Ｃ₂〜Ｃ₁₀）アルキニル；Ｔは、ハロゲン原子；（Ｃ₆〜Ｃ₁₈）アリール；（Ｃ₁〜Ｃ₆）アルキル；（Ｃ₁〜Ｃ₆）アルコキシ；ニトロ；カルボキシル；（Ｃ₁〜Ｃ₆）アルコキシカルボキシルから選択され、Ｔは、飽和または不飽和の複素環を、置換している場合は、オキソを表すことができ、あるいは、Ｔは、（Ｃ₁〜Ｃ₆）アルコキシカルボニル（Ｃ₁〜Ｃ₆）アルキル、または（Ｃ₁〜Ｃ₆）アルキルカルボニル（（Ｃ₁〜Ｃ₆）アルキル）_n−［式中、ｎは０または１である］を表す、
式Ｉの化合物から成る。

好ましい化合物の他の群は、Ｒ¹がアリールを表す場合は、Ｒ¹がフェニルである、式Ｉの化合物から成る。

好ましい化合物の他の群は、Ｒ¹は、（Ｃ₁〜Ｃ₁₀）アルキル、好ましくは（Ｃ₁〜Ｃ₃）アルキルを表し、Ｒ²およびＲ³は、互いに独立に、Ｈまたは場合によって置換された（Ｃ₆〜Ｃ₁₈）アリールを表す化合物から成る。

好ましい化合物の他の群は、Ｒ²はＨであり、Ｒ³は、非置換アリール、好ましくは非置換フェニルを表す化合物から成る。

好ましい化合物の他の群は、Ｒが、（Ｃ₁〜Ｃ₁₀）アルキルアリール、好ましくはベンジルを表す場合は、Ｒ¹およびＲ³は、非置換アリール、好ましくはフェニルを表す化合物から成る。

本発明の化合物の第１のより好ましい群は、Ｒ¹は非置換アリール基を表し、Ｒ²はＨを表し、Ｒ³は非置換アリールを表し、ＲはＨである式Ｉの化合物から成る。

本発明の化合物の第２のより好ましい群は、Ｒ¹は非置換アリールを表し、Ｒ²＝Ｈであり、Ｒ³は非置換アリールであり、Ｒ＝アルキルである式Ｉの化合物から成る。

本発明の化合物の第３のより好ましい群は、Ｒ¹＝非置換アリールであり、Ｒ²＝Ｈであり、Ｒ³＝非置換アリールであり、Ｒ＝アルキルアリールである式Ｉの化合物から成る。

本発明の化合物の第４のより好ましい群は、Ｒ¹＝置換されたアリールであり、Ｒ²＝Ｈであり、Ｒ³＝非置換アリールであり、Ｒ＝Ｈである式Ｉの化合物から成る。

本発明の化合物の第５のより好ましい群は、Ｒ１は置換されたアリールを表し、Ｒ２＝Ｈであり、Ｒ３は非置換アリールであり、Ｒ＝アルキルである式Ｉの化合物から成る。

本発明の化合物の第６のより好ましい群は、Ｒ¹は置換されたアリールを表し、Ｒ²＝Ｈであり、Ｒ³は非置換アリールであり、Ｒ＝アルキルアリールである式Ｉの化合物から成る。

本発明の化合物の第７のより好ましい群は、Ｒ¹はアルキルを表し、Ｒ²＝Ｈであり、Ｒ³は非置換アリールであり、Ｒ＝Ｈである式Ｉの化合物から成る。

本発明の化合物の第８のより好ましい群は、Ｒ¹はアルキルを表し、Ｒ²＝Ｈであり、Ｒ³は非置換アリールであり、Ｒ＝アルキルである式Ｉの化合物から成る。

本発明の化合物の第９のより好ましい群は、Ｒ¹はアルキルを表し、Ｒ²＝Ｈであり、Ｒ³は非置換アリールであり、Ｒ＝アルキルアリールである式Ｉの化合物から成る。

より特に好ましい化合物は、
メチル（Ｒ，Ｓ）−２−メトキシ−４−フェニルブト−３−エノエート
（Ｒ，Ｓ）−２−メトキシ−４−フェニルブト−３−エン酸
メチル（Ｒ，Ｓ）−２−プロポキシ−４−フェニルブト−３−エノエート
（Ｒ，Ｓ）−２−プロポキシ−４−フェニルブト−３−エン酸
ベンジル（Ｒ，Ｓ）−２−フェノキシ−４−フェニルブト−３−エノエート
メチル（Ｒ，Ｓ）−２−トリフルオロメチルフェノキシ−４−フェニルブト−３−エノエート
（Ｒ，Ｓ）−２−フェノキシ−４−フェニルブト−３−エン酸
（Ｒ，Ｓ）−２−トリフルオロメチルフェノキシ−４−フェニルブト−３−エン酸（ＺおよびＥ形）
から選択される。

本発明の化合物は、式ＩＩの化合物

［式中、Ｒ²、Ｒ³およびＲは、式Ｉについて上記で定義した通りであり、Ｘは、−ＯＨまたは塩素などのハロゲン原子を表す］の、式Ｒ¹−ＯＨのアルコールとの反応により調製することができる。

この反応は、好ましくは、直鎖または環状エーテル、例えばジエチルエーテル、ジ−ｔｅｒｔ−ブチルエーテル、ジイソプロピルエーテルまたはジメトキシエタン、あるいはジオキサンまたはテトラヒドロフランなどの極性非プロトン性溶媒中で実施され、テトラヒドロフランおよびジメトキシエタンが好ましい。

本発明の好ましい一実施形態によれば、式ＩＩの化合物対アルコールＲ¹−ＯＨのモル比は、１と１．５の間の範囲にあり、１と１．３の間、好ましくは１と１．１の間のほぼ化学量論比が望ましい。

この反応を容易にするために、低級アルキル（すなわち、Ｃ₁〜Ｃ₆アルキル）ジアゾジカルボキシレート、例えばエチルジアゾジカルボキシレートなどのカップリング剤を媒体に加えることが望ましい。

カップリング剤が反応媒体中に存在する場合は、これは、式ＩＩの化合物の最初の量に対して１〜５当量の比率で、より好ましくは１〜３当量の比率で、例えば１〜２モル当量の比率で媒体中に取り込まれる。

好ましくは、トリフェニルホスフィンなどのホスフィンを反応媒体中に導入することもまた推奨される。この場合は、トリフェニルホスフィン対式ＩＩの化合物のモル比は、好ましくは１と５の間、例えば１と３の間、特に１と２の間に維持される。

Ｘが−ＯＨを表す場合は、反応温度は一般に−１５℃と５０℃の間の範囲にあり、カップリング剤の存在下では、−１５℃と１０℃の間の温度が望ましいことを理解されたい。

Ｘがハロゲン原子を表す場合は、式ＩＩの化合物は、以下の式ＩＩ_Hal

［式中、Ｒ、Ｒ²およびＲ³は、上記で定義した通りであり、Ｈａｌはハロゲン原子を表す］により表される。

上記で定義した式ＩＩ_Halの化合物と共に、塩基、好ましくは水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、炭酸水素ナトリウム、炭酸水素カリウム、炭酸ナトリウムおよび炭酸カリウムから選択される無機塩基を反応媒体中に導入する。通常、塩基対式ＩＩの化合物のモル比は、１と５の間、より好ましくは１と３の間の範囲にある。

Ｘがハロゲン原子を表す場合は、反応温度は一般に１０℃と１２０℃の間、例えば６０℃と１００℃の間、より好ましくは７０℃と９０℃の間の範囲にある。

Ｘがハロゲン、例えば塩素を表す場合は、本発明の式Ｉの化合物は、以下の反応スキーム［ただし、Ｒ、Ｒ¹、Ｒ²およびＲ³は上記で定義した通りである］に従って得ることができる。

式Ｉの化合物は、以下の式ＩＩＩの化合物

［式中、Ｒ、Ｒ²およびＲ³は、上記で定義した通りである］において、官能基−ＣＯＯＲに対してα位のオキソ官能基の、適当な水素化物の作用による選択的還元、それに続いて、形成されたヒドロキシル官能基をアルキル化することにより調製することができる。

適当な水素化物の例には、特に水素化ホウ素ナトリウム、水素化ホウ素リチウム、水素化ホウ素トリブチルアンモニウム、トリエチル水素化ホウ素リチウムおよびシアノ水素化ホウ素ナトリウムがあり、水素化ホウ素ナトリウムが好ましい。

この反応は、好ましくは、メタノールまたはプロパノールなどの低級アルカノールなどの溶媒中で、−１５℃と２０℃の間、好ましくは−１０℃と＋１０℃の間の温度で行われる。

この反応では、水素化物対式ＩＩＩの化合物のモル比は、０．１と１０当量の間の範囲にある。水素化物がＮａＢＨ₄の場合は、０．２〜０．５当量のＮａＢＨ₄で十分である。

水素化物の作用で得た中間体化合物

［式中、Ｒ²、Ｒ³およびＲは、式Ｉについて上記で定義した通りである］のアルキル化は、それ自体が通常である方法で実施することができる。

この方法を実施する１つの方法は、単に、酸化銀、Ａｇ₂Ｏの存在下で、式ＩＶの中間体化合物を式Ｒ¹−Ｙ［式中、Ｙはハロゲン原子、好ましくはヨウ素である］の適当なアルキルハロゲン化物と反応させることから成る。

この反応では、大幅に過剰な式Ｒ¹−Ｙのアルキル化剤、例えば、式ＩＶの化合物の最初の量に対して５〜２００当量、より好ましくは１００と１５０当量の間を使用することが有利である。

Ａｇ₂Ｏの量に関しては、それが２と１２当量の間、例えば４と１０当量の間の範囲にあることが望ましい。

式Ｉの化合物はまた、式Ｒｈ₂（ＯＡｃ）₄の四酢酸ロジウムＩＩなどの、ロジウムＩＩ錯体の存在下で、式Ｖの化合物

［式中、Ｒ²、Ｒ³およびＲは、上記で定義した通りである］への、式Ｒ¹−ＯＨのアルコールの作用により調製することができる。

この反応は、好ましくは、場合によって塩素化された芳香族炭化水素、例えばベンゼン、トルエン、キシレンまたはクロロベンゼンなどの、極性非プロトン性溶媒中で実施され、ベンゼンが好ましい。

この反応では好ましくは、１と１０の間、例えば１と５間、より好ましくは２と４の間の範囲のアルコールＲ¹−ＯＨ対式Ｖの化合物のモル比が使用される。

ロジウム錯体は、式Ｖの化合物に対して１０^-3〜１０^-1当量の比率で存在することが望ましく、０．０１と０．１０の間、より好ましくは０．０１と０．０５の間のロジウム錯体対式Ｖの化合物の比が好ましい。

反応温度は、通常５０℃と１２０℃の間、例えば６０℃と１００℃の間にある。

ＲがＨを表す式Ｉの化合物は、ＲがＣ₁〜Ｃ₁₀アルキルを表す、式Ｉの対応する化合物の鹸化により得ることができる。鹸化は、ＬｉＯＨ、ＫＯＨ、ＮａＯＨ、ＮａＨＣＯ₃、ＫＨＣＯ₃、Ｎａ₂ＣＯ₃およびＫ₂ＣＯ₃から選択される無機塩基などの、塩基の作用により実施することができる。使用される塩基のモル量は、選択される塩基の強度に応じて、一般に１〜２０当量、好ましくは１〜１２当量の範囲にある。

より詳細には、ＬｉＯＨの場合は、反応媒体中に存在する式Ｉのエステルの量に対して、８〜１２当量の塩基を使用することが好ましい。

この反応は、好ましくは極性プロトン性タイプの溶媒中で、より好ましくは、エタノールと水またはメタノールと水の混合物などの、低級（Ｃ₁〜Ｃ₄）アルカノールと水の混合物中で実施される。

反応温度は、３５℃と１２０℃の間、より好ましくは４０℃と１００℃の間の範囲にあることが有利である。

Ｒ¹が、Ｏ、ＮおよびＳから選択される１個または複数のヘテロ原子を含み、上記で定義した１個または複数の基Ｔで場合によって置換された、単環式、二環式または三環式芳香族複素環基で置換されたアリールを表し、あるいは、Ｒ¹は、１個または複数の基Ｔで場合によって置換されたアリール基を表す式Ｉの化合物は、Ｒ¹が、塩素、臭素またはヨウ素などのハロゲン原子で置換されたアリールを表す対応する式Ｉの化合物の、式ＶＩの化合物

［式中、最終化合物においてＲ¹が次の複素環基で置換されたアリールを表す場合は、Ｇは、Ｏ、ＮおよびＳから選択される１個または複数のヘテロ原子を含み、上記で定義した１個または複数の基Ｔで場合によって置換された、単環式、二環式または三環式の芳香族複素環基を表し、あるいは、最終化合物においてＲ¹が、１個または複数の基Ｔによりそれ自体場合によって置換されたアリール基で置換されたアリールを表す場合は、Ｇは、１個または複数の基Ｔで場合によって置換されたアリールを表す］の作用による反応により調製することができる。

有利には、反応媒体中に存在する式Ｉの化合物の量に対して、１．５〜５当量、好ましくは１．５〜３当量の式ＶＩの化合物が使用される。

この反応は、好ましくは、パラジウム（０）錯体および塩基の存在下、極性非プロトン性溶媒中で実施される。

上記で定義したものなどの、直鎖または環状のエーテルが溶媒として特に適当である。ジメトキシエタンが好ましい。

使用される塩基は、上記の任意の無機塩基、有利にはＮａ₂ＣＯ₃である。例えば、式Ｉの化合物の量に対して１．５〜５当量、好ましくは１．５〜３当量の塩基を反応媒体中に導入することができる。

好ましい一実施形態によれば、塩基および式ＶＩの化合物の量は当量である。使用されるパラジウム（０）錯体の量は触媒量である。通常、０．００１〜１当量、好ましくは０．０１〜０．１当量の前記錯体が使用される。使用することができるパラジウム（０）錯体の例は、テトラフェニルパラジウム（０）である。

反応温度は、５０℃と１２０℃の間、好ましくは７０℃と９０℃の間の範囲にあることが有利である。

本発明はまた、上記で定義した式（Ｉ）の化合物の薬剤としての有効量と組み合せて、１種または複数の薬剤として許容されるビヒクルを含む薬剤組成物に関する。

本発明の説明では、「薬剤としての有効量」という表現は、動物またはヒトの組織または系の生物学的または医学的応答を誘発することを可能にする、活性物質または薬剤の量を定義するものであって、この生物学的または医学的応答は、例えば研究者または臨床医による所望の応答に対応するものと理解されたい。

さらに、「治療上有効な量」という表現は、こうした量を与えられなかった対応する各人とは対照的に、治療の改善、治癒、より良好な予防、あるいは、病理学的状態、障害または１種または複数の副作用の改善がもたらされ、あるいは、疾患または病理学的障害の進行度が低下する任意の量に対応する。上記の表現には、正常な生理学的機能を改善するのに有効な量もその意味中に含まれる。

したがって、本発明による薬剤組成物は、即放性または徐放性の錠剤、ゲルカプセル剤または顆粒剤の形態で経口で、注射可能な溶液の形態で静脈内に、粘着性経皮デバイスの形態で経皮的に、または液剤、クリーム剤またはゲル剤の形態で局所的に投与することができる。

経口投与用の固体組成物は、活性成分に充填剤、および適切な場合には、結合剤、崩壊剤、滑沢剤、着色剤または香味増強剤を加え、この混合物を錠剤、被覆錠剤、顆粒剤、散剤またはカプセル剤の形にすることにより調製される。

充填剤の例としては、ラクトース、コーンスターチ、スクロース、グルコース、ソルビトール、結晶性セルロースおよび二酸化ケイ素があり、結合剤の例としては、ポリ（ビニルアルコール）、ポリ（ビニルエーテル）、エチルセルロース、メチルセルロース、アラビアゴム、トラガカントゴム、ゼラチン、セラック、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、クエン酸カルシウム、デキストリンおよびペクチンがある。滑沢剤の例としては、ステアリン酸マグネシウム、タルク、ポリエチレングリコール、シリカおよび硬化植物油がある。着色剤は、薬剤への使用が認可された任意のものでよい。香味増強剤の例としては、ココア粉末、ハーブの形のミント、芳香植物粉末、油状ミント、ボルネオールおよびシナモン粉末がある。当然、錠剤または顆粒剤は、糖、ゼラチン等で適切に被覆し得る。

活性成分として本発明の化合物を含む注射可能な形態は、適切な場合には、前記化合物をｐＨ調節剤、緩衝剤、懸濁剤、可溶化剤、安定剤、等張剤および／または保存剤と混合し、この混合物を、標準的な方法に従って静脈内、皮下または筋肉内注射用の形態に転換することにより調製される。適切な場合には、得られた注射可能な形態を標準的な方法により凍結乾燥することもできる。

懸濁剤の例としては、メチルセルロース、ポリソルベート８０、ヒドロキシエチルセルロース、アラビアゴム、粉末状トラガカントゴム、カルボキシメチルセルロースナトリウムおよびポリエトキシ化ソルビタンモノラウレートがある。

可溶化剤の例としては、ポリオキシエチレンで固化されたヒマシ油、ポリソルベート８０、ニコチンアミド、ポリエトキシ化ソルビタンモノラウレートおよびヒマシ油脂肪酸のエチルエステルがある。

さらに、安定剤には、亜硫酸ナトリウム、メタ亜硫酸ナトリウムおよびエーテルが含まれ、一方、保存剤には、ｐ−ヒドロキシ安息香酸メチル、ｐ−ヒドロキシ安息香酸エチル、ソルビン酸、フェニル、クレゾールおよびクロロクレゾールが含まれる。

本発明の対象はまた、本発明の式Ｉの化合物を、脂質代謝異常、アテローム性動脈硬化症および糖尿病の予防または治療を目的とする薬剤の調製のために使用することである。

以下の実施例は、非限定的に本発明を例示する。

プロトン核磁気共鳴のデータでは（３００ ＭＨｚ ＮＭＲ）、以下の略号を使用した。一重線はｓ、二重線はｄ、三重線はｔ、四重線はｑ、八重線はｏ、複雑な多重線はｍ。化学シフトδはｐｐｍで表され、ｍ．ｐ．は融点を表す。

実施例１：（Ｒ，Ｓ）−２−ヒドロキシ−４−フェニルブタ−３−エン酸メチルの調製方法
１．１ ２−オキソ−４−フェニルブタ−３−エン酸メチルの調製
２ｍｌの濃硫酸を、５．９ｇ（３０ミリモル）の２−オキソ−４−フェニルブタ−３−エン酸ナトリウム（１）（Ｓｙｎｔｈ．Ｃｏｍｍｕｎ．、（１９９６年）、２６巻（１１）、２２３１頁）のメタノール１００ｍｌ懸濁液に滴下する。この混合物を８時間還流し、室温で一晩攪拌する。わずかな不溶性物質をろ過して除き、ろ液をその体積の半分に濃縮し、３００ｍｌの水中に注ぐ。得られたペースト状固体をジクロロメタンで抽出し、炭酸水素ナトリウム５％水溶液、次いで水で洗浄する。得られた溶液を硫酸ナトリウムにより乾燥する。溶媒を真空下で蒸発して除く。残渣（４．２ｇ）をフラシュクロマトグラフィー（ＳｉＯ₂、７０／３０ ＣＨ₂Ｃｌ₂／ヘプタン）により精製する。
７０〜７１℃で融解する、１．７ｇ（収率３０％）の明るい黄色固体が得られる。
¹Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃，３００ＭＨｚ）：３．８６（３Ｈ，ｓ）；７．３１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１６Ｈｚ）；７．２７〜７．５８（５Ｈ，ｍ）；７．８０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１６Ｈｚ）。
１．２ （Ｒ，Ｓ）−２−ヒドロキシ−４−フェニルブタ−３−エン酸メチルの調製方法
０．２７ｇ（７ミリモル）の水素化ホウ素ナトリウムを、４．２ｇ（２２ミリモル）の２−オキソ−４−フェニルブタ−３−エン酸メチルのメタノール１５０ｍｌ溶液に約１０分にわたり分けて加え、０℃に冷却する。この混合物を０℃と＋５℃の間で１０分間攪拌し、次いで室温にまで温まるようにしておく。得られた混合物を真空下４０℃で蒸発させ、残渣を１００ｍｌの水に溶解し、得られた混合物をジクロロメタンで抽出し、有機抽出物を硫酸ナトリウムにより乾燥する。この溶媒を真空下蒸発除去する。残渣（３．７ｇ）をフラシュクロマトグラフィー（ＳｉＯ₂、８０／２０ ヘプタン／酢酸エチル）で精製する。
２．２ｇ（収率５２％）の黄色の油が得られる。
¹Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃，３００ＭＨｚ）：３．００（１Ｈ，ＯＨ）；３．７０（３Ｈ，ｓ）；４．７３〜４．７５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝６Ｈｚ）；６．１１〜６．１７（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１６Ｈｚ，Ｊ＝６Ｈｚ）；６．６７〜６．７３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１６Ｈｚ）；７．１５〜７．３０（５Ｈ，ｍ）。

実施例２：（Ｒ，Ｓ）−２−メトキシ−４−フェニルブタ−３−エン酸メチルの調製方法
１．８ｇ（８ミリモル）の新しく調製した酸化銀を、２２５ｍｇ（１．２ミリモル）の実施例１で得られた化合物のヨウ化メチル１０ｍｌ溶液に加える。この混合物を室温で２４時間攪拌し、次いで１０ｍｌのジクロロメタンで希釈する。不溶性物質をろ過して除き、次いでろ液を真空下で蒸発する。２１０ｍｇ（収率８５％）の無色の油が得られる。

実施例３：（Ｒ，Ｓ）−２−メトキシ−４−フェニルブタ−３−エン酸の調製方法
４２ｍｌ（４２ミリモル）の１Ｍ水酸化リチウム一水和物水溶液を、０．８７ｇ（４．２ミリモル）の実施例２で得られた化合物のメタノール８０ｍｌ溶液に加える。この混合物を４時間還流する。一晩静置させた後、混合物を真空下で蒸発し、残渣を４０ｍｌの水に溶解する。この混合物を２×３０ｍｌのエチルエーテルで洗浄し、水性相を希塩酸で酸性化する。得られた水性相をエチルエーテルで抽出し、有機抽出物を硫酸ナトリウムにより乾燥し、溶媒を真空下で蒸発して除く。残渣（０．６５ｇ）をフラシュクロマトグラフィー（ＳｉＯ₂、９５／５ ジクロロメタン／メタノール）により精製する。
５０ｍｇ（収率６％）の黄色い油が得られる。

実施例４：（Ｒ，Ｓ）−２−ｎ−プロポキシ−４−フェニルブタ−３−エン酸の調製方法
４８０ｍｇ（２ミリモル）の実施例３で得られた化合物、１０ｍｌのエタノール、１ｍｌの水および２７０ｍｇ（４ミリモル）の水酸化カリウムペレットを４時間還流する。この混合物を真空下で蒸発し、残渣を２５ｍｌの水に溶解する。この混合物をエチルエーテルで洗浄し、水性相を希塩酸で酸性化する。得られた混合物をエチルエーテルで抽出し、有機抽出物を硫酸ナトリウムにより乾燥し、溶媒を真空下で蒸発して除く。残渣（３１０ｍｇ）をフラシュクロマトグラフィー（ＳｉＯ₂、８０／２０ ヘプタン／酢酸エチル）により精製する。４５ｍｇ（収率１０％）の黄色がかった油が得られる。
実施例１から４の反応スキームの例示、Ｒ ¹ ＝アルキル

実施例５：（Ｒ，Ｓ）−４−フェニル−２−（４−トリフルオロメチルフェノキシ）ブタ−３−エン酸メチルの調製方法
３００ｍｇ（０．６７ミリモル）の二量体の酢酸ロジウムを、１４．６ｇの４−トリフルオロメチルフェノールのベンゼン１５０ｍｌ溶液に加える。この混合物を還流させ、６．２ｇ（３０ミリモル）の４−フェニル−２−ジアゾブタ−３−エン酸メチル（６）（Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ Ｌｅｔｔ．、（１９８８年）、２９巻（９）、９７５〜９７８頁）のベンゼン６０ｍｌ溶液を１時間にわたり滴下する。この混合物を室温まで冷却させておき、次いで溶媒を真空下で蒸発して除く。この残渣をフラシュクロマトグラフィーにより２回精製する。４６０ｍｇ（収率４．６％）の結晶化する黄色の油が得られる。

実施例６：（Ｒ，Ｓ）−４−フェニル−２−（４−トリフルオロメチルフェノキシ）ブタ−３−エン酸の調製方法
１２．２ｍｌ（１２．２ミリモル）の１Ｍ水酸化リチウム一水和物水溶液を、４１０ｍｇ（１．２２ミリモル）の実施例５で得られた化合物の２０ｍｌの水酸化ナトリウム溶液に加える。この混合物を室温で１時間攪拌し、次いで溶媒を真空下で蒸発して除く。残渣を２０ｍｌの水に溶解し、得られた溶液をエチルエーテルで洗浄する。水性相を希塩酸で酸性化し、エチルエーテルで抽出する。この有機抽出物を硫酸ナトリウムにより乾燥し、溶媒を真空下で蒸発して除く。残渣を分取ＬＣ／ＭＳにより精製する。
ＺおよびＥの２つの形態に対応する、２種の純粋な生成物（８）および（９）（それぞれ５．５ｍｇおよび７．８ｍｇ）が回収される。
実施例５および６の反応スキームの例示、Ｒ ¹ ＝置換アリール（トリフルオロメチルフェニル）、ステップａ）およびｂ）

結果
血中脂質降下および血糖低下効果をもたらす本発明の化合物の活性を、以下の試験を実施することにより ｉｎ ｖｉｔｒｏ で実証した。

ＰＰＡＲ活性化の測定は、Ｌｅｈｍａｎｎら（Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．、２７０巻、（１９９５年）、１２９５３〜１２９５６頁）により記載された技法に従って実施した。

ＣＶ−１細胞（サルの腎臓細胞）を、キメラタンパク質ＰＰＡＲα−Ｇａｌ４またはＰＰＡＲγ−Ｇａｌ４に対する発現ベクターで、およびＧａｌ４応答配列を含むプロモーターの制御下に置かれたルシフェラーゼ遺伝子の発現を可能にする「レポーター」プラスミドで同時トランスフェクトする。

細胞を９６−ウエルミクロプレート中に播種し、市販の試薬を用いて、レポータープラスミド（ｐＧ５−ｔｋ−ｐＧＬ３）で、およびキメラタンパク質（ＰＰＡＲα−Ｇａｌ４またはＰＰＡＲγ−Ｇａｌ４）に対する発現ベクターで同時トランスフェクトする。４時間インキュベートした後、全培地（１０％ウシ胎児血清を含む）をウエルに加える。２４時間後、培地を除去し、試験生成物（最終濃度５０μＭ）を含む全培地で置き換える。この生成物を細胞と１８時間接触させたままにする。次いで細胞を溶解し、照度計を用いてルシフェラーゼ活性を測定する。次いで、生成物により誘発されたレポーター遺伝子発現の活性化を用いて、ＰＰＡＲ活性化係数を計算することができる（生成物をなにも入れていない対照細胞と比較して）。

一例として、化合物

の５０μＭの濃度のものは、キメラタンパク質ＰＰＡＲα−Ｇａｌ−４を２．３倍だけ、キメラタンパク質ＰＰＡＲγ−Ｇａｌ４を６．４倍だけ活性化する。ＰＰＡＲαまたはＰＰＡＲγリガンドに対する結合領域がない場合は（ベクターはＧａｌ４のみを発現する）、この生成物の存在下で測定されたルシフェラーゼ活性はゼロである。

Claims (1)

1. （Ｒ，Ｓ）−２−メトキシ−４−フェニルブト−３−エン酸、
   メチル（Ｒ，Ｓ）−２−プロポキシ−４−フェニルブト−３−エノエート、
   （Ｒ，Ｓ）−２−プロポキシ−４−フェニルブト−３−エン酸、
   ベンジル（Ｒ，Ｓ）−２−フェノキシ−４−フェニルブト−３−エノエート、
   メチル（Ｒ，Ｓ）−２−トリフルオロメチルフェノキシ−４−フェニルブト−３−エノエート、
   （Ｒ，Ｓ）−２−フェノキシ−４−フェニルブト−３−エン酸、
   （Ｒ，Ｓ）−２−トリフルオロメチルフェノキシ−４−フェニルブト−３−エン酸（ＺおよびＥ形）、
   から選択される化合物、
   およびまた、薬剤として許容されるその塩、溶媒和物および立体異性体。