JP4897490B2 - 転移抑制のための抗pecam治療 - Google Patents
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Description
本願は、2003年11月13日に出願された米国仮特許出願第60/519,986号に優先権を主張し、それは参照により本明細書に包含される。
本発明は、患者において新生物細胞の転移能を阻害するための方法および関連組成物の同定に関する。本方法および組成物には、抗体などのPECAM結合物質、ならびに新生物細胞の浸潤性および転移能を調節するためにPECAM結合物質を用いて疾患を処置または防止する方法が含まれる。
腫瘍形成は、Foulds(1958)により多段階の生物学的過程として記載され、それは現在、遺伝子損傷の蓄積により生じることが分かっている。分子レベルでの多段階過程の腫瘍形成は、正および負の調節エフェクターの両方の破壊を伴う(Weinberg, 1989)。ヒト結腸癌についての分子機序には、多くの癌遺伝子、腫瘍抑制遺伝子および修復遺伝子が関係することがVogelsteinおよびcoworkers(1990)により主張されている。同様に、網膜芽腫の進行をもたらす欠損には、別の腫瘍抑制遺伝子が関連している(Lee et al., 1987)。さらに他の癌遺伝子および腫瘍抑制遺伝子も、様々な他の悪性腫瘍において同定されている。残念ながら、不適切な数の処置可能な癌が残っており、癌の影響は、米国だけで一年に50万人以上の死をもたらすほど壊滅的である。
本発明は、PECAM−1と結合する抗体の全身的投与が、一般的にヒトにおいて致命的な多種多様な異なる腫瘍型の転移拡散を抑制するという予期せぬ発見に関係し、この効果は、あるとすれば、血管形成の何らかの阻害とは独立して達成される。この予期せぬ発見は、新規の抗癌処置剤および医薬の作製の基礎を提供し、ここで全身的投与量の抗PECAM抗体または同様の機能的結果を提供する代用物の供給が、患者における新生物細胞の侵襲性および/または転移能を阻害または低下するために患者に投与される。
図1Aおよび1Bは、マウスにおける抗体処理の効果を示す。
図2Aおよび2Bは、抗体処理の効果を示す。
図3Aおよび3Bは、マウスにおける抗体処理の効果を示す。
図4Aおよび4Bは、マウスにおける抗体処理の効果を示す。
図5Aおよび5Bは、抗体処理の効果を示す。
他に定義されない限り、本明細書中に用いられるすべての技術的および化学的用語は、本発明の属する技術分野における当業者に通常理解されるのと同じ意味を有する。本明細書に記載の何らかの方法および材料と同じかまたは等価なものを、本発明の実施または試験に用いることができるが、好ましい方法および材料が記載される。本発明の目的に関して、下記の用語を以下に定義する。
物について用いられるような、本明細書で用いる用語“天然に存在する”とは、その物を天然において発見することができるという事実を示す。例えば、天然源から単離され得、それらが研究室で人間により意図的に改変されていない、生物(ウイルスを含む)に存在するポリペプチドまたはポリヌクレオチド配列は、天然に存在する。一般的に、天然に存在するという用語は、種に典型的であり得るように、非病理学的(病気でない)個体に存在するものを示す。
以下に用いる学名および下記の細胞培養、分子遺伝学および核酸化学ならびにハイブリダイゼーションの実験法は、当技術分野で公知かつ通常用いられる方法を含み得る。標準技術を、組換え核酸法、ポリヌクレオチド合成法、ならびに微生物培養および形質転換法(例えば、エレクトロポレーション、リポフェクション)に用いる。前記技術および方法を通常、当技術分野における常套法および本明細書の全体を通して供される様々な一般的参考文献(一般的には、Sambrook et al. Molecular Cloning: A Laboratory Manual, 2d ed. (1989) Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, N.Y.を参照のこと。それらは参照により本明細書に含まれる)に従い行う。
天然のヒトPECAM−1タンパク質、その断片、またはその類似体を、特定の抗体の製造を目的として動物を免疫するために用いることができる。これらの抗体には、ポリクローナル抗血清が含まれ得るか、またはハイブリドーマ細胞により製造されるモノクローナル抗体が含まれ得る。抗体を製造するための一般法については、Antibodies:A Laboratory Manual, (1988) E. Harlow and D. Lane, Cold Spring Harbor Laboratory, Cold Spring Harbor, NY(参照により本明細書に包含される)を参照のこと。
材料および方法;
6−8週齢の雌マウスを、すべての研究に用いた。C57B1/6およびBalbCマウスをSimonson Labs(Gilroy, CA)から購入し、Nu/NuマウスをCharles Riverから購入した。腫瘍細胞を、尾静脈注射により接種した。B16−F10マウス黒色腫腫瘍およびルイス肺癌−高転移性(LLC−HM)肺癌モデルについて、各C57B1/6マウスに200μlの培養培地に懸濁した25,000の腫瘍細胞を投与した。4T1マウス乳癌モデルおよびCT26マウス結腸癌モデルについて、各Balb/Cマウスに200μ1の培養培地に懸濁した50,000の腫瘍細胞を投与した。Lox細胞ヒト黒色腫異種移植モデルについて、Nu/Nuマウスに、2回の尾静脈注射により培養培地中全量250万のLox細胞を投与した。初めの注射は朝に行い、次の注射は4時間後に行った。各注射には、300μlの培養培地中に125万の細胞が含まれる。
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様々な腫瘍細胞系に対する抗PECAM−1抗体の結合を試験した。
マウスB16−F10黒色腫細胞、マウス4T1乳癌細胞およびマウスルイス肺癌種−高転移性(LLC−HM)細胞に対する抗PECAM−1抗体の結合を評価した。
Claims (20)
- 哺乳動物に対して全身投与により治療的有効量の医薬を投与することによって、該哺乳動物での転移性腫瘍の新生物細胞の転移または浸潤を抑制または防止するための該医薬の製造における抗PECAM抗体の使用。
- 前記抗PECAM抗体がモノクローナル抗体である、請求項1に記載の使用。
- 前記新生物細胞が、黒色腫細胞、乳癌細胞、結腸癌細胞、または肺癌細胞である、請求項1に記載の使用。
- 前記新生物細胞が抗PECAM抗体への結合を欠き、PECAMが該新生物細胞上で検出不可能である、請求項2に記載の使用。
- 前記新生物細胞がヒト細胞である、請求項1に記載の使用。
- 前記モノクローナル抗体が、腹腔内投与により哺乳動物に投与される、請求項2に記載の使用。
- 前記モノクローナル抗体の投与を、腫瘍増殖が該哺乳動物に確立された後に開始する、請求項2に記載の使用。
- 前記モノクローナル抗体を、腫瘍細胞が該モノクローナル抗体の投与前に少なくとも7日間該哺乳動物の循環系に存在した後に投与する、請求項7に記載の使用。
- 前記腫瘍増殖が、新生物細胞の少なくとも1個の多細胞コロニーを含む、請求項7に記載の使用。
- 前記新生物細胞がヒト腫瘍細胞である、請求項9に記載の使用。
- 前記抗PECAM抗体を複数回の投与で前記哺乳動物に投与する請求項1に記載の使用であって、ここで各投与が少なくとも200マイクログラムの抗PECAM抗体を含み、かつ該複数回の投与が、各投与が少なくとも2日の間隔で少なくとも5回の投与を含む、使用。
- 前記モノクローナル抗体を、腫瘍細胞が該モノクローナル抗体の投与前に少なくとも7日間、該哺乳動物の循環系に存在した後に投与する、請求項11に記載の使用。
- 前記腫瘍細胞が、ヒト新生物細胞の少なくとも1個の多細胞コロニーを含む、請求項12に記載の使用。
- 哺乳動物において転移性腫瘍の新生物細胞の転移または浸潤を抑制または防止するためのキットであって、治療的有効量の抗PECAM抗体および該哺乳動物への該抗PECAM抗体の全身投与のための説明書を含むキット。
- 前記抗PECAM抗体がモノクローナル抗体である、請求項14に記載のキット。
- 前記説明書が、各投与が少なくとも200マイクログラムの該モノクローナル抗体を含む、複数回の投与の投与方法を明記するものである、請求項15に記載のキット。
- 前記説明書が、該モノクローナル抗体を、各投与を複数回の他の投与から少なくとも2日の間隔で少なくとも5回の投与で投与することを明記するものである、請求項16に記載のキット。
- 前記説明書が、上記モノクローナル抗体を他の抗新生物治療と組合せ得ることを明記するものである、請求項15に記載のキット。
- 前記他の抗新生物治療が、電離放射線、化学療法剤、熱剥離、PECAMと結合しない抗腫瘍モノクローナル抗体、放射性同位体種晶の注入、および外科手術からなる群から選択される、請求項18に記載のキット。
- 抗PECAMモノクローナル抗体が、該モノクローナル抗体の投与前に少なくとも7日間その体内に新生物細胞を有していた哺乳動物に投与される、請求項1に記載の使用。
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