JP4851367B2 - ローカルプラズモン増強蛍光センサ - Google Patents
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Description
例えば液体状の試料中の検出対象物と結合する第1物質が固定された検出部と、
この検出部に試料が接するように該試料を保持する試料保持部と、
前記試料中に混合されて、前記検出対象物と結合する複数の第2物質と、
これらの第2物質の各々に結合された金属微粒子と、
この金属微粒子および第2物質の対の各々と一体化された蛍光体と、
前記検出部に対して、前記蛍光体を励起する励起光を照射する光源と、
前記励起光によって励起された蛍光体が発する蛍光を検出する光検出手段とを備えてなることを特徴とするものである。
例えば液体状の試料中の検出対象物と結合する第1物質が固定された検出部と、
この検出部に試料が接するように該試料を保持する試料保持部と、
前記試料中に混合されて、前記第1物質と結合する複数の第2物質と、
これらの第2物質の各々に結合された金属微粒子と、
この金属微粒子および第2物質の対の各々と一体化された蛍光体と、
前記検出部に対して、前記蛍光体を励起する励起光を照射する光源と、
前記励起光によって励起された蛍光体が発する蛍光を検出する光検出手段とを備えてなることを特徴とするものである。
0.1mol(モル)のNHSと0.4molのEDCとを等体積混合した溶液を30μl加え、30分間室温静置。なお、
NHS:N-hydrooxysuccinimide
EDC:1-ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl)carbodiimide
である。
PBSバッファ(pH7.4)で5回洗浄後、1次抗体溶液(500μg/ml)を30μl加え、30〜60分間室温静置。
PBSバッフア(pH7.4)で5回洗浄後、1molのエタノールアミン(pH8.5)を30μl加え、20分間室温静置。さらにPBSバッフア(pH7.4)で5回洗浄。
(2)金コロイド表面分散剤の置換(クエン酸→シロキサン)
5×=10-4molの金コロイド水溶液500ml(ミリ・リットル)に、APS((3-Aminopropyl)trimethoxysilane)水溶液(2.5ml、1mmol)を添加し、15分間強攪拌することにより、金コロイド表面のクエン酸を置換する。
pH10〜11に調整したsodium silicate 0.54重量%水溶液20mlを工程(2)の金コロイド水溶液に添加し、強攪拌する。24時間経過すると、厚さが約4nmのSiO2被膜が形成される。この溶液を遠心分離により30mlまで濃縮した溶液に、170mlのエタノールを添加する。さらに0.6mlのNH4OH(28%)を滴下し、80μl(マイクロ・リットル)のTES(テトラエトキシシラン)を添加し、24時間ゆっくり攪拌すると、厚さ20nmのSiO2被膜からなる不撓性膜46が形成される。
平均粒径が役30nmのクエン酸安定化金ナノ粒子を最大約360pmol(=7×10-11重量%)含む水分散液を1ml用意し、これを遠心分離にかけた後、上澄み0.95mlを捨てる。残った暗赤色、粘稠性の沈殿物を1mlのDMF(N,N-dimethylformamide)に再分散させる。なお、過剰のクエン酸イオンは粒子のカプセル化を阻害する。また、小粒径の粒子を用いる場合は、DMFを加える前に水で洗浄した方が良い。
上記(1)の工程で得られた、平均粒径が約30nmのクエン酸安定化金ナノ粒子を約648pmol(=7×10-11重量%)含むDMF分散液1mlに、ポリスチレン-ポリアクリル酸ブロック共重合体(ポリスチレンが約100量体、ポリアクリル酸が約13量体)のDMF溶液(約10-2g/ml) 10μlを加え、シリンジポンプにより8.3μl/minの流量で水200μlを加えて激しく撹拌する。10分撹拌すると溶液の色が徐々に紫色に変化するので、そこで1重量%のドデカンチオールDMF溶液5μlを加え、24時間撹拌する。その後、さらにシリンジポンプにより、2ml/hの流量で水3mlを加える。
2 抗原
4 1次抗体
6 2次抗体
10 蛍光体
40 試料保持部
40a 試料保持部の底面(検出部)
41 励起光
42 光源
43 蛍光
44 光検出器
Claims (6)
- 試料中の検出対象物と結合する第1物質が固定された検出部と、
この検出部に試料が接するように該試料を保持する試料保持部と、
前記試料中に混合されて、前記検出対象物と結合する複数の第2物質と、
これらの第2物質の各々に結合された金属微粒子と、
前記第2物質と一体化された蛍光体と、
前記検出部に対して、前記蛍光体を励起する励起光を照射する光源と、
前記励起光によって励起された蛍光体が発する蛍光を検出する光検出手段とを備えてなるローカルプラズモン増強蛍光センサ。 - 前記第1物質が、前記検出対象物としての抗原と結合する1次抗体であり、
前記第2物質が、前記抗原と結合する2次抗体であることを特徴とする請求項1記載のローカルプラズモン増強蛍光センサ。 - 試料中の検出対象物と結合する第1物質が固定された検出部と、
この検出部に試料が接するように該試料を保持する試料保持部と、
前記試料中に混合されて、前記第1物質と結合する複数の第2物質と、
これらの第2物質の各々に結合された金属微粒子と、
前記第2物質と一体化された蛍光体と、
前記検出部に対して、前記蛍光体を励起する励起光を照射する光源と、
前記励起光によって励起された蛍光体が発する蛍光を検出する光検出手段とを備えてなるローカルプラズモン増強蛍光センサ。 - 前記第1物質が、前記検出対象物としての抗原と結合する1次抗体であり、
前記第2物質が、前記1次抗体と結合する物質であることを特徴とする請求項3記載のローカルプラズモン増強蛍光センサ。 - 前記金属微粒子が不撓性膜によって覆われていることを特徴とする請求項1から4いずれか1項記載のローカルプラズモン増強蛍光センサ。
- 前記金属微粒子が金微粒子であることを特徴とする請求項1から5いずれか1項記載のローカルプラズモン増強蛍光センサ。
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Families Citing this family (13)
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---|---|---|---|---|
JP5424610B2 (ja) * | 2007-11-07 | 2014-02-26 | 株式会社東芝 | 光導波路型センサチップ、光導波路型センサチップの製造方法、物質の測定方法、物質測定用キットおよび光導波路型センサ |
US20090124024A1 (en) | 2007-11-07 | 2009-05-14 | Shingo Kasai | Optical-waveguide sensor chip, method of manufacturing the same, method of measuring substance, substance-measuring kit and optical-waveguide sensor |
JP5428322B2 (ja) * | 2008-12-19 | 2014-02-26 | コニカミノルタ株式会社 | プラズモン励起センサを用いたアッセイ法 |
WO2010108038A2 (en) | 2009-03-18 | 2010-09-23 | University Of Utah Research Foundation | A microscopy system and method for creating three dimensional images using probe molecules |
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JP2012211799A (ja) * | 2011-03-31 | 2012-11-01 | Fujifilm Corp | 局在プラズモン増強蛍光粒子、局在プラズモン増強蛍光検出用担体、局在プラズモン増強蛍光検出装置および蛍光検出方法 |
JP5703098B2 (ja) * | 2011-03-31 | 2015-04-15 | 富士フイルム株式会社 | 生体分子検出装置および生体分子検出方法 |
TWI476394B (zh) * | 2012-04-02 | 2015-03-11 | Univ Chang Gung | And a method and method for determining whether a target biomolecule exists in a sample to be measured |
CN104237537A (zh) * | 2014-10-21 | 2014-12-24 | 南京基蛋生物科技有限公司 | 一种检测心肌肌钙蛋白的免疫层析荧光试剂条及制备方法 |
CN104502584A (zh) * | 2014-12-18 | 2015-04-08 | 南京基蛋生物科技有限公司 | 基于金属纳米粒子增强荧光的干式免疫层析分析方法 |
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WO2019176442A1 (ja) * | 2018-03-16 | 2019-09-19 | パナソニックIpマネジメント株式会社 | 検出装置、検出基板及び検出方法 |
Family Cites Families (10)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP3326708B2 (ja) * | 1993-08-31 | 2002-09-24 | 日水製薬株式会社 | 光学的測定装置およびその方法 |
CA2248140C (en) * | 1996-03-04 | 2005-02-01 | Ronald P. Mischak | Assay and reagents for quantifying hbnp |
US20030228682A1 (en) * | 2002-04-30 | 2003-12-11 | University Of Maryland, Baltimore | Fluorescence sensing |
JP2003329591A (ja) * | 2002-05-08 | 2003-11-19 | Takao Fukuoka | 窒素酸化物の分析方法 |
JP4699756B2 (ja) * | 2002-08-20 | 2011-06-15 | クエスト ダイアグノスティックス インヴェストメンツ インコーポレイテッド | 親水性化学発光アクリジニウムラベル化剤 |
US7598093B2 (en) * | 2003-07-23 | 2009-10-06 | Ctl Analyzers, Llc | Nanoparticle and microparticle based detection of cellular products |
FR2860872A1 (fr) * | 2003-10-09 | 2005-04-15 | Commissariat Energie Atomique | Micro-capteurs et nano-capteurs d'especes chimiques et biologiques a plasmons de surface |
US20050148100A1 (en) * | 2003-12-30 | 2005-07-07 | Intel Corporation | Methods and devices for using Raman-active probe constructs to assay biological samples |
US20050221507A1 (en) * | 2004-03-30 | 2005-10-06 | Intel Corporation | Method to detect molecular binding by surface-enhanced Raman spectroscopy |
US20070134815A1 (en) * | 2005-07-11 | 2007-06-14 | Danielle Chamberlin | Sensitivity enhancement of POCT devices using gold and silver nanoparticles on substrates containing nanostructures or nanoparticles that interact with labeling particles |
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Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
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