JP4766716B2 - PcrVに対する抗体 - Google Patents
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Description
(1)(A)インビトロにおいて1nMから200nMの濃度で、緑膿菌の白血球細胞に対する細胞傷害活性の50%以上を阻害する、
(B)インビトロにおいて1nMから50nMの濃度で、緑膿菌のミエローマ細胞に対する細胞傷害活性の50%以上を阻害する、および
(C)PcrVとの解離定数(Kd)が、2×10−9(M)以下である、
から選ばれる少なくとも1つの性質を有するPcrVに対するモノクローナル抗体またはその一部、
(2) 受託番号FERM P-21403として寄託されたハイブリドーマ、受託番号FERM P-21404として寄託されたハイブリドーマ、受託番号FERM P-21405として寄託されたハイブリドーマまたは受託番号FERM P-21406として寄託されたハイブリドーマのいずれかにより産生されるモノクローナル抗体の全ての相補性決定領域(CDR)のアミノ酸配列を有するモノクローナル抗体またはその一部、
(3)受託番号FERM P-21403として寄託されたハイブリドーマ、受託番号FERM P-21404として寄託されたハイブリドーマ、受託番号FERM P-21405として寄託されたハイブリドーマまたは受託番号FERM P-21406として寄託されたハイブリドーマのいずれかにより産生されるモノクローナル抗体またはその一部、
(4)配列番号1で示されるアミノ酸配列の136位から233位に、そのエピトープを有する、PcrVに対するモノクローナル抗体またはその一部、
(5)1)相補性決定領域に下記アミノ酸配列を含む重鎖可変領域;
SFTSYWMH(配列番号15)INPSNGRTNYNEKFNT(配列番号16)YGNYVVYYTMDY(配列番号17)および
2)相補性決定領域に下記アミノ酸配列を含む軽鎖可変領域;
SASTSVSYME(配列番号18)TTSKLAS(配列番号19)
HQWRNYPFT(配列番号20)
を有するPcrVに対するモノクローナル抗体またはその一部、
(6)1)相補性決定領域に下記アミノ酸配列を含む重鎖可変領域;
SITSDYAWN(配列番号21)YITYNGDTSYNPSLKS(配列番号22)SRNYYGAWFAY(配列番号23)および
2)相補性決定領域に下記アミノ酸配列を含む軽鎖可変領域;
KASQYVGTTVA(配列番号24)RASTRHT(配列番号25)
QQYCSSPLT(配列番号26)
を有するPcrVに対するモノクローナル抗体またはその一部、
(7)1)配列番号11のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域;および
2)配列番号12のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域;を有するPcrVに対するモノクローナル抗体またはその一部、
(8)1)配列番号13のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域;および
2)配列番号14のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域;を有するPcrVに対するモノクローナル抗体またはその一部、および
(9)上記(1)〜(8)のいずれかに記載の抗体又はその一部を有効成分として含む医薬組成物、および
(10)上記(1)〜(8)のいずれかに記載の抗体又はその一部を産生するハイブリドーマ、
に関する。
(2)インビトロにおいて1nMから50nMの濃度で、緑膿菌のミエローマ細胞に対する細胞傷害活性の50%以上を阻害する、および
(3)PcrVとの解離定数(Kd)が、2×10−9(M)以下である、
から選ばれる少なくとも1つの性質を有するPcrVに対するモノクローナル抗体である。
次に、緑膿菌の毒素などにより影響を受ける細胞(以下、ターゲット細胞とする)を細胞培養用の培地などを用いて希釈を行い、適当な数となるように調整する。具体的には、ミエローマ細胞を用いる場合であれば3×106〜5×106Cells/ml、白血球細胞を用いるのであれば1×106〜3×106Cells/mlの範囲で調整することが望ましい。同様にして、緑膿菌についても培養用の培地などで1×107〜1×108cfu/mlとなるように調整する。そして、上述したモノクローナル抗体の存在下において、緑膿菌およびターゲット細胞を、同一の試験管やウェル(例えば、マイクロプレート上のウェルなどのインビトロの条件)において適度な培養条件により培養する。このときの培養条件は細胞やバクテリアを生育させるのに良好とされる一般的な培養条件でよい。また、培養時間はターゲット細胞の種類により最適な条件は適宜変更するが、例えばミエローマ細胞を用いる場合であれば1〜3時間程度、白血球細胞を用いる場合であれば1〜3時間程度が好ましい。抗体を添加しないウェルを対照群として、対照群に対して50%を阻害する濃度(有効濃度)を算出する。ターゲット細胞の生死の判定については種々の手法が確立されているが、呈色試薬を添加した後に、適当な波長(例えば、400〜500nm)における吸光度の測定などが有用である(参考文献:Nature Medicine、1999年、vol.5、392〜395ページ)。
そしてb)(i)CDR1はアミノ酸配列 SASTSVSYME(配列番号18)を有し、CDR2はアミノ酸配列TTSKLAS(配列番号19)を有し、CDR3はアミノ酸配列HQWRNYPFT(配列番号20)を有する、免疫グロブリン軽鎖可変領域(VL)および(ii)ヒト軽鎖の定常部分またはその断片を含んでいることが望ましい。
そしてb)(i)CDR1はアミノ酸配列KASQYVGTTVA(配列番号24)を有し、CDR2はアミノ酸配列RASTRHT(配列番号25)を有し、CDR3はアミノ酸配列QQYCSSPLT(配列番号26)を有する、免疫グロブリン軽鎖可変領域(VL)および(ii)ヒト軽鎖の定常部分またはその断片を含んでいることが望ましい。
(イ)PcrVを細胞表面に発現する細胞もしくは細胞表面に発現するように人工的に樹立した細胞株、またはPcrVを細胞表面に発現するように遺伝子組換え技術を用いて作成した遺伝子組換え細胞;
(ロ)PcrVまたはその一部をタンパク質として発現するように遺伝子組換え技術を用いて作成された遺伝子組換え細胞を培養して得た培養上清もしくは当該培養上清から精製されたPcrVまたはその一部;または
(ハ)化学的に合成されたPcrVまたはその一部。
このような担体および添加物の例として、水、医薬的に許容される有機溶媒、コラーゲン、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、アルギン酸ナトリウム、水溶性デキストラン、ペクチン、メチルセルロース、エチルセルロース、カゼイン、ジグリセリン、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、ワセリン、ヒト血清アルブミン(HSA)、マンニトール、ソルビトール、ラクトース、医薬添加物として許容される界面活性剤などが挙げられる。使用される添加物は、剤型に応じて上記の中から適宜あるいは組合せて選択されるが、これらに限定されるものではない。
参考例
比較実験をするために、Mab166(特願2005−500250など)をリコンビナント抗体として作製した。
まずサブクラスがIgG2aである抗体を産生するハイブリドーマからmRNAを抽出し、H鎖およびL鎖の定常領域をRT−PCR法でクローニングした。PCRで増幅されたそれぞれの断片はpcDNA3.1(+)ベクター(インビトロジェン社製)にNheI、NotIサイトで挿入し、さらに可変領域部分のDNA断片を挿入できるようにマルチクローニングサイトを組み込んだ。
次にMab166可変領域部のH鎖およびL鎖の遺伝子配列をそれぞれ4分割した後、それらのセンスDNAとアンチセンスDNAを合成し、アニーリング反応した。アニーリング後の断片をDNAリガーゼによって結合させ、H鎖についてはMfeIとBlp I領域に、L鎖についてはEcoRVとBsiW I領域にクローニングを行った。
塩基配列が確認されたH鎖およびL鎖のベクターをLipofectamine2000(インビトロジェン社製)を用いて、HEK239T細胞へ導入し、48時間後、その細胞上清を回収した。回収された細胞上清からProtein−G(PIERCE社製)カラムでリコンビナントMab166を精製した。
以下、実施例を示して本発明を具体的に説明するが、本発明は下記実施例に制限されるものではない。なお、抗体作製手法として、特に断らない限り、Immunochemistry in Practice (Blackwell Scientific Publiations)に記載されている方法を用いた。また、遺伝子操作的手法として、特に断らない限り、Molecular Cloning:A Laboratory Manual,2nd Edition(Cold Spring Harbor Laboratory)に記載されている方法を用いた。
東海大より分与された緑膿菌株標準株PAO1の染色体DNAを抽出し、そのDNAを鋳型としてPCR法により、PcrVタンパク質をコードする遺伝子(配列番号:2)を増幅した。5’側プライマーに制限酵素Sph I認識部位を、3’側プライマーに制限酵素Hind III認識部位を設け(配列番号:3、4)、さらに発現ベクター挿入時に、ビオチン標識のためにヒスチジンタグと開始コドンの間にシステインが挿入されるように設計した。増幅されたPCR断片はSph IおよびHind III部位でpQE30ベクター(GEヘルスケア社製)へクローニングを行なった。塩基配列を確認後、大腸菌JM109へ本ベクターを導入し、組み換え大腸菌(PcrV−JM109)を得た。PcrV−JM109を500mlのLB/Ampicillin液体培地中に37℃で培養し、OD600が0.5になった時に0.1MのIPTGを200μl加え、PcrVの発現を誘導した。さらに、37℃で1.5時間培養後、菌体を遠心分離し、0.5%のリゾチーム(シグマ社製)を含む緩衝液A(25mM Tris−HCl(pH8.0)、0.5M NaCl、2mM MgCl2)を15 ml加え、0℃で30分間放置後、超音波処理を行った。遠心後、可溶性画分を得、His−Bind Columns(Novagen社製)に通した後、200mM イミダゾールを含む緩衝液B(20mM リン酸緩衝液(pH7.4)、500mM NaCl)で溶出した。最終的な溶出画分は10mMリン酸緩衝液(pH7.4)に対して透析することにより緩衝液置換を行った。
上記のように、発現・精製させたPcrVタンパク質を終濃度10mM メルカプトエチルアミン溶液中で37℃、150分反応させてシステイン残基を還元した。還元されたSH基にモル比で20倍量のPEO−Maleimide activated biotin(PIERCE社製)を添加し、4℃で終夜反応後、過剰なビオチンを除去するため、透析をおこなった。
抗原として精製したPcrV 20μgをフロイント完全アジュバントと共に4週齢Balb/c雌マウス7匹に腹腔内投与し、初回免疫とした。その後、14日後、35日後にPcrV 20μgをフロイント不完全アジュバントと共に投与し、追加免疫とした。さらに77日後にPcrV 20μgの腹腔投与とPcrV 10μgを尾静脈投与することで、最終免疫とした。
最終免疫の3日後に脾臓を摘出し、脾臓細胞を回収した。脾臓細胞とマウスミエローマ細胞(p3×63−Ag8.U1、東京腫瘤研究所)を50%のポリエチレングリコール4000を用いて融合させ、ヒポキサンチン、アミノプテリン、及びチミジンを含む培地で選択した。
細胞融合8日後に特異抗体産生細胞のスクリーニングを行った。スクリーニングに用いたイムノアッセイは以下の通りである。96穴マイクロタイタープレート(ヌンク社製)の各ウェルに2μgの抗マウスIgG抗体(シバヤギ社製)を含むトリス緩衝液(50mM Tris−HCl、pH7.5)を200μl加えて4℃で16時間固定した。これらのウェルを300μlの洗浄液(0.1% Tween20を含む生理食塩水)で2回洗浄した後、ブロックエース(大日本製薬社製)を300μl加えて室温で2時間放置して、ブロッキングを行った(抗マウスIgG抗体固相化プレート)。各ウェルを300μlの洗浄液で2回洗浄した後、50μlのハイブリドーマ培養上清を150μlの緩衝液C(0.9% 塩化ナトリウム、0.05% アジ化ナトリウム、0.5% ウシ血清アルブミン、0.01% Tween80、25μM Diethylenetriamine−N,N,N’,N‘’、N’ ’−pentaacetic acidを含む50mMトリス緩衝液、pH7.6)で希釈して各ウェルに添加し、4℃で終夜反応させた。300μlの洗浄液で3回洗浄後、10ngのEu−Labelled Streptavidin(PERKIN ELMER社製)と25ng ビオチン標識化PcrVを含む200μlの緩衝液Cを加え、室温1時間反応させた。反応後、300μlの洗浄液で3回洗浄を行い、増強試薬(1.39g/l フタル酸カリウム、19.3mg/l Tri−n−octylphosphine oxide、4.59mg/l 2−naphthoyltrifluoroacetone、1.0g/l Triton−X100、6.0g/l 酢酸)を200μl添加し、その時間分解蛍光を測定した。
抗体(1F3、2A4、6F5、7A7)の結合活性を測定するために、競合イムノアッセイを行った。96穴マイクロタイタープレート(ヌンク社製)の各ウェルに1.5μgの抗マウスFc抗体(Jackson ImmunoReseach社製)を含むトリス緩衝液(50mM Tris−HCl、pH7.5)を100μl加えて4℃で16時間固定した。これらのウェルを300μlの洗浄液で2回洗浄した後、10%スクロースを含むブロックエース(大日本製薬社製)溶液を300μl加えて室温で2時間放置して、ブロッキングを行った(抗マウスIgG抗体固相化プレート)。各ウェルを300μlの洗浄液で2回洗浄した後、2ng/ウェルの各抗体および未標識のPcrVを500ng/ウェルから10倍の希釈系列で5段階添加した。その後、5ng/ウェルのビオチン化PcrVを添加し終夜反応させた。300μlの洗浄液で4回洗浄し、100/ウェルのEnhancement Solution(Wallac社製)を添加後、1分間の攪拌後、時間分解蛍光を測定した。その結果、Mab166と比較して、1F3、2A4、6F5、7A7はPcrVとの強い結合活性を示した(図1)。
1F3、2A4、6F5、7A7はMab166とエピトープが異なることを証明するため、当該抗体とMab166とのサンドイッチ・アッセイの可否を検討した。
最初に、Mab166のビオチン標識を行った。100μgのMab166と7.853μgのNHS−PEO4 Biotin(PIERCE社製)を0.1M PBS(pH7.4)中で混合し、氷中で2時間反応させた。その後、反応溶液から未反応のビオチンを除去するため、ゲルクロマトグラフィー(G2000SWカラム(TOSHO社製))を行った。
1F3、2A4、6F5、7A7について、細胞傷害阻害活性試験を行った。その方法は以下の通りである。
まず1F3、2A4、6F5、7A7を、32μg/mlから2倍希釈系列で希釈し、96ウェルマイクロプレートの各ウェルに10μlずつ分注した。次にミエローマ細胞P3U1(ATCCから入手)を5×106Cells/mlもしくは白血球細胞の一種であるU937(ATCCから入手)細胞を1×106Cells/mlに細胞培養用培地(炭酸水素ナトリウムを含み、L−グルタミン及びフェノール・レッド不含RPMI1640(Sigma社製))を用いて調整し、当該96ウェルマイクロプレートに各100μl添加した。さらにCation−adjusted Mueller Hinton Broth(Difco)で一晩培養したシュードモナス・アエルギノーザSR24株を細胞培養用培地を用いて1×108cfu/mlに調整した菌液を10μl/ウェルで添加し、37℃、5%C02存在下で3時間培養した。3時間経過後、WST−8(キシダ化学社製)を各10μl添加し、ミエローマ細胞P3U1を用いた場合は、37℃、5%C02存在下で3時間、U937細胞の場合は1時間培養した。培養終了後、450nmの波長で吸光度を測定した。
欠失変異PcrV(136−233)は以下の方法で作製した。
PcrV抗原タンパク発現プラスミドであるpQE30―PcrVを鋳型とし、5’側プライマーGCTCGAGGATCCCAAGGCGCTGACCGC(配列番号5)、3’側プライマーGTTAAGCTTCTCGAAGGGGTACTC(配列番号6)を用いてPCRを行い、増幅したフラグメントをBamHI、HindIIIで制限酵素処理し、pET32b(Novagen社製)に挿入した。塩基配列を確認後、本ベクターを大腸菌BL21−DE3株に導入し組み換え大腸菌(欠失変異PcrV−BL21)を得た。この発現株を2mlのLB/Ampicillin液体培地で37℃、一昼夜前培養した。500mlのLB/Ampicillin液体培地中に2mLの前培養液を加えて37℃で培養し、OD600が0.5になった時に培養液を氷上で30分間静置した。終濃度0.75mMとなるようにIPTGを加え、震盪培養機で15℃、160rpm、一昼夜培養してPcrVの発現を誘導した。培養液を4℃、x5000g、30minで遠心して集菌した。上清を除き、菌体に0.1%のリゾチーム(シグマ社製)を含むBuffer X(25mM Tris−HCl(pH7.5)、150mM NaCl、2mM MgCl2)を10 ml加えて懸濁し、氷上で1時間静置した後、氷冷しながら超音波破砕処理した。遠心により可能性画分を得、Ni−NTAアガロース(Quiagen)を充填したカラムに通した後、Buffer Y(25mM Tris−HCl(pH7.5)、150mM NaCl、200mM Imidazole)で溶出した。最終的な溶出画分は10mMリン酸緩衝液(pH7.4)に対して透析することにより緩衝液置換を行った。
96穴マイクロタイタープレート(ヌンク社製)の各ウェルに1.5μgの抗マウスIgG Fc抗体(Jackson ImmunoResearch社製)を含むトリス緩衝液(50mM Tris−HCl、pH7.5)を150μl加えて4℃で16時間固定した。これらのウェルを300μlの洗浄液(0.1% Tween20を含む生理食塩水)で2回洗浄した後、ブロッキング溶液(50mM Tris−HCl pH7.5、2%ブロックエース(大日本製薬社製)、10%スクロース)を300μl加えて室温で2時間放置して、各ウェルをブロッキングした(抗マウスIgG抗体固相化プレート)。各ウェルを300μlの洗浄液で1回洗浄した後、緩衝液C(0.9% 塩化ナトリウム、0.05% アジ化ナトリウム、0.5% ウシ血清アルブミン、0.01% Tween80、25μM Diethylenetriamine−N,N,N’ ,N’ ’, N’ ’−pentaacetic acidを含む50mMトリス緩衝液、pH7.6)で80ng/mlに希釈したPcrV抗体溶液を50μlずつ各ウェルに添加し、Buffer Cで200ng/mlに希釈したEu−Labelled Streptavidin(PERKIN ELMER社製)溶液を各ウェルに50μlずつ、DELFIA Asssay Bufferで各濃度に希釈した欠損変異PcrVタンパクを各ウェルに100μlずつ加え4℃で終夜反応させた。300μlの洗浄液で3回洗浄後、200μlの増強試薬(1.39g/l フタル酸カリウム、19.3mg/l Tri−n−octylphosphine oxide、4.59mg/l 2−naphthoyltrifluoroacetone、1.0g/l Triton−X100、6.0g/l 酢酸)を200μl添加し、その時間分解蛍光を測定した(図6)。
またウエスタンブロット法による結合解析も行なった。精製したリコンビナントPcrVタンパクをSDS−PAGEを行った後、PVDFメンブレンに転写した。転写されたメンブレンはブロックエース(大日本製薬製)溶液で室温、2時間、振盪しながらブロッキングした。1μg/mlに希釈したPcrV抗体溶液をメンブレンに加え、4℃で終夜反応させた後、洗浄液B(10mM リン酸緩衝液(pH7.4)、0.05% Tween20)で洗浄した。2次抗体として標識した抗マウスIgG抗体(GE Healthcare社製)溶液をメンブレンに加え、室温で2時間反応後、メンブレンを洗浄液Bで洗浄し、ECL plus Western Blot Detection System(GE Healthcare社製)で発色させ、LAS−1000(FUJIFILM)で撮影した(図7)。PcrV中和抗体1F3、2A4は全長PcrVおよび欠失変異PcrVの双方に対して反応したが、m166、及び中和活性の低い6F5、7A7は全長PcrVに対してのみ反応し、欠失変異PcrVには反応しなかった。
全長PcrVタンパク質(配列番号1)および欠損変異PcrVタンパク質(配列番号1における136位−233位のアミノ酸配列を有する)を用いて,1F3、2A4、m166における細胞傷害阻害活性の抑制試験を行なった。その方法は以下の通りである。
まず1F3、2A4、m166をそれぞれ200nM、200nM、400nMから2倍希釈系列で希釈し、96ウェルマイクロプレートに10μlずつ分注した。本試験における1F3、2A4、m166の試験濃度域はそれぞれ1.56−6.25nM、6.25−25nM、50−200nMとした.各試験濃度域に対して全長PcrVタンパク質および欠損変異PcrVタンパク質を30、10、3、1、0.3倍モル濃度で96ウェルプレートに10μl添加し、30分室温で放置した.次にミエローマ細胞U3P1を5×106cells/mlに細胞培養用培地(炭酸水素ナトリウムを含み、L−グルタミン及びフェノール・レッド不含RPMI1640(Sigma社製))を用いて調製し、当該96ウェルマイクロプレートに各70μl添加した。さらにMueller Hinton Broth(Difco)で一晩培養した緑膿菌SR24株を細胞培養用培地を用いて1×108cfu/mlに調製した菌液を10μl添加し、37℃、5%C02存在下で3時間培養した。3時間経過後、WST−8(キシダ化学社製)を各10μl添加し、37℃、5%C02存在下で3時間培養した。培養終了後、450nmの波長で吸光度を測定した。
樹立されたハイブリドーマ細胞から、RNeasy Mini Kit(QIAGEN社製)を用いて、RNAの抽出を行った。抽出したRNAを1μgから、5’RACE Syatem for Rapid Amplification of cDNA Ends,Version 2.0(Invitrogen社製)を用いて、DNA断片の増幅を行った。その際、cDNA合成のために使用したプライマーは、1F3がTAGAGTCACCGAGGAGCCAGTTGT(配列番号:7)であり、2A4はTCCAGAGTTCCAAGTCACAGTCAC(配列番号:8)であった。また5’RACE法に用いたプライマーは、1F3がAGGGGCCAGTGGATAGACCGATGGGGCTGT(配列番号:9)であり、2A4がAGGGGCCAGTGGATAGACTGATGGGGGTGT(配列番号:10)であった。増幅された断片は、TOPO TA Cloning Kit(Invitrogen社製)でクローニングされ、Applied Biosystems 3130 Genetic Analyzer(Applied Biosystems社製)で塩基配列を解析した。1F3の解析結果を、図10に、2A4については図11に示した。
Claims (8)
- 配列番号1で示されるアミノ酸配列の136位から233位を、その認識エピトープとして有する、PcrVに対するモノクローナル抗体またはその抗体断片。
- 受託番号FERM P-21403として寄託されたハイブリドーマ、または受託番号FERM P-21404として寄託されたハイブリドーマのいずれかにより産生されるモノクローナル抗体の全ての相補性決定領域(CDR)のアミノ酸配列を有するモノクローナル抗体またはその抗体断片。
- 受託番号FERM P-21403として寄託されたハイブリドーマ、または受託番号FERM P-21404として寄託されたハイブリドーマのいずれかにより産生されるモノクローナル抗体またはその抗体断片。
- 1)相補性決定領域に下記アミノ酸配列を含む重鎖可変領域;SFTSYWMH(配列番号15)、INPSNGRTNYNEKFNT(配列番号16)およびYGNYVVYYTMDY(配列番号17)ならびに
2)相補性決定領域に下記アミノ酸配列を含む軽鎖可変領域;SASTSVSYME(配列番号18)、TTSKLAS(配列番号19)およびHQWRNYPFT(配列番号20)を有するPcrVに対するモノクローナル抗体またはその抗体断片。 - 1)相補性決定領域に下記アミノ酸配列を含む重鎖可変領域;SITSDYAWN(配列番号21)、YITYNGDTSYNPSLKS(配列番号22)およびSRNYYGAWFAY(配列番号23)ならびに
2)相補性決定領域に下記アミノ酸配列を含む軽鎖可変領域;KASQYVGTTVA(配列番号24)、RASTRHT(配列番号25)およびQQYCSSPLT(配列番号26)を有するPcrVに対するモノクローナル抗体またはその抗体断片。 - 1)配列番号11のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域;および
2)配列番号12のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域;を有するPcrVに対するモノクローナル抗体またはその抗体断片。 - 1)配列番号13のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域;および
2)配列番号14のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域;を有するPcrVに対するモノクローナル抗体またはその抗体断片。 - 請求項1〜7のいずれか1項に記載の抗体又はその抗体断片を有効成分として含む医薬組成物。
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CN118440191A (zh) * | 2024-05-11 | 2024-08-06 | 重庆原伦生物科技有限公司 | 一种抗铜绿假单胞菌PcrV抗体的制备及其应用 |
Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2005500250A (ja) * | 2001-01-26 | 2005-01-06 | エムシーダブリユー リサーチ フオンデーシヨン インコーポレーテツド | シュードモナスv抗原を用いる免疫化のための方法および組成物 |
WO2007114340A1 (ja) * | 2006-03-30 | 2007-10-11 | Meiji Seika Kaisha, Ltd. | 緑膿菌の外膜タンパク質pa0427 |
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---|---|---|---|---|
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US5648267A (en) | 1992-11-13 | 1997-07-15 | Idec Pharmaceuticals Corporation | Impaired dominant selectable marker sequence and intronic insertion strategies for enhancement of expression of gene product and expression vector systems comprising same |
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DE69930166T2 (de) * | 1998-11-25 | 2006-12-14 | MCW Research Foundation, Inc., Milwaukee | Verfahren und zusammensetzungen für impfung mit dem pseudomonas aeruginosa v-antigen |
US20030228324A1 (en) * | 1999-05-06 | 2003-12-11 | Malcolm Andrew J. | Peptide compositions and methods of producing and using same |
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