JP4615567B2 - C型肝炎ウイルス感染に関連する肝疾患の予後の予測 - Google Patents
C型肝炎ウイルス感染に関連する肝疾患の予後の予測 Download PDFInfo
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- G01N33/576—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for hepatitis
- G01N33/5767—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for hepatitis non-A, non-B hepatitis
Description
C30−39:IVGGVYLLPR(配列番号1)
C31−40:VGGVYLLPRR(配列番号2)
C32−41:GGVYLLPRRG(配列番号3)
NS5A−2132−2140:RYAPACKPL(配列番号4)
C33−42:GVYLLPRRGP(配列番号5)
C34−43:VYLLPRRGPR(配列番号6)
C35−44:YLLPRRGPRL(配列番号7)
C36−45:LLPRRGPRLG(配列番号8)
C37−46:LPRRGPRLGV(配列番号9)
以下の操作は,特に記載のないかぎり,室温(25℃)で行った。フィルタープレートを0.05%Tween−20/PBSで洗浄した。暗所でフィルタープレートの各ウェルにカルボキシビーズ(Luminex社製)を100μlずつ入れて吸引し,0.1M MES(2−モルホリノエタンスルホン酸)緩衝液(pH7.0)で洗浄し,50μlの0.1M MES緩衝液(pH7.0)を加えた。EDC(N−エチル−N’−(3−ジメチルアミノプロピル)−カルボジイミド塩酸塩)(10mg/ml/0.1M MES緩衝液(pH7.0))を各ウェルに10μlずつ添加した。
被験者から得た血清を10%ブロックエース(登録商標)/PBSで100倍に希釈した。フィルタープレートを0.05%Tween−20/PBSで洗浄し,先に作成したペプチド結合ビーズを5μl/ウェルで添加した。ビーズを0.05%Tween−20/PBSで洗浄した後,希釈血清を100μl/ウェルで加え,室温で2時間反応した。ビーズを0.05%Tween−20/PBSで洗浄し,ビオチン化ヤギ抗ヒトIgG(γ)抗体を100μl/ウェルで加え,室温で1時間反応した。ビーズを0.05%Tween−20/PBSで洗浄した後,ストレプトアビジン−R−フィコエリスリンコンジュゲート(SAPE)を100μl/ウェルで加え,室温で30分間反応した。次に,Luminex蛍光フローメトリーシステムで蛍光強度を測定した。
Claims (4)
- 被験者の血液中において,配列番号1〜4からなる群より選択されるペプチドに対する抗体の抗体価を測定することを特徴とする,HCV感染に関連する肝疾患の進行を予測する方法。
- C型肝炎ウイルス感染に関連する肝疾患の進行を予測するためのキットであって,配列番号1〜4からなる群より選択されるペプチドを含むキット。
- 肝疾患の進行が,慢性肝炎から肝硬変への進行である,請求項2に記載のキット。
- 肝疾患の進行が,慢性肝炎または肝硬変から肝癌への進行である,請求項2に記載のキット。
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