JP4540667B2 - 抗真菌性ネイルコート - Google Patents

Description

（関連出願の相互参照）
本出願は、２００３年３月２１日付けで出願された特許出願番号第６０／４５６，６８４の米国仮出願の優先権を主張する。

本発明は、足指の爪又は指の爪、及びこれに隣り合った皮膚の爪甲真菌症を回復又は予防するのに有用な局所抗真菌性組成物に関する。さらに詳しくは、本発明は、二重作用抗真菌性ネイルコート組成物及び該抗真菌性組成物を真菌に感受性の爪又は感染した爪及び／又は隣り合った皮膚に施用する方法に関する。

皮膚、毛髪、爪又は粘膜の表在性真菌感染症は、全ての人々の間で未だに極めてありふれたものである。特に、爪甲真菌症は爪の真菌感染症である。爪甲真菌症は、頻繁に生じ、４０歳から６０歳の年齢の間の最大約１５％の人を冒す。幾つかの評価は、爪甲真菌症が南アメリカの全住民の約６から約１３％を冒し、米国では約４．９から１２．３百万の人々が冒されていることを示唆している。欧州では、爪甲真菌症の推定される全罹病率は、約３から約１０％の範囲内にある。

抗真菌剤の爪を通って爪床及び周囲の皮膚への送達は、主として使用される被膜形成性の水不溶性重合体が乾燥被膜から爪及び皮膚中への薬剤の拡散を制限すること及び従来のネイルラッカー組成物は爪及び周囲の皮膚の両方に薬剤を最適抗真菌活性に十分な量で送達するための浸透促進の最適バランスを有していないことから、ネイルラッカーの形態では爪甲真菌症（指の爪、足指の爪、及び直に接している周囲の皮膚の感染症）の治療に対する有効性は小さかった。

爪の真菌感染症（一般に、爪甲真菌症と呼ばれる）は、皮膚糸状菌によって最も頻繁には引き起こされるが、糸状菌やカンジダ種によっても引き起こされ得る。爪甲真菌症は、男性や高齢者では主として指の爪よりもむしろ足指の爪に存在する。爪甲真菌症は、最も一般的には紅色白癬菌（Ｔｒｉｃｈｏｐｈｙｔｏｎ． ｒｕｂｒｕｍ）、毛瘡白癬菌（Ｔｒｉｃｈｏｐｈｙｔｏｎ． ｍｅｎｔａｇｒｏｐｈｙｔｅｓ）及びエピデルモフィトン・フロッコーズム（Ｅｐｉｄｅｒｍｏｐｈｙｔｏｎ． ｆｌｏｃｃｕｓｕｍ）によって引き起こされる。非皮膚糸状菌による爪甲真菌症は、通常は、カンジダ種、例えばカンジダ・アルビカンス（Ｃａｎｄｉｄａ ａｌｂｉｃａｎｓ）によって引き起こされ、おそらくは免疫応答性が保たれている人の足指の爪よりも指の爪において侵襲性の爪の病気を引き起こしやすい。

爪甲真菌症は、ある種の病気、例えば糖尿病や個体が免疫抑制状態である場合の他の病気を有する個人において医学的意義を有する。また、爪甲真菌症は、歩行などの日常生活動作に相当な望ましくない影響を及ぼし、自然寛解は稀である。爪甲真菌症の現行の治療としては、抗真菌剤、例えばイトラコナゾール〔Ｏｒｔｈｏ Ｂｉｏｔｅｃｈ Ｐｒｏｄｕｃｔｓ Ｌ．Ｐ．社から商品名ＳＰＯＲＯＮＯＸ（スポロノックス）（登録商標）として供給される〕、及びテルビナフィン〔Ｎｏｖａｒｔｉｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎから商品名ＬＡＭＩＳＩＬ（ラミシール）（登録商標）として供給される〕の経口投与が挙げられる。イトラコナゾール及び塩酸テルビナフィンは、イミダゾール類（例えば、ケトコナゾール）と比べて、著しい治癒率、短い治療計画及びより低い水準の有害事象を提供するが、臨床上重要な薬物相互作用が生じ得、治療期間は少なくとも数ヶ月を必要とする。従って、爪甲真菌症の非経口管理については継続的な要求と要望がある。

抗真菌剤、すなわち水不溶性の被膜形成重合体を含有する８％局所溶液としてＤｅｒｍｉｋ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ、Ｉｎｃ．から商品名ＰＥＮＬＡＣ（商標）Ｎａｉｌ Ｌａｃｑｕｅｒとして市販されているシクロピロクスを用いる一つの試みがなされており、Ｂｏｈｎらの米国特許第４，９５７，７３０号公報に記載されている。水不溶性の被膜形成重合体を利用する別の抗真菌性ネイルラッカー組成物が、Ｓａｍｏｕｒの米国特許第６，４９５，１２４号公報に記載されている。さらに別のネイルラッカー製剤は、５％のアモロルフィン（モルホリン誘導体）を含有し、商品名ＬＯＣＥＲＹＬ（商標）としてＲｏｃｈｅ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓによって製造されている。しかし、慣用のネイルラッカー組成物に使用されるような水不溶性の皮膜形成重合体は、水不溶性重合体の急速乾燥性（１分未満）溶液であり、爪を取り囲む皮膚領域にブラシ塗りされると、皮膚領域を刺激する傾向がある。また、このような伝統的な水不溶性、急速乾燥性の皮膜形成重合体は、高粘度のネイルラッカー組成物を生成し、従って治療効果の低下を招く薄膜と爪甲の間の抗真菌剤の活性交換のための移動性と時間を制限する。ある場合には、ネイルラッカーは、爪床を巻き込むことなく軽度の爪甲真菌症の治療にのみ適しており、爪床を含む重度の爪甲真菌症には全身療法がさらに必要とされる。

水不溶性脂肪成分、可溶化剤及び急速乾燥性の水溶性ポリビニルピロリドン、又は酢酸ビニル共重合体及びこの四元重合体を含有する組成物から施用されるアゾール誘導体を０．５から１％濃度で用いる試みが、カナダ特許第１，１７５，３５５号公報及び欧州特許第０５５，３９７号公報に記載されている。

本発明の二重作用抗真菌性局所ネイルコート組成物及び方法は、このような治療を必要としている哺乳動物の種々の重症度の爪甲真菌症の治療に適した殺真菌剤投与計画（ｒｅｇｉｍｅｎ）を提供する。

（発明の要約）
爪及び周囲の皮膚の真菌感染症、特に爪甲真菌症を回復又は予防するための抗真菌剤を含有する二重作用抗真菌性ネイルコート組成物が開示される。本発明の組成物は、有効成分を、爪甲全体に及び周囲の皮膚組織全体に送達する。また、二重作用抗真菌性ネイルコート組成物を真菌に感受性の爪又は感染した爪に局所施用する方法が開示される。抗真菌剤の生体利用性は、本発明の実施によって最適化される。

抗真菌性ネイルコート組成物は、「一液」型及び「二液」型組成物として配合される。

好ましい一液型の抗真菌性ネイルコート組成物の実施態様は、
殺菌有効量の抗真菌剤；
Ｎ，Ｎ−ジ（Ｃ_１−Ｃ_８）アルキルアミノ置換（Ｃ_４−Ｃ_１８）アルキル（Ｃ_２−Ｃ_１８）カルボン酸エステル又はこの医薬適合性の酸付加塩、医薬適合性のアルコール、及びこれらの混合物からなる群の中から選択される浸透促進量の実質的に不揮発性の浸透促進剤；
皮膜形成量の親水性重合体；及び
医薬適合性の揮発性有機担体
を含有してなる。

一液型の二重作用抗真菌性ネイルコート組成物において、有機担体は、ネイルコート組成物が真菌に感受性の爪又は感染した爪又は隣り合った皮膚と接触すると、薬剤、すなわち抗真菌剤を実質的に均一に分配することを促進し、施用後約１から５分以内に揮発して真菌感染症の持続的な回復及び防止のために爪及び隣り合った皮膚組織上に薬剤及び１種又はそれ以上の実質的に不揮発性の浸透促進剤を含有する実質的に水溶性の殺真菌性薄膜を提供することが好ましい。

別の好ましい二重作用抗真菌性ネイルコート組成物は、
抗真菌性プライマーコートを提供するための、医薬適合性の揮発性有機担体に分散させた殺菌有効量の抗真菌剤を含有してなる第一の抗真菌性ネイルコート組成物と、
抗真菌性薄膜を提供するための、皮膜形成量の親水性重合体、殺真菌有効量の抗真菌剤及び医薬適合性の揮発性有機担体とを含有してなり及び第一の抗真菌性ネイルコート組成物又は第二の抗真菌性ネイルコート組成物のいずれか一つが場合により実質的に不揮発性の浸透促進剤を含有するものである二液型組成物である。

二液型の二重作用組成物において、抗真菌剤は、真菌に感受性の爪又は感染した爪と接触すると第一の抗真菌性ネイルコート組成物から爪に急速に放出されて、殺真菌性プライマーコートを提供する。第二の抗真菌性ネイルコート組成物は、この後に前記の殺真菌性プライマーで被覆された爪と接触すると、爪の上に殺真菌性薄膜を提供する。殺真菌性薄膜は、長期間にわたって放出させることができる追加の抗真菌剤用の貯蔵所（ｄｅｐｏｔ）を提供し、プライマーコートから爪への抗真菌剤の徐放を維持して抗真菌剤の局所生体利用性を最適化し及び環境から感染した爪への真菌胞子のさらなる接触性を最小限にする爪保護層を提供する。

抗真菌剤は、アリルアミン系抗真菌剤及びアゾール系抗真菌剤からなる群の中から選択されることが好ましい。アリルアミン系抗真菌剤テルビナフィン（通常、塩酸テルビナフィンと呼ばれる）が特に好ましい。アゾール系抗真菌剤としては、アゾール類、イミダゾール類及びトリアゾール類が挙げられる。

親水性重合体は、ビニルピロリドン単量体単位からなる皮膜形成重合体、例えば単独重合体（例えば、ポリビニルピロリドン）、共重合体、及びこれらの複合物、ガム、樹脂などであり得る。親水性重合体はポリビニルピロリドン（ＰＶＰ）であることが好ましい。

揮発性有機担体は、２から約５個の炭素原子を有する医薬適合性の脂肪族アルカノールであることが好ましく、エタノールであることがさらに好ましい。

実質的に不揮発性の浸透促進剤は、ドデシル−２−（Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノ）イソプロピオネート（ＤＤＡＩＰ）、ベンジルアルコール及びこれらの組合せであることが特に好ましい。

本発明の二重作用抗真菌性ネイルコート組成物は、１種又はそれ以上の浸透促進剤を、爪及び周囲の皮膚中の抗真菌薬の抗真菌濃度を達成するのに有効な量で含有することができ、また治療の効果を増強するために補助抗感染薬、例えば抗菌剤、消毒剤などを含有することができる。

足指の爪又は指の爪の真菌感染症は、開示された二重作用抗真菌性局所ネイルコート組成物を本明細書に記載の方法で一液型又は二液型の形態で施用する殺真菌剤投与計画によって回復又は予防し得る。本発明の方法は、真菌感染症を回復又は予防するのに必要な限りは、１日に少なくとも１回行うことが好ましい。

二重作用抗真菌性ネイルコート組成物を使用する本発明の実施は、特に足指の爪又は指の爪の爪甲真菌症の治療において、抗真菌薬の局所生体利用性を高めるために所望される。都合のよいことに、二重作用抗真菌性ネイルコート組成物は、治療期間全体を短くすることができ、経口治療に通常関連した全身の有害事象を回避又は排除し、及び臨床効果を改善することができる。

（好ましい実施態様の詳細な説明）
本発明の抗真菌性ネイルコート組成物に適用される「二重作用」という用語は、該ネイルコート組成物が、爪及び隣り合った皮膚組織の表面に抗真菌薬を含有する水溶性の殺真菌性被膜を提供し、並びに爪及びこの周囲の皮膚組織への抗真菌薬の浸透を促進する実質的に不揮発性の浸透促進剤を提供することを意味する。

本発明の二重作用抗真菌性ネイルコート組成物に有用な抗真菌剤に関して、抗真菌剤が足指の爪又は指の爪及び周囲の皮膚の感染症、特に爪甲真菌症を引き起こすことが公知である真菌類に対して効力がある限りは、特に制限はない。抗真菌剤のリストは、以下に限定されることなく、例えば、Ｔｈｅ Ｍｅｒｃｋ Ｉｎｄｅｘ（メルクインデックス）（２００１）の第３１版の「Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ Ｃａｔｅｇｏｒｙ ａｎｄ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ａｃｔｉｖｉｔｙ Ｉｎｄｅｘ ｓｅｃｔｉｏｎ」の「抗真菌薬（抗生物質）」及び「抗真菌薬（合成）」の標題に見出し得、本明細書に参照により組み込まれる。

適切な抗真菌剤としては、例えばアリルアミン類、例えばテルビナフィン、ナフチフィン及びブテナフィン；並びにアゾール類、例えばイミダゾール類及びトリアゾール類などが挙げられる。イミダゾール類としては、ケトコナゾール、ビフォナゾール、ブトコナゾール、クロルダントイン、クロルミダゾール（ｃｈｌｏｒｍｉｄａｚｏｌｅ）、クロコナゾール、クロトリマゾール、エコナゾール、エニルコナゾール、フェニコナゾール、フルトリマゾール、イソコナゾール、ラノコナゾール、ミコナゾール、ネチコナゾール、オモコナゾール、硝酸オキシコナゾール、セルタコナゾール、スルコナゾール、及びチオコナゾールが挙げられる。トリアゾール類としては、フルコナゾール、イトラコナゾール、ポサコナゾール、サペルコナゾール、テルコナゾール及びボリコナゾールが挙げられる。前記アリルアミン、テルビナフィン；前記イミダゾール、ケトコナゾール；並びにトリアゾール類、フルコナゾール及びイトラコナゾールが特に好ましい。

説明したような本発明は、特にテルビナフィン及びこの酸付加塩に適応できるが、これらに限定されない。テルビナフィンを使用する本発明の実施が望ましい。この理由は、この抗真菌薬の局所生体利用性を高めることが足指の爪又は指の爪の爪甲真菌症に有用であるからである。都合のよいことに、二重作用抗真菌性ネイルコート組成物は、真菌感染症の標的部位に施用されることから、治療期間全体を短くすることができ、経口治療に通常関連した全身の有害事象を回避又は排除し、及び臨床効果を改善することができる。

テルビナフィンは、（Ｅ）−Ｎ−（６，６−ジメチル−２−ヘプテン−４−イニル）−Ｎ−メチル−１−ナフタレンメタンアミンとして化学的に示され、次の構造式：

を有する。

本明細書で使用する「テルビナフィン」という用語は、本化合物の遊離塩基の形態及びこの化学療法的に許容し得る酸付加塩を包含する。適切な塩の形態としては、塩酸塩、水素フマル酸塩、又はナフタリン−１，５−ジスルホン酸塩が挙げられる。本発明の目的には、無機酸塩、すなわち塩酸テルビナフィンが特に好ましい。塩酸テルビナフィンは、ナフチフィンに関連した合成抗真菌剤アリルアミンであり、経口投与用の錠剤に製剤されたＬＡＭＩＳＩＬ（登録商標）（Ｎｏｖａｒｔｉｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ）という名前で販売されている市販の抗真菌薬の有効成分（２５０ｍｇベースに相当する）である。プロペニルアミン類（テルビナフィンが挙げられる）の製造は、米国特許第４，７５５，５３４号公報に記載されており、本明細書に記載の医薬用途の局所投薬剤形は、０．０５から５重量％、特に１重量％の濃度の軟膏又はクリームである。

本発明は、皮膚糸状菌が宿る足指の爪及び指の爪並びに周囲の皮膚の種々の重症度の爪甲真菌症を回復するための局所治療に基づいた総合的治療プログラムにおいてテルビナフィンの臨床及び菌学的効果の最適化を可能にする。総合的治療プログラムは、爪甲真菌症を回復又は予防するために以下に記載のようにして二重作用抗真菌性ネイルコート組成物を局所施用する毎日の投与計画を含むことが好ましく、少なくとも毎月、結合されていない（ｕｎａｔｔａｃｈｅｄ）感染爪の除去を含むことが好ましい。

二重作用抗真菌性ネイルコート組成物の実施態様は、「一液型」組成物として又は「二液型」組成物として処方することができる。本明細書で使用する「一液型組成物」という用語は、親水性重合体及び実質的に不揮発性の浸透促進剤が爪及び隣り合った皮膚組織の表面に持続的な回復又は抗真菌予防効果を提供するための薬剤の補給所として実質的に均一な殺真菌性薄膜を提供できるように、抗真菌性ネイルコート組成物が、揮発性担体を含有して爪及びこの周囲の皮膚と接触すると薬剤の初期分配を促進し、次いで比較的迅速に（すなわち、約０．５分から約１０分の範囲の時間内に）揮発することを意味する。従って、殺真菌性薄膜は、ネイルコートが例えば水洗又は水浴によって取り除かれるまで爪と接触し続ける。このようにして、従来の抗真菌性ネイルラッカーが直面した重合体担体の望ましくない付着（ｂｕｉｌｄ−ｕｐ）が回避される。

一液型組成物は、必要に応じて毎日少なくとも１回施用されることが好ましく、水洗を介在させて又は介在させずに再施用することができる。

一液型の抗真菌性爪組成物において、通常存在する抗真菌剤の量は、約０．１重量％から約２０重量％の範囲、好ましくは約０．５重量％から約１５重量％の範囲、最も好ましくは約１重量％から約５重量％の範囲にある。

本明細書で使用する「二液型抗真菌性爪組成物」という用語は、二液型の二重作用抗真菌性ネイルコート組成物の製剤を示し、このそれぞれは連続して毎日少なくとも１回施用される。従って、二液型の抗真菌性爪組成物は、爪甲及び隣り合った組織領域の中に、これらを横切って及びこれらの表面に、テルビナフィンを比較的短時間で実質的に均一に浸透させるための殺真菌性プライマーコートを提供する第一の抗真菌性ネイルコート組成物と、この後に前記殺真菌性プライマーで被覆された爪の上に実質的に均一な補給用薄膜を提供して爪の保護層として及び徐々に放出させることができる追加のテルビナフィン用の補給所として作用させる第二の抗真菌性ネイルコート組成物とを含有してなる。従って、第二の抗真菌性爪組成物は、前記プライマーで被覆された爪に水洗を介在させずに直接に施用される。

抗真菌性ネイルコート組成物の二液型の実施態様において、第一の抗真菌性ネイルコート組成物及び第二の抗真菌性ネイルコート組成物それぞれに存在させる抗真菌剤の量は、変化させることができるが、第一のネイルコート組成物中の抗真菌剤の重量に対する第二のネイルコート組成物中の抗真菌剤の重量の比は、約１よりも小さいことが好ましい。感染症の重症度に応じて、第一の抗真菌性ネイルコート組成物中の抗真菌剤の量は全組成物の重量の約０．１から約２０％の範囲内で変化させることができ、第二のネイルコート組成物中の抗真菌剤の量は全組成物の重量の約０．１から約１５％の範囲内で変化させることができる。

二液型組成物について好ましい第一の抗真菌性ネイルコート組成物の実施態様は、揮発性の医薬適合性の担体に溶解されたテルビナフィンを約０．５から約２０重量％の範囲内の濃度で、さらに好ましくは約１０重量％の濃度で含有する実質的に透明な無色溶液である。揮発性担体は、２から約５個の炭素原子を有するアルカノール、例えばエタノール、プロパノール、イソプロパノール、ブタノール、イソブタノールなどである。エタノールが特に好ましい。また、揮発性担体は、浸透促進剤としても機能を果たすことができる。

特に好ましい第一の抗真菌性ネイルコート組成物は、重量／重量基準でエタノール中に溶解された約１０重量％のテルビナフィンを含有してなる。第一の抗真菌性ネイルコート組成物は、好ましくは、爪甲の毛細血管系に沿って及び爪甲を横切って真菌胞子に到達し真菌胞子を爪甲及び爪床中に固定する。二液型組成物の実施態様に特に好ましい第二の抗真菌性ネイルコート組成物は、約０．１から約１０重量％未満の範囲の濃度のテルビナフィン、有効皮膜形成量の親水性皮膜形成重合体及び残部として前記の医薬適合性の揮発性担体を含有してなることが好ましい。第一の組成物及び第二の組成物中の揮発性担体は、所望に応じて同じであることができるし又は異なることができる。

親水性重合体は、ビニルピロリドン単量体単位を含む皮膜形成重合体、例えば単独重合体（すなわち、ポリビニルピロリドン）、共重合体及びこれらの複合体、ガム、樹脂などであり得る。本明細書及び付属の特許請求の範囲で使用する「共重合体」という用語は、２種またはそれ以上の単量体反復単位を含む重合体を意味し、一般に「三元重合体」、「四元重合体」などと呼ばれる重合体を包含する。

ビニルピロリドン（ＶＰ）単量体単位を含有する典型的な皮膜形成重合体は、種々の粘度グレードの範囲で及び約８，０００から約３，０００，０００ダルトンの範囲の種々の重量平均分子量で販売されているポリビニルピロリドン（ＰＶＰ）（ＰＶＰ Ｋ 単独重合体シリーズ）である。ＰＶＰは、ＢＡＳＦ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎから商品名ＫＯＬＬＩＤＯＮ（登録商標）ＣＬとして販売されている。ＵＳＰグレードのポピドン（ＰＶＰ）が好ましい。典型的な皮膜形成共重合体としては、ＩＳＰから販売されているＰＶＰ／ＶＡ共重合体シリーズなどのＶＰ／ＶＡのモル比の範囲内で入手できるビニルピロリドン／酢酸ビニル（ＶＡ）共重合体が挙げられる。典型的なＶＰ複合体は、ポビドン−ヨウ素（ＰＶＰ−Ｉ）である。

親水性重合体は、約３０の「Ｋ」値（すなわち、約４５，０００から６０，０００ダルトンの範囲の重量平均分子量）を有するポリビニルピロリドンであることが好ましい。

典型的なガムとしては、寒天ガム、カラジーナンガム、ガッチガム、カラヤガム、ラムソン（ｒｈａｍｓｏｎ）ガム、キサンタンガムなどが挙げられる。

典型的な樹脂としては、カルボマー、ポリアルケニルポリエーテルを用いて容易に架橋されるポリアクリル酸重合体が挙げられる。これはＮｏｖｅｏｎ Ｉｎｃ．（オハイオ州クリーブランド）から「ＣＡＲＢＯＰＯＬ（登録商標）」という名称で市販されている。特に好ましいグレードのカルボマーは「ＣＡＲＢＯＰＯＬ（登録商標）９４０」と呼ばれるカルボマーである。使用に適した他のポリアクリル酸重合体は、「ＰＥＭＵＬＥＮ（登録商標）」（Ｎｏｖｅｏｎ Ｉｎｃ．）及びＰＯＬＹＣＡＲＢＯＰＨＩＬ（登録商標）（Ａ．Ｈ．Ｒｏｂｂｉｎｓ Ｃｏｍｐａｎｙ，Ｉｎｃ．，バージニア州リッチモンド所在）という名称で市販されており、ジビニルグリコールで架橋されたポリアクリル酸である。ＰＥＭＵＬＥＮ（登録商標）重合体は、Ｃ_１０−Ｃ_３０アルキルアクリレートと、スクロースのアリルエーテル又はペンタエリスリトールのアリルエーテルで架橋されたアクリル酸、メタクリル酸又はこれらの単純エステル類の１種又はそれ以上の単量体との共重合体である。

ネイルコート組成物が爪に容易に施用でき、この表面に薄膜を形成できる限りは、使用する親水性の皮膜形成重合体の形態（すなわち、液体又は粉末）又は使用量については、制限は無い。

本発明の二重作用抗真菌性ネイルコート組成物は、１種又はそれ以上の実質的に不揮発性の浸透促進剤、補助抗感染薬、例えば抗菌剤、防腐剤など、及びこれらの混合物を含有することができる。二液型組成物の実施態様において、１種又はそれ以上の実質的に不揮発性の浸透促進剤は、第一の抗真菌性ネイルコート組成物又は第二の抗真菌性ネイルコート組成物、又はこの両方に含有させることができる。本発明の抗真菌性ネイルコート組成物中の浸透促進剤は、爪及び周囲の皮膚組織領域への薬剤の浸透を促進することが好ましい。

好ましい皮膚浸透促進剤の中に、エタノール、プロピレングリコール、グリセロール、ラウリン酸エチル、パルミチン酸イソプロピル、ミリスチン酸イソプロピル、ラウロカプラム〔ＡＺＯＮＥ（登録商標）〕、ジオキソラン類（米国特許第４，８６１，７６４号公報に記載されている）、大環状ケトン類、１−デシル−チオエチル−２−ピロリドン（ＨＰ−１０１）、オキサゾリドン類及び生分解性浸透促進剤〔Ｗｏｎｇらの米国特許第４，９８０，３７８号及び同第５，０８２，８６６号公報に記載されている、例えばアルキル−２−（Ｎ，Ｎ−ジ置換アミノ）アルカノエート（例えば、ドデシル−２−（Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノ）イソプロピオネート（ＤＤＡＩＰ））、Ｎ，Ｎ−ジ置換アミノアルカノールアルカノエート〕及びこれらの混合物がある。脂肪族及び芳香族アルコールが、主な爪浸透促進剤である。

浸透促進剤は、抗真菌剤の浸透を高めるのに十分な量で存在させる。具体的な量は、必然的に所望の放出速度及び使用する具体的な抗真菌剤に従って変化する。一般に、浸透促進剤は、抗真菌性ネイルコート組成物の全重量に基づいて、約０．１から約２５重量％の範囲の量で存在させる。浸透促進剤は、抗真菌性ネイルコート組成物の好ましくは約０．１から約１０重量％の範囲の量、さらに好ましくは約０．５から約５重量％の範囲の量で存在させる。

一般的に、適切な浸透促進剤は、前記に挙げた浸透促進剤、並びに脂肪族及び芳香族アルコール類、スルホキシド類、脂肪酸類、脂肪酸エステル類、ポリオール類、アミド類、界面活性剤、テルペン類、アルカノン類、有機酸類及びこれらの混合物の中から選択される。一般に、Ｃｈａｔｔａｒａｊ，Ｓ．Ｃ． ａｎｄ Ｗａｌｋｅｒ，Ｒ．Ｂ．，Ｐｅｎｅｔｒａｔｉｏｎ Ｅｎｈａｎｃｅｒ Ｃｌａｓｓｉｆｉｃａｔｉｏｎ，ｐｐ．５−２０ ｉｎ Ｍａｉｂａｃｈ，Ｈ．Ｉ．，ａｎｄ Ｓｍｉｔｈ，Ｈ．Ｅ．，（ｅｄｓ．），Ｐｅｒｃｕｔａｎｅｏｕｓ Ｐｅｎｅｔｒａｔｉｏｎ Ｅｎｈａｎｃｅｒｓ， ＣＲＣ Ｐｒｅｓｓ，Ｉｎｃ．， Ｂｏｃａ Ｒａｔｏｎ，ＦＬ（１９９５）及びＢｕｙｕｋｔｉｍｋｉｎ，Ｎ．ら，Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｍｅａｎｓ ｏｆ Ｔｒａｎｓｄｅｒｍａｌ Ｄｒｕｇ Ｐｅｒｍｅａｔｉｏｎ Ｅｎｈａｎｃｅｍｅｎｔ，ｉｎ Ｇｈｏｓｈ，Ｔ．Ｋ．，ａｎｄ Ｐｆｉｓｔｅｒ，Ｗ．Ｒ．（ｅｄｓ．） Ｔｒａｎｓｄｅｒｍａｌ ａｎｄ Ｔｏｐｉｃａｌ Ｄｒｕｇ Ｄｅｌｉｖｅｒｙ Ｓｙｓｔｅｍ，Ｉｎｔｅｒｐｈａｒｍ Ｐｒｅｓｓ，Ｉｎｃ．，Ｂｕｆｆａｌｏ Ｇｒｏｖｅ，ＩＬ（１９９７）を参照。

適切なアルコールとしては、限定されることなく、エタノール、プロパノール、ブタノール、ペンタノール、ヘキサノール、オクタノール、ノナノール、デカノール、２−ブタノール、２−ペンタノール、ベンジルアルコール、フェノキシエタノール、カプリルアルコール、デシルアルコール、ラウリルアルコール、２−ラウリルアルコール、ミリスチルアルコール、セチルアルコール、ステアリルアルコール、オレイルアルコール、リノリルアルコール、リノレニルアルコール及びこれらの混合物が挙げられる。２から約５個の炭素原子を有する揮発性の脂肪族アルコールは、揮発性担体及び浸透促進剤として働くという二重の機能を提供することができる。ベンジルアルコール、フェノキシエタノールなどの芳香族アルコールは、実質的に不揮発性の浸透促進剤及び補助抗感染薬として働くという二重の機能を提供することができる。好ましいアルコールは、エタノール及びベンジルアルコールである。

適切なスルホキシドとしては、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、デシルメチルスルホキシド、及びこれらの混合物が挙げられる。

適切な脂肪酸としては、吉草酸、ヘプタン酸、ペラルゴン酸、カプロン酸、カプリン酸、ラウリン酸、ミリスチン酸、ステアリン酸、オレイン酸、リノール酸、リノレン酸、カプリル酸、イソ吉草酸、ネオペンタン酸、ネオヘプタン酸、ネオノナン酸、トリメチルヘキサン酸、ネオデカン酸及びイソステアリン酸、並びにこれらの混合物が挙げられる。

適切な脂肪酸エステルとしては、ｎ−酪酸イソプロピル、ｎ−ヘキサン酸イソプロピル、ｎ−デカン酸イソプロピル、ミリスチン酸イソプロピル、パルミチン酸イソプロピル、ミリスチン酸オクチルドデシル、酢酸エチル、酢酸ブチル、酢酸メチル、吉草酸メチル、プロピオン酸メチル、セバシン酸ジエチル、オレイン酸エチル、ラウリン酸エチル及びこれらの混合物が挙げられる。適切なポリオールとしては、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、エチレングリコール、ジエチレングリコール、トリエチレングリコール、ジプロピレングリコール、グリセロール、プロパンジオール、ソルビトール、デキストラン類、ブタンジオール、ペンタンジオール、ヘキサントリオール及びこれらの混合物が挙げられる。

適切なアミドとしては、尿素、ジメチルアセトアミド、ジエチルトルアミド、ジメチルホルムアミド、ジメチルオクタアミド、ジメチルデカアミド、ピロリドン誘導体、１−アルキル−４−イミダゾリン−２−オン、環状アミド、ヘキサメチレンラウリルアミド及びこの誘導体、ジエタノールアミン、トリエタノールアミン及びこれらの混合物が挙げられる。適切なピロリドン誘導体としては、１−メチル−２−ピロリドン、２−ピロリドン、１−ラウリル−２−ピロリドン、１−ラウリル−４−カルボキシ−２−ピロリドン、１−メチル−４−カルボキシ−２−ピロリドン、１−ヘキシル−４−カルボキシ−２−ピロリドン、１−デシルチオエチル−２−ピロリドン（ＨＰ−１０１）、Ｎ−シクロヘキシルピロリドン、１−メチル−４−メトキシカルボニル−２−ピロリドン、１−ヘキシル−４−メトキシカルボニル−２−ピロリドン、１−ラウリル−４−メトキシカルボニル−２−ピロリドン、Ｎ−ジメチルアミノプロピルピロリドン、Ｎ−ココイルピロリドン、Ｎ−タローイルピロリドン、Ｎ−（２−ヒドロキシメチル）−２−ピロリドン脂肪酸エステル及びこれらの混合物が挙げられる。適切な環状アミドとしては、１−ドデシルアザシクロヘプタン−２−オン〔ラウロカプラム、ＡＺＯＮＥ（登録商標）〕、１−ゲラニルアザシクロヘプタン−２−オン、１−ファルネシルアザシクロヘプタン−２−オン、１−ゲラニルゲラニルアザシクロヘプタン−２−オン、１−（３，７−ジメチルオクチル）アザシクロヘプタン−２−オン、１−（３，７，１１−トリメチルオクチル）アザシクロヘプタン−２−オン、１−ゲラニルアザシクロヘキサン−２−オン、１−ゲラニルアザシクロペンタン−２，５−ジオン、１−ファルネシルアザシクロペンタン−２−オン、及びこれらの混合物が挙げられる。

適切な界面活性剤としては、陰イオン性界面活性剤、陽イオン性界面活性剤、非イオン性界面活性剤、両性界面活性剤、胆汁酸塩及びレシチンが挙げられる。適切な陰イオン性界面活性剤としては、ラウリン酸ナトリウム、ラウリル硫酸ナトリウム、及びこれらの混合物が挙げられる。適切な陽イオン性界面活性剤としては、セチルトリメチルアンモニウムブロミド、テトラデシルトリメチルアンモニウムブロミド、ベンズアルコニウムクロリド、オクタデシルトリメチルアンモニウムクロリド、セチルピリジニウムクロリド、ドデシルトリメチルアンモニウムクロリド、ヘキサデシルトリメチルアンモニウムクロリド、及びこれらの混合物が挙げられる。適切な非イオン性界面活性剤としては、α−ヒドロ−ω−ヒドロキシポリ（オキシエチレン）−ポリ（オキシプロピル）ポリ（オキシエチレン）ブロック共重合体、ポリオキシエチレンエーテル、ポリオキシエチレンソルビタンエステル、脂肪アルコールのポリエチレングリコールエステル、及びこれらの混合物が挙げられる。適切なα−ヒドロ−ω−ヒドロキシ−ポリ（オキシエチレン）−ポリ（オキシプロピル）ポリ（オキシエチレン）ブロック共重合体としては、ポロキサマー（Ｐｏｌｏｘａｍｅｒ）１８２、１８４、２３１及びこれらの混合物が挙げられる。適切なポリオキシエチレンエーテルとしては、ＰＥＧ−４ラウリルエーテル〔ＢＲＩＪ（登録商標）３０〕、ＰＥＧ−２オレイルエーテル〔ＢＲＩＪ（登録商標）９３〕、ＰＥＧ−１０オレイルエーテル〔ＢＲＩＪ（登録商標）９６〕、ＰＥＧ−２０オレイルエーテル〔ＢＲＩＪ（登録商標）９９〕、及びこれらの混合物が挙げられる。適切なポリオキシエチレンソルビタンエステルとしては、モノラウリン酸エステル〔ＴＷＥＥＮ（登録商標）２０〕、モノパルミチン酸エステル〔ＴＷＥＥＮ（登録商標）４０〕、モノステアリン酸エステル〔ＴＷＥＥＮ（登録商標）６０〕、モノオレイン酸エステル〔ＴＷＥＥＮ（登録商標）８０〕及びこれらの混合物が挙げられる。脂肪酸の適切なポリエチレングリコールエステルとしては、ポリオキシエチレン（８）モノステアレート〔ＭＹＲＪ（登録商標）４５〕、ポリオキシエチレン（３０）モノステアレート〔ＭＹＲＪ（登録商標）５１〕、ポリオキシエチレン（４０）モノステアレート〔ＭＹＲＪ（登録商標）５２〕、及びこれらの混合物が挙げられる。

適切な両性界面活性剤としては、以下に限定されること無く、ラウリンアミドプロピルベタイン、コカミドプロピルベタイン、ラウリルベタイン、ココベタイン、コカミドプロピルヒドロキシスルタイン、アミノプロピルラウリルグルタミド、ココアンホ酢酸ナトリウム、ラウロアンホ酢酸ナトリウム、ラウロアンホ二酢酸二ナトリウム、ココアンホ二酢酸二ナトリウム、ココアンホプロピオン酸ナトリウム、ラウロアンホ二プロピオン酸二ナトリウム、ココアンホ二プロピオン酸二ナトリウム、ラウリミノ二プロピオン酸ナトリウム、ココアンホカルボキシメチルヒドロキシプロピル硫酸二ナトリウム、及びこれらの混合物が挙げられる。

適切な胆汁酸塩としては、コール酸ナトリウム、ラウロコール酸のナトリウム塩、グリコール酸のナトリウム塩及びデソキシコール酸のナトリウム塩、並びにこれらの混合物が挙げられる。

適切なテルペン類としては、Ｄ−リモネン、α−ピネン、β−エンレン（β−ｅｎｒｅｎｅ）、α−テルピネオール、テルピネン−４−オール、カルボール、カルボン、プレゴン、ピペリトン、メントン、メントール、ゲラニオール、シクロヘキセンオキシド、リモネンオキサイド、α−ピネンオキサイド、シクロペンテンオキシド、１，８−シネオール、イランイラン油、アニス油、ケノポジ油、ユーカリ油、及びこれらの混合物が挙げられる。適切なアルカノン類としては、Ｎ−ヘプタン、Ｎ−オクタン、Ｎ−ノナン、Ｎ−デカン、Ｎ−ウンデカン、Ｎ−ドデカン、Ｎ−トリデカン、Ｎ−テトラデカン、Ｎ−ヘキサデカン、及びこれらの混合物が挙げられる。適切な有機酸としては、クエン酸、コハク酸、サリチル酸、サリチル酸エステル類（例えば、メチル、エチル及びプロピルグリコール誘導体）、酒石酸、及びこれらの混合物が挙げられる。

好ましい実質的に不揮発性の浸透促進剤は、Ｎ，Ｎ−ジ（Ｃ_１−Ｃ_８）アルキルアミノ置換（Ｃ_４−Ｃ_１８）アルキル（Ｃ_２−Ｃ_１８）カルボン酸エステル又はこの医薬適合性の酸付加塩を含む。本明細書で使用するように、「（Ｃ_４−Ｃ_１８）アルキル（Ｃ_２−Ｃ_１８）カルボン酸エステル」という用語は、（Ｃ_４−Ｃ_１８）アルコールと（Ｃ_２−Ｃ_１８）カルボン酸 とのエステルを意味する。（Ｃ_４−Ｃ_１８）アルキル（Ｃ_２−Ｃ_１８）カルボン酸エステルに関連する「Ｎ，Ｎ−ジ（Ｃ_１−Ｃ_８）アルキルアミノ置換」という用語は、エステルが調製される前記アルコール部分又は前記カルボン酸部分がアミノ置換基ＮＲ_ｘＲ_ｙ〔式中、Ｒ_ｘ及びＲ_ｙはそれぞれ独立して（Ｃ_１−Ｃ_８）アルキル基である〕を有することを意味する。Ｒ_ｘ及びＲ_ｙは両方共にメチル基であることが好ましい。

ドデシル−２−（Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノ）プロピオン酸エステル（ＤＤＡＩＰ）；ドデシル−２−（Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノ）酢酸エステル（ＤＤＡＡ）；１−（Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノ）−２−プロピルドデカン酸エステル（ＤＡＩＰＤ）；１−（Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノ）−２−プロピルミリスチン酸エステル（ＤＡＩＰＭ）；１−（Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノ）−２−プロピルオレイン酸エステル（ＤＡＩＰＯ）；及びこれらの医薬適合性の酸付加塩が好ましい。

特に好ましい皮膚浸透促進剤は、ＤＤＡＩＰ単独又は補助浸透促進剤と組み合わせたＤＤＡＩＰである。ＤＤＡＩＰ・ＨＣｌは、Ｓｔｅｒｏｉｄｓ、Ｌｔｄ．（イリノイ州シカゴ所在）及びＰｉｓｇａｈ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ（ノースカロライナ州Ｐｉｓｇａｈ Ｆｏｒｅｓｔ）から入手できる。ＤＤＡＩＰの塩酸塩（ＤＤＡＩＰ・ＨＣｌ）が特に好ましい。ＤＤＡＩＰ及びこの結晶質酸付加塩は、Ｂｕｙｕｋｔｉｍｋｉｎらの米国特許第６，１１８，０２０号公報に記載されている。この公報は、本明細書に参照により組み込まれる。長鎖の同様のアミノ置換アルキルカルボン酸エステル類は、Ｗｏｎｇらの米国特許第４，９８０，３７８号公報に記載のようにして容易に入手できる化合物から合成できる。この公報は、本明細書と矛盾しない範囲で本明細書に参照により組み込まれる。

本明細書で使用する「抗感染症薬」という用語は、二重作用抗真菌性ネイルコート組成物の効果を増強できる局所抗菌剤、防腐剤などを包含する。適切な抗菌剤としては、静菌性防腐剤、例えばベンジルアルコール、フェノキシエタノール、フェネチルアルコール、ヨードプロピニルブチルカルバメート、パラベンなどが挙げられる。ベンジルアルコールが特に好ましく、存在させる場合には浸透促進剤及び抗感染薬として二重の目的を果たし得る。

適切な防腐剤としては、アルコール（すなわち、エタノール、イソプロパノール）、ハロゲン含有化合物（すなわち、ポビドン−Ｉ、トリクロサン等）；四級アンモニウム化合物（すなわち、塩化ベンゼトニウム、塩化セチルピリジニウム等）が挙げられる。

当業者には、１種又はそれ以上の前記成分が２以上の機能を果たすことができることが理解されるであろう。

好ましい二重作用性の一液型の抗真菌性ネイルコート組成物の実施態様は、
殺菌有効量の抗真菌剤；
Ｎ，Ｎ−ジ（Ｃ_１−Ｃ_８）アルキルアミノ置換（Ｃ_４−Ｃ_１８）アルキル（Ｃ_２−Ｃ_１８）カルボン酸エステル又はこの医薬適合性の酸付加塩、医薬適合性のアルコール、及びこれらの混合物を含む群の中から選択される浸透促進量の実質的に不揮発性の浸透促進剤；
皮膜形成量の親水性重合体；及び
医薬適合性の揮発性有機担体
を含有してなる。

一液型の抗真菌性ネイルコート組成物は、実質的に透明な製剤であることが好ましい。

抗真菌性ネイルコート組成物の好ましい二重作用性の一液型の実施態様は、組成物の全重量を基準として：
約０．１から約２０重量％の範囲、さらに好ましくは約０．５から約１５重量％の範囲；最も好ましくは約１から約５重量％の範囲の量の抗真菌剤；
約０．１から約２５重量％の範囲、さらに好ましくは約１から約１０重量％の範囲の合計量の実質的に不揮発性の浸透促進剤；
約０．１から約５重量％の範囲、さらに好ましくは約０．２５から約１重量％の範囲の親水性皮膜形成重合体；及び
医薬適合性の揮発性有機担体を含む残部を含む。好ましい揮発性有機担体は、組成物の全重量を基準として、好ましくは約５０から約９９．５重量％の範囲、さらに好ましくは約８５から約９９重量％の範囲の量で存在させる脂肪族アルコールである。

特に好ましい実質的に透明な、二重作用性の一液型抗真菌性ネイルコート組成物は、組成物の全重量を基準として：
約０．５から約１０重量％の範囲、さらに好ましくは約１から約５重量％の範囲の量で存在する塩酸テルビナフィン；
約０．１から約２５重量％の範囲、さらに好ましくは約０．１から約１０重量％の範囲の量で存在するＤＤＡＩＰ・ＨＣｌ；
約０．１から約１０重量％の範囲、さらに好ましくは約０．５から約１．５重量％の範囲の量で存在するベンジルアルコール；
約０．１から約５重量％の範囲、さらに好ましくは約０．１から約５重量％の範囲の量で存在するポリビニルピロリドン；及び
エタノールである残部
を含む。

第一の抗真菌性ネイルコート及び第二の抗真菌性ネイルコート組成物を利用する二液型の実施態様では、第二の抗真菌性ネイルコート組成物は、指の爪に付着した薄膜が足指の爪に付着したプライマー薄膜よりも、水による即時除去に対して実質的により耐性であるように配合されることが好ましい。

特に好ましい二液型の二重作用抗真菌性ネイルコート組成物は、組成物の全重量を基準として、第一の抗真菌性ネイルコート組成物すなわちプライマー用抗真菌性ネイルコート組成物中に、エタノールに溶解した約１０重量％のテルビナフィンを含有し、及び第二の抗真菌性ネイルコート組成物中に好ましくは約５重量％未満のテルビナフィンを含有する。この好ましい第二の抗真菌性ネイルコート組成物すなわち補給所用抗真菌性ネイルコート組成物は、約２０重量部のポリビニルピロリドン、約３重量部のテルビナフィン、及び約４７重量部のエタノールを含有してなる。

ヒトの切り取った爪を使用する生体外試験研究に基づいて、エタノール溶解１０％溶液として施用されるテルビナフィンは、爪の膜の全域に約１時間の時間で拡散することができ、真菌類について最小発育阻止濃度（ＭＩＣ）を越える濃度に達することができることが認められた。

足指の爪又は指の爪の真菌感染症は、以下に記載の一液型法又は二液型法で回復又は予防し得る。

一液型の二重作用抗真菌性ネイルコート組成物は、真菌に感受性の爪又は感染した爪及びこれに隣り合った皮膚組織の表面に実質的に均一な殺真菌性被膜を得るために施用し、少なくとも約０．５時間これらと接触させて維持することができる。一液型法では、ネイルコート組成物は、この後に水で洗浄することによって除去することができる。多重被覆法では、前記組成物は水洗浄を介在させて又は介在させることなく少なくとも２回再施用することができる。前記ネイルコート組成物は、殺真菌効果を達成するのに十分な期間毎日の投薬計画で施用することが好ましい。

本発明の二液型の二重作用抗真菌性ネイルコート組成物は、次の多重被覆方法で施用することができる。

（１）殺菌有効量の抗真菌剤を含有する第一の抗真菌性ネイルコート組成物を、感染した指の爪又は足指の爪、及びこの周囲の皮膚領域に少なくとも１回施用して、活性な殺真菌性プライマー被膜を得る；
（２）得られた活性な殺真菌性プライマーコートを、約１０分間又は該殺真菌性プライマーで被覆された爪が実質的に接触乾燥状態になるまで実質的に乾燥させる；次いで
（３）実質的に乾燥した殺真菌性プライマーで被覆された爪を、抗真菌剤を爪にさらに放出するために爪の表面に殺真菌性薄膜を得るのに十分な殺菌量の第二の抗真菌性ネイルコート組成物で被覆する。

二液型の二重作用抗真菌性ネイルコート組成物を用いた殺真菌剤投薬計画の初期において、第一の抗真菌性ネイルコート組成物の多重投与を、ステップ（３）を行う前にステップ（１）及び（２）連続して少なくとも２回行うことによって適用して、真菌剤の生体利用性をさらに最適化することができる。

本発明の方法は、新たな爪の成長が肉眼で真菌感染が認められなくなるまで、毎日実行することが好ましい。

テルビナフィンを用いる本発明の二液型の方法の実施が第一の抗真菌性ネイルコート組成物から施用されるテルビナフィンの残留時間を延ばすこと、第二の抗真菌性ネイルコート組成物の親水性重合体薄膜が内部及び外部保護膜の形成を促進すること及び約４週間の比較的短い期間内で爪甲真菌症の回復又は予防において高い効果が達成されることが認められた。

本発明のネイルコート組成物は、爪に慣用の方法、例えばブラシ塗り又は吹き付け塗りで施用できる。施用された組成物は、存在する揮発性有機担体の量に応じて、約０．５分から約１０分の範囲の時間内で、さらに好ましくは約１分から約５分の範囲の時間内で、実質的に接触乾燥状態になる。

殺真菌性ネイルコート組成物は、キットの形態で使用のためにこの中に含まれる指示書と共にキット形態で提供し得る。二液型の二重作用抗真菌性ネイルコート組成物の第一の抗真菌性被覆組成物及び第二の抗真菌性被覆組成物は、独立してそれぞれ同様の又は異なる形状のパッケージで包装されていてもよいし、又は治療順序の施用の後に使用者を手助けするために、第一の組成物と第二の組成物とを互いに肉眼で区別するために色分けされる。

指示書としては、限定されることなく、使用者を教育する印刷媒体、聴覚媒体、視覚教材、電子媒体又はこれらの組み合わせが挙げられる。印刷媒体としては、ラベル、パンフレット、本、チラシなどが挙げられるが、これらに限定されない。聴覚媒体としては、テープ録音、オーディオコンパクトディスク、レコードなどが挙げられるが、これらに限定されない。視覚教材としては、写真、スライド、映画、ビデオ、ＤＶＤなどが挙げられるが、これらに限定されない。電子媒体としては、全ての形の電子データ記憶媒体、例えばディスケット、対話型ＣＤ−ＲＯＭ、対話型ＤＶＤなどが挙げられるが、これらに限定されない。

（実施例）
以下の実施例は、本発明を例示することを目的とするものであり、本発明を限定するものではない。

本発明の二液型の二重作用抗真菌性ネイルコート組成物及び方法における塩酸テルビナフィンの予備的効果及び安全性を、足指の爪及び／又は指の爪の真菌感染症を有する患者で研究した。患者は、非盲検で（ｏｐｅｎ ｌａｂｅｌ）単一病院パイロット臨床試験に３ヶ月間にわたって加わった。

爪床からの爪甲分離、角質増殖、及び変色に基づいた感染の尺度を使用することによって測定される軽度から重度の爪甲真菌症を有すると判断された最大２０人の患者を選んだ。爪甲真菌症、角質増殖、及び変色の程度は、下記の尺度等級を使用して評価した。
爪甲真菌症
０＝爪床から爪甲の分離がない。

１＝爪甲の分離が≦５０％である。

２＝爪甲の分離が＞５０％であるが≦７５％である。

３＝爪甲の分離が＞７５％である。
角質増殖
０＝爪下壊死組織片がない。

２＝爪下領域の厚みが≦５０％である
２＝爪下領域の厚みが＞５０５であり、≦７５％である。

３＝爪下領域の厚みが＞７５％である。
変色
０＝爪甲の異常な着色（白色、黄色など）がない。

１＝爪甲の≦５０％にまで至る変色がある。

２＝爪甲の＞５０％であるが≦７５％にまで至る変色がある。

３＝爪甲の＞７５％にまで至る変色がある。

試験への算入について、基準は：爪甲の破壊部分又は欠落部分を含んだ爪の全表面の少なくとも２５％について爪併発（ｉｎｖｏｌｖｅｍｅｎｔ）を有する１８から７０歳の年代の間の爪甲真菌症患者であった。指の爪又は足指の爪の爪甲真菌症は、ＫＯＨ染色顕微鏡検査及び真菌培養により、次のようにして確認した。

爪甲及び硬い壊死組織片を、該断片を数滴の水酸化カリウム（５％グリセリンを有する２５％ＫＯＨ）と共に、ペトリ皿で覆った時計皿の中で２４時間放置することによって軟化させた。真菌検査には光学顕微鏡を使用した。薄片の小さな断片を顕微鏡スライドの上に置き、カバースリップを置いた。調製物を低出力で注意深く調べた。皮膚糸状菌は、均一な幅の半透明分岐桿状糸状体として現われる。菌糸の存在が４０倍の対物レンズを用いて検査することによって確認される場合には、試験結果は陽性と判断される。

真菌培養は、標準培地、サブロー寒天（寒天１８ｇ、ペプトン１０ｇ、グルコース４０ｇ、蒸留水１０００ｍｌ）を使用して行った。最も医学的に重要な真菌類は、この培地上で約２８℃の温度で約２４時間から約４８時間の培養時間にわたって好気的に増殖する。

試験から除外するための基準は：糸状菌（カンジダ種）によって引き起こされる爪甲真菌症；テルビナフィンに対する過敏性；異常肝機能（上限値の２倍）；２週間以内に局所治療又は２か月以内に経口治療を受けた者；Ｈブロッカー、制酸薬、リファンピン、フェノバルビタール、フェニトイン、カルバマゼピン、テルフェナジン〔例えば、ＳＥＬＤＡＮＥ（登録商標）〕又はジゴキシンを用いた同時治療；１ヶ月の試験薬の使用；乾癬又は乾癬履歴；試験に影響を及ぼすかもしれない重度の併発症；及び妊娠中の女性又は授乳期間中の母親であった。

３５から５９歳の年齢の患者２０人（女性６人、男性１４人）（４６歳の平均年齢を有する）が、上記の算入基準を満たした。これらの患者２０人のうち、１７人が１２週の治療を終えた。試験の開始時に、爪甲真菌症の程度は、患者２０人の１５％については軽度（すなわち、≦４０％の感染した爪）と評価され、残りの８０％については重度（すなわち、＞４０％の感染した爪）と評価された。患者２０人について、患者の４５％が爪甲の分離を有し；４５％が角質増殖を有し；及び１０％が変色を有していた。

一次効果基準は、陰性のＫＯＨ染色顕微鏡検査及び陰性の真菌培養の達成に基づいた菌学的治癒であった。

二次効果基準は、菌学的治癒及び臨床効果についての医者の判断であった。臨床効果の評価は、下記のように判断された。「治療された」（すなわち、真菌症の症状がない、残っている爪の変形がない、さらに治療する必要が無い）；「著しく改善された」（すなわち、真菌症の症状の著しい軽減と共に最小限の爪の関与）；及び「極僅かから中程度の改善」（すなわち、爪の関与及び真菌症の症状の程度の僅かから中程度の軽減）。

試験の完了後に、臨床安全性及び投与の効果は、有害事象、ＫＯＨ染色顕微鏡検査、真菌培養、臨床効果評価（すなわち、病変部の面積測定、新たな爪の成長の写真比較、及び爪関与の程度の減少）及び医者の総合評価に基づいて、研究員によって分析された。

一次安全性パラメーターには、有害事象、生命徴候、臨床検査室試験、理学的検査、及び心電図（ＥＣＧ）が含まれる。

試験に指定された患者は、それぞれブラシアプリケーターを備えた２つのビンが与えられ、それぞれのビンはネイルコート組成物（それぞれのビンに約２０ｇ）を含有し、「Ａ」及び「Ｂ」として特定された。ビン「Ａ」は、エタノールに溶解された塩酸テルビナフィン１０％（重量／重量）を含有していた。ビン「Ｂ」は、２０重量部のポリビニルピロリドン〔ＰＶＰ、ＫＯＬＬＩＤＯＮ（登録商標）３０、約４５，０００から６０，０００ダルトンの範囲の重量平均分子量〕、３重量部の塩酸テルビナフィン、及び４７重量部のエタノールを含有していた。

患者は、温水を使用することによって足又は両手を洗浄し、できる限り感染した爪を切るか又は清潔にすることを指示されたが、爪を提出することは指示されなかった。また、患者は、足を洗浄した実質的に直後のそれぞれの夜に１回、感染した爪に直接に抗真菌性ネイルコート組成物を塗布することも指示された。

患者は、ブラシを用いて溶液Ａを最初に塗布し、溶液Ａを乾燥させ、次いでブラシを用いて溶液Ｂを塗布し、溶液Ｂを乾燥させることを指示された。足を濡らすこと又は洗うことを避けることは制限がなかった。塗膜は、二重作用抗真菌性ネイルコート組成物を再塗布する前に洗い落とすことは容易であった。患者は、塗膜を洗い落とした後に、前記抗真菌性ネイルコート組成物を直ちに再塗布することを指示された。医師は、患者に、特に最初の１ヶ月間は、毎日、抗真菌性ネイルコート組成物を使用することを推奨した。

試験期間の１ヶ月目、２ヶ月目及び３ヶ月目の最後に、一次効果（菌学的治療）、臨床効果（新たな爪の出現、徴候及び症状の消滅）、及び総合効果（すなわち、菌学的評価及び臨床評価の両方）に基づいた効果を、表１に要約する。

表１に示されるように、爪関与（ｉｎｖｏｌｖｅｍｅｎｔ）における評価の変化、真菌感染症の徴候の変化、及び新たな爪の成長に基づいて、治療の１ヶ月目、２ヶ月目、３ヶ月目の最後の臨床効果（例えば、「僅かから中程度改善された」、「著しく改善された」及び「治癒した」と評価された患者）は、それぞれ３３．３％、５８．８％及び９４．１％であった。

表２に示されるように、重度の爪甲真菌症を有すると最初に評価された患者の人数は、試験期間の１ヶ月、２ヶ月目及び３ヶ月目の終わりに減少し、同時に軽度の爪甲真菌症を有すると評価された患者の人数が増えた。

「軽度」の爪甲真菌症を有する患者及び「重度」の爪甲真菌症を有する患者は、３ヶ月目の終わりに著しい改善を示すと判断された。

試験期間中、患者はまた日記を継続し、これから有害事象の患者の経験が記録された。有害事象は、試験期間中は患者の誰からも報告されなかった。

新たな爪の成長には時間がかかることが認められた。爪は、報告によれば、１ヶ月に３から４ミリメートル（ｍｍ）（１日に０．１１２から０．１３２ｍｍ）の速度で連続的に成長し、従って爪の完全な再生には４．５から５ヶ月を要する。また、爪の成長の速度は個人及び年齢層で異なること（爪の成長は若者ではより早い）、及びある種の健康障害及び投薬が成長の速度を狂わし得ることが認められた。従って、菌学的評価は、十分に将来の臨床効果を最も良く予測するために最も適切な客観的な一次効果基準であると判断された。短い試験期間内での二液型の二重作用抗真菌性爪組成物の効果は、種々の強さの爪甲真菌症を回復するのに安全であり及び有効であると判断された。

爪基質による抗真菌剤の摂取量を、一人の人から集めたヒトの切り取った爪を使用して生体外で評価した。切り取った爪を洗浄し、数週間、無水エチルアルコーで抽出した後に抗真菌剤、塩酸テルビナフィンを施用した。

組成物の全容量を基準として、下記に示した量の塩酸テルビナフィン、揮発性有機担体（エタノール）、皮膜形成親水性重合体〔ポリビニルピロリドン（ＰＶＰ）〕、又は浸透促進剤ドデシル−２−（Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノ）イソプロピオネート塩酸塩、（ＤＤＡＩＰ・ＨＣｌ）を含有する４種類の抗真菌剤含有溶液それぞれ約１５ｍｌを調製した。

溶液Ａ． 無水エチルアルコールに溶解した１０重量％塩酸テルビナフィン。

溶液Ｂ． 無水エチルアルコールに溶解した１０重量％塩酸テルビナフィン及び１０重量％ＰＶＰ〔ＫＯＬＬＩＤＯＮ（登録商標）３０、ＢＡＳＦ製〕。

溶液Ｃ． 無水エチルアルコールに溶解した１０重量％塩酸テルビナフィン及び０．５重量％ＤＤＡＩＰ・ＨＣｌ。

溶液Ｄ． 無水エチルアルコールに溶解した１０重量％塩酸テルビナフィン及び１重量％ＤＤＡＩＰ・ＨＣｌ。

切り取った爪を、溶液Ａ、Ｂ、Ｃ及びＤのそれぞれ約５ｍＬに別々に浸し（約１：１０の固形分：液体の比）、溶液中のテルビナフィンの濃度を測定することにより、テルビナフィンの摂取量を浸漬から約２４時間までの時間にわたる時間の関数として調べた。測定は、Ｗａｔｅｒｓ Ａｌｌｉａｎｃｅ ＨＰＬＣ（Ｗａｔｅｒｓ Ｓｙｍｍｅｔｒｙ Ｃ１８、３．５ｎｍ ４．２×７５ｍｍのカラムが分離のために装備されている、検出にはＵＶ２２４ｎｍ、流量１．５ｍＬ／分、注入量２０μＬ）を使用して、高性能液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）法を使用して行った。緩衝液はトリエチルアミン２部及び脱イオン水１０００部からなり、このｐＨはリン酸でｐＨ７に調節された。移動相の組成は、緩衝液２５部及びアセトニトリル７５部であった。

図１にグラフとして示すように、テルビナフィンの溶液濃度の初期の急速な低下が全ての場合において認められ、これは徐々に約５時間後には平衡に達し、この後は最大２４時間まで実質的に変化がなく、飽和が達成されたことを示している。溶液Ａから得られた摂取量は、約１時間未満の間に平衡に達し、溶液Ｂ、Ｃ又はＤから得られた摂取量よりも幾分早かった。全ての場合に、テルビナフィン摂取量の平均量は、約５．２ｍｇ／１００ｍｇ爪すなわち爪の重量を基準として約５．２％であると判断された。

テルビナフィン処理された切り取った爪を、次いでそれぞれの試験溶液から別々に回収し、１０ｍＬのエチルアルコールで洗浄して表面の空洞から抗真菌剤液を除去した。次いで、それぞれの試験から得た洗浄した切り取った爪を、別の５ｍＬの無水エチルアルコールに別々に浸して、時間の関数として放出された塩酸テルビナフィンの濃度を、前記ＨＰＬＣ法を使用して測定することによって、爪の表面から放出されるテルビナフィンの割合を評価した。約４８時間にわたる放出測定に基づいて、爪から最初に放出される塩酸テルビナフィンの量は、溶液Ａで処理した爪の方が、溶液Ｂ、Ｃ又はＤで処理した爪よりも多かった。図２にグラフとして示されるように、爪の中に保持された塩酸テルビナフィンの量は、約１０時間の時間内で平衡に達した。処理の効果の順位は、溶液Ｄ＞溶液Ｃ＞溶液Ｂ＞溶液Ａであった。

図３は、溶液Ｃ及びＤで処理した爪の最新の塩酸テルビナフィンの保持量をグラフで示す。データは、溶液Ｂ中の皮膜形成重合体及び溶液Ｃ及びＤ中の浸透促進剤が、爪の中のテルビナフィンの滞留時間の増大に有利に寄与することを示した。

時間の関数としてのヒトの切り取った爪による塩酸テルビナフィンの浸透を、実施例２に記載のようにして調製した溶液Ａ及びＣを使用して比較した。実質的に同様の乾燥厚み （＋／−５％）をもつ切り取った爪を選択した。選択した切り取った爪を、２個の開放金属フレームの間に置くことによって固定し、シーラント材料をこのフレームの縁と爪の端部の間に置き、次いで爪の両端を圧迫して爪を安定化させ及び爪ホルダーを得た。このようにして、爪ホルダーは、浸透用の開口を有し、固定された爪が透過膜として水平なフランツ（Ｆｒａｎｚ）拡散セル中に置かれた場合の漏れに対してシールされた。供給セル及び受け入れセルのそれぞれの容積容量は、３ｍＬであり、約７８．５平方ｍｍの浸透面積であった。供給溶液は、抗真菌剤溶液（溶液Ａ又は溶液Ｃ）であり、受器溶液は無水エチルアルコールであった。受器溶液を最大約１００時間までの時間にわたって定期的にサンプリングし、実施例２に記載のようにしてＨＰＬＣで分析した。

受器中の塩酸テルビナフィンの累積透過は、図４にグラフで示され、無水エチルアルコール中の１０％塩酸テルビナフィンを含有する溶液Ａの浸透よりも１０％塩酸テルビナフィンと０．５％ＤＤＡＩＰ・ＨＣｌを含有する溶液Ｃから爪への塩酸テルビナフィンの高められた浸透を示している。

本実施例は、一液型の二重作用抗真菌性ネイルコート組成物（Ａ）、（Ｂ）、（Ｃ）、（Ｄ）及び（Ｅ）の配合を例示する。

本実施例は、毛瘡白癬菌（Ｔｒｉｃｈｏｐｈｙｔｏｎ． ｍｅｎｔａｇｒｏｐｈｙｔｅｓ）（ＡＴＣＣ２４９５３）によって引き起こされる皮膚糸状菌症について認められているモルモットモデルにおいて、種々の量の塩酸テルビナフィン及び種々の量の浸透促進剤ＤＤＡＩＰ・ＨＣｌを含有する一液型の二重作用抗真菌性ネイルコート組成物の生体内臨床及び殺真菌効果を例示する。表４に示した量を有する１０種類の組成物を調製した。

使用した生体内評価プロトコールの操作は、動物福祉法（Ａｎｉｍａｌ Ｗｅｌｆａｒｅ Ａｃｔ）、実験動物の管理及び使用に関する指針（Ｇｕｉｄｅ ｆｏｒ ｔｈｅ Ｃａｒｅ ａｎｄ Ｕｓｅ ｏｆ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ａｎｉｍａｌｓ）、及びＯｆｆｉｃｅ ｏｆ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ａｎｉｍａｌ Ｗｅｌｆａｒｅに従っている。また、プロトコールは、動物の管理および使用に関する委員会〔Ｉｎｓｔｉｔｕｔｉｏｎａｌ Ａｎｉｍａｌ Ｃａｒｅ ａｎｄ Ｕｓｅ Ｃｏｍｍｉｔｔｅｅ（ＩＡＣＵＣ）〕によって承認されており、ＩＡＣＵＣ指針に従った。評価は、オハイオ州クリーブランド所在のケース・ウェスタン・リザーブ大学（Ｃａｓｅ Ｗｅｓｔｅｒｎ Ｒｅｓｅｒｖｅ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ）のＣｅｎｔｅｒ ｆｏｒ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｍｙｃｏｌｏｇｙ ａｎｄ Ｍｙｃｏｌｏｇｙ Ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙで行った。

体重約４００から約４５０ｇの雄性アルビノモルモットＨａｒｌａｎ−Ｓｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙ（Ｓａｎ Ｄｉｅｇｏ、ＣＡ）を、使用前に最低５日間順応させた。動物室の環境調節は、約１６から約２２℃の範囲の温度、約３０から約７０％の範囲の相対湿度、及び１２時間／１２時間の明／暗サイクルを維持するために設定した。モルモットは生まれつき皮膚糸状菌感染症に対して感受性であり、免疫抑制などの特殊な操作を必要としない。

各試験モルモットに、キシラジン、ケタミン及びアセプロマジン（容量で３：３：１）の麻酔薬カクテル０．１ｍｌの筋肉内（ＩＭ）注射により麻酔をかけた。電気かみそりを使用して、モルモットの背中の左側の毛を刈り込んだ。安全かみそりを用いてさらにすき間なく毛を剃った。ステンシルを使用して、約２．５×２．５ｃｍ^２の毛を剃った皮膚面積に複数の四分円の印をつけ、印をつけた皮膚領域を、滅菌微細粒度のサンドペーパを用い皮膚を擦りむいた。次いで、擦りむいた皮膚に、毛瘡白癬菌（Ｔ． ｍｅｎｔａｇｒｏｐｈｙｔｅｓ）（ＡＴＣＣ２４９５３）の細胞懸濁液を十分に擦りこむことによって、モルモットを局所感染させた。

毛瘡白癬菌（Ｔ．ｍｅｎｔｏｇｒｏｐｈｙｔｅｓ）懸濁液は、毛瘡白癬菌（Ｔ．ｍｅｎｔａｇｒｏｐｈｙｔｅｓ）（凍結保存物から）をポテトデキストロース寒天（ＰＤＡ）（Ｄｉｆｃｏ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ製）プレート上で継代培養し、次いで該プレートを約３０℃の温度で約５日から約７日間インキュベートすることによって調製した。得られたコロニーを、プレートから滅菌食塩水溶液（ＮａＣｌ０．８５％）を使用して擦り落とした。滅菌食塩水溶液を用いて３回洗浄した後に、分生子を滅菌食塩水溶液に再懸濁した。分生子懸濁液の１０倍希釈液を調製し、血球計を使用して数えた。分生子の作業懸濁液を、１００マイクロリットルの標準食塩水溶液当たり１×１０^７コロニー形成単位（ＣＦＵ）の最終濃度で調製した。毛瘡白癬菌（Ｔ．ｍｅｎｔａｇｒｏｐｈｙｔｅｓ）作業分生子懸濁液の１０倍希釈液の接種物数を、該懸濁液をサブローデキストロース寒天（Ｄｉｆｃｏ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ製）培地に塗布し、このプレートを約３０℃の温度で約３から約４日間インキュベートし、次いでコロニー数を調べることによって調べた。

前記皮膚糸状菌を接種し、感染させた後の３日目に、モルモットをそれぞれ、表４に挙げた選択したネイルコート組成物５（ＡからＪ）の一つの施用量０．１ｍＬを用いて７日間に毎日１回処理した。７日の試験期間の完了後３日目に、菌学的効果及び臨床効果を調べた。

菌学的効果は、滅菌ピンセットを用いて４つの四分円から毛の試料（四分円当たりそれぞれ１０本の毛）を取り除くことによって調べた。毛の試料を、ポテトデキストロース寒天プレート上の対応四分円の中に置き、約３０℃の温度で約２日間インキュベートした。２日のインキュベーション期間の後に、毛根における菌の成長を立体顕微鏡下で調べた。処理動物群当たりの菌学的に陽性の毛の試料の個数の減少における試験組成物の有効性は、次式：効果％＝１００−（Ｔ×１００／Ｋ）
（式中、Ｔ＝試験群の陽性の毛であり及びＫ＝未処理対照群の陽性の毛である）
を使用して、未処理対照群の動物に対する効果％として表した。

４匹のモルモットを、プラセボ（ビヒクル対照）群（群１）として、実施例５（Ａ）の組成物を用いて試験し、５匹のモルモットを表４に示す実施例の製剤〔実施例５（ＢからＪ）〕のそれぞれ一つを用いて試験し（群２から１０それぞれとして特定した）、４匹のモルモットの１群を感染対照群（群１１）として維持した。

感染した対照モルモット（群１１）から得た毛は、毛根の浸潤を示す菌糸の成長を示した。毛根の実質的に同様の浸潤が、プラセボで処理した感染モルモット（群１）及び実施例５（Ｂ）の薬剤無含有の組成物で処理した感染モルモット（群２）において認められた。塩酸テルビナフィンを含有する組成物、すなわち実施例５（ＣからＪ）の組成物の全ては、毛根に真菌要素が存在しないことによって示される菌学的効果を有していた。

臨床効果は、皮膚の外観の局部変化と、試験部位の毛の再成長を調べることによって、次の数値の評点基準を使用して評価した：０＝病巣なし；１＝皮膚に極僅かな紅斑がある；２＝十分に明確な発赤、腫脹があり、逆立った毛髪を伴う；３＝大きな面積の著しい発赤の瘡蓋、スケール（ｓｃａｌｉｎｇ）、禿げ上がった地肌、所々に潰瘍あり；４＝外皮の部分損傷及び毛の喪失あり；及び５＝外皮に対する広い損傷及び感染の部位の毛の完全な喪失あり。処理動物群当たりの評点の変化における臨床評価の評価は、次式：効果％＝１００−（Ｔ×１００／Ｋ）（式中、Ｔ＝試験群の評点であり及びＫ＝未処理対照群の評点である）を使用して、未処理対照群の動物に対する効果％として表した。

感染した対照モルモット（群１１）は、毛の喪失及び容易に目で見ることができる潰瘍性又は落屑性の皮膚部分を示した。実質的に同様の病変が、プラセボ〔実施例５（Ａ）〕で処理した群１のモルモットにおいて及び薬剤を含有していない組成物〔実施例５（Ｂ）〕で処理した群２のモルモットにおいて認められた。テルビナフィン含有組成物〔実施例５（ＣからＪ）〕は全て、プラセボ（ビヒクル）対照及び薬剤を含有していない組成物〔実施例５（ＡからＢ）〕で処理したモルモットの皮膚及び毛の再成長に比べて、群３から１０のモルモットのより健全な皮膚及び毛の再成長によって示されるように皮膚の改善された外観に基づいて、臨床効果を有していた。臨床効果は、薬剤含有量の増加又は浸透促進剤含有量の増加は臨床効果においてさらなる有利な増大を提供しなかったことから、約１重量％の薬剤濃度〔実施例５（Ｃ）〕で及び約０．５重量％のＤＤＡＩＰ浸透促進剤濃度〔実施例例５（Ｆ）〕で最適であると判断された。

試験の終わりに、生存動物全てを、安楽死溶液を静脈内注射することによって犠牲にし、焼却のためにｔｈｅ Ａｎｉｍａｌ Ｒｅｓｏｕｒｃｅ Ｃｅｎｔｅｒに処分した。

本実施例は、動物の蹄のケラチンモデル（ウマの蹄）及び寒天プレート拡散アッセイを使用して、塩酸テルビナフィンを含有する一液型の二重作用抗真菌性ネイルコート組成物の硬質ケラチンへの浸透性を生体外で例示する
３個ディスク（Ｉ、ＩＩ及びＩＩＩ）を、ウマの蹄のケラチンから約０．５から約１ミリメートル（ｍｍ）の範囲の厚み（ディスクＩ）；約１．１から約１．５ミリメートル（ｍｍ）の範囲の厚み（ディスクＩＩ）；及び約１．６から約２ミリメートル（ｍｍ）の範囲の厚み（ディスクＩＩ）に切り取った。それぞれのディスクの両側面及び一方の面を、ワセリンで被覆して、反対面を暴露させる寒天拡散の評価中の抗真菌薬の漏出を防止した。

一つの拡散アッセイ評価において、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）中に塩酸テルビナフィンを２５ｍｇ／ｍｌ、０．５ｍｇ／ｍｌ及び１ｍｇ／ｍｌそれぞれの量を含有する３種類の抗真菌性コート溶液〔６（Ａ）、６（Ｂ）、６（Ｃ）〕を調製した。各抗真菌性コート溶液を、各選択された蹄のディスク（Ｉ、ＩＩ及びＩＩＩ）の暴露面に塗布した。次いで、この蹄のディスクの抗真菌剤被覆面を、５×１０^５の濃度の毛瘡白癬菌（Ｔ． ｍｅｎｔａｇｒｏｐｈｙｔｅｓ）（ＡＴＣＣ２４９５３）の分生子懸濁液のローン（ｌａｗｎ）を接種した寒天プレートと接触させて置き、約８時間インキュベートした。次いで、阻止の帯域（透明のままである、すなわち成長がない領域の直径）をミリメートル（ｍｍ）で測定した。

結果は、全ての濃度の塩酸テルビナフィンで蹄の中への拡散が起こること及び浸透物は生物活性を保持していたことを示した。阻止について測定された帯域は、一般に蹄のディスクの厚みに対して直径で半比例した。約１．１ｍｍから約１．５ｍｍの範囲の厚みをもつ蹄のディスクＩＩは、ヒトの爪の厚みに類似していると判断される。

本実施例は、実施例６に記載のウマの蹄モデルを使用して、ヒトの爪に対する一液型の二重作用抗真菌性ネイルコート組成物の臨床使用を模擬実験する。

臨床使用を模擬実験するための一般的な方法は次の通りである：ウマの蹄をきれいにし、緩衝液で３回洗浄した。約１００マイクロメーターの厚みをもつウマの蹄の複数の切片を、Ａｒｂｏｒブレードを使用して切り取り、加圧滅菌により滅菌した。次いで、それぞれの蹄部分を、表５の組成物７（ＡからＨ）に示す量の塩酸テルビナフィン及び浸透促進剤を含有する選択されたネイルコート組成物を用いて被覆し、ネイルコート組成物と接触させた。比較のために、同様にウマの蹄の複数の切片を、合成抗真菌剤シクロピロクスを含有する市販の局所ネイルラッカーＰＥＮＬＡＣ（商標）と接触させた〔実施例７（１）〕。次いで、処理した蹄の切片をそれぞれ、５×１０^５の濃度の毛瘡白癬菌（Ｔ． ｍｅｎｔａｇｒｏｐｈｙｔｅｓ）（ＡＴＣＣ２４９５３）の分生子懸濁液のローンを接種した寒天プレートの上に置き、約３５℃の温度で約４日間インキュベートした。次いで、阻止の帯域を測定した。

本実施例は、皮膚糸状菌、紅色白癬菌（Ｔｒｉｃｈｏｐｙｔｏｎ． ｒｕｂｒｕｍ）の３種類の菌株、皮膚糸状菌、毛瘡白癬菌（Ｔｒｉｃｈｏｐｈｙｔｏｎ． ｍｅｎｔａｇｒｏｐｈｙｔｅｓ）の９種類の菌株及び酵母カンジダ・アルビカンス（Ｃａｎｄｉｄａ． ａｌｂｉｃａｎｓ）の１０種類の菌株に対する、塩酸テルビナフィン及び浸透促進剤としてＤＤＡＩＰ・ＨＣｌを含有する一液型の二重作用抗真菌性ネイルコート組成物の殺菌活性を例証する。

表６に示す量を有する塩酸テルビナフィンを含有するネイルコート組成物、実施例８（Ａ）、８（Ｂ）、及び薬剤なしの対照、実施例８（Ｃ）を調製し、殺真菌効果を、市販の組成物、実施例８（Ｄ）：ＰＥＮＬＡＣ（商標）ネイルラッカー溶液局所溶液８％（シクロピロクス含有）の殺真菌効果と比較した。

殺真菌効果を、薬剤の最小発育阻止濃度（ＭＩＣ）及び最大殺真菌濃度（ＭＦＣ）に基づいて、ブロス微量希釈アッセイ、及び阻止の帯域を測定する寒天拡散プレートアッセイを使用して評価した。

ブロス微量希釈法は、臨床研究所規格委員会〔Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｃｏｍｍｉｔｔｅｅ ｆｏｒ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｓｔａｎｄａｒｄｓ（ＮＣＣＬＳ）〕の分生子形成糸状菌の感受性試験のＮＣＣＬＳ Ｍ３８−Ａ標準法の変法であった。上記変法は、ｔｈｅ Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｓｏｃｉｅｔｙ ｆｏｒ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙによって刊行されたＪｅｓｓｕｐ，ら，「Ａｎｔｉｆｕｎｇａｌ Ｓｕｓｃｅｐｔｉｂｉｌｉｔｙ Ｔｅｓｔｉｎｇ ｏｆ Ｄｅｒｍａｔｏｐｈｙｔｅｓ： Ｅｓｔａｂｌｉｓｈｉｎｇ ａ Ｍｅｄｉｕｍ ｆｏｒ Ｉｎｄｕｃｉｎｇ Ｃｏｎｉｄｉａｌ Ｇｒｏｗｔｈ ａｎｄ Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ ｏｆ Ｓｕｓｃｅｐｔｉｂｉｌｉｔｙ ｏｆ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｉｓｏｌａｔｅｓ，「Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ，３８，３４１−３４４，（２０００）」に記載の方法に基づいてオハイオ州クリーブランドのｔｈｅ Ｃｅｎｔｅｒ ｆｏｒ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｍｙｃｏｌｏｇｙ、Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｈｏｓｐｉｔａｌｓ ｏｆ Ｃｌｅｖｅｌａｎｄで開発された。この公開は本明細書に参考として援用されている。皮膚糸状菌を試験するための前記変法の再現性の多施設共同研究に基づいて、ＮＣＣＬＳ Ｍ３８−Ａ標準法の修正として前記変法の採用が提案された。この変法を以下に記載する。

皮膚糸状菌分離株を、ポテトデキストロース寒天（ＰＤＡ）上で継代培養し、約３０℃の温度で約４日から約５日間又は良好な分生子形成が生じるまでインキュベートした。紅色白癬菌（Ｔ． ｒｕｂｒｕｍ）分離株を、ＰＤＡの代わりに穀物（オートミール）寒天上で継代培養して、分生子生成を誘導した。分生子を滅菌食塩水に懸濁した懸濁液は、コロニー表面を滅菌綿棒で穏やかに擦ることによって調製される。この懸濁液を約５分から約１０分間静置させ、分生子を血球計を使用して数えた。分生子の作業懸濁液は、１０ｍｌのＲＰＭＩ１６０４（Ｄｉｆｃｏ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ製）培地中で１から３×１０^３ＣＦＵ／ｍｌの最終濃度に調製した。酵母対照は、ＰＤＡ上で継代培養し、約３５℃の温度で約４８時間インキュベートした。酵母接種材料を、０．５から２．５×１０^３ＣＦＵ／ｍｌの最終濃度に調製した。ＭＩＣアッセイについては、それぞれの薬剤濃度ウエル及び増殖対照ウエルに、１００マイクロリットルの細胞懸濁液を接種し、それぞれのマクロタイターウエルの最終容量は２００マイクロリットルである。皮膚糸状菌プレートを約３５℃の温度で約４日間インキュベートした（酵母対照については４８時間）。プレートを増殖対照と比較して５０％及び８０％増殖阻止について肉眼で調べ、ＭＩＣ結果をマイクログラム（μｇ／ｍｌ）で記録した。ＭＩＣ終点は、一般に増殖対照と比較して真菌増殖を８０％阻止した最低濃度として定義される。ＭＦＣアッセイを行うために、可視できる増殖がないそれぞれのマイクロタイターウエルから１００μｌを取り出し、ポテトデキストロース寒天プレート上で継代培養した。＜１から２個のコロニーを生成させるための最低濃度を、ＭＦＣとみなす。（マイクロタイターウエルから取り出した接種材料を、単離のために画線した − 阻止の帯域が存在しない）。

ＭＩＣアッセイについては、ブロス希釈を、希釈剤としてＲＰＭＩ１０６４を用いてマイクロタイターウエル中で行った。ＭＦＣアッセイは、ＭＩＣ試験からマイクロタイターウエルを継代培養することによって行った。

寒天拡散アッセイについては、分生子の標準化接種材料をポテトデキストロース寒天プレートの表面に塗布し、乾燥させた。次いで、ウエルを寒天に切断し、試験組成物をこのウエルに入れ、拡散させ、抗真菌性活性を、ミリメートル（ｍｍ）直径で測定されるプレートの表面の増殖阻止の帯域（すなわち、透明であり、増殖が無い領域）によって証明する。

寒天拡散アッセイは、５×１０^５ＣＦＵ／ｍｌの濃度で分生子懸濁液のローンを播種したポテトデキストロース寒天プレートを使用して行った。寒天に切断したウエルに未希釈試験組成物２００μｌを加えることによって実施例８（ＡからＤ）の未希釈組成物を別々にプレートに接種し、拡散させた。次いで、接種プレートを、３５℃で皮膚糸状菌については約４日間及び酵母については４８時間インキュベートした。表６におけるネイル組成物の阻害（帯域）アッセイの帯域のミリメートル（ｍｍ）測定の範囲及び平均直径を、以下の表６−Ａに要約する。

表６−Ａのデータは、テルビナフィン含有ネイルコート組成物〔実施例８（Ａ）及び８（Ｂ）〕が３種類の生物全てに対して殺真菌活性であり、互いに対する活性において実質的に均等であることを示す。薬剤無含有組成物〔実施例８（Ｃ）〕は、酵母に対して実質的に無効であり、２種類の皮膚糸状菌に対して効果が弱いと判断され、このような活性は恐らくはベンジルアルコール及びエタノールによる寄与がある抗菌効果に起因している可能性があることを示す。テルビナフィン含有ネイルコート組成物は、皮膚糸状菌、毛瘡白癬菌（Ｔ． ｍｅｎｔａｇｒｏｐｈｙｔｅｓ）及び紅色白癬菌（Ｔ． ｒｕｂｒｕｍ）に対して市販のシクロピロクス含有ネイルラッカーよりも約３倍以上の効果があると判断され、酵母カンジダ・アルビカンス（Ｃ． ａｌｂｉｃａｎｓ）に対して市販のシクロピロクス含有ネイルラッカーと実質的に同等であった。

皮膚糸状菌、毛瘡白癬菌（Ｔ． ｍｅｎｔａｇｒｏｐｈｙｔｅｓ）（ＡＴＣＣ２４９５３）に対する塩酸テルビナフィンの殺菌活性を、最小発育阻止濃度（ＭＩＣ）及び最大殺真菌濃度（ＭＦＣ）並びに阻止の帯域を測定する寒天拡散プレートアッセイに基づいて、実施例８に記載の改変ＮＣＣＬＳブロス希釈アッセイで例示する。

表７に示す量を有するプラセボ組成物〔実施例９（Ａ）〕、２種類の塩酸テルビナフィン含有ネイルコート組成物〔実施例９（Ｂ）及び９（Ｃ）〕、及び薬剤無含有の比較組成物〔実施例９（Ｄ）〕を調製した。また、表７に示す量で塩酸テルビナフィンのジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）溶媒溶液、浸透促進剤ＤＤＡＩＰ・ＨＣｌのジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）溶媒溶液、これらの組み合わせの溶媒溶液〔実施例９（ＥからＨ）〕を調製した。比較のために、市販のＰＥＮＬＡＣ（商標）ネイルラッカー溶液も含めた。

ＭＩＣアッセイを、ＲＰＭＩ１６０４を希釈剤として用いてマイクロタイターウエル中で行った実施例８に記載のブロス希釈法を使用して調べた。各試験組成物の連続希釈を、ＲＰＭＩ希釈剤中で行い、次いで１００μｌの未希釈試験組成物及び各希釈組成物を、それぞれのマクロタイタープレートに加えた。次いで、各ウエルに分生子懸濁液（１００μｌ）を加え、プレートを約３５℃のインキュベーション温度で皮膚糸状菌については４日間及び酵母については４８時間のインキュベーション期間でインキュベートした。ＭＦＣ決定のために、寒天に切断したウエルに未希釈試験組成物を加え、拡散させた。ＭＩＣ終点は、一般に増殖対照と比較して真菌増殖を８０％阻止した最低濃度であった。ＭＦＣ終点は、１個から２個のコロニーを生成するための最終濃度であった。阻止帯域の大きさを測定した（透明のままである、すなわち増殖の無い領域の直径）。

組成物のそれぞれを用いて得られたＭＩＣ及びＭＦＣアッセイの阻止の帯域（ｍｍの直径サイズ）及び希釈因子を表７−Ａに示す。

テルビナフィン含有ネイルコート組成物〔実施例９（Ｂ）及び９（Ｃ）〕は、最も高い希釈（＞１：５１２）で殺真菌性であった。テルビナフィン無含有組成物〔実施例９（Ａ）及び９（Ｄ）〕は、ＭＩＣアッセイに基づいて殺真菌性が弱く、阻害の帯域を生成せず、観察された阻止効果は恐らくビヒクル中のベンジルアルコール及びエタノールによるある種の抗菌寄与に主として起因していることを示す。テルビナフィン含有組成物は、阻止の帯域に基づいて、同等の容量濃度で市販のネイルラッカー〔実施例９（１）〕の約２．４倍の効果があると判断された。市販のネイルラッカーは、ＭＩＣ及びＭＦＣアッセイに基づいて、テルビナフィン無含有組成物に相当した。最も高い濃度で市販のネイルラッカーラッカーについては、ビヒクルの蒸発及びマイクロタイターウエル中のラッカーの硬化により幾つかの問題に遭遇した。

ＤＭＳＯ溶媒において、１ｍｇ／ｍｌ濃度の塩酸テルビナフィンの＞１：５１２の希釈の殺真菌効果を、実施例９（Ｆ）で再確認し、ＭＩＣに基づいて浸透促進剤単独〔実施例８（Ｅ）〕〕はあってもある弱い効果であることが再確認された。１μｇ／ｍｌの塩酸テルビナフィン濃度では、塩酸テルビナフィンの殺真菌効果は、浸透促進剤を存在させた場合又は存在させない場合と実質的に同等であった〔実施例９（Ｇ）、９（Ｈ）〕。

上記の記載は、本発明を例示することを目的とするものであり、本発明を限定するものではない。数値的改変及び変更は本発明の真の精神及び範囲から逸脱することなく行い得る。

図１は、テルビナフィン供給溶液中に残存するテルビナフィンの濃度として表される選択された個体から切り取ったヒトの爪によって摂取されたテルビナフィンの時間の関数としてのグラフである、溶液Ａは無水エタノール中の１０重量％塩酸テルビナフィンであり、溶液Ｂは無水エタノール中の１０重量％塩酸テルビナフィン＋１０重量％ポリビニルピロリドン（Ｋ−３０）であり、溶液Ｃは無水エタノール中の１０重量％塩酸テルビナフィン＋０．５重量％ＤＤＡＩＰ・ＨＣｌであり、溶液Ｄは無水エタノール中の１０重量％塩酸テルビナフィン＋１重量％ＤＤＡＩＰ・ＨＣｌである。 図２は、切り取った爪に残存する塩酸テルビナフィンの計算量として表される図１の選択された個体の切り取ったヒトの爪から放出されるテルビナフィンの時間の関数としてのグラフである。試料Ａは溶液Ａで予め処理され、試料Ｂは溶液Ｂで予め処理され、試料Ｃは溶液Ｃで予め処理され、試料Ｄは溶液Ｄで予め処理された。 図３は、無水エタノールに溶解した塩酸テルビナフィンの溶液中のＤＤＡＩＰ・ＨＣｌ濃度の関数としての、ヒトの切り取った爪に保有される塩酸テルビナフィンの計算量のグラフである。 図４は、無水エタノールに溶解した塩酸テルビナフィンの１０重量％溶液から及び無水エタノールに溶解した塩酸テルビナフィンの１０重量％溶液と０．５重量％のＤＤＡＩＰ・ＨＣｌを含有する溶液からの時間の関数としてのヒトの切り取った爪の中の塩酸テルビナフィンの浸透のグラフである。

Claims (7)

1. 組成物の全重量を基準として：
   ０．５重量％から１０重量％の範囲内で存在する塩酸テルビナフィン、
   ０．１重量％から２５重量％の範囲内で存在するドデシル−２−（Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノ）イソプロピオネート塩酸塩、
   ０．１重量％から１０重量％の範囲内で存在するベンジルアルコール、
   ０．１重量％から５重量％の範囲内で存在するポリビニルピロリドン、及び
   残部を構成するエタノール
   を含んでなり、爪及び隣り合った皮膚組織の表面に抗真菌薬を含有する水溶性の殺真菌性被膜を提供し、並びに爪及びこの周囲の皮膚組織への抗真菌薬の浸透を促進する不揮発性の浸透促進剤を提供する一液型抗真菌性ネイルコート組成物。
2. ドデシル−２−（Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノ）イソプロピオネート塩酸塩が０．１重量％から１０重量％である請求項１に記載の組成物。
3. ベンジルアルコールが０．５重量％から１．５重量％である請求項１又は２に記載の組成物。
4. ポリビニルピロリドンが０．２５重量％から１重量％である請求項１から３のいずれか一項に記載の組成物。
5. 少なくとも一日一回投与するのに適した請求項１から４のいずれか一項に記載の組成物。
6. 爪甲真菌症の治療のための請求項１から５のいずれか一項に記載の組成物。
7. 透明である請求項１から６のいずれか一項に記載の組成物。

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