JP4377663B2 - 腸内機能改善剤 - Google Patents

Description

本発明は、フラクトース分子がβ−２，１結合で環状に結合して構成される環状イヌロオリゴ糖であるシクロフラクタンを有効成分とする腸内機能改善剤およびこの腸内機能改善剤を有効量配合してなる口腔適用対象物に関する。

オリゴ糖や食物繊維などの難消化性糖質は、人の消化酵素では分解されないため、小腸までの器官による消化吸収を免れ、大腸まで達する。そして大腸へ達した難消化性糖質の一部は、腸内細菌により資化されて酢酸、プロピオン酸、酪酸などの短鎖脂肪酸、腸ガス、ビタミンなどを産生する。短鎖脂肪酸が腸内で増えると、腸内のｐＨが低下し、この作用により、ウェルシュ菌などの悪玉菌の増殖を抑制し、悪玉菌の作り出す腐敗産物や細菌毒素の生成を抑え、整腸作用をもたらすことが報告されている。また、この短鎖脂肪酸は、腸へ刺激を与え、ぜん動運動を活発にし、排便を促すことも知られている。従って、短鎖脂肪酸は、腸内環境を改善したり腸内代謝を改善したりすることで腸内機能を改善することから、腸内の短鎖脂肪酸を増加させて腸内機能改善作用をもたらす難消化性糖質は、古くからその有用性について着目されている（下記の非特許文献１および２を参照）。
このような特性を有する難消化性糖質は、既に、各種の飲食品や医薬品などに配合されて利用されている。例えば、オリゴ糖は、腸内でのビフィズス菌増殖促進作用、整腸作用、難う蝕性、ミネラル吸収促進効果など優れた生理作用を有することから、食品分野における機能性甘味料の一つとして注目されている。また、例えば、可溶性食物繊維およびガラクトオリゴ糖を併用することにより、腸内環境を改善し、腐敗産物を低下減少させ、肝性脳症、大腸癌の治療・予防となる食品や医薬品としての利用を考えた腸内環境改善用組成物が知られている（下記の特許文献１を参照）。また、フラクトオリゴ糖には、腸内のビフィズス菌を増殖させる作用があることが知られており（下記の特許文献２を参照）、例えば、セルロースとフラクトオリゴ糖からなる便秘改善、便通促進、便性改善用組成物（下記の特許文献３を参照）は、腎不全による透析患者の便通改善を目的としている。また、キクイモ、チコリ、ゴボウ、ダリアなどのキク科、ユリ科、アヤメ科、ラン科などの植物の根、根茎から得られる、フラクトース分子がβ−２，１結合で直鎖状に連なったイヌリンは、腸内細菌の調製や活性を高めて整腸作用および腸内清浄化を高める作用があることが知られている（下記の特許文献４を参照）。
しかしながら、難消化性糖質が有する作用の解明は未だ十分には行われておらず、未知な部分も多い。従って、これまでに知られていない腸内機能改善作用を有する難消化性糖質の探求は非常に意義深いものである。
特開平３−１５１８５４号公報 特開昭５８−２０１９８０号公報 特開平１−３１９４２１号公報 特開２００３−６１５９２号公報 原 健次 著、生理活性脂質‐短鎖脂肪酸の生化学と応用、幸書房、２０００年１２月 印南 敏 著、外１６名、改定新版 食物繊維、第一出版株式会社、１９９５年５月

そこで本発明は、これまでに知られていない難消化性糖質を有効成分とする腸内機能改善剤を提供することを目的とする。

本発明者らは上記の点に鑑みて種々の検討を行った結果、フラクトース分子がβ−２，１結合で環状に結合して構成される環状イヌロオリゴ糖であるシクロフラクタンが優れた腸内機能改善作用を有することを見出した。
シクロフラクタンの機能性についての知見は現在のところまだわずかである。それらのうち代表的なものを挙げれば、例えば、特開平５−７６７５６号公報には、金属イオンの分析や分離に用いる金属イオン捕捉剤としてシクロフラクタンが有用であることが記載されている。また、特開平７−４６９５６号公報には、シクロフラクタンを添加したパン生地は長期間の冷凍保存が可能であり、シクロフラクタンを添加したパン生地から製造されるパン類はパン体積やクラムの柔らかさに優れることが記載されている。また、特開平７−５３３４７号公報には、シクロフラクタンを有効成分として含有する皮膚化粧料が角質層水分低下に基づく乾燥性皮膚を回復させる効果を有することが記載されている。また、特開平８−１３３９８６号公報には、リポソーム凍結乾燥製剤における凍結安定化剤としてシクロフラクタンが有用であることが記載されている。しかしながら、シクロフラクタンが腸内機能改善剤として機能することは、これまでに報告された例はなく、また、従来の技術からは想起することができない全く新しい知見である。

すなわち本発明の腸内機能改善剤は、請求項１記載のとおり、シクロフラクタンを有効成分とするものである。
また、請求項２記載の腸内機能改善剤は、請求項１記載の腸内機能改善剤において、シクロフラクタンが環状イヌロヘキサオースおよび環状イヌロヘプタオースから選ばれる少なくとも１つとするものである。

本発明における腸内機能改善剤は、シクロフラクタンを有効成分とした新しい腸内機能改善剤であり、飲食品や医薬品などの口腔適用対象物に幅広く応用できる汎用性の高いものである。本発明における腸内機能改善剤は、摂取により、腸内の短鎖脂肪酸が増加することで腸内の機能が改善され、整腸作用や排便促進による便秘改善作用などを発揮することができる。

本発明において腸内機能改善剤の有効成分として機能するシクロフラクタン（以下「ＣＦ」と略称する）とは、フラクトース分子がβ−２，１結合で環状に結合して構成される環状イヌロオリゴ糖を意味し、６個のフルクトース分子からなる環状イヌロヘキサオース（以下「ＣＦ６」と略称する）、７個のフルクトース分子からなる環状イヌロヘプタオース（以下「ＣＦ７」と略称する）、８個のフルクトース分子からなる環状イヌロオクタオース（以下「ＣＦ８」と略称する）などが知られている。これらは全て白色粉末であり、水に対する溶解性が極めて高く、含水有機溶媒などにも若干は溶解する。ＣＦは、例えば、キクイモ、チコリ、ゴボウ、ダリアなどのキク科、ユリ科、アヤメ科、ラン科などの植物の根、根茎から得られる炭水化物の主成分であるイヌリンに、環状イヌロオリゴ糖生成酵素であるシクロイヌロオリゴサッカライド フラクタノトランスフェラーゼ（以下「ＣＦＴａｓｅ」と略称する）を作用させることにより取得することができる。

以下にＣＦの取得方法および精製方法について詳しく記載する。ＣＦの取得に必要なＣＦＴａｓｅは、バチルス マセランス（Bacillus macerans）に属するＣＦＣ１（KIM HWA-Young and YONG-JIN CHOI, J. Microbiol. Biotechnol, vl.8, no.3, p.251-257, 1998）、バチルス サーキュランス（Bacillus circulans）に属するＯＫＵＭＺ ３１Ｂ（Mishio Kawamura and Takao Uchiyama, Carbohydr Res, vl.260, p.297-304, 1994）、バチルス サーキュランスに属するＭＣＩ−２５５４（Sachiko Kushibe and Kaori Mitsui, Biosci. Biotech. Biochem., vl.59, no.1, p31-34, 1995、特開平7-41500号公報）、パエニバチルス ポリミキサ（Paenibacillus polymyxa）に属するＭＧ−ＣＦ６（FERM P-19158）などのＣＦＴａｓｅ生産微生物を用いて生産させることができる。ＣＦは、このようなＣＦＴａｓｅ生産微生物を、イヌリンを含む培地で培養した後、遠心分離などを用いて除菌し、その培養上清液から取得することができる。また、ＣＦは、ＣＦＴａｓｅ生産微生物の培養上清液から単離した粗製のＣＦＴａｓｅや精製したＣＦＴａｓｅを別途イヌリンに作用させることで取得することもできる。このような方法で得られるＣＦは、ＣＦ６やＣＦ７やＣＦ８などからなる混合物であるが、これらは活性炭カラムクロマトグラフィー、イオン交換クロマトグラフィー、ゲル濾過（川村三志夫、内山喬夫、澱粉科学、第39巻、p.109-116, 1992、KIM HWA-Young et al., J. Microbiol. Biotechnol, vol.6, no.6, p.397-401, 1996）などにより、分離・精製することができる。

本発明の腸内機能改善剤は、上記のような方法にて取得したＣＦ混合物をそのまま有効成分として用いてもよいし、分離・精製した単一のＣＦ化合物を用いてもよいし、２種類以上の単一ＣＦ化合物を所望する混合比で混合して用いてもよく、いずれの用い方であっても本発明の腸内機能改善効果を発揮することができる。

ＣＦが有する腸内機能改善作用は、腸内の短鎖脂肪酸の増加作用などに基づく腸内環境改善や腸内代謝改善などによるものであるが、ここで短鎖脂肪酸とは、一般的に解釈されるものであればよく、酢酸、プロピオン酸、イソ酪酸、酪酸、イソ吉草酸、吉草酸、乳酸、リンゴ酸、コハク酸などから選ばれる少なくとも１つを意味するものと解釈してもよいし、これらを総括した総短鎖脂肪酸を意味するものと解釈してもよい。本発明の腸内機能改善剤は、腸内の短鎖脂肪酸を増加させることにより、腸内のｐＨを低下させ、ウェルシュ菌などの悪玉菌の増殖を抑制し、悪玉菌の作り出す腐敗産物や細菌毒素の生成を抑えることで、整腸作用や排便促進による便秘改善作用などを発揮することができる。

本発明において、腸内機能改善剤が配合されうる口腔適用対象物とは、口に含むことができるものであれば何でもよいが、腸内機能改善剤の有効成分となるＣＦが腸内に到達することができる、飲食品、医薬品、医薬部外品などを好適に例示することができる。

本発明の口腔適用対象物は、腸内機能改善剤の有効成分となるＣＦを配合することができるものであればどのような形態であってもよく、例えば、水溶液や混濁物や乳化物などの液状形態であっても、ゲル状やペースト状の半固形状形態であっても、粉末や顆粒やカプセルやタブレットなどの固形状形態であってもよい。

本発明における口腔適用対象物のうち、飲食品としては、例えば、即席食品類（即席めん、カップめん、レトルト・調理食品、調理缶詰め、電子レンジ食品、即席味噌汁・吸い物、スープ缶詰め、フリーズドライ食品など）、炭酸飲料、柑橘類（グレープフルーツ、オレンジ、レモンなど）の果汁や果汁飲料や果汁入り清涼飲料、柑橘類の果肉飲料や果粒入り果実飲料、トマト、ピーマン、セロリ、ウリ、ニンジン、ジャガイモ、アスパラガスなどの野菜を含む野菜系飲料、豆乳・豆乳飲料、コーヒー飲料、お茶飲料、粉末飲料、濃縮飲料、スポーツ飲料、栄養飲料、アルコール飲料やタバコなどの嗜好飲料・嗜好品類、パン、マカロニ・スパゲッティ、麺類、ケーキミックス、唐揚げ粉、パン粉、ギョーザの皮などの小麦粉製品、キャラメル・キャンディー、チューイングガム、チョコレート、クッキー・ビスケット、ケーキ・パイ、スナック・クラッカー、和菓子・米菓子・豆菓子、デザート菓子などの菓子類、しょうゆ、みそ、ソース類、トマト加工調味料、みりん類、食酢類、甘味料などの基礎調味料、風味調味料、調理ミックス、カレーの素類、たれ類、ドレッシング類、めんつゆ類、スパイス類などの複合調味料・食品類、バター、マーガリン類、マヨネーズ類、植物油などの油脂類、牛乳・加工乳、乳飲料、ヨーグルト類、乳酸菌飲料、チーズ、アイスクリーム類、調製粉乳類、クリームなどの乳・乳製品、素材冷凍食品、半調理冷凍食品、調理済み冷凍食品などの冷凍食品、水産缶詰め、果実缶詰め・ペースト類、魚肉ハム・ソーセージ、水産練り製品、水産珍味類、水産乾物類、佃煮類などの水産加工品、畜産缶詰め・ペースト類、畜肉缶詰め、果実缶詰め、ジャム・マーマレード類、漬物・煮豆類、農産乾物類、シリアル（穀物加工品）などの農産加工品、ベビーフード、ふりかけ・お茶漬けのりなどの市販食品などが挙げられる。

また、本発明の口腔適用対象物のうち、医薬品としては、日本薬局方に収められている医薬品で口に含むことができれば特に限定されるものではなく、その製剤形態としては、例えば、エアゾール剤、液剤、エキス剤、エリキシル剤、カプセル剤、顆粒剤、丸剤、散剤、酒精剤、錠剤、シロップ剤、浸剤・煎剤、トローチ剤、芳香水剤、リモナーゼ剤などが挙げられる。医薬部外品としては、厚生労働大臣が指定した医薬部外品で口に含むことができれば特に限定されるものではなく、例えば、内服液剤、健康飲料、消毒剤、消毒保護剤、ビタミン含有保健剤などが挙げられる。

口腔適用対象物への本発明の腸内機能改善剤の配合方法は特に制限されるものではない。例えば、口腔適用対象物の形態が液状形態や半固形状形態である場合には、その調製段階において本発明の腸内機能改善剤をそのまま、あるいは水に溶解させた水溶液などとして添加し、均一化することにより行えばよい。また、本発明の腸内機能改善剤をアルコール水などの含水有機溶媒やエタノールなどの有機溶媒などに分散させた分散液として添加し、十分に攪拌してこれを分散させることも可能である。なお、このようにして得られた調製物を、噴霧乾燥機や凍結乾燥機などを用いて乾燥することで、粉末状形態としてもよい。また、飲食品の形態が固形状形態である場合には、その調製段階において本発明の腸内機能改善剤をそのまま、あるいは水に溶解させた水溶液などとして添加し、均一化することにより行えばよい。また、本発明の腸内機能改善剤をアルコール水などの含水有機溶媒やエタノールなどの有機溶媒などに分散させた分散液として添加し、十分に混合してこれを分散させることも可能である。水難溶性の飲食品に本発明の腸内機能改善剤を配合する場合、必要に応じて飲食品にアルコール水などの含水有機溶媒やエタノールなどの有機溶媒などを添加してこれを溶解や希釈し、ここに本発明の腸内機能改善剤を添加し、十分に攪拌して腸内機能改善剤を分散させるようにしてもよい。

口腔適用対象物に対する本発明の腸内機能改善剤の配合量は、特に制限されないが、対象となる口腔適用対象物により配合量を適宜設定することが好ましい。一般的には、最終製品中で０．５〜２０重量％であることが好ましく、１〜１０重量％であることがより好ましい。腸内機能改善剤の配合量が０．５重量％より少ない場合には、目的とする腸内機能改善効果が期待できない恐れがある。一方、腸内機能改善剤の配合量が２０重量％より多い場合には、口腔適用対象物が飲食品の場合には飲食品本来の味が損なわれることや、ある一定の効果以上は得ることができずに経済的に不利となることがある。

本発明の腸内機能改善剤は、上記のように口腔適用対象物に配合して摂取してもよいが、そのまま単独で摂取することもできる。その摂取量は、摂取形態、年齢、体重などにより異なるが、特に制限されるものではない。本発明の腸内機能改善剤を単独で製剤化して摂取する場合における製剤形態は、有効成分としてＣＦを含んでなるものであればどのような形態であってもよく、例えば、粉末状であってもよいし液状であってもよい。また、本発明の腸内機能改善剤は、他の腸内機能改善剤、例えば、フラクトオリゴ糖やイヌリンなどと併用して用いても何ら問題は生じない。他の腸内機能改善剤と併用した場合には、より優れた腸内機能改善効果を期待することができる。また、本発明の腸内機能改善剤を口腔適用対象物に配合する際や単独で製剤化する際は、必要に応じて、抗酸化剤、着色剤、香料、矯味剤、界面活性剤、溶解補助剤、保存剤、甘味料、酸味料などを適宜組み合わせて用いてもよい。抗酸化剤としては、例えば、クエン酸トコフェロール（三栄源・エイ・エフ・アイ社製）などが挙げられる。界面活性剤としては、例えば、ショ糖脂肪酸エステル、ポリグリセリン脂肪酸エステル、ソルビタン脂肪酸エステル、ポリグリセリン縮合リシノレイン酸エステル、レシチン、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油、ポリエチレングリコール脂肪酸エステル、グリセリン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレン系非界面活性剤などが挙げられる。甘味料としては、砂糖、ブドウ糖、果糖、異性化液糖、グリチルリチン、ステビア、アスパラテーム、フラクトオリゴ糖、ガラクトオリゴ糖、その他のオリゴ糖としてシクロデキストリンが挙げられる。シクロデキストリンとしては、α−、β−、γ−シクロデキストリンおよび分岐α−、β−、γ−シクロデキストリンが使用できる。また、人工甘味料も使用できる。酸味料としては、天然成分から抽出した果汁類のほか、クエン酸、酒石酸、リンゴ酸、乳酸、フマル酸、リン酸が挙げられる。

以下に、製造例、試験例および処方例を挙げ、本発明をさらに詳しく説明する。ただし、本発明はこれに限定されるものではない。

製造例１：ＣＦ混合物の製造方法
イヌリン１％、イーストエキストラクト０．２％、硝酸ナトリウム０．５％、硫酸マグネシウム０．０５％、塩化カリウム０．０５％、リン酸１カリウム０．０５％、塩化第二鉄０．００１％を含んだ培地１５０ｍｌをｐＨ７．５に調整して、１２０℃で１５分間蒸気滅菌した。この滅菌した培地にパエニバチルス ポリミキサＭＧ−ＣＦ６（FERM P-19158）を１白金耳接種し、２００ｒｐｍ、３５℃で７２時間振とう培養した。培養終了後遠心分離により菌体を除去し、培養上清液を得た。得られた培養上清１００ｍｌを、一夜２０ｍＭリン酸緩衝液（pH7.0）を用いて透析し、得られた透析液を粗酵素液とした。これに最終濃度が１０％となるようにイヌリンを加え、４０℃で６０時間反応させた。得られた反応液を加熱し酵素を失活させた後、ｐＨを４．５に調整しインベルターゼ（生化学工業社製）を添加した。この反応溶液を５０℃で２４時間インキュベーション後、酵素を加熱失活させ活性炭カラムクロマトグラフィーに供した。カラムを蒸留水で洗浄後、３０％エタノール水溶液で溶出させた。溶出液を減圧濃縮後、凍結乾燥してＣＦ混合物４ｇ（組成比はCF6：61.7%、CF7：30.7%、その他：7.6%）を得た。

製造例２：ＣＦ精製物
製造例１で得られたＣＦ混合物４ｇを、少量の７０％エタノール水溶液に溶解した。この溶液を同濃度のエタノール水溶液で平衡化したＱＡＥ−トーヨーパールカラムに供し、ＣＦ６とＣＦ７を分離した。これらを凍結乾燥して、２ｇのＣＦ６と０．９ｇのＣＦ７それぞれの純品の粉末を得た。

試験例１：ＣＦによる腸内機能改善作用試験
製造例１で得られたＣＦ混合物を使用し、腸内の各短鎖脂肪酸濃度および糞重量を調べた。
（試験方法）
３週令の雄性ＳＤ系ラットを５日間固形飼料で予備飼育した後、平均体重が均等になるように群分けし、各々の群に、表１に示す組成の飼料を１４日間摂取させた。試験群には製造例１に記載のＣＦ混合物を添加し、コントロール群にはＣＦ混合物の代わりにシュクロースを、そして比較群１にはフラクトオリゴ糖を、比較群２にはイヌリンを添加した。この間、飼料および水は自由に摂取させた。そして１４日間の飼育終了後、ラットを屠殺して盲腸を摘出し、盲腸内容物を採取して各短鎖脂肪酸濃度をガスクロマトグラフ（Agilent 6890 Series GC System；6890A）にて分析した。ＧＣの分析条件を表２に示す。また盲腸中の短鎖脂肪酸の分析結果について、盲腸内容物中の酢酸、プロピオン酸、酪酸および総短鎖脂肪酸の濃度を表３に示す。ここでいう総短鎖脂肪酸とは、酢酸、プロピオン酸、イソ酪酸、酪酸、イソ吉草酸および吉草酸を総計したものであり、吉草酸は測定量が微量であったため本試験結果から除外した。また、各々の群について、全個体の屠殺前５日間の糞を採取して全糞重量（ｗｅｔ重量）を測定し、これをｎ数で割ってｎ＝１の５日あたりの糞重量を算出し、この糞重量を日数で割って、ｎ＝１の１日あたりの糞重量を算出した。算出結果を表４に示す。なお、飼育室温は２３℃で明期８：００〜２０：００、暗期２０：００〜８：００とした。

（試験結果）
表３から明らかなように、ＣＦを摂取させた試験群では、盲腸内容物中の酢酸、プロピオン酸、酪酸および総短鎖脂肪酸のすべての値がコントロール群に比べ有意に上昇した。ＣＦ以外の難消化性糖質であるフラクトオリゴ糖およびイヌリンを摂取させた比較群では、盲腸内容物中の酢酸、プロピオン酸、酪酸および総短鎖脂肪酸のすべての値がコントロール群に比べ上昇傾向は示したが、有意な差は認められなかった。これより本発明において用いられるＣＦは、腸内の短鎖脂肪酸の濃度を顕著に上昇させ、十分な腸内機能改善作用を有することが認められた。
また、短鎖脂肪酸だけでなく糞重量についても測定を行ったが（上記の表４を参照）、ＣＦを摂取させた試験群では、糞重量がコントロール群に比べ有意に増加した。ＣＦ以外の難消化性糖質であるフラクトオリゴ糖およびイヌリンを摂取させた比較群では、糞重量がコントロール群に比べ若干増加したが、有意差は認められなかった。短鎖脂肪酸が腸内で増えると、腸内内容物の消化通過時間が短縮され（Oufir, L.E., Flourie, B., Des Varannes, S.B., Barry, J.L., Cloarec, D., Bornet, F., Galmiche, J.P., Gut, vol.38, p.870, 1996）、この消化通過時間の短縮が排便量の増加につながることが報告されている（Burkitt, D., Walker, A.R.P., Painter, N.S., J. Am. Med. Assoc., vol.229, p.1069, 1974）。このことからも明らかなように、本発明において用いられるＣＦは、その一部が腸内細菌により資化されて短鎖脂肪酸を産生することで、排便を顕著に促進させる作用を有し、便秘改善剤として期待することができることがわかった。
なお、製造例２で得られたＣＦ６およびＣＦ７の各々についても、上記と同様の効果を確認した。

以下に、本発明における腸内機能改善剤を口腔適用対象物へ配合させた処方例を示す。本発明の腸内機能改善剤を含有する飲食品は、飲食品本来の味・香りを損なうことなく、美味しく摂取できるものであった。

処方例１：腸内機能改善剤を含有する緑茶飲料
水９００ｍｌを６０℃まで加熱し、これに緑茶葉３０ｇを加え６分間抽出した。これを３０メッシュのストレーナーで茶殻を除去し、３０℃以下まで冷却した後、濾紙濾過（工業用濾紙No.26：ADVANTEC社製、捕集粒子径=3μm）により清澄化を行い、抽出液７６０ｍｌを得た。この緑茶抽出液を飲用濃度（カテキン濃度60mg%）となるようにイオン交換水で稀釈し、Ｌ−アスコルビン酸を０．０３重量％となるように添加した後、重曹でｐＨ６．１〜６．３の範囲に調整し、調合液とした。この調合液に製造例１で得られたＣＦ混合物を５重量％添加してよく攪拌した。これらを８０℃以上の温度条件下でホットパック充填を行い、その後、レトルト殺菌にて、１２１℃、１０分間（F₀＝10以上）の殺菌を行った。これらを室温に冷却後、ＣＦを含有する緑茶飲料を得た。

処方例２：腸内機能改善剤を含有する烏龍茶飲料
水９００ｍｌを８０℃まで加熱し、これに烏龍茶（ウーロンG）３０ｇを加え６分間抽出した。処方例１と同様にして茶殻の除去、冷却、清澄化を行い、烏龍茶抽出液８１０ｍｌを得た。この烏龍茶抽出液を飲用濃度（カテキン濃度50mg%）となるようにイオン交換水で稀釈し、Ｌ−アスコルビン酸を０．０３重量％となるように添加した後、重曹でｐＨ６．１〜６．３の範囲に調整し、調合液とした。この調合液に製造例２で得られたＣＦ精製物であるＣＦ７を５重量％添加してよく攪拌した。これらを８０℃以上の温度条件下でホットパック充填を行い、その後、レトルト殺菌にて、１２１℃、１０分間（F₀＝10以上）の殺菌を行った。これらを室温に冷却後、ＣＦを含有する烏龍茶飲料を得た。

処方例３：腸内機能改善剤を含有する紅茶飲料
処方例２における烏龍茶（ウーロンG）を紅茶（ヌワヤレモンティー）に変更した以外は処方例２と同様の方法で調製し、ＣＦを含有する紅茶飲料を得た。

処方例４：腸内機能改善剤を含有する麦茶飲料
水８００ｍｌを９０℃まで加熱し、これに麦茶原料大麦４０ｇを加え３０分間抽出した。これを３０メッシュのストレーナーで茶殻を除去し、３０℃以下まで冷却した後、濾紙濾過（工業用濾紙No.2：ADVANTEC社製）により清澄化を行い、抽出液７２０ｍｌを得た。この麦茶抽出液を飲用濃度（Brix 0.4゜）となるようにイオン交換水で稀釈し、Ｌ−アスコルビン酸を０．０３重量％となるように添加した後、重曹でｐＨ６．０の範囲に調整し、調合液とした。この調合液に製造例１で得られたＣＦ混合物を５重量％添加してよく攪拌した。これらを８０℃以上の温度条件下でホットパック充填を行い、その後、レトルト殺菌にて、１２１℃、２０分間の殺菌を行った。これらを室温に冷却後、ＣＦを含有する麦茶飲料を得た。

処方例５：腸内機能改善剤を含有する混合茶飲料
水９００ｍｌを９０℃まで加熱し、これに混合茶（配合比率：烏龍茶65％、紅茶20％、ジャスミン5％、陳皮4％、ハイビスカス4％およびバナバ2％）３０ｇを加え１０分間抽出した。これを３０メッシュのストレーナーで茶殻を除去し、３０℃以下まで冷却した後、濾紙濾過（工業用濾紙No.2：ADVANTEC社製）により清澄化を行い、抽出液８２０ｍｌを得た。この混合茶抽出液を飲用濃度（Brix 0.2゜）となるようにイオン交換水で稀釈し、Ｌ−アスコルビン酸を０．０３重量％となるように添加した後、重曹でｐＨ６．０の範囲に調整し、調合液とした。この調合液に製造例２で得られたＣＦ精製物であるＣＦ７を５重量％添加してよく攪拌した。これらを８０℃以上の温度条件下でホットパック充填を行い、その後、レトルト殺菌にて、１２１℃、２０分間の殺菌を行った。これらを室温に冷却後、ＣＦを含有する混合茶飲料を得た。

処方例６：腸内機能改善剤を含有するオレンジ５０％果汁飲料
６倍濃縮オレンジ果汁 ８４ｇ
果糖ブドウ糖液糖 ９．７ｇ
クエン酸 ０．０６ｇ
Ｌ−アスコルビン酸 ０．０２２ｇ
製造例１で得られたＣＦ混合物 １０ｇ
香料 適量
上記記載の成分をイオン交換水に溶解し、全量を１０００ｍｌとした。これを容器に充填し、６５℃で１０分間加熱殺菌して、製造例１で得られたＣＦ混合物を含有するオレンジ５０％果汁飲料を得た。

処方例７：腸内機能改善剤を含有するオレンジ１００％果汁飲料
１／６濃縮オレンジ果汁 １６８ｇ
製造例２で得られたＣＦ７ １０ｇ
香料 適量
上記記載の成分をイオン交換水に溶解し、全量を１０００ｍｌとした。これを容器に充填し、６５℃で１０分間加熱殺菌して、製造例２で得られたＣＦ精製物であるＣＦ７を含有するオレンジ１００％果汁飲料を得た。

処方例８：腸内機能改善剤を含有するモモ５０％果汁飲料
１／４濃縮モモ果汁 １３１ｇ
果糖ブドウ糖液糖 ９．７ｇ
クエン酸 ０．０６ｇ
Ｌ−アスコルビン酸 ０．０２２ｇ
製造例２で得られたＣＦ６ １０ｇ
香料 適量
上記記載の成分をイオン交換水に溶解し、全量を１０００ｍｌとした。これを容器に充填し、６５℃で１０分間加熱殺菌して、製造例２で得られたＣＦ精製物であるＣＦ６を含有するモモ５０％果汁飲料を得た。

処方例９：腸内機能改善剤を含有するグレープフルーツジュース
市販のグレープフルーツジュース（サンキスト グレープフルーツジュース濃縮還元100%：サンキスト社の商品名）に本発明の製造例１に記載のＣＦ混合物を３重量％添加し、ＣＦを含有するグレープフルーツジュースを調製した。

処方例１０：腸内機能改善剤を含有する果肉入りグレープフルーツジュース
市販の果肉入りグレープフルーツジュース（ゴクリ：サントリー社の商品名）に本発明の製造例２に記載のＣＦ精製物であるＣＦ７を３重量％添加し、ＣＦを含有する果肉入りグレープフルーツジュースを調製した。

処方例１１：腸内機能改善剤を含有する野菜ジュース
市販の野菜ジュース（カゴメ野菜ジュース：カゴメ社の商品名）に本発明の製造例２に記載のＣＦ精製物であるＣＦ６を５重量％添加し、ＣＦを含有する野菜ジュースを調製した。

処方例１２：腸内機能改善剤を含有するコーヒー飲料
市販のコーヒー飲料（ブラックボトル無糖：ダイドードリンコ社の商品名）に本発明の製造例１で得られたＣＦ混合物を１重量％添加し、ＣＦを含有するコーヒー飲料を調製した。

処方例１３：腸内機能改善剤を含有するスポーツ飲料
製造例１で得られたＣＦ混合物 ２０ｇ
ビタミンＢ₁塩酸塩 ０．４５ｍｇ
ビタミンＢ₂ ０．２ｍｇ
ビタミンＣ １０ｍｇ
ナイアシン ０．８ｍｇ
パントテン酸Ｃａ ０．２２ｍｇ
クエン酸鉄アンモニウム １２．５７ｍｇ
クエン酸 １００ｍｇ
果糖 ２．５ｇ
上記記載の成分にイオン交換水を加え全量を２００ｍｌとし、製造例１で得られたＣＦ混合物を含有するスポーツ飲料を調製した。

処方例１４：腸内機能改善剤を含有するコーラ
グラニュー糖 ５ｇ
コーラベース ０．３ｇ
クエン酸 ０．０５ｇ
製造例２で得られたＣＦ７ ５ｇ
上記記載の成分に炭酸水を加え全量を１００ｍｌとし、製造例２で得られたＣＦ精製物であるＣＦ７を含有するコーラを調製した。

処方例１５：腸内機能改善剤を含有するミルクシェーク
バター １．７ｇ
脱脂粉乳 ５．５ｇ
製造例２で得られたＣＦ６ １０ｇ
砂糖 ５ｇ
ソルビトール ４ｇ
乳化安定剤 ０．７ｇ
上記記載の成分にイオン交換水を加え全量を１００ｍｌとし、８０℃まで加温して溶解し、ホモジナイザーで乳脂肪を均質化した後翌日まで５℃でエージングした。次にフリージング後に−４０℃まで急冷した後よくミキシングして、製造例２で得られたＣＦ精製物であるＣＦ６を含有するミルクシェークを調製した。

処方例１６：腸内機能改善剤を含有するドリンクヨーグルト
醸酵脱脂乳（脱脂乳を発酵させて粉砕したもの） ４０ｇ
砂糖 １３ｇ
安定剤 ０．３５ｇ
香料 ０．０５ｇ
製造例１で得られたＣＦ混合物 １０ｇ
上記記載の成分にイオン交換水を加え、全量を１００ｇとし、混合溶解した。これをホモジナイザーで均質化して、製造例１で得られたＣＦ混合物を含有するドリンクヨーグルトを調製した。

処方例１７：腸内機能改善剤を含有する赤ワイン
市販の赤ワイン（デリカメゾン赤・ライトタイプ：サントリー社の商品名）に本発明の製造例２で得られたＣＦ精製物であるＣＦ７を１重量％添加し、ＣＦを含有する赤ワインを調製した。

処方例１８：腸内機能改善剤を含有するビール
市販のビール（キリンラガー：キリンビール社の商品名）に本発明の製造例２で得られたＣＦ精製物であるＣＦ６を１重量％添加し、ＣＦを含有するビールを調製した。

処方例１９：腸内機能改善剤を含有する豆乳飲料
大豆粉水溶液 ５００ｇ
砂糖 ９０ｇ
５倍濃縮モモ果汁 ２０ｇ
クエン酸 ３ｇ
ペクチン ３ｇ
ミルクフレーバー ０．５ｇ
ピーチフレーバー １ｇ
製造例１で得られたＣＦ混合物 １０ｇ
上記記載の成分を混合し、イオン交換水を加え、全量を１０００ｍｌとした。この混合液を９２℃で１〜３秒間殺菌後、８７℃で容器に充填することによって、製造例１で得られたＣＦ混合物を含有する豆乳飲料を調製した。

処方例２０：腸内機能改善剤を含有するスープ
コーンスターチ ３０ｇ
製造例２で得られたＣＦ７ ５ｇ
砂糖 ５ｇ
食塩 ５ｇ
脱脂粉乳 ３０ｇ
肉エキスパウダー １ｇ
ＨＡＰパウダー ４ｇ
グルタミン酸ソーダ ５ｇ
ホワイトペッパー ０．２ｇ
セロリパウダー ０．０１ｇ
オニオンエキスパウダー ５ｇ
マーガリン ５ｇ
乾燥ニンジン ５ｇ
乾燥パセリ ０．３ｇ
上記記載の成分をインスタントスープ処方で粉末混合し、この混合物２１．５ｇに２００ｍｌの水を加え、よく混ぜながら３〜５分加熱し、製造例２で得られたＣＦ精製物であるＣＦ７を含有する粉末ポタージュスープを調製した。

処方例２１：腸内機能改善剤を含有するビーフシチュー
牛肉 １１０ｇ
ジャガイモ（６切れ） ６０ｇ
ニンジン（６切れ） ５０ｇ
ドミグラスソース ２１５ｇ
製造例２で得られたＣＦ６ ５ｇ
４号缶に上記記載の材料を添加し、よく混合した。これを１１５℃で９０分間レトルト殺菌し、製造例２で得られたＣＦ精製物であるＣＦ６を含有するビーフシチューを調製した。

処方例２２：腸内機能改善剤を含有するレトルトカレー
バラ肉 １２．４ｇ
塩 ０．５ｇ
バター ５．２ｇ
ジャガイモ ８．４ｇ
タマネギ １２．４ｇ
ニンジン ２．５ｇ
小麦粉 ３．６ｇ
カレー粉 ０．５ｇ
香辛料 ０．５ｇ
製造例１で得られたＣＦ混合物 ５ｇ
バラ肉をと野菜類を別々にフライパンで炒めて鍋にうつした。粉類を炒めてブラウンルーを作り、全体を鍋で煮詰めて、製造例１で得られたＣＦ混合物を含有するレトルトカレーを調製した。

処方例２３：腸内機能改善剤を含有するノンオイルドレッシング
食酢 ３０．８ｇ
砂糖 ４ｇ
食塩 ０．５ｇ
薄口醤油 ８．４ｇ
だし汁 ２６．３ｇ
粉飴 ２０ｇ
製造例２で得られたＣＦ７ １０ｇ
液体原料を混合後、粉末原料を溶解させて、製造例２で得られたＣＦ精製物であるＣＦ７を含有するノンオイルドレッシングを調製した。

処方例２４：腸内機能改善剤を含有する麺つゆ（２倍濃縮タイプ）
醤油 ７０ｍｌ
砂糖 ２０ｇ
みりん ５ｍｌ
鰹節煮出し液 ９ｇ
核酸系調味料 ３ｇ
食塩 ２ｇ
製造例２で得られたＣＦ６ １０ｇ
カラメル 適量
上記記載の成分をイオン交換水に溶解し、全量を１０００ｍｌとし、製造例２で得られたＣＦ精製物であるＣＦ６を含有する２倍濃縮の麺つゆを調製した。

処方例２５：腸内機能改善剤を含有する焼肉のたれ
醤油 ９００ｍｌ
味噌 ５００ｇ
砂糖 ３５０ｇ
玉ねぎペースト １００ｇ
リンゴペースト ２００ｇ
ごま油 ６０ｇ
にんにくペースト ２５０ｇ
白ごまペースト ２０ｇ
製造例１で得られたＣＦ混合物 ５０ｇ
上記記載の成分をイオン交換水に溶解し、全量を２０００ｍｌとし、製造例１で得られたＣＦ混合物を含有する焼肉のたれを調製した。

処方例２６：腸内機能改善剤を含有するマヨネーズ
卵黄 卵１個分
酢 小さじ１杯
塩 適量
サラダ油 １２０ｍｌ
砂糖 適量
製造例２で得られたＣＦ７ ５ｇ
上記記載の成分を常法に従ってゆっくりと加えながら混合し、製造例２で得られたＣＦ精製物であるＣＦ７を含有するマヨネーズを調製した。

処方例２７：腸内機能改善剤を含有するハードヨーグルト
脱脂乳 ９０．９ｇ
砂糖 ５ｇ
製造例２で得られたＣＦ６ ５ｇ
ステビオサイド ０．０５ｇ
香料 少量
硬化剤 少量
脱脂乳に硬化剤を添加後、スターターを３％接種して酸度が０．７％になったところで冷蔵した。他の原料を攪拌混合し、再度冷蔵して、製造例２で得られたＣＦ精製物であるＣＦ６を含有するハードヨーグルトを調製した。

処方例２８：腸内機能改善剤を含有するアイスクリーム
バター ７．５ｇ
脱脂粉乳 ５ｇ
砂糖 １０ｇ
製造例１で得られたＣＦ混合物 ５ｇ
乳化安定剤 ０．７ｇ
粉あめ（DE 8） ７ｇ
上記記載の成分にイオン交換水を加え、全量を１００ｇとし、よく混合した。これを７０℃まで加熱してホモミキサーで攪拌後、ホモジナイザーで均質化した。冷蔵庫で１日エージングし、フリージング後に−４０℃に急冷して、製造例１で得られたＣＦ混合物を含有するアイスクリームを調製した。

処方例２９：腸内機能改善剤を含有するコーヒーホワイトナー（粉末タイプ）
大豆硬化油 ５０ｇ
水飴 ２５ｇ
乳化剤 ０．８４ｇ
クリームフレーバー ０．１６ｇ
砂糖 １４ｇ
製造例２で得られたＣＦ７ １０ｇ
乾物に対して６６．６％の湯に水溶性原料を溶解し、油に乳化剤を溶解した。両者を６０℃で乳化、均質化後にスプレードライして、製造例２で得られたＣＦ精製物であるＣＦ７を含有するコーヒーホワイトナー（粉末タイプ）を調製した。

処方例３０：腸内機能改善剤を含有する漬物用調味液
昆布エキス ６ｇ
鰹節エキス ４ｇ
食塩 ４ｇ
製造例２で得られたＣＦ６ １ｇ
上記成分をイオン交換水に溶解し、全量を１００ｇとし、製造例２で得られたＣＦ精製物であるＣＦ６を含有する漬物用調味液を調製した。

処方例３１：腸内機能改善剤を含有するゼリー
１／５濃縮ブドウ果汁 １０ｇ
製造例１で得られたＣＦ混合物 ２０ｇ
砂糖 １５ｇ
ブドウ糖 ２０ｇ
水飴 １２ｇ
上記成分をイオン交換水で加温しながら完全に溶解し、全量を１００ｇとした。これをカップ容器に注ぎ、ヒートシールで蓋をして冷却し、製造例１で得られたＣＦ混合物を含有するゼリーを調製した。

処方例３２：腸内機能改善剤を含有するキャンディー
砂糖 ５０ｇ
水飴 １００ｇ
クエン酸 １ｇ
香料 ０．４ｇ
着色料 ０．１ｇ
製造例２で得られたＣＦ７ １０ｇ
上記記載の成分をキャンディー処方により常法で、製造例２で得られたＣＦ精製物であるＣＦ７を含有するキャンディー３０個を調製した。

処方例３３：腸内機能改善剤を含有するチューイングガム
酢酸ビニール樹脂 ２０ｇ
可塑剤 ３ｇ
ポリイソブチレン ３ｇ
マイクロクリスタルワックス ２ｇ
炭酸カルシウム ２ｇ
砂糖 ４０ｇ
ブドウ糖 ２０ｇ
製造例２で得られたＣＦ６ １０ｇ
アスパルテーム ０．３ｇ
香料 １ｇ
糖質と香料以外の原料を鍋にとり、加熱溶解してよく混合した。５０℃に冷却して糖質を添加混合し、４０℃で香料を添加して成型後、放冷して、製造例２で得られたＣＦ精製物であるＣＦ６を含有するガムを調製した。

処方例３４：腸内機能改善剤を含有するスイートチョコレート
ビターチョコ ３３．２ｇ
砂糖 ５０ｇ
製造例１で得られたＣＦ混合物 １０ｇ
アスパルテーム ０．３１ｇ
カカオバター １１．１ｇ
上記記載の成分を４０℃でよく混合し、さらに、ライカイ機で長時間練り上げて粒子を微細にした。成型後冷却して、製造例１で得られたＣＦ混合物を含有するスイートチョコレートを調整した。

処方例３５：腸内機能改善剤を含有するジャム
オレンジ果皮 ２５０ｇ
砂糖 １００ｇ
クエン酸 ０．５ｇ
製造例２で得られたＣＦ７ ５０ｇ
上記記載の成分を常法により煮詰め、製造例２で得られたＣＦ精製物であるＣＦ７を含有するジャムを調製した。

処方例３６：腸内機能改善剤を含有するクッキー
薄力粉 １００ｇ
澱粉 ７４ｇ
水 １４ｇ
製造例２で得られたＣＦ６ １５ｇ
ベーキングパウダー 小さじ２
塩 小さじ２
卵 １個
バター ８０ｇ
牛乳 大さじ２
上記記載のクッキー処方により常法で、製造例２で得られたＣＦ精製物であるＣＦ６を含有するクッキー３０個を調製した。

処方例３７：腸内機能改善剤を含有するカスタードクリーム
上白糖 １０ｇ
ブドウ糖 ５ｇ
水飴 ６．２ｇ
製造例１で得られたＣＦ混合物 １０ｇ
小麦粉 ３．８ｇ
加工澱粉 ７ｇ
脱脂粉乳 １．３ｇ
マーガリン ７．９ｇ
卵黄（粉） ０．２ｇ
イオン交換水 ４１．９ｇ
少量の水に小麦粉、加工澱粉、卵黄（粉）を混合したものに、残りの水を８０℃にして他の原料を溶解したものを、泡立て器を使用しながら添加して強火で煮て、製造例１で得られたＣＦ混合物を含有するカスタードクリームを調製した。

処方例３８：腸内機能改善剤を含有する練りようかん
生あん ３６．８ｇ
かんてん ０．８ｇ
水 ７．２ｇ
砂糖 ４０ｇ
製造例２で得られたＣＦ７ １０ｇ
水で膨張させたかんてんに、水、砂糖、茶多糖類を加え、加熱沸騰して溶解させた。これをうらごしした後、再沸騰させ、生あんを添加し、全量が１００ｇになるまで煮詰めた。成型、冷却し、製造例２で得られたＣＦ精製物であるＣＦ７を含有する練りようかんを調製した。

処方例３９：腸内機能改善剤を含有するスパゲッティー
小麦粉 １００ｇ
水 ２５ｇ
製造例１で得られたＣＦ混合物 ５ｇ
粉類を混合し、これに水を少量ずつ加えながら均一に練りこみ、製造例１で得られたＣＦ混合物を含有するスパゲッティーを調製した。

処方例４０：腸内機能改善剤を含有する中華麺
超強力粉 ７０ｇ
馬鈴薯澱粉 ３０ｇ
食塩 １ｇ
かんすい ２ｇ
水 ４８ｇ
製造例２で得られたＣＦ７ １０ｇ
上記記載の原料を混合し、常法にしたがって混捏、成形、複合、熟成、圧延して麺帯を形成して麺線に切り出し、製造例２で得られたＣＦ精製物であるＣＦ７を含有する中華麺を調製した。

処方例４１：腸内機能改善剤を含有する即席中華麺
市販中華麺用粉 ６０ｇ
超強力粉 ４０ｇ
馬鈴薯澱粉 １２ｇ
食塩 ２ｇ
市販かんすい ０．３ｇ
水 ３５ｇ
製造例２で得られたＣＦ６ １０ｇ
上記記載の原料をミキサーに入れミキシングし、荒延、圧延、切り出しを行い、麺線を得た。この麺線を１００℃で蒸煮し、１５０℃の油で揚げ、製造例２で得られたＣＦ精製物であるＣＦ６を含有する即席中華麺を調製した。

処方例４２：腸内機能改善剤を含有する冷凍うどん
小麦粉 １００ｇ
食塩 ３ｇ
水 ３０ｇ
製造例１で得られたＣＦ混合物 １０ｇ
上記記載の成分をミキサーに入れミキシングし、熟成、圧延、切り出しを行い、麺線を得た。この麺線を沸騰水中に入れて約５分間茹で上げ、冷水で１０℃まで冷却した。１玉分の麺線を取り出し、水切りした後、容器に厚さが均一となるようにならしながら入れて、−３０℃にて急速冷凍し、製造例１で得られたＣＦ混合物を含有する冷凍うどんを調製した。

処方例４３：腸内機能改善剤を含有する春巻き用の皮
小麦澱粉 ９９ｇ
小麦粉 １ｇ
乳化剤 ３ｇ
サラダ油 ２ｇ
酒 ２ｇ
食塩 ２ｇ
水 ４３ｇ
製造例２で得られたＣＦ７ ２ｇ
上記記載の成分を攪拌混練してペースト状の生地を作り、回転ドラムに１ｍｍの厚さに塗り付けて焼成して、できた生地を切断した１２ｃｍ×１２ｃｍの正方形に成型し、製造例２で得られたＣＦ精製物であるＣＦ７を含有する春巻きの皮を調製した。

処方例４４：腸内機能改善剤を含有するビーフ＆ポークソーセージ
牛肉 ２２ｇ
水 １７．３ｇ
食塩 １．７ｇ
塩漬け剤 ０．０１ｇ
砂糖 １ｇ
グルタミン酸ソーダ ０．５ｇ
スパイス ０．５ｇ
馬糊 ３ｇ
豚肩肉 ５４ｇ
製造例２で得られたＣＦ６ １０ｇ
上記記載の成分を生のまま粉砕して混合し、フィルムに充填した。塩漬として５℃で１２時間放置した後、７５℃で９０分間ボイルしてから冷蔵し、製造例２で得られたＣＦ精製物であるＣＦ６を含有するビーフ＆ポークソーセージを調製した。

処方例４５：腸内機能改善剤を含有するかまぼこ
スリミ ６０ｇ
塩 １．８ｇ
氷 ３０．４ｇ
澱粉 ６ｇ
調味料 １．８ｇ
製造例１で得られたＣＦ混合物 ６ｇ
スリミと塩と少量の氷を混合し、サイレント・カッターで破断混合を５分間行った後、残りの氷と原料を追加して続けて１０分間混合した。１５℃で粘りが出たところで終了し、型とりをして１６０℃の油で４分間フライして、製造例１で得られたＣＦ混合物を含有するかまぼこを調製した。

処方例４６：腸内機能改善剤を含有する内服液剤
製造例２で得られたＣＦ７ １０ｇ
ニンジン乾燥エキス ２１４ｍｇ
イカリソウ乾燥エキス ５０ｍｇ
ウルソデスオキシコール酸 ２５ｍｇ
Ｄ−ソルビトール ５０ｇ
白糖 ２５ｇ
ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油 ３ｇ
プロピレングリコール ５ｍｌ
安息香酸ナトリウム ６００ｍｇ
パラオキシ安息香酸ブチル １０ｍｇ
クエン酸塩緩衝液 適量
上記成分にイオン交換水を加え全量を３００ｍｌとし、製造例２で得られたＣＦ精製物であるＣＦ７を含有する内服液剤を調製した。

本発明のシクロフラクタン（ＣＦ）は、前記のとおり、各種飲食品などに添加することができる。

Claims (2)

1. シクロフラクタンを有効成分とする腸内機能改善剤。
2. シクロフラクタンが環状イヌロヘキサオースおよび環状イヌロヘプタオースから選ばれる少なくとも１つである請求項１記載の腸内機能改善剤。