JP4118877B2 - 分裂停止後のドーパミン産生ニューロン前駆細胞に特異的に発現している遺伝子 - Google Patents
分裂停止後のドーパミン産生ニューロン前駆細胞に特異的に発現している遺伝子 Download PDFInfo
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Description
[1] 分裂停止直後のドーパミン産生ニューロン前駆細胞に特異的に発現する65B13ポリペプチド、またはその抗原性断片をコードする以下の(1)〜(5)のヌクレオチド配列から選択される配列を含むポリヌクレオチド。
(1)配列番号:1の177から2280番目の塩基、若しくは配列番号:2の127番目から2079番目の塩基を含む核酸配列、または該核酸配列に相補的な配列
(2)配列番号:3若しくは4記載のアミノ酸配列をコードする核酸配列、または該核酸配列に相補的な配列
(3)配列番号:3若しくは4記載のアミノ酸配列においてシグナル配列部分を欠く配列をコードする核酸配列、または該核酸配列に相補的な配列
(4)配列番号:3または4記載のアミノ酸配列において1若しくは複数個のアミノ酸が欠失、挿入、置換、または付加されたアミノ酸配列をコードする核酸配列、または該核酸配列に相補的な配列
(5)上記(1)の配列に対してストリンジェントな条件下でハイブリダイズする核酸配列、
[2] [1]記載のポリヌクレオチドを含むベクター、
[3] [1]記載のポリヌクレオチドまたは[2]記載のベクターを含む宿主細胞、
[4] [1]記載のポリヌクレオチドによりコードされるポリペプチド、
[5] [4]記載のポリペプチドの断片であり、少なくとも8アミノ酸残基を有する
ポリペプチド断片、
[6] [4]記載のポリペプチド、または[5]記載のポリペプチド断片に対する抗体、
[7] [5]記載のポリペプチド断片をコードするヌクレオチド鎖、
[8] ドーパミン産生ニューロンを選択する方法であり、[6]記載の抗体とドーパミン産生ニューロン前駆細胞を含むと考えられる細胞試料とを接触させる工程を含む方法、
[9] ドーパミン産生ニューロンを選択する方法であり、[4]記載のポリペプチドの少なくとも細胞外領域部分を含むペプチドとドーパミン産生ニューロン前駆細胞を含むと考えられる細胞試料とを接触させる工程を含む方法、
[10] [8]または[9]記載の方法により選択された分裂停止直後のドーパミン産生ニューロン前駆細胞、
[11] ドーパミン産生ニューロン前駆細胞特異的遺伝子及び前駆細胞からドーパミン産生ニューロンへの各成熟段階に特異的な遺伝子の単離方法であって、[10]記載の前駆細胞または該前駆細胞から分化、誘導若しくは増殖された細胞を用い、該細胞において特異的に発現している遺伝子を検出、単離する工程を含む方法、並びに
[12] 成熟を指標としたスクリーニング方法であり、[10]記載の前駆細胞に対し、被験物質を接触させる工程、及び接触による前駆細胞の分化または増殖を検出する工程を含む方法、
に関する。
本発明のポリヌクレオチドは、ドーパミン産生ニューロン前駆細胞を選択するのに用いることができる抗体を作成する際の抗原を遺伝子工学的手法により得る際に使用することができる。本発明のポリヌクレオチドは、分裂停止直後のドーパミン産生ニューロン前駆細胞に特異的に発現する65B13ポリペプチドをコードする、配列番号:1(図1及び2)の177から2280番目の塩基、若しくは配列番号:2(図3及び4)の127番目から2079番目までの塩基を含む核酸配列、または該核酸配列に相補的な配列を含むものである。
さらに、本発明により、本発明のポリヌクレオチドに相補的な、少なくとも15塩基からなるヌクレオチド鎖が提供される。ここで「相補的な配列」とは、ヌクレオチド配列中の少なくとも15個の連続した塩基が鋳型に対して完全に対になっている場合のみならず、そのうちの少なくとも70%、好ましくは80%、より好ましくは90%、さらに好ましくは95%以上(例えば、97%または99%)が対になっているものも含む。対になっているとは、鋳型となるポリヌクレオチドの塩基配列中のAに対しT(RNAの場合はU)、TまたはUに対しA、Cに対しG、そしてGに対しCが対応して鎖が形成されていることを意味する。そして相同性は、上述のハイブリダイズするポリヌクレオチドの場合と同様の方法で決定することができる。
本発明により、本発明のポリヌクレオチドを含むベクターが提供される。本発明のベクターは、本発明のポリヌクレオチドを宿主細胞内に保持したり、該ポリヌクレオチドにコードされるポリペプチドを発現させたりするのに有用である。本ベクターには、プラスミド、コスミド、ウイルス、バクテリオファージ、クローニング用ベクター、発現ベクター等の種々のベクターが含まれる(Molecular Cloning, A Laboratory Manual 2nd ed., Cold Spring Harbor Press (1989); Current Protocols in Molecular Biology, John Wiley & Sons (1987))。好ましい態様においては、ベクターを導入した宿主細胞内で本発明のポリヌクレオチドが発現されるように制御配列下に結合する。ここで「制御配列」とは、宿主細胞が原核生物であればプロモーター、リボソーム結合部位、及びターミネーターを含み、真核生物の場合は、プロモーター及びターミネーターであり、場合によってトランスアクチベーター、転写因子、転写物を安定化するポリAシグナル、スプライシング及びポリアデニル化シグナル等が含まれる。このような制御配列は、それに連結されたポリヌクレオチドの発現に必要とされるすべての構成成分を含むものである。また、本発明のベクターは、好ましくは選択可能なマーカーを含む。さらに、細胞内で発現されたポリペプチドを小胞体内腔、グラム陰性菌を宿主とする場合ペリプラズム内、または細胞外へと移行させるために必要とされるシグナルペプチドを目的のポリペプチドに付加するようにして発現ベクターへ組み込むこともできる。このようなシグナルペプチドは、天然において65B13に付加している17アミノ酸残基からなる、または異種蛋白質由来のシグナルペプチドであってもよい。さらに、必要に応じリンカーの付加、開始コドン(ATG)、終止コドン(TAA、TAGまたはTGA)の挿入を行ってもよい。
本発明により、本発明のポリヌクレオチドまたはベクターを含む宿主が提供される。本発明のポリペプチドの製造には、in vitro及びin vivoの産生系が考えられる。本発明の宿主には、古細菌、細菌、真菌類、植物、昆虫、魚類、両生類、ハ虫類、鳥類、哺乳類由来の原核及び真核細胞が含まれる。本発明の宿主は、本発明のポリペプチドをコードするポリヌクレオチドを細胞内に含むものである。該ポリヌクレオチドは、宿主細胞のゲノム上の天然に存在する位置になければよく、該ポリヌクレオチド自身のプロモーター支配下にあっても、ゲノム中に組み込まれていても、染色体外の構造として保持されていても良い。
本発明の「ポリペプチド」は、本発明のポリヌクレオチドによりコードされるペプチド重合体である。配列番号:3または4記載のアミノ酸配列を有する蛋白質を好ましい例として挙げることができる。本発明のポリペプチドを構成するアミノ酸残基は天然に存在するものでも、また修飾されたものであっても良い。アミノ酸残基の修飾としては、アシル化、アセチル化、アミド化、アルギニル化、GPIアンカー形成、架橋、γ-カルボキシル化、環化、共有架橋の形成、グリコシル化、酸化、脂質または脂肪誘導体の共有結合化、シスチンの形成、ジスルフィド結合の形成、セレノイル化、脱メチル化、蛋白質の分解処理、ヌクレオチドまたはヌクレオチド誘導体の共有結合化、ヒドロキシル化、ピログルタメートの形成、フラビンの共有結合化、プレニル化、ヘム部分の共有結合化、ホスファチジルイノシトールの共有結合化、ホルミル化、ミリストイル化、メチル化、ユビキチン化、ヨウ素化、ラセミ化、ADP-リボシル化、硫酸化、リン酸化等が例示される。さらに、本発明のポリペプチドにはシグナルペプチド部分がついた前駆体、シグナルペプチド部分を欠く成熟蛋白質、及びその他のペプチド配列により修飾された融合蛋白質を含む。本発明のポリペプチドに付加するペプチド配列としては、インフルエンザ凝集素(HA)、グルタチオンSトランスフェラーゼ(GST)、サブスタンスP、多重ヒスチジンタグ(6×His、10×His等)、プロテインC断片、マルトース結合蛋白質(MBP)、免疫グロブリン定常領域、α-チューブリン断片、β-ガラクトシダーゼ、B-タグ、c-myc断片、E-タグ(モノクローナルファージ上のエピトープ)、FLAG(Hopp et al. (1988) Bio/Tehcnol. 6: 1204-10)、lckタグ、p18 HIV断片、HSV-タグ(ヒト単純ヘルペスウイルス糖蛋白質)、SV40T抗原断片、T7-タグ(T7 gene10蛋白質)、VSV-GP断片(Vesicular stomatitisウイルス糖蛋白質)等の蛋白質の精製を容易にする配列(例えば、pcDNA3.1/Myc−His(Invitrogen)のようなベクターを利用できる)、組換え技術により蛋白質を生産する際に安定性を付与する配列等を選択することができる。
in vitroでポリペプチドを製造する場合、in vitroトランスレーション(Dasso and Jackson (1989) Nucleic Acids Res. 17: 3129-44)等の方法に従って、細胞を含まない試験管内の系でポリペプチドを製造することができる。それに対して、細胞を用いてポリペプチドを製造する場合、まず、上述の中から適当な宿主細胞を選択し、目的とするDNAによる形質転換を行う。続いて形質転換された細胞を培養することにより所望のポリペプチドを得ることができる。培養は、選択した細胞に適した公知の方法により行う。例えば、動物細胞を選択した場合には、DMEM(Virology 8: 396 (1959)、MEM(Science 122: 501 (1952))、RPMI1640(J. Am. Med. Assoc. 199: 519 (1967))、199(Proc. Soc. Biol. Med. 73: 1 (1950))、IMDM等の培地を用い、必要に応じウシ胎児血清(FCS)等の血清を添加し、pH約6〜8、30〜40℃において15〜200時間前後の培養を行うことができる。その他、必要に応じ途中で培地の交換を行ったり、通気及び攪拌を行ったりすることができる。
本発明により、本発明のポリペプチドまたはポリペプチド断片に対する抗体が提供される。本発明の抗体にはポリクローナル抗体、モノクローナル抗体、キメラ抗体、一本鎖抗体(scFV)(Huston et al. (1988) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 85: 5879-83; The Pharmacology of Monoclonal Antibody, vol.113, Rosenburg and Moore ed., Springer Verlag (1994) pp.269-315)、ヒト化抗体、多特異性抗体(LeDoussal et al. (1992) Int. J. Cancer Suppl. 7: 58-62; Paulus (1985) Behring Inst. Mitt. 78: 118-32; Millstein and Cuello (1983) Nature 305: 537-9; Zimmermann (1986) Rev. Physiol. Biochem. Pharmacol. 105: 176-260; Van Dijk et al. (1989) Int. J. Cancer 43: 944-9)、並びに、Fab、Fab’、F(ab’)2、Fc、Fv等の抗体断片が含まれる。さらに、本発明の抗体は必要に応じ、PEG等により修飾されていてもよい。その他、本発明の抗体は、β-ガラクトシダーゼ、マルトース結合蛋白質、GST、緑色蛍光蛋白質(GFP)等との融合蛋白質として製造され得、二次抗体を用いずに検出できるようにしてもよい。また、ビオチン等により抗体を標識することによりアビジン、ストレプトアビジン等を用いて抗体の回収を行い得るように改変されていてもよい。
本発明により分裂停止直後のドーパミン産生ニューロン前駆細胞を選択的に均一な集団として得る方法が提供された。より詳細には、本発明の65B13ポリペプチドに対する抗体とドーパミン産生ニューロン前駆細胞を含むことが予測される細胞試料とを接触させ、抗体に結合する細胞を選択することで本発明のポリペプチドを発現している細胞、即ち、分裂停止直後のドーパミン産生ニューロン前駆細胞を獲得できる(図12から14参照)。細胞との接触前に、抗体を適当な担体に固定化して用いることも可能である。または、細胞と抗体とを接触させ、結合させた後、抗体のアフィニティーによる精製を行うことで、該抗体と結合した細胞を選択的に回収することもできる。例えば、本発明の抗体がビオチンと結合されている場合には、アビジンやストレプトアビジンを結合したプレートやカラムに対して添加することにより精製を行うことができる。
このようにして獲得された細胞は、分裂停止直後のドーパミン産生ニューロン前駆細胞であることから、従来の雑多な細胞集団または外来遺伝子を導入したドーパミン産生ニューロンと比べて、安全性、生存率、ネットワーク形成能の面でPD等の神経変性疾患の移植治療に好ましいものである。さらに、本方法により得られた本発明の細胞(群)は、分裂直後の前駆細胞であることから、in vitroにおいて培地等の条件を選択することにより適当な段階まで分化させることも可能であり、種々の神経移植治療の材料としても好ましいものである。本発明の方法により得られたニューロン前駆細胞の移植では、1×103〜1×106個、さらに好ましくは5〜6×104個の細胞を移植する。第1の方法としては、細胞の懸濁液を脳に移植する定位脳固定術(stereotaxic surgery)が挙げられる。また、ミクロ手術(microsurgery) により細胞を移植しても良い。ニューロン組織の移植方法については、Backlund等(Backlund et al. (1985) J. Neurosurg. 62: 169-73)、Lindvall等(Lindvall et al. (1987) Ann. Neurol. 22: 457-68)、Madrazo等(Madrazo et al. (1987) New Engl. J. Med. 316: 831-4)の方法を参照することができる。
本発明の抗体を用いて得られた分裂停止直後のドーパミン産生ニューロン前駆細胞は、該細胞において特異的に発現している遺伝子を単離する材料として使用することができる。さらに、本発明のドーパミン産生ニューロン前駆細胞を分化、誘導、または増殖させた細胞に特異的に発現している遺伝子を調べ、単離することもできる。また、分化/誘導/増殖させた細胞と元の前駆細胞とにおいて発現レベルに差違のある遺伝子を調べることによりドーパミン産生ニューロンの生体内における分化に必要とされる遺伝子を調べることもできる。このような遺伝子はドーパミン産生ニューロンにおける何等かの欠陥が病因となっている疾病の治療対象候補となり得るので、当該遺伝子を決定し、単離することは非常に有用である。
本発明により、本発明のドーパミン産生ニューロン前駆細胞に対し、被験物質を接触させる工程、及び接触による前駆細胞の分化または増殖を検出する工程を含む、スクリーニング方法が提供される。本方法によりスクリーニングされる化合物は、ドーパミン産生ニューロンの分化、増殖等を調節する機能を示すことから、ドーパミン産生ニューロンにおける何等かの欠陥が病因となっている疾病の治療対象候補となり得、有用と考えられる。
本発明により65B13遺伝子の発現制御領域が提供される。本発明の発現制御領域は、本発明のポリヌクレオチドを利用してゲノムDNAから公知の方法によってクローニングすることができる。例えば、S1マッピング法のような転写開始点の特定方法(細胞工学 別冊8 新細胞工学実験プロトコール, 東京大学医科学研究所制癌研究部編, 秀潤社 (1993) pp.362-374)が公知であり、本発明において利用できる。一般に、遺伝子の発現制御領域は、遺伝子の5’末端の15〜100bp、好ましくは30〜50bpをプローブDNAとして利用して、ゲノムDNAライブラリーをスクリーニングすることによりクローニングすることができる(本発明においては、配列番号:1の1〜176番目または配列番号:2の1〜126番目の塩基全部またはその1部)。このようにして得られるクローンは、10kbp以上の5’非翻訳領域を含むものであるので、次にエキソヌクレアーゼ等により処理し短縮化または断片化する。最後に、短縮された発現制御領域の候補を含む配列部分をレポーター遺伝子を利用して、その発現の有無、強さ、制御等について評価し、本発明の65B13の発現制御領域の活性維持のための最小必要単位を決定することができる。
本発明により、本発明のポリペプチドに対するリガンドが提供された。本発明のポリペプチドは膜貫通ドメインを有することから、天然において細胞膜中に埋め込まれた状態で存在すると考えられる。分裂停止直後のドーパミン産生ニューロン前駆細胞で一過性に発現されていることから、ニューロンの成熟に関与していることが考えられる。従って、本発明のポリペプチドに対するアゴニストやアンタゴニスト等の機能を示す可能性があるリガンドは、ドーパミン産生ニューロンのin vivo、ex vivo及びin vitroにおける分化を制御するのに利用できる可能性がある。本発明のポリペプチドに対するリガンドの同定においては、まず、本発明のポリペプチドと候補化合物とを接触させ、結合の有無を検定する。この際、本発明のポリペプチドを担体に固定したり、細胞膜に埋めこまれた状態に発現させて用いることもできる。候補化合物としては特に制限はなく、遺伝子ライブラリーの発現産物、海洋生物由来の天然成分、各種細胞の抽出物、公知化合物及びペプチド、植物由来の天然成分、生体組織抽出物、微生物の培養上清、並びにファージディスプレイ法等によりランダムに製造されたペプチド群(J. Mol. Biol. 222: 301-10 (1991))等が含まれる。また、結合の検出を容易にするために、候補化合物は標識しても良い。
ドーパミン産生ニューロン前駆細胞特異的な遺伝子を単離するために、E12.5マウス中脳腹側と背側のRNAを用いてサブトラクション(N-RDA)法により発現の差のある遺伝子を増幅し、得られた遺伝子の配列を解析した。
1-1. アダプターの調製
下記のオリゴヌクレオチドをアニーリングさせ、100μMに調製した。
(ad2: ad2S+ad2A、ad3: ad3S+ad3A、ad4: ad4S+ad4A、ad5: ad5S+ad5A、ad13: ad13S+ad13A)
ad2S: cagctccacaacctacatcattccgt(配列番号:11)
ad2A: acggaatgatgt(配列番号:12)
ad3S: gtccatcttctctctgagactctggt(配列番号:13)
ad3A: accagagtctca(配列番号:14)
ad4S: ctgatgggtgtcttctgtgagtgtgt(配列番号:15)
ad4A: acacactcacag(配列番号:16)
ad5S: ccagcatcgagaatcagtgtgacagt(配列番号:17)
ad5A: actgtcacactg(配列番号:18)
ad13S: gtcgatgaacttcgactgtcgatcgt(配列番号:19)
ad13A: acgatcgacagt(配列番号:20)
マウス12.5日胚(日本SLC)中脳腹側及び背側領域よりRNeasy mini kit (Qiagen)を用い全RNAを調製し、cDNA synthesis kit (TAKARA)を用いて二本鎖cDNAを合成した。制限酵素RsaIで消化したのち、ad2を付加し、ad2Sをプライマーとして72℃で5分インキュベートした後、94℃で30秒、65℃で30秒、及び72℃で2分の反応を15サイクルのPCRを行い、最後に72℃で2分インキュベートし、cDNAを増幅した。N-RDAのPCRはすべて以下の反応液組成で行った。
10×ExTaq 5μl
2.5mM dNTP 4μl
ExTaq 0.25μl
100μM primer 0.5μl
cDNA 2μl
蒸留水 38.25μl
ad2Sで増幅したcDNAをさらに、94℃で2分インキュベートした後、94℃で30秒、65℃で30秒、及び72℃で2分の反応を5サイクルのPCRを行い、最後に72℃で2分インキュベートした。Qiaquick PCR purification kit (Qiagen)を用いてcDNAを精製し、RsaI消化した。1回のサブトラクションに3μgずつ使用した。
ad2Sで増幅したcDNAをさらに94℃で2分インキュベートした後、94℃で30秒、65℃で30秒、及び72℃で2分の反応を5サイクルのPCRを行い、最後に72℃で2分インキュベートした。Qiaquick PCR purification kit (Qiagen)を用いてcDNAを精製し、RsaI消化した。60ngのRsaI消化cDNAにad3を付加した。
上記3及び4で作製したTesterおよびDriverを混合し、エタノール沈殿した後に、1xPCR buffer 1μlに溶解した。98℃5分の後、1xPCR buffer+1M NaCl 1μlを加えた。さらに98℃5分の後、68℃で16時間ハイブリダイズさせた。
ハイブリダイズさせたcDNAをad3Sをプライマーとして72℃で5分インキュベートした後、94℃で30秒、65℃で30秒、及び72℃で2分の反応を10サイクル行った。続いて、Mung Bean Nuclease (TAKARA)で消化し、Qiaquick PCR purification kitで精製した。さらに94℃で2分インキュベートした後、94℃で30秒、65℃で30秒、及び72℃で2分の反応を13サイクルのPCRを行い、最後に72℃で2分インキュベートした。
サブトラクション1回目で増幅したcDNA 8ngに2xPCR buffer 1μlを加えた。98℃5分の後、1xPCR buffer+1M NaCl 2μlを加えた。さらに98℃5分の後、68℃で16時間ハイブリダイズさせた。
ハイブリダイズさせたcDNAをRsaIで消化し、Qiaquick PCR purification kitで精製した。これをad3Sをプライマーとして94℃で2分インキュベートした後、94℃で30秒、65℃で30秒、及び72℃で2分の反応を11サイクルのPCRを行い、最後に72℃で2分インキュベートした。RsaIで消化し、ad4を付加した。
上記6でad4を付加したcDNA 20ngをTesterとして、上記3のDriverと混合し、さらに、上記5と同様の方法でサブトラクションを行った。最終的にRsaI消化したcDNAにad5を付加した。
上記7でad5を付加したcDNA 2ngをTesterとして、上記3のDriverと混合し、さらに、上記5と同様の方法でサブトラクションを行った。最終的にRsaI消化したcDNAにad13を付加した。
上記8でad13を付加したcDNA 2ngをTesterとして、上記3のDriverと混合し、以下、上記5と同様の方法でサブトラクションを行った。増幅したcDNAをpCRII (Invitrogen)にクローニングし、ABI3100シーケンスアナライザーを用いて塩基配列を解析した。
次に、N-RDA法により得られた65B13断片の配列を用い、以下の方法でRACEを行った。
マウス12.5日胚脳よりRNeasy mini kit (Qiagen)により全RNAを調製し、μMACS mRNA isdolation kit (Miltenyi Biotec)を用いてmRNAを調製した。調製したmRNAより、Superscript choice system (Invitrogen)およびpCRIIベクター(Invitrogen)を用いてcDNAライブラリーを調製した。これよりプラスミドDNAを調製し、以下のプライマーを用いてPCRを行った。
TAU2: GGCTTTACACTTTATGCTTCCGGCTC(配列番号:21)
TAU4: CAGCTATGACCATGATTACGCCAAGC(配列番号:22)
TAD3: AGGCGATTAAGTTGGGTAACGCCAGG(配列番号:23)
TAD4: CCAGTCACGACGTTGTAAAACGACGG(配列番号:24)
65B13 F1: CTTCCCGTATGCTACCTTGTCTCCAC(配列番号:25)
65B13 F2: TCCATCTCTCCAAGTGAAGGGTCTTG(配列番号:26)
65B13 R1: CCAACAGTCCTGCATGCTTGTAATGA(配列番号:27)
65B13 R2: TCCTTCAATGTTCAGTTTTGGAGGGG(配列番号:28)
1st PCR
10×ExTaq 2μl
2.5mM dNTP 1.6μl
ExTaq 0.1μl
100μM TAU2またはTAD3 0.04μl
100μM 65B13 F1またはR1 0.2μl
cDNA (10ng/μl) 1μl
蒸留水 15.06μl
2nd PCR
10×ExTaq 5μl
2.5mM dNTP 4μl
ExTaq 0.25μl
100μM TAU4またはTAD4 0.1μl
100μM 65B13 F2またはR2 0.5μl
1/100 1st PCR産物 1μl
蒸留水 15.06μl
次に、これらの遺伝子を用いて以下のプロトコールによりin situハイブリダイゼーションによる発現解析を行った。
次に、65B13遺伝子のうち、細胞外領域をコードする遺伝子配列を用いて、以下のプロトコールにより抗65B13抗体を作製し、免疫組織染色による発現解析を行った。
次に、抗65B13モノクローナル抗体を用いて、フローサイトメトリーによる65B13発現細胞の検出を行った。
Claims (14)
- ドーパミン産生ニューロン前駆細胞を選択する方法であり、以下の(1)〜(5)のヌクレオチド配列から選択される配列を含むポリヌクレオチドによりコードされるポリペプチドに対する抗体と、ドーパミン産生ニューロン前駆細胞を含むと考えられる細胞試料とを接触させる工程、および、該抗体に結合した細胞を選択する工程を含む方法。
(1) 配列番号:1の178から2280番目の塩基、若しくは配列番号:2の127番目から2079番目の塩基を含む核酸配列
(2) 配列番号:3若しくは4記載のアミノ酸配列をコードする核酸配列
(3) 配列番号:3若しくは4記載のアミノ酸配列においてシグナル配列部分を欠く配列をコードする核酸配列
(4) 配列番号:3または4記載のアミノ酸配列において1若しくは複数個のアミノ酸が欠失、挿入、置換、または付加されたアミノ酸配列をコードする核酸配列であって、中脳で分裂停止直後のドーパミン産生ニューロン前駆細胞において特異的に発現している配列
(5) 上記(1)の配列に相補的な核酸配列に対してストリンジェントな条件下でハイブリダイズし、中脳で分裂停止直後のドーパミン産生ニューロン前駆細胞において特異的に発現している配列 - フローサイトメトリーによってドーパミン産生ニューロン前駆細胞を分離する工程をさらに含む、請求項1に記載の方法。
- ドーパミン産生ニューロン前駆細胞集団を生産する方法であり、以下の(1)〜(5)のヌクレオチド配列から選択される配列を含むポリヌクレオチドによりコードされるポリペプチドに対する抗体と、ドーパミン産生ニューロン前駆細胞を含むと考えられる細胞試料とを接触させる工程、および、該抗体に結合した細胞を選択する工程を含む方法。
(1) 配列番号:1の178から2280番目の塩基、若しくは配列番号:2の127番目から2079番目の塩基を含む核酸配列
(2) 配列番号:3若しくは4記載のアミノ酸配列をコードする核酸配列
(3) 配列番号:3若しくは4記載のアミノ酸配列においてシグナル配列部分を欠く配列をコードする核酸配列
(4) 配列番号:3または4記載のアミノ酸配列において1若しくは複数個のアミノ酸が欠失、挿入、置換、または付加されたアミノ酸配列をコードする核酸配列であって、中脳で分裂停止直後のドーパミン産生ニューロン前駆細胞において特異的に発現している配列
(5) 上記(1)の配列に相補的な核酸配列に対してストリンジェントな条件下でハイブリダイズし、中脳で分裂停止直後のドーパミン産生ニューロン前駆細胞において特異的に発現している配列 - フローサイトメトリーによってドーパミン産生ニューロン前駆細胞を分離する工程をさらに含む、請求項3に記載の方法。
- 抗体が、該ポリペプチドの細胞外領域部分と親和性を有する抗体である、請求項1から4のいずれか一項に記載の方法。
- ドーパミン産生ニューロン前駆細胞を選択する方法であり、以下の(1)〜(5)のヌクレオチド配列から選択される配列を含むポリヌクレオチドによりコードされるポリペプチドの少なくとも細胞外領域部分を含むペプチドとドーパミン産生ニューロン前駆細胞を含むと考えられる細胞試料とを接触させる工程、および、該細胞外領域部分に結合した細胞を選択する工程を含む方法。
(1) 配列番号:1の178から2280番目の塩基、若しくは配列番号:2の127番目から2079番目の塩基を含む核酸配列
(2) 配列番号:3若しくは4記載のアミノ酸配列をコードする核酸配列
(3) 配列番号:3若しくは4記載のアミノ酸配列においてシグナル配列部分を欠く配列をコードする核酸配列
(4) 配列番号:3または4記載のアミノ酸配列において1若しくは複数個のアミノ酸が欠失、挿入、置換、または付加されたアミノ酸配列をコードする核酸配列であって、中脳で分裂停止直後のドーパミン産生ニューロン前駆細胞において特異的に発現している配列
(5) 上記(1)の配列に相補的な核酸配列に対してストリンジェントな条件下でハイブリダイズし、中脳で分裂停止直後のドーパミン産生ニューロン前駆細胞において特異的に発現している配列 - ドーパミン産生ニューロン前駆細胞集団を生産する方法であり、以下の(1)〜(5)のヌクレオチド配列から選択される配列を含むポリヌクレオチドによりコードされるポリペプチドの少なくとも細胞外領域部分を含むペプチドとドーパミン産生ニューロン前駆細胞を含むと考えられる細胞試料とを接触させる工程、および、該ペプチドに結合した細胞を選択する工程を含む方法。
(1) 配列番号:1の178から2280番目の塩基、若しくは配列番号:2の127番目から2079番目の塩基を含む核酸配列
(2) 配列番号:3若しくは4記載のアミノ酸配列をコードする核酸配列
(3) 配列番号:3若しくは4記載のアミノ酸配列においてシグナル配列部分を欠く配列をコードする核酸配列
(4) 配列番号:3または4記載のアミノ酸配列において1若しくは複数個のアミノ酸が欠失、挿入、置換、または付加されたアミノ酸配列をコードする核酸配列であって、中脳で分裂停止直後のドーパミン産生ニューロン前駆細胞において特異的に発現している配列
(5) 上記(1)の配列に相補的な核酸配列に対してストリンジェントな条件下でハイブリダイズし、中脳で分裂停止直後のドーパミン産生ニューロン前駆細胞において特異的に発現している配列 - 以下の(1)〜(5)のヌクレオチド配列から選択される配列を含むポリヌクレオチドによりコードされるポリペプチドに対する抗体を含む、請求項1から5のいずれか一項に記載の方法に使用するための試薬。
(1) 配列番号:1の178から2280番目の塩基、若しくは配列番号:2の127番目から2079番目の塩基を含む核酸配列
(2) 配列番号:3若しくは4記載のアミノ酸配列をコードする核酸配列
(3) 配列番号:3若しくは4記載のアミノ酸配列においてシグナル配列部分を欠く配列をコードする核酸配列
(4) 配列番号:3または4記載のアミノ酸配列において1若しくは複数個のアミノ酸が欠失、挿入、置換、または付加されたアミノ酸配列をコードする核酸配列であって、中脳で分裂停止直後のドーパミン産生ニューロン前駆細胞において特異的に発現している配列
(5) 上記(1)の配列に相補的な核酸配列に対してストリンジェントな条件下でハイブリダイズし、中脳で分裂停止直後のドーパミン産生ニューロン前駆細胞において特異的に発現している配列 - 請求項1から5のいずれか一項に記載の方法に使用する抗体を製造するための、以下の(1)〜(5)のヌクレオチド配列から選択される配列を含むポリヌクレオチドによりコードされるポリペプチドの使用。
(1) 配列番号:1の178から2280番目の塩基、若しくは配列番号:2の127番目から2079番目の塩基を含む核酸配列
(2) 配列番号:3若しくは4記載のアミノ酸配列をコードする核酸配列
(3) 配列番号:3若しくは4記載のアミノ酸配列においてシグナル配列部分を欠く配列をコードする核酸配列
(4) 配列番号:3または4記載のアミノ酸配列において1若しくは複数個のアミノ酸が欠失、挿入、置換、または付加されたアミノ酸配列をコードする核酸配列であって、中脳で分裂停止直後のドーパミン産生ニューロン前駆細胞において特異的に発現している配列
(5) 上記(1)の配列に相補的な核酸配列に対してストリンジェントな条件下でハイブリダイズし、中脳で分裂停止直後のドーパミン産生ニューロン前駆細胞において特異的に発現している配列 - 以下の(1)〜(5)のヌクレオチド配列から選択される配列に相補的な塩基配列を含む、ドーパミン産生ニューロン前駆細胞を検出するためのプローブ。
(1) 配列番号:1の178から2280番目の塩基、若しくは配列番号:2の127番目から2079番目の塩基を含む核酸配列
(2) 配列番号:3若しくは4記載のアミノ酸配列をコードする核酸配列
(3) 配列番号:3若しくは4記載のアミノ酸配列においてシグナル配列部分を欠く配列をコードする核酸配列
(4) 配列番号:3または4記載のアミノ酸配列において1若しくは複数個のアミノ酸が欠失、挿入、置換、または付加されたアミノ酸配列をコードする核酸配列であって、中脳で分裂停止直後のドーパミン産生ニューロン前駆細胞において特異的に発現している配列
(5) 上記(1)の配列に相補的な核酸配列に対してストリンジェントな条件下でハイブリダイズし、中脳で分裂停止直後のドーパミン産生ニューロン前駆細胞において特異的に発現している配列 - ドーパミン産生ニューロン前駆細胞集団を生産する方法であり、以下の(1)〜(5)のヌクレオチド配列から選択される配列を含むポリヌクレオチドによりコードされるポリペプチドの少なくとも細胞外領域部分を含むペプチドとドーパミン産生ニューロン前駆細胞を含むと考えられる細胞試料とを接触させる工程、および、該細胞外領域部分に結合した細胞を選択する工程を含む方法
(1) 配列番号:1の178から2280番目の塩基、若しくは配列番号:2の127番目から2079番目の塩基を含む核酸配列
(2) 配列番号:3若しくは4記載のアミノ酸配列をコードする核酸配列
(3) 配列番号:3若しくは4記載のアミノ酸配列においてシグナル配列部分を欠く配列をコードする核酸配列
(4) 配列番号:3または4記載のアミノ酸配列において1若しくは複数個のアミノ酸が欠失、挿入、置換、または付加されたアミノ酸配列をコードする核酸配列であって、中脳で分裂停止直後のドーパミン産生ニューロン前駆細胞において特異的に発現している配列
(5) 上記(1)の配列に相補的な核酸配列に対してストリンジェントな条件下でハイブリダイズし、中脳で分裂停止直後のドーパミン産生ニューロン前駆細胞において特異的に発現している配列 - 以下の(1)〜(5)のヌクレオチド配列から選択される配列に相補的な塩基配列を含む核酸の、ドーパミン産生ニューロン前駆細胞を検出するための使用。
(1) 配列番号:1の178から2280番目の塩基、若しくは配列番号:2の127番目から2079番目の塩基を含む核酸配列
(2) 配列番号:3若しくは4記載のアミノ酸配列をコードする核酸配列
(3) 配列番号:3若しくは4記載のアミノ酸配列においてシグナル配列部分を欠く配列をコードする核酸配列
(4) 配列番号:3または4記載のアミノ酸配列において1若しくは複数個のアミノ酸が欠失、挿入、置換、または付加されたアミノ酸配列をコードする核酸配列であって、中脳で分裂停止直後のドーパミン産生ニューロン前駆細胞において特異的に発現している配列
(5) 上記(1)の配列に相補的な核酸配列に対してストリンジェントな条件下でハイブリダイズし、中脳で分裂停止直後のドーパミン産生ニューロン前駆細胞において特異的に発現している配列 - 以下の(1)〜(5)のヌクレオチド配列から選択される配列を用いる、ドーパミン産生ニューロン前駆細胞を検出する方法。
(1) 配列番号:1の178から2280番目の塩基、若しくは配列番号:2の127番目から2079番目の塩基を含む核酸配列
(2) 配列番号:3若しくは4記載のアミノ酸配列をコードする核酸配列
(3) 配列番号:3若しくは4記載のアミノ酸配列においてシグナル配列部分を欠く配列をコードする核酸配列
(4) 配列番号:3または4記載のアミノ酸配列において1若しくは複数個のアミノ酸が欠失、挿入、置換、または付加されたアミノ酸配列をコードする核酸配列であって、中脳で分裂停止直後のドーパミン産生ニューロン前駆細胞において特異的に発現している配列
(5) 上記(1)の配列に相補的な核酸配列に対してストリンジェントな条件下でハイブリダイズし、中脳で分裂停止直後のドーパミン産生ニューロン前駆細胞において特異的に発現している配列 - 以下の(1)〜(5)のヌクレオチド配列から選択される配列の発現を検出する工程を含む、ドーパミン産生ニューロン前駆細胞を検出する方法。
(1) 配列番号:1の178から2280番目の塩基、若しくは配列番号:2の127番目から2079番目の塩基を含む核酸配列
(2) 配列番号:3若しくは4記載のアミノ酸配列をコードする核酸配列
(3) 配列番号:3若しくは4記載のアミノ酸配列においてシグナル配列部分を欠く配列をコードする核酸配列
(4) 配列番号:3または4記載のアミノ酸配列において1若しくは複数個のアミノ酸が欠失、挿入、置換、または付加されたアミノ酸配列をコードする核酸配列であって、中脳で分裂停止直後のドーパミン産生ニューロン前駆細胞において特異的に発現している配列
(5) 上記(1)の配列に相補的な核酸配列に対してストリンジェントな条件下でハイブリダイズし、中脳で分裂停止直後のドーパミン産生ニューロン前駆細胞において特異的に発現している配列
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---|---|---|---|---|
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EP1712638B1 (en) * | 2003-11-26 | 2009-06-10 | Eisai R&D Management Co., Ltd. | Specific marker Lmx1a on dopaminergic neurons |
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AU2005264579B2 (en) * | 2004-07-22 | 2010-06-10 | Eisai R&D Management Co., Ltd. | Lrp4/Corin dopaminergic neuron progenitor cell markers |
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US20100203505A1 (en) * | 2005-08-18 | 2010-08-12 | Eisai R&D Management Co., Ltd. | DOPAMINERGIC NEURON PROLIFERATIVE PROGENITOR CELL MARKER Msx1/2 |
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US20110159492A1 (en) * | 2008-06-04 | 2011-06-30 | Rimsza Lisa M | Diffuse Large B-Cell Lymphoma Markers and Uses Therefore |
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Family Cites Families (41)
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---|---|---|---|---|
NZ207394A (en) | 1983-03-08 | 1987-03-06 | Commw Serum Lab Commission | Detecting or determining sequence of amino acids |
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EP0546026B1 (en) | 1990-08-30 | 2000-08-02 | Cargill Incorporated | Brassica-oils with altered fatty acid profiles |
US5981165A (en) | 1991-07-08 | 1999-11-09 | Neurospheres Holdings Ltd. | In vitro induction of dopaminergic cells |
WO1993002227A1 (en) | 1991-07-15 | 1993-02-04 | Eco-Tec Limited | Process and apparatus for treating fluoride containing acid solutions |
IT1251435B (it) | 1991-09-04 | 1995-05-09 | Sclavo Spa | Vettore genetico per la integrazione multipla stabile di sequenze di dna nel genoma dei lieviti kluyveromyces lactis e saccharomyces cerevisiae e plasmidi che lo contengono. |
EP0617706B1 (en) | 1991-11-25 | 2001-10-17 | Enzon, Inc. | Multivalent antigen-binding proteins |
ES2301158T3 (es) | 1992-07-24 | 2008-06-16 | Amgen Fremont Inc. | Produccion de anticuerpos xenogenicos. |
US5285485A (en) | 1993-02-01 | 1994-02-08 | General Electric Company | Composite nuclear fuel container and method for producing same |
US5753491A (en) | 1993-04-13 | 1998-05-19 | Us Health | Use of neuro-derived fetal cell lines for transplantation therapy |
DE69429721T2 (de) * | 1993-04-13 | 2002-09-05 | The Government Of The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Department Of Health And Human Services, Rockville | Verwendung von neuronalen fötalen zellinien für transplantationstherapie |
JPH08509612A (ja) | 1993-04-26 | 1996-10-15 | ジェンファーム インターナショナル インコーポレイテッド | 異種抗体を産生することができるトランスジェニック非ヒト動物 |
US5554381A (en) | 1993-08-09 | 1996-09-10 | Cygnus, Inc. | Low flux matrix system for delivering potent drugs transdermally |
US6204053B1 (en) | 1994-11-08 | 2001-03-20 | Diacrin, Inc. | Porcine cortical cells and their use in treatment of neurological deficits due to neurodegenerative diseases |
US6277372B1 (en) | 1994-11-08 | 2001-08-21 | Diacrin, Inc. | Porcine neural cells and their use in treatment of neurological deficits due to neurodegenerative diseases |
US6294383B1 (en) | 1994-11-08 | 2001-09-25 | The Mclean Hospital Corporation | Porcine neural cells and their use in treatment of neurological deficits due to neurodegenerative diseases |
US5830460A (en) | 1995-03-13 | 1998-11-03 | University Of South Florida | Sertoli cells as transplantation facilitator for cell transplantation |
AU705932B2 (en) | 1995-03-13 | 1999-06-03 | University Of South Florida | Sertoli cells as neurorecovery inducing cells for neurodegenerative disorders |
US6653134B2 (en) | 1995-03-28 | 2003-11-25 | Cp Hahnemann University | Isolated stromal cells for use in the treatment of diseases of the central nervous system |
DE69637481T2 (de) | 1995-04-27 | 2009-04-09 | Amgen Fremont Inc. | Aus immunisierten Xenomäusen stammende menschliche Antikörper gegen IL-8 |
AU2466895A (en) | 1995-04-28 | 1996-11-18 | Abgenix, Inc. | Human antibodies derived from immunized xenomice |
US5753505A (en) | 1995-07-06 | 1998-05-19 | Emory University | Neuronal progenitor cells and uses thereof |
US20020127584A1 (en) * | 1997-09-18 | 2002-09-12 | Genentech, Inc. | Secreted and transmembrane polypeptides and nucleic acids encoding the same |
US20030027262A1 (en) * | 1997-09-18 | 2003-02-06 | Genentech, Inc. | Secreted and transmembrane polypeptides and nucleic acids encoding the same |
DE19756864C5 (de) | 1997-12-19 | 2014-07-10 | Oliver Brüstle | Neurale Vorläuferzellen, Verfahren zu ihrer Herstellung und ihre Verwendung zur Therapie von neuralen Defekten |
WO1999056759A1 (en) | 1998-05-07 | 1999-11-11 | University Of South Florida | Bone marrow cells as a source of neurons for brain and spinal cord repair |
US7339033B2 (en) * | 1998-06-26 | 2008-03-04 | Genentech, Inc. | Pro1481 |
US6913925B1 (en) | 1998-08-12 | 2005-07-05 | Signal Pharmaceuticals Llc | Human mesencephalon cell lines and methods of use therefor |
US6610540B1 (en) | 1998-11-18 | 2003-08-26 | California Institute Of Technology | Low oxygen culturing of central nervous system progenitor cells |
US7217565B2 (en) * | 1999-02-12 | 2007-05-15 | Stemcells California, Inc. | Enriched central nervous system stem cell and progenitor cell populations, and methods for identifying, isolating and enriching for such populations |
JP2001184757A (ja) | 1999-12-27 | 2001-07-06 | Aiwa Co Ltd | テープレコーダ |
WO2001068815A1 (en) * | 2000-03-14 | 2001-09-20 | Es Cell International Pte Ltd | Embryonic stem cells and neural progenitor cells derived therefrom |
JP2002051775A (ja) | 2000-06-01 | 2002-02-19 | Japan Science & Technology Corp | ドーパミン作動性ニューロンの濃縮・分離方法 |
CA2381065C (en) * | 2000-06-01 | 2007-06-05 | Japan Science And Technology Corporation | Method for enrichment and/or isolation of dopaminergic neurons |
JP2004500872A (ja) * | 2000-06-22 | 2004-01-15 | バイオジェン インコーポレイテッド | Gp354核酸およびポリペプチド |
EP1421179A1 (en) * | 2001-08-24 | 2004-05-26 | Nsgene A/S | Isolation of cells from neural cell populations using antibodies to fa1/dlk1 |
AU2003301576A1 (en) | 2002-10-22 | 2004-05-13 | Eisai Co., Ltd. | Gene expressed specifically in dopamine-producing neuron precursor cells after termination of division |
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EP1712638B1 (en) * | 2003-11-26 | 2009-06-10 | Eisai R&D Management Co., Ltd. | Specific marker Lmx1a on dopaminergic neurons |
JP5507851B2 (ja) * | 2007-02-09 | 2014-05-28 | エーザイ・アール・アンド・ディー・マネジメント株式会社 | Gabaニューロン前駆細胞マーカー65b13 |
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Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US7807371B2 (en) | 2003-01-24 | 2010-10-05 | Eisai R & D Management Co., Ltd. | Methods of selecting dopaminergic neuron proliferative progenitor cells using Lrp4/Corin markers |
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