JP4099065B2

JP4099065B2 - 血管増殖を阻害する医薬組成物とその使用の方法

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Publication number: JP4099065B2
Application number: JP2002563953A
Authority: JP
Inventors: デウィット・クラー，マイケル; ダネシ，ロマノ; ボッシ，ガイド; デルタッカ，マリオ
Original assignee: ソシエテ・ドゥ・コンセイユ・ドゥ・ルシェルシュ・エ・ダプリカーション・シャンティフィック・エス・ア・エス
Priority date: 2001-01-12
Filing date: 2002-01-14
Publication date: 2008-06-11
Anticipated expiration: 2022-01-14
Also published as: NZ526676A; JP2004527483A; CZ20031695A3; AU2002243552C1; CN1531441A; HUP0302732A2; CA2433785C; PL361879A1; NO20033117L; AU2002243552B2; IL156506A0; CA2433785A1; WO2002064160A3; EP1409007A2; KR20030068585A; RU2288739C2; NO20033117D0; US20040082517A1; US7084117B2; WO2002064160A8

Description

血管新生、つまり既存の血管からの新たな毛細血管の発生は、固形新生物の進行において、そして糖尿病性網膜症や慢性関節リウマチのような他の多くの病理学的状態において必須のプロセスである（Folkman, J., Nature Medicine 1995, 1 : 27-31）。この血管の発生を標的とする様々な戦略が詳しく研究されてきて、血管新生研究におけるモデル系において信頼し得る in vitro モデル系の利用可能性は、特異的な阻害剤の研究に不可欠になっている（Jain, R. K., et al., Nature Medicine 1997, 3: 1203-1208）。

腫瘍がその宿主から新たな血管を誘導する能力が癌の増殖及び転移に対して重大な効果を及ぼすことは今日広く認められている。腫瘍血管新生のプロセスは、微小血管増殖の陽性及び陰性のレギュレーターの均衡により仲介され、新たな血管の発生は３つの異なる連続工程へ分けることが可能である：１）基底膜の細胞仲介性、タンパク分解的な破壊；２）血管から周囲の細胞外マトリックスへの内皮細胞の遊走及び増殖；３）この細胞の管状構造への組織化（Folkman, J., Nature Medicine 1995, 1 : 27-31）。

ソマトスタチン（ソマトトロピン放出阻害因子、又はＳＲＩＦ）には、１４アミノ酸アイソフォーム（ソマトスタチン−１４）と２８アミノ酸アイソフォーム（ソマトスタチン−２８）の両方がある。Wilson, J. & Foster, D.,「ウィリアムスの内分泌学教程」、５１０頁（第７版、１９８５年）を参照のこと。この化合物は成長ホルモンの分泌の阻害剤であり、はじめは視床下部から単離された。Brazeau, et al., Science 179: 77 (1973)。ネイティブなソマトスタチンは、エンド及びエクソペプチダーゼにより速やかに不活性化されるので、in vivo ではごく短い作用時間を有する。このホルモンの作用時間、生物学的活性、及び（例えば、特定のソマトスタチン受容体への）選択性を高めるために、多くの新規類似体（例えば、ペプチド及び非ペプチド化合物）が調製されてきた。そのようなソマトスタチンの類似体を本明細書では「ソマトスタチンアゴニスト」と呼ぶことにする。

様々なソマトスタチン受容体（ＳＳＴＲ）、例えば、ＳＳＴＲ−１、ＳＳＴＲ−２、ＳＳＴＲ−３、ＳＳＴＲ−４、及びＳＳＴＲ−５が単離されてきた。従って、ソマトスタチンアゴニストは、ＳＳＴＲ−１アゴニスト、及び／又はＳＳＴＲ−２アゴニスト、及び／又はＳＳＴＲ−３アゴニスト、及び／又はＳＳＴＲ−４アゴニスト、及び／又はＳＳＴＲ−５アゴニストであり得る。

これまでいくつかの in vitro 及び in vivo 実験モデルにおいてソマトスタチン類似体の抗血管新生活性が実証されてきた（Danesi, R. et al., Clinical Cancer Research 1997, 3: 265-272; Woltering, E. A., et al., Investigational New Drug 1997, 15: 77-86）。このことに加え、長期のオクトレオチド（octreotide）治療は、糖尿病患者において、重篤な増殖性網膜症に関連した血管化の進行を抑えることができた（Mallet et al., 1992）。

どのソマトスタチンサブタイプ（群）がソマトスタチンの抗血管新生特性に関与しているかを決定すれば、最大の効力と最小の副作用を有する治療組成物の開発を可能にするだろう。しかしながら，この分野でのこれまでの研究は、５種のソマトスタチン受容体サブタイプのそれぞれがソマトスタチンの抗血管新生活性について担う可能性がある役割に関して矛盾した、及び／又は決定的でない知見をもたらしてきた。

発明の要約
本発明は、被検者において血管増殖の阻害に有用であるソマトスタチン１型受容体アゴニストを含んでなる組成物に関する。さらに本発明は、そのような治療の必要な患者（例えば、ヒトのような哺乳動物）において、血管増殖、例えば血管新生及び再狭窄を治療する方法に関する。本方法には、治療有効量のソマトスタチン１型受容体（ＳＳＴＲ−１）アゴニスト（例えば、ソマトスタチン１型選択アゴニスト）を前記患者へ投与する工程が含まれる。

本発明はまた、そのような阻害の必要な患者において、平滑筋増殖、内皮細胞増殖、及び新血管発芽を阻害する方法に関する。本方法には、治療有効量のソマトスタチン１型受容体（ＳＳＴＲ−１）アゴニスト（例えば、ソマトスタチン１型選択アゴニスト）を前記患者へ投与する工程が含まれる。

本発明により治療することが可能である臨床適応症の例には、限定されないが、自己免疫疾患（例えば、関節炎、強皮症、等）、癌性腫瘍、角膜移植片血管化、糖尿病性網膜症、血管腫、肥厚性瘢痕、及び乾癬、並びに外科的処置、例えば血管形成及びＡＶシャントに関連した血管増殖が含まれる。

本発明の主題の治療組成物及び方法を用いた治療へ反応する可能性がある病的状態のさらなる例は、皮膚に関するもの：いぼ、肉芽腫、カポシ肉腫、アレルギー性浮腫、等；子宮及び卵巣に関するもの：子宮内膜症、機能不全性子宮出血、卵胞嚢胞、等；眼に関するもの：未熟児網膜症、脈絡膜と他の眼内障害、黄斑変性、加齢関連黄斑変性、等、である。

本発明の主題の治療組成物及び方法を用いた治療へ反応する可能性がある疾患状態のさらなる例は、Folkman, J., べスイスラエル病院（ボストン）医学セミナー、３３６巻、２６号、１７５７〜１７６３頁に開示されている。

実際、当技術分野でよく知られているように、血管新生、平滑筋増殖、内皮細胞増殖、及び／又は新血管発芽を阻害することが可能な剤について知られている疾患及び状態のリストは実に多く、限定せずに、固形腫瘍、腫瘍転移、良性腫瘍、例えば聴神経腫、神経線維腫、及びトラコーマ、白血病、血管拡張性肉芽腫、心筋血管新生、斑血管化、アテローム性動脈硬化症、冠状側枝、脳側枝、動静脈奇形、虚血肢血管新生、眼及び角膜の血管新生状態、例えば角膜移植片拒絶、オスラー−ウェバー症候群、ルベオーシス、新血管性緑内障、後水晶体線維形成、及び糖尿病性網膜症、糖尿病性血管化、創傷治癒、骨折、脈管形成、造血、排卵、月経、胎盤形成、ねこひっかき病（Rochele minalia quitosa）、潰瘍（消化性；ヘリコバクター・ピロリ）、乾癬（例えば、毛細血管拡張性乾癬を含む）、慢性関節リウマチ、クローン病、腸癒着、瘢痕形成（即ち、細胞及び結合組織を含む高密度組織の形成）、肥厚性瘢痕（即ち、ケロイド）、毛細血管拡張症、血友病関節症、血管線維腫、及び、創傷肉芽が含まれる。これらの疾患及び状態は、例えば、以下の米国特許と国際特許公報のような文献において詳しく論じられている：６，３２３，２２８，６，２９４，５３２，６，２８８，２２８，６，２８８，０２４，６，２８４，７２６，６，２８０，７３９，６，２６５，４０７，６，２６５，４０３，６，２５８，８１２，６，２５５，３５５，６，２５５，３５３，６，２５１，８６７，６，２４２，４８１，６，２３５，７５６，６，２３５，７４１，６，２２８，８７９，６，２２８，８７１，６，２２５，３４０，６，２１４，８００，６，２０１，１０４，６，１７７，４０１，６，１７４，８６１，６，１５０，４０７，６，１５０，３６２，６，１１７，８６２，６，１１４，３５５，６，０９０，７９４，６，０８６，８６５，６，０７１，９４８，６，０５７，２９０，６，０５７，１２２，６，０２８，０６１，６，０２５，３５３，６，０２５，３３１，６，０２４，６８８，６，０１７，９４９，５，９９７，８６８，５，９９４，３８８，５，９９４，２９２，５，９９０，２８０，５，９８５，８７８，５，９８５，３３０，５，９８１，４８４，５，９７２，９２２，５，９７２，８９６，５，９４８，４０３，５，９３２，６１１，５，９０２，７９０，５，８７４，０８１，５，８４７，００２，５，８４３，９２５，５，８３７，６８０，５，８０７，７３１，５，８０１，１４６，５，７６６，５９１，５，７５３，２３０，５，７４４，４９２，５，７３３，８７６，５，７２１，２２６，５，７１２，２９１，５，６９８，５８６，５，６９６，１４７，５，６７７，１８１，５，６４６，１３６，５，６２９，３４０，５，６２９，３２７，５，６１０，１６６，５，５９３，９９０，５，５７４，０２６，５，５６７，６９３，５，５６７，４１７，５，５６３，１３０，５，５１２，５５０，５，５０６，２０８，ＷＯ０２／０２６０９，ＷＯ０２／０２５９３，ＷＯ０２／００８７７，ＷＯ０２／００６９０，ＷＯ０２／０００１７，ＷＯ０１／９３８０６，ＷＯ０１／８５７９６，ＷＯ０１／８１５７９，ＷＯ０１／８１３１１，ＷＯ０１／７９１５７，ＷＯ０１／７４２９９，ＷＯ０１／７２６９９，ＷＯ０１／７２２９７，ＷＯ０１／６６１２７，ＷＯ０１／６２７９９，ＷＯ０１／６２７２５，ＷＯ０１／５９１００，ＷＯ０１／５８８９９，ＷＯ０１／５１０４８，ＷＯ０１／４６１１０，ＷＯ０１／４５７５１，ＷＯ０１／３５９７７，ＷＯ０１／３４１９５，ＷＯ０１／２９０８５，ＷＯ０１／２８５７７，ＷＯ０１／２５４３３，ＷＯ０１／２３３７５，ＷＯ０１／２１８３１，ＷＯ０１／１９９８７，ＷＯ０１／１９８６８，ＷＯ０１／１２８０９，ＷＯ０１／１２２２６，ＷＯ０１／１２２１０，ＷＯ０１／１０８５９，ＷＯ０１／０９１１３，ＷＯ０１／０７０５７，ＷＯ０１／０４１５７，ＷＯ０１／０３７２０，ＷＯ０１／００２０１，ＷＯ００／７５１２４，ＷＯ００／７３４４５，ＷＯ００／７３３４０，ＷＯ００／５９５３２，ＷＯ００／５４７７０，ＷＯ００／５４７６２，ＷＯ００／５３７５７，ＷＯ００／５３７５３，ＷＯ００／５３７５２，ＷＯ００／５２１５８，ＷＯ００／４８５９１，ＷＯ００／４７２１２，ＷＯ００／４７１９３，ＷＯ００／４３３９３，ＷＯ００／４０５９７，ＷＯ００／３５４０７，ＷＯ００／３２２２１，ＷＯ００／３２１８０，ＷＯ００／３０６２８，ＷＯ００／２７８６６，ＷＯ００／２７４１５，ＷＯ００／２７３４０，ＷＯ００／２４４１５，ＷＯ００／２１５６１，ＷＯ００／２０５７７，ＷＯ００／２００２６，ＷＯ００／１９９９５，ＷＯ００／１５７９２，ＷＯ００／１２０８９，ＷＯ００／１０５０７，ＷＯ００／１０５０６，ＷＯ００／０９６５７，ＷＯ００／０９４９５，ＷＯ００／０５３５６，ＷＯ００／０２９０２，ＷＯ００／０２８７１，ＷＯ００／０２５８５，ＷＯ００／０１３８３，ＷＯ９９／６２５４９，ＷＯ９９／６１５９０，ＷＯ９９／６１４３２，ＷＯ９９／６０９８４，ＷＯ９９／５８１３９，ＷＯ９９／４８４９５，ＷＯ９９／４５９０９，ＷＯ９９／３７７７６，ＷＯ９９／３１０８８，ＷＯ９９／２６６２２，ＷＯ９９／２６４８０，ＷＯ９９／２３１０５，ＷＯ９９／２２７６０，ＷＯ９９／１６７５５，ＷＯ９９／１６４６５，ＷＯ９９／１４２３４，ＷＯ９９／１０３４９，ＷＯ９９／０９９８２，ＷＯ９９／０４８０６，ＷＯ９９／０４８０３，ＷＯ９８／５８９２９，ＷＯ９８／５８９１９，ＷＯ９８／５４０９３，ＷＯ９８／５１３２６，ＷＯ９８／４１２０５，ＷＯ９８／３６７６０，ＷＯ９８／３５９５８，ＷＯ９８／３１６８８，ＷＯ９８／１９７１２，ＷＯ９８／１９６４９，ＷＯ９８／１７７９６，ＷＯ９８／１３０７１，ＷＯ９８／１２２２６，ＷＯ９８／０５３２３，ＷＯ９８／０５２９３，ＷＯ９７／４５１３７，ＷＯ９７／４１８２４，ＷＯ９７／３５５６７，ＷＯ９７／３２５８３，ＷＯ９７／３００８５，及びＷＯ９７／２６２５８号。上記の特許及び特許公報のそれぞれの内容は、本明細書にそのまま援用される。

「ソマトスタチン１型受容体アゴニスト」及び「ソマトスタチン１型受容体選択アゴニスト」の定義は以下に提供する。治療有効量は、治療される状態、選択される投与の経路、及び、使用される化合物の比活性に依存し、最終的には、担当する医師若しくは獣医師により決定される（例えば、５ｇ／日と５ｍｇ／日の間）。１つの態様において、ソマトスタチンアゴニストは、治療される状態が鎮静するまで患者へ投与される。もう１つの態様において、ソマトスタチンアゴニストは、患者の生存期間の間投与される。

ソマトスタチンアゴニストは、治療される被検者の血流へ非経口的に、例えば静脈内に投与することが可能である。しかしながら、当業者には、治療される状態と使用されるソマトスタチンアゴニストの活性及びバイオアベイラビリティに応じて、静脈内、皮下、筋肉内、腹腔内、腸内、経皮、経粘膜、徐放性ポリマー組成物（例えば、乳酸ポリマー、又は乳酸及びグリコール酸共重合体の微粒子若しくはインプラント）、灌流、経鼻、経口、等のように、その経路が変化するものであると容易に理解されよう。

ソマトスタチンアゴニストはまた、体内に移植される器具の表面上のコーティング剤、又はコーティング剤の成分として提供してもよい。例えば、血管ステントの内側若しくは上部でのソマトスタチンアゴニストの提供は、しばしばステント移植に関連する再狭窄の治療に有用である。

ＳＳＴＲ−１アゴニストは、必要に応じて、全身的、及び／又は局在的若しくは局部的に投与することが可能である。癒着の予防のために、ＳＳＴＲ−１アゴニストは、典型的には、外科手術の時に、好ましくは制御放出製剤において、及び／又はバリアー技術を使用して、適用されるだろう。

ソマトスタチンアゴニストは、純粋又は実質的に純粋な化合物として投与することが可能であるが、医薬製剤若しくは調製物として提示してもよい。ヒト及び動物の両方のために本発明において使用される製剤は、１つ以上の製剤的に許容される担体、及び、場合により他の治療成分とともに、以下に記載されるソマトスタチンアゴニストのいずれかを含む。

担体は、製剤の有効成分と適合可能であり（例えば、ペプチドを安定化することが可能である）、治療される被検者に対して有害でないという意味において、「許容され」なければならない。望ましくは、この製剤には、酸化剤や、ペプチドが適合し得ないことが知られている他の物質を含んではならない。例えば、環状化形態（例えば、内部システインのジスルフィド結合）のソマトスタチンアゴニストは、酸化され得る；従って、賦形剤として還元剤が存在すると、このシステインジスルフィド結合の開放をもたらす場合がある。一方、高酸化状態は、システインスルホキシドの形成やトリプトファンの酸化をもたらす可能性がある。故に、賦形剤を慎重に選択することが重要である。ｐＨはもう１つの重要因子であり、やや酸性（ｐＨ５〜６）の条件下で生成物を緩衝化することが必要である場合がある。

製剤は、簡便にも単位剤形において提示される場合があり、製剤学の技術分野でよく知られたいずれの方法でも調製してよい。すべての方法には、（諸）有効成分を、１つ以上の付属成分を構成する担体と一緒にする工程が含まれる。

一般に、錠剤若しくは散剤の製剤は、微細化した固形担体と有効成分を均一かつ完全に混和すること、そして次いで、錠剤の場合のように、必要ならば生成物を所望の形状及び大きさへ成型することによって調製される。

一方、非経口（例えば、静脈内）投与に適した製剤は、簡便にも、（諸）有効成分の無菌水溶液を含む。好ましくは、この溶液は、治療される患者の血液と等張である。そのような製剤は、簡便にも、水溶液を産生するために固形の（諸）有効成分を水に溶かし、前記溶液を無菌にすることによって調製することが可能である。この製剤は、単用量若しくは多用量の容器、例えば、密封アンプル若しくはバイアルにおいて提示してよい。

徐放性非経口投与に適した製剤（例えば、乳酸若しくはグリコール酸残基を含有するポリエステルのような生物分解性ポリマー製剤）も、当技術分野でよく知られている。例えば、米国特許第３，７７３，９１９号及び４，７６７，６２８号とＰＣＴ公報第ＷＯ９４／１５５８７号を参照のこと。

外科用ステントの処置及び／又はコーティングの方法及び製剤（ここで、前記コーティングは、医薬活性化合物を含む場合がある）も、当技術分野でよく知られている。例えば、米国特許第６，２１４，１１５号、６，０９０，９０１号、及び６，０８３，２５７号と国際特許公報第ＷＯ０１／０１９５７及びＷＯ００／０２５９９号を参照のこと。

ソマトスタチン又はソマトスタチンアゴニストはまた、フィブラート（例えば、ベザフィブラート、ジェムフィブロジル、及びクロロフィブラート）、ＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害剤（例えば、プラバスタチン、シンバスタチン、及びフルオラスタチン、アトルバスタチン、及びロバスタチン）、胆汁酸結合樹脂（例えば、コレスチラミン及びコレスチポール）、ニコチン酸化合物（例えば、ニコチン酸、及びニセリトロール）及び魚油のような、トリグリセリド、コレステロール、又はグリセロールの血中レベルを低下させることが可能な他の化合物とともに投与してもよい。高脂血症の治療ワークショップ、１９９６−２（Lakemedelsverket，ウプサラ、スウェーデン、１９９６年）を参照のこと。

本発明の他の特徴と利点は、以下の好ましい態様の説明と特許請求項から明らかであろう。
発明の詳細な説明
当業者は、本明細書の記載に基づいて、本発明をその最大限まで利用することが可能であると考えられる。従って、以下の特殊な態様は、単に例示のものであって、本開示の残りを決して制限するものではないと解釈されるべきである。

他に定義されなければ、本明細書に使用されるすべての技術及び科学用語は、本発明が属する技術分野において当業者により通常理解されるのと同じ意味を有する。また、本明細書に示されるすべての公報、特許出願、特許及び他の参考文献は、参照により組み込まれる。

ソマトスタチン１型受容体アゴニスト（即ち、ＳＳＴＲ−１アゴニスト）が意味するものは、（１）（例えば、以下に記載の受容体結合アッセイにより定義されるように）ＳＳＴＲ−１に対して高い結合アフィニティー（例えば、１０００ｎＭ未満、又は好ましくは１００ｎＭ未満、又は１０ｎＭ未満のＫｉ）を有し、（２）（例えば、以下に記載の生物学的アッセイにより示されるように）血管増殖の速度若しくは程度を減少させる化合物である。

ソマトスタチン１型受容体選択アゴニストが意味するものは、（１）（例えば、以下に記載の受容体結合アッセイにより定義されるように）ＳＳＴＲ−２、ＳＳＴＲ−３、ＳＳＴＲ−４、又はＳＳＴＲ−５のいずれよりもＳＳＴＲ−１に対してより高い結合アフィニティーを有し、（２）（例えば、以下に記載の生物学的アッセイにより示されるように）血管増殖の速度若しくは程度を減少させるソマトスタチンアゴニストである。

１つの態様において、ソマトスタチン１型受容体選択アゴニストは、ＳＳＴＲ−１アゴニストでもある。
ソマトスタチンアゴニストの例は、いずれも本明細書に援用される、以下に示す公表物に特に引用される式により含まれるものか又は式である。

Van Binst, G. et al. Peptide Research 5: 8 (1992)；
Horvath, A. et al. 抄録「抗腫瘍活性を有するソマトスタチン類似体のコンホメーション」、第２２回欧州ペプチドシンポジウム、１９９２年９月１３〜１９日、インターラーケン、スイス；
Curtis et al., Am. J. Physio. Heart. Circ. Physio, 278: H1815 (2000)；
Nicolaou et al., Rivier と Marshall編、『ペプチド』中、「骨格形成にβ−Ｄ−グルコースを利用する、ペプチド模擬体の設計及び合成」、ＥＳＣＯＭ（１９９０年）；
Papageorgiou et al., 「ソマトスタチンの非ペプチド模擬体の設計、合成、及び結合アフィニティー」 Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters, 第２巻、１３５〜１４０頁、１９９２年；及び、R. Hirschmann et al. 「β−Ｄ−グルコースを新規の骨格形成剤として利用する、ソマトスタチン非ペプチドペプチド模擬体の de novo 設計及び合成」 J. Am. Chem. Soc., 第１１５巻、１２５５０〜１２５６８頁、１９９３年；
ＰＣＴ出願第ＷＯ９１／０９０５６号（１９９１年）；
ＥＰ出願第０３６３５８９Ａ２号（１９９０年）；
ＥＰ出願第Ｐ５１６４ＥＵ号（発明者：Ｇ．Ｋｅｒｉ）；
米国特許第６，２６２，２２９号；
米国特許第６，１９７，９６３号；
米国特許第６，１５９，９４１号；
米国特許第６，１２７，３４３号；
米国特許第６，０８３，９６０号；
米国特許第６，０２０，３４９号；
米国特許第５，５５２，５３４号；
米国特許第５，８１７，８７９号；
米国特許第５，８１１，５１２号；
米国特許第４，９０４，６４２号（１９９０年）；
米国特許第４，８７１，７１７号（１９８９年）；
米国特許第４，８５３，３７１号（１９８９年）；
米国特許第４，７２５，５７７号（１９８８年）；
米国特許第４，６８４，６２０号（１９８７年）；
米国特許第４，６５０，７８７号（１９８７年）；
米国特許第４，６０３，１２０号（１９８６年）；
米国特許第４，５８５，７５５号（１９８６年）；
ＥＰ出願第０２０３０３１Ａ２号（１９８６年）；
米国特許第４，５２２，８１３号（１９８５年）；
米国特許第４，４８６，４１５号（１９８４年）；
米国特許第４，４８５，１０１号（１９８４年）；
米国特許第４，４３５，３８５号（１９８４年）；
米国特許第４，３９５，４０３号（１９８３年）；
米国特許第４，３６９，１７９号（１９８３年）；
米国特許第４，３６０，５１６号（１９８２年）；
米国特許第４，３５８，４３９号（１９８２年）；
米国特許第４，３２８，２１４号（１９８２年）；
米国特許第４，３１６，８９０号（１９８２年）；
米国特許第４，３１０，５１８号（１９８２年）；
米国特許第４，２９１，０２２号（１９８１年）；
米国特許第４，２３８，４８１号（１９８０年）；
米国特許第４，２３５，８８６号（１９８０年）；
米国特許第４，２２４，１９９号（１９８０年）；
米国特許第４，２１１，６９３号（１９８０年）；
米国特許第４，１９０，６４８号（１９８０年）；
米国特許第４，１４６，６１２号（１９７９年）；
米国特許第４，１３３，７８２号（１９７９年）；
米国特許第５，５０６，３３９号（１９９６年）；
米国特許第４，２６１，８８５号（１９８１年）；
米国特許第４，７２８，６３８号（１９８８年）；
米国特許第４，２８２，１４３号（１９８１年）；
米国特許第４，２１５，０３９号（１９８０年）；
米国特許第４，２０９，４２６号（１９８０年）；
米国特許第４，１９０，５７５号（１９８０年）；
ＥＰ特許第０３８９１８０号（１９９０年）；
ＥＰ出願第０５０５６８０号（１９８２年）；
ＥＰ出願第００８３３０５号（１９８２年）；
ＥＰ出願第００３０９２０号（１９８０年）；
ＰＣＴ出願第ＷＯ８８／０５０５２号（１９８８年）；
ＰＣＴ出願第ＷＯ９０／１２８１１号（１９９０年）；
ＰＣＴ出願第ＷＯ９７／０１５７９号（１９９７年）；
ＰＣＴ出願第ＷＯ９１／１８０１６号（１９９１年）；
ＰＣＴ出願第ＷＯ００／７５１８６号（２０００年）；
イギリス出願第ＧＢ２，０９５，２６１号（１９８１年）；及び、
フランス出願第ＦＲ２，５２２，６５５号（１９８３年）。

ＳＳＴＲ−１選択ソマトスタチンアゴニストの例には、限定されないが、上記に引用した参考文献に開示される、以下のソマトスタチン類似体が含まれる：

ここで、「Ｃａｅｇ」の構造は、

である。
本明細書に記載されるすべてのソマトスタチンアゴニストでは、各アミノ酸残基が−ＮＨ−Ｃ（Ｒ）Ｈ−ＣＯ−の構造を表すことに留意すること。ここで、Ｒは側鎖（例えば、ＡｌａではＣＨ₃）である。アミノ酸残基間の線は、アミノ酸を結合するペプチド結合を表す。また、アミノ酸残基が光学的に活性である場合、Ｄ型がはっきり明示されなければ、意図されているのはＬ型配置である。ジスルフィド結合（例えば、ジスルフィド架橋）がＣｙｓ残基の２つのフリーチオールの間に存在するが、それは示されない。

ソマトスタチンアゴニストの合成
ソマトスタチンアゴニストを合成する方法は十分に文書化されていて、当業者の能力の範囲内にある。例えば、上記に記載されるＨ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｐｈｅ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−ＮＨ₂の合成は、ヨーロッパ特許出願０３９５４１７Ａ１号の実施例１に説明されるプロトコールに従うことによって達成することが可能である。置換Ｎ末端を有するソマトスタチンアゴニストの合成は、例えば、ＷＯ８８／０２７５６号、ヨーロッパ特許出願第０３２９２９５号、及びＰＣＴ公報第ＷＯ９４／０４７５２号に説明されるプロトコールに従うことによって達成することが可能である。

ソマトスタチン受容体結合アッセイ
ヒトＳＳＴＲ−１、ＳＳＴＲ−２、ＳＳＴＲ−３、ＳＳＴＲ−４、及びＳＳＴＲ−５のｃＤＮＡクローンはすでに記載されていて（ＳＳＴＲ−１とＳＳＴＲ−２は、Yamada, Y., et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA., 89: 251-255 (1992) において；ＳＳＴＲ−３は、Yamada, et al., Mol. Endocrinol. 6: 2136-2142 (1993) において；そして、ＳＳＴＲ−４とＳＳＴＲ−５は、Yamada, et al., Biochem. Biophys. Res. Commun. 195: 844-852 (1993) において）、アメリカン・タイプ・カルチャー・コレクション（ＡＴＣＣ，ロックヴィル、メリーランド州）からも入手可能である（ＡＴＣＣ番号７９０４４（ＳＳＴＲ−１）、７９０４６（ＳＳＴＲ−２）、及び７９０４８（ＳＳＴＲ−３））。制限エンドヌクレアーゼマップに基づいて、各ＳＳＴＲｃＤＮＡのコーディング領域全体を、好適な制限エンドヌクレアーゼ消化により切断することが可能である（Maniatis, T., et al., 「分子クローニング−実験マニュアル」、ＣＳＨＬ、１９８２年）。制限エンドヌクレアーゼは、ニューイングランド・バイオラブズ（ベヴァリー、マサチューセッツ州）から入手可能である。このｃＤＮＡフラグメントを、分子生物学の標準技術を使用して（例えば、Maniatis, T., et al., 「分子クローニング−実験マニュアル」、コールドスプリングハーバーラボラトリー（１９８２年）を参照のこと）、哺乳動物発現ベクターのｐＣＭＶ（Russell, D., et al., J. Biol. Chem., 264: 8222-8229 (1989)）へ挿入し、発現プラスミド、ｐＣＭＶ−ヒトＳＳＴＲ−１〜ｐＣＭＶ−ヒトＳＳＴＲ−５を産生した。他の哺乳動物発現ベクターには、ｐｃＤＮＡ１／Ａｍｐ（インビトロゲン、サンドレジィ、カリフォルニア州）が含まれる。この発現プラスミドを好適な細菌宿主、大腸菌ＨＢ１０１（ストラタジーン、ラジョラ、カリフォルニア州）へ導入し、トランスフェクション用のプラスミドＤＮＡを塩化セシウム勾配上で調製した。

ＣＨＯ−Ｋ１（チャイニーズハムスター卵巣）細胞をＡＴＣＣ（ＡＴＣＣ番号：ＣＣＬ６１）から入手した。この細胞を、１０％ウシ胎仔血清を補充したハムＦ１２培地（ギブコＢＲＬ、グランドアイランド、ニューヨーク州）において、標準組織培養条件下で増殖させて、維持した。トランスフェクションのために、細胞を１ｘ１０⁶／６０−ｃｍプレート（バクスター・サイエンティフィック・プロダクツ、マクグローパーク、イリノイ州）の密度で播いた。リン酸カルシウム共沈殿法（Ausubel, F. M., et al., 「分子生物学の最新プロトコール」、ジョン・ウィリー・アンド・サンズ、１９８７年）を使用して、ＤＮＡ仲介性トランスフェクションを行った。選択可能マーカーとして、発現プラスミドの１／１０の濃度で、プラスミドｐＲＳＶ−ｎｅｏ（ＡＴＣＣ；ＡＴＣＣ番号３７１９８）を含めた。トランスフェクトされたＤＮＡを安定的に継承したＣＨＯ−Ｋ１クローン細胞系を、１０％ウシ胎仔血清及び０．５ｍｇ／ｍｌのＧ４１８（シグマ）を含有するハムＦ１２培地における増殖について選択した。この細胞を環クローン化し、同じ培地において分析のために増殖させた。

この細胞から調製した全ＲＮＡのノーザンブロット分析（Sambrook, J. E., et al., 「分子クローニング−実験マニュアル、第２版」、コールドスプリングハーバーラボラトリー、コールドスプリングハーバー、ニューヨーク州（１９８９年））と、（¹²⁵Ｉ−Ｔｙｒ¹¹）ソマトスタチン−１４をリガンドとして使用する受容体結合により、ＣＨＯ−Ｋ１細胞におけるヒトＳＳＴＲ−１〜ＳＳＴＲ−５受容体の発現を検出した。ヒトＳＳＴＲ受容体を発現するトランスフェクトされた細胞系を培養においてクローン増殖させ、以下のＳＳＴＲ結合プロトコールに使用した。

ＰＯＬＹＴＲＯＮホモジェナイザー（６に設定、１５秒）を用いて、２０ｍｌの氷冷５０ｍＭＴｒｉｓ−ＨＣｌにおいてこのトランスフェクトされた細胞を均質化することによって、粗製膜を調製した。緩衝液を加えて４０ｍｌの最終量を得て、このホモジェネートをＳｏｒｖａｌＳＳ−３４ローターにおいて、３９，０００ｇで１０分間、０〜４℃で遠心分離した。生じた上澄液をデカントして捨てた。ペレットを氷冷緩衝液において再びホモジェナイズし、希釈し、先のように遠心分離した。最終ペレットを１０ｍＭＴｒｉｓ−ＨＣｌに再懸濁させ、受容体結合アッセイのために氷上に保った。

この膜調製品のアリコートを、様々な濃度（例えば、１０^-11〜１０^-6）の試験ソマトスタチンアゴニスト、ウシ胎仔血清（Ｖ分画）１０ｍｇ／ｍｌ（シグマケミカル社、セントルイス、ミズーリ州）、ＭｇＣｌ₂（５ｍＭ）、Ｔｒａｓｙｌｏｌ（２００ＫＩＵ／ｍｌ）、バシトラシン（０．０２ｍｇ／ｍｌ）、及びフッ化フェニルメチルスルホニル（０．０２ｍｇ／ｍｌ）を含有する５０ｍＭＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．４）において、０．０５ｎＭ（¹²⁵Ｉ−Ｔｙｒ¹¹）ソマトスタチン−１４（２０００Ｃｉ／ミリモル；アマーシャム社、アーリントンハイツ、イリノイ州）とともに３０℃で３０分間インキュベートした。最終アッセイ量は０．３ｍｌであった。Ｂｒａｎｄｅｌ濾過マニホルドを使用して、（０．３％ポリエチレンイミンに３０分間予め浸した）ＧＦ／Ｃフィルターに通す急速濾過によりインキュベーションを止めた。次いで、それぞれの試験管と濾紙を氷冷緩衝液の５ｍｌアリコートで３回洗浄した。特異結合を、［（¹²⁵Ｉ−Ｔｙｒ¹¹）ＳＲＩＦ−１４の全結合］−［１００ｎＭの存在下でのその結合］として定義した。ソマトスタチンアゴニストのＫｉ値は、以下の式を使用して算出される：Ｋｉ＝ＩＣ₅₀／（１＋（ＬＣ／ＬＥＣ））。ここで、ＩＣ₅₀は、放射リガンド（¹²⁵Ｉ−Ｔｙｒ¹¹）ソマトスタチン−１４の特異結合の５０％を阻害するのに必要とされる試験ソマトスタチンアゴニストの濃度であり、ＬＣは放射リガンドの濃度（０．０５ｎＭ）であり、ＬＥＣは放射リガンドの平衡解離定数（０．１６ｎＭ）である。

増殖及び毛細血管形成の阻害
内皮細胞に対する抗増殖効果とソマトスタチン類似体により引き起こされる内皮細胞の増殖及び毛細血管形成の阻害について検討するために、２つの異なるヒト in vivo モデルを実施した。これらのモデルは、二次元内皮細胞層と、in vivo での毛細血管発生を模倣する細胞外マトリックスにおける三次元内皮細胞増殖に対する、ソマトスタチン類似体の効果の研究を可能にした。さらに、これらのアッセイは、抗血管新生療法への可能な慢性臨床アプローチに類似し、ヒト組織に対する非常に長い期間の処置（それぞれ、７２時間と２８日）を可能にした。

材料と方法
材料
組換えヒト表皮増殖因子（ＥＧＦ）と組換えヒト血管内皮増殖因子（ＶＥＧＦ）はＰｅｐｒｏＴｅｃｈＥＣ社（ロンドン、イギリス）からのものであった。ＥＧＦとＶＥＧＦは、データシートの情報に従って、滅菌蒸留水で１００μｇ／ｍｌの濃度に復元した。

１９９細胞培養基とフェノールレッドのない１９９培地は、ギブコＢＲＬ（ペーズリー、イギリス）から購入した。ブタ皮膚サプリメント由来Ａ型ゼラチンと本節に列挙しない他のすべての化学品は、シグマケミカル社（セントルイス、ミズーリ州、アメリカ）から入手した。細胞培養用のプラスチック製品はコスター（ケンブリッジ、マサチューセッツ州、アメリカ）により供給された。

ソマトスタチン−１４、ＢＩＭ−２３０１４Ｃ、ＢＩＭ−２３１２０Ｃ、ＢＩＭ−２３１９０Ｃ、ＢＩＭ−２３１９７Ｃ、ＢＩＭ−２３２０６Ｃ、ＢＩＭ−２３２６８Ｃ、ＢＩＭ−２３７４５Ｃ、及びＢＩＭ−２３９２６Ｃ（いずれも、バイオメジャー社、ミルフォード、マサチューセッツ州、アメリカから）を、０．１％（脂肪酸フリー）ウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）を含有する０．０１Ｎ酢酸のストック溶液に溶かし、−８０℃で保存した。

先述の化合物の様々なソマトスタチン受容体への相対アフィニティーは以下のように要約することが可能である：

ＳＵ５４１６、３−（（２，４−ジメチルピロール−５−イル）メチルデニル）−２−インドリノンは、スジェン社（サンフランシスコ、カリフォルニア州、アメリカ）からの提供品であった。

細胞培養条件
Ades, et al., (Journal of Investigative Dermatology 1992, 99: 683-690) により特徴づけられた不死化ヒト微小血管内皮細胞系、ＨＭＥＣ−１を、１０％熱不活性化ウシ胎仔血清（ＦＢＳ）、ペニシリン（５０ＩＵ／ｍＬ）、及びヒドロコーチゾン（１００μｇ／ｍｌ）を補充した１９９培地において維持した。７５ｃｍ²ゼラチンコート化組織培養フラスコにおいて細胞を通常通りに培養し、５％ＣＯ₂、３７℃の加湿空気中に保った。すべての実験で、細胞が長い増殖期にあって、上記の培養条件下で維持されているときに、０．２５％トリプシン−０．０３％ＥＤＴＡの溶液とともに細胞を採取した。

細胞毒性アッセイ
９６穴ゼラチンコート化無菌プラスチックプレートにおいてプレート培養し、一晩付着させたＨＥＭＣ−１細胞の単一細胞懸濁液（５ｘ１０³細胞／ウェル）について、in vitro 化学感受性試験を実施した。処置プロトコール（図１）は、２４時間後、１０^-10〜１０^-6Ｍのソマトスタチン−１４、ソマトスタチン類似体、ＳＵ５４１６１０^-6Ｍ＋ＶＥＧＦ１０ｎｇ／ｍＬを陽性対照又は担体として加え、プレートを７２時間インキュベートするように設計した（より詳細については、図１を参照のこと）。この処置は、各ペプチドが少なくとも９つのウェルにより表されるように計画された。実験の終了時に、細胞をリン酸緩衝化生理食塩水（ＰＢＳ）で濯ぎ、トリプシン／ＥＤＴＡとともに採取し、血球計で計数した。対照に対する細胞増殖の比として結果を表し、これは、３回繰り返した３回の個別実験の平均±Ｓ．Ｅ．である。

ヒト胎盤血管の in vitro 培養
以下に記載のヒト胎盤外植片の実験モデルの使用は、ピサ大学病院倫理委員会により承認を得た（プロトコール番号００５５６７）。

本研究では、Brown et al., (Laboratory Investigation 1996, 75: 539-555) により記載の実験方法に従って、一部変更した。自然分娩の直後に、胎盤を無菌条件で採取し、直径約１〜１．５ｍｍで長さ１〜５ｃｍの表在血管を切除した。２．５ｍｇ／ｍＬのアンホテリシンＢと５０μｇ／ｍＬのゲンタマイシンを含有するリン酸緩衝化生理食塩水（ＰＢＳ）溶液に血管外植片を入れ、ほぼ１ｍｍのフラグメントへ切断した。この培養は２４穴培養プレート中で実施した；フェノールレッドのない１９９培地中のフィブリノーゲン３ｍｇ／ｍＬの溶液の０．５ｍＬ／ウェルを各ウェルへ加えた後、１５μＬのトロンビン（０．１５ＭＮａＣｌ中５０ＮＩＨＵ／ｍＬ）を速やかに加えた。この血管外植片を、血塊形成後すぐにウェルの中心に置き、フィブリノーゲン溶液の０．５ｍＬ／ウェルで覆い、さらに１５μＬのトロンビンを加えて、そのすべてを２つの血塊の間の同一レベルに浮遊させた。ゲル形成の後で、１０％の熱不活性化ＦＢＳ、０．１％ ε−アミノカプロン酸、Ｌ−グルタミン（２ｍＭ）、及び抗生物質（ストレプトマイシン５０μｇ／ｍＬ、ペニシリン５０ＩＵ／ｍＬ、及びアンホテリシンＢ２．５ｍｇ／ｍＬ）を補充した、フェノールレッドのない１９９培地の１ｍＬ／ウェルを加えた。３７℃、空気９５％／５％ＣＯ₂の加湿環境において２８日間、血管を培養し、２日ごとに１０^-10〜１０^-6Ｍのソマトスタチン−１４、ソマトスタチン類似体、及びＳＵ５４１６１０^-6Ｍ又は担体で処理した（図２）。２８日目に位相差ＬｅｉｔｚＭＤＩＬ顕微鏡（ライカ、ヘールブルッグ、スイス）を用いて血管外植片を写真撮影し、画像分析にかけた。

画像分析
本研究には、Bocci et al., (Cancer Chemotherapy Pharmacology 1999, 43: 205-212)に記載の画像分析法を採用した。簡潔に言うと、カラービデオカメラＴＫ−１２８０Ｅ（ＪＶＣ、東京、日本）とマイクロコンピュータ・プロセッサーを使用して、胎盤フラグメントアッセイから得た写真を５１２ｘ５１２ピクセルのマトリックスにおいてディジタル化した。ディジタル化した臨床像を高解像カラーディスプレイで可視化した。双方向操作、画像の定量化、及びデータ収集のために、真色画像分析ソフトウェア・パッケージ、ＫＳ３００ｖ．１．２（コントロン・エレクトロニック社、エキング、ドイツ）を実行した。既知の寸法のサンプルで幾何較正を設定し、グレイスケール分析を実施して０〜２２５の範囲にある画像の密度を測定したが、ここで、０は黒（血管発芽の存在）であり、２２５は白（血管発芽の非存在）である。胎盤血管外植片のフィブリン培養において、発芽領域の平均グレイレベルを測定し、発芽インデックス（ＳＩ）を：
発芽インデックス＝（（発芽領域／発芽領域の平均グレイレベル）／外植片の周辺長さ）ｘ１００
と定義した。発芽インデックス±Ｓ．Ｅ．の対照に対する比率として結果を表す。

結果
細胞毒性アッセイ
表Ｉにすべての結果を示す。ソマトスタチン類似体は、試験した濃度で、いずれも不死化ヒト微小血管内皮ＨＭＥＣ−１細胞に対して抗増殖活性を示し、１０^-7〜１０^-8Ｍで最大の効果であった。特異的なＶＥＧＦ受容体阻害剤である陽性対照のＳＵ５４１６（１０^-6Ｍ）は、５６．２％の細胞増殖阻止をもたらした。

ヒト胎盤血管の in vitro 培養
フィブリンマトリックスの内部で発芽する外植片を、胎盤フラグメントの周囲にある数多くの微小血管により特徴づけた。血管細胞は放射状に組織化し、連続した再構築を行う微小血管を形成した（図３）。この三次元微小血管ネットワークの最大成長が起きたのは第三〜第四週の間であり、外植後２７日目でプラトーに達した。組織学的には、フィブリンゲル中に、フォン・ウィルブラント因子のために免疫反応する（図４）、内皮細胞のかすかな骨組みを観察した（図５）。ほとんどの実験例において、微小血管は最初の管腔を示したが、管腔がなくて内皮細胞しか観察されない例もあった（図５）。

培養の第一日目の胎盤外植片の顕微鏡像を図６Ａ（目盛り：２ｍｍ）に示す；胎盤培養血管フラグメントから内皮細胞が突出する外観が観察されたのは、培養の６日目頃である（ＳＩ＝０．０５５±０．００４（ｍｍ／平均グレイ）ｘ１００；図６Ｄ）。

毛細血管発芽に対するソマトスタチン類似体の活性に関する実験データを、表ＩＩに要約した。ＳＭＳ類似体及びＳＵ５４１６で処置した培養物を図７〜１６に示したが、ここでは最大効果を示した。ＢＩＭ−２３９２６ＣとＢＩＭ−２３７４５Ｃは、長期処置において強力な阻害特性を明らかにした；それらは、未処置対照に比較して、それぞれ、１０^-7Ｍで１７．１８±１１．８％、１０^-8Ｍで４２．８４±５．６％のＳＩを生じた。陽性対照のＳＵ５４１６は、１０^-6Ｍの濃度で、３２．９２±９．７％のＳＩをもたらした。

他の態様
上記の記載は本発明の特殊な態様に限定されたものである。しかしながら、本発明の利点の一部若しくは全部の達成には、本発明に対していくつかの変更及び改良を施すことが可能であることが明らかであろう。そのような態様も以下の特許請求項の範囲内にある。

HEMC−１細胞の処理プロトコールを示す。胎盤血管外植片の処理プロトコールを示す。ヒト胎盤血管のin vitro培養を示す。ヒト胎盤血管のin vitro培養を示す。ヒト胎盤血管のin vitro培養を示す。ヒト胎盤血管のin vitro培養を示す。ヒト胎盤血管のin vitro培養を示す。ヒト胎盤血管のin vitro培養を示す。ヒト胎盤血管のin vitro培養を示す。ヒト胎盤血管のin vitro培養を示す。ヒト胎盤血管のin vitro培養を示す。ヒト胎盤血管のin vitro培養を示す。ヒト胎盤血管のin vitro培養を示す。ヒト胎盤血管のin vitro培養を示す。ヒト胎盤血管のin vitro培養を示す。ヒト胎盤血管のin vitro培養を示す。表Ｉは細胞毒性アッセイの結果である。表ＩＩは、毛細血管発芽に対する実験結果である。

Claims

患者において血管増殖を治療するために投与する医薬製剤であって、治療有効量の
式：
Ｃａｅｇ−ｃ（Ｄ−Ｃｙｓ−Ｐａｌ−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−Ｄ−Ｃｙｓ）−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−Ｔｙｒ−ＮＨ _２；
の化合物、又はその製剤的に許容される塩を含む前記医薬製剤。
前記血管増殖が、血管新生、再狭窄、内皮細胞増殖、平滑筋増殖、又は新血管発芽を含む、請求項１の医薬製剤。
前記血管増殖が、自己免疫疾患、関節炎、強皮症、癌性腫瘍、角膜移植片血管化、糖尿病性網膜症、血管腫、肥厚性瘢痕、又は乾癬を含んでなる疾患若しくは状態において発生する、請求項１の医薬製剤。
前記血管増殖が、血管形成又はＡＶシャントに付随するか又は関連する、請求項１の医薬製剤。
前記血管増殖が、いぼ、肉芽腫、カポシ肉腫、又はアレルギー性浮腫を含んでなる疾患若しくは状態において発生する、請求項１の医薬製剤。
前記血管増殖が、子宮内膜症、機能不全性子宮出血、又は卵胞嚢胞を含んでなる疾患若しくは状態において発生する、請求項１の医薬製剤。
前記血管増殖が、未熟児網膜症、脈絡膜疾患、黄斑変性、又は加齢関連黄斑変性を含んでなる疾患若しくは状態において発生する、請求項１の医薬製剤。
前記血管増殖が、固形腫瘍、腫瘍転移、良性腫瘍、聴神経腫、神経線維腫、トラコーマ、白血病、血管拡張性肉芽腫、心筋血管新生、斑血管化、アテローム性動脈硬化症、冠状側枝、脳側枝、動静脈奇形、虚血肢血管新生、角膜移植片拒絶、オスラー−ウェバー症候群、ルベオーシス、新血管性緑内障、後水晶体線維形成、糖尿病性網膜症、糖尿病性血管化、骨折、脈管形成、造血、排卵、月経、胎盤形成、ねこひっかき病（Rochele minalia quitosa）、消化性潰瘍、ヘリコバクター・ピロリ関連潰瘍、乾癬、毛細血管拡張性乾癬、慢性関節リウマチ、クローン病、腸癒着、瘢痕形成、肥厚性瘢痕、ケロイド、毛細血管拡張症、血友病関節症、血管線維腫、又は創傷肉芽を含んでなる疾患若しくは状態において発生する、請求項１の医薬製剤。
前記Ｃａｅｇ−ｃ（Ｄ−Ｃｙｓ−Ｐａｌ−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−Ｄ−Ｃｙｓ）−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−Ｔｙｒ−ＮＨ _２の化合物、又はその製剤的に許容される塩が血管ステントの上部か又はその内側に配置される、請求項１の医薬製剤。
前記Ｃａｅｇ−ｃ（Ｄ−Ｃｙｓ−Ｐａｌ−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−Ｄ−Ｃｙｓ）−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−Ｔｙｒ−ＮＨ _２の化合物、又はその製剤的に許容される塩が徐放性製剤の成分として提供される、請求項９の医薬製剤。
前記Ｃａｅｇ−ｃ（Ｄ−Ｃｙｓ−Ｐａｌ−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−Ｄ−Ｃｙｓ）−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−Ｔｙｒ−ＮＨ _２の化合物、又はその製剤的に許容される塩が重合性組成物の成分として提供される、請求項９の医薬製剤。