JP3696516B2

JP3696516B2 - 検体固定方法およびこの方法を利用した標本スライド作成装置

Info

Publication number: JP3696516B2
Application number: JP2001056613A
Authority: JP
Inventors: 博町田; 勉小嶌; 朋子長岡
Original assignee: 株式会社アドサイエンス・テクノロジー
Priority date: 2001-03-01
Filing date: 2001-03-01
Publication date: 2005-09-21
Anticipated expiration: 2021-03-01
Also published as: JP2002257821A

Description

【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は細胞や染色体の標本スライドを作成するときに検体を標本スライドに固定する検体固定方法およびこの方法を利用した標本スライド作成装置に係り、特に、検体のメタフェーズを適正形状とすることのできる検体固定方法およびこの方法を利用した作成装置関する。
【０００２】
【従来の技術と発明が解決しようとする課題】
一般に、染色体検査の工程は、通常、細胞培養、細胞収穫と染色体標本スライドの作成、分染法による染色体バンドの染色、顕微鏡写真撮影、核型分析の５段階に分けられる。本発明においては、主として細胞収穫と染色体標本スライドの作成を対象としている。
【０００３】
この第２工程である細胞収穫と染色体標本スライドの作成は、第１工程で培養した細胞にコルセミドを作用させた分裂中期にある細胞、つまりメタフェーズを低張処理した後、物理的ショックを与えて細胞膜や核膜を破壊させ、球体である核の中に存在していた染色体をスライドグラス上に展開させる工程であり、前記メタフェーズが標本として適正形状に広がった標本スライドを作成することが必要とされている。標本スライドが美しいものに仕上がらなければ、それ以降の染色体バンドの染色等の作業が全て著しく困難なものとなるからである。
【０００４】
これまでの染色体標本スライド作成は、染色体を含む細胞浮遊液を手作業によってスライドグラス上に滴下する各種固定方法が職人芸のごとく実施されているのが現状であった。
【０００５】
この手作業による方法としては、例えば図８から図１１に示す方法がある。図８に示す火炎固定方法においては、スライドグラスからなる標本スライド１上にピペット２から細胞浮遊液３を滴下４させて拡げ、その後すばやく標本スライド１をバーナ５からの火炎内を通過させてメタノールに引火させ、細胞浮遊液３の液分を蒸発させて標本を作成している。また、図９に示す蒸気固定方法においては、図８と同様にして細胞浮遊液３を滴下した標本スライド１を、過熱器６によって加熱され容器７から蒸発している蒸気８に近づけ液を蒸発させ、細胞浮遊液３の液分を蒸発させて標本を作成している。また、図１０に示す高温多湿下の固定方法においては、ホットプレート９によって加熱されている濡れ紙タオル１０から発生する高温多湿状態の中にスライドグラスを置き、その上に図８と同様にして細胞浮遊液３を滴下４させて拡げて、細胞浮遊液３の液分を蒸発させて標本を作成している。また、図１１に示す高所から滴下する常温の固定方法においては、作業台１１上に載置された上に、数ミリメートル高さから、時には約１．５メートルの高さから細胞浮遊液３を滴下４させて拡げて、細胞浮遊液３の液分を蒸発させて標本を作成している。
【０００６】
しかしながら、これらの方法においては、細胞浮遊液３の染色体のメタフェーズを適正形状とするためには熟練が必要であり、しかも適正形状のメタフェーズの生成を可能とするためには偶発的な要素を含んでおり、画一的な標本スライドを作成することが難しく、誰にでもできるという操作方法ではなかった。
【０００７】
また、これらの方法において適正形状のメタフェーズの生成を可能とするための関係パラメータは判明しておらず、展開要領は操作する研究者等の経験に基づくものであるところが現状であった。
【０００８】
このように職人技的に作成する前述のような従来の標本スライドの作成においては、メタフェーズが標本として適正形状に広がった標本スライドを作成することが経験の浅い術者には大変困難であった。更に、これらの方法は手作業による条件の再現性に乏しく、試験者が手作業で行うため標本スライドの品質の安定性に問題があった。
【０００９】
本発明はこれらの点に鑑みなされたもので、標本スライドの作成方法に係る関連パラメータを制御することによって、検体のメタフェーズを確実に適正形状とすることができ、誰にでも適正な標本スライドを作成することができ、しかも標本スライドの品質が安定しており、更に大量生産をも可能である検体固定方法およびこの方法を利用した標本スライド作成装置を提供することを目的とする。
【００１０】
【課題を解決するための手段】
本発明者等は、前記目的を達成するために鋭意研究し、所定の乾燥時間をもって液状検体を乾燥させることにより適正形状のメタフェーズの生成が可能であることを発見して本発明を完成させた。
【００１１】
また、本発明者等は、前記乾燥時間の制御パラメータとして、検体となる細胞浮遊液を標本スライド上に滴下してメタフェーズを展開する場合には、乾燥雰囲気の温度ならびに湿度、液状の検体の滴下液量、細胞浮遊液のカルノア液酢酸濃度等を制御するとよいことを発見して本発明を完成させた。
【００１２】
即ち、本発明の検体固定方法は、細胞または染色体からなる検体を標本スライドに固定する検体固定方法において、前記検体のメタフェーズの染色体が顕微鏡観察するのに適した形状に広がった適正形状とさせるように雰囲気を対流させながら乾燥雰囲気の温度ならびに湿度、液状の検体の滴下液量、細胞浮遊液のカルノア滴酢酸濃度を制御パラメータとして制御した乾燥時間をもって液状検体を乾燥させることを特徴とする。
【００１３】
このように構成することにより、雰囲気を対流させながら乾燥雰囲気の温度ならびに湿度、液状の検体の滴下液量、細胞浮遊液のカルノア滴酢酸濃度を制御パラメータとして制御して決定した乾燥時間をもって液状検体を乾燥させることによって検体のメタフェーズを適正形状として固定した標本スライドを得ることができる。
【００１４】
また、本発明の検体固定方法は、検体のメタフェーズの直径を６０から１００μｍとしたり、乾燥時間を１００から３００秒としたりすることによって、検体のメタフェーズをより一層適正形状として固定することができる。
【００１７】
また、本発明の標本スライド作成装置は、細胞または染色体からなる検体を標本スライドに固定して標本スライドを作成する標本スライド作成装置において、標本スライド上の前記検体のメタフェーズが適正形状となる乾燥時間をもって液状検体を乾燥させる乾燥制御機構であって予め取得した標本スライド上の前記検体のメタフェーズの染色体が顕微鏡観察するのに適した形状に広がった適正形状となる乾燥時間に応じて雰囲気を対流させながら乾燥雰囲気の温度ならびに湿度、液状の検体の滴下液量、細胞浮遊液のカルノア滴酢酸濃度をそれぞれ制御する制御ループを有する乾燥制御機構を備えていることを特徴とする。
【００１８】
このように構成することにより、予め取得した標本スライド上の前記検体のメタフェーズが適正形状となる乾燥時間に応じて雰囲気を対流させながら乾燥雰囲気の温度ならびに湿度、液状の検体の滴下液量、細胞浮遊液のカルノア滴酢酸濃度をそれぞれ制御する制御ループを有する乾燥制御機構により決定した乾燥時間をもって液状検体を乾燥させて検体のメタフェーズを適正形状として固定した標本スライドを作成することができる。
【００２１】
また、本発明の標本スライド作成装置としては、標本スライド上に滴下される液状の検体を得る液状検体作成機構を更に備えることにより、検体の作成から検体の固定までを良好に行うことができる。
【００２２】
【発明の実施の形態】
以下、本発明の実施の形態を図１から図７を参照して説明する。
【００２３】
図１は本発明の標本スライド作成装置の１実施形態の基本構成を示す概略図である。
【００２４】
本実施形態の標本スライド作成装置２０は検体を乾燥するために適宜なチャンバ等からなる閉空間２１を設けている。この閉空間２１内下部には、スライドグラスからなる標本スライド１の上面に滴下された検体となる細胞浮遊液３を加熱するためにヒータ２２を内蔵した恒温ブロック２３が設置されている。ヒータ２２の近傍には温度センサ２４が配設されていて、閉空間２１外の恒温ブロック温度制御ユニット２５によって加熱制御されるようになっている。閉空間２１の上部には、加湿器２６が設置されている。この加湿器２６は容器２７内の水を加湿用ヒータ２８によって加熱して蒸気を発生させるようになっている。発生された蒸気はファン２９によって閉空間２１内を強制対流させられる。閉空間２１の上部にはには湿度センサ３０が配設されていて、閉空間２１外の加湿用ヒータ制御ユニット３１によって湿度制御されるようになっている。細胞浮遊液３は予め培養されその後に低張処理をして作成されており、閉空間２１外に設置してあるポンプ制御ユニット３２に設けた供給ポンプ３３によって所定量が搬送管３４を通して送出され、閉空間２１内に設置されている滴下ピペット３５を通して標本スライド１上面に滴下供給されるようになっている。更に、閉空間２１外には恒温ブロック温度制御ユニット２５の動作を制御する最適展開温度値演算ユニット３６が設けられている。この最適展開温度値演算ユニット３６は、入力される湿度センサ３０からの湿度値、ポンプ制御ユニット３２からの細胞浮遊液３の供給量即ち検体の滴下液量値および検体作成時に付与されたカルノア液酢酸濃度値に基づいて演算した温度設置値を出力して、手動／自動制御切替器３７を通し恒温ブロック温度制御ユニット２５に付与する。
【００２５】
このように形成されている標本スライド作成装置２０による検体の固定および標本スライドの作成を説明する。
【００２６】
まず、標本スライド１を加熱状態にある恒温ブロック２３の上面に載置する。次に、ポンプ制御ユニット３２の供給ポンプ３３により所定量の細胞浮遊液３を送出して滴下ピペット３５を通して標本スライド１上面に滴下させる。この時の閉空間２１内の温度は、最適展開温度値演算ユニット３６から指令される温度設定値に応じて恒温ブロック温度制御ユニット２５が恒温ブロック２３のヒータ２２に通電して設定値になるように制御される。同時に、閉空間２１内の湿度は、加湿度設定値に基づいて加湿用ヒータ制御ユニット３１が加湿用ヒータ２８を制御して設定値となるように制御される。このようにして形成される閉空間内の乾燥雰囲気により標本スライド１上の検体は乾燥される。本装置２０に於いては細胞浮遊液のカルノア液酢酸濃度を一定に保ち、精密な供給ポンプ３３を用いて精確な滴下滴量を実現できるため、これら二つのパラメータを一定値に固定することができる。
【００２７】
本発明者等が検体としてヒト白血球を用いて鋭意実験研究したところ、標本スライド１上の検体の乾燥後のメタフェーズの適正形状は、その直径が６０から１００μｍなっていた。更に、その場合の検体の乾燥時間を１００から３００秒とすると、検体の適正形状のメタフェーズが得られた。ここでメタフェーズの適正形状とは、４６個の染色体が１つも重複することなく、全部が分離された状態で所定の直径内に収まっている状態を意味する。
【００２８】
従って、図１に示す標本スライド作成装置２０においては、所定の乾燥速度を実現するために、標本スライド１上の前記検体のメタフェーズが適正形状となる乾燥時間を予め求めるとともに、この乾燥時間を実現した際の閉空間２１内の乾燥雰囲気の温度ならびに湿度、液状の検体の滴下液量、細胞浮遊液のカルノア液酢酸濃度等の組合せデータを求めておき、これらのデータを制御ループとして最適展開温度値演算ユニット３６内のメモリに記憶させ、次の標本スライド作成時に当該データに基づいて乾燥雰囲気の温度ならびに湿度、液状の検体の滴下液量、細胞浮遊液のカルノア液酢酸濃度等を再現するように動作制御を行わせるようになっている。
【００２９】
これにより標本スライド１の作成方法に係る関連パラメータとしての乾燥速度を制御することによって、検体のメタフェーズを確実に適正形状とすることができ、誰にでも適正な標本スライド１を作成することができ、しかも標本スライド１の品質が安定することとなる。
【００３０】
この関連パラメータとしての乾燥速度について更に説明する。
【００３１】
前記の乾燥時間を実現した際の閉空間２１内の乾燥雰囲気の温度ならびに湿度、液状の検体の滴下液量、細胞浮遊液のカルノア液酢酸濃度をもとにして乾燥時間を関数式をもって表すと次の式で与えられる。
【００３２】
即ち、乾燥時間（tvap）、温度（T）、湿度（RH）、酢酸濃度（D）、液量（V）とすると、
tvap＝F（T．RH．D．V）
と表すことができる。
【００３３】
また、パラメータ感度（変化率）は、変化分を求めることによって得られる。
【００３４】
即ち、
Kt＝∂F／∂T＝∂tvap／∂T＜O
Krh＝∂F／∂RH＝∂tvap／∂RH＞O
Kd＝∂F／∂D＝∂tvap／∂D＞O
Kv＝∂F／∂V＝∂tvap／∂V＞0
これらの乾燥時間に関するパラメータ感度（変化率）は、温度（−）、湿度（＋）、酢酸濃度（＋）、液量（＋）の傾向を持つ。乾燥時間（tvap）は、温度（T）、湿度（RH）、酢酸濃度（D）、滴量（V）が大きく変化しない近傍範囲で線形関数と見なせる関数を与える。つまり、
tvap＝Kt・T＋Krh・RH＋Kd・D＋Kv・V
ここで、酢酸濃度（D）および液量（V）を一定値にした展開条件で、乾燥時間（tvap）を最良値に制御する場合は、湿度または温度を制御すればよいことが分かる。
【００３５】
これらの変化定数から制御係数が算出でき、現在値としての温度、湿度、滴下液量、細胞浮遊液のカルノア液酢酸濃度を与えて最適な乾燥時間を提供する標本スライド１の近傍の環境を制御することができる。これらのパラメータは適当範囲を持つが、湿度は精密な蒸気の拡散制御が難しく、液量制御は標本中の展開細胞数に影響し、カルノア液の酢酸濃度制御は制御のダイナミックレンジが狭いこととフイードバック制御が難しいなどの問題がある。このため温度条件が容易に制御可能なパラメータとなる。
【００３６】
図２および図３は本発明の標本スライド作成装置の他の実施形態を示しており、図１の検体の固定を行うほかに標本スライド１上に滴下される液状の検体を得る液状検体作成機構を備えているものである。
【００３７】
本実施形態の標本スライド作成装置４０は、平面矩形状の基体４１の右側前方に図１と同様に形成されている検体の固定を行う恒温ブロック２３部分が配設されており、左に隣接されているスライドグラス供給カセット部４２から標本スライド１が１枚ずつ恒温ブロック２３の上面に供給されるようになっている。恒温ブロック２３の奥側には、標本スライド１上に滴下される液状の検体を得る液状検体作成機構４３が配設されている。この液状検体作成機構４３は主として遠心分離機４４と液状の検体を標本スライド１上に滴下させるＸＹＺ可動型ピペット機構４５とにより形成されている。
【００３８】
一方のＸＹＺ可動型ピペット機構４５は、恒温ブロック２３と遠心分離機４４との左右両側に前後方向に平行な２本の高架レール４６を設け、両高架レール４６の間に架け渡した架橋レール４７をその両端部に設けたロール４８をもって高架レール４６上を走行自在とし、この架橋レール４７の上をロール４９をもってピペット支持走行体５０を走行自在に装着し、このピペット支持走行体５０に滴下ピペット３５を上下方向移動自在に設けて構成されている。
【００３９】
他方の遠心分離機４４を図３および図４によって説明する。
【００４０】
この遠心分離機４４はモータ等の遠心回転機構５１の回転軸５２の開放端部に回転部材５３を固定して形成されており、回転部材５３の外周部には、６個の揺動バケット５４を前記回転軸５２を中心とする円周上に等間隔に配設している。そして、前記揺動バケット５４には、スピッツ５５がそれぞれ中心軸回りに回動自在に保持されている。また、前記遠心機位置検出機構５６により各スピッツ５５が所定の停止位置に停止したことを検出するように構成されている。具体的には、前記は回転軸５２に固着されたセンサ円盤５７ａの外周に形成された図示しない停止位置マークをセンサ５７によって検出するようになされている。
【００４１】
前記遠心分離機４４の周囲には、前記揺動バケット５４に保持されたスピッツ５５内に所定量の液状試薬（低張液やカルノア固定液）を注入する低張液用ピペット５８とスピッツ５５内から所定量の液状物を排出する廃液用ピペット５９とが配設されている。低張液用ピペット５８の位置には図４に示すようにカルノア固定液用ピペット６０も配設されている。また、低張液用ピペット５８の位置の下部には、撹拌上下機構６２によって下方から上方に向かって伸延させられる把持部６１によって停止している各スピッツ５５の下端部を把持して上下動させ、前記揺動バケット５４で正逆方向に軸回転させる図示しない駆動手段を有する攪拌機構６３が配設されている。低張液用ピペット５８には低張液試薬ボトル６４内の低張液が輸送ポンプ６５によって送給される。カルノア固定液用ピペット６０には、酢酸ボトル６６内の酢酸とメタノールボトル６７内のメタノールとがそれぞれ輸送ポンプ６８および６９によって所定の比率（本実施の形態においては１：３）で搬送され、途中の２液混合部７０において混合させられて送給される。排出用ピペット５９からは図示しない輸送用ポンプによってスピッツ管５５内の廃液が吸い出されて廃液タンク７１内に排出される。また、廃液部分においては、図４に示すように、廃液レベル検出器７２によってスピッツ管５５内の廃液の量を検出できるように形成されている。
【００４２】
そして、前記遠心回転機構５１、遠心機位置検出器５６、撹拌機構６３、および輸送用ポンプ６５、６８、６９は、それぞれ本標本スライド作成装置４０の制御を行う制御部７３と接続されており、前記制御部７３において各部の動作が制御される。
【００４３】
次に、本実施形態の作用について、図５から図７により説明する。
【００４４】
図５は、本発明の標本スライド作成装置により、標本スライドグラスを作成するための第１ステージにおける処理を示すフロー図であり、図６は、第２ステージにおける処理を示すフロー図、図７は、第３ステージにおける処理を示すフロー図である。
【００４５】
まず、事前段階として、培養した細胞の浮遊液を前記遠心分離機４４の各揺動バケット５４に保持させる６本のスピッツ５５に移す。
【００４６】
その後、前記遠心分離機４４を駆動し、１３００回転／分で１０分間遠沈させ、前述の遠心機位置検出装置５６により、１個のスピッツ５５（以下、この１個のスピッツ５５に対する操作として説明する）を廃液用ピペット５９の位置に停止させる（ステップＳＴ１）。
【００４７】
そして、停止したスピッツ５５に対し、前記廃液用ピペット５９を、前記スピッツ５５の上方から前記スピッツ５５の内壁に当接させないようにして、前記スピッツ５５内の上澄み液層中の所定深さまで廃液レベル検出器７２を用いて挿入し、続いて、図示しない廃液用ポンプを駆動し、前記上澄み液（約５ｍｌ）をスピッツ５５内から吸い出して廃液タンク７１に回収する（ステップＳＴ２）。
【００４８】
そして、上澄み液の抽出が完了したら、前記廃液用ピペット５９を前記スピッツ５５内から抜き出し、続いて前記遠心機回転機構５１を駆動して前記スピッツ５５を低張液用ピペット５８の位置まで移動させて、同位置において低張液用ピペット５８から、輸送ポンプ６５を駆動させることにより、所定量の５ｍｌの低張処理液を注入し、その後スピッツ５５をすりこぎ棒のように偏心撹拌させる（ステップＳＴ３）。
【００４９】
このようにして、順次、スピッツ５５を前記回転部材５３の回転方向に１停止位置づつ移動させ、ステップＳＴ２とＳＴ３の処理を施す。
【００５０】
その後、前記回転部材５３を約１５分間停止させるとともに温度を３７℃に維持して低張処理を施す（ステップＳＴ４）。
【００５１】
その後、低張液用ピペット５８の位置における２回目の攪拌を全てのスピッツ５５に対して順に行う（ステップＳＴ５）。
【００５２】
また、２回目の攪拌が終了したスピッツ５５に対してステップＳＴ４と同様の低調処理を施す（ステップＳＴ６）。
【００５３】
その後、低張液用ピペット５８の位置においてカルノア固定液用ピペット６０から、輸送ポンプ６６、６７を駆動させることにより、第１回目の所定量の０．５ｍｌのカルノア固定液を注入し、その後スピッツ５５をすりこぎ棒のように偏心撹拌させる（ステップＳＴ７）。
【００５４】
このようにして、順次、スピッツ５５を前記回転部材５３の回転方向に１停止位置づつ移動させ、ステップＳＴ７の処理を施す。
【００５５】
その後、前記遠心分離機４４を１３００回転／分で１０分間、遠沈させる（ステップＳＴ８）。
【００５６】
次に、図６に示すように、前記遠心分離機４４を停止した時点で、廃液用ピペット５９の位置に停止しているスピッツ５５に対し、ステップＳＴ２の手順と同様にして約５ｍｌの上澄み液をスピッツ５５内から吸い出して廃液タンク７１に回収する（ステップＳＴ９）。
【００５７】
そして、第２回目の上澄み液の抽出が完了したら、前記廃液用ピペット５９を前記スピッツ５５内から抜き出し、続いて前記遠心機回転機構５１を駆動して前記スピッツ５５を低張液用ピペット５８の位置まで移動させて、同位置においてステップＳＴ７と同様に、カルノア酢酸液用ピペット６０から、輸送ポンプ６６、６７を駆動させることにより、第２回目の所定量の３ｍｌのカルノア固定液を注入し、その後スピッツ５５をすりこぎ棒のように偏心撹拌させる（ステップＳＴ１０）。
【００５８】
このようにして、順次、スピッツ５５を前記回転部材５３の回転方向に１停止位置づつ移動させ、ステップＳＴ９とＳＴ１０の処理を施す。
【００５９】
全てのスピッツ５５対し攪拌まで終了したら、前記遠心分離機４４を１３００回転／分で６分間駆動し、遠沈させる（ステップＳＴ１１）。
【００６０】
そして、前記遠心分離機４４を停止した時点で、廃液用ピペット５９の位置に停止しているスピッツ５５から、順次、ステップＳＴ９からステップＳＴ１１までの処理を３〜４回繰り返す（ステップＳＴ１２）。
【００６１】
最後の遠心分離が終了したら、図７の処理に移る。
【００６２】
図７のステップＳＴ１３およびＳＴ１４において、廃液用ピペット５９の位置に停止しているスピッツ５５から、順次、前述のテップＳＴ９およびＳＴ１０における処理と同様の上澄み液の吸い出し処理およびカルノア固定液の注入処理とスピッツ５５の偏心撹拌処理を全てのスピッツ５５に対して施す。
【００６３】
その後、低張液用ピペット５８の位置に停止しているスピッツ５５に対し、ステップＳＴ１４の手順と同様にしてカルノア酢酸液用ピペット６０から、輸送ポンプ６６、６７を駆動させることにより、細胞浮遊液濃度調整のための最後のカルノア固定液を注入し、その後スピッツ５５をすりこぎ棒のように偏心撹拌させる（ステップＳＴ１５）。この処理を全てのスピッツ５５に対して施す。
【００６４】
その後、ＸＹＺ可動型ピペット機構４５を作動させて滴下ピペット３５を停止しているスピッツ５５内に挿入し、同スピッツ５５内の細胞浮遊液３を滴下ピペット３５内に吸い込み排出を繰り返してタッピング処理を施す（ステップＳＴ１６）。
【００６５】
その後、供給ポンプ３３を駆動し、前記細胞浮遊液３を滴下ピペット３５内に回収する（ステップＳＴ１７）。そして、ＸＹＺ可動型ピペット機構４５を駆動して滴下ピペット３５をスピッツ５５内から抜き出し、続いてＸＹＺ可動型ピペット機構４５を駆動して滴下ピペット３５を標本スライド１のスポット位置の上部にまで移動させ、その後、ＸＹＺ可動型ピペット機構４５を再び駆動させて、滴下ピペット３５の先端を標本スライド１の上面直上まで移動させる。そして、供給ポンプ３３の駆動により、スライドグラス１９上に必要数滴の細胞浮遊液３を滴下ピペット３５から滴下する（ステップＳＴ１８）。
【００６６】
その後、恒温ブロック２３により図１に示す実施形態において説明した方法によって標本スライド１上の液状の細胞浮遊液３が良好に乾燥されて、適正形状を有するメタフェーズが形成される。
【００６７】
このように本実施形態によれば、標本スライド１上に滴下される液状の検体である細胞浮遊液３を得ることができるとともに、液状の検体を良好に固定することができる。
【００６８】
なお、本発明は前記実施形態のものに限定されるものではなく、必要に応じて種々変更することが可能である。
【００６９】
【発明の効果】
以上述べたように本発明の検体固定方法およびこの方法を利用した標本スライド作成装置は構成され作用するものであるから、標本スライドの作成方法に係る関連パラメータを制御することによって、検体のメタフェーズを確実に適正形状とすることができ、誰にでも適正な標本スライドを作成することができ、しかも標本スライドの品質が安定しており、更に大量生産をも可能とする等の効果を奏する。
【図面の簡単な説明】
【図１】本発明に係る標本スライド作成装置の一実施形態を示す全体の概念図
【図２】本発明に係る標本スライド作成装置の他の実施形態を示す正面図
【図３】図２の平面図
【図４】本発明の遠心分離機の構成を示す概略図
【図５】本発明に係る標本スライド作成装置を用いて標本スライドグラスを作成するための処理を示すフロー図
【図６】図５の後の処理を示すフロー図
【図７】図６の後の処理を示すフロー図
【図８】従来の細胞浮遊液を固定する方法を示す概略図
【図９】従来の細胞浮遊液を固定する他の方法を示す概略図
【図１０】従来の細胞浮遊液を固定する更に他の方法を示す概略図
【図１１】従来の細胞浮遊液を固定する更に他の方法を示す概略図
【符号の説明】
２０、４０標本スライド作成装置
２１閉空間
２３恒温ブロック
２５恒温ブロック温度制御ユニット
２６加湿器
３１加湿用ヒータ制御ユニット
３２ポンプ制御ユニット
３６最適展開温度値演算ユニット
４３液状検体作成機構
４４遠心分離機
４５ＸＹＺ可動型ピペット機構
５８低張液用ピペット
６０カルノア固定液用ピペット

Claims

細胞または染色体からなる検体を標本スライドに固定する検体固定方法において、前記検体のメタフェーズの染色体が顕微鏡観察するのに適した形状に広がった適正形状とさせるように雰囲気を対流させながら乾燥雰囲気の温度ならびに湿度、液状の検体の滴下液量、細胞浮遊液のカルノア滴酢酸濃度を制御パラメータとして制御した乾燥時間をもって液状検体を乾燥させることを特徴とする検体固定方法。
前記検体のメタフェーズの適正形状は、その直径を６０から１００μｍとすることを特徴とする請求項１に記載の検体固定方法。
前記乾燥時間は１００から３００秒であることを特徴とする請求項１または請求項２に記載の検体固定方法。
細胞または染色体からなる検体を標本スライドに固定して標本スライドを作成する標本スライド作成装置において、標本スライド上の前記検体のメタフェーズが適正形状となる乾燥時間をもって液状検体を乾燥させる乾燥制御機構であって予め取得した標本スライド上の前記検体のメタフェーズの染色体が顕微鏡観察するのに適した形状に広がった適正形状となる乾燥時間に応じて雰囲気を対流させながら乾燥雰囲気の温度ならびに湿度、液状の検体の滴下液量、細胞浮遊液のカルノア滴酢酸濃度をそれぞれ制御する制御ループを有する乾燥制御機構を備えていることを特徴とする標本スライド作成装置。
前記乾燥制御機構は、乾燥雰囲気の温度ならびに湿度、液状の検体の滴下液量、細胞浮遊液のカルノア滴酢酸濃度をそれぞれ制御自在に形成されていることを特徴とする請求項４に記載の標本スライド作成装置。
標本スライド上に滴下される液状の検体を得る液状検体作成機構を備えていることを特徴とする請求項４または請求項５に記載の標本スライド作成装置。