JP3693341B2 - タキソールまたはタキソテレまたはイチイ抽出物と、シクロデキストリンとから成る封入複合体、該複合体の製造及び使用 - Google Patents

Description

本発明は、パクリタキセル即ち｛２ａＲ−［２ａα，４β；４αβ，６β，９α（αＲ＊，βＳ＊），１１α−１２α，１２ａα，１２ｂα］｝−β−（ベンゾイルアミノ）−α−ヒドロキシベンゼン−プロパン酸６，１２−ｂ−ビス（アセチルオキシ）−１２−（ベンゾイルオキシ）−２ａ，３，４，４ａ，５，６，９，１０，１１，１２，１２ａ，１２ｂ−ドデカヒドロ−４，１１−ジヒドロキシ−４ａ，８，１３，１３−テトラメチル−５−オキソ−７，１１−メタノ−１Ｈ−シクロデカ［３，４］−ベンズ−［１，２−ｂ］オキセト−９−イルエステル、またはドセタキセル（ブトキシカルボニル−１０−デアセチル−Ｎ−デベンゾイルパクリタキセル）、及び［パクリタキセル以外にセファロマンニン（ｃｅｐｈａｌｏｍａｎｎｉｎｅ）、１０−デアセチル−パクリタキセル、デアセチルバッカチン（ｂａｃｃａｔｉｎｅ）−ＩＩＩ、バッカチン−ＩＩＩ、シンナモイル−タキシシン（ｔａｘｉｃｉｎｅｓ）、タクスシン（ｔａｘｕｓｉｎｅ）といった他のジテルペンタキサン誘導体も含有する］イチイ（Ｔａｘｕｓ目）抽出物と、シクロデキストリン誘導体またはシクロデキストリン誘導体混合物とから成る封入複合体に係わる。
パクリタキセルがかなり有望な生物学的有効性及び高い抗癌活性を示すとしても、この物質を治療に適用するには多くの困難が伴う。
−タキサン類は非常に僅かしか水に溶解し得ず、例えばパクリタキセルの水への溶解度は２５℃において０．５５〜０．５９μｇ／ｍｌである（シクロラボ社（Ｃｙｃｌｏｌａｂ）において測定）。
−パクリタキセルは光及びｐＨに対して非常に敏感であり、その分解時には生物学的に不活性な物質が生成する。
−薬理学においてパクリタキセルに帰せられる成果は、細胞毒溶媒（クレモフオール・イー・エル（Ｃｒｅｍｏｐｈｏｒ ＥＬ））が用いられることから妥当性が疑われる：ジェイ・エヌ・デニス、ジャーナル・オブ・アメリカン・ケミカルソサエテイ（Ｊ．Ｎ．Ｄｅｎｉｓ，Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．）、１１０巻、５９１７頁（１９８８年）；エム・エル・ヒャアエルスコーグ等、ランセット（Ｆｊａｅｌｌｓｋｏｇ，Ｍ．Ｌ．ｅｔ ａｌ．：Ｌａｎｃｅｔ，３４２−８７３頁（１９９３年）；及びエル・ウエブスター等、ジャーナル・オブ・ナチュラル・キャンサー・インステイチュート（Ｗｅｂｓｔｅｒ，Ｌ．ｅｔ ａｌ．：Ｊ．Ｎａｔｌ．Ｃａｎｃｅｒ Ｉｎｓｔ．）、８５巻、１６８５頁（１９９３年）。
上述のような欠点を改良する方法は多数知られている。−可溶化剤（クレモフオール・イー・エル（Ｃｒｅｍｏｐｈｏｒ ＥＬ）と無水エタノールとの１：１混合物；ナチュラル・キャンサー インスティチュート、パクソタクセル文献（Ｎａｔｌ．Ｃａｎｃｅｒ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ，ＰＡＣＬＩＴＡＸＥＬ Ｄｏｃｕｍｅｎｔａｔｉｏｎ））を使用する。
−ホスファチジル−エタノールアミンを用いて化学的に改 変した微小ミセルを形成する（リピド・スペシャリティー社（Ｌｉｐｉｄ Ｓｐｅｃｉａｌｉｔｉｅｓ，Ｉｎｃ．）所有のヨーロッパ特許第１１８ ３１６号）。
−溶解度改善剤としてエタノールとポリソルベートとの混 合物を用いる（ローヌ・プーラン・ローレル社（Ｒｈｏｎｅ−Ｐｏｕｌｅｎｃ Ｒｏｒｅｒ）所有のヨーロッパ特許第５２２ ９３６号及び同第５２２ ９３７号）。
−リポソーム型パクリタキセル製剤を用いる（例えばアール・アクイラール（Ｒ．Ａ ｑｕｉｌａｒ）及びアール・アフェロフ（Ｒ．Ｒａｆａｅｌｌｏｆｆ）の国際特許出願公開第９３／１８７５１号；及びエム・エッチ・アルカン等、ジャーナル・オブ・リポゾーム・リサーチ（Ａｌｋａｎｅ，Ｍ．Ｈ．ｅｔ ａｌ．：Ｊ．Ｌｉｐｏｓｏｍｅ Ｒｅｓｅａｒｃｈ）、３巻、４２頁（１９９３年）。
パクリタキセルの対水溶解度を合成誘導体の製造によって高める試みも幾つか為された（例えば、エッチ・ザアオ等、ジャーナル・オブ・ナチュラルプロダクト（Ｚｈａｏ，Ｈ．ｅｔ ａｌ．：Ｊ．Ｎａｔ．Ｐｒｏｄ．）、５４巻６号、１６０７頁（１９９１年）；及びデイ・アイ・キングストン（Ｄ．Ｉ．Ｋｉｎｇｓｔｏｎ）及びワイ・ワイ・ザング（Ｙ．Ｙ．Ｘａｎｇ）のヨーロッパ特許第５３７９０５号；及びエッチ・エム・ドイッチュ（Ｈ．Ｍ．Ｄｅｕｔｓｃｈ）等の米国特許第５、１５７、０４９号）。
化学的に改変して可溶性を高めたパクリタキセル誘導体の生物学的有効性は好ましくない方へ変化し、ほとんどの場合多剤耐性が上昇傾向を示し、また生物への作用である細胞毒性は低下する。
パクリタキセルを非経口的に適用する際の難点を解決するべく、改善された対水溶解度を有するパクリタキセルプロドラッグの合成も行なわれた（エイ・マチュー等、ジャーナル・オブ・メディカルケミストリー（Ｍａｔｔｈｅｗ，Ａ．ｅｔ ａｌ．：Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．）、３５巻１号、１４５頁（１９９２年）。
パクリタキセルをマイクロカプセルに封入することにより、バルトーリ（Ｂａｒｔｏｌｉ）等はパクリタキセルの通常低い安定性を改善しようとした（エイチ・バルトーリ等、ジャーナル・オブ・マイクロエンカプシュレーション（Ｂａｒｔｏｌｉ，Ｈ．ｅｔ ａｌ．：Ｊ．Ｍｉｃｒｏｅｎｃａｐｓｕｌａｔｉｏｎ）、７巻２号、１９１頁（１９９０年）。
特に非経口医薬品の製造には多くの困難が有り、なぜならかなり親油性であるジテルペノイド型のタキサン誘導体は、たとえ大量の界面活性剤、及び水と有機溶媒との混合物を存在させたとしても適当かつ安定な濃縮溶液の形態に配合することはできないからである（ビイ・タール、ファーマセウティカル、リサーチ（Ｂ．Ｔａｒｒ，Ｐｈａｒｍ．Ｒｅｓ．）、４巻２号、１６２頁（１９８７年）。
今日、（例えばザ・ナショナル・インスティチュート・オブ・ヘルス（ｔｈｅ Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ）及びザ・ナショナル・キャンサー・インスティチュート（ｔｈｅ Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｃａｎｃｅｒ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ）に）公式に登録された非経口投与用のパクリタキセル製剤は、混合比１：１のポリオキシエチル化ひまし油（クレモフオール・イー・エル（Ｃｒｅｍｐｈｏｒ ＥＬ））及びエタノールを分散媒とする６ｍｇ／ｍｌ濃縮乳濁液として調製され、この乳濁液は適用時１０倍に稀釈しなければならない。上記のような非経口投与用製剤の適用には多くの不愉快な副作用が伴い、なかでも最も重大であるのは、非経口投与ではほとんど許容しがたいクレモフオール・イー・エル（Ｃｒｅｍｏｐｈｏｒ ＥＬ）を用いることによって惹起される重篤なアレルギー性副作用である。そのうえ、クレモフオール・イー・エル（Ｃｒｅｍｏｐｈｏｒ ＥＬ）−エタノール溶媒中で調製されたパクリタキセル製剤は透明な溶液ではなく、僅かに乳白色をしており（エル・エイ・トリッセル、アメリカン・ジャーナル・オブ・ホスピタル・ファーマコロジイ（Ｌ．Ａ．Ｔｒｉｓｓｅｌ：Ａｍ／Ｊ．Ｈｏｓｐ．Ｐｈａｒｍ．）、５０巻、３００頁（１９９３年），該製剤を他の何等かの医薬と共に稀釈または適用すると沈澱が生じる恐れが有る。
日本で開かれた或る会議では、エタノール及び酢酸エチルと共に用いたグリコシル−及びマルトシル−β−シクロデキストリンがパクリタキセルの溶解度を２０〜１１０μｇ／ｍｌまで上昇させたことが報告された（ケイ・ミクニ（Ｋ．Ｍｉｋｕｎｉ）等，１９９３）。
本発明によれば、パクリタキセル及びタキサン誘導体の対水溶解度は、適当なシクロデキストリン及び／またはシクロデキストリン誘導体及び／またはこれらの混合物をパクリタキセルとシクロデキストリンとの化学結合が一切生じないようにして用いることにより改善できる。
本発明の封入複合体は、
ａ）パクリタキセルまたはドセタキセルまたはイチイ（Ｔａｘｕｓ）目抽出物を水性媒質中でシクロデキストリン誘導体と反応させ、混合物から複合体をそれ自体公知の手段によって単離すること、
ｂ）パクリタキセルまたはドセタキセルまたはイチイ（Ｔａｘｕｓ）目抽出物を固体形態のシクロデキストリン誘導体と反応させること、ｃ）パクリタキセルまたはドセタキセルまたはイチイ（Ｔａｘｕｓ）目抽出物をシクロデキストリン誘導体と共に高エネルギー微粉砕すること
によって製造し得る。
混合物からの複合体の単離は濾過、遠心、凍結乾燥、噴霧乾燥、真空乾燥によって行ない得る。
パクリタキセルまたはドセタキセルまたはイチイ（Ｔａｘｕｓ）目抽出物をシクロデキストリン誘導体と共に高エネルギー微粉砕することは、ハンガリー特許出願公開第Ｔ／５２３６６号において説明または言及されているようにして可能である。
シクロデキストリン誘導体としては、好ましくは
ヘプタキス−２，６−Ｏ−ジメチル−β−シクロデキストリン、
ランダムメチル化β−シクロデキストリン、
スクシニル−メチル−β−シクロデキストリン、
２−ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン、
可溶性アニオン性β−シクロデキストリンポリマー（ＣＤＰＳＩ）、
β−シクロデキストリン、
γ−シクロデキストリン
を用い得る。
本発明の封入複合体のうち、パクリタキセルまたはドセタキセルまたはイチイ（Ｔａｘｕｓ）目抽出物と
ヘプタキス−２，６−Ｏ−ジメチル−β−シクロデキストリン、
ランダムメチル化β−シクロデキストリン、
スクシニル−メチル−β−シクロデキストリン
とから成るものなど幾つかは改善された対水溶解度及び安定性を有し、従って医薬組成物の活性成分として用い得る。活性成分としてパクリタキセルまたはドセタキセルまたはイチイ（Ｔａｘｕｓ）目抽出物とシクロデキストリン誘導体、好ましくはヘプタキス−２，６−Ｏ−ジメチル−β−シクロデキストリン、ランダムメチル化β−シクロデキストリン、スクシニル−メチル−β−シクロデキストリンとから成る封入複合体を有効量で含有し、かつ通常の医薬用増量剤、稀釈剤その他の補助物質を含有する本発明の医薬組成物はそれ自体公知の方法で製造することができる。
上記以外の本発明の封入複合体で、パクリタキセルまたはドセタキセルまたはイチイ（Ｔａｘｕｓ）目抽出物と
２−ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン、
可溶性アニオン性β−シクロデキストリンポリマー（ＣＤＰＳＩ）、
β−シクロデキストリン、
γ−シクロデキストリン
とから成るものなどの対水溶解度は改善されないか、またはさほど改善されないが、このような封入複合体は例えばパクリタキセル産生細胞の発酵物からパクリタキセルを抽出するのに用い得る。
本発明を、以下の非限定的実施例によって説明する。
実施例１
１１．６ｍｇのパクリタキセル（シグマ・ケミカル社，米国）を１０ｍｌのヘプタキス−２，６−Ｏ−ジメチル−β−シクロデキストリンの４０％水溶液中で室温で３０分間処理し、僅かに濁った溶液を得る。この溶液を滅菌０．２２μｍ酢酸セルロース膜フィルターで濾過して、溶解パクリタキセル濃度が９９２〜１０００μｇ／ｍｌである透明なパクリタキセル水溶液を得る（上記処理を行なわなかった場合、２５℃でのパクリタキセルの対水溶解度は０．５５〜０．５９μｇ／ｍｌである）。
滅菌濾過によって得られた透明なパクリタキセル水溶液は通常の条件下に８週間、変質させることなく貯蔵可能である。
上記パクリタキセル水溶液を凍結乾燥すると３．９４ｇの白色でほぼ非晶質の固体生成物が得られ、この生成物は水と接触させれば再溶解可能である。再構成溶液は１０００μｇ／ｍｌの溶解パクリタキセルを含有し、この溶液のｐＨは５．７〜６．２となる。固体状態の封入複合体の存在は、Ｘ線粉末回折測定及び示差走査熱量測定によって確認した。
実施例２
ランダムメチル化β−シクロデキストリン（平均置換度＝１．８）を生理的緩衝食塩液（ｐＨ７．６）に様々な濃度で溶解させ、得られた溶液をパクリタキセル基質と共に室温で１２時間インキュベートした。各試料にはパクリタキセルを５ｍｇ／ｍｌの初期濃度で含有させた。平衡後の懸濁液を膜濾過し、溶解したパクリタキセルに関してＨＰＬＣによってアッセイした。得られた溶解度データを表１に示す。

この溶解度上昇は、溶液中でパクリタキセルとメチル化βＣＤとの複合体が形成されたことを示すものであり、なぜならグルコースは溶解度の上昇を一切惹起しなかったからである。
参考例３
パクリタキセルを、実施例２に述べたのと同様の方法でスルホプロピルオキシ−β−シクロデキストリンの存在下に可溶化した。スルホプロピルオキシ−β−シクロデキストリンは試験条件（２５℃、水中、中性ｐＨ）の下でパクリタキセルの可溶化に適当とは判明せず、それどころかこの誘導体は溶液中のパクリタキセルと負の相互作用をすることが判明し、この相互作用に起因してパクリタキセルは分解し、未知の生成物となることが明らかとなった。
参考例４
水溶性アニオン性β−シクロデキストリンポリマー（エピクロロヒドリン架橋カルボキシメチル化β−シクロデキストリン；略号ＣＤＰＳＩ）は、メチル化β−シクロデキストリンほどは強力でない可溶化剤であることが判明した。溶解度上昇を表２に示す。

参考例５
パクリタキセルを、２−ヒドロキシプロピル化したβ−シクロデキストリン（ＨＰＢＣＤ）を用いて可溶化した。ＨＰＢＣＤ溶液が達成した溶解度上昇を表３に示す。

実施例６
酸官能基を有するメチル化β−シクロデキストリンであるモノスクシニル−メチル−β−シクロデキストリンは、パクリタキセルの対水溶解度を改善する強力な可溶化剤であることが判明した。１ｍｌのスクシニル−メチル−β−シクロデキストリンの１０％水溶液にパクリタキセルを加え、これを室温で１２時間攪拌した。懸濁液を濾過し、溶解したパクリタキセルをＨＰＬＣによって測定した。スクシニル−メチル−βＣＤの１０％水溶液に溶解したパクリタキセルの濃度は２４４μｇ／ｍｌであったが、スクシニル−メチル−βＣＤの４０％溶液にはパクリタキセルが９９３μｇ／ｍｌの濃度で溶解し得た。即ち、モノスクシニル−メチル−β−シクロデキストリンの可溶化力はヘプタキス−２，６−ジ−Ｏ−メチル化−β−シクロデキストリンのものにほぼ匹敵するほど大きかった。
実施例７
８．５ｍｇのパクリタキセルと２６．６ｍｇのヘプタキス−２，６−ジ−Ｏ−メチル化−β−シクロデキストリン（モル比約１：２）とを一緒に、エタノール：水の１：２混合物０．２５ｍｌの存在下に激しく磨砕して均質なクリームを得た。湿潤なクリームを重量が一定となるまで風乾し、粉末状とした。得られた白色の固体は２１．８％のパクリタキセルを含有した。実施例７による生成物に由来する捕捉パクリタキセルのイン・ビトロ（ｉｎ ｖｉｔｒｏ）溶解特性は複合体化していないパクリタキセルのものを著しく、即ち１２０〜１２４倍上回ることが判明した。そのうえ、この実施例の配合物では該配合物中のパクリタキセルの化学的及び熱的安定性も改善された。
参考例８
８．５ｍｇのパクリタキセル及び５２．９ｍｇのγ−シクロデキストリンを２．５ｍｌの３３％（ｖ／ｖ）水性エタノールに加え、これを６時間激しく攪拌した。凍結乾燥によって溶媒を除去すると白色の微晶質生成物が得られる。このパクリタキセル／γ−シクロデキストリン配合物中のパクリタキセルは、熱分析によって確認したところ、熱に対して改善された安定性を有した。実施例８による複合体のＤＳＣパターン上では吸熱熱流の徴候がパクリタキセル融解範囲内に検出されず、このことは薬物が複合体状となったことを示している。結晶質のパクリタキセル／γＣＤ配合物は直接錠剤に成形するのに適することが判明した。新規な結晶格子が形成されるという事実もＸ線回折測定によって確認した。
パクリタキセルとγＣＤとの相互作用は溶解度の上昇を全くもたらさず、それどころかγＣＤの作用は正に反対であった。即ち、γＣＤ水溶液は［例えばタクサス・ブレビフオリア（Ｔａｘｕｓ ｂｒｅｖｉｆｏｌｉａ）の幹の根元の樹皮（ｇｒｏｕｎｄ ｓｔｅｍｂａｒｋ）に由来する］多成分混合物からパクリタキセルを安定な結晶質複合体の形成によって取り出し得、前記複合体からは捕捉されたパクリタキセルの再抽出が可能である。
参考例９
２．５ｍｌの水−エタノール１：２混合物中で５０ｍｇのβ−シクロデキストリンと８．５ｍｇのパクリタキセルとを室温で１２時間反応させた。噴霧乾燥または凍結乾燥により溶媒を除去して白色の微晶質固体を得たが、この固体は新規な結晶状態を有すること、即ち封入複合体であることがＸ線粉末回折によって明らかとなった。固体のパクリタキセル／β−シクロデキストリン配合物は直接錠剤に成形するのに適することが判明した。βＣＤとの配合物に由来するパクリタキセルのイン・ビトロ（ｉｎ ｖｉｔｒｏ）溶解速度は、水中とｐＨ７．６の緩衝液中との両方において遊離パクリタキセルのものより優れるという結果が得られた。
実施例１０
２．５ｍｇの合成パクリタキセル類似体であるドセタキセル（ブトキシカルボニル−１０−デアセチル−Ｎ−デベンゾイルパクリタキセル）を１ｍｌのランダムメチル化β−シクロデキストリンの４０％水溶液（ＤＳ＝１．８）に加え、これを２５℃で１２時間激しく攪拌することによって前記ドセタキセルを可溶化した。このようにして実現した溶解度上昇は水中で、遊離の上記パクリタキセル誘導体のものの８５０倍であった。実施例１０による凍結乾燥生成物は白色の非晶質粉末であり、この粉末は通常の条件下に良好な湿潤性と改善された対水溶解度とを示した。メチル化β−シクロデキストリンが実現した溶解度上昇は、溶液中に封入複合体が存在することを証明した（同一濃度のグルコースはドセタキセルの溶解度を改善しなかった）。
実施例１１
パクリタキセル及び本発明による可溶化剤、即ち
１０ｍｇのパクリタキセル（シグマ・ケミカル社；Ｎｏ．Ｔ−７４０２，Ｌｏｔ．Ｎｏ．２３Ｈ０４６４）、及び
１０ｍｌの結晶質ヘプタキス−２，６−Ｏ−ジメチル−β−シクロデキストリンの４０％水溶液
を含有する稀釈可能な濃縮溶液を、光から保護しながら窒素下に１２時間攪拌する。得られた透明な溶液を０．２２μｍ膜で滅菌濾過し、滅菌注射用アンプルに入れて封止する。この滅菌溶液は生理的に許容可能な稀釈剤で所望濃度に稀釈してから用い得、また２ヵ月間安定である（２５℃で６０日間貯蔵後の溶液中の活性成分の損失は３％未満であった）。
実施例１２
１ｍｇのパクリタキセル（シグマ・ケミカル社；Ｎｏ．Ｔ−７４０２，Ｌｏｔ．Ｎｏ．２３Ｈ０４６４）を１ｍｌの４０％ランダムメチル化β−シクロデキストリンに溶解させ、この溶液を２５ｍｇのメチルセルロースと３０分間徹底的に混合して無色透明の局所適用用ゲルを得ることにより、パクリタキセル含有ヒドロゲルを調製する。このゲルはヒトの皮膚に対する刺激性を持たず、かつ溶解したパクリタキセルを十分保持する。

Claims (4)

1. パクリタキセル即ち｛２ａＲ−［２ａα，４β；４αβ，６β，９α（αＲ＊，βＳ＊），１１α−１２α，１２ａα、１２ｂα］｝−β−（ベンゾイルアミノ）−α−ヒドロキシベンゼン−プロパン酸６，１２−ｂ−ビス（アセチルオキシ）−１２−（ベンゾイルオキシ）−２ａ，３，４，４ａ，５，６，９，１０，１１，１２，１２ａ，１２ｂ−ドデカヒドロ−４，１１−ジヒドロキシ−４ａ，８，１３，１３−テトラメチル−５−オキソ−７，１１−メタノ−１Ｈ−シクロデカ［３，４］−ベンズ−［１，２−ｂ］オキセト−９−イルエステル、またはドセタキセル（ブトキシカルボニル−１０−デアセチル−Ｎ−デベンゾイルパクリタキセル）、またはパクリタキセルと他のジテルペンタキサン誘導体を含有するタクサス・ブレビフオリア（Ｔａｘｕｓ ｂｒｅｖｉｆｏｌｉａ）抽出物と、シクロデキストリン誘導体とから成る封入複合体であり、前記シクロデキストリン誘導体が、ヘプタキス−２，６−Ｏ−ジメチル−β−シクロデキストリン、ランダムメチル化β−シクロデキストリンまたはスクシニル−メチル−β−シクロデキストリンである前記封入複合体。
2. 請求項１に記載の封入複合体を製造する方法であって、
   ａ）パクリタキセルまたはドセタキセルまたはパクリタキセルと他のジテルペンタキサン誘導体を含有するタクサス・ブレビフオリア（Ｔａｘｕｓ ｂｒｅｖｉｆｏｌｉａ）抽出物を水性媒質中でシクロデキストリン誘導体と反応させ、混合物から複合体をそれ自体公知の手段によって単離すること、
   ｂ）パクリタキセルまたはドセタキセルまたはパクリタキセルと他のジテルペンタキサン誘導体を含有するタクサス・ブレビフオリア（Ｔａｘｕｓ ｂｒｅｖｉｆｏｌｉａ）抽出物を固体形態のシクロデキストリン誘導体と反応させること、
   ｃ）パクリタキセルまたはドセタキセルまたはパクリタキセルと他のジテルペンタキサン誘導体を含有するタクサス・ブレビフオリア（Ｔａｘｕｓ ｂｒｅｖｉｆｏｌｉａ）抽出物をシクロデキストリン誘導体と共に高エネルギー微粉砕すること
   のいずれかの１工程を含む前記方法。
3. 前記混合物から複合体を濾過、遠心、凍結乾燥、噴霧乾燥、真空乾燥によって単離することを特徴とする請求項２に記載の方法。
4. 活性成分として請求項１に記載の封入複合体を有効量で含有し、かつ通常の医薬用増量剤、稀釈剤その他の補助物質を含有する医薬組成物。